WO2010139252A1

WO2010139252A1 - 异硫氰酸酯类化合物在促进毛发生长中的应用

Info

Publication number: WO2010139252A1
Application number: PCT/CN2010/073332
Authority: WO
Inventors: 程景才; 顾国林; 钟成娟
Original assignee: Cheng Jingcai; Gu Guolin; Zhong Chengjuan
Priority date: 2009-05-31
Filing date: 2010-05-28
Publication date: 2010-12-09
Also published as: CN101897691A; CN101897691B

Description

异硫氰酸酯类化合物在促进毛发生长中的应用技术领域

本发明涉及化学、生物和医药领域，更具体而言涉及异硫氰酸酯类化合物在促进毛发生长中的应用，尤其是其在治疗和 /或预防脱发中的应用。相关申请

本发明是基于如下专利申请或专利的后续研究：

一种天然及人工合成的异硫氰酸酯类化合物 JC-5411在制备预防和治疗前列腺癌、肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌、黑色素瘤和神经母细胞瘤的药物中的应用，专利号： ZL200510040865.1 , 申请日： 2005年 6月 30日；授权公告日： 2009年 1月 7日；

一种天然及人工合成的异硫氰酸酯类化合物 JC-541 1在制备转录因子 Spl的抑制剂中的应用，申请号： 200510095737.7，申请日： 2005年 11月 15日；

一种适用于难溶性药物的分散剂，申请号： 200610038112.1，申请日： 2006年 1 月 27 曰；

一种适用于难溶性药物的药用乳剂及其制备方法，专利号： ZL 200410052816.5，授权公告日： 2009年 7月 22日；申请号： 200410052816.5，申请日： 2004年 7月 14日；

异硫氰酸酯类化合物在前列腺疾病及皮肤癌中的应用，申请号： 200610126892.5，申请日： 2006年 9月 11 日；

PCT 国际专利：异硫氰酸酯类化合物在前列腺疾病及皮肤癌中的应用，国际申请号：

PCT/CN2006/003062, 国际申请日： 2006年 11月 14日。

上述专利申请或专利的内容以其全文纳入本文作为参考。背景技术

现代生活中，秃发和脱发已成为人类的常见病和多发病，它们虽然不会给患者带来直接的肉体痛苦，却给患者的精神带来诸多不良影响，并给患者的生活带来不便。在人群中可观察到不同形式的秃发症，如雄激素性脱发 (androgenetic alopecia, AGA)、斑秃、假性斑秃、脂溢性脱发、生长期脱发以及休止期脱发等，其中较为普遍的是雄激素性脱发。男性和女性均可发生 AGA，男性发生的概率普遍高于女性，对男性而言大多数脱发发生在头的前部和顶部，女性则是整个头部的头发变薄。

2003年对近 6000名男性调查的结果表明：我国 25-29岁男性中患有不同程度 AGA的人占该年龄段的 12%， 30-34岁占 17%， 35-39岁占 20%， 40-44岁占 24%， 45-49岁的发病率则可高达 31%。由于社会、环境等方面的因素，近几年， AGA发病率不断提高，且呈现低龄化趋势。

AGA的治疗方法主要有药物治疗和手术治疗 (如毛发移植)两类。毛发移植虽可改善脱发的不良视觉，达到一定美容效果，但手术费用高，且存在手术风险；另外脱发面积较大的患者往往需要多次移植，费用更高，较难普及。

AGA的临床表现常常为头顶部毛囊变小，生长期缩短，生长期 /休止期毛囊比值下降，毛发直径变小、变少，毳毛代替终毛。目前认为该病是在一定遗传素质的基础上，与雄激素水平增高有关 (尹兴平等， 5α-还原酶在雄激素代谢中的作用及其抑制剂在皮肤科的应用，国外医学皮肤性病学分册， 2004， 30(6)： 375-377)。早在 40年代， Hamilton等就认识到了遗传禾口睾酮与 AGA之间的关系 (Hamilton JB. Male hormone is a prerequisite and an incitant in common bladness. Am JAnat 1942, 71 :451-480)。

近年来，随着分子生物学的不断发展， AGA的发病机理，特别是雄激素与 AGA的关系更趋明了。正常生理状态下，雄激素在体内对毛发的生长发育起一定的剌激促进作用，但能诱导某些特定部位毛发的脱失。 AGA患者秃发区脱发的诱因，主要是由于雄激素在皮肤局部组织的代谢异常，以及与雄激素代谢有关的酶和受体在秃发区的活性和数量增加 (Hibberts NA等， Balding hair folliele dermal papilla cells contain higher levels of androgen receptors than those from non-balding scalp, Endocrinol, 1998， 156(1)： 59-65), 后者使容易秃发的头皮对正常或偏高的雄激素产生强大的放大效应。例如，通过 5α-还原酶、 3α-羟基类固醇脱氢酶等的作用，活性较低的睾酮 (Τ)转换成活性较高的二氢睾酮 (DHT)。睾酮或二氢睾酮都必须与集中于毛囊单位内的雄激素受体结合，进入细胞核产生一系列生物效应，使细胞内环磷酸腺苷降低，毛发生长期缩短或毛囊微小化，从而导致脱发。因此，从发病机理来看，下调雄激素受体过度表达可以改善 AGA的脱发症状。

市场上治疗脱发的药物主要分为三类：

(1)以非那雄胺为代表的 5α-还原酶抑制剂。这类药物通过抑制 5α-还原酶，从而降低睾酮向活性更高的二氢睾酮的转化，减弱了器官中过量雄激素剌激的作用。但该药物也存在一些缺陷，比如引发阳痿的性功能障碍、停药后反复复发等。此外由于无法局部应用，激素样副作用使之不适合用于女性、孕妇禁用 (付国强. 治疗雄激素性脱发药物的研究进展 m . 国外医学皮肤性病学分册， 2000， 26(2)： 68-72)等等。

(2)雄激素拮抗剂，包括体类和非体类。这类药物通过抗雄激素或与雄激素竞争性结合雄激素受体而降低雄激素作用。体类如醋酸环丙孕酮、雌激素等，该类药物有对抗雄激素的作用，但同时产生女性化副作用。非甾体类雄激素拮抗剂虽然没有激素的副作用，却由于与所有内源性雄激素竞争受体位点，因而可导致男性患者或女性患者的雄性胎儿女性化的倾向，以及睾丸产生过度剌激的反馈作用。

(3)钾离子通道开放剂，如米诺地尔，口服存在快速降低血压等不良反应，故一般外用。但该药物停药后易复发，需要长期使用。此外该药物不直接调控雄激素或雄激素受体，因此对雄激素性脱发的治疗效果不强。

由上可知，目前市场上治疗脱发的一线药物均存在一定副作用，疗效也不甚理想。此外，从美容的角度而言，本领域也缺乏可安全、有效地促进毛发生长以达到美容效果的组合物。

因此，本领域迫切需要开发出可有效、安全地促进毛发生长的组合物。发明内容

本发明的目的之一正是提供一种已知化合物——异硫氰酸酯类化合物在促进毛发生长中的新用途、其相关组合物及应用。

在本发明的第一方面中，提供了通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物在制备促进对象毛发生长的组合物中的应用：

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n-， n为 0-4的整数； R¹为多取代或单取代或未取代的苯基或 C₂_₄烯基，所述取代基选自：磺酸基、氨基磺酸基、卤素、甲基、乙基、甲氧基、甲硫基、甲酰氨基、乙酰氨基、甲氨基、乙氨基、羧基和氰基；

H S

R^LX-N-C-R³ 通式 π

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

R³为氢或通过硫原子与 _N-C-的碳原子连接的衍生自以下化合物的基团: N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰氨基酸和半胱氨酰氨基酸 (d-C₆烷基)酯。

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n -， n为 0-4的整数；

R¹为多取代或单取代或未取代的苯基或 C₂_₄烯基，所述取代基选自：磺酸基、氨基磺酸基、卤素 (如氟、氯、溴)、甲基、乙基、甲氧基、甲硫基、甲酰氨基、乙酰氨基、甲氨基、羧基和氰基；

H S

R^LX-N-C-R³ 通式 π

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

R³为氢或通过硫原子与 _N-C-的碳原子连接的衍生自以下化合物的基团： N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰氨基酸和半胱氨酰氨基酸 (d-C₆烷基) 酯，其中氨基酸，较优的有：甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸、丙氨酸、或蛋氨酸。

在本发明的一个实施方式中，所述异硫氰酸酯类化合物或其衍生物为选自结构式 (1)〜(10) 化合物中的一种或多种：

或（10)。

在一个优选例中，所述异硫氰酸酯类化合物获自：动植物、化学合成或半化学合成，优选所述植物选自：十字花科植物，如豆瓣菜、抱子甘蓝、椰菜、卷心菜、芥菜、羽衣甘蓝、山葵、萝卜和芜菁甘蓝等，也可以硫葡萄糖苷加合物即称为芥子油苷的形式存在。在本发明的另一个实施方式中，所述促进毛发生长针对选自下组的疾病或症状：毛发异常脱落或毛发稀少。

在一个优选例中，所述组合物还抑制雄激素受体、雄激素受体上游基因 Spl或雄激素受体下游基因前列腺特异抗原的表达。

在另一优选例中，所述对象为哺乳动物，优选人类或赏毛动物。

在本发明的另一个实施方式中，所述毛发异常脱落选自：雄激素性脱发、斑秃、假性斑秃、脂溢性脱发、生长期脱发或休止期脱发。

在一个优选例中，所述毛发异常脱落为雄激素性脱发。

在本发明的另一个实施方式中，所述组合物选自：药物组合物、食品、保健品或化妆品。在本发明的另一个实施方式中，所述组合物的剂型选自：浴剂、洗剂、搽剂、酊剂、油齐 U、软膏剂、硬膏剂、糊剂、熨剂、贴膏、贴片、涂膜剂、膜剂、凝胶剂、巴布剂、穴位贴敷剂、喷雾剂、气雾剂、植入剂、乳剂、洗发液、护发素、栓剂、片剂、胶囊、丸剂、注射用粉针、注射剂、冻干粉剂。

在本发明的另一个实施方式中，以组合物的总重量为基准计，所述组合物中通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物的含量为 0.001〜99.9重量％。

在一个优选例中，所述组合物中通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物的含量为 0.01〜90重量％，更优选 0.05〜75重量％。

在另一优选例中，所述组合物以可直接施用的形式存在，以组合物的总重量为基准计，通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物的含量为 0.001〜25重量％，优选 0.005〜20重量％，更优选 0.05〜10重量％。

在另一优选例中，所述组合物以浓缩物的形式存在，在使用前可对其进行稀释，以稀释物的总重量为基准计，通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II 的衍生物的含量为 0.001〜25重量％，优选 0.005〜20重量％，更优选 0.05〜10重量％。

在本发明的一个实施方式中，所述组合物中的载体为油脂性基质或水溶性基质。

在本发明的另一个实施方式中，所述油脂性基质为选自下文所述 (bl)中的一种或多种，所述水溶性基质为选自下文 (b2)中的一种或多种。

在本发明的另一个实施方式中，所述组合物还含有其它预防和 /或治疗脱发的活性物质。在一个优选例中，所述其它预防和 /或治疗脱发的活性物质为选自下组的一种或多种： 5α- 还原酶抑制剂、雄激素拮抗剂或钾离子通道开放剂，优选非那雄胺、依立雄胺、度他雄胺、醋酸环丙孕酮、雌激素、米诺地尔或安体舒通。

在本发明的另一个实施方式中，在使用所述组合物之前、同时或之后，配合使用所述其它预防和 /或治疗脱发的活性物质、实施针对脱发的外科手术或给予针对脱发的放射性治疗。

在本发明的第二方面中，提供了一种组合物，其含有：

(Α)有效量的通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物：

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n -， n为 0-4的整数；

R¹为多取代或单取代或未取代的苯基或 C₂_₄烯基，所述取代基选自：磺酸基、氨基磺酸基、卤素、甲基、乙基、甲氧基、甲硫基、甲酰氨基、乙酰氨基、甲氨基、乙氨基、羧基和氰基；

H S

R^LX-N-C-R³ 通式 π

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

R³为氢或通过硫原子与 _N-C-的碳原子连接的衍生自以下化合物的基团: N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰氨基酸和半胱氨酰氨基酸 (d-C₆烷基)酯; 优选为衍生自以下化合物的一价基团： N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基）酯、半胱氨酰甘氨酸、半胱氨酰甘氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰谷氨酸、半胱氨酰谷氨酸 (d-C₆ 烷基)酯、半胱氨酰丙氨酸、半胱氨酰丙氨酸 (d-c₆烷基)酯、半胱氨酰丝氨酸、半胱氨酰丝氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰蛋氨酸、半胱氨酰蛋氨酸 (d-C₆烷基)酯；

(B)药学上可接受的载体、食品、保健品或化妆品可接受的载体；

(C)一种或多种其它预防和 /或治疗脱发的活性物质。

在本发明的另一个实施方式中，所述油脂性基质为选自 (M)中的一种或多种，所述水溶性基质为选自 (b2)中的一种或多种：

(bl)凡士林、凡士林羊毛醇、石蜡、液状石蜡、液体石蜡羊毛醇、地蜡、蜂蜡、白蜡、黄蜡、鲸蜡、羊毛脂、猪油、羊油、麻油、花生油、玉米油、大豆油、菜子油、芝麻油、葵花籽油、杏仁油、蓖麻油、橄榄油、棉籽油、二甲基硅油、氢化植物油、中链甘油三酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、硬脂酸、十六醇、十六醇酯蜡、十八醇、邻苯二甲酸二酯、巴西棕榈蜡、丙酮、石油醚、油酸乙酯或棕榈酸异丙酯；或

(b2)蒸熘水、乙醇、异丙醇、甘油、淀粉甘油、单乙醇胺、丙三醇三乙酸酯、虫胶、角豆胶、明胶、瓜耳胶、角叉菜胶、阿拉伯胶、西黄蓍胶、黄原酸胶、壳聚糖、海藻酸钠、甲基纤维素、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、羧甲纤维素钠、羟乙纤维素、羟乙甲纤维素、羟丙纤维素、低取代羟丙纤维素、羟丙甲纤维素、羟丙甲纤维素酞酸酯、卡波姆、聚乙二醇或胶体硅酸镁铝。

在本发明的另一个实施方式中，所述组合物还含有其它预防和 /或治疗脱发的活性物质。在本发明的另一个实施方式中，所述其它预防和 /或治疗脱发的活性物质为选自下组的一种或多种： 5α-还原酶抑制剂、雄激素拮抗剂或钾离子通道开放剂。

在一个优选例中，所述活性物质优选为：非那雄胺、依立雄胺、度他雄胺、醋酸环丙孕酮、雌激素、米诺地尔或安体舒通。

在本发明的第三方面中，提供了一种美容方法，所述方法包括给予对象通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物或本发明的组合物以促进所述对象毛发的生长。

在本发明的第四方面中，提供了一种预防和 /或治疗脱发的方法，所述方法包括给予需要所述预防和 /或治疗的对象有效量的通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。附图说明

图 1: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组小鼠新生毛发生长速度比较，通过达到 ++ 或更高的动物个数占总个数百分率进行比较。

图 2: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组小鼠新生毛发面积比较。

图 3: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组小鼠新生毛发重量比较。

图 4: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组给药 1 1天小鼠照片。图 4A: 给药 1 1天阴性对照组小鼠照片；图 4B : 给药 1 1天苯乙基异硫氰酸酯给药组小鼠照片。

图 5: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组给药 13天小鼠照片。图 5A: 给药 13天阴性对照组小鼠照片；图 5B : 给药 13天苯乙基异硫氰酸酯给药组小鼠照片。

图 6: 苯乙基异硫氰酸酯给药组与阴性对照组给药 18天小鼠照片。图 6A: 给药 18天阴性对照组小鼠照片；图 6B : 给药 18天苯乙基异硫氰酸酯给药组小鼠照片。具体实施方式

本发明人经过广泛而深入的研究发现：已知化合物一异硫氰酸酯类化合物对于毛发生长的速度、面积和质量均有明显的促进作用，且几乎没有毒副作用，可安全有效地促进毛发生长。由此，本发明人开发出了可用于促进毛发生长的组合物，并在此基础上完成了本发明。异硫氰酸酯类化合物

如本文所用，术语"异硫氰酸酯类化合物"、 "异硫氰酸酯类活性物质"和"本发明的活性物质"可互换使用，均是指具有通式 I所述结构的化合物、其衍生物 (尤其是具有通式 II的衍生物)、代谢物或它们的组合。

本发明所述的异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物，包括但不限于苯甲基异硫氰酸酯 (BITC)、苯乙基异硫氰酸酯 (PEITC)、苯丙基异硫氰酸酯 (PPITC)、烯丙基异硫氰酸酯 (AITC)、 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯 (SPITC)、以及它们分别与 N-乙酰半胱氨酸形成的共轭物 (BITC-NAC PEITC-NAC PPITC-NAC AITC-NAC禾 P SPITC-NAC), 分别对应于本文中的结构式 (1)〜(10)。

在本发明中，对于获得异硫氰酸酯类化合物的方法没有特别的限制，比如其可以从天然植物 (例如芥菜或萝卜)中提取、采用化学合成或半化学合成的方法制备等。本发明中所使用的异硫氰酸酯类化合物可通过市售途径获得，例如可购自无锡杰西医药科技有限公司或 SIGMA公司。

异硫氰酸酯类化合物促进毛发生长的活性及应用

本发明提供了异硫氰酸酯类化合物在促进毛发生长中的新用途。本发明中异硫氰酸酯类化合物或含有此类化合物作为活性成分的组合物，能有效促进毛发 (优选头发)的生长，改善脱发，起到预防、治疗和 /或美容的效果。

不限于理论，本发明异硫氰酸酯类化合物可通过如下机理促进毛发生长：

(1)促进毛发生长部位血液循环：毛发生长影响因素的研究表明，增加皮肤局部的血液循环，有助于毛发的生长。本发明的异硫氰酸酯类化合物对毛发生长部位有局部剌激作用，可改善施用部位的血液循环，从而促进毛发生长；

(2)抑制异常的雄激素受体的转录和表达：异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物可分别从雄激素受体 AR、 AR上游基因 Spl和 AR下游基因 PSA三个方面抑制异常的雄激素受体的转录和表达 (可参考前文所述的中国专利申请 200610126892.5)。

因此，本发明的异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物除了可促进预防和 /或治疗普通的脱发之外，还可有效地预防和 /或治疗普通药物、食品、保健品或化妆品难以有效预防或治疗的雄激素性脱发。并且，在预防和 /或治疗脱发的同时，还可用于治疗因雄激素过量导致的普通粉剌或皮脂溢，达到综合美容的效果。

由此，本发明中还提供了异硫氰酸酯类化合物及其组合物在促进毛发生长中的用途，其可用于治疗目的的脱发临床治疗和 /或预防，也可用于非治疗目的的美容和 /或保健。或者，可将本发明的异硫氰酸酯类化合物及其组合物施用于其它哺乳动物，尤其是赏毛动物 (例如宠物犬、猫等)。

组合物和施用方法

本发明所述组合物可以是药物组合物 (药品)、食品、保健品或化妆品，其中含有有效量的异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物；药学、食品学、保健品学或化妆品学上可接受的载体或赋形剂；以及任选的其它促进毛发生长的活性物质。

如本文所用，术语"含有"或"包括"包括了 "包含"、 "基本上由 ... ...构成"、和"由 ... ...构成"。如本文所用，术语"药学、食品学、保健品学或化妆品学上可接受的"的成分是适用于人和 / 或动物而无过度不良副反应 (如毒性、剌激和变态反应;)的，即有合理的效益 /风险比的物质。如本文所用，术语"有效量"是指可对人和 /或动物产生功能或活性的且可被人和 /或动物所接受的量。

如本文所用，术语"药学上可接受的载体"指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在《雷明顿药物科学》（Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Pub. Co. , N.J. 1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。

本发明的组合物中异硫氰酸酯类活性物质有效成分占组合物总重量的 0.001-99.9 wt%; 优选为组合物总重量的 0.01-90 wt%, 较优选为 0.05-75 wt%, 余量为药学上可接受的载体以及其它添加剂等物质。

在本发明的一个优选实施方式中，所述组合物为单位剂型或多剂型，且其中异硫氰酸酯类活性物质的含量为 0.001-3000 mg/剂，优选 0.01-2000 mg/剂，更优选 0.1-1500 mg/剂。

在本发明的一个优选例中，所述组合物中含有：低剂量的异硫氰酸酯类活性物质，例如

0.01-10 mg/剂，更优选 0.05-8 mg/剂，进一步优选含有 0.1-5 mg/剂；含有中剂量的异硫氰酸酯类活性物质，例如 1-1000 mg/剂；更优选 5-800 mg/剂，进一步优选 10-500 mg/剂，更优选 15-200 mg/剂；或高剂量的异硫氰酸酯类活性物质 (如作为可在施用前稀释的浓缩物)，例如其含量为 100-3500 mg/剂；更优选 500-3000 mg/剂，进一步优选 1000-2500 mg/剂，更优选 1500-2000 mg/剂。在本发明的另一个优选例中，每天一次或多次施用本发明的组合物，例如

1、 2、 3、 4、 5或 6次。

本发明所述的含有异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物的药品、食品、保健品、化妆品组合物，除如中国发明专利 200610126892.5所述，可以是适宜口服给药的各种剂型外，还可以是各种外用给药制剂或其它胃肠道外给药制剂。例如，本发明所述的外用给药制剂，还可以通过添加表面活性剂、透皮吸收促进剂、防腐剂、溶剂、抗氧剂、保湿剂、 pH调节齐 lj、着色剂、矫香剂等辅料，进一步制备成 (包括但不限于)：浴剂、洗剂、搽剂、酊剂、油齐 U、软膏剂、硬膏剂、糊剂、熨剂、贴膏、贴片、涂膜剂、膜剂、凝胶剂、巴布剂、穴位贴敷剂、喷雾剂、气雾剂、植入剂、乳剂、洗发液、和护发素等。

在本发明的一个实施方式中，所述的外用给药制剂，可包含下列成份： (a) 0-50重量份天然的或人工合成的异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物，所述的异硫氰酸酯类化合物包括但不限于苯乙基异硫氰酸酯、苯甲基异硫氰酸酯、苯丙基异硫氰酸酯、烯丙基异硫氰酸酯、 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯；所述衍生物、代谢物包括但不限于异硫氰酸酯类化合物的 N-乙酰半胱氨酸共轭物，优选地是，苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸共轭物、苯甲基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸共轭物、苯丙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸共轭物、烯丙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸共轭物、 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸共轭物；

(b) 0-1000重量份活性成分载体，所述的活性成分载体选自油脂性基质、水溶性基质： (bl) 油脂性基质，所述的油脂性基质选自：凡士林、凡士林羊毛醇、石蜡、液状石蜡、液体石蜡羊毛醇、地蜡、蜂蜡、白蜡、黄蜡、鲸蜡、羊毛脂、猪油、羊油、麻油、花生油、玉米油、大豆油、菜子油、芝麻油、葵花籽油、杏仁油、蓖麻油、橄榄油、棉籽油、二甲基硅油、氢化植物油、中链甘油三酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、硬脂酸、十六醇、十六醇酯蜡、十八醇、邻苯二甲酸二酯、巴西棕榈蜡、丙酮、石油醚、油酸乙酯、棕榈酸异丙酯中的一种或一种以上组成的混合物。

(b2) 水溶性基质，所述水溶性基质选自：蒸熘水、乙醇、异丙醇、甘油、淀粉甘油、单乙醇胺、丙三醇三乙酸酯、虫胶、角豆胶、明胶、瓜耳胶、角叉菜胶、阿拉伯胶、西黄蓍胶、黄原酸胶、壳聚糖、海藻酸钠、甲基纤维素、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、羧甲纤维素钠、羟乙纤维素、羟乙甲纤维素、羟丙纤维素、低取代羟丙纤维素、羟丙甲纤维素、羟丙甲纤维素酞酸酯、卡波姆、聚乙二醇、胶体硅酸镁铝等的一种或一种以上组成的混合物。本发明所述的外用给药制剂，其特征在于，还可以通过添加如下辅料，进一步制备成其它适宜的剂型，其所添加的其它辅料包括：

(i) 0-200重量份乳化剂，所述乳化剂选自白蛋白、酪蛋白、卵磷脂、卡波姆、羊毛月旨、羊毛醇、胆固醇、鲸蜡醇、多库酯钠、硬脂酸棕榈酸乙二醇酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、三乙醇胺硬脂酸新生皂、十二烷基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯、聚山梨酯、失水山梨醇脂肪酸脂、平平加 0、乳化剂 OP、聚氧乙烯月桂醇醚、硬脂酸聚氧乙烯酯、维生素 E琥珀酸聚乙二醇酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、泊洛沙姆、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚氧乙烯烷基醚、海藻酸丙二醇酯、山梨坦酯、硬脂酸、阴离子乳化蜡、非离子乳化蜡等的一种或一种以上组成的混合物；

(ii) 0-20重量份透皮吸收促进剂，所述的透皮吸收促进剂选自：四氢呋喃聚乙二醇醚、 α-吡咯酮、 Ν-甲基吡咯酮、 5-甲基吡咯酮、 1-5-二甲基吡咯酮、 Ν-乙基吡咯酮、 5-羧基吡咯酮、乙醇、丙二醇、癸醇、甘油、乙酸乙酯、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、癸基甲基亚砜、油酸、油酸酯、亚油酸、亚油酸酯、月桂酸、月桂酸酯、肉豆蔻酸、肉豆蔻酸异丙酯、月桂氮卓酮及其同系物、尿素、胆酸、胆酸盐、水杨酸、薄荷油、桉叶油、桉树脑、松节油、氨基酸、磷脂、樟脑、柠檬烯、 β-环糊精、羟丙基 -β-环糊精、二甲基 β-环糊精的一种或一种以上组成的混合物。

(iii)0-50重量份防腐剂，所述的防腐剂选自：海克西定、咪唑烷脲、山梨酸、 2-糠酸、克菌丹，二甘醇单甲醚、己烯乙二醇、氯苄烷铵、洗必泰、苯甲酸类、氯甲酚、甲酚、尼泊金类、三氯叔丁醇、苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、溴硝丙二醇、氯已定、羟苯丁酯、羟苯甲酯、羟苯丙酯、羟苯乙酯、对氯间二甲苯、苯氧乙醇、丙酸钠的一种或一种以上组成的混合物；

(iv)0-50重量份抗氧剂，所述的抗氧剂选自： VE、 VC、抗坏血酸钠、棕榈酸维生素 C酯、丁羟茴醚、丁羟基甲苯 (BHT)、氯甲酚、没食子酸丙酯、焦性末食子酸乙酯或丙酯、二叔丁对苯酚、叔丁对甲氧酚、枸橼酸、酒石酸、乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、巯基二丙酸和亚硫酸盐、焦亚硫酸钾、焦亚硫酸钠中的一种或一种以上组成的混合物；

(v)0-50重量份其它添加剂：所述的其它成分包括保湿剂、 pH调节剂、着色剂、矫香剂等。

所述的保湿剂可选自：甘油、丙二醇、丁二醇、山梨醇、木糖醇、环甲基硅酮、海藻糖、吡咯烷酮羧酸钠、聚乙二醇、乳酸钠、粘多糖、硫酸软膏素、神经酰胺、透明质酸、几丁质、几丁聚糖、（锚丝保湿剂；)乙酰基玻尿酸、蜂蜜中的一种或几种混合物。

所述的 pH调节剂可选自：柠檬酸、柠檬酸钾、枸橼酸、富马酸、乳酸、酒石酸、盐酸、磷酸、醋酸、苹果酸、氢氧化钠、氨水、二甲醇胺、葡甲胺、氢氧化钾、酒石酸等的一种或几种混合物。

所述的着色剂可选自：苋菜红、姜黄素、核黄素、酒石黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、淡红、赤藓红、丽春红、阿洛拉红、专利蓝 5、靛蓝胭脂红、亮蓝 FCF、叶绿素、叶绿素和叶绿酸酮复合物、绿 S、焦糖 (酱色)、亮黑 BN、活性炭、辣椒红、类胡萝卜素、辣椒玉红素、番茄红素、叶黄素、斑蝥黄、甜菜根红、花色素苷、花青素、翠雀苷色素、锦葵色素、天竺葵色素、芍药花色素、苯乙醇、二氧化钛、氧化铁、氢氧化铁、矾土、铝粉、青铜粉、碳酸钙、云母等的一种或一种以上组成的混合物。

所述的矫香剂可选自：薄荷油、薄荷脑、樟脑、冰片、香精、二甲醚、乙酸乙酯、乙基香草醛等的一种或一种以上组成的混合物。

在本发明的药品、食品、保健品、化妆品组合物中，较优的如以苯甲基异硫氰酸酯、苯乙基异硫氰酸酯、苯丙基异硫氰酸酯、烯丙基异硫氰酸酯、苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸加合物为有效成分的组合物，在治疗相关疾病时，可以是单独使用，也可以是联合使用，如与外科手术联合使用或与一种或多种西药联合使用或与中草药联合使用或与放射性治疗联合使用或与基因治疗联合使用或与生物调节剂联合使用等。

本发明的优点

与现有技术相比，本发明的优越性在于：

1. 本发明首次证明了异硫氰酸酯类化合物能有效促进毛发生长，从而为脱发临床预防和 /或治疗、美容或保健提供了新的途径；

2. 本发明提供了异硫氰酸酯类化合物为有效成分的外用给药制剂的组合配方；

3. 本发明揭示了异硫氰酸酯类化合物治疗雄激素性脱发的独特的作用机理:异硫氰酸酯类化合物或其衍生物、代谢物分别从雄激素受体 AR、 AR上游基因 Sp 1和 AR下游基因 PS A三个方面抑制异常的雄激素受体的转录和表达，从而有效治疗雄激素性脱发。实施例

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。实施例 1: 异硫氰酸酯类化合物的软膏剂研究

实施例 1-1 :

处方：苯乙基异硫氰酸酯 0.05%

白凡士林 50.00%

黄蜂蜡 4.95%

液体石蜡 40.00%

单硬脂酸甘油酯 5.00%

工艺：取处方量白凡士林、液体石蜡、黄蜂蜡加入到烧杯中加热，使其熔化，搅拌均匀，加入单硬脂酸甘油酯，搅匀。称取处方量苯乙基异硫氰酸酯于另一烧杯中，将上述混匀的液体以等量递增法加入到装有苯乙基异硫氰酸酯的烧杯中，混合均匀，继续搅拌至自然冷却，待液体渐渐变成粘稠状后，停止搅拌，即得。

实施例 1-2:

处方：苯甲基异硫氰酸酯 0.75%

白凡士林 51.00%

尼泊金丙酯 0.03%

黄蜂蜡 7.10%

液体石蜡 41.12%

工艺：取处方量白凡士林、尼泊金丙酯、液体石蜡、黄蜂蜡加入到烧杯中加热，使其熔化，搅拌均匀。称取处方量苯甲基异硫氰酸酯于另一烧杯中，将上述混匀的液体以等量递增法加入到装有苯甲基异硫氰酸酯的烧杯中，混合均匀，继续搅拌至自然冷却，待液体渐渐变成粘稠状后，停止搅拌，即得。

实施例 1-3 :

处方：烯丙基异硫氰酸酯 2.50%

白凡士林 91.00%

维生素 E (生育酚；） 2.00%

单硬脂酸甘油酯 4.50%

工艺：取处方量白凡士林、维生素 E加入到烧杯中加热，使其熔化，搅拌均匀，加入单硬脂酸甘油酯，搅匀。称取处方量烯丙基异硫氰酸酯于另一烧杯中，将上述混匀的液体以等量递增法加入到装有烯丙基异硫氰酸酯的烧杯中，混合均匀，继续搅拌至自然冷却，待液体渐渐变成粘稠状后，停止搅拌，即得。

实施例 1-4:

处方：苯乙基异硫氰酸酯 5.00%

白凡士林 92.00%

尼泊金丙酯 0.03%

维生素 E (生育酚；） 2.97%

工艺：取处方量白凡士林、尼泊金丙酯、维生素 E加入到烧杯中加热，使其熔化，搅拌均匀。称取处方量苯乙基异硫氰酸酯于另一烧杯中，将上述混匀的液体以等量递增法加入到装有苯乙基异硫氰酸酯的烧杯中，混合均匀，继续搅拌至自然冷却，待液体渐渐变成粘稠状后，停止搅拌，即得。

实施例 1-5 :

处方： PEITC-NAC 1.49%

甘油 9.91% 三乙醇胺 0.40%

硬脂酸 12.88%

凡士林 0.99%

液体石蜡 5.95%

单硬脂酸甘油酷 3.96%

蒸熘水 64.42%

工艺：将 PEITC-NAC、甘油和三乙醇胺加入蒸熘水中，加热溶解。取凡士林、硬脂酸、液体石蜡、单硬脂酸甘油酯加热融化形成油相。搅拌下将油相缓缓加入同温的水溶液中，继续搅拌至完全冷凝，即得。

实施例 1-6:

处方： 0.29%

硼酸钠 0.67%

白蜂蜡 6.73%

十六醇 7.69%

凡士林 17.31%

液体石蜡 41.35%

失水山梨醇脂肪酸酯 80 2.88%

羊毛脂 1.92%

蒸熘水 21.16%

工艺：将硼酸钠加入蒸熘水中，加热溶解，冷却至室温，加入 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯，搅拌溶解，得均一透明溶液。取凡士林、白蜂蜡、十六醇、液体石蜡、失水山梨醇脂肪酸酯 80、羊毛脂加热融化形成油相。搅拌下将水溶液缓缓加入同温的油相，继续搅拌至完全冷凝，即得。实施例 2: 异硫氰酸酯类化合物的酊剂研究

实施例 2-1

处方：苯乙基异硫氰酸酯 0.20%

乙醇 79.80%

丙二醇 20.00%

工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的苯乙基异硫氰酸酯，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。

实施例 2-2

处方：烯丙基异硫氰酸酯 0.20%

乙醇 79.80%

丙二醇 20.00%

工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的烯丙基异硫氰酸酯，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。

实施例 2-3

处方：苯甲基异硫氰酸酯 0.20%

乙醇 79.80%

丙二醇 20.00% 工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的苯甲基异硫氰酸酯，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。

实施例 2-4

处方：苯丙基异硫氰酸酯 0.20%

乙醇 79.80%

丙二醇 20.00%

工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的苯丙基异硫氰酸酯，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。

实施例 2-5

处方：苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸加合物 0.80%

乙醇 79.20%

丙二醇 20.00%

工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸加合物，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。

实施例 2-6

处方：异硫氰酸酯提取物 (约 2.5%) 8%

乙醇 73.6%

丙二醇 18.4%

工艺：取乙醇和丙二醇置同一烧杯中，混合均匀。另取一烧杯，精密称取处方量的异硫氰酸酯提取物，倒入少量的基质溶液，搅拌均匀后，再加入少量基质，搅拌均匀，依法操作，至足量的基质，搅拌均匀停止，即得。实施例 3: 异硫氰酸酯类化合物的搽剂研究

实施例 3-1

处方：苯乙基异硫氰酸酯 2.00%

蓖麻油 20.00%

维生素 E 1.00%

玉米油 77.00%

工艺：取苯乙基异硫氰酸醒蓖麻油、玉米油和维生素 E混合均匀即得。

实施例 3-2

处方： PEITC-NAC 0.88%

月桂氮卓酮 1.77%

甘油 8.85%

蒸熘水 88.50%

工艺：取 PEITC-NAC、月桂氮卓酮、甘油搅拌分散，加蒸熘水搅拌至完全溶解，即得。实施例 4: 异硫氰酸酯类化合物的糊剂研究

处方： PEITC-NAC 0.88%

西黄蓍胶 1.77%

羟丙甲纤维素 1.00% 甘油 7.85%

蒸熘水 88.50%

工艺：取聚冰尼丙蒸薄乙 PEITC-NAC研细过筛，加适量蒸熘水研匀。取处方量羟丙甲纤维素，加蒸熘水溶胀完全。再塯荷醇二片泊乙将西黄蓍胶与甘油调匀后，与羟丙甲纤维素和 PEITC-NAC溶液混匀，加蒸熘水烯水脑醇金

至全量，即得。实施例 5. 异硫氰酸酯类化合物的涂膜剂研究

处万： PEITC-NAC 2.50%

60.00%

醇 2.50%

10.00%

25.00%

工艺：取聚乙烯醇加入蒸熘水，充分溶胀，加热成胶浆液，乙醇与丙二醇混匀，加入 PEITC-NAC搅拌至全溶，边搅拌边加入聚乙烯醇胶浆液，搅匀，即得。实施例 6. 异硫氰酸酯类化合物的喷雾剂研究

处方： 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯 0.6%

0.12%

0.10%

0.03%

聚山梨 0 1.50%

蒸熘水加至 100%

工艺：取蒸熘水约 70 ml至 100 ml于烧杯内，加尼泊金加热至溶解，溶液放冷至室温，加入 4-磺酸基苯基异硫氰酸酯，搅拌至溶解，得均一溶液；另取冰片、薄荷脑、聚山梨酯 80搅拌使溶解，加入上述溶液中，加蒸熘水至 100%，即得。实施例 7: 软膏中有效成分的稳定性研究

实验仪器：

S.C.101型鼓风电热恒温干燥箱：浙江省嘉兴县新胜电热仪器厂， METTLER AE 100电子天平：瑞士梅特勒公司， SUMMIT HPLC: 美国戴安公司。

实验方法：

取上述实施例 1-1、 1-2、 1-3和 1-4中制剂适量，置洁净西林瓶中，加橡胶塞，铝盖密闭，置 60°C条件下放置，于第 0， 5， 10天取样，高效液相色谱法考察含量的变化。

实验结果：

实验结果如表 1所示：

结果讨论：

上述结果表明：本研究试验条件下，受试软膏中活性成分稳定性良好。实施例 8: 苯乙基异硫氰酸酯油膏刺激性试验

处方 8-1 : 苯乙基异硫氰酸酯 0.05%

白凡士林 50.00%

黄蜂蜡 2.50%

尼泊金丙酯 0.03%

液体石蜡 45.42%

维生素 E (生育酚） 1.00%

单硬脂酸甘油酯 1.00%

处方 8-2: 苯乙基异硫氰酸酯 5.00%

白凡士林 50.00%

黄蜂蜡 2.50%

尼泊金丙酯 0.03%

液体石蜡 40.47%

维生素 E (生育酚） 1.00%

单硬脂酸甘油酯 1.00%

工艺：白凡士林 +黄蜂蜡 +液体石蜡 +尼泊金丙酯置同一烧杯，加热到 ioo°c，搅拌至均匀。搅拌降温至约 70~80°C，加入单硬脂酸甘油酯，搅拌均匀，加入维生素 E，搅拌均匀。约 70°C 保温备用。另取一 25 ml小烧杯，精密称取处方量的苯乙基异硫氰酸酯，倒入适量的基质溶液， 70°C保温，搅拌至均匀，继续加入适量基质，搅拌至均匀，依法操作，直至足量，搅拌至均匀。搅拌降温，至接近粘稠时，分装。

给药方式：

分别取约 0.05g上述软膏涂抹在药物研究人员的指定位置，观察和记录给药期内皮肤变化，包括红、肿、痒、疼痛、辣等不同程度的剌激性症状。

表 2. 苯乙基异硫氰酸酯油膏剌激性试验

1分钟时产生强烈疼痛感消失，但抚疼痛感及红肿

唇上部剌激感，随后发红，摸仍有轻微疼痛完全消失，轻微

疼痛感，轻微红肿色素沉着结果与讨论：上述实验表明，所试验的异硫氰酸酯类化合物外用制剂对人体皮肤有一定的剌激性。比较不同剂量组人体剌激性反应可见，这种剌激性与受试药物中活性成分的量正相关，即随着受试药物中活性成分的量的增加，剌激性相应增大。低剂量组 2小时后，剌激性基本消失。高剂量组 2小时后，手臂、手臂内侧和耳后的剌激性基本消失，相对敏感的眼皮和唇上部仍然有一定的剌激性，但剌激性造成的损伤未经治疗，自然恢复。

毛发生长影响因素的研究表明：增加皮肤局部的血液循环，有助于毛发的生长。本试验研究结果表明，受试药物中活性成分类似于辣椒、大蒜和斑蝥酊，对皮肤有局部剌激作用，可改善给药部位血液循环，从而促进毛发生长。实施例 9: 苯乙基异硫氰酸酯的小鼠生发试验

材料与方法：

试剂：苯乙基异硫氰酸酯 (PEITC), 由无锡杰西医药科技有限公司合成， HPLC测定其含量(>99%)；其它试剂均为市售化学纯或分析纯产品。

器材： Mettler AE 100电子天平， Mettler PE 360电子天平， VWR ν-200/20-200μ1移液枪，游标卡尺，吉利牌双面刀片，奥林巴斯 μΙΟΙΟ数码相机。

动物模型：处于毛发生长终期的 7周龄雄性 C3H/HeN小鼠，购于扬州大学实验动物中心。供应常规食物和饮用水，温度 20-26°C，明暗交替时间 12h/12h。

药物治疗：受试鼠按重量随机分组，一组给药，一组阴性对照，每组 9只。将每只受试鼠背部剃去面积为 3x4cm²的毛发作为试验区域。给药组每天给药一次，每周 7天，共给药 18天。每次给浓度为 0.2%的 PEITC酊剂 (如实施例 2-1中所制备) 200μ1，均匀涂布在试验区域。自给药第一天起，观察 20天。阴性对照组同时给相等体积的空白基质，平行比较。观察与评价：

试验初期每隔一日对试验鼠处理区毛发生长状况及药物皮肤剌激性进行观察比较。当受试鼠观察区域颜色加深，即粉红色向暗灰色变化时，改为每日观察，并拍照比较。

(1)新生毛发生长评价

毛发生长速度比较：自小鼠处理区域出现毛发生长第一迹象 (皮肤颜色变深，毛囊中的黑素细胞开始合成黑色素)时，根据表 3的评价标准，评价受试鼠的毛发生长速度。

表 3. 毛发生长速度评分标准

根据表 3，对受试鼠进行评分，以受试鼠达到 ++或更高 (完全毛发生长初期)的小鼠的百分率对给药天数作图 (图 1)，评价毛发的生长。

从图 1可看出，给药组给药第 11天时，约 30%的小鼠达到 ++或更高，第 12天时， 100% 的小鼠达到 ++或更高；阴性对照组给药第 11天时，约 20%的小鼠达到 ++或更高，第 12天时，约 30%的小鼠达到 ++或更高，第 16天时，小鼠才 100%达到 ++或更高。这说明给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。

新生毛发面积比较：给药第 18天时，给药组所有小鼠的处理区域均覆盖了一层密而厚的新生毛发，覆盖率为 100%，而阴性对照组中尚有部分小鼠的处理区域未全部长毛。测量未长毛区域面积，计算得阴性对照组小鼠处理区域的平均毛发覆盖率为 87.9%，结果见表 4，据此作图比较 (图 2)。

表 4. 新生毛发面积比较

表 4中两组数据 P<0.05，具有显著性差异。试验结果说明，给药组小鼠处理区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，外观上看，尽管试验鼠的处理区域均有新生毛发，但给药组处理区域的新生毛发较密且长，而阴性对照组较稀且短。为了定量研究这一差异，分别取阴性对照组和给药组中每只小鼠，在处理区域的同一位置剃取 l x lcm²区域的新生毛发，合并后分别用电子天平称重。结果见图 3，同等面积剃取的小鼠新生毛发的总重在阴性对照组中为 0.0157g，给药组为 0.0278g，阴性对照组仅为给药组的 56.5%。这从新生毛发的质量角度，说明试验药物的确促进了新生毛发的生长。

新生毛发直观比较：由图 4可见，给药第 11天，给药组小鼠绝大部分处理区域颜色加深，而阴性对照组小鼠处理区域仍为粉红色；由图 5可见，给药第 13天，给药组小鼠处理区域颜色进一步加深且可见新生毛发，阴性对照组小鼠处理区域的颜色开始加深；由图 6可见，给药第 18天，给药组小鼠处理区域新生毛发密、长、粗，而阴性对照组大部分则稀、短、细，因此可直观的看出给药组小鼠新生毛发的生长明显好于阴性对照组。

(2)剌激性评价：整个实验过程中，阴性对照组未观察到任何剌激性症状；给药组在给药初期时皮肤红色加深，稍后仔细观察可见细微脱皮，但至给药的中后期，上述症状逐渐减弱直至消失。

结论：

处于毛发生长终期的 7周龄雄性 C₃H eN小鼠，一旦被剃毛，皮肤呈粉红色 (毛发生长终止期的视觉迹象)。根据文献报道，受试鼠毛发生长初期的第一迹象是毛囊中的黑色素细胞开始合成黑色素，从而导致皮肤颜色加深，可以观察到新生毛发的生长过程。

本试验分别从新生毛发的生长速度、生长面积和生长质量三方面观察和研究了给药组和对照组的差异。综合上述试验结果可知，不论是处理区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长密度，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分苯乙基异硫氰酸酯的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 10: 烯丙基异硫氰酸酯的小鼠生发试验

材料与方法：

试剂：烯丙基异硫氰酸酯 (AITC)，青岛加华化工；其它试剂为市售化学纯或分析纯产品。基质： 20%丙二醇 -80%乙醇溶液。

器材： Mettler AE 100电子天平， Mettler PE 360电子天平， VWR ν-200/20-200μ1移液枪，游标卡尺，吉利牌双面刀片，明基 DC E1020数码相机。

动物模型：处于毛发生长终期的 6~7周龄雄性 C3H/HeN小鼠，购于扬州大学实验动物中心。供应常规食物和饮用水，温度 20-26°C，明暗交替时间 12h/12h。

药物治疗：受试鼠按重量随机分成给药组和阴性对照组，每组 8只。将每只受试鼠背部剃去面积为 3 x4cm²的毛发作为试验区域。给药组每周 7天，每天给药一次，每次给浓度为 0.2%的 AITC酊剂 (如实施例 2-2中所制备) 200μ1，均匀涂布在试验区域，共给药 20天。给药期间，阴性对照组在试验区域平行涂布相等体积的空白基质。

观察与评价：

自给药第一天起，对试验鼠试验区域毛发生长状况及皮肤不良反应除目测观察比较外，数码相机拍照，共观察拍照 20天。

(1)新生毛发生长评价

毛发生长速度比较：自小鼠试验区域出现毛发生长第一迹象起，根据表 3的评分标准，以受试鼠达到 ++或更高 (完全毛发生长初期;)的百分率，评价受试鼠的毛发生长速度。

表 5. AITC给药组小鼠达到 ++或更高的个数及百分率

由表 5可知，给药第 12天时，约 25%的给药组小鼠达到 ++或更高；第 16天时， 100% 的小鼠达到 ++或更高。与之相对应的是，给药第 12天时，约 12.5%的阴性对照组小鼠达到 ++或更高；到第 20天试验结束时，仅约 62.5%的小鼠达到 ++或更高。试验结果表明，自第 12天开始，给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，而且第 16天时， 100%的小鼠达到 ++ 或更高。这意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。新生毛发面积比较:给药第 20天试验结束时，测量小鼠新生毛发区域面积，计算得 AITC 给药组试验区域的平均毛发覆盖率为 99.74%，阴性对照组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率仅 62.50%。试验结果说明，给药组小鼠试验区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，分别取阴性对照组和给药组中每只小鼠，在试验区域的同一位置剃取 l x lcm²区域的新生毛发，合并后分别用电子天平称重。同等面积剃取的小鼠新生毛发的平均重量在阴性对照组中为 1.90mg，给药组为 4.83mg，阴性对照组仅为给药组的 39.3%。这从新生毛发的质量角度，说明 AITC的确促进了新生毛发的生长。

(2)剌激性评价：整个实验过程中，均未观察到任何剌激性症状。

结论：

综合上述试验结果可知，不论是试验区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长质量，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分 AITC的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 11 : 苯甲基异硫氰酸酯的小鼠生发试验

材料与方法：同实施例 10，除了所用药物为苯甲基异硫氰酸酯 (BITC，购自 Adrich)的 0.2 % 酊剂 (如实施例 2-3中所制备)，每组 9只受试鼠。

观察与评价 (方法和标准同实施例 10):

(1)新生毛发生长评价

表 6. BITC给药组小鼠达到 ++或更高的个数及百分率

由表 6可知，给药第 9天时，约 11.11%的给药组小鼠达到 ++或更高；第 19天时， 100% 的小鼠达到 ++或更高。给药第 9天时， 0%的阴性对照组小鼠达到 ++或更高，到第 20天试验结束时，仅约 66.67%的小鼠达到 ++或更高。试验结果表明，自第 9天开始，给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，而且第 19天时， 100%的小鼠达到 ++或更高。这意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。

新生毛发面积比较：给药第 20天试验结束时，测量小鼠新生毛发区域面积，计算得 BITC 给药组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 91.11%，阴性对照组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率仅 66.67%。试验结果说明，给药组小鼠试验区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，同等面积 (l x lcm²)剃取的小鼠新生毛发的平均重量在阴性对照组中为 1.90mg，给药组为 6.23mg，阴性对照组仅为给药组的 30.49%。这从新生毛发的质量角度，说明试验药物的确促进了新生毛发的生长。

结论：

综合上述试验结果可知，不论是试验区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长质量，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分 BITC的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 12: 苯丙基异硫氰酸酯的小鼠生发试验

材料与方法：同实施例 10，除了所用药物为苯丙基异硫氰酸酯 (PPITC, 购自 Alfa Aesar)的 0.2 %酊剂 (如实施例 2-4中所制备；)。

观察与评价 (方法和标准同实施例 10):

(1)新生毛发生长评价

表 7. PPITC给药组小鼠达到 ++或更高的个数及百分率

由表 7可知，给药第 9天时，约 25%的给药组小鼠达到 ++或更高；第 17天时， 100%的小鼠达到 ++或更高。与之相对应的是，给药第 9天时， 0%的阴性对照组小鼠达到 ++或更高; 到第 20天试验结束时，仅约 66.7%的小鼠达到 ++或更高。试验结果表明，自第 9天开始，给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，而且第 17天时， 100%的小鼠达到 ++或更高。这意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。新生毛发面积比较:给药第 20天试验结束时，测量小鼠新生毛发区域面积，计算得 PPITC 给药组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 97.91%，阴性对照组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 62.50%。试验结果说明，给药组小鼠试验区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，同等面积 (l x lcm²)剃取的小鼠新生毛发的平均重量在阴性对照组中为 1.90mg，给药组为 7.34mg，阴性对照组仅为给药组的 25.9%。这从新生毛发的质量角度，说明试验药物的确促进了新生毛发的生长。

结论：

综合上述试验结果可知，不论是试验区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长质量，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分 PPITC的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 13: 苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸加合物的小鼠生发试验

材料与方法：同实施例 10，除了所用药物为苯乙基异硫氰酸酯 -N-乙酰半胱氨酸加合物 (PEITC-NAC, 购自无锡杰西医药科技有限公司）的 0.8 %酊剂 (如实施例 2-5中所制备)。观察与评价 (方法和标准同实施例 10):

(1)新生毛发生长评价

表 8. PEITC-NAC给药组小鼠达到 ++或更高的个数及百分率

由表 8可知，给药第 9天时，约 12.5%的给药组小鼠达到 ++或更高；第 19天时， 100% 的小鼠达到 ++或更高。与之相对应的是，给药第 9天时， 0%的阴性对照组小鼠达到 ++或更高；到第 20天试验结束时，仅约 62.5%的小鼠达到 ++或更高。试验结果表明，自第 9天开始，给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，而且第 19天时， 100%的小鼠达到 ++或更高。这意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。

新生毛发面积比较：给药第 20 天试验结束时，测量小鼠新生毛发区域面积，计算得 PEITC-NAC给药组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 88.75%，阴性对照组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 62.5%。试验结果说明，给药组小鼠试验区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，同等面积 (l x lcm²)剃取的小鼠新生毛发的平均重量在阴性对照组中为 1.90mg，给药组为 5.54mg，阴性对照组仅为给药组的 34.3%。这从新生毛发的质量角度，说明试验药物的确促进了新生毛发的生长。

结论：

综合上述试验结果可知，不论是试验区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长质量，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分 PEITC-NAC的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 14: 异硫氰酸酯提取物的小鼠生发试验

材料与方法：同实施例 10，除了所用药物为异硫氰酸酯提取物 (由无锡杰西医药科技有限公司提取)的酊齐 IJ (如实施例 2-6中所制备)，其中 PEITC含量为 0.2%。

异硫氰酸酯提取物的提取方法如下：取西洋菜干适量，用 18倍 (重量比;)的 80°C水浸泡提取 25min。残渣再加 15倍 (重量比)的 80°C水，浸泡提取 25min。将提取液在 65 °C下减压浓缩，所得浓缩液真空干燥，得浸膏粉。取 50g浸膏粉与 10g萝卜籽粉混合，加 200 ml水搅拌，室温下酶解 (在萝卜粉中的黑芥子酶作用下，浸膏粉中硫代葡萄糖苷被酶解得异硫氰酸酯)。所得酶解液用乙酸乙酯萃取，挥干有机溶剂得到油样物质。以 PEITC 对照作外标， HPLC-UV确定 PEITC峰并测定含量。

观察与评价 (方法和标准同实施例 10):

(1)新生毛发生长评价

表 9. 异硫氰酸酯提取物给药组小鼠达到 ++或更高的个数及百分率

从表 9可看出，给药第 9天时，约 12.5%的给药组小鼠达到 ++或更高；第 15天时， 100% 的小鼠达到 ++或更高。与之相对应的是，给药第 9天时， 0%的阴性对照组小鼠达到 ++或更高；到第 20天试验结束时，仅约 62.5%的小鼠达到 ++或更高。试验结果表明，自第 9天开始，给药组毛发生长速度明显优于阴性对照组，而且第 15天时， 100%的小鼠达到 ++或更高。这意味着药物的使用缩短了毛发生长终止期，促使受试小鼠更快进入毛发生长初期。

新生毛发面积比较：给药第 20天试验结束时，测量小鼠新生毛发区域面积，计算得异硫氰酸酯提取物给药组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 96.35%，阴性对照组小鼠试验区域的平均毛发覆盖率为 62.5%。试验结果说明，给药组小鼠试验区域新生毛发面积显著大于阴性对照组。

新生毛发质量比较：给药后第 20天，同等面积 (l x lcm²)剃取的小鼠新生毛发的平均重量在阴性对照组中为 1.90mg，给药组为 4.80mg，阴性对照组仅为给药组的 39.6%。这从新生毛发的质量角度，说明试验药物的确促进了新生毛发的生长。

(2)剌激性评价：整个实验过程中，可观察到剌激性。

结论：

综合上述试验结果可知，不论是试验区域的毛发生长速度，还是生长面积或生长质量，给药组均明显优于阴性对照组。这些结果说明：试验药物中的活性成分异硫氰酸酯提取物 (含 PEITC)的确可以有效促进新生毛发的生长。实施例 15: 苯乙基异硫氰酸酯对中枢神经系统、心血管、呼吸系统的影响

实验数据统计：用 SPSS 10.0 for windows软件进行数据处理。

试验动物：清洁级 ICR小鼠， 7周龄，体重 18〜20g ，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，环境温度 20〜25 °C，相对湿度 40%〜70%。普通级 Beagle犬， 10〜11月龄，体重 8〜l lkg，雌雄各半，由南京安立默科技有限公司提供，环境温度 20〜25 °C，相对湿度 40%〜70%。

试验方法与结果

中枢神经系统：

一次经口给予小鼠 30 mg/kg剂量的苯乙基异硫氰酸酯，观察苯乙基异硫氰酸酯对小鼠中枢神经系统的影响。结果如下：

(1)定性观察及半定量评价试验：经口给予苯乙基异硫氰酸酯后 30、 60、 90、 120分钟，动物外表、毛发、姿势、步态正常，无麻醉、催眠、镇静等作用，无体位变化；对痛觉和光反射活动正常，瞳孔反射正常；对小鼠翻正反射、被动状态、肌颤、流涎和眼球震颤无影响。

(2)避暗试验：经口给予苯乙基异硫氰酸酯后 30、 60、 90、 120分钟各时间段潜伏期、错误次数，给药组与对照组比较，无显著性差异。

(3)开阔场试验：给药后 90分钟，给药组雄性小鼠举前肢次数多于对照组 ( < 0.01)，其余各项指标在给药后 30、 60、 90、 120分钟，给药组与对照组比较，均无显著性差异。

(4)平衡试验：给药后 30、 60、 90、 120分钟，给药组与对照组比较，各项指标均无显著性差异。

心血管和呼吸系统：一次经口给予 Beagle犬 3 mg/kg剂量的苯乙基异硫氰酸酯，观察其对 Beagle犬心血管、呼吸系统的影响。给药后 0、 5、 15、 30、 60、 90、 120、 240分钟，给药组与对照组比较，均无显著性差异。综上所述，在本试验条件下未见苯乙基异硫氰酸酯对中枢神经系统、心血管和呼吸系统的明显影响。实施例 16: 苯乙基异硫氰酸酯长期使用安全性试验

试剂：苯乙基异硫氰酸酯 (PEITC), 购自无锡杰西医药科技有限公司， HPLC测定其含量 (>99%)；其它试剂均为市售化学纯或分析纯产品。

器材：长春迪瑞 H-100尿液分析仪， CELL-DYN3700血细胞分析仪， SYSMEX XT-2000i 血球仪，日本 Hitachi 7020生化自动分析仪， Shamd成套病理设备作石蜡包埋，切片， HE 染色， Olympus显微镜光镜观察，作组织学检查，实验数据用 SPSS 10.0软件统计处理。

试验动物：清洁级 SD大鼠，雌、雄各半，体重 80〜100g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，环境温度 20〜25 °C，相对湿度 40%〜70%。

试验方法：试验动物检疫 5天，选择 123〜149g体重的雄性大鼠按体重随机分组，选择 116〜142g体重的雌性大鼠按体重随机分对照雌组、对照雄组、给药雌组和给药雄组，每组各 20只。给药组每天经口灌胃给药。每周 6天，共 6个月。药物按 20mg/kg用玉米油稀释，对照组给予玉米油。每周随动物体重变化调整一次给药量。

试验结果：

(1)一般行为及动物死亡情况：动物一般行为未见明显异常。实验过程中无动物死亡。

(2)体重、摄食量及食饲率：给药组体重增长变化、摄食量与对照组比较未见显著性差异。食饲效率变化未见明显规律性。（3)尿常规：尿液外观未见明显的异常。尿常规检查无显著差异 (p > 0.05)。（4)血液学检查：血常规检查无显著性差异 (p > 0.05)。（5)网织红细胞计数：给药组与对照组比较无显著性差异 (p > 0.05)。（6)凝血酶原时间检查：给药组与对照组比较无显著性差异 (p > 0.05)。（7)血液生化学检查：试验末期除雄性大鼠组 GLU略高，雌性大鼠组 CREA 略低外，其余各项指标给药组与对照组比较无显著性差异。（8)大体解剖和脏器系数检查：大体解剖：未见明显异常。脏器系数检查：各组脏器系数与对照组无显著差异 (p > 0.05)。 (9) 病理组织学检查：给药组与对照组未见两组间有明显差异。

结果分析：

实验结果说明，在本实验条件下，给药组和对照组的动物体重、血、尿常规、凝血时间、血液生化和病理组织检查与 0 mg/kg组比较无明显差异。这说明长期使用受试药物是安全的。

上世纪 80年代，受试药物被发现有可能预防吸烟诱发的肺癌。上世纪末，美国食品药品管理局批准了受试药物作为肺癌预防用药的 I期临床。 2008年，该局又批准了受试药物进入 II期临床。作为健康人长期使用的预防用药，其安全性是药品审查过程中最为关注的因素。这从另一侧面说明，受试药物是安全的。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims

1. 通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物在制备促进对象毛发生长的组合物中的应用：

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n -， n为 0-4的整数；

H S

R^LX-N-C-R³ 通式 π

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

2. 如权利要求 1所述的通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物在制备促进对象毛发生长的组合物中的应用：

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n -， n为 0-4的整数；

R¹为多取代或单取代或未取代的苯基或 C₂_₄烯基，所述取代基选自：磺酸基、氨基磺酸基、氟、氯、溴、甲基、乙基、甲氧基、甲硫基、甲酰氨基、乙酰氨基、甲氨基、羧基和氰基；

H S

R^LX-N-C-R³ 通式 π

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

R³为氢或通过硫原子与 _N-C-的碳原子连接的衍生自以下化合物的基团： N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰氨基酸和半胱氨酰氨基酸 (d-C₆烷基)酯，其中所述氨基酸选自：甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸、丙氨酸、或蛋氨酸。

3. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，所述异硫氰酸酯类化合物或其衍生物为选自结构式 (1)〜(； 10)化合物中的一种或多种： CH _{i =}CH— CH ₂— MCS

(10)

4. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，所述促进毛发生长针对选自下组的疾病或症状：毛发异常脱落或毛发稀少。

5. 如权利要求 4所述的应用，其特征在于，所述毛发异常脱落选自：雄激素性脱发、斑秃、假性斑秃、脂溢性脱发、生长期脱发或休止期脱发。

6. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，所述组合物选自：药物组合物、食品、保健品或化妆品。

7. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，所述组合物的剂型选自：浴剂、洗剂、搽剂、酊剂、油剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、熨剂、贴膏、贴片、涂膜剂、膜剂、凝胶剂、巴布齐 u、穴位贴敷剂、喷雾剂、气雾剂、植入剂、乳剂、洗发液、护发素、栓剂、片剂、胶囊、丸剂、注射用粉针、注射剂或冻干粉剂。

8. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，以组合物的总重量为基准计，所述组合物中通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物的含量为 0.001〜99.9重量％。

9. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，所述组合物还含有其它预防和 /或治疗脱发的活性物质。

10. 如权利要求 1所述的应用，其特征在于，在使用所述组合物之前、同时或之后，配合使用所述其它预防和 /或治疗脱发的活性物质、实施针对脱发的外科手术或给予针对脱发的放射性治疗。

11. 一种促进对象毛发生长的组合物，其含有：

(A)有效量的通式 I所示异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物：

R^X-NCS 通式 I

在通式 I中：

NCS为异硫氰酸酯基；

X为 -(CH₂)_n -， n为 0-4的整数；

R¹为多取代或单取代或未取代的苯基或 C₂_₄烯基，所述取代基选自：磺酸基、氨基磺酸基、卤素、甲基、乙基、甲氧基、甲硫基、甲酰氨基、乙酰氨基、甲氨基、乙氨基、羧基 H S

R^LX-N-C-R³ 通式 n

通式 II中：

R¹和 X如通式 I中所定义；

H S

R³为氢或通过硫原子与 _N-C-的碳原子连接的衍生自以下化合物的基团： _N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、半胱氨酸 (d-C₆烷基)酯、半胱氨酰氨基酸和半胱氨酰氨基酸 (d-C₆烷基)酯;

(B)药学上可接受的载体、食品、保健品或化妆品可接受的载体；以及

(C)一种或多种其它预防和 /或治疗脱发的活性物质。

12. 如权利要求 11所述的组合物，其特征在于，所述组合物中的载体为油脂性基质或水溶性基质。

13. 如权利要求 11所述的组合物，其特征在于，所述油脂性基质为选自 (bl)中的一种或多种，所述水溶性基质为选自 (b2)中的一种或多种：

14. 如权利要求 11所述的组合物，其特征在于，所述其它预防和 /或治疗脱发的活性物质为选自下组的一种或多种： 5α-还原酶抑制剂、雄激素拮抗剂或钾离子通道开放剂。

15. 一种美容方法，所述方法包括给予对象通式 I所示的异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物或权利要求 11-14中任一项所述的组合物以促进所述对象毛发的生长。

16. 一种预防和 /或治疗脱发的方法，所述方法包括给予需要所述预防和 /或治疗的对象有效量的通式 I所示的异硫氰酸酯类化合物或其具有通式 II的衍生物或权利要求 11-14中任一项所述的组合物。