WO2009053628A2 - Nouveaux composes, préparation et utilisations - Google Patents

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WO2009053628A2
WO2009053628A2 PCT/FR2008/051838 FR2008051838W WO2009053628A2 WO 2009053628 A2 WO2009053628 A2 WO 2009053628A2 FR 2008051838 W FR2008051838 W FR 2008051838W WO 2009053628 A2 WO2009053628 A2 WO 2009053628A2
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hydrogen atom
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Gaëtan Lucien Alfred MISLIN
Isabelle Jeanne Louise Schalk
Gérard Jean Marie LESCOAT
François Rémi GABORIAU
David Rodriguez-Lucena
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Universite Louis Pasteur
Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale
Centre National De La Recherche Scientifique
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D277/12—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen

Definitions

  • the present invention relates to novel compounds, pharmaceutical compositions comprising them and their therapeutic applications in the fields of human and animal health.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of these compounds.
  • Metals are essential elements in the chemistry of life. While a lack of certain metals can lead to serious metabolic disorders, the presence of these excess metals in living tissues is just as significant a threat.
  • Iron is a crucial element for many metabolic processes and physiological functions and, as such, it is present in all cells. It is thus constitutive of the theme of oxygen transporters (hemoglobin, myoglobin) and cytochromes (electron transporters). Iron is also a co-factor for many essential enzymes, especially those involved in the biosynthetic pathways of deoxyribonucleotides, monomers of DNA, the support of the genetic heritage.
  • This transition metal can exist in the form of several degrees of oxidation and has the property of easily gaining or losing an electron, thus passing for example from the ferrous divalent form (Fe 2+ ) to the trivalent ferric form (Fe 3+ ), and vice versa. This property gives it a primary role in the oxidation and biological reduction processes that form the basis of metabolic chemistry.
  • iron homeostasis is regulated by hepcidin, a hormone responsible for iron storage and intestinal absorption of iron (refs a and b). The amount of iron absorbed daily thus compensates for the losses (desquamation of the mucous cells, menstrual losses ...), evaluated between 1 and 2 mg per day. Due to the existence of an iron recycling process in the body, exchanges between storage sites and sites of use, iron circulates almost closed circuit and there is no specific mechanism to eliminate iron in case of overload.
  • hemochromatosis characterized by iron overload, or overload, either symptomatic (hemochromatosis) or consecutive transfusions (sickle cell anemia, beta-thalassemia).
  • iron overloads have serious consequences and can lead to a fatal outcome for untreated patients through the progressive destruction of essential organs.
  • Iron is deposited in the pituitary gland (general dysregulation, physical and mental fatigue, loss of libido, impotence, depression but also osteoporosis and early menopause in women), heart (cardiomyopathies, tachycardia), pancreas (progressive destruction of the number of of cells producing insulin leading to diabetes), and joints (joint pain, arthritis, rheumatism).
  • the liver a key organ in the regulation of iron homeostasis (hepcidin synthesis, iron storage) is particularly affected by iron overload (fibrosis, cirrhosis, cancer).
  • Iron-chelating compounds have been described, such as in patent application WO 2005/034949. But, these compounds generally have an asymmetric carbon, which has a disadvantage in terms of synthesis and may involve risks of toxicity.
  • the compounds according to the invention are iron chelators having cytoprotective and antiproliferative properties. They have the advantage of being highly selective for the complexation of iron to any other important metal in biological systems. Compounds according to the invention are particularly interesting since they are soluble in physiological media. The molecules described in the invention are therefore of interest for treating pathologies related to an iron overload. These same molecules could also be used for the treatment of cancers in general and that of the liver more particularly.
  • the present invention therefore relates to compounds of general formula
  • R1, R3, R5 and R7 identical or different, represent a hydrogen, halogen, COOH (acid), -SO3H (sulfonic acid), NO2, CN, R, COOR, CONH 2, CONHR , CONRR ', NH 2 , NHR, NRR' or NH-COR, wherein R and R ', which may be identical or different, represent a (C 1 -C 16) alkyl, (C 2 -C 16) alkenyl or (C 2 -C 16) alkynyl radical, (C6-C14) aryl, or heteroaryl; R2, R4, R6 and R8, which may be identical or different, represent a hydrogen, halogen, NH 2 , NHR, NRR ', NH-COR or R atom, where R and R', which may be identical or different, are such that defined above;
  • X represents an oxygen atom or a sulfur atom
  • A represents an oxygen atom or an NH, NCOOR9 or N + H 2 group , where R9 represents a (C1-C16) alkyl, C2-C16) alkenyl, (C2-C16) alkynyl radical, (C6-
  • aryl or heteroaryl which may be identical or different, represent 1, 2 or 3; their stereoisomers (diastereoisomers, enantiomers), pure or in mixture, racemic mixtures, geometrical isomers, tautomers, salts, hydrates, solvates, as well as their mixtures.
  • n, X and / or A represented in formula (I) are respectively identical or different on either side of formula (I), preferably they are identical.
  • R1, R3, R5 and R7 may be identical or different, they are preferably identical at least two by two, in particular R1 is identical to R5 and / or R3 identical to R7.
  • R2, R4, R6 and R8 may be the same or different, they are preferably at least two to two, in particular R2 is the same as R6 and / or R4 is the same as R8.
  • alkyl denotes a saturated hydrocarbon radical, linear, branched or cyclic, substituted or unsubstituted, having from 1 to 16, preferably 1 to 6, carbon atoms. Mention may be made, for example, of the methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, pentyl, neopentyl, n-hexyl or cyclohexyl radicals.
  • alkyl radical is cyclic, mention may in particular be made of cyclohexyl, cyclopentyl, cyclopropyl, cyclobutyl, cycloheptyl or norbornyl groups.
  • alkenyl refers to an unsaturated hydrocarbon radical (comprising at least one double bond), linear, branched or cyclic, substituted or unsubstituted, having from 2 to 16, preferably 2 to 6, carbon atoms.
  • alkenyl refers to an unsaturated hydrocarbon radical (comprising at least one double bond), linear, branched or cyclic, substituted or unsubstituted, having from 2 to 16, preferably 2 to 6, carbon atoms.
  • alkynyl refers to an unsaturated hydrocarbon radical (comprising at least one triple bond), linear, branched or cyclic, substituted or unsubstituted, having from 2 to 16, preferably 2 to 6 carbon atoms.
  • alkynyl refers to an unsaturated hydrocarbon radical (comprising at least one triple bond), linear, branched or cyclic, substituted or unsubstituted, having from 2 to 16, preferably 2 to 6 carbon atoms.
  • the ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 1-butynyl, 2-butynyl, 1-pentynyl or 2-pentynyl radicals may be mentioned.
  • aryl refers to an aromatic hydrocarbon radical, substituted or unsubstituted, preferably having 6 to 14 carbon atoms. It may in particular be substituted with at least one halogen atom, an alkyl, hydroxyl, thiol, alkyloxy, alkylthio, amino, alkylamino or dialkylamino radical or a nitro (NO 2) function.
  • the aryl radicals according to the present invention are chosen from phenyl, naphthyl (for example 1-naphthyl or 2-naphthyl), biphenyl (for example, 2-, 3- or 4-biphenyl), anthryl or fluorenyl. Phenyl groups, substituted or unsubstituted, are very particularly preferred.
  • heteroaryl refers to an aromatic hydrocarbon radical having one or more heteroatoms such as nitrogen, sulfur and oxygen, substituted or unsubstituted, preferably having 6 to 14 carbon atoms. It may in particular be substituted by at least one halogen atom, an alkyl radical (as defined above), hydroxyl, thiol, alkyloxy (-O-alkyl), alkylthio (-S-alkyl), amino (NH 2 ), alkylamino (of the NHR type, with R being an alkyl radical), dialkylamino (of the NRR 'type, with R and R', which may be identical or different, being an alkyl radical) or a nitro (NO 2 ) function.
  • pyridinyl pyridazinyl, pyrimidyl, pyrazyl, triazinyl, pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, (1, 2,3) and (1,2,4) -triazolyl, pyrazinyl and pyrimidinyl groups.
  • tetrazolyl furyl, thienyl, isoxazolyl, thiazolyl, isoxazolyl or oxazolyl, etc.
  • halogen is meant the chlorine, bromine, fluorine and iodine atoms.
  • the radicals thus defined may be substituted, in particular by at least one halogen atom, an alkyl, cycloalkyl, aryl, hydroxyl, thiol, alkyloxy, alkylthio, amino, alkylamino, dialkylamino, hydroxyl, heterocycle or a nitro (NO 2) radical. ).
  • the alkyl group may be a perhaloalkyl radical, in particular perfluoroalkyl, such as -CF 3 .
  • a particular aspect of the invention relates to the compounds of general formula (I) in which n, identical or different on either side of formula (I), is 1 or 2, preferably 1. Preferably, n is identical on both sides of the formula (I).
  • a particular aspect of the invention relates to compounds of general formula (I) wherein m is 1 or 2, preferably 1.
  • the invention relates to compounds of general formula (I) in which A is an oxygen atom.
  • the invention relates to compounds of general formula (I) in which A is an NH, NCOOR9 or N + H 2 group , where R9 represents a (C1-C16) alkyl radical.
  • R9 preferably represents a (C1-C6) alkyl radical, in particular the methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl or tert-butyl radical.
  • R1 and R5 represent a hydrogen atom, a halogen atom or a group R, where R represents a radical (C1- C16) alkyl, preferably R is a (C1-C3) alkyl radical.
  • R 1 and R 5 represent a hydrogen atom.
  • R 2 and R 6 which are identical or different, represent a hydrogen atom, NH 2 , NHR or NRR ', where R and R', which are identical or different, different, represent a radical (C1-C16) alkyl, preferably R and R ', identical or different, represent a (C1-C3) alkyl radical.
  • R2 and R6 represent a hydrogen atom.
  • R4 and R8 represent a hydrogen atom, NH 2 , NHR or NRR ', where R and R', which are identical or different, different, represent a radical (C1-C16) alkyl, preferably R and R ', identical or different, represent a (C1-C3) alkyl radical.
  • R4 and R8 represent a hydrogen atom.
  • R3 and R7 which are identical or different, represent a hydrogen atom, a COOH (acid) group, SO3H (sulfonic acid), or a COOR group, where R represents a (C1-C16) alkyl, (C2-C16) alkenyl, (C2-C16) alkynyl radical, ( C6-C14) aryl, or heteroaryl.
  • R3 and R7 which are identical or different, represent a hydrogen atom, a COOH (acid) group or a COOR group, where R represents a (C1-C6) alkyl radical, preferably methyl or ethyl.
  • the compounds of formula (I) have at least one or two of, preferably all, the following characteristics:
  • - A represents an oxygen atom, a group NCOOR9, or N + H 2 ,
  • R1 represents a hydrogen atom
  • R2 represents a hydrogen atom
  • R4 represents a hydrogen atom
  • R5 represents a hydrogen atom
  • R6 represents a hydrogen atom
  • R8 represents a hydrogen atom
  • R3 represents a hydrogen atom, a COOH group or a COOR group
  • R7 represents a hydrogen atom, a COOH group or a COOR group
  • R9 represents a (C1-C6) alkyl radical, and / or
  • R identical or different, represents a (C 1 -C 6) alkyl radical.
  • BHPTC Bis-Hydroxy-phenyl Thiazole Carboxamide or B-Hydroxy-Phenyl Thiazole ThioCarboxamide
  • BHPTC-OOH compound 4,4'-dihydroxy-3,3 '- [(2,2'-ethylenedioxybenzethylamine-dithiazolcarboxamide] dibenzoic acid
  • BHPTC-SOH compound 4,4'-dihydroxy-3,3 '- [(2,2'-ethylenedioxybisethylamine-dithiazolthiocarboxamide] dibenzoic acid
  • BHPTC-OX compound ⁇ /, ⁇ / '- [1,2-ethanediyl-bis (oxy-2,1-ethandiylethyl)] - bis [2- (2-hydroxyphenyl)] - 4-dithiazolcarboxamide
  • BHPTC-SU compound ⁇ /, ⁇ / '- [1,2-ethanediyl-bis (oxy-2,1-ethandiylethyl)] - bis [2- (2-hydroxyphenyl)] - 4-dithiazolthiocarboxamide
  • BHPTC-ONH compound methyl 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ [2,2' - (ethylenebisammonium) diethan-1-amine] -dithiazole carboxamide ⁇ -dibenzoate, bis-trifluoroacetate
  • BHPTC-OOHNBoc compound 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ 2,2' - ⁇ ethylenebis [(tert-butoxycarbonyl) imino] ⁇ -ethan-1-amine ⁇ -dithiazole-carboxamide ⁇ -dibenzoic acid
  • BHPTC-OOHNBoc BHPTC-OOHNH Compound: 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ [2,2' - (ethylenebisammonium) diethan-1-amine] -dithiazole carboxamide ⁇ -dibenzoic acid, bis-trifluoroacetate
  • BHPTC-SNBoc compound Methyl 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ 2,2' - ⁇ ethylenebis [(tert-butoxycarbonyl) imino] ⁇ -ethan-1-amine ⁇ -dithiazole-thiocarboxamide ⁇ -dibenzoate
  • BHPTC-SNH compound Methyl 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ [2,2' - (ethylenebisammonium) -diethan-1-amine] -dithiazole-thiocarboxamide ⁇ -dibenzoate, bis-trifluoroacetate NOT
  • BHPTC-SOHNBoc compound 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ 2,2' - ⁇ ethylenebis [(tert-butoxycarbonyl) imino] ⁇ -ethan-1-amine ⁇ -dithiazole-thiocarboxamide ⁇ -dibenzoic acid
  • BHPTC-SOHNH compound 4,4'-dihydroxy-3,3 '- ⁇ [2,2' - (ethylenebisammonium) diethan-1-amine] -dithiazole-thiocarboxamide ⁇ -dibenzoic acid, bis-trifluoroacetate
  • the compounds of the present invention include stereoisomers (diastereoisomers, enantiomers), pure or in mixtures, racemic mixtures, geometric isomers, tautomers, salts, hydrates, solvates, solid forms and mixtures thereof.
  • the compounds according to the invention may contain one or more asymmetric centers.
  • the present invention includes stereoisomers (diastereoisomers, enantiomers), pure or in mixture, as well as racemic mixtures.
  • the present invention also includes the geometric isomers of the compounds according to the invention.
  • an enantiomerically pure (or enriched) mixture When an enantiomerically pure (or enriched) mixture is desired, it can be obtained either by purification of the final product or of chiral intermediates, or by asymmetric synthesis according to methods known to those skilled in the art (using, for example, reagents and catalysts chiral). Some compounds according to the invention may have different stable tautomeric forms and all such forms and mixtures thereof are included in the invention.
  • the present invention also relates to the pharmaceutically acceptable salts of the compounds according to the invention, especially those having a COO " , NH 3 + , NH 2 + , NHR + , NRR 1 H + or SO 3 " function .
  • This term refers to the low or non-toxic salts obtained from bases or acids, organic or inorganic.
  • the acid salts include both organic and inorganic salts.
  • Representative examples of mineral acids can be HCl, HBr, -
  • organic acids may be formic, acetic, trichloroacetic, trifluoroacetic, propionic, benzoic, cinnamic, citric, fumaric, glycolic, lactic, maleic, malic, malonic, mandelic, oxalic, pyruvic, salicylic, succinic, methanesulfonic, ethanesulfonic, tartaric, ascorbic, palmoic, ethanedisulfonic, gluconic, citraconic, aspartic, stearic, palmitic, EDTA, glycolic, p-aminobenzoic, glutamic, benzenesulfonic, p-toluenesulfonic, sulphates, nitrates, phosphates, perchlorates, borates, acetates , benzoates, hydroxynaphth
  • the pharmaceutically acceptable salts referred to in J. Pharm can be referred to. Sci. 1977, 66, 2.
  • metal salts include lithium, sodium, potassium, magnesium or equivalent salts.
  • alkylated ammonium and ammonium salts include ammonium, methylammonium, dimethylammonium, trimethylammonium, ethylammonium, hydroxyethylammonium, diethylammonium, butylammonium, tetramethylammonium salts or the like.
  • organic bases include lysine, arginine, guanidine, diethanolamine, choline or the like.
  • salts of trifluoroacetic acid are particularly contemplated. These salts can be obtained during the final purification step of the compound according to the invention or by incorporation of the salt on the already purified compound.
  • Certain compounds according to the invention and their salts could be stable in several solid forms.
  • the present invention includes all solid forms of the compounds according to the invention which includes amorphous, polymorphic, mono- and polycrystalline forms.
  • the compounds according to the invention may exist in free form or in solvated form, for example with pharmaceutically acceptable solvents such as water (hydrates) or ethanol.
  • pharmaceutically acceptable solvents such as water (hydrates) or ethanol.
  • the compounds according to the invention labeled with one or more isotopes are also included in the invention: these compounds are structurally identical but differ in that at least one atom of the molecule is replaced by an isotope (radioactive or not).
  • isotopes that can be included in the structure of the compounds of the invention may be selected from hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, sulfur such as 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 18 O, 17 O, 35 S, respectively.
  • the 3 H and 14 C radioactive isotopes are particularly preferred because they are easy to prepare and detect in vivo in vivo bioavailability studies.
  • the heavy isotopes (such as H 2) are preferred because they are used as internal standards in analytical studies.
  • the subject of the present invention is also the compounds as described above, as medicaments.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising, in a pharmaceutically acceptable carrier.
  • compositions or drug for the treatment of pathologies or disorders characterized by an iron overload.
  • Iron overload may be limited to one or more cell or tissue types or to a particular organ or, conversely, may be generalized (many or all of the tissues of the body), such as in the case of genetic diseases, such as hemochromatosis, sickle cell anemia, or beta-thalassemia.
  • Iron overload is either symptomatic or post-treatment, such as regular transfusions, often required for patients with sickle cell anemia or beta-thalassemia. These iron overloads have serious consequences and can lead to a fatal outcome for untreated patients (progressive destruction of essential organs).
  • Iron is deposited in the pituitary gland (which can lead to general dysregulation, physical or mental fatigue, loss of libido, impotence, depression, but also osteoporosis and early menopause in women).
  • heart which can lead to cardiomyopathy, or tachycardia
  • pancreas which can lead to a gradual destruction of the number of cells producing insulin resulting in diabetes
  • joints which can lead to joint pain, arthritis, rheumatism
  • the liver a key organ in the regulation of iron homeostasis (hepcidin synthesis, iron storage) is particularly affected by iron overload (which can lead to fibrosis, cirrhosis or liver cancer).
  • the compounds according to the invention can be used to treat one of the pathologies or one of the disorders indicated above, one of the causes or symptoms of which would be iron overload.
  • Iron overload can therefore also be limited to an organ, such as the heart, lungs, liver, pancreas, brain or kidneys.
  • these localized overloads can lead to neurological or neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, neuroferritinopathies, amyotrophic lateral sclerosis, Friedreich's ataxia or multiple sclerosis.
  • the compounds according to the invention can be used to treat one of the pathologies indicated above.
  • Neoplastic pathologies that are caused by cell hyperproliferation can be benign or malignant. They can affect a large number of tissues, such as the brain, lungs, esophagus, nose, mouth, skin, stomach, pancreas, liver, ovaries, bladder, prostate, prostate uterus, testes, breast, colon, bones, immune system (leukemias) and the endocrine system.
  • the invention relates to a pharmaceutical composition or medicament for the treatment of tumors or cancers, in particular: breast cancer, lung cancer, small bowel cancer, colon and rectal cancer, cancer of the respiratory tract, of the oropharynx and hypopharynx, esophageal cancer, liver cancer, stomach cancer, bile duct cancer, gall bladder cancer, pancreatic cancer, urinary tract cancers including kidney, urothelium and bladder, cancers of the female genital tract including cancer of the the uterus, cervix, ovaries, chlorocarcinoma and trophoblastoma; cancers of the male genital tract including prostate cancer, seminal vesicles, testes, germ cell tumors; cancers of the endocrine glands including thyroid, pituitary, adrenal gland cancer; skin cancers including hemangiomas, melanomas, sarcomas, including Kaposi's sarcoma; tumors of the brain, nerves, eyes, meninges, including a
  • the invention also resides in a method for treating pathologies or disorders as described above for subjects suffering from such pathologies or disorders, comprising administering to these subjects a therapeutically effective amount of at least one compound of formula (I).
  • treatment means curative, symptomatic or preventative treatment.
  • the compounds of the present invention can thus be used in subjects (such as mammals, in particular humans) with a declared disease.
  • the compounds of the present invention can also be used to delay or slow progression or prevent further progression of the disease, thereby improving the condition of the subjects.
  • the compounds of the present invention may finally be administered to non-diseased subjects who may develop the disease normally or who have a significant risk of developing the disease.
  • compositions according to the invention advantageously comprise one or more excipients or vehicles, which are pharmaceutically acceptable.
  • excipients or vehicles for example, saline, physiological, isotonic, buffered, etc., solutions compatible with a pharmaceutical use and known to those skilled in the art may be mentioned.
  • the compositions may contain one or several agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, stabilizers, preservatives, etc.
  • Agents or vehicles that can be used in formulations include methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, and the like. acacia, liposomes, micelles, etc.
  • compositions may be formulated as injectable suspensions, gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, aerosols, etc., optionally using dosage forms or devices providing sustained and / or delayed release.
  • an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used.
  • the compounds or compositions according to the invention can be administered in different ways and in different forms. Thus, they may be, for example, administered systemically, orally, parenterally, by inhalation or by injection, for example intravenously, intramuscularly, subcutaneously, trans-dermally, intra-arterially, etc.
  • the compounds are generally packaged as liquid suspensions, which can be injected by means of syringes or infusions, for example.
  • the flow rate and / or the injected dose can be adapted by those skilled in the art depending on the patient, the pathology, the mode of administration, etc.
  • the compounds are administered in doses (for a subject of approximately 70 kg) which can vary between 50 mg and 10 g per administration, preferably 50 mg to 1 g per administration. Administrations may be daily or repeated several times a day.
  • the compositions according to the invention may comprise, in addition, other agents or active principles.
  • the invention also relates to processes for the preparation of the compounds according to the invention.
  • the compounds of the invention may be prepared from commercial products, using a combination of chemical reactions known to those skilled in the art.
  • the methods according to the invention have the advantage of being simple to implement and can correspond to a limited number of reaction steps (for example, a maximum of 4 to 5 steps).
  • the subject of the present invention is thus a process for the preparation of the compounds according to the invention comprising the following steps:
  • step (ii) a step of coupling two compounds obtained in step (i) with a symmetrical diamine, optionally followed by a purification step, in particular by chromatography,
  • step (v) optionally after step (iii) or (iv), saponification of the ester to obtain the corresponding carboxylate.
  • steps (iii), (iv) or (v) ) can be followed by acid treatment to prepare the corresponding ammonium bis-trifluoroacetate salts.
  • R 1 -R 8, X, A, n and m are as defined above.
  • step (ii) of the process is followed by a purification step, in particular by chromatography.
  • Figure 4 cytoprotective effect of the compounds BHPTC-O and BHPTC-OOH.
  • DBU 1,8-diazabicyclo [5.4.0] undec-7-ene.
  • DMSO Dimethyl sulfoxide
  • EDCI ⁇ - (3-dimethylaminopropyl) - ⁇ -ethylcarbodiimide.
  • NTA Nitriloacetic acid
  • the NMR spectra were recorded on a Bruker Avance 300 spectrometer (300 MHz for 1 H and 75 MHz for 13 C). The calibration of the NMR spectra is made from the residual peak of the non-deuterated solvent.
  • the multiplicities of the signals are expressed in the following way: s (singlet), d (doublet), t (triplet), q (quadruplet), p (pentuplet) and m (multiplet).
  • a multiplicity followed by the letter I indicates that the signal is broadened and a multiplicity preceded by the letter d signifies that the signal is split.
  • the experiments of spectrometry of Routine mass and high resolution were performed by electrospray using a Bruker MicroToF spectrometer.
  • the suspension obtained is then extracted with CH 2 Cl 2 (3 ⁇ 75 ml) and the organic phases are then combined to be dried over Na 2 SO 4 , filtered and then evaporated under reduced pressure.
  • the desired thazoline (1434 mg, 5.10 mmol, yield: 90%) is thus isolated in the form of a yellow crystalline powder, used without further purification for subsequent synthesis.
  • the organic phase is washed with water (50 mL) before to be dried over Na 2 SO 4 , filtered before the solvents are removed under reduced pressure.
  • the dithiazoline thus obtained is dissolved in CH 2 Cl 2 (50 ml) followed by DBU (546 ⁇ l, 555 mg, 3.65 mmol, 3.96 equivalents) and CBrCl 3 (315 ⁇ l, 634 mg, 3%). 20 mmol, 3.50 equivalents) are added successively. The resulting solution is stirred for 14 hours under argon at 24 ° C.
  • the reaction medium is adsorbed on demetallated silica before being chromatographed on a demetallated silica column (30 g of SiO 2 , filler eluent: CH 2 Cl 2 , migration eluent: CH 2 Cl 2 / EtOH: 95 / 5).
  • the pale yellow solid obtained after evaporation of the solvents is washed with boiling ethanol before being filtered and then dried under reduced pressure.
  • BHPTC-O (444 mg, 0.66 mmol, 71% yield on both steps) is isolated as a white powder.
  • BHPTC-S BHPTC-O (350 mg, 0.52 mmol) and Lawesson's reagent (422 mg, 1.04 mmol, 2.00 equivalents) are dissolved in anhydrous toluene (20 mL) and the suspension obtained is heated under reflux. (110 ° C.) for 2 hours. The mixture is cooled to room temperature and the solvent is evaporated under reduced pressure. The oily residue is then dissolved in CH 2 Cl 2 (50 mL) before successive washings with water (30 mL), with a saturated aqueous solution of NaHCO 3 (30 mL). ml_) and then brine (30 ml_). The organic phase is then dried over Na 2 SO 4 , filtered and the solvent is removed under reduced pressure.
  • BHPTC-OOH BHPTC-OOH.
  • BHPTC-OOH 160 mg, 0.25 mmol, yield: 65%
  • Mass Spectrometry (Electrospray): m / z 643 (M + H + ), 665 (M + Na + ), 681 (M + K + ). High Resolution Mass Spectrometry (Electrospray): m / z found 665.099 ([M + Na] + ); m / z calcd for C 2 SH 2 BN 4 NaO 2 O S 2 : 675.071.
  • the organic phase is washed with water (100 mL) before being dried over Na 2 SO 4 , filtered before the solvents are removed under reduced pressure.
  • the dithiazoline thus obtained is dissolved in CH 2 Cl 2 (100 mL) followed by DBU (2.68 mL, 2730 mg, 17.93 mmol, 4.00 equivalents) and CBrCl 3 (1.55 mL, 3112). mg, 15.69 mmol, 3.50 equivalents) are added successively.
  • the solution obtained is stirred for 6 h under argon at 20 ° C.
  • the reaction medium is adsorbed on demetallated silica before being chromatographed on a demetallated silica column (40 g of SiO 2 , filler eluent: CH 2 Cl 2 migration eluent: CH 2 Cl 2 / EtOH: 97/3).
  • the pale yellow solid obtained after evaporation of the solvents is recrystallized from a cyclohexane / CH 2 Cl 2 mixture.
  • BHPTC-OX (1841 mg, 3.32 mmol, yield: 54% over two steps) is isolated as a white crystalline powder.
  • BHPT-OX 150 mg, 0.27 mmol
  • Lawesson's reagent 219 mg, 0.54 mmol, 2.00 equivalents
  • the mixture is cooled to room temperature and the solvent is evaporated under reduced pressure.
  • Mass Spectrometry (Electrospray): m / z 585 (M + ).
  • BHPTC-SOH BHPTC-SOH.
  • the BHPTC- SOH 35 mg, 52 ⁇ mol, yield: 59%) is isolated as a fine pale yellow powder.
  • Mass spectrometry (Electrospray): m / z 673 (M " ) High resolution mass spectrometry (Electrospray): m / z found 675.070 ([M + H] + ) m / z calculated for C 2 SH 2 ZN 4 O 8 S 4 : 675.071.
  • EDCI (359 mg, 1.87 mmol) is added to a solution of 2,2'- ⁇ ethylenebis [(tert-butoxycarbonyl) imino] ⁇ -ethan-1-amine (ref h) (271 mg, 0). 78 mmol) and 2- (2-hydroxy-5-methoxycarbonylphenyl) -4,5-dihydrothiazol-4-carboxylic acid (440 mg, 1. 56 mmol) in CH 2 Cl 2 (15 ml). The reaction medium is stirred for 16 hours at 24 ° C. under argon and the solvent is then evaporated off under reduced pressure. The residue is suspended in water (30 mL) and the pH is adjusted to 2 by addition of aqueous 1N HCl.
  • This aqueous phase phase is extracted with CH 2 Cl 2 (3 x 30 mL) and the organic phases are combined, dried over Na 2 SO 4 and the solvents are removed under reduced pressure. The oily residue is then dissolved in CH 2 Cl 2 (40 mL), then DBU (0.41 mL, 2.74 mmol) and CBrCU (0.30 mL, 3.04 mmol) are added successively at 0. 0 C.
  • BHPTC-ONBoc (113 mg, 0.13 mmol) is dissolved in a mixture of 5% TFA / CH 2 CI 2 (2 mL) and the resulting solution is stirred for 5 h at 23 ° C. The solvents are evaporated under reduced pressure and then water is added (5 mL). Freezing and lyophilization of this solution gave the double trifluoroacetate salt of BHPTC-ONH (93 mg, 0.10 mmol, yield: 80%), isolated as a white powder.
  • Mass Spectrometry (Electrospray): m / z 863.0 ([M + Na] +), 839.0 ([M - H] "), 796.0 ([M - COOH]”), 741, 1 ( [M-Boc + 2H] + ), 739.0 ([M-Boc] " ), 641.0 ([M-2Boc + 3H] + ) High Resolution Mass Spectrometry (Electrospray): m / z found 841 , 2514 ([m + H] +); m / z calcd for C 38 H 45 N 6 Oi 2 S 2: 841, 2531.
  • Mass spectrometry (Electrospray): m / z 641, 1 ([M + H] + ), 321, 1 ([M +
  • BHPTC-SNBoc (68 mg, 75 ⁇ moles) is dissolved in a mixture of 5% TFA / CH 2 Cl 2 (2 ml) and the resulting solution is stirred for 6 h at 23 ° C. The solvents are evaporated under reduced pressure and then water is added (5 mL). Freezing and lyophilization of this solution gave the double trifluoroacetate salt of BHPTC-SNH (63 mg, 68 ⁇ mol, yield: 90%), isolated in the form of a white powder.
  • the precipitate which forms is recovered by filtration before being dried under vacuum.
  • Mass Spectrometry (Electrospray): m / z 673.1 ([M + H] + ). High Resolution Mass Spectrometry (Electrospray): m / z found 673.1025 ([M + H] + ); m / z calcd for C 28 H 29 N 6 O 6 S 4 : 673.1026.
  • Iron chelators are active against many biological targets in humans which explains the toxicity of these molecules, observed in patients treated over long periods. If this problem is considered from the point of view of the complexed metal, one of the reasons mainly advanced is the lack of selectivity of the chelator vis-à-vis biological ions (ref i). This lack of selectivity leads to the complexation, in variable proportions, of zinc, copper, nickel, cobalt or manganese, which results in a disruption of the metabolic processes involving these metals. It is therefore necessary to verify that our chelators are capable of complexing, preferentially iron to any other metal of biological interest. For this, the pM ⁇ + of the BHPTC-O ligand was measured in order to compare the capacity of the ligand to complex the metal ion M ⁇ + considered (ref j, ref k).
  • the stock solution of BHPTC-O is diluted before use in a solution of HCIO 4 (10 ⁇ 2 M, p [H] 2.0).
  • the measurements for the spectrophotometric titrations (absorption) of BHPTC-O by the various metals tested were carried out in quartz quartz tanks Hellma quartz (optical path: 1 cm). The corresponding UV-visible spectra were recorded between 220 to 800 nm on a Cary 300 spectrophotometer (Varian).
  • the light source used is a xenon lamp (half-peak width ⁇ 10 ⁇ s, power 20 kW).
  • Spectrophotometric and spectrofluorimetric data were refined using Specfit, Haltafall and / or Origin 5.0 software.
  • Figure 2 Cationic selectivity profile of BHPTC-O ligand.
  • the pFe 3+ and the cationic selectivities of other synthesized BHPTCs are currently under development
  • the chelators are previously dissolved in DMSO to form a stock solution which will be subsequently diluted in the culture media.
  • the cellular model used is the HepaRG line (patent application FR20010009044, filed on July 6, 2001 by INSERM) isolated from hepatocellular carcinoma, which has the distinction of being able to differentiate under controlled culture conditions.
  • the evolution of HepaRG cell cultures passes through a proliferative phase that extends after confluence by a differentiation phase. Two cell types can then be identified, one hepatocyte expressing specific functions of the adult liver (synthesis of albumin, aldolase B, transferrin, detoxification functions) and the other biliary epithelioid.
  • HepaRG cells are cultured in a humid atmosphere at 37 ° C, enriched with 5% CO 2, in Williams' E medium supplemented with 10% fetal calf serum, penicillin-streptomycin (50 ⁇ g / ml), glutamine ( 2x10 "3M), bovine insulin (5 .mu.g / ml) and hydrocortisone hemisuccinate (5x10" 5 M).
  • the cytoprotective activity test is carried out on HepaRG cells in the differentiation phase and is based on the evaluation of toxicity by assaying the activity of lactate dehydrogenase (LDH), a cytoplasmic enzyme released in the culture medium. in case of membrane damage. Increasing the extracellular concentration of LDH is therefore directly correlated with cell death.
  • LDH lactate dehydrogenase
  • the colorimetric assay of this enzyme has been performed intra- and / or extracellularly, using the kit "Cytotoxicity detection kit (LDH)" (Roche, Mannheim, Germany).
  • Extra and intracellular LDH assays are carried out respectively on a volume of 20 .mu.l of culture medium or 20 .mu.l of cell lysate obtained by sonication of the cells in phosphate buffered saline.
  • a standard range is made from a diluted reference LDH solution (Sigma), in the serum-free culture medium for the determination of extra-cellular LDH, and in the phosphate-buffered saline for the intracellular LDH assay.
  • the total protein content of the cultures is measured by the Bradford technique. The results are expressed in mIU of LDH per ⁇ g of protein.
  • Figure 4 cytoprotective effect of the compounds BHPTC-O and BHPTC-OOH. Comparison with Desferal (DFO).
  • the compounds BHPTC-O and BHPTC-OOH show significant cytoprotective activity on HepaRG cells in the differentiation phase placed under iron overload conditions. The activity observed is comparable to that of Desferal, a molecule considered as the reference for this therapeutic application.
  • the HepaRG line cells are cultured under the same conditions as those described in Example 15, but the cells are used this time in the proliferative phase only.
  • the cytotoxic effect is evaluated in two ways: one by measuring the extra- and intracellular activity of lactate dehydrogenase (LDH) (see Materials and Methods of Example 15) and the other method, called MTT test, focuses on cell viability after treatment with a cytotoxic agent and allows to evaluate the proportion of viable cells after treatment. It is based on the reduction of yellow MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide) to blue crystals of formazan by a mitochondrial enzyme, succinate dehydrogenase.
  • LDH lactate dehydrogenase
  • the formed formazan crystals are solubilized by dimethylsulfoxide and their detection is carried out by spectrophotometry at a wavelength of 535 nm. The results are expressed as percentage of formazan formed in treated cultures compared to control cultures. For these tests, the chelators are previously dissolved in DMSO to form a stock solution which will be subsequently diluted in the culture media.
  • BHPTC-O At a concentration of 20 ⁇ M, the cytotoxicity of BHPTC-O is low and very close to that of BHPTC-S (small increase in extracellular LDH / control and small decrease in intracellular LDH / control). At the concentration of 50 ⁇ M, the cytotoxicity of BHPTC-S is very much higher than that of BHPTC-O [extracellular LDH: 239% for BHPT-O and 572% for BHPT-S; Intracellular LDH: 83 for BHPTC-O and 26% for BHPTC-S]. At a concentration of 50 ⁇ M, BHPTC-S thus has a high cytotoxicity, very much higher than that observed for BHPTC-O.
  • BHPTC-O At a concentration of 20 ⁇ M, the effect of BHPTC-O is not significant while BHPTC-S has an effect on cell viability (78% compared to the 100% control). At a concentration of 50 ⁇ M, the effect of the two chelators is significant with a deleterious effect on cell viability more asserted for BHPTC-S (40% by 100% control ratio) only for BHPTC-O (20% relative to the 100% control).
  • the MTT test indeed shows a drop in activity of the mitochondrial succinate dehydrogenase with respective IC 5 O 18.3 / 27.8 / 35.1 microM to DFO, the BHPTC-OOH and BHPTC-O.
  • Antiproliferative activity is assessed by the extent of inhibition of DNA replication.
  • the measurement of the incorporation of tritiated thymidine in the DNA makes it possible to measure the intensity of the replication process and thus to quantify the antiproliferative effect of the BHPTCs on the HepaRG line (cancer cells of the liver).
  • the cells of HepaRG lines are cultured under the conditions described in the "Materials and Methods" part of Example 15. For these experiments, the cells are obviously used in the prolitative phase. After 24 h of incubation in the presence of 0.5 ⁇ Ci / mL of tritiated thymidine ( 3 H methyl-thymidine, 25 Ci / mmol), the cells are washed twice with phosphate buffered saline and lysed by sonication. 200 ⁇ l of cell lysate are placed in a counting flask and 2.5 ml of scintillating liquid are added thereto. The radioactivity is measured in a liquid scintillation counter. The radioactivity incorporated in the DNA is expressed in cpm / ⁇ g protein. The experimental results are expressed as a percentage relative to the control cultures.
  • BHPTC-S inhibits DNA replication far more effectively than BHPTC-O. This activity is however level at higher concentration, probably because of the effects of cytotoxicity associated with the compounds according to the invention.
  • Chelators according to the invention have been tested on various normal or resistant human tumor cell lines (with reference antitumor) representing the main tissue types.
  • the KB (human bovine epidermal carcinoma) and HepG2 (hepatocarcinoma) lines were obtained from ECACC (Salisbury, UK) and cultured in D-MEM supplemented with 10% fetal calf serum in the presence of penicillin.
  • HCT116, HT29 and HCT15 colon adenocarcinoma
  • MCF7 mammary adenocarcinoma
  • MCF7R chemically resistant mammary adenocarcinoma
  • SK-OV3 ovarian adenocarcinoma
  • PC-3 prostate adenocarcinoma
  • A549 pulmonary carcinoma
  • HL60 promyéocytic leukemia
  • K562 chronic myelogenous leukemia
  • SF268 glioblastoma
  • the chemo-resistant cell line MCF7R is obtained by prolonged treatment of the MCF7 line with doxorubicin
  • the cells are plated in 96-well culture microplates containing 200 ⁇ l of medium and are treated 24 hours later with the compounds to be tested, dissolved beforehand in DMSO, thanks to a Biomek
  • control experiments are treated with the same volume of DMSO (1% of the final volume). After 72 h, the MTS reagent (Promega) is added and after 3 h of incubation at 37 ° C, the absorbance is measured at 490 nm (OD490) and the results are expressed as the inhibition of cell proliferation calculated by the ratio [(1- (OD 4 9o treated crop / OD 4 9 0 control culture)) * 100]. Each experiment is performed three times and the given inhibition value is the average of the values obtained on these three experiments.
  • the chelators tested are respectively BHPTC-OOH, BHPTC-S, BHPTC-O, BHPTC-SOH, BHPTC-ONH (TFA double salt), BHPTC-ONBoc, BHPTC-OOHNBoc, BHPTC-OOHNH (TFA double salt). They were confronted with the DFOM, the mesylate salt of Desferal considered as the reference compound in the field of ferrochelators for therapeutic use. The proliferation inhibition measurements were carried out at two concentrations, 10 -5 M / 10 -6 M (Table 1).
  • Table 1 Inhibition of the proliferation of cancer cell lines in the presence of 10 ⁇ 5M or (/) 10 ⁇ 6M chelators of the family of BHPTC or desferal mesylate (DFOM).
  • the compounds BHPTC-S and BHPTC-ONBoc are the most active compounds to inhibit the proliferation of cancerous lines. Their activity is however, varies from one line to another, but generally still higher than that of the Desferal (DFO) used as a reference. In addition, on certain lines, the effective concentrations are comparable to those of certain chelators developed specifically for an anticancer application (ref o, ref p).
  • Examples 1 to 12 describe the efficient and optimized syntheses of the compounds according to the invention. Among these compounds, some have been tested for their physicochemical and biological properties.
  • the compounds BHPTC-O and BHPTC-OOH showed that they had cytoprotective properties comparable to those of Desferal (DFO), considered as the reference compound for the treatment of iron overloads. Although the compounds BHPTC-O and BHPTC-OOH have a cytotoxic effect comparable to that of DFO, the compounds according to the invention have, however, a less deleterious effect than the reference molecule on cell viability. These biological properties seem to target BHPTC-O and BHPTC-OOH and the related compounds, to a therapeutic application in the field of the treatment of iron overloads in connection with a genetic pathology (hemochromatosis, sickle cell anemia, beta-thalassemia, etc.).
  • DFO Desferal
  • the compound BHPTC-S has in parallel a significant cytotoxic and antiproliferative effect on HepaRG cells. This antiproliferative activity was confirmed on several other lines from different cancerous tissue groups. These biological properties seem to target BHPTC-S and related compounds with a preferential application in the field of the treatment of certain cancers.

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Abstract

La présente invention concerne de nouveaux composés, les compositions pharmaceutiques les comprenant ainsi que leurs applications thérapeutiques dans les domaines de la santé humaine et animale. La présente invention a également trait à un procédé de préparation de ces composés.

Description

NOUVEAUX COMPOSES, PREPARATION ET UTILISATIONS
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne de nouveaux composés, les compositions pharmaceutiques les comprenant ainsi que leurs applications thérapeutiques dans les domaines de la santé humaine et animale. La présente invention a également trait à un procédé de préparation de ces composés.
DESCRIPTION DU CONTEXTE DE L'INVENTION
Les métaux sont des éléments essentiels à la chimie du Vivant. Si une carence en certains métaux peut conduire à des troubles métaboliques graves, la présence de ces métaux en excès dans les tissus vivants revêt un danger tout aussi significatif.
Le fer est un élément crucial pour de nombreux processus métaboliques et fonctions physiologiques et, à ce titre, il est présent dans toutes les cellules. Il est ainsi constitutif de Thème des transporteurs d'oxygène (hémoglobine, myoglobine) et des cytochromes (transporteurs d'électrons). Le fer est également co-facteur de nombreuses enzymes essentielles notamment celles impliquées dans les voies de biosynthèse des désoxyribonucléotides, monomères de l'ADN, le support du patrimoine génétique. Ce métal de transition peut exister sous forme de plusieurs degré d'oxydation et possède la propriété de gagner ou de perdre facilement un électron, passant ainsi par exemple de la forme ferreuse divalente (Fe2+) à la forme ferrique trivalente (Fe3+), et inversement. Cette propriété lui confère un rôle primordial dans les processus d'oxydation et de réduction biologique qui constituent la base de la chimie métabolique.
Chez l'adulte, le stock en fer de l'organisme est en moyenne de 4 g. L'homéostasie du fer est régulée par l'hepcidine, une hormone responsable du stockage du fer et de l'absorption intestinale de ce métal (réf. a et b). La quantité de fer absorbé quotidiennement compense ainsi les pertes (desquamation des cellules muqueuses, pertes menstruelles...), évaluées entre 1 et 2 mg par jour. Du fait de l'existence d'un processus de recyclage du fer dans l'organisme, des échanges entre sites de stockage et sites d'utilisation, le fer circule quasiment en circuit fermé et il n'existe pas de mécanisme spécifique permettant d'éliminer le fer en cas de surcharge.
Certaines maladies génétiques comme l'hémochromatose, l'anémie falciforme ou la béta-thalassémie se caractérisent par une surcharge en fer, ou surcharge martiale, soit symptômatique (hémochromatose) soit consécutive à des transfusions régulières (anémie falciforme, béta-thalassémie).
Ces surcharges en fer ont de graves conséquences et peuvent conduire à une issue fatale pour les patients non traités par la destruction progressive d'organes essentiels. Le fer se dépose dans l'hypophyse (dérèglement général, fatigue physique et psychique, perte de libido, impuissance, dépression mais aussi ostéoporose et ménopause précoce chez la femme), le cœur (myocardiopathies, tachycardie), le pancréas (destruction progressive du nombre de cellules produisant l'insuline aboutissant au diabète), et les articulations (douleurs articulaires, arthrites, rhumatismes). Le foie, organe clé dans la régulation de l'homéostasie du fer (synthèse d'hepcidine, stockage du fer) est tout particulièrement affecté par les surcharges en fer (fibrose, cirrhose, cancer).
La faible biodisponibilité et la toxicité à long terme des chélateurs de fer actuellement utilisés dans le traitement des surcharges en fer expliquent le recours encore fréquents, en particulier dans le cas de l'hémochromatose, aux saignées pour désaturer en fer l'organisme du patient (réf. c).
Il a été décrit des composés chélateurs de fer, tels que dans la demande brevet WO 2005/034949. Mais, ces composés présentent généralement un carbone asymétrique, ce qui présente un inconvénient en terme de synthèse et peut impliquer des risques de toxicité.
Comme cela a déjà été mentionné, certaines enzymes intervenant dans la synthèse des désoxyribonucléotides, monomères de l'ADN, contiennent dans leurs sites actifs des atomes de fer essentiels à leur fonctionnalité. De plus le fer est nécessaire au bon fonctionnement de différentes protéines impliquées dans la régulation du cycle cellulaire (cyclines). Enfin, la conversion, par les réducteurs biologiques, de chélates ferriques en entités chimiques contenant du fer(ll) peut engendrer la production de radicaux libres cytotoxiques (réactions de Fenton). Ces trois aspects, permettent de comprendre pourquoi la stratégie consistant à piéger le fer par des chélateurs de synthèse permet de diminuer la quantité d'ADN synthétisé et de ralentir la prolifération rapide et anarchique caractéristique des cellules cancéreuses (références d. et e).
DESCRIPTION DE L'INVENTION
De manière inattendue, les inventeurs ont découvert une nouvelle famille de molécules présentant une activité cytoprotectrice contre les surcharges en métaux et en particulier les surcharges en fer et une activité antiproliférative dans des cellules cancéreuses, en particulier dans une lignée de cellules d'hépatome humain. Les composés selon l'invention sont des chélateurs de fer présentant des propriétés cytoprotectrices et antiprolifératives. Ils présentent l'avantage d'être hautement sélectifs pour la complexation du fer à tout autre métal important dans les systèmes biologiques. Des composés selon l'invention sont particulièrement intéressants puisqu'ils sont solubles dans des milieux physiologiques. Les molécules décrites dans l'invention présentent donc un intérêt pour traiter les pathologies liées à une surcharge en fer. Ces mêmes molécules pourraient aussi être utilisées pour le traitement des cancers en général et celui du foie plus particulièrement.
La présente invention concerne donc des composés de formule générale
(I):
Figure imgf000004_0001
(I) dans laquelle :
R1 , R3, R5 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe COOH (acide), SO3H (acide sulfonique), NO2, CN, un groupe R, COOR, CONH2, CONHR, CONRR', NH2, NHR, NRR' ou NH-COR, où R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1 -C16)alkyle, (C2- C16)alkényle, (C2-C16)alkynyle, (C6-C14)aryl, ou hétéroaryle; R2, R4, R6 et R8, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, NH2, NHR, NRR', NH-COR ou R, où R et R', identiques ou différents, sont tels que définis ci-dessus ;
X représente un atome d'oxygène ou un atome de soufre ;
A représente un atome d'oxygène ou un groupe NH, NCOOR9 ou N+H2, où R9 représente un radical (C1-C16)alkyle, C2-C16)alkényle, (C2-C16)alkynyle, (C6-
C14)aryl, ou hétéroaryle, m et n, identiques ou différents, représentent 1 , 2 ou 3 ; leurs stéréoisomères (diastéréoisomères, énantiomères), purs ou en mélange, mélanges racémiques, isomères géométriques, tautomères, sels, hydrates, solvates, ainsi que leurs mélanges.
Il convient de noter que les deux n, X et/ou A représentés dans la formule (I) sont respectivement identiques ou différents de part et d'autre de la formule (I), de préférence ils sont identiques.
Dans le cadre de la présente invention, R1 , R3, R5 et R7 peuvent être identiques ou différents, ils sont de préférence identiques au moins deux à deux, en particulier R1 est identique à R5 et/ou R3 identique à R7.
R2, R4, R6 et R8 peuvent être identiques ou différents, ils sont de préférence identiques au moins deux à deux, en particulier R2 est identique à R6 et/ou R4 identique à R8.
Dans le cadre de la présente invention, le terme « alkyle » désigne un radical hydrocarboné saturé, linéaire, ramifié ou cyclique, substitué ou non, ayant de 1 à 16, de préférence 1 à 6, atomes de carbone. On peut citer, par exemple, le radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, tert-butyle, sec- butyle, pentyle, néopentyle, n-hexyle ou cyclohexyle. Lorsque le radical alkyle est cyclique, on peut citer notamment les groupes cyclohexyle, cyclopentyle, cyclopropyle, cyclobutyle, cycloheptyle ou norbornyle.
Le terme « alkényle » désigne un radical hydrocarboné insaturé (comprenant au moins une double liaison), linéaire, ramifié ou cyclique, substitué ou non, ayant de 2 à 16, de préférence 2 à 6 atomes de carbone. On peut citer, par exemple, le radical éthényle, 1-propényle, 2-propényle, 1-butényle, 2-butényle, 1-pentényle, 2-pentényle, 3-méthyl-3-butényle.
Le terme « alkynyle » désigne un radical hydrocarboné insaturé (comprenant au moins une triple liaison), linéaire, ramifié ou cyclique, substitué ou non, ayant de 2 à 16, de préférence 2 à 6 atomes de carbone. On peut citer, par exemple, le radical éthynyle, 1-propynyle, 2-propynyle, 1-butynyle, 2-butynyle, 1- pentynyle ou 2-pentynyle.
Le terme « aryle » désigne un radical hydrocarboné aromatique, substitué ou non, ayant de préférence 6 à 14 atomes de carbone. Il pourra en particulier être substitué par au moins un atome d'halogène, un radical alkyle, hydroxyle, thiol, alkyloxy, alkylthio, amino, alkylamino, dialkylamino ou une fonction nitro (NO2). De préférence, les radicaux aryles selon la présente invention sont choisis parmi le phényle, le naphtyle (par exemple 1-naphtyle ou 2-naphtyle), le biphényle (par exemple, 2-, 3- ou 4- biphényle), l'anthryle ou le fluorényle. Les groupes phényles, substitués ou non, sont tout particulièrement préférés.
Le terme « hétéroaryle » désigne un radical hydrocarboné aromatique comportant un ou plusieurs hétéroatomes tels que l'azote, le soufre et l'oxygène, substitué ou non, ayant de préférence 6 à 14 atomes de carbone. Il peut en particulier être substitué par au moins un atome d'halogène, un radical alkyle (tel que défini ci-dessus), hydroxyle, thiol, alkyloxy (-O-alkyl), alkylthio (-S-alkyl), amino (NH2), alkylamino (de type NHR, avec R étant un radical alkyle), dialkylamino (de type NRR', avec R et R', identiques ou différents, étant un radical alkyle) ou une fonction nitro (NO2). A titre d'exemple, on peut citer les groupements pyridinyle, pyridazinyle, pyrimidyle, pyrazyle, triazinyle, pyrrolyle, pyrazolyle, imidazolyle, (1 ,2,3,)- et (1 ,2,4)-triazolyle, pyrazinyle, pyrimidinyle, tétrazolyle, furyle, thiényle, isoxazolyle, thiazolyle, isoxazolyle ou oxazolyle, etc.
Par le terme « halogène », on désigne les atomes de chlore, brome, fluor et iode.
Les radicaux ainsi définis peuvent être substitués, en particulier par au moins un atome d'halogène, un radical alkyle, cycloalkyle, aryle, hydroxyle, thiol, alkyloxy, alkylthio, amino, alkylamino, dialkylamino, hydroxyle, hétérocycle ou une fonction nitro (NO2). Ainsi, le groupe alkyle peut être un radical perhalogénoalkyle, en particulier perfluoroalkyle, tel que -CF3. Un aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle n, identique ou différent de part et d'autre de la formule (I), est 1 ou 2, de préférence 1. De préférence, n est identique de part et d'autre de la formule (I).
Un aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle m est 1 ou 2, de préférence 1.
Selon une variante particulière, l'invention concerne des composés de formule générale (I) dans laquelle A est un atome d'oxygène.
Selon une autre variante particulière, l'invention concerne des composés de formule générale (I) dans laquelle A est un groupe NH, NCOOR9 ou N+H2 , où R9 représente un radical (C1-C16)alkyle. Lorsque A représente un groupe NCOOR9, R9 représente préférentiellement un radical (C1-C6)alkyle, en particulier le radical méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, ou tert-butyle.
Un autre aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle R1 et R5, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe R, où R représente un radical (C1- C16)alkyle, de préférence R est un radical (C1-C3)alkyle. Avantageusement, R1 et R5 représentent un atome d'hydrogène.
Un autre aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle R2 et R6, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, NH2, NHR ou NRR', où R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C16)alkyle, de préférence R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C3)alkyle. De préférence, R2 et R6 représentent un atome d'hydrogène.
Un autre aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle R4 et R8, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, NH2, NHR ou NRR', où R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C16)alkyle, de préférence R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C3)alkyle. Avantageusement, R4 et R8 représentent un atome d'hydrogène.
Un autre aspect particulier de l'invention concerne les composés de formule générale (I) dans laquelle R3 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe COOH (acide), SO3H (acide sulfonique), ou un groupe COOR, où R représente un radical (C1-C16)alkyle, (C2-C16)alkényle, (C2- C16)alkynyle, (C6-C14)aryl, ou hétéroaryle. De préférence, R3 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe COOH (acide) ou un groupe COOR, où R représente un radical (C1-C6)alkyle, de préférence méthyle ou éthyle.
De manière préférentielle, les composés de formule (I) présentent au moins une ou deux des, de préférence toutes les, caractéristiques suivantes :
- m est 1 ,
- n est 1 ,
- A représente un atome d'oxygène, un groupe NCOOR9, ou N+H2,
- R1 représente un atome d'hydrogène,
- R2 représente un atome d'hydrogène, R4 représente un atome d'hydrogène, R5 représente un atome d'hydrogène, R6 représente un atome d'hydrogène, R8 représente un atome d'hydrogène,
- R3 représente un atome d'hydrogène, un groupe COOH ou COOR,
- R7 représente un atome d'hydrogène, un groupe COOH ou COOR,
- R9 représente un radical (C1-C6)alkyle, et/ou
- R, identique ou différent, représente un radical (C1-C6)alkyle.
Cette famille de composés est nommée, dans la présente description, BHPTC ("BHPTC" pour Bis-HydroxyPhényl Thiazole Carboxamide ou Bis- HydroxyPhényl Thiazole thioCarboxamide).
Selon un mode particulier de l'invention, les composés préférés sont indiqués ci-dessous :
Composé BHPTC-0 : 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-biséthylamine- dithiazolecarboxamide]-dibenzoate de méthyle
Figure imgf000009_0001
Composé BHPTC-S : 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-biséthylamine- dithiazolethiocarboxamide]-dibenzoate de méthyle
Figure imgf000009_0002
Composé BHPTC-OOH : Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy- biséthylamine-dithiazolcarboxamide] dibenzoïque
Figure imgf000010_0001
Composé BHPTC-SOH : Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy- bisethylamine-dithiazolthiocarboxamide] dibenzoïque
Figure imgf000010_0002
Composé BHPTC-OX : Λ/,Λ/'-[1 ,2-éthanediyl-bis(oxy-2,1-ethandiyléthyl)]-bis[2-(2- hydroxyphényl)]-4-dithiazolcarboxamide
Figure imgf000011_0001
Composé BHPTC-SU : Λ/,Λ/'-[1 ,2-éthanediyl-bis(oxy-2,1-ethandiyléthyl)]-bis[2-(2- hydroxyphényl)]-4-dithiazolthiocarboxamide
Figure imgf000011_0002
Composé BHPTC-ONBoc : 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert- butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1-amine}-dithiazole-carboxamide}-dibenzoate de méthyle
Figure imgf000012_0001
Composé BHPTC-ONH : 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène- bisammonium)diéthan-1 -amine]-dithiazole-carboxamide}-dibenzoate de méthyle, bis-trifluoroacétate
Figure imgf000012_0002
BHPTC-ONH + 2 CF,COO
Composé BHPTC-OOHNBoc : acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert- butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1-amine}-dithiazole-carboxamide}-dibenzoïque
Figure imgf000012_0003
BHPTC-OOHNBoc Composé BHPTC-OOHNH : acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène- bisammonium)diéthan-1-amine]-dithiazole-carboxamide}-dibenzoïque, bis- trifluoroacétate
Figure imgf000013_0001
BHPTC-OOHNH - 2 CFoCOO
Composé BHPTC-SNBoc : 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert- butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1-amine}-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoate de méthyle
Figure imgf000013_0002
Composé BHPTC-SNH : 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène- bisammonium)diéthan-1-amine]-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoate de méthyle, bis-trifluoroacétate N
Figure imgf000014_0001
BHPTC-SNH + 2 CFoCOO
Composé BHPTC-SOHNBoc : acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert- butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1-amine}-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoïque
Figure imgf000014_0002
BHPTC-SOHNBoc
Composé BHPTC-SOHNH : acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène- bisammonium)diéthan-1-amine]-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoïque, bis- trifluoroacétate
Figure imgf000015_0001
+ 2 CFoCOO
BHPTC-SOHNH
Les composés de la présente invention incluent les stéréoisomères (diastéréoisomères, énantiomères), purs ou en mélange, leurs mélanges racémiques, leurs isomères géométriques, leurs tautomères, leurs sels, leurs hydrates, leurs solvates, leurs formes solides ainsi que leurs mélanges.
Les composés selon l'invention peuvent contenir un ou plusieurs centres asymétriques. La présente invention inclut les stéréoisomères (diastéréoisomères, énantiomères), purs ou en mélange, ainsi que les mélanges racémiques.
La présente invention inclut également les isomères géométriques des composés selon l'invention.
Quand un mélange énantiomériquement pur (ou enrichi) est souhaité, il peut être obtenu soit par purification du produit final ou d'intermédiaires chiraux, soit par synthèse asymétrique suivant des méthodes connues de l'homme du métier (utilisant par exemple des réactifs et catalyseurs chiraux). Certains composés selon l'invention peuvent avoir différentes formes tautomères stables et toutes ces formes ainsi que leurs mélanges sont inclus dans l'invention.
La présente invention concerne également les sels pharmaceutiquement acceptables des composés selon l'invention, notamment ceux présentant une fonction COO", NH3 +, NH2 +, NHR+, NRR1H+ ou SO3". Ce terme désigne les sels peu ou non toxiques obtenus à partir de bases ou d'acides, organiques ou inorganiques. Les sels d'acides incluent les sels aussi bien organiques que minérales. Des exemples représentatifs d'acides minéraux peuvent être HCI, HBr, -
Hl, l'acide phosphorique, sulfurique, nitrique ou équivalents. Des exemples représentatifs d'acides organiques peuvent être l'acide formique, acétique, trichloroacétique, trifluoroacetique, propionique, benzoique, cinnamique, citrique, fumarique, glycolique, lactique, maleique, malique, malonique, mandélique, oxalique, pyruvique, salicylique, succinique, methanesulfonique, éthanesulfonique, tartarique, ascorbique, palmoique, éthanedisulfonique, gluconique, citraconique, aspartique, stéarique, palmitique, EDTA, glycolique, p-aminobenzoique, glutamique, benzenesulfonique, p-toluènesulfonique, les sulfates, nitrates, phosphates, perchlorates, borates, acétates, benzoates, hydroxynaphthoates, glycérophosphates, cétoglutarates ou équivalents. On peut se référer aux sels acceptables d'un point de vue pharmaceutique qui sont cités dans J. Pharm. Sci. 1977, 66, 2. Des exemples de sels métalliques incluent les sels de lithium, sodium, potassium, magnésium ou équivalents. Des exemples de sels d'ammonium et d'ammonium alkylés incluent des sels d'ammonium, méthylammonium, diméthylammonium, triméthylammonium, éthylammonium, hydroxyéthylammonium, diéthylammonium, butylammonium, tetraméthylammonium ou équivalents. Des exemples de bases organiques incluent la lysine, arginine, guanidine, diéthanolamine, choline ou équivalents. Pour la fonction NH2 +, on envisage en particulier des sels de l'acide trifluoroacetique. Ces sels peuvent être obtenus lors de l'étape de purification finale du composé selon l'invention ou par incorporation du sel sur le composé déjà purifié.
Certains composés selon l'invention et leurs sels pourraient être stables sous plusieurs formes solides. La présente invention inclut toutes les formes solides des composés selon l'invention ce qui inclut les formes amorphes, polymorphes, mono- et poly-cristallines.
Les composés selon l'invention peuvent exister sous forme libre ou sous forme solvatée, par exemple avec des solvants pharmaceutiquement acceptables tels que l'eau (hydrates) ou l'éthanol. Les composés selon l'invention marqués par un ou des isotopes sont également inclus dans l'invention : ces composés sont structurellement identiques mais diffèrent par le fait qu'au moins un atome de la molécule est remplacé par un isotope (radioactif ou non). Des exemples d'isotopes pouvant être inclus dans la structure des composés selon l'invention peuvent être choisis parmi l'hydrogène, le carbone, l'azote, l'oxygène, le soufre tels que 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 35S respectivement. Les isotopes radioactifs 3H et 14C sont particulièrement préférés car faciles à préparer et à détecter dans le cadre d'études de biodisponibilité in vivo des substances. Les isotopes lourds (tels que 2H) sont particulièrement préférés car ils sont utilisés comme standards internes dans des études analytiques.
La présente invention a aussi pour objet les composés tels que décrits ci- avant, à titre de médicaments.
La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique.
Il s'agit avantageusement d'une composition pharmaceutique ou médicament pour le traitement de pathologies ou désordres caractérisés par une surcharge en fer.
La surcharge en fer peut être limitée à un ou plusieurs types cellulaires ou tissulaires ou à un organe particulier ou, au contraire, peut être généralisée (plusieurs ou tous les tissus de l'organisme), telle que dans le cas de maladies génétiques, comme l'hémochromatose, l'anémie falciforme, ou la béta- thalassémie. La surcharge en fer (surcharge martiale) est soit symptômatique soit consécutive à un traitement, comme les transfusions régulières, souvent nécessaires pour les patients souffrant d'anémie falciforme ou de béta- thalassémie. Ces surcharges en fer ont de graves conséquences et peuvent conduire à une issue fatale pour les patients non traités (destruction progressive d'organes essentiels). Le fer se dépose dans l'hypophyse (ce qui peut entraîner un dérèglement général, une fatigue physique ou psychique, une perte de libido, l'impuissance, la dépression, mais aussi l'ostéoporose et une ménopause précoce chez la femme), le cœur (ce qui peut entraîner des myocardiopathies, ou une tachycardie), le pancréas (ce qui peut entraîner une destruction progressive du nombre de cellules produisant l'insuline résultant en diabète), et les articulations (ce qui peut entraîner des douleurs articulaires, arthrites, rhumatismes). Le foie, organe clé dans la régulation de l'homéostasie du fer (synthèse d'hepcidine, stockage du fer) est tout particulièrement affecté par les surcharges en fer (ce qui peut entraîner une fibrose, une cirrhose ou un cancer du foie). On a constaté également une répartition anormale du fer dans les mitochondries dans certaines pathologies, comme l'ataxie de Friedreich. Ainsi, les composés selon l'invention peuvent être utilisés pour traiter l'une des pathologies ou l'un des désordres indiqués ci-dessus dont l'une des causes ou des symptômes serait une surcharge en fer.
La surcharge en fer peut donc aussi être limitée à un organe, tel que le cœur, les poumons, le foie, le pancréas, le cerveau ou les reins. Ainsi, ces surcharges localisées peuvent aboutir à des désordres neurologiques ou neurodégénératifs, tels que la maladie d'Alzheimer, de Parkinson, de Huntington, des neuroferritinopathies, la sclérose latérale amyotrophique, l'ataxie de Friedreich ou la sclérose en plaques. Ainsi, les composés selon l'invention peuvent être utilisés pour traiter l'une des pathologies indiquées ci-dessus.
La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique ou médicament pour le traitement de pathologies néoplasiques ou de cancers. Les pathologies néoplasiques qui sont causées par une hyperprolifération cellulaire peuvent être bénignes ou malignes. Elles peuvent toucher un grand nombre de tissus, comme le cerveau, les poumons, l'œsophage, le nez, la bouche, la peau, l'estomac, le pancréas, le foie, les ovaires, la vessie, la prostate, l'utérus, les testicules, le sein, le colon, les os, le système immunitaire (leucémies) et le système endocrinien.
L'invention a pour objet une composition pharmaceutique ou médicament pour le traitement de tumeurs ou de cancers, en particulier: cancer du sein, cancer du poumon, cancer de l'intestin grêle, cancer du colon et du rectum, cancer des voies respiratoires, de l'oropharynx et de l'hypopharynx, cancer de l'oesophage, cancer du foie, cancer de l'estomac, cancer des canaux biliaires, cancer de la vésicule biliaire, cancer du pancréas, cancers des voies urinaires y compris rein, urothélium et vessie, cancers du tractus génital féminin y compris le cancer de l'utérus, du col de l'utérus, des ovaires, chloriocarcinome et trophoblastome; cancers du tractus génital masculin y compris cancer de la prostate, des vésicules séminales, des testicules, tumeurs des cellules germinales; cancers des glandes endocrines y compris cancer de la thyroïde, de l'hypophyse, des glandes surrénales ; cancers de la peau y compris hémangiomes, mélanomes, sarcomes, incluant le sarcome de Kaposi ; tumeurs du cerveau, des nerfs, des yeux, des méninges, incluant astrocytomes, gliomes, glioblastomes, rétinoblastomes, neurinomes, neuroblastomes, schwannomes, méningiomes ; tumeurs malignes hématopoïétiques ; leucémies telles que leucémie aigϋe lymphoïde, leucémie aigϋe myéloïde, leucémie myéloïde chronique, leucémie lymphoïde chronique, chloromes, plasmocytomes, leucémies des cellules T ou B, lymphomes non hodgkiniens ou hodgkiniens, myélomes, ou hémopathies malignes diverses.
L'invention réside également dans une méthode de traitement de pathologies ou de désordres tels que décrits ci-dessus de sujets atteints de tels pathologies ou désordres, comprenant l'administration à ces sujets d'une quantité thérapeutiquement efficace d'au moins un composé de formule (I).
Le terme « traitement » (ou « traiter ») désigne le traitement curatif, symptomatique ou préventif. Les composés de la présente invention peuvent ainsi être utilisés chez des sujets (comme les mammifères, en particulier humains) atteints d'une maladie déclarée. Les composés de la présente invention peuvent aussi être utilisés pour retarder ou ralentir la progression ou prévenir une progression plus en avant de la maladie, améliorant ainsi la condition des sujets. Les composés de la présente invention peuvent enfin être administrés aux sujets non malades, mais qui pourraient développer normalement la maladie ou qui ont un risque important de développer la maladie.
Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un ou plusieurs excipients ou véhicules, acceptables sur le plan pharmaceutique. On peut citer par exemple des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations (liquides et/ou injectables et/ou solides) sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, les liposomes, les micelles, etc. Les compositions peuvent être formulées sous forme de suspensions injectables, gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, aérosols, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons.
Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être par exemple administrés de manière systémique, par voie orale, parentérale, par inhalation ou par injection, comme par exemple par voie intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, etc. Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple.
Il est entendu que le débit et/ou la dose injectée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie, du mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses (pour un sujet d'approximativement 70 kg) pouvant varier entre 50 mg et 10 g par administration, préférentiellement de 50 mg à 1 g par administration. Les administrations peuvent être quotidiennes ou répétées plusieurs fois par jour. D'autre part, les compositions selon l'invention peuvent comprendre, en outre, d'autres agents ou principes actifs.
L'invention a également pour objet des procédés de préparation des composés selon l'invention. Les composés de l'invention peuvent être préparés à partir de produits du commerce, en mettant en œuvre une combinaison de réactions chimiques connues de l'homme du métier. Les procédés selon l'invention présentent l'avantage d'être simple à mettre en œuvre et peuvent correspondre à un nombre limité d'étapes réactionnelles (par exemple, un maximum de 4 à 5 étapes).
La présente invention a ainsi pour objet un procédé de préparation des composés selon l'invention comprenant les étapes suivantes :
(i) une étape de condensation entre un 2-hydroxybenzonitrile, éventuellement fonctionnalisé sur le cycle phényle, et la cystéine,
(ii) une étape de couplage de deux composés obtenus à l'étape (i) avec une diamine symétrique, éventuellement suivie d'une étape de purification, en particulier par chromatographie,
(iii) une étape d'oxydation des cycles thiazoline du produit obtenu en (ii) en thiazoles, de préférence suivie d'une étape de purification, en particulier par chromatographie,
(iv) éventuellement, une réaction de thionation du produit obtenu en (iii) pour tranformer le produit de formule (I) avec X=O en un produit correspondant de formule (I) avec X=S, de préférence suivie d'une étape de purification, en particulier par chromatographie,
(v) éventuellement après l'étape (iii) ou (iv), saponification de l'ester pour obtenir le carboxylate correspondant.
(vi) Dans le cas ou la diamine utilisée en (ii) est la 2, 2'-{éthylènebis[(tert- butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1 -aminé, les étapes (iii), (iv) ou (v) peuvent être suivie d'un traitement en milieu acide permettant de préparer les sels de bis-trifluoroacétate d'ammonium correspondants.
Selon un mode particulier de l'invention, le procédé comprenant les étapes (i) et (ii) telles que décrites ci-avant permet d'obtenir des composés de type thiazoline de formule (II) suivante :
Figure imgf000022_0001
(H) dans laquelle :
R1-R8, X, A, n et m sont tels que définis précédemment.
De préférence, dans le cadre de l'obtention de composés de formule (II), l'étape (ii) du procédé est suivie d'une étape de purification, en particulier par chromatographie.
Une description détaillée des procédés de préparation des composés spécifiques identifiés ci-dessus est donnée dans les exemples.
DESCRIPTION DES FIGURES
Figure 1 : Spectre de masse du complexe ferrique de BHPTC-O
Figure 2 : Profil de sélectivité cationique du ligand BHPTC-O
Figure 3 : effet cytoprotecteur du composé BHPTC-O
Figure 4 : effet cytoprotecteur des composés BHPTC-O et BHPTC-OOH.
Comparaison avec le Desferal (DFO).
Figure 5 : cytotoxicité du composé BHPTC-O
Figure 6 : comparaison de l'effet cytotoxique du BHPTC-O et du BHPTC-S
Figure 7 : comparaison de l'effet cytotoxique du BHPTC-O et du BHPTC-S
Figure 8 : comparaison de l'effet cytotoxique du BHPTC-O, du BHPTC-OOH et du
Desferal (DFO)
Figure 9 : comparaison de l'effet du BHPTC-O et du BHPTC-S sur la viabilité cellulaire
Figure 10 comparaison de l'effet du BHPTC-O, du BHPTC-OOH et du Desferal
(DFO) sur la viabilité cellulaire
Figure 11 : comparaison de l'effet du BHPTC-O et du BHPTC-S sur la réplication de l'ADN D'autres avantages et aspects de l'invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.
EXEMPLES
Les pourcentages mentionnés sont exprimés en poids, sauf mention contraire.
Abbréviations utilisées :
DBU : 1 ,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ène.
DMSO : Diméthylsulfoxyde.
EDCI : Λ/-(3-diméthylaminopropyl)-Λ/'-éthylcarbodiimide.
NTA : Acide nitriloacétique
LDH : Lactate deshydrogénase
RMN : Résonance Magnétique Nucléaire.
TFA : Acide trifluoroacétique
Matériels et Méthodes pour la partie chimie : Toutes les expériences sont réalisées sous atmosphère d'argon. Les solvants utilisés anhydres ne sont pas distillés mais achetés directement sous leur forme anhydre commerciale. Sauf mention particulière, les solvants sont utilisés sous leur forme commerciale avec un taux de pureté supérieur à 99%. Le contrôle des réactions est effectué à l'aide de plaques de gel de silice Merck 6OF254 déposé sur feuilles d'aluminium. Les plaques sont révélées à l'aide d'une lampe UV (λ = 254 nm ou λ = 365 nm) et d'un réactif à base de KMnO4. Les BHPTC, quant à eux, sont révélés par une solution hydrométhanolique à 5% de FeCU. Les purifications sur colonnes chromatographiques ont été réalisées sur de la silice Merck Kiesel gel 60 (0,063 - 0 , 200 mm). Les spectres RMN ont été enregistrés sur un spectromètre de type Bruker Avance 300 (300 MHz pour 1H et 75 MHz pour 13C). La calibration des spectres RMN s'effectue à partir du pic résiduel du solvant non deutéré. Les multiplicités des signaux sont exprimées de la façon suivante : s (singulet), d (doublet), t (triplet), q (quadruplet), p (pentuplet) et m (multiplet). Une multiplicité suivie de la lettre I indique que le signal est élargi et une multiplicité précédée de la lettre d signifie que le signal est dédoublé. Les expériences de spéctrométrie de masse de routine et à haute résolution ont été réalisées par électronébulisation grâce à un spectromètre MicroToF Bruker.
EXEMPLE 1. Synthèse du composé BHPTC-O
Méthode: Acide 2-(2-hydroxy-5-methoxycarbonyl-phenyl)-4,5-dihydro- thiazole-4-carboxylique.
Une solution de 3-cyano-4-hydroxy-methylbenzoate (1000 mg, 5,65 mmoles) et de L-cystéine (1589 mg, 13,11 mmoles, 2,32 équivalents) dans un mélange de méthanol (32 ml_) et de tampon phosphate (pH 6,4 ; 0,1 N, 20 ml_) est chauffée à 600C pendant 16 h. Le mélange est ramené à température ambiante pour être évaporé sous pression réduite. Le résidu spongieux ainsi obtenu est dissout dans l'eau (100 mL) avant lavage par un mélange 2:1 de cyclohexane et de diéthylether (75 mL). La phase aqueuse est ensuite ajustée à un pH entre 2,0-3,0 par addition d'acide citrique solide. La suspension obtenue est ensuite extraite par CH2CI2 (3 x 75 mL) puis les phases organiques sont rassemblées pour être séchées sur Na2SO4, filtrées puis évaporées sous pression réduite. La thazoline recherchée (1434 mg ; 5,10 mmole, rendement : 90 %) est ainsi isolée à l'état d'une poudre cristalline jaune, utilisée sans autre purification pour la suite de la synthèse.
Formule Brute : C12H11NO5S. Masse molaire : 281 ,28 g. mole"1. Point de fusion :
184-1860C.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,64-3,81 (m, 1 H); 3,84 (s, 3H); 5,51 (dd, J
= 7,5; 9,6 Hz, 1 H); 7,10 (d, J = 9,3 Hz, 1 H); 7,98-8,02 (m, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 33,7; 52,1 ; 76,1 ; 115,5; 117,5; 120,6;
131 ,7; 134,3; 162,2; 165,1 ; 171 ,0; 172,0.
BHPTC-O. Une solution de 2,2'-(éthylènedioxy)bis-(éthylamine) (134 mg, 0,93 mmole) dans le CH2CI2 (20 mL) est ajoutée goutte-à-goutte à température ambiante (25-27°C) à une solution d'acide 2-(2-hydroxy-5-méthoxycarbonyl- phényl)-4,5-dihydro-thiazole-4-carboxylique (565 mg ; 2,01 mmoles ; 2,16 équivalents) et de EDCI (463 mg, 2,41 mmoles, 2,59 équivalents) dans le CH2CI2 (30 mL). La solution est agitée pendant 16 h à 25°C avant d'être lavée par une solution de HCI 0,5N (50 mL). La phase organique est lavée à l'eau (50 mL) avant d'être séchée sur Na2SO4, filtrée avant que les solvants soient éliminés sous pression réduite. La dithiazoline ainsi obtenue est dissoute dans du CH2CI2 (50 ml_) puis de la DBU (546 μl_, 555 mg, 3,65 mmoles, 3,96 équivalents) et du CBrCI3 (315 μl_, 634 mg, 3,20 mmoles, 3,50 équivalents) sont ajoutés successivement. La solution obtenue est agitée 14 h sous argon à 24°C. Le milieu réactionnel est adsorbé sur de la silice démétallée avant d'être chromatographié sur une colonne de silice démétallée (30 g de SiO2, éluant de charge : CH2CI2, éluant de migration : CH2CI2/EtOH : 95/5). Le solide jaune pale obtenu après évaporation des solvants est lavé avec de l'éthanol bouillant avant d'être filtré puis séché sous pression réduite. Le BHPTC-O (444 mg, 0,66 mmole, rendement : 71 % sur les deux étapes) est isolé à l'état de poudre blanche.
Formule Brute : C3oH30N4OioS2. Masse molaire : 670,71 g. mole"1.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,38-3,61 (m, 12H) ; 3,83 (s, 6H) ; 7,12 (d,
J = 8,6 Hz, 2H) ; 7,90 (dd, J = 2,3 ; 8,6 Hz, 2H) ; 8,28 (s, 2H) ; 8,51 (t, J = 5,7 Hz,
2H) ; 8,88 (d, J = 2,3 Hz, 2H) ; 12,07 (si, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 38,3 ; 51 ,9 ; 69.0 ; 69,6 ; 116,6 ; 119,2 ;
121 ,0 ; 124,6 ; 129,5 ; 131 ,9 ; 149,0 ; 159.0 ; 160,7 ; 161 ,5 ; 165,8.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 671 (M+H+), 693 (M+Na+), 709
(M+K+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé : 671 ,1359 (M+H+), m/z calculé pour C30H31 N4Oi0S2 : 671 ,1476.
Le composé BHPTC-O identifié ci-dessus est ainsi préparé selon le schéma réactionnel 1 suivant en utilisant le 3-cyano-4-hydroxy-methylbenzoate comme produit de départ (dont la synthèse est décrite dans la référence f):
Figure imgf000026_0001
HS-^
Figure imgf000026_0002
rBrïd-εEtisni 30%
Figure imgf000026_0003
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Schéma 1
EXEMPLE 2. Synthèse des composés BHPTC-S et BHPTC-OOH
Méthode:
BHPTC-S. Le BHPTC-O (350 mg, 0,52 mmole) et le réactif de Lawesson (422 mg, 1 ,04 mmole, 2,00 équivalents) sont dissouts dans du toluène anhydre (20 ml_) et la suspension obtenue est chauffée à reflux (1100C) durant 2 h. Le mélange est ramené à température ambiante puis le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu huileux est ensuite dissout dans du CH2CI2 (50 mL) avant des lavages successifs à l'eau (30 mL), avec une solution aqueuse saturée en NaHCOs (30 ml_) puis de saumure (30 ml_). La phase organique est ensuite séchée sur Na2SO4, filtrée puis le solvant est éliminé sous pression réduite. Après purification par chromatographie sur une colonne de silice démétallée (30 g de Siθ2, MeOH/CH2CI2 : 1/99), le BHPTC-S (351 mg, 0,50 mmole, rendement : 96%) est isolé sous la forme d'une fine poudre jaune vif.
Formule brute : C3OH3ON4O8S4. Masse molaire : 702,84 g. mole"1.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,68-3,97 (m, 12H) ; 3,83 (s, 6H) ; 7,12 (d,
J = 8,6 Hz, 2H) ; 7,90 (dd, J = 2,2 ; 8,6 Hz, 2H) ; 8,45 (s, 2H) ; 8,90 (d, J = 2,2 Hz,
2H) ; 10,36 (t, J = 5,7 Hz, 2H) ; 12,10 (si, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 44,6 ; 51 ,9 ; 67,3 ; 69,7 ; 116,5 ; 119,2 ;
121 ,0 ; 127,2 ; 129,5 ; 132,3 ; 152,7 ; 159,1 ; 161 ,1 ; 165,8 ; 186,1.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 703 (M+H+), 725 (M+Na+), 741
(M+K+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé : 703,1013 (M+H+), m/z calculé pour C30H3I N4O8S4 : 703,1019.
BHPTC-OOH. Le BHPTC-O (257 mg, 0,38 mmole) est suspendu dans un mélange de THF (30 mL) et d'une solution aqueuse de NaOH 1 N (30 mL). Le mélange est chauffé à 700C durant 4 h. Le mélange est ramené à température ambiante avant d'être dilué avec de l'eau (50 mL) et de l'éther diéthylique (100 mL). Après une agitation vigoureuse, les deux phases sont séparées. Le pH de la phase aqueuse est ajusté à pH = 1 par addition de HCI 1 N. Le précipité qui se forme est récupéré par filtration, rincé à l'eau glacée avant d'être séché sous pression réduite. Le BHPTC-OOH (160 mg, 0,25 mmole, rendement : 65%) est isolé sous la forme d'une fine poudre blanche.
Formule brute : C28H2BN4Oi0S2. Masse molaire : 642,66 g. mole"1.
1H-RMN (300 MHz,DMSO-d6) δ ppm = 3,45-3,60 (m, 12H) ; 7,12 (d, J = 8,4 Hz,
2H) ; 7,90 (dd, J = 2,1 , 8,4 Hz, 2H) ; 8,28 (s, 2H) ; 8,52 (t, J = 5,7 Hz, 2H) ; 8,88 (d,
J = 2,1 Hz, 2H) ; 11 ,97 (si, 2H) ; 12,81 (si, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 38,2 ; 68,6 ; 69,3 ; 116,1 ; 119,0 ; 122,0 ;
124,4 ; 130.0 ; 132,3 ; 148,9 ; 158,6 ; 160,7 ; 161 ,7 ; 166,8. Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 643 (M+H+), 665 (M+Na+), 681 (M+K+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 665,099 ([M + Na]+); m/z calculé POUr C2SH2BN4NaOi0S2: 675,071.
Les composés BHPTC-S et BHPTC-OOH identifiés ci-dessus sont ainsi préparés selon le schéma réactionnel suivant :
Figure imgf000028_0001
Schéma 2 EXEMPLE 3. Synthèse des composés BHPTC-OX et BHPTC-SU
Méthode:
BHPTC-OX. Une solution de 2,2'-(éthylènedioxy)bis-(éthylamine) (916 mg, 6,18 mmoles) dans le CH2CI2 (10 ml_) est ajouté goutte-à-goutte à température ambiante (25-27°C) à une solution d'acide 2-(2-hydroxyphényl)-4,5-dihydro- thiazole-4-carboxylique (2755 mg, 12,36 mmoles, 2,00 équivalents) et de EDCI (2841 mg, 14,82 mmoles, 2,20 équivalents) dans le CH2CI2 (100 ml_). La solution est agitée pendant 16 h à 25°C avant d'être lavée par une solution de HCI 0.5N (100 ml_). La phase organique est lavée à l'eau (100 mL) avant d'être séchée sur Na2SO4, filtrée avant que les solvants soient éliminés sous pression réduite. La dithiazoline ainsi obtenue est dissoute dans du CH2CI2 (100 mL) puis de la DBU (2,68 mL, 2730 mg, 17,93 mmoles ; 4,00 équivalents) et du CBrCI3 (1 ,55 mL, 3112 mg, 15,69 mmoles, 3,50 équivalents) sont ajoutés successivement. La solution obtenue est agitée 6 h sous argon à 200C. Le milieu réactionnel est adsorbé sur de la silice démétallée avant d'être chromatographié sur une colonne de silice démétallée (40 g de SiO2, éluant de charge : CH2CI2, éluant de migration : CH2CI2/EtOH : 97/3). Le solide jaune pale obtenu après évaporation des solvants est recristallisé dans un mélange cyclohexane/ CH2CI2. Le BHPTC-OX (1841 mg, 3,32 mmoles, rendement : 54% sur deux étapes) est isolé à l'état de poudre cristalline blanche.
Formule brute : C26H26N4OeS2. Masse molaire : 554,63 g. mole"1. Point de fusion :
165-167°C.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,36-3,60 (m, 12H) ; 6,96 (m, 2H) ; 7,03
(dd, J = 8,1 ; 0,6 Hz, 2H) ; 7,32 (ddd, J = 9,0 ; 7,2; 1 ,8 Hz, 2H) ; 8,23 (s, 2H) ; 8,31
(dd, J = 7,8 ; 1 ,5 Hz, 2H) ; 8,54 (tl, J = 6,0 Hz, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 38,0 ; 68,9 ; 69,5 ; 116,4 ; 119.0 ; 119,3 ;
123,8 ; 127,8 ; 131 ,3 ; 148,6 ; 155.0 ; 160,7 ; 162,7. BHPTC-SU. Le BHPT-OX (150 mg, 0,27 mmole) et le réactif de Lawesson (219 mg, 0,54 mmole, 2,00 équivalents) sont dissouts dans du toluène anhydre (10 ml_) et la suspension obtenue est chauffée à reflux (1100C) durant 2 h 30 mn. Le mélange est ramené à température ambiante puis le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu huileux est ensuite chromatographié sur une colonne de silice démétallée (30 g de SiO2, MeOH/CH2CI2 : 0,5/99,5 puis 1/99) le BHPTC- S (81 mg, 0,14 mmole, rendement : 51 %) est isolé sous la forme d'une fine poudre jaune.
Formule brute : C2GH25N4O4S4. Masse molaire : 585,77 g. mole"1.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,62 (s, 4H) ; 3,75 (t, J = 5,7 Hz, 4H) ; 3,95
(q, J = 5,8 Hz, 4H) ; 6,97 (m, 2H) ; 7,03 (dd, J = 8,2 ; 0,7 Hz, 2H) ; 7,33 (ddd, J =
7,3 ; 5,7 ; 1 ,7 Hz, 2H) ; 8,38 (dd, J = 8,0 ; 1 ,7 Hz, 2H) ; 8,42 (s, 2H) ; 10,42 (tl, J =
5,7 Hz, 2H) ; 11 ,13 (si, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 44,4 ; 67,3 ; 69,6 ; 116,4 ; 119,1 ; 119,4 ;
126,6 ; 128,0 ; 131 ,4 ; 152,4 ; 155,2 ; 162,3 ; 186,2.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 585 (M").
Les composés BHPTC-OX et BHPTC-SU identifiés ci-dessus sont donc préparés selon le schéma réactionnel suivant à partir de l'acide 2-(2-hydroxyphényl)-4,5- dihydro-thiazole-4-carboxylique dont la synthèse a été décrite antérieurement dans la littérature (réf. g) :
Figure imgf000031_0001
Schéma 3
EXEMPLE 4. Synthèse du composé BHPTC-SOH
BHPTC-SOH. Le BHPTC-S (63 mg, 89 μmoles) est suspendu dans un mélange de dioxanne (5 m L) et d'une solution aqueuse de KOH 1 N (5 mL). Le mélange est chauffé à 600C durant 2 h. Le mélange est ramené à température ambiante avant d'être dilué avec de l'eau (50 mL) et du CH2CI2 (30 mL). Après une agitation vigoureuse, les deux phases sont séparées. Le pH de la phase aqueuse est ajusté à pH = 1 par addition de HCI 1 N. Le précipité qui se forme est récupéré par filtration, rincé à l'eau glacée avant d'être séché sous pression réduite. Le BHPTC- SOH (35 mg, 52 μmoles, rendement : 59%) est isolé sous la forme d'une fine poudre jaune pale.
Formule brute : C28H26N4O8S4. Masse molaire : 674,79 g. mole"1.
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 3,66 (s, 4H) ; 3,73 (t, J = 5,7 Hz, 4H) ; 3,94
(q, J = 5,8 Hz, 4H) ; 7,12 (d, J = 8,7 Hz, 2H) ; 7,91 (dd, J = 2,1 ; 8,7 Hz, 2H) ; 8,45
(s, 2H) ; 8,91 (d, J = 2,1 Hz, 2H) ; 10,38 (t, J = 5,7 Hz, 2H) ; 12,06 (si, 2H) ; 12,77
(si, 2H).
13C-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 44,4 ; 67,2 ; 69,7 ; 116,3 ; 119,0 ; 122,0 ;
127,0 ; 129,7 ; 132,4 ; 152,6 ; 158,9 ; 161 ,3 ; 166,9 ; 186,1.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 673 (M"). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 675,070 ([M + H]+); m/z calculé pour C2SH2ZN4O8S4: 675,071.
EXEMPLE 5. Synthèse du composé BHPTC-ONBoc
De l'EDCI (359 mg, 1 ,87 mmole) est ajouté à une solution de 2, 2'- {éthylènebis[(tert-butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1 -aminé (réf. h) (271 mg, 0,78 mmole) et d'acide 2-(2-hydroxy-5-méthoxycarbonylphényl)-4,5-dihydrothiazol-4- carboxylique (440 mg, 1 ,56 mmole) dans le CH2CI2 (15 ml_). Le milieu réactionnel est agité 16 h à 24°C sous argon puis le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu est suspendu dans l'eau (30 mL) puis le pH est ajusté à 2 par addition de HCI 1 N aqueux. Cette phase aqueuse phase est extraite par du CH2CI2 (3 x 30 mL) et les phases organiques sont rassemblées, séchées sur Na2SO4 puis les solvants sont éliminés sous pression réduite. Le résidu huileux est ensuite dissout dans CH2CI2 (40 mL), puis de la DBU (0,41 mL, 2,74 mmoles) et du CBrCU (0,30 mL, 3,04 mmoles) sont ajoutés successivement à 0 0C. Le mélange réactionnel est ensuite agité pendant 16 h à 24°C sous argon avant d'être adsorbé sur de la silice démétallée puis chromatographié sur une colonne de silice démétallée (gradient CH2CI2 → 97:3 → 95:5 CH2CI2-EtOH) permettant ainsi d'isoler le composé BHPTC-ONBoc (475 mg, 0,55 mmole, rendement : 70% sur deux étapes) sous la forme d'un solide amorphe de couleur jaune. Formule brute : C4OH4SN6Oi2S2. Masse molaire : 868,97 g. mole"1
1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1 ,31 (s, 18 H) ; 3,50-3,20 (m, 12 H) ; 3,83
(s, 6 H) ; 7,12 (d, J = 8,6 Hz, 2 H) ; 7,91 (dd, J = 8,6 ; 2,2 Hz, 2 H) ; 8,28 (s, 2 H) ;
8,47-8,61 (m, 2 H) ; 8,90 (d, J = 2,2 Hz, 2 H) ; 12,02 (si, 2 H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 27,9; 37,6 ; 39,1 ; 39,9 ; 51 ,9 ; 78,6 ; 78,9 ;
116,6 ; 119,3 ; 121 ,0 ; 124,6 ; 129,6 ; 132,2 ; 149,1 ; 154,8 ; 155,0 ; 159,0 ; 160,9 ;
161 ,5 ; 165,8.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 769,2 ([M - Boc + 2H]+), 867,1
([M - H]"). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 869,2822 ([M + H]+); m/z calculé pour C40H49N6Oi2S2: 869,2844.
EXEMPLE 6. Synthèse du composé BHPTC-ONH
Le BHPTC-ONBoc (113 mg, 0,13 mmole) est dissout dans un mélange de TFA/CH2CI2 5% (2 m L) puis la solution obtenue est agitée 5 h à 23°C. Les solvants sont évaporés sous pression réduite puis de l'eau est ajoutée (5 mL). La congélation puis la lyophilisation de cette solution conduit au sel double de trifluoroacétate du BHPTC-ONH (93 mg, 0,10 mmole, rendement : 80%), isolé sous la forme d'une poudre blanche.
Formule brute : Cs4H34F6N6Oi2S2. Masse molaire : 896, 79 g. mole"1
1H-RMN (300 MHz, CD3OD) δ ppm = 3,44-3,48 (m, 4 H) ; 3,65 (s, 4 H) ; 3,80-3,84
(m, 4 H) ; 6,97 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) ; 3,89 (s, 6 H) ; 7,89 (dd, J = 8,7 ; 2,4 Hz, 2 H) ;
8,23 (s, 2 H) ; 8,65 (d, J = 2,4 Hz, 2 H).
13C-RMN (75 MHz, CD3OD) δ ppm = 37,4 ; 44,9 ; 49,9 ; 52,7 ; 117,6 ; 120,0 ;
123,0 ; 126,4 ; 131 ,2 ; 133,8 ; 149,0 ; 160,7 ; 165,3 ; 165,5 ; 168,1.
19F-RMN (188 MHz, CD3OD) δ ppm = -73,4.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 669,1 ([M + H]+), 667,0 ([M -
H]"). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé :
669,1805 ([M + H]+); m/z calculé pour C30H33N6O8S2 : 669,1796.
Figure imgf000034_0001
Shéma 4
EXEMPLE 7. Synthèse du composé BHPTC-OOHNBoc
Une solution aqueuse de KOH 1 M (6,4 mL) est ajoutée à une solution de BHPTC- ONBoc (100 mg, 0,12 mmole) dans le dioxane (6,4 mL), puis le mélange est agité 5 h à 60 0C. Le milieu réactionnel est ramené à température ambiante, dilué avec de l'eau (25 mL) puis lavé avec du CH2CI2 (25 mL) avant de traiter la phase aqueuse par une solution aqueuse de HCI 1 N pour atteindre pH = 1. Le précipité qui se forme est récupéré par filtration avant d'être séché sous vide. Le composé BHPTC-OOHNBoc est ainsi obtenu (66 mg, 0,08 mmole, rendement : 68%) sous la forme d'une poudre jaune pâle. Formule brute : C3SH44N6Oi2S2. Masse molaire : 840,92 g. mole"1 1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1 ,30 (s, 18 H) ; 3,18-3,52 (m, 8 H) ; 3,56 (s, 4 H) ; 7,11 (d, J = 8,6 Hz, 2 H) ; 7,90 (dd, J = 8,6 ; 2,0 Hz, 2 H) ; 8,28 (s, 2 H) ; 8,46-8,64 (m, 2 H) ; 8,89 (d, J = 2,0 Hz, 2 H) ; 12,05 (si, 2 H) ; 12,63 (si, 2H). 13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 27,9 ; 37,6 ; 39,5 ; 40,3 ; 78,5 ; 78,9 ; 116,4 ; 119,1 ; 122,1 ; 124,5 ; 129,8 ; 132,4 ; 149,1 ; 154,9 ; 158,7 ; 160,9 ; 161 ,8 ;166,9.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 863,0 ([M + Na]+), 839,0 ([M - H]"), 796,0 ([M - COOH]"), 741 ,1 ([M - Boc + 2H]+), 739,0 ([M - Boc]"), 641 ,0 ([M - 2Boc + 3H]+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 841 ,2514 ([M + H]+); m/z calculé pour C38H45N6Oi2S2 : 841 ,2531.
EXEMPLE 8. Synthèse du composé BHPTC-OOHNH
Le BHPTC-OOHNBoc (64 mg, 76 μmoles) est dissout dans un mélange de
TFA/CH2CI2 5% (2 m L) puis la solution obtenue est agitée 3 h à 23°C. Les solvants sont évaporés sous pression réduite puis de l'eau est ajoutée (5 mL). La congélation puis la lyophilisation de cette solution conduit au sel double de trifluoroacétate du BHPTC-OOHNH (65 mg, 75 μmoles, rendement : 99%), isolé sous la forme d'une poudre blanche.
Formule brute : Cs2H30F6N6Oi2S2. Masse molaire : 868,73 g. mole"1
1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,16-3,32 (m, 4 H) ; 3,32 (s, 4 H) ; 3,56-
3,74 (m, 4 H) ; 7,15 (d, J = 8,6 Hz, 2 H) ; 7,92 (dl, J = 8,6 Hz, 2 H) ; 8,36 (s, 2 H) ;
8,46-8,70 (m, 2 H) ; 8,70-8,85 (m, 2 H) ; 8,93 (si, 2 H) ; 12,15 (si, 2 H) ; 12,77 (si,
2H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 35,6 ; 42,9 ; 47,2 ; 116,5 ; 119,1 ; 122,1 ;
125,3 ; 129,8 ; 132,6 ; 148,5 ; 159,3 ; 162,2 ; 162,3 ; 167,0.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 641 ,1 ([M + H]+), 321 ,1 ([M +
2H]2+), 312,1 ([M - OH + H]2+), 303,1 ([M + 2OH]2+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 641 ,1497 ([M + H]+); m/z calculé
POUr C28H29N6O8S2: 641 ,1483.
Figure imgf000036_0001
Schéma 5
EXEMPLE 9. Synthèse du composé BHPTC-SNBoc
Une solution de BHPTC-ONBoc (114 mg, 130 μmoles) et de réactif de Lawesson (131 mg, 0,32 mmole) dans le toluène anhydre (10 ml_) est portée à reflux sous agitation pendant 3 h. Le mélange réactionnel est ramené à température ambiante, les solvants sont évaporés sous pression réduite puis le résidu est dissout dans du CH2CI2 (15 ml_). La phase organique est succesivement lavée par de l'eau, puis par une solution aqueuse saturée en NaHCθ3 et enfin par de la saumure. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée puis les solvants sont éliminés sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur une colonne de silice démétallée (CH2CI2-EtOH 99:1) permettant ainsi d'isoler le BHPTC-SNBoc (49 mg, 54 μmoles, rendement : 42%) sous la forme d'un solide amorphe incolore. Formule brute : C4OH4SN6Oi0S4. Masse molaire : 901 ,10 g. mole"1
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6, 333 K) δ ppm = 1 ,32 (s, 18 H) ; 3,41 (s, 4 H) ; 3,51-
3,62 (m, 4 H) ; 3,83 (s, 6 H) ; 3,86-4,04 (m, 4 H) ; 7,13 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) ; 7,92
(dd, J = 8,7 ; 2,1 Hz, 2 H) ; 8,46 (s, 2 H) ; 8,86-8,99 (m, 2 H) ; 10,32-10,54 (m, 2
H) ; 11 ,97 (si, 2 H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 27,9 ; 43,4 ; 44,1 ; 44,6 ; 51 ,9 ; 78,6 ; 79,1 ;
116,5 ; 119,3 ; 121 ,0 ; 127,1 ; 129,8 ; 132,3 ; 152,8 ; 154,6 ; 155,3 ; 159,1 ; 161 ,1 ;
165,8 ; 186,4.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 923,8 ([M + Na]+), 899,0 ([M -
H]"), 802,0 ([M - Boc + 2H]+), 801 ,0 ([M - Boc]"). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 901 ,2362 ([M + H]+); m/z calculé pour
C40H49N6Oi0S4: 901 ,2388.
EXEMPLE 10. Synthèse du composé BHPTC-SNH
Le BHPTC-SNBoc (68 mg, 75 μmoles) est dissout dans un mélange de TFA/CH2CI2 5% (2 ml_) puis la solution obtenue est agitée 6 h à 23°C. Les solvants sont évaporés sous pression réduite puis de l'eau est ajoutée (5 mL). La congélation puis la lyophilisation de cette solution conduit au sel double de trifluoroacétate du BHPTC-SNH (63 mg, 68 μmoles, rendement : 90%), isolé sous la forme d'une poudre blanche.
Formule brute : Cs4H34F6N6Oi0S4. Masse molaire : 928,92 g. mole"1
1H-RMN (300 MHz, CD3OD) δ ppm = 3,54 (s, 4 H) ; 3,56 (tl, J = 5,7 Hz, 4 H) ; 3,90
(s, 6 H) 4,29 (tl J = 5,7 Hz, 4 H) ; 7,04 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) ; 7,94 (dd, J = 8,7 ; 2,4
Hz, 2 H) ; 8,50 (s, 2 H) ; 8,89 (d, J = 2,4 Hz, 2 H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 41 ,5 ; 43,2 ; 45,3 ; 52,1 ; 116,7 ; 119,3 ;
121 ,0 ; 128,0 ; 129,8 ; 132,5 ; 152,7 ; 159,4 ; 161 ,4 ; 165,9 ; 187,6.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 701 ,2 ([M + H]+).
Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé
701 ,1339 ([M + H]+); m/z calculé pour C30H33N6O6S4: 701 ,1339.
Figure imgf000038_0001
Schéma 6
EXEMPLE 11. Synthèse du composé BHPTC-SOHNBoc
Une solution aqueuse de KOH 1 M (7,5 ml_) est ajoutée à une solution de BHPTC-
SNBoc (124 mg, 0,14 mmole) dans le dioxane (7,5 ml_), puis le mélange est agité
6 h à 60 0C. Le milieu réactionnel est ramené à température ambiante, dilué avec de l'eau (25 ml_) puis lavé avec du CH2CI2 (25 ml_) avant de traiter la phase aqueuse par une solution aqueuse de HCI 1 N pour atteindre pH = 1. Le précipité qui se forme est récupéré par filtration avant d'être séché sous vide. Le composé
BHPTC-SOHNBoc est ainsi obtenu (88 mg, 0,10 mmoles, rendement : 72 %) sous la forme d'une poudre jaune.
Formule brute : 038H44N6Oi 0S4. Masse molaire : 873,05 g. mole"1
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6, 333 K) δ ppm = 1 ,32 (s, 18 H) ; 3,39 (s, 4 H) ; 3,50-
3,59 (m, 4 H) ; 3,86-4,02 (m, 4 H) ; 7,12 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) ; 7,91 (dd, J = 8,7 ; 1 ,8 s<O
Hz , 2 H) ; 8,45 (s, 2 H) ; 8,85-8,95 (m, 2 H) ; 10,32-10,50 (m, 2 H) ; 11 ,82 (si, 2 H) ; 12,51 (si, 2H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 27,9; 43,9 ; 44,3 ; 44,6 ; 79,0 ; 116,3 ; 119,1 ; 122,2 ; 126,9 ; 130,0 ; 132,5 ; 152,8 ; 153,0 ; 158,8 ; 161 ,4 ; 166,9 ; 186,5. Spectrométrie de masse (Electronébulisation) : m/z 871.4 ([M - H]"), 855.3 ([M - OH]"), 772.4 ([M - Boc]"). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 871 ,1928 ([M - H]"); m/z calculé pour C38H43N6Oi0S4: 871 ,1929.
EXEMPLE 12. Synthèse du composé BHPTC-SOHNH
Le BHPTC-SOHNBoc (60 mg, 68 μmoles) est dissout dans un mélange de
TFA/CH2CI2 5% (2 ml_) puis la solution obtenue est agitée 3 h à 24°C. Les solvants sont évaporés sous pression réduite puis de l'eau est ajoutée (5 mL). La congélation puis la lyophilisation de cette solution conduit au sel double de trifluoroacétate du BHPTC-SOHNH (61 mg, 67 μmoles, rendement : 99%), isolé sous la forme d'une poudre jaune pâle.
Formule brute : C32H30F6N6Oi0S4. Masse molaire : 900.87 g. mole"1
1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3,33 (s, 4 H) ; 3,38-3,47 (m, 4 H) ; 4,08-
4,21 (m, 4 H) ; 7,14 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) ; 7,93 (dd, J = 8,7 ; 2,4 Hz , 2 H) ; 8,55 (s,
2 H) ; 8, 82-9,06 (m, 2 H) ; 8,95 (d, J = 2,4 Hz, 2 H) ; 8,79 (tl, J = 5,7 Hz, 2 H) ;
12,21 (si, 2 H) ; 12,24 (si, 2H).
13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 41 ,2 ; 42,9 ; 45,2 ; 116,5 ; 119,1 ; 122,1 ;
128,0 ; 129,9 ; 132,7 ; 152,6 ; 159,1 ; 161 ,6 ; 167,0 ; 187,7.
Spectrométrie de masse (Electronébulisation) :m/z 673,1 ([M + H]+). Spectrométrie de masse haute résolution (Electronébulisation) : m/z trouvé 673,1025 ([M + H]+); m/z calculé pour C28H29N6O6S4: 673,1026.
Figure imgf000040_0001
Schéma 7
EXEMPLE 13. Capacité des composés selon l'invention à complexer l'ion fer(lll) : exemple du BHPTC-O
Etude effectuée par spectrométrie de masse sur un appareil microTOF LC de Bruker Daltonics. Spectrométrie de masse haute résolution du BHPTC-O (Electronébulisation) : m/z trouvé : 671 ,1359 (M+H+), m/z calculé pour C30H31N4O10S2 : 671 ,1476 (voir exemple 1 ).
Figure 1 : Spectrométrie de masse du complexe ferrique de BHPTC-O
Spectrométrie de masse haute résolution du complexe de BHPTC-O avec Fe(III) (Electronébulisation) : m/z trouvé : 724,0595 (M-2H++Fe3+), m/z calculé pour C3oH2δN4θioS2Fe : 724,0591. La stoechiométrie du composé de formule (I) avec Fe(III) est donc de 1 : 1. EXEMPLE 14. Sélectivité de chélation des composés selon l'invention
Les chélateurs de fer sont actifs contre de nombreuses cibles biologiques chez l'être humain ce qui explique la toxicité de ces molécules, observés chez les patients traités sur de longues périodes. Si ce problème est considéré du point du vue du métal complexé, l'une des raisons principalement avancée est le manque de sélectivité du chélateur vis-à-vis des ions biologiques (réf. i). Ce manque de sélectivité conduit à la complexation, dans des proportions variables, du zinc, du cuivre, du nickel, du cobalt ou du manganèse ce qui a pour résultat une perturbation des processus métaboliques impliquant ces métaux. Il convient donc de vérifier que nos chélateurs sont capablent de complexer, préférentiellement le fer à tout autre métal d'intérêt biologique. Pour cela il a été mesuré les pMπ+ du ligand BHPTC-O, grandeur permettant de comparer la capacité du ligand à complexer l'ion métallique Mπ+ considéré (réf. j, réf. k)
A- Matériels et méthodes
Pour des raisons de solubilité, les propriétés physico-chimiques des ligands BHPTC et de leurs complexes métalliques ont été étudiées dans un mélange méthanol/eau (80/20 en poids). L'eau distillée est purifiée par un passage sur une colonne échangeuse d'ions (Bioblock Scientific R3-83002, M3-83006) puis sur du charbon actif (Bioblock Scientific ORC-83005). L'eau distillée ainsi que le méthanol (qualité spectroscopique, Merck, Uvasol®, p. a.) sont préalablement désoxygénés en utilisant de l'argon sans CO2 ni O2 (cartouche Sigma Oxiclear). Toutes les solutions stock ont été préparées en pesant les solides avec une balance AG 245 Mettler Toledo (précision : 0,01 mg). La dissolution complète du ligand BHPTC-O a été obtenue par sonication. La force ionique a été ajustée à 0,1 M avec du perchlorate de tétraéthylammonium (NEt4CIO4, Fluka, puriss). Les sels de perchlorate, combinés avec des solvants organiques, sont potentiellement explosifs et doivent être manipulés en petites quantités et avec les précautions d'usage. Les solutions stock (~ 1-5 x 10~2 M) de métaux sont préparées par dissolution des quantités appropriées des sels de perchlorate correspondants, dans un mélange méthanol/eau (80/20 en poids) pré-saturé par de l'argon. La solution stock de BHPTC-O est diluée avant usage dans une solution de HCIO4 (10~2 M; p[H] 2.0). Les mesures pour les titrations spectrophotométriques (absorption) de BHPTC-O par les différents métaux testés ont été effectuées dans des cuves en quartz Hellma quartz (trajet optique : 1 cm). Les spectres UV- visibles correspondants ont été enregistrés entre 220 to 800 nm sur un spectrophotomètre Cary 300 (Varian). Les titrations spectrofluorimétriques de BHPTC-O (λexc = 320 nm) par les différents métaux testés ont été effectuées dans le même type de cuve en quartz et enregistrées entre 300 et 700 nm sur un spectrofluorimètre Perkin-Elmer LS-50B. La source lumineuse utilisée est une lampe puisée au xénon (largeur à mi-pic < 10 μs, puissance de 20 kW). Les données spectrophotométriques et spectrofluorimétriques ont été affinées en utilisant les logiciels Specfit, Haltafall et/ou Origin 5.0. Les pMπ+ ont été établis en utilisant la relation pMnπ+ = -log[Mπ+]ιibre grâce logiciel Hyss conformément aux protocoles décrits antérieurement (réf. j, réf. k). Les conditions intégrées au logiciel sont les suivantes : [Mπ+]totai = 10"6 M, [BHPTC-O]totai = 10"5 M, pH = 7.4, / = 0.1 M (NEt4CIO4); 7 = 25.0(2) 0C.
B- Résultats
Figure 2 : Profil de sélectivité cationique du ligand BHPTC-O.
Cette expérience montre que si le ligand BHPTC-O chélate aussi le cuivre (II) (PCu2+ = 11 ,8), le nickel (II) (pNi2+ = 10,5), le cobalt (II) (pCo2+ = 9,5), le zinc (II) (pZn2+ = 8,8) ou le manganèse (II) (pMn2+ = 6,8), ce ligand complexe bien plus efficacement le fer(lll) (pFe3+ = 18,5).
C- Conclusion
Ces données classe les composés selon l'invention parmi les plus sélectifs décrits à ce jour (réf. I). En outre, le pFe3+ du ligand BHPTC-O approche les valeurs de pFe3+ établies pour de très bons ligands synthétiques du Fe(III) comme le N- TRENSOX (pFe3+ = 22,2) (réf. m), ou le TRENPYPOLS (pFe3+ = 23,6) (réf. n). Les pFe3+ et les sélectivités cationiques des autres BHPTC synthétisés est actuellement en cours d'établissement
EXEMPLE 15. Activité cytoprotectrice contre les surcharges en fer de composés selon l'invention
A- Matériels et Méthodes
Les chélateurs sont préalablement dissouts dans le DMSO pour constituer une solution mère qui sera ultérieurement diluée dans les milieux de culture. Le modèle cellulaire utilisé est la lignée HepaRG (demande de brevet FR20010009044 déposée le 06.07.2001 par l'INSERM) isolée à partir d'un carcinome hépato-cellulaire présentent la particularité de pouvoir se différencier dans des conditions de culture contrôlées. L'évolution des cultures de cellules HepaRG passe par une phase proliférative qui se prolonge après la confluence par une phase de différenciation. Deux types cellulaires peuvent être alors identifiés, l'un hépatocytaire exprimant des fonctions spécifiques du foie adulte (synthèse d'albumine, d'aldolase B, de transferrine, fonctions de détoxification) et l'autre épithélioïde biliaire. Les cellules HepaRG sont cultivées en atmosphère humide à 37°C, enrichie par 5% de CO2, dans du milieu E de Williams supplémenté par 10% de sérum de veau fœtal, de pénicilline-streptomycine (50 μg/mL), de glutamine (2x10"3 M), d'insuline bovine (5μg /mL) et d'hémisuccinate d'hydrocortisone (5x10"5 M).
Le test d'activité cytoprotectrice est mené sur des cellules HepaRG en phase de différentiation et se fonde sur l'évaluation de la toxicité par dosage de l'activité de la lactate-deshydrogénase (LDH), une enzyme cytoplasmique libérée dans le milieu de culture en cas d'altération membranaire. L'augmentation de la concentration extracellulaire de LDH est donc directement corrélé à la mort cellulaire. Le dosage colorimétrique de cette enzyme a été effectué au niveau intra- et/ou extra-cellulaire, grâce au kit « Cytotoxicity détection kit (LDH) » (Roche, Mannheim, Germany). Les dosages extra et intra-cellulaires de la LDH s'effectuent respectivement sur un volume de 20 μl_ de milieu de culture ou 20 μl_ de lysat cellulaire obtenu par sonication des cellules dans du tampon phosphate salin. Une gamme étalon est réalisée à partir d'une solution LDH de référence (Sigma) diluée, dans le milieu de culture sans sérum pour le dosage de LDH extra-cellulaire, et dans le tampon phosphate salin pour le dosage de LDH intracellulaire. La teneur en protéines totales des cultures est mesurée par la technique de Bradford. Les résultats sont exprimés en mUI de LDH par μg de protéines.
B - Résultats
Figure 3 : effet cytoprotecteur du composé BHPTC-O
L'exposition des cultures à 50 μM de Fe-NTA pendant 48 h (conditions mimant une surcharge massive en fer) augmente le taux extracellulaire de LDH qui passe de 0,3 mUI/μg protéine à 5,8 mUI/μg de protéine ; parallèlement, le taux intracellulaire de LDH passe de 19 mUI/μg de protéine à 0,1 mUI/μg de protéine. L'addition de 50 μM de BHPTC-O en même temps que le Fe-NTA dimininue de manière hautement significative la toxicité du fer dans la mesure où les concentrations extra et intracellullaires de LDH sont très proches des valeurs mesurées dans les cultures témoins.
Figure 4 : effet cytoprotecteur des composés BHPTC-O et BHPTC-OOH. Comparaison avec le Desferal (DFO).
Une comparaison de l'activité cytoprotectrice des chélateurs BHPTC-O, BHPTC- OOH et du Desferal (DFO) a été réalisée. L'addition de 50 μM de Fe-NTA au milieu de culture, conditions mimant une surcharge massive en fer, augmente 6,5 fois l'activité de la LDH extracellulaire dans les cultures de cellules HepaRG montrant ainsi l'effet délétère de ces conditions sur les hépatocytes. L'addition conjointe des chélateurs BHPTC-O ou BHPTC-OOH (50 μM) en présence de Fer- NTA (50 μM), permet de réduire significativement la toxicité du fer pour les cellules dans des proportions proches de l'expérience contrôle (dosage de la LDH extracellulaire sur des cellules HepaRG en culture sans additif). Cette activité cytoprotectrice est du même ordre que celle induite par le DFO. C - Conclusion
Les composés BHPTC-O et BHPTC-OOH présentent une activité cytoprotectrice significative sur des cellules HepaRG en phase de différentiation placées dans des conditions de surcharge en fer. L'activité observée est comparable à celle du Desferal, molécule considérée comme la référence pour cette application thérapeutique.
EXEMPLE 16. Effet cytotoxique de composés selon l'invention
A- Matériels et Méthodes
Les cellules de lignée HepaRG sont cultivées dans les mêmes conditions que celles décrites dans l'exemple 15 mais les cellules sont utilisées cette fois en phase proliférative uniquement. L'effet cytotoxique est évalué de deux manières : l'une par la mesure de l'activité extra- et intra-cellulaire de la lactate deshydrogénase (LDH) (voir Matériels et Méthodes de l'exemple 15) et l'autre méthode, appelé test MTT, se focalise sur la viabilité cellulaire après traitement avec un agent cytotoxique et permet d'évaluer la proportion de cellules viables après traitement. Il est basé sur la réduction du MTT jaune (bromure de 3-(4,5- diméthylthiazol-2-yl)-2,5-diphényl tetrazolium) en cristaux bleus de formazan par une enzyme mitochondriale, la succinate deshydrogénase. Les cristaux de formazan formés sont solubilisés par le diméthylsulfoxyde et leur détection est réalisée par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 535 nm. Les résultats sont exprimés en pourcentage de formazan formé dans les cultures traitées par rapport aux cultures témoins. Pour ces tests, les chélateurs sont préalablement dissouts dans le DMSO pour constituer une solution mère qui sera ultérieurement diluée dans les milieux de culture
B - Résultats
Figure 5 : cytotoxicité du composé BHPTC-O Le BHPTC-O aux concentrations de 20 et 50 μM augmente le taux extracellulaire de LDH (140 et 239% respectivement par rapport au témoin fixé à 100%) et diminue le taux intracellulaire de LDH (90 et 83% par rapport au témoin fixé à 100%). Il existe donc une cytotoxicité dose-dépendante mais elle n'est pas majeure car la baisse du taux intracellulaire de LDH ne dépasse pas 17% par rapport à l'expérience de contrôle.
Figures 6 et 7 : comparaison de l'effet cytotoxique du BHPTC-O et du BHPTC-S
A la concentration de 20 μM, la cytotoxicité du BHPTC-O est faible et très proche de celle du BHPTC-S (faible augmentation de LDH extracellulaire/témoin et faible diminution de LDH intracellulaire/témoin). A la concentration de 50 μM, la cytotoxicité du BHPTC-S est très nettement supérieure à celle du BHPTC-O [ LDH extracellulaire : 239% pour le BHPT-O et 572% pour le BHPT-S ; LDH intracellulaire : 83 pour le BHPTC-O et 26% pour le BHPTC-S]. A une concentration de 50 μM le BHPTC-S présente donc une forte cytotoxicité, très nettement supérieure à celle observée pour le BHPTC-O.
Figure 8 : Comparaison de l'effet cytotoxique du BHPTC-O, du BHPTC-OOH et du Desferal
Nous avons voulu comparer l'effet cytotoxique de deux de nos chélateurs à celui engendré par le Desferal (DFO), considéré comme une référence dans le domaine des chélateurs thérapeutiques. Nous observons que 20 μM de Desferal (DFO), de BHPTC-O ou de BHPTC-OOH présente un effet cytotoxique comparable sur les cellules tumorales de la lignée HepaRG.
Figure 9 : comparaison de l'effet du BHPTC-O et du BHPTC-S sur la viabilité cellulaire
A une concentration de 20 μM, l'effet du BHPTC-O n'est pas significatif alors que le BHPTC-S a un effet sur la viabilité cellulaire (78% par rapport au témoin 100%). A une concentration de 50 μM, l'effet des deux chélateurs est significatif avec un effet délétère sur la viabilité cellulaire plus affirmé pour le BHPTC-S (40% par rapport au témoin 100%) que pour le BHPTC-O (20% par rapport au témoin 100%).
Figure 10 : Comparaison de l'effet du BHPTC-O, du BHPTC-OOH et du Desferal sur la viabilité cellulaire
Nous avons voulu comparer l'effet de deux de nos chélateurs sur la viabilité cellulaire à celui engendré par le Desferal (DFO). Les trois chélateurs ainsi testés diminuent la viabilité cellulaire des cellules tumorales de la lignée HepaRG. Le test MTT montre en effet une chute de l'activité de la succinate deshydrogénase mitochondriale avec des IC5O respectifs de 18,3/27,8/35,1 μM pour le DFO, le BHPTC-OOH et le BHPTC-O.
C - Conclusion
Ces expériences montrent que le composé BHPTC-S présente une forte cytotoxicité et un effet notable sur la viabilité cellulaire des cellules HepaRG en phase proliférative. Cet effet cytotoxique est globalement plus faible lorsque le composé BHPTC-O est utilisé dans les mêmes conditions de culture. La comparaison de l'effet cytotoxique des composés BHPTC-O, BHPTC-OOH et du Desferal (DFO) montre un effet cytotoxique comparable bien que les composés selon invention présentent une activité moins délétère que le DFO sur la viabilité cellulaire.
EXEMPLE 17. Activité antiproliférative de composés selon l'invention sur des cellules de la lignée HepaRG
L'activité antiproliférative est évaluée par l'ampleur de l'inhibition de la réplication de l'ADN. La mesure de l'incorporation de thymidine tritiée dans l'ADN permet de mesurer l'intensité du processus de réplication et donc de quantifier l'effet antiprolifératif des BHPTC sur la lignée HepaRG (cellules cancéreuses du foie).
A- Matériels et Méthodes Les cellules de lignées HepaRG sont cultivées dans les conditions décrites dans la partie « Matériels et Méthodes » de l'exemple 15. Pour ces expériences, les cellules sont, bien évidemment utilisées en phase prol itérative. Après 24 h d'incubation en présence de 0,5 μCi/mL de thymidine tritiée (3H méthyl-thymidine, 25 Ci/mmole), les cellules sont lavées deux fois par du tampon phosphate salin et lysées par sonication. 200 μl_ de lysat cellulaire sont déposés dans une fiole de comptage et auxquels on ajoute 2,5 ml_ de liquide scintillant. La radioactivité est mesurée dans un compteur à scintillation liquide. La radioactivité incorporée dans l'ADN est exprimée en cpm/μg protéine. Les résultats expérimentaux sont exprimés en pourcentage par rapport aux cultures témoins.
B - Résultats
Figure 11 : comparaison de l'effet du BHPTC-O et du BHPTC-S sur la réplication de l'ADN
En présence de 20 μM de BHPTC-O et de BHPTC-S, on note une diminution de la réplication de l'ADN en faveur du BHPTC-S (66 et 38% respectivement/témoin 100%). A une concentration de 50 μM, une plus grande efficacité des chélateurs est observée sans aucune différence entre les deux.
C - Conclusions
Dans des cellules HepaRG en phase proliférative, le BHPTC-S inhibe bien plus efficacement la réplication de l'ADN que le BHPTC-O. Cette activité est cependant nivelle à concentration plus élevée, probablement à cause des effets de cytotoxicité associés aux composés selon invention.
EXEMPLE 18. Activité antiproliférative de composés selon l'invention sur des lignées différentes d'HepaRG
A- Matériels et Méthodes Des chélateurs selon l'invention ont été testés sur différentes lignées cellulaires humaines tumorales normales ou résistantes (à des antitumoraux de référence) représentant les principaux types tissulaires. Les lignées KB (carcinome d'épiderme buccal humain) et HepG2 (hepatocarcinome) ont été obtenues chez ECACC (Salisbury, UK) et sont cultivées dans le milieu D-MEM complémenté avec 10% de sérum fœtal de veau, en présence de pénicilline, de streptomycine et de fungizone dans des flacons de 75 cm3 sous une atmosphère à 5% de CO2 Les lignées HCT116, HT29 et HCT15 (adénocarcinome de colon), MCF7 (adénocarcinome mammaire), MCF7R (adénocarcinome mammaire chimio- résistant, SK-OV3 (adénocarcinome ovarien), PC-3 (adénocarcinome de prostate), A549 (carcinome pulmonaire), HL60 (leucémie promyéocytique), K562 (leucémie chronique myélogène) et SF268 (glioblastome) sont cultivées dans du milieu RPMI. La lignée cellulaire chimio-résistante MCF7R est obtenue par un traitement prolongé de la lignée MCF7 avec la doxorubicine. Les cellules sont étalées dans des micro-plaques de culture à 96 puits contenant 200 μl de milieu et sont traitées 24 h plus tard avec les composés à tester, préalablement dissouts dans du DMSO, grâce à un automate Biomek 3000 (Beckman-Coulter). Les expériences de contrôle sont traitées par le même volume de DMSO (1 % du volume final). Après 72 h, le réactif MTS (Promega) est ajouté et après 3 h d'incubation à 37°C, l'absorbance est mesurée à 490 nm (DO490) et les résultats sont exprimés comme étant l'inhibition de prolifération cellulaire calculée par le rapport [(1-(DO49o culture traitée/OD490 culture contrôle))* 100]. Chaque expérience est effectuée à trois reprises et la valeur d'inhibition donnée est la moyenne des valeurs obtenues sur ces trois expériences.
B- Résultats
Les chélateurs testés sont respectivement BHPTC-OOH, BHPTC-S, BHPTC-O, BHPTC-SOH, BHPTC-ONH (sel double de TFA), BHPTC-ONBoc, BHPTC- OOHNBoc, BHPTC-OOHNH (sel double de TFA). Ils ont été confrontés au DFOM, le sel de mésylate du Desferal considéré comme le composé de référence dans le domaine des ferrochélateurs à usage thérapeutique. Les mesures d'inhibition de prolifération ont été effectuées à deux concentrations, 10"5 M / 10~6 M (Tableau 1 ).
Figure imgf000050_0001
Tableau 1 : Inhibition de la prolifération de lignées cellulaires cancéreuses en présence de 10~5 M ou(/) 10~6 M de chélateurs de la famille des BHPTC ou de mésylate de desferal (DFOM).
A une concentration de 1 μM, l'ensemble des chélateurs testés, tout comme le DFOM, ont une activité faible à négligeable sur l'ensemble des lignées. Cependant, à une concentration de 10 μM, deux molécules, le BHPTC-S et le BHPTC-ONBoc, présentent en général des activités supérieures à celles du composé de référence sur l'ensemble des lignées, avec notamment une forte activité sur les cellules cancéreuses des voies aériennes (A549 et KB). Il convient aussi de noter qu'à une concentration de 10 μM, le composé BHPTC-S et BHPTC- NBoc sont plus actifs sur la lignée chimiorésistante issue d'un carcinome mammaire MCF7R (64% d'inhibition pour le BHPTC-S) que sur la lignée cancéreuse normale MCF7 (10% d'inhibition).
C- Conclusion
Les composés BHPTC-S et BHPTC-ONBoc sont les composés les plus actifs pour inhiber la prolifération de lignées cancéreuses. Leur activité est cependant variable d'une lignée à l'autre mais globalement toujours supérieure à celle du Desferal (DFO) utilisé comme référence. En outre, sur certaines lignées, les concentrations efficaces sont comparables à celle de certains chélateurs développés spécifiquement pour une application anticancéreuse (réf. o, réf. p).
CONCLUSIONS GENERALES SUR L'ENSEMBLE DES EXEMPLES
- Les exemples 1 à 12 décrivent les synthèses efficaces et optimisées des composés selon invention. Au nombre de ces composés, certains ont été testés pour leur propriétés physico-chimiques et biologiques.
- L'étude physico-chimique menée sur le composé BHPTC-O a mis en évidence que cette molécule est un excellent chélateur du fer(lll) mais qu'en outre il est capable de complexer préférentiellement le fer à tout autre métal impliqué dans les processus métaboliques/biologiques.
- Les composés BHPTC-O et BHPTC-OOH ont montré qu'ils avaient des propriétés cytoprotectrices comparables à celles du Desferal (DFO), considéré comme le composé de référence pour le traitement des surcharges en fer. Si les composés BHPTC-O et BHPTC-OOH ont un effet cytotoxique comparable à celui du DFO, les composés selon invention présentent cependant un effet moins délétère que la molécule de référence sur la viabilité cellulaire. Ces propriétés biologiques semblent destiner BHPTC-O et BHPTC-OOH et les composés apparentés, à une application thérapeutique dans le domaine du traitement des surcharges en fer en relation avec une pathologie génétique (hémochromatose, anémie falciforme, béta-thalassémie, etc.).
- Pour un effet cytoprotecteur proche de celui de BHPTC-O, le composé BHPTC-S a en parallèle un effet cytotoxique et antiprolifératif significatif sur les cellules HepaRG. Cette activité antiproliférative a été confirmée sur plusieurs autres lignées issues de groupes tissulaires cancéreux différents. Ces propriétés biologiques semblent destiner BHPTC-S et les composés apparentés à une application préférentielle dans le domaine du traitement de certains cancers. REFERENCES
a. Pigeon, C; llyin, G.; Courselaud, B.; Leroyer, P.; Turlin, B.; Brissot, P.; Loréal, O. J. Biol. Chem. 2001 , 276, 7811-7819. b. Nicolas, G.; Bennoun, M.; Devaux, I. ; Beaumont, C. ; Grandchamp, B. ; Kahn, A. ; Vaulont, S. PNAS 2001 , 98, 8780-8785 c. Neufeld, EJ. Blood 2006, 107, 3436-3441 d. Buss, J. L.; Torti, F. M.; Torti, S. V. Curr. Med. Chem. 2003, 10, 1021-1034. e. Le, N. T. V.; Richardson, D. R. Biochim. Biophys. Acta 2002, 1603, 31-46 f. Madsen, P.; Ling, A.; Plewe, M.; Sams, C. K.; Knudsen, L. B.; Sidelmann, U. G.; Ynddal, L.; Brand, C. L.; Andersen, B.; Murphy, D.; Teng, M.; Truesdale, L.; Kiel, D.; May, J.; Kuki, A.; Shi, S.; Johnson, M. D.; Teston, K.A.; Feng, J.; Lakis, J.; Anderes, K.; Gregor, V.; Lau, J. J. Med. Chem. 2002, 45, 5755-5775. g. Zamri, A.; Abdallah, M.A. Tetrahedron 2000, 56, 249-256. h. Srinivasachari, S.; Liu, Y.; Zhang, G.; Prevette, L.; Reineke, T. M. J. Am.
Chem. Soc. 2006, 128, 8176-8184 i. Biaso, F.; Baret, P.; Pierre, J. -L.; Serratrice, G. J. Inorg. Biochem. 2002, 89,
123-130. j. Harris, W. R.; Carrano, C. J.; Raymond, K. N. J. Am. Chem. Soc. 1979,
700, 2213-2214 k. Harris, W. R.; Carrano, C. J.; Cooper, S. R.; Sofen, S. R.; Avdeef, A. E.;
McArdle, J. V.; Raymond, K. N. J. Am. Chem. Soc. 1979, 101, 6097-6104. I. Biaso, F.; Baret, P.; Pierre, J. -L.; Serratrice, G. J. Inorg. Biochem. 2002, 89,
123-130 m. Gérard, C; Chehhal, H.; Hugel, R. P. Polyhedron 1994, 13, 591-597 n. Baret, P.; Béguin, C; Gellon, G.; Pierre, J. L.; Serratrice, G.; Thomas, F.;
Lauljère, J. P.; Saint-Aman, E. Eur. J. Inorg. Chem. 2000, 1219-1227 o. Richardson, D. R.; Milnes, K. Blood 1997, 89, 3025-3038. p. Gao, J.; Richardson, D. R. Blood 2001 , 98, 842-850

Claims

REVENDICATIONS
1- Composés de formule générale (I) :
Figure imgf000053_0001
(I) dans laquelle :
R1 , R3, R5 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe COOH, SO3H, NO2, CN, un groupe R, COOR, CONH2,
CONHR, CONRR', NH2, NHR, NRR', ou NH-COR, où R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C16)alkyle, (C2-C16)alkényle, (C2-
C16)alkynyle, (C6-C14)aryl, ou hétéroaryle;
R2, R4, R6 et R8, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, NH2, NHR, NRR', NH-COR ou R, où R et R', identiques ou différents, sont tels que définis ci-dessus ;
X représente un atome d'oxygène ou un atome de soufre;
A représente un atome d'oxygène ou un groupe NH, NCOOR9, ou N+H2, où R9 représente un radical (C1-C16)alkyle, C2-C16)alkényle, (C2-C16)alkynyle, (C6-
C14)aryl, ou hétéroaryle, m et n, identiques ou différents, représentent 1 , 2 ou 3 ;
leurs stéréoisomères (diastéréoisomères, énantiomères), purs ou en mélange, mélanges racémiques, isomères géométriques, tautomères, sels, hydrates, solvates, ainsi que leurs mélanges.
2- Composés selon la revendication 1 , caractérisés en ce que n est 1 ou 2, de préférence 1. 3- Composés selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que m est 1 ou 2, de préférence 1.
4- Composés selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que R1 , R3, R5 et R7 sont identiques au moins deux à deux, en particulier R1 est identique à R5 et/ou R3 identique à R7.
5- Composés selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisés en ce que R2, R4, R6 et R8 sont identiques au moins deux à deux, en particulier R2 est identique à R6 et/ou R4 identique à R8.
6- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisés en ce que A est un atome d'oxygène.
7- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisés en ce que A est un groupe NH, NCOOR9, ou N+H2, où R9 représente un radical (C1- C16)alkyle.
8- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisés en ce que R1 et R5, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, d'halogène, un groupe R, où R représente un radical (C1 -C16)alkyle, de préférence R est un radical (C1-C3)alkyle.
9- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisés en ce que R2 et R6, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, NH2, NHR, NRR' ou NHCOR, où R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C16)alkyle, de préférence R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C3)alkyle.
10- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisés en ce que R4 et R8, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, NH2, NHR, NRR' ou NHCOR, où R et R', identiques ou différents, représentent un >
radical (C1-C16)alkyle, de préférence R et R', identiques ou différents, représentent un radical (C1-C3)alkyle.
11- Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisés en ce que R3 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe COOH, SO3H, ou un groupe COOR, où R représente un radical (C1- C16)alkyle, (C2-C16)alkényle, (C2-C16)alkynyle, (C6-C14)aryl, ou hétéroaryle.
12- Composés selon la revendication précédente, caractérisés en ce que R3 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe COOH ou un groupe COOR, où R représente un radical (C1-C6)alkyle, de préférence méthyle ou éthyle.
13- Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que les composés de formule (I) présentent au moins une ou deux des, de préférence toutes les, caractéristiques suivantes :
- m est 1 ,
- n est 1 ,
- A représente un atome d'oxygène, un groupe NCOOR9, ou N+H2,
- R1 représente un atome d'hydrogène,
- R2 représente un atome d'hydrogène,
- R4 représente un atome d'hydrogène, R5 représente un atome d'hydrogène, R6 représente un atome d'hydrogène, R8 représente un atome d'hydrogène,
R3 représente un atome d'hydrogène, un groupe COOH ou COOR,
- R7 représente un atome d'hydrogène, un groupe COOH ou COOR,
- R9 représente un radical (C1-C6)alkyle, et/ou
- R, identique ou différent, représente un radical (C1-C6)alkyle.
14- Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi: 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-biséthylamine-dithiazolecarboxamide]- dibenzoate de méthyle ;
4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-biséthylamine-dithiazolethiocarboxamide]- dibenzoate de méthyle ;
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-biséthylamine-dithiazolcarboxamide] dibenzoïque ;
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-[(2,2'-éthylènedioxy-bisethylamine- dithiazolthiocarboxamide] dibenzoïque ;
Λ/,Λ/'-[1 ,2-éthanediyl-bis(oxy-2,1-ethandiyléthyl)]-bis[2-(2-hydroxyphényl)]-4- dithiazolcarboxamide ;
Λ/,Λ/'-[1 ,2-éthanediyl-bis(oxy-2,1-ethandiyléthyl)]-bis[2-(2-hydroxyphényl)]-4- dithiazolthiocarboxamide ;
4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert-butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1- amine}-dithiazole-carboxamide}-dibenzoate de méthyle
4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène-bisammonium)diéthan-1-amine]-dithiazole- carboxamidej-dibenzoate de méthyle, bis-trifluoroacétate
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert-butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1- amine}-dithiazole-carboxamide}-dibenzoïque
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène-bisammonium)diéthan-1-amine]- dithiazole-carboxamidej-dibenzoïque, bis-trifluoroacétate
4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert-butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1- amine}-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoate de méthyle
4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène-bisammonium)diéthan-1-amine]-dithiazole- thiocarboxamidej-dibenzoate de méthyle, bis-trifluoroacétate
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{{2,2'-{éthylènebis[(tert-butoxycarbonyl)imino]}diéthan-1- amine}-dithiazole-thiocarboxamide}-dibenzoïque
Acide 4,4'-dihydroxy-3,3'-{[2,2'-(éthylène-bisammonium)diéthan-1-amine]- dithiazole-thiocarboxamidej-dibenzoïque, bis-trifluoroacétate
15- Composés selon l'une quelconque des revendications précédentes 1 -14, à titre de médicaments. 16- Composition pharmaceutique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique, au moins un composé tel que défini dans l'une des revendications 1 à 14.
17- Composition pharmaceutique selon la revendication précédente, pour le traitement de pathologies ou désordres caractérisés par une surcharge en fer.
18- Composition pharmaceutique selon la revendication 16 ou 17, caractérisée en ce que les pathologies ou les désordres sont choisis parmi l'hémochromatose, l'anémie falciforme, la béta-thalassémie, un dérèglement général, une fatigue physique ou psychique, une perte de libido, l'impuissance, une dépression, l'ostéoporose, ménopause précoce, myocardiopathies, tachycardie, fibrose, cirrhose, cancer, diabète sucré, douleurs articulaires, arthrites, et rhumatismes.
19- Composition pharmaceutique selon la revendication 16 ou 17, caractérisée en ce que les pathologies ou désordres sont des désordres neurologiques ou neurodégénératifs, en particulier choisies parmi la maladie d'Alzheimer, de Parkinson, de Huntington, des neuroferritinopathies, la sclérose latérale amyotrophique, l'ataxie de Friedreich et la sclérose en plaques.
20- Composition pharmaceutique selon la revendication 16, pour le traitement de pathologies néoplasiques ou de cancers.
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Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011051665A1 (fr) * 2009-10-26 2011-05-05 The University Of Birmingham Composition anticancéreuse comprenant de l'alginate
WO2015077652A1 (fr) * 2013-11-22 2015-05-28 University Of Florida Research Foundation, Inc. Analogues de la désazadesferrithiocine et leurs utilisations
US9174948B2 (en) 2007-03-15 2015-11-03 University Of Florida Research Foundation, Inc. Desferrithiocin polyether analogues
US9567309B2 (en) 2005-04-04 2017-02-14 University Of Florida Research Foundation, Inc. Desferrithiocin polyether analogues
US10010535B2 (en) 2013-11-22 2018-07-03 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Desferrithiocin analogs and uses thereof
US10570104B2 (en) 2015-04-27 2020-02-25 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Metabolically programmed metal chelators and uses thereof
US11931346B2 (en) 2011-12-16 2024-03-19 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Uses of 4′-desferrithiocin analogs

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005034949A1 (fr) * 2003-09-09 2005-04-21 University Of Florida Derives de desferrithiocine et leur utilisation en tant que chelateurs du fer

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ526880A (en) * 1998-09-21 2005-05-27 Univ Florida Antimalarial agents

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005034949A1 (fr) * 2003-09-09 2005-04-21 University Of Florida Derives de desferrithiocine et leur utilisation en tant que chelateurs du fer

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HOVEYDA H R ET AL: "DESIGN AND SYNTHESIS OF MULTIDENTATE 2-(2'-HYDROXYPHENYL)-2-THIAZOLI NES FOR BIOMEDICAL APPLICATION" TETRAHEDRON, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, AMSTERDAM, NL, vol. 48, no. 25, 1992, pages 5219-5226, XP001160881 ISSN: 0040-4020 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9567309B2 (en) 2005-04-04 2017-02-14 University Of Florida Research Foundation, Inc. Desferrithiocin polyether analogues
US9994535B2 (en) 2005-04-04 2018-06-12 University Of Florida Foundation, Inc. Desferrithiocin polyether analogues
US9174948B2 (en) 2007-03-15 2015-11-03 University Of Florida Research Foundation, Inc. Desferrithiocin polyether analogues
US9730917B2 (en) 2007-03-15 2017-08-15 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Desferrithiocin polyether analogues
WO2011051665A1 (fr) * 2009-10-26 2011-05-05 The University Of Birmingham Composition anticancéreuse comprenant de l'alginate
CN102958527A (zh) * 2009-10-26 2013-03-06 伯明翰大学 包含藻酸盐的抗癌组合物
US9421220B2 (en) 2009-10-26 2016-08-23 The University Of Birmingham Edgbaston Anti-cancer composition comprising alginate
US11931346B2 (en) 2011-12-16 2024-03-19 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Uses of 4′-desferrithiocin analogs
WO2015077652A1 (fr) * 2013-11-22 2015-05-28 University Of Florida Research Foundation, Inc. Analogues de la désazadesferrithiocine et leurs utilisations
US10010535B2 (en) 2013-11-22 2018-07-03 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Desferrithiocin analogs and uses thereof
US10570104B2 (en) 2015-04-27 2020-02-25 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Metabolically programmed metal chelators and uses thereof

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