WO2009113543A1 - ホスフィン化合物、その製造方法およびそれを用いた過酸化物捕捉剤 - Google Patents

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WO2009113543A1
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compound
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phosphine
cyclic
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幸生 塩路
裕之 中川
健太郎 大熊
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学校法人福岡大学
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02Phosphorus compounds
    • C07F9/28Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5442Aromatic phosphonium compounds (P-C aromatic linkage)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06Free radical scavengers or antioxidants
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02Phosphorus compounds
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    • C07F9/50Organo-phosphines
    • C07F9/53Organo-phosphine oxides; Organo-phosphine thioxides
    • C07F9/5325Aromatic phosphine oxides or thioxides (P-C aromatic linkage)

Definitions

  • the present invention relates to a phosphine compound and a peroxide scavenger using the phosphine compound, and more specifically, the present invention relates to a phosphine compound and a peroxide scavenger using the same, which are localized in mitochondria. It relates to a peroxide scavenger.
  • the present invention also relates to a novel phosphine compound localized in mitochondria, a method for producing the same, and a method for capturing peroxide using the same. Furthermore, this invention relates to the phosphinyl compound which is an oxidation product of a phosphine compound.
  • Oxidative stress is defined as the difference between the oxidative damage potential of the active oxygen group generated in vivo and the antioxidant potential of the antioxidant system in vivo.
  • the active oxygen group is originally useful for energy production, invading foreign body attack, unnecessary cell processing, cell information transmission, and the like.
  • excessive reactive oxygen groups are generated that cannot be captured by the in vivo antioxidant system, lipids, proteins, enzymes that carry the structure and functions of living organisms, and genetic DNA that carries genetic information are oxidized and damaged. It disturbs the structure and function of the living body, causes diseases such as cancer and lifestyle-related diseases, and accelerates aging (Non-patent Document 1).
  • mitochondria are a source of active oxygen, they are one of the microorgans most susceptible to oxidative stress. Therefore, analyzing the state of oxidative stress in mitochondria greatly assists in elucidating the mechanism of many diseases caused by oxidative stress. Therefore, it is extremely useful to generate functional molecules that visualize the degree of mitochondrial oxidative stress.
  • Non-patent Document 2 Japan Antioxidant Society website (http://www.jsa-site.com/sanka_storesu.htm) Suzuki, B., Et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 2055-2058 Okimoto, Y., Et al., FEBS Lett., 2000, 474, 137-140
  • the present inventors have introduced a new peroxide scavenger that introduces a diphenylmonopyrenylphosphine compound, which is a substituent localized in mitochondria, as a fluorescent probe that captures only peroxide.
  • a new peroxide scavenger that introduces a diphenylmonopyrenylphosphine compound, which is a substituent localized in mitochondria, as a fluorescent probe that captures only peroxide.
  • an object of the present invention is to provide a phosphine compound represented by the following general formula [I] and a method for producing the same as one embodiment.
  • Another object of the present invention is to provide a novel peroxide scavenger wherein the peroxide scavenger is a phosphine compound [I] and a method for using the same.
  • the present invention provides, as another form, the following general formula [I ′], which is an oxidation product generated by oxidation of a novel peroxide scavenger that is a phosphine compound represented by the following general formula [I].
  • the object is to provide the phosphinyl compounds represented.
  • Z 1 and Z 2 are both cyclic groups, Ar means an arylene group, R means an aliphatic hydrocarbon group; Y means phosphorus (P), nitrogen (N) or bismuth (Bi), R 1 , R 2 and R 3 all represent a cyclic group)
  • the phosphine compound represented by these is provided.
  • any of the cyclic groups represented by Z 1 and Z 2 is an unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group or polycyclic hydrocarbon group, A heteromonocyclic or heteropolycyclic group;
  • the arylene group represented by Ar is an unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group or bicyclic hydrocarbon group;
  • the aliphatic hydrocarbon group represented by R is a linear or branched divalent aliphatic hydrocarbon group having 1 to 8 carbon atoms,
  • the cyclic groups represented by R 1 , R 2 and R 3 may be the same or different from each other, and are unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group, polycyclic hydrocarbon group or heteromonocyclic Group or heteropolycyclic group, Provided that one of the cyclic groups Z 1 and Z 2 is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and the other cyclic group is a polycyclic group
  • R 1 , R 2 and R 3 is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and the other cyclic group is a polycyclic hydrocarbon group or A heteropolycyclic group, A phosphine compound is provided.
  • any one of the cyclic groups Z 1 and Z 2 is a polycyclic hydrocarbon group or a heteropolycyclic group.
  • the other monocyclic group is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and all the cyclic groups of R 1 , R 2 and R 3 are monocyclic hydrocarbon groups or heteromonocyclic groups Or all cyclic groups of Z 1 and Z 2 are monocyclic groups are monocyclic hydrocarbon groups or heteromonocyclic groups, and any one ring of R 1 , R 2 and R 3
  • the formula group is a polycyclic hydrocarbon group or a heteropolycyclic group, and it is to provide a phosphine compound in which the other cyclic group is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group.
  • the present invention provides a phosphine compound represented by the above general formula [I], wherein among the cyclic groups represented by Z 1 and Z 2 , a monocyclic hydrocarbon group is For example, a phenyl group, etc .; as a polycyclic hydrocarbon group, a bicyclic hydrocarbon group includes, for example, an indanyl group, an indenyl group, a pentarenyl group, an azulenyl group, a naphthyl group, a tetrahydronaphthyl group, etc .;
  • the hydrocarbon group is, for example, anthracenyl group, fluorenyl group, phenalenyl group, phenanthrenyl group, etc .;
  • the tetracyclic hydrocarbon group is, for example, pyrenyl group, naphthacenyl group, chrysenyl group, etc .
  • the pentacyclic hydrocarbon group is, for example
  • heterocyclic polycyclic group includes, for example, an N-containing heterocyclic polycyclic group such as indolyl group, indolinyl group, quinolinyl group, isoquinolinyl group, quinazolinyl group, quinoxalinyl group, N-containing heterobicyclic groups such as naphthyridinyl group, pteridinyl group, purinyl group; acridinyl group, carbazolyl group, phenanthridinyl group, phenazini
  • An N-containing heterotricyclic group such as a benzoisoquinolinyl group
  • O-containing heteropolycyclic group such as a benzofur
  • the arylene group represented by Ar is a phenylene group, a tolylene group or a naphthalene group;
  • the linear or branched divalent aliphatic hydrocarbon group having 1 to 8 carbon atoms represented by R is a methylene group, an ethylene group, a propylene group, an isopropylene group, a butylene group or a methylbutylene group. ;
  • the monocyclic hydrocarbon group is, for example, a phenyl group; a polycyclic hydrocarbon group For example, an indanyl group, an indenyl group, a pentarenyl group, an azulenyl group, a naphthyl group, a tetrahydronaphthyl group, and the like; a tricyclic hydrocarbon group such as an anthracenyl group, a fluorenyl group, a phenalenyl group, and the like.
  • tetracyclic hydrocarbon group for example, pyrenyl group, naphthacenyl group, chrysenyl group, etc .
  • pentacyclic hydrocarbon group for example, perylenyl group, picenyl group, pentacenyl group, etc .
  • a hydrogen group is, for example, a naphthobirenyl group
  • a seven-ring hydrocarbon group is, for example, a coronenyl group
  • N-containing heteromonocyclic group is, for example, pyrrolyl group, imidazolyl group, pyrazolyl group, pyridyl group, piperidyl group, triazinyl group, etc .
  • O-containing heteromonocyclic group is, for example, furanyl group, pyranyl group, etc .
  • S-containing heteropolycyclic group for example, thiopolycyclic group, for example,
  • the O-containing heteropolycyclic group is, for example, an O-containing heterobicyclic group such as a benzofuranyl group, a chromanyl group, a chromenyl group, or an isochromanyl group, an O-containing heterotricyclic group such as a xanthenyl group; S-containing heteropolycyclic groups such as S-containing heterotricyclic groups such as containing heterotricyclic groups and thiantenyl groups; pyridooxazolyl groups, thienofuranyl groups, phenoxazinyl groups, phenothiazinyl groups, pyrazolooxazolyls N / O / S-containing heteropolycyclic groups such as a group; examples of the substituent include lower aliphatic groups having 1 to 6 carbon atoms such as a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group
  • a phosphine compound
  • the phosphine compound represented by the general formula [I] is in a cation state, the phosphine compound may be bonded to an anion as represented by the following general formula [I].
  • Such cations include, for example, halogen atom ions such as chlorine, bromine or iodine ions.
  • compounds in a state of binding to anions are also one embodiment of the present invention.
  • X means a halogen atom
  • This invention provides the manufacturing method of the phosphine compound represented by general formula [I] as another form. More specifically, the phosphine compound [I] of the present invention has the general formula [II]: (Wherein Z 1 represents a cyclic group, and X 1 represents a halogen atom) A halide compound represented by:
  • the hydroxyarylphosphine borane compound [VIII] obtained in the above step 4 is represented by the general formula [IX]: (Wherein X 5 represents a halogen atom, R means an aliphatic hydrocarbon group; Y means phosphorus (P), nitrogen (N) or bismuth (Bi), R 1 , R 2 and R 3 all represent a cyclic group) And a halide compound [IX] represented by
  • Step 3 in which the methoxyaryl phosphine oxide compound [VI] obtained in the above step 1b is demethylated with a demethylating reagent to obtain a hydroxyaryl phosphine oxide compound [VII];
  • the halo compound [XVI] obtained in the step 8 is converted into the general formula [VIII] obtained in the step 4:
  • a step 10 of obtaining a phosphine compound [I] represented by: Provides a method for producing a phosphine compound comprising producing a phosphine compound [I].
  • the present invention provides a peroxide scavenger containing a phosphine compound represented by the general formula [I] and a method for using the same.
  • the present invention provides a peroxide trapping method comprising trapping a peroxide using a phosphine compound represented by the general formula [I].
  • the present invention provides a peroxide trap, wherein the peroxide is, for example, a radical species such as superoxide or hydroxy radical, or a non-radical species such as hydrogen peroxide or singlet oxygen.
  • the peroxide is, for example, a radical species such as superoxide or hydroxy radical, or a non-radical species such as hydrogen peroxide or singlet oxygen.
  • the present invention provides, as another form, an oxidation product produced by oxidation of the phosphine compound represented by the general formula [I]. Specifically, the present invention provides an oxidation product obtained by oxidizing the phosphine compound represented by the general formula [I].
  • the phosphinyl compound represented by these is provided.
  • the phosphine compound according to the present invention is a source of active oxygen, it generates a functional molecule that can visualize the state of oxidative stress in mitochondria, which is one of the microorgans most susceptible to oxidative stress. There is an advantage that the mechanism of many diseases caused by oxidative stress can be elucidated.
  • FIG. 1 is a graph showing the change over time in the fluorescence intensity of the oxidation reaction of MitoDPPP with hydrogen peroxide.
  • FIG. 2 is a diagram showing the introduction of MitoDPPP into Hep G2 cells.
  • FIG. 3 is a diagram showing introduction of MitoDPPP into Hep2G2 cells and oxidation by tert-butoxyhydroperoxide (tBHP) stimulation.
  • FIG. 4 is a diagram showing the results of comparison of oxidation of Hep G2 intracellular MitoDPPP by hydrogen peroxide and tBHP.
  • FIG. 5 is a graph showing the change in fluorescence intensity with time in an aqueous solution of MitoDPPP.
  • FIG. 6 is a graph showing changes in fluorescence intensity over time due to oxidation of MitoDPPP in cells in the presence of ascorbic acid.
  • the present invention provides the following general formula [I]: (Wherein, Z 1 and Z 2 are both cyclic groups, Ar means an arylene group, R means an aliphatic hydrocarbon group; Y means phosphorus (P), nitrogen (N) or bismuth (Bi), R 1 , R 2 and R 3 all represent a cyclic group) It is related with the phosphine compound represented by these.
  • each of the cyclic groups represented by Z 1 and Z 2 is an unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group, polycyclic hydrocarbon group, or heteromonocyclic A group or a heteropolycyclic group;
  • the arylene group represented by Ar is an unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group or bicyclic hydrocarbon group;
  • the aliphatic hydrocarbon group represented by R is a linear or branched divalent aliphatic hydrocarbon group having 1 to 8 carbon atoms,
  • the cyclic groups represented by R 1 , R 2 and R 3 may be the same or different from each other, and are unsubstituted or substituted monocyclic hydrocarbon group, polycyclic hydrocarbon group or heteromonocyclic Group represents a heterocyclic group or a heterocyclic polycyclic group),
  • one of the cyclic groups Z 1 and Z 2 is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and the
  • R 1 , R 2 and R 3 is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and the other cyclic group is a polycyclic hydrocarbon group or Heteropolycyclic group.
  • any one of the cyclic groups Z 1 and Z 2 is a polycyclic hydrocarbon group or a heteropolycyclic group.
  • the other monocyclic group is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and all the cyclic groups of R 1 , R 2 and R 3 are monocyclic hydrocarbon groups or heteromonocyclic groups.
  • all cyclic groups of Z 1 and Z 2 are monocyclic groups wherein the monocyclic group is a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group, and any one ring of R 1 , R 2 and R 3
  • the formula group may be a polycyclic hydrocarbon group or a heteropolycyclic group, and the other cyclic group may be a monocyclic hydrocarbon group or a heteromonocyclic group.
  • the monocyclic hydrocarbon group is, for example, a phenyl group
  • the polycyclic hydrocarbon group is, for example, an indanyl group, an indenyl group, a pentarenyl group, an azulenyl group, a naphthyl group, a tetrahydronaphthyl group, or the like;
  • a tricyclic hydrocarbon group is For example, anthracenyl group, fluorenyl group, phenalenyl group, phenanthrenyl group, etc .;
  • a tetracyclic hydrocarbon group for example, a pyrenyl group, a naphthacenyl group, a chrysenyl group, etc .;
  • a pentacyclic hydrocarbon group for example, a perylenyl group, a picenyl group
  • heteropolycyclic group includes, for example, an indolyl group, indolinyl group, quinolinyl group, isoquinolinyl group, quinazolinyl group, quinoxalinyl group, naphthyridinyl group, pteridinyl group, purinyl group N-containing heterobicyclic groups such as groups; acridinyl group, carbazolyl group, phenanthridinyl group, phenazinyl group, benzoisoquinolini N-containing heterotricyclic groups such as ruthenium groups;
  • O-containing heteropolycyclic groups include, for example, O-containing heterobicyclic groups such as benzofuranyl group, chromanyl group, chromenyl group, isochromanyl group, and xanthenyl group.
  • S-containing heterotricyclic group such as dithianaphthyl group, S-containing heteropolycyclic group such as S-containing heterotricyclic group such as thiantenyl group; pyridooxazolyl group, thienofuranyl group N / O / S-containing heteropolycyclic groups such as a phenoxazinyl group, a phenothiazinyl group, and a pyrazolooxazolyl group.
  • these cyclic groups may have, for example, a lower aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms such as a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group as a substituent. Good.
  • the arylene group represented by Ar is a phenylene group, a naphthalene group, or the like, and the linear or branched divalent aliphatic hydrocarbon group represented by R is a methylene group, an ethylene group, a propylene group, or an isopropylene group. , Butylene group or methylbutylene group.
  • the monocyclic hydrocarbon group is, for example, a phenyl group; a polycyclic hydrocarbon group
  • the bicyclic hydrocarbon group for example, an indanyl group, an indenyl group, a pentarenyl group, an azulenyl group, a naphthyl group, a tetrahydronaphthyl group, and the like
  • a tricyclic hydrocarbon group includes, for example, an anthracenyl group, a fluorenyl group, a phenalenyl group, and the like.
  • tetracyclic hydrocarbon groups are, for example, pyrenyl groups, naphthacenyl groups, chrysenyl groups, etc .
  • pentacyclic hydrocarbon groups are, for example, perylenyl groups, picenyl groups, pentacenyl groups, etc .
  • the hydrogen group is, for example, a naphthobirenyl group
  • the seven-ring hydrocarbon group is, for example, a coronenyl group
  • the heterocyclic monocyclic group of a heterocyclic group N-containing heteromonocyclic group is, for example, pyrrolyl group, imidazolyl group, pyrazolyl group, pyridyl group, piperidyl group, triazinyl group, etc .
  • O-containing heteromonocyclic group is, for example, furanyl group, pyranyl group, etc .
  • S-containing heteropolycyclic groups include, for example,
  • the O-containing heteropolycyclic group includes, for example, an O-containing heterobicyclic group such as a benzofuranyl group, a chromanyl group, a chromenyl group, and an isochromanyl group, an O-containing heterotricyclic group such as a xanthenyl group, and the like; S-containing heteropolycyclic groups such as S-containing heterotricyclic groups such as containing heterotricyclic groups and thiantenyl groups; pyridooxazolyl groups, thienofuranyl groups, phenoxazinyl groups, phenothiazinyl groups, pyrazolooxazolyls N / O / S-containing heteropolycyclic groups such as groups.
  • an O-containing heterobicyclic group such as a benzofuranyl group, a chromanyl group, a chromenyl group, and an isochromanyl group, an O-containing heterotricyclic
  • these cyclic groups may have, for example, a lower aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms such as a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group as a substituent. Good.
  • the phosphine compound represented by the above general formula [I] is in a cation state, it is preferable that the phosphine compound be bonded to an anion.
  • Such cations include, for example, halogen atom ions such as chlorine, bromine or iodine ions.
  • compounds in a bonded state with anions are also one form included in the present invention.
  • the phosphine compound [I] according to the present invention can be produced by a method known per se in the art. The production method will be described in more detail according to the following reaction steps.
  • step 1a the halide compound [II], the dihalophosphine compound [III], and the methoxyaryl metal magnesium halide [IV] are reacted to give the methoxyarylphosphine compound [V].
  • the halogen atom of the halide compound [II] used in Step 1 include bromine, iodine, chlorine and the like.
  • the halide compound [II] include phenyl bromide, tolyl chloride, naphthyl bromide, anthrace. Examples include nyl bromide, pyrenyl bromide, and perylenyl bromide.
  • Examples of the dihalophosphine compound [III] include dichlorophenylphosphine, dibromophenylphosphine, diiodophenylphosphine, and the like.
  • Examples of the substituent of the dihalophosphine compound [III] include an aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms, preferably 1 to 3 carbon atoms, such as a methyl group, an ethyl group, and a propyl group. And isopropyl group.
  • Examples of the methoxyaryl metal magnesium halide [IV] include methoxyphenylmagnesium chloride, methoxyphenylmagnesium bromide, methoxyphenylmagnesium iodide and the like.
  • Examples of the substituent include 1 to 6 carbon atoms, preferably Includes an aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms, such as a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group. Further, the number and position of the substituents are not particularly limited, and may be arbitrary as long as the reaction is not hindered.
  • the reaction in Step 1 is preferably performed in a solvent, and examples of the solvent include ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran.
  • the reaction temperature is, for example, 0 ° C to -100 ° C, preferably -40 ° C to -80 ° C, and the reaction time is, for example, about 1 to 24 hours, preferably about 5 to 15 hours. Good.
  • Step 2 is an oxidation reaction of the methoxyaryl phosphine compound [V] obtained in Step 1a and is a step for obtaining a methoxyaryl phosphine oxide compound [VI].
  • This oxidation reaction can be performed using an oxidizing agent in a solvent.
  • the oxidizing agent examples include hydrogen peroxide and potassium hydrogenated monosulfate.
  • the solvent an organic solvent such as dichloromethane and alkyl halides such as chloroform can be used.
  • the reaction temperature is from room temperature to about 60 ° C., preferably 40 ° C. to 45 ° C., and the reaction time is about 10 minutes to 1 hour, preferably about 15 minutes to 25 minutes.
  • the methoxyaryl phosphine oxide compound [VI] can also be produced by the step 1b as shown in the above reaction step. That is, it can also be produced by reacting the halide compound [II] with methoxyaryl phosphine oxide [XI].
  • the reaction of step 1b is preferably carried out in a solvent such as dimethylsulfone oxide or dimethylformamide in the presence of a palladium compound such as palladium acetate and an amine such as 1.3-bis (diphenylphosphino) propane and diisopropylethylamine. .
  • the reaction temperature is under heating, for example, room temperature to 160 ° C., preferably 150 ° C., and the reaction time is about 10 to 24 hours, preferably 12 to 18 hours.
  • Step 3 is a deprotection reaction of the protecting group of the methoxyaryl phosphine oxide compound [VI] obtained in Step 2, and is a step for obtaining the hydroxyaryl phosphine oxide compound [VII].
  • the methoxy group of the methoxyphenyl group in the methoxyarylphosphine oxide compound [VI] can be deprotected and converted to a hydroxy group.
  • This deprotection reaction is preferably carried out in a solvent using a deprotecting agent.
  • a deprotecting agent for example, a demethylating reagent such as borane tribromide can be used.
  • an aprotic solvent such as an alkyl halide such as dichloromethane, dichloroethane or chloroform can be used.
  • the reaction temperature is about ⁇ 50 ° C. to 0 ° C., preferably about ⁇ 20 ° C. to ⁇ 10 ° C., and the reaction time is about 1 hour to 24 hours, preferably about 10 hours to 20 hours.
  • Step 4 is a step of reacting the hydroxyarylphosphine oxide compound [VII] obtained in Step 3 above with a protective reagent to introduce a protecting group to obtain a hydroxyarylphosphine borane compound [VIII].
  • the dicyclic group-substituted hydroxyarylphosphine oxide compound [VII] is reacted with a protecting agent in a solvent to introduce a borane protecting group.
  • protective agents that can be used in this step include borohydride compounds such as monoborane.
  • the solvent for example, alkylamines such as triethylamine and tributylamine can be used.
  • the reaction temperature is about -50 ° C to 200 ° C, preferably about -20 ° C to 150 ° C, and the reaction time is about 10 minutes to 24 hours, preferably about 30 minutes to 20 hours.
  • Step 5 is an alkylation step in which the hydroxyarylphosphine borane compound [VIII] obtained in Step 4 is reacted with a substituted alkyl halide [IX] to obtain a phosphine borane compound [X].
  • This ether bond formation reaction is carried out in an organic solvent such as formamide such as dimethylformamide in the presence of a base such as sodium hydride at a reaction temperature of about ⁇ 50 ° C. to 0 ° C., preferably about ⁇ 20 ° C. to 0 ° C. for 10 minutes to The reaction time is about 24 hours, preferably about 30 minutes to 20 hours.
  • Step 6 is a step in which the borane protecting group of the tri-substituted phosphine borane compound [X] obtained in Step 5 is deprotected to obtain the phosphine compound [I].
  • This deprotection reaction is preferably carried out in a solvent using a deprotecting agent.
  • a deprotecting agent for example, a deboraneation reagent such as diethylamine or diisopropylethylamine can be used.
  • aprotic solvents such as alkyl halides such as dichloromethane and dichloroethane can be used.
  • the reaction temperature is about 0 ° C. to 60 ° C., preferably about 30 ° C. to 40 ° C., and the reaction time is about 1 hour to 24 hours, preferably about 10 hours to 15 hours.
  • the phosphine compound [I] according to the present invention can also be produced by a method comprising the following steps.
  • the phosphine compound [I] is represented by the general formula [XVIII].
  • Step 7 is a step in which the halide compound [XII] and the monohalophosphine compound [XIII] are reacted in the presence of alkyllithium, for example, butyllithium, to obtain the triarylphosphine compound [XIV].
  • alkyllithium for example, butyllithium
  • the halogen atom of halide [XII] used in Step 7 include bromine, iodine, chlorine and the like
  • examples of the halide compound [XII] include phenyl bromide, tolyl chloride, naphthyl bromide, anthracenyl. Examples include bromide, pyrenyl bromide, and perylenyl bromide.
  • Examples of the monohalophosphine compound [XIII] include chlorophenylphosphine, bromophenylphosphine, iodophenylphosphine, and the like.
  • the substituent of the halophosphine compound [XIII] for example, an aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms, preferably 1 to 3 carbon atoms, such as a methyl group, an ethyl group, a propyl group, An isopropyl group etc. are mentioned. Further, the number and position of the substituents are not particularly limited, and may be arbitrary as long as the reaction is not hindered.
  • the reaction in step 7 is preferably performed in a solvent, and examples of the solvent include ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran.
  • the reaction temperature is, for example, 0 ° C to -100 ° C, preferably -40 ° C to -80 ° C, and the reaction time is, for example, about 1 to 24 hours, preferably about 5 to 15 hours. Good.
  • Step 8 is a step of reacting alkyl dihalide [XVI] with triarylphosphine [XIV] to obtain substituted alkyl halide [XVI].
  • This alkylation reaction is carried out in an organic solvent such as an aromatic hydrocarbon such as toluene at a reaction temperature of about ⁇ 50 ° C. to 200 ° C., preferably about ⁇ 20 ° C. to 150 ° C. for about 10 minutes to 24 hours, preferably 30
  • the reaction time is preferably about 20 minutes to 20 minutes.
  • Step 9 is an alkylation step in which the hydroxyarylphosphine borane compound [VIII] obtained in the above Step 1a, Step 2, Step 3 and Step 4 is reacted with a substituted alkyl halide [XVI] to obtain a phosphine borane compound [XVII]. It is.
  • This ether bond formation reaction is carried out in an organic solvent such as formamide such as dimethylformamide in the presence of a base such as sodium hydride at a reaction temperature of about ⁇ 50 ° C. to 0 ° C., preferably about ⁇ 20 ° C. to 0 ° C.
  • the reaction time is preferably about minutes to 24 hours, preferably about 30 minutes to 20 hours.
  • Step 10 is a step of obtaining the phosphine compound [XVIII] by deprotecting the borane protecting group of the tri-substituted phosphine borane compound [XVII] obtained in Step 9.
  • This deprotection reaction is preferably carried out in a solvent using a deprotecting agent.
  • a deprotecting agent for example, a deboraneation reagent such as diethylamine or diisopropylethylamine can be used.
  • the solvent aprotic solvents such as alkyl halides such as dichloromethane and dichloroethane can be used.
  • the reaction temperature is about 0 ° C. to 60 ° C., preferably about 30 ° C. to 40 ° C., and the reaction time is about 1 hour to 24 hours, preferably about 10 hours to 15 hours.
  • the phosphine compound [I] according to the present invention When the phosphine compound [I] is oxidized, it quickly becomes a phosphonium oxide salt [I ′] and increases the fluorescence intensity. Double staining of the phosphonium oxide salt [I ′] and the mitochondrial fluorescent marker confirmed that the phosphonium oxide salt [I ′] was localized in the mitochondria.
  • the phosphine compound [I] was oxidized with hydrogen peroxide and tert-butoxyhydroperoxide (tBHP) in an aqueous solution, an increase in fluorescence intensity was confirmed with either oxidizing agent.
  • tBHP tert-butoxyhydroperoxide
  • the phosphine compound [I] is oxidized to a phosphonium oxide salt [I ′] as shown above. That is, the phosphonium oxide salt [I ′] has the general formula [I ′]: (In the formula, Z 1 ′ and Z 2 ′ have the same meaning as Z 1 and Z 2 , respectively, provided that all of R 1 , R 2 and R 3 are monocyclic hydrocarbon groups. Is a cyclic group other than a monocyclic hydrocarbon group, and when Z 1 ′ and Z 2 ′ are both monocyclic hydrocarbon groups, R 1 , R 2 and One of R 3 means a cyclic group other than a monocyclic hydrocarbon group) It is a compound represented by these.
  • the phosphine compound [I] of the present invention is capable of capturing peroxides such as active oxygen that are localized in living cells, particularly mitochondria, and are generated in mitochondria. Accordingly, the phosphine compound [I] of the present invention can be used as a mitochondrial peroxide scavenger because it can localize in mitochondria and capture peroxides.
  • Step 1c Synthesis of 4-methoxyphenylphenylpyrenylphosphine [Va] Pyrene bromide [IIa] (3.28 g, 15 mmol) was dissolved in 70 mL of THF and n-BuLi (6.11 mL, 2.7 M, 16.5 mmol, 1.1 eq) was added dropwise for 15 minutes and stirred for 3 hours.
  • This reaction is THF
  • dichlorophenylphosphine [IIIa] (2.03 mL, 15 mmol, 1 eq) dissolved in 6 mL ( ⁇ 78 ° C.) for 15 minutes.
  • Step 2a Synthesis of 4-methoxyphenylphenylpyrenylphosphine oxide [VIa] Pyrenyl-phenyl-4-methoxyphenylphosphine [Va] (1.68 g, 4.03 mmol) is dissolved in 25 mL of chloroform, and 5 mL of hydrogen peroxide is slowly added dropwise. To do. Stir for 5 minutes and quench with 25 mL of 10% sodium thiosulfate. Extraction was performed with chloroform (20 mL ⁇ 3). The organic layer was dried over sodium sulfate and concentrated with an evaporator to obtain white crystals with a yield of 97%. The white crystals obtained were identified by 1 H-NMR, 31 P-NMR and 13 C-NMR.
  • Step 3a Synthesis of 4-methoxyphenylphenylpyrenylphosphine oxide [VIIa] Pyrenyl-phenyl-4-methoxyphenylphosphine oxide [VIa] (1.7 g, 3.9 mmol) was dissolved in 100 mL of dichloromethane, and the solution was dissolved at -78 ° C. Bromide (11 mL, 11 mmol, 4 eq) was added dropwise. After stirring for 18 hours, it was quenched with 40 mL of H 2 O. The white precipitate formed at that time was suction filtered. The obtained crystals were dried with a pistol overnight to obtain white crystals with a yield of 94%. The obtained white crystals were identified by 1 H-NMR and 31 P-NMR.
  • Step 4a Synthesis of 4-hydroxyphenylphenylpyrenylphosphine borane [VIIIa] Pyrenyl-phenyl-4-methoxyphenylphosphine oxide [VIIa] (1.2 g, 3.1 mmol) dissolved in 100 mL of toluene and triethylamine (1.79 mL, 13 mmol, 4 eq) is added dropwise and stirred in ice. Trichlorosilane (1.2mL, 12 mmol, 4 eq) is added dropwise for 10 minutes and refluxed at 110 ° C. After stirring for 18 hours, borane THF complex (3.00mL, 3.1 mmol, 1 eq) is added dropwise for 10 minutes.
  • VIIIa Pyrenyl-phenyl-4-methoxyphenylphosphine oxide
  • Step 5a Synthesis of phosphine borane [Xa] Sodium hydride [VIIIa] (192 mg, 2.9 mmol, 1.1 eq) was washed with hexane (1 mL ⁇ 3) in a glow box, 5 mL of DMF was added dropwise and stirred for 10 minutes. To do. Pyrenyl-phenyl-4-phenoxyphosphine borane (1.14 g, dissolved in 5 mL DMF) 2.7 mmol, 1 eq) is added dropwise for 5 minutes.
  • iodine propane triphenylphosphonium iodide [IXa] (1.51 g, 2.7 mmol, 1 eq) dissolved in 5 mL of DMF was added dropwise at -15 ° C. for 5 minutes. After stirring for 6 hours, the reaction solution turned from an orange turbid solution to a clear yellow solution. At that time, the reaction was quenched with 5 mL of saturated aqueous ammonium chloride solution. Extraction was performed with dichloromethane (10 mL ⁇ 3), and the organic layer was dried over sodium sulfate. Concentration with an evaporator gave a yellow oil.
  • the obtained yellow crystals were dissolved in a small amount of dichloromethane, and ethyl acetate was added to precipitate a white precipitate.
  • the upper layer was removed by decantation, and when an oil pump was pulled, white crystals were obtained in a yield of 33%.
  • the obtained white crystals were identified by 1 H-NMR, 31 P-NMR and ESI-MS.
  • Step 6a Synthesis of [3- (4-Phenoxyphenylphosphinopyrenylphosphino) bropyl] triphenylphosphonium iodide [Ia] [Pyrenyl-phenyl-4-phenoxyphosphineborane] triphenylphosphonium dye [Xa] ( 167 mg, 0.21 mmol) was dissolved in 1 mL of chloroform, and diethylamine (102 ⁇ L, 0.84 mmol, 4 eq) was added dropwise. The mixture was stirred overnight at 40 ° C. in a water bath.
  • Example 2 is a method for synthesizing MitoPeDPP.
  • Diiodopropane (0.6mmol, 175 mg) was dissolved in toluene (1 mL) and refluxed, and the resulting dipyrenylphosphine (0.6 mmol, A solution of 232 mg, 1 eq) dissolved in toluene (1 mL) was slowly added dropwise. The mixture was allowed to stir overnight, and the deposited yellow precipitate was taken out by suction filtration and washed with hot toluene three times. The crystals were dried to obtain iodopropanediphenylpyrenylphosphonium iodide (yield 63%). They were identified by 1 H-NMR, 31 P-NMR, 13 C-NMR, ESI-MS, IR, and elemental analysis.
  • Diphenylphosphine chloride (5 mmol, 0.92 ml) was dissolved in THF (25 ml) and cooled to 0 ° C. 4-methoxyphenylmagnesium bromide (6.5 mmol, 19 ml, 1.3 eq) was added dropwise for 20 minutes. The mixture was stirred for 3 hours and allowed to return to room temperature. After further stirring for 5 hours, the reaction was terminated with saturated NH 4 Cl (20 ml). Inorganic salts were removed by suction filtration, and the filtrate was extracted with dichloromethane (40 ml ⁇ 3). It was dried with sodium sulfate and concentrated using an evaporator and an oil pump to obtain diphenyl-4-methoxyphenylphosphine.
  • FIG. 2 (a) is a view stained with a mitochondrial fluorescent stain Mito Tracker Green FM, and the right side is an enlarged view of the left circle.
  • FIG. 2 (b) is a view stained with MitoDPPP, and the right side is an enlarged view of the left circle.
  • ascorbic acid (25 ⁇ M) solution 6-O-acetylascorbic acid (25 ⁇ M) solution, 6-O-hexanoylascorbic acid (25 ⁇ M) solution, 5,6-O-isopropylidene-L-asukorubinic acid 2 mL of each (25 ⁇ M) solution was prepared, poured into a petri dish, and incubated at 37 ° C. for 30 minutes. After loading, the solution was removed and washed twice with 1 mL of PBS. 1980 ⁇ L of DPBS heated to 37 ° C.
  • MitoDPPP is oxidized using AAPH which is a radical initiator.
  • AAPH a radical initiator.
  • Ascorbic acid and its derivatives are added during the reaction, an increase in fluorescence intensity is suppressed. This degree of inhibition becomes the antioxidant power of ascorbic acid and its derivatives.
  • FIG. 5 shows the change over time of the fluorescence intensity in the aqueous solution.
  • ascorbic acid and the synthesized fat-soluble derivatives were compared in antioxidant activity in HepG2 cells.
  • HepG2 cells are cultured on a glass plate, the autofluorescence of the cells on the plate is measured, then MitoDPPP and an ascorbic acid derivative are introduced, and then AAPH is introduced to initiate the reaction.
  • the increase in fluorescence intensity was normalized by dividing the measured fluorescence intensity by autofluorescence.
  • FIG. 6 shows time-dependent changes in fluorescence intensity due to oxidation of MitoDPPP in cells in the presence of ascorbic acid.
  • the phosphine compound according to the present invention is capable of capturing peroxides localized in mitochondria that are particularly susceptible to oxidative stress, and also causes the disorder of mitochondrial membrane function and causes the degree of oxidative stress to cause apoptosis. Since it can be visualized by a probe, it is useful as a mitochondrial peroxide scavenger.

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Abstract

 この発明は、一般式 [I]: (式中、ZおよびZはいずれも環式基を意味し、Arはアリレン基を意味し、 Rは脂肪族炭化水素基を意味し、Yはリン(P)、窒素(N)またはビスマス(Bi)を意味し、R、RおよびRはいずれも環式基を意味する) で表されるホスフィン化合物からなる過酸化物捕捉剤であって、特に酸化ストレスによりミトコンドリア中に発生し、ミトコンドリア中に局在する活性酸素種などの過酸化物を捕捉できる過酸化物捕捉剤を提供する。この発明のホスフィン化合物は、ミトコンドリアに局在する過酸化物によって酸化され、その蛍光強度を増加することによって該過酸化物を捕捉することができる新規な過酸化物捕捉剤である。  

Description

ホスフィン化合物、その製造方法およびそれを用いた過酸化物捕捉剤
 この発明は、ホスフィン化合物およびそれを用いた過酸化物捕捉剤に関するものであり、更に詳細には、この発明は、ホスフィン化合物およびそれを用いた過酸化物捕捉剤であってミトコンドリアに局在化する過酸化物捕捉剤に関するものである。また、この発明は、ミトコンドリアに局在化する新規なホスフィン化合物ならびにその製造方法およびそれを用いた過酸化物捕捉方法に関するものである。さらに、この発明は、ホスフィン化合物の酸化生成物であるホスフィニル化合物に関するものである。
 酸化ストレスは、生体内で生成する活性酸素群の酸化損傷力と、生体内の抗酸化システムの抗酸化ポテンシャルとの差として定義されている。活性酸素群は、本来、エネルギー生産、侵入異物攻撃、不要な細胞の処理、細胞情報伝達などに際して生産される有用なものである。しかし、生体内の抗酸化システムで捕捉し切れない余剰な活性酸素群が生じる場合、生体の構造や機能を担っている脂質、タンパク質、酵素や、遺伝情報を担う遺伝子DNAを酸化し損傷を与え、生体の構造や機能を乱し、がんや生活習慣病などの病気を引き起こしたり、老化を早めたりする(非特許文献1)。
 体内では、呼吸で取り入れた酸素をミトコンドリアの電子伝達系で使用してH2Oが生成されるときに産生する活性酸素などの過酸化物は、酸化ストレスを増加させると考えられている。ミトコンドリアは、ATPを構成し細胞の生命を維持するだけでなく、アボトーシス(細胞死)に中心的な役割を果たしている。なお、酸化LDL、酸化RLPなどは血管内皮細胞の酸化ストレスを増加させることが知られている。
 このように、ミトコンドリアは、活性酸素の発生源である一方、酸化ストレスを最も大きく受けやすい微小器官の1つである。したがって、ミトコンドリアでの酸化ストレスの状態を解析することは、酸化ストレスに起因する多くの疾病の機構を解明することに大きな助けとなる。そのために、ミトコンドリアの酸化ストレスの程度を視覚化する機能性分子を生成することは極めて有用である。
 これまで過酸化物捕捉剤が開発されてきたが、過酸化物だけを捕捉する試薬は未だ開発されていない(非特許文献2)。またミトコンドリアに局在化する過酸化物捕捉剤も未だ開発されていない(非特許文献3)。
日本抗酸化学会ホームページ(http://www.jsa-site.com/sanka_storesu.htm) Suzuki,B., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 2055-2058 Okimoto,Y., et al., FEBS Lett., 2000, 474, 137-140
 上記背景技術に鑑みて、本発明者らは、ミトコンドリアに局在化する置換基であるジフェニルモノピレニルホスフィン化合物を、過酸化物のみを捕捉する蛍光プローブとして導入した新しい過酸化物捕捉剤を見出して、この発明を完成した。
 したがって、この発明は、1つの形態として、下記一般式[I]で表されるホスフィン化合物およびその製造方法を提供すること目的としている。
 この発明は、別の形態として、上記過酸化物捕捉剤がホスフィン化合物[I]である新規過酸化物捕捉剤およびその使用方法を提供することを目的としている。
 また、この発明は、別の形態として、下記一般式[I]で表されるホスフィン化合物である新規過酸化物捕捉剤が酸化されて生成する酸化生成物である下記一般式[I’]で表されるホスフィニル化合物を提供することを目的としている。
 上記目的を達成するために、この発明は、下記一般式[I]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 (式中、ZおよびZはいずれも環式基を意味し、
     Arはアリレン基を意味し、
     Rは脂肪族炭化水素基を意味し、
     Yはリン(P)、窒素(N)またはビスマス(Bi)を意味し、
     R、RおよびRはいずれも環式基を意味する)
で表されるホスフィン化合物を提供する。
 この発明は、好ましい態様として、上記ホスフィン化合物であって、ZおよびZで表される環式基はいずれも、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基であり;
 Arで表されるアリレン基は、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基または2環式炭化水素基であり;
 Rで表される脂肪族炭化水素基は、炭素原子数が1~8個の直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基であり、
 R、RおよびRで表される環式基がそれぞれ、同一かまたは異なっていてもよく、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基を意味し、
 ただし、ZおよびZのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、および/またはR、RおよびRのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基である、
ホスフィン化合物を提供する。
 この発明のより好ましい態様としては、一般式[I]で表されるホスフィン化合物において、ZおよびZのいずれか一つの環式基が多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他方の単環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRの全ての環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基である、またはZおよびZの全ての環式基が単環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRのいずれか一つの環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他の環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であるホスフィン化合物を提供することである。
 この発明は、さらに好ましい態様として、上記一般式[I]で表されるホスフィン化合物であって、ZおよびZでいずれも表される環式基のうち、単環式炭化水素基が、例えば、フェニル基などであり;多環式炭化水素基としては、2環式炭化水素基が、例えば、インダニル基、インデニル基、ペンタレニル基、アズレニル基、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基など;3環式炭化水素基が、例えば、アントラセニル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基など;4環式炭化水素基が、例えば、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基など;5環式炭化水素基が、例えば、ペリレニル基、ピセニル基、ペンタセニル基など;6環式炭化水素基が、例えば、ナフトビレニル基など;7環式炭化水素基が、例えば、コロネニル基などであり;また複素環式基の複素単環式基としては、N含有複素単環式基が、例えば、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピペリジル基、トリアジニル基など;O含有複素単環式基が、例えば、フラニル基、ピラニル基など;S含有複素多環式基が、例えば、チオフェニル基など;N/O/S含有複素単環式基が、例えば、オキサゾリル基、チアゾリル基、モルホリニル基等のなどであり;また複素多環式基としては、N含有複素多環式基が、例えば、インドリル基、インドリニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、プリニル基等のN含有複素2環式基;アクリジニル基、カルバゾリル基、フェナントリジニル基、フェナジニル基、ベンゾイソキノリニル基等のN含有複素3環式基など;O含有複素多環式基が、例えば、ベンゾフラニル基、クロマニル基、クロメニル基、イソクロマニル基等のO含有複素2環式基、キサンテニル基等のO含有複素3環式基など;ジチアナフチル基等のS含有複素3環式基、チアントレニル基等のS含有複素3環式基等のS含有複素多環式基;ピリドオキサゾリル基、チエノフラニル基、フェノキサジニル基、フェノチアジニル基、ピラゾロオキサゾリル基等のN/O/S含有複素多環式基などであり;置換基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基等の炭素原子数が1~6個の低級脂肪族炭化水素基であり;
 Arで表されるアリレン基がフェニレン基、トリレン基、ナフタレン基であり;
 Rで表される炭素原子数が1~8個の直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基がメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基またはメチルブチレン基であり;
 Aで表されるカチオン基のR、RおよびRでいずれも表される環式基のうち、単環式炭化水素基が、例えば、フェニル基などであり;多環式炭化水素基としては、2環式炭化水素基が、例えば、インダニル基、インデニル基、ペンタレニル基、アズレニル基、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基など;3環式炭化水素基が、例えば、アントラセニル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基など;4環式炭化水素基が、例えば、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基など;5環式炭化水素基が、例えば、ペリレニル基、ピセニル基、ペンタセニル基など;6環式炭化水素基が、例えば、ナフトビレニル基など;7環式炭化水素基が、例えば、コロネニル基などであり;また複素環式基の複素単環式基としては、N含有複素単環式基が、例えば、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピペリジル基、トリアジニル基など;O含有複素単環式基が、例えば、フラニル基、ピラニル基など;S含有複素多環式基が、例えば、チオフェニル基など;N/O/S含有複素単環式基が、例えば、オキサゾリル基、チアゾリル基、モルホリニル基等のなどであり;また複素多環式基としては、N含有複素多環式基が、例えば、インドリル基、インドリニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、プリニル基等のN含有複素2環式基;アクリジニル基、カルバゾリル基、フェナントリジニル基、フェナジニル基、ベンゾイソキノリニル基等のN含有複素3環式基など;O含有複素多環式基が、例えば、ベンゾフラニル基、クロマニル基、クロメニル基、イソクロマニル基等のO含有複素2環式基、キサンテニル基等のO含有複素3環式基など;ジチアナフチル基等のS含有複素3環式基、チアントレニル基等のS含有複素3環式基等のS含有複素多環式基;ピリドオキサゾリル基、チエノフラニル基、フェノキサジニル基、フェノチアジニル基、ピラゾロオキサゾリル基等のN/O/S含有複素多環式基などであり;置換基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基等の炭素原子数が1~6個の低級脂肪族炭化水素基であるホスフィン化合物を提供する。
 上記一般式[I]で表されるホスフィン化合物は、カチオンの状態であるので、下記一般式[I]で示すように、アニオンと結合する形態であるのがよい。かかるカチオンとしては、例えば、塩素、臭素またはよう素イオン等のハロゲン原子イオンなどが挙げられ、当然のことながら、アニオンとの結合状態の化合物もこの発明の1態様である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
 (式中、Xはハロゲン原子を意味する)。
 この発明は、別の形態として、一般式[I]で表されるホスフィン化合物の製造方法を提供する。更に具体的には、この発明のホスフィン化合物[I]は、一般式[II]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
 (式中、Z1は環式基を意味し、Xはハロゲン原子を意味する)
で表されるハライド化合物と、
一般式[III]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
 (式中、Zは環式基を意味し、XおよびXはハロゲン原子をそれぞれ意味する)
で表されるジハロホスフィン化合物と、
一般式[IV]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
(式中、Xはハロゲン原子を意味し、Arはアリレン基を意味する)
で表されるメトキシアリール金属マグネシウムハライドを反応させて、
一般式[V]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
 (式中、Z、ZおよびArはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるメトキシアリールホスフィン化合物を得る工程1aと;
上記工程1aで得られたメトキシアリールホスフィン化合物[V]を酸化剤と反応させて一般式[VI]:
 (式中、Z、ZおよびArはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるメトキシアリールホスフィンオキシド化合物を得る工程2と;
 上記工程2で得られたメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を脱メチル化試薬で脱メチル化して一般式[VII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
 (式中、Z、ZおよびArはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物を得る工程3と;
上記工程3で得られたヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII] をボラン化合物と反応させて一般式[VIII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
 (式中、Z、ZおよびArはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物を得る工程4と;
上記工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を一般式[IX]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
     (式中、X5 はハロゲン原子を意味し、
     Rは脂肪族炭化水素基を意味し、
     Yはリン(P)、窒素(N)またはビスマス(Bi)を意味し、
     R、RおよびRはいずれも環式基を意味する)
で表されるハライド化合物[IX]と反応させて、
一般式[X]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
     (式中、Z、Z、Ar、R、Y、R、RおよびRはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるホスフィンボラン化合物を得る工程5と;
上記工程5で得られたホスフィンボラン化合物[X]の保護基を脱保護して一般式[I]で表されるホスフィン化合物を得る工程6と、からなる方法;または
上記一般式[II]で表されるハライド化合物と、一般式[XI]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
(式中、ZおよびArは前記と同じ意味を有する)
で表されるメトキシアリールホスフィンオキシド化合物と反応させて、一般式[VI]で表されるメトキシアリールホスフィンオキシド化合物を得る工程1bと;
 上記工程1bで得られたメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を脱メチル化試薬で脱メチル化してヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を得る工程3と;
上記工程3で得られたヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]をボラン化合物と反応させてヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を得る工程4と;
上記工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]をハライド化合物[IX]と反応させて、ホスフィンボラン化合物[X]を得る工程5と;
上記工程5で得られたホスフィンボラン化合物[X]の保護基を脱保護して一般式[I]で表されるホスフィン化合物を得る工程6と、からなる方法;または
一般式[XII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
 (式中、Xはハロゲン原子を意味し、Rは前記と同じ意味を有する)
で表されハライド化合物と、一般式[XIII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
 (式中、Xはハロゲン原子を意味し、RおよびRは前記と同じ意味を有する)
で表されるハライド化合物を反応させて、一般式[XIV]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
 (式中、R、RおよびRは前記と同じ意味を有する)
で表される化合物を得る工程7と;
 工程7で得られた上記化合物[XIV]と、一般式[XV]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
 (式中、XおよびXはいずれもハロゲン原子を意味する)
で表されるジハロ化合物を反応させて一般式[XVI]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
 (式中、R、R、R、XおよびXは前記と同じ意味を有する)
で表されるハロ化合物を得る工程8と;
 工程8で得られた上記ハロ化合物[XVI]を、上記工程4で得られた上記一般式 [VIII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
 (式中、Z、ZおよびArはいずれも前記と同じ意味を有する)
で表されるヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物と反応させて一般式[XVII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
 (式中、Z、Z、Ar、R、R、R、RおよびXは前記と同じ意味を有する)
で表されるホスフィンボラン化合物を得る工程9と;
 工程9で得られたホスフィンボラン化合物[XVII]を脱保護することによって一般式[XVIII]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
 (式中、Z、Z、Ar、R、R、R、R、RおよびXは前記と同じ意味を有する)
で表されるホスフィン化合物[I]を得る工程10と、からなる方法;
によってホスフィン化合物[I]を製造することからなるホスフィン化合物の製造方法を提供する。
 この発明は、別の形態として、一般式[I]で表されるホスフィン化合物を含む過酸化物捕捉剤およびその使用方法を提供する。
 この発明は、さらに別の形態として、一般式[I]で表されるホスフィン化合物を用いて過酸化物を捕捉することからなる過酸化物捕捉方法を提供する。
 この発明は、この形態の好ましい態様として、過酸化物が、例えば、スーパーオキシド、ヒドロキシラジカル等のラジカル種、過酸化水素、一重項酸素等のノンラジカル種などであることからなる過酸化物捕捉方法を提供する。
 また、この発明は、別の形態として、一般式[I]で表されるホスフィン化合物が酸化されて生成する酸化生成物を提供する。具体的には、この発明は、一般式 [I] で表されるホスフィン化合物が酸化生成される酸化生成物が
一般式 [I’]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
 (式中、Z1’およびZ2’は、上記Z1、およびZ2とそれぞれ同じ意味を有し、ただし、R、RおよびRの全てが単環式炭化水素基である場合は、そのいずれか一方は、単環式炭化水素基以外の環式基であり、またZ1’およびZ2’がいずれも単環式炭化水素基である場合は、R、RおよびRの1つは、単環式炭化水素基以外の環式基を意味する)
で表されるホスフィニル化合物を提供する。
 この発明に係るホスフィン化合物は、活性酸素の発生源である一方、酸化ストレスを最も大きく受けやすい微小器官の1つであるミトコンドリアでの酸化ストレスの状態を視覚化することができる機能性分子を生成することができ、それによって酸化ストレスに起因する多くの疾病の機構を解明できるという利点がある。
図1は、MitoDPPPについての過酸化水素による酸化反応の蛍光強度の経時変化を示す図である。(実施例4) 図2は、MitoDPPPのHep G2細胞への導入についての図である。(実施例5) 図3は、MitoDPPPのHep G2細胞への導入および tert-ブトキシヒドロパーオキサイド(tBHP)刺激による酸化についての図である。(実施例6) 図4は、過酸化水素およびtBHPによるHep G2細胞内 MitoDPPP の酸化の比較した結果を示す図である。(実施例7) 図5は、MitoDPPPの水溶液での蛍光強度の経時変化を示す図。(実施例9) 図6は、アスコルビン酸存在下における細胞中でのMitoDPPPの酸化による蛍光強度の経時変化を示す図。(実施例9)
 この発明は、下記一般式[I]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
 (式中、ZおよびZはいずれも環式基を意味し、
     Arはアリレン基を意味し、
     Rは脂肪族炭化水素基を意味し、
     Yはリン(P)、窒素(N)またはビスマス(Bi)を意味し、
     R、RおよびRはいずれも環式基を意味する)
で表されるホスフィン化合物に関するものである。
 この発明に係るホスフィン化合物[I]において、ZおよびZで表される環式基はいずれも、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基であり;
 Arで表されるアリレン基は、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基または2環式炭化水素基であり;
 Rで表される脂肪族炭化水素基は、炭素原子数が1~8個の直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基であり、
 R、RおよびRで表される環式基がそれぞれ、同一かまたは異なっていてもよく、非置換もしくは置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基を意味する)で表されるカチオン基であり、
 ただし、ZおよびZのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、および/またはR、RおよびRのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基である。
 この発明の更に好ましい態様においては、一般式[I]で表されるホスフィン化合物において、ZおよびZのいずれか一つの環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他方の単環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRの全ての環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基である、またはZおよびZの全ての環式基は単環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRのいずれか一つの環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他の環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であるのがよい。
 更に詳細には、上記一般式[I]で表されるホスフィン化合物であって、ZおよびZでいずれも表される環式基のうち、単環式炭化水素基は、例えば、フェニル基などであり;多環式炭化水素基としては、2環式炭化水素基は、例えば、インダニル基、インデニル基、ペンタレニル基、アズレニル基、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基など;3環式炭化水素基は、例えば、アントラセニル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基など;4環式炭化水素基は、例えば、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基など;5環式炭化水素基は、例えば、ペリレニル基、ピセニル基、ペンタセニル基など;6環式炭化水素基は、例えば、ナフトビレニル基など;7環式炭化水素基は、例えば、コロネニル基などであり;また複素環式基の複素単環式基としては、N含有複素単環式基は、例えば、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピペリジル基、トリアジニル基など;O含有複素単環式基は、例えば、フラニル基、ピラニル基など;S含有複素多環式基は、例えば、チオフェニル基など;N/O/S含有複素単環式基は、例えば、オキサゾリル基、チアゾリル基、モルホリニル基等のなどであり;また複素多環式基としては、N含有複素多環式基は、例えば、インドリル基、インドリニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、プリニル基等のN含有複素2環式基;アクリジニル基、カルバゾリル基、フェナントリジニル基、フェナジニル基、ベンゾイソキノリニル基等のN含有複素3環式基など;O含有複素多環式基は、例えば、ベンゾフラニル基、クロマニル基、クロメニル基、イソクロマニル基等のO含有複素2環式基、キサンテニル基等のO含有複素3環式基など;ジチアナフチル基等のS含有複素3環式基、チアントレニル基等のS含有複素3環式基等のS含有複素多環式基;ピリドオキサゾリル基、チエノフラニル基、フェノキサジニル基、フェノチアジニル基、ピラゾロオキサゾリル基等のN/O/S含有複素多環式基などである。また、これらの環式基は、置換基として、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基等の炭素原子数が1~6個の低級脂肪族炭化水素基などを有していてもよい。
 Arで表されるアリレン基はフェニレン基、ナフタレン基などであり、またRで表される直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基はメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基またはメチルブチレン基などである。
 Aで表されるカチオン基のR、RおよびRでいずれも表される環式基のうち、単環式炭化水素基は、例えば、フェニル基などであり;多環式炭化水素基としては、2環式炭化水素基は、例えば、インダニル基、インデニル基、ペンタレニル基、アズレニル基、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基など;3環式炭化水素基は、例えば、アントラセニル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基など;4環式炭化水素基は、例えば、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基など;5環式炭化水素基は、例えば、ペリレニル基、ピセニル基、ペンタセニル基など;6環式炭化水素基は、例えば、ナフトビレニル基など;7環式炭化水素基は、例えば、コロネニル基などであり;また複素環式基の複素単環式基としては、N含有複素単環式基は、例えば、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピペリジル基、トリアジニル基など;O含有複素単環式基は、例えば、フラニル基、ピラニル基など;S含有複素多環式基は、例えば、チオフェニル基など;N/O/S含有複素単環式基は、例えば、オキサゾリル基、チアゾリル基、モルホリニル基等のなどであり;また複素多環式基としては、N含有複素多環式基は、例えば、インドリル基、インドリニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、プリニル基等のN含有複素2環式基;アクリジニル基、カルバゾリル基、フェナントリジニル基、フェナジニル基、ベンゾイソキノリニル基等のN含有複素3環式基など;O含有複素多環式基は、例えば、ベンゾフラニル基、クロマニル基、クロメニル基、イソクロマニル基等のO含有複素2環式基、キサンテニル基等のO含有複素3環式基など;ジチアナフチル基等のS含有複素3環式基、チアントレニル基等のS含有複素3環式基等のS含有複素多環式基;ピリドオキサゾリル基、チエノフラニル基、フェノキサジニル基、フェノチアジニル基、ピラゾロオキサゾリル基等のN/O/S含有複素多環式基などである。また、これらの環式基は、置換基として、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基等の炭素原子数が1~6個の低級脂肪族炭化水素基などを有していてもよい。
 上記一般式[I]で表されるホスフィン化合物は、カチオンの状態であるので、アニオンと結合する形態であるのがよい。かかるカチオンとしては、例えば、塩素、臭素またはよう素イオン等のハロゲン原子イオンなどが挙げられ、当然のことながら、アニオンとの結合状態の化合物もこの発明に包含される1形態である。
 この発明に係るホスフィン化合物[I]は、それ自体当該技術分野にて既知の方法によって製造することができる。その製造方法を下記反応工程に従って更に詳しく説明する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
 上記反応工程に示すように、工程1aは、ハライド化合物[II]と、ジハロホスフィン化合物[III]と、メトキシアリール金属マグネシウムハライド[IV]とを反応させて、メトキシアリールホスフィン化合物[V]を得る工程である。
 工程1で使用されるハライド化合物[II]のハロゲン原子としては、例えば、臭素、ヨウ素、塩素などが挙げられ、ハライド化合物[II]としては、例えば、フェニルブロミド、トリルクロリド、ナフチルブロミド、アントラセニルブロミド、ピレニルブロミド、ペリレニルブロミドなどが挙げられる。
 ジハロホスフィン化合物[III]としては、例えば、ジクロロフェニルホスフィン、ジブロモフェニルホスフィン、ジヨードフェニルホスフィンなどが挙げられる。ジハロホスフィン化合物[III]の置換基としては、例えば、炭素原子数が1から6個、好ましくは炭素原子数が1から3個の脂肪族炭化水素基、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基などが挙げられる。
 メトキシアリール金属マグネシウムハライド[IV]としては、例えば、メトキシフェニルマグネシウムクロライド、メトキシフェニルマグネシウムブロマイド、メトキシフェニルマグネシウムヨーダイドなどが挙げられ、置換基としては、例えば、炭素原子数が1から6個、好ましくは炭素原子数が1から6個の脂肪族炭化水素基、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基などが挙げられる。また、置換基の数および位置は特に限定されるものではなく、反応に支障がない限り任意であってよい。
 工程1における反応は溶媒中で行うのがよく、溶媒としては、例えば、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテルなどを使用することができる。また、反応温度は、例えば、0℃~-100℃、好ましくは-40℃~-80℃であって、反応時間は、例えば、1~24時間、好ましくは5~15時間程度であるのがよい。
 工程2は、工程1aで得られたメトキシアリールホスフィン化合物[V] の酸化反応であって、メトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を得る工程である。この酸化反応は溶媒中で酸化剤を使用して行うことができる。使用できる酸化剤としては、例えば、過酸化水素、モノ化硫酸水素カリウムなどが挙げられる。溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化アルキル、などの有機溶媒を使用することができる。反応温度は室温から60℃程度、好ましくは40℃~45℃であって、反応時間は10分~1時間程度、好ましくは15分~25分程度であるのがよい。
 また、メトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]は、上記反応工程に示すように、工程1bによっても製造できる。つまり、上記ハライド化合物[II]と、メトキシアリールホスフィンオキシド[XI]とを反応させることによっても製造することができる。工程1bの反応は、例えば、酢酸パラジウムなどのパラジウム化合物と1.3-ビス(ジフェニルホスフィノ)プロパンとジイソプロピルエチルアミンなどのアミン類の存在下でジメチルスルホンオキシド、ジメチルホルムアミドなどの溶媒中で行うのがよい。反応温度は加熱下、例えば室温~160℃、好ましくは150℃で、反応時間は10~24時間程度、好ましくは12時間~18時間である。
 工程3は、工程2で得られたメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]の保護基の脱保護反応であって、ヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を得る工程である。この脱保護反応によって、メトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]におけるメトキシフェニル基のメトキシ基が脱保護されてヒドロキシ基に変換することができる。この脱保護反応は脱保護化剤を使用して溶媒下で行うのがよい。かかる脱保護化剤としては、例えば、ボラントリブロミド等の脱メチル化試薬などが使用できる。溶媒としては、非プロトン性溶媒、例えば、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化アルキルなどが使用できる。反応温度はー50℃~0℃程度、好ましくは-20℃~-10℃程度であって、反応時間は1時間~24時間程度、好ましくは10時間~20時間程度であるのがよい。
 工程4は、上記工程3で得られたヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を保護試剤と反応させて保護基を導入してヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を得る工程である。この工程での反応は、ジ環式基置換ヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を保護試剤と、溶媒中で反応させて、ボラン保護基を導入する。この工程で使用できる保護試剤としては、例えば、モノボラン、などの水素化ホウ素化合物が挙げられる。溶媒としては、例えば、トリエチルアミン、トリブチルアミン等のアルキルアミンなどを使用することができる。反応温度は-50℃~200℃程度、好ましくは-20℃~150℃程度であって、反応時間は10分間~24時間程度、好ましくは30分間~20時間程度であるのがよい。
 工程5は、上記工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を置換アルキルハライド[IX]と反応させてホスフィンボラン化合物[X]を得るアルキル化工程である。このエーテル結合生成反応は、ホルムアミド例えばジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中でたとえばナトリウムハイドライドなどの塩基存在下-50℃~0℃程度、好ましくは-20℃~0℃程度の反応温度で、10分間~24時間程度、好ましくは30分間~20時間程度の反応時間行うのがよい。
 工程6は、工程5で得られたトリ置換ホスフィンボラン化合物[X]のボラン保護基を脱保護して、ホスフィン化合物[I]を得る工程である。この脱保護反応は、この脱保護反応は脱保護化剤を使用して溶媒下で行うのがよい。かかる脱保護化剤としては、例えば、ジエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の脱ボラン化試薬などが使用できる。溶媒としては、非プロトン性溶媒、例えば、ジクロロメタン、ジクロロエタン等のハロゲン化アルキルなどが使用できる。反応温度は0℃~60℃程度、好ましくは30℃~40℃程度であって、反応時間は1時間~24時間程度、好ましくは10時間~15時間程度であるのがよい。
 また、この発明に係るホスフィン化合物[I]は、次のような工程からなる方法によっても製造することもできる。なお、下記反応スキームにおいては、ホスフィン化合物[I]は、一般式[XVIII]で表されている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
 工程7はハライド化合物[XII]と、モノハロホスフィン化合物[XIII]とをアルキルリチウム、たとえばブチルリチウムの存在下で反応させて、トリアリールホスフィン化合物[XIV]を得る工程である。
 工程7で使用されるハライド[XII]のハロゲン原子としては、例えば、臭素、ヨウ素、塩素などが挙げられ、ハライド化合物[XII]としては、例えば、フェニルブロミド、トリルクロリド、ナフチルブロミド、アントラセニルブロミド、ピレニルブロミド、ペリレニルブロミドなどが挙げられる。
 モノハロホスフィン化合物[XIII]としては、例えば、クロロフェニルホスフィン、ブロモフェニルホスフィン、ヨードフェニルホスフィンなどが挙げられる。ハロホスフィン化合物[XIII]の置換基としては、例えば、炭素原子数が1から6個、好ましくは炭素原子数が1から3個の脂肪族炭化水素基、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基などが挙げられる。また、置換基の数および位置は特に限定されるものではなく、反応に支障がない限り任意であってよい。
 工程7における反応は溶媒中で行うのがよく、溶媒としては、例えば、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテルなどを使用することができる。また、反応温度は、例えば、0℃~-100℃、好ましくは-40℃~-80℃であって、反応時間は、例えば、1~24時間、好ましくは5~15時間程度であるのがよい。
 工程8はアルキルジハライド[XVI]とトリアリールホスフィン[XIV]を反応させて置換アルキルハライド[XVI]を得る工程である。このアルキル化反応は芳香族炭化水素、例えばトルエンなどの有機溶媒中で-50℃~200℃程度、好ましくは-20℃~150℃程度の反応温度で、10分間~24時間程度、好ましくは30分間~20時間程度の反応時間行うのがよい。
 工程9は、上記工程1a、工程2、工程3および工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を置換アルキルハライド[XVI]と反応させてホスフィンボラン化合物[XVII]を得るアルキル化工程である。このエーテル結合生成反応は、ホルムアミド、例えばジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中で、たとえばナトリウムハイドライドなどの塩基存在下-50℃~0℃程度、好ましくは-20℃~0℃程度の反応温度で、10分間~24時間程度、好ましくは30分間~20時間程度の反応時間行うのがよい。
 工程10は、工程9で得られたトリ置換ホスフィンボラン化合物[XVII]のボラン保護基を脱保護して、ホスフィン化合物[XVIII]を得る工程である。この脱保護反応は、この脱保護反応は脱保護化剤を使用して溶媒下で行うのがよい。かかる脱保護化剤としては、例えば、ジエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の脱ボラン化試薬などが使用できる。溶媒としては、非プロトン性溶媒、例えば、ジクロロメタン、ジクロロエタン等のハロゲン化アルキルなどが使用できる。反応温度は0℃~60℃程度、好ましくは 30℃~40℃程度であって、反応時間は1時間~24時間程度、好ましくは10時間~15時間程度であるのがよい。
 この発明に係るホスフィン化合物[I]は、酸化されると速やかにホスホニウムオキシド塩[I’]となって蛍光強度を増加する。ホスホニウムオキシド塩[I’]とミトコンドリア蛍光マーカーとの二重染色により、ホスホニウムオキシド塩[I’]がミトコンドリアに局在していることが確認された。ホスフィン化合物[I]を水溶液中で過酸化水素およびtert-ブトキシヒドロパーオキサイド(tBHP)により酸化すると、どちらの酸化剤でも蛍光強度の増大が確認された。一方、ミトコンドリアに局在しているホスフィン化合物[I]は、同様に酸化すると、tBHPを使用したときのみにホスホニウムオキシド塩[I’]の蛍光が観察されている。
 ホスフィン化合物[I]は、酸化されて上記に示すようにホスホニウムオキシド塩[I’]になる。つまり、ホスホニウムオキシド塩[I’]は、一般式[I’]:
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
(式中、Z1’およびZ’は、上記Z1、およびZ2とそれぞれ同じ意味を有し、ただし、R、RおよびRの全てが単環式炭化水素基である場合は、そのいずれか一方は、単環式炭化水素基以外の環式基であり、またZ1’およびZ’がいずれも単環式炭化水素基である場合は、R、RおよびRの1つは、単環式炭化水素基以外の環式基を意味する)
で表される化合物である。
 これらの結果から、この発明のホスフィン化合物[I]は、生体細胞、特にミトコンドリアに局在して、ミトコンドリア内に発生する活性酸素などの過酸化物を捕捉することができる。したがって、この発明のホスフィン化合物[I]は、ミトコンドリアに局在して過酸化物を捕捉することができることから、ミトコンドリアの過酸化物捕捉剤として使用することができる。
 この発明に係る[3-(4-フェノキシフェニルホスフィノピレニルホスフィノ)ブロピル]トリフェニルホスホニウムヨ-ダイド[Ia](MitoDPPP)の反応スキームは次の通りである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
 上記反応スキームの各工程について詳細に説明する。
工程1c:4-メトキシフェニルフェニルピレニルホスフィン[Va]の合成
 ピレンブロミド[IIa](3.28g, 15mmol)を70mLのTHFに溶かし、-78℃でn-BuLi(6.11mL, 2.7M,
16.5mmol, 1.1eq)を15分間滴下し、3時間撹拌した。この反応物をTHF
6mLに溶かしたジクロロフェニルホスフィン[IIIa](2.03mL, 15mmol, 1eq)へ15分間滴下した(-78℃)。一晩撹拌した後、4-メトキシフェニルマグネシウムブロミド[IVa](45mL, 0.5M, 22.5mmol, 1.5eq)を-78℃にて15分間滴下した。6時間撹拌した後、50mLの飽和塩化アンモニウム水溶液にてクエンチした。その際生じた無機塩を吸引ろ過にて除去し、ジクロロメタン(100mL×3)にて抽出した。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥後、エバポレーターにて濃縮した。精製はカラムクロマトグラフィーを展開溶媒(ジクロロメタン:へキサン=1:2)にて行った。得られた淡黄色の結晶が収率32%で得られた。得られた淡黄色の結晶は1H-NMR、31P-NMR、13C-NMR、H-H COSYおよびC-H COSYにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ
3.78 (s, 3H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz,2H), 7.28-7.34 (m, 7H), 7.54 (dd, J = 8.0, 4.4 Hz, 1H), 7.98-8.10 (m, 5H), 8.17-8.20 (m,
2H), 8.73 (dd, 8.0, 4.4 Hz, 1H). 31P NMR
(CDCl3, 162 MHz) δ -14.23. 13C NMR (CDCl3, 100 Hz) δ
114.36, 114.38, 114.62, 114.71, 124.78, 124.80, 124.88, 124.93, 124.99, 125.54,
125.60, 125.74, 125.81, 126.29, 127.29, 127.36, 127.64, 127.95, 127.98, 128.29,
128.49、128.55,
128.78, 128.83, 128.49, 130.98, 131.09, 131.55, 131.94, 132.26, 132.41, 132.43,
133.94, 134.03, 134.13, 134.26, 134.76, 134.97, 136.07, 136.29, 137.68, 137.78,
160.69.
工程2a:4-メトキシフェニルフェニルピレニルホスフィンオキシド[VIa]の合成
 ピレニル-フェニル-4-メトキシフェニルホスフィン[Va](1.68g, 4.03mmol)をクロロホルム25mLに溶かし、5mLの過酸化水素をゆっくり滴下する。5分間撹拌し、10%チオ硫酸ナトリウム25mLにてクエンチする。クロロホルム(20mL×3)にて抽出した。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥し、エバポレーターにて濃縮して白色結晶を収率97%で得た。得られた白色結晶は1H-NMR、31P-NMRおよび13C-NMRにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 3.82 (s, 3H), 6.97 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 7.43-7.49 (m,
2H), 7.52-7.56 (m, 1H), 7.60-7.78 (m, 5H), 8.00-8.08 (m, 4H), 8.15-8.23 (m,
3H), 8.94 (d, J = 9.6 Hz, 1H). 31P NMR (CDCl3, 162 MHz) δ
33.93. 13C NMR (CDCl3, 100 Hz) δ
114.37, 114.50, 123.68, 123.82, 124.03, 124.43, 125.14, 125.27, 125.32, 125.37,
126.35, 126.59, 126.67, 127.36, 128.74, 128.86, 129.06, 130.01, 130.66, 131.24,
131.35, 131.48, 131.98, 132.01, 132.33, 132.43, 133.51, 134.24, 134.28, 134.35,
134.38, 134.55, 162.66, 162.69.
工程3a:4-メトキシフェニルフェニルピレニルホスフィンオキシド[VIIa]の合成
 ピレニル-フェニル-4-メトキシフェニルホスフィンオキシド[VIa](1.7g, 3.9mmol)をジクロロメタン100mLに溶かし、-78℃にてボラントリブロミド(11mL, 11mmol, 4eq)を滴下した。18時間撹拌後、40mLのH2Oにてクエンチした。そのとき生じた白色の沈殿物を吸引ろ過した。得られた結晶を一晩ピストル乾燥して白色結晶を収率94%で得た。得られた白色結晶は1H-NMRおよび31P-NMRにて同定した。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ6.92
(d, J = 10.8 Hz, 2H), 7.40-7.45 (m, 2H), 7.52-7.61 (m, 5H), 7.69 (dd, J = 12.0, 7.6 Hz, 1H), 8.11-8.40 (m, 7H), 8.83 (d, J =
9.2 Hz, 1H), 10.34 (br). 31P NMR (DMSO-d6,
162 MHz) δ31.10.
工程4a:4-ヒドロキシフェニルフェニルピレニルホスフィンボラン[VIIIa]の合成
 ピレニル-フェニル-4-メトキシフェニルホスフィンオキシド[VIIa](1.2g, 3.1 mmol)にトルエン100mLに溶かしトリエチルアミン(1.79mL,
13mmol, 4eq)を滴下し、氷溶中にて撹拌する。トリクロロシラン(1.2mL,
12mmol, 4eq)を10分間滴下し110℃で還流する。18時間撹拌後、氷溶中にてボランTHFコンプレックス(3.00mL,
3.1mmol, 1eq)を10分間滴下する。15分間撹拌後、5mLのメタノールにてクエンチした。白色の沈殿物を吸引ろ過し、ろ液をエバポレーターにて濃縮して淡黄色の結晶を収率88%で得た。得られた淡黄色の結晶を展開溶媒(酢酸エチル:へキサン=1:2)にてカラムクロマトグラフィーを行って淡黄色の結晶を得た。得られた淡黄色の結晶は1H-NMRおよび31P-NMRにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ
6.88 (d, 8.4 Hz,2H),7.40-7.44 (m, 2H), 7.49-7.58 (m, 3H), 7.65-7.74 (m, 3H),
7.96-8.06 (m, 4H), 8.11-8.24 (m, 3H), 8.40 (d, J = 9.2 Hz, 1H). 31P
NMR (CDCl3, 162 MHz) δ 20.40 (br). 13C
NMR (CDCl3, 100 Hz) δ 116.41, 116.51, 119.96, 120.58, 122.39, 122.94, 124.38,
124.42, 124.53, 125.36, 125.44, 126.37, 126.61, 126.67, 126.72, 127.35, 128.35,
129.13, 129.24, 129.74, 130.02, 130.55, 130.61, 131.27, 131.45, 131.47, 131.96,
13204, 133.43, 133.48, 133.53, 133.57, 133.96, 133.98, 135.69, 135.79, 158.66,
158.68. IR 830.91, 1102.58, 1175.52, 1435.70, 1500.34, 1580.50, 2375.59,
3405.33.
工程5a:ホスフィンボラン[Xa]の合成
 グローボックス内にてナトリウムハイドライド[VIIIa](192mg, 2.9mmol, 1.1eq)をヘキサン(1mL×3)にて洗浄し、5mLのDMFを滴下し10分間撹拌する。5mLのDMFに溶かしたピレニル-フェニル-4-フェノキシホスフィンボラン(1.14g,
2.7mmol, 1eq)を5分間滴下する。3時間撹拌後、-15℃にて5mLのDMFに溶かしたヨ-ドプロパントリフェニルホスホニウムヨ-ダイド[IXa](1.51g, 2.7mmol, 1eq)を5分間滴下した。6時間撹拌後、反応溶液はオレンジ色の混濁液から黄色の透明溶液になった。そのとき飽和塩化アンモニウム水溶液5mLにてクエンチした。ジクロロメタン(10mL×3)にて抽出し、有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥した。エバポレーターにて濃縮し、黄色のオイルが得られた。この黄色のオイルを展開溶媒(ジクロロメタン:酢酸エチル=3:7)を用いてカラムクロマトグラフィーで精製した。得られた黄色の結晶を少量のジクロロメタンに溶かし、酢酸エチルを加えると白色の沈殿物が沈降した。上層をデカンテーションにて取り除き、オイルポンプを引くと白色の結晶を収率33%で得た。得られた白色結晶は1H-NMR、31P-NMRおよびESI-MSにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 2.16-2.18 (m, 2H), 4.05-4.13 (m, 2H) 4.38-4.41 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.0
Hz, 2H), 7.27-7.44 (m, 2H), 7.49-7.57 (m, 3H), 7.65-7.86 (m, 18H), 7.95-8.08
(m, 4H), 8.12-8.22 (m, 3H), 8.39 (d, J = 9.2 Hz, 1H),31P NMR (CDCl3,
162 MHz) δ 20.26 (br), 25.90 13C NMR (CDCl3,
100 Hz) δ 19.95 (d, JCP = 52.60 Hz), 23.01 (s), 66.99 (d, JCP = 16.80 Hz),
115.48, 115.59, 117.87, 118.73, 120.13, 120.76, 122.41, 122.96, 124.38, 124.49,
124.59, 125.32, 125.41, 126.35, 126.56, 126.61, 126.68, 127.41, 128.31, 129.13,
129.23, 129.69, 129.93, 130.51, 130.67, 130.80, 131.26, 131.45, 131.47, 132.01,
132.10, 133.36, 133.43, 133.52, 133.87, 133.97, 135.32, 135.35, 135.41, 135.51,
160.97, 160.99. IR 688.37, 738.36, 1105.66, 1247.54, 1435.83, 1498.61, 1592.29,
2377.83. ESI-MS (C49H42BOP2 +) : 計算値:719; 測定値:721.
元素分析(C49H42BIOP2);計算値:C, 69.52; H, 5.00; 測定値: C, 69.37; H, 5.28.
工程6a:[3-(4-フェノキシフェニルホスフィノピレニルホスフィノ)ブロピル]トリフェニルホスホニウムヨ-ダイド[Ia]の合成
 [ピレニル-フェニル-4-フェノキシホスフィンボラン]トリフェニルホスホニウムダイド[Xa](167mg, 0.21mmol)をクロロホルム1mLに溶かし、ジエチルアミン(102μL, 0.84mmol, 4eq)を滴下した。水浴にて40℃で一晩撹拌した。溶媒をエバポレーターにて濃縮し、展開溶媒(ジクロロメタン:メタノール=13:1)を用いてカラムクロマトグラフィーで精製すると、白色の結晶が収率51%で得られた。この白色結晶は1H-NMRおよび31P-NMRにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 2.15-2.19(m, 2H), 4.08-4.15 (m, 2H), 4.34 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 6.82 (d,
J = 8.8 Hz, 2H), 7.21-7.33 (m, 7H), 7.52 (dd, J =
7.6, 4.4 Hz, 1H), 7.63-7.87 (m, 15H), 7.97-8.09 (m, 5H), 8.16-8.19 (m, 2H),
8.71 (dd, J = 9.2 Hz, 4.4 Hz, 1H). 31P NMR
(CDCl3, 162 MHz) δ -13.76, 26.07. 13C NMR (CDCl3,
100 Hz) δ 19.96 (d, JCP = 51.9 Hz), 23.15 (s), 66.75 (d, JCP = 16.0 Hz),
115.22, 115.31, 118.05, 118.90, 124.76, 124.84, 124.89, 125.06, 125.50, 125.58,
125.70, 125.77, 126.26, 127.68, 127.74, 127.81, 127.90, 127.933, 128.25,
128.78, 128.85, 130.62, 130.74, 131.01, 131.06, 131.54, 131.91, 132.20, 132.34,
133.91, 134.01, 134.09, 134.18, 135.22, 135.25, 136.09, 136.30, 137.48, 137.58,
159.29. IR 687.78, 1110.48, 1241.25, 1434.81, 1588.94. ESI-MS for C49H39OP2 +:
計算値:705; 測定値: 705
 実施例2はMitoPeDPPの合成方法である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
ペリレンブロミドの合成
 ペリレン3.0g(11mmol)をジクロロメタン700mLに溶かし5分間攪拌した。そこへ、N-ブロモサクシンイミド2.11g(12mmol,
1.1eq)を室温でゆっくり滴下し一晩攪拌した。反応溶液を展開溶媒ジクロロメタン:ヘキサン=1:1に調整したシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、N-ブロモサクシンイミドを取り除いた。溶媒を濃縮後、黄色の結晶(収率90%)を得た。化合物の同定はH-NMR、ESI-MSより行った。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 7.46-7.51
(m, 2H), 7.59 (t, J = 4.4 Hz,1H), 7.68-7.72 (m, 2H), 7.78-7.80 (m, 1H),
7.98-8.04 (m, 1H), 8.09-8.14 (m, 1H), 8.17-8.28 (m, 3H). ESI-MS (C20H11Br):計算値:330.00;
測定値: 331.9.
アニシルフェニルホスフィンオキシドの合成
 ヘキサン30mlにピリジン3.2mL(40mmol, 2eq)を加え、そこへジクロロフェニルホスフィン2.7mL(20mmol)をゆっくり滴下した。そこへジエチルアミン4.18mL(40mmol, 2eq)をゆっくり滴下後、3時間還流した。溶媒を除去後、淡黄色の油状物質(収率60%)を得た。
得られた粗生成物を35mLのテトラヒドロフランに溶かし、-15℃のアイスバスにて15分間撹拌した。そこへアニシルマグネシウムブロミド24mL(12mmol,1eq)をゆっくり滴下し一晩撹拌した。2N塩酸水溶液15mLを室温にて滴下した。エーテルにより抽出し(30mL×3回)、硫酸ナトリウムにより乾燥後、溶媒を除去して粗アニシルフェニルホスフィンオキシド(収率40%)を得た。
4-メトキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンオキシド(3)の合成
 ペリレンブロミド780mg(2.35mmol)とアニシルフェニルホスフィンオキシド1.1g(4.7mmol, 2eq)と酢酸パラジウム53mg(0.24mmol, 0.05eq)と1.3-ビス(ジフェニルホスフィノ)プロパン99mg(0.24mmol,
0.05eq)の混合物に17mLのDMSOに溶かしたジイソプロピルエチルアミン1.2g(9.4
mmol, 4eq)を滴下した。反応温度を150℃に上げ一晩撹拌する。TLCにて反応を確認後、酢酸エチル50mLを加えて薄め、H2O、飽和NaCl水溶液にて3回洗浄した(30ml×3回)。有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥し、溶媒を除去後、淡黄色の結晶を得た。精製はシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン:エチルアセテート=1:1)により行った(収率70%)。化合物の同定はH-NMR、31P-NMR、13C-NMR、IR、ESI-MS、UVより行なった。 
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 3.86 (s,
3H), 6.99 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 7.24-7.29 (m, 1H), 7.30-8.06 (m, 12H), 8.08 (d,
J = 2 Hz, 1H), 8.20-8.24 (m, 3H), 8.49 (d, J = 4.2 Hz, 1H). 31P NMR
(CDCl3, 162 MHz) δ
33.60. 13C NMR (CDCl3, 100 Hz) δ 55.59, 114.43, 114.56, 118.52,
118.67, 121.03, 121.19, 121.84, 124.32, 126.81, 127.09, 127.77, 127.83, 127.94,
128.44, 128.57, 128.67, 128.79, 128.91, 129.57, 130.37, 131.13, 131.83, 132.11,
132.29, 132.38, 133.78, 134.20, 134.32, 134.50, 134.61, 134.68, 135.61, 135.97,
162.78. IR 758.72, 809.70, 117.79, 1170.46, 1254.81, 1501.34, 1595.92, 3048.39.
ESI-MS (C33H23O2P+H):計算値:483.15;
測定値: 483.11;UV 427 nm, 453 nm.
4-ヒドロキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンオキシド(4)の合成
 4-メトキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンオキシド(400mg,
0.83mmol)をジクロロメタン30mLに溶かし、-78℃にてボラントリブロミド(2.5mL,
2.5mmol, 4eq)を滴下する。18時間撹拌後、10mLのH2Oを加えて反応を終了した。そのとき生じた赤褐色の沈殿物を吸引ろ過した。得られた結晶を一晩ピストル乾燥して赤褐色の結晶(収率77%)を得た。得られた結晶は1H-NMR、31P-NMR、IR、ESI-MS、UVにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 6.92 (d, J
= 3.6 Hz, 2H), 7.21 (dd, J = 3.8, 15 Hz, 1H),
7.41-7.63 (m, 10H), 7.84-7.90 (m, 2H), 8.35-8.42 (d, J = 2 Hz, 5H), 10.24 (br, 1H). 31P NMR (CDCl3, 162 MHz) δ 30.59. IR 757.64, 805.41, 118.60,
114.94, 1292.26, 1437.65, 1505.70, 1579.50, 3050.38. ESI-MS (C32H21O2P+K):計算値:509.09;
測定値:: 509.12;UV 427 nm, 453 nm.
4-ヒドロキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンボラン(5)の合成
 4-ヒドロキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンオキシド(293mg,
0.63mmol)にトルエン20mLに溶かし、トリエチルアミン(900μL, 6.26mmol, 8eq)を滴下し、氷溶中にて撹拌する。トリクロロシラン(780μL, 7.8mmol, 12eq)を10min滴下し110℃で還流する。18時間撹拌後、氷溶中にてボランTHFコンプレツクス(1.23mL, 1.2mmol, 2eq)を10分間滴下する。15分間撹拌後、10mLのメタノールを加えて反応を終了させた。黄色の沈殿物を吸引ろ過し、ろ液をエバポレーターにて濃縮した。得られた赤褐色の結晶を展開溶媒(ジクロロメタン)にてカラムクロマトグラフィーを行って淡黄色の結晶(収率83%)を得た。得られた結晶は1H-NMR、31P-NMR、13C-NMR、IR、UVにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ 6.92 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 7.20-7.23 (m, 1H), 7.37 (t, J = 8.2 Hz, 1H),
7.45-7.76 (m, 11H), 7.99-8.07 (m, 2H), 8.16-8.20 (m, 3H). 31P NMR
(CDCl3, 162 MHz) δ 20.12 (br). 13C
NMR (CDCl3, 100 Hz) δ116.45, 116.56, 116.63, 119.15, 119.27, 119.76,
120.90, 121.09, 121.63, 125.05, 125.60, 126.79, 126.98, 127.12, 127.80, 127.87,
128.40, 129.10, 129.20, 129.33, 129.41, 129.48, 129.53, 130.11, 130.25, 130.95,
131.44, 131.93, 132.84, 132.94, 133.44, 133.54, 134.56, 134.93, 134.99, 135.09,
135.24, 135.35, 135.63, 135.74, 158.94.IR 810.14, 1100.33, 1170.57, 1253.73,
1498.76, 1595.37, 2927.87, 3050.72;UV
428 nm, 454 nm.
MitoPeDPPB(6)の合成
 ナトリウムハイドライド38.4mg(1.1eq,
0.58mmol)をグローブボックス内でヘキサン(1mL)を用いて3回洗浄した。残ったヘキサンをオイルポンプを用いて乾燥後、DMF
2mLを加え室温で10分間撹拌した。その混合溶液に4-ヒドロキシフェニルフェニルペリレニルホスフィンボラン245mg(0.52mmol)のDMF(2mL)溶液をゆっくり滴下し、2.5時間室温で撹拌した。反応溶液は次第に深赤色の混濁液になり、同時に気泡が発生した。この反応溶液をアイスバスにより-15℃に冷やし、ヨードプロピルホスホニウムヨーダイド290mg(1eq, 0.52mmol)のDMF(1mL)溶液をゆっくり滴下した。徐々に室温に戻し、一晩撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の進行を確認後、飽和塩化アンモニウム水溶液を5mLゆっくり滴下した。ジクロロメタンにより抽出後、硫酸ナトリウムにより乾燥した。溶媒を除去し深赤色のオイルを得た。精製はシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン:エチルアセテート=3:7)により行なった(収率41%)。得られた化合物の同定はH-NMR、31P-NMR、IR、ESI-MS、元素分析より行なった。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ
2.22 (m, 2H), 4.04 (m, 2H), 4.41 (m, 2H), 6.95 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 7.35 (t, J
= 4 Hz, 1H), 7.39-7.59 (m, 8H), 7.65-7.87 (m, 22H), 8.01 (d, J = 4.2 Hz, 1H),
8.10 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 3.6 Hz, 3H). 13C NMR (CDCl3,
100 Hz) δ20.24,Jcp = 43.722.98, 67.01 (d, Jcp = 8.4), 115.50, 115.62, 117.60, 118.46, 119.27, 119.38,
119.71, 120.34, 120.90, 121.11, 121.71, 124.98, 125.54, 126.86, 126.99, 127.13,
127.71, 127.79, 128.38, 128.44, 129.14, 129.24, 129.35, 129.48, 129.95, 130.22,
130.77, 130.90, 131.54, 131.96, 133.40, 133.50, 133.86, 133.97, 134.54, 134.96,
135.07, 135.24, 135.38, 135.49, 160.97. 31P NMR (CDCl3,
162 MHz) δ 19.94 (br),
25.91. IR 687.41, 737.06, 1105.67, 1253.35, 1435.94, 1498.13, 1590.88, 2380.33.
ESI-MS for C53H41O2P2:
計算値:755.26; 測定値: 755.29;元素分析(C53H44BIOP2・2H2O):計算値:C, 68.26. H, 5.19; 測定値:C, 68.21. H, 5.07.
MitoPeDPP(7)の合成
 MitoPeDPPB(60mg,
0.067mmol)をクロロホルム1mLに溶かし、ジエチルアミン(52μL,
0.52mmol, 8eq)を滴下する。ウォーターバスにて40℃で一晩撹拌した。溶媒をエバポレーターにて濃縮した。精製は展開溶媒(ジクロロメタン:メタノール=20:1)にてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行った。溶媒を濃縮し、赤褐色の結晶(収率62%)を得た。化合物の同定は1H-NMR、31P-NMR、13C-NMR、IR、ESI-MS、UVより行った。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ2.17 (m, 2H),
3.92-3.99 (m, 2H), 4.31 (m, 2H), 6.84 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 6.93-7.00 (m, 1H),
7.11-7.53 (m, 12H), 7.63-7.83 (m, 21H), 8.02 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 8.10 (d, J =
3.8 Hz, 1H), 8.14-8.23 (m, 3H). 31P NMR (CDCl3, 162 MHz)
δ-13.85, 25.78 13C NMR (CDCl3, 100 Hz) δ20.20Jcp = 26.3
Hz 23.08, 66.84, 115.31, 115.39, 117.74, 118.60, 120.72, 120.83, 126.08,
126.35, 126.87, 127.04, 128.20, 128.47, 128.65, 128.86, 128.93, 129.18, 130.71,
130.84, 131.06, 131.35, 131.86, 132.45, 132.80, 133.88, 133.98, 134.21, 134.77,
135.41, 136.15, 136.36, 136.68, 159.48 IR 686.99, 810.59, 1109.21, 1239.95,
1434.91, 1494.37, 1588.13, 3048.96. ESI-MS (C53H41O2P2):計算値: 755.26; 測定値:755.36;UV 433 nm,
463 nm
ヨードプロパンジフェニルピレニルホスホニウムヨーダイドの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
 ブロモピレン(5mmol,
1.41g)を入れTHF(25ml)に溶かした。これを-78℃に冷やしておき、ここにn-BuLi(5.5mmol, 2.08ml, 2.64M, 1.1eq)をゆっくり滴下し2時間攪拌し、ジフェニルホスフィンクロリド(5mmol,
0.92ml, 1eq)をゆっくり滴下し、一晩攪拌した。飽和NH4Cl(10mL)を加え、THF層と水層を分け、水層をジクロロメタン(50mL×3)で抽出し、有機層とTHF層を混ぜ、硫酸ナトリウムを用いて乾燥させた。エバポレーターを用いて濃縮した。精製はシリカゲルカラムクロマトグラフィー(展開溶媒、ジクロロメタン:ヘキサン=1:3)によって行った。これより白黄色の結晶であるジフェニルピレニルホスフィン(DPPP)を得た(収率39%)。この結晶の同定は1H-NMR、31P-NMRにて行った。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.33-7.37 (m, 10H), 7.53-7.56 (dd, J =
7.8 Hz, 1H), 7.98-8.10 (m, 5H), 8.17-8.20 (m, 2H), 8.75-8.78 (dd, J = 7.9Hz, 1H) 31P NMR (CDCl3,
162 MHz) δ-12.84
 ジヨードプロパン(0.6mmol,
175mg)をトルエン(1mL)に溶かし還留させ、そこに得られたジピレニルホスフィン(0.6mmol,
232mg, 1eq)をトルエン(1mL)に溶かしたものをゆっくり滴下した。一晩攪拌させ、析出した黄色い沈殿物を吸引ろ過によってとりだし、熱トルエンで3回洗浄した。この結晶を乾燥させヨードプロパンジフェニルピレニルホスホニウムヨーダイドを得た(収率63%)。1H-NMR、31P-NMR、13C-NMR、ESI-MS、IR、元素分析にて同定した。
m. p. 157-158℃ 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ2.14-2.16
(m, 2H), 3.38-3.41 (t, J = 3.2 Hz, 2H), 3.82-3.83 (m, 2H), 7.77-7.79 (m, 4H),
7.89-7.97 (m, 7H), 8.21-8.33 (m, 3H), 8.43-8.45 (d, J = 7.6 Mz,
1H), 8.47-8.53 (m, 4H) 31P NMR (CD3OD, 162 MHz) δ24.06. 13C
NMR (DMSO-d6, 100MHz) δ6.40-6.61,
24.79-25.30, 28.06, 108.40, 109.25, 119.44, 120.28, 123.51, 124.34, 126.12, 126.25,
127.81, 128.44, 128.79, 128.91, 130.02, 131.15, 131.28, 131.54, 132.48, 13367,
133.93, 134.12, 134.22, 135.70, 136.70. IR 481.80, 2878.23, 3039.23, 3398.25.
ESI-MS (C31H25IP):計算値:555.41;
測定値:555.03. 元素分析(C31H25IP):計算値:C, 54.57 H, 3.69、測定値:C,
54.50 H, 4.06.
[ジフェニル-4-フェノキシホスフィノ]ジフェニルピレニルホスホニウムヨーダイド(PyMitoTP)の合成
 まず、ジフェニル-4-メトキシフェニルホスフィンを下記のように合成した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
ジフェニルホスフィンクロリド(5mmol ,0.92ml)をTHF(25ml)に溶かし、0℃に冷やした。ここに4-メトキシフェニルマグネシウムブロミド(6.5mmol,
19ml, 1.3eq)を20分間滴下した。3時間攪拌させ室温に戻し、さらに5時間攪拌後飽和NH4Cl(20ml)で反応を終了させた。無機塩を吸引ろ過で除去し、ろ液をジクロロメタン(40ml×3)で抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレーター、オイルポンプを用いて濃縮しジフェニル-4-メトキシフェニルホスフィンを得た。
 次に、得られたジフェニル-4-メトキシフェニルホスフィンをMitoDPPPの合成と同様に処理して、下記ホスフィンボラン(収率20%)を得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
1H
NMR (CDCl3, 400 MHz)δ
2.23-2.24 (d, J = 5.2, 2H), 4.29-4.30 (dd, 3.6, 2H),
4.40-4.42 (m, 2H), 6.88-6.90 (d, J = 8.8, 2H), 7.39-7.55 (m, 12H), 7.65-7.70
(m, 4H), 7.77-7.80 (m, 2H), 7.93-7.98 (m, 5H), 8.15-8.23 (m, 3H), 8.34-8.43 (m,
5H) 31P NMR (CDCl3, 162 MHz) δ 19.98, 25.68. ESI-MS (C49H42BIOP2):計算値:706.52 測定値:706.15.
 上で得たホスフィンボランから下記のようにして[ジフェニル-4-フェノキシホスフィノ]ジフェニルピレニルホスホニウム ヨーダイド(PyMitoTP)を合成した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
 ホスフィンボラン(20mg,
0.02mmol)をCHCl3(2ml)に溶か、CHCl3(1ml)に溶かしたDABCO(2mg, 0.02mmol, 1eq)を滴下した。40℃で一晩攪拌させた。溶媒をエバポレーター、オイルポンプで濃縮した。精製はカラムクロマトグラフィー(展開溶媒:ジクロロメタン:メタノール=40:1)にて行った(収率10%)。同定は1H-NMR、31P-NMRにて同定した。
1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ2.22 (s, 2H), 4.28-4.29 (d, J = 3.6, 2H), 4.32-4.33 (d, J = 5.2, 2H),
6.80-6.82 (d, J = 8.4, 2H), 7.18-7.23 (t, J = 10, 2H), 7.30-7.60 (m, 10H),
7.67-7.70 (m, 4H), 7.76-7.78 (m, 2H), 7.94-7.99 (m, 5H), 8.15-8.23 (m, 3H),
8.34-8.43 (m, 5H) 31P NMR (CDCl3, 162 MHz) δ -5.96, 25.71.
 実施例1で得られた[3-(4-フェノキシフェニルホスフィノピレニルホスフィノ)ブロピル]トリフェニルホスホニウムヨ-ダイド[Ia](MitoDPPP)について、過酸化水素による酸化反応の蛍光強度の経時変化について調べた。
 MitoDPPP(16μM)のジメチルスルホキシド溶液に10mM H2O2を滴下して、蛍光波長380nmの蛍光強度を10分間測定した。その結果を図1に示す。図1に示すように、MitoDPPPが徐々に酸化されてその蛍光強度が増加していることが分かる。
 MitoDPPP[Ia]からMitoDPPP[XIa]への酸化反応スキームを下記に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
 MitoDPPPのHepG2細胞への導入について調べた。MitoDPPP(16μM)の20% ジメチルスルホキシド溶液を調製し、HepG2細胞に10分間ロードして細胞を染色した。PBSで洗浄後、蛍光顕微鏡を用いて観測した結果を図2に示す。図に示すように、ミトコンドリア蛍光染色剤 Mito Tracker Green FMと比較した結果、MitoDPPPがミトコンドリアに局在していることが分かった。図2(a)は、ミトコンドリア蛍光染色剤Mito Tracker Green FMで染色した図であって、右側は左側の丸印の部分の拡大図である。図2(b)は、MitoDPPPで染色した図であって、右側は左側の丸印の部分の拡大図である。
 MitoDPPPのHep G2細胞への導入およびtert-ブトキシヒドロパーオキサイド(tBHP)刺激による酸化について調べた。MitoDPPP(16μM)の0.1%ジメチルスルホキシド溶液を調製し、Hep G2細胞に2分間ロードして細胞を染色した。PBSで洗浄後、蛍光顕微鏡を用いて観測した。次に、tert-ブトキシヒドロパーオキサイド(tBHP)を添加して10分後に蛍光顕微鏡で観察した。その結果を図3で示す。図中、(a)はtBHP導入前のMitoDPPP染色細胞、(b)はtBHP導入後のMitoDPPP染色細胞、(c)は(a)の輝度分布、(d)は(b)の輝度分布を示している。これらの結果から、Hep G2細胞中のミトコンドリアに局在する MitoDPPPがtBHPにより酸化を受けて(a)の輝度よりも(b)の輝度が増加していることが分かった。
 過酸化水素およびtBHPによるHepG2細胞内MitoDPPPの酸化の比較を調べた。MitoDPPP(16μM)の0.1%ジメチルスルホキシド溶液を調製し、Hep G2細胞に10分間ロードし、PBSで洗浄後、過酸化水素を添加してマイクロプレートリーダーにより蛍光強度の増加を追跡した。その結果を図4に示した。その結果、水溶液中での MitoDPPPの酸化は、過酸化水素でもtBHPでもいずれを用いても速やかに酸化が進行するが、それに対してHep G2細胞に導入したMitoDPPPは過酸化水素では酸化されないことが分かった。
 MitoDPPP(1.6μM)、アスコルビン酸およびアスコルビン酸誘導体(25μM)、AAPH(25μM)が入った1%DMSO含有Dulbecco’sリン酸緩衝溶液を調製し、37℃に加温し、蛍光分光計にて蛍光強度の変化を追跡した。
次に、HepG2細胞を表面に培養したガラスプレートを石英セルの中心に斜めに固定し、DPBS
3mLを加え、自家蛍光(励起波長:281nm、蛍光波長:340nm付近)を測定した。自家蛍光を測定したプレートをシャーレに移し、PBS
1mLで2回洗浄し、MitoDPPP(16μM)溶液2mLをシャーレに注ぎ、37℃で20分間インキュベートした。その後、溶液を取り除きDPBS 1mLで2回洗浄した。次いで、アスコルビン酸(25μM)の溶液、6-O-アセチルアスコルビン酸(25μM)の溶液、6-O-ヘキサノイルアスコルビン酸(25μM)の溶液、5,6-O-イソプロピリデン-L-asukorubin酸(25μM)の溶液をそれぞれ2mL調整し、シャーレに注ぎ37℃で30分間インキュベートした。ロード後、溶液を取り除きPBS 1mLで2回洗浄した。石英セルに37℃に加温したDPBS 1980μLを注ぎ、マグネットを用いて石英セルの中心にプレートを立て蛍光強度(励起波長:353nm、蛍光波長:380nm)を測定した。AAPH(25μM)をDPBS 1mLに溶かし冷やしておいた溶液20μL(最終濃度250μM)を加え、37℃に加温し蛍光分光計にて蛍光強度の増加を追跡した。その結果を図5および図6に示す。
抗酸化剤の細胞中での抗酸化力の比較
 まず、ラジカル開始剤であるAAPHを用いてMitoDPPPを酸化する。その反応中にアスコルビン酸およびその誘導体を加えると、蛍光強度の増大が抑制される。この抑制の度合いがアスコルビン酸およびその誘導体の抗酸化力となる。図5は水溶液での蛍光強度の経時変化を示す。
次に、アスコルビン酸および合成した脂溶性誘導体のHepG2細胞中での抗酸化作用を比較した。ガラスプレート上にHepG2細胞を培養し、そのプレート上の細胞自身が持つ自家蛍光を測定し、次にMitoDPPPとアスコルビン酸誘導体を導入、次にAAPHを導入することで反応を開始する。測定した蛍光強度を自家蛍光で割ることにより蛍光強度の増大を規格化した。図6は、アスコルビン酸存在下における細胞中でのMitoDPPPの酸化による蛍光強度の経時変化を示す。
 この発明に係るホスフィン化合物は、特に酸化ストレスを受けやすいミトコンドリアに局在化する過酸化物を捕捉することができるとともに、ミトコンドリアの膜機能に障害を惹起し、アトポーシスを引き起こす酸化ストレスの程度を蛍光プローブにより視覚化することができることから、ミトコンドリアの過酸化物捕捉剤として有用である。

Claims (9)

  1.  一般式[I]:
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     (式中、ZおよびZはいずれも環式基を意味し、
         Arはアリレン基を意味し、
         Rは脂肪族炭化水素基を意味し、
         Yはリン(P)、窒素(N)またはビスマス(Bi)を意味し、
         R、RおよびRはいずれも環式基を意味する)
    で表されるホスフィン化合物。
  2.  請求項1に記載のホスフィン化合物であって、ZおよびZで表される環式基がいずれも、非置換または置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基であり;
     Arで表されるアリレン基は、非置換または置換の単環式炭化水素基または2環式炭化水素基であり;
     Rで表される脂肪族炭化水素基は、炭素原子数が1~8個の直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基であり、
     R、RおよびRで表される環式基がそれぞれ、同一かまたは異なっていてもよく、非置換または置換の単環式炭化水素基もしくは多環式炭化水素基または複素単環式基もしくは複素多環式基を意味する)で表されるカチオン基であり、
     ただし、ZおよびZのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、および/またはR、RおよびRのいずれか一方の環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基であり、他方の環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基である、
    ことを特徴とするホスフィン化合物。
  3.  請求項2に記載のホスフィン化合物であって、ZおよびZのいずれか一つの環式基が多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他方の単環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRの全ての環式基は単環式炭化水素基または複素単環式基である、またはZおよびZの全ての環式基が単環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であり、R、RおよびRのいずれか一つの環式基は多環式炭化水素基または複素多環式基であり、他の環式基が単環式炭化水素基または複素単環式基であることを特徴とするホスフィン化合物。
  4.  請求項2または3に記載のホスフィン化合物であって、
     Z、Z、R、RおよびRでいずれも表される環式基が、フェニル基等の単環式炭化水素基;インダニル基、インデニル基、ペンタレニル基、アズレニル基、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基等の2環式炭化水素基;アントラセニル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基等の3環式炭化水素基;ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基などの4環式炭化水素基;ペリレニル基、ピセニル基、ペンタセニル基等の5環式炭化水素基;ナフトビレニル基等の6環式炭化水素基;コロネニル基等の7環式炭化水素基などであり;複素環式基が、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピペリジル基、トリアジニル基等のN含有複素単環式基、フラニル基、ピラニル基等のO含有複素単環式基、チオフェニル基等のS含有複素多環式基、オキサゾリル基、チアゾリル基、モルホリニル基等のN/O/S含有複素単環式基などの複素単環式基;インドリル基、インドリニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、プリニル基等のN含有複素2環式基、アクリジニル基、カルバゾリル基、フェナントリジニル基、フェナジニル基、ベンゾイソキノリニル基等のN含有複素3環式基などのN含有複素多環式基、ベンゾフラニル基、クロマニル基、クロメニル基、イソクロマニル基等のO含有複素2環式基、キサンテニル基等のO含有複素3環式基などのO含有複素多環式基;ジチアナフチル基等のS含有複素3環式基、チアントレニル基等のS含有複素3環式基等のS含有複素多環式基;ピリドオキサゾリル基、チエノフラニル基、フェノキサジニル基、フェノチアジニル基、ピラゾロオキサゾリル基等のN/O/S含有複素多環式基などの複素多環式基であり;置換基はメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基等の炭素原子数が1~6個の低級脂肪族炭化水素基であり;
     Arで表されるアリレン基がフェニレン基、ナフタレン基であり;
     Rで表される直鎖状または分岐状の2価脂肪族炭化水素基がメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基またはメチルブチレン基である、
    ことを特徴とするホスフィン化合物。
  5. ハライド化合物[II]と、ジハロホスフィン化合物[III]と、メトキシアリール金属マグネシウムハライド[IV]を反応させて、メトキシアリールホスフィン化合物[V]を得る工程1aと、上記工程1aで得られたメトキシアリールホスフィン化合物[V]を酸化剤と反応させてメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を得る工程2と、上記工程2で得られたメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を脱メチル化試薬で脱メチル化してヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を得る工程3と、上記工程3で得られたヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]をボラン化合物と反応させてヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を得る工程4と、上記工程4で得られたジ環式基置換ヒドロキシメトキシアリールホスフィンボラン化合物[VII]をハライド化合物[IX]と反応させてホスフィンボラン化合物[X]を得る工程5と、上記工程5で得られたホスフィンボラン化合物[X]の保護基を脱保護して一般式[I]で表されるホスフィン化合物を得る工程6とからなる方法;または
     ハライド化合物[II]をメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[XI]と反応させて、一般式で表されるジ環式基置換メトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を得る工程1bと、上記工程1bで得られたメトキシアリールホスフィンオキシド化合物[VI]を脱メチル化試薬で脱メチル化してヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]を得る工程3と、上記工程3で得られたヒドロキシアリールホスフィンオキシド化合物[VII]をボラン化合物と反応させてヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を得る工程4と、上記工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]をハライド化合物[IX]と反応させてホスフィンボラン化合物[X]を得る工程5と、上記工程5で得られたホスフィンボラン化合物[X]の保護基を脱保護して一般式[I]で表されるホスフィン化合物を得る工程6と、からなる方法;または
     ハライド化合物[XII]と、ハライド化合物[XIII]を反応させて化合物[XIV]を得る工程7と、上記工程7で得られた上記化合物[XIV]と、ジハロ化合物[XV]を反応させてハロ化合物[XVI]を得る工程8と、上記工程8で得られた上記ハロ化合物[XVI]と、上記工程4で得られたヒドロキシアリールホスフィンボラン化合物[VIII]を置換アルキルハライド[XVI]と反応させてホスフィンボラン化合物[XVII] を得る工程で9と、上記工程9で得られたホスフィンボラン化合物[VI]を脱保護することによってホスフィン化合物[XVIII]または[I]を得る工程10と、からなる方法;
    によってホスフィン化合物[I]または[XVIII]をえることを特徴とするホスフィン化合物の製造方法。
  6.  一般式[I]で表されるホスフィン化合物を含む過酸化物捕捉剤。
  7.  一般式[I]で表されるホスフィン化合物を用いて過酸化物を捕捉することを特徴とする過酸化物捕捉方法。
  8.  請求項6に記載の過酸化捕捉方法であって、前記過酸化物が、過酸化脂質、1重項酸素などの活性酸素種などであることを特徴とする過酸化物捕捉方法。
  9. 一般式 [I’]:
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
     (式中、Z1’およびZ’は、上記Z1、およびZ2とそれぞれ同じ意味を有し、ただし、R、RおよびRの全てが単環式炭化水素基である場合は、そのいずれか一方は、単環式炭化水素基以外の環式基であり、またZ1’およびZ2’がいずれも単環式炭化水素基である場合は、R、RおよびRの1つは、単環式炭化水素基以外の環式基を意味する)
    で表されるホスフィニル化合物。
     
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6887688B2 (ja) * 2019-02-07 2021-06-16 株式会社高純度化学研究所 蒸発原料用容器、及びその蒸発原料用容器を用いた固体気化供給システム
JP6901153B2 (ja) 2019-02-07 2021-07-14 株式会社高純度化学研究所 薄膜形成用金属ハロゲン化合物の固体気化供給システム。

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5202493A (en) * 1991-04-26 1993-04-13 E. I. Du Pont De Nemours And Company Chiral tridentate bis(phospholane) ligands
CN1096315A (zh) * 1992-11-24 1994-12-14 联邦科学及工业研究组织 除氧组合物
JP3830180B2 (ja) * 1995-07-27 2006-10-04 高砂香料工業株式会社 新規ホスフィン−ホスフィナイト化合物およびそれを用いた4−[(r)−1’−ホルミルエチル]アゼチジン−2−オン誘導体の製造方法
US20030216599A1 (en) * 2000-05-31 2003-11-20 Hillhouse John Henry Synthesis of diphosphinoarenes
EP1341799B1 (en) * 2000-12-13 2005-03-16 Warner-Lambert Company LLC P-chirale bisphospholane ligands, their transition metal complexes
JP4005800B2 (ja) * 2001-12-10 2007-11-14 高砂香料工業株式会社 新規不斉ホスフィン配位子
JP2004210672A (ja) * 2002-12-27 2004-07-29 Nippon Chem Ind Co Ltd ビスホスホニウム塩化合物及びその製造方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BAN, S. ET AL.: "Novel mitochondria-localizing TEMPO derivative for measurement of cellular oxidative stress in mitochondria.", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 17, 2007, pages 2055 - 2058 *
OKIMOTO, Y. ET AL.: "A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes", FEBS LETTERS, vol. 474, 2000, pages 137 - 140 *

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