WO2010137335A1 - α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物 - Google Patents

α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物 Download PDF

Info

Publication number
WO2010137335A1
WO2010137335A1 PCT/JP2010/003578 JP2010003578W WO2010137335A1 WO 2010137335 A1 WO2010137335 A1 WO 2010137335A1 JP 2010003578 W JP2010003578 W JP 2010003578W WO 2010137335 A1 WO2010137335 A1 WO 2010137335A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lipoic acid
added
nanoparticles
solution
ion
Prior art date
Application number
PCT/JP2010/003578
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
西裏宏美
野村耕司
杉本和久
山口葉子
久保田芳樹
秋山香織
石松朋子
Original Assignee
江崎グリコ株式会社
株式会社ナノエッグ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 江崎グリコ株式会社, 株式会社ナノエッグ filed Critical 江崎グリコ株式会社
Priority to JP2011515906A priority Critical patent/JPWO2010137335A1/ja
Publication of WO2010137335A1 publication Critical patent/WO2010137335A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/385—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having two or more sulfur atoms in the same ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Definitions

  • the present invention relates to a composition for promoting skin turnover containing ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • ⁇ -Lipoic acid is a kind of coenzyme contained in the living body and acting on sugar metabolism and TCA cycle rotation.
  • the structural formula is C 8 H 14 O 2 S 2 , the molecular weight is 206.3, the yellow crystal has a melting point of 60 It is a substance at ⁇ 62 ° C.
  • ⁇ -Lipoic acid is also present in the human body and is also found in many foods such as broccoli and red meat. Therefore, ⁇ -lipoic acid can be said to be a highly safe substance.
  • ⁇ -lipoic acid has been found to have a strong antioxidant power in vivo, to reduce oxidative stress, and to be an effective chelating agent for heavy metal excretion.
  • thioctic acid ⁇ -Lipoic acid is currently blended in pharmaceuticals as “thioctic acid”, and thioctic acid preparations are usually sold as injections.
  • the efficacy and effects of thioctic acid preparations include supplementation when demand for thioctic acid increases (during intense physical labor), Lee syndrome (subacute necrotizing encephalomyelitis), toxicity (due to streptomycin and kanamycin), and noise characteristics (Occupational) inner ear deafness is described in Japanese Pharmaceutical Collection Medical Drugs (Non-patent Document 1).
  • ⁇ -Lipoic acid has been approved for use in foods and cosmetics in Japan due to recent deregulation, so further application in these fields is expected.
  • ⁇ -Lipoic acid has a yellow powder-like property, but its use is limited because it is hardly soluble in water. Further, ⁇ -lipoic acid is very unstable to heat and light, and it is difficult to stably exist in the preparation. Furthermore, ⁇ -lipoic acid has a characteristic sulfur odor, and it becomes a problem that its odor becomes stronger when it is altered, and it becomes a gum due to heat. For use in foods, cosmetics and pharmaceuticals, these There is a big problem in terms of quality and usability.
  • Non-Patent Document 2 describes that (1) the stability of ⁇ -lipoic acid in an aqueous solution is improved by nanoencapsulation; (2) a wrinkle model mouse obtained by irradiating a hairless mouse with ultraviolet light. Study of anti-wrinkle effect; and (3) Study of anti-wrinkle effect in humans are described. However, Non-Patent Document 2 does not disclose any relation between the ⁇ -lipoic acid nanocapsules and the effect of promoting the turnover.
  • Non-Patent Document 3 describes that ⁇ -lipoic acid has a cosmetic function by inhibiting melanin production and fibroblast proliferation.
  • B16 melanoma was cultured in the presence of ⁇ -lipoic acid (25 to 100 ⁇ g / mL), and as a result, a concentration-dependent inhibitory effect on melanin production was observed.
  • ⁇ -lipoic acid (1, 5 or 25 mg / kg) was continuously administered to brown guinea pigs, and pigmentation was induced on the back by ultraviolet irradiation.
  • Non-Patent Document 4 discloses the same contents as Non-Patent Document 3. However, ⁇ -lipoic acid used in Non-Patent Documents 3 and 4 was not nanoparticles.
  • the present invention is intended to solve the above-described problems, and an object thereof is to provide a composition for promoting skin turnover.
  • the present inventors have used nonionic surfactants, divalent metal ions, carbonate ions or phosphate ions in a specific order. It was found that by using the ⁇ -lipoic acid nanoparticles produced, an excellent turnover promoting effect was obtained, and the present invention was completed based on this.
  • ⁇ -lipoic acid ( ⁇ -lipoic acid; LA) is an amphiphilic low-molecular sulfur-containing fatty acid.
  • ⁇ -Lipoic acid is known to act as a cofactor of mitochondrial enzymes and to be involved in energy metabolism.
  • the present inventors have analyzed the pharmacological effects of ⁇ -lipoic acid nanoparticles of a novel DDS (Drug Delivery System) formulation in which LA is nano-encapsulated.
  • DDS Drug Delivery System
  • the present inventors have analyzed the dye discharging effect of ⁇ -lipoic acid nanoparticles. As a result, contrary to expectations, a higher pigment excretion effect was observed in the ⁇ -lipoic acid nanoparticle-administered group than in the LA-administered group. Furthermore, histological analysis suggested that ⁇ -lipoic acid nanoparticles accelerate skin epidermal turnover.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention are produced by utilizing the amphipathic property of ⁇ -lipoic acid.
  • ⁇ -Lipoic acid is very poorly soluble in water under acidic or neutral conditions, but becomes transparent when alkali is added.
  • ⁇ -Lipoic acid in an alkaline solution is thought to form spherical micelles in water. Subsequently, when a nonionic surfactant is added to ⁇ -lipoic acid, mixed micelles of ⁇ -lipoic acid and nonionic surfactant are considered to be formed.
  • the divalent metal cation is bound to the negative charge of the lipoic acid ion to prevent aggregation and precipitation of ⁇ -lipoic acid. It is thought that micelles having a spherical shape or an oval shape in which divalent metal ions are bonded to the acid surface are formed. Further, a divalent anion is added to adsorb (bond) the divalent anion to the metal ion on the micelle surface to neutralize the micelle surface charge. As a result, a polyvalent metal inorganic salt film is formed on the micelle surface, and it is considered that the polyvalent metal inorganic salt film ⁇ -lipoic acid nanoparticles are prepared.
  • ⁇ -lipoic acid micelles are used as a template, so that the encapsulation rate corresponds to the concentration excluding monodisperse ⁇ -lipoic acid molecules and is considered to be close to 100%. It is considered that the hydrophilic group of the nonionic surfactant is exposed on the surface of the nanoparticle.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention are transparently dispersed in water.
  • polyvalent metal inorganic salt crystals such as CaCO 3 do not dissolve in water, but are considered to have a vaterite or amorphous structure on the surface of the nanoparticles and gradually dissolve in vivo. Therefore, the composition of the present invention is expected to have a DDS effect in which ⁇ -lipoic acid is gradually released.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention are solubilized in a certain nonionic surfactant, and ⁇ -lipoic acid is dispersed in water to form ⁇ -lipoic acid.
  • a divalent metal halide, acetate or gluconate is added to the negative charge of ⁇ -lipoic acid ion. Bind cations.
  • the presence of the surfactant prevents the aggregation and precipitation of ⁇ -lipoic acid, thereby forming spherical or oval micelles in which divalent metal ions are bound to the surface of lipoic acid.
  • Divalent anions alkali metal carbonates or alkali metal phosphates
  • the divalent anions are adsorbed (bonded) to the metal ions on the micelle surface to charge the micelle surface.
  • a polyvalent metal inorganic salt film is formed on the micelle surface, and it is considered that the polyvalent metal inorganic salt film ⁇ -lipoic acid nanoparticles are prepared.
  • the present invention provides, for example, the following means: (Item 1) A composition for promoting skin turnover, the composition comprising ⁇ -lipoic acid nanoparticles, the ⁇ -lipoic acid nanoparticles being non-ionic with ⁇ -lipoic acid A composition comprising a surfactant, a divalent metal ion, and a carbonate ion or a phosphate ion.
  • composition according to item 1 which is a composition for discharging skin melanin, for wound healing, or for promoting skin regeneration.
  • the nonionic surfactant is polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, sucrose fatty acid ester, and polyglycerin fatty acid. 4. The composition according to any one of items 1 to 3, which is selected from the group consisting of esters.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles are preparing an aqueous dispersion comprising ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant; Adding a divalent metal salt to the aqueous dispersion, wherein the divalent metal salt is a divalent metal halide, divalent metal acetate or divalent metal glucone oxide; and Items 1 to 5 produced by a method comprising a step of forming an ⁇ -lipoic acid nanoparticle by adding an alkali metal carbonate or an alkali metal phosphate to an aqueous dispersion to which a divalent metal salt is added.
  • the step of preparing an aqueous dispersion containing the ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant comprises: Including dissolving ⁇ -lipoic acid in a liquid nonionic surfactant to obtain a surfactant solution; and adding water or a water-containing liquid to the surfactant solution to obtain an aqueous dispersion.
  • Item 7 The composition according to Item 6.
  • the step of preparing an aqueous dispersion containing the ⁇ -lipoic acid and the nonionic surfactant produces an ⁇ -lipoic acid-containing aqueous solution by preparing a mixture of ⁇ -lipoic acid, an alkaline substance and water.
  • the composition according to item 6, comprising preparing a dispersion; and adding a nonionic surfactant to the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion.
  • the divalent metal salt is calcium chloride, calcium bromide, calcium fluoride, calcium iodide, magnesium chloride, magnesium bromide, magnesium fluoride, magnesium iodide, zinc chloride, zinc bromide, fluoride.
  • Item 9 The composition according to any one of Items 6 to 8, selected from the group consisting of zinc, zinc iodide, calcium acetate, magnesium acetate, zinc acetate, calcium gluconate, magnesium gluconate and zinc gluconate.
  • composition according to any one of items 6 to 9, wherein the divalent metal salt is selected from the group consisting of calcium chloride, magnesium chloride and zinc gluconate.
  • the nonionic surfactant is polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, sucrose fatty acid ester, and polyglycerin fatty acid.
  • the nonionic surfactant is polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20) octyldodecyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20) stearyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20). Any one of Items 6 to 14 selected from the group consisting of polyoxypropylene (degree of polymerization 4 to 8) cetyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 20 to 100) hydrogenated castor oil and sucrose laurate The composition as described.
  • composition of the present invention significantly promotes skin turnover.
  • compositions of the present invention also significantly promote melanin excretion.
  • FIG. 1 shows the results of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles prepared using distilled water in Example 1 using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics ELS-710TY).
  • FIG. 2 shows the result of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid nanoparticles produced using ion-exchanged water in Comparative Example 1A using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics ELS-710TY).
  • FIG. 3 shows the result of the residual ratio of ⁇ -lipoic acid.
  • FIG. 4 shows the results of Test Example 3.
  • FIG. 5 shows the results of Test Example 4.
  • FIG. 6 shows a wrinkle replica of Test Example 4.
  • FIG. 7 shows the results of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles prepared using distilled water in Example 22A using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • FIG. 4 shows the results of Test Example 3.
  • FIG. 5 shows the results of Test Example 4.
  • FIG. 6 shows a wrinkle replica of Test Example 4.
  • FIG. 7 shows the results of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles prepared using distilled water in Example 22A using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • FIG. 8 shows the result of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles prepared using distilled water in Example 29B using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • FIG. 9 shows the results of Test Example 5.
  • FIG. 10 shows the results of Test Example 6.
  • FIG. 11 shows that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles were added to the 3T3-L1 cell culture medium in Test Example 7, fat accumulated in immature adipocytes was stained with oil red O, and an absorptiometer (wavelength 520 nm). ) Shows the measurement results.
  • FIG. 12 shows that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles were added to the 3T3-L1 cell culture medium in Test Example 8, and fat accumulated in mature adipocytes was stained with oil red O, and an absorptiometer (wavelength 520 nm). The measurement result is shown.
  • FIG. 13 shows the concentration of ⁇ -lipoic acid in the cell lysate obtained by crushing immature adipocytes cultured by adding ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles to the 3T3-L1 cell culture solution in Test Example 9. The result measured by the graph mass spectrometer is shown.
  • FIG. 13 shows the concentration of ⁇ -lipoic acid in the cell lysate obtained by crushing immature adipocytes cultured by adding ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles to the 3T3-L1 cell culture solution in Test Example 9. The result measured by the graph mass spectrometer is shown.
  • FIG. 14 shows the high-performance liquid chromatographic mass of ⁇ -lipoic acid concentration in the immature adipocyte culture supernatant obtained by adding ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles to the 3T3-L1 cell culture in Test Example 9 and culturing. The result measured by the analyzer is shown.
  • FIG. 15 shows an example of evaluation criteria for a sputum model mouse produced in Test Example 10.
  • FIG. 16 shows a mouse replica prepared by applying ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles to the mouse model mouse prepared in Test Example 6 for 6 weeks and the score of the mouse.
  • FIG. 17 shows the results of hyaluronic acid staining of a skin model mouse skin section prepared in Test Example 10.
  • FIG. 18 shows a saddle replica of Test Example 11.
  • FIG. 19 shows the results of hyaluronic acid ELISA for the cell lysate fraction of Test Example 12.
  • FIG. 20 is a photograph of the back skin of a guinea pig on which the ⁇ -lipoic acid dispersion liquid of Comparative Example 60 was applied on the application start date and the application day 11 of Test Example 14.
  • 21 is a photograph of the back skin of a guinea pig on which the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle dispersion liquid of Example 60 was applied on the application start date and the application day 11 of Test Example 14.
  • FIG. 22 is a photograph of the back skin of a guinea pig on which the ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticle dispersion liquid of Example 61 was applied on the application start date and the application day 11 of Test Example 14.
  • FIG. 23 is a photograph of guinea pig dorsal skin with water applied or untreated on the application start date and application day 11 of Test Example 14.
  • FIG. 24 is a photomicrograph of a guinea pig dorsal skin tissue section stained with hematoxylin and eosin on the 11th day of application in Test Example 14.
  • FIG. 25 shows the results of Test Example 17.
  • FIG. 26 shows the results of Test Example 17. It represents the average thickness of the epidermal layer in the analysis of skin tissue staining image collected every day after application.
  • FIG. 27 is a photomicrograph of a mouse dorsal skin tissue section 3 days after application in Test Example 17 immunostained with Ki-67 antibody. Gray represents the cell nucleus. Cells that are double-stained with nuclei and a positive signal and become black represent immunostaining positive cells.
  • the composition of the present invention is a composition for promoting skin turnover, and the composition contains ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention contain ⁇ -lipoic acid, a nonionic surfactant, a divalent metal ion, and a carbonate ion or a phosphate ion.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention are produced using ⁇ -lipoic acid, a nonionic surfactant, a divalent metal salt, an alkali metal carbonate or an alkali metal phosphate.
  • a person skilled in the art can use other materials as necessary, such as an alkaline aqueous solution, in the production method of the present invention.
  • the ⁇ -lipoic acid used in the present invention can be any ⁇ -lipoic acid known in the art.
  • ⁇ -Lipoic acid is also known as thioctic acid.
  • the ⁇ -lipoic acid may be any of R, S-(+/ ⁇ )- ⁇ -lipoic acid, R-(+)- ⁇ -lipoic acid, and S-( ⁇ )- ⁇ -lipoic acid.
  • ⁇ -Lipoic acid may be in the form of an acid or a salt. Any commercially available ⁇ -lipoic acid can be used.
  • ⁇ -Lipoic acid can be in the form of a powder or crystals.
  • the nonionic surfactant used in the present invention can be any surfactant as long as it is nonionic.
  • examples of the nonionic surfactant used in the present invention include, but are not limited to, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether , Polyglycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, propylene glycol fatty acid ester, monoglycerin fatty acid ester, diglycerin fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene fatty acid ester and the like.
  • nonionic surfactant used in the present invention those having an HLB value of about 10 or more are particularly preferable.
  • examples of the nonionic surfactant used in the present invention include polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, sucrose fatty acid ester and polyoxyethylene alkyl ether.
  • a nonionic surfactant selected from the group consisting of glycerin fatty acid esters and having an HLB value of about 10 or more is preferred.
  • the nonionic surfactant further comprises polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20) octyldodecyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20) stearyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 10 to 20). It is particularly preferred to be selected from the group consisting of polyoxypropylene (degree of polymerization 4 to 8) cetyl ether, polyoxyethylene (degree of polymerization 20 to 100) hydrogenated castor oil and sucrose laurate. In the present invention, one kind of nonionic surfactant may be used, or two or more kinds of nonionic surfactants may be used in combination.
  • the HLB value of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is preferably about 10 or more, more preferably about 12 or more, and most preferably about 14 or more; the HLB value of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is , Preferably about 20 or less, more preferably about 18 or less, and most preferably about 16 or less.
  • Nonionic surfactants may be solid at room temperature (ie, surfactants having a melting point higher than room temperature) or liquid at room temperature (ie, surfactants having a melting point lower than room temperature). It may be.
  • liquid nonionic surfactant refers to an embodiment using a nonionic surfactant that is liquid at room temperature, and heating a nonionic surfactant that is solid at room temperature. It is used with respect to both the embodiment in which it is melted and used as a liquid.
  • the HLB value is 0 when the amount of the hydrophilic group in the molecule is 0%, and 20 when the amount is 100%.
  • the HLB value represents the size and strength of hydrophilic and hydrophobic groups that form a surfactant molecule in a surfactant, and a surfactant having a high hydrophobicity has a low HLB value and a high hydrophilicity. Has a large HLB value.
  • polyoxyethylene hydrogenated castor oil examples include polyoxyethylene hydrogenated castor oil having an arbitrary degree of polymerization of ethylene oxide. For example, those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 10 or more are preferred, and those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 200 or less are preferred. Examples of even more preferred polyoxyethylene hydrogenated castor oil include polyoxyethylene hydrogenated castor oil 40, polyoxyethylene hydrogenated castor oil 60, and polyoxyethylene hydrogenated castor oil 80. This number represents the degree of polymerization of ethylene oxide. For example, polyoxyethylene hydrogenated castor oil 40 indicates that the number of added moles of ethylene oxide is 40.
  • polyoxyethylene alkyl ethers preferably used in the present invention include polyoxyethylene alkyl ethers having an arbitrary degree of polymerization of ethylene oxide. Those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 10 or more are preferred, and those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 20 or less are preferred. Examples of even more preferred polyoxyethylene alkyl ethers include, for example, polyoxyethylene (20) stearyl ether (also described as POE (20) stearyl ether), polyoxyethylene (20) octyldodecyl ether (POE (20)). Octyldodecyl ether) and polyoxyethylene (20) isostearyl ether (POE (20) isostearyl ether). This number (20) indicates that the degree of polymerization of ethylene oxide is 20.
  • polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters suitably used in the present invention include polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters having an arbitrary degree of polymerization of ethylene oxide. Those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 10 or more are preferred, and those having a degree of polymerization of ethylene oxide of about 20 or less are preferred.
  • Examples of even more preferred polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters include, for example, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate (also described as POE (20) sorbitan monooleate), polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate Rate (also described as POE (20) sorbitan monolaurate), polyoxyethylene (20) sorbitan monostearate (also described as POE (20) sorbitan monostearate), polyoxyethylene (20) sorbitan monopalmi Tate (also described as POE (20) sorbitan monopalmitate) and polyoxyethylene (20) sorbitan trioleate (also described as POE (20) sorbitan trioleate).
  • This number (20) indicates that the degree of polymerization of ethylene oxide is 20.
  • polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ethers preferably used in the present invention include polyoxyethylene polyoxypropylene ethers having any degree of polymerization of ethylene oxide. Those having a degree of polymerization of the polyoxyethylene moiety of about 10 or more are preferred, and those having a degree of polymerization of the polyoxyethylene moiety of about 20 or less are preferred. A polyoxypropylene moiety having a degree of polymerization of about 4 or more is preferred, and a polyoxypropylene part having a degree of polymerization of about 8 or less is preferred.
  • Examples of even more preferred polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ethers include, for example, polyoxyethylene (20) polyoxypropylene (8) cetyl ether (also described as POE (20) POP (8) cetyl ether), poly Oxyethylene (20) polyoxypropylene (4) cetyl ether (also described as POE (20) POP (4) cetyl ether), polyoxyethylene (34) polyoxypropylene (23) cetyl ether (POE (34) POP) (23) also described as cetyl ether), polyoxyethylene polyoxyethylene propylene decyl tetradecyl ether (also described as POEPOE propylene decyl tetradecyl ether) and polyoxyethylene (20) isostearyl ether (POE (20) also described as isostearyl ether) and the like.
  • polyoxyethylene (20) polyoxypropylene (8) cetyl ether also described as POE (20) POP (8) cetyl ether
  • polyglycerol fatty acid esters suitably used in the present invention include decaglycerol monolaurate, decaglycerol monomyristate, decaglycerol monooleate and decaglycerol monostearate.
  • the HLB value of the polyglycerol fatty acid ester to be used is not particularly limited, but the HLB value is preferably about 8 or more, more preferably about 10 or more, and further preferably about 12 or more.
  • the HLB value is preferably about 20 or less, more preferably about 19 or less, and still more preferably about 18 or less.
  • sucrose fatty acid esters suitably used in the present invention include, for example, sucrose stearic acid ester, sucrose palmitic acid ester, sucrose myristic acid ester, and sucrose lauric acid ester. Of these, sucrose laurate is more preferably used.
  • the content of the surfactant in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles varies depending on the type of the surfactant.
  • the amount of the surfactant is preferably about 1 time or more, more preferably about 2 times or more, still more preferably about 3 times or more, particularly preferably about 4 times or more of the weight of ⁇ -lipoic acid. And most preferably about 5 times or more.
  • the amount of the surfactant is preferably not more than about 40 times, more preferably not more than about 35 times, still more preferably not more than about 30 times, particularly preferably not more than about 25 times the weight of ⁇ -lipoic acid. And most preferably about 20 times or less.
  • the nanoparticles tend to aggregate and it may be difficult to obtain transparent and stable particles. If the amount of the surfactant for ⁇ -lipoic acid is too large, the effect obtained by increasing the added amount will not increase so much, and the content of ⁇ -lipoic acid will be relatively reduced. When this nanoparticle is used for food, the taste derived from the surfactant is expressed and the commercial value is lowered.
  • divalent metal salt In the present invention, a divalent metal salt is used.
  • divalent metal salts that can be used include divalent metal halides, divalent metal acetates and divalent metal glucone oxides.
  • Divalent metal acetate is a salt of acetic acid and a divalent metal, also called a divalent metal salt of acetic acid.
  • the divalent metal glucone oxide is a salt of gluconic acid and a divalent metal, and is also called a gluconic acid divalent metal salt.
  • the divalent metal salt is preferably calcium chloride, calcium bromide, calcium fluoride, calcium iodide, magnesium chloride, magnesium bromide, magnesium fluoride, magnesium iodide, zinc chloride, zinc bromide, zinc fluoride, iodine.
  • divalent metal salts Selected from the group consisting of zinc chloride, calcium acetate, magnesium acetate, zinc acetate, calcium gluconate, magnesium gluconate and zinc gluconate, more preferably selected from the group consisting of magnesium chloride, calcium chloride and zinc gluconate .
  • divalent metal salts can be used. One kind of divalent metal salt may be used, or two or more kinds of divalent metal salts may be mixed and used. It is preferable to use one kind of divalent metal salt.
  • alkali metal carbonate or alkali metal phosphate is used.
  • alkali metal in the alkali metal carbonate or alkali metal phosphate include sodium, potassium, lithium, rubidium, cesium and francium.
  • the alkali metal is preferably sodium or potassium, more preferably sodium.
  • alkali metal carbonates that can be used in the present invention include sodium carbonate, potassium carbonate, sodium bicarbonate and potassium bicarbonate, with sodium carbonate being preferred.
  • alkali metal phosphates that can be used in the present invention include, for example, sodium phosphate and potassium phosphate.
  • the sodium phosphate may be sodium metaphosphate, disodium hydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, trisodium phosphate, sodium pyrophosphate or sodium hydrogen pyrophosphate, preferably disodium hydrogen phosphate.
  • the potassium phosphate may be potassium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate or tripotassium phosphate, preferably dipotassium hydrogen phosphate.
  • alkali metal carbonates and alkali metal phosphates can be used.
  • One kind of alkali metal carbonate or alkali metal phosphate may be used, and two or more kinds of alkali metal carbonate or alkali metal phosphate may be mixed and used. It is preferable to use one kind of alkali metal carbonate or alkali metal phosphate.
  • additives can be used.
  • the additive is preferably a water-soluble polymer.
  • examples of the additive include polyethylene glycol, plant polymer, microbial polymer, animal polymer, starches and dextrins, celluloses, vinyl polymer and acrylic polymer.
  • Polyethylene glycol is a substance represented by HO (CH 2 CH 2 O) n H.
  • Polyethylene glycol is a polyether having a structure that is considered to be produced by dehydration polycondensation of ethylene glycol, and both terminals are hydroxyl groups.
  • Various ones having a molecular weight of about 200 to about 20,000 are known.
  • Polyethylene glycol is liquid when the molecular weight is about 200 to about 600, and solid when the molecular weight exceeds about 1000. Since polyethylene glycol is a polymer, it is usually sold as a mixture of molecules of various molecular weights.
  • the number average molecular weight of polyethylene glycol is preferably about 500 or more, more preferably about 600 or more, still more preferably about 700 or more, still more preferably about 800 or more, and particularly preferably about 900 or more. And most preferably about 1,000 or more.
  • the number average molecular weight of polyethylene glycol is preferably about 10,000 or less, more preferably about 9,000 or less, still more preferably about 8,000 or less, and still more preferably about 7,000 or less. Particularly preferably no more than about 6,500, and most preferably no more than about 2,000.
  • Examples of polyethylene glycol suitably used in the present invention include polyethylene glycol 1000, polyethylene glycol 4000, and polyethylene glycol 6000.
  • Plant polymer refers to a polymer extracted or purified from a plant.
  • plant polymers include gum arabic, gum tragacanth, galactan, guar gum, locust bean gum, carrageenan, pectin, quince seed (quince seed) extract, brown alga powder and the like.
  • Microbial polymer means a polymer extracted or purified from microorganisms.
  • examples of the microbial polymer include xanthan gum, dextran, pullulan and the like.
  • Animal polymer refers to a polymer extracted or purified from an animal.
  • animal macromolecules include collagen, casein, albumin, gelatin, hyaluronic acid and the like.
  • Starches and dextrins refer to starch and dextrin, and their chemically modified products, enzyme-treated products, and physically-treated products.
  • the starches are preferably chemically modified starches. Examples of starches include carboxymethyl starch and methylhydroxy starch.
  • Cellulose refers to celluloses and their chemically modified products, enzyme-treated products and physical-treated products.
  • celluloses include methyl cellulose, nitrocellulose, ethyl cellulose, methyl hydroxypropyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, cellulose sulfate, hydroxypropyl cellulose, carboxymethyl cellulose, crystalline cellulose, cellulose powder and the like.
  • the vinyl polymer is a polymer obtained by polymerizing a vinyl monomer.
  • vinyl polymers include polyvinyl alcohol, polyvinyl methyl ether, polyvinyl pyrrolidone, carboxyvinyl polymer, and the like.
  • An acrylic polymer refers to a polymer obtained by polymerizing an acrylic monomer.
  • examples of the acrylic polymer include polyacrylic acid and its salt, polyacrylimide and the like.
  • the method for producing ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention comprises a step of preparing an aqueous dispersion containing ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant; a divalent metal salt is added to the aqueous dispersion; A step of adding, wherein the divalent metal salt is a divalent metal halide, divalent metal acetate or divalent metal glucone oxide; and an aqueous dispersion to which the divalent metal salt is added. Adding an alkali metal carbonate or alkali metal phosphate to form ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • the step of preparing an aqueous dispersion containing ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant comprises dissolving ⁇ -lipoic acid in a liquid nonionic surfactant and a surfactant solution. And adding water or a water-containing liquid to the surfactant solution to obtain an aqueous dispersion.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles can be produced by performing the steps including “2a-1”, “2b-1”, “2c” and “2d” described below.
  • the step of preparing the aqueous dispersion containing the ⁇ -lipoic acid and the nonionic surfactant comprises preparing a mixture of ⁇ -lipoic acid, an alkaline substance and water to produce ⁇ -lipoic acid. Preparing an acid-containing aqueous dispersion; and adding a nonionic surfactant to the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles can be produced by performing the steps including “2a-2”, “2b-2”, “2c” and “2d” described below.
  • the method of ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention prepares an ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion by making a mixture of ⁇ -lipoic acid, an alkaline substance and water.
  • a step (considered that ⁇ -lipoic acid forms micelles in the aqueous dispersion); a step of adding a nonionic surfactant to the aqueous dispersion (of ⁇ -lipoic acid and nonionic surfactant) It is considered that mixed micelles are formed); a step of adding a divalent metal salt to the aqueous dispersion, wherein the divalent metal salt is a divalent metal halide, divalent metal acetate or divalent metal glucone A step of being an oxide; and a step of adding an alkali metal carbonate or an alkali metal phosphate to an aqueous dispersion to which the divalent metal salt is added to form ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • Step of dissolving ⁇ -lipoic acid in a liquid nonionic surfactant An embodiment in which ⁇ -lipoic acid is first dissolved in a nonionic surfactant is described.
  • a nonionic surfactant is used as a solvent. That is, a surfactant solution is prepared.
  • ⁇ -lipoic acid is dissolved in a liquid nonionic surfactant to obtain a surfactant solution.
  • This ⁇ -lipoic acid may be added directly to the nonionic surfactant or indirectly. “Adding indirectly” means adding after mixing with other substances. For example, ⁇ -lipoic acid may be mixed with the additive and then added to the nonionic surfactant.
  • ⁇ -Lipoic acid is usually marketed in the form of crystals or powder.
  • ⁇ -lipoic acid is almost completely dissolved in the liquid nonionic surfactant.
  • the nonionic surfactant is liquid at room temperature, this dissolution operation can be performed at room temperature, but if necessary, the dissolution operation may be performed by heating. If the nonionic surfactant is solid at room temperature, the nonionic surfactant is heated to make it liquid and this dissolution operation is performed.
  • the above-mentioned additives may be added to the nonionic surfactant as necessary.
  • the amount of water mixed in preparing the surfactant solution is preferably about 50 parts by weight or less, more preferably about 20 parts by weight or less with respect to 100 parts by weight of ⁇ -lipoic acid. , About 10 parts by weight or less, more preferably about 5 parts by weight or less, and particularly preferably about 1 part by weight or less. There is no particular lower limit on the amount of water, but conditions in which about 0.001 part by weight or more, about 0.01 part by weight or more, or about 0.1 part by weight or more of water is mixed with 100 parts by weight of ⁇ -lipoic acid May be adopted.
  • ⁇ -Lipoic acid is soluble in alcohol, but in the present invention, it is preferable not to use alcohol substantially.
  • the use of alcohol can adversely affect the micelle formation efficiency of ⁇ -lipoic acid. Therefore, for example, with respect to 100 parts by weight of ⁇ -lipoic acid, the amount of alcohol used is preferably about 10 parts by weight or less, more preferably about 5 parts by weight or less, and about 1 part by weight or less. More preferred is about 0.5 parts by weight or less, and most preferred is about 0.1 parts by weight or less.
  • the lower limit of the amount of alcohol used is not particularly limited. For example, the amount of alcohol used is about 0.01 parts by weight or more with respect to 100 parts by weight of ⁇ -lipoic acid. It is possible to set.
  • an alkaline compound is used when ⁇ -lipoic acid is dissolved.
  • the dissolution operation is preferably performed without using a material other than ⁇ -lipoic acid and the nonionic surfactant.
  • the dissolution operation can be performed without substantially using an alkaline compound. Therefore, with respect to the amount of the alkaline compound used in the dissolution operation, for example, the amount of the alkaline compound used can be 5 parts by weight or less with respect to 100 parts by weight of ⁇ -lipoic acid. 1 part by weight or less, can be about 0.5 part by weight or less, can be about 0.1 part by weight or less, and can be about 0.05 part by weight or less. It is also possible to make it about 0.01 part by weight or less.
  • an alkali may be added simultaneously with water if necessary, and alkaline water (for example, a basic compound) may be added. May be added.
  • a nonionic surfactant having a melting point of room temperature or higher is melted by heating. Heating may be performed so that the nonionic surfactant to be used has a temperature sufficient to melt. Excessive heating such that the temperature of the nonionic surfactant is about 70 ° C. or higher is not preferable because ⁇ -lipoic acid may be decomposed.
  • the temperature of the nonionic surfactant when ⁇ -lipoic acid is added is higher than the melting point of the nonionic surfactant and is preferably (melting point + 20 ° C.) or less, and (melting point + 15 ° C.) or less. More preferably, it is most preferably (melting point + 10 ° C.) or less.
  • the substance may also be mixed.
  • a mixture may be prepared by adding ⁇ -lipoic acid after mixing a nonionic surfactant and an additive (for example, polyethylene glycol).
  • an additive for example, polyethylene glycol
  • an additive for example, polyethylene glycol
  • the amount of ⁇ -lipoic acid is selected so that the concentration of ⁇ -lipoic acid in the aqueous dispersion containing ⁇ -lipoic acid obtained in step 2b-1 is not less than the critical micelle concentration.
  • the concentration of ⁇ -lipoic acid in the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is preferably about 0.1% by weight or more, more preferably about 0.5% by weight or more, and more preferably about 1.0% by weight. % By weight or more.
  • the concentration of ⁇ -lipoic acid in the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is preferably about 20% by weight or less, more preferably about 16% by weight or less, and further preferably about 14% by weight or less. Particularly preferred is about 12% by weight or less, and most preferred is about 10% by weight or less.
  • the amount of the nonionic surfactant used to dissolve ⁇ -lipoic acid can be arbitrarily selected, but when the amount of ⁇ -lipoic acid is 100, it is preferably about 100 by weight. More preferably, it is about 200 or more, more preferably about 300 or more, particularly preferably about 400 or more, and most preferably about 500 or more.
  • the amount of the nonionic surfactant added in this step is preferably about 4000 or less, more preferably about 3500 or less in terms of a weight ratio when the amount of ⁇ -lipoic acid is 100. More preferably, it is about 3000 or less, Especially preferably, it is about 2500 or less, Most preferably, it is about 2000 or less.
  • mixed micelles of ⁇ -lipoic acid and nonionic surfactant are spontaneously formed by adding water to the mixture of nonionic surfactant and ⁇ -lipoic acid and mixing them.
  • mixed micelles are formed all at once by the addition of water from the state in which ⁇ -lipoic acid and nonionic surfactant are regularly arranged. It is believed that micelles can be formed.
  • the stirring time is preferably about 10 minutes or more, more preferably about 20 minutes or more, further preferably about 25 minutes or more, and most preferably about 30 minutes or more. There is no particular upper limit on the stirring time.
  • aqueous dispersion containing ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant is obtained.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles In the production method of ⁇ -lipoic acid nanoparticles according to the embodiment in which ⁇ -lipoic acid and alkali are first mixed, first, a mixture of ⁇ -lipoic acid, an alkaline substance and water is prepared, and ⁇ -lipoic acid-containing aqueous solution is prepared. A dispersion is prepared. ⁇ -Lipoic acid is usually marketed in the form of crystals or powder. When ⁇ -lipoic acid is added to water, it is dispersed but not completely dissolved. Although ⁇ -lipoic acid is soluble in alcohol, it is preferred not to use alcohol in the present invention. The use of alcohol can adversely affect the micelle formation efficiency of ⁇ -lipoic acid.
  • the alkaline substance can be any alkaline substance, but is preferably a strong base, more preferably sodium hydroxide.
  • the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion can be prepared, for example, by first adding ⁇ -lipoic acid to water and mixing, and then adding and mixing an alkaline solution thereto.
  • An ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion can also be prepared by adding ⁇ -lipoic acid to water and mixing, and adding and mixing an alkaline substance therein.
  • An ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion can also be prepared by adding ⁇ -lipoic acid to an alkaline solution and mixing them.
  • the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion can also be prepared by adding ⁇ -lipoic acid and an alkaline substance to water and mixing them.
  • ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion other substances may be mixed as long as the mixing (micelle formation) of ⁇ -lipoic acid and alkali is not substantially adversely affected.
  • the amount of ⁇ -lipoic acid used to prepare the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is such that the concentration of ⁇ -lipoic acid in the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is equal to or higher than the critical micelle concentration. Selected.
  • the concentration of ⁇ -lipoic acid in the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is preferably about 0.1% by weight or more, more preferably about 0.5% by weight or more, and more preferably about 1.0% by weight. % By weight or more.
  • the concentration of ⁇ -lipoic acid in the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is preferably about 20% by weight or less, more preferably about 16% by weight or less, and further preferably about 14% by weight or less. Particularly preferred is about 12% by weight or less, and most preferred is about 10% by weight or less.
  • the amount of the alkaline substance used for preparing the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion may be any amount as long as ⁇ -lipoic acid is dispersed in water.
  • the amount of the alkaline substance is preferably an amount that brings the pH of the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion to about 6.5 or more.
  • the amount of the alkaline substance is preferably such that the pH of the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is about 13.5 or less, more preferably the pH of the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion is about 13.0 or less.
  • Particularly preferred is an amount that makes the pH of the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion less than or equal to about 12.5.
  • Nonionic surfactants form mixed micelles with ⁇ -lipoic acid and project hydrophilic groups on the micelle surface, so even if polyvalent metal ions are adsorbed (bonded) to the micelle surface, It is considered that micelle precipitation does not occur due to the presence of protruding hydrophilic groups.
  • the amount of the nonionic surfactant added in this step can be arbitrarily selected, but when the ⁇ -lipoic acid concentration is 100, the weight ratio is preferably about 100 or more, more preferably It is about 200 or more, more preferably about 300 or more, particularly preferably about 400 or more, and most preferably about 500 or more.
  • the amount of the nonionic surfactant added in this step is preferably about 4000 or less, more preferably about 3500 or less in terms of weight ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. More preferably, it is about 3000 or less, Especially preferably, it is about 2500 or less, Most preferably, it is about 2000 or less.
  • a mixed micelle of ⁇ -lipoic acid and a nonionic surfactant is naturally formed by adding a nonionic surfactant to the ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion and mixing. It is preferable that the solution after adding the nonionic surfactant is well stirred. Stirring is preferably continued for a certain period of time.
  • the stirring time is preferably about 10 minutes or more, more preferably about 20 minutes or more, further preferably about 25 minutes or more, and most preferably about 30 minutes or more. There is no particular upper limit on the stirring time.
  • a divalent metal salt is added to the aqueous dispersion prepared in 2b-1 or 2b-2.
  • the divalent metal salt may be added directly to the aqueous dispersion or may be added as an aqueous solution, but is preferably added as an aqueous solution of the divalent metal salt.
  • the aqueous dispersion to which the divalent metal salt should be added can be used as it is in the previous step, but preferably the pH is adjusted immediately before adding the metal salt depending on the metal salt used.
  • the pH suitable for dispersion of ⁇ -lipoic acid is different from the pH suitable for adding a divalent metal salt, and ⁇ -lipoic acid and nonionic surface activity are different. It has been found that when divalent metal ions are added to an aqueous dispersion containing mixed micelles containing an agent, a suitable pH exists depending on the type of metal ions. This pH is desirably about 12.0 or less when the divalent metal ion is Mg 2+ , about 12.0 or less when Ca 2+ is used, and about 9.5 or less when Zn 2+ is used. More preferably, it is about 11.5 or less for Mg 2+ , about 11.5 or less for Ca 2+ , and about 8.8 or less for Zn 2+ .
  • the pH of the aqueous dispersion immediately before the addition of the divalent metal salt is preferably about 3 4 or more, more preferably about 3.6 or more, particularly preferably about 3.8 or more, and most preferably about 4.0 or more; an aqueous dispersion immediately before the addition of the divalent metal salt
  • the pH of the liquid is preferably about 12.0 or less, more preferably about 11.9 or less, particularly preferably about 11.7 or less, and most preferably about 11.5 or less.
  • the pH of the aqueous dispersion just before the addition of the divalent metal salt is preferably about 3 4 or more, more preferably about 3.6 or more, particularly preferably about 3.8 or more, and most preferably about 4.0 or more; an aqueous dispersion immediately before the addition of the divalent metal salt
  • the pH of the liquid is preferably about 12.0 or less, more preferably about 11.9 or less, particularly preferably about 11.7 or less, and most preferably about 11.5 or less.
  • the pH of the aqueous dispersion immediately before adding the divalent metal salt is preferably about 3 0.5 or more, more preferably about 3.7 or more, and most preferably about 3.9 or more; the pH of the aqueous dispersion just before the addition of the divalent metal salt is preferably about 9.5 or less. More preferably, it is about 9.2 or less, and most preferably about 8.8 or less.
  • the amount of the divalent metal salt added in this step can be arbitrarily selected, but when the ⁇ -lipoic acid concentration is 100, the molar ratio is preferably about 10 or more, more preferably about 20 Or more, more preferably about 30 or more, particularly preferably about 40 or more, and most preferably about 50 or more.
  • the amount of the divalent metal salt added in this step is preferably not more than about 200, more preferably not more than about 160, and still more preferably in molar ratio, assuming that the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. Is about 140 or less, particularly preferably about 120 or less, and most preferably about 100 or less.
  • a divalent metal salt When a divalent metal salt is added to the aqueous dispersion and mixed, the divalent metal ions bind to the negative charge on the surface of the mixed micelle, and aggregation and precipitation of ⁇ -lipoic acid micelles are prevented. Conceivable. It is preferable to well stir the solution after adding the divalent metal salt. Stirring is preferably continued for a certain period of time. The stirring time is preferably about 10 minutes or more, more preferably about 20 minutes or more, further preferably about 25 minutes or more, and most preferably about 30 minutes or more. There is no particular upper limit on the stirring time.
  • alkali metal carbonate or alkali metal phosphate is added to the aqueous dispersion to which the divalent metal salt is added.
  • the amount of alkali metal carbonate and alkali metal phosphate can be arbitrarily selected, but the divalent anion when the amount of added divalent metal salt is 1 is used.
  • the amount of the salt having ions is preferably about 0.01 or more, more preferably about 0.02 or more, and further preferably about 0.1 or more, in molar ratio.
  • the amount of the salt having a divalent anion when the amount of the added divalent metal salt is 1, the molar ratio is preferably about 0.80 or less, more preferably about 0.70 or less, More preferably, it is about 0.60 or less.
  • the amount of salt having a divalent anion, where the amount of added divalent metal salt is 1, the molar ratio is, for example, about 0.60 or less, about 0.50 or less, or about It may be 0.40 or less.
  • the amount of the added divalent metal salt is 1, the amount of the salt having a divalent anion is most preferably 0.2 in terms of molar ratio. If the amount of the salt having a divalent anion with respect to the amount of the divalent metal salt is too small, the positive charge on the micelle surface may not be neutralized, and the protection efficiency against aggregation and precipitation between micelles may decrease. If the amount of the salt having a divalent anion with respect to the amount of the divalent metal salt is too large, precipitation may easily occur.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles are formed in the aqueous dispersion.
  • the amount of the salt having a divalent anion added in this step can be arbitrarily selected.
  • the molar ratio is preferably about 0.1 or more, More preferably, it is about 0.5 or more, more preferably about 1.0 or more, particularly preferably about 1.5 or more, and most preferably about 2.0 or more.
  • the amount of the salt having a divalent anion added in this step is preferably about 80 or less, more preferably about 74 or less in terms of a molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. More preferably, it is about 68 or less, particularly preferably about 62 or less, and most preferably about 60 or less.
  • the amount of the salt having a divalent anion added in this step is, for example, about 50 or less, about 46 or less in terms of a molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. It may be about 44 or less, about 42 or less, or about 40 or less.
  • a divalent anion is bonded to a divalent metal ion bonded to the micelle surface by adding and mixing a salt having a divalent anion to an aqueous dispersion to which a divalent metal salt is added. It is considered that the charge on the micelle surface is substantially neutralized by the binding of the divalent anion to the divalent metal salt bonded to the micelle surface. On the micelle surface, it is considered that a divalent metal ion and a divalent anion are combined to form a polyvalent metal inorganic salt. Thus, it is thought that the coating of the polyvalent metal inorganic salt is formed on the micelle surface, and as a result, the precipitation due to the binding between the micelles is prevented.
  • the stirring time is preferably about 10 minutes or more, more preferably about 20 minutes or more, further preferably about 25 minutes or more, and most preferably about 30 minutes or more.
  • the stirring time is preferably about 48 hours or less, about 24 hours or less, about 18 hours or less, about 12 hours or less, about 6 hours or less, about 4 hours or less, about 2 hours or less, about 1 hour or less, about 50 minutes or less, about 40 minutes
  • it can be arbitrarily set such as about 35 minutes or less.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles are formed in the aqueous dispersion.
  • This aqueous dispersion can be dried as necessary to obtain a powder. Drying may be performed by any method known in the art. Drying is performed, for example, by freeze drying, spray drying, drum drying, or the like. Freeze drying is preferred.
  • the powder containing ⁇ -lipoic acid nanoparticles produced according to this method is easily dispersed when added to water to form a transparent liquid.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention contain ⁇ -lipoic acid, a nonionic surfactant, a divalent metal ion, and a carbonate ion or a phosphate ion.
  • the amount of the nonionic surfactant in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably about 100 or more by weight when the ⁇ -lipoic acid concentration is 100, and more Preferably, it is about 200 or more, more preferably about 300 or more, particularly preferably about 400 or more, and most preferably about 500 or more.
  • the amount of the nonionic surfactant in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles of the present invention is preferably about 4000 or less, more preferably about 4000, by weight, with the ⁇ -lipoic acid concentration being 100. 3500 or less, more preferably about 3000 or less, particularly preferably about 2500 or less, and most preferably about 2000 or less.
  • the amount of divalent metal ions in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably about 10 or more in terms of a molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100, more preferably About 20 or more, more preferably about 30 or more, particularly preferably about 40 or more, and most preferably about 50 or more.
  • the amount of divalent metal ions in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably about 200 or less in terms of molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100, more preferably About 160 or less, more preferably about 140 or less, particularly preferably about 120 or less, and most preferably about 100 or less.
  • the amount of carbonate ion or phosphate ion (also referred to as divalent anion) in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably a molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. Is about 0.1 or more, more preferably about 0.5 or more, further preferably about 1.0 or more, particularly preferably about 1.5 or more, and most preferably about 2.0 or more. It is.
  • the amount of carbonate ion or phosphate ion in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably about 80 or less in terms of molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100.
  • the amount of the salt having a divalent anion added in this step is, for example, about 50 or less, about 46 or less in terms of a molar ratio when the concentration of ⁇ -lipoic acid is 100. It may be about 44 or less, about 42 or less, or about 40 or less.
  • the divalent metal ion in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is preferably calcium ion, zinc ion or magnesium ion.
  • the amount of the divalent anion when the amount of the divalent metal ion in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is 1 is preferably about 0.01 or more, more preferably in molar ratio. Is about 0.10 or more, more preferably about 0.20 or more.
  • the amount of the divalent anion when the amount of the divalent metal ion in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is 1 is preferably about 0.80 or less, more preferably in molar ratio. Is about 0.50 or less, more preferably about 0.40 or less.
  • the amount of divalent anion, when the amount of divalent metal ion in the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention is 1, is most preferably about 0.2 in molar ratio.
  • composition of the present invention is a composition for promoting skin turnover.
  • the composition of the present invention comprises ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • skin turnover refers to the metabolic cycle of epidermal cells.
  • promotes skin turnover refers to activating skin metabolism.
  • Adult turnover is usually about 28 days, but turnover is prolonged with aging, and about 40-60 days for older people.
  • the basal cells lined up at the bottom of the epidermis layer divide and some of the cells after division are pushed up. Since the basal cells divide one after another, the cells above the basal cells are gradually pushed up. These pushed-up cells change their name and shape as spiny cells, granule cells, etc. as they go up. When these pushed-up cells reach the stratum corneum, they lose their cell nuclei and become a hard substance whose main component is a protein called keratin. The cells pushed upward will come off as plaque after staying for about two weeks after reaching the stratum corneum. It is also known that turnover is prolonged by aging and disease. Therefore, the composition of the present invention accelerates the process until the basal cells divide, reach the stratum corneum, and finally peel off as plaque, thereby reducing the time required for it.
  • melanocytes are present together with basal cells.
  • Melanocytes account for about 5-15% of the cells of the basal layer.
  • Melanocytes form melanin due to abnormal signals from keratinocytes due to ultraviolet irradiation, stimulation, inflammation, oxidative stress, aging, and the like.
  • Melanocytes that have received a signal to make melanin use tyrosine as a raw material in the cell to form melanin.
  • the formed melanin moves to the melanocyte protrusion.
  • the migrated melanin is absorbed by the surrounding basal cells.
  • the absorbed melanin covers the cell nucleus of the basal cell and absorbs ultraviolet rays, thereby protecting the cell nucleus from the influence of ultraviolet rays and the like.
  • Melanin is excreted when basal cells are pushed away by turnover and fall off.
  • the balance between the amount of melanin formed by stimuli such as ultraviolet rays and the amount of melanin excreted by turnover determines whether the skin becomes whiter or blacker. That is, if the amount of melanin excreted by turnover is larger than the amount of melanin formed, the amount of melanin in the skin is reduced, and a whitening effect is obtained.
  • the composition of the present invention promotes skin turnover, the composition of the present invention is useful for whitening.
  • the composition of the present invention when the composition of the present invention was applied to the skin, melanin was excreted, and the amount of melanin in the skin decreased, and the skin became white.
  • the compositions of the present invention can be used to excrete melanin in the skin.
  • the composition of the present invention can be used for whitening.
  • whitening refers to reducing skin pigmentation.
  • whitening refers to reducing the amount of melanin in the skin.
  • the composition of the present invention can be used, for example, to alleviate diseases such as stains, buckwheat, pigmentation, skin melanosis, senile pigment spots and liver spots.
  • compositions of the present invention promotes skin turnover, skin regeneration is promoted.
  • compositions of the present invention can be used for wound healing.
  • wound healing refers to the partial or complete healing of a wound.
  • composition of the present invention promotes skin turnover, skin regeneration is promoted.
  • compositions of the present invention can be used to promote skin regeneration.
  • Endogenous aging is genetically programmed aging. Endogenous aging can be said to be aging skin which is epidermal atrophy. Exogenous aging is a combination of endogenous aging with external factors such as UV damage, environmental pollution, severe climate, and smoking. Endogenous aging increases shallow wrinkles in the skin, makes the skin dry and thin. In particular, the epidermis is said to thin by 10-50% between the ages of 30-80. With aging, the regeneration rate of epidermal keratinocytes decreases and turnover also decreases. (“Science of skin care”, Nankodo, pages 112-114).
  • composition of the present invention promotes skin turnover, the skin can be maintained in an active state.
  • the compositions of the present invention can be used to promote skin rejuvenation and anti-aging (also referred to as anti-aging).
  • the compositions of the present invention can also be used to treat diseases such as senile pigment spots, dry skin in senile xeroderma and atopic dermatitis, facial wrinkles.
  • the compositions of the present invention can also be used to treat diseases involving reduced skin turnover. Examples of diseases associated with reduced skin turnover include keratosis, atopic dermatitis, discoid lupus erythematosus and lichen planus.
  • compositions of the present invention can also be used to treat diseases involving skin turnover abnormalities.
  • diseases associated with abnormal skin turnover include psoriasis and acne.
  • treating refers to treating, curing, reducing or ameliorating a target disease.
  • composition of the present invention can be formulated as a pharmaceutical, a quasi-drug or other composition.
  • the composition of the present invention can be formulated as a transdermal absorption agent, as another parenteral administration agent, or as an oral administration agent.
  • the composition of the present invention can be formulated, for example, as a skin external preparation.
  • composition of the present invention can be administered by any known administration route.
  • the compositions of the present invention can be systemically (e.g., intravenously, intratracheally, transvascularly, intrapulmonary, intraperitoneally, intranasally, parenterally, enterally, It can be administered by intramuscular injection, subcutaneously or intracranial.
  • the compositions of the invention can also be administered by oral administration, by aerosol administration, or by intrapulmonary infusion.
  • composition of the present invention in the form of an external preparation for skin in one embodiment, the composition for promoting turnover of the present invention is in the form of a skin external preparation.
  • the term “external preparation for skin” refers to a preparation for use on the skin that achieves a desired effect by contact with the skin.
  • the present invention is effective for applications that continuously contact the skin for a long time (for example, applications that continuously contact the skin for about 1 hour or more, or applications that continuously contact the skin for about 5 hours or more).
  • a preferred example of the external preparation for skin is a cosmetic material for promoting turnover.
  • a preferable example of the cosmetic is skin care cosmetic.
  • Specific examples of cosmetics include skin care cosmetics such as lotions, emulsions and creams, cosmetics such as foundations, eye shadows, lipsticks and blushers, hair cosmetics, emollient creams, emollient lotions, creams, cream rinses and colds.
  • the present invention is effective for applications where a whitening effect is desired.
  • the present invention is effective for whitening basic cosmetics (for example, lotion, milky lotion, etc.).
  • the present invention is particularly effective for an application that makes contact with the skin for a long time.
  • the present invention is also effective for an application such as a facial cleanser or a shampoo that is washed after being used in a short time.
  • Cosmetics include cleansing cosmetics, hair cosmetics, basic cosmetics, makeup cosmetics, aromatic cosmetics, tanning cosmetics, sunscreen cosmetics, nail cosmetics, eyeliner cosmetics, eyeshadow cosmetics, teak, lip cosmetics, oral cosmetics, etc.
  • the present invention is effective for any application.
  • the skin external preparation may be a pharmaceutical or a quasi drug.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles can be blended in an ointment containing a pharmaceutically active ingredient.
  • the external preparation for skin of the present invention activates skin metabolism. Furthermore, the skin external preparation of the present invention exerts a whitening effect by promoting the discharge of the already formed melanin pigment rather than suppressing the formation of melanin pigment by ultraviolet rays or the like.
  • the external preparation for skin of the present invention reduces skin darkening due to dryness, ultraviolet rays, etc., improves pigmentation disorders such as spots and freckles, and exhibits aging phenomena such as dullness, wrinkles, sagging and hair loss. Effective for delaying.
  • Examples of dosage forms of the external preparation for skin of the present invention include ointments, liniments, thickening gels, lotions, water-in-oil (W / O) emulsions, oil-in-water (O / W) emulsions, W / O / W type emulsion, emulsified dosage form such as O / W / O type emulsion, solid, sheet, powder, gel, mousse, oil, liquid, kneaded, stick, volatile oil, paste , Mist and spray. It may be a product in a form in which a skin external preparation is impregnated into a cloth, such as a make-up pack.
  • the dosage form of the external preparation for skin is lotion, emulsion, thickening gel system and the like, among the above ingredients, among the thickening agents, gum arabic, gum tragacanth, galactan, guar gum, carrageenan, locust bean gum, pectin, Plant-based polymers such as quince seed extract, brown algae powder; microbial polymers such as xanthan gum, dextran, pullulan; animal-based polymers such as collagen, casein, albumin, gelatin, hyaluronic acid; carboxymethyl starch , Starches such as methyl hydroxy starch; methyl cellulose, nitrocellulose, ethyl cellulose, methyl hydroxypropyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, cellulose sulfate, hydroxypropyl cellulose, carboxymethyl cellulose, Celluloses such as cellulose and cellulose powder; vinyl polymers such as polyvinyl alcohol, polyvinyl methyl ether, polyvinyl pyrroli
  • composition of the present invention in the form of a skin external preparation can be produced by a known method.
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles are produced from a fiber or a fabric by binding to the fiber, mixing with a fiber material, impregnating the fiber, or applying to the surface of the fabric.
  • a clothing containing ⁇ -lipoic acid nanoparticles in a method of use in which ⁇ -lipoic acid nanoparticles are percutaneously absorbed when contacted with the skin (for example, underwear) and the skin is also a concept of an external preparation for skin.
  • the binding of ⁇ -lipoic acid nanoparticles to the fiber can be performed, for example, by crosslinking.
  • a method of bonding a compound to a fiber, a method of mixing with a fiber material, a method of impregnating a fiber, a method of applying to a fabric surface, and the like are known in the art.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention do not require a special step to be added to the skin external preparation, and are added together with the raw material at the beginning of the manufacturing process of the skin external preparation or added during the manufacturing process. Or added at the end of the manufacturing process.
  • a normal method such as mixing, kneading, dissolving, dipping, spraying, spraying, and application is selected according to the type and properties of the skin external preparation.
  • the skin external preparation of the present invention can be prepared according to methods known to those skilled in the art.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the external preparation for skin of the present invention is preferably about 0.002% by weight or more, more preferably about 0.01% by weight in terms of ⁇ -lipoic acid. More preferably, it is about 0.1% by weight or more, particularly preferably about 0.5% by weight or more, and most preferably about 1.0% by weight or more.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the external preparation for skin of the present invention is preferably about 10% by weight or less, more preferably about 8% by weight or less in terms of ⁇ -lipoic acid, More preferably, it is about 5% by weight or less, particularly preferably about 4% by weight or less, and most preferably about 3% by weight or less.
  • the dosage, administration frequency, and administration period of the external preparation for skin of the present invention are determined according to the administration form, patient age, body weight, nature or severity of symptoms to be treated, and the like.
  • the dosage of the external preparation for skin of the present invention is preferably about 1 ng or more, more preferably about 10 ng or more, more preferably about 100 ng or more per 1 cm 2 of application area as the amount of ⁇ -lipoic acid. Most preferred.
  • the dosage of the external preparation for skin of the present invention is preferably about 250 ⁇ g or less, preferably about 80 ⁇ g or less, preferably about 20 ⁇ g or less per 1 cm 2 of application area as the amount of ⁇ -lipoic acid. Is more preferable, and most preferably about 8 ⁇ g or less.
  • the frequency of administration of the external preparation for skin of the present invention is preferably 3 times a day to once every 3 days, more preferably twice a day to once every 2 days, and even more preferably once a day.
  • the administration period of the external preparation for skin of the present invention can be arbitrarily determined, but is preferably about 1 day or more, more preferably about 3 days or more, and further preferably about 1 week or more.
  • the administration period of the external preparation for skin of the present invention is, for example, about 1 year or less, about 6 months or less, about 3 months or less, about 1 month or less, about 3 weeks or less, about 2 weeks or less, about 1 week or less. obtain. If necessary, the external preparation for skin of the present invention may be administered almost permanently.
  • the external preparation for skin of the present invention can be a sustained-release preparation for promoting turnover.
  • the sustained-release preparation may be solid, semi-solid, or liquid, but is preferably liquid.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention do not require a special process to be added to the sustained-release preparation, and may be added together with the raw material at the initial stage of the production process of the sustained-release preparation or during the production process. Add at the end of the manufacturing process.
  • the addition method is selected from usual methods such as mixing, kneading, dissolving, dipping, spraying, spraying, and coating depending on the type and properties of the sustained-release preparation.
  • the sustained-release preparation of the present invention can be prepared according to methods known to those skilled in the art.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the sustained-release preparation of the present invention is preferably about 0.002% by weight or more, more preferably about 0.01% by weight in terms of ⁇ -lipoic acid. % Or more, more preferably about 0.1% by weight or more, particularly preferably about 0.5% by weight or more, and most preferably about 1.0% by weight or more.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the sustained-release preparation of the present invention is preferably about 10% by weight or less, more preferably about 8% by weight or less in terms of ⁇ -lipoic acid. More preferably, it is about 5% by weight or less, particularly preferably about 4% by weight or less, and most preferably about 3% by weight or less.
  • the dosage, administration frequency, and administration period of the sustained-release preparation of the present invention are determined according to the administration form, patient age, body weight, nature or severity of symptoms to be treated, and the like.
  • the dose of the sustained-release preparation of the present invention is preferably about 1 ng or more, more preferably about 10 ng or more, more preferably about 100 ng or more per 1 cm 2 of application area as the amount of ⁇ -lipoic acid. Most preferably it is.
  • the dosage of the external preparation for skin of the present invention is preferably about 250 ⁇ g or less, more preferably about 80 ⁇ g or less, more preferably about 20 ⁇ g or less per 1 cm 2 of application area as the amount of ⁇ -lipoic acid. More preferred is about 8 ⁇ g or less.
  • the administration frequency of the sustained-release preparation of the present invention is preferably 3 times a day to once every 3 days, more preferably twice a day to once every 2 days, more preferably once a day.
  • the administration period of the sustained-release preparation of the present invention can be arbitrarily determined, but is preferably about 1 day or more, more preferably about 3 days or more, and further preferably about 1 week or more.
  • the administration period of the sustained-release preparation of the present invention is, for example, about 1 year or less, about 6 months or less, about 3 months or less, about 1 month or less, about 3 weeks or less, about 2 weeks or less, about 1 week or less. possible. If necessary, the sustained release formulations of the present invention may be administered almost permanently.
  • the composition for oral cavity of the present invention contains the ⁇ -lipoic acid nanoparticles of the present invention.
  • the oral composition can be any oral composition.
  • the oral composition may be solid, semi-solid, or liquid, but is preferably liquid.
  • Examples of oral compositions include dentifrices (for example, toothpastes, powder toothpastes, etc.), dental creams, gargles (including mouthwashes), mouse sprays, disintegrating films, gels, and troches.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention do not require a special process to be added to the oral composition, and may be added together with the raw material at the initial stage of the oral composition manufacturing process, or during the manufacturing process. Add at the end of the manufacturing process.
  • a normal method such as mixing, kneading, dissolution, dipping, spraying, spraying, and application is selected according to the type and properties of the oral composition.
  • the oral composition of the present invention can be prepared according to methods known to those skilled in the art.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the oral composition of the present invention is preferably about 0.002% by weight or more, more preferably about 0.01% by weight in terms of ⁇ -lipoic acid. % Or more, more preferably about 0.1% by weight or more, particularly preferably about 0.5% by weight or more, and most preferably about 1.0% by weight or more.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the oral composition of the present invention is preferably about 10% by weight or less, more preferably about 8% by weight or less in terms of ⁇ -lipoic acid. More preferably, it is about 5% by weight or less, particularly preferably about 4% by weight or less, and most preferably about 3% by weight or less.
  • the food of the present invention is a food for promoting skin turnover and contains ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • the food product can be any food product.
  • the food may be solid, semi-solid, or liquid, but is preferably liquid.
  • the food is preferably a health food, more preferably a health drink, but is not limited thereto.
  • the health food can be used for the same normal use as ⁇ -lipoic acid contained in the health food. Examples of uses and effects of health foods include promotion of skin turnover, reduction of wrinkles, stains, buckwheat and pigmentation.
  • Foods include, for example, frozen desserts (ice cream, ice milk, ice confections, etc.), palatable beverages (eg, soft drinks, carbonated beverages (cider, ramune, etc.), condiment beverages, alcoholic beverages, powdered juices, etc.), dairy products ( Milk, yogurt, ice cream, butter, margarine, cheese, whipped cream, etc.), confectionery (Western confectionery, Japanese confectionery, snack confectionery, etc.) , Cookies, rice crackers, tablet confectionery, etc.), bread, rice cakes, marine products (rice cakes, chikuwa, etc.), processed meat products (sausage, ham, etc.), processed fruit products (jam, marmalade, fruit sauce, etc.), seasonings ( Dressing, mayonnaise, miso, etc.), noodles (udon, soba, etc.), pickles, and meat, fish, fruit bottling, canned foods, etc. Get.
  • palatable beverages eg, soft drinks, carbonated beverages (cider, ramune, etc.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles synthesized by the method of the present invention do not require a special process to be added to food, and are added together with the raw material at the beginning of the food manufacturing process, or during the manufacturing process, Alternatively, it is added at the end of the production process.
  • a normal method such as mixing, kneading, dissolution, dipping, spraying, spraying, and application is selected according to the type and properties of the food.
  • the food of the present invention can be prepared according to methods known to those skilled in the art.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the food of the present invention is preferably about 0.01% by weight or more, more preferably about 0.05% by weight or more in terms of ⁇ -lipoic acid. More preferably about 0.1% by weight or more, particularly preferably about 0.5% by weight or more, and most preferably about 1.0% by weight or more.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the food of the present invention is preferably about 10% by weight or less, more preferably about 8% by weight or less, more preferably in terms of ⁇ -lipoic acid. Is about 5% by weight or less, particularly preferably about 4% by weight or less, and most preferably about 3% by weight or less.
  • the dosage, administration frequency, and administration period of the food of the present invention are determined according to the administration form, patient age, body weight, nature or severity of symptoms to be treated, and the like.
  • the dose of the food of the present invention is preferably about 0.1 mg or more, more preferably about 0.2 mg or more, more preferably about 0.4 mg or more per kg body weight per day as the amount of ⁇ -lipoic acid. Most preferably.
  • the dose of the food of the present invention is preferably about 5 mg or less, more preferably about 3 mg or less, and most preferably about 1 mg or less as the amount of ⁇ -lipoic acid per kg body weight per day. .
  • the administration frequency of the food of the present invention is preferably 3 times a day to once every 3 days, more preferably 2 times a day to once every 2 days, and even more preferably once a day.
  • the administration period of the food of the present invention can be arbitrarily determined, but is preferably about 1 day or more, more preferably about 3 days or more, and further preferably about 1 week or more.
  • the administration period of the food of the present invention can be, for example, about 1 year or less, about 6 months or less, about 3 months or less, about 1 month or less, about 3 weeks or less, about 2 weeks or less, about 1 week or less. If necessary, the food of the present invention may be administered almost permanently.
  • the pharmaceutical product of the present invention is a pharmaceutical product for promoting turnover and contains ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • the medicament can be any medicament for promoting turnover.
  • the form of the pharmaceutical product can be arbitrary.
  • the pharmaceutical of the present invention may be a powder, granule, tablet (tablet), capsule, pill, liquid, dispersion, ointment, liniment, cream and the like.
  • the pharmaceutical product of the present invention is preferably in the form of a tablet, a powder preparation, an oral solution, a capsule or the like.
  • the pharmaceutical of the present invention When used for parenteral administration, it is preferably an injection, an ointment or a cream, but is not limited thereto.
  • the sustained release effect can be obtained by gradually decomposing ⁇ -lipoic acid nanoparticles in the body.
  • the pharmaceutical product of the present invention can be used by animals and humans, and is preferably used by humans.
  • the pharmaceutical agent of the present invention may contain a normal pharmaceutically acceptable carrier in addition to ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • a normal pharmaceutically acceptable carrier in addition to ⁇ -lipoic acid nanoparticles.
  • sugars such as water, sucrose, sorbit, fructose, glycols such as polyethylene glycol, propylene glycol, sesame oil, olive oil, soybean oil, etc.
  • Oils, preservatives such as p-hydroxybenzoates, and flavors such as strawberry flavor and peppermint can be used.
  • the pharmaceutical product of the present invention is a capsule, tablet, powder, or granule
  • excipients such as lactose, glucose, sucrose, mannitol, disintegrants such as starch and sodium alginate, magnesium stearate, talc and the like
  • Lubricants binders such as polyvinyl alcohol, hydroxypropyl cellulose, and gelatin, surfactants such as fatty acid esters, plasticizers such as glycerin, and the like can be used.
  • Preparations for parenteral administration are preferably isotonic with the blood of the recipient.
  • a solution for injection is prepared using a carrier comprising a salt solution, a glucose solution or a mixture of salt water and a glucose solution.
  • Topical formulations are prepared by dissolving or suspending ⁇ -lipoic acid nanoparticles in one or more media, such as mineral oil, petroleum, polyhydric alcohols, or other bases used in topical pharmaceutical formulations.
  • Formulations for enteral administration are prepared using conventional carriers such as cacao butter, hydrogenated fat, hydrogenated fatty carboxylic acid and the like and provided as suppositories.
  • glycols, oils, flavors, preservatives (including antioxidants), excipients, disintegrants, lubricants, binders, surfactants exemplified in oral preparations are also used in parenteral preparations.
  • One or more auxiliary components selected from agents, plasticizers and the like can also be added.
  • the dosage, administration frequency, and administration period of the pharmaceutical of the present invention are determined according to the administration form, patient age, body weight, nature or severity of symptoms to be treated, and the like.
  • the dosage of the pharmaceutical agent of the present invention is preferably about 0.1 mg or more, more preferably about 0.2 mg or more, more preferably about 0.4 mg or more per kg body weight per day as the amount of ⁇ -lipoic acid. Most preferably.
  • the dose of the pharmaceutical agent of the present invention is preferably about 30 mg or less per kg body weight per day, more preferably about 20 mg or less, most preferably about 5 mg or less as the amount of ⁇ -lipoic acid. .
  • the administration frequency of the pharmaceutical of the present invention is preferably 3 times a day to once every 3 days, more preferably 2 times a day to once every 2 days, and even more preferably once a day.
  • the administration period of the pharmaceutical product of the present invention can be arbitrarily determined, but is preferably about 1 day or more, more preferably about 3 days or more, and further preferably about 1 week or more.
  • the administration period of the pharmaceutical agent of the present invention can be, for example, about 1 year or less, about 6 months or less, about 3 months or less, about 1 month or less, about 3 weeks or less, about 2 weeks or less, about 1 week or less. If necessary, the medicament of the present invention may be administered almost permanently.
  • the pharmaceutical product of the present invention can be used to promote turnover.
  • uses and effects of the pharmaceutical of the present invention include skin melanin excretion, wound healing, skin regeneration, skin rejuvenation, and anti-aging.
  • the medicament of the present invention is a medicament for reducing or treating diseases such as spots, buckwheat, pigmentation, skin melanosis, senile pigment spots, liver spots and facial wrinkles.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles used in the present invention do not require any special process to be added to the drug, and are added together with the raw material at the beginning of the drug manufacturing process, added during the manufacturing process, or manufactured. Add at the end of the process.
  • a normal method such as mixing, kneading, dissolving, dipping, spraying, spraying, and application is selected according to the type and properties of the pharmaceutical product.
  • the medicament of the present invention can be prepared according to methods known to those skilled in the art.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the pharmaceutical product of the present invention is preferably about 0.01% by weight or more, more preferably about 0.05% by weight or more in terms of ⁇ -lipoic acid. More preferably about 0.1% by weight or more, particularly preferably about 0.5% by weight or more, and most preferably about 1.0% by weight or more.
  • the content of ⁇ -lipoic acid nanoparticles contained in the pharmaceutical product of the present invention is preferably about 10% by weight or less, more preferably about 8% by weight or less, more preferably in terms of ⁇ -lipoic acid. Is about 5% by weight or less, particularly preferably about 4% by weight or less, and most preferably about 3% by weight or less.
  • ⁇ -lipoic acid ⁇ -lipoic acid special grade manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd. (purity 98% or more, powder form); Sucrose laurate: Ryoto sugar ester L-1695 manufactured by Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.
  • Example 1 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 1A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.2. When the pH reached 7.2, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of Ryoto sugar ester L-1695 and stirred well.
  • Example 1B A paste containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 1A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • the paste after lyophilization was redispersed to a predetermined concentration with distilled water.
  • the paste after lyophilization was added to distilled water, it was well redispersed and a transparent dispersion was obtained. This indicates that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles are stable after lyophilization.
  • Example 2 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 2A 0.25 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.1. When the pH reached 7.1, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of Ryoto sugar ester L-1695 and stirred well.
  • Example 2B A paste containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 2A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • the paste after lyophilization was redispersed to a predetermined concentration with distilled water.
  • the paste after lyophilization was added to distilled water, it was well redispersed and a transparent dispersion was obtained. This indicates that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles are stable to lyophilization.
  • Comparative Example 1B A paste was obtained in the same procedure as in Comparative Example 1A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles produced in Example 1A had a particle size of about 10 nm, and the ⁇ -lipoic acid nanoparticles of Comparative Example 1A produced without adding magnesium chloride and sodium carbonate. It was confirmed that the diameter was about 760 nm. The particle diameter was almost the same when distilled water was used and when ion-exchanged water was used.
  • FIG. 2 shows the results obtained by measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid nanoparticles prepared in Comparative Example 1A using distilled water using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics ELS-710TY).
  • Example 3 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 3A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.0. When the pH reached 7.0, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 3B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 3A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 4 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 4A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.3. When the pH reached 7.3, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 50 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.95 mL of distilled water containing 0.02 g of Emulgen 2020G-HA and stirred well.
  • Example 4B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 4A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 5 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 5A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.1. When the pH reached 7.1, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 50 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.95 mL of distilled water containing 0.05 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 5B A paste containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 5A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 6 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 6A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 7.0. When the pH reached 7.0, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 20 ⁇ L of this solution was collected as a mother liquor, and this was added to 0.98 mL of distilled water containing 0.02 g of Emulgen 2020G-HA and stirred well.
  • Example 6B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 6A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 7 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaPO 4 nanoparticles
  • Example 7A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 20 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.98 mL of distilled water containing 0.02 g of HCO-60 and stirred well.
  • the pH of the solution was adjusted to 6.4 with 0.1 M HCl or 0.1 M NaOH, and then 5 ⁇ L of 0.5 M CaCl 2 was added and stirred. After stirring for 30 minutes, 5 ⁇ L of 0.1M Na 2 HPO 4 was added to this solution and further stirred. As a result, a transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaPO 4 nanoparticles was obtained. The transparent dispersion was stirred for a whole day and night (24 hours), and then the dispersion was freeze-dried overnight to obtain a paste.
  • Example 7B A paste containing ⁇ -lipoic acid-CaPO 4 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 7A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 8 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 8A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 1M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 11.7. When the pH reached 11.7, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of POE (20) POP (8) cetyl ether (PBC44) and stirred well.
  • POE 20
  • Example 8B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 8A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 9 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 9A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 1 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 11.5. When the pH reached 11.5, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. The solution was diluted to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.02 g of POE (20) stearyl ether and stirred well.
  • Example 9B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 9A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 10 Preparation of ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles
  • Example 10A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.8. When the pH reached 6.8, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 10B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 10A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 11 Preparation of ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles
  • Example 11A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 11B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 11A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 12 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 12A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of Ryoto sugar ester L-1695 and stirred well.
  • Example 12B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 12A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 13 Preparation of ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles
  • Example 13A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 13B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-ZnCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 13A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 14 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 14A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 10.9. When the pH reached 10.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 14B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 14A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 15 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 15A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 8.7. When the pH reached 8.7, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 15B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 15A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 16 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 16A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 16B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 16A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 17 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 17A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 6.9. When the pH reached 6.9, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of Emulgen 2020G-HA and stirred well.
  • Example 17B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 17A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 18 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 18A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion exchange water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 11.8. When the pH reached 11.8, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of HCO-60 and stirred well.
  • Example 18B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 18A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 19 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 19A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid was added to 9 mL of ion-exchanged water and mixed, and 5 M NaOH was added to this mixture to adjust the pH of the mixture to 9.1. When the pH reached 9.1, the ⁇ -lipoic acid powder disappeared and the solution had a transparent appearance. This solution was made up to 10 mL with ion exchange water. 100 ⁇ L of this solution was taken as a mother liquor, and this was added to 0.9 mL of distilled water containing 0.1 g of Ryoto sugar ester L-1695 and stirred well.
  • Example 19B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 19A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water for preparing the mother liquor.
  • Example 20 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 20A 0.28 g of 1M NaOH was added to 0.05 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved. 9.328 ml of water for injection (Otsuka Pharmaceutical Japan Pharmacopoeia water for injection) was added and mixed there. After adding 0.3 g of POE (20) stearyl ether to this mixed solution and stirring for 30 minutes or more, the pH of this solution was adjusted to 7.0 with 5N HCl.
  • Example 20B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 20A, except that ion-exchanged water was used instead of water for injection.
  • Example 21 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 21A 950 ⁇ L of 0.26 M NaOH was added to 0.05 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved.
  • 0.25 g of POE (20) stearyl ether was added thereto and stirred well, then 3.626 ml of ion exchange water was added thereto and stirred for 30 minutes or more. The pH of this solution was adjusted to 5.5 with 5N HCl.
  • Example 21B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 21A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Comparative Example 22-1B An ⁇ -lipoic acid dispersion was obtained in the same procedure as Comparative Example 22-1A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Comparative Example 22-2B An ⁇ -lipoic acid dispersion was obtained by the same procedure as in Comparative Example 22-2A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 22 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 22A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH. To this, 0.48 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.96 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 22B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 22A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 23 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 23A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH. To this, 0.96 ml of 2.5M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.96 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 23B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 23A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 24 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 24A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.3 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 24B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 24A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 25 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 25A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 3.5 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60), which had been heated and melted in advance, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.48 ml of 2.5 M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1 M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 25B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 25A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 26 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 26A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 3.5 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60), which had been heated and melted in advance, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.2 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.72 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 26B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 26A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 27 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 27A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 4.5 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 27B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 27A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 28 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 28A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 4.5 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.48 ml of 2.5M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.48 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 28B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 28A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 29 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 29A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 5.0 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH. To this, 0.96 ml of 2.5M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 1.44 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 29B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 29A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 30 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 30A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 5.0 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) previously heated and melted to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH. To this, 0.48 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.48 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 30B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 30A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 31 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 31A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.3 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.48 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 31B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 31A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 32 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 32A To 7.0 g of Emulgen 2020G-HA previously heated and melted, 1.0 g of ⁇ -lipoic acid powder was added and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 70 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 32B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 32A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 33 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 33A 0.25 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 7.0 g of polysorbate (80) previously heated and melted, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.3 with 5M NaOH. To this, 0.12 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.12 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 33B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 33A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 34 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 34A 0.25 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 7.0 g of polysorbate (80) previously heated and melted, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 2.5M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.12 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 34B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 34A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 35 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 35A 0.25 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 7.0 g of polysorbate (80) previously heated and melted, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.3 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.48 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 35B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 35A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 36 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 36A 0.25 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 7.0 g of polysorbate (80) previously heated and melted, and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.48 ml of 2.5M MgCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.48 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 36B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained in the same procedure as in Example 36A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 37 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 37A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted and 1.0 g of polyethylene glycol (1000) and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 37B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 37A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 38 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 38A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (4000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.3 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 38B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 38A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 39 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 39A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 2.0 g of polyethylene glycol (4000) which had been heated and melted in advance to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 39B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 39A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 40 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 40A 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to and mixed with 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 2.0 g of polyethylene glycol (1000) which had been heated and melted in advance to dissolve ⁇ -lipoic acid. About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.4 with 5M NaOH. To this, 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 40B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 40A, except that the same amount of ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 41 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 41A ⁇ -lipoic acid powder was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (1000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH.
  • Example 41B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained in the same procedure as in Example 41A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 42 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 42A The ⁇ -lipoic acid was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (4000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH.
  • Example 42B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 42A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 43 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 43A ⁇ -Lipoic acid powder was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (1000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH.
  • Example 43B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained in the same procedure as in Example 43A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 44 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 44A ⁇ -Lipoic acid powder was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (1000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.6 with 5M NaOH.
  • Example 44B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 44A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 45 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 45A ⁇ -Lipoic acid powder was dissolved by adding and mixing 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder to 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether and 1.5 g of polyethylene glycol (1000) which had been heated and melted in advance. About 35 ml of ion-exchanged water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH.
  • Example 45B Except for using the same amount of distilled water instead of deionized water to obtain a transparent dispersion liquid containing ⁇ - lipoic acid MgCO 3 nanoparticles by the same procedure as that in Example 45A.
  • Example 46 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 46A To 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted, 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. To this, 15 ml of a solution prepared by dissolving 10 g of polyethylene glycol (1000) in ion-exchanged water to make 100 ml was added and mixed. Further, about 20 ml of ion-exchanged water was added and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4 with 5 M NaOH. Adjusted to .5.
  • Example 46B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as in Example 46A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 47 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 47A To 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted, 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid.
  • 15 ml of a solution prepared by dissolving 10 g of polyethylene glycol (4000) in ion exchange water to make 100 ml is added and mixed, and further about 20 ml of ion exchange water is added and mixed for 30 minutes or more, and 5M NaOH. The pH was adjusted to 4.3.
  • Example 47B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained by the same procedure as Example 47A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 48 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • Example 48A To 5.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted, 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid. 15 ml of a solution prepared by dissolving 10 g of polyethylene glycol (6000) in ion exchange water to make 100 ml is added and mixed, and then about 20 ml of ion exchange water is added and mixed for 30 minutes or more to obtain 5M NaOH. The pH was adjusted to 4.4.
  • Example 48B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was obtained in the same procedure as in Example 48A, except that the same amount of distilled water was used instead of ion-exchanged water.
  • Example 49A (Preparation of high concentrations of ⁇ - lipoic acid MgCO 3 nanoparticles Example 49)
  • Example 49A 2.85 ml of 0.26 M NaOH was added to 0.15 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved.
  • 0.75 g of POE (20) stearyl ether was added thereto and stirred well, then 0.5 ml of distilled water was added thereto and stirred for 30 minutes or more. The pH of this solution was adjusted to 5.5 with 5N HCl.
  • 144 ⁇ L of 2.5M MgCl 2 was added and stirred for 12 hours or more, and then 144 ⁇ L of 1M Na 2 CO 3 was added and further stirred for 12 hours or more.
  • Distilled water was added thereto to make 5.0 ml.
  • a transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained.
  • Example 49B A transparent dispersion containing ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles was obtained in the same procedure as in Example 49A, except that ion-exchanged water was used instead of distilled water.
  • Example 50 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Example 50A 0.28 g of 1M NaOH was added to 0.05 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved. 9.35 ml of water for injection (Otsuka Pharmaceutical Japan Pharmacopoeia water for injection) was added and mixed. After adding 0.3 g of polyoxyethylene hydrogenated castor oil (HCO-60) to this mixed solution and stirring for 30 minutes or more, the pH of this solution was adjusted to 7.0 with 5N HCl.
  • HCO-60 polyoxyethylene hydrogenated castor oil
  • Example 50B Except that in place of water for injection using ion-exchanged water to obtain a transparent dispersion liquid containing ⁇ - lipoic acid MgCO 3 nanoparticles by the same procedure as that in Example 50A.
  • Examples 1A to 50B and Comparative Examples 1A, 1B and 22-1A to 22-2B are summarized in Tables 1-1 to 1-3 below.
  • Examples 1A to 21B and 49A to 50B a procedure of adding a nonionic surfactant after preparing an ⁇ -lipoic acid-containing aqueous dispersion was used, and in Examples 22A to 48B, ⁇ -lipoic acid was added. A procedure was used in which water was added after dissolving in the nonionic surfactant.
  • Test Example 1 Thermal stability test of formulation
  • the reagent ⁇ -lipoic acid was used as a control.
  • the residual ratio of ⁇ -lipoic acid was calculated by dividing the amount of ⁇ -lipoic acid after heating by the amount of ⁇ -lipoic acid before heating and multiplying by 100.
  • ⁇ -lipoic acid as a reagent decreased by about 55% after 3 hours of heating, whereas ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles of Example 1A, ⁇ -lipoic acid without addition of magnesium chloride and sodium carbonate were added.
  • the acid nanoparticles did not show a substantial decrease in ⁇ -lipoic acid.
  • the preparation of the present invention is extremely excellent in the stability of ⁇ -lipoic acid.
  • UV-A was irradiated at 8 J / cm 2 and UV-B at 12 mJ / cm 2 on the application start date (Monday) and 2, 4, 7 days later (Wednesday, Friday, next Monday), respectively.
  • the skin brightness (L * value) was measured using a color difference meter as an index of melanin production in guinea pig skin, and the amount of decrease in brightness was used as an index of the degree of blackening. The lightness indicates that the larger the L * value, the whiter the color.
  • the absolute values of the amount of change in brightness ( ⁇ L * value) from the test start date due to melanin production were compared. Comparison was made using a guinea pig coated only with water not containing ⁇ -lipoic acid as a control group.
  • the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle application group showed less decrease in brightness than the control group throughout the entire test period, that is, the skin blackening was suppressed.
  • the absolute value of ⁇ L * value at the end of the test was 8.3 in the control group, whereas it was 6.6 in the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle coating group.
  • Table 3 and FIG. 4 below show absolute values of ⁇ L * values measured after 0 days (Monday), 4 days (Friday), 7 days (Monday), and 9 days (Wednesday). From the above results, it was confirmed that ⁇ -lipoic acid nanoparticles were absorbed into the skin and pigmentation caused by ultraviolet rays could be suppressed.
  • Hairless mice (Hos: HR-1,7-week-old, male) back to one day per 55mJ / cm 2 of UV-B five days a week (ie, irradiated only Monday to Friday, is irradiated on Saturday and Sunday The mice were irradiated for 2 months to produce photoaging model mice.
  • ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle dispersion obtained in Example 3A was once a day at a dose of 80 mg once a day for 5 days a week (ie Monday (Applied only on Friday, not on Saturday and Sunday) Applied for 1 month Visual observation of the skin condition of mouse skin at the start and end of application, stratum corneum water content, transdermal moisture transpiration The amount (TEWL) was measured to check the state of wrinkles and stratum corneum moisture and skin barrier function.
  • the TEWL value on the last day of the test was 15.7 (g / h ⁇ m 2 ) in the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle coating group, whereas it was 32.6 (g / h ⁇ in) in the control group. m 2 ), and it was confirmed that the skin barrier function was restored by application of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles. Moreover, a replica photograph of wrinkles is shown in FIG. In the control group, there was no change in the wrinkle state at the start of the test, but in the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle coating group, a clear decrease in wrinkles was observed. From the above results, it was confirmed that the ⁇ -lipoic acid nanoparticles were absorbed into the skin and the effect of returning the photoaged skin state to a healthy state was confirmed.
  • Example 2 Measurement of particle diameter
  • a solution of the ⁇ - lipoic acid CaCO 3 nanoparticles produced in Example 22A particle size was measured by dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • the particle diameter of the ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles prepared in Example 22A was about 20 nm.
  • the particle diameter was almost the same when distilled water was used and when ion-exchanged water was used.
  • FIG. 7 shows the results of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles prepared using distilled water in Example 22A using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • Example 3 Measurement of particle diameter
  • the particle diameter of the solution of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles prepared in Example 29A was measured with a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000). From the results of the solution being completely transparent and the particle size measurement, ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles prepared in Example 29A have primary particles having an average particle size of about 12 nm and average particle sizes of 200 nm and 1700 nm. It was confirmed that a weak cluster was formed. The particle diameter was almost the same when distilled water was used and when ion-exchanged water was used.
  • FIG. 8 shows the results of measuring the particle size distribution of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles prepared using ion-exchanged water in Example 29A using a dynamic light scattering photometer (Otsuka Electronics FPAR1000).
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles without addition of magnesium chloride and sodium carbonate prepared in Comparative Example 22-1A after storage at 60 ° C. for 3 weeks showed a decrease of about 18%.
  • the decrease in ⁇ -lipoic acid was suppressed to about 11%. From this, it is understood that the preparation of the present invention has extremely excellent stability of ⁇ -lipoic acid.
  • the ⁇ -lipoic acid nanoparticles without addition of magnesium chloride and sodium carbonate prepared in Comparative Example 22-2A after storage at 60 ° C. for 3 weeks showed a decrease of about 13%.
  • the reduction of ⁇ -lipoic acid was suppressed to about 8%. From this, it is understood that the preparation of the present invention has extremely excellent stability of ⁇ -lipoic acid.
  • D-MEM medium (added to D-MEM medium to a final concentration of 10% FCS, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin) in a plastic petri dish with a diameter of 3.5 cm 1.5 ml of was added.
  • FCS 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin
  • the medium was adipocyte differentiation induction medium (final concentration of 10% FCS in D-MEM, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin, 5 ⁇ g / ml insulin, 0.25 ⁇ M dexamethasone), 0. It was exchanged for 3 ml of 5 mM isobutyl-methylxanthine (IBMX). Two more days later, the medium was replaced with 3 ml of the adipocyte differentiation-inducing medium having the same composition, and cultured for 2 days, for a total of 4 days.
  • IBMX isobutyl-methylxanthine
  • the ⁇ -lipoic acid solution or the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle solution of Example 20A is added to the adipocyte differentiation induction medium at an ⁇ -lipoic acid concentration of 0, 100, 250 or 500 ⁇ M.
  • ⁇ -lipoic acid concentration 0 100, 250 or 500 ⁇ M.
  • the amount of accumulated fat in the cultured cells thus obtained was measured. After washing with 1 ml of PBS buffer, fixation with neutral formalin was performed for 5 minutes. Further, washing was performed with a 70% ethanol solution and distilled water. Subsequently, 1 ml of oil red O solution (saturated oil red O / isopropanol solution and distilled water mixed in a ratio of 6: 4 and filtered) was added and left for 15 minutes. After removing the staining solution and washing with a 70% ethanol solution until the dye did not diffuse, 0.75 ml of 4% nonidet P-40 / isopropanol solution was added and stirred for 30 minutes to elute the dye. . The entire amount of this solution was recovered, and the absorbance at a wavelength of 520 nm was measured using an absorptiometer.
  • Test Example 8 Functional test of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles for dedifferentiation of mature adipocytes
  • D-MEM medium 1.5 ml of D-MEM medium (added to D-MEM medium to a final concentration of 10% FCS, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin) was added to a plastic petri dish with a diameter of 3.5 cm. .
  • the medium was adipocyte differentiation induction medium (final concentration 10% FCS in D-MEM medium, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin, 5 ⁇ g / ml insulin, 0.25 ⁇ M dexamethasone, 0.5 mM
  • the solution was added to 3 ml of isobutyl-methylxanthine) and replaced with 3 ml and cultured for 4 days to induce differentiation into adipocytes.
  • the adipocyte maturation medium D-MEM medium added to a final concentration of 10% FCS, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin, 5 ⁇ g / ml insulin) was replaced.
  • Example 20A ⁇ -lipoic acid solution or an ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle solution of Example 20A was added to an adipocyte maturation medium so that the ⁇ -lipoic acid concentration was 0, 100, 250, or 500 ⁇ M. .
  • Each medium was replaced with the same medium every 2 days of culture. All the cultures were performed under conditions of 5% CO 2 and 37 ° C.
  • the amount of accumulated fat in the cultured cells thus obtained was measured. After washing with 1 ml of PBS buffer, fixation with neutral formalin was performed for 5 minutes. Further, washing was performed with a 70% ethanol solution and distilled water. 1 ml of oil red O solution was added thereto and left for 15 minutes. After dyeing, washing was performed with a 70% ethanol solution until the dye did not diffuse. 0.75 ml of 4% nonidet P-40 / isopropanol solution was added thereto and stirred for 30 minutes to elute the dye. The total amount of this solution was recovered, and the absorbance at a wavelength of 520 nm was measured using an absorptiometer.
  • Test Example 9 Stability of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles in culture medium and cell localization analysis
  • Culture was performed in the same manner as in Test Example 7.
  • ⁇ -Lipoic acid and ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles of Example 20A were each added at a final concentration of 250 ⁇ M.
  • the whole culture supernatant of the cells was collected and used as a culture supernatant fraction.
  • the cells were washed with PBS buffer, recovered and washed by a conventional method, precipitated by centrifugation, suspended in 500 ⁇ L of purified water, and disrupted by sonication.
  • the disrupted solution was centrifuged at 15,000 rpm for 15 minutes at 4 ° C., and the supernatant was collected to obtain a cell disrupted liquid fraction.
  • the residual ⁇ -lipoic acid concentration in each fraction was quantified using a high performance liquid chromatograph mass spectrometer.
  • paraffin-embedded sections of mouse dorsal skin were prepared and the amounts were compared by staining with hyaluronic acid.
  • Staining of hyaluronic acid was detected with a biotin-labeled hyaluronic acid-binding protein (biotin-labeled HABP, Seikagaku Corporation) as a probe, and detected with a streptavidin-labeled fluorescent dye (Cy3 streptavidin, Jackson ImmunoResearch Laboratories). The method used was used.
  • ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles have the effect of increasing the amount of hyaluronic acid as an extracellular matrix in the dermis layer damaged by ultraviolet rays, and these effects have improved wrinkles was confirmed.
  • Test Example 11 Human wrinkle improvement effect test by application of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • Subject 1 A male subject in his 30s (Subject 1) had an aqueous dispersion containing 0.01% ⁇ -lipoic acid on one half face, and 0.01% ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 of Example 21A on the other half face.
  • the nanoparticle-containing aqueous dispersion was applied evenly twice a day, continuously.
  • a female subject in her fifties (subject 2) applied the aqueous dispersion containing 0.01% ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles of Example 21A to the half-face only every day, with no half-face. It was set as application.
  • Each test period was performed for 16 weeks, and the evaluation of wrinkles was performed by preparing replicas from the buttocks before and after 16 weeks.
  • Test Example 12 Hyaluronic acid accumulation test using ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • 3 ml of D-MEM medium (added to D-MEM medium to a final concentration of 10% FCS, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin) was added to a plastic petri dish having a diameter of 6.0 cm.
  • the cells were inoculated with 1.5 ⁇ 10 5 3T3-L1 cells, which are preadipocytes, and pre-cultured for 3 days to be confluent.
  • the medium was adipocyte differentiation induction medium (final concentration 10% FCS in D-MEM, 100 units / ml penicillin and 100 ⁇ g / ml streptomycin, 5 ⁇ g / ml insulin, 0.25 ⁇ M dexamethasone, 0.5 mM isobutyl. -The one added to methylxanthine) was replaced with 3 ml. Two more days later, the medium was replaced with 3 ml of an adipocyte induction medium having the same composition and cultured for 2 days, and cultured in an adipocyte differentiation induction medium for a total of 4 days.
  • the ⁇ -lipoic acid solution and the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle solution of Example 50A were added to the adipocyte differentiation induction medium so that the ⁇ -lipoic acid concentrations were 0, 100, 250, and 500 ⁇ M, respectively.
  • 1 ml of PBS buffer was added to the petri dish from which the culture supernatant was removed, and the cells were collected with a cell scraper.
  • a cell disruption solution was obtained by ultrasonically disrupting the collected cells, and the amount of hyaluronic acid contained therein was quantified by enzyme immunoassay (ELISA).
  • ELISA enzyme immunoassay
  • the experimental method for the hyaluronic acid ELISA is described by Anna Jacobson et al., Int. J. et al. Cancer. 102: 212-219 (2002). All of the cultures were performed under conditions of 5% CO 2 and 37 ° C.
  • the amount of hyaluronic acid was higher in the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles added group than in the ⁇ -lipoic acid added group (FIG. 19). From the above results, it was confirmed that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles had an action of accumulating hyaluronic acid on the cell surface. This suggests that ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles improve wrinkles by improving the water retention of the skin dermis layer. In addition, hyaluronic acid was accumulated and concentrated on the surface of chondrocytes in joints, and the effect of reducing damage between articular cartilage tissues was expected, suggesting its usefulness as a therapeutic agent for osteoarthritis.
  • Example 51 Production of external preparation ointment
  • ingredients having the composition shown in Table 9 below are mixed to produce an external preparation ointment.
  • Example 52 Production of cosmetic emulsion
  • a cosmetic emulsion is prepared by mixing the ingredients shown in Table 10 below in accordance with a method commonly used in the art.
  • Example 53 Production of toothpaste
  • a toothpaste is produced by mixing the materials shown in Table 11 below according to a method commonly used in the art.
  • Tablets are produced by mixing the ingredients shown in Table 12 below according to the methods commonly used in the art.
  • Example 55 Production of injection solution
  • An injection solution is prepared by mixing the materials shown in Table 13 below according to a method commonly used in the art.
  • Example 56 Production of lotion
  • a lotion is produced by mixing the ingredients shown in Table 14 below in accordance with a method commonly used in the art.
  • Example 57 Production of external lotion for skin
  • blending shown in the following Table 15 was mixed, and the skin external lotion was manufactured.
  • Transcutaneous water transpiration was measured immediately before UV irradiation and on the 4th and 5th days from the UV irradiation day to check the state of the skin barrier function.
  • the amount of increase with respect to TEWL immediately before UV irradiation on each measurement day from the UV irradiation date was taken as ⁇ TEWL, which was used as a measure for the skin barrier function deterioration.
  • Example 58 Production of drink
  • blending shown in the following Table 17 was mixed, and the drink was manufactured.
  • ⁇ -lipoic acid-Ca nanoparticle solution in place of the ⁇ -lipoic acid-Ca nanoparticle solution in Table 17 above, ⁇ -lipoic acid was neutralized and dissolved with a minimum amount of a 0.25M aqueous sodium hydroxide solution to make a 1% aqueous solution.
  • ⁇ -lipoic acid was neutralized and dissolved with a minimum amount of a 0.25M aqueous sodium hydroxide solution to make a 1% aqueous solution.
  • the sensory evaluation of the drink of Example 58 and the comparative product was conducted by five specialist panels, all of the drinks of this Example compared to the comparative product, the sulfur odor caused by ⁇ -lipoic acid and the tongue The tingling sensation was reduced, and it was evaluated that the palatability was excellent.
  • Example 59 Production of soft drink
  • ⁇ -lipoic acid was neutralized and dissolved with a minimum amount of 0.25M aqueous sodium hydroxide solution to make a 1% aqueous solution.
  • the sensory evaluation of the soft drink (drink preparation) of Example 59 and the comparative product was conducted by five specialized panels, and all of the soft drinks (drink preparations) of this example were ⁇ - The sulfur odor and the tingling sensation of the tongue caused by lipoic acid were reduced, and it was evaluated that it was excellent in palatability.
  • Example 60 Preparation of ⁇ - lipoic acid MgCO 3 nanoparticles
  • 1M NaOH 1M NaOH was added to 0.3 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved.
  • 3M MgCl 2 6 ml of ion-exchanged water was added thereto and stirred for 3 hours or more.
  • the pH of this solution was adjusted to 5.5 with 5N HCl.
  • 288 ⁇ L of 2.5M MgCl 2 was added thereto and stirred for 12 hours or more, and then 288 ⁇ L of 1M Na 2 CO 3 was added and further stirred for 12 hours or more.
  • Distilled water was added thereto to make 10 ml.
  • a transparent dispersion containing 3 % by weight of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles in terms of ⁇ -lipoic acid was obtained.
  • Example 61 Preparation of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles
  • ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles To 0.2 g of ⁇ -lipoic acid, 1.12 mL of 1M NaOH was added and mixed, and stirred until completely dissolved. 2 g of POE (20) stearyl ether was added and stirred well, then 6 ml of ion exchange water was added thereto and stirred for 3 hours or more. The pH of this solution was adjusted to 5.5 with 5N HCl. 96 ⁇ L of 5M CaCl 2 was added thereto and stirred for 12 hours or more, and then 192 ⁇ L of 1M Na 2 CO 3 was added and further stirred for 12 hours or more. Distilled water was added thereto to make 10 ml. As a result, a transparent dispersion liquid containing 2% by weight of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles in terms of ⁇ -lipoic acid was obtained.
  • Example 62 Preparation of ⁇ - lipoic acid CaCO 3 nanoparticles
  • 0.5 g of ⁇ -lipoic acid powder was added to 4.0 g of polyoxyethylene (20) stearyl ether previously heated and melted and 1.0 g of polyethylene glycol (1000) and mixed to dissolve ⁇ -lipoic acid.
  • About 35 ml of distilled water was added to this mixture and mixed for 30 minutes or more, and the pH was adjusted to 4.5 with 5M NaOH.
  • 0.24 ml of 5M CaCl 2 aqueous solution was added and mixed, and then 0.24 ml of 1M Na 2 CO 3 aqueous solution was added and further mixed.
  • Example 63 Preparation of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles
  • 2 mL of 1M NaOH was added to 0.4 g of ⁇ -lipoic acid, mixed, and stirred until completely dissolved.
  • 2.5 ml of ion-exchanged water was added and stirred well, and then 1.9 g of glycerin was added and stirred well.
  • 2 g of POE (20) stearyl ether was added and stirred for 6 hours or more. The pH of this solution was adjusted to 5.5 with 5N HCl, and 384 ⁇ L of 2.5M MgCl 2 was added thereto and stirred for 12 hours or more.
  • Example 60 In each compartment, a 1-fold, 3-fold, 30-fold, or 300-fold dilution of the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle dispersion obtained in Example 60 (the ⁇ -lipoic acid concentration is 3%, 1%, 0.1%, 0.01%), or a 1-fold, 2-fold, 20-fold, or 200-fold diluted solution of ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticle dispersion obtained in Example 61 ( ⁇ -lipoic acid) Concentrations of 2%, 1%, 0.1% and 0.01%, respectively, were applied at 30 mg per dose, twice a day at 6 hour intervals. The dispersion was applied a total of 16 times over 10 days for 2 weeks (1 week: Monday to Friday, 2 weeks: Tuesday to Thursday).
  • the skin brightness (L * value) was measured using a color difference meter as an index of melanin production in guinea pig skin, and the increase in brightness was used as an index of the degree of recovery from pigmentation.
  • the lightness indicates that the larger the L * value, the whiter the color.
  • the absolute values of the lightness change amount ( ⁇ L * value) from the test substance application start date (Day 0) were compared.
  • the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle application zone and the ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticle application zone were light with melanin discharge from about 4 days after the start of application (Day 4).
  • FIG. 20 The photographs of the application start date and the application portion of the guinea pig back preparation on the 11th day of application are shown in FIG. 20, FIG. 21, FIG. 22, and FIG.
  • FIG. 21 A representative image of the histopathologically stained skin image collected 11 days after application is shown in FIG.
  • FIG. 20 As a result of measuring the thickness of the skin layer in each coating section by analyzing the obtained image, the thickness of ⁇ - lipoic acid MgCO 3 nanoparticles coated Ward and ⁇ - lipoic acid CaCO 3 skin layers with nanoparticles coated Zone It became clear that turnover was promoted.
  • the relationship between the thickness of the skin layer and the turnover can be considered as follows.
  • the thickness of the epidermis layer is determined by the relationship between the speed at which the entire epidermis layer is pushed up by the division of the epidermis keratinocytes immediately above the basement membrane and the rate at which cells in the epidermis layer differentiate into cells in the stratum corneum. That is, when the speed of the former exceeds the speed of the latter due to the activation of the former, the epidermis layer is thickened.
  • the division and proliferation of epidermal keratinocytes directly above the basement membrane are activated, and a phenomenon is observed in which the epidermal layer becomes at least temporarily thick.
  • the epidermal layer becomes thicker and thicker as the turnover time of the epidermal tissue is increased by chemical peeling or the like.
  • the epidermis does not continue to thicken, but at some point it is balanced. Therefore, the skin layer does not become excessively thick due to the accelerated turnover.
  • an increase in the thickness of the epidermis can be an indicator of the promotion of turnover. Conceivable.
  • the skin surfaces of the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle application group and the ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticle application group are the non-application group (control group 1), the water application group (control group 2) and
  • the skin color was similar to that of the ⁇ -lipoic acid dispersion diluted liquid application section of Comparative Example 60, and no skin inflammation reaction was confirmed.
  • Conventionally known retinoic acid as a substance having an effect of improving turnover is known to cause a strong skin inflammatory reaction as a side effect at the time of application, but in this example, it was confirmed that there was no such side effect. .
  • ⁇ -lipoic acid nanoparticles do not induce skin inflammation, a side effect known to be retinoic acid, and are not observed with ⁇ -lipoic acid alone, but pigmentation due to epidermal layer turnover and melanin excretion It has been confirmed that it significantly accelerates recovery from
  • Example 64 Preparation of cosmetic cream
  • a cosmetic cream was produced by mixing the ingredients shown in Table 20 below according to a conventional method.
  • Example 65 Preparation of cream for external use on skin
  • ingredients having the composition shown in Table 21 below were mixed to produce a skin external cream.
  • Table 22 shows the average value of the change in the number of spots obtained by subtracting the number of spots on the coating start date from the number of spots after 12 weeks for 12 persons. The result was that the number of spots was increased at the site without application, whereas the number of spots was decreased at the site where the cream containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles was applied. In addition, the average value of the lightness of the cheeks was higher at the site where the ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticle-containing cream was applied as compared with the non-application region. From the above results, it was confirmed that the cream containing ⁇ -lipoic acid-CaCO 3 nanoparticles had a stain reducing effect.
  • Test Example 16 Test for confirming the effect of reducing pigmentation at a spot site in humans
  • an application test on facial spots was performed. Applying the cream containing 0.4% ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticles of Example 65 to a woman in her 40s having a relatively large spot that can be measured with a color difference meter on each of the left and right cheeks. received. The application was applied only to the spot area twice a day in the morning and at night, approximately 1-2 mg per cm 2 per time.
  • Ki-67 is a protein expressed in the nucleus at the time of cell division and is not expressed in the mitotic resting phase, and is a marker serving as an index of cell division.
  • Rat anti-mouse Ki-67 antibody (manufactured by Dako) was used as the primary antibody for immunostaining, and peroxidase-labeled goat anti-rat IgG antibody ⁇ simple stain mouse MAX-PO (Rat), Nichirei Used ⁇ . Diaminobenzidine was used for color development.
  • the number of Ki-67 positive cells stained brown in the epidermal basal cell layer was counted from the stained image, and the average number of positive cells per 1 mm length of the basement membrane was graphed. Separately prepared sections were stained with hematoxylin and eosin, and the thickness of the epidermis layer was measured from the microscopic images. The number of Ki-67 positive cells is shown in FIG. 25, and the thickness of the epidermis layer is shown in FIG. From this result, in the ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle dispersion application group, a significant increase in the number of Ki-67 positive cells was observed until the third day after application as compared with the ⁇ -lipoic acid dispersion application group. .
  • FIG. 27 shows a representative Ki-67 antibody immunostained image of a mouse skin tissue section 3 days after application of ⁇ -lipoic acid-MgCO 3 nanoparticle dispersion.
  • the composition of the present invention is used to promote skin turnover. Since the melanin excretion from the skin is promoted by promoting the skin turnover, the composition of the present invention can be used for the purpose of melanin excretion. Since promoting skin turnover promotes skin regeneration, the composition of the present invention can be used for skin regeneration, wound healing, and the like.
  • the nanoparticles contained in the composition of the present invention maintain the form of a transparent solution when dissolved in water, and are coated with ⁇ -lipoic acid by a coating of a polyvalent metal inorganic salt, so that it is mild. It is sex. Therefore, the composition of the present invention can be administered as a subcutaneous and intravenous injection preparation.
  • composition of the present invention When the composition of the present invention is applied and administered as an external preparation or administered as an oral preparation, it is well absorbed through the skin and is not irritating, so it does not cause inflammation and is sustainedly released from the nanoparticles. Thus, ⁇ -lipoic acid is released, and the effect of promoting skin turnover can be exerted.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本発明により、皮膚のターンオーバーを促進するための組成物が提供される。本発明の組成物は、皮膚のターンオーバーを促進するための組成物であって、該組成物は、α－リポ酸ナノ粒子を含み、該α－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸と、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを含む。この組成物は、特定の好ましい実施形態では、皮膚のメラニンを排出するため、創傷治癒のため、または皮膚再生促進のための組成物である。

Description

α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物
　本発明は、α－リポ酸ナノ粒子を含有する皮膚のターンオーバー促進用組成物に関する。
　α－リポ酸は生体内に含まれ、糖の代謝およびＴＣＡサイクルの回転に作用する補酵素の一種であり、構造式Ｃ８Ｈ１４Ｏ２Ｓ２、分子量２０６．３、黄色結晶で融点６０～６２℃の物質である。α－リポ酸は人間の体内にも存在し、ブロッコリーや赤身肉など多くの食品にも含まれる。そのため、α－リポ酸は安全性の高い物質といえる。機能面に関して、α－リポ酸は、生体内で強力な抗酸化力を持ち、酸化ストレスを軽減することや、重金属排出に効果的なキレート剤であることが認められている。α－リポ酸は、現在、「チオクト酸」として医薬品に配合されており、チオクト酸製剤は、通常、注射剤として販売されている。チオクト酸製剤の効能・効果としては、チオクト酸の需要が増大した際の補給（激しい肉体労働時）、リー症候群（亜急性壊死性脳脊髄炎）、中毒性（ストレプトマイシン、カナマイシンによる）および騒音性（職業性）の内耳性難聴が日本医薬品集　医療薬（非特許文献１）に記載されている。
　α－リポ酸は、日本では近年の規制緩和によって食品および化粧品への使用が認められたので、これらの分野でのさらなる応用が期待される。
　α－リポ酸は黄色粉末状の性状を持つが、水に難溶であるためにその用途が限られている。またα－リポ酸は熱および光に対して非常に不安定であり、製剤中に安定して存在することが困難である。さらにα－リポ酸は特有の硫黄臭を持ち、変質することでその臭いがより強力になること、および熱によってガム化してしまうことが問題となり、食品、化粧品および医薬品に使用するには、これらの品質および使用感の面で大きな問題がある。
　上記のような問題を解決するために、本発明者らは、α－リポ酸を水中でミセル化し、その表面を無機塩類でコートすることによって得られた、直径８～１０ナノメートルの球状ナノカプセルを開発した（非特許文献２）。非特許文献２には、（１）ナノカプセル化によって水溶液でのα－リポ酸の安定性が向上すること；（２）へアレスマウスに紫外線照射をすることによって得られたシワモデルマウスでの抗シワ効果の検討；および（３）ヒトにおける抗シワ効果の検討が記載されている。しかし、非特許文献２には、このα－リポ酸のナノカプセルとターンオーバー促進効果との関連については全く開示されていない。
　非特許文献３は、α－リポ酸がメラニン生成抑制および線維芽細胞増殖による美容機能を有することを記載している。非特許文献３の１３頁には、Ｂｌ６メラノーマをα－リポ酸（２５～１００μｇ／ｍＬ）の共存下で培養した結果、濃度依存的なメラニン生成抑制作用が認められたと記載されている。非特許文献３の１３頁にはまた、褐色モルモットにα－リポ酸（１、５または２５ｍｇ／ｋｇ）を継続投与した後、紫外線照射により色素沈着を背部に惹起した結果、α－リポ酸投与群のモルモットの照射部位では明度の上昇が観察されたことが記載されている。非特許文献３の１４頁には、α－リポ酸処理細胞において表皮層の顆粒が角質層に浸潤し、角質層との境界域が不明瞭になってきている像が観察されたこと；この知見は、表皮層で生まれた細胞が上層へ移行するのが促進され、皮膚の代謝サイクルが亢進している可能性を示唆するものと考えられること；が記載されている。非特許文献４は、非特許文献３と同様の内容を開示している。しかし、非特許文献３および４で使用されたα－リポ酸はナノ粒子ではなかった。
日本医薬品集　医療薬　２００７年版、株式会社　じほう、１３２７頁（２００６） 第２４回　日本ＤＤＳ（Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍ）学会学術集会　プログラム予稿集、２００８年、３７７頁 下田博司、杉下朋子、ＦＯＯＤ　ＦＵＮＣＴＩＯＮ、第２巻、第１号、１－６（２００６） オリザ油化株式会社のα－リポ酸カタログ　ｖｅｒ４．０　ＨＳ／ＳＭ（制定日２００４年１０月５日；改定日２００６年５月１２日）
　本発明は、上記問題点の解決を意図するものであり、皮膚のターンオーバーを促進するための組成物を提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを特定の順序で使用することにより製造されるα－リポ酸ナノ粒子を使用することにより、優れたターンオーバー促進効果が得られることを見出し、これに基づいて本発明を完成させた。
　α－リポ酸（α－ｌｉｐｏｉｃ　ａｃｉｄ；ＬＡ）は両親媒性の低分子含硫脂肪酸である。α－リポ酸は、ミトコンドリア酵素群の補因子として作用し、エネルギー代謝に関与していることが知られている。本発明者らはこのＬＡをナノカプセル化した新規ＤＤＳ（Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍ）製剤α－リポ酸ナノ粒子についてその薬理効果の解析を行った。これまでＬＡはその物性から外用剤への利用が困難であったが、ナノカプセル化することでＬＡの持つ様々な物性が改善された。そこで、本発明者らは外用剤としての利用、特にシミ改善効果に着目し解析を行った。本発明者らは、α－リポ酸ナノ粒子の色素排出効果について解析を行った。その結果、予想に反し、α－リポ酸ナノ粒子投与群においてＬＡ投与群より高い色素排出効果が観察された。さらに組織学的解析からα－リポ酸ナノ粒子は皮膚表皮層ターンオーバーを加速していることが示唆された。
　本発明で使用するα－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸の両親媒性を利用して製造される。α－リポ酸は酸性条件または中性条件では非常に水に難溶であるが、アルカリを加えると透明な液状になる。アルカリ溶液中のα－リポ酸は、水中で球状ミセルを形成すると考えられる。ついで、α－リポ酸に非イオン性界面活性剤を添加すると、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤の混合ミセルが形成すると考えられる。さらに２価金属のハロゲン化物、酢酸塩、あるいはグルコン酸塩を添加することにより、リポ酸イオンのマイナス電荷に２価の金属カチオンを結合させ、α－リポ酸の凝集・沈澱を防ぐことによりリポ酸の表面に２価の金属イオンが結合した球状、もしくは卵形等を有するミセルが形成すると考えられる。さらに２価の陰イオンを添加して、２価の陰イオンをミセル表面の金属イオンに吸着（結合）させて、ミセル表面荷電を中和させる。その結果、ミセル表面に多価金属無機塩の皮膜が形成され、多価金属無機塩皮膜α－リポ酸ナノ粒子が調製されると考えられる。このナノ粒子の調製においてはα－リポ酸ミセルを鋳型にしていることから、封入率は単分散α－リポ酸分子を除いた濃度に相当し１００％に近いものとなると考えられる。このナノ粒子の表面には非イオン性界面活性剤の親水基が露出すると考えられる。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子は、水中に透明に分散する。またＣａＣＯ３などの多価金属無機塩結晶は水に溶解しないが、ナノ粒子表面ではバテライトあるいはアモルファス構造をとると考えられ、生体内では徐々に溶解する。そのため、本発明の組成物は、α－リポ酸が徐放されるＤＤＳ効果が期待される。
　本発明で使用するα－リポ酸ナノ粒子は、別の実施形態では、α－リポ酸がある種の非イオン性界面活性剤に可溶化され、この可溶化物を水中に分散させることによりα－リポ酸と非イオン性界面活性剤の混合ミセルが形成されるという知見に基づいて製造され得る。このα－リポ酸溶解非イオン性界面活性剤の混合ミセルに、２価金属のハロゲン化物、酢酸塩、あるいはグルコン酸塩を添加することにより、α－リポ酸イオンのマイナス電荷に２価の金属カチオンを結合させる。この際、界面活性剤の存在によりα－リポ酸の凝集・沈澱が妨げられ、リポ酸の表面に２価の金属イオンが結合した球状もしくは卵形の形状のミセルが形成されると考えられる。このミセルに対してさらに２価の陰イオン（アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物）を添加して、２価の陰イオンをミセル表面の金属イオンに吸着（結合）させて、ミセル表面荷電を中和させる。その結果、ミセル表面に多価金属無機塩の皮膜が形成され、多価金属無機塩皮膜α－リポ酸ナノ粒子が調製されると考えられる。
　上記目的を達成するために、本発明は、例えば、以下の手段を提供する：
　（項目１）　皮膚のターンオーバーを促進するための組成物であって、該組成物は、α－リポ酸ナノ粒子を含み、該α－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸と、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを含む、組成物。
　（項目２）　皮膚のメラニンを排出するため、創傷治癒のため、または皮膚再生促進のための組成物である、項目１に記載の組成物。
　（項目３）　前記２価金属イオンがカルシウムイオン、亜鉛イオンまたはマグネシウムイオンである、項目１または２に記載の組成物。
　（項目４）　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂肪酸エステルからなる群より選択される、項目１～３のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目５）　さらにポリエチレングリコールを含む、項目１～４のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目６）　前記α－リポ酸ナノ粒子が、
　α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程；
　該水性分散液に、２価金属塩を添加する工程であって、該２価金属塩が、２価金属ハロゲン化物、２価金属酢酸化物または２価金属グルコン酸化物である、工程；および
　該２価金属塩を添加した水性分散液に、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加して、α－リポ酸ナノ粒子を形成させる工程
を包含する方法によって製造される、項目１～５のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目７）　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、
液状の非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解して界面活性剤溶液を得ること；および
該界面活性剤溶液に水または水を含む液体を添加して水性分散液を得ることを含む、項目６に記載の組成物。
　（項目８）　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、α－リポ酸とアルカリ性物質と水との混合物を作製してα－リポ酸含有水性分散液を調製すること；および該α－リポ酸含有水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加することを含む、項目６に記載の組成物。
　（項目９）　前記２価金属塩が、塩化カルシウム、臭化カルシウム、フッ化カルシウム、ヨウ化カルシウム、塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、フッ化マグネシウム、ヨウ化マグネシウム、塩化亜鉛、臭化亜鉛、フッ化亜鉛、ヨウ化亜鉛、酢酸カルシウム、酢酸マグネシウム、酢酸亜鉛、グルコン酸カルシウム、グルコン酸マグネシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択される、項目６～８のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１０）　前記２価金属塩が、塩化カルシウム、塩化マグネシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択される、項目６～９のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１１）　前記アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸ナトリウムおよびリン酸カリウムからなる群より選択される、項目６～１０のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１２）　前記アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が、炭酸ナトリウムおよびリン酸水素二ナトリウムからなる群より選択される、項目６～１１のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１３）　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂肪酸エステルからなる群より選択される、項目６～１２のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１４）　前記非イオン性界面活性剤のＨＬＢ値が、１０以上である、項目１３に記載の組成物。
　（項目１５）　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）オクチルドデシルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ポリオキシプロピレン（重合度４～８）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度２０～１００）硬化ヒマシ油およびショ糖ラウリン酸エステルからなる群より選択される、項目６～１４のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１６）　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程において、
　前記非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解する前に、ポリエチレングリコールを該非イオン性界面活性剤中に混合しておくか、または
　前記界面活性剤溶液に水を含む液体を添加する際に、該水を含む液体として、ポリエチレングリコールを含む水を用いる、項目７～１５のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１７）　皮膚外用剤である、項目１～１６のいずれか１項に記載の組成物。
　（項目１８）　経口投与剤である、項目１～１６のいずれか１項に記載の組成物。
　本発明の組成物は、皮膚のターンオーバーを顕著に促進する。本発明の組成物はまた、メラニン排出もまた顕著に促進する。
図１は、実施例１で蒸留水を使用して作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＥＬＳ－７１０ＴＹ）によって測定した結果を示す。 図２は、比較例１Ａでイオン交換水を使用して作製したα－リポ酸ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＥＬＳ－７１０ＴＹ）によって測定した結果を示す。 図３は、α－リポ酸の残存率の結果を示す。△は対照である試薬のα－リポ酸の結果であり、■は比較例１のα－リポ酸ナノ粒子の結果であり、□は実施例１のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の結果である。 図４は、試験例３の結果を示す。 図５は、試験例４の結果を示す。 図６は、試験例４のしわのレプリカを示す。 図７は、実施例２２Ａで蒸留水を使用して作製したα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって測定した結果を示す。 図８は、実施例２９Ｂで蒸留水を使用して作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって測定した結果を示す。 図９は、試験例５の結果を示す。 図１０は、試験例６の結果を示す。 図１１は、試験例７で３Ｔ３－Ｌ１細胞培養液にα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を添加し、未成熟脂肪細胞内に蓄積した脂肪をオイルレッドＯで染色し、吸光度計（波長５２０ｎｍ）にて測定した結果を示す。 図１２は、試験例８で３Ｔ３－Ｌ１細胞培養液にα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を添加し、成熟脂肪細胞内に蓄積した脂肪をオイルレッドＯで染色し、吸光度計（波長５２０ｎｍ）にて測定した結果を示す。 図１３は、試験例９で３Ｔ３－Ｌ１細胞培養液にα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を添加し培養した未成熟脂肪細胞を破砕した細胞破砕液中のα－リポ酸濃度を高速液体クロマトグラフ質量分析計によって測定した結果を示す。 図１４は、試験例９で３Ｔ３－Ｌ１細胞培養液にα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を添加し培養した未成熟脂肪細胞培養上清液中のα－リポ酸濃度を高速液体クロマトグラフ質量分析計によって測定した結果を示す。 図１５は、試験例１０で作製した皺モデルマウスの評価基準例を示す。 図１６は、試験例１０で作製した皺モデルマウスに６週間α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を塗布したマウスの皺レプリカとその皺評価点数を示す。 図１７は、試験例１０で作製した皺モデルマウス皮膚切片のヒアルロン酸染色の結果を示す。 図１８は、試験例１１の皺レプリカを示す。 図１９は、試験例１２の細胞破砕液画分に対するヒアルロン酸ＥＬＩＳＡの結果を示す。 図２０は、試験例１４の塗布開始日および塗布１１日目における、比較例６０のα－リポ酸分散液を塗布したモルモット背部皮膚の写真である。 図２１は、試験例１４の塗布開始日および塗布１１日目における、実施例６０のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液を塗布したモルモット背部皮膚の写真である。 図２２は、試験例１４の塗布開始日および塗布１１日目における、実施例６１のα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子分散液を塗布したモルモット背部皮膚の写真である。 図２３は、試験例１４の塗布開始日および塗布１１日目における、水を塗布したかまたは無処置部分のモルモット背部皮膚の写真である。 図２４は、試験例１４の塗布１１日目における、各塗布部分のモルモット背部皮膚組織切片をヘマトキシリン・エオジンで染色したものの顕微鏡写真である。 図２５は、試験例１７の結果を示す。塗布後各日数に採取した皮膚組織染色画像解析における基底膜１ｍｍあたりのＫｉ－６７陽性細胞の平均数を表す。 図２６は、試験例１７の結果を示す。塗布後各日数に採取した皮膚組織染色画像解析における表皮層の平均厚さを表す。 図２７は、試験例１７の塗布後３日目のマウス背部皮膚組織切片をＫｉ－６７抗体で免疫染色したものの顕微鏡写真である。灰色が細胞核を表し。核と陽性シグナルとで二重に濃く染色され、黒色になった細胞が免疫染色陽性細胞を表す。
　以下、本発明を詳細に説明する。
　本発明の組成物は、皮膚のターンオーバーを促進するための組成物であって、該組成物は、α－リポ酸ナノ粒子を含む。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸と、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを含む。
　（１．α－リポ酸ナノ粒子の材料）
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸、非イオン性界面活性剤、２価金属塩、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を使用して製造される。当業者は、本発明の製造法において、アルカリ性水溶液など、必要に応じて他の材料を使用し得る。
　（１ａ．α－リポ酸）
　本発明において用いられるα－リポ酸は、当該分野で公知の任意のα－リポ酸であり得る。α－リポ酸はチオクト酸としても公知である。α－リポ酸は、Ｒ，Ｓ－（＋／－）－α－リポ酸、Ｒ－（＋）－α－リポ酸、Ｓ－（－）－α－リポ酸のいずれであってもよい。α－リポ酸は、酸の形態であってもよく、塩の形態であってもよい。市販の任意のα－リポ酸が用いられ得る。α－リポ酸は、粉末または結晶の形態であり得る。
　（１ｂ．非イオン性界面活性剤）
　本発明において用いられる非イオン性界面活性剤は、非イオン性であれば任意の界面活性剤であり得る。本発明において用いられる非イオン性界面活性剤の例としては、特に限定はないが、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル類、プロピレングリコール脂肪酸エステル、モノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル等が挙げられる。本発明において用いられる非イオン性界面活性剤としては特に、ＨＬＢ値が約１０以上であるものが好ましい。本発明において用いられる非イオン性界面活性剤としては特に、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂肪酸エステルからなる群より選択される非イオン性界面活性剤であって、かつＨＬＢ値が約１０以上であるものが好ましい。本発明においてはさらに、非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）オクチルドデシルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ポリオキシプロピレン（重合度４～８）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度２０～１００）硬化ヒマシ油およびショ糖ラウリン酸エステルからなる群より選択されることが特に好ましい。本発明においては、１種類の非イオン性界面活性剤を使用してもよく、または２種類以上の非イオン性界面活性剤を組み合わせて使用してもよい。ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、約１０以上であることが好ましく、約１２以上であることがより好ましく、約１４以上であることが最も好ましい；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、約２０以下であることが好ましく、約１８以下であることがより好ましく、約１６以下であることが最も好ましい。
　非イオン性界面活性剤は、室温で固体のもの（すなわち、融点が室温よりも高い界面活性剤）であってもよく、室温で液体のもの（すなわち、融点が室温よりも低い界面活性剤）であってもよい。本願明細書中で「液状の非イオン性界面活性剤」との用語は、室温で液体の非イオン性界面活性剤を使用する実施形態と、室温で固体の非イオン性界面活性剤を加熱して融解させて液状にして使用する実施形態との両方に関して用いられる。
　本明細書中で用いられる場合、「ＨＬＢ値」とは、親水性疎水性バランス値（Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｅ　Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ　Ｂａｌａｎｃｅ　ｖａｌｕｅ）をいい、一般に、２０×ＭＨ／Ｍにより計算され、ここで、ＭＨ＝親水基部分の分子量であり、Ｍ＝分子全体の分子量である。ＨＬＢ値は、分子中の親水基の量が０％のとき０であり、１００％のとき２０である。ＨＬＢ値は、界面活性剤では界面活性剤分子を形成する親水性および疎水性の基の大きさと強さを表し、疎水性の高い界面活性剤はＨＬＢ値が小さく、親水性の高い界面活性剤はＨＬＢ値が大きい。
　本発明において好適に使用されるポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の例としては、酸化エチレンの重合度が任意のものであるポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が挙げられる。例えば、酸化エチレンの重合度が約１０以上のものが好ましく、酸化エチレンの重合度が約２００以下のものが好ましい。さらにより好ましいポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の例としては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油８０が挙げられる。なお、この数字は、酸化エチレンの重合度の程度を表し、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０は、酸化エチレンの付加モル数が４０であることを示す。
　本発明において好適に使用されるポリオキシエチレンアルキルエーテルの例としては、酸化エチレンの重合度が任意のものであるポリオキシエチレンアルキルエーテルが挙げられる。酸化エチレンの重合度が約１０以上のものが好ましく、酸化エチレンの重合度が約２０以下のものが好ましい。さらにより好ましいポリオキシエチレンアルキルエーテルの例としては、例えば、ポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル（ＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルとも記載される）、ポリオキシエチレン（２０）オクチルドデシルエーテル（ＰＯＥ（２０）オクチルドデシルエーテルとも記載される）およびポリオキシエチレン（２０）イソステアリルエーテル（ＰＯＥ（２０）イソステアリルエーテル）が挙げられる。この（２０）という数字は酸化エチレンの重合度が２０であることを示す。
　本発明において好適に使用されるポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの例としては、酸化エチレンの重合度が任意のものであるポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルが挙げられる。酸化エチレンの重合度が約１０以上のものが好ましく、酸化エチレンの重合度が約２０以下のものが好ましい。さらにより好ましいポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの例としては、例えば、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート（ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノオレエートとも記載される）、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート（ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウレートとも記載される）、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート（ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレートとも記載される）、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート（ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノパルミテートとも記載される）およびポリオキシエチレン（２０）ソルビタントリオレート（ＰＯＥ（２０）ソルビタントリオレートとも記載される）が挙げられる。この（２０）という数字は酸化エチレンの重合度が２０であることを示す。
　本発明において好適に使用されるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルの例としては、酸化エチレンの重合度が任意のものであるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンエーテルが挙げられる。ポリオキシエチレン部分の重合度が約１０以上のものが好ましく、ポリオキシエチレン部分の重合度が約２０以下のものが好ましい。ポリオキシプロピレン部分の重合度が約４以上のものが好ましく、ポリオキシプロピレン部分の重合度が約８以下のものが好ましい。さらにより好ましいポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルの例としては、例えば、ポリオキシエチレン（２０）ポリオキシプロピレン（８）セチルエーテル（ＰＯＥ（２０）ＰＯＰ（８）セチルエーテルとも記載される）、ポリオキシエチレン（２０）ポリオキシプロピレン（４）セチルエーテル（ＰＯＥ（２０）ＰＯＰ（４）セチルエーテルとも記載される）、ポリオキシエチレン（３４）ポリオキシプロピレン（２３）セチルエーテル（ＰＯＥ（３４）ＰＯＰ（２３）セチルエーテルとも記載される）、ポリオキシエチレンポリオキシエチレンプロピレンデシルテトラデシルエーテル（ＰＯＥＰＯＥプロピレンデシルテトラデシルエーテルとも記載される）およびポリオキシエチレン（２０）イソステアリルエーテル（ＰＯＥ（２０）イソステアリルエーテルとも記載される）が挙げられる。
　本発明において好適に使用されるポリグリセリン脂肪酸エステル類の例としては、例えば、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノオレートおよびデカグリセリンモノステアレートが挙げられる。使用されるポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は特に限定はされないが、ＨＬＢ値は好ましくは約８以上であり、より好ましくは約１０以上であり、さらに好ましくは約１２以上である。ＨＬＢ値は好ましくは約２０以下であり、より好ましくは約１９以下であり、さらに好ましくは約１８以下である。
　本発明において好適に使用されるショ糖脂肪酸エステル類の例としては、例えば、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステルおよびショ糖ラウリン酸エステルが挙げられる。中でもショ糖ラウリン酸エステルがより好適に使用される。
　本発明において、α－リポ酸ナノ粒子中の界面活性剤の含有量は、界面活性剤の種類により異なる。界面活性剤の量は、α－リポ酸重量の、好ましくは約１倍以上であり、より好ましくは約２倍以上であり、さらに好ましくは約３倍以上であり、特に好ましくは約４倍以上であり、最も好ましくは約５倍以上である。界面活性剤の量は、α－リポ酸重量の、好ましくは約４０倍以下であり、より好ましくは約３５倍以下であり、さらに好ましくは約３０倍以下であり、特に好ましくは約２５倍以下であり、最も好ましくは約２０倍以下である。α－リポ酸に対する界面活性剤の量が少なすぎると、ナノ粒子が凝集しやすくなり、透明かつ安定な粒子を得ることが難しい場合がある。α－リポ酸に対する界面活性剤の量が多すぎると、添加量を増やしてもそれにより得られる効果がそれほど増えない上に、α－リポ酸含量が相対的に低下する、使用時のハンドリングが悪くなる、本ナノ粒子を食品に利用した場合に界面活性剤由来の味が発現し商品価値を下げる、などの問題が生じ得る。
　（１ｃ．２価金属塩）
　本発明においては、２価金属塩が使用される。使用され得る２価金属塩の例としては、２価金属ハロゲン化物、２価金属酢酸化物および２価金属グルコン酸化物が挙げられる。
　２価金属酢酸化物とは、酢酸と２価金属との塩であり、酢酸二価金属塩ともいう。２価金属グルコン酸化物とは、グルコン酸と２価金属との塩であり、グルコン酸二価金属塩ともいう。２価金属塩は好ましくは、塩化カルシウム、臭化カルシウム、フッ化カルシウム、ヨウ化カルシウム、塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、フッ化マグネシウム、ヨウ化マグネシウム、塩化亜鉛、臭化亜鉛、フッ化亜鉛、ヨウ化亜鉛、酢酸カルシウム、酢酸マグネシウム、酢酸亜鉛、グルコン酸カルシウム、グルコン酸マグネシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択され、より好ましくは、塩化マグネシウム、塩化カルシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択される。市販の２価金属塩が使用され得る。１種類の２価金属塩を使用してもよく、２種類以上の２価金属塩を混合して使用してもよい。１種類の２価金属塩を使用することが好ましい。
　（１ｄ．アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物）
　本発明においては、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が使用される。アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物中のアルカリ金属の例としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、ルビジウム、セシウムおよびフランシウムが挙げられる。アルカリ金属は、ナトリウムまたはカリウムであることが好ましく、ナトリウムであることがさらに好ましい。本発明において使用され得るアルカリ金属炭酸化物の例としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムが挙げられ、炭酸ナトリウムが好ましい。本発明において使用され得るアルカリ金属リン酸化物の例としては、例えば、リン酸ナトリウムおよびリン酸カリウムが挙げられる。リン酸ナトリウムは、メタリン酸ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸ナトリウムまたはピロリン酸水素ナトリウムであり得、好ましくはリン酸水素二ナトリウムである。リン酸カリウムは、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウムまたはリン酸三カリウムであり得、好ましくはリン酸水素二カリウムである。
　市販のアルカリ金属炭酸化物およびアルカリ金属リン酸化物が使用され得る。１種類のアルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を使用してもよく、２種類以上のアルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を混合して使用してもよい。１種類のアルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を使用することが好ましい。
　（１ｅ．添加剤）
　本発明においては、添加剤を使用することができる。添加剤は、水溶性高分子であることが好ましい。添加剤の例としては、ポリエチレングリコール、植物系高分子、微生物系高分子、動物系高分子、デンプン類およびデキストリン類、セルロース類、ビニル系高分子およびアクリル系高分子が挙げられる。
　添加剤を用いることにより、ミセル表面へと水溶性高分子が吸着することによるミセルの凝集抑制効果および分散効果；ミセル間の水中（連続相）に高分子化合物が存在することによる立体障害によるミセルの凝集抑制効果；ならびに増粘によるミセルの凝集抑制効果などの効果が得られると考えられる。
　ポリエチレングリコールは、ＨＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨによって示される物質である。ポリエチレングリコールは、エチレングリコールの脱水重縮合によって生成したと考えられる構造をもち、両末端がヒドロキシル基であるポリエーテルである。分子量約２００から約２０，０００の種々のものが公知である。ポリエチレングリコールは、分子量が約２００～約６００では液体であり、分子量が約１０００を超えると固体である。ポリエチレングリコールは高分子であるので、通常、種々の分子量の分子の混合物として販売される。ポリエチレングリコールの数平均分子量は、好ましくは約５００以上であり、より好ましくは約６００以上であり、さらに好ましくは約７００以上であり、なおさらに好ましくは約８００以上であり、特に好ましくは約９００以上であり、そして最も好ましくは約１，０００以上である。ポリエチレングリコールの数平均分子量は、好ましくは約１０，０００以下であり、より好ましくは約９，０００以下であり、さらに好ましくは約８，０００以下であり、なおさらに好ましくは約７，０００以下であり、特に好ましくは約６，５００以下であり、そして最も好ましくは約２，０００以下である。本発明で好適に使用されるポリエチレングリコールの例としては、ポリエチレングリコール１０００、ポリエチレングリコール４０００、ポリエチレングリコール６０００が挙げられる。
　植物系高分子とは、植物から抽出または精製される高分子をいう。植物系高分子の例としては、アラビアガム、トラガカントガム、ガラクタン、グアガム、ローカストビーンガム、カラギナン、ペクチン、クインスシード（マルメロ種子）抽出物、褐藻粉末などが挙げられる。
　微生物系高分子とは、微生物から抽出または精製される高分子をいう。微生物系高分子の例としては、キサンタンガム、デキストラン、プルランなどが挙げられる。
　動物系高分子とは、動物から抽出または精製される高分子をいう。動物系高分子の例としては、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、ゼラチン、ヒアルロン酸などが挙げられる。
　デンプン類およびデキストリン類とは、デンプンおよびデキストリン、ならびにそれらの化学修飾物、酵素処理物および物理的処理物をいう。デンプン類は、好ましくは、化学修飾されたデンプンである。デンプン類の例としては、カルボキシメチルデンプン、メチルヒドロキシデンプンなどが挙げられる。
　セルロース類とは、セルロース類およびその化学修飾物、酵素処理物および物理的処理物をいう。セルロース類の例としては、メチルセルロース、ニトロセルロース、エチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、セルロース硫酸塩、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、結晶セルロース、セルロース末などが挙げられる。
　ビニル系高分子とは、ビニル系モノマーを重合して得られる高分子をいう。ビニル系高分子の例としては、ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマーなどが挙げられる。
　アクリル系高分子とは、アクリル系モノマーを重合して得られる高分子をいう。アクリル系高分子の例としては、ポリアクリル酸及びその塩、ポリアクリルイミドなどが挙げられる。
　（２．α－リポ酸ナノ粒子の製造方法）
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子の製造方法は、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程；該水性分散液に、２価金属塩を添加する工程であって、該２価金属塩が、２価金属ハロゲン化物、２価金属酢酸化物または２価金属グルコン酸化物である、工程；および該２価金属塩を添加した水性分散液に、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加して、α－リポ酸ナノ粒子を形成させる工程を包含する。
　好ましい実施形態では、前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、液状の非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解して界面活性剤溶液を得ること；および該界面活性剤溶液に水または水を含む液体を添加して水性分散液を得ることを含む。この実施形態では、以下に記載の「２ａ－１」、「２ｂ－１」、「２ｃ」および「２ｄ」を含む工程を行うことにより、α－リポ酸ナノ粒子を製造し得る。
　別の好ましい実施形態では、前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、α－リポ酸とアルカリ性物質と水との混合物を作製してα－リポ酸含有水性分散液を調製すること；および該α－リポ酸含有水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加することを含む。この実施形態では、以下に記載の「２ａ－２」、「２ｂ－２」、「２ｃ」および「２ｄ」を含む工程を行うことにより、α－リポ酸ナノ粒子を製造し得る。
　特定の好ましい実施形態では、本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子の方法は、α－リポ酸とアルカリ性物質と水との混合物を作製してα－リポ酸含有水性分散液を調製する工程（該水性分散液中でα－リポ酸がミセルを形成すると考えられる）；該水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加する工程（α－リポ酸と非イオン性界面活性剤との混合ミセルが形成すると考えられる）；該水性分散液に、２価金属塩を添加する工程であって、該２価金属塩が、２価金属ハロゲン化物、２価金属酢酸化物または２価金属グルコン酸化物である、工程；および該２価金属塩を添加した水性分散液に、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加して、α－リポ酸ナノ粒子を形成させる工程を包含する。
　（２ａ－１．α－リポ酸を液状の非イオン性界面活性剤に溶解する工程）
　α－リポ酸を非イオン性界面活性剤に最初に溶解させる実施形態を説明する。この実施形態においては、非イオン性界面活性剤を溶媒として用いる。すなわち、界面活性剤溶液を調製する。この実施形態においては、まず、液状の非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解して界面活性剤溶液を得る。このα－リポ酸は、非イオン性界面活性剤に直接添加してもよく、間接的に添加してもよい。「間接的に添加する」とは、他の物質と混合してから添加することをいう。例えば、α－リポ酸を添加剤と混合した後に非イオン性界面活性剤に添加してもよい。α－リポ酸は、通常、結晶または粉末の形態で市販されている。この実施形態では、α－リポ酸は、液状の非イオン性界面活性剤にほぼ完全に溶解する。非イオン性界面活性剤が室温で液状であれば、室温でこの溶解操作を行うことができるが、必要に応じて、加熱してこの溶解操作を行っても良い。非イオン性界面活性剤が室温で固体であれば、加熱して非イオン性界面活性剤を液状にして、この溶解操作を行う。この界面活性剤溶液を調製する際、必要に応じて、非イオン性界面活性剤に上述した添加剤を加えておいても良い。
　この界面活性剤溶液を調製する際、好ましくは、水を使用しない。すなわち、界面活性剤溶液を調製する際に混入する水の量は、α－リポ酸１００重量部に対して約５０重量部以下とすることが好ましく、約２０重量部以下とすることがより好ましく、約１０重量部以下とすることがさらに好ましく、約５重量部以下とすることがいっそう好ましく、約１重量部以下とすることが特に好ましい。水分量の下限は特にないが、α－リポ酸１００重量部に対して約０．００１重量部以上、約０．０１重量部以上、または約０．１重量部以上の水が混合される条件を採用してもよい。
　α－リポ酸はアルコールには溶解するが、本発明においてはアルコールを実質的に使用しないことが好ましい。アルコールを使用するとα－リポ酸のミセル形成効率に悪影響を及ぼし得る。従って、例えば、α－リポ酸１００重量部に対して、アルコールの使用量を約１０重量部以下とすることが好ましく、約５重量部以下とすることがより好ましく、約１重量部以下とすることがさらに好ましく、約０．５重量部以下とすることが特に好ましく、約０．１重量部以下とすることが最も好ましい。ただし、必要に応じてアルコールを使用する場合、そのアルコールの使用量の下限は特にないが、例えば、α－リポ酸１００重量部に対して、アルコールの使用量が約０．０１重量部以上に設定することは可能である。
　なお、後述する実施形態では、α－リポ酸を溶解させる際にアルカリ性化合物を使用するが、本実施形態では、アルカリ性化合物を使用してα－リポ酸を溶解させる必要はない。本実施形態において、α－リポ酸を非イオン性界面活性剤に溶解する際には、好ましくは、α－リポ酸および非イオン性界面活性剤以外の材料を用いずに、当該溶解操作を行う。例えば、アルカリ性化合物を実質的に使用せずに、当該溶解操作を行うことができる。従って、溶解操作を行う際に使用されるアルカリ性化合物の量については、例えば、α－リポ酸１００重量部に対して、アルカリ性化合物の使用量を５重量部以下とすることが可能であり、約１重量部以下とすることも可能であり、約０．５重量部以下とすることも可能であり、約０．１重量部以下とすることも可能であり、約０．０５重量部以下とすることも可能であり、約０．０１重量部以下とすることも可能である。
　なお、α－リポ酸を非イオン性界面活性剤に溶解した後、水を加える際には、必要に応じて、水とともにアルカリを同時に添加しても良く、アルカリ性の水（例えば、塩基性化合物の水溶液）を添加しても良い。
　非イオン性界面活性剤は、融点が室温以上のものは、加熱して融解することが好ましい。加熱は、使用する非イオン性界面活性剤が融解するに充分な温度になるように行われればよい。α－リポ酸を分解するおそれがあるので、非イオン性界面活性剤の温度が約７０℃以上になるような、過度の加熱は好ましくない。α－リポ酸を添加する際の非イオン性界面活性剤の温度は、この非イオン性界面活性剤の融点より高く、（融点＋２０℃）以下であることが好ましく、（融点＋１５℃）以下であることがより好ましく、（融点＋１０℃）以下であることが最も好ましい。
　非イオン性界面活性剤とα－リポ酸との混合物の作製の際に、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤との混合（ミセル形成）に実質的に悪影響を及ぼさない限り、他の物質をまた混合してもよい。例えば、非イオン性界面活性剤と添加剤（例えば、ポリエチレングリコール）とを混合した後にα－リポ酸を添加することにより混合物を作製してもよい。あるいは、非イオン性界面活性剤とα－リポ酸との混合物に添加剤（例えば、ポリエチレングリコール）を添加してもよい。
　α－リポ酸を添加した後の混合物をよく攪拌することが好ましい。
　α－リポ酸の量は、工程２ｂ－１で得られるα－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度が、臨界ミセル濃度以上になるように選択される。α－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度は、好ましくは約０．１重量％以上であり、より好ましくは約０．５重量％以上であり、より好ましくは約１．０重量％以上である。α－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度は、好ましくは約２０重量％以下であり、より好ましくは約１６重量％以下であり、さらに好ましくは約１４重量％以下であり、特に好ましくは約１２重量％以下であり、最も好ましくは約１０重量％以下である。
　α－リポ酸を溶解するために使用される非イオン性界面活性剤の量は、任意に選択され得るが、α－リポ酸の量を１００としたときに、重量比で、好ましくは約１００以上であり、より好ましくは約２００以上であり、さらに好ましくは約３００以上であり、特に好ましくは約４００以上であり、最も好ましくは約５００以上である。この工程で添加される非イオン性界面活性剤の量は、α－リポ酸の量を１００としたときに、重量比で、好ましくは約４０００以下であり、より好ましくは約３５００以下であり、さらに好ましくは約３０００以下であり、特に好ましくは約２５００以下であり、最も好ましくは約２０００以下である。
　（２ｂ－１．非イオン性界面活性剤とα－リポ酸との混合物に水を添加してα－リポ酸含有水性分散液を得る工程）
　次いで、非イオン性界面活性剤とα－リポ酸との混合物に水を添加して、α－リポ酸含有水性分散液が得られる。α－リポ酸含有水性分散液の作製の際に、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤との混合（ミセル形成）に実質的に悪影響を及ぼさない限り、他の物質をまた混合してもよい。
　非イオン性界面活性剤とα－リポ酸との混合物に水を添加して混合することにより、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤との混合ミセルが自然に形成されると考えられる。この実施形態では、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とが規則的に配列している状態から、水の添加によって一気に混合ミセルが形成されると考えられるので、非常に安定的に混合ミセルを形成できると考えられる。水を添加した後の溶液をよく攪拌することが好ましい。攪拌は、ある程度の時間継続されることが好ましい。攪拌時間は、好ましくは約１０分間以上であり、より好ましくは約２０分間以上であり、さらに好ましくは約２５分間以上であり、最も好ましくは約３０分間以上である。攪拌時間に特に上限はない。例えば、約４８時間以下、約２４時間以下、約１８時間以下、約１２時間以下、約６時間以下、約４時間以下、約２時間以下、約１時間以下、約５０分間以下、約４０分間以下、約３５分間以下など、任意に設定され得る。
　このようにしてα－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液が得られる。
　（２ａ－２．α－リポ酸とアルカリを混合する工程）
　α－リポ酸とアルカリを最初に混合する実施形態のα－リポ酸ナノ粒子の製造方法においては、まず、α－リポ酸とアルカリ性物質と水との混合物を作製してα－リポ酸含有水性分散液が調製される。α－リポ酸は、通常、結晶または粉末の形態で市販されている。α－リポ酸を水に添加すると、分散はするが、完全に溶解することはない。α－リポ酸はアルコールには溶解するが、本発明においてはアルコールを使用しないことが好ましい。アルコールを使用するとα－リポ酸のミセル形成効率に悪影響を及ぼし得る。アルカリ性物質は、任意のアルカリ性物質であり得るが、好ましくは、強塩基であり、より好ましくは水酸化ナトリウムである。
　α－リポ酸含有水性分散液は、例えば、まず、水にα－リポ酸を添加して混合し、そこにアルカリ性溶液を添加して混合することによって作製され得る。α－リポ酸含有水性分散液はまた、水にα－リポ酸を添加して混合し、そこにアルカリ性物質を添加して混合することによっても作製され得る。α－リポ酸含有水性分散液はまた、アルカリ性溶液にα－リポ酸を添加して混合することによっても作製され得る。α－リポ酸含有水性分散液はまた、水にα－リポ酸とアルカリ性物質とを添加して混合することによっても作製され得る。
　α－リポ酸含有水性分散液の作製の際に、α－リポ酸とアルカリとの混合（ミセル形成）に実質的に悪影響を及ぼさない限り、他の物質をまた混合してもよい。
　α－リポ酸含有水性分散液を作製するために使用されるα－リポ酸の量は、α－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度が、臨界ミセル濃度以上になるように選択される。α－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度は、好ましくは約０．１重量％以上であり、より好ましくは約０．５重量％以上であり、より好ましくは約１．０重量％以上である。α－リポ酸含有水性分散液中のα－リポ酸の濃度は、好ましくは約２０重量％以下であり、より好ましくは約１６重量％以下であり、さらに好ましくは約１４重量％以下であり、特に好ましくは約１２重量％以下であり、最も好ましくは約１０重量％以下である。
　α－リポ酸含有水性分散液を作製するために使用されるアルカリ性物質の量は、α－リポ酸を水に分散させる量であれば任意の量であり得る。アルカリ性物質の量は、好ましくは、α－リポ酸含有水性分散液のｐＨを約６．５以上にする量である。アルカリ性物質の量は、好ましくは、α－リポ酸含有水性分散液のｐＨを約１３．５以下にする量であり、より好ましくはα－リポ酸含有水性分散液のｐＨを約１３．０以下にする量であり、特に好ましくはα－リポ酸含有水性分散液のｐＨを約１２．５以下にする量である。
　このようにしてα－リポ酸含有水性分散液が得られる。
　（２ｂ－２．α－リポ酸含有水性分散液と非イオン性界面活性剤を添加する工程）
　次いで、このα－リポ酸含有水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加する。α－リポ酸のミセルの表面は、マイナス荷電で覆われた状態となっているため、容易に２価金属イオン、たとえばカルシウムイオン（Ｃａ２＋）が吸着（結合）し、ナトリウムイオンとの交換反応が生じ得る。この場合、２価金属イオンはナトリウムイオンに比較して吸着力（結合力）が高いことから、２価金属イオンを吸着したミセルは、その表面の荷電は解離しにくくなり、水に不溶化して、ミセルが沈澱する。沈澱を生じると、粒子同士の凝集が生じ、非常に大きな粒子を形成することとなる。この段階での粒子同士の凝集を防ぐために、非イオン性界面活性剤が添加される。非イオン性界面活性剤は、α－リポ酸と共に混合ミセルを形成し、ミセル表面上に親水基を突出させるために、多価金属イオンがミセル表面に吸着（結合）しても、ミセル表面に突出した親水基の存在により、ミセルの沈澱が生じないこととなると考えられる。
　この工程で添加される非イオン性界面活性剤の量は任意に選択され得るが、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、重量比で、好ましくは約１００以上であり、より好ましくは約２００以上であり、さらに好ましくは約３００以上であり、特に好ましくは約４００以上であり、最も好ましくは約５００以上である。この工程で添加される非イオン性界面活性剤の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、重量比で、好ましくは約４０００以下であり、より好ましくは約３５００以下であり、さらに好ましくは約３０００以下であり、特に好ましくは約２５００以下であり、最も好ましくは約２０００以下である。
　α－リポ酸含有水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加して混合することにより、α－リポ酸と非イオン性界面活性剤との混合ミセルが自然に形成されると考えられる。非イオン性界面活性剤を添加した後の溶液をよく攪拌することが好ましい。攪拌は、ある程度の時間継続されることが好ましい。攪拌時間は、好ましくは約１０分間以上であり、より好ましくは約２０分間以上であり、さらに好ましくは約２５分間以上であり、最も好ましくは約３０分間以上である。攪拌時間に特に上限はない。例えば、約４８時間以下、約２４時間以下、約１８時間以下、約１２時間以下、約６時間以下、約４時間以下、約２時間以下、約１時間以下、約５０分間以下、約４０分間以下、約３５分間以下など、任意に設定され得る。
　このようにしてα－リポ酸と非イオン性界面活性剤を含む水性分散液が得られる。
　（２ｃ．２価金属塩を添加する工程）
　次いで、上記２ｂ－１または２ｂ－２で調製された水性分散液に、２価金属塩が添加される。２価金属塩は、この水性分散液に直接添加されてもよく、水溶液として添加されてもよいが、好ましくは、２価金属塩の水溶液として添加される。
　２価金属塩を添加すべき水性分散液は、前の工程のものがそのまま使用され得るが、好ましくは、使用する金属塩に応じて、金属塩を添加する直前にｐＨが調整される。
　本発明者らは、α－リポ酸においてはα－リポ酸の分散に好適なｐＨと、２価金属塩を添加する際に好適なｐＨとが異なり、α－リポ酸および非イオン性界面活性剤を含む混合ミセルを含む水性分散液に２価の金属イオンを付加する際に、金属イオンの種類によって好適なｐＨが存在することを見出した。このｐＨは、２価の金属イオンがＭｇ２＋の際には約１２．０以下、Ｃａ２＋の際には約１２．０以下、Ｚｎ２＋の際には約９．５以下であることが望ましく、さらに好ましくはＭｇ２＋の際には約１１．５以下、Ｃａ２＋の際には約１１．５以下、Ｚｎ２＋の際には約８．８以下が望ましい。
　２価金属塩が塩化カルシウム、臭化カルシウム、フッ化カルシウム、ヨウ化カルシウム、酢酸カルシウムまたはグルコン酸カルシウムである場合、２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは、好ましくは約３．４以上であり、より好ましくは約３．６以上であり、特に好ましくは約３．８以上であり、最も好ましくは約４．０以上であり；２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは好ましくは約１２．０以下であり、さらに好ましくは約１１．９以下であり、特に好ましくは約１１．７以下であり、最も好ましくは約１１．５以下である。
　２価金属塩が塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、フッ化マグネシウム、ヨウ化マグネシウム、酢酸マグネシウムまたはグルコン酸マグネシウムである場合、２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは、好ましくは約３．４以上であり、より好ましくは約３．６以上であり、特に好ましくは約３．８以上であり、最も好ましくは約４．０以上であり；２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは好ましくは約１２．０以下であり、さらに好ましくは約１１．９以下であり、特に好ましくは約１１．７以下であり、最も好ましくは約１１．５以下である。
　２価金属塩が塩化亜鉛、臭化亜鉛、フッ化亜鉛、ヨウ化亜鉛、酢酸亜鉛またはグルコン酸亜鉛である場合、２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは、好ましくは約３．５以上であり、より好ましくは約３．７以上であり、最も好ましくは約３．９以上であり；２価金属塩を添加する直前の水性分散液のｐＨは好ましくは約９．５以下であり、さらに好ましくは約９．２以下であり、最も好ましくは約８．８以下である。
　この工程で添加される２価金属塩の量は任意に選択され得るが、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約１０以上であり、より好ましくは約２０以上であり、さらに好ましくは約３０以上であり、特に好ましくは約４０以上であり、最も好ましくは約５０以上である。この工程で添加される２価金属塩の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約２００以下であり、より好ましくは約１６０以下であり、さらに好ましくは約１４０以下であり、特に好ましくは約１２０以下であり、最も好ましくは約１００以下である。
　水性分散液に２価金属塩を添加して混合することにより、混合ミセル表面のマイナス電荷に２価の金属イオンが結合して、α－リポ酸のミセル同士の凝集および沈澱が防御されると考えられる。２価金属塩を添加した後の溶液をよく攪拌することが好ましい。攪拌は、ある程度の時間継続されることが好ましい。攪拌時間は、好ましくは約１０分間以上であり、より好ましくは約２０分間以上であり、さらに好ましくは約２５分間以上であり、最も好ましくは約３０分間以上である。攪拌時間に特に上限はない。例えば、約４８時間以下、約２４時間以下、約１８時間以下、約１２時間以下、約６時間以下、約４時間以下、約２時間以下、約１時間以下、約５０分間以下、約４０分間以下、約３５分間以下など、任意に設定され得る。
　（２ｄ．アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加する工程）
　次いで、この２価金属塩を添加した水性分散液に、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が添加される。
　アルカリ金属炭酸化物およびアルカリ金属リン酸化物（「２価陰イオンを持つ塩」ともいう）の量は任意に選択され得るが、添加した２価金属塩の量を１としたときの２価陰イオンを持つ塩の量は、モル比で、好ましくは約０．０１以上であり、より好ましくは約０．０２以上であり、さらに好ましくは約０．１以上である。添加した２価金属塩の量を１としたときの２価陰イオンを持つ塩の量は、モル比で、好ましくは約０．８０以下であり、より好ましくは約０．７０以下であり、さらに好ましくは約０．６０以下である。特定の実施形態では、添加した２価金属塩の量を１としたときの２価陰イオンを持つ塩の量は、モル比で、例えば、約０．６０以下、約０．５０以下または約０．４０以下であってもよい。添加した２価金属塩の量を１としたときの２価陰イオンを持つ塩の量は、モル比で、最も好ましくは０．２である。２価金属塩の量に対する２価陰イオンを持つ塩の量が少なすぎるとミセル表面のプラス電荷が中和されず、ミセル同士の凝集及び沈殿の防御効率が低下するという場合がある。２価金属塩の量に対する２価陰イオンを持つ塩の量が多すぎると沈澱が生じやすくなる場合がある。
　例えば、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムのモル比を１：１とした場合、一昼夜放置すると沈澱が生じるようになるが、１：０．０１～０．８、特に１：０．４までの場合は透明で、長時間の放置でも沈澱を生じない。濁ったり、沈澱が生じたりする場合は、形成された粒子の粒子径が大きすぎるからであり、粒子径が大きすぎると、皮膚透過性が悪くなり、注射する場合でも不都合が生じる。しかし、透明で沈澱も生じない場合は、形成される粒子の粒子径が小さくかつ分布が狭い。したがって皮膚透過性もよく注射にも不都合が生じないのである。
　このようにして、水性分散液中でα－リポ酸ナノ粒子が形成される。
　この工程で添加される２価陰イオンを持つ塩の量は任意に選択され得るが、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約０．１以上であり、より好ましくは約０．５以上であり、さらに好ましくは約１．０以上であり、特に好ましくは約１．５以上であり、最も好ましくは約２．０以上である。この工程で添加される２価陰イオンを持つ塩の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約８０以下であり、より好ましくは約７４以下であり、さらに好ましくは約６８以下であり、特に好ましくは約６２以下であり、最も好ましくは約６０以下である。特定の実施形態では、この工程で添加される２価陰イオンを持つ塩の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、例えば、約５０以下、約４６以下、約４４以下、約４２以下または約４０以下であってもよい。
　２価金属塩を添加した水性分散液に２価陰イオンを持つ塩を添加して混合することにより、ミセル表面に結合した２価金属イオンに２価陰イオンが結合すると考えられる。ミセル表面に結合した２価金属塩に２価陰イオンが結合することにより、ミセル表面の荷電が実質的に中和されると考えられる。ミセル表面では、２価金属イオンと２価陰イオンとが結合して多価金属無機塩を形成していると考えられる。このようにしてミセル表面に多価金属無機塩の被膜が形成されており、その結果、ミセル同士の結合による沈澱が防御されていると考えられる。
　アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加した後の溶液をよく攪拌することが好ましい。攪拌は、ある程度の時間継続されることが好ましい。攪拌時間は、好ましくは約１０分間以上であり、より好ましくは約２０分間以上であり、さらに好ましくは約２５分間以上であり、最も好ましくは約３０分間以上である。攪拌時間に特に上限はない。例えば、約４８時間以下、約２４時間以下、約１８時間以下、約１２時間以下、約６時間以下、約４時間以下、約２時間以下、約１時間以下、約５０分間以下、約４０分間以下、約３５分間以下など、任意に設定され得る。
　（２ｅ．他の工程）
　上記の各工程を行うことにより、水性分散液中でα－リポ酸のナノ粒子が形成される。この水性分散液を必要に応じて乾燥させて粉末を得ることができる。乾燥は、当該分野で公知の任意の方法によって行われ得る。乾燥は、例えば、凍結乾燥、スプレードライ、ドラムドライなどによって行われる。凍結乾燥が好ましい。この方法に従って製造されたα－リポ酸ナノ粒子を含む粉末は、水に添加したときに容易に分散して透明な液を形成する。
　（３．α－リポ酸ナノ粒子）
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸と、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを含む。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の非イオン性界面活性剤の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、重量比で、好ましくは約１００以上であり、より好ましくは約２００以上であり、さらに好ましくは約３００以上であり、特に好ましくは約４００以上であり、最も好ましくは約５００以上である。本発明のα－リポ酸ナノ粒子中の非イオン性界面活性剤の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、重量比で、好ましくは約４０００以下であり、より好ましくは約３５００以下であり、さらに好ましくは約３０００以下であり、特に好ましくは約２５００以下であり、最も好ましくは約２０００以下である。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンの量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約１０以上であり、より好ましくは約２０以上であり、さらに好ましくは約３０以上であり、特に好ましくは約４０以上であり、最も好ましくは約５０以上である。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンの量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約２００以下であり、より好ましくは約１６０以下であり、さらに好ましくは約１４０以下であり、特に好ましくは約１２０以下であり、最も好ましくは約１００以下である。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の炭酸イオンまたはリン酸イオン（２価陰イオンともいう）の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約０．１以上であり、より好ましくは約０．５以上であり、さらに好ましくは約１．０以上であり、特に好ましくは約１．５以上であり、最も好ましくは約２．０以上である。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の炭酸イオンまたはリン酸イオンの量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、好ましくは約８０以下であり、より好ましくは約７４以下であり、さらに好ましくは約６８以下であり、特に好ましくは約６２以下であり、最も好ましくは約６０以下である。特定の実施形態では、この工程で添加される２価陰イオンを持つ塩の量は、α－リポ酸の濃度を１００としたときに、モル比で、例えば、約５０以下、約４６以下、約４４以下、約４２以下または約４０以下であってもよい。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンは、好ましくはカルシウムイオン、亜鉛イオンまたはマグネシウムイオンである。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンの量を１としたときの２価陰イオンの量は、モル比で、好ましくは約０．０１以上であり、より好ましくは約０．１０以上であり、さらに好ましくは約０．２０以上である。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンの量を１としたときの２価陰イオンの量は、モル比で、好ましくは約０．８０以下であり、より好ましくは約０．５０以下であり、さらに好ましくは約０．４０以下である。本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子中の２価金属イオンの量を１としたときの２価陰イオンの量は、モル比で、最も好ましくは約０．２である。
　（４．ターンオーバーを促進するための組成物）
　本発明の組成物は、皮膚のターンオーバーを促進するための組成物である。本発明の組成物は、α－リポ酸ナノ粒子を含む。
　本明細書中では、用語「皮膚のターンオーバー」とは、表皮の細胞の新陳代謝のサイクルをいう。本明細書中では、用語「皮膚のターンオーバーを促進する」とは、皮膚の新陳代謝を活発化することをいう。成人のターンオーバーは通常約２８日であるが、加齢に伴ってターンオーバーが延長され、高齢者では約４０～６０日になる。
　皮膚のターンオーバーにおいては、表皮層の底に並ぶ基底細胞が分裂し、分裂後の一部の細胞が上に押し上げられる。基底細胞は次々に分裂をするため、基底細胞よりも上の細胞は徐々に上に押し上げられていく。この押し上げられた細胞は、上に行くに従って有棘細胞、顆粒細胞などと名前と形を変えていく。この押し上げられた細胞が角質層に到達したときには細胞核を失っており、ケラチンというタンパク質を主成分とする硬い物質となる。上に押し上げられた細胞は、角質層に到達してから約２週間滞在した後、垢として剥がれ落ちる。また加齢や疾患によりターンオーバーが延長することが知られている。従って、本発明の組成物は、この基底細胞が分裂して角質層に到達し、最終的に垢として剥がれ落ちるまでの過程を促進し、それに要する時間を短縮する。
　基底層には、基底細胞とともにメラノサイトが存在する。メラノサイトは基底層の細胞の約５～１５％を占める。メラノサイトは、紫外線照射、刺激、炎症、酸化ストレス、老化等によるケラチノサイトからのシグナル異常などによりメラニンを形成する。メラニンを作るというシグナルを受けたメラノサイトは細胞中でチロシンを原料として使用してメラニンを形成する。形成されたメラニンはメラノサイトの突起に移動する。移動したメラニンは周囲の基底細胞に吸収される。吸収されたメラニンは基底細胞の細胞核を覆って紫外線を吸収することにより、細胞核を紫外線などの影響から保護する。メラニンは基底細胞がターンオーバーにより押し出されて剥がれ落ちる際に排出される。紫外線などの刺激により形成されるメラニンの量とターンオーバーにより排出されるメラニンの量とのバランスにより、皮膚がより白くなるかまたは黒くなるかが決まる。すなわち、形成されるメラニンの量よりもターンオーバーにより排出されるメラニンの量の方が多ければ皮膚のメラニン量が減少するので、美白効果が得られる。
　本発明の組成物は肌のターンオーバーを促進するため、本発明の組成物は、美白に役立つ。実際、実施例で示されるように、本発明の組成物を皮膚に塗布することによりメラニンが排出されて皮膚のメラニン量が減少し、皮膚が白くなった。このように、本発明の組成物は、皮膚のメラニンを排出するために使用され得る。例えば、本発明の組成物は美白のために使用され得る。
　本明細書中では、用語「美白」とは、皮膚の色素沈着を減らすことをいう。好ましくは、美白とは、皮膚のメラニン量を減少させることをいう。本発明の組成物は、例えば、シミ、ソバカス、色素沈着、皮膚の黒化症、老人性色素斑、肝斑などの疾患を軽減するために使用され得る。
　本発明の組成物は皮膚のターンオーバーを促進するため、皮膚の再生が促進される。そのため、本発明の組成物は、創傷治癒のために使用され得る。本明細書中では、用語「創傷治癒」とは、創傷が部分的または完全に治癒することをいう。
　本発明の組成物は皮膚のターンオーバーを促進するため、皮膚の再生が促進される。そのため、本発明の組成物は、皮膚の再生を促進するために使用され得る。
　皮膚の老化は、内因性老化と外因性老化の２種類に分けられる。内因性老化は遺伝的にプログラムされた老化である。内因性老化は、表皮萎縮である老化皮膚であるともいえる。外因性老化は、内因性老化に紫外線障害、環境汚染、厳しい気候、喫煙などの外的要因が加わったものである。内因性老化では、皮膚に浅いシワが増加し、皮膚が乾燥し、かつ菲薄化する。特に表皮は３０～８０歳の間に１０～５０％菲薄化するといわれている。加齢に伴って表皮角化細胞の再生率は低下し、ターンオーバーも低下する。（「スキンケアを科学する」、南江堂、１１２－１１４頁）。
　本発明の組成物は皮膚のターンオーバーを促進するため、皮膚が活性のある状態を維持することを促進し得る。そのため、本発明の組成物は、皮膚の若返りおよび老化防止（アンチエイジングともいう）を促進するために使用され得る。本発明の組成物はまた、老人性色素斑、老人性乾皮症およびアトピー性皮膚炎における乾燥肌、表情ジワなどの疾患を処置するために使用され得る。本発明の組成物はまた、皮膚のターンオーバー低下に関与する疾患を処置するために使用され得る。皮膚のターンオーバー低下に関与する疾患の例としては、角化症、アトピー性皮膚炎、円盤状エリトマトーデスおよび扁平苔癬が挙げられる。
　皮膚のターンオーバー異常に関与する疾患に関しては、皮膚のターンオーバーを促進することにより症状が改善すると考えられる。そのため、本発明の組成物はまた、皮膚のターンオーバー異常に関与する疾患を処置するために使用され得る。皮膚のターンオーバー異常に関与する疾患の例としては、乾癬およびニキビが挙げられる。
　本明細書においては、「処置する」とは、対象の疾患を治療、治癒、軽減または改善することをいう。
　本発明の組成物は、医薬品、医薬部外品または他の組成物として配合され得る。本発明の組成物は、経皮吸収剤として、他の非経口投与剤として、または経口投与剤として配合され得る。本発明の組成物は例えば、皮膚外用剤として配合され得る。
　本発明の組成物は、任意の公知の投与経路で投与することができる。例えば、本発明の組成物は、全身的に（例えば、静脈内に、気管内に、経脈管的に、肺内に、腹腔内に、鼻腔内に、非経口で、経腸的に、筋肉内注射により、皮下でまたは頭蓋内に）投与され得る。本発明の組成物はまた、経口投与により、エアロゾル投与により、または肺内点滴により投与され得る。
　（４ａ．皮膚外用剤の形態の本発明の組成物）
　１つの実施形態では、本発明のターンオーバー促進用組成物は、皮膚外用剤の形態である。
　本明細書において、用語「皮膚外用剤」とは皮膚に接触させることにより、所望の効果を達成する、皮膚に対して使用する製剤をいう。特に長時間継続的に皮膚に接触させる用途（例えば、約１時間以上継続的に皮膚に接触させる用途、または約５時間以上継続的に皮膚に接触させる用途）に本発明は有効である。
　皮膚外用剤の好ましい例は、ターンオーバー促進用化粧料である。
　化粧料の好ましい例としては、スキンケア化粧料が挙げられる。化粧料の具体的な例としては、化粧水、乳液、クリーム等のスキンケア化粧料、ファンデーション、アイシャドウ、口紅、頬紅などの化粧品、頭髪化粧料、エモリエントクリーム、エモリエントローション、クリーム、クリームリンス、コールドクリーム、バニッシングクリーム、ローション、パック剤、ジェル、フェイスパック、石鹸、ボディーソープ、シャンプー、コンディショナー、リンス、入浴剤、浴用剤、洗顔料、シェービングクリーム、ヘアクリーム、ヘアローション、ヘアートリートメント、髪パック、グロス、リップクリーム、ケーキ、などが挙げられる。特に、美白効果が望まれる用途に本発明は有効である。例えば、美白用基礎化粧品（例えば、化粧水、乳液など）に本発明は有効である。本発明は、長時間皮膚に接触させる用途に特に有効であるが、洗顔料やシャンプーなどのように、短時間で使用した後に洗い流してしまうような用途においても本発明は有効である。
　上述したとおり、化粧品も化粧料に含まれる。化粧品としては、清浄用化粧品、頭髪用化粧品、基礎化粧品、メークアップ化粧品、芳香化粧品、日焼け用化粧品、日焼け止め用化粧品、爪化粧品、アイライナー化粧品、アイシャドウ化粧品、チーク、口唇化粧品、口腔化粧品などに分類され、そのいずれの用途にも本発明は有効である。
　皮膚外用剤は、医薬品または医薬部外品であってもよい。例えば、薬学的に有効な成分を含む軟膏にα－リポ酸ナノ粒子を配合することもできる。
　乳液、化粧水、クリーム、シャンプー、洗顔料などの化粧品および医薬部外品などの皮膚外用剤にα－リポ酸ナノ粒子を配合することにより、シワ、シミ、ソバカス、色素沈着などの予防および治療に有効な皮膚外用剤が得られる。本発明の皮膚外用剤は、皮膚の新陳代謝を活発化する。さらに、本発明の皮膚外用剤は、紫外線などによるメラニン色素の形成を抑制するというよりも、既に形成されたメラニン色素の排出を促進することにより美白効果を発揮する。したがって、本発明の皮膚外用剤は、乾燥、紫外線などによる肌の黒化を軽減するため、シミ、ソバカス等の色素異常症を改善するため、およびくすみ、シワ、たるみ、脱毛等の老化現象を遅延させるのに有効である。
　本発明の皮膚外用剤の剤形の例としては、軟膏、リニメント剤、増粘ゲル系、ローション、油中水（Ｗ／Ｏ）型エマルジョン、水中油（Ｏ／Ｗ）型エマルジョン、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルジョン、Ｏ／Ｗ／Ｏ型エマルジョンなどの乳化型剤形、固形状、シート状、パウダー状、ジェル状、ムース状、油状、液状、練り状、スティック状、揮発性油状、ペースト状、ミスト状およびスプレー状が挙げられる。メーク落としパックなどのように、皮膚外用剤を布等に含浸させた形態の製品としてもよい。
　皮膚外用剤の剤形をローション、乳液、増粘ゲル系などとする場合、上記の成分の中でも特に、増粘剤のうち、アラビアガム、トラガカントガム、ガラクタン、グアガム、カラギナン、ローカストビーンガム、ペクチン、クインスシード（マルメロ種子）抽出物、褐藻粉末などの植物系高分子；キサンタンガム、デキストラン、プルランなどの微生物系高分子；コラーゲン、カゼイン、アルブミン、ゼラチン、ヒアルロン酸などの動物系高分子；カルボキシメチルデンプン、メチルヒドロキシデンプンなどのデンプン類；メチルセルロース、ニトロセルロース、エチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、セルロース硫酸塩、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、結晶セルロース、セルロース末などのセルロース類；ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマーなどのビニル系高分子；ポリアクリル酸及びその塩、ポリアクリルイミドなどのアクリル系高分子；グリチルリチン酸やアルギン酸などの有機系増粘剤；ベントナイト、ヘクトライト、ラボナイト、珪酸アルミニウムマグネシウム、無水珪酸などの無機系増粘剤；などからなる水溶性増粘剤と、アルコールのうち、エタノール、イソプロパノールなどの低級アルコールとを配合することが効果を増大させる点で好ましい。
　皮膚外用剤の形態の本発明の組成物は公知の方法により製造することができる。
　本明細書中では、α－リポ酸ナノ粒子を繊維に結合したり、繊維材料に混合したり、繊維に含浸させたり、または布帛の表面に塗布したりすることにより、その繊維または布帛から製造した衣類（例えば、肌着など）と皮膚とが接触したときにα－リポ酸ナノ粒子が経皮吸収されるような利用方法におけるα－リポ酸ナノ粒子を含む衣類も、皮膚外用剤の概念に含む。α－リポ酸ナノ粒子を繊維に結合することは、例えば、架橋などにより行われ得る。化合物を繊維に結合する方法、繊維材料に混合する方法、繊維に含浸させる方法、布帛表面に塗布する方法などは、当該分野で公知である。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子を皮膚外用剤に添加するには特別な工程を必要とせず、皮膚外用剤の製造工程の初期において原料と共に添加するか、製造工程中に添加するか、あるいは製造工程の終期に添加する。添加方式は混和、混練、溶解、浸漬、散布、噴霧、塗布等通常の方法を皮膚外用剤の種類および性状に応じて選択する。本発明の皮膚外用剤は、当業者に公知の方法に従って調製され得る。
　本発明の皮膚外用剤に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約０．００２重量％以上であり、より好ましくは約０．０１重量％以上であり、さらに好ましくは約０．１重量％以上であり、特に好ましくは約０．５重量％以上であり、最も好ましくは約１．０重量％以上である。本発明の皮膚外用剤に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約１０重量％以下であり、より好ましくは約８重量％以下であり、さらに好ましくは約５重量％以下であり、特に好ましくは約４重量％以下であり、最も好ましくは約３重量％以下である。
　本発明の皮膚外用剤の投与量、投与頻度および投与期間は、投与形態、患者の年令、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などに応じて決められる。本発明の皮膚外用剤の投与量は、α－リポ酸の量として、塗布面積１ｃｍ２当たり一日約１ｎｇ以上であることが好ましく、約１０ｎｇ以上であることがさらに好ましく、約１００ｎｇ以上であることが最も好ましい。本発明の皮膚外用剤の投与量は、α－リポ酸の量として、塗布面積１ｃｍ２当たり一日約２５０μｇ以下であることが好ましく、約８０μｇ以下であることが好ましく、約２０μｇ以下であることがさらに好ましく、約８μｇ以下であることが最も好ましい。
　本発明の皮膚外用剤の投与頻度は、好ましくは１日３回～３日に１回、より好ましくは１日２回～２日に１回、さらに好ましくは１日１回である。
　本発明の皮膚外用剤の投与期間は、任意に決定され得るが、好ましくは約１日以上であり、より好ましくは約３日以上であり、さらに好ましくは約１週間以上である。本発明の皮膚外用剤の投与期間は、例えば、約１年以下、約６ヶ月以下、約３ヶ月以下、約１ヶ月以下、約３週間以下、約２週間以下、約１週間以下などであり得る。必要な場合、本発明の皮膚外用剤は、ほぼ永続的に投与されてもよい。
　（４ｂ．α－リポ酸ナノ粒子を含む徐放性皮膚外用剤）
　本発明の皮膚外用剤は、ターンオーバー促進用の徐放性製剤であり得る。徐放性製剤は、固体であっても、半固体であっても、液体であってもよいが、好ましくは液体である。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子を徐放性製剤に添加するには特別な工程を必要とせず、徐放性製剤の製造工程の初期において原料と共に添加するか、製造工程中に添加するか、あるいは製造工程の終期に添加する。添加方式は混和、混練、溶解、浸漬、散布、噴霧、塗布等通常の方法を徐放性製剤の種類および性状に応じて選択する。本発明の徐放性製剤は、当業者に公知の方法に従って調製され得る。
　本発明の徐放性製剤に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約０．００２重量％以上であり、より好ましくは約０．０１重量％以上であり、さらに好ましくは約０．１重量％以上であり、特に好ましくは約０．５重量％以上であり、最も好ましくは約１．０重量％以上である。本発明の徐放性製剤に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約１０重量％以下であり、より好ましくは約８重量％以下であり、さらに好ましくは約５重量％以下であり、特に好ましくは約４重量％以下であり、最も好ましくは約３重量％以下である。
　本発明の徐放性製剤の投与量、投与頻度および投与期間は、投与形態、患者の年令、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などに応じて決められる。本発明の徐放性製剤の投与量は、α－リポ酸の量として、塗布面積１ｃｍ２当たり一日約１ｎｇ以上であることが好ましく、約１０ｎｇ以上であることがさらに好ましく、約１００ｎｇ以上であることが最も好ましい。本発明の皮膚外用剤の投与量は、α－リポ酸の量として、塗布面積１ｃｍ２当たり一日約２５０μｇ以下であることが好ましく、約８０μｇ以下であることがより好ましく、約２０μｇ以下であることがさらに好ましく、約８μｇ以下であることが最も好ましい。
　本発明の徐放性製剤の投与頻度は、好ましくは１日３回～３日に１回、より好ましくは１日２回～２日に１回、さらに好ましくは１日１回である。
　本発明の徐放性製剤の投与期間は、任意に決定され得るが、好ましくは約１日以上であり、より好ましくは約３日以上であり、さらに好ましくは約１週間以上である。本発明の徐放性製剤の投与期間は、例えば、約１年以下、約６ヶ月以下、約３ヶ月以下、約１ヶ月以下、約３週間以下、約２週間以下、約１週間以下などであり得る。必要な場合、本発明の徐放性製剤は、ほぼ永続的に投与されてもよい。
　（４ｃ．α－リポ酸ナノ粒子を含む口腔用組成物）
　本発明の口腔用組成物は、本発明のα－リポ酸ナノ粒子を含有する。口腔用組成物は、任意の口腔用組成物であり得る。口腔用組成物は、固体であっても、半固体であっても、液体であってもよいが、好ましくは液体である。口腔用組成物の例としては、歯磨剤（例えば、練り歯磨、粉歯磨きなど）、歯用クリーム、含嗽剤（マウスウォッシュを含む）、マウススプレー、崩壊性フィルム、ゲル、トローチが挙げられる。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子を口腔用組成物に添加するには特別な工程を必要とせず、口腔用組成物の製造工程の初期において原料と共に添加するか、製造工程中に添加するか、あるいは製造工程の終期に添加する。添加方式は混和、混練、溶解、浸漬、散布、噴霧、塗布等通常の方法を口腔用組成物の種類および性状に応じて選択する。本発明の口腔用組成物は、当業者に公知の方法に従って調製され得る。
　本発明の口腔用組成物に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約０．００２重量％以上であり、より好ましくは約０．０１重量％以上であり、さらに好ましくは約０．１重量％以上であり、特に好ましくは約０．５重量％以上であり、最も好ましくは約１．０重量％以上である。本発明の口腔用組成物に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約１０重量％以下であり、より好ましくは約８重量％以下であり、さらに好ましくは約５重量％以下であり、特に好ましくは約４重量％以下であり、最も好ましくは約３重量％以下である。
　（４ｅ．α－リポ酸ナノ粒子を含む食品）
　本発明の食品は、皮膚のターンオーバーを促進するための食品であり、α－リポ酸ナノ粒子を含有する。食品は、任意の食品であり得る。食品は、固体であっても、半固体であっても、液体であってもよいが、好ましくは液体である。食品は、好ましくは、健康食品であり、より好ましくは健康飲料であるが、これらに限定されない。健康食品は、その健康食品に含まれるα－リポ酸と同じ通常の用途に用いられ得る。健康食品の用途・効能の例としては、皮膚のターンオーバーの促進、シワ、シミ、ソバカスおよび色素沈着の軽減、などが挙げられる。
　食品は、例えば、冷菓（アイスクリーム、アイスミルク、氷菓など）、嗜好性飲料（例えば、清涼飲料、炭酸飲料（サイダー、ラムネ等）、薬味飲料、アルコール性飲料、粉末ジュースなど）、乳製品（牛乳、ヨーグルト、アイスクリーム、バター、マーガリン、チーズ、ホイップクリーム等）、菓子類（洋菓子、和菓子、スナック菓子等、例えば、あんこ、羊羹、饅頭、チョコレート、ガム、ゼリー、寒天、杏仁豆腐、ケーキ、カステラ、クッキー、煎餅、錠菓等）、パン、餅、水産練製品（蒲鉾、ちくわ等）、畜肉加工品（ソーセージ、ハム等）、果実加工品（ジャム、マーマレード、果実ソース等）、調味料（ドレッシング、マヨネーズ、味噌等）、麺類（うどん、そば等）、漬物、および蓄肉、魚肉、果実の瓶詰、缶詰類などであり得る。
　本発明の方法で合成されたα－リポ酸ナノ粒子を食品に添加するには特別な工程を必要とせず、食品の製造工程の初期において原料と共に添加するか、製造工程中に添加するか、あるいは製造工程の終期に添加する。添加方式は混和、混練、溶解、浸漬、散布、噴霧、塗布等通常の方法を食品の種類および性状に応じて選択する。本発明の食品は、当業者に公知の方法に従って調製され得る。
　本発明の食品に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約０．０１重量％以上であり、より好ましくは約０．０５重量％以上であり、さらに好ましくは約０．１重量％以上であり、特に好ましくは約０．５重量％以上であり、最も好ましくは約１．０重量％以上である。本発明の食品に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約１０重量％以下であり、より好ましくは約８重量％以下であり、さらに好ましくは約５重量％以下であり、特に好ましくは約４重量％以下であり、最も好ましくは約３重量％以下である。
　本発明の食品の投与量、投与頻度および投与期間は、投与形態、患者の年令、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などに応じて決められる。本発明の食品の投与量は、α－リポ酸の量として、１日体重１ｋｇ当たり約０.１ｍｇ以上であることが好ましく、約０.２ｍｇ以上であることがさらに好ましく、約０.４ｍｇ以上であることが最も好ましい。本発明の食品の投与量は、α－リポ酸の量として、１日体重１ｋｇ当たり約５ｍｇ以下であることが好ましく、約３ｍｇ以下であることがさらに好ましく、約１ｍｇ以下であることが最も好ましい。
　本発明の食品の投与頻度は、好ましくは１日３回～３日に１回、より好ましくは１日２回～２日に１回、さらに好ましくは１日１回である。
　本発明の食品の投与期間は、任意に決定され得るが、好ましくは約１日以上であり、より好ましくは約３日以上であり、さらに好ましくは約１週間以上である。本発明の食品の投与期間は、例えば、約１年以下、約６ヶ月以下、約３ヶ月以下、約１ヶ月以下、約３週間以下、約２週間以下、約１週間以下などであり得る。必要な場合、本発明の食品は、ほぼ永続的に投与されてもよい。
　（４ｆ．α－リポ酸ナノ粒子を含むターンオーバー促進用の医薬品）
　本発明の医薬品は、ターンオーバー促進用の医薬品であり、α－リポ酸ナノ粒子を含有する。医薬品は、ターンオーバー促進用の任意の医薬品であり得る。医薬品の形態は、任意であり得る。本発明の医薬品は、散剤、顆粒剤、錠剤（タブレット）、カプセル剤、丸剤、液剤、分散剤、軟膏、リニメント、クリームなどであり得る。本発明の医薬品が経口投与用途に使用される場合、本発明の医薬品は好ましくは、タブレット、粉末製剤、内服液、カプセル剤などの形態である。本発明の医薬品が非経口投与用途に使用される場合、好ましくは、注射剤、軟膏またはクリーム剤であるが、これに限定されない。本発明の医薬品を用いることにより、α－リポ酸ナノ粒子が体内で徐々に分解することによって徐放効果が得られ得る。
　本発明の医薬品は、動物および人に使用されることができ、人に使用されることが好ましい。本発明の医薬品は、α－リポ酸ナノ粒子に加えて製薬上許容される通常の担体を含み得る。例えば、本発明の医薬品が乳剤およびシロップ剤のような液体調製物である場合、水、ショ糖、ソルビット、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ゴマ油、オリーブ油、大豆油等の油類、ｐ－ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類等を使用することができる。本発明の医薬品がカプセル剤、錠剤、散剤、顆粒剤である場合は、乳糖、ブドウ糖、ショ糖、マンニット等の賦形剤、澱粉、アルギン酸ソーダ等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチン等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤等を使用することができる。
　注射剤などの非経口投与用製剤は、好ましくは受容者の血液と等張である。例えば、注射剤の場合、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。
　局所製剤は、α－リポ酸ナノ粒子を１種もしくはそれ以上の媒質、例えば鉱油、石油、多価アルコール等または局所医薬製剤に使用される他の基剤中に溶解または懸濁させて調製する。腸内投与のための製剤は、通常の担体、例えばカカオ脂、水素化脂肪、水素化脂肪カルボン酸等を用いて調製し、坐剤として提供される。
　本発明では、非経口剤においても、経口剤で例示したグリコール類、油類、フレーバー類、防腐剤（抗酸化剤を含む）、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤等から選択される１種もしくはそれ以上の補助成分を添加することもできる。
　本発明の医薬品の投与量、投与頻度および投与期間は、投与形態、患者の年令、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などに応じて決められる。本発明の医薬品の投与量は、α－リポ酸の量として、１日体重１ｋｇ当たり約０.１ｍｇ以上であることが好ましく、約０.２ｍｇ以上であることがさらに好ましく、約０．４ｍｇ以上であることが最も好ましい。本発明の医薬品の投与量は、α－リポ酸の量として、１日体重１ｋｇ当たり約３０ｍｇ以下であることが好ましく、約２０ｍｇ以下であることがさらに好ましく、約５ｍｇ以下であることが最も好ましい。
　本発明の医薬品の投与頻度は、好ましくは１日３回～３日に１回、より好ましくは１日２回～２日に１回、さらに好ましくは１日１回である。
　本発明の医薬品の投与期間は、任意に決定され得るが、好ましくは約１日以上であり、より好ましくは約３日以上であり、さらに好ましくは約１週間以上である。本発明の医薬品の投与期間は、例えば、約１年以下、約６ヶ月以下、約３ヶ月以下、約１ヶ月以下、約３週間以下、約２週間以下、約１週間以下などであり得る。必要な場合、本発明の医薬品は、ほぼ永続的に投与されてもよい。
　本発明の医薬品は、ターンオーバーを促進するために用いられ得る。本発明の医薬品の用途・効能の例としては、皮膚のメラニンの排出、創傷治癒、皮膚再生、皮膚の若返り、および老化防止（アンチエイジング）が挙げられる。例えば、本発明の医薬品は、シミ、ソバカス、色素沈着、皮膚の黒化症、老人性色素斑、肝斑、表情ジワなどの疾患を軽減または治療するための医薬品である。
　本発明で使用されるα－リポ酸ナノ粒子を医薬品に添加するには特別な工程を必要とせず、医薬品の製造工程の初期において原料と共に添加するか、製造工程中に添加するか、あるいは製造工程の終期に添加する。添加方式は混和、混練、溶解、浸漬、散布、噴霧、塗布等通常の方法を医薬品の種類および性状に応じて選択する。本発明の医薬品は、当業者に公知の方法に従って調製され得る。
　本発明の医薬品に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約０．０１重量％以上であり、より好ましくは約０．０５重量％以上であり、さらに好ましくは約０．１重量％以上であり、特に好ましくは約０．５重量％以上であり、最も好ましくは約１．０重量％以上である。本発明の医薬品に含まれるα－リポ酸ナノ粒子の含有量は、α－リポ酸に換算して、好ましくは約１０重量％以下であり、より好ましくは約８重量％以下であり、さらに好ましくは約５重量％以下であり、特に好ましくは約４重量％以下であり、最も好ましくは約３重量％以下である。
　以下の実施例および比較例においては、試薬として以下のものを用いた：
　α－リポ酸：和光純薬社製α－リポ酸　特級（純度９８％以上、粉末状）；
　ショ糖ラウリン酸エステル：三菱化学フーズ株式会社製リョートーシュガーエステルＬ－１６９５（ＨＬＢ値約１５；結合脂肪酸約９９％；モノエステル約８０％；ジ・トリ・ポリエステル約２０％）；
　ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油：日光ケミカルズ社製ＮＩＫＫＯＬ　ＨＣＯ－６０（ＨＬＢ約１４；白色～微黄色のペースト～固体）；
　ポリオキシエチレンオクチルドデシルエーテル：花王株式会社製エマルゲン２０２０Ｇ－ＨＡ（ＨＬＢ値１３．０）；
　ＰＯＥ（２０）ＰＯＰ（８）セチルエーテル：日光ケミカルズ社製ＮＩＫＫＯＬ　ＰＢＣ４４（ＨＬＢ約１２．５；白色～微黄色の固体）
　ＰＯＥ（２０）ステアリルエーテル：日光ケミカルズ社製ＮＩＫＫＯＬ　ＢＳ－２０（ＨＬＢ１８．０；白色～微黄色の固体）；
　ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレイン酸エステル：日油株式会社製ポリソルベート（８０）（ＨＬＢ約１５；無色透明の液体）；
　ＭｇＣｌ２：市販品、試薬グレード；
　ＣａＣｌ２：市販品、試薬グレード；
　グルコン酸亜鉛：市販品、試薬グレード；
　Ｎａ２ＣＯ３：市販品、試薬グレード；
　Ｎａ２ＨＰＯ４：市販品、試薬グレード。
　（実施例１：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．２に調整した。ｐＨが７．２になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをリョートーシュガーエステルＬ－１６９５　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、この溶液に０．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。この透明な分散液を一昼夜（２４時間）攪拌した後、分散液を１晩かけて凍結乾燥させてペーストを得た。このα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を他の試験に使用する際は、凍結乾燥後のペーストを蒸留水で所定の濃度に再分散させて使用した。この凍結乾燥後のペーストを蒸留水に添加したところ、よく再分散し、透明な分散液が得られた。これは、凍結乾燥後に対してα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子が安定であることを示す。
　（実施例１Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含むペーストを得た。このα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を他の試験に使用する際は、凍結乾燥後のペーストを蒸留水で所定の濃度に再分散させて使用した。この凍結乾燥後のペーストを蒸留水に添加したところ、よく再分散し、透明な分散液が得られた。これは、凍結乾燥後に対してα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子が安定であることを示す。
　（実施例２：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２Ａ）
　α－リポ酸　０．２５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．１に調整した。ｐＨが７．１になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをリョートーシュガーエステルＬ－１６９５　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、この溶液に０．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。この透明な分散液を一昼夜（２４時間）攪拌した後、分散液を１晩かけて凍結乾燥させてペーストを得た。このα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を他の試験に使用する際は、凍結乾燥後のペーストを蒸留水で所定の濃度に再分散させて使用した。この凍結乾燥後のペーストを蒸留水に添加したところ、よく再分散し、透明な分散液が得られた。これは、凍結乾燥に対してα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子が安定であることを示す。
　（実施例２Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含むペーストを得た。このα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を他の試験に使用する際は、凍結乾燥後のペーストを蒸留水で所定の濃度に再分散させて使用した。この凍結乾燥後のペーストを蒸留水に添加したところ、よく再分散し、透明な分散液が得られた。これは、凍結乾燥に対してα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子が安定であることを示す。
　（比較例１：α－リポ酸分散液の作製）
　（比較例１Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．２に調整した。ｐＨが約７．２になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをリョートーシュガーエステルＬ－１６９５　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。この分散液を一昼夜（２４時間）攪拌した後、分散液を１晩かけて凍結乾燥させてペーストを得た。
　（比較例１Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は比較例１Ａと同じ手順でペーストを得た。
　（測定例１：粒子径の測定）
　実施例１Ａで使用した作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子のペーストと、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないで作製した比較例１Ａのα－リポ酸ナノ粒子のペーストそれぞれ０．３ｇを３ｍＬの水に添加し、３時間程度４℃で放置した後、１分間攪拌することによって分散させ、動的光散乱光度計（大塚電子　ＥＬＳ－７１０ＴＹ）によって粒子径を測定した。その結果、実施例１Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の粒子径が約１０ｎｍであり、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないで作製した比較例１Ａのα－リポ酸ナノ粒子の粒子径が約７６０ｎｍであることが確認できた。蒸留水を使用した場合もイオン交換水を使用した場合も粒子径はほぼ同じであった。実施例１Ａで蒸留水を使用して作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＥＬＳ－７１０ＴＹ）によって測定した結果を、図１に示し、比較例１Ａで蒸留水を使用して作製したα－リポ酸ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＥＬＳ－７１０ＴＹ）によって測定した結果を図２に示す。
　（実施例３：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．０に調整した。ｐＨが７．０になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、この溶液に０．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例３Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．３に調整した。ｐＨが７．３になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として５０μＬ採取し、これをエマルゲン２０２０Ｇ－ＨＡ　０．０２ｇを含む蒸留水０．９５ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、この溶液に０．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を１０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を５μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例５：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例５Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．１に調整した。ｐＨが７．１になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として５０μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．０５ｇを含む蒸留水０．９５ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌまたは０．１Ｍ　ＮａＯＨでこの溶液のｐＨを６．６に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を１０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を１０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。この透明な分散液を一昼夜（２４時間）攪拌した後、分散液を１晩かけて凍結乾燥し、ペーストとした。
　（実施例５Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例５Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含むペーストを得た。
　（実施例６：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例６Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを７．０に調整した。ｐＨが７．０になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として２０μＬ採取し、これをエマルゲン２０２０Ｇ－ＨＡ　０．０２ｇを含む蒸留水０．９８ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌまたは０．１Ｍ　ＮａＯＨでこの溶液のｐＨを６．２に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を５μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を５μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例６Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例６Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例７：α－リポ酸－ＣａＰＯ４ナノ粒子の作製）
　（実施例７Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として２０μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．０２ｇを含む蒸留水０．９８ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌまたは０．１Ｍ　ＮａＯＨでこの溶液のｐＨを６．４に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を５μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＨＰＯ４を５μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＰＯ４ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。この透明な分散液を一昼夜（２４時間）攪拌した後、分散液を１晩かけて凍結乾燥し、ペーストとした。
　（実施例７Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例７Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＰＯ４ナノ粒子を含むペーストを得た。
　（実施例８：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例８Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に１Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを１１．７に調整した。ｐＨが１１．７になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＰＯＥ（２０）ＰＯＰ（８）セチルエーテル（ＰＢＣ４４）０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌまたは０．１Ｍ　ＮａＯＨでこの溶液のｐＨを１１．０に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を４０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例８Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例８Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例９：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例９Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に１Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを１１．５に調整した。ｐＨが１１．５になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬ）にメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＰＯＥ（２０）ステアリルエーテル　０．０２ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌまたは０．１Ｍ　ＮａＯＨでこの溶液のｐＨを１０．８に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を４０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例９Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例９Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１０：α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１０Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．８に調整した。ｐＨが６．８になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．０に調整し、その後、５％　グルコン酸亜鉛溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１０Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１０Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１１：α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１１Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．０に調整し、その後、０．５Ｍ　酢酸亜鉛溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１１Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１１Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１２：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１２Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをリョートーシュガーエステルＬ－１６９５　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを６．８に調整し、その後、０．５Ｍ　塩化マグネシウム溶液を４０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を８０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１２Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１２Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１３：α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１３Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを３．９に調整し、その後、０．５Ｍ　酢酸亜鉛溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１３Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１３Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＺｎＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１４：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１４Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを１０．９に調整した。ｐＨが１０．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを６．４に調整し、その後、０．５Ｍ　塩化カルシウム溶液を４０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１４Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１４Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１５：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１５Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを８．７に調整した。ｐＨが８．７になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを６．３に調整し、その後、０．５Ｍ　塩化カルシウム溶液を４０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１５Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１５Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１６：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１６Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを６．４に調整し、その後、０．５Ｍ　塩化カルシウム溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１６Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１６Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１７：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１７Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを６．９に調整した。ｐＨが６．９になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをエマルゲン２０２０Ｇ－ＨＡ　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを６．７に調整し、その後、０．５Ｍ　塩化カルシウム溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１７Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１７Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１８：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１８Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを１１．８に調整した。ｐＨが１１．８になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをＨＣＯ－６０　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを１０．９に調整し、その後、０．５Ｍ　ＣａＣｌ２を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１８Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１８Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例１９：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例１９Ａ）
　α－リポ酸　０．５ｇを９ｍＬのイオン交換水に添加して混合し、この混合液に５Ｍ　ＮａＯＨを加えて混合液のｐＨを９．１に調整した。ｐＨが９．１になると、α－リポ酸の粉末が消滅し、溶液のような透明な外観になった。この溶液をイオン交換水で１０ｍＬにメスアップした。この溶液を母液として１００μＬ採取し、これをリョートーシュガーエステルＬ－１６９５　０．１ｇを含む蒸留水０．９ｍＬに加え、よく攪拌した。攪拌を約３０分間行った後、０．１Ｍ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを８．５に調整し、その後、０．５Ｍ　ＭｇＣｌ２溶液を２０μＬ加えて攪拌した。攪拌を３０分間行った後、この溶液に０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌した。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例１９Ｂ）
　母液の調製のためにイオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例１９Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２０：α－リポ酸－ＭｇＣＯ3ナノ粒子の作製）
　（実施例２０Ａ）
　α－リポ酸０．０５ｇに０．２８ｇの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこに注射用水（大塚製薬製　日本薬局方注射用水）を９．３２８ｍｌ添加し混合した。この混合液にＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを０．３ｇ加えて３０分以上攪拌した後、５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを７．０に調整した。そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を４０μＬ添加しよく攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２μＬ加えてさらに攪拌し、注射用水を加えて１０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２０Ｂ）
　注射用水の代わりにイオン交換水を用いたこと以外は実施例２０Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２１：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２１Ａ）
　α－リポ酸０．０５ｇに９５０μＬの０．２６Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを０．２５ｇ加えよく攪拌した後、そこにイオン交換水を３．６２６ｍｌ添加して３０分以上攪拌した。５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．５に調整した。そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を４８μＬ添加してよく攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を４８μＬ加えてさらに攪拌し、イオン交換水を加えて５ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２１Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２１Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（比較例２２－１：α－リポ酸分散液の作製）
　（比較例２２－１Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを６．８に調整した後、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸分散液が得られた。
　（比較例２２－１Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は比較例２２－１Ａと同じ手順でα－リポ酸分散液を得た。
　（比較例２２－２：α－リポ酸分散液の作製）
　（比較例２２－２Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを７．０に調整した後、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸分散液が得られた。
　（比較例２２－２Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は比較例２２－２Ａと同じ手順でα－リポ酸分散液を得た。
　（実施例２２：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２２Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．９６ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．７に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２２Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例２２Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２３：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２３Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．９６ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．９６ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２３Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２３Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２４：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２４Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．７に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２４Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例２４Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２５：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２５Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）３．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．３に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２５Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例２５Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２６：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２６Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）３．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．２に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．７２ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．９に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２６Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例２６Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２７：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２７Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２７Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２７Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２８：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２８Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）４．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２８Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２８Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例２９：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例２９Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．９６ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を１．４４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例２９Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例２９Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３０：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３０Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．６に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３０Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例３０Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３１：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３１Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．９に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３１Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３１Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３２：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３２Ａ）
　あらかじめ加温して融解したエマルゲン２０２０Ｇ－ＨＡ　７．０ｇへα－リポ酸粉末１．０ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約７０ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３２Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３２Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３３：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３３Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリソルベート（８０）７．０ｇへα－リポ酸粉末０．２５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．１２ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．１２ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．５に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３３Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３３Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３４：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３４Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリソルベート（８０）７．０ｇへα－リポ酸粉末０．２５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．１２ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３４Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３４Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３５：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３５Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリソルベート（８０）７．０ｇへα－リポ酸粉末０．２５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．５に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３５Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３５Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３６：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３６Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリソルベート（８０）７．０ｇへα－リポ酸粉末０．２５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．９に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３６Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３６Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３７：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３７Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．６に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３７Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３７Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３８：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３８Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（４０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３８Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３８Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例３９：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例３９Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（４０００）２．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．５に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例３９Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例３９Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４０：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４０Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）２．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．４に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．９に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４０Ｂ）
　蒸留水の代わりに同量のイオン交換水を用いたこと以外は実施例４０Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４１：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４１Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．４に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４１Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４１Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４２：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４２Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（４０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４２Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４２Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４３：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４３Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．４８ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．７に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４３Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４３Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４４：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４４Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．７２ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４４Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４４Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４５：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４５Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．５ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２水溶液０．４８ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．７２ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．６に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４５Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４５Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４６：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４６Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。ここにポリエチレングリコール（１０００）１０ｇをイオン交換水に溶解して１００ｍｌとした溶液を１５ｍｌ添加して混合し、さらに約２０ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．７に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４６Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４６Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４７：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４７Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。ここにポリエチレングリコール（４０００）１０ｇをイオン交換水に溶解して１００ｍｌとすることにより調製した溶液を１５ｍｌ添加して混合し、さらに約２０ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．３に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．６に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４７Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４７Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４８：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４８Ａ）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル５．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。ここにポリエチレングリコール（６０００）１０ｇをイオン交換水に溶解して１００ｍｌとすることにより調製した溶液を１５ｍｌ添加して混合し、さらに約２０ｍｌのイオン交換水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．４に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．８に調整し、さらにイオン交換水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４８Ｂ）
　イオン交換水の代わりに同量の蒸留水を用いたこと以外は実施例４８Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例４９：高濃度のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　（実施例４９Ａ）
　α－リポ酸０．１５ｇに２．８５ｍｌの０．２６Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを０．７５ｇ加えよく攪拌した後、そこに蒸留水を０．５ｍｌ添加して３０分以上攪拌した。５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．５に調整した。そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を１４４μＬ添加して１２時間以上攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を１４４μＬ加えてさらに１２時間以上攪拌した。そこに蒸留水を加えて５．０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例４９Ｂ）
　蒸留水の代わりにイオン交換水を用いたこと以外は実施例４９Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　（実施例５０：α－リポ酸－ＭｇＣＯ3ナノ粒子の作製）
　（実施例５０Ａ）
　α－リポ酸０．０５ｇに０．２８ｇの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこに注射用水（大塚製薬製　日本薬局方注射用水）を９．３５ｍｌ添加し混合した。この混合液にポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）を０．３ｇ加えて３０分以上攪拌した後、５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを７．０に調整した。そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を４０μＬ添加しよく攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２０μＬ加えてさらに攪拌し、注射用水を加えて１０ｍｌとした。これによりα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例５０Ｂ）
　注射用水の代わりにイオン交換水を用いたこと以外は実施例５０Ａと同じ手順でα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液を得た。
　これらの実施例１Ａ～５０Ｂおよび比較例１Ａ、１Ｂ、２２－１Ａ～２２－２Ｂの結果を以下の表１－１から表１－３にまとめる。なお、実施例１Ａ～２１Ｂ及び４９Ａ～５０Ｂでは、α－リポ酸含有水性分散液を調製した後に非イオン性界面活性剤を添加する手順を用い、実施例２２Ａ～４８Ｂでは、α－リポ酸を非イオン性界面活性剤に溶かした後に水を添加する手順を用いた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　（試験例１：製剤の熱安定性試験）
　実施例１Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子と、比較例１Ａで作製した、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子をそれぞれ６０℃にて加温し、加熱１時間後および加熱３時間後のサンプル中のα－リポ酸の量をＨＰＬＣで分析した。対照として試薬のα－リポ酸を用いた。加熱後のα－リポ酸の量を加熱前のα－リポ酸の量で除算して１００を乗算することにより、α－リポ酸の残存率を計算した。α－リポ酸の残存率の結果を以下の表２および図３に示す。△は対照である試薬のα－リポ酸の結果であり、■は比較例１のα－リポ酸分散液の結果であり、□は実施例１Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の結果である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　その結果、加温３時間後に試薬のα－リポ酸は５５％程度減少したのに対し、実施例１Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子と、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子ではα－リポ酸の実質的な減少が見られなかった。コントロールとの比較からも明らかなように、本発明の製剤は、α－リポ酸の安定性が極めて優れているものであることが理解される。
　（試験例２：硫黄臭の改善）
　実施例１Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の凍結乾燥後のペーストと、比較例１Ａで作製した、塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子の凍結乾燥後のペーストをそれぞれ、α－リポ酸が最終濃度０．１％となるように蒸留水に分散させ、透明な樹脂製の試験管に入れ、太陽光の届く室内で放置した。対照として、試薬のα－リポ酸にアルカリ（５Ｍ　ＮａＯＨ）を加えてｐＨを７～７．５にすることによってα－リポ酸を水に溶解した水性分散液（α－リポ酸の最終濃度０．１％）も同様に放置した。
　その結果、２週間経過後、対照溶液および比較例１Ａで作製した塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子の分散液からは特有の硫黄臭が強く感じられた。その程度は、対照としたα-リポ酸を水に溶解した水性分散液と同程度であった。
それに対して、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液では臭いは感じられなかった。
　（試験例３：有色モルモットにおけるα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の紫外線惹起色素沈着抑制効果試験）
　メラニン色素産生細胞を持つ有色モルモット（Ｗｅｉｓｅｒ　Ｍａｐｌｅｓ、５週齢、雄）の背部を２ｃｍ×２ｃｍの面積で毛剃りし、実施例３Ａにおいて得られたα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液（α－リポ酸を３５０μｇ含有する）を一日あたり８０ｍｇずつ１日１回、５日／週（月曜日～金曜日）、塗布した。塗布後、塗布開始日（月曜日）および、２、４、７日後（水曜日、金曜日、次週の月曜日）にそれぞれＵＶ－Ａを８Ｊ／ｃｍ２、ＵＶ－Ｂを１２ｍＪ／ｃｍ２照射した。モルモット皮膚でのメラニン産生の指標として色差計を用いて皮膚の明度（Ｌ＊値）を測定し、明度の減少量を黒色化の程度の指標とした。明度はＬ＊値が大きいほど、色が白いことを示す。メラニン産生による試験開始日からの明度の変化量（ΔＬ＊値）の絶対値を比較した。α－リポ酸を含まない水のみを塗布したモルモットをコントロール区として比較を行った。
　その結果、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区は試験の全期間を通じてコントロール区よりも明度の減少が少なく、すなわち、皮膚の黒色化が抑制されていた。試験終了時のΔＬ＊値の絶対値はコントロール区が８．３であったのに対し、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区は６．６であった。
　以下の表３および図４に、０日後（月曜日）、４日後（金曜日）、７日後（月曜日）および９日後（水曜日）に測定したΔＬ＊値の絶対値を示す。以上の結果により、α－リポ酸ナノ粒子が皮膚に吸収され、紫外線により惹起される色素沈着を抑制できることが確認された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　（試験例４：光老化モデルマウスの皮膚水分、バリア機能およびシワの回復におけるα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の効果確認試験）
　ヘアレスマウス（Ｈｏｓ：ＨＲ－１、７週齢、雄）の背部に一日あたり５５ｍＪ／ｃｍ２のＵＶ－Ｂを週５日（すなわち、月曜日～金曜日のみ照射し、土曜日および日曜日には照射しなかった）、２ヶ月間照射し、光老化モデルマウスを作製した。このマウスに（実施例３Ａにより得られたα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液（α－リポ酸を３５０μｇ含有する）を一日あたり８０ｍｇずつ１日１回、週５日（すなわち、月曜日～金曜日のみ塗布し、土曜日および日曜日には塗布しなかった）、１ヶ月間塗布した。塗布開始時と塗布終了時のマウス皮膚について目視による皮膚状態観察および、角層水分量、経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）の測定を行い、シワおよび角層水分、皮膚バリア機能の状態をチェックした。
　その結果、以下の表４および図５に示すように、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区は塗布開始時よりも角層水分量の回復が認められた。一方、コントロール区（α－リポ酸を含まない水のみを同様に塗布）では角層水分量の回復は認められなかった。試験終了時の角層水分量はα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区が１８．２（μｓ）であったのに対し、コントロール区で５．６（μｓ）であった。また、試験最終日のＴＥＷＬ値はα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区が１５．７（ｇ／ｈ・ｍ２）であったのに対し、コントロール区では３２．６（ｇ／ｈ・ｍ２）であり、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布により皮膚のバリア機能が回復していることが確認できた。また、シワのレプリカ写真を図６に示す。コントロール区は試験開始時とシワの状態に変化は認められなかったがα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区では明らかなシワの減少が認められた。以上の結果により、α－リポ酸ナノ粒子が皮膚に吸収され、光老化した皮膚の状態を健全な状態に戻す効果が確認できた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　（測定例２：粒子径の測定）
　実施例２２Ａで作製したα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の溶液を、動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって粒子径を測定した。その結果、実施例２２Ａで作製したα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の粒子径が約２０ｎｍであることが確認できた。蒸留水を使用した場合もイオン交換水を使用した場合も粒子径はほぼ同じであった。実施例２２Ａで蒸留水を使用して作製したα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって測定した結果を、図７に示す。
　（測定例３：粒子径の測定）
　実施例２９Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の溶液を、動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって粒子径を測定した。溶液が完全に透明であること及び粒子径測定の結果から、実施例２９Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は平均粒子径が約１２ｎｍである一次粒子が平均粒径２００ｎｍおよび１７００ｎｍの、弱いクラスターを形成していることが確認できた。蒸留水を使用した場合もイオン交換水を使用した場合も粒子径はほぼ同じであった。実施例２９Ａでイオン交換水を使用して作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の粒子径分布を動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって測定した結果を、図８に示す。
　（測定例４：粒子径の測定）
　実施例２４Ａ、２４Ｂ、２５Ａ、２５Ｂ、３３Ａ、３３Ｂ、３６Ａおよび３６Ｂで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の溶液のそれぞれについても、動的光散乱光度計（大塚電子　ＦＰＡＲ１０００）によって粒子径を測定した。
　測定例１～４で測定した各α－リポ酸ナノ粒子の平均粒子径（ｎｍ）を以下の表５にまとめる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　（試験例５：製剤の熱安定性試験）
　実施例２２Ａで作製したα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子と、比較例２２－１Ａで作製したα－リポ酸分散液（塩化カルシウムも炭酸ナトリウムも添加しないもの）をそれぞれ６０℃にて保存（加熱保存）し、３週間まで１週間ごとに溶液中のα-リポ酸の量をＨＰ
ＬＣで分析した。加熱保存後のα－リポ酸の量を加熱前のα－リポ酸の量で除算して１００を乗算することにより、α－リポ酸の残存率を計算した。α－リポ酸の残存率の結果を以下の表６および図９に示す。■は比較例２２－１Ａのα－リポ酸分散液の結果であり、□は実施例２２Ａのα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の結果である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
　その結果、６０℃で３週間保存後に比較例２２－１Ａで作製した塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子では約１８％の減少が見られたが、実施例２２Ａのα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子ではα－リポ酸の減少が約１１％に抑えられていた。このことから、本発明の製剤は、α－リポ酸の安定性が極めて優れているものであることが理解される。
　（試験例６：製剤の熱安定性試験）
　実施例２９Ａで作製したα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子と、比較例２２－２Ａで作製した塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子をそれぞれ６０℃にて保存し、３週間まで１週間ごとに溶液中のα-リポ酸の量をＨＰＬＣで分析した。加熱保存後のα－リポ酸の量を加熱前のα－リポ酸の量で除算して１００を乗算することにより、α－リポ酸の残存率を計算した。α－リポ酸の残存率の結果を以下の表７および図１０に示す。■は比較例２２－２Ａのα－リポ酸ナノ粒子の結果であり、△は実施例２９Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の結果である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
　その結果、６０℃で３週間保存後に比較例２２－２Ａで作製した塩化マグネシウムと炭酸ナトリウムを添加しないα－リポ酸ナノ粒子では約１３％の減少が見られたが、実施例２９Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子ではα－リポ酸の減少が約８％に抑えられていた。このことから、本発明の製剤は、α－リポ酸の安定性が極めて優れているものであることが理解される。
　（試験例７：脂肪前駆細胞の分化に関するα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の機能試験）
　直径３．５ｃｍのプラスチックシャーレにＤ－ＭＥＭ培地（Ｄ－ＭＥＭ培地に終濃度１０％　ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）と１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）になるように添加したもの）を１．５ｍｌ添加した。そこに脂肪前駆細胞である３Ｔ３－Ｌ１細胞を５．０×１０４個接種し、３日間前培養を行いコンフルエント状態にした。その後、培地を脂肪細胞分化誘導培地（Ｄ－ＭＥＭに終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５μｇ／ｍｌのインスリン、０．２５μＭのデキサメタソン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）、０．５ｍＭのイソブチル－メチルキサンチン（ｉｓｏｂｕｔｙｌ－ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）（ＩＢＭＸ）になるように添加したもの）３ｍｌに交換した。さらに２日後、同じ組成の脂肪細胞分化誘導培地３ｍｌと交換し、そして２日間培養し、合計して４日間脂肪細胞分化誘導培地で培養した。この培養の際に、脂肪細胞分化誘導培地にはα－リポ酸溶液あるいは実施例２０Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子溶液を、α－リポ酸濃度で０、１００、２５０または５００μＭになるように添加した。培養は全て５％ＣＯ２、３７°Ｃの条件で行った。
　こうして得られた培養細胞の蓄積脂肪量を計測した。ＰＢＳ緩衝液１ｍｌで洗浄後、中性ホルマリンで５分間固定を行った。さらに７０％エタノール溶液および蒸留水で洗浄を行った。続いてオイルレッドＯ溶液（飽和オイルレッドＯ／イソプロパノール溶液と蒸留水を６：４の比率で混合し、濾過した染色液）を１ｍｌ添加し１５分間放置した。染色液を除去し、７０％エタノール溶液で色素が拡散しなくなるまで洗浄を行った後、０．７５ｍｌの４％ノニデットＰ－４０／イソプロパノール溶液を添加し、３０分間攪拌し、色素を溶出させた。この溶液を全量回収し、吸光度計を用いて５２０ｎｍの波長の吸光度を測定した。
　その結果、α－リポ酸の添加により脂肪の蓄積が減少する結果となったのに対し、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子添加では脂肪を細胞内蓄積させる作用が認められた（図１１）。すなわちα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子には効率よく未成熟脂肪細胞内に糖を取り込ませる作用があることが示唆された。上記試験において糖の取り込みを促進したことは、α－リポ酸ナノ粒子にはα－リポ酸単体では認められなかった血糖値を改善する効果が期待でき、糖尿病治療薬としての有用性が示唆された。
　（試験例８：成熟脂肪細胞の脱分化に関するα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の機能試験）
　直径３．５ｃｍのプラスチックシャーレにＤ－ＭＥＭ培地（Ｄ－ＭＥＭ培地に終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンになるように添加したもの）を１．５ｍｌ添加した。そこに脂肪前駆細胞である３Ｔ３－Ｌ１細胞を５．０×１０４個接種し、３日間前培養を行いコンフルエント状態にした。その後、培地を脂肪細胞分化誘導培地（Ｄ－ＭＥＭ培地に終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５μｇ／ｍｌのインスリン、０．２５μＭのデキサメタゾン、０．５ｍＭのイソブチル－メチルキサンチンになるように添加したもの）３ｍｌに交換して４日間培養し、脂肪細胞への分化を誘導した。さらにその後、脂肪細胞成熟化培地（Ｄ－ＭＥＭ培地に終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５μｇ／ｍｌのインスリンになるように添加したもの）に交換し、７日間培養した。その後、試験培地に交換して更に４日間培養した。試験培地には脂肪細胞成熟化培地にα－リポ酸溶液あるいは実施例２０Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子溶液をα－リポ酸濃度で０、１００、２５０または５００μＭになるように添加した。それぞれの培地は培養２日毎に同じものに交換した。培養は全て５％ＣＯ２、３７°Ｃの条件で行った。
　こうして得られた培養細胞の蓄積脂肪量を計測した。ＰＢＳ緩衝液１ｍｌで洗浄後、中性ホルマリンで５分間固定を行った。さらに７０％エタノール溶液および蒸留水で洗浄を行った。そこにオイルレッドＯ溶液を１ｍｌ添加し１５分間放置した。染色後、７０％エタノール溶液で色素が拡散しなくなるまで洗浄を行った。ここに０．７５ｍｌの４％ノニデットＰ－４０／イソプロパノール溶液を添加し、３０分間攪拌し、色素を溶出させた。この溶液を全量回収し、吸光度計を用いて５２０ｎｍの波長の吸光度を測定した。
　その結果、α－リポ酸添加区では無添加区と脂肪蓄積量がほとんど変わらなかったのに対し、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子添加区では脂肪を細胞内へ蓄積させる作用が認められた（図１２）。すなわち試験例７同様、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子には効率よく成熟脂肪細胞内に糖を取り込ませる作用があることを示唆している。特に脂肪細胞に対してはどのような分化段階にあっても脂肪を蓄積させる作用が確認された。以上のことからα－リポ酸ナノ粒子にはα－リポ酸単体では認められなかった高い血糖値改善効果が期待でき、糖尿病治療薬としての有用性が示唆された。
　（試験例９：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の培養液中での安定性とその細胞局在解析）
　試験例７と同様の方法で培養を行った。α－リポ酸および実施例２０Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子はそれぞれ終濃度２５０μＭで添加した。この細胞の培養上清を全量回収し培養上清画分とした。さらに細胞をＰＢＳ緩衝液で洗浄後、常法にて回収・洗浄を行い遠心処理で沈殿させ、５００μＬの精製水で懸濁し超音波処理にて破砕した。この破砕液を毎分１５０００回転、４℃で１５分間遠心し、上清を回収し、これを細胞破砕液画分とした。各画分の残存α－リポ酸濃度を高速液体クロマトグラフ質量分析計を用いて定量した。
　その結果、細胞破砕液画分では濃度差が確認されなかった（図１３）。しかし、培養上清画分においてはα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子添加実験群において高いα－リポ酸残存が確認された（図１４）。以上の結果から、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は培養液中でも非常に安定であることが確認された。また、試験例７において観察されたα－リポ酸とα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作用の違いは、細胞内α－リポ酸濃度の違いによるものではなく、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の持つ物理化学的な性質の違いによるものであることが示唆された。
　（試験例１０：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布による皺モデルマウス抗皺効果試験）
　ヘアレスマウス（Ｈｒ／ｋｕｄ、９週齢、雄）に紫外線を照射し皺モデルマウスを作製した。この皺モデルの作製においては、紫外線を１３週間（５日間／週、月曜から金曜まで）にわたって、ＵＶＡ、ＵＶＢがそれぞれ合計１４８．９９Ｊ／ｃｍ２、３．４９Ｊ／ｃｍ２の照射量になるように照射した。皺モデルを作製後、マウス背部に０．０１％α－リポ酸を含有する市販品化粧品と実施例２１Ａの０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有水性分散液をそれぞれ３０ｍｇ／ｃｍ２／ｄａｙの量で５回／週（月曜から金曜まで）で塗布し、これを６週間行った。対照区としては何も製剤を塗布せず６週間飼育した無塗布群およびＵＶ照射による皺形成を行わずに同時に飼育した無処置区を用いた。作製した皺モデルはレプリカ法によって評価し、図１５に示す独自に設定した点数化基準を元に、目視によって皺の程度を比較し、皺モデルマウスの点数化を行った。また、マウス背部皮膚のパラフィン包埋切片を作製し、ヒアルロン酸の染色をすることでその量を比較した。ヒアルロン酸の染色は、ビオチンで標識化したヒアルロン酸結合タンパク質（ビオチン標識ＨＡＢＰ、生化学工業）をプローブとして用い、ストレプトアビジン標識した蛍光色素（Ｃｙ３ストレプトアビジン（Ｃｙ３　ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ）、Ｊａｃｋｓｏｎ　ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ　ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ）により検出する方法を用いた。
　その結果、６週間塗布したマウス背部のレプリカ解析から０．０１％α－リポ酸含有市販品と比較して０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有水性分散液塗布群においてより高い皺の改善効果が観察された（図１６）。また点数化においても、皺改善効果が確認された（表８）。
　また、同マウス皮膚切片のヒアルロン酸染色を行った結果、０．０１％α－リポ酸含有市販品や無塗布群ではヒアルロン酸の減少が観察されたが、０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布群において無処置群と同程度のヒアルロン酸の蓄積が観察された（図１７）。真皮におけるヒアルロン酸減少が皺の形成に関与していることが知られている。以上の結果から、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は紫外線により障害を受けた真皮層において細胞外基質であるヒアルロン酸の量を増加させる作用があり、これらの効果により皺が改善されたことが確認された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000010
　（試験例１１：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布によるヒト皺改善効果試験）
　３０代男性被験者（被験者１）に一方の半顔には０．０１％α－リポ酸含有水性分散液を、他方の半顔には実施例２１Ａの０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有水性分散液を、１日２回、連日、ムラなく塗布してもらった。また、５０代女性被験者（被験者２）には半顔だけに実施例２１Ａの０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有水性分散液を連日ムラなく塗布してもらい、半顔は無塗布とした。それぞれの試験期間は１６週間行い、皺の評価は試験前と１６週間後に眼尻からレプリカを作製して行った。
　その結果、どちらの被験者とも０．０１％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有水性分散液を塗布した側が０．０１％α－リポ酸含有水性分散液や無塗布であった反対側と比較して皺の改善が観察された（図１８）。以上の結果から、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子はヒトの皺を改善する効果があることが確認された。
　（試験例１２：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子によるヒアルロン酸蓄積試験）
　直径６．０ｃｍのプラスチックシャーレにＤ－ＭＥＭ培地（Ｄ－ＭＥＭ培地に終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンになるように添加したもの）を３ｍｌ添加した。そこに脂肪前駆細胞である３Ｔ３－Ｌ１細胞を１．５×１０５個接種し、３日間前培養を行いコンフルエント状態にした。その後、培地を脂肪細胞分化誘導培地（Ｄ－ＭＥＭに終濃度１０％ＦＣＳ、１００ユニット／ｍｌのペニシリンと１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５μｇ／ｍｌのインスリン、０．２５μＭのデキサメタゾン、０．５ｍＭのイソブチル－メチルキサンチンになるように添加したもの）３ｍｌに交換した。さらに２日後、同じ組成の脂肪細胞化誘導培地３ｍｌと交換し２日間培養し、合計４日間脂肪細胞分化誘導培地で培養した。脂肪細胞分化誘導培地にはα－リポ酸溶液と実施例５０Ａのα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子溶液がそれぞれα－リポ酸濃度で０、１００、２５０、５００μＭになるように添加した。培養後、培養上清を除いたシャーレにＰＢＳ緩衝液を１ｍｌ添加し、細胞をセルスクレーパーで回収した。こうして回収した細胞を超音波破砕したものを細胞破砕液とし、これに含まれるヒアルロン酸量を酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）により定量した。ヒアルロン酸ＥＬＩＳＡの実験方法はＡｎｎｉｃａ　Ｊａｃｏｂｓｏｎら、Ｉｎｔ．　Ｊ．　Ｃａｎｃｅｒ．１０２：２１２－２１９（２００２）に記載される方法に従って行った。また、培養は全て５％ＣＯ２、３７°Ｃ条件で行った。
　その結果、α－リポ酸添加群と比較してα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子添加群の方が高いヒアルロン酸量を示した（図１９）。以上の結果から、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子はヒアルロン酸を細胞表面へ蓄積させる作用があることが確認された。このことからα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は皮膚真皮層の保水性を向上させることにより、皺を改善していることが示唆された。また、関節において軟骨細胞表面にヒアルロン酸を蓄積・濃縮させ、関節軟骨組織間の損傷を低減する効果が期待され、変形性関節症の治療薬としての有用性も示唆された。
　（実施例５１：外用剤軟膏の製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表９に示す配合の材料を混合して外用剤軟膏を製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000011
　（実施例５２：化粧用乳液の製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１０に示す配合の材料を混合して化粧用乳液を製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012
　（実施例５３：練り歯磨きの製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１１に示す配合の材料を混合して練り歯磨きを製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000013
　（実施例５４：タブレットの製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１２に示す配合の材料を混合してタブレットを製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000014
　（実施例５５：注射液の製造）
当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１３に示す配合の材料を混合して注射液を製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000015
　（実施例５６：化粧水の製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１４に示す配合の材料を混合して化粧水を製造する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000016
　（実施例５７：皮膚外用ローションの製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１５に示す配合の材料を混合して皮膚外用ローションを製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000017
　（試験例１３：ＵＶ－Ｂ照射によるヘアレスマウス皮膚のバリア機能低下に対するα－リポ酸ナノ粒子含有皮膚外用ローションの効果確認試験）
　ヘアレスマウス（Ｈｏｓ：ＨＲ－１、２５週齢、雄）の背部に７０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶ－Ｂを単回照射した。紫外線照射後、このマウスに実施例５７により得られたα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有皮膚外用ローションを一日あたり１００μｌずつ１日１回、連続４日間塗布した。紫外線照射直前および紫外線照射日から４日目および５日目に経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）の測定を行い、皮膚バリア機能の状態をチェックした。紫外線照射日から各測定日における紫外線照射直前のＴＥＷＬに対する増加量をΔＴＥＷＬとし皮膚バリア機能低下の目安とした。
　表１６に示すように、どちらの測定日においてもα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有皮膚外用ローション塗布区（ｎ＝３）はコントロール区（α－リポ酸を含まない水のみを同様に塗布、ｎ＝３）と比較しＴＥＷＬ値の上昇、すなわち皮膚バリア機能の低下が抑制されていることが確認された。以上の結果により、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有皮膚外用ローションは紫外線照射後の皮膚に作用し、紫外線刺激による皮膚の機能障害を低減する効果を発揮することが確認できた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000018
　（実施例５８：ドリンク剤の製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１７に示す配合の材料を混合してドリンク剤を製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000019
　上記表１７におけるα－リポ酸-Ｃａナノ粒子溶液のかわりに、α－リポ酸を最少量の０．２５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いて中和溶解し１％水溶液としたもので置換した比較品を作製した。専門のパネル５名で実施例５８のドリンク剤と比較品の官能評価を行ったところ、全員が本実施例のドリンク剤は比較品に比べて、α－リポ酸に起因する硫黄臭や舌のピリピリ感が低減されており、嗜好性に優れているとの評価を得た。
　（実施例５９：清涼飲料水の製造）
　当該分野で通常行われる方法に従って以下の表１８に示す配合の材料を混合して清涼飲料水を製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000020
　上記表１８におけるα－リポ酸-Ｍｇナノ粒子溶液のかわりに、α－リポ酸を最少量の０．２５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いて中和溶解し１％水溶液としたもので置換した比較品を作製した。専門のパネル５名で実施例５９の清涼飲料水（ドリンク剤）と比較品の官能評価を行ったところ、全員が本実施例の清涼飲料水（ドリンク剤）は比較品に比べて、α－リポ酸に起因する硫黄臭や舌のピリピリ感が低減されており、嗜好性に優れているとの評価を得た。
　（実施例６０：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　α－リポ酸０．３ｇに１．６８ｍＬの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを１．５ｇ加えよく攪拌した後、そこにイオン交換水を６ｍｌ添加して３時間以上攪拌した。５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．５に調整した。そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を２８８μＬ添加して１２時間以上攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を２８８μＬ加えてさらに１２時間以上攪拌した。そこに蒸留水を加えて１０ｍｌとした。これによりα－リポ酸に換算して３重量％のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例６１：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　α－リポ酸０．２ｇに１．１２ｍＬの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを２ｇ加えよく攪拌した後、そこにイオン交換水を６ｍｌ添加して３時間以上攪拌した。５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．５に調整した。そこに５Ｍ　ＣａＣｌ２を９６μＬ添加して１２時間以上攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を１９２μＬ加えてさらに１２時間以上攪拌した。そこに蒸留水を加えて１０ｍｌとした。これによりα－リポ酸に換算して２重量％のα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（比較例６０：α－リポ酸分散液の作製）
　α－リポ酸０．３ｇに１．６ｍＬの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにＨＥＰＥＳを０．２４ｇ添加し、さらにイオン交換水を加えて攪拌し１０ｍｌにした。この際のｐＨは６．９であった。これにより３％α－リポ酸分散液が得られた。
　（実施例６２：α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子の作製）
　あらかじめ加温して融解したポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル４．０ｇとポリエチレングリコール（１０００）１．０ｇへα－リポ酸粉末０．５ｇを加えて混合し、α－リポ酸を溶解した。この混合物に約３５ｍｌの蒸留水を加えて３０分以上混合し、５Ｍ　ＮａＯＨでｐＨを４．５に調整した。ここに、５Ｍ　ＣａＣｌ２水溶液０．２４ｍｌを添加して混合した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液を０．２４ｍｌ加えてさらに混合した。この溶液のｐＨを測定し、１Ｍ　ＮａＯＨ又は１Ｍ　ＨＣｌでｐＨ６．６に調整し、さらに蒸留水を加えて５０ｍｌとした。これにより、α－リポ酸に換算して１重量％のα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子を含む透明な分散液が得られた。
　（実施例６３：α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子の作製）
　α－リポ酸０．４ｇに２．２４ｍＬの１Ｍ　ＮａＯＨを添加して混合し、完全に溶解するまで攪拌した。そこにイオン交換水を２．５ｍｌ添加してよく攪拌した後、グリセリンを１．９ｇ添加してよく攪拌した。さらにＰＯＥ（２０）ステアリルエーテルを２ｇ加え、６時間以上攪拌した。５Ｎ　ＨＣｌでこの溶液のｐＨを５．５に調整し、そこに２．５Ｍ　ＭｇＣｌ２を３８４μＬ添加して１２時間以上攪拌した後、１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３を３８４μＬ加えてさらに１２時間以上攪拌した。そこに蒸留水を加えて１０ｍｌとした。これによりα－リポ酸に換算して４重量％のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子を含有する透明な分散液が得られた。
　（試験例１４：有色モルモットにおけるα－リポ酸ナノ粒子のメラニン排出効果試験）
　メラニン色素産生細胞を持つ有色モルモット（Ｗｅｉｓｅｒ　Ｍａｐｌｅｓ、１０週齢、オス）の背部を毛剃りし、１日あたり１３Ｊ／ｃｍ２の紫外線ＵＶ－Ａおよび１日あたり５９ｍＪ／ｃｍ２の紫外線ＵＶ－Ｂを月曜から金曜まで一日１回、週５日間、６週間弱にわたり計２８回照射し、シミモデルモルモットを１０匹作成した。照射終了後、紫外線照射による炎症の影響を抑えるために１週間放置した。その後、色素沈着の生じた背部を毛剃りし、２ｃｍ×２ｃｍの区画を１匹あたり６区画作成した。
　各区画に実施例６０において得られたα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液の１倍、３倍、３０倍、または３００倍希釈液（α－リポ酸濃度はそれぞれ３％、１％、０．１％、０．０１％）、或いは実施例６１において得られたα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子分散液の１倍、２倍、２０倍、または２００倍希釈液（α－リポ酸濃度はそれぞれ２％、１％、０．１％、０．０１％）を一回あたり３０ｍｇ、１日２回、６時間間隔で塗布した。この分散液の塗布を２週間（１週目：月～金、２週目：火～木）の延べ１０日にわたって合計１６回行った。比較のために、比較例６０において得られたα－リポ酸分散液の１倍、３倍、３０倍、または３００倍希釈液（α－リポ酸濃度としてそれぞれ３％、１％、０．１％、０．０１％）を同様に塗布した。無処置区も対照区１として設けた。蒸留水も同様に塗布し、その塗布部分を対照区２とした。
　モルモット皮膚でのメラニン産生の指標として色差計を用いて皮膚の明度（Ｌ＊値）を測定し、明度の増加量を色素沈着からの回復の程度の指標とした。明度はＬ＊値が大きいほど、色が白いことを示す。被検物質塗布開始日（Ｄａｙ０）からの明度の変化量（ΔＬ＊値）の絶対値を比較した。その結果、表１９に示すように、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区およびα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子塗布区は塗布開始４日後（Ｄａｙ４）あたりから、メラニンの排出を伴う軽い落屑が起こり始め、塗布開始８日後（Ｄａｙ８）および１１日後（Ｄａｙ１１）には大幅な明度の回復が認められた。これらα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子およびα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子による効果はα－リポ酸濃度として０．０１％の製剤においても発揮されていた。一方、α－リポ酸分散液塗布区は最も高濃度である３％においても対照区である無塗布区および水塗布区とほとんど差が認められなかった。
　塗布開始日と塗布１１日目のモルモット背部製剤塗布部分の写真を図２０、図２１、図２２および図２３に示す。塗布１１日後に採取した皮膚の病理組織染色画像のうち代表的なものを図２４に示す。得られた画像の解析により各塗布部分における表皮層の厚さを計測した結果、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区およびα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子塗布区では表皮層の厚みが増大し、ターンオーバーが促進されていることが明らかとなった。一方、α－リポ酸分散液塗布区では、目視観察で明確な落屑は認められないとともに、表皮層部分の厚さも無塗布区（対照区１）や水塗布区（対照区２）と同程度であった。
　表皮層の厚みとターンオーバーとの関係については以下のように考えることができる。表皮層の厚みは、基底膜直上の表皮角化細胞の分裂によって表皮層全体を押し上げる速さと、表皮層の細胞が角層の細胞に分化する速さとの関係によって決まる。つまり、前者の活性化によりその速度が後者の速度を上回ったとき、表皮層は肥厚する。ターンオーバーが加速している表皮層では基底膜直上の表皮角化細胞の分裂および増殖が活性化しており、表皮層が少なくとも一時的に厚くなる現象が観察される。例えば、ケミカルピーリング等による表皮組織のターンオーバータイムの亢進にともない表皮層が肥厚し厚くなることはよく知られている。ターンオーバーの促進によって表皮層は肥厚し続けるわけではなく、ある時点でバランスがとれる。そのため、ターンオーバーを促進したことにより表皮層が異常に厚くなりすぎることはない。また、老人の皮膚では若年者の皮膚にくらべて表皮のターンオーバーが低下すること、表皮の菲薄化が認められることからも、表皮層の厚みの増加がターンオーバーの促進の指標になりうると考えられる。
　さらに目視観察において、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子塗布区およびα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子塗布区の皮膚表面は無塗布区（対照区１）、水塗布区（対照区２）および比較例６０のα－リポ酸分散液希釈液塗布区と同様の皮膚色を呈しており、皮膚炎症反応は確認されなかった。従来からターンオーバー改良効果を有する物質として周知のレチノイン酸は、塗布時に副作用として強い皮膚炎症反応を起こすことが知られているが、本実施例では、そのような副作用がないことが確認された。
　以上の結果により、α－リポ酸ナノ粒子はレチノイン酸で知られる副作用である皮膚への炎症を誘発することなく、α－リポ酸単独では認められない表皮層のターンオーバーおよびメラニン排出による色素沈着からの回復を著しく促進することが確認された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000021
　（実施例６４：化粧用クリームの調製）
　常法に従い以下の表２０に示す配合の材料を混合して化粧用クリームを製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000022
　（実施例６５：皮膚外用クリーム剤の調製）
　常法に従い以下の表２１に示す配合の材料を混合して皮膚外用クリーム剤を製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000023
　（試験例１５：ヒトでのシミ減少効果確認試験）
　化粧品クリームによるヒトでのシミ減少効果を確認した。４６～５４歳までの女性１２人に対し、被験者それぞれの日常の化粧品使用に加えて実施例６４のα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有クリームを左半顔にまんべんなく、朝と夜の１日２回、１２週間、１回あたり１ｃｍ２あたり約１～２ｍｇずつ塗布してもらい、塗布開始日と１２週間後の顔面に存在するシミ個数を顔の皮膚画像解析カウンセリングシステムＶＩＳＩＡ－Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ（ＣＡＮＦＩＥＬＤ社製、アメリカ）を用いて計測した。また塗布１２週間後には色彩色差計を用いて頬部明度（Ｌ＊値）も計測を行った。結果を以下の表２２に示す。表２２は１２週間後のシミ個数から塗布開始日のシミ個数を差し引いたシミ個数の変化量の１２名での平均値を示す。無塗布部位ではシミ個数が増加したのに対し、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有クリーム塗布部位ではシミ個数が減少する結果が得られた。また頬部明度の平均値もα－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有クリーム塗布部位では無塗布部と比較して高くなっていた。以上の結果から、α－リポ酸－ＣａＣＯ３ナノ粒子含有クリームはシミ減少効果を有することが確認できた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000024
　（試験例１６：ヒトでのシミ部位の色素沈着軽減効果確認試験）
　ヒトのシミにおける効果を確認するために、顔面シミへの塗布試験を行った。左右頬部に一箇所ずつ色彩色差計での測定が可能な比較的大きなシミをもつ４０代女性に実施例６５の０．４％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有クリーム剤を塗布してもらった。塗布はシミ部分だけに、朝と夜の１日２回、１回あたり１ｃｍ２あたり約１～２ｍｇずつで行ってもらった。そして塗布前と４週間後にシミ部位およびクリームを塗布しない隣接非シミ部位の明度（Ｌ＊値）を色彩色差計にて測定し、シミ部位と隣接部位との明度差（ΔＬ＊）により、シミの程度を数値化した。結果を以下の表２３に示す。この表２３においては、ΔＬ＊が小さくなるほどシミ部位と隣接部位の明度に差がなくシミが目立ちにくいことを表しており、また、４週目のΔＬ＊から塗布前のΔＬ＊を差し引いた値（Δ(ΔＬ＊)）が負の値であれば経日的にシミが回復したことを示している。試験の結果、表２３に示したように、試験を行った２箇所のシミどちらにおいても４週間の０．４％α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子含有クリーム剤塗布により肉眼観察でのシミ改善が認められたとともにΔＬ＊の値が小さくなる結果を得た。この際、隣接部位の明度はほとんど変化していないことから、このΔＬ＊値の減少はシミ部位のメラニン排出による色素沈着レベルの低下によるものであることが確認できた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000025
　（試験例１７：マウス背部へのα-リポ酸ナノ粒子塗布による表皮角化細胞分裂促進効果）
　ヘアレスマウス（ＨＲ－１、５週齢、オス）の背部、３ｃｍ×２ｃｍの区画に比較例６０のα－リポ酸分散液（３重量％α－リポ酸含有）、あるいは実施例６０のα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液（３重量％α－リポ酸含有）をそれぞれ４５ｍｇずつ１回塗布した。そして塗布前、塗布１、３、５、および７日後のマウス背部皮膚を採取し（ｎ＝３）、パラフィン包埋に供した。パラフィン包埋した組織から皮膚組織切片を作製しＫｉ－６７抗体免疫染色を行った。Ｋｉ－６７は細胞分裂時に核で発現しているタンパク質であり、分裂休止期には発現しておらず、細胞分裂の指標となるマーカーである。免疫染色の一次抗体にはラット抗マウスＫｉ－６７抗体（Ｄａｋｏ社製）を使用し、二次抗体にはペルオキシダーゼ標識されているヤギ抗ラットＩｇＧ抗体｛シンプルステインマウスＭＡＸ－ＰＯ（Ｒａｔ）、ニチレイ社製｝を使用した。発色にはジアミノベンジジンを用いた。染色画像から表皮基底細胞層において褐色に染色されたＫｉ－６７陽性細胞数をカウントし、基底膜１ｍｍ長あたりの平均陽性細胞数をグラフ化した。さらに別に作成した切片をヘマトキシリン・エオジン染色し、その顕微鏡画像から表皮層の厚さを測定した。Ｋｉ－６７陽性細胞数を図２５、表皮層の厚さを図２６に示す。この結果から、α－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液塗布群では塗布後３日目までα－リポ酸分散液塗布群と比較して有意にＫｉ－６７陽性細胞数の増加が観察された。それと相関するように表皮層の厚さも塗布後３日目まで有意に増大が観察された。一方、比較例のα-リポ酸分散液塗布区ではＫｉ－６７陽性細胞数、表皮層の厚さともに、塗布前とほとんど変化が認められなかった。また図２７にα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子分散液塗布３日後マウス皮膚組織切片の代表的なＫｉ－６７抗体免疫染色画像を示す。表皮層の厚み増大には表皮層有蕀細胞や顆粒細胞の増殖異常が関与する場合もあるといわれているが、図２７の結果からα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は表皮基底細胞層の分裂を活性化し、正常に皮膚のターンオーバーを促進していることが確認された。上記の結果からα－リポ酸－ＭｇＣＯ３ナノ粒子は優れたターンオーバー促進効果を発揮することが確認できた。
　以上のように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、この実施形態に限定して解釈されるべきものではない。本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。当業者は、本発明の具体的な好ましい実施形態の記載から、本発明の記載および技術常識に基づいて等価な範囲を実施することができることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
　本発明の組成物は、皮膚のターンオーバーを促進するために使用される。皮膚のターンオーバーを促進することにより皮膚からのメラニンの排出が促進されるため、本発明の組成物をメラニンの排出を目的とする用途に使用し得る。皮膚のターンオーバーを促進すると皮膚の再生が促進されるため、本発明の組成物を皮膚の再生および創傷治癒などに使用し得る。
　本発明の組成物に含まれるナノ粒子は水に溶解した場合に透明溶液の形態を保つものであり、且つ、多価金属無機塩の皮膜によりα－リポ酸が被覆されていることから低刺激性である。従って、本発明の組成物を、皮下および静脈内注射製剤として投与することが可能となる。
　本発明の組成物を外用剤として塗布投与した場合、あるいは経口投与剤として投与した場合には、良好に経皮吸収され、刺激性がないことから炎症を惹起せず、ナノ粒子から徐放的にα－リポ酸が放出され、皮膚のターンオーバーの促進効果を発揮できる。

Claims (18)

  1. 　皮膚のターンオーバーを促進するための組成物であって、該組成物は、α－リポ酸ナノ粒子を含み、該α－リポ酸ナノ粒子は、α－リポ酸と、非イオン性界面活性剤と、２価金属イオンと、炭酸イオンまたはリン酸イオンとを含む、組成物。
  2. 　皮膚のメラニンを排出するため、創傷治癒のため、または皮膚再生促進のための組成物である、請求項１に記載の組成物。
  3. 　前記２価金属イオンがカルシウムイオン、亜鉛イオンまたはマグネシウムイオンである、請求項１に記載の組成物。
  4. 　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂肪酸エステルからなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
  5. 　さらにポリエチレングリコールを含む、請求項１に記載の組成物。
  6. 　前記α－リポ酸ナノ粒子が、
    　α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程；
    　該水性分散液に、２価金属塩を添加する工程であって、該２価金属塩が、２価金属ハロゲン化物、２価金属酢酸化物または２価金属グルコン酸化物である、工程；および
    　該２価金属塩を添加した水性分散液に、アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物を添加して、α－リポ酸ナノ粒子を形成させる工程
    を包含する方法によって製造される、請求項１に記載の組成物。
  7. 　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、
    液状の非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解して界面活性剤溶液を得ること；および該界面活性剤溶液に水または水を含む液体を添加して水性分散液を得ることを含む、請求項６に記載の組成物。
  8. 　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程が、α－リポ酸とアルカリ性物質と水との混合物を作製してα－リポ酸含有水性分散液を調製すること；および該α－リポ酸含有水性分散液に非イオン性界面活性剤を添加することを含む、請求項６に記載の組成物。
  9. 　前記２価金属塩が、塩化カルシウム、臭化カルシウム、フッ化カルシウム、ヨウ化カルシウム、塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、フッ化マグネシウム、ヨウ化マグネシウム、塩化亜鉛、臭化亜鉛、フッ化亜鉛、ヨウ化亜鉛、酢酸カルシウム、酢酸マグネシウム、酢酸亜鉛、グルコン酸カルシウム、グルコン酸マグネシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  10. 　前記２価金属塩が、塩化カルシウム、塩化マグネシウムおよびグルコン酸亜鉛からなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  11. 　前記アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸ナトリウムおよびリン酸カリウムからなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  12. 　前記アルカリ金属炭酸化物またはアルカリ金属リン酸化物が、炭酸ナトリウムおよびリン酸水素二ナトリウムからなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  13. 　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステルおよびポリグリセリン脂肪酸エステルからなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  14. 　前記非イオン性界面活性剤のＨＬＢ値が、１０以上である、請求項１３に記載の組成物。
  15. 　前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）オクチルドデシルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度１０～２０）ポリオキシプロピレン（重合度４～８）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（重合度２０～１００）硬化ヒマシ油およびショ糖ラウリン酸エステルからなる群より選択される、請求項６に記載の組成物。
  16. 　前記α－リポ酸と非イオン性界面活性剤とを含む水性分散液を調製する工程において、
    　前記非イオン性界面活性剤にα－リポ酸を溶解する前に、ポリエチレングリコールを該非イオン性界面活性剤中に混合しておくか、または
    　前記界面活性剤溶液に水を含む液体を添加する際に、該水を含む液体として、ポリエチレングリコールを含む水を用いる、請求項７に記載の組成物。
  17. 　皮膚外用剤である、請求項１に記載の組成物。
  18. 　経口投与剤である、請求項１に記載の組成物。
PCT/JP2010/003578 2009-05-29 2010-05-27 α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物 WO2010137335A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2011515906A JPWO2010137335A1 (ja) 2009-05-29 2010-05-27 α−リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2009131600 2009-05-29
JP2009-131600 2009-05-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2010137335A1 true WO2010137335A1 (ja) 2010-12-02

Family

ID=43222461

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2010/003578 WO2010137335A1 (ja) 2009-05-29 2010-05-27 α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JPWO2010137335A1 (ja)
WO (1) WO2010137335A1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014025035A (ja) * 2012-07-30 2014-02-06 Panac Co Ltd 新規多糖体
JP2023109255A (ja) * 2022-01-27 2023-08-08 マスオ生物産業株式会社 美肌用組成物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62175415A (ja) * 1986-01-27 1987-08-01 Kanebo Ltd 皮膚化粧料
JP2005230314A (ja) * 2004-02-20 2005-09-02 Shiseido Co Ltd 表皮ターンオーバーの測定方法
JP2008088121A (ja) * 2006-10-03 2008-04-17 Kao Corp 表皮細胞増殖促進剤
JP2008143784A (ja) * 2006-12-06 2008-06-26 B & C Laboratories Inc 細胞増殖促進剤
WO2009078366A1 (ja) * 2007-12-14 2009-06-25 Ezaki Glico Co., Ltd. α-リポ酸ナノ粒子およびその調製方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5429824A (en) * 1992-12-15 1995-07-04 Eastman Kodak Company Use of tyloxapole as a nanoparticle stabilizer and dispersant
WO2004098570A1 (en) * 2002-10-30 2004-11-18 Spherics, Inc. Nanoparticulate bioactive agents

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62175415A (ja) * 1986-01-27 1987-08-01 Kanebo Ltd 皮膚化粧料
JP2005230314A (ja) * 2004-02-20 2005-09-02 Shiseido Co Ltd 表皮ターンオーバーの測定方法
JP2008088121A (ja) * 2006-10-03 2008-04-17 Kao Corp 表皮細胞増殖促進剤
JP2008143784A (ja) * 2006-12-06 2008-06-26 B & C Laboratories Inc 細胞増殖促進剤
WO2009078366A1 (ja) * 2007-12-14 2009-06-25 Ezaki Glico Co., Ltd. α-リポ酸ナノ粒子およびその調製方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HIROMI NISHIURA ET AL.: "a-Lipoic Acid Nano Capsule Seizai (a-lipoegg(R)) Kaihatsu no Tameno Kiso Kenkyu ··· Seizaika Hen", DRUG DELIVERY SYSTEM (DDS), vol. 24, no. 3, 9 June 2009 (2009-06-09), pages 304 *
KEIICHI HIRATA ET AL.: "a-Lipoic Acid Nano Capsule-ka Gijutsu no Kochiku (a-lipoeggTM) Oyobi Ko Shiwa Koka o Mokuteki to shita Yakuri Koka no Kento", DRUG DELIVERY SYSTEM (DDS), vol. 23, no. 3, 6 June 2008 (2008-06-06), pages 377 *
MASASHI ISOTANI ET AL.: "Nano Capsule-ka Retinoic Acid (NANOEGG(R)) ni yoru Shiwa Kaizen Koka no Kento(in vivo)", JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY, JAPAN, vol. 68, 30 April 2008 (2008-04-30), pages 215 *
YAMAGUCHI, Y ET AL.: "Successful treatment of photo-damaged skin of nano-scale atRA particles using a novel transdermal delivery", JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, vol. 104, no. 1, 5 May 2005 (2005-05-05), pages 29 - 40, XP004872698, DOI: doi:10.1016/j.jconrel.2004.11.036 *
YOSHIKI KUBOTA ET AL.: "a-Lipoic Acid Nano Capsule Seizai (a-lipoegg(R)) Kaihatsu no Tameno Kiso Kenkyu ···Yakuri Koka Hen", DRUG DELIVERY SYSTEM (DDS), vol. 24, no. 3, 9 June 2009 (2009-06-09), pages 304 *
YOSHIKI KUBOTA ET AL.: "a-Lipoic Acid Nano Capsule Seizai (a-lipoegg(R)) ni yoru Melanin Shikiso Haishutsu Koka no Kaiseki", AESTHETIC DERMATOLOGY, vol. 19, no. 3, 1 August 2009 (2009-08-01), pages 263 *
YOSHIKI KUBOTA ET AL.: "a-Lipoic Acid Nano Capsule Seizai (a-lipoeggTM) no Shibo Saibo eno Eikyo in vitro Kaiseki", DRUG DELIVERY SYSTEM (DDS), vol. 23, no. 3, 6 June 2008 (2008-06-06), pages 376 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014025035A (ja) * 2012-07-30 2014-02-06 Panac Co Ltd 新規多糖体
JP2023109255A (ja) * 2022-01-27 2023-08-08 マスオ生物産業株式会社 美肌用組成物

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2010137335A1 (ja) 2012-11-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5547612B2 (ja) α−リポ酸ナノ粒子およびその調製方法
US20230404889A1 (en) Peptide compositions and methods for ameliorating skin laxity and body contour
JP2018510220A (ja) シリマリンおよびスルホアルキルエーテルシクロデキストリンを含有する組成物ならびにそれを使用する方法
JP2008291004A (ja) 美肌用組成物
WO2020006496A1 (en) Bioactive compositions and methods for treating skin
CN109348703A (zh) 包含紫罗兰酮或其盐作为有效成分的具有改善皮肤保湿、去除皮肤角质、增强皮肤弹性、抑制红斑、改善皮肤皱纹或改善皮肤光老化效果的组合物
EP2735304B1 (en) Composition for preventing or alleviating skin wrinkles containing fermented honeybush extract as an active ingredient
JP5685315B2 (ja) ニコチン酸アデニンディヌクレオチドリン酸又はその誘導体を含む薬学又は化粧料組成物
JP3987793B2 (ja) 皮膚外用剤
KR101124441B1 (ko) 마그네슘 아스코르빌 포스페이트(ｍａｐ) 및 메틸설포닐메탄(ｍｓｍ) 혼합물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 발모 개선용 조성물
WO2010137335A1 (ja) α－リポ酸ナノ粒子を含有する、ターンオーバー促進用組成物
CN106852725A (zh) 用于改善皮肤的组合物
JP6238190B2 (ja) コラーゲン産生促進用、エラスチン産生促進用および／またはケラチノサイト遊走促進用組成物
KR20220123067A (ko) Ppar 작용제 복합물 및 사용 방법
JP6656890B2 (ja) フィラグリン産生促進剤
KR102652809B1 (ko) 피부 상태 개선용 조성물
US11773081B2 (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating wound, comprising indirubin derivative as active ingredient
KR102169935B1 (ko) 마리골드 추출물을 포함하는 히알루론산 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물
KR101754556B1 (ko) 수베르산 또는 이의 염을 유효성분으로 함유하는 피부보습 개선 또는 피부탄력 증진 효과를 갖는 조성물
KR101656322B1 (ko) 가르데노시드를 포함하는 피부 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 조성물
JP2013203729A (ja) コラーゲン産生促進剤
JP2004075558A (ja) 美白改善用キット
KR20170114741A (ko) 피부 상태 개선용 조성물
KR20170114736A (ko) 피부 상태 개선용 조성물
KR20160019032A (ko) 피부주름 및 피부노화 예방 또는 개선용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 10780295

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2011515906

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 10780295

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1