WO2008086743A1 - Application d'un extrait d'antrodia cinnamomea pour l'inhibition de la croissance de cellules tumorales - Google Patents

Application d'un extrait d'antrodia cinnamomea pour l'inhibition de la croissance de cellules tumorales Download PDF

Info

Publication number
WO2008086743A1
WO2008086743A1 PCT/CN2008/070024 CN2008070024W WO2008086743A1 WO 2008086743 A1 WO2008086743 A1 WO 2008086743A1 CN 2008070024 W CN2008070024 W CN 2008070024W WO 2008086743 A1 WO2008086743 A1 WO 2008086743A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
growth
tumor cells
inhibiting
group
cancer tumor
Prior art date
Application number
PCT/CN2008/070024
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Sheng-Yun Liu
Wu-Che Wen
Wan-Ling Tsou
Original Assignee
Golden Biotechnology Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Golden Biotechnology Corporation filed Critical Golden Biotechnology Corporation
Publication of WO2008086743A1 publication Critical patent/WO2008086743A1/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A61K31/36—Compounds containing methylenedioxyphenyl groups, e.g. sesamin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the present invention relates to the use of a compound, and in particular to the use of a compound isolated and purified from an extract of Antrodia camphorata to inhibit the growth of tumor cells. Background technique
  • Antrodia camphorata also known as Antrodia camphorata, burdock mushroom, red scorpion, red scorpion, scorpion or scorpion scorpion
  • Antrodia camphorata is a unique species of fungi in Taiwan. It grows only in the mountains of Taiwan at an altitude of 450-2000 meters. The inner wall of the hollow decayed heartwood of Cinnamoum kanehirai Hay is thus grown from the inner surface of the trunk.
  • Burdock trees are mainly distributed in mountainous areas such as Taoyuan and Nantou. Because Burdock is a very rare species of conservation trees in Taiwan, combined with artificial logging, the number of wild Antrodia camphorata that can grow in it is even rarer. The growth is quite slow, and the growth period is only between June and October, so the price is very expensive.
  • the fruiting body of Antrodia camphorata is perennial, sessile, cork-to-wood, and its shape is varied, with plate shape, bell shape, horseshoe shape or tower shape. It is flat at the beginning and is attached to the surface of the wood. The leading edge is then slightly curled and raised in a plate shape (lamellar shape) or as a stalactite.
  • the surface of the burdock is brown to dark brown, with inconspicuous wrinkles, shiny, flat and blunt edges, and its ventral surface is orange-red or partially yellow with many fine pores.
  • Antrodia camphorata has a strong astringent aroma, which fades to yellow and white after drying, and tastes extremely bitter. It is used by the folks as an anti-drug, liver-protecting and anti-cancer herb.
  • Antrodia camphorata is a common medicinal medicinal mushroom with many complex components.
  • the known physiologically active ingredients include polysaccharides (such as ⁇ -glucan), triterpenoids (triterpenoids), and superoxide.
  • Superoxide dismutase SOD
  • adenosine adenosine
  • protein including immunoglobulin
  • vitamins such as vitamin B, niacin
  • trace elements such as: calcium, phosphorus and strontium
  • nucleic acids lectins, amino acids, sterols, lignin, and blood pressure stabilizing substances (such as antodia acid), etc.
  • physiologically active ingredients are considered to have anti-tumor, immunity, anti-allergy, inhibition of platelet aggregation, anti-virus, anti- Bacterial, antihypertensive, hypoglycemic, cholesterol lowering and liver protection.
  • triterpenoids are the most studied, and triterpenoids are composed of three. The ten carbon elements are combined into a hexagonal or pentagonal natural compound. The bitterness of Antrodia camphorata is mainly from the triterpenoids.
  • Cherng et al. found that three extracts of triterpenoids based on ergostane were found in the extract of Antrodia camphorata fruit bodies: antcin A, antcin B and antcin C ( Cherng, I. H" and Chiang, HC 1995. Three new triterpenoids from Antrodia cinnamomea. J. Nat. Prod. 58:365-371 ). Chen et al.
  • the present invention separates and purifies a compound having the following structural formula from the extract of Antrodia camphorata:
  • R 2 , R 3 and R 4 are each selected from the group consisting of methoxy (OCH 3 ), methoxy, decyl (CH 3 ) and hydrogen (H).
  • the compound of the formula (1) has a molecular formula of C 1Q 0 4 H 12 , a pale yellow granular form, and a molecular weight of 196, and includes the following formulas (2), (3), (4), and (5).
  • the present invention is applied to inhibit the growth of tumor cells, and enables further application of a pharmaceutical composition included in the treatment of cancer to enhance the therapeutic effect of cancer.
  • the application range of the compound of the invention includes the growth inhibition effect on cells such as breast cancer tumor cells, liver cancer tumor cells and prostate cancer tumor cells, so as to inhibit the rapid growth of the tumor cells, thereby inhibiting tumor proliferation and delaying tumors. Deterioration.
  • a preferred compound is 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane of the formula (2) (4, 7-dimethoxy-5-methy-l, 3- Benzodioxole ).
  • the compound of the formula (1) can be used for the treatment of components of pharmaceutical compositions such as breast cancer, liver cancer and prostate cancer by the application of the present invention.
  • the compound for inhibiting tumor cell growth in the present invention is of the formula (1), which is isolated and purified from an aqueous extract of Antrodia camphorata or an organic solvent extract, and the organic solvent may include an alcohol (for example, decyl alcohol, ethanol or propanol), an ester ( For example, ethyl acetate), an alkane (e.g., hexane) or a halogenated alkane (e.g., chlorodecane, ethyl chloride), but is not limited thereto, and among them, preferred are alcohols.
  • an alcohol for example, decyl alcohol, ethanol or propanol
  • an ester For example, ethyl acetate
  • an alkane e.g., hexane
  • a halogenated alkane e.g., chlorodecane, ethyl chloride
  • Antrodia camphorata mycelium, fruiting body or a mixture of the two is taken, and extracted by water or an organic solvent by a known extraction method to obtain an aqueous extract of Antrodia camphorata or an organic solvent extract.
  • the organic solvent may include an alcohol (for example, decyl alcohol, ethanol or propanol), an ester (such as ethyl acetate), an alkane (such as hexane) or a halogen (for example, chlorodecane, ethyl chloride), but Not limited to this.
  • alcohols for example, decyl alcohol, ethanol or propanol
  • an ester such as ethyl acetate
  • an alkane such as hexane
  • a halogen for example, chlorodecane, ethyl chloride
  • the extracted aqueous extract of Antrodia camphorata or the organic solvent extract can be further separated and purified by high performance liquid chromatography, and then each cancer fraction is tested for its anticancer effect. Finally, the components of the cancer-suppressing effect were analyzed for component analysis, and the components that may have a tumor suppressing effect were further tested for inhibition of different cancer tumor cells. Finally, it was found that the compound of the formula (1) in the present invention has an effect of inhibiting the growth of tumor cells of different cancers.
  • the 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane compound of the formula (2) will be described below.
  • the present invention is based on MTT assay, according to the National Cancer Institute ( The National Cancer Institute (NCI) anti-tumor drug screening model tests cell viability for tumor cells including breast cancer, liver cancer, and prostate cancer.
  • Example 1 Activity test of anti-breast cancer tumor cells in vitro
  • NCI National Cancer Institute
  • MTT assay is a common method for analyzing cell proliferation, survival rate. (ercent of viable cells) and analytical methods for cytotoxicity.
  • MTT 3 - [4 , 5 -dimethylthiazol-2-yl] 2 , 5 -diphenyltetrazolium bromide
  • succinic acid tetra- p- reductase in the glandular gland.
  • succinate tetrazolium reductase is reduced to insoluble water-blue-purple formazan, so the survival rate of cells can be judged and calculated by the formation of formazan.
  • Human breast cancer cells MCF-7 and MDA-MB-231 were first cultured in a medium containing fetal bovine serum for 24 hours. The proliferated cells were washed once with PBS, and the cells were treated with 1 time trypsin-EDTA, followed by centrifugation at 1,200 rpm for 5 minutes, the cells were pelleted and the supernatant was discarded. Then, 10 ml of the new culture solution was added, and the cells were resuspended by shaking slightly, and the cells were placed in a 96-well microplate.
  • the IC50 value for MCF-7 human breast cancer tumor cells was 1.721 g/by the action of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane.
  • Ml the IC50 value for MDA-MB-231 human breast cancer tumor cells is 0.992 g/ml, which is much lower than the IC50 value measured for the extract of Antrodia camphorata, so it can be confirmed that 4,7- in Antrodia camphorata extract
  • the dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane can indeed be used for the inhibition of breast cancer tumor cell growth.
  • Example 2 Activity test for adjuvant treatment of breast cancer tumor cells in vitro
  • the cells were treated with 0.0017 g/ml paclitaxel (Taxol) for 72 hours, and then the cells were placed in a 96-well microplate, and then 0 g/ml was added to each well (control group), 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1 and 0.03 g/ml of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane (test group), at 37 ° C, 5 % C0 2
  • the culture was carried out for 48 hours. Thereafter, 2.5 mg/ml of MTT was added to each well in the dark, and after 4 hours of reaction, 100 ⁇ M of lysis buffer was added to each well to terminate the reaction. Finally, the absorbance was measured by an enzyme immunoassay at an absorption wavelength of 570 nm to calculate the cell survival rate, and the concentration required for growth half inhibition (i.e., IC50 value) was calculated.
  • Table 2 The results are shown in Table 2.
  • Test group IC 50 ( g/ml)
  • MDA-MB-231 (0.0017 g/ml Taxol+Form 2) 0.0009
  • Table 2 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane was synergistically effected by paclitaxel.
  • the IC50 value of the ring for MCF-7 human breast cancer cells decreased to 0.0007 g/ml
  • the IC50 value for MDA-MB-231 human breast cancer cells also decreased to about 0.0009 g/ml, thus confirming the 4 in the extract of Antrodia camphorata.
  • the 7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane can be used for the inhibition of growth of breast cancer tumor cells, and has a better inhibitory effect under the synergistic effect of paclitaxel.
  • Example 3 Activity test of anti-hepatocarcinoma tumor cells in vitro
  • human hepatoma cells Hep 3B and Hep G2 were cultured for 24 hours in a culture solution containing fetal bovine serum, respectively.
  • the proliferated cells were washed once with PBS, and the cells were treated with 1 time trypsin-EDTA, followed by centrifugation at 1,200 rpm for 5 minutes, the cells were pelleted and the supernatant was discarded. Then, 10 ml of the new medium was added, and the cells were resuspended with gentle shaking, and the cells were placed in a 96-well microplate.
  • the IC50 value of Hep 3B human hepatoma tumor cells was 0.016 g / ml by the action of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane.
  • the IC50 value for Hep G2 human hepatocarcinoma cells is 2.462 g/ml, which is much lower than the IC50 value measured for the extract of Antrodia camphorata. Therefore, it can be confirmed that 4,7-dioxane in Antrodia camphorata extract 5--5-mercapto-1,3-benzoate Oxygen rings can indeed be used to inhibit the growth of liver cancer tumor cells.
  • lovastatin was added to the Hep 3B cell line, and 0.0017 g/ml of taxol (Taxol) was added to the Hep G2 cell line.
  • the cells were treated for 72 hours, and then the cells were divided into 96-well micro-slices. In the dish, then O g/rnl (control group), 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1 and 0.03 g/ml of 4,7-dimethoxy-5-indenyl group were added to each well.
  • the 1,3-benzodioxane (test group) was cultured at 37 ° C, 5 % C02 for 48 hours.
  • Hep G2 (0.0017 g/ml Taxol + Formula 2) 0.0129
  • Table 4 by the synergistic action of lovastatin and paclitaxel, 4,7-dimethoxy-5-nonyl-1,3-benzodiox
  • the IC50 value of Hep 3B human hepatocellular carcinoma cells decreased to 0.0007 g/ml
  • the IC50 value of Hep G2 human liver cancer tumor cells also decreased to about 0.0129 g / ml, thus confirming the 4,7-II in Antrodia camphorata extract.
  • the methoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane can indeed benefit It is used for the inhibition of the growth of liver cancer tumor cells, and has a better inhibitory effect under the synergistic action of paclitaxel.
  • Human prostate cancer cells LNCaP and DU-145 were first cultured in a medium containing fetal bovine serum for 24 hours. The proliferated cells were washed once with PBS, and the cells were treated with 1 time trypsin-EDTA, followed by centrifugation at 1,200 rpm for 5 minutes, the cells were pelleted and the supernatant was discarded. Then, 10 ml of the new medium was added, and the cells were resuspended with gentle shaking, and the cells were placed in a 96-well microplate.
  • the IC50 value of LNCaP human prostate cancer tumor cells is 4.46 g by the action of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane. /ml, for DU-145 human
  • the IC50 value of prostate cancer tumor cells was 2.21 g / ml, which was much lower than the IC50 value measured by the extract of Antrodia camphorata, so it was confirmed that 4,7-dimethoxy-5 in the extract of Antrodia camphorata - Mercapto-1,3-benzodioxane can indeed be utilized for the inhibition of growth of prostate cancer tumor cells.
  • paclitaxel was added to the LNCaP cell line test, and 0.0043 g/ml of paclitaxel was added to the DU-145 cell line for 72 hours, and the cells were placed in a 96-well microplate. Then, O g/ml (control group), 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1 and 0.03 g/ml of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3 were added to each well. - 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane of benzodioxane (test group), cultured at 37 ° C:, 5 % C0 2 for 48 hours.
  • DU-145 (0.0043 g/ml Taxol+ type 2) 0.71
  • Table 6 the IC50 value of 4,7-dimethoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane for LNCaP human prostate cancer cells was reduced by the synergistic effect of paclitaxel.
  • the IC50 value of DU-145 human prostate cancer cells also decreased to about OJl g / ml, compared to the IC50 value measured by the extract of Antrodia camphorata is much lower, so the extract of Antrodia camphorata can be confirmed
  • the 4,7-dioxaoxy-5-mercapto-1,3-benzodioxane can indeed be used for the inhibition of growth of prostate cancer tumor cells, and is better under the synergistic effect of paclitaxel. The inhibitory effect.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

牛樟芝萃取物对抑制肿瘤细胞生长的应用
技术领域
本发明涉及一种化合物的应用， 特别是涉及一种利用由牛樟芝（ Antrodia camphorata )萃取物中所分离纯化的化合物抑制肿瘤细胞生长的用途。 背景技术
牛樟芝（Antrodia camphorata ), 又称樟芝、 牛樟菇、 红樟、 红樟芝、 樟 菰或樟窟内菰等， 为台湾特有种真菌， 只生长于台湾山区海拔 450~2000 公 尺间的牛樟树（ Cinnamoum kanehirai Hay ) 的中空腐朽心材内壁上， 因此是 由树干内面生长出子实体。 牛樟树目前主要分布于桃园、 南投等山区， 由于 牛樟树是台湾数量极为稀少的保育类树种， 加上人为的盗伐， 使得寄生于其 中方能生长的野生牛樟芝数量更为稀少， 且由于其生长相当緩慢， 生长期亦 仅在六月至十月之间， 因此价格非常昂贵。
牛樟芝的子实体为多年生， 无柄， 呈木栓质至木质， 其外形多变， 有板 状、 钟状、 马蹄状或塔状。 初时为扁平型， 贴生于木材表面， 之后其前缘会 略为卷曲翘起， 而呈板块状（层紋板状）或如钟乳石状。 牛樟芝顶部表面呈 褐色至黑褐色， 具不明显的皱紋， 有光泽， 边缘平而钝， 其腹面则为橘红色 或局部黄色， 并有许多细孔。
此外， 牛樟芝具有强烈的黄樟香气， 其晒干后褪色成土黄白色， 味极苦， 民间将其用作解毒、 保肝、 抗癌的草药。 牛樟芝如同一般食药用的蕈菇类， 具有许多复杂的成分， 已知的生理活性成分包括多醣体（polysaccharides, 如 β-萄聚醣）、 三萜类 4匕合物 ( triterpenoids )、 超氧歧 4匕酶 ( superoxide dismutase, SOD ), 腺苷（adenosine ), 蛋白质 （含免疫球蛋白）、 维生素 （如维生素 B、 烟碱酸）、 微量元素 （如： 钙、 磷及锗等）、 核酸、 凝集素、 胺基酸、 固醇类、 木质素以及血压稳定物质 （如 antodia acid )等， 这些生理活性成分被认为具 有抗肿瘤、 增加免疫能力、 抗过敏、 抑制血小板凝集、 抗病毒、 抗细菌、 抗 高血压、 降血糖、 降胆固醇以及保护肝脏等功能。
牛樟芝众多成分中以三萜类化合物被研究的最多， 三萜类化合物是由三 十个碳元素结合成六角形或五角形天然化合物的总称， 牛樟芝所具的苦味即 主要来自三萜类此成分。 1995年时， Cherng等人发现牛樟芝子实体萃取物中 含有三种新的以麦角甾烷（ ergostane )为骨架的三萜类化合物： antcin A、 antcin B与 antcin C ( Cherng, I. H" and Chiang, H. C. 1995. Three new triterpenoids from Antrodia cinnamomea. J. Nat. Prod. 58:365-371 )。 Chen等人以乙酉事萃取樟 芝子实体后发现 zhankuic acid A、 zhankuic acid B 及 zhankuic acid C等三种三 类化合物 ( Chen, C. H" and Yang, S. W. 1995. New steroid acids from Antrodia cinnamomea, a fungus parasitic on Cinnamomum micranthum. J. Nat. Prod. 58:1655-1661 ")。 此外， Chiang等人于 1995 年也由子实体萃取物中发现另外 三种分别为倍半萜内酯 ( sesquiterpene lactone )与两种双酚类衍生物的新三萜 类化合物， 这就是 antrocin、 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环
( 4,7-dimethoxy-5-methy-l,3-benzodioxole ) 与 2,2',5,5'-四曱氧基 -3,4,3',4'-双- 亚 曱 二 氧 基 -6,6'- 二 曱 基 联 苯 ( 2,2',5,5'-teramethoxy-3,4,3',4'-bi- methylenedioxy-6,6'-dimethylbiphenyl ) ( Chiang, H. C, Wu, D. P., Cherng, I. W., and Ueng, C. H. 1995. A sesquiterpene lactone, phenyl and biphenyl compounds from Antrodia cinnamomea. Phytochemistry. 39:613-616 。 i'J了 1996年, Cherng 等人以同样分析方法再度发现四种新的三萜类化合物： antcin E、 antcin F、 methyl antcinate G、 methyl antcinate H ( Cherng, I. K, Wu, D. P., and Chiang, H. C. 1996. Triteroenoids from Antrodia cinnamomea. Phytochemistry. 41:263-267 )； 而 Yang等人则发现了两种以麦角甾烷为骨架的新化合物 zhankuic acid D、 zhankuic acid E , 以及三种以羊毛甾烷（ lanostane )为骨架的新化合物： 15 α - 乙醜-去氢石克色多孑 L菌酸 ( 15 α-acetyl-dehydrosulphurenic acid )、 去氢齿孑 L酸
( dehydroeburicoic acid )与去水石克色多孑 L菌酸 ( dehydrasulphurenic acid X Yang, S. W., Shen, Y. C" and Chen, C. H. 1996. Steroids and triterpenoids of Antrodia cinnamomea—a fungus parasitic on Cinnamomum micranthum. Phytochemistry. 41:1389-1392 )„虽然由目前许多实验可得知牛樟芝萃取物具有抑癌的功效（如 前述 Chen ( 1995 ) ),但究竟为何种有效成分可达到抑制肿瘤细胞效果的研究， 目前则仍处于试验阶段， 并未有具体的有效成分发表， 故若能将该萃取物进 一步纯化分析， 找出其真正有效抑癌成分， 对于人类癌症的治疗实将产生极 大的帮助。 发明内容
为明了牛樟芝萃取物中究竟是何成分具有抑癌的效果， 本发明由牛樟芝 萃取物中分离纯化出具下列结构式的化合物：
Figure imgf000005_0001
其中， 、 R2、 R3与 R4是分别选自甲氧基（OCH3)、 甲氧基、 曱基（CH3) 与氢（H)其中之一。
式（1)的化合物， 其分子式为 C1Q04H12, 淡黄色颗粒状， 分子量为 196， 包括如下所示式（2)、 式（3)、 式（4)、 式（5)、 式（6)或式（7) 的化合 物：
Figure imgf000005_0002
Figure imgf000006_0001
其依序分别为 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 （ 4,7-dimethoxy-
5- methy-l,3-benzodioxole, 式（2 ) )、 4,6-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环（ 4,
6- dimethoxy-5-methy -1,3-benzodioxole , 式 （3 ) )、 4,6-二曱氧基 -7國曱基 -1,3國 苯并二氧环（4, 6-dimethoxy-7-methy-l,3-benzodioxole, 式（4 ) )、 4,5-二曱氧 基 -6-曱基 -1,3-苯并二氧环（ 4, 5- dimethoxy-6-methy- 1,3-benzodioxole,式（ 5 ) )、 4,5-二曱氧基 -7-曱基 -1,3-苯并二氧环 ( 4,5-dimethoxy-7-methy-l,3- benzodioxole,式（6 ) )与 5,6-二曱氧基 -4-曱基 -1,3-苯并二氧环（ 5, 6-dimethoxy -4-methy- 1,3-benzodioxole, 式 ( 7 ) )。
借由前述化合物， 本发明是将其应用于抑制肿瘤细胞生长上， 使能进一 步应用包括于治疗癌症的医药组成份中， 增益癌症的治疗效果。 本发明对该 化合物的应用范围包括对于乳癌肿瘤细胞、 肝癌肿瘤细胞与摄护腺癌肿瘤细 胞等细胞的生长抑制效果， 使抑制该等肿瘤细胞的迅速生长， 进而抑制肿瘤 的增生， 而延緩肿瘤的恶化。 其中， 较佳的化合物是式（2 ) 的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 ( 4, 7-dimethoxy-5-methy-l,3-benzodioxole )。
另一方面，借由本发明的应用，也可将式（1 )的化合物利用于治疗乳癌、 肝癌与摄护腺癌等医药组成物的成分中。
本发明中用以抑制肿瘤细胞生长如式（ 1 )的化合物是分离纯化自牛樟芝 水萃取物或有机溶剂萃取物，有机溶剂可包括醇类（例如曱醇、 乙醇或丙醇）、 酯类 （例如乙酸乙酯）、 烷类 （例如己烷）或卤烷（例如氯曱烷、 氯乙烷）， 但并不限制于此， 其中较佳的为醇类。
以下将结合实施例进一步说明本发明的实施方式， 下述所列举的实施例 是用以阐明本发明， 并非用以限定本发明的范围， 任何熟悉此技术的人员， 在不脱离本发明的精神和范围内， 应当可以做出一些修改和改进， 因此本发 明的保护范围应该以随后附权利要求范围所界定的为准。 具体实施方式
首先取牛樟芝 ( Antrodia camphorata ) 菌丝体、 子实体或二者的混合物， 利用已知的萃取方式， 以水或有机溶剂进行萃取， 借以取得牛樟芝水萃取物 或有机溶剂萃取物。 其中， 有机溶剂可包括醇类 （例如曱醇、 乙醇或丙醇）、 酯类 （例如乙酸乙酯）、 烷类 （例如己烷）或卤烷（例如氯曱烷、 氯乙烷）， 但并不限制于此。 其中较佳者为醇类， 更佳者为乙醇。
经萃取过后的牛樟芝水萃取物或有机溶剂萃取物， 可进一步借由高效液 相层析加以分离纯化， 之后再对每一分液（fraction )进行抑癌效果的测试。 最后， 则针对具抑癌效果的分液进行成分分析， 将可能产生抑癌效果的成分 再分别进一步做不同癌症肿瘤细胞的抑制效果测试。 最终即发现本发明中如 式（1 ) 的化合物是具有抑制不同癌症肿瘤细胞生长的效果。
为方便说明本发明， 以下将以式（2 )的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二 氧环化合物进行说明。 为证实 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环化合物对 肿瘤细胞生的抑制效果，本发明中是以 MTT分析法，根据美国国家癌症研究 所（National Cancer Institute, NCI )抗肿瘤药物筛检模式， 对包括乳癌、 肝癌 与摄护腺癌等肿瘤细胞进行细胞存活率的测试。 由该些测试证实， 4,7-二曱氧 基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环对于乳癌肿瘤细胞（包括 MCF-7与 MDA-MB-231 )、 肝癌肿瘤细胞（包括 Hep 3B与 Hep G2 )与摄护腺癌肿瘤细胞（包括 LNCaP 与 DU-145 )等都可降低其存活率， 相比之下可同时降低生长半抑制率所需浓 度（即 IC50值）， 因此得以由 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环， 应用于 包括乳癌、 肝癌与摄护腺癌等肿瘤细胞的生长抑制上。 现对前述实施方式详 尽说明如下。
实施例 1. 体外抗乳癌肿瘤细胞的活性测试
本测试是根据美国国家癌症研究所（ National Cancer Institute, NCI )抗肿 瘤药物筛检模式，取 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环化合物，加入 MCF-7 与 MDA-MB-231人类肿瘤细胞培养液中， 进行肿瘤细胞存活性的测试。 细胞 存活性的测试可釆已知的 MTT分析法进行分析， 而 MCF-7与 MDA-MB-231 都是人类的乳癌肿瘤细胞系。
MTT 分析法是一种常见用于分析细胞增生 （cell proliferation ), 存活率 ( ercent of viable cells ) 以及细胞毒性 ( cytotoxicity ) 的分析方法。 其中， MTT ( 3 - [4 , 5 -dimethylthiazol-2-yl] 2 , 5 -diphenyltetrazolium bromide )为一黄色染 剂， 它可被活细胞吸收并被粒腺体中的琥珀酸四 p坐还原酶 ( succinate tetrazolium reductase )还原成不溶水性且呈蓝紫色的 formazan , 因此借由 formazan形成与否， 即可判断并计算细胞的存活率。
首先将人类乳癌细胞 MCF-7 与 MDA-MB-231 分别于含有胎牛血清的培 养液中培养 24小时。 将增生后的细胞以 PBS清洗一次， 并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA处理细胞， 随后在 l,200rpm下离心 5分钟， 将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后加入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮， 再将细胞分置于 96 孔微量盘内。测试时，分别于每一孔内加入 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml 牛樟芝乙醇萃取物 （对照组） 以及 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 （试 验组）， 在 37°C、 5 % C02 下培养 48小时。 其后， 于避光的环境下于每一孔 内加入 2.5 mg/ml的 MTT,反应 4小时后再于每一孔内加入 ΙΟΟμΙ的 lysis buffer 终止反应。 最后以酵素免疫分析仪在 570nm吸光波长下测定其吸光值， 借以 计算细胞的存活率， 并推算出其生长半抑制率所需浓度（即 IC50 值）， 其结 果如表 1所示。
表 1. 体外对乳癌肿瘤细胞存活率的测试结果 测试样品 IC5o ( g/ml )
对照组 (加入牛樟芝萃取物）
MCF-7 1 1 .461
MDA-MB-231 26.812
试验组 (加入式 2)
MCF-7 1 .721
MDA-MB-231 0.992
由表 1 中可知， 借由 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环的作用， 其对 于 MCF-7人类乳癌肿瘤细胞的 IC50值为 1.721 g/ml, 对于 MDA-MB-231 人类乳癌肿瘤细胞的 IC50值则为 0.992 g/ml,相比于牛樟芝萃取混合物所测 得的 IC50值低得多， 因此可证实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3- 苯并二氧环确实能够用于乳癌肿瘤细胞生长的抑制。 实施例 2. 体外对乳癌肿瘤细胞辅助治疗的活性测试
本测试同样是根据美国国家癌症研究所的体外筛检模式进行测试。首先， 取人类乳癌细胞 MCF-7与 MDA-MB-231 , 分别于含有胎牛血清的培养液中培 养 24小时后， 将增生后的细胞以 PBS清洗一次， 并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA 处理细胞， 随后在 1,200 rpm下离心 5分钟， 将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后 加入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮。 测试前， 先加入 0.0017 g/ml紫杉醇（Taxol )处理细胞 72小时， 再将细胞分置于 96孔微量盘内， 之 后分别于每孔内加入 0 g/ml (对照组）， 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml 的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 (试验组)， 在 37°C、 5 % C02 下培养 48小时。 其后， 于避光的环境下于每一孔内加入 2.5 mg/ml的 MTT, 反应 4 小时后于每一孔内加入 100 μΐ的 lysis buffer终止反应。 最后以酵素免疫分析仪 在 570nm吸光波长下测定其吸光值， 借以计算细胞的存活率， 并推算出其生 长半抑制所需浓度 (即 IC50值）， 其结果如表 2所示。
表 2. 体外对乳癌肿瘤细胞经紫杉醇辅助治疗后抑制的测试结果
测试样品 结果 对照组 细胞存活率 （％)
MCF-7 (0.0017 g/ml Taxol) 69±1
MDA-MB-231 (0.0017 g/ml Taxol) 86±1
试验组 IC50 ( g/ml)
MCF-7 (0.0017 g/ml Taxol+式 2) 0.0007
MDA-MB-231 (0.0017 g/ml Taxol+式 2) 0.0009 由表 2中可知，透过紫杉醇的协同作用， 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二 氧环对于 MCF-7 人类乳癌肿瘤细胞的 IC50 值降为 0.0007 g/ml , 对于 MDA-MB-231人类乳癌肿瘤细胞的 IC50值也降为约 0.0009 g/ml, 因此可证 实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环确实能够利用于乳 癌肿瘤细胞生长的抑制， 且在紫杉醇的协同作用下， 有更佳的抑制效果。 实施例 3. 体外抗肝癌肿瘤细胞的活性测试
本测试也是根据美国国家癌症研究所抗肿瘤药物筛检模式进行， 将 4,7- 二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环化合物， 加入 Hep 3B与 Hep G2人类肝癌肿 瘤细胞培养液中进行培养， 借以进行肿瘤细胞存活性的测试。
首先将人类肝癌细胞 Hep 3B与 Hep G2分别于含有胎牛血清的培养液中 培养 24小时。将增生后的细胞以 PBS清洗一次，并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA 处理细胞， 随后在 1,200 rpm下离心 5分钟， 将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后 加入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮， 再将细胞分置于 96孔微 量盘内。 测试时， 分别于每一孔内加入 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml 的牛樟芝乙醇萃取物 （对照组） 以及 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml 的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 （试验组）， 在 37°C、 5 % C02 下培 养 48小时。 其后， 于避光的环境下于每一孔内加入 2.5mg/ml的 MTT, 反应 4小时后再于每一孔内加入 ΙΟΟμΙ的 lysis buffer终止反应。最后以酵素免疫分 析仪在 570nm吸光波长下测定其吸光值， 借以计算细胞的存活率， 并推算出 其 IC50值， 其结果如表 3所示。
表 3. 体外对肝癌肿瘤细胞抑制的测试结果
Figure imgf000010_0001
对照组 (加入牛樟芝萃取物）
Hep 3B 6.1 12
Hep G2 18.931
试马全组 (加入式 2)
Hep 3B 0.016
Hep G2 2.462
由表 3 中可知， 借由 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环的作用， 其对 于 Hep 3B人类肝癌肿瘤细胞的 IC50值为 0.016 g/ml,对于 Hep G2人类肝癌 肿瘤细胞的 IC50值则为 2.462 g/ml,相比于牛樟芝萃取混合物所测得的 IC50 值是低得多， 因此可证实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二 氧环确实能够利用于肝癌肿瘤细胞生长的抑制。
实施例 4. 体外对肝癌肿瘤细胞辅助治疗的活性测试
本测试同样是根据美国国家癌症研究所的体外筛检模式进行测试。首先， 取人类肝癌细胞 Hep 3B与 Hep G2 , 分别于含有胎牛血清的培养液中培养 24 小时后， 将增生后的细胞以 PBS清洗一次， 并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA处理 细胞， 随后在 l,200rpm下离心 5分钟， 将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后加入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮。 测试前， 先于 Hep 3B细胞株 试验加入 0.0043 g/ml的 Lovastatin,而于 Hep G2细胞株试验加入 0.0017 g/ml 的紫杉醇 （Taxol ), 处理细胞 72小时， 再将细胞分置于 96孔微量盘内， 之 后分别于每孔内加入 O g/rnl (对照组）， 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml 的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环 （试验组）， 在 37 °C、 5 % C02 下培 养 48小时。 其后， 于避光的环境下于每一孔内加入 2.5mg/ml的 MTT, 反应 4小时后于每一孔内加入 ΙΟΟμΙ的 lysis buffer终止反应。最后以酵素免疫分析 仪在 570nm 吸光波长下测定其吸光值， 借以计算细胞的存活率， 并推算出其 IC50值， 其结果如表 4所示。
表 4. 体外对肝癌肿瘤细胞经紫杉醇辅助治疗后抑制的测试结果
测试样品 结果 对照组 细胞存活率 （％)
Hep 3B (0.0043 g/ml Lovastatin) 69±1
Hep G2 (0.0017 g/ml Taxol) 86±1 试验组 IC5o ( g/ml )
Hep 3B (0.0043 g/ml Lovastatin+式 2) 0.0007
Hep G2 (0.0017 g/ml Taxol +式 2) 0.0129 由表 4 中可知， 透过 Lovastatin及紫杉醇的协同作用， 4,7-二曱氧基 -5- 曱基 -1,3-苯并二氧环对于 Hep 3B人类肝癌肿瘤细胞的 IC50值降为 0.0007 g/ml, 对于 Hep G2人类肝癌肿瘤细胞的 IC50值也降为约 0.0129 g/ml, 因 此可证实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环确实能够利 用于肝癌肿瘤细胞生长的抑制， 且在紫杉醇的协同作用下， 有更佳的抑制效 果。
实施例 5. 体外抗摄护腺癌肿瘤细胞的活性测试
本测试也是根据美国国家癌症研究所抗肿瘤药物筛检模式进行， 将 4,7- 二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环化合物， 加入 LNCaP与 DU-145人类摄护腺 癌肿瘤细胞培养液中进行培养， 借以进行肿瘤细胞存活性的测试。
首先将人类摄护腺癌细胞 LNCaP与 DU-145分别于含有胎牛血清的培养 液中培养 24小时。 将增生后的细胞以 PBS清洗一次， 并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA处理细胞，随后在 l,200rpm下离心 5分钟，将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后加入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮， 再将细胞分置于 96 孔微量盘内。 测试时， 分别于每一孔内加入 30、 10、 3、 1与 0.3 g/ml牛樟芝 乙醇萃取物（对照组）以及 30、 10、 3、 1与 0.3 g/ml 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3- 苯并二氧环（试验组）， 在 37°C、 5 % C02 下培养 48小时。 其后， 于避光的 环境下于每一孔内加入 2.5mg/ml的 MTT, 反应 4小时后再于每一孔内加入 100 μΐ的 lysis buffer终止反应。 最后以酵素免疫分析仪在 570nm 吸光波长下 测定其吸光值， 借以计算细胞的存活率， 并推算出其 IC50值， 其结果如表 5 所示。
表 5. 体外对摄护腺癌肿瘤细胞抑制的测试结果
测试样品 IC5o ( g/ml ) 对照组（加入牛樟芝萃取物）
LNCaP 45.47
DU-145 30.15
试马全组（加入式 2)
LNCaP 4.46
DU-145 2.21
由表 5中可知， 借由 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环的作用， 其对 于 LNCaP人类摄护腺癌肿瘤细胞之 IC50值为 4.46 g/ml, 对于 DU-145人类 摄护腺癌肿瘤细胞之 IC50值则为 2.21 g/ml, 相较于牛樟芝萃取混合物所测 得的 IC50值低得多， 因此可证实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3- 苯并二氧环确实能够利用于摄护腺癌肿瘤细胞生长的抑制。
实施例 6. 体外对摄护腺癌肿瘤细胞辅助治疗的活性测试
本测试同样是根据美国国家癌症研究所的体外筛检模式进行测试。首先， 取人类摄护腺癌细胞 LNCaP与 DU-145 , 分别于含有胎牛血清的培养液中培养 24小时后， 将增生后的细胞以 PBS清洗一次， 并以 1倍的胰蛋白酶 -EDTA处 理细胞， 随后在 l,200rpm下离心 5分钟， 将细胞沉淀并丟弃上清液。 之后加 入 10ml的新培养液， 轻微摇晃使细胞再次悬浮。 测试前， 先于 LNCaP细胞株 试验加入 0.0017 g/ml的紫杉醇， 而于 DU-145胞株试验加入 0.0043 g/ml的紫 杉醇分别处理细胞 72小时， 再将细胞分置于 96孔微量盘内， 之后分别于每 孔内加入 O g/ml (对照组）, 30、 10、 3、 1、 0.3、 0.1与 0.03 g/ml的 4,7-二 曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环（试验组） 的 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二 氧环， 在 37°C：、 5 % C02 下培养 48小时。 其后， 于避光的环境下于每一孔 内加入 2.5 mg/ml的 MTT, 反应 4小时后于每一孔内加入 ΙΟΟμΙ的 lysis buffer 终止反应。 最后以酵素免疫分析仪在 570nm吸光波长下测定其吸光值， 借以 计算细胞的存活率， 并推算出其 IC5Q值， 其结果如表 6所示。
表 6. 体外对摄护腺癌肿瘤细胞经紫杉醇辅助治疗后抑制的测试结果
测试样品 结果 对照组 细胞存活率 （％)
LNCaP (0.0017 g/ml Taxol) 55±1
DU-145 (0.0043 g/ml Taxol) 71±1 试验组 IC5o ( g/ml )
LNCaP (0.0017 g/ml Taxol+式 2) 1.16
DU-145 (0.0043 g/ml Taxol+式 2) 0.71 试验组 IC5o ( g/ml )
LNCaP (0.0017 g/ml Taxol+式 2) 1.16
DU-145 (0.0043 g/ml Taxol+式 2) 0.71 由表 6中可知，透过紫杉醇的协同作用， 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二 氧环对于 LNCaP人类摄护腺癌肿瘤细胞的 IC50 值降为 1.16 g/ml, 对于 DU-145人类摄护腺癌肿瘤细胞的 IC50值也降为约 OJl g/ml,相比于牛樟芝 萃取混合物所测得的 IC50值低得多， 因此可证实牛樟芝萃取物中的 4,7-二曱 氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环确实能够利用于摄护腺癌肿瘤细胞生长的抑制， 且在紫杉醇的协同作用下， 有更佳的抑制效果。

Claims

权 利 要 求 书 癌肿瘤细包生长的应
Figure imgf000015_0001
其中， 、 R2、 R3与 是分别选自曱氧基、 曱氧基、 曱基与氢其中之一。
2. 根据权利要求 1所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝萃取物所分离制得。
3. 根据权利要求 2所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的水萃取物所分离制得。
4. 根据权利要求 2所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的有机溶剂萃取物所分离制得。
5. 根据权利要求 4所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该有机溶剂是选自酯类、 醇类、 烷类或卤烷所组成的族群。
6. 根据权利要求 5所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该醇类是乙醇。
7. 根据权利要求 1所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环。
8. 根据权利要求 1或 7所述将该化合物利用于抑制乳癌肿瘤细胞生长的 应用， 其中， 该乳癌肿瘤细胞是 MCF-7或 MDA-MB-231细胞系。
9. 一种将具有下列结构式的化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用：
Figure imgf000015_0002
其中， 、 R2、 R3与 R4是分别选自曱氧基、 曱氧基、 曱基与氢其中之一。
10. 根据权利要求 9所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝萃取物所分离制得。
11. 根据权利要求 10所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的水萃取物所分离制得。
12. 根据权利要求 10所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的有机溶剂萃取物所分离制得。
13. 根据权利要求 12所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该有机溶剂是选自酯类、 醇类、 烷类或卤烷所组成的族群。
14. 根据权利要求 13所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该醇类是乙醇。
15. 根据权利要求 9所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长的应 用， 其中， 该化合物是 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环。
16. 根据权利要求 9或 15所述将该化合物利用于抑制肝癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该乳癌肿瘤细胞是 Hep 3B或 Hep G2细胞系。
17. 一种将具有下列结构式的化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用：
Figure imgf000016_0001
其中， 、 R2、 R3与 是分别选自曱氧基、 曱氧基、 曱基与氢其中之一。
18. 根据权利要求 17所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该化合物是由牛樟芝萃取物所分离制得。
19. 根据权利要求 18所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的水萃取物所分离制得。
20. 根据权利要求 18所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该化合物是由牛樟芝的有机溶剂萃取物所分离制得。
21. 根据权利要求 20所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该有机溶剂是选自酯类、 醇类、 烷类或卤烷所组成的族群。
22. 根据权利要求 21所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该醇类是乙醇。
23. 根据权利要求 17所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞生长 的应用， 其中， 该化合物是 4,7-二曱氧基 -5-曱基 -1,3-苯并二氧环。
24. 根据权利要求 17或 23所述将该化合物利用于抑制摄护腺癌肿瘤细胞 生长的应用， 其中， 该乳癌肿瘤细胞是 LNCaP或 DU145细胞系。
25. 一种将包括具有下列结构式化合物的医药组成物利用于抑制肿瘤细 包生长的应用：
Figure imgf000017_0001
其中， 、 R2、 R3与 是分别选自曱氧基、 曱氧基、 曱基与氢其中之一; 而该肿瘤细胞是选自乳癌、 肝癌或摄护线癌的肿瘤细胞。
PCT/CN2008/070024 2007-01-05 2008-01-04 Application d'un extrait d'antrodia cinnamomea pour l'inhibition de la croissance de cellules tumorales WO2008086743A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200710001559.6 2007-01-05
CN200710001559A CN101214238B (zh) 2007-01-05 2007-01-05 牛樟芝萃取物对抑制肿瘤细胞生长的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2008086743A1 true WO2008086743A1 (fr) 2008-07-24

Family

ID=39620788

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/CN2008/070024 WO2008086743A1 (fr) 2007-01-05 2008-01-04 Application d'un extrait d'antrodia cinnamomea pour l'inhibition de la croissance de cellules tumorales

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN101214238B (zh)
WO (1) WO2008086743A1 (zh)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101559084B (zh) * 2009-04-23 2011-06-15 徐财泉 一种抗肿瘤的药物组合物及其生产方法
TWI463989B (zh) 2010-07-30 2014-12-11 Chieh Chou Yu 自牛樟芝萃取之化合物及含彼之醫藥組合物及其用途
TWI454301B (zh) * 2011-01-10 2014-10-01 Univ Kaohsiung Medical 樟芝子實體苯類化合物、製備與分析方法
CN103012358A (zh) * 2011-09-27 2013-04-03 游介宙 自牛樟芝萃取的化合物、含该化合物的医药组合物及该化合物的用途
CN104887661B (zh) * 2014-03-06 2018-02-13 兰亭生物科技有限公司 用于促进伤口愈合的医药组成物及其用途
TWI532432B (zh) * 2015-03-02 2016-05-11 美和學校財團法人美和科技大學 三萜類化合物用以改善藻華現象之用途
CN107397764A (zh) * 2016-05-20 2017-11-28 台湾原生药用植物股份有限公司 用于辅助治疗癌症的医药组合物
TWI650120B (zh) * 2017-07-21 2019-02-11 寶騰生醫股份有限公司 一種醫藥組成物用於製備治療或預防個體感染病毒之藥物的用途
CN110337991A (zh) * 2019-06-19 2019-10-18 三生源生物科技（天津）有限公司 一种基于牛樟芝提取物的肿瘤细胞抑制剂的制备及应用
JP7267635B2 (ja) * 2020-10-15 2023-05-02 緑茵生技股▲ふん▼有限公司 Ｃ－Ｍｅｔ調節用の組成物及び肝細胞再生を促進するための用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1683418A (zh) * 2005-03-07 2005-10-19 敖宗华 用大孔吸附树脂制备樟芝多糖和樟芝三萜的方法及其产品

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1683418A (zh) * 2005-03-07 2005-10-19 敖宗华 用大孔吸附树脂制备樟芝多糖和樟芝三萜的方法及其产品

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUNG-CHEN CHIANG ET AL.: "A Sesquiterpene Lactone, Phenyl and Biphenyl Compounds from Antrodia Chinnamomea", PHYTOCHEMISTRY, vol. 39, no. 3, pages 613 - 616 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101214238B (zh) 2010-05-19
CN101214238A (zh) 2008-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2008086743A1 (fr) Application d'un extrait d'antrodia cinnamomea pour l'inhibition de la croissance de cellules tumorales
TWI330528B (zh)
JP5014959B2 (ja) ベニクスノキタケ抽出物から分離させた新化合物
WO2009052711A1 (fr) Nouveaux composés isolés d'un extrait d'antrodia camphorata
WO2008089674A1 (fr) Cyclohexénone extraite d'antrodia camphorata
TWI394575B (zh) Application of Cynanchum auranthone Cyclohexenone Compounds in the Preparation of Drugs for the Suppression of Hepatitis B Virus
TWI394566B (zh) Used to inhibit the growth of ovarian cancer tumor cells of the cattle camphor cyclohexene ketone compounds
TWI302834B (zh)
TW201102075A (en) Cyclohexenone compound of Antrodia cinnomomea that suppresses growth of tumor cell of pancreatic cancer
TWI383791B (zh) Used to inhibit the growth of gastric cancer tumor cells of the male antler ketone compounds
TWI361687B (zh)
CN101343247B (zh) 牛樟芝的环己烯酮萃取物
TWI583376B (zh) Compounds isolated from Antelroxicus and their use
TW201109013A (en) Cyclohexenone chemical compounds of Antrodia cinnamomea for suppressing the growth of the Lymphoma tumor cell
TWI379679B (zh)
TWI383790B (zh) Used to inhibit the growth of oral cancer cells of the cattle Antrodylcyclohexenone compounds
CN102232946B (zh) 牛樟芝环己烯酮化合物在制备用于抑制胃癌肿瘤细胞生长的药物的用途
TW201442700A (zh) 牛樟芝化合物、萃取物及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 08700050

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 08700050

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1