WO2011051633A2 - Utilisation d'un extrait de punica granatum pour lutter contre la canitie - Google Patents

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Definitions

  • the present invention relates to cosmetic treatment methods for preventing or reducing whitening of integuments, and the use of plant extracts as an agent for promoting pigmentation of integuments and / or for limiting and / or preventing depigmentation.
  • plant extracts as an agent for promoting pigmentation of integuments and / or for limiting and / or preventing depigmentation.
  • it relates to pomegranate extracts, or compositions containing them, for combating canities.
  • the color of human hair and skin is a function of various factors including seasons of the year, race, sex and age. It is mainly determined by the concentration of melanin produced by melanocytes. Melanocytes are specialized cells that, via particular organelles, melanosomes, synthesize melanin. The synthesis of melanin or melanogenesis is complex and involves schematically the following main steps:
  • Tyrosinase (monophenol dihydroxyl phenylalanine: oxygen oxidoreductase EC 1 .14.18.1) is involved in this series of reactions by catalyzing, in particular, the conversion reaction of tyrosine to Dopa (dihydroxyphenylalanine). and the transformation reaction of Dopa into Dopaquinone.
  • the upper part of the hair follicle presents itself as a tubular invagination of the epidermis which penetrates to the deep layers of the dermis.
  • the lower part, or hairy bulb, itself contains an intussusception in which is the dermal papilla.
  • the dermal papilla there is an area populated by cells with a high rate of proliferation (matrix cells) in the lower part of the bulb. These cells are the precursors of the keratinized cells that will constitute the hair. The cells that result from the proliferation of these precursors migrate vertically into the bulb and keratinize gradually in the upper part of the bulb, this set of keratinized cells will form the hair shaft.
  • the color of hair and hair is partly based on the presence in varying amounts and ratios of two groups of melanins: eumelanins (brown and black pigments) and pheomelanines (red and yellow pigments).
  • the pigmentation of the hair and hair requires the presence of melanocytes in the bulb of the hair follicle. These melanocytes are active, ie they synthesize melanins. This melanin is transmitted to the keratinocytes intended to form the hair shaft which will result in the growth of a hair, or a hair, pigmented. This structure is called "follicular unit of pigmentation".
  • melanogenesis involves at least three enzymes: tyrosinase, DOPAchrome tautomerase (TRP-2) and DHICAoxidase (TRP-1).
  • Tyrosinase is the enzyme that initiates the biosynthesis of melanins. It is also described as the enzyme limiting melanogenesis.
  • Tyrosinase catalyzes the oxidation of tyrosine to Dopa and Dopaquinone. The Dopaquinone compound is spontaneously converted to Dopachrome, or cysteinyldopa derivatives in the presence of cysteine.
  • TRP-2 catalyzes the tautomerization of Dopachrome to 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid (DHICA).
  • DHICA 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid
  • DHI 5,6-dihydroxyindole
  • TRP-1 oxidizes DHICA compounds to form quinone derivatives.
  • the three tyrosinase enzymes, TRP-2 and TRP-1 appear specifically involved in eumelanogenesis. In addition, the activity of these three enzymes has been described as necessary for the maximal activity of biosynthesis of eumelanines.
  • This cycle comprises a growth phase (anagen phase), a degeneration phase (catagen phase) and a rest phase (telogen phase) following which a new anagen phase will develop.
  • the follicular unit of pigmentation must also be cyclically renewed.
  • part of the inactive melanocytes contained in the telogen capsule proliferates is positioned around the dermal papilla of the incipient bulb, and begins to express the enzymes necessary for the synthesis of melanins such as tyrosinase and TRP-1, but not the TRP-2 enzyme ⁇ Pigment Cell Res 2004 Oct; 17: 488-497).
  • the other part of quiescent melanocytes remains inactive in the upper region of the hair follicle.
  • the tyrosinase and TRP-1 enzymes will be expressed in the hair bulb melanocytes throughout the anagen phase but will no longer be expressed in the melanocytes during the catagenic phase and the telogen phase.
  • the normal cycle of melanocytes in the human hair follicle requires the presence of precursor melanocytes in the upper region of the hair follicle which will be cyclically activated to regenerate the follicular unit of pigmentation. It is known that in most populations the brown coloration of the skin and the maintenance of a constant color of the hair are important aspirations.
  • compositions containing a phosphodiesterase inhibitor (WO9517161), DNA fragments (WO9501773), diacylglycerol (WO9404122), prostaglandins (WO951 1003) or pyrimidine 3-oxide derivatives (EP829260).
  • WO 04/073594 proposes the use of inhibitors of the enzyme 15-PGDH.
  • EP1870081 describes the use of ellagic acid or its derivatives for the treatment of canities.
  • Pomegranate is a small fruit tree with deciduous foliage, native to Asia, particularly from the Middle East belonging to the family Punicaceae. It can reach about 5 m, but often it does not reach more than 1, 50 m.
  • the flowers are red or orange or scarlet, single or double, depending on the variety.
  • the fruits are edible and consumed since ancient times. Synonyms are Punica spinosa, Punica florida or Granatum puniceum. Its fruit is pomegranate, red-orange in color, with a hard and leathery pericarp (or bark) containing in 6 to 12 membranous compartments numerous triangular seeds with a translucent and juicy appearance. Pomegranate is rich in vitamins (B, C and D) and polyphenols in the form of tannins. Bark extracts have been proposed for their astringent, antibacterial and anti-haemorrhagic properties. Extracts rich in tannins, are used traditionally in theixie pharmacopoeia to blacken the hair, in topical application.
  • Patent EP138419 describes the topical application of pomegranate extract to prolong the color intensity of colored hair.
  • WO 2007/004229 discloses the use of oily fractions of pomegranate seeds to promote regeneration of the skin.
  • FR 2730408 relates to compositions for depigmenting the skin by topical application, which may comprise extracts of various fruits, including that of Punica granatum.
  • EP1523895 relates to compositions for the oral route containing a combination of an extract of Punica granatum, a fatty acid, in particular conjugated linoleic acid (CLA) and OPC.
  • CLA conjugated linoleic acid
  • OPC conjugated linoleic acid
  • US6630163 describes compositions for the treatment of dermatological disorders containing fruit extracts, and in particular extracts of pomegranate.
  • Punica granatum or its extracts orally, to prevent, limit or stop the progression of canities, and / or promote the natural re-pigmentation of dander, in particular hair and / or hair.
  • the invention therefore particularly relates to the use of at least one plant of the species Punica granatum or of one of its extracts or a composition containing at least one such plant or one of its extracts in a physiologically acceptable medium, as an agent for promoting and / or inducing and / or stimulating the pigmentation of integuments, and / or as an agent for preventing and / or limiting depigmentation and / or whitening of integuments, especially as an agent for preventing and / or or limit canities; this agent is more particularly used in mammals, in particular in humans.
  • the invention relates to the cosmetic use of at least one plant of the species Punica granatum or of one of its extracts in a composition adapted to the oral route for promoting and / or inducing and / or stimulating the pigmentation of integuments, and / or for preventing and / or limiting depigmentation and / or whitening of integuments and / or for preventing and / or limiting canities .
  • the invention also relates to the use of at least one plant of the species Punica granatum or at least one of its extracts for the preparation of a composition intended to promote and / or induce and / or stimulate the pigmentation of integuments, and / or intended to prevent and / or limit the depigmentation and / or whitening of integuments and / or intended to prevent and / or limit canities.
  • compositions which are useful according to the invention may contain a physiologically acceptable medium or excipients.
  • skin By skin is meant the entire skin, including the scalp and mucous membranes.
  • dander we mean all the integumentary appendages and in particular the nails, the hair and the hair.
  • hair and hair is meant all the hairy appendages and in particular also the eyelashes and the eyebrows.
  • At least one means one or two or more, including mixtures in all proportions of the various elements mentioned.
  • the term “a” in this application shall be understood to mean at least one.
  • the extract of Punica granatum useful according to the invention may be chosen from flower extracts, fruit extracts, seed extracts and bark extracts of Punica granatum, and mixtures thereof in all proportions.
  • a fruit extract - or pomegranate extract - this extract can come from all parts of the pomegranate or more specifically from the bark and / or seeds.
  • a total extract that is to say an extract comprising all parts of the pomegranate, from which the woody parts have been removed, can be used.
  • use will be made of at least one extract enriched in certain fractions, in particular an extract titrated with polyphenols.
  • the pomegranate extract can be obtained from any part of the pomegranate and in particular from the fruit including or not the seed, or especially from the bark of the fruit.
  • extract is meant both a crude mixture of parts of the plant roughly reduced in pieces and the extraction solvent that fractions or more preparations or less elaborate active principles solubilized during extraction.
  • a total extract can be used, that is to say an extract comprising all the fractions present in the parts of Punica granatum, possibly devoid of the cellulosic parts.
  • use will be made of at least one extract enriched in certain fractions.
  • the extract can be obtained by any method for preparing a plant extract known to those skilled in the art.
  • the extract may be obtained by maceration of the part of the plant in water, or in a solvent composed of a mixture of water and an organic solvent, for example water-alcohol, or water- acetone, or water-propylene glycol, or water-butylene glycol.
  • the water-organic solvent ratio may vary.
  • the extraction will be carried out, for example, in a 50% ethanol-water mixture or a 20% water-80% ethanol solution.
  • the plant / solvent ratio may vary for example and without limitation from 1/4 to 1/20.
  • the preparation of the extract begins by grinding the parts of the plant followed by maceration in the extraction solvent for several hours. Extraction can be performed with stirring to improve performance.
  • the extraction can be carried out at ambient temperature or by increasing the temperature, for example at 50 ° C. or else at 60 ° C.
  • the solution is filtered.
  • the solution thus obtained can be concentrated by any method known to those skilled in the art.
  • the solution obtained can be lyophilized by any conventional freeze-drying method, thereby obtaining a powder.
  • the extract useful for the implementation of the invention may also correspond to pomegranate juice, obtained by pressing the fleshy parts of the fruit.
  • This juice may undergo fermentation, concentration and / or lyophilization and / or any operation to facilitate its preservation such as sterilization treatments, known to those skilled in the art.
  • the extraction from the pomegranate fruit including the seed can result, according to a particular method of realization, in the preparation of an essential oil.
  • the extract in the form of a concentrated solution, as well as the extract in powder form, as well as the extract in the form of an essential oil may be taken up in a suitable medium for oral consumption for humans.
  • the extract is chosen from aqueous extracts and alcoholic or hydro-alcoholic extracts of Punica granatum.
  • Such extracts are recorded for example with the CAS number 84961-57-9 and for example marketed by the company MMP Inc. under the trade name "Pomegrante Juice extract E40"; other extracts are for example marketed by the company Blue California under the trade name “Pomegrante Extract 70%", or by the company Naturex under the trade name “Pomegranate extract 40%", or by the company Guillin Layn Natural Ingredients under the trade name "Pomegranate Seed PE”.
  • the Punica granatum extract is present in a composition suitable for the oral route, containing physiologically acceptable excipients.
  • compositions according to the invention are intended to be absorbed by any pathway allowing systemic passage, in particular orally, in order to protect or maintain in good condition the superficial parts of the body, or to improve the appearance of individuals, especially in the skin and its appendages.
  • the compositions according to the invention are in particular food supplements.
  • the composition according to the invention may contain the extract (s) of Punica granatum in solution in a liquid food such as an aqueous or aqueous-alcoholic solution, optionally flavored. They can also be incorporated in an unmanageable solid carrier and be for example in the form of granules, pills, tablets or dragees. They can also be placed in solution in a food liquid conditioned itself possibly in unmanageable capsules. For ingestion, many embodiments of oral compositions and in particular dietary supplements are possible. Their formulation is carried out by the usual methods for producing dragees, capsules, gels, emulsions, tablets, capsules or solutions.
  • the active (s) according to the invention can be incorporated into all other forms of food supplements or fortified foods, for example food bars, or compacted powders or not.
  • the powders can be diluted with water, in soda, dairy products or soy derivatives, or incorporated into food bars.
  • the active agents according to the invention can be formulated with the excipients and components customary for such oral compositions or food supplements, namely in particular fatty and / or aqueous components, humectants, thickeners, preservatives, texture, flavor and / or coating agents, antioxidants, preservatives and dyes common in the field of food.
  • the amount of plant or extract Punica granatum will be adapted by the skilled person depending on the nature of the asset and the desired effect.
  • the Punica granatum extract may constitute up to 100% of the composition.
  • the extract of Punica granatum will be present in a composition suitable for the oral route at a concentration of between 0.01 and 99% by weight, relative to the total weight of the composition, generally less than or equal to 90% and especially from 0.1 to 50% by weight. Concentrations of 5% to 50% relative to the total weight of the composition, and in particular 40 to 50% may thus be used in accordance with the invention.
  • the content of Punica granatum or extract of Punica granatum in the compositions will be adapted so as to result in a daily intake of between 10 mg and 1000 mg of extract of Punica granatum, in particular between 200 mg and 500 mg.
  • the compositions or plant extracts of the Punica granatum species according to the invention are useful for reducing and / or preventing and / or delaying the natural whitening of keratin fibers occurring physiologically during aging, more particularly in the body.
  • human The human keratinous fibers to which the invention applies are in particular the hair, the eyebrows, the eyelashes, the beard hair, the mustache hair and the pubic hair. More specifically, the invention is applicable to human hair and / or eyelashes.
  • the subject of the invention is also a plant plant of the species Punica granatum or one of its extracts for use in preventing and / or treating canities.
  • the invention aims to limit, prevent or stop the disappearance of precursors of melanocytes hair.
  • the subject of the invention is also a cosmetic treatment method for reducing and / or delaying the whitening of keratinous fibers, in particular the hair and / or the hair and / or promoting their natural repigmentation, characterized in that it is administered orally to a subject at least one plant of the species Punica granatum, or an extract of Punica granatum or a composition containing it.
  • the method according to the invention may thus be intended to reduce and / or delay and / or prevent bleaching of the hair and / or hair and / or promote their natural repigmentation.
  • the method thus makes it possible to maintain a coloration and a natural pigmentation of human hair, especially in subjects over 35 years of age or over 45 years old.
  • Oral intake of Punica granatum extract may be associated with topical application to the skin or integuments of an extract of Punica granatum, identical or different from that ingested.
  • At least one additional agent that is beneficial to the hair and / or hair is applied to the subject. bristles or reducing their bleaching, or an agent promoting hair growth or decreasing hair loss, an agent improving the quality of the hair fiber such as a hair loss reducing agent or strengthening the capillary diameter, or an anti-hair loss agent; dandruff or fight against desquamative conditions of the hair.
  • This application can be performed by any route, including topical or oral.
  • compositions containing the extract of Punica granatum also contain at least one other agent that promotes the pigmentation of the hair or the hair, and / or at least one agent that promotes hair regrowth or decreasing their fall.
  • agents that modulate the differentiation and / or proliferation and / or pigmentation of skin cells such as retinol and its esters, vitamin D and its derivatives, cAMP modulators such as the POMC derivatives, adenosine, or forskolin and its derivatives, prostaglandins and their derivatives;
  • anti-free radical agents such as ⁇ -tocopherol or its esters, superoxide dismutases or its mimetics, certain metal chelators or ascorbic acid and its esters;
  • anti-seborrheic agents such as certain sulfur amino acids, 13-cis retinoic acid, cyproterone acetate;
  • desquamating agents of the scalp such as selenium disulphide, climbazole, undecylenic acid, ketoconazole, piroctone olamine (octopirox) or ciclopirocton (ciclopirox)
  • plant extracts with pro-pigmenting activity such as chrysanthemum extracts as described in FR 2768343 and extracts of Sanguisorba described in FR 2782920.
  • it may be active stimulating the regrowth and / or promoting the slowing down of the hair loss, it may more particularly be mentioned without limitation:
  • nicotinic acid esters including in particular tocopherol nicotinate, benzyl nicotinate and C-alkyl nicotinates; -Cg such as methyl or hexyl nicotinates;
  • pyrimidine derivatives such as 2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine 3-oxide or "Minoxidil” described in US Pat. Nos. 4,139,619 and 4,596,812; Aminexil or 2,4 diamino pyrimidine 3 oxide described in WO96 / 09048;
  • lipoxygenase or cyclooxidase inducing agents promoting hair regrowth such as those described by the Applicant in the European patent application EP 0 648 488;
  • calcium antagonists such as Cinnarizine, Nimodipine and Nifedipine;
  • the additional agent may especially be chosen from the group comprising at least one extract of a plant selected from Fragaria (strawberry), blackberry, raspberry, grape, nut, terminalia (in particular Belerica, Chebula and Arjuna), Caesalpinia spinosa, cypresses , Burnet, Sanguisorba officinalis or chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium) or an agent selected from tyrosine, L-DOPA, pro-opiomelanocortin derivatives, adenosine, or forskolin or its derivatives.
  • Fragaria strawberry
  • blackberry blackberry
  • raspberry raspberry
  • grape nut
  • terminalia in particular Belerica, Chebula and Arjuna
  • cypresses Burnet
  • Sanguisorba officinalis or chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium)
  • At least one additional agent is applied topically to the skin and / or its annexes.
  • At least one additional agent in particular at least one additional agent beneficial for the hair as defined above, in particular promoting the natural repigmentation of the hair or reducing their whitening, is administered orally.
  • composition adapted to the implementation of the invention also contains at least one extract of a plant selected from raspberry, blackberry (raspberry, blackberry), strawberry, grape, nut, terminalia (in particular Belerica, Chebula and Arjuna), Caesalpinia Spinosa.
  • Punica granatum The plant Punica granatum, its extracts or the composition containing them will be ingested regularly, daily in particular 1 to 3 times a day.
  • the treatment of Punica granatum may be continued over time, for example for 2 to 4 weeks, but may be continued for 2 to 6 months without inconvenience.
  • the method according to the invention is a cosmetic process which makes it possible to improve the appearance of the hair, in particular by delaying or reducing the physiological whitening.
  • pomegranate extract according to the invention makes it possible to obtain a good tolerance and a good effectiveness of the cosmetic treatment. In addition, improved formulations are obtained.
  • the invention also relates to an extract of at least one plant of the species Punica granatum for use in preventing and / or treating canities.
  • the invention also relates to a combination product for simultaneous, separate or sequenced use in time, characterized in that it comprises at least
  • a second component comprising an additional active agent promoting the natural pigmentation of the hair or reducing its whitening, chosen from extracts of a plant selected from Fragaria (strawberry), blackberry, raspberry, grape, nut, Terminalia (in particular Belerica, Chebula and Arjuna) and Caesalpinia spinosa.
  • the human hair follicles are micordisséqués and placed in culture in vitro in the culture medium William's E (Gibco-BRL) supplemented in particular with glutamine, insulin, hydrocortisone and antibiotics.
  • the culture medium contains 2-Thiouracil [ 14 C] at a concentration of 3 ⁇ / ⁇ .
  • the culture medium is supplemented with pomegranate extract.
  • the culture medium is supplemented with the vehicle (in the same quantity as for the "test” group).
  • the hair follicles are washed with medium without 2-Thiouracil [ 14 C]; then lysed by immersion in a solution of Soluene 350 heated to 50 ° C. A scintillating liquid is then added. The amount of 2-Thiouracil [ 14 C] present in the lysates is measured using TRILUX 1450 Micro-Beta.
  • Pomegranate extract increases the incorporation of 2-thiouracil [ 14 C] into hair follicles.
  • the level of expression of these bio markers of canities is analyzed by the standard technique of quantitative RT-PCR (Q-RT-PCR) in human hair follicles.
  • Q-RT-PCR quantitative RT-PCR
  • the human hair follicles of white hair are microdissected and placed in culture in vitro in the William's E culture medium (Gibco-BRL) supplemented in particular with glutamine, insulin, hydrocortisone and antibiotics.
  • the culture medium is supplemented with Punica granatum extract.
  • the control group (30 follicles)
  • the culture medium is supplemented with the vehicle (in the same quantity as for the "test” group).
  • the time necessary for the revelation of the activity of the extract generally from 24h to 5 days, the mRNAs of the hair follicles are extracted. MRNAs of the same experimental condition are grouped together.
  • the expression level of the interest mRNAs is determined by a conventional method
  • Q-RT-PCR for example using QuantiTect kit SYBR Green RT-PCR reference 204243 from Qiagen, the measurement that can be performed on the MylQ device of BIORAD.
  • the extract of Punica granatum corrects the expression changes of some bio markers of canities in the hair follicles of white hair.
  • Example 2 Formula type Gellule Active gelatin mg / sugar

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Abstract

L'invention concerne l'utilisation d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum ou de l'un de ses extraits comme agent pour diminuer ou prévenir le blanchissement des cheveux et/ou des poils, ledit extrait étant utilisé par voie orale. Elle concerne également un procédé de traitement cosmétique par administration de Punica granatum.

Description

Utilisation d'un extrait de Punica granatum pour lutter contre la canitie
La présente invention concerne des procédés de traitement cosmétique pour prévenir ou diminuer le blanchissement des phanères, et l'utilisation d'extraits végétaux comme agent pour favoriser la pigmentation des phanères et/ou pour limiter et/ou prévenir la dépigmentation. Elle concerne en particulier des extraits de grenade, ou des compositions les contenant, pour lutter contre la canitie.
La couleur des cheveux et de la peau humaine est fonction de différents facteurs et notamment des saisons de l'année, de la race, du sexe et de l'âge. Elle est principalement déterminée par la concentration de mélanine produite par les mélanocytes. Les mélanocytes sont les cellules spécialisées qui par l'intermédiaire d'organelles particuliers, les mélanosomes, synthétisent la mélanine. La synthèse de la mélanine ou mélanogénèse est complexe et fait intervenir schématiquement les principales étapes suivantes :
Tyrosine— > Dopa— > Dopaquinone— > Dopachrome— > Mélanine La tyrosinase (monophénol dihydroxyl phénylalanine : oxygen oxydoreductase EC 1 .14.18.1 ) intervient dans cette suite de réactions en catalysant notamment la réaction de transformation de la tyrosine en Dopa (dihydroxyphénylalanine) et la réaction de transformation de la Dopa en Dopaquinone. La partie supérieure du follicule pileux se présente comme une invagination tubulaire de l'épiderme qui s'enfonce jusqu'aux couches profondes du derme. La partie inférieure, ou bulbe pileux, comporte elle-même une invagination dans laquelle se trouve la papille dermique. On trouve, autour de la papille dermique, dans la partie inférieure du bulbe une zone peuplée de cellules à haut taux de prolifération (cellules de la matrice). Ces cellules sont les précurseurs des cellules kératinisées qui constitueront le cheveu. Les cellules qui résultent de la prolifération de ces précurseurs migrent verticalement dans le bulbe et se kératinisent progressivement dans la partie supérieure du bulbe, cet ensemble de cellules kératinisées formera la tige pilaire.
La couleur des cheveux et des poils repose en partie sur la présence en quantités et ratios variables de deux groupes de mélanines : les eumélanines (pigments bruns et noirs) et les phéomélanines (pigments rouges et jaunes). La pigmentation du cheveu et des poils requiert la présence de mélanocytes au niveau du bulbe du follicule pileux. Ces mélanocytes sont actifs, c'est à dire qu'ils synthétisent les mélanines. Cette mélanine est transmise aux kératinocytes destinés à former la tige pilaire ce qui aboutira à la pousse d'un cheveu, ou d'un poil, pigmenté. Cette structure est appelée « unité folliculaire de pigmentation ». Chez les mammifères la mélanogénèse implique, au moins, trois enzymes : la tyrosinase, la DOPAchrome tautomérase (TRP-2) et la DHICAoxydase (TRP-1 ). La tyrosinase est l'enzyme qui initie la biosynthèse des mélanines. Elle est également décrite comme étant l'enzyme limitant de la mélanogénèse. La tyrosinase catalyse l'oxydation de la tyrosine en Dopa puis en Dopaquinone. Le composé Dopaquinone se transforme spontanément en Dopachrome, ou en dérivés cystéinyldopa en présence de cystéine. La TRP-2 catalyse la tautomérisation du Dopachrome en acide 5,6-Dihydroxyindole-2carboxylique (DHICA). En absence de TRP-2 le Dopachrome subit une décarboxylation spontanée pour former le 5,6-Dihydroxyindole (DHI). Finalement la TRP-1 oxyde les composés de DHICA pour former des dérivés de quinones. Les trois enzymes tyrosinase, TRP-2 et TRP-1 apparaissent spécifiquement impliquées dans l'eumélanogénèse. De plus l'activité de ces trois enzymes a été décrite comme nécessaire à l'activité maximale de biosynthèse des eumélanines.
Le cheveu et le poil subissent un cycle. Ce cycle comprend une phase de croissance (phase anagène), une phase de dégénérescence (phase catagène) et une phase de repos (phase télogène) à la suite de laquelle une nouvelle phase anagène se développera. Du fait de ce cycle pilaire, l'unité folliculaire de pigmentation doit également être cycliquement renouvelée. Chez l'homme, au cours de la transition télogène-anagène une partie des mélanocytes inactifs contenus dans la capsule télogène prolifère, se positionne autour de la papille dermique du bulbe naissant, et commence à exprimer les enzymes nécessaires à la synthèse de mélanines telles que tyrosinase et TRP-1 , mais pas l'enzyme TRP-2 {Pigment Cell Res 2004 Oct; 17:488-497). En parallèle l'autre partie de mélanocytes quiescents reste, inactive, dans la région supérieure du follicule pileux. Les enzymes tyrosinase et TRP-1 seront exprimées dans les mélanocytes du bulbe pileux pendant toute la durée de la phase anagène mais ne seront plus exprimées dans les mélanocytes pendant la phase catagène et la phase télogène. Ainsi le cycle normal des mélanocytes dans le follicule pileux humain requiert la présence de mélanocytes précurseurs dans la région supérieure du follicule pileux qui seront cycliquement activés pour régénérer l'unité folliculaire de pigmentation. On sait que dans la plupart des populations la coloration brune de la peau et le maintien d'une coloration constante du cheveu sont des aspirations importantes.
Il est admis que l'apparition de poils et/ou de cheveux gris ou blancs, ou canitie, est associée à une diminution de mélanine dans la tige pilaire. Ce phénomène survient naturellement au cours de la vie d'un individu. Toutefois, l'être humain cherche à avoir un aspect plus jeune et dans un but esthétique, il est souvent tenté de lutter contre ce phénomène, surtout lorsqu'il se produit à un âge relativement précoce.
On a ainsi proposé de nombreuses solutions dans le domaine de la coloration artificielle par apport de colorants exogènes visant à donner aux cheveux une coloration la plus proche possible de ce qu'elle est naturellement. Une autre approche consiste à stimuler la voie naturelle de la pigmentation.
Parmi les solutions proposées, on peut citer des compositions contenant un inhibiteur de phosphodiestérases (W09517161 ), des fragments d'ADN (WO9501773), du diacyl glycérol (WO9404122), des prostaglandines (WO951 1003) ou des dérivés de pyrimidine 3-oxyde (EP829260). La demande WO 04/073594 propose l'utilisation d'inhibiteurs de l'enzyme 15-PGDH. EP1870081 décrit l'utilisation d'acide ellagique ou de ses dérivés pour le traitement de la canitie.
Cependant il existe toujours un besoin de nouvelles solutions efficaces pour favoriser la pigmentation des cheveux et/ou des poils et donc prévenir ou diminuer la canitie.
De manière inattendue, il a maintenant été trouvé que ce but et d'autres pouvait être atteint par l'utilisation de la plante Punica granatum, de ses fractions ou de ses extraits. C'est pourquoi la présente invention a pour objet l'utilisation d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum et/ou de l'un de ses extraits ou d'une composition contenant au moins un tel végétal ou l'un de ses extraits, comme agent pour diminuer ou prévenir le blanchissement des cheveux et/ou des poils, ledit extrait étant utilisé par voie orale. Le grenadier (Punica granatum) est un petit arbre fruitier au feuillage caduc, originaire d'Asie, en particulier du Moyen Orient appartenant à la famille des Punicaceae. Il peut atteindre environ 5 m, mais souvent il n'atteint pas plus que 1 ,50 m. Les fleurs sont rouge orangées ou écarlates, simples ou doubles, selon les variétés. Les fruits sont comestibles et consommés depuis l'Antiquité. Des synonymes sont Punica spinosa, Punica florida ou Granatum puniceum. Son fruit est la grenade, de couleur rouge orangée, au péricarpe (ou écorce) dur et coriace contenant dans 6 à 12 loges membraneuses de nombreuses graines triangulaires à a ri 11 e translucide et juteuse. La grenade est riche en vitamines (B, C et D) et en polyphénols sous forme de tannins. Les extraits d'écorce ont été proposés pour leurs propriétés astringentes, antibactériennes et anti-hémorragiques. Les extraits riches en tannins, sont utilisés de façon traditionnelle dans la pharmacopée marocaine pour noircir les cheveux, en application topique.
Le brevet EP138419 décrit l'application topique d'extrait de grenadier pour prolonger l'intensité de la couleur des cheveux colorés.
WO 2007/004229 décrit l'utilisation de fractions huileuse des graines de grenade pour favoriser la régénération de la peau.
FR 2730408 se rapporte à des compositions pour dépigmenter la peau par application topique, qui peuvent comprendre des extraits de différents fruits, dont celui de Punica granatum.
EP1523895 concerne des compositions pour la voie orale contenant une association d'un extrait de Punica granatum, d'un acide gras, en particulier l'acide linoléique conjugué (CLA) et d'OPC.
US6630163 décrit des compositions pour le traitement de désordres dermatologiques contenant des extraits de fruit, et notamment des extraits de grenade.
US 2006/0280819 décrit des compléments alimentaires préparés à partir de graines de grenade
Cependant, à la connaissance des demandeurs, il n'a jamais été proposé d'utiliser Punica granatum ou ses extraits, par voie orale, pour prévenir, limiter ou arrêter la progression de la canitie, et/ou favoriser la re-pigmentation naturelle des phanères, en particulier des cheveux et/ou des poils.
L'invention a donc notamment pour objet l'utilisation d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum ou de l'un de ses extraits ou d'une composition contenant au moins un tel végétal ou l'un de ses extraits dans un milieu physiologiquement acceptable, comme agent pour favoriser et/ou induire et/ou stimuler la pigmentation des phanères, et/ou comme agent pour prévenir et/ou limiter la dépigmentation et/ou le blanchissement des phanères, notamment comme agent pour prévenir et/ou limiter la canitie; cet agent est plus particulièrement mis en œuvre chez les mammifères, en particulier chez l'être humain.
Selon un autre de ses aspects, l'invention se rapporte à l'utilisation cosmétique d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum ou de l'un de ses extraits dans une composition adaptée à la voie orale pour favoriser et/ou induire et/ou stimuler la pigmentation des phanères, et/ou pour prévenir et/ou limiter la dépigmentation et/ou le blanchissement des phanères et/ou pour prévenir et/ou limiter la canitie. L'invention concerne également l'utilisation d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum ou d'au moins l'un de ses extraits pour la préparation d'une composition destinée à favoriser et/ou induire et/ou stimuler la pigmentation des phanères, et/ou destinée à prévenir et/ou limiter la dépigmentation et/ou le blanchissement des phanères et/ou destinée à prévenir et/ou limiter la canitie.
Les compositions utiles selon l'invention pourront contenir un milieu ou des excipients physiologiquement acceptables
Par peau on entend l'ensemble du revêtement cutané, et notamment le cuir chevelu et les muqueuses. Par phanères, on entend l'ensemble des annexes tégumentaires et notamment les ongles, les poils et les cheveux. Par poils et cheveux on entend l'ensemble des annexes pileuses et notamment également les cils et les sourcils.
Par au moins un on entend un ou deux ou plusieurs, et notamment des mélanges en toutes proportions des différents éléments cités. A moins qu'il ne soit spécifié différemment, le terme "un" dans la présente demande doit s'entendre comme signifiant au moins un.
L'extrait de Punica granatum utile selon l'invention peut être choisi parmi les extraits de fleurs, les extraits de fruit, les extraits de graine et les extraits d'écorce de Punica granatum, et leurs mélanges en toutes proportions. Avantageusement, on utilise un extrait de fruit - ou extrait de grenade - cet extrait pouvant provenir de toutes les parties de la grenade ou plus spécifiquement de l'écorce et/ou des graines.
On peut utiliser un extrait total, c'est-à-dire un extrait comprenant l'ensemble des parties de la grenade, d'où ont été éliminées les parties ligneuses. Selon un autre mode de mise en œuvre de l'invention, on utilisera au moins un extrait enrichi en certaines fractions, notamment un extrait titré en polyphénols.
L'extrait de grenadier peut-être obtenu à partir de toute partie du grenadier et en particulier à partir du fruit incluant ou non la graine, ou encore en particulier à partir de l'écorce du fruit.
Par extrait on entend aussi bien un mélange brut de parties du végétal grossièrement réduites en morceaux et du solvant d'extraction que des fractions ou préparations plus ou moins élaborées des principes actifs solubilisés lors de l'extraction. On peut utiliser un extrait total, c'est-à-dire un extrait comprenant l'ensemble des fractions présentes dans les parties de Punica granatum , éventuellement dépourvue des parties cellulosiques. Selon un autre mode de mise en œuvre de l'invention, on utilisera au moins un extrait enrichi en certaines fractions.
L'extrait peut être obtenu par toute méthode de préparation d'un extrait végétal connue de l'homme du métier.
En particulier, l'extrait peut être obtenu par la macération de la partie du végétal dans l'eau, ou dans un solvant composé d'un mélange d'eau et d'un solvant organique par exemple eau-alcool, ou encore eau-acétone, ou encore eau-propylène glycol, ou encore eau-butylene glycol. Le rapport eau-solvant organique peut varier. L'extraction sera par exemple réalisée dans un mélange eau-éthanol 50%, ou encore une solution 20% eau- 80% éthanol. Le rapport plante/solvant peut varier par exemple et sans limitation de 1/4 à 1/20. Avantageusement, la préparation de l'extrait débute par le broyage des parties du végétal suivi d'une macération dans le solvant d'extraction pendant plusieurs heures. L'extraction peut être réalisée sous agitation pour en améliorer la performance. L'extraction peut être réalisée à température ambiante ou en augmentant la température par exemple à 50°C ou encore à 60°C. Une fois l'extraction réalisée, la solution est filtrée. La solution ainsi obtenue peut être concentrée par tout procédé connu de l'homme de l'art. De même la solution obtenue peut être lyophilisée par toute méthode classique de lyophilisation, on obtient ainsi une poudre.
L'extrait utile pour la mise en œuvre de l'invention peut également correspondre à du jus de grenade, obtenu par pression des parties charnues du fruit. Ce jus pourra subir des étapes de fermentation, de concentration et/ou de lyophilisation et/ou toute opération permettant de faciliter sa conservation telles que des traitements de stérilisation, connues de l'homme du métier.
L'extraction à partir du fruit de grenadier incluant la graine peut aboutir, selon un procédé particulier de réalisation, à la préparation d'une huile essentielle. L'extrait sous forme de solution concentrée, de même que l'extrait sous forme de poudre, de même que l'extrait sous forme d'huile essentielle peut être repris dans un milieu approprié pour la consommation par voie orale pour l'homme.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait est choisi parmi les extraits aqueux et les extraits alcooliques ou hydro-alcooliques de Punica granatum. De tels extraits sont enregistrés par exemple avec le numéro CAS 84961 -57-9 et par exemple commercialisés par la société MMP Inc. sous le nom commercial « Pomegrante Juice extract E40 » ; d'autres extraits sont par exemple commercialisés par la société Blue California sous le nom commercial « Pomegrante Extract 70% », ou par la société Naturex sous le nom commercial « Pomegranate extract 40% », ou encore par la société Guillin Layn Natural Ingrédients sous le nom commercial « Pomegranate Seed P.E » .
Avantageusement, l'extrait de Punica granatum est présent dans une composition adaptée à la voie orale, contenant des excipients physiologiquement acceptables.
Les compositions selon l'invention sont destinées à être absorbées par toute voie permettant un passage systémique, en particulier par voie orale, en vue de protéger ou maintenir en bon état les parties superficielles du corps, ou d'améliorer l'apparence des individus, en particulier au niveau de la peau et ses annexes. Les compositions selon l'invention sont en particulier des compléments alimentaires.
Par voie orale, la composition selon l'invention peut contenir le ou les extraits de Punica granatum en solution dans un liquide alimentaire tel qu'une solution aqueuse ou hydroalcoolique, éventuellement aromatisée. Ils peuvent également être incorporés dans un excipient solide ingérable et se présenter par exemple sous forme de granulés, de pilules, de comprimés ou de dragées. Ils peuvent également être placés en solution dans un liquide alimentaire conditionné lui-même éventuellement dans des capsules ingérables. Pour l'ingestion, de nombreuses formes de réalisation de compositions orales et notamment de compléments alimentaires sont possibles. Leur formulation est réalisée par les procédés usuels pour produire des dragées, gélules, gels, émulsions, comprimés, capsules ou solutions. En particulier, le(s) actif(s) selon l'invention peuvent être incorporés dans toutes autres formes de compléments alimentaires ou d'aliments enrichis, par exemple des barres alimentaires, ou des poudres compactées ou non. Les poudres peuvent être diluées à l'eau, dans du soda, des produits laitiers ou dérivés du soja, ou être incorporées dans des barres alimentaires.
Les actifs selon l'invention peuvent être formulés avec les excipients et composants usuels pour de telles compositions orales ou compléments alimentaires, à savoir notamment composants gras et/ou aqueux, agents humectants, épaississants, conservateurs, agents de texture, de saveur et/ou d'enrobage, antioxydants, conservateurs et colorants usuels dans le domaine de l'alimentaire. La quantité de végétal ou d'extrait de Punica granatum sera adaptée par l'homme du métier selon la nature de l'actif et l'effet recherché. Dans certains modes de mise en œuvre de l'invention, l'extrait de Punica granatum pourra constituer jusqu'à 100% de la composition. A titre indicatif, l'extrait de Punica granatum sera présent dans une composition adaptée à la voie orale à une concentration comprise entre 0.01 et 99% en poids, par rapport au poids total de la composition, généralement inférieure ou égale à 90% et notamment de 0.1 à 50% en poids. Des concentrations de 5% à 50% par rapport au poids total de la composition, et notamment de 40 à 50% pourront ainsi être utilisées conformément à l'invention.
La teneur en Punica granatum ou en extrait de Punica granatum dans les compositions sera adaptée de façon à aboutir à une prise journalière comprise entre 10 mg et 1000mg d'extrait de Punica granatum, notamment comprise entre 200 mg et 500 mg. Les compositions ou les extraits de végétal de l'espèce Punica granatum selon l'invention sont utiles pour diminuer et/ou prévenir et/ou retarder le blanchissement naturel des fibres kératiniques survenant de façon physiologique au cours du vieillissement, plus particulièrement chez l'être humain. Les fibres kératiniques humaines auxquelles s'applique l'invention sont notamment les cheveux, les sourcils, les cils, les poils de barbe, de moustache et les poils pubiens. Plus spécialement, l'invention s'applique aux cheveux et/ou aux cils humains.
L'invention a également pour objet un végétal de végétal de l'espèce Punica granatum ou l'un de ses extraits pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter la canitie. En particulier, l'invention vise à limiter, prévenir ou arrêter la disparition des précurseurs des mélanocytes des cheveux.
L'invention a également pour objet un procédé de traitement cosmétique pour diminuer et/ou retarder le blanchissement des fibres kératiniques, en particulier des cheveux et/ou des poils et/ou favoriser leur repigmentation naturelle, caractérisé en ce qu'on administre oralement à un sujet au moins un végétal de l'espèce Punica granatum , ou un extrait de Punica granatum ou une composition le contenant.
Le procédé selon l'invention peut ainsi être destiné à diminuer et/ou retarder et/ou prévenir le blanchissement des cheveux et/ou des poils et/ou favoriser leur repigmentation naturelle. Le procédé permet ainsi le maintien d'une coloration et d'une pigmentation naturelle de la chevelure humaine, notamment chez des sujets de plus de 35 ans, voire de plus de 45 ans.
La prise orale de l'extrait de Punica granatum peut être associée à une application topique sur la peau ou les phanères d'un extrait de Punica granatum, identique ou différent de celui ingéré.
Selon une variante du procédé selon l'invention, on applique en outre au sujet au moins un agent additionnel bénéfique pour les cheveux et/ou des poils, en particulier un agent favorisant la pigmentation ou le re-pigmentation naturelle des cheveux et/ou des poils ou diminuant leur blanchissement, ou un agent favorisant la croissance des cheveux ou diminuant leur chute, un agent améliorant la qualité de la fibre capillaire tel qu'un agent diminuant la casse des cheveux ou renforçant le diamètre capillaire, ou encore un agent anti-pelliculaire ou de lutte contre les états desquamatifs du cheveu. Cette application peut être réalisée par toute voie, et notamment topique ou orale.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, les compositions contenant l'extrait de Punica granatum contiennent en outre au moins un autre agent favorisant la pigmentation des cheveux ou des poils, et/ou au moins un agent favorisant la repousse des cheveux ou diminuant leur chute.
Parmi les agents additionnels adaptés à la mise en œuvre de l'invention on peut citer à titre d'exemple
- les agents modulant la différenciation et/ou la prolifération et/ou la pigmentation des cellules de la peau tels que le rétinol et ses esters, la vitamine D et ses dérivés, les modulateurs de l'AMPc tels que les dérivés de POMC, l'adénosine, ou la forskoline et ses dérivés, les prostaglandines et leurs dérivés;
- des extraits de micro-organismes ;
- les agents anti-radicaux libres tels que Γα-tocophérol ou ses esters, les superoxyde dismutases ou ses mimétiques, certains chélatants de métaux ou l'acide ascorbique et ses esters ;
- les anti-séborrhéiques tels que certains acides aminés soufrés, l'acide 13-cis rétinoïque, l'acétate de cyprotérone ;
- les autres agents de lutte contre les états desquamatifs du cuir chevelu comme le disulfure de sélénium, le climbazole, l'acide undécylénique, le Kétoconazole, la piroctone olamine (octopirox) ou la ciclopiroctone (ciclopirox)
- des extraits végétaux à activité pro-pigmentante comme les extraits de chrysanthème tels que décrits dans FR 2768343 et les extraits de Sanguisorba décrits dans FR 2782920.
En particulier, il pourra s'agir d'actifs stimulant la repousse et/ou favorisant le ralentissement de la chute des cheveux, on peut plus particulièrement citer à titre non limitatif :
- les esters d'acide nicotinique, dont notamment le nicotinate de tocophérol, le nicotinate de benzyle et les nicotinates d'alkyles en C-| -Cg comme les nicotinates de méthyle ou d'hexyle ;
- les dérivés de pyrimidine, comme le 2,4-diamino 6-piperidinopyrimidine 3-oxyde ou "Minoxidil" décrit dans les brevets US 4,139,619 et US 4,596,812 ; l'Aminexil ou 2,4 diamino pyrimidine 3 oxyde décrit dans WO96/09048 ;
- les agents inhibiteur de la lipoxygenase ou inducteur de la cyclooxydase favorisant la repousse des cheveux comme ceux décrits par la Demanderesse dans la demande de brevet européen EP 0 648 488 ;
- les agents antagonistes de calcium, comme la Cinnarizine, la Nimodipine et la Nifedipine ;
- des agonistes des canaux potassiques dépendant de ΓΑΤΡ tels que la cromakalim et le nicorandil..
L'agent additionnel peut notamment être choisi dans le groupe comprenant au moins un extrait d'un végétal choisi parmi Fragaria (fraise), mûre, Framboise, Raisin, Noix, Terminalia (en particulier Belerica, Chebula et Arjuna), Caesalpinia spinosa, cyprès, Burnet, Sanguisorba officinalis ou de chrysanthème (Chrysanthemum morifolium) ou un agent choisi parmi la tyrosine, la L-DOPA, des dérivés de pro-opiomélanocortines, l'adénosine, ou la forskoline ou ses dérivés.
Selon un mode de réalisation du procédé selon l'invention, au moins un agent additionnel est appliqué par voie topique sur la peau et/ou ses annexes.
Selon un autre mode de réalisation du procédé selon l'invention, au moins un agent additionnel, en particulier au moins un agent additionnel bénéfique pour les cheveux tel que défini plus haut, notamment favorisant la repigmentation naturelle des cheveux ou diminuant leur blanchissement, est administré par voie orale.
De tels actifs additionnels peuvent notamment être choisis parmi la taurine ; des extraits de pépins de raisin ; des extraits de thé vert ; des oligo éléments tel que le Zinc et le sélénium ; des vitamines tel que la vitamine A, la vitamine E et la vitamine C ; .des cathéchines tel que l'épicatéchine, le gallocatechine, l'épigallocatechine ou encore l'épigallocatéchine gallate ; des phytostérols de pin. Avantageusement, la composition adaptée à la mise en œuvre de l'invention contient en outre au moins un extrait d'un végétal choisi parmi Framboise, mûre (raspberry, blackberry), Fraise, Raisin, Noix, Terminalia (en particulier Belerica, Chebula et Arjuna), Caesalpinia Spinosa.
Le végétal Punica granatum, ses extraits ou la composition les contenant seront ingérés de façon régulière, quotidienne notamment de 1 à 3 fois par jour. La prise de Punica granatum pourra être poursuivie dans le temps, par exemple pendant 2 à 4 semaines, mais pourra être poursuivie de 2 à 6 mois sans inconvénient.
Le procédé selon l'invention est un procédé cosmétique qui permet d'améliorer l'apparence de la chevelure, notamment en retardant ou diminuant le blanchissement physiologique.
L'utilisation d'extrait de grenade selon l'invention permet d'obtenir une bonne tolérance et une bonne efficacité du traitement cosmétique. On obtient en outre des formulations améliorées.
L'invention concerne également un extrait d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter la canitie.
L'invention concerne aussi un produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou séquencée dans le temps caractérisé en ce qu'il comprend au moins
(i) un composant comprenant un végétal de l'espèce Punica granatum et/ou un extrait d'un végétal de l'espèce Punica granatum
(ii) un second composant comprenant un actif additionnel favorisant la pigmentation naturelle des cheveux ou diminuant leur blanchissement, choisi parmi les extraits d'un végétal choisi parmi Fragaria (fraise), mûre, Framboise, Raisin, Noix, Terminalia (en particulier Belerica, Chebula et Arjuna) et Caesalpinia spinosa.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent
Exemple I : Mesure de l'activité des mélanocytes des follicules pileux humains:
L'activité des mélanocytes dans les follicules pileux humains est mesurée par le procédé décrit dans la publication de Michelet et al. (Exp Dermatol 2008 Oct 22). Brièvement les étapes de de réalisation du test ont été les suivantes :
les follicules pileux humains sont micordisséqués et placés en culture in vitro dans le milieu de culture William's E (Gibco-BRL) supplémenté notamment en glutamine, insuline, hydrocortisone et antibiotiques.
Le mileu de culture contient la 2-Thiouracile [14C] à une concentration de 3 μθί/ηιΐ.
Pour le groupe de follicules pileux « essai » (25 follicules), le milieu de culture est complété avec l'extrait de grenadier. Pour le groupe « contrôle » (25 follicules), le milieu de culture est complété avec le véhicule (en même quantité que pour le groupe « essai »).
Après 5 jours, les follicules pileux sont lavés avec du milieu sans 2-Thiouracile [14C] ; puis lysés par immersion dans une solution de Soluène 350 porté à 50°C. Un liquide scintillant est ensuite ajouté. La quantité de 2-Thiouracile [14C] présente dans les lysats est mesurée à l'aide de l'appareil TRILUX 1450 Micro-Beta.
L'extrait de grenadier augmente l'incorporation de 2-thiouracile [14C] dans les follicules pileux.
Exemple II : Correction des bio marqueurs de canitie des follicules pileux humains:
Dans le follicule pileux de cheveu blanc, certains ARNm sont sur-représentés (gènes surexprimés) et d'autres sont sous-représentés (gènes sous-exprimés). Ces gènes sont des bio marqueurs de la canitie et leurs changements d'expression sont associés au développement de la canitie.
Le niveau d'expression de ces bio marqueurs de canitie est analysé par la technique classique de RT-PCR quantitative (Q-RT-PCR) dans des follicules pileux humains. Pour la réalisation de l'essai, les follicules pileux humains de cheveux blancs sont microdisséqués et placés en culture in vitro dans le milieu de culture William's E (Gibco- BRL) supplémenté notamment en glutamine, insuline, hydrocortisone et antibiotiques. Pour le groupe de follicules pileux « essai » (30 follicules), le milieu de culture est complété avec l'extrait de Punica granatum. Pour le groupe « contrôle » (30 follicules), le milieu de culture est complété avec le véhicule (en même quantité que pour le groupe « essai »). Après le temps nécessaire à la révélation de l'activité de l'extrait, en général de 24h à 5 jours, les ARNm des follicules pileux sont extraits. Les ARNm de la même condition expérimentale sont regroupés.
Le niveau d'expression des ARNm d'intérêts est déterminé par une méthode classique
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de Q-RT-PCR, par exemple à l'aide du kit QuantiTect SYBR Green RT-PCR référence 204243 de Qiagen, la mesure pouvant être réalisée sur l'appareil MylQ de BIORAD.
L'extrait de Punica granatum corrige les changements d'expression de certains bio marqueurs de la canitie dans les follicules pileux des cheveux blancs.
Exemples III: compositions orales
Exemple 1 : Formule type dragée
actif mg/dragée
Extrait de grenadier 300
Excipient
Cellulose microcristaline 70
Encompress I M 60
stéarate de magnésium 3
Silice colloïdale anhydre 1
Agent d'enrobage
Gomme laque 5
Talc 60
Saccharose 50
Polyvidone 6
Dioxyde de titane 0,3
Agent de coloration 5
Exemple 2 : Formule type Gellule Gélatine actif mg/dragée
Extrait de grenadier 300
Excipient
Amidon 200
stéarate de magnésium 3 Exemple 3 : Formule type gel unidose
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Exemple 4 : Formule type capsule
actif mg/capsule
Extrait de grenadier 300
Excipient
Glycérine 150
Stéarate de magnésium 3 eau Qsp 500

Claims

Revendications
Utilisation d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum ou de l'un de ses extraits comme agent pour diminuer ou prévenir le blanchissement des cheveux et/ou des poils, ledit extrait étant utilisé par voie orale.
Utilisation d'au moins un extrait selon la revendication 1 , caractérisée en ce que ledit extrait de Punica granatum est choisi dans le groupe comprenant les extraits de fleurs, les extraits de fruit, les extraits de graine et les extraits d'écorce de Punica granatum.
Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que l'extrait est choisi parmi les extraits aqueux, les extraits alcooliques et les extraits hydroalcooliques de Punica granatum.
Utilisation selon l'une au moins des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'extrait de Punica granatum est présent dans une composition adaptée à la voie orale à une concentration comprise entre 0.01 et 99% en poids, par rapport au poids total de la composition.
Extrait d'au moins un végétal de l'espèce Punica granatum pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter la canitie.
Procédé de traitement cosmétique pour diminuer et/ou retarder le blanchissement des cheveux et/ou des poils et/ou favoriser leur repigmentation naturelle, caractérisé en ce qu'on administre oralement au moins un extrait de Punica granatum ou une composition le contenant.
Procédé de traitement cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'on applique en outre au sujet au moins un agent additionnel bénéfique pour les cheveux choisi parmi les actifs favorisant la pigmentation des cheveux et/ou des poils, et les actifs diminuant la chute des cheveux ou stimulant leur croissance ou de lutte contre les états desquamatif, ou d'amélioration la qualité de la fibre capillaire, ou renforçant le diamètre des cheveux.
Procédé selon l'une des revendications 6 ou 7, caractérisé en ce que la composition contient en outre au moins un agent pour favoriser la pigmentation des cheveux ou pour favoriser la repousse des cheveux.
Procédé selon l'une au moins des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que la composition contient au moins un extrait d'un végétal choisi parmi Framboise, mûre, Fraise, Raisin, Noix, Terminalia (en particulier Belerica, Chebula et Arjuna), Caesalpinia spinosa. 10- Procédé de traitement cosmétique selon l'une au moins des revendications 6 à 9, caractérisé en ce qu'au moins un agent additionnel bénéfique pour les cheveux est appliqué par voie topique sur la peau ou ses annexes.
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