WO2013129977A2 - Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) - Google Patents
Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) Download PDFInfo
- Publication number
- WO2013129977A2 WO2013129977A2 PCT/RU2013/000165 RU2013000165W WO2013129977A2 WO 2013129977 A2 WO2013129977 A2 WO 2013129977A2 RU 2013000165 W RU2013000165 W RU 2013000165W WO 2013129977 A2 WO2013129977 A2 WO 2013129977A2
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- ethyl
- methyl
- hydroxypyridine succinate
- mexidol
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/26—Iron; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Definitions
- compositions possessing neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, antiischemic activity possessing neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, antiischemic activity.
- Mexidol has a mechanism of action, the fundamental difference from the mechanism of action of traditional neuro-psychotropic drugs is its lack of specific binding to known receptors (Scientific Research Institute of Pharmacology RAMS, T.A. Voronin. Mexidol. Main effects, mechanism of action, application (http: // www. voed.ru/mexidol .htm).
- Mexidol is an inhibitor of free radical processes, lipid peroxidation, it activates superoxide dismutase, affects the physicochemical properties of the membrane, increases the polar fraction of lipids (phosphotidylserine and phosphotidylinositol, etc.) in the membrane, reduces the ratio of cholesterol / phospholipids, reduces the viscosity of the lipid layer and increases the fluidity of the membrane, activates the energy-synthesizing functions of mitochondria and improves energy metabolism in the cell and, thus, protects the cell apparatus and the structure of their membranes.
- lipids phosphotidylserine and phosphotidylinositol, etc.
- mexidol has a modulating effect on the activity of membrane-bound enzymes, ion channels and receptor complexes, in particular, benzodiazepine, GABA, acetylcholine, increasing their ability to bind to ligands, increasing the activity of neurotransmitters and activation of synaptic processes.
- mexidol has a pronounced lipid-lowering effect, reduces the level of total cholesterol and low density lipoproteins and increases high density lipoproteins.
- Mexidol is determined primarily by its antioxidant properties, the ability to stabilize cell biomembranes, activate the energy synthesizing functions of mitochondria, modulate the functioning of receptor complexes and the passage of ion currents, enhance the binding of endogenous substances, improve synaptic transmission and the relationship of brain structures. Thanks to this mechanism of action, Mexidol exerts influence on key basic links in the pathogenesis of various diseases, has a wide range of effects, extremely small side effects and low toxicity, and has the ability to potentiate the action of other central active substances, especially those that realize their action as direct receptor agonists.
- compositions with neurotropic, antiamnestic activity containing Mexidol and Semax (application for the invention of the Russian Federation
- Another analogue of the pharmaceutical composition variants is an agent containing mexidol and excipients: potato starch, polyvinylpyrrolidone, magnesium stearic acid, microcrystalline cellulose, milk sugar (RF patent 2145855, published May 26, 1999).
- the drug is intended for the treatment of impaired brain functions, in particular, acute and chronic cerebrovascular disorders.
- the drug is prescribed intravenously and intramuscularly.
- biologically active additive has antihypoxic and
- the disadvantage of the analogue is the impossibility of its use as a composition for injection.
- Another disadvantage is the low content of mexidol in a liter. About three orders of magnitude less than what is required for the injection solution.
- the patent provides for the use of isotopes 13C, 15N, etc. for the introduction of isotopic labels in a drug.
- the isotopes determine the dynamics of the distribution of the drug in the tissues of the body.
- This patent may be an analogue for 4-7 variants of the invention.
- the prototype of the two variants of the invention is a pharmaceutical composition for injection (Instructions for use of the drug Mexidol. Registration number P N2002161 / 01) containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
- Succinate is an anion of succinic acid or a salt of this acid.
- the amount of the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate is 50 g / L.
- the drug is used for acute and chronic cerebrovascular insufficiency and related diseases, including stroke and its consequences. Studies have shown that the prototype is not always effective in these pathologies.
- the bond K - H is a covalent bond.
- the above formulation contains a 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine cation (2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium) and a pharmaceutically acceptable anion, namely C 4 H 6 O 4 .
- An ionic bond between a cation and anion is a bond between negatively and positively charged particles in a preparation.
- a pharmaceutical composition for injection containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium and a pharmaceutically acceptable anion.
- the disadvantages of the prototype are the relatively low speed of the onset of the therapeutic effect, not sufficiently large therapeutic effect of the pharmaceutical product, low stability of the pharmaceutical composition over the expiration date.
- Injection - the introduction of a medicinal solution (composition) directly under the skin, into a muscle, into a vein.
- shelf life the period during which the pharmaceutical composition retains its properties in a measure that ensures its use according to
- composition with neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, antiischemic activity.
- the pharmaceutical composition for injection contains 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, and from the prototype
- the pharmaceutical composition has a neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic,
- the pharmaceutical composition for injection contains 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, and differs from the prototype in that it additionally contains mineral substances
- nC N 13 C / NC
- pS is the ratio of the amount of carbon isotopes 13 C to the total amount of carbon in the pharmaceutical composition
- N 13 C the amount of carbon isotopes 13 C in the pharmaceutical composition
- NC the total number of carbon isotopes in the pharmaceutical composition is from 0.005 to 0.75
- the pharmaceutical composition is neuroprotective
- each of the above pharmaceutical compositions for injection can be made in such a way that the pH value is from 4 to 7.
- the claimed formulations use a pharmaceutically acceptable
- a solvent in particular water for injection or another solvent.
- polyvinylpyrrolidone and sorbic acid These components increase the antitumor activity of the active principle.
- Trace elements iron, copper, manganese, zinc, cobalt, iodine, fluorine, chromium, molybdenum, vanadium, nickel, strontium, silicon, selenium are recognized as essential for human and animal life.
- Mineral substances in solution (in particular, in the pharmaceutical composition for injection) are contained in pharmaceutically acceptable salts, for example, succinates, chlorides, carbonates or sulfates, as well as in various pharmaceutically acceptable complex
- Metals have a pronounced local effect on the mucous membranes. At the concentrations of mineral substances considered in the application, the local action of these substances may be astringent or irritating.
- the narrowing of the ranges is carried out taking into account the patent of the Russian Federation 2156087.
- the M * indicator is the amount of mineral matter in milligrams per one milligram of the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate in a liter of pharmaceutical composition or dietary supplement (RF patent 2156087).
- the indicator M ** is the amount of mineral matter in milligrams per one milligram of mexidol in a liter of dietary supplement.
- New narrowed ranges allow the invention to go beyond the ranges of values of specific index M * and M ** for mineral substances in dietary supplements.
- the table also shows the values of the specific indicator M * and M ** for some mineral substances, in particular for potassium, magnesium, iron and zinc.
- the table shows the values of Mexidol and the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate (which in Mexidol is 5% by weight) in dietary supplement.
- Mmin the weight of minerals in 1 liter of dietary supplement
- MPR is the weight of the drug - 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
- Table 24 presents the quantitative characteristics of the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals in the claimed pharmaceutical formulations.
- the table also shows the values of the specific indicator M * for potassium, magnesium, iron and zinc.
- M P p - the weight of the drug is 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate in the claimed pharmaceutical formulations.
- table 33 presents the reduced ranges of specific indicators M * for minerals in the claimed pharmaceutical formulations, taking into account specific indicators M ** BAA, described in the patent of the Russian Federation
- table 24 presents reduced ranges of quantitative characteristics of mineral substances in the claimed pharmaceutical compositions.
- dietary supplement in one liter of which contains 1 - 200 milligrams of mexidol or 0.05 - 10 milligrams of the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
- Figure 1 presents the UV spectrum of the claimed pharmaceutical composition for injection and Mexidol.
- Figure 2 presents the chromatogram of a sample of the claimed
- Figure 3-6 presents chromatograms of a sample of the claimed
- Figure 10 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- Fig-21 presents high-resolution mass spectra of a mixture of derivatives of the claimed pharmaceutical composition.
- FIG. 1 presents a diagram of a cavitation reactor for isotopic enrichment of various mixtures.
- Fig presents a diagram of the installation for isotope enrichment.
- Figure 1-10 shows the chromatograms of samples of the pharmaceutical composition for injection with minerals, mg / l:
- composition of the mobile phase is the composition of the mobile phase.
- UV detection 220 nm UV detection 220 nm.
- Figure 1 presents the U-spectrum (upper curve) of the claimed
- a pharmaceutical composition for injection containing a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals.
- the lower curve on the graph is Mexidol.
- the abscissa is the wavelength.
- the ordinate is the optical density.
- Figure 2 presents the chromatogram of a sample of the claimed
- the abscissa is time.
- the ordinate is the absorption at a wavelength of 220 nm.
- Fig.3 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- composition for injection with mass-selective detection of the 1st peak.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 4 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- composition for injection with mass-selective detection of the 2nd peak.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 5 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- composition for injection with mass-selective detection of the 3rd peak.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 6 presents the chromatogram of a sample of the claimed
- composition for injection with mass selective detection of the 4th peak.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 7 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- the abscissa is time.
- the ordinate axis is the absorption intensity at a wavelength of 220 nm.
- On Fig presents a chromatogram of a sample of the claimed
- compositions for injection on a chiral column YMC CHIRAL NEA (R) 250 * 4.6 mm S -5 mkm, 30 nm, with mass-selective detection.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 9 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- compositions for injection on a chiral column YMC CHIRAL NEA (R) 250 * 4.6 mm S -5 mkm, 30 nm, with mass-selective detection.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Figure 10 presents a chromatogram of a sample of the claimed
- the abscissa is time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows time.
- the ordinate is the intensity.
- the abscissa shows the value of m / z, where m is the mass of the ion; z is the ion charge.
- the ordinate is the intensity.
- Fig presents the determination of the mass fraction of components of a sample of the claimed pharmaceutical composition for injection by ELSD.
- the abscissa is time.
- the ordinate is the intensity.
- Example 1 a method of introducing minerals into water for injection.
- Example 2 a method of obtaining pharmaceutical compositions and verification of stability.
- Example 3 tests for general toxicity.
- Examples 4-8 illustrate the effectiveness of the claimed pharmaceutical compositions with neuroprotective, antiamnestic, antioxidant, antihypoxic, antiischemic activity. The studies were carried out using materials published in the sources / 1 - 5 /.
- Example 1 The introduction of mineral substances into the solution (in water for injection) was carried out according to the method 161. There are other ways of introducing mineral substances into the solution. Solutions were prepared from pure metals using pharmaceutically acceptable solvents to ensure storage stability of the solutions.
- the concentration of metals in solutions was controlled by the atomic absorption method for determining the contents of sodium, potassium, calcium, magnesium, iron, manganese, copper, zinc, lead, cadmium, cobolt, nickel, and chromium. Clause 1.3.2.1 of the source / 6 /.
- chrome - from 0.001 to 2.000;
- molybdenum - from 0.001 to 2.000;
- Example 2 For example, we describe the receipt of one pharmaceutical composition with potassium, magnesium, zinc and iron of a certain concentration.
- the control showed the qualitative performance of the pharmaceutical composition.
- FIG. 1-19 illustrates studies of only one pharmaceutical composition, mg / l:
- Figure 1 presents the UV spectrum of the pharmaceutical composition.
- concentration of the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate 0.054 g / ml - determined by UV spectrophotometry.
- one milliliter of the preparation should contain from 0.045 to 0.055 g.
- the lower curve on the graph is a standard sample of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate (Mexidol preparation), the top declared pharmaceutical composition.
- the kinematic viscosity of the pharmaceutical composition is 1,180 mm / s (from a range of 1.01 to 1.23 mm 2 / s). Determined using capillary
- LD 50 ranges from 950 to 1000 mg / kg when administered intraperitoneally.
- LD50 is up to 3000 mg / kg, which allows the claimed compounds to be classified as non-toxic substances.
- Example 4 The antioxidant activity of pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals was compared with the antioxidant activity of the drug mexidol
- Mexidol containing 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate - 50 g / l, sodium metabisulfate - 1 g / l were compared with pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and mineral substances (ordinal Pharmaceutical compound numbers 49 to 56). The comparison results are shown in table 13.
- compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and with a carbon content of 13 C equal to 0.5% and 75% of all carbon in the pharmaceutical composition (serial numbers of pharmaceutical compositions 57 - 72). The comparison results are shown in table 13.
- Example 5 The antihypoxic activity of pharmaceutical compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and containing carbon isotopes 13 C, was compared with the antihypoxic activity of the drug mexidol.
- mice were weighed 23 - 27 g for acute hypoxia / 9, 10 /.
- Acute hypoxia (normobaric hypoxic hypoxia)
- mice modeled by placing mice in a heat chamber with a volume of 250 cm 3 .
- Mexidol was administered once intraperitoneally 30, 60 and 90 minutes before placing the mice in the heat chamber and stopping air from entering the heat chamber.
- Tv The time from the moment of drug administration to the placement of mice in a heat chamber and the termination of air access in the tables is indicated by Tv in minutes.
- Each of the pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals was administered once intraperitoneally also 30, 60 and 90 minutes before placing the mice in the heat chamber and stopping the air from entering the heat chamber. After placing the mice in a heat chamber, as oxygen was consumed, its concentration in the air and in the body of the mice decreased, and the amount of carbon dioxide increased. As a result, animals developed acute hypoxic hypoxia. Life expectancy (until breathing stopped) was recorded using a stopwatch and judged by its increase
- composition Mexidol and Semax composition Mexidol + Semax
- antihypoxic effect pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, the peptide sequence Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (semax) of the formula
- the weight ratio of Mexidol / Semax was 1 / 0.0004-0.01.
- mice have an average life expectancy of up to 13%.
- Example 6 The neuroprotective effect of pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and carbon isotopes containing 13 C was compared with the neuroprotective effect of the drug mexidol (with a concentration of 2-ethyl-6-methyl-3 - hydroxypyridine succinate - 10 g / l).
- Ischemic stroke in rats was reproduced by bilateral ligation of the common carotid arteries.
- the experimental animals were injected intraperitoneally with Mexidol and the claimed pharmaceutical compositions with serial numbers from 25 to 48. The characteristics of these pharmaceutical compositions are shown in tables 4 to 6.
- rat survival Neurological deficits in animals were determined each hour for 24 hours, and then 1 time per day. The severity of the condition was determined by the sum of the corresponding points.
- compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and carbon isotopes 13 C in doses of 20 mg per day on the rat have a pronounced neuroprotective effect, generally superior in severity to neurological deficiency mexidol.
- the neuroprotective effects of the remaining compounds are superior to the neuroprotective effect of Mexidol.
- compositions 31, 32 in their neuroprotective effect do not exceed composition 30. Therefore, these formulations are not advisable to use.
- Pharmaceutical formulations 39, 40 in their neuroprotective effect do not exceed composition 38. Therefore, these formulations are not advisable to use.
- Pharmaceutical formulations 47, 48 in their neuroprotective effect do not exceed composition 46. Therefore, these formulations are not advisable to use.
- GI Hemorrhagic stroke
- rat craniotomy and brain tissue destruction were performed in the area of the internal capsule with the subsequent injection of the same rat into the site of blood damage (0.03 ml of blood).
- a stroke was achieved in the area of the inner capsule
- Mexidol was injected intraperitoneally in animals at a dose of 20 mg per day per rat.
- the administration schedule was as follows: the first injection was carried out 2 hours after the operation, then 3 injections after 4 hours. Then the pharmaceutical composition of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals, as well as mexidol, were administered daily once a day for 14 days.
- compositions 31, 32 in their neuroprotective effect do not exceed composition 30.
- the same values are indicated by the “- // -” symbols.
- composition 38 Pharmaceutical formulations 39, 40 in their neuroprotective effect do not exceed composition 38. The same values are indicated by the “- // -” symbols.
- composition 46 in their neuroprotective effect do not exceed composition 46. Identical values are indicated by the “- // -” symbols. Therefore, it is not advisable to use these compounds in practice.
- Example 7 The antiamnestic effect of pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and carbon isotopes C, was compared with the antiamnistic effect of the drug mexidol.
- mice The effect of pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and carbon isotopes 13 C, and the drug mexidol on amnesia (learning and memory processes) in mice
- the drugs were administered once intraperitoneally 30, 60 and 90 minutes before the training of mice.
- the safety of the conditioned reaction of passive avoidance was checked 24 hours after the amnesiac effect.
- mice pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and carbon isotopes 13 C, as well as the drug mexidol actively prevent the development of amnesia of the conditioned reaction of passive avoidance (see table 20).
- the number of mice isotopes 13 C, as well as the drug mexidol actively prevent the development of amnesia of the conditioned reaction of passive avoidance (see table 20). The number of mice
- the lower value of the range provides mexidol.
- Table 20 shows that pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and 13 C carbon isotopes increase the onset of the therapeutic effect while maintaining the duration of action without increasing concentration
- mice On the scopolamine amnesia model, it was found that in mice pharmaceutical formulations based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and carbon isotopes 13 C, as well as the preparation mexidol also prevent the development of amnesia of the conditioned passive avoidance reaction (see .table 21).
- An increase in the speed of the onset of the therapeutic effect and an increase in the therapeutic effect due to the use of Mexidol can be achieved by increasing its amount in injection.
- Example 8 The anti-ischemic effect of pharmaceutical compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, minerals and carbon isotopes 13 C, was compared with the anti-ischemic effect of the drug mexidol. The comparison results are presented in table 22.
- mice white non-linear mice (males) weighing 35 -
- mice After bilateral ligation of the common carotid arteries (and not using the above drugs), more than 90% of the mice died during the observed days.
- compositions based on the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, mineral substances and carbon isotopes I3 C, as well as the preparation Mexidol significantly increased the survival of mice during the observation period.
- the concentration of the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate was 1 g / L.
- compositions N ° l, N ° 9 and j ⁇ ° 17 in action are similar to the action of Mexidol. With an increase in the amount of mineral substances in the compositions, their effect increases.
- compositions N ° 7, N28 in their action do not exceed the effect of the composition N ° 6.
- the pharmaceutical compositions j ° 15, N2I6 in their action do not exceed the action of the composition j ⁇ ° 14.
- Pharmaceutical formulations N ° 23 and ⁇ ° 24 in their action do not exceed the effect of composition 22. Therefore, it is not advisable to produce and use them.
- compositions for injection containing, mg / l are confirmed:
- the pharmaceutical composition is made with a content of carbon isotopes 13 With from 0.5% to 75% of the total carbon in the pharmaceutical composition.
- composition of minerals in the above pharmaceutical formulations for injection was limited to the list of minerals (macrocells and microelements) in the Guide to Methods for Monitoring the Quality and Safety of Dietary Supplements. - M.: Federal Center
- the Guide describes a method for introducing mineral substances into a solution, as well as methods for precisely controlling the amount of mineral substances in solutions.
- the first composition for injection can be performed as follows:
- the pharmaceutical composition for injection contains a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals in the following
- the pharmaceutical composition for injection contains a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and minerals in the following
- Carbon isotopes 13 C increase the resistance of molecules to
- Carbon C isotopes are non-toxic. The experiments show that feeding mice and rats with foods enriched with 75% 13 C carbon does not lead to side effects and poor health.
- compositions enriched in carbon C isotopes have increased stability, they are non-toxic and, in addition, have increased neuroprotective, antiamnestic, antioxidant,
- the reactor was manufactured according to the method described in the source / 15 /.
- the flow rate in the reactor, along the length of the channel, varied from 10 m / s to 50 m / s.
- Fig presents a diagram of a cavitation reactor for isotopic enrichment of various mixtures, in particular, hydrocarbon reagents to obtain the preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate, enriched
- the reactor is located in the installation, which contains the pump 6NK-6x1, providing a maximum flow rate of 90 m / h, a pressure of 125 m with an electric motor power of 75 kW, a rotational speed of the electric motor rotor and pump wheel 2950 rpm. Additionally, the installation contains tanks for reagents and measuring instruments.
- the cavitation reactor 1 (see Fig. 22) is made in the form of a flat Laval nozzle with cavitation bodies 2-9 in the channel 10.
- Fig presents a cross section of a cavitation reactor.
- the reactor channel in the area of cavitation bodies is divided into several channels.
- cavitation bodies 5 and 6 divide the channel into smaller channels 13, 14 and 15. Outside, the channel is limited by walls 16 and 17, as well as two covers 1 1 and 12.
- arrows 18 show the direction of movement of the reagent at the inlet to the reactor
- arrow 19 shows the direction of movement of the reagent at the outlet of the reactor.
- channels 24 and 25 are made for supplying carbon dioxide and nitrogen to the cavitation zones.
- Installation works as follows.
- the hydrocarbon reagent from the tank 28 is pumped through the reactor 27 through the pump 27 and enters the tank 28.
- the pressure drop in the reactor is controlled by pressure gauges 29 and 30.
- the temperature of the reactant is monitored by thermometer 31.
- the reagent is heated in the tank by a heater 32.
- the hydrocarbon reagent moves along the cavitator channel in direction 18.
- the flow is divided into several flows. Beyond the cavitation bodies, cavitation areas arise.
- cavitation 2 3, and 4 are cavitation zones 20, 21, 22, and 23.
- cavitation 2 Upon entering the cavitation region, the reagent “boils”, cavitation bubbles appear, and cavitation cavities exit the cavitation region the bubbles collapse.
- an increase in pressure to several thousand atmospheres and an increase in temperature to a thousand degrees are observed
- the gas-vapor mixture obtained in the reactor together with the liquid reagent enters the tank 28.
- the gas-vapor mixture is passed through a pipe 33 to a separator with a porous partition, where the gas-vapor mixtures with 13 C and 12 C are separated.
- the reactor worked from several hours to several days.
- a direct dependence of the degree of enrichment of the vapor-gas mixture and the reagent with the 13 C isotope on the operating time of the cavitation reactor is established.
- the amount of 13 C carbon isotopes was controlled by high resolution mass spectroscopy.
- the reagent was enriched with the 13 C carbon isotope to 75%.
- compositions for injection containing a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate with
- carbon isotope C content from 0.5% to 75% of total carbon in
- the gas-vapor mixture obtained in the reactor together with the reagent enters the tank 28.
- the gas-vapor mixture is fed through a pipe 33 to a separator with a porous partition, where the gas-vapor mixtures with ⁇ 4 ⁇ and 15 N are separated.
- the reagent was enriched with a nitrogen isotope to 1.375%.
- the value of the indicator " ⁇ " took values from 0.01% to 1.375%.
- the indicator "p” was determined by the formula
- n 15 N is the number of nitrogen isotopes with a relative atomic mass of 15.0037;
- n 14 N is the number of nitrogen isotopes with relative atomic mass
- compositions for injection containing a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate with
- a pharmaceutical composition for injection containing a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate and the pharmaceutical composition is made as follows in a way that contains 13 C carbon isotopes, and the pC index is from 0.005 to 0.75, where
- pS is the ratio of the amount of carbon isotopes 13 C to the total amount of carbon in the pharmaceutical composition
- N C is the amount of carbon C isotopes in the pharmaceutical composition
- NC is the total amount of carbon isotopes in the pharmaceutical composition
- the pharmaceutical composition is made with a content of nitrogen isotopes 15 N from 0.01% to 1.375% of all nitrogen in the pharmaceutical composition.
- composition for injection is made with
- the pharmaceutical composition for injection is designed in such a way that it contains 13 C carbon isotopes, and the pC value is from 0.005 to 0.75, where
- nC N 13 C / NC, where nC is the ratio of the number of carbon isotopes 13 C to the total amount of carbon in the pharmaceutical composition;
- N C is the amount of carbon C isotopes in the pharmaceutical composition
- NC is the total amount of carbon isotopes in the pharmaceutical composition
- the pharmaceutical composition is made with a content of nitrogen isotopes 15 N from 0.01% to 1.375% of the total nitrogen in the pharmaceutical composition.
- the pharmaceutical compositions have a neuroprotective, antiamnestic, antioxidant
- a further increase in the concentration of mineral substances to the DZ range affected the result.
- the antioxidant activity of the studied pharmaceutical composition was equal to the activity of Mexidol. That is, the effect of increasing activity due to the use of mineral substances when reaching the range of RS (see table 25) was not found.
- the dose of the drug is 100 mg. Average life, min.
- the dose of the drug is 100 mg. Average life, min.
- mice in each experiment *) The number of mice in each experiment - **) Mexidol, dose of 40 mg per mouse.
- mice in each experiment *) The number of mice in each experiment - **) Mexidol, dose of 40 mg per mouse.
- mice The number of mice in each experiment is 30
- composition G ° 94 99
- Mexidol a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate
- minerals in a dietary supplement described in RF patent 2156087 Quantitative characteristics of Mexidol (a preparation of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate) and minerals in a dietary supplement described in RF patent 2156087
- Table 25 The ranges of quantitative characteristics of mineral substances in pharmaceutical formulations in studies on the effect of increased concentrations of mineral substances on antioxidant and anti-ischemic activity
- a value in the range of D4 reduces the effectiveness of the drug 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицине. Задачей изобретения является создание фармацевтического состава, обладающего нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью. Задача решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций содержит 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, и дополнительно содержит минеральные вещества: калий, магний, железо, цинк. Кроме того, в фармацевтическом составе часть изотопов углерода 12С замещена на изотопы углерода 13С. Техническими результатами изобретения являются: увеличение скорости наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, повышение стабильности в течение срока годности.
Description
Фармацевтический состав для инъекций,
обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью
(варианты)
Область техники, к которой относится изобретение.
Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицине и может быть использовано при создании и применении
фармацевтических составов обладающих нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью.
Уровень техники.
Важной проблемой современной медицины является создание новых средств, способных эффективно защищать, а также лечить заболевания мозга. Для лечения острых нарушений мозгового кровообращения, дисциркуляторной энцефалопатии, вегетососудистой дистонии, атеросклеротических нарушений функций мозга, невротических и неврозоподобных расстройств с проявлением тревоги, для купирования абстинентного синдрома при алкоголизме, для лечения острой интоксикации нейролептиками и ряда других заболеваний используют
современные российские средства на основе препарата 6-метил-2-этил-3- гидроксипиридина сукцината, в частности, мексидол (Инструкция по применению препарата Мексидол. Регистрационный номер Р N°002161/01).
Мексидол обладает механизмом действия, принципиальным отличием которого от механизма действия традиционных нейро-психотропных препаратов является отсутствие у него специфического связывания с известными рецепторами (НИИ Фармакологии РАМН, Т.А. Воронина. Мексидол. Основные эффекты, механизм действия, применение (http ://www. voed.ru/mexidol .htm) . Мексидол является ингибитором свободно-радикальных процессов, перекисного окисления липидов, он активирует супероксиддисмутазу, оказывает влияние на физико- химические свойства мембраны, повышает содержание полярных фракций липидов
(фосфотидилсерина и фосфотидилинозита и др.) в мембране, уменьшает отношение холестерол/ фосфолипиды, уменьшает вязкость липидного слоя и увеличивает текучесть мембраны, активирует энергосинтезирующие функции митохондрий и улучшает энергетический обмен в клетке и, таким образом, защищает аппарат клеток и структуру их мембран.
Вызываемое мексидолом изменение функциональной активности
биологической мембраны приводит к конформационным изменениям белковых макромолекул синаптических мембран, вследствие чего мексидол оказывает модулирующее влияние на активность мембраносвязанных ферментов, ионных каналов и рецепторных комплексов, в частности, бензодиазепиновый, ГАМК, ацетил-холиновый, усиливая их способность к связыванию с лигандами, повышая активность нейромедиаторов и активацию синаптических процессов. Наряду с этим, мексидол обладает выраженным гиполипидемическим действием, уменьшает уровень общего холестерина и липопротеидов низкой плотности и увеличивает липопротеиды высокой плотности.
Таким образом, механизм действия Мексидола определяют прежде всего его антиоксидантные свойства, способность стабилизировать биомембраны клеток, активировать энергосинтезирующие функции митохондрий, модулировать работу рецепторных комплексов и прохождение ионных токов, усиливать связывание эндогенных веществ, улучшать синаптическую передачу и взаимосвязь структур мозга. Благодаря этому механизму действия, мексидол оказывает влияние на ключевые базисные звенья патогенеза различных заболеваний, имеет большой спектр эффектов, чрезвычайно малые побочные проявления и низкую токсичность, обладает способностью потенцировать действие других центральнодействующих веществ, в особенности тех, которые реализуют свое действие как прямые агонисты рецепторов.
В заявке заявлены два варианта фармацевтического состава.
Аналогом каждому варианту фармацевтического состава является
фармацевтическая композиция, обладающая нейротропной, антиамнестической активностью, содержащая мексидол и семакс (заявка на изобретение РФ
2006146529, опубликованная 27.12.2006).
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтической композиции в течение срока годности (в частности, в течение 3 лет).
Другим аналогом вариантам фармацевтического состава является средство, содержащее мексидол и вспомогательные вещества: крахмал картофельный, поливинилпирролидон, магний стеариновокислый, микрокристаллическая целлюлоза, сахар молочный (патент РФ 2145855, опубликованный 26.05.1999). Лекарственное средство предназначено для лечения нарушений функций мозга, в частности, острых и хронических нарушений мозгового кровообращения.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического средства в течение срока годности.
Также аналогом всем вариантам фармацевтического состава является стабильный фармацевтический состав для инъекций, содержащий мексидол, янтарную кислоту, трилон Б и воду для инъекций (Патент РФ 2205640,
опубликованный 09.04.2002). Препарат назначают внутривенно и внутримышечно.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Кроме того, имеется аналог - патент РФ 2156087, опубликованный 20.09.2000. В патенте описана биологически активная добавка к пище, включающая калий (4- 380мг/л), магний (1-510мг/л), железо (1-2100мг/л), цинк (1-1240мг/л), мексидол (1- 200мг/л) и дополнительно 29 различных веществ. В патенте заявлено, что
биологически активная добавка обладает антигипоксическими и
антиоксидантными свойствами.
Недостатком аналога является невозможность его применения в качестве состава для инъекций. Другим недостатком является малое содержание мексидола в литре. Примерно на три порядка меньше, чем требуется для инъекционного раствора.
Известен также патент ЕАПВ 008591, опубликованный 29.06.2007. В патенте предложено использовать производные 3-(3,5-диоксо-4,5-дигидро-ЗН- (1,2,4)триазин-2-ил) бензамида в качестве ингибиторов Р2Х7 для лечения
различных заболеваний, в том числе ишемию при инсульте или сердечном приступе.
В патенте предусмотрено использование изотопов 13С, 15N и др. для внесение изотопных меток в лекарственное средство. По изотопам определяют динамику распространения лекарства в тканях организма. Этот патент может быть аналогом для 4-7 вариантов изобретения.
Прототипом двум вариантам изобретения является фармацевтический состав для инъекций (Инструкция по применению препарата Мексидол. Регистрационный номер Р N2002161/01), содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
В прототипе в качестве аниона использован С4НбО4 (сукцинат). Сукцинат - анион янтарной кислоты или соль этой кислоты.
В прототипе количество препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат составляет 50г/л.
Препарат применяют при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения и связанных с ней заболеваниях, в том числе при инсульте и его последствиях. Исследования показали, что прототип не всегда эффективен при этих патологиях.
Формула препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат может быть представлена в следующем виде:
Связь К" - Н - это ковалентная связь.
Вышеуказанный препарат содержит катион 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиний) и фармацевтически приемлемый анион, а именно С4Н6О4. Ионная связь между катионом и анионом - это связь между, отрицательно и положительно заряженными частицами в препарате.
Признаки прототипа «фармацевтический состав для инъекций содержит 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат» совпадают с признаками заявленных вариантов изобретения.
В качестве аниона может быть использован не только сукцинат, но и другое вещество, в частности, хлорид. Поэтому более широкая формулировка, признаков, совпадающих с изобретением может быть следующей:
«Фармацевтический состав для инъекций, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридиния и фармацевтически приемлемый анион».
Недостатками прототипа являются относительно малая скорости наступления лечебного эффекта, не достаточно большой лечебный эффект фармацевтического средства, низкая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Сущность изобретения.
Дадим определения терминам.
Инъекция - введение лекарственного раствора (состава) непосредственно под кожу, в мышцу, в вену.
Срок годности - период, в течение которого фармацевтический состав сохраняет свои свойства в мере, обеспечивающей его использование по
назначению.
Задачей настоящего изобретения является создание эффективного
фармацевтического состава, обладающего нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью.
Задача решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций содержит 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, и от прототипа
отличается тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при
следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 - 300 10 ;
калий - 0.020 - 19.99;
магний - 0.065 - 4.99;
железо - 0.027 - 4.99;
цинк - 0.065 - 4.99,
и при этом фармацевтический состав обладает нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
противоишемической активностью.
Также задача решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций содержит 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, и от прототипа отличается тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при
следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - Г 10 3 - 300 ' 10 3 ;
калий - 0.020 - 27.7;
магний - 0.065 - 70.3;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13С, и отношение:
nC = N13C/NC,
где пС - отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе;
N 13 С - количество изотопов углерода 13 С в фармацевтическом составе; NC - общее количество изотопов углерода в фармацевтическом составе, составляет величину от 0.005 до 0.75,
и при этом фармацевтический состав обладает нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
противоишемической активностью.
Дополнительно, каждый вышеописанный фармацевтический состав для инъекций может быть выполнен таким образом, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
В заявленных составах используют фармацевтически приемлемый
растворитель, в частности, воду для инъекций или другой растворитель.
Техническими результатами изобретения являются:
- увеличение скорости наступления лечебного эффекта (уменьшение времени наступления лечебного эффекта) при сохранении продолжительности действия
б
без увеличения концентрации фармацевтического состава и препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности свободнорадикальных процессов;
- увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации
фармацевтического состава и препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности
свободнорадикальных процессов;
- повышение стабильности фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности.
В настоящее время, увеличение скорости наступления лечебного эффекта при введении лекарственных средств в организм с помощью инъекций
обеспечивают:
- дозировкой средства и временем его воздействия;
- введением в раствор для инъекций вспомогательного ингредиента - ускорителя скорости воздействия (частный случай регулятора скорости
воздействия).
Известен инъекционный раствор (заявка РФ N 94015245, опубликованная 27.12.1995) в котором в качестве регулятора скорости воздействия используют 5- 10% раствор гиалуроновой кислоты.
Известен кардиостимулирующий препарат (патент РФ N 2068697,
опубликованный 10.1 1.1996), содержащий яд зеленой жабы, хлорбутанодигидрат, хлористый натрий и воду. Для повышения скорости наступления
кардиостимулирующего эффекта (при сохранении продолжительности действия), обеспечиваемого указанным ядом, в препарат вводят до 95% этилового спирта. Спирт за счет осмотических явлений вызывает болевые ощущения и местную негативную реакцию, что и ускоряет действие препарата.
Известны биологически активные добавки, которые при их введении совместно с действующим началом повышают фармакологическую активность лечебных препаратов за счет оптимизации скорости усвоения действующего начала. Так в противоопухолевое средство (авторское свидетельство СССР N 1683190, опубликованное 20.04.1995) дополнительно вводят
поливинилпирролидон и сорбиновую кислоту. Эти компоненты повышают противоопухолевую активность действующего начала.
В изобретении достигается увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения
концентрации фармацевтического средства, за счет введение в состав средства минеральных веществ. Описание действия, заявленных фармацевтический состав будет приведено ниже.
Ниже приведем общие сведения о минеральных веществах.
Минеральные вещества подразделяют на макро- и микроэлементы.
К макроэлементам относятся кальций, фосфор, магний, калий, натрий, хлор и сера.
Микроэлементов: железо, медь, марганец, цинк, кобальт, йод, фтор, хром, молибден, ванадий, никель, стронций, кремний, селен признаны необходимыми для жизнедеятельности человека и животных.
Макроэлементы регулируют водно-солевой обмен, поддерживают осмотическое давление в клетках и межклеточных жидкостях, что необходимо для передвижения между ними питательных и лекарственных веществ. Процессы кроветворения происходят с участием железа, меди, марганца, кальция и других минеральных веществ (элементов). Минеральные вещества (микроэлементы) активируют действие ферментов, гормонов, участвуют во всех видах обмена веществ.
Минеральные вещества (Fe, Си, Zn и другие) в растворе (в частности, в фармацевтическом составе для инъекций) находятся в составе фармацевтически приемлемых солей, например, сукцинатов, хлоридов, карбонатов или сульфатов, а также в составе различных фармацевтически приемлемых комплексных
соединений.
Минеральные вещества, соли металлов оказывают противомикробный эффект, инактивируя ферменты, необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов. Инактивация ферментов происходит путем взаимодействия ионов металлов с сульфгидрильными группами ферментов.
На слизистые оболочки металлы оказывают выраженное местное действие. При рассматриваемых в заявке концентрациях минеральных веществ, местное действие этих веществ может быть вяжущим или раздражающим.
Механизм местного действия металлов обусловлен их способностью реагировать с белками тканей. В результате такого взаимодействия белки свертываются и образуют с ионами металлов альбуминаты. При этом, если происходит частичное свертывание белков только в самых поверхностных слоях тканей, наблюдается вяжущий или раздражающий эффект, имеющий обратимый характер.
Проведенные исследования показали, что минеральные вещества, входящие в состав препарата, усиливают их лечебный эффект. Обеспечивается это, в основном, за счет явно выраженного раздражающего эффекта на ткани организма, а также путем воздействия на ферментативную систему организма.
Для всех вариантов, рассматриваемых в изобретении фармацевтических составов рациональные диапазоны значений содержания минеральных веществ, следующие:
калий - 0.020 - 27.70;
магний - 0.065 - 70.30;
железо - 0.027 - 24.50;
цинк - 0.065 - 72.80.
Однако, для первого варианта изобретения, диапазоны значений содержания минеральных веществ сужены:
калий - 0.020 - 19.99;
магний - 0.065 - 4.99;
железо - 0.027 - 4.99,
цинк - 0.065 - 4.99.
Сужение диапазонов осуществлено с учетом патента РФ 2156087.
У изобретения и у биологически активной добавки (БАД), описанной в патенте РФ 2156087, диапазоны удельного показателя М* (М**) для минеральных веществ частично пересекаются.
Показатель М* это - количество минерального вещества в миллиграммах, приходящееся на один миллиграмм препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в литре фармацевтического состава или БАД (патент РФ 2156087).
Показатель М** это - количество минерального вещества в миллиграммах, приходящееся на один миллиграмм мексидола в литре БАД. Мы предположили, что авторы запатентованной БАД под словом «Мексидол» имели в виду препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, а воду из «Мексидола» учли в составе воды БАД.
Новые суженные диапазоны позволяют изобретению выйти из диапазонов значений удельного показателя М* и М** для минеральных веществ в БАД.
В таблице 23, для примера, представлены количественные характеристики мексидола (препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат) и
минеральных веществ в БАД, описанной в патенте РФ 2156087. Также в таблице приведены значения удельного показателя М* и М** для некоторых минеральных веществ, в частности, для калия, магния, железа и цинка.
В таблице представлены значения мексидола и препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат (которого в мексидоле 5% по весу) в БАД.
В таблице использовалось отношение
М** = ММИН / ММЕКС ,
где М** - удельный показатель;
Ммин - вес минеральных веществ в 1 литре БАД;
ММЕКС _ вес мексидола в 1 литре БАД.
Также в таблице 32 использовалось отношение
М* = Ммин ПР ,
где Мпр - вес препарата - 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
В таблице 24 представлены количественные характеристики препарата 2-этил- 6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в заявленных фармацевтических составах. Также в таблице приведены значения удельного показателя М* для калия, магния, железа и цинка.
В таблице 33 удельный показатель
* = Ммин МПР ,
где МПр - вес препарата - 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в заявленных фармацевтических составах.
Кроме того, в таблице 33 представлены уменьшенные диапазоны удельных показателей М* для минеральных веществ в заявленных фармацевтических составах с учетом удельных показателей М** БАД, описанной в патенте РФ
2156087.
Также в таблице 24 представлены уменьшенные диапазоны количественных характеристик минеральных веществ в заявленных фармацевтических составах.
Следует отметить, что в заявке в одном литре фармацевтического состава содержится 1000 - 300 000 миллиграмм препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
В патенте РФ 2156087 описана БАД, в одном литре которой содержится 1 - 200 миллиграмм Мексидола или 0.05 - 10 миллиграмм препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
При разработке изобретения установлено, что увеличение скорости
наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в
фармацевтическом составе, повышение стабильности фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности, обеспечивается введением в фармацевтический состав определенных минералов (определенной комбинации минералов) в строго определенном для каждого минерала количестве. В результате проведенных исследований для каждого минерала установлен весовой диапазон в фармацевтическом составе. Использование меньшего, чем указано в диапазоне, количества минерального вещества не приводит к достижению технических результатов. Использование большего, чем указано в диапазоне, количества минерального вещества не только не приводит к достижению технических результатов, но ухудшает лечебный эффект от действия препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Установлено, что с повышением концентрации минеральных веществ в
фармацевтическом составе (выше заявленных диапазонов) они подавляют действие
препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, лечебный эффект от препарата исчезает. Появляется сильный раздражающий эффект от действия больших концентраций минеральных веществ.
Дополнительное увеличение скорости наступления лечебного эффекта, увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического состава и препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в
фармацевтическом составе, повышение стабильности фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности обеспечивается частичным замещением в фармацевтическом составе изотопов углерода 12С на изотопы углерода 13С.
Перечень фигур чертежей.
На фиг.1 представлен УФ-спектр заявленного фармацевтического состава для инъекций и мексидола.
На фиг.2 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава.
На фиг.3-6 представлены хроматограммы образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций.
На фиг.7-9 представлены хроматограммы образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке.
На фиг.10 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций.
На фиг.11 представлен MSMS иона 438.7.
На фиг.12 представлен MSMS иона 138.
На фиг.13 представлено определение массовой доли компонентов образца заявленного фармацевтического состава.
На фиг.14- представлен Ή-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава в D2O.
На фиг.15 представлен 'Н-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава в DMSO.
На фиг.16-18 представлены С-ЯМР-спектры образца заявленного
фармацевтического состава с подавлением и без подавления.
На фиг.19 представлен Ή-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава.
На фиг.20-21 представлены масс-спектры высокого разрешения смеси производных заявленного фармацевтического состава.
На фиг.22 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей.
На фиг.23 представлено поперечное сечение кавитационного реактора.
На фиг.24 представлена схема установки по изотопному обогащению.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.
На фиг.1-10 представлены хроматограммы образцов фармацевтического состава для инъекций с минеральными веществами, мг/л:
калий - 0.27;
магний - 0.88;
железо - 0.29;
цинк - 0.66.
Хроматограммы образцов фармацевтического состава для инъекций с другим составом минеральных веществ аналогичны (различия малы и на графиках соизмеримы с толщенной линии).
Параметры разделения:
Состав подвижной фазы.
А - вода с добовлением на 1 л 1 13мкл трифторуксусной кислоты;
В - ацетонитрил с добовлением на 1 л 113мкл трифторуксусной кислоты.
Стандартный градиент от 5%В до 100%В за 20 минут.
Колонка размером 250мм на 4,6мм сорбент Reprosil-Pur ODS.
Детекция УФ 220 нм.
Хроматографическая система Agilent 1200series.
Массдетектор Agilent 6310 Ion Trap LCMS.
На фиг.1 представлен У Ф-спектр (верхняя кривая) заявленного
фармацевтического состава для инъекций, содержащего препарат 2-этил-6-метил- 3-гидроксипиридина сукцинат и минеральные вещества. Нижняя кривая на графике - мексидол.
По оси абсцисс - длинна волны. По оси ординат - оптическая плотность.
На фиг.2 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций. Регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время. По оси ординат - поглощение при длине волны 220нм.
На фиг.З представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций, с масс-селективной детекцией 1-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.4 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций, с масс-селективной детекцией 2-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.5 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций, с масс-селективной детекцией 3-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.6 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций, с масс-селективной детекцией 4-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.7 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке, регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность поглощения на длине волны 220нм.
На фиг.8 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке (YMC CHIRAL NEA (R) 250*4,6 mm S -5 mkm, 30 nm), с масс-селективной детекцией.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.9 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке (YMC CHIRAL NEA (R) 250*4,6 mm S -5 mkm, 30 nm), с масс-селективной детекцией.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.10 представлена хроматограмма образца заявленного
фармацевтического состава для инъекций. Регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.11 представлен MSMS иона 438.7.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность. На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.12 представлен MSMS иона 138.
На верхнем графике по оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.13 представлено определение массовой доли компонентов образца заявленного фармацевтического состава для инъекций методом ELSD.
(оборудование ELSD - Sedex 75 температура 40градусов).
По оси абсцисс - время. По оси ординат - интенсивность.
На фиг.14- представлен 'Н-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава в D2O.
На фиг.15 представлен Ή-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава в DMSO.
На фиг.16 представлен 13С-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава с подавлением.
На фиг.17 представлен 13С-ЯМР-спектры образца заявленного
фармацевтического состава без подавления.
На фиг.18 представлен С-ЯМР-спектры образца заявленного
фармацевтического состава без подавления.
На фиг.19 представлен 'Н-ЯМР-спектр образца заявленного
фармацевтического состава.
По совокупности ЯМР-спектров определена структура катиона 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния).
Изобретение иллюстрируется представленными ниже примерами.
Пример 1 - способ введения минеральных веществ в воду для инъекций. Пример 2 - способ получения фармацевтических составов и проверка на стабильность.
Пример 3 - испытания на общую токсичность.
Примеры 4-8 иллюстрируют эффективность заявленных фармацевтических составов с нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью. Исследования проведены с использованием материалов, опубликованных в источниках /1 - 5/.
Пример 1. Введение минеральных веществ в раствор (в воду для инъекций) осуществляли по методике 161. Существуют и другие способы введения минеральных веществ в раствор. Растворы готовили из чистых металлов при использовании фармацевтически приемлемых растворителей, обеспечивающих устойчивость растворов при хранении.
Для проведения углубленных исследований, при разработке заявки на изобретение, концентрации металлов в растворах обеспечивались в следующих диапазонах, мг/л:
калий - от 0.01 до 27.7;
магний - от 0.03 до 70.3;
железо - от 0.01 до 24.5;
цинк - от 0.05 до 72.8.
Кроме того, были проведены исследования на сверхбольшое содержание минеральных веществ в составах. Об этих исследованиях будет написано ниже.
Контроль концентраций металлов в растворах осуществляли атомно- абсорбционным методом определения содержания натрия, калия, кальция, магния, железа, марганца, меди, цинка, свинца, кадмия, кобольта, никеля, хрома. П.1.3.2.1 источника /6/.
Кроме того, исследовались и другие фармацевтические составы для инъекций, содержащие препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с
минеральными веществами: кальций, медь, кобальт, хром, марганец, натрий и молибден. Для исследований, концентрации этих металлов в растворах
обеспечивались в следующих диапазонах, мг/л:
медь - от 0.0001 до 1.000;
кобальт - от 0.0001 до 1.000;
хром - от 0.001 до 2.000;
молибден - от 0.001 до 2.000;
кальций - от 0.0008 до 3.500;
марганец - от 0.005 до 10;
натрий - от 1.00 до 390.0.
Пример 2. Для примера, опишем получение одного фармацевтического состава с калием, магнием, цинком и железом определенной концентрации.
В реактор с мешалкой, наливают 8 л воды для инъекций. После чего в реактор загружают препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - Юг, заливают раствор с калием (общее содержание калия 0.22 мг), заливают раствор с магнием (общее содержание магния 0.7 мг), заливают раствор с железом (общее содержание железа 0.25 мг), заливают раствор с цинком (общее содержание цинка 0.66 мг), при постоянном перемешивании. Затем доводят рН раствора до значения 4,5. Полученный раствор доводят до объема 10 л водой для инъекций и
пропускают через фильтр.
При контроле найдено:
!Н-ЯМР-спектр в DMSO:
Ή ЯМР (600 МГц, DMSO-d6): 12,1-9,9 (м, 2.75Н); 7,020 (д, IAB = 8,4 Гц, 1Н); 6,840 (д, IAB = 8,4 Гц, 1Н); 2.671 (к, I = 9,6 Гц, 2,05Н); 2,502 (с, 0,25Н); 2,429 (с, 4,12Н); 2,303 (с, 3,08Н); 1,130 (т, I = 7,5 Гц, 3,07Н).
13С-ЯМР-спектр:
!Н ЯМР (400.4 МГц, D20): 7,720 (д, IAB = 8,8 Гц 0,92Н); 7,402 (д, IAB = 8,8 Гц 0,92Н); 4,090 (с, 58,4Н); 2,894 (к, I = 7,6 Гц, 2Н); 2,547 (с, 2,98Н); 2,492 (с, 3,97Н); 1,450 (т, I = 9 Гц 3,03Н).
'Н-ЯМР-спектр B D20:
Ή ЯМР (400.4 МГц, D20): 7,720 (д, IAB = 8,8 Гц 0,92Н); 7,402 (д, 1АВ= 8,8 Гц 0,92Н); 4,090 (с, 58,4Н); 2,894 (к, I = 7,6 Гц, 2Н); 2,547 (с, 2,98Н); 2,492 (с, 3,97Н); 1,450 (т, I = 9 Гц 3,03Й).
,3С-ЯМР-спектры:
13С ЯМР (600 МГц, DMSO-d6): 174,18 (м); 149,90 (м); 149,15 (м); 147,02 (м); 122,72 (дд, 1 = 6 Гц, 12 = 636 Гц); 121,48 (дк, I, = 18 Гц, 12 = 636 Гц); 29,38 (тт, I! = 20,4 Гц, 12 = 510 Гц); 25,33 (тк I, = 18 Гц, 12 = 510 Гц); 23,13 (кд, I, = 9 Гц, 12 = 504 Гц); 12,98 (кт I, = 21 Гц, 12 = 504 Гц).
Контроль показал качественное выполнение фармацевтического состава.
Аналогичным образом были получены и проконтролированы другие
заявленные фармацевтические составы с минеральными веществами и препаратом 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Проведены лабораторные исследования заявленных фармацевтических составов. В заявке на фиг. 1-19 проиллюстрированы исследования только одного фармацевтического состава, мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 10 10 3;
калий - 0.220;
магний - 0.70;
железо - 0.25;
цинк - 0.66.
Остальные заявленные и описанные в заявке фармацевтические составы также подвергались лабораторным исследованиям.
Установлено, что 'Н-ЯМР-спектры и 13С-ЯМР-спектры не чувствительны к незначительному изменению количества и концентраций минералов в фармацевтическом составе.
Еще пример. На фиг.1 представлен УФ-спектр фармацевтического состава. Концентрация препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат 0,054 г/мл - определена УФ-спектрофотометрией. По НД N002161/01-140308 один миллилитр препарата должен содержать от 0,045 до 0,055 г. Нижняя кривая на графике -стандартный образец 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат (препарат мексидол), верхняя заявленный фармацевтический состав.
Кинематическая вязкость фармацевтического состава 1,180 мм /с (из диапазона от 1.01 до 1.23 мм2/с). Определено с помощью капиллярного
вязкозиметра.
Проведенные исследования стабильности (срока хранения) показали, что полученное таким образом фармацевтические составы стабильны и сохраняют исходные показатели в течение 3.5 лет. Проводилась УФ-спектрофотометрия и другие вышеуказанные исследования каждые пол года в течение 3.5 лет.
Установлено повышение стабильности заявленных фармацевтических составов в течение 3.5 лет по сравнению с мексидол ом. Мексидол проявлял стабильные свойства в течение 3 лет. В мексидоле стабильность обеспечивает стабилизатор метабисульфит натрия.
Пример 3. Испытания на общую токсичность проводили путем
внутрибрюшинного введения фармацевтических составов на базе 2-этил-6-метил- 3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ крысам.
Для проведения исследований концентрации минеральных веществ в растворах выбраны, мг/л:
калий— 30.000;
магний - 80.000;
железо - 30.000;
цинк 80.000.
марганец - 10.000;
медь - 1.000;
кобальт - 1.000;
хром - 2.000;
молибден - 2.000;
кальций - 3.500;
натрий - 390.0.
LD50 составляет величину от 950 до 1000 мг/кг при внутрибрюшинном введении.
При внутримышечном введении LD50 составляет величину до 3000 мг/кг, что позволяет отнести заявляемые составы к нетоксичным веществам.
При длительном применении фармацевтических составов на базе 2-этил-6- метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ у крыс не выявило изменений со стороны органов и тканей организма (были несущественные).
Пример 4. Антиоксидантную активность фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, сравнивали с антиоксидантной активностью препарата мексидол
хемилюминесцентным методом 111.
Сравнивали мексидол, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50г/л, натрия метабисульфат - 1г/л с фармацевтическими составами на базе препарата 2-этил-6-метил-3 -гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ (порядковые номера фармацевтических составов 49 - 56). Результаты сравнения приведены в таблице 13.
Также сравнивали мексидол, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 50г/л, натрия метабисульфат - 1г/л с
фармацевтическими составами на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% и 75% от всего углерода в фармацевтическом составе (порядковые номера фармацевтических составов 57 - 72). Результаты сравнения приведены в таблице 13.
Установлено, что по антиоксидантной активности (АО А) фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в основном превосходили мексидол на 10 - 20%.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 49, 57 и 65 не
превосходили мексидол.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56 по АО А практически не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 54.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 63 и 64 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 62.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 71 и 72 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 70. У составов 71 и 72 наблюдалось некоторое снижение АОА.
Следовательно, фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56, 63 и 64, 71 и 72 применять в качестве антиоксидантного средства экономически не целесообразно (затратно).
Исследования на антиоксидантную активность фармацевтических составов также проведены по методике /8/. Результаты, в основном, аналогичны
вышеприведенным.
Пример 5. Противогипоксическую активность фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С, сравнивали с противогипоксической активностью препарата мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцах) массой 23 - 27 г по острой гипоксии /9, 10/.
Острую гипоксию (нормобарическую гипоксическую гипоксию)
моделировали путем помещения мышей в термокамеру объемом 250 см3.
В опытах регистрировали продолжительность жизни животных после прекращения доступа воздуха в термокамеру. Животные помещались в
термокамеру поодиночке.
Мексидол вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 минут до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру.
Время от момента введения препарата до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в таблицах обозначено Тв в минутах.
Каждый из фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, вводили однократно внутрибрюшинно также за 30, 60 и 90 минут до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру.
После помещения мышей в термокамеру, по мере потребления кислорода концентрация его в воздухе и в организме мышей снижалась, а количество углекислого газа возрастало. В результате у животных развивалась острая гипоксическая гипоксия. Продолжительность жизни (до остановки дыхания) регистрировали с помощью секундомера и по ее увеличению судили об
эффективности испытанных препаратов.
Результаты сравнения противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С, с
противогипоксической активностью препарата мексидол приведены в таблицах 14- 17.
На модели острой нормобарической гипоксической гипоксии (в термокамере) установлено, что большая часть фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ увеличивала продолжительность жизни мышей в среднем более чем на 5% по сравнению с мексидол ом.
Установлено увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации
фармацевтического средства. Это хорошо видно в таблице 17. Заявленные препараты увеличивают скорость наступления лечебного эффекта, что сближает значения продолжительности жизни при Тв = ЗОмин и Тв =60мин и 90 мин.
Достигнуто увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации и количества препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Сравнения также проведены на моделях: острой гипобарической гипоксии в вытяжной барокамере с имитацией подъема животных со скоростью 50 м/с до высоты 11000 м; острой гемической гипоксии и острой гистотоксической гипоксии.
Результаты этих сравнений аналогичны, результатам, полученным на модели острой нормобарической гипоксической гипоксии.
Кроме вышеуказанных исследований, было проведено дополнительное сравнение противогипоксического действия композиции мексидола и семакса (композиция мексидол + семакс) и противогипоксического действия
фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, пептидной последовательности Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro (семакс) формулы
и минеральных веществ на модели острой нормобарической гипоксической гипоксии в термокамере.
Весовое соотношение мексидол / семакс составляло 1 / 0.0004-0.01.
Установлено, что большая часть фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, семакса и минеральных веществ (по сравнению с композицией мексидол + семакс) увеличивала
продолжительность жизни мышей в среднем до 13%.
Пример 6. Нейропротекторное действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и содержащих изотопы углерода 13С сравнивали с нейропротекторным действием препарата мексидол (с концентрацией препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 10 г/л).
Сравнительные исследования выполнены на белых нелинейных крысах- самцах массой 220-250 г, у которых моделировали ишемический инсульт и геморрагический инсульт.
Ишемический инсульт у крыс воспроизводили двусторонней перевязкой общих сонных артерий. Подопытным животным вводили внутри брюшинно мексидол и заявленные фармацевтические составы с порядковыми номерами от 25 по 48. Характеристики этих фармацевтических составов приведены в таблицах 4 - 6.
Животных после операции наблюдали в течение 2 недель с учетом
выживаемости крыс. Неврологический дефицит у животных определяли каждый
час в течение 24 ч, а затем 1 раз в сутки. Тяжесть состояния определяли по сумме соответствующих баллов.
Результаты исследования нейропротекторного действия препаратов
представлены в таблице 18. Анализ результатов, приведенных в таблице показал, что у крыс, получивших внутрибрюшинно мексидол, неврологический дефицит был максимально выражен (5.4±0,1 балла) через 3 и 4 сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество крыс в опыте - 12. Из них погибло 2 животных (16.67%).
В опытах было установлено, что составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С в дозах 20мг в сутки на крысу оказывает выраженное нейропротекторное действие, в целом превосходя по выраженности действия в отношении неврологического дефицита мексидол.
Было проведено 24 опыта с крысами, получившими внутрибрюшинно фармацевтический состав на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С. Количество крыс в каждом опыте - 12. В опытах погибало 8-14% животных.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41 по
нейропротекторному действию практически не превосходят мексидол.
Нейропротекторные действия остальных составов превосходят нейропротекторное действие мексидола.
Наиболее выраженое нейропротекторное действие у фармацевтических составов с порядковыми номерами 26 - 32, 34-40, 42-48.
Однако следует учесть следующее. Фармацевтические составы 31, 32 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 30. Поэтому эти составы использовать не целесообразно. Фармацевтические составы 39, 40 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 38. Поэтому эти составы использовать не целесообразно. Фармацевтические составы 47, 48 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 46. Поэтому эти составы использовать не целесообразно.
Геморрагический инсульт (ГИ) у крыс воспроизводили моделированием локального кровоизлияния в головном мозге (создание ГИ с ишемией мозга)
проводили по методике /11/. В соответствие с методикой проводили трепанацию черепа крысы и деструкцию мозговой ткани в области внутренней капсулы с последующим введением в место повреждения крови этой же крысы (0,03 мл крови). Таким образом достигали инсульт в области внутренней капсулы
практически без повреждений соседних тканей мозга.
Фармацевтический состав 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С вводили животным
внутрибрюшинно в дозе 20мг в сутки на крысу. Мексидол вводили животным внутрибрюшинно в дозе 20мг в сутки на крысу. Схема введения была следующей: первую инъекцию осуществляли через 2 ч после операции, потом 3 инъекции через 4 ч. Затем фармацевтический состав 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, а также мексидол вводили ежедневно один раз в сутки в течение 14 суток.
В течение 14 суток после операции оценивали координацию движений на вращающемся стержне в течение 2 минут и способность препаратов повышать выживаемость животных (см. таблицу 19).
Установлено, что фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41 по координации движения на вращающемся стержне практически не превосходят мексидол. Нейропротекторные действия остальных составов превосходят нейропротекторное действие мексидола.
Координация движения крыс заметно повышается при применении
составов с порядковыми номерами 26 - 32 (см. характеристики составов в таблице 4), 34-40 (см. характеристики составов в таблице 5), 42-48 (см. характеристики составов в таблице 6). Однако следует учесть следующее.
Фармацевтические составы 31 , 32 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 30. Одинаковость значений отмечены значками «-//-».
Поэтому эти составы использовать на практике не целесообразно.
Фармацевтические составы 39, 40 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 38. Одинаковость значений отмечены значками «-//-».
Поэтому эти составы использовать на практике не целесообразно.
Фармацевтические составы 47, 48 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 46. Одинаковость значений отмечены значками «-//-».
Поэтому эти составы использовать на практике не целесообразно.
Фармацевтические составы на базе 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С повышают (по сравнению с мексидолом) выживаемость крыс после операций.
Пример 7. Антиамнестическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода С, сравнивали с антиамнистическим действием препарата мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцах) массой 23 - 27 г.
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, и препарата мексидол на амнезию (процессы обучения и памяти) у мышей
исследовали, используя условную реакцию пассивного избегания электрокожного раздражения. Мышей подвергали воздействию электросудорожного шока (ток 30 мА в течение 0.3 -0.5 с к ушным раковинам) сразу после обучения условной реакции пассивного избегания (модель амнезии, вызванной электросудорожным шоком) /10, 12/.
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, и препарата мексидол на амнезию также оценивали на модели скополаминовой амнезии после обучения условной реакции пассивного избегания /10/.
Препараты вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 минут до обучения мышей. Сохранность условной реакции пассивного избегания проверяли через 24 ч после амнезирующего воздействия.
На модели амнезии, вызванной электросудорожным шоком, было
обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также препарат мексидол активно предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. таблицу 20). Число мышей,
обучившихся условной реакции пассивного избегания, составляло от 91 до 95%. Причем верхние значения диапазона обеспечивают практически все
фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина
сукцинат и минеральных веществ, а также составы, содержащие изотопы углерода |3С. Нижнее значение диапазона обеспечивает мексидол.
Анализ таблица 20 показывает, что фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации
фармацевтического средства. Также наблюдается увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства.
Вышеперечисленные эффекты могут быть достигнуты и за счет применения мексидола путем увеличения дозы мексидола или его концентрации в дозе. В опытах (см. таблицу 20) количество мексидола было увеличено с 20 мг до 40 мг на мышь.
На модели скополаминовой амнезии было обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также препарат мексидол также предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. таблицу 21).
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении
продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства. Также наблюдается увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства.
Увеличение скорости наступления лечебного эффекта и увеличение лечебного эффекта за счет использования мексидола может быть достигнуто путем увеличения его количества в иньекции.
Пример 8. Противоишемическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, сравнивали с противоишемическим действием препарата мексидол. Результаты сравнения представлены в таблице 22.
Исследования проведены на белых нелинейных мышах (самцы) массой 35 -
37г.
Ишемию головного мозга воспроизводили путем перевязки обеих общих сонных артерий. Животных после операции наблюдали в течение 7 дней.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, и препарат мексидол вводили внутрибрюшинно в течение 7 дней. В первый день препараты вводились дважды: сразу после опирации и через 3 часа после операции. Во второй, третий, и т.д. до седьмого дня препараты вводились один раз в сутки.
После двусторонней перевязки общих сонных артерий (и не использовании вышеуказанных препаратов) более 90% мышей погибали в течение наблюдаемых дней.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода I3C, а также препарат мексидол существенно увеличивали выживаемость мышей в период наблюдения. При этом концентрация препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат составляла 1г/л. Увеличение концентрации препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат в составах до 50-300г/л приводило к дальнейшему повышению выживаемости мышей.
Из таблицы 22 видно, что выживаемость мышей при использовании большинства фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С выше, чем выживаемость мышей при использовании мексидола.
Фармацевтические составы N°l, N°9 и j\°17 по действию аналогичны действию мексидола. С увеличением количества минеральных веществ в составах их действие усиливается.
Фармацевтические составы N°7, N28 по своему действию не превосходят действие состава N°6. Фармацевтические составы j °15, N2I6 по своему действию не превосходят действие состава j\°14. Фармацевтические составы N°23 и Ν°24 по своему действию не превосходят действие состава 22. Поэтому производить и применять их не целесообразно.
Таким образом, описано применение и подтверждены технические результаты составов для инъекций содержащих, мг/л:
°l . 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 3 - 300 10 3 ;
калий - 0.020 - 27.7
магний - 0.065 - 70.3
железо - 0.027 - 24.5
цинк - 0.065 - 72.8.
N°2. 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 - 300 10 3 ; калий - 0.020 - 27.7;
магний - 0.065 - 70.3;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8,
и при этом фармацевтический состав выполнен с содержанием изотопов углерода 13 С от 0.5% до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Проведены также исследования состава для инъекций N°l содержащего: препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат
и минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л: калий - 0.02 - 27.7;
натрий - 19 - 390;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
магний - 0.065 - 70.3;
хром - 0.0012 - 1.58;
марганец - 0.006 - 7.5;
кальций - 0.001 - 2.8;
медь - 0.0003 - 0.5;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
молибден - 0.0013-1.59.
Проведены также исследования состава для инъекций N°2 содержащего: препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат
и минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л: калий - 0.02 - 27.7;
натрий - 19 - 390;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
магний - 0.065 - 70.3;
хром - 0.0012 - 1.58;
марганец - 0.006 - 7.5;
кальций - 0.001 - 2.8;
медь - 0.0003 - 0.5;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
молибден - 0.0013-1.59.
Состав минеральных веществ в выше описанных фармацевтических составах для инъекций был ограничен перечнем минеральных веществ (макроэлементов и микроэлементов) в «Руководстве по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр
Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004, - 240с». В Руководстве описан метод введения минеральных веществ в раствор, а также методы точного контроля количества минеральных веществ в растворах.
В вышеперечисленных вариантах составов приведены диапазоны весовых значений (в мг/л) компонентов составов, которые по сравнению с прототипом (мексидолом) дают эффект (по техническим результатам) более чем на 5%.
Для практической реализации составов Nel и Ν_>2, дополнительно к указанным в них минеральным веществам могут быть добавлен любой или добавлены любые из нижеприведенных (за исключением уже указанных в составе минеральных веществ), мг/л:
калий - 0.02 - 27.7;
натрий - 19 - 390;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
магний - 0.065 - 70.3;
хром - 0.0012 - 1.58;
марганец - 0.006 - 7.5;
кальций - 0.001 - 2.8;
медь - 0.0003 - 0.5;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
молибден - 0.0013-1.59.
Например, первый состав для инъекций может быть выполнен следующим образом:
Фармацевтический состав для инъекций содержит препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральные вещества при следующем
соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - Г 10 3 - 300 10 3 ;
калий - 0.020 - 27.7;
магний - 0.065 - 70.3;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
кобальт - 0.0003 - 0.75.
Или может быть выполнен следующим образом:
Фармацевтический состав для инъекций содержит препарат 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральные вещества при следующем
соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 3 - 300 ' 10 3 ;
калий - 0.020 - 27.7;
магний - 0.065 - 70.3;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8;
кобальт - 0.0003 - 0.75;
молибден - 0.0013-1.59.
В настоящее время в Мире изотопы углерода 13С широко применяются в биохимии и медицине для диагностики. В заявке представлены результаты собственных исследований по влиянию изотопов углерода , 3С на стабильность и
эффективность действия лекарственных составов на базе препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Установлено, что повышение стабильности заявленного фармацевтического состава в течение срока годности может быть достигнуто за счет замены (от 0.5% до 75%) изотопов углерода 12С на изотопы углерода 13С. Установлено, что изотопы углерода С в молекулах препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат замедляют происходящие в молекулах химические реакции, формируют более прочные ковал ентные связи, чем изотопы углерода С.
Изотопы углерода 13С повышают сопротивляемость молекул к
окислительному воздействию радикалов.
Изотопы углерода С не токсичны. Проведенные эксперименты показывают, что кормление мышей и крыс пищей, обогащенной на 75% углеродом 13С, не приводит к побочным эффектам и ухудшению их здоровья.
В процессе экспериментальной проверки заявленных фармацевтических составов, обогащенных изотопами углерода С установлено, что эти составы обладают повышенной стабильностью, они не токсичны и, кроме того, обладают повышенной нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, противоишемической активностью по сравнению с фармацевтическим составом, в котором отсутствуют изотопы углерода С.
Проведены исследования фармацевтических составов для инъекций с диапазонами значений пС от 0.005 до 0.75, то есть с содержанием изотопов углерода 13С от 0.5% до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Способы производства стабильного высокообогащенного нерадиоактивного изотопа углерода- 13 широко применяются в российской и мировой
промышленности. Хорошо отработаны способы получения изотопа углерода- 13 методом газовой диффузии через пористые перегородки, диффузии в потоке пара, термодиффузии, а также методом дистилляции, изотопного обмена,
центрифугирования, электролиза, генной инженерии и др. Краткая характеристика этих методов приведена в источнике /13/.
В Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова отрабатывают современные нанотехнологии получения и
включения атомов стабильных изотопов углерода С в молекулы различной структуры. В академии получают молекулы изотопномеченных соединений с различными уровнями изотопного обогащения - от долей процентов до ста процентов изотопов в веществе. Работы ведутся в интересах медицинской диагностики. В источнике /14/ приведено 165 ссылок на иностранные источники информации по изотопному обогащению различных веществ.
В свою очередь, авторы активно участвовал в работах по изотопному обогащению углеводородов, а также реагентов для получения различных лекарственных препаратов. Обогащение реагентов изотопом углерода 13С
(замещение изотопов углерода С на изотопы углерода С) осуществляли в кавитационном реакторе конструкции профессора Кормилицына В. И. (Московский Энергетический Институт - технический университет).
Реактор был изготовлен по методике, приведенной в источнике /15/. Скорость течения в реакторе, по длине канала, изменялась от 10м/с до 50м/с.
На фиг.22 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей, в частности, углеводородных реагентов для получения препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, обогащенного
- изотопом углерода С. Реактор расположен в установке, которая содержит насос 6НК-6х1, обеспечивающий максимальный расход 90 м /час, напор 125 м при мощности электродвигателя 75 кВт, частоте оборотов ротора электродвигателя и колеса насоса 2950 об/мин. Дополнительно установка содержит емкости для реагентов и измерительные приборы.
Схема установка представлена на фиг.24.
Кавитационный реактор 1 (см. фиг.22) выполнен в виде плоского сопла Лаваля с телами кавитации 2-9 в канале 10.
На фиг.23 представлено поперечное сечение кавитационного реактора. Канал реактора в области тел кавитации разделяется на несколько каналов. Например, тела кавитации 5 и 6 разделяют канал на более мелкие каналы 13, 14 и 15. Снаружи канал ограничивают стенки 16 и 17, а также две крышки 1 1 и 12.
На фиг.22 стрелками 18 показано направление движения реагента на входе в реактор, стрелкой 19 показано направление движения реагента на выходе из реактора.
зз
В стенке 16 выполнены каналы 24 и 25 для подачи в зоны кавитации двуокиси углерода и азота.
Установка работает следующим образом. Углеводородный реагент из емкости 28 с помощью насоса 26 прокачивается через реактор 27 и поступает обратно в емкость 28. Падение давления на реакторе контролируется манометрами 29 и 30. Температура реагента контролируется по термометру 31. Подогрев реагента в емкости осуществляют нагревателем 32.
При работе реактора углеводородный реагент движется по каналу кавитатора в направлении 18. При обтекании тел кавитации поток разделяется на несколько потоков. За телами кавитации возникают области кавитации. В частности, за телами (если смотреть по направлению движения реагента) кавитации 2, 3 и 4 располагаются зоны кавитации 20, 21, 22 и 23. При входе в область кавитации реагент «закипает», возникают кавитационные пузырьки, при выходе из области кавитации кавитационные пузырьки схлопываются. При этом, в области (в месте) схлопывания кавитационного пузырька наблюдается повышение давления до нескольких тысяч атмосфер и повышение температуры до тысячи градусов
Цельсия. Через каналы 24 и 25 в поток подается двуокись углерода таким образом, чтобы газ попал в зоны кавитации.
Парогазовая смесь, полученная в реакторе совместно с жидким реагентом поступает в емкость 28. Далее парогазовая смесь по трубопроводу 33 поступает в сепаратор с пористой перегородкой, где парогазовые смеси с 13С и 12С разделяются.
В экспериментах реактор работал от нескольких часов до нескольких суток. Установлена прямая зависимость степени обогащения парогазовой смеси и реагента изотопом 13С от времени работы кавитационного реактора.
Контроль количества изотопов углерода 13С осуществлялся масс- спектроскопией высокого разрешения.
В результате экспериментов было достигнуто обогащение реагента изотопом углерода 13С до 75%.
Таким образом, были получены фармацевтические составы для инъекций, содержащие препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с
содержанием изотопа углерода С от 0.5% до 75% от всего углерода в
фармацевтическом составе.
Кроме того, проведены работы по обогащению реагентов для получения различных лекарственных препаратов изотопами 15N.
Замещение изотопов азота 14N на изотопы азота 15N осуществляли в вышеописанном кавитационном реакторе. При работе реактора реагент движется по каналу кавитатора в направлении 18. При обтекании тел кавитации поток разделяется на несколько потоков. За телами кавитации возникают области кавитации. При входе в область кавитации реагент «закипает», возникают кавитационные пузырьки, при выходе из области кавитации кавитационные пузырьки схлопываются. В эксперимента через каналы 24 и 25 в поток подавали азот таким образом, чтобы газ попал в зоны кавитации.
Парогазовая смесь, полученная в реакторе совместно с реагентом поступает в емкость 28. Далее парогазовая смесь по трубопроводу 33 поступает в сепаратор с пористой перегородкой, где парогазовые смеси с Ι4Ν и 15N разделяются.
В результате экспериментов было достигнуто обогащение реагента изотопом азота до 1.375%. Значение показателя «Ν» принимало значения от 0.01% до 1.375%.
Показатель «п» определяли по формуле
N = n15N 100% / (n14N+n15N),
где n15N - количество изотопов азота с относительной атомной массой 15.0037;
n14N - количество изотопов азота с относительной атомной массой
14,0067.
Таким образом, были получены фармацевтические составы для инъекций, содержащие препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с
содержанием изотопов азота I5N от 0.01% до 1.375% от всего азота в
фармацевтическом составе.
В рамках изобретения подтверждено нейропротекторное, антиамнестическое, антиоксидантное, противогипоксическое, противоишемическое действие следующих фармацевтических составов:
А) Фармацевтический состав для инъекций, содержащий препарат 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат и фармацевтический состав выполнен таким
образом, что содержит изотопы углерода 13С, и показатель пС составляет величину от 0.005 до 0.75, где
пС = N13C/NC,
где пС - отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе;
N С - количество изотопов углерода С в фармацевтическом составе; NC - общее количество изотопов углерода в фармацевтическом составе, и, кроме того, фармацевтический состав выполнен с содержанием изотопов азота 15N от 0.01% до 1.375% от всего азота в фармацевтическом составе.
Б) Фармацевтический состав для инъекций, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и, при этом, дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 ' 10 - 300 10 ;
калий - 0.020 - 19.99;
магний - 0.065 - 4.99;
железо - 0.027 - 4.99;
цинк - 0.065 - 4.99,
к кроме того, фармацевтический состав для инъекций выполнен с
содержанием изотопов азота Ι5Ν от 0.01% до 1.375% от всего азота в
фармацевтическом составе.
В) Фармацевтический состав для инъекций, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и, при этом, дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 - 300 10 ,
калий - 0.020 - 19.99;
магний - 0.065 - 4.99;
железо - 0.027 - 4.99;
цинк - 0.065 - 4.99,
к кроме того, фармацевтический состав для инъекций выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13С, и показатель пС составляет величину от 0.005 до 0.75, где
пС = N13C/NC,
где nC - отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе;
N С - количество изотопов углерода С в фармацевтическом составе; NC - общее количество изотопов углерода в фармацевтическом составе, и, кроме того, фармацевтический состав выполнен с содержанием изотопов азота 15N от 0.01% до 1.375% от всего азота в фармацевтическом составе.
И при этом вышеуказанные, в пунктах А, Б, В фармацевтические составы обладают нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной,
противогипоксической, противоишемической активностью.
Таким образом, при реализации заявленных фармацевтических составов обеспечивается:
- увеличение скорости наступления лечебного эффекта (уменьшение времени наступления лечебного эффекта) при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического состава и препарата 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности свободнорадикальных процессов;
- увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации
фармацевтического состава и препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат при лечении расстройства нервной системы, ишемии и гипоксии центральной нервной системы и миокарда, амнезии, а также при повышении активности эндогенной системы и уменьшении интенсивности
свободнорадикальных процессов;
- повышение стабильности фармацевтического состава с препаратом 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина сукцинат в течение срока годности.
При разработке заявки были проведены исследования по существенному повышению концентрации минеральных веществ в фармацевтическом составе для инъекций. Оценивали влияние повышеной концентрации минеральных веществ на антиокидантную и противоишемическую активность армацевтического состава.
Для проведения исследований концентрации минеральных веществ в растворах увеличивали в разы (см. таблицу 25).
В исследованиях установлено, что по антиоксидантной активности
фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ (при рациональных диапазонах значений, см. таблицу 25) превосходили препарат мексидол на 10 - 20%.
Увеличение концентрации минеральных веществ с диапазона Д1 до диапазона Д2 (см. таблицу 25), на результат не повлияло. Антиоксидантная активность превышала активность мексидола на 10 - 20%.
Дальнейшее повышение концентрации минеральных веществ до диапазона ДЗ (см. таблицу 25), на результат повлияло. Антиоксидантная активность исследуемого фармацевтического состава сравнялась с активностью мексидола. То есть, эффект повышения активности за счет применения минеральных веществ при достижении диапазона ДЗ (см. таблицу 25) не обнаружен.
Дальнейшее повышение концентрации минеральных веществ до диапазона Д4 (см. таблицу 25), привело к снижению антиоксидантной активности
исследуемого фармацевтического состава по сравнению с активностью мексидола на 3-5% и выше.
Противоишемическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ с
повышенными концентрациями, сравнивали с противоишемическим действием препарата мексидол. В исследованиях оценивалось число выживших мышей на 7-е сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий.
Установлено, что при использовании мексидола на 7 сутки выживает 93% мышей (см. таблицу 22). При использовании минеральных веществ с
концентрацией из рационального диапазона и из диапазонов Д1 и Д2 (см. таблицу 25) количество выживших мышей на седьмые сутки составило 96-97%.
При использовании минеральных веществ с концентрацией из диапазонов ДЗ (см. таблицу 25) количество выживших мышей на седьмые сутки уменьшилось до 92-93%. Эффект, практически, сравнялся с эффектом от препарата мексидол.
Дальнейшее увеличение концентрации минеральных веществ (Диапазон Д4, см. таблицу 25) привело к дальнейшему ухудшению результата. На 7 сутки выживает 90-91% мышей.
Из проведенных исследований следует, что повышение концентрации минеральных веществ в фармацевтических составах для инъекций, содержащих препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с выходом за пределы рационального диапазона значений (см. таблицу 25) может привести к увеличению затрат на производство и к снижению активности препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил
гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
*) нумерация фармацевтических составов сквозная.
Таблица 2
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Таблица 3
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
Таблица 5
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил
гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода 13С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Таблица 9
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
Таблица 11
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода | 3С равным 0.5% от всего углерода в фармацевтическом составе
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и с содержанием изотопов углерода |3С равным 75% от всего углерода в фармацевтическом составе
Таблица 13
Результаты сравнения антиоксидантной активности мексидола, содержащего 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат 50г/л, с антиоксидантной активностью фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ, а также содержащих изотопы углерода 13С
(порядковые номера фармацевтических составов 49 - 72)
Порядковый номер Антиоксидантная активность Антиоксидантная фармацевтического фармацевтических составов на активность мексидола, состава с 50 граммами базе препарата 2-этил-6-метил- содержащего 2-этил-6- препарата 2-этил-6- 3-гидроксипиридина сукцинат, метил-3- метил-3- минеральных веществ и гидроксипиридина гидроксипиридина изотопов углерода 13С, сукцинат - 50г/л, сукцинат в литре Усл.ед. Усл.ед.
49 3.50
50 3.77
51 3.85
52 4.07
53 4.18
54 4.21
55 4.21
56 4.20
57 3.51
58 3.78 3.50
59 3.88
60 4.10
61 4.17
62 4.20
63 4.20
64 4.20
65 3.51
66 3.59
67 3.68
68 3.88
69 4.00
70 4.10
71 4.09
72 4.09
Таблица 14
Результаты проверки противогипоксической активности
препарата мексидол, доза^ 100мг
*) доза препарата на одну мышь.
**) среднее время по испытуемым мышам в опыте.
Таблица 15
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ. Доза 100 мг.
Средняя продолжительность жизни, мин
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С.
Доза препарата 100 мг. Средняя продолжительность жизни, мин
Таблица 17
Результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода С.
Доза препарата 100 мг. Средняя продолжительность жизни, мин
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели ишемического инсульта) фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С и нейропротекторного действия препарата мексидол.
Измерения в баллах, М+т, где т=0.1
Фарм. состав N°35 4.5 4.5 4.7 4.6 4.6 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5
Фарм. состав _N°36 4.4 4.5 4.7 4.6 4.5 4.5 4.4 4.4 4.4 4.3
Фарм. состав N°37 4.3 4.3 4.4 4.6 4.5 4.5 4.3 4.3 4.3 4.2
Фарм. состав Ν°38 4.2 4.2 4.3 4.4 4.5 4.5 4.4 4.3 4.3 4.1
Фарм. состав N°39 -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N240 -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N°41 4.9 4.9 5.3 5.3 5.3 5.3 5.2 5.1 4.9 4.8
Фарм. состав N°42 4.8 4.8 5.1 5.3 5.4 5.3 5.2 5.1 4.7 4.6
Фарм. состав Ν°43 4.7 4.7 4.9 5.2 5.3 5.2 5.2 5.1 4.7 4.6
Фарм. состав Ν°44 4.6 4.7 4.9 5.2 5.3 5.3 5.3 5.1 4.7 4.6
Фарм. состав N°45 4.4 4.5 4.5 4.7 4.9 4.9 4.7 4.6 4.6 4.5
Фарм. состав N°46 4.4 4.4 4.5 4.7 4.6 4.5 4.5 4.4 4.4 4.4
Фарм. состав N°47 -II- -II- -II- -II- -//- -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N°48 -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II- -II-
Таблица 19
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели геморрагического инсульта) фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ с изотопами углерода 13С, и нейропротекторного действия препарата мексидол. Количество крыс, не
удержавшихся на вращающемся стержне в течение 2 минут
(количество выживших крыс)
Фарм. состав Ne26 4(10) 3(9) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав jY°27 4(10) 3(10) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав N°28 4(10) 3(10) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав N°29 4(10) 3(10) 2(9) 1 (8) 0(8)
Фарм. состав N°30 3(10) 2(10) 1(9) 0(9) 0(9)
Фарм. состав N°31 -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N°32 -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N°33 5(9) 4(9) 3(8) 1 (7) 0(6)
Фарм. состав N°34 5(10) 3(10) 2(9) 1 (9) 0(8)
Фарм. состав 35 4(10) 3(10) 2(9) 1 (9) 0(8)
Фарм. состав JST236 4(10) 3(10) 2(9) 0(8) 0(8)
Фарм. состав JNS37 4(10) 3(10) 2(9) 1 (8) 0(8)
Фарм. состав N°38 3(10) 2(10) 1(9) 0(9) 0(9)
Фарм. состав J°39 -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав JN°40 -II- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав N°41 5(9) 4(9) 3(7) 1 (7) 0(7)
Фарм. состав N°42 4(10) 3(10) 2(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав N°43 4(10) 3(10) 2(9) 1 (8) 0(8)
Фарм. состав JST24 4(10) 3(10) 2(10) 1 (9) 0(8)
Фарм. состав N°45 4(10) 3(10) 1(9) 1(8) 0(8)
Фарм. состав Ν°46 3(Ю) 2(10) 1(9) 0(9) 0(9)
Фарм. состав N°47 -//- -II- -II- -II- -II-
Фарм. состав Ν°48 -II- -II- -II- -II- -II-
*) количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне в течение 2 минут. **) количество выживших крыс к моменту контроля. На контроль предоставлялось 10 крыс. ,
Таблица 20
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также мексидола на амнезию у мышей, вызванную электросудорожным шоком. Число мышей с амнезией условной реакции пассивного избегания через 24 часа после амнезирующего воздействия, %
(значения округлены до целого числа)
Фарм. состав N°48 -II- -II- 14 12 -//-
*) Количество мышей в каждом опыте - **) Мексидол, доза 40 мг на мышь.
Таблица 21
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также мексидола на амнезию у мышей, вызванную скополамином Число мышей с амнезией условной реакции пассивного избегания через 24 часа после амнезирующего воздействия, % (значения округлены до целого числа)
Фарм. состав Ν°44 21 15 1 1 1 1 11
Фарм. состав Ν°45 18 15 1 1 1 1 1 1
Фарм. состав N246 18 13 9 9 9
Фарм. состав N°47 -II- 13 9 9 -II-
Фарм. состав N°48 -II- -II- 9 9 -II-
*) Количество мышей в каждом опыте - **) Мексидол, доза 40 мг на мышь.
Таблица 22
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2- этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, минеральных веществ и изотопов углерода 13С, а также мексидола на выживаемость мышей на 7-е сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий.
Количество мышей в каждом опыте - 30
Фармацевтический состав Ν°3 94
Фармацевтический состав Ν°4 94
Фармацевтический состав Ν°5 95
Фармацевтический состав Ν°6 96
Фармацевтический состав JN°7 96
Фармацевтический состав N°8 96
Фармацевтический состав N°9 93
Фармацевтический состав К» 10 94
Фармацевтический состав N°l 1 94
Фармацевтический состав Nel2 96
Фармацевтический состав N°13 97
Фармацевтический состав \А 97
Фармацевтический состав Ν°15 97
Фармацевтический состав Ν°16 96
Фармацевтический состав -N°17 93
Фармацевтический состав N2I 8 94
Фармацевтический состав Ν°19 96
Фармацевтический состав j\°20 97
Фармацевтический состав ЗЧз21 97
Фармацевтический состав Ns22 98
Фармацевтический состав JNTe23 98
Фармацевтический состав N°24 97
Фармацевтический состав Ns89 96
Фармацевтический состав N°90 97
Фармацевтический состав ·Ν°91 97
Фармацевтический состав N292 97
Фармацевтический состав *N°93 98
Фармацевтический состав Г°94 99
Фармацевтический состав 95 99
Фармацевтический состав JN°96 99
Таблица 23
Количественные характеристики мексидола (препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат) и минеральных веществ в биологически активной добавке, описанной в патенте РФ 2156087
Таблица 24
Количественные характеристики препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в заявленных фармацевтических составах
Таблица 25
Диапазоны количественных характеристик минеральных веществ в фармацевтических составах при исследованиях на влияние повышенной концентрации минеральных веществ на антиокидантную и противоишемическую активность
*)При различных комбинациях минеральных веществ в фармацевтическом составе значение, находящееся в диапазоне ДЗ не приводит к повышению
эффективности препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Значение, находящееся в диапазоне Д4 приводит к снижению эффективности препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Литература
1. Воронина Т.А., Островская Р.У. Методические указания по изучению ноотропной активности фармакологических веществ //Руководство по
экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Под ред. Фисенко В.П. - М., 2000. - С.153- 158.
2. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П.Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ. /Под. ред. Батуева А.С. - М.: Высш. шк., 1991. - 399 с.
3. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка
антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесценции // Биофизика. - 1992. - Т.37, вып.6. - С.1041-1047.
4. Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол:
основные эффекты, механизм действия, применение. - М., 2004. - 21 с.
5. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001.
6. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004, - 240с.
7. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка
антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесценции // Биофизика. - 1992. - Т.37, вып.6. - С.1041-1047.
8. В.Х.Хавинсон, В.Г.Морозов, В.Н.Анисимов. Влияние эпиталамина на свободнорадикальные процессы у человека и животных. Успехи геронтологии, 1999г., выпуск 3 .
9. Методические рекомендации по экспериментальному изучению
препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве
антигипоксических средств. Под редакцией Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под редакцией Р.У.Хабриева. - М.: Минздрав РФ, 2005.
1 1. McGraw СР., Pashayan A.G., Wendel О.Т. Cerebral infarction in the
Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976 - Vol.7, No 5. - P.485-488.
12. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 13-5057) upon impared learning and memory in rodents //
Psychopharmacol. - 1982. - Vol.78. - P.104-1 1 1.
13. Разделение изотопов. Физическая энциклопедия.
http://dic.academic.ru/dic.nsf/enc phvsics/1071/ИЗОТОПОВ .
14. Нанотехнология и включение атомов дейтерия 2Н, углерода 13С, азота 15N, и кислорода 18O в молекулы аминокислот и белков.
http://samlib.m/o/oleg_w_m/cdocu^
termologiiaiwkl)Uchenieatomowdejteriia2hrtf.shtml
15. Р.Ф.Ганиев, В.И.Кормилицын, Л.И.Украинский. Волновая
технология приготовления альтернативных видов топлив и эффективность их сжигания.-М.:Научно-издательский центр «Регулярная и хаотическая динамика», 2008.-1 16 с.
Claims
1. Фармацевтический состав для инъекций, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 - 300 ' 10 ;
калий - 0.020 - 19.99;
магний - 0.065 - 4.99;
железо - 0.027 - 4.99;
цинк - 0.065 - 4.99,
и при этом фармацевтический состав обладает нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
противоишемической активностью.
2. Фармацевтический состав для инъекций, содержащий 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что дополнительно содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов в мг/л:
2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат - 1 10 3 - 300 ' 10 3 ;
калий - 0.020 - 27.7;
магний - 0.065 - 70.3;
железо - 0.027 - 24.5;
цинк - 0.065 - 72.8,
и при этом фармацевтический состав выполнен таким образом, что содержит изотопы углерода 13С, и отношение:
nC = N13C/NC,
где пС - отношение количества изотопов углерода 13С к общему количеству углерода в фармацевтическом составе;
N 13 С - количество изотопов углерода 13 С в фармацевтическом составе; NC - общее количество изотопов углерода в фармацевтическом составе, составляет величину от 0.005 до 0.75,
и при этом фармацевтический состав обладает нейропротекторной,
антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической,
противоишемической активностью.
3. Фармацевтический состав для инъекций по любому из пп.1-2, отличающийся тем, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EA201200233A EA022836B1 (ru) | 2012-03-02 | 2012-03-02 | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) |
EA201200233 | 2012-03-02 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
WO2013129977A2 true WO2013129977A2 (ru) | 2013-09-06 |
WO2013129977A3 WO2013129977A3 (ru) | 2013-11-14 |
Family
ID=49083414
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PCT/RU2013/000165 WO2013129977A2 (ru) | 2012-03-02 | 2013-03-01 | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
EA (1) | EA022836B1 (ru) |
WO (1) | WO2013129977A2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631496C1 (ru) * | 2016-09-30 | 2017-09-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Комплекс ацетата цинка с 3-гидроксипиридином, обладающий антигипоксической активностью в условиях острой экзогенной гипоксии |
RU2797949C1 (ru) * | 2023-03-21 | 2023-06-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Южно-Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Сложный эфир тиоктовой (α-липоевой) кислоты и 2-этил-6-метил-3-оксипиридина, проявляющий антигипоксическую активность |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2156087C1 (ru) * | 1999-11-25 | 2000-09-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью Фирма "Электронная медицина" | Биологически активная добавка |
RU2205640C1 (ru) * | 2002-04-09 | 2003-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Экофарминвест" | Стабильный фармацевтический состав, содержащий мексидол |
RU2385722C1 (ru) * | 2008-07-02 | 2010-04-10 | Тимофей Георгиевич Кожока | Фармацевтическая нейропротекторная, антиоксидантная, антигипоксантная, антиапоптотическая и мембранопротекторная композиция и способ лечения |
RU2412188C2 (ru) * | 2006-09-21 | 2011-02-20 | Раквалиа Фарма Инк. | Производные бензимидазола в качестве селективных ингибиторов кислотной помпы |
-
2012
- 2012-03-02 EA EA201200233A patent/EA022836B1/ru not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-03-01 WO PCT/RU2013/000165 patent/WO2013129977A2/ru active Application Filing
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2156087C1 (ru) * | 1999-11-25 | 2000-09-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью Фирма "Электронная медицина" | Биологически активная добавка |
RU2205640C1 (ru) * | 2002-04-09 | 2003-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Экофарминвест" | Стабильный фармацевтический состав, содержащий мексидол |
RU2412188C2 (ru) * | 2006-09-21 | 2011-02-20 | Раквалиа Фарма Инк. | Производные бензимидазола в качестве селективных ингибиторов кислотной помпы |
RU2385722C1 (ru) * | 2008-07-02 | 2010-04-10 | Тимофей Георгиевич Кожока | Фармацевтическая нейропротекторная, антиоксидантная, антигипоксантная, антиапоптотическая и мембранопротекторная композиция и способ лечения |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
TEKHNOLOGIA LEKARSTVENNYKH FORM. POD RED. T.S. KONDRATEVOI, TOM 1 , M. 1991, page 364 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2631496C1 (ru) * | 2016-09-30 | 2017-09-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Комплекс ацетата цинка с 3-гидроксипиридином, обладающий антигипоксической активностью в условиях острой экзогенной гипоксии |
RU2809486C2 (ru) * | 2022-06-08 | 2023-12-12 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") | Средство, проявляющее антигипоксическую активность |
RU2797949C1 (ru) * | 2023-03-21 | 2023-06-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Южно-Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Сложный эфир тиоктовой (α-липоевой) кислоты и 2-этил-6-метил-3-оксипиридина, проявляющий антигипоксическую активность |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA022836B1 (ru) | 2016-03-31 |
WO2013129977A3 (ru) | 2013-11-14 |
EA201200233A1 (ru) | 2013-09-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Boskovic et al. | Oxidative stress in schizophrenia | |
Fan et al. | Controllable synthesis of hydrogen bubbles via aeration method for efficient antioxidant process | |
WO2013129977A2 (ru) | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
Kleczkowski et al. | The role of metal ions in biological oxidation-the past and the present | |
Samad et al. | Free–L-Cysteine improves corticosterone-induced behavioral deficits, oxidative stress and neurotransmission in rats | |
WO2013141758A1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
WO2013137778A1 (ru) | Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
Gonzalez-Pina et al. | Prenatal exposure to ozone disrupts cerebellar monoamine contents in newborn rats | |
Li et al. | Recent insights into autophagy and metals/nanoparticles exposure | |
EA022860B1 (ru) | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA022859B1 (ru) | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020584B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA023752B1 (ru) | Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
WO2014070038A1 (ru) | Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
Salaramoli et al. | Therapeutic Effects of Selenium on Alpha-Synuclein Accumulation in Substantia Nigra Pars Compacta in a Rat Model of Parkinson’s Disease: Behavioral and Biochemical Outcomes | |
WO2013137777A1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020673B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020058B1 (ru) | Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020041B1 (ru) | Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020042B1 (ru) | Твердая лекарственная форма, обладающая нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020559B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020539B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020521B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020538B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) | |
EA020560B1 (ru) | Фармацевтический состав, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, нейрометаболической, противоишемической активностью (варианты) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 13754857 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A2 |