WO2012045283A1

WO2012045283A1 - 4-氨基吡啶的多晶型物及其制备和应用

Info

Publication number: WO2012045283A1
Application number: PCT/CN2011/080548
Authority: WO
Inventors: 张和胜; 陈鑫
Original assignee: 天津和美生物技术有限公司; 天津米雪儿科技发展有限公司
Priority date: 2010-10-08
Filing date: 2011-10-08
Publication date: 2012-04-12
Also published as: EP2626347A1; CN102442942A; EP2626347A4; US20130197040A1

Description

4-氨基吡啶的多晶型物及其制备和应用

技术领域

本发明涉及制药技术领域，特别是涉及 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物及其制备方法和应用。

背景技术

多发性硬化症是一种慢性致残性自身免疫性疾病。据国际多发性硬化学会统计显示，在全世界范围内有超过 250万人被诊断罹患此病，其中仅美国就有 40万患者深受其害。多发性硬化症的临床表现主要包括进行性行走困难，容易疲劳，身体协调性丧失以及视力、记忆力的下降，并伴有热敏感性。在多发性硬化症的所有发病类型中最常见的是驰张型，主要表现为继数月至数年缓解期后的突然急性发作，不伴随任何新的病征表现。其次就是持续型，即自发病之时起，疾病呈进行性加重，中间并不伴有缓解期，表现为一个持续的、不可逆的神经退行性病变过程。但不论是哪种类型，在多发性硬化症的病程中，患者步行速度的缓慢是一个重要的症状。步行速度的变缓会使患者的自主活动受限，影响其正常的日常生活。

目前，用于治疗多发性硬化症的药物，主要是通过减少中枢神经系统的炎症性损害起作用，且多是通过非口服途径给药。

日前，一种新型多发性硬化症口服治疗药物 Ampyra (4-氨基吡啶， dalfampridine)获得 FDA的批准并在美国上市，成为首种可以口服治疗多发性硬化症的药物，也是第一个获得 FDA批准用于改善多发性硬化症患者步行速度的药物。

Ampyra的研究可以追溯到 20世纪 60年代。当时 Floyd Davis博士通过临床观察发现，相当一部分多发性硬化症患者，当体温略有降低的时候，其病症就会减轻。在多发性硬化症患者中，环绕在脑神经和脊髓神经周围的髓鞘遭受到破坏，造成了短路。但是，低体温却可以使电脉冲沿着神经纤维继续传导，这一发现很重要，说明神经纤维受损并不是像以前一直认为的那样是不可逆的。

该研究团队此后进行了一系列的实验室研究，以探求此种现象的发生机制，并试图寻找一种化合物，可以模仿体温较低时对神经纤维的影响，而且研究了一些能够阻滞神经纤维中钾离子通道的药物，比如 4-氨基吡啶（ dalfampridine )。

1983 年， 11 例因多发性硬化症而导致视力和运动功能受损的患者注射了 dalfampridine, 结果收到了惊人的疗效 -—患者的步行速度及视力均得以改善。

III期临床试验时，这种药物表现出在步行速度方面的持续改善。在一系列的临床试验中，以 dalfampridine治疗的多发性硬化症患者的步行速度比接受安慰剂者的更快，接受规定剂量 dalfampridine的患者中，步行速度与基线水平相比至少提高 10%-30%的患者比例明显高于安慰剂组。

研究中发现，虽然 dalfampridine是用于改善多发性硬化症患者的步行速度，但同时也缓解了多发性硬化症的其他症状，因为该药还具有恢复神经信号传导的作用。

众所周知，化合物的结晶型形式与无定型物相比，具有更好的稳定性，可延长原料药的保质期，而且更有利于制剂的制备。因此，将原料药制备成结晶型形式通常是原料药物质形态的最佳选择，尤其是象 4-氨基吡啶这样对湿和空气敏感的化合物，但目前尚未有 4-氨基吡啶的结晶型形式，如多晶型物，报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物；

本发明的另一个目的是提供 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物的制备方法和应用。

为此，本发明的技术方案如下：

本发明公开的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物可由以下几种方法制备：

1、将 4-氨基吡啶与单一溶剂加热溶清，静置冷却析出固体。

2、将 4-氨基吡啶与混合溶剂加热溶清，静置冷却析出固体。

3、将 4-氨基吡啶与单一溶剂加热溶清，搅拌冷却析出固体。

4、将 4-氨基吡啶与单一溶剂加热溶清后，搅拌冷却下向体系中滴加不良溶剂，析出固体。

5、将 4-氨基吡啶与混合溶剂加热溶清，搅拌冷却析出固体。

6、将 4-氨基吡啶与混合溶剂加热溶清，搅拌下冷却，同时滴加不良溶剂，析出固体。上述制备方法中，若冷至室温还无析出，可移入冰箱冷却至 0-10 °C。本发明中所述的单一溶剂均指：水、醇、酯、酮、醚、烷烃、卤代烃、腈、芳香经、酰胺、砜、环醚类、吡啶类或亚砜类溶剂中的一种，包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、丙酮、丁酮、乙醚、异丙醚、四氢呋喃、 1, 4-二氧六环、甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸异丙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、甲酸丁酯、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 Ν,Ν-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、水、吡啶、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、乙二醇二甲醚、乙二醇单甲醚、乙二醇二乙醚、乙二醇单乙醚、乙二醇二丙醚、乙二醇单丙醚、正己垸、氯仿、二氯甲垸、 1,2-二氯乙垸或四氯化碳中的一种。

本发明中所述的混合溶剂均指：水、醇、酯、酮、醚、烷烃、卤代烃、腈、芳香烃、酰胺、砜、环醚类、吡啶类或亚砜类溶剂中的两种或两种以上的混合溶液，具体的包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、丙酮、丁酮、乙醚、异丙醚、四氢呋喃、 1,4-二氧六环、甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸异丙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、甲酸丁酯、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 Ν，Ν-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、水、吡啶、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、乙二醇二甲醚、乙二醇单甲醚、乙二醇二乙醚、乙二醇单乙醚、乙二醇二丙醚、乙二醇单丙醚、正己垸、氯仿、二氯甲垸、四氯化碳或石油醚等中的两种或两种以上的混合溶液；当混合溶剂为上述两种溶剂时两种溶剂的比例为 100 : 1-1 : 100c 本发明中所述的不良溶剂均指：水、醇、酯、酮、醚、垸烃、卤代烃、腈、芳香经、酰胺、砜、环醚类或亚砜类溶剂中的一种或一种以上的混合溶液，包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、丙酮、丁酮、乙醚、异丙醚、四氢呋喃、 1, 4- 二氧六环、甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸异丙酯、乙酸甲酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、甲酸丁酯、水、吡啶、乙腈、苯、甲苯、二甲苯、乙二醇二甲醚、乙二醇单甲醚、乙二醇二乙醚、乙二醇单乙醚、乙二醇二丙醚、乙二醇单丙醚、正己烷、氯仿、二氯甲烷、四氯化碳或石油醚中的一种或一种以上的混合溶液；当混合溶剂为上述两种溶剂时两种溶剂的比例为 100 : 1-1 : 100。

本发明公开了 4-氨基吡啶或其溶剂化物的八种多晶型物，即多晶型物 Ι〜νΠΙ。

本发明中的 X射线粉末衍射图谱的测量条件如下：

样品量：约 100mg，

靶： Cu，

滤片：单色，

3

更正页（细则第 91条）电压 /电流： 40kV/100mA，

狭缝： SS/DS 1°, RS 0.3mm,

扫描速度： 8°/分

范围： 3-50。

本发明中公开的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的八种多晶型物中峰强度在 15 以上的峰见以下各表：

( 1 ) 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 I

其 X射线粉末衍射图谱中的峰具有以下特征:

4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 V 其 X射线粉末衍射图谱中的峰具有以下特征:

4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 VI

其 X射线粉末衍射图谱中的峰具有以下特征:

本发明提供的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物使用时可以是单一的一种多晶型物，也可以是两种或两种以上的多晶型物的混合物。

本发明公开的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物作为药物活性成分应用时单位使用剂量范围为： 0. 01〜500mg; 最佳单位使用剂量为 0. l〜100mg。本发明中所述的单位使用剂量均指：能施用于患者并且易于操作和包装的单元，即单个剂量。

本发明中公开的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物作为药物活性成分时可用于治疗多发性硬化症，包括但不限于温和型多发性硬化症、复发缓解型多发性硬化症、复发渐进型多发性硬化症或慢性渐进型多发性硬化症。

本发明公开的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物作为药物活性成分应用时可以与适宜的制剂辅料制备成相应的剂型，这些剂型包括但不限于：片剂（包括但不限于普通片剂、口含片、泡腾片、肠溶片、缓释片、控释片或口崩片）、胶囊剂（包括但不限于硬胶囊或软胶囊）、粉针（包括但不限于普通粉针或冻干粉针）、溶液制剂、气雾剂、喷剂、膏剂、贴剂、滴眼剂、滴耳剂、颗粒剂、冻干速溶片、植入剂或栓剂等经由口服、注射、吸入、滴眼、滴耳、透皮、直肠、阴道给药等给药方式应用的制剂。

本发明中所述的适宜的制剂辅料包括但不限于：崩解剂、填充剂、着色剂、矫味剂、润滑剂、助流剂、粘合剂、泡腾剂、防腐剂、溶剂和 /或助溶剂。

本发明中所述的崩解剂包括但不限于：淀粉、低取代羟丙基纤维素 (L_HPC)、交联聚乙烯吡咯烷酮 (PVPP)、交联羧甲基纤维素钠 (CCNa)、交联羧甲基淀粉钠 (CCMS-Na)或处理琼脂 (TAG)中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的填充剂包括但不限于：明胶、氯化钠、右旋糖酐、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、山梨醇、羟乙基纤维素、糊精、微晶纤维素 (MCC)、乳糖、甘露醇、赤藓糖醇、淀粉或糖粉中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的着色剂包括但不限于：胡萝卜素、日落黄、柠檬黄、胭脂红或叶绿素中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的矫味剂包括但不限于：天然矫味剂和人工矫味剂，如甜菊甙、木糖醇、阿司巴甜、甜橙固体香精、甜蜜素、水果香精、蔗糖、葡萄糖、薄荷脑、枸橼酸、维生素 C或山梨糖中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的润滑剂包括但不限于：硬脂酸镁、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸、聚乙二醇 4000、聚乙二醇 6000、氢化植物油、聚氧乙烯单硬脂酸酯、轻质矿物油、蜡类、三醋酸甘油酯或十二烷基硫酸镁中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的助流剂包括但不限于：微粉硅胶、 Cab-0-si l (Cabot 公司）、 Arosi l (Degussa公司）或水合硅铝酸钠中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的粘合剂包括但不限于：水、淀粉、羟丙基甲基纤维素 (HPMC)、羧甲基纤维素钠（CMC-Na)、羟丙基纤维素 (HPC)、甲基纤维素 (MC)、乙基纤维素 (EC)、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)或乙醇中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的泡腾剂中的酸源包括但不限于：枸橼酸、酒石酸、四己酸、赖氨酸或精氨酸中的一种或一种以上的混合物。本发明中所述的泡腾剂中的碱源包括但不限于：碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸钾中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的防腐剂包括但不限于：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸中的一种或一种以上的混合物，其中所述的尼泊金类包括但不限于尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯或尼泊金丁酯中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的溶剂包括但不限于：水、聚乙二醇 200、聚乙二醇 300、聚乙二醇 400、聚乙二醇 600或甘油中的一种或一种以上的混合物。

本发明中所述的助溶剂包括但不限于：泊洛沙姆、乙醇、 1， 2-丙二醇、甘油、聚乙二醇 200、聚乙二醇 300、聚乙二醇 400或聚乙二醇 600中的一种或一种以上的混合物。

本发明提供的 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物在室温空气中放置 12个月后进行高效液相色谱法纯度测定，未产生降解杂质，稳定性极好，是优选的原料药物质形态。

附图说明

图 1是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 I的 X射线粉末衍射图谱；

图 2是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 II的 X射线粉末衍射图谱；

图 3是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 III的 X射线粉末衍射图谱；

图 4是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 IV的 X射线粉末衍射图谱；

图 5是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 V的 X射线粉末衍射图谱；

图 6是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 VI的 X射线粉末衍射图谱；

图 7是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 VII的 X射线粉末衍射图谱；

图 8是 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 VIII的 X射线粉末衍射图谱。

具体实施方式

本发明熔点测定仪为： BUCHI-B-545 ; 熔点管：华西医科大学仪器厂生产 0. 9〜1. 1讓熔点管。实施例 1、多晶型物 I的制备将 1.6克 4-氨基吡啶加入到 15mL甲苯和 6mL吡啶的混合液中，加热至 95 °C溶清，无色清液，静置冷却至室温并保持 3小时，抽滤，滤饼在空气中干燥，得晶型 I。该晶型熔点为 151.8-152.2°C，其 X射线粉末衍射图谱见图 1。实施例 2: 多晶型物 II的制备

方法 a: 将 3克 4-氨基吡啶加入到 2mL丙酮和 2mL水的混合液中，加热至 80°C溶清，静置冷却至室温并保持 2小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 II，其熔点为 160-160.8°C。

方法 b: 将 4.5克 4-氨基吡啶加入到 3mL乙醇和 3mL水的混合液中，加热至 85 °C溶清，无色清液，静置冷却至 5。C，保持 3 小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 II。

该晶型的 X射线粉末衍射图谱见图 2。实施例 3 : 多晶型物 III的制备

将 2.2克 4-氨基吡啶加入到 20mL四氯化碳和 5mL异丙醇的混合液中，加热至 86°C 回流溶清，静置冷却至 5 °C，保持 20min，抽滤。所得滤饼在空气中干燥，得晶型 III，其熔点为 159.8-160.2°C，其 X射线粉末衍射图谱见图 3。实施例 4: 多晶型物 IV的制备

方法 a: 将 2.8克 4-氨基吡啶加入到 20mL丙酮中，加热至 70°C溶清，静置冷却至室温，保持 3小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 IV，其熔点为 159.8-161.5 °C。

方法 b: 将 2克 4-氨基吡啶加入到 15mL四氢呋喃中，加热至 85 °C溶清，静置冷却至室温，并保持 3小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 IV，其 X射线粉末衍射图谱见图 4。

该晶型的 X射线粉末衍射图谱见图 4。实施例 5 : 多晶型物 V的制备

方法 a: 将 3克 4-氨基吡啶加入到 2mL乙腈和 2mL水的混合液中，加热至 80°C溶清，静置冷却至 5 °C，保持 20min，有片状固体析出，移至室温，静置 2小时。抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 V，其熔点为 159.8-161.5 °C。方法 b:将 1.8克 4-氨基吡啶加入到 20mL水中，加热至 90°C溶清，静置冷却至 5°C，保持 20min，有析出，移至室温，静置过夜。抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 V。

该晶型的 X射线粉末衍射图谱见图 5。实施例 6: 多晶型物 VI的制备

方法 a: 2.2克 4-氨基吡啶溶于 16mL乙二醇二甲醚和 4mL乙二醇单甲醚的混合溶液中，加热至回流溶清，静置冷却至室温，移入冰箱冷藏过夜，有析出，抽滤。所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VI。

方法 b: 1.8克 4-氨基吡啶溶于 30mL乙酸乙酯中，加热至 85 °C溶清，静置冷却至室温，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VI。

方法 c: 将 3克 4-氨基吡啶溶于 15mL乙腈，加热至 85°C回流溶清，搅拌下冷却至室温，抽滤。所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VI。

该晶型的 X射线粉末衍射图谱见图 6。实施例 7: 多晶型物 VII的制备

方法 a:将 1.8克 4-氨基吡啶溶于 16mL正己烷和 2.5mL N,N-二甲基乙酰胺的混合液中，加热至 85°C溶清，分层。搅拌下冷却，同时滴加 20mL二氯甲烷，体系很快变成一相，滴加完毕，有细小针状晶体析出。室温静置 1小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VII。熔点 160-162°C。

方法 b:将 2.8克 4-氨基吡啶溶于 10mL乙腈中，加热至 85°C溶清，静置冷却至室温，保持 3小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VII。

方法 c: 将 1.8克 4-氨基吡啶溶于 30mL氯仿和 lmL甲醇的混合液中，加热至 75°C 溶清，静置冷却至室温，静置 3小时，抽滤，所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VII。

方法 d: 将 2.8克 4-氨基吡啶加入到 20mL乙腈中，加热至 70°C溶清，静置冷却至室温并保持 3小时，抽滤，空气中干燥。得晶型 VII。

该晶型的 X射线粉末衍射图谱见图 7。实施例 8: 多晶型物 VIII的制备

3克 4-氨基吡啶溶于 8mL乙醇，加热至 85°C回流 10min，静置冷却至室温，抽滤。所得滤饼在空气中干燥，得晶型 VIII，其熔点为： 157.6〜158.5°C，其 X射线粉末衍射图谱见图 8。

从图 1-8可以看出，上述八种 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物的 X射线粉末衍射图谱中的峰强度在 15以上的峰分别具有以下特征：

1、 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 I：

2、 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 II：

3、 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 III:

6、 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物 VI:

将本发明提供的上述八种 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物在室温空气中放置 12 个月后进行高效液相色谱法纯度测定，纯度结果如下：

高效液相色谱纯度测定条件：

色谱柱： Agi lent extend-C18 (250*4. 6mm, 5 μ )

流动相：含 O.Olmol/L辛烷磺酸钠的 O.Olmol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节 pH值至

2.6) -甲醇 ( 75： 25 )；

柱温： 40 °C ;

检测波长： 264nm;

流速： lml/min。由上述数据可见本发明提供的上述八种 4-氨基吡啶或其溶剂化物的多晶型物在室温空气中放置 12个月后仍保持了极高的纯度，未产生明显降解物，具有极好的稳定性。