WO2007086395A1

WO2007086395A1 - 光線力学的療法用キット

Info

Publication number: WO2007086395A1
Application number: PCT/JP2007/051040
Authority: WO
Inventors: Naohiro Kanayama; Hidechika Ozawa; Kentaro Horiuchi; Toru Hirano; Eiji Kohno
Original assignee: Hamamatsu Foundation For Science And Technology Promotion
Priority date: 2006-01-24
Filing date: 2007-01-24
Publication date: 2007-08-02
Also published as: JPWO2007086395A1

Abstract

　本発明は、光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬からなる光線力学的療法のためのキット、光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬を含む光線力学的療法のための医薬、血管拡張性麻酔薬からなる光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤を提供する。

Description

明細書

光線力学的療法用キット

技術分野

[0001] 本発明は、光線力学的療法（Photodynamic Therapy: PDT)用キット、光線力学的療法用剤及び光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤に関する。

背景技術

[0002] 光線力学的療法とは、薬剤と光によって引き起こされる光化学反応を利用した治療法であり、癌組織中に活性酸素を生成させることによって、癌組織を壊死させるものである。

[0003] 具体的には、癌親和性光感受性薬剤を投与し、当該薬剤を癌組織に選択的に蓄積させ、蓄積された癌組織に特定波長の光を照射することによって光化学反応を起こさせ、標的組織中に活性酸素やラジカルを生成させ、癌細胞を壊死させて癌等の疾患を治療しょうとするものである。

[0004] これらの光感受性薬剤としてはポルフィリン骨格を有する化合物が知られており、これらの化合物は、波長が 635nm付近の光の照射により 1重項基底状態力も励起 3重項状態となり、活性酸素を生成することにより癌細胞を壊死させる。

[0005] 実際にこのような治療に用いられる光線力学的療法用剤としては、フォトフリン（（登録商標)武田薬品工業)が知られて!/ヽる。

[0006] フォトフリンは、へマトポリフィンがエーテル及びエステル結合したオリゴマー（2— 8 量体)である。しかし、このフォトフリンを投与された患者は、フォトフリンが患者の体内力排出されるまでに長期間を要するので、フォトフリン処置患者は、フォトフリンが患者の体内から排出されるまでのすくなくとも 1ヶ月間は、直射日光などの強い光を浴びることができず、光の少な!/、場所で過ごさなければならな、。

[0007] また、コプロポルフィリン III亜鉛が細菌によって産生されること及びコプロボルフイリン ΙΠ亜鉛が光感受性を有すること、光線照射により活性酸素を生じること、そして癌細胞に対する毒性効果がへマトポルフィリンに比べて優れていることが見出された（特許文献 1)。 [0008] さらに、胎児の便中力コプロポルフィリン I亜鉛が見出され、その光感受性や PDT における効果が確認されている（特願 2005— 008341)。

[0009] しかし、 PDT用光感受性薬剤の光感受性から、より低用量での処置が望まれていた。

[0010] 特許文献 1 :特開平 05— 229948号公報

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0011] 本発明は、新規な光感受性化合物、その製造方法及びそれを含む光線力学的治療用剤を提供する。

課題を解決するための手段

[0012] 本発明者等は、上記の目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、光線力学的療法用剤を血管拡張性麻酔薬と併用することによって光線力学的療法用剤の癌細胞壊死効果が増強されることを見出し、本発明を完成するに至った。

[0013] したがって、本発明は、下記のとおりである。

1.光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬からなる、光線力学的療法のためのキット、

2.光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロポルフィリン—I亜鉛、コプロポルフィリン—ΠΙ亜鉛又はフォトフリンである、上記 1に記載のキット、

3.血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、上記 1又は 2に記載のキット、

4.光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬を含む、光線力学的療法のための医薬、

5.光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロポルフィリン—I亜鉛、コプロポルフィリン—ΠΙ亜鉛又はフォトフリンである、上記 4に記載の医薬、

6.血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、上記 4又は 5に記載の医薬、 7.血管拡張性麻酔薬力なる、光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤、

8.光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロポルフィリン—I亜鉛、コプロポルフィリン—ΠΙ亜鉛又はフォトフリンである、上記 7に記載の癌細胞壊死作用増強剤、

9.血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、上記 7又は 8に記載の癌細胞壊死作用増強剤、

10.光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤の製造のための血管拡張性麻酔薬の使用、

11.光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプ口ポルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、上記 10 に記載の使用、

12.血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、上記 10又は 11に記載の使用、

13.光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬の有効量を哺乳動物に投与し、その後に光を照射することを含む、癌の治療方法、

14.光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプ口ポルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、上記 13 に記載の癌の治療方法、

15.血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、上記 13又は 14に記載の癌の治療方法。

発明の効果

[0014] 本発明は、光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用を増強することができ、その結果、光線力学的療法用剤の投与量を低減することができるという効果を有する。図面の簡単な説明

[0015] [図 1]図 1は、光線力学的療法に対する血管拡張性麻酔薬 (リド力インゼリー及びリド力インスプレー）の効果である。縦軸は、壊死深度 (mm)であり、横軸は、 ZnCP-I投与量である。

発明を実施するための最良の形態 [0016] 光線力学的療法 (PDT)とは、薬剤と光によって引き起こされる光化学反応を利用した治療法であり、癌組織中に活性酸素を生成させることによって、癌組織を壊死さ ·¾：るものである。

[0017] 本発明の光線力学的療法用剤としては、光線力学的療法に用いることができる任意の薬剤を用いることができる力好ましくは、コプロポルフィリンー1、コプロボルフイリン III、コプロポルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— ΙΠ亜鉛、フォトフリン、レザフリン又は 5— ALA (アミノレヴリン酸）であり、より好ましくは、コプロポルフィリン一 I亜鉛である。本発明の光線力学的療法用剤は、上記化合物の医薬的に許容されるその塩を含む。

[0018] コプロポルフィリン— I及びコプロポルフィリン— IIIは、フナコシから、フォトフリンは、武田薬品工業から、レザフリンは、明治製菓から、そして 5— ALAはコスモノィォから入手することができる。また、コプロポルフィリン—I亜鉛及びコプロポルフィリン III 亜鉛又はフォトフリンは、下記の方法によって調製することができる。

[0019] 出発物質であるコプロポルフィリン—Iをブタノールに溶解し、得られたブタノール溶液を、酢酸アンモ-ゥム塩水溶液を用いて分別抽出し、コプロポルフィリン— Iを含む酢酸アンモ -ゥム塩水溶液を得る。得られたコプロポルフィリン—Iィ匕合物を含む酢酸アンモ-ゥム塩水溶液に塩ィ匕亜鉛水溶液をカ卩えることによって、コプロポルフィリン一 I亜鉛を得ることができる。コプロポルフィリン III亜鉛についても、同様な方法を用いることによって、調製することができる。なお、上記の操作は、遮光環境で行うことが好ましい。

[0020] 本発明の血管拡張性麻酔剤としては、従来公知の任意の血管拡張性麻酔剤を用いることができるが、好ましくは、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体 (ニトログリセリンなど)又は血管拡張性プロスタグランジンである。これらは、すべて医薬品として巿販されている。

[0021] 本発明の光線力学的療法用剤をヒトに投与する場合には、例えば、 1回あたり 0. 1 〜100mgZkg (体重）、好ましくは 1回あたり 1〜： LOOmgZkg (体重）、より好ましくは 1 日あたり l〜50mgZkg (体重）の投与量で投与することができる。本発明の光線力学的療法用剤の投与量、投与回数及び投与経路は、疾患の種類、症状、年齢、投与方法などにより適宜変更することができる。

[0022] 本発明の血管拡張性麻酔剤をヒトに投与する場合には、例えば、 1回あたり 1〜10 Omg/kg (体重）、好ましくは 1回あたり 1〜： LOOmg/kg (体重）、より好ましくは 1回あたり l〜50mgZkg (体重)の投与量で投与することができる。本発明の光線力学的療法用剤の投与量、投与回数及び投与経路は、疾患の種類、症状、年齢、投与方法などにより適宜変更することができる。

[0023] 本発明の光線力学的療法のためのキットは、第一成分として光線力学的療法用剤を、そして第二成分として血管拡張性麻酔薬をそれぞれ独立して含む。また、このキットは、投与量、投与回数及び投与経路等を記載した指示書を含むことができる。

[0024] 本発明の医薬は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤などの製剤にして、経口投与してもよいし、注射剤などの製剤にして、腹腔内や静脈内へ注射する、あるいは坐剤などの製剤にして直腸内投与するような態様で非経口投与することもできる。光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬の含有率は、 1〜90重量％の間で変動させることができる。例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの形態をとる場合には、有効成分を 5〜80重量％含有させるのが好ましい。シロップ剤などの液剤の場合には、有効成分を 1〜30重量％含有させるのが好ましい。さらに、非経口投与する注射剤の場合には、有効成分を 1〜10重量％含有させるのが好ましい。

[0025] 本発明の医薬の製剤化は、賦形剤 (乳糖、白糖、ブドウ糖、マン-トールなどの糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシなどのデンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシゥム、炭酸水素ナトリウムなどの無機物、結晶セルロースなど）、結合剤（デンプンのり液、アラビアゴム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、ェチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロースなど）、滑沢剤 (ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油）、崩壊剤（デンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、 CMC' Na、 CMC'Ca、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウムなど）、矯味矯臭剤（乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニトール、芳香性精油類など)、溶剤 (注射用水、滅菌精製水、ゴマ油、ダイズ油、トウモロコシ油、ォリーブ油、綿実油など）、安定剤（窒素、二酸化炭素などの不活性ガス、 EDTA、チォグリコール酸などのキレート剤、亜硫酸水素ナトリウム、チォ硫酸ナトリウム、 L—ァスコルビン酸、ロンガリットなどの還元物質など）、保存剤（パラォキシ安息香酸エステル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フエノール、塩化ベンザルコ -ゥムなど）、界面活性剤（水素添加ヒマシ油、ポリソルベート 80、 20など）、緩衝剤（タエン酸、酢酸、リン酸のナトリウム塩、ホゥ酸など）、希釈剤などの製剤添加物を用いて、公知の方法で行うことができる。

[0026] 本発明の血管拡張性麻酔剤は、光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤の製造のために用いることができる。

[0027] 本発明の光線力学的療法用剤は、そのもの自身では、抗細胞活性を示さないが、光照射下において、高い抗細胞活性を示す。したがって、これらの化合物を全身に投与した後、癌組織だけに光照射を行うことで、癌組織を選択的に死滅させ、癌を副作用なく治療することができる。従って、これらの化合物は、光線力学的療法剤として、表存型の癌 (例えば、胃癌、肺癌、皮膚癌、食道癌）のみならず、深部型の癌 (例えば、乳癌）の治療に用いることができる。

実施例 1

[0028] 以下、本発明を実施例および比較例によって具体的に説明する。なお、これらの実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を限定するものではない。

[0029] 1.光線力学的療法用キット

[0030] 実験方法

(BALBZc)ヌードマウスの背部皮内に、 HeLa細胞 5 X 10⁶個 ZO. 1mlを移植した。直径が 12〜17mmに増殖した腫瘍に対し、亜鉛ィ匕コプロポルフィリン 1/生理食塩水を局所注射し、次いで血管拡張性麻酔薬 (リド力イン、塩酸リドカイン、塩酸ブピバ力イン)又は麻酔薬口ビバ力インを投与した。所定時間経過後に 160mW/cm²、全照射量 100J/cm²で、ハロゲンランプとフィルターを用い、 580nmの光を照射した。光は、腫瘍の横力も水平方向に照射した。壊死層の観察は、ハロゲン光照射 24時間後に、腫瘍を摘出し、 20%のホルマリンで固定し、パラフィン包埋後、切片を作成、 HE染色し、標本を作成し、観察した。

[0031] 実験結果 (l) ZnCP- IZO.125%塩酸ブピバ力イン（局所注射）

ZnCP-I 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深度

(投与後時間とは、投与から照射までの時間をいう。 )

(mg/kg) (ml) 、min) (mm;

9.2 0.02 13 3.25

9.5 0.02 12 7.13

15.3 0.01 12 7.64

(2) ZnCP- - IZO.25%塩酸ブピバ力イン（局所注射）

ZnCP-I 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深,

(mg/kg) (ml) 、min) (mm;

4.6 0.02 11 5.78

10.1 0.02 11 9.63

(3) ZnCP- - IZO.5%塩酸ブピバ力イン（局所注射）

ZnCP-I 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深,

(mg/kg) (ml) 、min) (mm;

4.7 0.02 11 0.00

6.2 0.02 13 2.27

18.8 0.02 14 7.04

(4) ZnCP- - IZO.5%リドカイン (局所注射）

ZnCP-I リドカイン投与後時間細胞壊死深度

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

5.2 0.02 10 0.00

9.8 0.02 11 6.99

(5) ZnCP- - iZi.o%リドカイン (局所注射）

ZnCP-I リドカイン投与後時間細胞壊死深度

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

5.1 0.02 12 0.00

5.9 0.02 10 0.00 (6) ZnCP- IZ2.0%リドカイン (局所注射）

ZnCP-I リドカイン投与後時間細胞壊死深度

、mg/kg) (ml) (min) (mm)

5.1 0.02 10 0.00

8.0 0.015 12 1.09

19.1 0.015 11 7.17

(7) ZnCP- IZO.2%口ビバ力イン（局所注射）

ZnCP-I 口ビバ力イン投与後時間細胞壊死深度

、mg/kg) (ml) (min) (mm)

27.9 0.02 10 4.42

実施例 2

[0032] 2.光線力学的療法用剤

実験方法

(BALB/c)ヌードマウスの背部皮内に、 HeLa細胞 5 X 10⁶個 /0. 1mlを移植した。直径が 12〜17mmに増殖した腫瘍に対し、亜鉛ィ匕コプロポルフィリン 1/生理食塩水と血管拡張性麻酔薬 (リド力イン、塩酸リドカイン、塩酸ブピバ力イン)の 1： 1の混合液を投与した。所定時間経過後に 160mW/cm²、全照射量 lOOJ/cm²で、ハロゲンランプとフィルターを用い、 580nmの光を照射した。光は、腫瘍の横力水平方向に照射した。壊死層の観察は、ハロゲン光照射 24時間後に、腫瘍を摘出し、 20%のホルマリンで固定し、ノラフィン包埋後、切片を作成、 HE染色し、標本を作成し、観察した。

[0033] 実験結果

(1) ZnCP- IZO.125%塩酸ブピバ力イン（局所注射）

ZnCP-I 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深度

、mg/kg) (ml) (min) (mm)

3.7 0.0075 12 4.09

12.3 0.025 12 8.14

(2) ZnCP- IZO.25%塩酸ブピバ力イン（局所注射） ZnCP- 1 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深,

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

2.5 0.005 12 3.52

4.2 0.01 14 3.22

6.9 0.015 16 6.45

12.5 0.025 10 5.86

(3) ZnCP- - IZO.5%塩酸ブピバ力イン（局所注射）

ZnCP- 1 塩酸ブピバ力イン投与後時間細胞壊死深,

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

2.6 0.005 11 2.31

5.1 0.01 11 0.89

12.6 0.025 15 3.34

13.3 0.03 12 7.35

(4) ZnCP- - IZO.5%リドカイン (局所注射）

ZnCP- 1 リドカイン投与後時間細胞壊死深度

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

2.4 0.005 11 2.67

8.1 0.015 10 10.08

32.7 0.07 11 11.57

(5) ZnCP- - iZi.o%リドカイン (局所注射）

ZnCP- 1 リドカイン投与後時間細胞壊死深度

(mg/kg) (ml) 、min) (mm)

3.6 0.0075 11 4.08

20.9 0.04 11 4.69

26.6 0.055 12 5.59

30.7 0.07 14 9.00

(6) ZnCP- - IZ2.0%リドカイン (局所注射）

ZnCP— I リドカイン投与後時間細胞壊死深度 (mg/kg) (ml) (min) (mm)

13.0 0.025 13 4.43

16.5 0.03 11 4.67

23.1 0.05 12 5.60

(7) ZnCP- 1のみ

ZnCP-I 投与後時間細胞壊死深度

(mg/kg) (min; 、mm,

4.42 10 0.00

5.1 14 0.00

10.1 10 0.67

10.2 10 5.77

11.2 11 2.97

17.3 10 5.25

50.8 13 5.78

[0034] 所見

HeLa腫瘍に ZnCP-lZ血管拡張性薬剤混合溶液を局注し、可視光を照射した結果、毛細血管内に血栓が見られ、組織内出血も見られた。 HeLa細胞に関しては、核がない細胞、クロマチンが凝集した細胞、空胞破壊を生じた細胞等が見られ、壊死したとみられた。血管拡張性薬剤薬量依存的に、細胞壊死深度は著明に深くなつていた。

産業上の利用可能性

[0035] 本発明の光線力学的療法用キット、光線力学的療法用剤及び光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤は、光線力学的治療に有用である。

Claims

請求の範囲

[I] 光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬からなる、光線力学的療法のためのやット。

[2] 光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロボルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、請求項 1に記載のキット。

[3] 血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、請求項 1又は 2に記載のキット。

[4] 光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬を含む、光線力学的療法のための医薬。

[5] 光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロボルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、請求項 4に記載の医薬。

[6] 血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、請求項 4又は 5に記載の医薬。

[7] 血管拡張性麻酔薬力もなる、光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤。

[8] 光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロボルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、請求項 7に記載の癌細胞壊死作用増強剤。

[9] 血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、請求項 7又は 8に記載の癌細胞壊死作用増強剤。

[10] 光線力学的療法用剤の癌細胞壊死作用増強剤の製造のための血管拡張性麻酔薬の使用。

[II] 光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロボルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、請求項 10に記載の使用。

[12] 血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、請求項 10又は 11に記載の使用。

[13] 光線力学的療法用剤及び血管拡張性麻酔薬の有効量を哺乳動物に投与し、その後に光を照射することを含む、癌の治療方法。

[14] 光線力学的療法用剤が、コプロポルフィリンー1、コプロポルフィリン III、コプロボルフィリン— I亜鉛、コプロポルフィリン— III亜鉛又はフォトフリンである、請求項 13に記載の癌の治療方法。

[15] 血管拡張性麻酔薬が、リドカイン、ブピバ力イン、 NO誘導体又は血管拡張性プロスタグランジンである、請求項 13又は 14に記載の癌の治療方法。