WO2009113404A1 - レジオネラ属菌増殖抑制剤、入浴剤、及び洗浄剤 - Google Patents

レジオネラ属菌増殖抑制剤、入浴剤、及び洗浄剤 Download PDF

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崇輝 後藤
福本　修一
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Definitions

  • the present invention relates to a Legionella growth inhibitor, and a bathing agent and a cleaning agent containing the same.
  • Legionella spp. are aerobic gram-negative bacilli, and have been confirmed to grow easily in, for example, bathing equipment and cooling towers. Legionella infections are caused by inhalation of aerosols containing Legionella spp. Legionella infection includes Legionella pneumonia and Pontiac fever, and Legionella pneumonia is known to be an infection with a high mortality rate. Patent Document 1 describes that an extract component from straw suppresses the growth of Legionella spp.
  • Patent Document 2 it is known that an extract from a giant grass (major tree) belonging to the genus Euphorbiaceae has an antibacterial action. However, the action of the grasshopper extract against Legionella spp. Has not been elucidated so far and is not described in Patent Document 2. JP 2006-45077 A JP 2007-45754 A
  • the present invention is based on the finding that, as a result of diligent research by the present inventors, the extract of the grasshopper has an action of suppressing the growth of Legionella spp., And the object thereof is a novel Legionella spp.
  • An object of the present invention is to provide an inhibitor, and a bath and a cleaning agent containing the same.
  • a Legionella growth inhibitor containing, as an active ingredient, a plantain extract extracted from a plantain using an extraction solvent containing at least an organic solvent.
  • a Legionella growth inhibitor containing at least one selected from nymphaeol-A, nymphaeol-B and nymphaeol-C as an active ingredient.
  • the bath agent containing either the Legionella genus microbe growth inhibitor of the said 1st and 2nd aspect is provided.
  • the cleaning agent containing either the Legionella genus microbe growth inhibitor of the said 1st and 2nd aspect is provided.
  • FIG. 1 The chromatogram which shows the result analyzed by the high performance liquid chromatography about the grasshopper extract which concerns on Example 1.
  • FIG. 2 The chromatogram which shows the result analyzed by the high performance liquid chromatography about the grasshopper extract which concerns on Example 2.
  • FIG. 1 The chromatogram which shows the result analyzed by the high performance liquid chromatography about the grasshopper extract which concerns on Example 2.
  • the Legionella spp. Growth inhibitor of the present embodiment contains, as an active ingredient, a grasshopper extract extracted from a grasshopper using an extraction solvent containing at least an organic solvent.
  • the grasshopper also called Macaranga ius, is an evergreen broad-leaved tree of both sexes belonging to the genus Euphoridae. Weow grows in Okinawa (southern Japan), Taiwan, southern China, the Malay Peninsula, Southeast Asia such as the Philippines, Malaysia, Indonesia, and Thailand, and northern Australia. The grasshopper grows very fast among trees and can grow in degraded areas.
  • any organ of the grasshopper or components of each organ can be used.
  • the extraction raw material a single organ of a grasshopper or a component thereof may be used, or a mixture of two or more organs of a grasshopper or a component thereof may be used.
  • Extracted raw materials are in the state of being collected, in the state of being crushed, crushed or ground after collection, in the state of being crushed, crushed or ground after collection and drying, or in the state of being crushed, ground or ground after collection and dried Then, it is used for the extraction operation.
  • the extraction raw material is crushed.
  • the extraction raw material can be crushed using, for example, a cutter, a cutter, or a crusher.
  • the extraction raw material can be pulverized using, for example, a mill, a crusher, or a grinder.
  • the extraction raw material can be ground using, for example, a kneader or a mortar.
  • the extraction solvent used when extracting the grass extract from the extraction raw material may be a mixed solvent of water and an organic solvent, for example, lower alcohol, dimethyl sulfoxide, acetonitrile, acetone, ethyl acetate, hexane, glycerin, An organic solvent such as propylene glycol may be used.
  • organic solvent such as propylene glycol
  • examples of lower alcohol that can be used include methanol, ethanol, propanol, isopropanol, and butanol.
  • the organic solvent one kind of solvent may be used alone, or a plurality of kinds of solvents may be mixed and used.
  • the content of the organic solvent in the mixed solvent is preferably 50% by volume or more, more preferably 80% by volume or more.
  • the active ingredient contained in the grass can be extracted particularly efficiently.
  • the organic solvent is preferably a lower alcohol, and more preferably ethanol.
  • the extraction solvent for example, organic salts, inorganic salts, buffers, emulsifiers, and dextrins may be dissolved.
  • Extraction is performed by immersing the extraction raw material in an extraction solvent for a predetermined time. In the extraction, for example, stirring, heating, or both may be performed as necessary to improve the extraction efficiency.
  • the extraction raw material is subjected to water extraction or hot water extraction in advance to remove the extracted water prior to extraction using the extraction solvent.
  • Raw materials may be prepared.
  • the components contained in the grass that are presumed to have the effect of inhibiting the growth of Legionella are nymphaeols. Nimpheols are water-insoluble. By boiling the grasshopper in, for example, hot water, impurities other than nymphaeol are efficiently transferred to the extraction water and removed.
  • ⁇ Oowagi extract extracted from the extracted raw material is subjected to solid-liquid separation to separate and remove the residue of the extracted raw material.
  • the solid-liquid separation method is performed by a known method such as filtration or centrifugation.
  • the liquid wean extract after the solid-liquid separation may be concentrated as necessary.
  • the solid solvent extract can be obtained by removing the extraction solvent contained in the liquid powder extract as necessary. Removal of the extraction solvent from the liquid plantain extract may be performed, for example, by heating under reduced pressure or by freeze-drying.
  • the moth extract extracted from the pupa using an extraction solvent containing at least an organic solvent includes nymphaeol-A (also known as 5,7,3 ′, 4′-tetrahydroxy-6-geranylflavanone (5,7,3 ', 4'-tetrahydroxy-6-geranylflavanone)), Nimpheol-B (also known as 5,7,3', 4'-tetrahydroxy-2'-geranylflavanone (5,7,3 ', 4'-tetrahydroxy-2) '-geranylflavanone)), and nymphaeol-C (also known as 5,7,3', 4'-tetrahydroxy-6- (3 '' ', 3' ''-dimethylallyl) -2'-geranylflavanone (5, 7,3 ', 4'-tetrahydroxy-6- (3' '', 3 '' '-dimethylallyl) -2'-geranylflavanone)
  • the main component of the grasshopper extract is at least one selected from nymphaeol-A, nymphaeol-B and nymphaeol-C, that is, nymphaeol, which is presumed to have an action of suppressing the growth of Legionella spp.
  • the plantain extract includes proporin A (also known as 5,7,3 ′, 4′-tetrahydroxy-2 ′-(7 ′′ -hydroxy-3 ′′, 7 ′′ -dimethyl-2 ′′ -octenyl)- Further contains flavanones (5,7,3 ', 4'-tetrahydroxy-2'-(7 ''-hydroxy-3 '', 7 ''-dimethyl-2 ''-octenyl) -flavanone) .
  • proporin A also known as 5,7,3 ′, 4′-tetrahydroxy-2 ′-(7 ′′ -hydroxy-3 ′′, 7 ′′ -dimethyl-2 ′′ -octenyl
  • flavanones 5,7,3 ', 4'-tetrahydroxy-2'-(7 ''-hydroxy-3 '', 7 ''-dimethyl-2 ''-octenyl) -flavanone
  • the extract extracted from flowers, seeds and fruits contains nymphaeol A, B, C and isonymfeol B in particularly high concentrations. ing.
  • the Legionella spp. Growth inhibitor may contain components other than the Euphorus extract as long as the effect of suppressing the growth of Legionella spp. Is not impaired. Examples of components other than the grass extract that can be contained in the Legionella spp. Growth inhibitor include excipients, bases, emulsifiers, stabilizers, and fragrances.
  • the Legionella growth inhibitor may be liquid or solid.
  • the dosage form of the Legionella growth inhibitor is not particularly limited, and may be, for example, a powder, a powder, a granule, a tablet, a capsule, a pill, or a liquid.
  • the Legionella spp. Growth inhibitor prepared in a solid state is used, for example, supported on a drainage or water circulation pipe or a filter provided in a bacteria removal facility.
  • a surfactant for example, a surfactant, a chelating agent, an emulsifier, or ethanol can be added to the Legionella growth inhibitor to improve the water dispersibility and water solubility of the grasshopper extract.
  • Legionella growth inhibitors are useful for preventing human infection by Legionella through inhibiting the growth of Legionella.
  • Legionella pneumophila is known as a representative species of Legionella, but dozens of species are currently identified, and all of these Legionella species can cause Legionella infections It is considered to be sexual.
  • Legionella growth inhibitor can be applied without particular limitation as long as Legionella growth is expected. Specifically, Legionella spp. Growth inhibitor is used by being added to water used in, for example, bathing facilities, hot water and hot water facilities, cooling towers, humidifiers, waterscape facilities, heat storage tanks, and the like. Infectious diseases caused by Legionella are particularly likely to occur in the elderly, newborns, and infants with low resistance. The Legionella spp. Growth inhibitor of this embodiment can be used with peace of mind in medical facilities or elderly welfare facilities because the active ingredient is a grasshopper extract derived from natural products.
  • the Legionella growth inhibitor can be used as, for example, a bath agent, a cleaning agent, a deodorant, or an aromatic.
  • the Legionella spp. Growth inhibitor is preferably used as a bathing agent or a cleaning agent because it can be easily applied to the above-mentioned places that can be a source of Legionella spp.
  • the Legionella growth inhibitor is such that the total concentration of nymphaeol A, nymphaeol B and nymphaeol C at a location that can be a source of Legionella genus, that is, the nymphaeol concentration is preferably 15 ppm or more, more preferably 20 ppm or more. It is desirable to be used. When the concentration of nymphaeol is 15 ppm or more, the effect of suppressing the growth of Legionella is exhibited particularly well.
  • the bathing agent of this embodiment contains the aforementioned Legionella spp. Growth inhibitor.
  • the dosage form of the bathing agent can be, for example, solid, liquid, or powder.
  • the bathing agent is selected from, for example, water-soluble inorganic salts, coloring agents, fragrances, humectants, pH adjusters, vitamins, herbal medicines, organic acids, enzymes At least one kind is contained.
  • water-soluble inorganic salts include carbonates such as sodium carbonate and sodium hydrogen carbonate, silicates such as sodium metasilicate, phosphates such as sodium orthophosphate, sulfates such as sodium sulfate and magnesium sulfate, sodium chloride And chlorides such as calcium chloride and ammonium chloride.
  • the bath agent of this embodiment is suitable for preventing human infection by Legionella spp.
  • the content of the grass extract in the bathing agent can be appropriately set according to the amount of the bathing agent mixed in the bath liquid.
  • the bathing agent is desirably used so that the total concentration of nymphaeol A, nymphaeol B and nymphaeol C in the bath solution, that is, the nymphaeol concentration is preferably 15 ppm or more, more preferably 20 ppm or more.
  • the concentration of nymphaeols in the bath is 15 ppm or more, the effect of suppressing the growth of Legionella is exhibited particularly well.
  • the cleaning agent of this embodiment contains the aforementioned Legionella spp. Growth inhibitor.
  • the dosage form of the cleaning agent can be, for example, solid, liquid, or powder.
  • the detergent contains at least one selected from, for example, surfactants, chelating agents, and pH adjusters.
  • the cleaning agent may further contain a chlorine-based or oxygen-based disinfectant as necessary.
  • the cleaning agent is used, for example, by periodically contacting a portion that can be a source of Legionella spp. For a predetermined time. More specifically, a portion that can be a source of Legionella spp. May be soaked using a diluted solution obtained by appropriately diluting the cleaning agent. Alternatively, the cleaning agent may be sprayed directly on a location that can be a source of Legionella spp. The content of the grass extract in the cleaning agent can be appropriately set according to the usage form of the cleaning agent. It is desirable that the detergent is used so that the concentration of nymphaeol at a location that can be a generation source of Legionella is preferably 15 ppm or more, more preferably 20 ppm or more. When the concentration of nymphaeol is 15 ppm or more, the effect of suppressing the growth of Legionella is exhibited particularly well.
  • the Legionella growth inhibitor of the present embodiment is a novel Legionella growth inhibitor containing an aerial extract as an active ingredient, and can be used to prevent infection by Legionella through inhibiting the growth of Legionella. Useful.
  • ⁇ Oowagi grows very fast among trees and can grow even in degraded areas, so it takes less time to cultivate.
  • the plant extract is highly safe because it is derived from a plant. Therefore, the Legionella growth inhibitor of this embodiment is excellent also in terms of supply stability, productivity, and safety of raw materials.
  • the embodiment may be modified as follows.
  • the Legionella growth inhibitor of the above-mentioned embodiment is at least one selected from nymphaeol-A, nymphaeol-B and nymphaeol-C derived from other than the grass extract, instead of or in addition to the grass extract May be contained as an active ingredient.
  • Nimpheol-A, Nimpheol-B and Nimpheol-C derived from other than the extract of canow can be obtained, for example, by chemical synthesis.
  • Legionella bacteria are present in the natural environment such as soil. Therefore, there is a possibility that Legionella spp. May grow on horticultural soil or fertilizer that is sealed and stored in a resin bag. Therefore, for the purpose of preventing human infection of Legionella spp. Through horticultural soil or fertilizer, the Legionella spp. Growth inhibitor of the above embodiment is added to the horticultural soil or fertilizer and used. May be. Since the active ingredient of Legionella spp. Growth inhibitor is a natural aerial extract, the growth of horticultural plants using horticultural soil or fertilizer added with Legionella spp. Almost no inhibition.
  • Example 1 Preparation of Euphorus extract 1>
  • the fresh leaves of weep collected and frozen in Okinawa were thawed and cut into small pieces with scissors.
  • 30 g of the cut fresh leaves were immersed in 100 ml of a mixed solvent consisting of 90 parts by volume of ethanol and 10 parts by volume of water for 2 weeks in a state of standing at room temperature. Then, this was filtered and the filtrate was collect
  • the weevil extract which is a solid powder contained in the weevil extract, was prepared by freeze-drying.
  • the total concentration of nymphaeol-A, nymphaeol-B, and nymphaeol-C contained in this powdery plantain extract, that is, the concentration of nymphaeols, is shown in FIG. As a result of calculating from the chromatogram, it was 50 mass%.
  • specimen liquid Preparation of specimen liquid
  • the above-mentioned powdery weeping extract was mixed with 99.5 V / V% ethanol to prepare a specimen liquid having a concentration of 100 ⁇ 10 3 ppm. Further, by diluting this sample solution with 99.5 V / V% ethanol, the concentration of the sample solution of the 2-fold dilution series, that is, the extract of the aerobasi is 50 ⁇ 10 3 ppm, 25 ⁇ 10 3 ppm, 12 Sample liquids of 0.5 ⁇ 10 3 ppm, 6.25 ⁇ 10 3 ppm, 3.13 ⁇ 10 3 ppm, and 1.56 ⁇ 10 3 ppm were also prepared.
  • plate medium for sensitivity measurement Add 1% by weight of each sample solution to 99% by weight of B-SYE ⁇ medium kept at 50-60 ° C after sterilization, mix well, then dispense into a dish and solidify. It was. In this way, plate culture media for sensitivity measurement were prepared in which the concentration of psyllium extract was 1,000 ppm, 500 ppm, 250 ppm, 125 ppm, 62.5 ppm, 31.3 ppm, and 15.6 ppm, respectively. The prepared plate medium was dried in a clean bench.
  • the B-SYE ⁇ medium has a composition of 1.5 g of starch, 1.0 g of yeast extract, 1.3 g of agar, 1 vial of Legionella BCYE ⁇ Growth Supplement (OXOID), and 100 ml of purified water.
  • the inoculum was streaked on a plate for sensitivity measurement using a loop with an inner diameter of 1 mm. Thereafter, the strain on each plate medium was cultured at 37 ° C. for 3 days.
  • Example 2 ⁇ Preparation 2 of the grasshopper extract> First, 30 g of the cut leaves of the big grass were immersed in water at 95 ° C. for 30 minutes. The leaves remaining after removing water by filtration were immersed in 100% ethanol for 3 days. Then, this was filtered and the filtrate was collect
  • the weevil extract which is a solid powder contained in the weevil extract, was prepared by freeze-drying.

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Abstract

　レジオネラ属菌増殖抑制剤は、少なくとも有機溶媒を含んだ抽出溶媒を用いてオオバギから抽出されるオオバギ抽出物を有効成分として含有する。あるいは、レジオネラ属菌増殖抑制剤は、ニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種を有効成分として含有する。レジオネラ属菌増殖抑制剤は、例えば、入浴剤及び洗浄剤に配合して使用される。

Description

レジオネラ属菌増殖抑制剤、入浴剤、及び洗浄剤
　本発明は、レジオネラ属菌増殖抑制剤、並びにそれを含有した入浴剤及び洗浄剤に関する。
　レジオネラ属菌は、好気性グラム陰性の桿菌であり、例えば、入浴設備、冷却塔で増殖し易いことが確認されている。レジオネラ属菌を含んだエアロゾルを吸入することが原因となってレジオネラ感染症は引き起こされる。レジオネラ感染症には、レジオネラ肺炎及びポンティアック熱があり、レジオネラ肺炎は、死亡率の高い感染症であることが知られている。特許文献１には、笹からの抽出成分がレジオネラ属菌の増殖を抑制することが記載されている。
　一方、特許文献２に記載されているように、トウダイグサ科オオバギ属に属するオオバギ（大葉木）からの抽出物が抗菌作用を有することが知られている。しかしながら、レジオネラ属菌に対するオオバギ抽出物の作用はこれまで解明されておらず、特許文献２にも何ら記載されていない。
特開２００６－４５０７７号公報 特開２００７－４５７５４号公報
　本発明は、本発明者らによる鋭意研究の結果、オオバギ抽出物がレジオネラ属菌の増殖を抑制する作用を有することを見出したことに基づくものであり、その目的は、新規なレジオネラ属菌増殖抑制剤、並びにそれを含有した入浴剤及び洗浄剤を提供することにある。
　上記の目的を達成するために、本発明の第１の態様では、少なくとも有機溶媒を含んだ抽出溶媒を用いてオオバギから抽出されるオオバギ抽出物を有効成分として含有するレジオネラ属菌増殖抑制剤が提供される。
　本発明の第２の態様では、ニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種を有効成分として含有するレジオネラ属菌増殖抑制剤が提供される。
　本発明の第３の態様では、上記第１及び第２の態様のレジオネラ属菌増殖抑制剤のいずれかを含有する入浴剤が提供される。
　本発明の第４の態様では、上記第１及び第２の態様のレジオネラ属菌増殖抑制剤のいずれかを含有する洗浄剤が提供される。
実施例１に係るオオバギ抽出物について高速液体クロマトグラフィーにて分析した結果を示すクロマトグラム。 実施例２に係るオオバギ抽出物について高速液体クロマトグラフィーにて分析した結果を示すクロマトグラム。
　以下、本発明の一実施形態を詳細に説明する。
　本実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤は、少なくとも有機溶媒を含んだ抽出溶媒を用いてオオバギから抽出されるオオバギ抽出物を有効成分として含有する。オオバギは、マカランガ・タナリウス（Macaranga tanarius）とも呼ばれ、トウダイグサ科オオバギ属に属する雌雄異株の常緑広葉樹である。オオバギは、沖縄（日本南部）、台湾、中国南部、マレー半島、フィリピン、マレーシア、インドネシア、タイなどの東南アジア、オーストラリア北部などに生育している。オオバギは、樹木の中でも成長が極めて早く、荒廃地においても生育が可能である。
　抽出溶媒を用いた抽出に供される抽出原料として、オオバギのあらゆる器官又は各器官の構成要素を用いることができる。抽出原料には、オオバギの単独の器官又はその構成要素が用いられてもよいし、オオバギの二種以上の器官又はその構成要素が混合して用いられてもよい。得られるオオバギ抽出物のレジオネラ属菌増殖抑制作用を向上させるためには、オオバギの果実、種子、花、根、幹、茎の先端部、葉身、又は分泌物（ワックス等）を含んだ抽出原料を使用することが好ましい。茎の先端部は、茎の成長点及び葉芽を含んでおり、葉身に比べて柔軟であるため、抽出操作を効率的に行うことが容易である。また、オオバギの全体に対して各器官が占める割合を比較すると、幹、根、及び葉の占める割合は高い。このため、オオバギの葉身を抽出原料として用いることは、原料確保が容易であるという点で工業的に有利である。
　抽出原料は、採取したままの状態で、又は採取後に粉砕、破砕若しくはすり潰した状態で、又は採取及び乾燥後に粉砕、破砕若しくはすり潰した状態で、又は採取後に破砕、粉砕若しくはすり潰して乾燥させた状態で、抽出操作に供される。抽出を効率的に行うためには、抽出原料は破砕されていることが好ましい。抽出原料の破砕は、例えば、カッター、裁断機又はクラッシャーを用いて行うことができる。抽出原料の粉砕は、例えば、ミル、クラッシャー又はグラインダーを用いて行うことができる。抽出原料のすり潰しは、例えば、ニーダー又は乳鉢を用いて行うことができる。
　抽出原料からオオバギ抽出物を抽出するに際して使用される抽出溶媒は、水と有機溶媒の混合溶媒であってもよいし、例えば、低級アルコール、ジメチルスルホキシド、アセトニトリル、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、グリセリン、プロピレングリコールのような有機溶媒であってもよい。使用可能な低級アルコールとしては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールが挙げられる。有機溶媒は、一種類の溶媒が単独で用いられてもよいし、複数種類の溶媒が混合して用いられてもよい。抽出溶媒として水と有機溶媒の混合溶媒を用いる場合には、混合溶媒中における有機溶媒の含有量は、好ましくは５０体積％以上、より好ましくは８０体積％以上である。混合溶媒中における有機溶媒の含有量が５０体積％以上である場合には、オオバギに含まれる有効成分を特に効率的に抽出することができる。有機溶媒は、低級アルコールが好ましく、エタノールがより好ましい。
　抽出溶媒には、例えば、有機塩、無機塩、緩衝剤、乳化剤、デキストリンが溶解されていてもよい。
　抽出は、抽出溶媒中に上記抽出原料を所定時間浸漬させることにより行われる。抽出に際しては、抽出効率を向上させるべく、必要に応じて、例えば、攪拌、加温又はその両方を行ってもよい。また、不要な夾雑物が抽出溶媒中に抽出されるのを少なくするために、抽出溶媒を用いた抽出に先立って、予め抽出原料を水抽出又は熱水抽出に供して抽出水を除去した抽出原料を準備してもよい。レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用を有すると推測されるオオバギに含まれる成分はニムフェオール類である。ニムフェオール類は水不溶性である。オオバギを例えば熱湯で煮沸することで、ニムフェオール類以外の夾雑物は効率的に抽出水に移動して除去される。
　抽出原料から抽出されたオオバギ抽出物は、抽出原料の残渣を分離除去するべく、固液分離に供される。固液分離法は、例えば、濾過、遠心分離のような公知の方法で行われる。固液分離後の液体状のオオバギ抽出物は、必要に応じて濃縮してもよい。
　液体状のオオバギ抽出物に含まれる抽出溶媒を必要に応じて除去することにより、固体状のオオバギ抽出物を得ることができる。液体状のオオバギ抽出物からの抽出溶媒の除去は、例えば、減圧下での加熱により行ってもよいし、凍結乾燥により行ってもよい。
　少なくとも有機溶媒を含んだ抽出溶媒を用いてオオバギから抽出されるオオバギ抽出物には、ニムフェオール－Ａ（別名５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－６－ゲラニルフラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-6-geranylflavanone））、ニムフェオール－Ｂ（別名５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－２’－ゲラニルフラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-2’-geranylflavanone））、及びニムフェオール－Ｃ（別名５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－６－（３’’’，３’’’－ジメチルアリル)－２’－ゲラニルフラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-6-(3’’’,3’’’-dimethylallyl)-2’-geranylflavanone））から選ばれる少なくとも一種が含まれている。オオバギ抽出物の主要成分は、ニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種、すなわちニムフェオール類であり、これがレジオネラ属菌の増殖を抑制する作用を有すると推測される。
　オオバギ抽出物には、プロポリンＡ（別名５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－２’－（７’’－ヒドロキシ－３’’，７’’－ジメチル－２’’－オクテニル）－フラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-2’-(7’’-hydroxy-3’’,7’’-dimethyl-2’’-octenyl)-flavanone））がさらに含まれている。その他にもオオバギ抽出物には、微量成分として、例えば、５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－５’－ゲラニルフラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-5’-geranylflavanone、別名イソニムフェオールＢ）、５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－５’－（７’’－ヒドロキシ－３’’，７’’－ジメチル－２’’－オクテニル）－フラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-5’-(7’’-hydroxy-3’’,7’’-dimethyl-2’’-octenyl)-flavanone）、５，７，３’，４’－テトラヒドロキシ－６－（７’’－ヒドロキシ－３’’，７’’－ジメチル－２’’－オクテニル）－フラバノン（5,7,3’,4’-tetrahydroxy-6-(7’’-hydroxy-3’’,7’’-dimethyl-2’’-octenyl)-flavanone）、５，７，４’－トリヒドロキシ－３’－（７’’－ヒドロキシ－３’’，７’’－ジメチル－２’’－オクテニル）－フラバノン（5,7,4’-trihydroxy-3’-(7’’-hydroxy-3’’,7’’-dimetyl-2’’-octenyl)-flavanone）、５，７，４’－トリヒドロキシ－３’－ゲラニルフラバノン（5,7,4’-trihydroxy-3’-geranylflavanone）が含まれている。
　オオバギの各部位から抽出される抽出液の中でも、花、種子及び実（ワックスを含む）から抽出される抽出液は、ニムフェオールＡ，Ｂ，Ｃ及びイソニムフェオールＢを特に高濃度で含有している。
　レジオネラ属菌増殖抑制剤は、レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用を損なわない限りにおいて、オオバギ抽出物以外の成分を含有してもよい。レジオネラ属菌増殖抑制剤に含有させることができるオオバギ抽出物以外の成分としては、例えば、賦形剤、基剤、乳化剤、安定剤、香料が挙げられる。
　レジオネラ属菌増殖抑制剤は、液状であってもよいし、固体状であってもよい。レジオネラ属菌増殖抑制剤の剤形は、特に限定されないが、例えば、散剤、粉剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、液剤であってもよい。固体状に調製されたレジオネラ属菌増殖抑制剤は、例えば、排水用又は水循環用の配管や、菌除去設備に設けられるフィルタに担持して使用される。
　オオバギ抽出物の水分散性及び水溶解性を向上させるべく、例えば、界面活性剤、キレート剤、乳化剤又はエタノールをレジオネラ属菌増殖抑制剤に添加することも可能である。
　レジオネラ属菌を含んだエアロゾルを吸入することが原因となって引き起こされるレジオネラ肺炎やポンティアック熱のようなレジオネラ感染症の予防のためには、レジオネラ属菌の増殖を抑制することが極めて重要である。レジオネラ属菌増殖抑制剤は、レジオネラ属菌の増殖を抑制することを通じてレジオネラ属菌によるヒトの感染の予防に役立つ。
　レジオネラ属菌には、代表的なものとしてレジオネラ・ニューモフィラ（Legionella pneumophila）が知られているが、現在数十種が確認されており、これらのレジオネラ属菌のすべてがレジオネラ感染症を引き起こす可能性があると考えられている。
　レジオネラ属菌増殖抑制剤は、レジオネラ属菌の増殖が想定される箇所であれば特に限定されることなく適用が可能である。具体的には、レジオネラ属菌増殖抑制剤は、例えば、入浴設備、給水給湯設備、冷却塔、加湿器、水景設備、蓄熱槽等で使用される水に添加して使用される。レジオネラ属菌による感染症は、抵抗力の低い高齢者、新生児、乳幼児で特に発症し易い。本実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤は、その有効成分が天然物由来のオオバギ抽出物であることから、医療施設又は老人福祉施設においても安心して用いることができる。
　レジオネラ属菌増殖抑制剤は、例えば、入浴剤、洗浄剤、消臭剤、芳香剤として利用することができる。レジオネラ属菌の発生源となり得る上述したような箇所への適用が容易であることから、レジオネラ属菌増殖抑制剤は、入浴剤又は洗浄剤として利用されることが好ましい。レジオネラ属菌増殖抑制剤は、レジオネラ属菌の発生源となり得る箇所のニムフェオールＡ、ニムフェオールＢ及びニムフェオールＣの合計濃度、すなわちニムフェオール類濃度が好ましくは１５ｐｐｍ以上、より好ましくは２０ｐｐｍ以上となるようにして使用されることが望ましい。ニムフェオール類濃度が１５ｐｐｍ以上である場合には、レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用が特に良好に発揮される。
　本実施形態の入浴剤は、上記のレジオネラ属菌増殖抑制剤を含有する。入浴剤の剤型は、例えば、固体状、液状、粉末状が可能である。入浴剤には、上記のレジオネラ属菌増殖抑制剤に加えて、例えば、水溶性無機塩類、着色剤、香料、保湿剤、ｐＨ調整剤、ビタミン類、生薬類、有機酸類、酵素類から選ばれる少なくとも一種が含有される。水溶性無機塩類としては、例えば、炭酸ナトリウムや炭酸水素ナトリウム等の炭酸塩、メタケイ酸ナトリウム等のケイ酸塩、オルトリン酸ナトリウム等のリン酸塩、硫酸ナトリウムや硫酸マグネシウム等の硫酸塩、塩化ナトリウムや塩化カルシウム、塩化アンモニウム等の塩化物が挙げられる。
　このような入浴剤を入浴設備の浴液に混合して使用することで、入浴設備の稼働中に浴槽、その浴槽に浴液を循環する配管、その配管に接続される濾過器、及び熱交換器におけるレジオネラ属菌の増殖を抑制することができる。このため、本実施形態の入浴剤は、各種入浴設備におけるレジオネラ属菌によるヒトの感染を予防するのに好適である。入浴剤中のオオバギ抽出物の含有量は、浴液に混合される入浴剤の量に応じて適宜に設定することが可能である。入浴剤は、浴液中のニムフェオールＡ、ニムフェオールＢ及びニムフェオールＣの合計濃度、すなわちニムフェオール類濃度が好ましくは１５ｐｐｍ以上、より好ましくは２０ｐｐｍ以上となるようにして使用されることが望ましい。浴液中のニムフェオール類濃度が１５ｐｐｍ以上である場合には、レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用が特に良好に発揮される。
　本実施形態の洗浄剤は、上記のレジオネラ属菌増殖抑制剤を含有する。洗浄剤の剤型は、例えば、固体状、液状、粉末状が可能である。洗浄剤には、上記のレジオネラ属菌増殖抑制剤に加えて、例えば、界面活性剤、キレート剤、ｐＨ調整剤から選ばれる少なくとも一種が含有される。洗浄剤は、必要に応じて塩素系又は酸素系除菌剤をさらに含有してもよい。
　洗浄剤は、例えば、レジオネラ属菌の発生源となり得る箇所に定期的に所定時間接触させて使用される。より詳細には、洗浄剤を適当に希釈した希釈液を用いてレジオネラ属菌の発生源となり得る箇所を浸漬させてもよい。あるいは、洗浄剤をレジオネラ属菌の発生源となり得る箇所に直接吹き付けてもよい。洗浄剤中のオオバギ抽出物の含有量は、洗浄剤の使用形態に応じて適宜に設定することが可能である。洗浄剤は、レジオネラ属菌の発生源となり得る箇所のニムフェオール類濃度が好ましくは１５ｐｐｍ以上、より好ましくは２０ｐｐｍ以上となるようにして使用されることが望ましい。ニムフェオール類濃度が１５ｐｐｍ以上である場合には、レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用が特に良好に発揮される。
　本実施形態によれば、以下の効果が得られる。
　本実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤は、オオバギ抽出物を有効成分として含有した新規なレジオネラ属菌増殖抑制剤であり、レジオネラ属菌の増殖を抑制することを通じてレジオネラ属菌による感染の予防に役立つ。
　オオバギは、樹木の中でも成長が極めて早く、荒廃地においても生育が可能であることから、栽培にあまり手間がかからない。しかも、オオバギ抽出物は、植物由来であるため、安全性が高い。従って、本実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤は、原料の供給安定性、生産性、安全性の面についても優れる。
　本実施形態の入浴剤及び洗浄剤は、上記のレジオネラ属菌増殖抑制剤を含有しているため、レジオネラ属菌の増殖を抑制する作用を有する。
　前記実施形態は次のように変更されてもよい。
　前記実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤は、オオバギ抽出物の代わりに、あるいはオオバギ抽出物に加えて、オオバギ抽出物以外に由来するニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種を有効成分として含有してもよい。オオバギ抽出物以外に由来するニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃは、例えば化学合成により得ることができる。
　レジオネラ属菌は土壌等の自然環境中に存在している。そのため、樹脂製の袋に密封して保存されている園芸用の土又は肥料においてレジオネラ属菌が増殖するおそれがある。そこで、園芸用の土又は肥料を介してレジオネラ属菌にヒトが感染するのを防止することを目的として、前記実施形態のレジオネラ属菌増殖抑制剤を園芸用の土又は肥料に添加して使用してもよい。レジオネラ属菌増殖抑制剤の有効成分が天然物由来のオオバギ抽出物であることから、レジオネラ属菌増殖抑制剤を添加した園芸用の土又は肥料を用いて園芸植物を栽培してもその生育は殆ど阻害されない。
　次に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する。
　実施例１
　＜オオバギ抽出物の調製１＞
　沖縄県で採取して冷凍したオオバギの生葉を解凍し、はさみで細かく裁断した。裁断した生葉３０ｇを、９０体積部のエタノールと１０体積部の水からなる混合溶媒１００ｍｌに室温で静置した状態で２週間浸漬した。その後、これを濾過して濾液をオオバギ抽出液として回収した。オオバギ抽出液を凍結乾燥することにより、オオバギ抽出液に含まれる固形分の粉末であるオオバギ抽出物を調製した。この粉末状のオオバギ抽出物中に含まれるニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃの合計濃度、すなわちニムフェオール類濃度は、下記のＨＰＬＣ条件でオオバギ抽出物を分析して得られる図１に示すクロマトグラムから算出した結果、５０質量％であった。
　ＨＰＬＣ条件
　　システム：　ＰＤＡ－ＨＰＬＣシステム（島津製作所）、ＬＣ１０ＡＤｖｐシリーズ、ＵＶ；ＳＰＤ－１０Ａｖｐ、ＰＤＡ；ＳＰＤ－Ｍ１０Ａｖｐ
　　カラム　：　Ｌｕｎａ　Ｃ１８　（２．０×２５０ｍｍ）（島津ＧＬＣ）
　　溶媒　　：　Ａ：水（５％酢酸）、Ｂ：アセトニトリル（５％酢酸）
　　溶出条件：　０－２０ｍｉｎ
　　　　　　　（グラジエント溶出；Ａ：Ｂ＝８０：２０→Ａ：Ｂ＝３０：７０）
　　　　　　　　２０－５０ｍｉｎ
　　　　　　　（グラジエント溶出；Ａ：Ｂ＝３０：７０→Ａ：Ｂ＝０：１００）
　　　　　　　　５０－６０ｍｉｎ（Ａ：Ｂ＝０：１００）
　　　　　　　　６０－７５ｍｉｎ（Ａ：Ｂ＝８０：２０）
　　流速　　：　０．２ｍｌ／ｍｉｎ
　　ＰＤＡ検出：ＵＶ１９０－３７０ｎｍ
　　ＵＶ検出：　ＵＶ２８７ｎｍ
　　注入量　：　２０μｌ
　　温度　　：　４０℃
　＜レジオネラ属菌に対するオオバギ抽出物の抗菌活性試験＞
　前培養
　レジオネラ属菌株、Legionella pneumophila（ＧＩＦＵ９１３４）を、Ｌ－システイン添加buffered charcoal yeast extract（ＢＣＹＥ）培地を用いて３７℃で４日間培養後、得られた菌体をリン酸緩衝液に懸濁させることにより、菌数が１０６～１０７ＣＦＵ／ｍｌの接種用菌液を調製した。
　検体液の調製
　上記の粉末状のオオバギ抽出物を９９．５Ｖ／Ｖ％エタノ－ルに混合してオオバギ抽出物の濃度が１００×１０３ｐｐｍの検体液を調製した。さらに、この検体液を９９．５Ｖ／Ｖ％エタノ－ルで希釈することにより、２倍希釈系列の検体液、すなわちオオバギ抽出物の濃度がそれぞれ５０×１０３ｐｐｍ、２５×１０３ｐｐｍ、１２．５×１０３ｐｐｍ、６．２５×１０３ｐｐｍ、３．１３×１０３ｐｐｍ、１．５６×１０３ｐｐｍの検体液も調製した。
　感受性測定用平板培地の調製
　滅菌後に５０～６０℃で保温したＢ－ＳＹＥα培地９９質量％に１質量％の各検体液を添加し、十分に混合した後、シャ－レに分注、固化させた。こうして、オオバギ抽出物の濃度がそれぞれ１，０００ｐｐｍ、５００ｐｐｍ、２５０ｐｐｍ、１２５ｐｐｍ、６２．５ｐｐｍ、３１．３ｐｐｍ、１５．６ｐｐｍの感受性測定用平板培地を調製した。調製後の平板培地はクリーンベンチ内にて乾燥させた。なお、Ｂ－ＳＹＥα培地は、デンプン１．５ｇ、酵母エキス１．０ｇ、寒天１．３ｇ、Legionella BCYEα Growth Supplement（ＯＸＯＩＤ）１バイアル、精製水１００ｍｌの組成を有する。
　レジオネラ属菌の接種及び培養
　内径１ｍｍのループを用いて感受性測定用平板培地に接種用菌液を画線塗沫した。その後、各平板培地上の菌株を３７℃で３日間培養した。
　判定及び結果
　培養後の平板培地を観察したところ、オオバギ抽出物の濃度が３１．３ｐｐｍ以上の平板培地上ではレジオネラ属菌の発育が阻止されることが確認された。つまり、レジオネラ属菌に対する実施例１のオオバギ抽出物の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は３１．３ｐｐｍであった。上述したとおり、実施例１のオオバギ抽出物にはニムフェオール類が５０質量％含まれているので、使用時のニムフェオール類濃度は１５．６ｐｐｍ以上が好ましいことがこの結果からは推測される。
　実施例２
　＜オオバギ抽出物の調製２＞
　裁断したオオバギの生葉３０ｇをまず９５℃の水に３０分間浸漬した。濾過により水を除去して残った葉を１００％エタノールに３日間浸漬した。その後、これを濾過して濾液をオオバギ抽出液として回収した。オオバギ抽出液を凍結乾燥することにより、オオバギ抽出液に含まれる固形分の粉末であるオオバギ抽出物を調製した。この粉末状のオオバギ抽出物中のニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃの合計濃度、すなわちニムフェオール類濃度は、上記のＨＰＬＣ条件でオオバギ抽出物を分析して得られる図２に示すクロマトグラムから算出した結果、４０質量％であった。
　＜レジオネラ属菌に対するオオバギ抽出物の抗菌活性試験＞
　実施例１と同様に抗菌活性試験を実施した結果、実施例２で調製したオオバギ抽出物についても、実施例１で調製したオオバギ抽出物と同様の結果が得られ、実施例１で調製したオオバギ抽出物と実施例２で調製したオオバギ抽出物の抗菌活性が同様であることが確認された。

Claims (5)

  1. 　少なくとも有機溶媒を含んだ抽出溶媒を用いてオオバギから抽出されるオオバギ抽出物を有効成分として含有することを特徴とするレジオネラ属菌増殖抑制剤。
  2. 　ニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種を有効成分として含有することを特徴とするレジオネラ属菌増殖抑制剤。
  3. 　前記ニムフェオール－Ａ、ニムフェオール－Ｂ及びニムフェオール－Ｃから選ばれる少なくとも一種はオオバギ抽出物由来である、請求項２に記載のレジオネラ属菌増殖抑制剤。
  4. 　請求項１～３のいずれか一項に記載のレジオネラ属菌増殖抑制剤を含有することを特徴とする入浴剤。
  5. 　請求項１～３のいずれか一項に記載のレジオネラ属菌増殖抑制剤を含有することを特徴とする洗浄剤。
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