WO2007086389A1 - 米糠由来の水溶性多糖類、その製造法及びこれを用いた乳化剤 - Google Patents
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Definitions
- the present invention relates to a water-soluble polysaccharide derived from rice bran and a method for producing the same, and more particularly, a rice bran water-soluble polysaccharide excellent in emulsification and emulsion stability function by extraction from rice bran under high-temperature conditions and acidic conditions. It relates to its production and use.
- Patent Document 4 Even under high temperature and pressure conditions such as 130 ° C and 2 MPa, polysaccharides could not be efficiently obtained unless the sample was sheared with an etastruder or the like if the pH was not adjusted (Patent Document 4).
- the extraction efficiency under neutral conditions is poor even under high temperature and pressure conditions, and it is necessary to use a combination of enzymatic degradation (Patent Document 5).
- These conventional rice bran polysaccharides have been found to have functionalities that improve the physical properties and functions of foods that have many uses as dietary fiber reinforcement (dietary fiber).
- Patent Document 1 Japanese Patent Publication No. 6-11764
- Patent Document 2 Japanese Patent Laid-Open No. 5-112455
- Patent Document 3 Japanese Patent No. 3098553
- Patent Document 4 Japanese Patent Publication No. 2-100644
- Patent Document 5 Japanese Patent Laid-Open No. 5-219976
- the inventors have obtained knowledge that rice bran can be extracted under high temperature conditions under acidic conditions, and functional polysaccharides that are cell wall constituents can be efficiently extracted.
- the present inventors have obtained knowledge that the water-soluble polysaccharide of the present invention functions as an emulsifier without performing a further hydrolysis treatment with an enzyme, for example, in addition to the function as a dietary fiber.
- the present invention has been completed on the basis of strong knowledge.
- the present invention relates to
- a method for producing a water-soluble polysaccharide wherein a water-soluble fraction of rice bran is extracted by a treatment of ⁇ 2.5 to pH4 and 95 ° C to 140 ° C.
- An emulsifier comprising the water-soluble polysaccharide according to (3) as an active ingredient.
- the rice bran used in the present invention refers to all rice bran produced as a by-product during rice milling, and includes defatted rice bran and the like.
- Rice bran contains a lot of fats and oils rich in unsaturated fatty acids, and becomes a peroxide and is likely to cause flavor problems. Therefore, defatted rice bran obtained by defatting lipids with hexane or the like in advance is preferred as a raw material.
- the method for producing rice bran polysaccharide will be specifically described as follows. Rice bran is crushed as it is or is hydrated, and it is heated to a temperature of pH 2.5 or higher and pH 4 or lower and a temperature range of 95 ° C or higher. Perform extraction. When the pH is lower, hydrolysis of the polysaccharide is promoted, the proportion of reducing sugar in the total sugar becomes very high, and the yield of the polymer fraction is lowered. In addition, when the extraction temperature is below 95 ° C, the yield deteriorates, and the resulting extract increases impurities such as ash.
- Yield increases as the temperature rises Because hydrolysis of the polysaccharide proceeds, 95 ° C to 140 ° C, preferably 105 ° C to 140 ° C, more preferably 110 ° C to 130 ° C It is desirable to extract in the temperature range. Heating exceeding 100 ° C is performed under pressure in a pressurized container or the like.
- the extraction time is not particularly limited, but it is preferably about 2 minutes to 2 hours.
- alkali such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide and ammonia
- alkali such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide and ammonia
- the polysaccharide thus obtained can be dried and used as it is, but it is preferable to carry out further purification in order to remove the mixed impurities.
- Desalting and purification methods include precipitation using a polar organic solvent such as methanol, ethanol, isopropanol, and acetone, electrodialysis, ion-exchange or hydrophobic resin, and membrane fraction using UF membrane. Examples are drawings. One of these methods or a combination of two or more methods can be used. Of these, the precipitation method using a polar organic solvent is efficient and preferable. Ethanol is particularly preferable.
- the purified rice bran polysaccharide solution is dried by freeze drying, spray drying or the like to obtain a powdered rice bran polysaccharide.
- the viscosity of the polysaccharide solution obtained in the present invention is not particularly limited, but it is a low viscosity of 50 cP's, preferably 20 cP's or less, at 20 ° C in a 5 wt% solution.
- glucose and arabinose are used as constituent sugars.
- All the obtained polysaccharides have a molecular weight of 1 million or less, preferably 500,000 or less, as analyzed by gel filtration HPLC (TSKgel-G-5 000 PWXL; TOHSO).
- the average molecular weight of this polysaccharide is the standard substance Pullulan (Showa Denko) It is a value measured as a standard substance.
- the water-soluble polysaccharide of the present invention can be used alone as an emulsifier. In addition, other quality improvers and emulsifiers can be used in combination.
- the emulsifier can make an emulsion in any pH range. It is preferable to make an emulsion at pH 4 to pH 9. A neutral pH range of pH 6 to pH 8 is more preferable.
- the addition amount is not particularly limited, but the addition amount in the emulsion is 0.05 to 25% by weight, preferably 0.1 to 15% by weight, and the oil content is 5 to 50% by weight.
- An emulsion can be made.
- the addition timing of the water-soluble polysaccharide is not particularly limited, but an emulsified product can be obtained by preliminarily dissolving in the water phase and dispersing in the oil phase.
- the total sugar was quantified using the phenol-sulfuric acid method
- the starch was quantified by the iodine starch method
- the reducing sugar was quantified by the Somogene Nelson method
- the uronic acid was quantified by the Blumenkrantz method
- the crude protein was quantified by the Kjeldahl method.
- the water-solubilization rate is the ratio of the solids water-soluble after heat extraction to the solid content of the raw material
- the ethanol precipitation yield is the ratio of the solid content of ethanol precipitation to the solid content of the raw material. The value is expressed in weight%.
- the range suitable for extraction was determined to be pH 4 or less.
- the water content was high, but the resulting polysaccharide had a bad eta precipitation rate of 8%.
- the molecular weight distribution was measured by HPLC, it became clear that a high molecular fraction could not be obtained, and it was considered that decomposition was progressing under strong acid conditions (Fig. 1). Therefore, it was judged that the pH during extraction was 2.5 or more and 4 or less.
- Extraction was performed for 90 minutes at 150 ° C. Heating was performed in a hot water bath below 100 ° C and using an autoclave above 110 ° C. After adjusting the pH to 7, the obtained slurry was centrifuged (8000 G ⁇ 30 minutes), and ethanol was added to the supernatant to a concentration of 60%. The precipitate was collected by centrifugation (8000 G X 30 min) and freeze-dried to obtain a powdered rice bran polysaccharide.
- Table 2 shows the compositional analysis values of the rice bran polysaccharides obtained by this example.
- Oil phase Lemon oil 10% • Oil phase Soybean oil 40%
- the emulsion using rice bran polysaccharide A as an emulsifier did not separate the oil and maintained a stable emulsified state even after storage for one week.
- it maintained a stable emulsified state with a small particle size under neutral conditions, and had a very strong emulsifying power.
- Rice bran or defatted rice bran which was originally treated as industrial waste, can efficiently extract water-soluble polysaccharides, so that the addition to the environment can be reduced. Also, by using the obtained polysaccharide as an emulsion stabilizer, it has become possible to produce safe foods that do not use synthetic emulsifiers.
- FIG. 1 shows gel filtration of molecular weight distribution of water-soluble rice bran polysaccharide.
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Abstract
米糠を有効活用するべく、効率よく水溶性の多糖類を抽出することを課題とした。ダイエタリーファイバーとしての機能の他に食品の物性や機能を改良する機能性素材として利用できないか検討することを目的とした。米糠を高温条件下、酸性条件で抽出し、細胞壁構成成分である機能性多糖類を効率よく抽出できる知見を得るに到った。加えて本発明の水溶性多糖類はダイエタリーファイバーとしての機能の他に乳化剤として機能する知見を得るに到った。
Description
明 細 書
米糠由来の水溶性多糖類、その製造法及びこれを用いた乳化剤 技術分野
[0001] 本発明は、米糠由来の水溶性多糖類およびその製造法に関し、詳しくは米糠から 高温条件下、酸性条件で抽出することによる、乳化及び乳化安定機能に優れた米糠 水溶性多糖類およびその製造法及び使用法に関する。
背景技術
[0002] 現在日本では年間 100万 tの米糠が精米の過程で排出されている。米糠のうち約 40 %は搾油の原料として使用されているが、その過程で生じる脱脂米糠はこれまで有 効活用されることなく産業廃棄物として処理されるか、焼却処分されていた。
[0003] 米糠力ゝら多糖類成分を抽出する方法として、水性溶媒で抽出する方法、および酵 素処理により細胞壁を部分的に分解することによって抽出する方法が報告されてい る。水性溶媒で抽出する場合、常圧で抽出を行なうと pH条件にかかわらず抽出効率 力 S3.5重量％から 8重量％と低い (特許文献 1, 2)。また lOOMPa以上と高圧条件でも 常温であると同様に収率が低い（特許文献 3)。また 130°C, 2MPaといった高温加圧 条件下でも、 pH未調整では試料をエタストルーダー等によりせん断しなければ効率 よく多糖類を得ることができなかった (特許文献 4)。高温加圧条件でも中性下での抽 出効率は悪ぐ酵素分解の併用が必要である (特許文献 5)。これら従来の米糠多糖 類は食物繊維強化 (ダイエタリーファイバー）としての用途が多ぐ食品の物性や機能 を改善する機能性は見出されて 、な 、。
[0004] 特許文献 1 :特公平 6-11764 公報
特許文献 2 :特開平 5-112455 公報
特許文献 3 :特許第 3098553 公報
特許文献 4:特公平 2-100644 公報
特許文献 5 :特開平 5-219976 公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] 米糠を有効活用するべぐ効率よく水溶性の多糖類を抽出し、更にダイエタリーファ ィバーとしての機能の他に、食品の物性や機能を改良する機能性素材として利用す ることを課題とした。
課題を解決するための手段
[0006] 上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、米糠を高温条件下、酸性条件で抽出し 、細胞壁構成成分である機能性多糖類を効率よく抽出できる知見を得るに到った。 加えて本発明の水溶性多糖類はダイエタリーファイバーとしての機能の他に、例えば 酵素による更なる加水分解処理等を行なうことなぐ乳化剤として機能する知見を得 るに到った。本発明は力かる知見に基づいて完成されたものである。
[0007] すなわち本発明は、
(1) ρΗ2.5以上 pH4以下、且つ 95°C以上 140°C以下の処理により、米糠力 水溶性画 分を抽出することを特徴とする、水溶性多糖類の製造法。
(2)処理後に脱塩精製を行なうことを特徴とする、 (1)に記載の多糖類の製造法。
(3) pH2.5以上 pH4以下、且つ 95°C以上 140°C以下の処理により、米糠力 水溶性画 分を抽出して得た水溶性多糖類。
(4) (3)に記載の水溶性多糖類を有効成分とする乳化剤。
である。
発明の効果
[0008] 米糠力 酸性条件で 95°C以上の高温で抽出することにより、効率良く水溶性多糖 類を得ることができ、得られた水溶性多糖類は、乳化安定剤として機能を有していた 。また本発明の多糖類を用いることで、上記機能に優れた食品を得ることが出来た。 発明を実施するための最良の形態
[0009] 本発明に用いる米糠とは、米を精米する際に副生する米糠全般を指し、また脱脂 米糠等を含む。米糠は不飽和脂肪酸に富む油脂分を多く含み、過酸化物となり風味 上問題が起きやす ヽので、予めへキサン等で脂質を脱脂した脱脂米糠が原料として 好ましい。
[0010] 米糠多糖類の製造法を具体的に説明すると以下のようである。米糠をそのままある いは粉砕し、これに加水を行ない、 pH2.5以上 pH4以下で 95°C以上の温度域で高温
抽出をおこなう。より低 pH域になると多糖類の加水分解が促進され、全糖中の還元 糖の割合が非常に高くなり、高分子画分の収率が低下する。また、抽出温度は 95°C を切ると収率が悪化し、得られた抽出物は灰分等の夾雑物が増加する。高温になる に従って収率は増加する力 多糖類の加水分解が進むため、 95°C以上 140°C以下、 好ましくは 105°C以上 140°C以下、より好ましくは 110°C以上 130°C以下の温度域で抽 出することが望ましい。 100°Cを超える加熱は、加圧容器等の加圧下で行なわれる。 抽出時間は特に制限されるわけではないが、 2分から 2時間程度であることが好まし い。
[0011] 高温抽出時に pHを調整する際の酸には特に制限はなぐいずれのものも利用でき る力 酸性条件にするために塩酸，硫酸，リン酸等の無機酸、あるいは酢酸，クェン 酸，乳酸，シユウ酸等の有機酸を使用することが出来る。
[0012] 得られた抽出液の pHを任意に調整し、水溶性画分を遠心分離等により分離する。
この pH調整の際に水酸化ナトリウム，水酸ィ匕カリウム，水酸ィ匕カルシウム，アンモニア 等のアルカリを用いることが出来る。こうして得られた多糖類はそのまま乾燥して利用 することも出来るが、混在する夾雑物を除去するために更なる精製をする方が好まし い。
[0013] 脱塩精製処理の方法として、メタノール，エタノール，イソプロパノール，アセトン等 の極性有機溶媒を用いた沈殿法、電気透析処理，イオン交換榭脂あるいは疎水性 榭脂、 UF膜を用いた膜分画等が例示できる。これらの一法又は二法以上を組み合 わせて用いることが出来る。中でも極性有機溶媒による沈澱法が効率的で好ましぐ 特にエタノールの使用が好ましい。こうして精製された米糠多糖類溶液を凍結乾燥、 スプレードライ等により乾燥させ、粉体の米糠多糖類が得られる。
[0014] 本発明で得られた多糖類の溶液の粘度は、特に制限されるものではないが 5重量 %溶液で 20°Cにおいて 50cP's、好ましくは 20cP's以下の低粘度である。米糠水溶性 多糖類の構成糖は特開平 11-049682に記載の方法で分析した結果、グルコースとァ ラビノースを構成糖とする。得られた多糖類はいずれもゲル濾過 HPLC (TSKgel-G-5 000 PWXL； TOHSO)で分析した平均分子量力 100万以下、好ましくは 50万以下の 分子量を示す。この多糖類の平均分子量は、標準物質プルラン (昭和電工 (株)）を
標準物質として測定した値である。
[0015] 本発明の水溶性多糖類は単独で乳化剤として利用することが出来る。また、他の品 質改良剤や乳化剤も併用することが出来る。本乳化剤はいかなる pH域でも乳化物を 作ることが可能である力 pH4〜pH9で乳化物を作ることが好ましぐ pH6〜pH8の中 性 pH域がより好ましい。添加量は特に限定されるものではないが、乳化物中への添 加量が 0.05重量％から 25重量％、好ましくは 0.1重量％から 15重量％により、油分 5重 量％から 50重量％の乳化物を作ることが出来る。本水溶性多糖類の添加時期につ いても特に制限されるものではないが、水相に予め溶解する力、油相に分散する事 により乳化物を得ることが出来る。
[0016] 以下実施例を例示して本発明を説明するが、これらは例示であって本発明の内容 力 Sこれらの例示によって制限されるものではない。なお例中の％は特にことわらない 限り重量基準を意味するものである。
実施例 1
[0017] 巿販の脱脂米糠 150gを 3kgに加水して塩酸を用いて pH2〜7に調整した。これらを 1 10°C, 90分加圧加熱して水溶性多糖類を抽出した。 pHを 7に調整後、得られたスラリ 一を遠心分離し (8000 G X 30分、室温）、上清にエタノールを 60%濃度となるようにカロ えた。沈殿を遠心分離 (8000 G X 30分、室温）により回収し、凍結乾燥した。表 1は、 この実施例により得られた米糠多糖類の組成分析値を示す。これら多糖類の組成分 析法として、全糖はフ ノール硫酸法、澱粉はヨウ素澱粉法、還元糖はソモジ 'ネルソ ン法、ゥロン酸は Blumenkrantz法、粗蛋白質はケルダール法を用いて定量した。尚、 水溶化率とは原料の固形分に対して加熱抽出後に水溶化した固形分の割合を、ェ タ沈収率とは原料の固形分に対してエタノール沈澱の固形分の割合を、それぞれ重 量％で示した値である。
[0018] [表 1] 110°C抽出時の各 pHにおける組成分析値
抽出 水溶化率 エタ沈収率 全糖 澱粉 還元糖 ゥロン酸 粗蛋白質 灰分
PH (%) (%) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) pH2 53.9 8.0 - - - - - pH3 47.5 1 2.2 56.6 1 .0 0.3 9.3 1 1 1 21 .0 pH5 33.0 3.8 45.6 1 .0 0.6 6.9 1 2.2 29.4 pH7 33.2 1 .0 39.5 1 .1 1 .4 7.3 23.5 25.1
[0019] これより、 pH5以上では水溶ィ匕率、エタ沈収率ともに低ぐ全糖すなわち多糖類純 度も低い。また中性付近では蛋白質含量が増加することから、抽出に適した範囲は p H4以下であると判断された。 pH2で抽出すると、水溶ィ匕率は高いが、得られた多糖類 のエタ沈収率が 8%と悪力つた。また分子量分布を HPLCにより測定したところ、高分 子画分が得られないことが明らかとなり、強酸条件により分解が進んでいると考えられ た（図 1)。よって抽出時の pHは 2.5以上 4以下が適当であると判断した。
実施例 2
[0020] 巿販の脱脂米糠 5gを 100gに加水して塩酸を用いて pH3に調整した。これらを、 60
150°Cの条件下 90分抽出した。 100°C以下では湯浴上、 110°C以上はオートクレー ブを用いて加熱を行った。 pHを 7に調整後、得られたスラリーを遠心分離し (8000 G X 30分）、上清にエタノールを 60%濃度となるように加えた。沈殿を遠心分離 (8000 G X30分）により回収し、凍結乾燥し粉体の米糠多糖類を得た。表 2は、この実施例に より得られた米糠多糖類の組成分析値を示す。
[0021] [表 2] pH3抽出時の各温度における組成分析値
抽出 水溶化率 エタ沈収率 全糖 澱粉 逼兀糖 ゥロン酸 粗蛋白質 灰分
/皿' (%) (%) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％) (乾物中％)
60°C 22.5 4.4 10.8 0.3 0.6 4.1 10.7 69.1
80°C 29.1 5.4 18.0 0.6 1.2 7.8 8.1 56.9
100C 38.9 11.2 56.7 2.4 0.4 8.5 5.8 35.6
110C 53.5 13.2 57.4 1.2 1.4 6.7 10.6 21.0
120°C 57.6 11.0 58.1 1.8 1.9 8.1 4.6 26.6
130°C 63.3 14.2 53.8 1.7 1.7 10.5 5.3 30.8
135°C 68.3 15.0 53.5 1.0 2.7 10.3 6.3 32.9
150°C 65.0 7.0 30.4 1.0 9.5 8.2 7.0 40.1
[0022] その結果、 pH3の酸性条件で抽出した場合、 60°C, 80°Cでは水溶ィ匕率が低ぐ全 糖すなわち多糖類純度が低ぐ灰分が多力つた。 110 130°Cではエタ沈収率が高く 好ましいが、 135°Cでは加水分解による還元糖の増力！]、および灰分が増加する傾向 が若干認められ、 150°Cでは明らかに水溶ィ匕率の低下，全糖の減少，還元糖の増加 等が認められた。
[製造例 1]
[0023] 巿販の脱脂米糠 5gを 100gに加水して塩酸を用いて pH3に調整した。これらをオート
クレープを用いて、 110°Cの条件下 90分抽出した。 pHを 7に調整後、得られたスラリー を遠心分離し (8000 G X 30分）、上清にエタノールを 60%濃度となるようにカ卩えた。沈 殿を遠心分離 (8000 G X 30分）により回収し、凍結乾燥し粉体の米糠多糖類 Aを得た 実施例 3
[0024] 〇乳化安定性の評価
表 3の配合で水相に油相を添カ卩した後超音波処理 (5281型振動子； KAIJO DENKI
)により乳化物を調製し、 4°Cで静置保存した。尚、表 3中の％は容積％である。
[0025] [表 3]乳化物配合
a.乳化香料配合 b.ホイップクリーム配合
•油相 レモンオイル 1 0% •油相 大豆油 40%
1 2%米糠多糖類 A水溶液 82.5% 5 %米糠多糖類 A水溶液 30%
-水相 -水相
グリセリン 1 7.5% 緩衝液（pH4.0/7.0)* 30%
C.コ一ヒ —クリーム配合
-油相 大豆油 25% * 1 OOmMクェン酸 Na-HCI buffer (pH4.0)
5 %米糠多糖類 A水溶液 37.5% 1 OOmM Uン酸 Na-HCI buffer (pH7.0)
-水相
緩衝液（pH4.0/7.0)* 37.5%
[0026] これら乳化物の粒子径を、レーザー粒度分布計 (SALD-2000；島津製作所)を用い て経時的に測定した。表 4に 0, 1, 7日後の平均乳化粒子径を示す。
[0027] [表 4]各乳化物の粒子径変化 乳化系 粒子径 m)
PH D+0 D+Ί D+7
乳化香料配合 - 0.636 0.659 0.646
pH4 5.700 7.1 59 3.628
ホイップクリー -厶配合
pH7 2.41 3 2.930 2.478
pH4 2.1 30 2.1 92 2.1 76
コ一ヒ一クリー -厶配合
pH7 1 .581 1 .641 1 .688
[0028] 以上の結果、乳化剤として米糠多糖類 Aを使用した乳化物は、油分の分離等がなく 一週間保存後も安定な乳化状態を維持していた。特に中性条件下で粒子径が小さく 安定した乳化状態を維持しており、非常に強い乳化力を持っていた。
産業上の利用可能性
[0029] 本来産業廃棄物として処理されていた米糠もしくは脱脂米糠力 効率よく水溶性多 糖類を抽出可能となったことにより、環境への付加を軽減することが可能となる。また 得られた多糖類を乳化安定剤として利用することにより、合成乳化剤を使用しない安 全な食品を製造することが可能となった。
図面の簡単な説明
[0030] [図 1]水溶性米糠多糖類の分子量分布のゲル濾過を示す。
Claims
[1] pH2.5以上 pH4以下、且つ 95°C以上 140°C以下の処理により、米糠から水溶性画分 を抽出することを特徴とする、水溶性多糖類の製造法。
[2] 処理後に脱塩精製を行なうことを特徴とする、請求項 1に記載の多糖類の製造法。
[3] pH2.5以上 pH4以下、且つ 95°C以上 140°C以下の処理により、米糠から水溶性画分 を抽出して得た水溶性多糖類。
[4] 請求項 3に記載の水溶性多糖類を有効成分とする乳化剤。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6466203A (en) * | 1987-09-07 | 1989-03-13 | Hiroshi Hikino | Polysaccharide, isolation and use thereof |
| JPH02276801A (ja) * | 1988-12-07 | 1990-11-13 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 水溶性ヘミセルロースの製造方法 |
| JPH04244203A (ja) * | 1991-01-29 | 1992-09-01 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 抽出改良法 |
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6466203A (en) * | 1987-09-07 | 1989-03-13 | Hiroshi Hikino | Polysaccharide, isolation and use thereof |
| JPH02276801A (ja) * | 1988-12-07 | 1990-11-13 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 水溶性ヘミセルロースの製造方法 |
| JPH04244203A (ja) * | 1991-01-29 | 1992-09-01 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 抽出改良法 |
| JPH0769865A (ja) * | 1993-09-03 | 1995-03-14 | Sanei Gen F F I Inc | 水溶性ヘミセルロースを含有する製剤 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007222844A (ja) * | 2006-02-27 | 2007-09-06 | Chikuno Shokuhin Kogyo Kk | 乳化性組成物 |
| CN116396406A (zh) * | 2023-03-03 | 2023-07-07 | 华南理工大学 | 一种植物细胞壁多糖及其制备方法和应用 |
| CN116396406B (zh) * | 2023-03-03 | 2023-12-19 | 华南理工大学 | 一种植物细胞壁多糖及其制备方法和应用 |
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