WO2006109397A1 - 逆流防止構造、それを用いた検査用マイクロチップおよび検査装置 - Google Patents

逆流防止構造、それを用いた検査用マイクロチップおよび検査装置 Download PDF

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WO2006109397A1
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backflow prevention
reagent
inspection
channel
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PCT/JP2006/305109
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Kusunoki Higashino
Yasuhiro Sando
Akihisa Nakajima
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Konica Minolta Medical & Graphic, Inc.
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    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L2201/00—Properties
    • C08L2201/12—Shape memory
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    • F16K2099/0082—Microvalves adapted for a particular use
    • F16K2099/0084—Chemistry or biology, e.g. "lab-on-a-chip" technology

Definitions

  • the present invention relates to a testing microchip that can be used as a microreactor in genetic testing or the like, and a testing device using the same.
  • Such a system is also called ⁇ -TAS (Micro total Analysis System), bioreactor, lab “on-chips”, or biochip. Its application is expected in fields such as agricultural production.
  • ⁇ -TAS Micro total Analysis System
  • bioreactor Bioreactor
  • lab on-chips
  • biochip biochip
  • the present inventors have stored a sample storage unit that stores a sample, a reagent storage unit that stores a reagent, and a sample storage unit.
  • a specimen and a reagent housed in the reagent housing part are joined together to perform a predetermined test on a reaction part having a reaction channel for performing a predetermined reaction process, and a reaction processing substance obtained by the reaction of the reaction part.
  • the specimen storage section, the reagent storage section, the reaction section, and the test section are continuous channels that continuously flow from the upstream side to the downstream side.
  • Patent Document 3 Japanese Patent Application No. 2004-138959
  • This backflow prevention part is a check valve in which the valve body closes the flow path opening by backflow pressure, or an active valve that closes the opening by pressing the valve body to the flow path opening by the valve body deforming means. It is made up of things.
  • the microsphere 167 is used as a valve body, and the opening 168 formed in the substrate 162 is opened and closed by the movement of the microsphere 167, thereby allowing the liquid to flow. Allow and block passage.
  • the microsphere 167 is separated from the substrate 162 by the liquid pressure and the opening 168 is opened, so that the passage of the liquid is allowed.
  • the microsphere 167 is seated on the substrate 162 and the opening 168 is closed, so that the passage of the liquid is blocked.
  • the flexible substrate 169 which is laminated on the substrate 162 and whose end extends to the upper side of the opening 168, is formed above the opening 168 by hydraulic pressure.
  • the opening 168 is opened and closed by moving up and down.
  • the end of the flexible substrate 169 is separated from the substrate 162 by the hydraulic pressure, and the opening 168 is opened. Permissible .
  • the flexible substrate 169 comes into close contact with the substrate 162 and the opening 68 is closed, so that the passage of the liquid is blocked.
  • a flexible substrate 163 having a valve portion 164 protruding downward is laminated on a substrate 162 having an opening 165 formed thereon.
  • a valve body deforming means such as a pneumatic piston, a hydraulic piston, a piezoelectric piston, a shape memory alloy actuator, etc.
  • the valve portion 164 is tightly attached to the substrate 162 so as to cover the opening 165, thereby blocking back flow in the B direction.
  • the active valve is not limited to one that is operated by an external driving device, and a configuration in which the valve body is deformed by itself to close the flow path, for example, as shown in FIG.
  • a structure that is deformed by energizing heating using 181 is disclosed, and a structure that is deformed by energizing heating using shape memory alloy 182 is disclosed, as shown in FIG.
  • the microsphere 167 needs to be a valve body, the opening 168 must be formed in the flow path, and the microsphere 167 must be disposed.
  • the structure is complicated, the manufacturing process is complicated, and the cost is high.
  • the flexible substrate 169 that is laminated on the substrate 162 and whose end extends to the upper side of the opening 168 must be configured.
  • the configuration is complicated, the manufacturing process is complicated, and the cost is high.
  • a flexible substrate 163 having a valve portion 164 projecting downward is disposed, and the flexible substrate 163 is arranged from the upper side with air pressure, hydraulic pressure, and hydraulic piston. Since it needs to be pressed by valve element deformation means such as a piezoelectric actuator or shape memory alloy actuator, a separate drive mechanism is required, the structure is complicated, the manufacturing process is complicated, and the cost is high. At the same time, the inspection microchip will become larger.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2001-322099
  • Patent Document 2 JP 2004-108285 A
  • Patent Document 3 Japanese Patent Application No. 2004-138959
  • Non-patent document 1 “DNA chip technology and its application”, “Protein Nucleic Acid Enzyme” 43 ⁇ , No. 13 (1 998) Fumio Kimizuka, Yasunobu Kato, Kyoritsu Publishing Co., Ltd.
  • the present invention is a backflow prevention structure that constitutes a backflow prevention unit that prevents backflow of liquid over a joining part where two flow paths of the microchip for inspection join. Therefore, a separate drive mechanism is not required, the manufacturing cost can be reduced without increasing the size of the inspection microchip with a simple structure, and the back flow of the liquid can be reliably prevented.
  • An object of the present invention is to provide an inspection microchip that can perform an accurate inspection and has excellent reliability, and an inspection apparatus using the same.
  • the present invention has been invented in order to achieve the above-described problems and objects in the prior art, and the backflow prevention structure of the present invention includes:
  • the apparatus includes a backflow prevention means provided in one flow path upstream from the merging section,
  • the channel resistance of the backflow preventing means is set to be larger than the total channel resistance of the total upstream and downstream channel resistances of the junction in the other channel.
  • the apparatus includes a backflow prevention means provided in one flow path upstream from the merging section,
  • the channel resistance of the backflow preventing means is set to be larger than the total channel resistance of the total upstream and downstream channel resistances of the junction in the other channel.
  • the inspection microchip of the present invention comprises:
  • a sample storage section for storing a sample
  • a reagent container for storing the reagent;
  • a reaction unit having a reaction channel for performing a predetermined reaction process by combining the sample stored in the sample storage unit and the reagent stored in the reagent storage unit;
  • An inspection section having an inspection flow path for performing a predetermined inspection on the reaction processing substance obtained by the reaction of the reaction section,
  • the apparatus includes a backflow prevention means provided in one flow path upstream from the merging section,
  • the channel resistance of the backflow preventing means is set to be larger than the total channel resistance of the total upstream and downstream channel resistances of the junction in the other channel.
  • FIG. 1 is a perspective view showing an embodiment of an inspection apparatus according to the present invention, comprising an inspection microchip according to the present invention and an inspection apparatus main body force for detachably mounting the inspection microchip.
  • FIG. 2 is a top view showing only the entire flow path formed in the inspection microchip of FIG.
  • FIG. 3 is a partially enlarged view showing a reagent storage part of the flow path of FIG.
  • FIG. 4 is a partially enlarged view showing the entire flow path branched from the reagent storage section of the flow path of FIG.
  • FIG. 5 (a) is a cross-sectional view showing an example of a micropump 11 using a piezo pump
  • FIG. 5 (b) is a top view thereof
  • FIG. It is sectional drawing which showed the Example.
  • FIG. 6 is a schematic top view showing the configuration of the reagent quantification unit.
  • FIG. 7 is a schematic view schematically showing an example of the flow path of the microchip for inspection showing the configuration of the backflow prevention unit of the present invention.
  • FIG. 8 is a schematic view schematically showing a configuration of an example of a backflow prevention unit of the present invention.
  • FIG. 9 is a schematic view schematically showing a configuration of an example of the backflow prevention unit of the present invention.
  • FIG. 10 is a cross-sectional view schematically showing a configuration of a backflow prevention unit.
  • FIG. 11 is a cross-sectional view schematically showing a configuration of a backflow prevention unit.
  • FIG. 12 is a cross-sectional view schematically showing a configuration of a backflow prevention unit.
  • FIG. 13 is a cross-sectional view schematically showing a configuration of a backflow prevention unit. Explanation of symbols
  • the flow path resistance upstream of the backflow prevention means is the total flow path of the total flow path resistance upstream and downstream of the junction in the other flow path. It is set to be larger than the resistance.
  • the channel resistance of the backflow preventing means is the flow upstream and downstream of the junction in the other channel. Since the total channel resistance is greater than the total channel resistance, it is possible to reliably prevent the liquid from flowing back into one of the channels upstream of the backflow prevention means.
  • the liquid to be sent from one flow path is sent to the merge flow path
  • the liquid is fed with a large pump pressure that can compensate for the pressure drop due to the flow path resistance of the backflow prevention means. By doing so, the liquid to be sent can be sent from the one flow path to the merge flow path through the backflow prevention means.
  • the pump pressure of the liquid feed pump to one flow path to a pump pressure higher than the liquid feed pump pressure to the other flow path, and switching these liquid feed pumps, The liquid to be selectively sent from the other flow path and the other flow path can be reliably sent to the merging flow path, and the liquid from the merging flow path to one of the flow paths should be prevented from flowing back. Can be reliably prevented from flowing back.
  • one flow path is used as a reagent flow path communicating with a reagent storage section in which a reagent is stored, and the other flow path is connected to a sample storage section storing a sample.
  • the backflow prevention structure of the present invention can be applied as the specimen flow path.
  • the pump pressure of the liquid feeding pump to the reagent channel is set to a pump pressure higher than the pump pressure of the liquid feeding pump to the sample channel, and these liquid feeding pumps are switched. Therefore, the reagent from the reagent channel, the sample from the sample channel, and the like can be selectively and reliably sent to the merge channel, and backflow is prevented to prevent contamination of the reagent container. It is possible to reliably prevent the merged liquid from the merge flow path to the reagent flow path to flow back.
  • the reagent, the specimen, a mixed solution thereof, a treatment liquid, or the like is sent from the one channel to the downstream of the junction, and the liquid is stored in the downstream channel. Further, the liquid is pushed out further downstream by the liquid in the other channel.
  • the liquid in the other channel may be a driving liquid for extruding the reagent and the specimen rather than the reagent.
  • the present invention is characterized in that the backflow prevention means is constituted by a channel cross-sectional area force or a backflow prevention channel rather than a downstream channel cross-sectional area.
  • such a backflow prevention flow path is arranged at a predetermined position of the flow path of the inspection microchip to control the pump pressure from the micropump and selectively switch the pump.
  • the timing of liquid feeding can be controlled by controlling the stop and passage of liquid from the two flow paths.
  • the reagent and the specimen are joined at an appropriate time, and joined and reacted at a predetermined mixing ratio, so that a predetermined test can be performed accurately.
  • the present invention is characterized in that the backflow prevention means comprises a backflow prevention flow path including a baffle plate member arranged in the flow path.
  • the baffle plate member arranged in the flow path increases the resistance of the backflow prevention flow path, and passes through the backflow prevention flow path from the downstream merging flow path. It is possible to reliably prevent the backflow to the upstream channel from the prevention channel.
  • such a backflow prevention flow path is disposed at a predetermined position in the flow path of the microchip for inspection, and the pump pressure from the micropump is controlled, and the pump is switched selectively.
  • the timing of liquid feeding can be controlled by controlling the stop and passage of liquid from the two flow paths.
  • the reagent and the specimen merge at an appropriate time, and a predetermined mixing ratio is obtained. Therefore, a predetermined inspection can be performed accurately.
  • the test microchip of the present invention is characterized in that the sample storage unit includes a sample pretreatment unit that performs sample pretreatment by joining the sample and the sample pretreatment liquid.
  • a pretreatment suitable for an amplification reaction can be performed on a sample such as separation or concentration of an analyte (analyte), deproteinization, and the like. It is possible to provide an inspection microchip capable of performing a predetermined inspection quickly.
  • the inspection apparatus of the present invention is characterized in that the above-described inspection microchip is detachably mounted and the inspection is performed in the inspection portion of the inspection microchip.
  • the inspection microchip that is convenient to carry and excellent in handling is simply mounted on the inspection apparatus, and it does not require special techniques, complicated and complicated operations, and can be accurately performed. It is possible to carry out a predetermined inspection quickly and quickly.
  • FIG. 1 is a perspective view showing an embodiment of an inspection apparatus according to the present invention composed of an inspection microchip according to the present invention and an inspection apparatus main body on which the inspection microchip is detachably mounted.
  • FIG. FIG. 3 is a top view showing only the entire flow path formed on the test microchip in FIG. 1, FIG. 3 is a partially enlarged view showing a reagent storage part of the flow path in FIG. 2, and FIG. 4 is a reagent in the flow path in FIG. It is the elements on larger scale which show the whole flow path branched from the accommodating part.
  • reference numeral 1 denotes an inspection apparatus according to the present invention as a whole.
  • the inspection apparatus 1 has an inspection microchip 2 and a microchip 2 for inspection that are detachably attached to each other. And an inspection device main body 3 for carrying out the inspection.
  • the inspection microchip 2 has a substantially rectangular card shape, and is composed of, for example, a single chip card made of resin, glass, silicon, ceramics, or the like. It is.
  • a series of flow paths are formed in the inspection microchip 2 as shown in FIG.
  • test microchip 2 for gene testing is taken as an example.
  • the microchip 2 for inspection is not limited to this, and is used for inspecting various specimens.
  • the arrangement, shape, dimensions, size, and the like can be variously changed according to the type of specimen, examination items, and the like.
  • the test microchip 2 of this embodiment is an ICAN method (Isothermal chimera primer initiated nucleic acid amplification) [amplification of the above-mentioned amplification, and in the test microchip 2, blood
  • a gene amplification reaction can be performed using a sample extracted from sputum and a reagent containing a chitin primer that has been modified specifically for hybridization with a gene targeted for detection, a DNA polymerase having strand displacement activity, and an endonuclease. (See Patent No. 3433929).
  • reaction solution is subjected to a denaturation treatment and then sent to a flow path where streptavidin is adsorbed, and the amplified gene is immobilized on the flow path.
  • the probe DNA whose ends are modified with fluorescein isothiocyanate (FITC) and the immobilized gene are neutralized.
  • the gold colloid whose surface is modified with FITC antibody is adsorbed to a probe hybridized to the immobilized gene, and the concentration of the gold colloid is optically measured to detect the amplified gene.
  • the test microchip 2 shown in FIG. 1 is composed of a single chip made of resin, and by injecting a sample such as blood, the gene amplification reaction and its reaction are performed in the test microchip 2. It is configured so that detection can be performed automatically and genetic diagnosis can be performed on multiple items simultaneously.
  • test microchip 2 can be applied to the test apparatus main body 3 shown in FIG. 1 simply by dropping a blood sample of about 2 to 3 ⁇ 1 onto a chip having a length and width of several centimeters, for example. Attaching the microchip 2 for use enables the amplification reaction and its detection.
  • the test microchip 2 is formed with a reagent storage unit 18 for storing a reagent used for the gene amplification reaction.
  • a chitin primer modified with piotin that specifically hybridizes to a gene to be detected, a DNA polymerase having strand displacement activity , And reagent power such as endonuclease are accommodated in reagent accommodating portions 18a, 18b, 18c.
  • reagents are stored in advance in these reagent storage units 18a, 18b, and 18c so that they can be inspected quickly regardless of location or time.
  • the surfaces of the reagent storage portions 18a, 18b, 18c are sealed. .
  • the inspection microchip 2 when the inspection microchip 2 is stored, in order to prevent the reagent from leaking into the fine flow path from the reagent storage portions 18a, 18b, 18c and causing the reagent to react, Under storage conditions, it is solid or gelled, and in use, it is encapsulated by a sealing material such as fats and oils that melts and becomes fluid at room temperature.
  • a sealing material such as fats and oils that melts and becomes fluid at room temperature.
  • Micropumps 11 are connected to the upstream sides of these reagent storage units 18a, 18b, and 18c by pump connection units 12, respectively. By these micropumps 11, the reagent is fed from the reagent storage portions 18a, 18b, 18c to the flow path 15a on the downstream side.
  • the micropump 11 is incorporated in the inspection apparatus body 3 separate from the inspection microchip 2, and by attaching the inspection microchip 2 to the inspection apparatus body 3,
  • the pump connection portion 12 is connected to the inspection microchip 2.
  • FIG. 5 (a) is a cross-sectional view showing an example of a micropump 11 using a piezo pump
  • FIG. 5 (b) is a top view thereof.
  • the micropump 11 includes a substrate 42 on which a first liquid chamber 48, a first flow path 46, a pressurization chamber 45, a second flow path 47, and a second liquid chamber 49 are formed. I have. Then, an upper substrate 41 laminated on the substrate 42, a diaphragm 43 laminated on the upper substrate 41, a piezoelectric element 44 laminated on the opposite side of the diaphragm 43 from the pressurizing chamber 45, A drive unit (not shown) for driving the piezoelectric element 44 is provided.
  • FIG. 5 (c) is a cross-sectional view showing another example of the micropump 11.
  • the micropump 11 includes a silicon substrate 71, a piezoelectric element 44, and a flexible wiring force (not shown).
  • the silicon substrate 71 is obtained by processing a silicon wafer into a predetermined shape by a known photolithographic technique, and by etching, a pressurizing chamber 45, a diaphragm 43, a first flow path 46, and a first liquid chamber. 48, a second flow path 47, and a second liquid chamber 49 are formed.
  • the first liquid chamber 48 is provided with a port 72
  • the second liquid chamber 49 is provided with a port 73, and is configured to communicate with the pump connection portion 12 of the microchip 2 for inspection via this port. It is.
  • the liquid feeding direction and the liquid feeding speed can be controlled by changing the pump driving voltage and frequency.
  • the reagent is transferred from the reagent storage unit 18a, 18b, 18c to the downstream channel 15a via the liquid supply control unit 13. After the liquid is fed and the mixed state is stabilized in the flow path 15a, the reagent mixed liquid is fed to the flow paths 15b and 15c to 15d branched into three.
  • the flow path 15b communicates with the reaction and detection system with the sample constituting the left flow path shown in FIG.
  • the flow path 15c communicates with the reaction and detection system with the positive control constituting the central flow path in FIG.
  • the flow path 15d communicates with the negative detection reaction system that constitutes the flow path on the right side of FIG.
  • the reagent mixed solution sent to the flow path 15b is filled in the storage portion 17a.
  • a reagent filling flow path is configured between the backflow prevention unit (check valve) 16 on the upstream side of the storage unit 17a and the liquid supply control unit 13a on the downstream side,
  • the reagent quantification unit is configured together with the liquid feeding control unit 13b provided in the branch flow path communicating with the micropump 11 for feeding the driving liquid.
  • the reagent quantification unit is configured to mix a predetermined amount of reagent in the channel (reagent filling channel 15a) between the backflow prevention unit 16 including a check valve and the liquid feeding control unit 13a. Filled with liquid. Further, a branch channel 15b that branches from the reagent-filled channel 15a and communicates with the micropump 11 that feeds the driving liquid is provided. [0077] Then, the reagent is quantitatively fed as follows. First, the reagent 31 is filled by supplying the reagent 31 to the reagent filling channel 15a at the liquid feeding pressure without passing the reagent 31 from the liquid feeding control unit 13a to the back flow preventing unit 16 side.
  • the microphone pump 11 causes the branching flow path 15b to move toward the reagent filling flow path 15a.
  • the driving liquid 25 By feeding the driving liquid 25, the reagent 31 filled in the reagent filling channel 15a is pushed forward from the liquid feeding control unit 13a, and thereby the reagent 31 is quantitatively fed. It should be noted that by providing a large-volume reservoir 17a in the reagent filling channel 15a, the quantitative variation is reduced.
  • the sample storage unit 20 may include a sample pretreatment unit that performs sample pretreatment by merging the sample and the sample pretreatment liquid.
  • the specimen storage unit 20 has a mechanism almost the same as that of the reagent quantitative unit described above, so that the specimen is filled in a fixed quantity by the micro-bump 11, and is sent to the subsequent flow path 15e. ing.
  • the specimen filled in the reservoir 17a and the reagent mixed solution filled in the reservoir 17b are sent to the channel 15e via the Y-shaped channel and mixed in the channel 15e. And ICAN reaction.
  • liquid transfer of the sample and the reagent is performed by, for example, alternately driving the micropumps 11 to alternately introduce the sample and the reagent mixed solution into the flow path 15e in a ring shape. It is desirable to allow the reagent to spread and mix.
  • the stop solution storage portion 21a stores a reaction stop solution in advance, and the micro pump 11 sends the reaction stop solution to the flow path 15f, thereby causing the peotidin.
  • the amplification reaction can be stopped by mixing the reaction solution after the amplification reaction with the modified primer and the stop solution.
  • the denatured solution in the denatured solution storage unit 21b is mixed in the flow path 15g with the mixture solution subjected to the reaction termination process, and one amplified gene is mixed. Denature into chains. So After that, the buffer solution stored in the hybridization buffer storage unit 21c is mixed in the flow path 15h, and the obtained mixed solution is used as two detection units 22a for detecting the target substance and for internal control detection. Divide into 22b and send. As a result, the gene denatured into a single strand is immobilized on the detection units 22a and 22b by the streptavidin adsorbed on the detection units 22a and 22b.
  • this detection unit 22a with a single pump 11, the cleaning solution, probe DNA solution, and colloidal gold solution labeled with FITC antibody contained in each of the storage units 21d, 21f, 21e Pump in the order shown in. Similarly, the washing solution, internal control probe DNA solution, and colloidal gold solution labeled with FITC antibody are accommodated in each of the accommodating parts 21d, 21g, and 21e by the single pump 11 into the detecting part 22b. In the order shown in the figure.
  • the probe DNA whose end is fluorescently labeled with FITC is allowed to hybridize with the single-stranded amplified gene immobilized on the detection units 22a and 22b, and then the gold colloid is converted via FITC.
  • the combined gold colloid is irradiated with measurement light with, for example, LED force, and the presence or absence of amplification or amplification efficiency is measured by detecting transmitted light or reflected light with a light detection means such as a photodiode or a photomultiplier tube. .
  • the flow path 15c communicates with the positive control that constitutes the central flow path in FIG. 2, and communicates with the detection system.
  • the reaction with the negative control composing the flow path on the right side of Fig. 2 is communicated to the detection system.
  • the probe is allowed to undergo an amplification reaction in the flow path with the reagent in the same manner as in the reaction and detection system of the sample in the flow path 15b described above.
  • An amplification reaction is detected based on the reaction product by allowing the probe DNA accommodated in the DNA storage section to undergo hybridization in the flow path.
  • the flow path as described above of the inspection microchip 2 has a backflow prevention that prevents the backflow of the liquid at the junction where the two flow paths merge.
  • Many parts 16 are provided.
  • the backflow prevention unit 16 is a check valve in which the valve body closes the flow path opening by backflow pressure, or an active valve that closes the opening by pressing the valve body to the flow path opening by the valve body deforming means. Power is composed. [0089]
  • Patent Document 3 Japanese Patent Application No. 2004-138959
  • the structure as shown in Figs. A check valve has been proposed.
  • the backflow prevention unit is configured as shown in FIG.
  • FIG. 7 is a schematic view schematically showing an example of the flow path of the inspection microchip showing the configuration of such a backflow prevention unit.
  • the liquid feed pump 51 is driven.
  • a sample supply channel 52 through which a sample is fed from the sample container is provided.
  • the first reagent flow path 54 for feeding the first reagent from the first reagent container (not shown) and the liquid feed pump 55 are not shown.
  • a second reagent channel 56 for feeding the second reagent from another second reagent container is not shown.
  • the first reagent channel 54 and the second reagent channel 56 are communicated with the reagent supply channel 59 via the junction 57.
  • sample supply channel 52 and the reagent supply channel 59 are connected to the reaction channel 6 via the junction 58.
  • the backflow preventing means 70 is disposed.
  • reference numeral 61 denotes an air vent
  • reference numeral 62 denotes a liquid feeding control unit
  • the inspection microchip 50 having such a configuration is set to have the following flow path resistance relationship.
  • the flow resistance of the backflow preventing means 70 is Rl
  • the flow resistance of the first reagent flow 54 is R2
  • the flow resistance of the reagent supply flow 59 is R3
  • R4 be the channel resistance of reaction channel 60.
  • the first flow path resistance R1 of the backflow preventing means 70 of the second reagent flow path 56 is a flow path upstream and downstream of the junctions 57, 58 in the first reagent flow path 54.
  • the channel resistance is set so that Rl> (R2 + R3 + R4).
  • the channel resistance R1 upstream of the backflow prevention means 70 is set to the first reagent flow.
  • the total channel resistance (R2 + R3 + R4) of the sum of the channel resistances upstream and downstream of the junctions 57 and 58 in the channel 54 (the other channel) is set to be larger.
  • the channel resistance force of the backflow preventing means 70, the first reagent channel 54 is larger than the second reagent flow upstream of the backflow prevention means 70. It is possible to reliably prevent the liquid from flowing back into the passage 56.
  • the liquid to be sent from the second reagent channel 56 is sent to the reagent supply channel 59, it is larger than the channel resistance R1 of the backflow preventing means 70 and at a pump pressure P2.
  • the liquid to be fed can be fed from the second reagent channel 56 to the reagent supply channel 59 through the backflow preventing means 70.
  • the pump pressure P2 of the liquid feed pump 55 to the second reagent flow path 56 is set to a pump pressure higher than the pump pressure P1 of the liquid feed pump 53 to the first reagent flow path 54.
  • the first reagent flow path 54 and the second reagent flow path 56 are also surely sent to the reagent supply flow path 59 the liquid to be sent selectively.
  • R1 is set to be 1 to: LOO times, preferably 5 to 30 times larger than (R2 + R3 + R4). ,.
  • the first reagent channel 54 (the other channel) Let the first reagent push the mixed reagents further downstream.
  • the liquid feed pump 55 to the second reagent channel 56 (one channel) is not driven, the first reagent flow having the channel resistance of the backflow preventing means 70 is provided.
  • the liquid pressure in the channel 54 (the other channel) causes a slight back flow to the second reagent channel 56 (the one channel).
  • the liquid supply pump 55 in the second reagent flow path 56 (the first flow path) is set to be more than the liquid supply pump 53 in the first reagent flow path 54 (the other flow path).
  • a reagent, a specimen, a mixed solution thereof, a treatment liquid, or the like is sent from one flow path having a flow resistance of the backflow preventing means to the downstream flow path, and the liquid flows to the downstream flow path. After the liquid is accumulated, the liquid may be pushed further downstream by the liquid in the other channel.
  • the liquid in the other channel may be a driving liquid for pushing out the reagent and the sample rather than the reagent.
  • one flow path for preventing backflow is the second reagent flow path 56 and the other flow path is the first reagent flow path 54. Therefore, for example, in a test microchip, one flow path is used as a reagent flow path communicating with a reagent storage section in which a reagent is stored, and the other flow path is used to store a sample.
  • the backflow prevention structure of the present invention can also be applied as a sample flow path communicating with the sample storage section.
  • the pump pressure of the liquid feeding pump to the reagent flow path is set to a pump pressure larger than the liquid feeding pump pressure to the sample flow path, and these liquid feeding pumps are switched to thereby change the reagent.
  • the reagent from the flow channel and the sample from the sample flow channel can be selectively sent to the merge flow channel reliably, and the back flow is prevented to prevent contamination of the reagent container. It is possible to reliably prevent the merged liquid from the merge channel from flowing backward.
  • channel resistance corresponds to the coefficient of pressure loss when the fluid flows through the channel.
  • the value of “channel resistance” can be obtained by measuring the flow rate when a fluid is flowed by applying pressure to the inlet of the flow channel and dividing the pressure by the flow rate.
  • the flow path resistance R is
  • the channel resistance can be increased by reducing the cross-sectional area S and increasing the channel length L.
  • the backflow prevention means 70 is, for example, as shown in FIG. 8 (a), the backflow prevention means 70 having a flow passage cross-sectional area S2 smaller than the flow passage cross-sectional area S1 of the downstream flow passage 80.
  • the channel length can be increased.
  • the backflow prevention channel 82 having a channel cross-sectional area S2 smaller than the channel cross-sectional area S1 of the downstream channel 80 is curved, etc.
  • the channel resistance can be increased by increasing the channel length of the backflow preventing channel 82.
  • the flow passage cross-sectional area S2 is smaller than the flow passage cross-sectional area S1 of the downstream flow passage 80.
  • a backflow prevention flow path 82 provided with a baffle plate member 84 may be used.
  • the flow passage cross-sectional area S2 is smaller than the flow passage cross-sectional area S1 of the downstream flow passage 80.
  • a backflow prevention flow path 82 provided with a bellows-like small-diameter portion 86 may be provided.
  • the backflow prevention means 70 includes a backflow prevention flow channel cap which has a material force having a flow passage resistance larger than the flow passage resistance of the material forming the downstream flow passage in order to change the flow passage resistance. Make it up.
  • the I CAN method has been described as a test microchip for genetic testing.
  • the arrangement, shape, dimensions, size, etc. can be changed in various ways depending on the type of specimen, test item, etc., and various changes can be made within the scope without departing from the object of the present invention. is there.

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Abstract

　二つの流路が合流する合流部において、合流部より上流の一方の流路に設けられた逆流防止手段を備え、前記逆流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流の流路抵抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定した。

Description

明 細 書
逆流防止構造、それを用いた検査用マイクロチップおよび検査装置 技術分野
[0001] 本発明は、例えば、遺伝子検査などにおいて、マイクロリアクタとして利用可能な検 查用マイクロチップおよびそれを用 、た検査装置に関する。
背景技術
[0002] 最近では、従来の試料調製、化学分析、化学合成などを行うための装置、手段、例 えば、ポンプ、バルブ、流路、センサーなどを、マイクロマシン技術および超微細加工 技術を駆使して微細化することによって、 1チップ上に集積ィ匕したシステムが開発さ れている。
[0003] このようなシステムは、 μ -TAS (Micro total Analysis System)、バイオリア クタ、ラブ 'オン'チップ (Lab— on— chips)、バイオチップとも呼ばれ、医療検査'診 断分野、環境測定分野、農産製造分野などでその応用が期待されている。
[0004] 特に、遺伝子検査の場合のように、煩雑な工程、熟練した手技、機器類の操作が 必要とされる場合には、自動化、高速化および簡便化されたミクロ化分析システムは 、コスト、必要試料量、所要時間などの低減できるだけではなぐ時間と場所を選ばな V、分析が可能であり、その効果は非常に大き 、ものである。
[0005] この場合、臨床検査を始めとする各種検査を行う現場では、場所を選ばず、迅速に 結果を出すことができるチップタイプのマイクロリアクタを用いた測定の際にも、その 定量性、解析の精度などが重要視されている。 のサイズ、形態の点カゝら厳しい制約があるため、シンプルな構成で、高い信頼性の送 液システムを確立することが課題となる。そのため、精度が高ぐ信頼性に優れるマイ クロ流体制御素子が求められている。本発明者等は、特許文献 1 (特開 2001— 322 099号公報）、特許文献 2 (特開 2004— 108285号公報）において、既に、このような 要求を満足するマイクロ流体制御素子として好適なマイクロポンプシステムを提案し ている。 [0007] また、特許文献 3 (特願 2004— 138959号）において、本発明者等は、検体を収容 する検体収容部と、試薬が収容される試薬収容部と、検体収容部に収容された検体 と、試薬収容部に収容された試薬とを合流させて、所定の反応処理を行う反応流路 を有する反応部と、反応部の反応で得られた反応処理物質に対して、所定の検査を 行う検査流路を有する検査部とを備え、これらの検体収容部と、試薬収容部と、反応 部と、検査部とがー連の流路で、上流側から下流側に連続的に流路によって接続さ れた検査用マイクロチップ (マイクロリアクタ）を、既に提案して 、る。
[0008] この特許文献 3 (特願 2004— 138959号）のマイクロリアクタには、その流路におい て、二つの流路が合流する合流部において、液体の逆流を防止する逆流防止部が 多数設けられている。この逆流防止部は、逆流圧により弁体が流路開口部を閉止す る逆止弁か、または弁体変形手段により弁体を流路開口部へ押圧して開口部を閉止 する能動弁から構成されて ヽるものである。
[0009] 具体的には、図 10 (a)の逆止弁では、微小球 167を弁体として、基板 162に形成し た開口 168をこの微小球 167の移動により開閉することによって、液体の通過を許容 および遮断している。
[0010] すなわち、 A方向カゝら液体が送液される際には、液圧によって微小球 167が基板 1 62から離反して開口 168が開放されるので、液体の通過が許容される。一方、 B方 向力も液体が逆流した場合には、微小球 167が基板 162に着座して開口 168が閉 止されるので、液体の通過が遮断されるように構成されて 、る。
[0011] また、図 10 (b)の逆止弁では、基板 162上に積層され、その端部が開口 168の上 側に延び出した可撓性基板 169が、液圧により開口 168の上側を上下動することに より開口 168を開閉している。
[0012] すなわち、 A方向カゝら液体が送液される際には、液圧によって可撓性基板 169の 端部が基板 162から離反して開口 168が開放されるので、液体の通過が許容される 。一方、 B方向から液体が逆流した場合には、可撓性基板 169が基板 162に密着し て開口 68が閉止されるので、液体の通過が遮断されるようになっている。
[0013] さらに、図 11 (a)に示した能動弁では、下方に突出した弁部 164が形成された可撓 性基板 163が、開口 165が形成された基板 162の上に積層されている。 [0014] 閉弁時には、図 11 (b)に示したように、可撓性基板 163を上側力も空気圧、油圧、 水圧ピストンや圧電ァクチユエータ、形状記憶合金ァクチユエータなどの弁体変形手 段により押圧することによって、弁部 164を基板 162に対して開口 165を覆うように密 着させ、これにより B方向への逆流を遮断するようにして 、る。
[0015] また、この能動弁では外部の駆動装置により作動するものに限らず、弁体が自ら変 形して流路を塞ぐ構成とする構成として、例えば、図 12に示したように、バイメタル 18 1を使用して通電加熱により変形するようにした構造が、また、図 13に示したように、 形状記憶合金 182を使用して通電加熱により変形する構造が開示されている。
[0016] し力しながら、このような従来の検査用マイクロチップにおける逆流防止部を構成す る図 10〜図 13に示したような逆支弁ではいずれも、基板 162で区画して、流路を検 查用マイクロチップの厚さ方向に多層構造にして流路を構成しなければならず、流路 を検査用マイクロチップの厚さが厚くなつてしまい、検査用マイクロチップが大型化し てしまうことになる。
[0017] また、図 10 (a)の逆止弁では、微小球 167を弁体とする必要があり、流路に開口 16 8を形成し、微小球 167を配置しなければならず、その構成が複雑であり、製造工程 が複雑ィ匕して、コストが高くつくことになる。
[0018] また、図 10 (b)の逆止弁においても、基板 162上に積層され、その端部が開口 168 の上側に延び出した可撓性基板 169を構成しなければならないため、その構成が複 雑であり、製造工程が複雑化して、コストが高くつくことになる。
[0019] さらに、図 11に示した能動弁では、下方に突出した弁部 164が形成された可撓性 基板 163を配置して、可撓性基板 163を上側から空気圧、油圧、水圧ピストンゃ圧電 ァクチユエータ、形状記憶合金ァクチユエータなどの弁体変形手段により押圧する必 要があるため、別途駆動機構が必要であり、その構成が複雑であり、製造工程が複 雑化して、コストが高くつくことになるとともに、検査用マイクロチップが大型化してしま うことになる。
[0020] さらに、図 12および図 13に示したように、バイメタル 181、形状記憶合金 182を配 置して通電加熱により変形する必要があるため、通電機構が別途必要であり、その構 成が複雑であり、製造工程が複雑化して、コストが高くつくことになるとともに、検査用 マイクロチップが大型化してしまうことになる。
特許文献 1：特開 2001— 322099号公報
特許文献 2 :特開 2004— 108285号公報
特許文献 3 :特願 2004— 138959号
非特許文献 1 :「DNAチップ技術とその応用」、「蛋白質 核酸 酵素」 43卷、 13号（1 998年)君塚房夫、加藤郁之進、共立出版 (株)発行
発明の開示
[0021] 本発明は、このような現状に鑑み、検査用マイクロチップの二つの流路が合流する 合流部にぉ 、て、液体の逆流を防止する逆流防止部を構成する逆流防止構造であ つて、別途の駆動機構が不要であり、簡単な構造で、検査用マイクロチップが大型化 することなぐ製造コストも低減することが可能で、し力も、確実に液体の逆流を防止 することができ、正確な検査を実施でき、信頼性に優れる検査用マイクロチップおよ びそれを用いた検査装置を提供することを目的とする。
[0022] 本発明は、前述したような従来技術における課題及び目的を達成するために発明 されたものであって、本発明の逆流防止構造は、
二つの流路が合流する合流部において、合流部より上流の一方の流路に設けられ た逆流防止手段を備え、
前記逆流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流 の流路抵抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定したことを特徴とする。
[0023] また、本発明の検査用マイクロチップにおける逆流防止構造は、
検査用マイクロチップにおける逆流防止構造であって、
二つの流路が合流する合流部において、合流部より上流の一方の流路に設けられ た逆流防止手段を備え、
前記逆流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流 の流路抵抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定したことを特徴とする。
[0024] また、本発明の検査用マイクロチップは、
検体を収容する検体収容部と、
試薬が収容される試薬収容部と、 前記検体収容部に収容された検体と、試薬収容部に収容された試薬とを合流させ て、所定の反応処理を行う反応流路を有する反応部と、
前記反応部の反応で得られた反応処理物質に対して、所定の検査を行う検査流路 を有する検査部とを備え、
これらの検体収容部と、試薬収容部と、反応部と、検査部とがー連の流路で、上流 側から下流側に連続的に流路によって接続された検査用マイクロチップであって、 二つの流路が合流する合流部において、合流部より上流の一方の流路に設けられ た逆流防止手段を備え、
前記逆流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流 の流路抵抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定したことを特徴とする。 図面の簡単な説明
[図 1]図 1は、本発明の検査用マイクロチップと、検査用マイクロチップを脱着自在に 装着する検査装置本体力 構成される本発明の検査装置の実施例を示す斜視図で ある。
[図 2]図 2は、図 1の検査用マイクロチップに形成された流路全体のみを示す上面図 である。
[図 3]図 3は、図 2の流路の試薬収容部を示す部分拡大図である。
[図 4]図 4は、図 2の流路の試薬収容部から分岐した流路の全体を示す部分拡大図 である。
[図 5]図 5 (a)は、ピエゾポンプを用いたマイクロポンプ 11の一例を示した断面図、図 5 (b)は、その上面図、図 5 (c)は、マイクロポンプ 11の他の実施例を示した断面図で ある。
[図 6]図 6は、試薬定量部の構成を示した概略上面図である。
[図 7]図 7は、本発明の逆流防止部の構成を示す検査用マイクロチップの流路の実施 例を模式的に示す概略図である。
[図 8]図 8は、本発明の逆流防止部の実施例の構成を模式的に示す概略図である。
[図 9]図 9は、本発明の逆流防止部の実施例の構成を模式的に示す概略図である。
[図 10]図 10は、逆流防止部の構成を模式的に示す断面図である。 [図 11]図 11は、逆流防止部の構成を模式的に示す断面図である。
[図 12]図 12は、逆流防止部の構成を模式的に示す断面図である。
[図 13]図 13は、逆流防止部の構成を模式的に示す断面図である。 符号の説明
1 検査装置
2 検查用マイクロチップ
3 検査装置本体
11 マイクロポンプ
12 ポンプ接続部
13 送液制御部
13a 送液制御部
13b 送液制御部
15a〜15h 流路
16 逆流防止部
17a 貯留部
17b 貯留部
18 試薬収容部
18a 試薬収容部
20 検体収容部
21a 停止液収容部
21b 変性液収容部
21c ハイブリダィゼーシヨンバッファー収容部
21d 洗浄液収容部
21e 金コロイド収容部
2 If プローブ DNA収容部
21g インターナルコントロール用プローブ DNA収容部
21h ポジティブコントロール収容部
211 ネガティブコントロール収容部 a 検出部
b 検出部
廃液貯留部 駆動液 上側基板
基板
ダイヤフラム (振動板) 圧電素子
加圧室
第 1流路
第 2流路
第 1液室
第 2液室
検査用マイクロチップ 送液ポンプ
検体供給流路 送液ポンプ
第 1の試薬流路 送液ポンプ
第 2の試薬流路, 58 合流部 試薬供給流路 反応流路
空気抜き流路 送液制御部 開口
逆流防止手段 71 シリコン基板
72 ポート
73 ポート
80 流路
82 逆流防止流路
84 邪魔板部材
86 細径部分
162 基板
163 可撓性基板
164 弁部
165 開口
167 微小球
168 開口
169 可撓性基板
181 バイメタル
182 形状記憶合金
発明を実施するための最良の形態
[0027] このように逆流を防止する一方の流路において、逆流防止手段よりも上流側の流路 抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流の流路抵抗の合計の全流路 抵抗よりも大きくなるように設定している。
[0028] 従って、他方の流路から送液すべき液体を合流流路に送液する際には、この逆流 防止手段の流路抵抗が、他方の流路における合流部の上流および下流の流路抵抗 の合計の全流路抵抗よりも大きくなつているので、逆流防止手段よりも上流側の一方 の流路に液体が逆流するのを確実に防止することができる。
[0029] また、一方の流路から送液すべき液体を合流流路に送液する際には、この逆流防 止手段の流路抵抗による圧力降下を補い得るような大きいポンプ圧力で送液するこ とによって、この一方の流路から逆流防止手段を通過して、送液すべき液体を合流 流路に送液することができる。 [0030] 従って、一方の流路への送液ポンプのポンプ圧を、他方の流路への送液ポンプ圧 よりも大きいポンプ圧に設定して、これらの送液ポンプを切り替えることによって、一方 の流路および他方の流路から選択的に送液すべき液体を合流流路に確実に送液す ることができるとともに、逆流を防止すべき一方の流路への合流流路からの液体が逆 流するのを確実に防止することができる。
[0031] しかも、このように送液ポンプを切り替えることによって、一方の流路からの液体と他 方の流路力 の液体が層流となり、合流流路内においてこれらの液体の混合が効率 的に行われることになる。
[0032] 従って、例えば、検査用マイクロチップにおいて、一方の流路を試薬が収容される 試薬収容部に連通する試薬流路として用い、他方の流路を検体を収容する検体収 容部に連通する検体流路として、本発明の逆流防止構造を適用することができる。
[0033] これにより、試薬流路への送液ポンプのポンプ圧を、検体流路への送液ポンプのポ ンプ圧よりも大きいポンプ圧に設定して、これらの送液ポンプを切り替えることによつ て、試薬流路からの試薬、検体流路からの検体などを選択的に合流流路に確実に 送液することができるとともに、逆流を防止して、試薬収容部の汚染を防止すべき試 薬流路への合流流路からの合流液体などが逆流するのを確実に防止することができ る。
[0034] し力も、このように送液ポンプを切り替えることによって、試薬流路からの試薬と検体 流路からの検体が層流となり、合流流路内においてこれらの試薬と検体との混合が 効率的に行われることになり、正確な検査を実施でき、信頼性に優れる検査用マイク 口チップを提供することができる。
[0035] また、本発明では、前記一方の流路から、試薬、検体、あるいはそれらの混合液、 処理液などを合流部の下流へ送液して下流の流路にその液体を溜めたあとに、他方 の流路の液体によって前記の液体をさらに下流に押し出すように構成したことを特徴 とする。
[0036] このように構成することによって、逆流防止手段を境に、その上流と下流とでの液体 の流れの相互作用を断ち切れるので、より精密な送液が可能となる。
[0037] また、このとき、一方の流路への送液ポンプを駆動していなければ、（逆流防止手 段の流路抵抗があるものの)他方の流路の液体圧力によって、一方の流路へ僅かな 力 逆流が生じる。それを防止するために、一方の流路の送液ポンプを、他方の流 路の送液ポンプよりも弱 、圧力で駆動することで、前記のわずかな逆流も防止するこ とがでさる。
[0038] なお、この場合、他方の流路の液体は、試薬や検体ではなぐそれらを押し出すた めの駆動液であっても良 、。
[0039] また、本発明では、前記逆流防止手段が、下流側の流路断面積よりも流路断面積 力 、さ 、逆流防止流路から構成されて 、ることを特徴とする。
[0040] このように構成することによって、下流側の断面積の大き 、（大径の）流路から、流 路断面積の小さ!、 (小径の）逆流防止流路への流路抵抗が大きくなつて、下流側の 合流流路から、逆流防止流路を通過して、逆流防止流路よりも上流側の流路への逆 流を確実に防止することができる。
[0041] 従って、このような逆流防止流路を、検査用マイクロチップの流路の所定の箇所に 配設して、マイクロポンプからのポンプ圧を制御するとともに、ポンプを切り替えること によって、選択的に二つの流路からの液体の停止と通過を制御して、送液のタイミン グを制御することができる。
[0042] これにより、例えば、試薬と検体とが、適切な時期に合流し、また、所定の混合比率 で合流して反応することになり、所定の検査を正確に実施することができる。
[0043] また、本発明では、前記逆流防止手段が、流路内に配置した邪魔板部材を備えた 逆流防止流路から構成されて!ヽることを特徴とする。
[0044] このように構成することによって、流路内に配置した邪魔板部材によって、逆流防止 流路の抵抗が大きくなり、下流側の合流流路から、逆流防止流路を通過して、逆流 防止流路よりも上流側の流路への逆流を確実に防止することができる。
[0045] 従って、このような逆流防止流路を、検査用マイクロチップの流路の所定の箇所に 配設して、マイクロポンプからのポンプ圧を制御するとともに、ポンプを切り替えること によって、選択的に二つの流路からの液体の停止と通過を制御して、送液のタイミン グを制御することができる。
[0046] これにより、例えば、試薬と検体とが、適切な時期に合流し、また、所定の混合比率 で合流して反応することになり、所定の検査を正確に実施することができる。
[0047] また、本発明の検査用マイクロチップは、前記検体収容部が、検体と検体前処理液 を合流させて、検体前処理を行う検体前処理部を備えることを特徴とする。
[0048] このように構成することによって、例えば、分析対象物 (アナライト）の分離または濃 縮、除タンパクなどの検体に対して増幅反応に適した前処理を行うことができ、効率 良く且つ迅速に、所定の検査を実施することが可能な検査用マイクロチップを提供す ることがでさる。
[0049] さらに、本発明の検査装置は、上記の検査用マイクロチップを脱着自在に装着して 、検査用マイクロチップの検査部における検査を実施するように構成したことを特徴と する。
[0050] このように構成することによって、携帯に便利で、取り扱いに優れた検査用マイクロ チップを検査装置に装着するだけで、特別な技術、複雑で煩雑な操作を必要とする ことなく、正確にかつ迅速に所定の検査を実施することが可能である。
[0051] 以下、本発明の実施の形態 (実施例）を図面に基づいてより詳細に説明する。
[0052] 図 1は、本発明の検査用マイクロチップと、検査用マイクロチップを脱着自在に装着 する検査装置本体から構成される本発明の検査装置の実施例を示す斜視図、図 2 は、図 1の検査用マイクロチップに形成された流路全体のみを示す上面図、図 3は、 図 2の流路の試薬収容部を示す部分拡大図、図 4は、図 2の流路の試薬収容部から 分岐した流路の全体を示す部分拡大図である。
[0053] 図 1において、 1は、全体で、本発明の検査装置を示しており、検査装置 1は、検査 用マイクロチップ 2と、この検査用マイクロチップ 2を脱着自在に装着して、所定の検 查を実施する検査装置本体 3とを備えて ヽる。
[0054] 検査用マイクロチップ 2は、図 1に示したように、略矩形のカード形状であり、例えば 、榭脂、ガラス、シリコン、セラミックスなどで作製される一枚のチップカゝら構成されるも のである。
[0055] そして、検査用マイクロチップ 2内には、図 2に示したように、一連の流路が形成され ている。
[0056] なお、以下の説明については、遺伝子検査用の検査用マイクロチップ 2を例にして 、説明する力 もちろん、検査用マイクロチップ 2は、これに限定されるものではなぐ 様々な検体を検査するために用いられるものである。また、以下に述べる流路構成に ついては、その配置、形状、寸法、大きさなどは、検体の種類、検査項目などに応じ て、種々変更可能である。
[0057] すなわち、この実施例の検査用マイクロチップ 2は、 ICAN法（Isothermal chime ra primer initiated nucleic acid amplification )【こより増巾§反 を行つもの であり、検査用マイクロチップ 2内で、血液もしくは喀痰から抽出した検体と、検出対 象である遺伝子に特異的にハイブリダィゼーシヨンするピオチン修飾したキメラプライ マー、鎖置換活性を有する DNAポリメラーゼ、およびエンドヌクレアーゼを含む試薬 とにより、遺伝子増幅反応を行うものである (特許第 3433929号参照)。
[0058] そして、反応液は、変性処理した後にストレプトアビジンを吸着させた流路に送液さ れ、増幅された遺伝子が流路に固定化される。
[0059] 次に、末端をフルォレセインイソチオシァネート（FITC)で修飾したプローブ DNA と、固定ィ匕した遺伝子とをノヽイブリダィゼーシヨンさせる。そして、 FITC抗体で表面を 修飾した金コロイドを、固定ィ匕した遺伝子にハイブリダィズしたプローブに吸着させ、 金コロイドの濃度を光学的に測定することにより、増幅された遺伝子を検出するもの である。
[0060] 図 1に示した検査用マイクロチップ 2は、榭脂製の一枚のチップからなり、血液など の検体を注入することにより、検査用マイクロチップ 2内で、遺伝子増幅反応およびそ の検出を自動的に行い、多項目について同時に遺伝子診断ができるように構成され ている。
[0061] 検査用マイクロチップ 2は、例えば、縦横の長さが数 cmのチップに、 2〜3 μ 1程度 の血液検体を滴下するだけで、図 1に示した検査装置本体 3に、検査用マイクロチッ プ 2を装着することによって、増幅反応とその検出ができるようになつている。
[0062] 検査用マイクロチップ 2には、図 2に示したように、遺伝子増幅反応に用いる試薬を 収容する試薬収容部 18が形成されている。
[0063] すなわち、図 3に示したように、検出対象である遺伝子に特異的にハイブリダィゼー シヨンするピオチン修飾したキメラプライマー、鎖置換活性を有する DNAポリメラーゼ 、およびエンドヌクレアーゼなどの試薬力 試薬収容部 18a、 18b、 18cに収容されて いる。
[0064] この場合、これらの試薬収容部 18a、 18b、 18cには、場所や時間を問わず迅速に 検査ができるように、予め試薬が収容されていることが望ましい。検査用マイクロチッ プ 2内に内蔵される試薬類などは、蒸発、漏失、気泡の混入、汚染、変性などを防止 するため、その試薬収容部 18a、 18b、 18cの表面が密封処理されている。
[0065] さらに、検査用マイクロチップ 2の保管時に、試薬収容部 18a、 18b、 18cから試薬 が微細流路内に勝手に漏出して試薬が反応してしまうことなどを防止するために、冷 蔵条件下では、固ィ匕もしくはゲルイ匕しており、使用時、室温にすると融解し流動状態 となる物質、例えば、油脂などの封止材により封入されている。
[0066] そして、これらの試薬収容部 18a、 18b、 18cの上流側にはそれぞれ、マイクロポン プ 11が、ポンプ接続部 12で接続されている。これらのマイクロポンプ 11により、試薬 収容部 18a、 18b、 18cから、下流側の流路 15aへ試薬が送液されるようになってい る。
[0067] なお、この場合、マイクロポンプ 11としては、検査用マイクロチップ 2とは別途の検査 装置本体 3に組み込まれており、検査用マイクロチップ 2を検査装置本体 3に装着す ることによって、ポンプ接続部 12から検査用マイクロチップ 2に接続されるようになつ ている。しかしながら、マイクロポンプ 11を検査用マイクロチップ 2の流路に予め組み 込んでおくことも可能である。
[0068] また、このようなマイクロポンプ 11として、ピエゾポンプを用いるのが望ましい。図 5 ( a)は、ピエゾポンプを用いたマイクロポンプ 11の一例を示した断面図、図 5 (b)は、そ の上面図である。
[0069] このマイクロポンプ 11には、第 1液室 48と、第 1流路 46と、加圧室 45と、第 2流路 4 7と、第 2液室 49が形成された基板 42を備えている。そして、この基板 42上に積層さ れた上側基板 41と、上側基板 41上に積層された振動板 43と、振動板 43の加圧室 4 5と反対側に積層された圧電素子 44と、圧電素子 44を駆動するための駆動部（図示 せず）とが設けられている。
[0070] 図 5 (c)は、このマイクロポンプ 11の他の実施例を示した断面図である。この実施例 では、マイクロポンプ 11を、シリコン基板 71と、圧電素子 44と、図示しないフレキシブ ル配線力 構成している。シリコン基板 71は、シリコンウェハを公知のフォトリソグラフ ィー技術により所定の形状に加工したものであり、エッチングにより加圧室 45と、振動 板 43と、第 1流路 46と、第 1液室 48と、第 2流路 47と、第 2液室 49が形成されている 。第 1液室 48には、ポート 72が、第 2液室 49には、ポート 73がそれぞれ設けられ、こ のポートを介して検査用マイクロチップ 2のポンプ接続部 12と連通するように構成さ れている。
[0071] このように構成されたマイクロポンプ 11によれば、ポンプの駆動電圧と周波数を変 えることによって、液体の送液方向、送液速度を制御できるようになつている。
[0072] このように構成されるマイクロポンプ 11によって、図 3に示したように、試薬収容部 1 8a、 18b、 18cから、送液制御部 13を介して、下流側の流路 15aへ試薬が送液され、 流路 15a内で混合状態が安定した後に、試薬混合液が、 3本に分岐した流路 15b、 1 5cゝ 15dへ送液されるようになっている。
[0073] すなわち、流路 15bは、図 2に示した左側の流路を構成する検体との反応、検出系 へ連通している。また、流路 15cは、図 2の中央の流路を構成するポジティブコント口 ールとの反応、検出系へ連通している。さらに、流路 15dは、図 2の右側の流路を構 成するネガティブコントロールとの反応、検出系へ連通している。
[0074] 以下については、図 2および図 4を参照して、流路 15bの流路について主として説 明する。
[0075] 流路 15bに送液された試薬混合液は、図 4に示したように、貯留部 17aに充填され る。なお、図 6に示したように、貯留部 17aの上流側の逆流防止部（逆止弁） 16と、下 流側の送液制御部 13aとの間で、試薬充填流路が構成され、駆動液を送液するマイ クロポンプ 11に連通する分岐流路に設けられた送液制御部 13bとともに、試薬定量 部を構成している。
[0076] すなわち、試薬定量部は、逆止弁から構成される逆流防止部 16と、送液制御部 13 aとの間の流路 (試薬充填流路 15a)には、所定量の試薬混合液が充填される。また 、この試薬充填流路 15aから分岐し、駆動液を送液するマイクロポンプ 11に連通する 分岐流路 15bが設けられている。 [0077] そして、試薬の定量送液は、次のように行われる。最初に、逆流防止部 16側から、 送液制御部 13aから先へ試薬 31が通過しな 、送液圧力で、試薬充填流路 15aに試 薬 31を供給することにより試薬 31を充填する。
[0078] 次に、送液制御部 13aから先へ試薬 31が通過することを許容する送液圧力で、マ イク口ポンプ 11により、分岐流路 15bから試薬充填流路 15aに向かう方向へ、駆動液 25を送液することにより、試薬充填流路 15a内に充填された試薬 31を送液制御部 1 3aから先へ押し出し、これにより試薬 31を定量的に送液する。なお、試薬充填流路 1 5aに、大容積の貯留部 17aを設けることによって、定量のバラツキが小さくなるように なっている。
[0079] 一方、図 4に示したように、血液もしくは喀痰力 抽出した検体は、検体収容部 20か ら注入され、貯留部 17bに充填されるようになっている。なお、この検体収容部 20は 、図示しないが、検体と検体前処理液を合流させて、検体前処理を行う検体前処理 部を備えるようにしても良い。
[0080] そして、この検体収容部 20は、上記の試薬定量部とほぼ同じ機構で、マイクロボン プ 11により、検体が定量に充填され、後続する流路 15eへ定量送液されるようになつ ている。
[0081] すなわち、貯留部 17aに充填された検体と、貯留部 17bに充填された試薬混合液 は、 Y字流路を介して、流路 15eに送液され、この流路 15e内で混合および ICAN反 応が行われる。
[0082] なお、検体と試薬との送液は、例えば、交互に各マイクロポンプ 11を駆動して、流 路 15eへ輪切り状に検体と試薬混合液とを交互に導入し、迅速に検体と試薬とが拡 散、混合するようにすることが望ましい。
[0083] また、図 4に示したように、停止液収容部 21aには、予め反応停止液が収容されて おり、マイクロポンプ 11により、反応停止液を流路 15fに送液して、ピオチン修飾した プライマーを用いて増幅反応させた後の反応液と停止液とを混合することにより、増 幅反応が停止されるようになって ヽる。
[0084] 次に、図 4に示したように、反応停止処理を行った混合液に対して、変性液収容部 21bの変性液を流路 15gで混合して、増幅された遺伝子を一本鎖に変性させる。そ の後、ハイブリダィゼーシヨンバッファー収容部 21cに収容されたバッファー液を流路 15hで混合し、得られた混合液を目的物質検出用およびインターナルコントロール検 出用の 2つの検出部 22a, 22bに分割して送液する。これによつて、一本鎖に変性さ れた遺伝子は、検出部 22a, 22bに吸着されたストレプトアビジンにより検出部 22a, 22b〖こ固定ィ匕される。
[0085] この検出部 22a内へ、単一のポンプ 11により、各収容部 21d、 21f、 21eに収容さ れた洗浄液、プローブ DNA溶液、および FITC抗体で標識した金コロイドの溶液を、 同図に示した順序で送液する。同様に、検出部 22b内へ、単一のポンプ 11により、 各収容部 21d、 21g、 21eに収容された洗浄液、インターナルコントロール用プロ一 ブ DNA溶液、および FITC抗体で標識した金コロイドの溶液を、同図に示した順序 で送液する。
[0086] このようにして、末端を FITCで蛍光標識したプローブ DNAを検出部 22a, 22bに 固定ィ匕された一本鎖の増幅遺伝子にノ、イブリダィズさせ、その後 FITCを介して金コ ロイドを結合させる。この結合した金コロイドを、例えば LED力も測定光を照射し、フ オトダイオード、光電子増倍管などの光検出手段で透過光もしくは反射光を検出する ことによって、増幅の有無または増幅効率を測定する。
[0087] なお、図 2および図 3に示したように、流路 15cは、図 2の中央の流路を構成するポ ジティブコントロールとの反応、検出系へ連通しており、流路 15dは、図 2の右側の流 路を構成するネガティブコントロールとの反応、検出系へ連通している。試薬混合液 をこれらの流路 15c、 15dに送液することにより、上述した流路 15bの検体の反応、検 出系における場合と同様に、試薬と流路内で増幅反応させた後、プローブ DNA収 容部に収容されたプローブ DNAと流路内でノ、イブリダィゼーシヨンさせ、この反応生 成物に基!、て増幅反応が検出されるようになって!/、る。
[0088] ところで、図 2〜図 4に示したように、検査用マイクロチップ 2の上記したような流路に は、二つの流路が合流する合流部において、液体の逆流を防止する逆流防止部 16 が多数設けられている。この逆流防止部 16は、逆流圧により弁体が流路開口部を閉 止する逆止弁か、または弁体変形手段により弁体を流路開口部へ押圧して開口部を 閉止する能動弁力 構成されて 、るものである。 [0089] この場合、従来の検査用マイクロチップにおける逆流防止部としては、特許文献 3 ( 特願 2004— 138959号）に開示されているように、図 10〜図 13に示したような構造 の逆止弁が提案されている。
[0090] し力しながらこのような構造の逆止弁は前述の問題がある。
[0091] このため、本願発明では、この逆流防止部を、図 7に示したような構成にしている。
[0092] 図 7は、このような逆流防止部の構成を示す検査用マイクロチップの流路の実施例 を模式的に示す概略図である。
[0093] 図 7に示したように、この検査用マイクロチップ 50では、送液ポンプ 51の駆動により
、図示しな!ヽ検体収容部から検体が送液される検体供給流路 52を備えて ヽる。
[0094] 一方、送液ポンプ 53の駆動により、図示しない第 1の試薬収容部から、第 1の試薬 を送液する第 1の試薬流路 54と、送液ポンプ 55の駆動により、図示しない別の第 2の 試薬収容部から、第 2の試薬を送液する第 2の試薬流路 56とを備えて 、る。
[0095] これらの第 1の試薬流路 54と第 2の試薬流路 56とは合流部 57を介して、試薬供給 流路 59に連通している。
[0096] そして、検体供給流路 52と試薬供給流路 59とは、合流部 58を介して、反応流路 6
0に連通するように構成されて 、る。
[0097] そして、合流部 57より上流の第 2の試薬流路 56には、逆流防止手段 70が配設され ている。
[0098] なお、図中、符号 61は、空気抜き、符号 62は、送液制御部をそれぞれ示している。
なお、上記の構成は、符号が相違するが、前述の図 1〜図 6に示した各構成部分と 同様な構成となって 、るので、その詳細な説明は省略する。
[0099] このような構成の検査用マイクロチップ 50では、下記のような流路抵抗の関係となる ように設定されている。
[0100] すなわち、図 7に示したように、逆流防止手段 70の流路抵抗を Rl、第 1の試薬流 路 54の流路抵抗を R2、試薬供給流路 59の流路抵抗を R3、反応流路 60の流路抵 抗を R4とする。
[0101] この時に、第 2の試薬流路 56の逆流防止手段 70の流路抵抗 R1が、第 1の試薬流 路 54における合流部 57、 58の上流および下流の流路である、第 1の試薬流路 54の 流路抵抗 R2、試薬供給流路 59の流路抵抗 R3、反応流路 60の流路抵抗 R4の流路 抵抗の合計の全流路抵抗 (R2+R3+R4)よりも大きくなるように設定されて！、る。
[0102] すなわち、 Rl > (R2+R3+R4)となるように流路抵抗が設定されている。
[0103] このように逆流を防止する第 2の試薬流路 56 (—方の流路）にお 、て、逆流防止手 段 70よりも上流側の流路抵抗 R1を、第 1の試薬流路 54 (他方の流路）における合流 部 57、 58の上流および下流の流路抵抗の合計の全流路抵抗 (R2+R3+R4)よりも 大きくなるように設定して 、る。
[0104] 従って、第 1の試薬流路 54から送液すべき液体を試薬供給流路 59に送液する際 には、この逆流防止手段 70の流路抵抗力、第 1の試薬流路 54における合流部 57、 58の上流および下流の流路抵抗の合計の全流路抵抗 (R2+R3+R4)よりも大きく なっているので、逆流防止手段 70よりも上流側の第 2の試薬流路 56に液体が逆流 するのを確実に防止することができる。
[0105] また、第 2の試薬流路 56から送液すべき液体を試薬供給流路 59に送液する際に は、この逆流防止手段 70の流路抵抗 R1よりも大き 、ポンプ圧力 P2で送液すること によって、この第 2の試薬流路 56から逆流防止手段 70を通過して、送液すべき液体 を試薬供給流路 59に送液することができる。
[0106] 従って、第 2の試薬流路 56への送液ポンプ 55のポンプ圧 P2を、第 1の試薬流路 5 4への送液ポンプ 53のポンプ圧 P1よりも大きいポンプ圧に設定して、これらの送液ポ ンプ 53、 55を切り替えることによって、第 1の試薬流路 54および第 2の試薬流路 56 力も選択的に送液すべき液体を試薬供給流路 59に確実に送液することができるとと もに、逆流を防止すべき第 2の試薬流路 56への試薬供給流路 59からの液体が逆流 するのを確実に防止することができる。
[0107] し力も、このように送液ポンプ 53、 55を切り替えることによって、第 1の試薬流路 54 力もの液体と第 2の試薬流路 56からの液体が層流となり、試薬供給流路 59内におい てこれらの液体の混合が効率的に行われることになる。
[0108] この場合、上記の逆流防止効果を考慮すれば、 R1は、（R2+R3+R4)よりも、 1 〜： LOO倍、好ましくは 5〜30倍大きくなるように設定するのが望ま 、。
[0109] また、逆流防止手段 70の流路抵抗がある第 2の試薬流路 56 (—方の流路)から、 第 2の試薬を下流の流路の合流部である試薬供給流路 59に送液してその液体を溜 めた (充填した)後に、第 1の試薬流路 54 (他方の流路)の第 1の試薬によって、混合 試薬をさらに下流に押し出すようにしてもょ 、。
[0110] このように構成することによって、逆流防止手段 70を境に、その上流と下流とでの 液体の流れの相互作用を断ち切れるので、より精密な送液が可能となる。
[0111] また、このとき、第 2の試薬流路 56 (—方の流路）への送液ポンプ 55を駆動してい なければ、逆流防止手段 70の流路抵抗がある第 1の試薬流路 54 (他方の流路)の 液体圧力によって、第 2の試薬流路 56 (—方の流路)へ僅かながら逆流が生じる。そ れを防止するために、第 2の試薬流路 56 (—方の流路）の送液ポンプ 55を、第 1の試 薬流路 54 (他方の流路）の送液ポンプ 53よりも弱 、圧力で駆動することで、前記のわ ずかな逆流も防止することができる。
[0112] すなわち、逆流防止手段の流路抵抗がある一方の流路から、試薬、検体、あるいは それらの混合液、処理液などを合流部の下流へ送液して下流の流路にその液体を 溜めたあとに、他方の流路の液体によって前記の液体をさらに下流に押し出すように 構成しても良い。
[0113] このように構成することによって、逆流防止手段を境に、その上流と下流とでの液体 の流れの相互作用を断ち切れるので、より精密な送液が可能となる。
[0114] また、このとき、一方の流路への送液ポンプを駆動していなければ、（逆流防止手 段の流路抵抗があるものの)他方の流路の液体圧力によって、一方の流路へ僅かな 力 逆流が生じる。それを防止するために、一方の流路の送液ポンプを、他方の流 路の送液ポンプよりも弱 、圧力で駆動することで、前記のわずかな逆流も防止するこ とがでさる。
[0115] なお、この場合、他方の流路の液体は、試薬や検体ではなぐそれらを押し出すた めの駆動液であっても良 、。
[0116] なお、上記の実施例では、逆流を防止する一方の流路を第 2の試薬流路 56とし、 他方の流路を、第 1の試薬流路 54としたが、何らこれらの組み合わせに限定されるも のではなぐ従って、例えば、検査用マイクロチップにおいて、一方の流路を試薬が 収容される試薬収容部に連通する試薬流路として用い、他方の流路を検体を収容す る検体収容部に連通する検体流路として、本発明の逆流防止構造を適用することも できる。
[0117] これにより、試薬流路への送液ポンプのポンプ圧を、検体流路への送液ポンプ圧よ りも大きいポンプ圧に設定して、これらの送液ポンプを切り替えることによって、試薬 流路からの試薬、検体流路からの検体を選択的に合流流路に確実に送液することが できるとともに、逆流を防止して、試薬収容部の汚染を防止すべき試薬流路への合 流流路からの合流液体などが逆流するのを確実に防止することができる。
[0118] し力も、このように送液ポンプを切り替えることによって、試薬流路からの試薬と検体 流路からの検体などが層流となり、合流流路内においてこれらの試薬と検体との混合 が効率的に行われることになり、正確な検査を実施でき、信頼性に優れる検査用マイ クロチップを提供することができる。
[0119] この場合、「流路抵抗」とは、流体が流路を通って流れる時の圧力損失の係数に相 当するものである。
[0120] すなわち、流量を Q、流体が流路を流れることによる圧力損失を Δ Ρとした時に、流 路抵抗 R (N' s/m5)は、 R= A PZQである。ここで、 Nは、力（Newton)、 sは時間（ second)である。
[0121] 従って、「流路抵抗」の値は、流路の入口に圧力をかけて流体を流した時の流量を 測定して、その圧力をその流量で割ることにより求めることができる。
[0122] 例えば、送液ポンプ 55の実効的な内部流路抵抗 R2は、所定の駆動電圧での流量 Qと発生圧力 Pとを求めることにより、 R2 = PZQで決定することができる。
[0123] 特に、本発明の検査用マイクロチップのような細力べて長い流路内で、層流が支配 的である場合には、流路抵抗 Rは、
[0124] [数 1]
[0125] である。ここで、 7?は粘度、 Sは断面積、 φは等価直径、 Lは流路長さである。なお、 流路の断面形状が長方形の場合には、流路の幅を a、高さを bとすると、
[0126] [数 2] = ( a X b ) Z U a + b ) / 2 }
[0127] である。
[0128] 従って、この数式 1、数式 2から明らかなように、断面積 Sを小さくし、流路長さ Lを大 きくすることによって、流路抵抗を大きくすることができる。
[0129] 従って、逆流防止手段 70は、例えば、図 8 (a)に示したように、下流側の流路 80の 流路流路断面積 S1よりも、流路断面積 S2が小さい逆流防止流路 82から構成すると ともに、その流路長さを長くすることができる。
[0130] この場合、図 8 (b)に示したように、下流側の流路 80の流路流路断面積 S1よりも、 流路断面積 S2が小さい逆流防止流路 82を湾曲させるなどして、逆流防止流路 82の 流路長さを長くすることによって、流路抵抗を大きくすることも可能である。
[0131] また、図 9 (a)に示したように、逆流防止手段 70として、下流側の流路 80の流路流 路断面積 S1よりも、流路断面積 S2が小さくなるように、邪魔板部材 84を設けた逆流 防止流路 82とすることもできる。
[0132] さらに、図 9 (b)に示したように、逆流防止手段 70として、下流側の流路 80の流路 流路断面積 S1よりも、流路断面積 S2が小さくなるように、蛇腹状の細径部分 86を設 けた逆流防止流路 82とすることもできる。
[0133] なお、逆流防止手段 70としては、流路抵抗を変更するために、下流側流路を形成 する材料の流路抵抗よりも、流路抵抗が大きい材料力もなる逆流防止流路カも構成 するようにしてちょい。
[0134] このように構成することによって、下流側の流路抵抗の小さい材料からなる流路から 、流路抵抗の大きい材料力もなる逆流防止流路への流路抵抗が大きくなつて、下流 側の合流流路から、逆流防止流路を通過して、逆流防止流路よりも上流側の流路へ の逆流を確実に防止することができる。
[0135] 以上、本発明の好ましい実施の態様を説明してきた力 本発明はこれに限定される ことはなぐ例えば、上記実施例では、遺伝子検査用の検査用マイクロチップとして I CAN法について説明したが、その配置、形状、寸法、大きさなどは、検体の種類、検 查項目などに応じて、種々変更可能であるなど本発明の目的を逸脱しな 、範囲で種 々の変更が可能である。

Claims

請求の範囲
[1] 二つの流路が合流する合流部と、合流部より上流の一方の流路に設けられた逆流 防止手段を備え、前記逆流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の 上流および下流の流路抵抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定したこと を特徴とする逆流防止構造。
[2] 前記逆流防止手段が、下流側の流路断面積よりも流路断面積が小さ!、逆流防止 流路力 構成されていることを特徴とする請求の範囲第 1項に記載の逆流防止構造
[3] 前記逆流防止手段が、流路内に配置した邪魔板部材を備えた逆流防止流路から 構成されていることを特徴とする請求の範囲第 2項に記載の逆流防止構造。
[4] 当該逆流防止構造が、検査用マイクロチップにおける逆流防止構造であることを特 徴とする請求の範囲第 1項に記載の逆流防止構造。
[5] 検体を収容する検体収容部と、試薬が収容される試薬収容部と、前記検体収容部 に収容された検体と、試薬収容部に収容された試薬とを合流させて、所定の反応処 理を行う反応流路を有する反応部と、前記反応部の反応で得られた反応処理物質 に対して、所定の検査を行う検査流路を有する検査部とを備え、これらの検体収容部 と、試薬収容部と、反応部と、検査部とがー連の流路で、上流側から下流側に連続 的に流路によって接続された検査用マイクロチップであって、二つの流路が合流する 合流部と、合流部より上流の一方の流路に設けられた逆流防止手段を備え、前記逆 流防止手段の流路抵抗を、他方の流路における合流部の上流および下流の流路抵 抗の合計の全流路抵抗よりも大きくなるように設定したことを特徴とする検査用マイク 口チップ。
[6] 前記一方の流路から、試薬、検体、あるいはそれらの混合液、処理液などを合流部 の下流へ送液して下流の流路にその液体を溜めたあとに、他方の流路の液体によつ て前記の液体をさらに下流に押し出すように構成したことを特徴とする請求の範囲第 5項に記載の検査用マイクロチップ。
[7] 前記逆流防止手段が、下流側の流路断面積よりも流路断面積が小さ!、逆流防止 流路力 構成されていることを特徴とする請求の範囲第 5項に記載の検査用マイクロ チップ。
[8] 前記逆流防止手段が、流路内に配置した邪魔板部材を備えた逆流防止流路から 構成されていることを特徴とする請求の範囲第 7項に記載の検査用マイクロチップ。
[9] 前記検体収容部が、検体と検体前処理液を合流させて、検体前処理を行う検体前 処理部を備えることを特徴とする請求の範囲第 5項に記載の検査用マイクロチップ。
[10] 請求の範囲第 5項に記載の検査用マイクロチップを脱着自在に装着して、検査用 マイクロチップの検査部における検査を実施するように構成したことを特徴とする検 查装置。
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