WO2012002730A2 - 봉독 추출물을 함유하는 피부 미백 및 보습용 조성물 - Google Patents

봉독 추출물을 함유하는 피부 미백 및 보습용 조성물 Download PDF

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WO2012002730A2
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skin
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whitening
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박준성
심진섭
김덕희
김한곤
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(주)아모레퍼시픽
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    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin

Definitions

  • the present invention relates to a skin whitening and skin moisturizing composition containing bee venom extract.
  • Melanin is a black-brown pigment that has a function of blocking more than a certain amount of ultraviolet rays to protect the skin from ultraviolet rays. Therefore, when the skin is exposed to ultraviolet rays, a large amount of melanin is produced in the body to protect the skin. Since the skin color is determined by the amount of melanin and the amount of melanin increases, the skin becomes black. Therefore, the production of large amounts of melanin causes spots, spots, freckles, and blotch. For this reason, substances that inhibit melanin production may have a skin whitening effect.
  • the present invention is to provide a composition having a skin whitening or skin moisturizing effect by containing bee venom extract as an active ingredient.
  • One aspect of the present invention provides a composition for skin whitening containing bee venom extract as an active ingredient.
  • Another aspect of the present invention provides a skin moisturizing composition containing bee venom extract as an active ingredient.
  • Another aspect of the present invention provides a cosmetic composition containing bee venom extract as an active ingredient.
  • composition according to one aspect of the present invention contains bee venom extract as an active ingredient, thereby inhibiting melanin production and improving pigmentation produced by UV light, thereby having an excellent skin whitening effect. In addition, it induces differentiation of keratinocytes and promotes the expression of filaggrin, which has a skin moisturizing effect.
  • extract includes any material obtained by extracting a component therefrom from a natural product, regardless of the method of extraction or the kind of the component.
  • extract includes all the components which are dissolved in a solvent from a natural product using water or an organic solvent, and those obtained by extracting only a specific component such as an oil such as oil.
  • skin refers to a tissue covering the body surface of an animal, and is a broad concept including not only tissues covering the body surface such as the face or body, but also the scalp and hair.
  • bee venom refers to bee venom (bee venom) coming out of the spawning tube of bees, and is often used as a folk remedy because it is effective in neuralgia, rheumatism, and back pain.
  • bee venom extract collectively refers to a fraction of a substance or solvent extracted through various extraction methods known in the art for bee venom.
  • bee sting therapy using bee sting is sometimes used.
  • Such needle acupuncture is known to be effective in treating arthritis and the like. If you look at the form of bee acupuncture by type, it can be divided into:
  • the first is the direct method ( ⁇ ⁇ ⁇ ) is to put a bunch of live bees on the area to be treated, and then immersed for about 30 to 60 seconds so that bee venom penetrates enough to pull out the saliva.
  • the second method is called acupuncture method ( ⁇ ⁇ ) is to remove the needle from the bee with a tweezers and put it on the area to be treated, and then pull it out to another area.
  • the piercing method is not a strong irritation and can be used three to five places a single bee sting is a relatively popular method.
  • Sanja method is similar to the method of sleeping by using the Samreung Acupuncture, and it is a treatment method that utilizes the characteristics of bee-acupuncture to treat a wide area with a small amount of needles by repeatedly pitting and removing the needle.
  • the fourth method is to inject bee venom into the acupuncture points of the human body through a syringe while diluting it through saline. This method has the advantage that the patient is less aware of the pain, but also faster to penetrate bee venom directly into the menstrual blood.
  • the form of the procedure is a method of injecting bee venom into acupuncture points along with acupuncture in order to find a blood donor in a state where the bee venom is buried in Chinese medicine.
  • Herbal acupuncture method is an excellent method that the medical effect is much improved due to the nature of the acupuncture method, there is a problem accordingly.
  • the inventors have discovered a new efficacy of bee venom in the course of studying bee venom.
  • compositions for skin whitening containing bee venom extract as an active ingredient.
  • the composition may exhibit a skin whitening effect by inhibiting melanin production and improving pigmentation produced by ultraviolet light.
  • compositions containing bee venom extract as an active ingredient.
  • the composition may induce differentiation of keratinocytes and promote the expression of filaggrin, a protein that is an important source for the production of natural moisturizing factors possessed by keratinocytes, thereby exerting a skin moisturizing effect.
  • filaggrin a protein that is an important source for the production of natural moisturizing factors possessed by keratinocytes, thereby exerting a skin moisturizing effect.
  • the composition containing bee venom itself may also exhibit the same or similar effects as the composition containing bee venom extract.
  • bee venom may undergo various pretreatment procedures commonly recognized in the art.
  • purified bee venom can be used by pouring distilled water into bee venom obtained through an electric bombardment method to suspend bees or foreign substances from bee venom, and filtering out floating bees or foreign substances.
  • bee venom extract can be obtained by extracting bee venom by conventional methods in the art.
  • bee venom extract can be obtained using a solvent extraction method of leaching, purifying and separating bee venom into water, an organic solvent or a mixed solvent of water and an organic solvent.
  • the organic solvent is not particularly limited and may be C 1 to C 5 lower alcohol, ether, ethyl acetate or chloroform.
  • the lower alcohol of C 1 ⁇ C 5 may be, for example, any one or two or more mixed solvents selected from the group consisting of methanol, ethanol, isopropyl alcohol, n-propyl alcohol, n-butanol and isobutanol. .
  • the volume of the organic solvent in the mixed solvent of water and the organic solvent may be 10 to 90% (v / v).
  • the bee venom extract is a mixed solvent comprising 10 to 90% (v / v) ethanol, specifically a mixed solvent comprising 30 to 80% (v / v) ethanol, based on the total volume of the mixed solvent, more Specifically, the extract may be extracted using a mixed solvent containing 50 to 75% (v / v) ethanol.
  • the composition according to one aspect of the present invention may contain 0.0001 to 30% by weight, specifically 0.001 to 15% by weight, more specifically 0.01 to 5% by weight, based on the total weight of the composition.
  • it is not only suitable for exhibiting the intended effect of the present invention, but also satisfies both the stability and safety of the composition, and may be appropriate to include in the above range in terms of cost-effectiveness. More specifically, when the content of bee venom extract is lower than the above range, the skin whitening or skin moisturizing effect by bee venom component may not be sufficiently obtained, and when the content of the bee venom extract is exceeded, the increase in effect may not be large compared to the increase in content. have.
  • One aspect of the present invention provides a cosmetic composition containing bee venom extract as an active ingredient.
  • the cosmetic composition may contain the bee venom extract as an active ingredient, thereby exhibiting skin whitening and skin moisturizing effect.
  • the cosmetic composition may be, for example, a cosmetic composition, the cosmetic appearance of which includes a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base.
  • a cosmetic composition the cosmetic appearance of which includes a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base.
  • These are all formulations suitable for topical application, e.g. emulsions obtained by dispersing the oil phase in solutions, gels, solids, pasty anhydrous products, aqueous phases, emulsions obtained by dispersing the aqueous phase in oil phases, multiemulsions, suspensions, micro emulsions, micro It may be provided in the form of an aerosol composition containing capsules, microgranulocytes, ionic (liposomal) and nonionic vesicle dispersants, foams or compressed propellants. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art.
  • Cosmetic compositions include organic solvents, solubilizers, thickeners, gelling agents, emollients, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, fragrances, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, metal ions Containment agents, chelating agents, preservatives, vitamins, wetting agents, oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or auxiliaries commonly used in the cosmetic or dermatological arts. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological fields.
  • the cosmetic composition is not particularly limited in formulation, and may be appropriately selected in accordance with the desired purpose.
  • flexible lotion, astringent lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing lotion, cleansing foam, cleansing water, pack, powder conceal stick, body lotion, body Creams, body oils, body essences, body cleansers, hair dyes, hair tonics, hair nourishing lotions, hair essences, hair serums, scalp treatments, hair treatments, hair conditioners, hair shampoos, hair lotions, toothpastes, mouthwashes, hair conditioners , Wool, lotions, ointments, gels, creams, patches, and sprays may be prepared in one or more formulations selected from the group consisting of, but not limited to.
  • Bee venom was obtained by an electric shock method. Distilled water was poured into the bee venom obtained through the electroshock method, and bee or foreign matter was suspended from the bee venom. Suspended bees or debris were filtered off and purified bee venom was obtained.
  • the obtained bee venom was extracted using 70% ethanol. Specifically, 70% ethanol corresponding to three times the volume of bee venom obtained was added and extracted and degreased with stirring five times at room temperature. Four times the volume of 70% ethanol was further added to the defatted bee venom and extracted three times under reflux, followed by immersion at 15 ° C. for 2 days. The residue and the filtrate were separated through filtration and centrifugation for the deposit, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain an extract. After the obtained extract was suspended in water, the pigment was removed using ether, and the aqueous layer was extracted five times with butanol and removed. The obtained organic solvent layer was concentrated under reduced pressure to obtain an extract. The obtained extract was dissolved in methanol, ethyl acetate was added, and the resultant precipitate was dried to obtain bee venom extract, which was obtained in Example 1.
  • mouse pigment cells were used. First, C57BL / 6 in a medium containing 10% fetal placental serum, 100 nM 2-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate and 1 nM cholera toxin in Dulbeccos modified Eagles media (DMEM) Mice-derived mouse pigment cells (Mel-Ab cells) were incubated under conditions of 37 ° C and 5% CO 2 . The cultured Mel-Ab cells were separated with 0.25% trypsin-EDTA, the cells were incubated at a concentration of 10 5 cells / well in a 24-well plate, and the bee venom of Example 1 was continued for two days from the second day.
  • DMEM Dulbeccos modified Eagles media
  • Example 1 As can be seen from the results, the bee venom extract of Example 1 according to the present invention showed a melanin production inhibition rate similar to that of hydroquinone. This confirms that bee venom extract has an excellent whitening effect.
  • the difference in skin color ( ⁇ L *) at the application start time and the application completion time according to each test material was calculated according to Equation 2 below, and the results are shown in Table 2 below.
  • the whitening effect is determined by comparing ⁇ L * between the sample application site and the control site. When ⁇ L * value is about 2, the whitening effect of the deposited pigment is clear, and when it is about 1.5 or more, the whitening effect is determined. Can be.
  • the bee venom extract of Example 1 showed a similar degree of skin color brightness as hydroquinone. Through this, bee venom extract can be confirmed to have an effect of brightening the skin color by improving pigmentation generated by ultraviolet rays.
  • RT-PCR reverse transcriptional polymerase chain reaction
  • Example 1 promotes the expression of filaggrin in keratinocytes. Therefore, bee venom extract can be seen to promote the natural moisturizing factor production and enhance the skin moisturizing ability.
  • Example 2 and Comparative Example 1 which are external preparations of the nutrition cream formulation, were prepared.
  • the unit of content ratio of the following components is weight%.
  • Example 2 Comparative Example 1 Purified water To 100 To 100 Bee Venom Extract (Example 1) 0.1 - Vegetable Cured Oil 1.50 1.50 Stearic acid 0.60 0.60 Glycerol Stearate 1.00 1.00 Stearyl alcohol 2.00 2.00 Polyglyceryl-10 Pentastearate & Behenyl Alcohol & Sodium Stearoyl Lactylate 1.00 1.00 Arachidil Behenyl Alcohol & Arachidil Glucoside 1.00 1.00 Cetylaryl Alcohol & Cetearyl Glucoside 2.00 2.00 PEG-100 Stearate & Glycerolate & Propylene Glycol 1.50 1.50 Caprylic / Carric Triglycerides 11.00 11.00 Cyclomedicon 6.00 6.00 Preservative, incense Quantity Quantity Triethanol amine 0.1 0.1 0.1
  • Example 2 and Comparative Example 1 40 healthy women in their 30s were divided into two groups of 20 people, and each of the nutritional creams of Example 2 and Comparative Example 1 was applied to the face twice daily for four weeks under conditions of temperature 24-26 ° C and humidity of 75%, followed by application. Before start, after 1 week, 2 weeks, 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) after application was stopped, constant temperature and humidity conditions (24 ° C, 40% relative humidity) Skin moisture content was measured. On the basis of the Koniometer value measured immediately before the start of the test, the measured value increase in each measurement was expressed as a percentage, and the results are shown in Table 6 below.
  • Example 2 containing bee venom extract was further increased in skin moisture retention compared to the group to which Comparative Example 1 was applied.
  • the value after 6 weeks, which is 2 weeks after the application of the test substance was stopped was similar to the value after 1 week to 2 weeks after the test substance was applied, and the skin obtained by the application of Example 2 without applying the test substance was observed. It can be seen that the water retention of was maintained for a certain period of time. Therefore, bee venom extract can be seen to enhance the skin moisturizing ability when applied to humans.
  • a lotion preparation is prepared according to a conventional method with the compositions described in the table below.
  • a creamy formulation is prepared according to the conventional method with the compositions described in the table below.
  • Table 8 ingredient weight(%) Bee Venom Extract of Example 1 1.00 Polyethylene Glycol Monostearate 2.00 Glycerin Monostearate 5.00 Cetyl alcohol 4.00 Squalene 6.00 Tri2-ethylhexaneglyceryl 6.00 Sphingolipid 1.00 1,3-butylene glycol 7.00 Purified water Remaining amount
  • Packed formulations are prepared according to conventional methods in the compositions shown in the table below.
  • a cosmetic liquid formulation is prepared according to a conventional method with the composition shown in the table below.

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Abstract

본 발명은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유함으로써, 피부 미백 및 피부 보습 효과를 가지는 조성물을 개시한다. 또한 본 발명은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유함으로써, 피부 미백 및 피부 보습 효과를 가지는 화장품 조성물을 개시한다.

Description

봉독 추출물을 함유하는 피부 미백 및 보습용 조성물
본 발명은 봉독 추출물을 함유하는 피부 미백 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
멜라닌은 흑갈색 색소로서 일정량 이상의 자외선을 차단하는 기능이 있어 자외선으로부터 피부를 보호하는 작용을 한다. 따라서 피부가 자외선에 노출되는 경우 피부를 보호하기 위해 몸에서 멜라닌이 다량 생성된다. 멜라닌의 양에 의해 피부색이 결정되고 멜라닌의 양이 많아질수록 피부는 검은색을 띠게 되므로, 멜라닌의 다량 생성은 기미, 점, 주근깨, 검버섯 등의 원인이 된다. 이러한 이유로 멜라닌 생성을 억제하는 물질은 피부 미백 효과를 가질 수 있다.
한편, 피부 수분량이 감소하면 건조로 인한 각질이 자주 일어난다. 또한 피부의 윤기가 사라지고 잔주름이 쉽게 생기며 피부 노화도 일찍 시작된다. 즉, 바람직한 피부를 가지기 위해서는 피부 수분 유지가 필수적이다.
본 발명은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유함으로써, 피부 미백 또는 피부 보습 효과를 가지는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장품 조성물을 제공한다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유함으로써, 멜라닌 생성을 억제하고 자외선에 의해 생성된 색소 침착을 개선하여 우수한 피부 미백 효과를 가진다. 또한 각질형성세포의 분화를 유도하고 필라그린(filaggrin)의 발현을 촉진하여 피부 보습 효과를 가진다.
본 명세서에서 "추출물"이라 함은, 천연물로부터 그 안의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질이라면, 뽑아내는 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함한다. 예컨대, 물이나 유기 용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출해 낸 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함하는 광의의 개념이다.
본 명세서에서 "피부"라 함은, 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로서, 얼굴 또는 바디 등의 체표를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.
이하에서, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 명세서에서“봉독”이란, 꿀벌의 산란관에서 나오는 독액(bee venom)을 의미하며, 신경통, 류머티즘, 요통 등에 효과가 좋아 민간요법으로 많이 이용되기도 한다. 그리고“봉독 추출물”은 상기 봉독에 대하여 당해 기술 분야에서 알려진 다양한 추출법을 통해 추출된 물질 또는 용매의 분획을 총칭한다.
봉독을 몸에 침투시켜 질병을 치료하는 방법으로는, 봉침을 이용하여 시술하는 봉침 요법이 사용되기도 한다. 이러한 봉침 요법은 관절염 등의 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 봉침 요법의 사용 형태를 유형별로 살펴보면 다음과 같이 나누어 볼 수 있다.
첫 번째는, 직자법(直刺法)이라 하여 살아있는 벌의 꽁무니를 시술하고자 하는 부위에 대고 찌른 다음 약 30~60 초 가량 유침하여 봉독이 충분히 스며들게 한 후 침을 뽑아주는 방법이다. 두 번째는, 발침법(拔針法)이라 하여 핀셋으로 벌에서 침을 떼어내어 시술하고자 하는 부위에 살짝 댄 후 뽑아서 또 다른 부위에 시술하는 방법이다. 발침법은 자극이 강하지 않고 벌침 하나로 3~5 군데를 시술할 수 있어서 비교적 많이 사용되는 방법이다. 세 번째로는, 대상포진과 같은 광범위한 질환에 시술하는 방법으로 산자법(散刺法)이 있다. 산자법은 삼릉침을 사용하여 자침하는 방법과 유사하며 침을 재빠르게 찔렀다 빼는 동작을 반복하여 넓은 환부를 소량의 침으로 치료하는 봉침 요법의 특성을 살린 치료법이다. 그리고 네 번째는 봉독액을 식염수를 통해 희석시킨 상태에서 그 희석액을 주사기를 통해 직접 인체의 경혈에 주입하는 방법이다. 이 방법은 환자가 자각하는 통증도가 훨씬 적되, 경혈에 직접 봉독을 침투시키기에 효과 또한 빠르다는 장점이 있다.
그러나 상기와 같은 방법들은 정확한 기혈을 찾아 봉독을 투입시키기에 어려움이 많으며, 이상적인 치료를 위한 봉독의 분량(Doss)을 정확히 조절하기가 쉽지 않다.
이러한 문제를 해결하기 위해 창안된 시술의 형태가 한방용 침에 상기 봉독을 묻힌 상태에서 기혈을 찾아 침술과 함께 봉독을 경혈에 투입하는 방법이다. 한방용 침을 사용하는 방법은 그 침술 방법의 특성상 그 의학적인 효과는 많이 증진된 우수한 방법이지만, 그에 따른 문제점도 있다.
예를 들어, 한방용 침의 끝단에 봉독을 묻힌 상태에서 표피를 뚫고 경혈의 내부로 침투하는 과정에서, 봉독이 표피로 퍼져 정확한 경혈의 내부로 침투하지 못하면 충분한 치료 효과를 기대하기 어려울 수 있다. 구체적으로는, 한방 침 치료시 해당 혈 자리에 침을 정확히 놓기 위해서 침관을 사용하게 된다. 그러나 환자의 통증을 줄이기 위해 침이 빠른 속도로 피부를 뚫도록 시침하면 그 과정에서 코팅된 봉독액이 경혈에 도착하기도 전에 표피층으로 흡수되어 본래의 효능을 기대할 수 없게 되는 것이다.
본 발명자들은 봉독을 연구하는 과정에서 봉독의 새로운 효능을 발견하게 되었다.
본 발명의 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 멜라닌 생성을 억제하고 자외선에 의해 생성된 색소 침착을 개선하여 피부 미백 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 다른 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 각질형성세포의 분화를 유도하고 각질세포가 보유하고 있는 천연보습인자들의 생성에 중요한 원천이 되는 단백질인 필라그린(filaggrin)의 발현을 촉진하여 피부 보습 효과를 나타낼 수 있다. 한편, 봉독 그 자체를 함유하는 조성물 또한 봉독 추출물을 함유하는 조성물과 동일 또는 유사한 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 일측면에서, 봉독은 당해 기술 분야에서 통상적으로 인정되는 다양한 전처리 과정을 거칠 수 있다. 예를 들어, 전기 충격법을 통해 수득한 봉독에 증류수를 부어 봉독에서 벌 또는 이물질을 부유시키고, 부유된 벌 또는 이물질을 걸러냄으로써, 정제된 상태의 봉독을 사용할 수 있다.
본 발명의 일측면에서, 봉독 추출물은 봉독을 당해 기술 분야의 통상적인 방법으로 추출하여 얻을 수 있다. 본 발명의 다른 일측면에서, 봉독 추출물은 봉독을 물, 유기 용매 또는 물과 유기 용매의 혼합 용매에 침출하고, 정제, 분리하는 용매 추출법을 사용하여 얻을 수 있다. 상기 유기 용매는, 특별히 제한되는 것은 아니며, C1~C5의 저급 알코올, 에테르, 에틸아세테이트 또는 클로로포름일 수 있다. 상기 C1~C5의 저급 알코올은, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필알코올, n-부탄올 및 이소부탄올로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합 용매일 수 있다. 본 발명의 다른 일측면에서, 상기 물과 유기 용매의 혼합 용매 중 유기 용매의 부피는 10 내지 90%(v/v)일 수 있다. 구체적으로, 상기 봉독 추출물은 혼합 용매 전체 부피를 기준으로 10 내지 90%(v/v) 에탄올을 포함하는 혼합 용매, 구체적으로는 30 내지 80%(v/v) 에탄올을 포함하는 혼합 용매, 더 구체적으로 50 내지 75%(v/v) 에탄올을 포함하는 혼합 용매를 이용하여 추출한 추출물일 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물은 조성물 전체 중량을 기준으로 봉독 추출물을 0.0001 내지 30 중량%, 구체적으로 0.001 내지 15 중량%, 더 구체적으로 0.01 내지 5 중량%로 함유할 수 있다. 상기 범위로 함유할 경우 본 발명의 의도한 효과를 나타내기에 적절할 뿐만 아니라, 조성물의 안정성 및 안전성을 모두 만족할 수 있으며, 비용 대비 효과의 측면에서도 상기 범위로 함유하는 것이 적절할 수 있다. 보다 구체적으로, 봉독 추출물의 함량이 상기 범위보다 낮은 경우에는 봉독 성분에 의한 피부 미백 또는 피부 보습 효과 등을 충분히 얻을 수 없고, 상기 범위를 초과하는 경우에는 함량 증가에 비해 효과의 증가가 크지 않을 수 있다.
본 발명의 일측면은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 미용 조성물을 제공한다. 상기 미용 조성물은 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유함으로써, 피부 미백 및 피부 보습 효과를 나타낼 수 있다.
상기 미용 조성물은 예를 들어 화장품 조성물일 수 있으며, 화장품의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 포함한다. 이는 국소 적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 멀티에멀젼, 현탁액, 마이크로 에멀젼, 마이크로캡슐, 미세 과립구, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제, 포말(foam) 또는 압축된 추진제를 함유한 에어로졸 조성물의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
미용 조성물은 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면 활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 습윤화제, 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 더 포함할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
상기 미용 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 제형을 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 아이 에센스, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 파우더, 콘실 스틱, 바디 로션, 바디 크림, 바디 오일, 바디 에센스, 바디 세정제, 염모제, 헤어 토닉, 모발 영양 화장수, 헤어 에센스, 헤어 세럼, 스칼프 트리트먼트, 헤어 트리트먼트, 헤어 컨디셔너, 헤어 샴푸, 헤어 로션, 치약, 구강 청정제, 정발제, 양모제, 로션, 연고, 젤, 크림, 패치 및 분무제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 실시예, 비교예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예, 비교예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 그에 의해 제한되는 것은 아니다.
[실시예 1] 봉독의 수득 및 봉독 추출물의 제조
전기 충격법에 의해 봉독을 얻었다. 전기 충격법을 통해 얻은 봉독에 증류수를 부어 봉독에서 벌 또는 이물질을 부유시켰다. 부유된 벌 또는 이물질을 걸러내고 정제된 봉독을 수득하였다.
수득한 봉독을 70% 에탄올을 이용하여 추출하였다. 구체적으로 설명하면, 수득한 봉독의 3배 부피에 해당하는 70% 에탄올을 첨가하고 상온에서 5회 교반하면서 추출하여 탈지시켰다. 탈지된 봉독에 다시 4배 부피의 70% 에탄올을 첨가하고 3회 환류 추출한 후, 15℃에서 2일간 침적시켰다. 침적물에 대한 여과 및 원심 분리 과정을 거쳐 잔사와 여액을 분리하고, 분리한 여액을 감압 농축하여 엑기스를 얻었다. 얻어진 엑기스를 물에 현탁한 후, 에테르를 이용하여 색소를 제거한 다음, 수층을 부탄올로 5회 추출하여 제거하였다. 수득한 유기 용매 층을 감압 농축하여 엑기스를 얻었다. 얻어진 엑기스를 메탄올에 녹인 후, 에틸아세테이트를 추가하고 생성된 침전물을 건조시켜 봉독 추출물을 수득하여 실시예 1로 하였다.
[시험예 1] 피부 미백 효과 평가
1) 쥐의 색소 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과
봉독 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 알아보기 위하여 쥐의 색소세포를 이용하였다. 먼저, DMEM(Dulbeccos modified Eagles media)에 10% 우태반 혈청, 100nM 2-O-테트라데카노일포르볼(tetradecanoyphorbol)-13-아세테이트 및 1nM 콜레라 독소(cholera toxin)를 첨가한 배지에서, C57BL/6 마우스 유래의 쥐 색소 세포(Mel-Ab cell)를 37℃, 5% CO2의 조건 하 배양하였다. 배양한 Mel-Ab세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고, 24-웰 플레이트에 105 세포/웰(cells/well)의 농도로 세포를 배양한 다음 이틀째부터 3일 연속으로 실시예 1의 봉독 추출물 1ppm 및 10ppm을 각각 가하여 배양하였다. 이 때, 하이드로퀴논을 양성 대조군으로 사용하였다. 이후 배양액을 제거하고, PBS로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정한 다음, 아래 수학식 1에 따라 시험 물질을 처리하지 않은 음성 대조군을 기준으로 각 시험 물질의 멜라닌 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과를 아래 표 1에 나타내었다.
[수학식 1]
Figure PCTKR2011004755-appb-I000001
표 1 봉독 추출물, 하이드로퀴논의 멜라닌 생성에 대한 억제 작용
시험물질 멜라닌 생성 억제율(%)
실시예 1(1ppm) 13.5
실시예 1(10ppm) 35.2
하이드로퀴논(양성 대조군) 43.6
상기 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 봉독 추출물은 하이드로퀴논과는 유사한 정도의 멜라닌 생성 억제율을 보였다. 이를 통해 봉독 추출물이 우수한 미백 효과를 가짐을 확인할 수 있다.
2) 인간 피부에 대한 미백 효과
봉독 추출물의 인간 피부에 대한 미백 효과를 알아보기 위하여 아래와 같은 실험을 수행하였다. 먼저, 건강한 12명의 남자를 대상으로 피검자의 상박 부위에 직경 1.5㎝의 구멍이 3개 뚫린 불투명 테이프를 부착한 뒤, 각 피검자의 최소 홍반량(Minimal Erythema Dose)의 1.5~2배 정도의 자외선(UVB)을 조사하여 피부의 흑화를 유도하였다. 상기 자외선 조사 후 2곳에 시험 물질인 실시예 1의 봉독 추출물과 하이드로퀴논을 각각 바르고, 한 곳은 아무 것도 바르지 않고 10주 동안 상태 변화를 관찰하였다. 1주 단위로 피부의 색깔을 색차계 CR2002(일본, 미놀타 사)로 측정하였다. 그 다음 상기 각 시험 물질에 따른 도포 개시 시점과 도포 완료 시점에서의 피부색 차이(△L*)를 아래 수학식 2에 따라 계산하였고, 그 결과를 아래 표 2에 나타내었다. 한편, 미백 효과는 시료 도포 부위와 대조군 부위의 △L*의 비교로 판정하는데, △L* 값이 2 정도일 경우는 침착된 색소의 미백화가 뚜렷한 경우이고, 1.5 이상 정도이면 미백 효과가 있다고 판정할 수 있다.
[수학식 2]
Figure PCTKR2011004755-appb-I000002
표 2
시험물질 피부색 밝기 정도(△L*)
실시예 1 1.81 ± 0.15
하이드로퀴논(양성 대조군) 1.89 ± 0.15
용매(Vehicle)(음성 대조군) 0.51 ± 0.13
상기 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 실시예 1의 봉독 추출물은 하이드로퀴논과 유사한 정도의 피부색 밝기 정도를 보였다. 이를 통해 봉독 추출물은 자외선에 의해 생성된 색소 침착을 개선하여 피부색을 밝게 해 주는 효과를 가짐을 확인할 수 있다.
[시험예 2] 인간 각질형성세포의 분화 유도 시험
봉독 추출물의 피부 장벽 기능 및 피부 보습능을 확인하기 위하여, 흡광도를 이용한 시험을 실시하였다. 먼저 일차 배양한 인간의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 아래 표 3과 같이 조성된 배양액에 첨가하여, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이 세포를 수확(cell harvest)하여 PBS(phosphate buffered saline)로 세척한 뒤, 2% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 3분간 소니케이션(sonication)을 수행하고 난 후, 10분간 끓였다. 이를 1200 rpm으로 30분간 원심 분리 하여 분리한 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하고 단백질 함량을 측정하여, 세포 분화 정도의 평가시 기준으로 삼았다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2 mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 시험 물질을 첨가하여 실시한 시험 결과를 아래 표 3 에 나타내었다.
표 3
사용 농도 각질형성세포에서의 분화능(%)
대조군 저 Ca2+(0.03 mM) 100
고 Ca2+(1.2 mM) 206
실시예 1 0.1ppm 120
실시예 1 0.05ppm 105
상기 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 각질형성세포 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)의 양을 측정하여 세포 분화 촉진 효과를 비교한 결과 실시예 1의 봉독 추출물은 각질형성세포에서 분화를 촉진한다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 봉독 추출물은 피부 장벽 기능을 강화하고 피부 수분을 보호할 수 있음을 알 수 있다.
[시험예 3] RT-PCR 분석을 통한 필라그린(filaggrin)의 발현 측정
봉독 추출물의 피부 보습능을 시험하기 위해서 필라그린 발현 정도를 측정하였다. 실험에 사용한 세포주는 독일 암 연구센터의 Dr. Fusenig로부터 분양 받은 해캣 세포주(Human kerationocyte HaCaT cell line)로서, 상기 세포를 60㎜ 디쉬에 1 ×105 개로 분주하고 1일간 배양한 후, 시험 물질을 아래 표 4과 같이 처리한 다음 24시간 배양하였다. 상기의 방법으로 배양 및 시험한 세포로부터 트리졸(Trizol, Gibco Laboratories, USA)을 이용하여 총 RNA를 추출한 다음, 원 스텝 RNA PCR 키트(AMV)(Takara Bio Inc., Japan)에서 제공하는 방법에 준하여 RT-PCR(reverse transcriptional polymerase chain reaction) 분석을 시행하였다. 이 때, 프라이머(primer)로는 필라그린(filaggrin)에 대한 프라이머(바이오니아사, 한국)를 사용하였으며, 내부 대조군(internal control)으로는 베타-액틴(β-actin)을 이용하여 발현량을 비교하였다. 이미지 분석 후에 대조군을 100으로 하여 비교치를 아래 표 4에 나타내었다.
표 4
사용농도 필라그린 생성량(%)
무처리 대조군 - 100
실시예 1 0.1ppm 180
실시예 1 0.05ppm 112
상기 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 실시예 1의 봉독 추출물은 각질형성세포에서 필라그린의 발현을 촉진하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 봉독 추출물은 피부의 천연보습인자 생성을 촉진하고 피부 보습능을 강화하는 효과가 있음을 알 수 있다.
[실시예 2 및 비교예 1]
아래 표 5의 조성비에 따라 영양 크림 제형의 외용제인 실시예 2 및 비교예 1을 제조하였다. 아래 성분의 함량비의 단위는 중량%이다.
표 5
성분 실시예 2 비교예 1
정제수 To 100 To 100
봉독 추출물(실시예 1) 0.1 -
식물성 경화유 1.50 1.50
스테아린산 0.60 0.60
글리세롤 스테아레이트 1.00 1.00
스테아릴 알코올 2.00 2.00
폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 & 소디움 스테아로일 락틸에이트 1.00 1.00
아라키딜 베헤닐 알코올 & 아라키딜글루코사이드 1.00 1.00
세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 2.00 2.00
PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 1.50 1.50
카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드 11.00 11.00
사이클로메디콘 6.00 6.00
방부제, 향 적량 적량
트리에탄올 아민 0.1 0.1
[시험예 4] 피부 보습 개선 효과 측정
봉독 추출물의 사람에 대한 피부 보습 효과를 확인하기 위하여 상기 실시예 2와 비교예 1에 대하여 아래와 같은 실험을 실시하였다. 30대의 건강한 여성 40명을 20명씩 2조로 나누고, 각각 실시예 2와 비교예 1의 영양 크림을 온도 24-26℃, 습도 75%의 조건에서 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 한 후, 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대 습도 40%)에서 코니오미터로 피부 수분량을 측정하였다. 시험 개시 직전에 측정한 코니오미터 값을 기준으로 하여 각 측정 시의 측정값 증가분을 백분율로 표시한 후 그 결과를 아래 표 6에 나타내었다.
표 6
임상 결과 수분 증가율 (%)
1주 경과 2주 경과 4주 경과 6주 경과
비교예 1 30 33 34 15
실시예 2 33 41 42 32
상기 결과에서 볼 수 있는 바와 같이, 봉독 추출물을 함유한 실시예 2는 비교예 1를 도포한 군에 비하여 피부 수분 보유량이 더 증가되었음을 알 수 있다. 또한, 시험 물질의 도포를 중지한 2주 후인 6주 경과 후의 수치가 시험 물질 도포 중이었던 1주 내지 2주 경과 후의 수치와 유사하게 나타나, 시험 물질을 도포하지 않아도 실시예 2의 도포에 의한 피부의 수분 보유량이 일정 기간 동안 지속적으로 유지됨을 확인할 수 있었다. 따라서 봉독 추출물을 사람에 적용하는 경우 피부 보습 능력을 강화시킴을 알 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 로션형 제제(단위: 중량%)
아래 표에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 로션형 제제를 제조한다.
표 7
성분 중량(%)
실시예 1의 봉독 추출물 3.00
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1.00
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 1.00
시트르산나트륨 0.10
시트르산 0.05
감초 엑기스 0.20
1,3-부틸렌글리콜 3.00
정제수 잔량
[제형예 2] 크림형 제제
아래 표에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 크림형 제제를 제조한다.
표 8
성분 중량(%)
실시예 1의 봉독 추출물 1.00
폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트 2.00
모노스테아르산글리세린 5.00
세틸알코올 4.00
스쿠알렌 6.00
트리2-에틸헥산글리세릴 6.00
스핑고당지질 1.00
1,3-부틸렌글리콜 7.00
정제수 잔량
[제형예 3] 팩형 제제
아래 표에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 팩형 제제를 제조한다.
표 9
성분 중량(%)
실시예 1의 봉독 추출물 5.00
폴리비닐알코올 13.00
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1.00
라우로일히드록시프롤린 1.00
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 2.00
1,3-부틸렌글리콜 3.00
에탄올 5.00
정제수 잔량
[제형예 4] 미용액형 제제
아래 표에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 미용액형 제제를 제조한다.
표 10
성분 중량(%)
실시예 1의 봉독 추출물 2.00
히드록시에틸렌셀룰로오스 (2% 수용액) 12.00
크산탄검 (2% 수용액) 2.00
1,3-부틸렌글리콜 6.00
진한 글리세린 4.00
히알루론산나트륨 (1% 수용액) 5.00
정제수 잔량

Claims (6)

  1. 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물.
  2. 봉독 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 보습용 조성물.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    봉독 추출물은 봉독을 물, 유기 용매 또는 물과 유기 용매의 혼합 용매로 추출한 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제 3 항에 있어서,
    유기 용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필알코올, n-부탄올, 이소부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    조성물은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.0001 내지 30 중량%의 봉독 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    조성물은 화장품 조성물인 조성물.
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