WO2011108778A1

WO2011108778A1 - 치매치료 및 억제용 복합생약제제 조성물

Info

Publication number: WO2011108778A1
Application number: PCT/KR2010/002413
Authority: WO
Inventors: 이상룡; 임종순; 정인철; 김승형
Original assignee: 대전대학교 산학협력단
Priority date: 2010-03-03
Filing date: 2010-04-19
Publication date: 2011-09-09
Also published as: KR100999227B1

Abstract

본 발명은 석창포, 원지, 백복신, 산사육 및 파극천의 복합생약제제의 종래비율인 석창포 2 : 원지 2 : 백복신 2 : 산사육 2 : 파극천 2에서 석창포 4 : 원지 4 또는 2 : 백복신 2 또는 4 : 산사육 2 : 파극천 2로 할 때 종래비율의 조성물보다 β-amyloid 단백질 생산억제율이 85.5% 이상 증가되는 복합생약제제 조성물부터 추출하여 수득하는 생약 조성물을 함유하는 약제에 관한 것이다. 본 발명에 의하여, 사용자의 거부감이 없고 다른 부작용이 없는 우수한 천연 복합생약 유래의 기억력감퇴억제 및 치매치료용 복합생약제제를 제공하는 것이 가능하게 된다.

Description

치매치료 및 억제용 복합생약제제 조성물

본 발명은 석창포 4.0 중량부, 원지 2.0 또는 4.0 중량부, 백복신 4.0 또는 2.0 중량부, 산사육 2.0 중량부 및 파극천 2.0 중량부의 혼합물로부터 추출하여 수득하는 복합생약제제 조성물 및 그 조성물을 함유하는 약제에 관한 것이다.

최근 노령인구의 급격한 증가와 사회의 고도화에 따라 노인성 질환에 대한 사회적 비용부담이 크게 증가하고 있으며, 이 분야의 신약 개발은 삶의 질 향상 차원에서 반드시 필요한 분야로 평가되고 있다. 특히, 평균수명의 연장으로 노령인구가 증가하고 그 중 상당수인 약 8% 이상이 치매환자로 추정되어 치매 치료제에 대한 잠재적 시장은 점차 커지고 있는 추세이다. 또한, 치매는 아직 뚜렷한 치료제가 개발되어 있지 않아 새로운 치료제가 개발되면 시장이 급격히 팽창할 것으로 추정되어 산업적으로 집중적인 연구가 필요한 분야이다.

그러나 아직까지 독창적인 치매 치료제를 개발할 수 있는 기반이 형성되지 않았으며, 특히 치매의 발병 메카니즘에 대한 연구, 치매관련 유전자 및 단백질의 역할 규명에 대한 연구 등은 낙후되어 있는 분야이다. 따라서 국가 차원에서 치매관련 유전자 및 단백질에 대한 생물정보 시스템을 구축하여, 새로운 표적물질 발굴과 발병기작을 밝혀낸다면 독창적인 신규 치매 치료제 개발이 가능할 것이다.

알츠하이머형 치매(노인성 치매)는 중추신경계에 이상이 생겨, 초기증상으로 기억력 감퇴와 언어장애를 일으키고 병이 진행됨에 따라 주위의 도움 없이는 아무것도 할 수 없게 돼 결국 죽음에 이르게 되는 병이다. 지금까지 개발된 노인성 치매 치료제는 크게 나누어 AChE(acetyl cholin esterase) 억제제, choline 생성 전구체 물질, 수용체 억제제 및 산화 방지제 등인데, 그 중 유일하게 FDA 공인을 얻어 상품화된 치매치료제는 AChE 억제제인 tacrine이라는 acridine계열의 화합물을 주성분으로 하는 Cognex와 donepezil로 이루어진 Aricept 등이 알려져 있으나, 아직 어떤 약물도 완전한 치료 효과를 내지 못하고 있는 실정이다. AChE 억제제의 경우 억제상수(Ki)가 nM 범위까지 밖에 내려가지 않고 blood brain barrier를 통과하기 어려운 물질들이 많으며 독성문제도 있는 실정이다. 한편, 최근 많은 연구가 이루어지고 있는 β-amyloid 축적의 경우, α와 γ secretase inhibitor와 metalloendopeptidase 억제제가 중요하지만 이런 기전을 이용하여 임상적으로 활용하고 약물은 현재까지 없다.

한편, 총명탕(聰明湯)은 원지, 석창포, 백복신으로 이루어진 방제로 동의보감에 "치다망, 구복능일송천언"이라 기술된 이래 심허 및 담탁으로 인한 건망 및 치매 등의 병증에 활용되고 있으며(대한한방신경정신과학회편 한방신경정신의학, 서울집문당, 2005:311-6,432-5,451.), 김 등(김영욱.총명탕이 건망유도백서의 학급과 기억에 미치는 영향, 대전대학교 대학원 1999.)의 연구에서 건망유도백서의 학습과 기억에 유의한 효과가 있음이 보고되었다. 하 등(하수영 외 2, 총명탕과 산사총명탕이 Alzheimer's Disease 병태 모델에 미치는 영향,동의 신경정과학회지. 2006;17(1):59-78)의 연구에서 총명탕은 THP-1 cell에서의 IL-1β, IL-6, TNF-α의 발현을 억제하였고 PC-12 세포주의 APP, AChE 유전자 발현을 억제하였으며 PC-12 세포주 세포성 단백질에서 AChE의 활성도와 APP 발현을 억제하였다. 또한 임 등(임정화 외 2, 총명탕과 파극천총명탕 열수추출물, 초미세분말제형이 microglia 및 기억력 감퇴 병태모델에 미치는 영향, 동의생리병리학회지. 2006. 20(4):997-1008)의 연구에서 총명탕은 BV2 microglial cell line과 배양상층액에서 IL-1β, IL-6, TNF-α, NOS-Ⅱ, COX-2 유전자 발현을 억제하고, NO, ROS의 생산량을 감소시켰고 IL-10, TGF-β1의 mRNA의 발현을 증가시켰으며 Morris water maze 실험에서 유의성 있는 기억력 개선 효과를 나타냈다. 따라서 β-amyloid의 과다 생성, microglial cell의 proinflammatory cytokynes의 과잉 발현 등으로 인해 야기될 수 있는 알츠하이머형 치매와, choline성 신경세포의 퇴화에 의해 야기되는 기억력 감퇴에 대한 치료제로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

하 등(하수영 외 2, 총명탕과 산사총명탕이 Alzheimer's Disease 병태 모델에 미치는 영향 동의 신경정과학회지. 2006;17(1):59-78)은 산사총명탕(山

聰明湯)이 THP-1 cell에서 IL-1β, IL-6, TNF-a의 발현을 모두 억제하였고, PC-12 세포주의 APP, AChE 유전자 발현을 억제하였으며 PC-12 세포주 세포성 단백질에서 AChE의 활성도와 APP 발현을 억제하여, β-amyloid의 과다 생성, microglial cell의 proinflammatory cytokynes의 과잉 발현 등으로 인해 야기될 수 있는 알츠하이머형 치매와, choline성 신경세포의 퇴화에 의해 야기되는 기억력 감퇴에 대한 예방과 치료제로 활용될 수 있을 것으로 보고한 바 있다.

총명탕이 알츠하이머형 치매의 치료와 예방에 응용될 수 있다는 가능성을 제시한 연구와 파극천이 치매병태모델에 미치는 영향에 대한 연구로 미루어 볼 때 총명탕에 파극천을 가해 만든 파극천총명탕(巴戟天聰明湯) 역시 치매의 치료 및 예방에 효과가 있을 것으로 생각된다. 임 등(임정화 외 2, 총명탕과 파극천총명탕 열수추출물, 초미세분말제형이 microglia 및 기억력 감퇴 병태모델에 미치는 영향, 동의생리병리학회지. 2006. 20(4):997-1008)의 연구에서 파극천총명탕은 BV2 microglial cell line에서 IL-1β, IL-6, TNF-a, NOS-Ⅱ, COX-2의 mRNA 발현을 억제하고, IL-10, TGF-β1의 mRNA의 발현을 증가시켰으며, BV2 microglial cell line의 배양상층액에서 IL-1β, IL-6, TNF-a, NO, ROS의 생산량을 감소시켰다. 또한 scopolamine으로 유도된 기억력 감퇴 생쥐의 혈청 내 glucose를 유의성 있게 감소시켰고 AChE 활성을 유의성 있게 억제시켰으며, Morris water maze 실험에서 유의성 있는 기억력 개선 효과를 보여 파극천총명탕은 알츠하이머형 치매의 예방과 치료에 활용될 수 있을 것으로 판단된다.

본 발명은『東醫

鑑·

景篇』에 "治多忘久服能日誦千言"이라 기술되어 있는 총명탕(원지 2g, 석창포 2g, 백복신 2g)에서 원지와 석창포의 배합비를 달리하고, 파극천 2g, 산사육 2g을 가미한 처방으로서, 임상에서 건망 및 치매 치료에 다양하게 활용할 수 있는 것이다. 또한 파극천과 산사육의 치매에 대한 실험적 연구를 통해 두 약물의 효능을 확인하였고 이후 총명탕과 파극천 혹은 산사를 가미한 파극천총명탕, 산사총명탕에 대한 추가적 연구에서 모두 기억력 감퇴 억제 효과, 항염증효과, 뇌세포 보호효과, 행동개선효과를 확인한 바 있다.

현재 국내에서 판매되고 있는 치매치료제는 질병의 진행을 지연시키거나 증상을 완화시키는 수준에 머물러 있어 근본적인 치료를 위한 약물개발의 필요성이 끈임 없이 요구되어 왔는데, 이에 본 발명자들은 종래의 복합생약제제 조성물로서 모두 동량(同

)인 석창포, 원지, 백복신, 파극천, 산사육의 조성비를 다양하게 조합하여 종래의 동량 복합생약제제 조성비보다 β-amyloid 생산 억제, 뇌신경세포 보호작용 및 항염증작용 등의 복합적인 약리작용에 가장 우수한 복합생약제제의 조합과 그들의 조성비를 찾아내게 되어 발명을 완성하게 되었다.

본 발명은 종래의 복합생약제제 조성물보다도 효과가 우수한 복합생약제제로 최적 조합과 최적 조성비를 제시하여 우수한 치매억제 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 석창포 4.0 중량부, 원지 2.0 중량부, 백복신 4.0 중량부, 산사육 2.0 중량부 및 파극천 2.0 중량부의 혼합물로부터 추출하여 수득하는 복합생약제제 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 석창포 4.0 중량부, 원지 4.0 중량부, 백복신 2.0 중량부, 산사육 2.0 중량부 및 파극천 2.0 중량부의 혼합물로부터 추출하여 수득하는 복합생약제제 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 위 복합생약제제 조성물로부터 제조된 약제를 제공한다.

본 발명에 의한 복합생약제제 조성물은 세포에서 알츠하이머 예방 및 치매치료에 관련된 유전자의 발현을 억제시키며, 복합생약제제 조성물 중 종래비율의 조성물보다 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물의 경우가 더욱 우수한 효과를 나타낸다.

즉, 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물을 치매억제용 약제로 활용하는 경우, 생약의 제제성분이 적용된 것이므로 사용자의 거부감을 없앨 수 있으며, 치매억제에 따른 다른 신체부위 및 장기에 부정적인 영향이 없는 우수한 제품이 가능하게 된다.

도 1 은 본 발명에 의한 다양한 복합생약 조성물의 조합과 이 조성물 조합 중에서 세포의 β-amyloid 생성 활성에 대한 최고의 억제율(%)을 보여주는 도표.

이하 본 발명을 실시예 및 적용예에 의해 보다 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명하고자하는 예시적인 것일 뿐 이에 의해 본 발명의 기술적 사상의 본질이 변하거나 범위가 축소되는 것은 아니다. 하기 실시예에서 제시되지 않은 여러 가지 실시예 및 적용예 들이 가능함은 당업자에게 있어 당연할 것이다.

이하 본 발명의 구성성분인 약제를 설명하고자 한다.

1) 석창포

석창포는 천남성목 천남성과의 여러해살이풀인 석창포나무의 뿌리줄기로 베타아사론(β-asarone), 아사론(asarone), 카리오필렌(caryophyllene), 휴물렌(a-humulene), 세키손(sekishone), 아미노산, 유기산 및 당류가 함유되어 있으며, 활담개규, 성신익지, 화습화위하는 효능이 있고 주치증으로는 개선, 건망, 금구하리, 담미심규, 랭비, 신지혼란, 실청, 완비불기, 음한습양, 이명, 전간, 치태, 풍한습비, 피부습창 등이 있다.

*2) 원지

원지는 쌍떡잎식물 쥐손이풀목 원지과의 여러해살이풀인 원지의 뿌리를 말린 것으로 사포닌 성분인 테누게닌(tenuigenin) A, B, 폴리가리톨(polygalytol), 테누이딘(tenuidine) 등이 함유되어 있으며, 원지의 효능은 안신개규, 녕심안신, 진심, 양심, 거담리규, 화담지해, 소산옹종, 소종해독, 교통심신, 강지익정, 익지, 총이명목 등이며, 주치는 심신불안, 실면다몽. 미혹건망, 경계불매, 신지황홀, 해담불상, 창양종독, 유방종통 등으로 역대 본초서에 기재되어 있다.

3) 백복신

백복신은 다공균과에 속한 진균인 복령의 방괴상으로 소나무 뿌리를 싸고 있으며, 질은 단단하고 백색이며 성은 평, 미는 감담하고, 심·비경으로 귀경하며, 영심안신, 녕신정지, 개심익지, 양신, 리수의 효능으로 심허경계, 건망, 실면, 경간, 소변불리 등을 치료한다.

4) 산사육

산사육은 산사, 산사자 등으로도 불리며, 장미과에 속한 낙엽교목인 산리홍, 산사, 또는 야산사의 성숙한 과실로서, 구형 또는 배형으로 직경은 2.5cm 정도이고 표면은 심홍색으로 광택이 있으며 회백색의 작은 반점이 많다.

산사육의 성미는 미온 무독, 산감하고 비, 위, 간경에 귀한다. 또한 건비행기, 화담화어, 소식적의 효능이 있어 육적, 비만, 탄산, 사리 등의 질환에 사용되는데, 그 효능으로 미루어보아 기체혈어, 담음정체 등의 원인으로 야기되는 치매에도 응용할 수 있을 것으로 판단된다.

5) 파극천

파극천은 보익약으로 천초과에 속한 다년생 등본식물인 파극천의 뿌리를 건조한 것으로, 겨울과 봄에 채취하여 발근을 제거하고 세정하여 건조한다.

파극천의 성미는 감·신 미온 무독하며 보신양의 효능이 있어 비신휴허형 치매에 응용할 수 있을 것으로 판단되고, 현대에는 파극천을 보익약 중에서도 보양약으로 분류하고 있으며, 보신양, 장근골, 거풍습하는 효능이 있어 양위유정, 궁랭불잉, 소복냉통, 소변불금, 풍습비통, 요슬산통 등을 치료한다고 하여 신양의 부족에 의한 증상에 활용되고 있다.

이하에서 본 발명의 제제예와 실험자료를 상세히 기술한다.

<제제예 1> 복합생약제제 조성물의 제조

본 발명에 의한 상기 복합생약제제 조성물은, 통상의 방법에 따라 열수추출의 방법으로 각 성분의 혼합물을 추출한 다음, 여과한 후 동결 건조하여 분말상으로 사용할 수 있다. 예를 들면, 다음과 같은 방법으로 제조될 수 있는데, 먼저, 선별되고 적절한 크기로 다듬어진 건조된 석창포 4.0g, 원지 2.0g, 백복신 4.0g, 산사육 2.0g 및 파극천 2.0g을 혼합한다. 혼합물에 1.3ℓ의 순수를 가하고 100℃에서 3시간 열수추출을 행한 다음 영하 40℃에서 15시간 급속 동결하고, 0.23토르 이하의 압력에서 35시간 이상 진공 건조한 다음 분쇄하여 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물 분말을 1.99g을 수득하였다.

<제제예 2> 복합생약제제 조성물의 제조

제제예 1과 비교하여 원지 2.0g 대신에 4.0g, 백복신 4.0g 대신에 2.0g을 각각 달리하여 배합하는 외에는 제제예 1과 동일한 조건으로 하여 복합생약제제 조성물 분말을 1.82g을 수득하였다.

<비교 제제예 1 내지 9>

본 발명과 비교를 위한 제제예는 약제별 혼합량을 여러 가지로 [표 1]과 같이달리하여 제제예와 동일한 방법으로 제조하였는데, 특히 비교 제제예 1은 석창포, 원지, 백복신, 산사육 및 파극천이 모두 2g으로 된 종래비율에 의한 제제이다.

표 1

비교 제제예별 배합비 및 건조추출물 (g)

	예 1	예 2	예 3	예 4	예 5	예 6	예 7	예 8	예 9
석창포	2.0	2.0	4.0	2.0	2.0	2.0	2.0	4.0	2.0
원지	2.0	4.0	2.0	2.0	2.0	2.0	4.0	4.0	2.0
백복신	2.0	2.0	2.0	4.0	2.0	2.0	4.0	4.0	2.0
산사육	2.0	2.0	2.0	2.0	4.0	2.0	2.0	2.0	4.0
파극천	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	4.0	2.0	2.0	4.0
합 계	10.0	12.0	12.0	12.0	12.0	12.0	14.0	16.0	14.0
건조추출물	2.26	2.06	2.04	1.99	2.47	2.58	2.05	2.03	3.32

<시험예 1> in vitro 실험을 통한 복합생약제제 조성물의 Amyloid precusor protein mRNA 유전자 발현 억제 효과 분석.

사전에 통상의 방법으로 실험에서 사용된 BV-2 세포주는 primary microglial cell에 v-raf/v-myc oncogene을 감염시켜 만들어진 세포주로서, 이 세포주를 약 2×10⁶cell/㎖의 농도가 되도록 배양한 다음, 상기 세포배양액 1㎖ 당 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물을 100㎍를 가하고 1시간 후 LPS (10㎍/ml)와 25μM synthetic βAP fragment, residues 25-35 (BAP; Bachem California, Torrance, CA)를 가한다. 24시간 후 DMEM 배양액으로 세척한 후 새로운 배양액과 복합생약제제 조성물 (100㎍/ml)을 가하고 40 시간 동안 CO₂ 조직배양기에서 배양한 후, 세포로부터 mRNA를 추출하여 역전사 중합효소연쇄반응(reverse transcription-polymerase chain reaction) 을 이용하여 APP mRNA의 유전자 발현도를 조사하였다(표 2).

표 2

원 발명과 비교제제예에 따른 APP mRNA 유전자 발현억제율(%)

본원 1	본원 2	예 1	예 2	예 3	예 4	예 5	예 6	예 7	예 8	예 9
54.1	42.7	21.8	41.8	6.4	12.0	24.7	14.4	28.6	24.7	40.9

* BV-2 세포주에 LPS와 βAP만으로 자극한 실험대조군 (Ratio APP mRNA/ GAPDH)에 대한 복합생약제제 조성물(100㎍/ml) 처리군의 상대억제율(%)

[표 2]는 조성물의 비율을 각각 달리한 복합생약제제 조성물을 BV-2 세포주에 가하고 LPS와 βAP로 자극하여 APP mRNA 유전자 발현을 분석한 결과로서, 위 표에서 볼 수 있듯이, 복합생약제제 조성물 중 종래비율의(예 1) 조성물보다 본 발명 복합생약제제 조성물의 APP mRNA 유전자 발현이 거의 2배 이상 우수한 APP mRNA 발현 억제 효과를 나타내었다.

따라서 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물이 종래비율의 조성물(예 1)에 비해 우수한 APP mRNA 유전자 발현억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

<시험 2> in vitro 실험을 통한 복합생약제제 조성물의 β-Amyloid protein 생성량 억제 효과 분석.

사전에 통상의 방법으로 실험에서 사용된 BV-2 세포주는 primary microglial cell에 v-raf/v-myc oncogene을 감염시켜 만들어진 세포주로, 이 세포주를 약 2×10⁶cell/㎖의 농도가 되도록 배양한 다음, 상기 세포배양액 1㎖ 당 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물 100㎍를 가하고 1시간 후 LPS (10 ㎍/ml)와 25μM synthetic βAP fragment, residues 25-35 (βAP; Bachem California, Torrance, CA)를 가한다. 24시간 후 DMEM 배양액으로 세척한 후 새로운 배양액과 복합생약제제 조성물 (100 ㎍/ml)을 가하고 40 시간 동안 CO₂ 조직배양기에서 배양한다. 배양 종료 후 전체 배양액을 2000 rpm에서 5분간 원심 분리하여 상등액을 회수하여 β-amyloid protein 생성량을 ELISA (Code No. 27720, Mouse/Rat Amyloidβ(1-40) High Specific Assay Kit-IBL, USA)로 측정하였다.

표 3

β-myloid 단백질 생산억제율(%)

본원 1	본원 2	예 1	예 2	예 3	예 4	예 5	예 6	예 7	예 8	예 9
80.1	77.9	42.0	41.7	40.2	46.7	56.4	60.5	47.3	46.9	60.4

* BV-2 세포주에 LPS와 βAP 만으로 자극한 실험대조군에 대한 생약조성물 건조추출물 (100㎍/ml)을 처리군의 상대억제율(%)

[표 3]은 조성물의 비율을 각각 달리한 복합생약제제 조성물을 BV-2 세포주에 가하고 LPS와 βAP로 자극하여 배양 상층액에서 β-amyloid 단백질 생산량 분석한 결과로서, 복합생약제제 조성물 중 종래비율의 조성물(예 1)보다 본 발명 복합생약제제 조성물의 β-amyloid 단백질 생산량이 85.5% 이상 우수한 β-amyloid 단백질 생산량 억제 효과를 나타내었다.

따라서 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물은 종래비율의 조성물에 비해 우수한 β-amyloid 단백질 생산량 억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

<시험예 3> in vitro 실험을 통한 복합생약제제 조성물의 β-Amyloid precursor protein 활성도 억제 효과 분석.

사전에 통상의 방법으로 실험에서 사용된 BV-2 세포주는 primary microglial cell에 v-raf/v-myc oncogene을 감염시켜 만들어진 세포주로, 이 세포주를 약 2×10⁶cell/㎖의 농도가 되도록 배양한 다음, 상기 세포배양액 1㎖ 당 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물을 100㎍를 가하고 1시간 후 LPS (10㎍/ml)와 25μM synthetic βAP fragment, residues 25-35 (BAP ; Bachem California, Torrance, CA), 그리고 양성대조군으로 calpain protease inhibitor MDL 28170(35μM, MDL 28170)를 가한다. 24시간 후 DMEM 배양액으로 세척한 후 새로운 배양액과 복합생약제제 조성물 (100㎍/㎖)을 가하고 40시간 동안 CO₂ 조직배양기에서 배양한 후, 세포성 lysate를 얻어 β-APP activity를 측정하였고, 세포성 lysate를 얻기 위하여 50㎕의 lysis 완충용액{Tris-HCl (200mM; pH 8.0), 150mM NaCl, 0.5%(v/v) Nonidet P-40, 0.1mM EGTA, 1mM PMSF, 0.1mM DTT, 10㎍/㎖ leupetin}을 혼합한 후 얼음에서 30분간 배양하고 5분간 원심분리하여 세포성 lysate를 얻어 Bradford 염색법(Bradford, M. "A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding" Anal. Biochem. 1976; 72:248-254)으로 단백질을 정량하여 50㎍으로 조정하였다. 세포 lysate (50㎍)를 12% SDS-PAGE gel에 걸고 PDVF membrane에 전이시켰다. 2% BSA로 2시간 blocking한 후 anti-mouse β-APP N-terminal antibody를 처리하여 4에서 overnight시켰다. 그리고 anti-mouse Ig HRP-conjugated sceondary Ab(1:4000, Amersham, Arlington Heights, IL)과 반응시킨 후 ECL-Hybond film으로 immunoblotting을 하여 분석하였다.

도 1에서 위는 BV-2 세포주에서 β-APP를 immunoblotting으로 분석한 것으로 대조군 (control)은 LPS (10㎍/ml)와 25μM synthetic βAP fragment, residues 25-35로 자극한 것으로 anti-β-APP가 현저한 발현량 증가를 보여주고 있고, 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물 중 종래비율의 조성물(No.1)보다 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물(No. 8, 9)의 anti-β-APP 발현량이 현저하게 억제된 것을 알 수 있었다. 또한, 도 1에서 볼 수 있듯이, β-APP 발현량을 western blot으로 분석한 결과, 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물 중 종래비율의 조성물(No.1)보다 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물(No. 8, 9)의 β-APP 발현량이 더 현저하게 억제 효과를 나타내었다.

*따라서 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물이 종래비율의 조성물에 비해 우수한 β-APP 발현 억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었고, 이에 따라 본 발명에 의한 복합생약제제 조성물은 치매치료·억제에도 유용하게 적용될 수 있음을 확인할 수 있었다.

Claims

석창포 4.0 중량부, 원지 2.0 중량부, 백복신 4.0 중량부, 산사육 2.0 중량부 및 파극천 2.0 중량부의 혼합물로부터 추출하여 수득하는 복합생약제제 조성물.
제 1항에 의한 복합생약제제 조성물로부터 제조된 치매치료 및 억제용 약제.
석창포 4.0 중량부, 원지 4.0 중량부, 백복신 2.0 중량부, 산사육 2.0 중량부 및 파극천 2.0 중량부의 혼합물로부터 추출하여 수득하는 복합생약제제 조성물.
제 3항에 의한 복합생약제제 조성물로부터 제조된 치매치료 및 억제용 약제.