WO2006046716A1 - 反応容器 - Google Patents

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reaction vessel
tube
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reaction
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Junji Miyakawa
Asami Matsumoto
Shusaku Oka
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Itoham Foods Inc.
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Definitions

  • the present invention relates to a disposable reaction container used in an immunoassay.
  • An immunoassay is a measurement method using an antigen-antibody reaction and is used for detection and quantification of various substances.
  • This immunoassay method is roughly divided into a competitive reaction method and a non-competitive reaction method, and BF separation of antigen-antibody reaction conjugate (B: Bound Form) and non-binding unreacted (F: Free Form), respectively. It is divided into the heterogeneous method and the BF separation! And the homogenous method.
  • the heterogeneous method there are a liquid phase method in which an antigen'-antibody reaction is carried out in a liquid phase, and a solid phase method in which the reaction is carried out between a solid phase and a liquid phase.
  • a non-competitive reaction method particularly a heterogeneous solid-phase method such as a sandwich method is often applied rather than a competitive reaction method in terms of excellent detection sensitivity.
  • an antibody against the antigen to be measured is bound to a solid-phased carrier, and a sample solution containing the antigen to be measured is added thereto, An antigen-antibody reaction (first reaction) in which the antigen specifically binds to the antibody is caused, and then washing for removing contaminant components is performed. Then, for example, an enzyme-labeled antibody conjugated with an enzyme is added as a labeling substance to cause an antigen-antibody reaction (second reaction), thereby binding the enzyme-labeled antibody to the antigen bound to the solidified carrier. Thereafter, washing for BF separation is performed!
  • an enzyme reaction is carried out by adding a reagent containing a chromogenic substrate or a luminescent substrate, and reacting.
  • the amount of antigen is detected by measuring absorbance and luminescence.
  • an antigen is measured by a competitive-heterogeneous method
  • an antibody against the antigen to be measured is bound to a solid-phase support, and a sample liquid containing the antigen to be measured is labeled with this antigen.
  • a labeled antigen to which a substance is bound is added simultaneously, and an antigen-antibody reaction is performed in which it reacts competitively with an antibody on a solid-phase support.
  • the antigen to be measured and the labeled antigen are bound to the solid phase support according to the ratio of the respective amounts.
  • Perform BF separation and enzyme reaction in the same way as the Dutch method. Since the enzyme activity at this time is determined by the amount of bound labeled antigen, the amount of antigen to be measured is measured using a calibration curve based on the amount of labeled antigen added.
  • Patent Document 1 and Patent Document 2 describe a reaction container for use in the enzyme immunoassay as described above.
  • the reaction vessel described in Patent Document 1 has a structure in which a water-permeable partition wall is provided at the upper and lower ends of a capillary capillary and fine particles are filled between these partition walls. Then, with the antigen or antibody bound to the microparticles, the test solution is filled into the tubule to cause an antigen-antibody reaction.
  • the reaction container described in Patent Document 2 is also the same, and has a structure in which fine particles bound with an antigen or an antibody are filled in a thin tube. In the case of Patent Document 2, fine particles are kept immersed in the preservation solution, while a discharge hole whose tip is closed communicates with the downstream side of the narrow tube, and the discharge hole is opened for inspection. It is opened to allow the storage solution and test solution to pass through.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Application Laid-Open No. 62-169055
  • Patent Document 2 Japanese Patent No. 2515392
  • reaction containers such as Patent Document 1 and Patent Document 2
  • sample liquid, reagent liquid, and cleaning liquid injected into a narrow tube at the time of inspection are removed from the thin tube each time after a predetermined process such as reaction or cleaning. It is necessary to discharge.
  • these liquids discharged from the narrow tubes are stored in a tank outside the reaction vessel to prevent secondary contamination.
  • connecting parts such as hoses and pipes for transferring the liquid to the tank, as well as a pump or aspirator that sucks the liquid and generates a liquid flow. Therefore, the inspection apparatus is complicated.
  • connecting the connecting parts is troublesome.
  • the liquid since the liquid is injected into the narrow tube and the liquid is flown down by the pressure or suction force of a pump or aspirator, there is a problem that the control that makes it difficult to adjust the liquid flow becomes complicated.
  • the present invention has been made in view of such problems, and has a structure in which a liquid to be measured, a reagent liquid, a cleaning liquid, or the like injected into a narrow tube is held inside, Connecting member
  • a liquid to be measured, a reagent liquid, a cleaning liquid, or the like injected into a narrow tube is held inside, Connecting member
  • the object is to provide a reaction vessel that can be easily controlled as it is unnecessary.
  • the reaction container of the present invention is a disposable reaction container for immunoassay; it has a liquid supply port at one end, and a solid state to which either antibody or antigen is bound.
  • the liquid flow control mechanism includes at least liquid suction force control of the liquid absorption member and liquid flow rate control in the communication path.
  • an idle space is formed on the upstream side of the arrangement area of the liquid absorption holding member in the waste liquid recovery pipe.
  • a vent hole is formed on the upstream side of the area where the liquid absorption holding member is disposed in the waste liquid collection pipe, and the vent hole can be sealed with a sealant, or the liquid supply port
  • the liquid-absorbing member can be sealed with a sealing material, and the liquid-absorbing member is preferably a member having an endothermic effect when the water-containing liquid is absorbed.
  • the liquid to be measured, the cleaning liquid, the labeled antibody liquid, the luminescent substrate, the chromogenic substrate, or the chromogenic substrate or the chromogenic tube based on various immunoassay methods are applied to the capillary tube filled with the solid phase carrier particles.
  • a reaction reagent such as a fluorescent substrate
  • light is emitted or color develops in a capillary tube filled with solid phase carrier fine particles. Therefore, the substance in the liquid to be measured can be identified and quantified by measuring the amount of luminescence, absorbance, fluorescence intensity, and the like.
  • the liquid absorbing member sucks the liquid injected into the narrow tube. It is structured to prevent secondary contamination by storing it in the waste liquid collection pipe. For this reason, it is not necessary to provide a tank for preventing secondary contamination outside the reaction vessel, and it is not necessary to provide a connecting part for connecting the tank photometer and the reaction vessel. In addition to the structure, connection work for preventing secondary contamination is unnecessary, and measurement can be performed easily.
  • the liquid flow control mechanism is provided to control the liquid flow in the narrow tube, it is not necessary to adjust the suction force, the control becomes easy, and an external device such as a pump is provided. No need for suction means or liquid feeding control means for photometric device, and a simpler structure can be achieved.
  • FIG. 1 is a cross-sectional view showing an example of a reaction vessel in a first embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 is a cross-sectional view showing an example of a reaction vessel in a second embodiment of the present invention. Explanation of symbols
  • FIG. 1 shows a reaction vessel 1 according to a first embodiment of the present invention, which includes a thin tube 2 and a waste liquid recovery tube 3, and has a liquid flow control mechanism.
  • This reaction container 1 is used for an immunoassay (imunoassay), and after being used for the immunoassay, it is disposable that can be disposed of by autoclaving or incineration.
  • an immunoassay applicable to the reaction container 1 of this embodiment an immunoreaction is used to measure qualitatively, quantitatively, or semiquantitatively the antigen (including hapten antigen) or antibody to be measured. Any method can be applied.
  • the immunoassay include, for example, solid-phase enzyme immunoassay (ELISA: Enzyme-linked Immunosorbent Assay, FEIA: Fluorescent Enzyme Immunoassay), bioluminescent enzyme immunoassay Enzyme Immunoassay (EIA) such as CLEIA (Chemiluminescent Enzyme Immunoass ay), Bioluminescent Enzyme Immunoassay (BLEIA), and V-fluorescence immunoassay (E) Examples include FIA (Fluorescent Immunoassay), chemiluminescent immunoassay (CLIA), and bioluminescent immunoassay (BLIA).
  • ELISA Enzyme-linked Immunosorbent Assay
  • FEIA Fluorescent Enzyme Immunoassay
  • EIA Bioluminescent enzyme immunoassay Enzyme Immunoassay
  • CLEIA Chemiluminescent Enzyme Immunoass ay
  • the narrow tube 2 is formed by a main body 2a as an enzyme reaction site and a measurement site, and a liquid supply unit 2b integrally provided at one end (upper end) of the main body 2a, and is transparent or translucent.
  • the whole is formed of a light-transmitting material such as a glass tube or a resin tube.
  • the liquid supply part 2b is formed to have a somewhat larger diameter than the main body part 2a, and a liquid supply port 4 is formed by opening one end (upper end) thereof. Liquids such as the liquid to be measured and cleaning liquid are injected from the liquid supply port 4, and the injected liquid flows down from the liquid supply part 2b to the main body part 2a.
  • the inner diameter and length of the liquid supply part 2b and the inner diameter and length of the main body part 2a are the amount and viscosity of the liquid to be measured.
  • the liquid supply part 2b is set, for example, to an inner diameter of about 5 to 7 mm and a length of about 10 to 15 mm when used in an ELISA method.
  • the inner diameter is about 2.5 to 3. Omm and the length is about 25 to 30 mm.
  • the main body 2a is filled with solid phase carrier fine particles 5.
  • water-permeable partition walls 6 and 7 are provided at both ends (upper and lower ends) in the length direction inside the main body 2a, and the solid-phase carrier fine particles 5 are located between these partition walls 6 and 7. Filled.
  • the partition walls 6 and 7 may have any water permeability material such as a water permeable membrane filter material or a glass wool filter material. By performing such filling, it is possible to prevent the solid-phase carrier fine particles 5 from leaking out of the thin tube 2.
  • the partition wall 7 can also function as a member constituting the liquid flow control mechanism by adjusting its thickness, pore size, and the like.
  • the solid-phase carrier fine particles 5 perform an immune reaction with the solution to be measured, and are in a state in which one of the antibody and the antigen is bound. That is, when measuring an antigen, an antibody that reacts with the antigen is bound, and when measuring an antibody, an antigen corresponding to the antibody is bound.
  • a hapten is also referred to as an antigen.
  • glass beads or polystyrene beads can be suitably used, and porous beads (porous carriers) can also be used.
  • the average particle diameter of these fine particles is adjusted so that the surface area in the total amount filled in the main body 2a is as large as possible, and is appropriately selected within the range of, for example, a diameter of 100 to 250 / ⁇ ⁇ .
  • Such binding of antibodies or antigens to microparticles can be performed by conventional immunoassay methods such as physical adsorption and covalent bonding.
  • surface treatment of the fine particles can be performed in advance.
  • the surface treatment for example, when the fine particles are glass beads, they are washed with pure water or alcohol, dried, then sonicated in an organic solution of silanes, and then washed. Can be done. Further, in place of or in addition to silanesilylation, amino group silane treatment or carboxyl treatment can also be performed.
  • an antigen or antibody is bound and subjected to a blocking treatment for use in an immunoassay.
  • the blocking treatment can be any blocking agent or blocking agent as long as it can prevent non-specific adsorption due to proteins or polypeptides other than the antigen or antibody to be measured.
  • albumin for example, in addition to albumin, skim milk, gelatin, and casein, commercially available blocking agents can be used.
  • the waste liquid recovery pipe 3 is coaxially connected to an end (lower end) opposite to the liquid supply port 4 in the main body 2a.
  • the waste liquid recovery pipe 3 has a connection port 10 that fits an external force at the lower end of the main body 2a.
  • the connection port 10 is fitted to the main body 2a, the waste liquid recovery pipe 3 is connected to the narrow pipe 2. Is done.
  • the connected waste liquid recovery pipe 3 is processed and operated integrally with the thin pipe 2 until it is discarded after the measurement of the force at the start of measurement.
  • the waste liquid collection tube 3 is formed into a bottomed cylindrical shape using glass, resin, or the like.
  • the waste liquid recovery pipe 3 sucks and stores the liquid injected into the narrow pipe 2, and therefore the waste liquid recovery pipe 3 and the thin pipe 2 communicate with each other so that the liquid moves to the waste liquid recovery pipe 3. It has become.
  • This communication is performed by forming a through hole in the substantially central portion of the bottom surface of the thin tube 2 and forming a through hole corresponding to the through hole in the upper end portion of the waste liquid collecting tube 3.
  • These through holes are formed to have the same diameter, and the communication path 11 is formed by the communication between the through hole of the thin tube 2 and the through hole of the waste liquid recovery tube 3.
  • a vertically long space 15 is formed inside the waste liquid recovery pipe 3, and a liquid absorbing member 13 for sucking the liquid injected into the thin pipe 2 is provided in this space.
  • the liquid absorbing member 13 includes a liquid absorbing holding member 14 supported on the bottom side of the space 15, and a guiding member spanned between the liquid absorbing holding member 14 and the communication path 11 described above. It consists of twelve.
  • the liquid absorption holding member 14 and the guide member 12 for example, cloth, non-woven fabric, fibrous paper material, or the like that can suck and hold liquid by capillary force can be used.
  • the materials for the liquid absorption holding member 14 and the induction member 12 include, for example, polyvinyl alcohol, polyacrylate, vinyl acetate, acrylate, A highly water-absorbent resin that is made of a hydrophilic resin such as starch and acrylic acid graft system and swells by liquid absorption can also be used. You may comprise the material cover which combined the water-absorbent resin material and the natural material.
  • a crosslinked body, a porous body, a porous crosslinked body of the above-described hydrophilic resin, and the like can be used.
  • the liquid-absorbing holding member 14 includes all of the liquid to be measured and the cleaning liquid injected into the thin tube 2 for measurement.
  • the size of the liquid is set so that it can absorb and hold all liquids.
  • the guide member 12 extends in the length direction in the space 15 in a state where the upper end portion is in contact with the lower surface portion of the communication path 11, and the lower end portion of the guide member 12 is inserted into the liquid absorption holding member 14, thereby connecting the communication path. It acts to suck the liquid from 11 and guide it to the liquid absorption holding member 14.
  • the waste liquid collection tube 3 needs to prevent light from leaking and becoming noise. It is configured to have sex. For this purpose, for example, it is preferable to use a structure in which the entire waste liquid collection tube 3 is black or the periphery of the waste liquid collection tube 3 is covered with a light shielding sheet.
  • the absorbance or fluorescence intensity of the liquid in the communication path 11 can be measured in addition to the luminescence measurement in the main body 2a of the thin tube 2. In this case, the waste liquid recovery can be performed.
  • the tube 3 needs to have translucency, and for this reason, a transparent material is used for the waste liquid collection tube 3. That is, the waste liquid collection tube 3 is selected depending on the measurement mode, whether it is light-transmitting or force-transmitting.
  • a play space 17 is provided above the space 15 in which the liquid absorption holding member 14 is set.
  • the play space 17 is located above the space 15 and thus is located upstream of the arrangement area of the liquid suction holding member 14.
  • the play space 17 is formed upstream of the liquid absorption holding member 14. Since the liquid is provided, the liquid can be held inside the waste liquid collection pipe 3, and safety is improved.
  • the liquid absorption holding member 14 made of a material including a highly water absorbent resin material that swells due to liquid absorption and retains moisture at a weight ratio of several times or more is used. The volume is expected to swell.
  • a vent hole 19 is formed in the side surface portion of the waste liquid collection pipe 3.
  • the vent hole 19 is used to set the pressure inside the waste liquid collecting pipe 3 to normal pressure, so that the liquid can naturally flow through the communication path 11.
  • the vent hole 19 is formed so as to be located above the liquid absorption holding member 14, that is, upstream of the liquid absorption holding member 14, so that even if the liquid absorption holding member 14 overflows, the passage It is possible to prevent leakage from the pores 19 to the outside.
  • the liquid flow control mechanism controls the liquid flow in the narrow tube 2 so as to adjust the liquid to be held in the thin tube 2 for a predetermined time.
  • the communication path 11 and the liquid absorbing member 13 are involved.
  • the diameter of the communication path 11 can be changed according to the viscosity of the liquid to adjust the liquid passing speed in the communication path 11, the suction force of the liquid absorbing member 13, or the like. May be combined to control the liquid flow.
  • the liquid absorbing member 13 including the guide member 12 and the liquid absorbing holding member 14 described above, a material having an endothermic action when absorbing the water-containing liquid can be used.
  • this material water-absorbing fibers containing xylitol, erythritol and the like can be used.
  • the liquid absorbing member 13 may have a structure in which potassium nitrate, potassium chloride salt, ammonium nitrate, and urea that absorb heat when absorbing a water-containing liquid are held therein.
  • the liquid absorbing member 13 absorbs heat by absorbing the water-containing liquid as described above, the space 15 in the waste liquid collecting pipe 3 is in a reduced pressure state, so that the liquid in the narrow pipe 2 is smoothly absorbed through the communication path 11. It can be absorbed by the liquid member 13. In this way, the liquid absorbing member 13 has an endothermic action, and the liquid absorption speed in the communication path 11 is changed by this endothermic action, so the liquid absorbing member 13 having the liquid absorbing function also functions as a liquid flow control mechanism. It becomes like this.
  • a sealing material 21 is pasted on the waste liquid collection pipe 3 around the vent hole 19. It is also possible to block by sticking.
  • the sealing material 21 seals the air holes 19 with an adhesive, and can be peeled off and re-adhered as appropriate. Therefore, in the measurement, the sealing material 21 is peeled off so that the inside of the waste liquid collecting pipe 3 is in a normal pressure state, and the air hole 19 is sealed with the sealing material 21 after collecting the liquid used for the measurement. It becomes possible. As a result, when the reaction vessel 1 is discarded, it is possible to prevent the secondary contamination that the liquid does not flow out through the vent hole 19, and it is possible to achieve higher safety.
  • the sealing material 23 is peeled off so that liquid can be injected from the liquid supply port 4. After the measurement is completed, the liquid supply port 4 is blocked by the sealing material 23, so that the reaction vessel 1 can be discarded. It is possible to improve the safety that liquid does not leak from the liquid supply port 4.
  • FIG. 2 shows a reaction vessel 31 according to the second embodiment of the present invention. Also in this embodiment, it has a thin tube 2, a waste liquid recovery tube 3 connected to the lower end of the thin tube 2, and a liquid flow control mechanism.
  • the outer diameter of the narrow tube 2 and the waste liquid recovery tube 3 are substantially the same, and the outer surface has no irregularities, so that the handleability and storage stability are improved.
  • the thin tube 2 is composed of a main body portion 2a as an enzyme reaction site and a measurement site, and a liquid supply portion 2b integrally provided at the upper end of the main body portion 2a, and is entirely made of a translucent material. It is formed.
  • a fine particle storage chamber 33 is formed in the upper part of the main body 2a of the thin tube 2 and the fine particle storage chamber 33 is filled with the same solid phase carrier fine particles 5 as in the first embodiment.
  • the upper and lower ends of the fine particle storage chamber 33 are provided with the water-permeable partition walls 6 and 7 as in the first embodiment, so that the solid phase carrier fine particles 5 are prevented from leaking out of the thin tube 2.
  • the main body portion 2a of the thin tube 2 is formed with a sub-measurement portion 35 extending so as to extend downward from the fine particle storage chamber 33, and the sub-measurement portion 35 has a light-transmitting property.
  • Drain tube 34 is inserted.
  • the drain tube 34 is inserted into the sub-measurement unit 35 with a downward force so that the upper end abuts against the partition wall 7, so that the drain tube 34 is in communication with the particulate storage chamber 33. . By this communication, the liquid that has passed through the particulate storage chamber 33 can enter the drain tube 34.
  • light emission and color development due to an enzyme reaction can be measured in the fine particle storage chamber 33 (that is, the main body portion 2a) filled with the solid phase carrier fine particles 5.
  • the degree of color development V Can be measured by the sub-measurement unit 35.
  • the drain tube 34 is extended so as to be exposed downward from the lower end of the main body portion 2a, and the extended portion 34b is inserted into the space 15 of the waste liquid recovery tube 3. As a result, the drain tube 34 serves as a communication passage 11 that guides the liquid injected into the narrow tube 2 to the waste liquid collection tube 3.
  • a liquid absorption holding member 14 is provided inside the waste liquid recovery pipe 3.
  • the liquid absorption holding member 14 is provided so as to be positioned at the bottom of the waste liquid recovery pipe 3 and sucks and holds the liquid flowing down from the drain tube 34.
  • the liquid absorption holding member 14 is set in size and the like so as to have a liquid absorption capability for holding all the liquid injected into the thin tube 2 as in the first embodiment. Therefore, since all the liquid used for the measurement can be contained in the waste liquid collection pipe 3, secondary contamination can be prevented and safety is improved.
  • the guiding member 12 of the first embodiment is not provided, and the liquid absorbing member 13 is configured by the liquid absorbing holding member 14 alone.
  • the upper space 15 of the liquid absorption holding member 14 is vertically long, so that the upper portion of the space 15 is a play space 17. Therefore, since the amount of liquid used for the measurement is large, it is possible to hold the liquid inside the waste liquid collection tube 3 even when the liquid overflows from the liquid absorption holding member 14.
  • the liquid flow control mechanism controls the liquid flow so that the liquid injected into the thin tube 2 is held in the thin tube 2 for a predetermined time.
  • the liquid flow control mechanism in this embodiment includes the inner diameter and length of the drain tube 34, the inner diameter and length of the fine particle storage chamber 33, the packing density of the solid phase carrier fine particles 5, It is configured by adjusting the thickness of the partition wall 7 and the pore size.
  • the liquid absorption holding member 14 also functions as a liquid flow control mechanism.
  • the vent hole 19 is formed in the side surface portion of the waste liquid recovery pipe 3 in the upper part of the space 15.
  • a seal member 21 is attached to the vent hole 19 so that it can be peeled off and re-adhered (re-attached).
  • the sealing material 23 is also attached to the liquid suction port 4 of the thin tube 2 so that it can be peeled off and re-adhered.
  • the diameter of the reaction vessel 31 is 7 to: LOmm
  • the length is 70 to: LOOmm
  • the inner diameter of the particulate storage chamber 33 is 2 to 3 mm
  • the length is
  • the inner diameter of the drain tube 34 can be set to 1 to 1.5 mm and the length 14 mm.
  • the volume of the waste liquid collection tube 3 can be set to 1.0 to 1.5 mL by setting the length to 40 to 50 mm.
  • the liquid flow control mechanism is provided to control the liquid flow in the narrow tube 2, it is not necessary to adjust the liquid suction force, and a simple structure can be achieved.
  • the same description as in the first embodiment including the type of immunoassay to which the reaction vessel 31 can be applied and the material, structure, shape, etc. of each member is omitted. .
  • the reaction container according to the present invention comprises a solid phase enzyme immunoassay (ELISA), a fluorescent enzyme immunoassay.
  • ELISA solid phase enzyme immunoassay
  • fluorescent enzyme immunoassay a fluorescent enzyme immunoassay
  • Enzyme immunoassay such as (FEIA), chemiluminescent enzyme immunoassay (CLEIA), bioluminescent enzyme immunoassay (BLEI A), fluorescent immunoassay without enzyme (FIA), science It can be applied to any immunoassay such as luminescence immunoassay (CLIA) and bioluminescence immunoassay (BLIA).
  • EIA Enzyme immunoassay
  • FEIA chemiluminescent enzyme immunoassay
  • CLLEI A chemiluminescent enzyme immunoassay
  • BLEI A bioluminescent enzyme immunoassay
  • FIA fluorescent immunoassay without enzyme
  • the reaction container according to the present invention has a structure in which the liquid injected into the narrow tube is sucked by the liquid absorption member and stored in the waste liquid recovery pipe to prevent secondary contamination. Connection parts for connecting the photometer and reaction vessel that do not need to be installed outside are no longer required, and a simple structure can be achieved. Easy It can be done easily.
  • the reaction vessel of the present invention since the reaction vessel of the present invention has a liquid flow control mechanism and controls the liquid flow in the narrow tube, it is not necessary to adjust the suction force, and the control becomes easy, and an external device such as a pump is used.
  • reaction vessel can be disposed of by autoclaving or incineration as it is, which is useful for safety and health management for the handler.

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Abstract

サンプル液、試薬液や洗浄液等の液体を内部で保持する構造とすることにより、接続部材を不要として簡素化を行うと共に、細管内での液体の流速を行う機能を備えることによりポンプを不要として制御を容易とする。反応容器１は、免疫測定用使い捨ての容器である。一端に給液口４を有し、抗体または抗原のいずれか一方が結合した固相担体微粒子５が内部に充填された透明な細管２と、細管２に注入された液体を吸引する吸液部材１３が内部に設けられ、連通路１１を通じて細管２の下流側に連結された廃液回収管３と、液体を細管２内に所定時間保持するように細管内の液流を制御する液流制御機構とを備える。

Description

明 細 書
反 、谷
技術分野
[0001] 本発明は、免疫測定法に用いる使い捨ての反応容器に関する。
背景技術
[0002] 免疫測定法 (ィムノアッセィ法）は、抗原抗体反応を利用した測定法であり、様々な 物質の検出や定量に用いられている。この免疫測定法は、競合反応法と非競合反応 法に大別され、それぞれ、抗原 ·抗体反応結合体 (B : Bound Form)と非結合未反 応体（F： Free Form)とを BF分離するヘテロジニアス法と、 BF分離しな!、ホモジ- ァス法に区分される。ヘテロジニアス法においては、抗原'抗体反応を液相で行う液 相法、固相と液相間にて行う固相法がある。抗原又は抗体を定量する際には、検出 感度が優れる点で、競合反応法より非競合反応法、特にサンドイッチ法のようなへテ 口ジ-ァスー固相法を適用する場合が多い。
[0003] サンドイッチ法により抗原を測定する場合の手順例としては、固相化担体に測定対 象の抗原に対する抗体を結合させておき、これに測定対象の抗原を含む検体液を 加えることにより、抗体に抗原が特異的に結合する抗原抗体反応 (第 1反応)を起こし 、その後、夾雑成分を除去する洗浄を行う。そして、標識物質として例えば酵素を結 合させた酵素標識抗体を添加して、抗原抗体反応 (第 2反応)を起こすことにより、固 相化担体に結合した抗原に酵素標識抗体を結合させる。その後、 BF分離させるた めの洗浄を行!ヽ、抗原に結合した酵素標識抗体の酵素活性を測定するため発色基 質又は発光基質等を含む試薬を添加し反応させる酵素反応を行!ヽ、吸光度や発光 度を測定することにより抗原の量を検出する。
[0004] 競合—ヘテロジニアス法により抗原を測定する場合の一例としては、固相化担体に 測定対象の抗原に対する抗体を結合させておき、これに被測定抗原を含む検体液 及びこの抗原に標識物質を結合させた標識抗原を同時に添加し、競合的に固相化 担体の抗体と反応させる抗原抗体反応を行う。この抗原抗体反応では、被測定抗原 及び標識抗原がそれぞれの量の割合に応じて固相化担体に結合する。その後、サ ンドイッチ法と同様に BF分離を行い、酵素反応を行う。このときの酵素活性は、結合 した標識抗原の量により決まるため、添加した標識抗原量カゝら検量線を用いて被測 定抗原の量を測定する。
[0005] 特許文献 1及び特許文献 2には、以上のような酵素免疫測定法に用いるための反 応容器が記載されている。特許文献 1に記載の反応容器は、毛管状の細管の上下 端部に透水性の隔壁を設け、これらの隔壁の間に微粒子を充填した構造となってい る。そして、微粒子に抗原または抗体を結合した状態で、細管内に被験液を充填し て抗原抗体反応を起こさせるものである。特許文献 2に記載の反応容器も同様であり 、抗原または抗体を結合した微粒子を細管内に充填した構造となっている。また、特 許文献 2の場合には、微粒子が保存液に浸漬した状態で保持される一方、細管の下 流側には先端が閉じられた排出孔が連通しており、検査に際して排出孔を開放して 保存液や検査液の通過を可能とするものである。
[0006] 特許文献 1 :特開昭 62— 169055号公報
特許文献 2 :特許第 2515392号公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0007] 特許文献 1や特許文献 2のような反応容器では、検査に際して細管内に注入される サンプル液、試薬液や洗浄液がその反応や洗浄等の所定の処理の後、その都度、 細管から排出する必要がある。上述の反応容器では、細管から排出されたこれらの 液体を反応容器外部のタンクに貯溜して 2次汚染を防止している。し力しながら、この 場合には、液体をタンクに移送するためのホースや管体等の接続部品を用いる必要 があると共に、液体を吸引して液流を発生させるポンプやァスピレータなどが必要と なり、検査装置が複雑ィ匕している。また、接続部品の接続作業が面倒ともなつている 。さらに、細管への液体の注入やその流下をポンプやァスピレータなどの圧液力又 は吸引力によって行うため、液流の調整が難しぐ制御が煩雑となる問題を有してい る。
[0008] 本発明は、このような問題点を考慮してなされたものであり、細管に注入される被測 定液、試薬液や洗浄液等の液体を内部で保持する構造とすることにより、接続部材 を不要として検査装置の簡素化を行うと共に、細管内での液体の流速を制御する機 能を備えることにより、測光装置にセットするだけでそのまま測光することが可能であ り、また、ポンプを不要としてその制御を容易とした反応容器を提供することを目的と する。
課題を解決するための手段
[0009] 上記目的を達成するため、本発明の反応容器は、免疫測定用使い捨ての反応容 器であって；一端に給液口を有し、抗体または抗原の 、ずれか一方が結合した固相 担体微粒子が内部に充填された細管と；細管に注入された液体を吸弓 Iする吸液部 材が内部に設けられ、連通路を通じて細管の下流側に連結された廃液回収管とを含 んでなり、液体を細管内に所定時間保持するように細管内の液流を制御する液流制 御機構を有して ヽることを特徴とする。
[0010] このような反応容器において、液流制御機構は、吸液部材の液体吸引力制御と連 通路内での通液速度制御とを少なくとも含んでいることが好ましぐまた、吸液部材は 、吸液した液体を保持する吸液保持部材と、この吸液保持部材と連通路とに掛け渡 されて連通路からの液体を吸液保持部材に吸引する誘導部材とを有していることが 好適であり、さらに、廃液回収管における吸液保持部材の配置領域の上流側に遊び 空間が形成されていることが良い。そして、廃液回収管における吸液保持部材の配 置領域の上流側に通気孔が形成されていることが好適であり、また、通気孔がシー ル材により封鎖可能となっていたり、給液口がシール材により封鎖可能となっているこ とが好ましぐさらに、吸液部材は、含水液体を吸液したときに吸熱作用を有する部材 であることが良い。
発明の効果
[0011] 本発明の反応容器によれば、固相担体微粒子が充填された細管に対して、各種免 疫測定法に基づいて被測定液や洗浄液、標識抗体液、発光基質又は発色基質又 は蛍光基質などの反応試薬を注入することにより固相担体微粒子が充填された細管 内で発光したり発色する。このため、その発光量や吸光度、蛍光強度などを測定する ことにより、被測定液中の物質の同定や定量を行うことができる。
[0012] 本発明の反応容器では、細管内に注入された液体を吸液部材が吸引することによ り廃液回収管内に貯留して 2次汚染を防止する構造となっている。このため、 2次汚 染を防止するためのタンクを反応容器外に設ける必要がなぐタンクば力りでなくタン クゃ測光装置と反応容器とを接続するための接続部品が不要となり、簡単な構造と することができると共に、 2次汚染防止のための接続作業が不要となり、測定を簡易 に行うことができる。
[0013] また、本発明では、液流制御機構を設けて細管内の液流を制御して 、るため、吸 引力の調整が不要であり、制御が容易となると共に、ポンプ等の外部の吸引手段や 測光装置への送液制御手段などが不要となり、さらに簡単な構造とすることができる 図面の簡単な説明
[0014] [図 1]本発明の第 1の実施形態における反応容器の一例を示す断面図である。
[図 2]本発明の第 2の実施形態における反応容器の一例を示す断面図である。 符号の説明
[0015] 1 反応容器
2 細管
3 廃液回収管
4 給液 PI
5 固相担体微粒子
6, 7 隔壁
11 連通路
12 誘導部材
13 吸液部材
14 吸液保持部材
15 空間
17 遊び空間
19 通気孔
21, 23 シーノレ材
発明を実施するための最良の形態 [0016] 以下、本発明の反応容器を実施するための最良の形態について、図面を参照して 詳細に説明する。なお、各実施形態において、同一の部材には同一の符号を付して 対応させてある。
[0017] 図 1は、本発明における第 1の実施形態の反応容器 1を示し、細管 2と、廃液回収 管 3とを備え、液流制御機構を有している。この反応容器 1は免疫測定法 (ィムノアツ セィ）に用いられるものであり、免疫測定に使用された後においては、そのままオート クレープ処理又は焼却等により廃棄処分可能な使い捨てとなっている。本実施形態 の反応容器 1に適用可能な免疫測定法としては、免疫反応を利用して測定対象の抗 原 (ハプテン抗原を含む)又は抗体について定性的、又は定量的、又は半定量的に 測定する方法であれば如何なる方法にも適用できる。免疫測定法として具体的には 、例えば、固相酵素免疫測定法（ELISA:Enzyme—linked Immunosorbent A ssayノ、 光酵素免疫測疋'法 (FEIA:Fluorescent Enzyme Immunoassay)、 ィ匕学発光酵素免疫測定法（CLEIA: Chemiluminescent Enzyme Immunoass ay)、生物発光酵素免疫測定法（BLEIA: Bioluminescent Enzyme Immunoas say)などの酵素免疫測定法 (EIA： Enzyme Immunoassay)や、酵素を使用しな Vヽ蛍光免疫測定法 (FIA： Fluorescent Immunoassay)、化学発光免疫測定法（ CLIA： Chemiluminescent Immunoassay)、生物発光免疫測定法（BLIA： Biol uminescent Immunoassay)などを挙 D "ること;^できる。
[0018] 細管 2内部において酵素反応を行うと共に、酵素反応によって発生した光や色を測 定するものである。この細管 2は酵素反応部位及び測定部位としての本体部 2aと、本 体部 2aの一端 (上端）に一体的に設けられた給液部 2bとによって形成されており、透 明又は半透明なガラス管や榭脂管等の透光材料によって全体が成形されて 、る。こ のように細管 2の全体が透光部材によって形成されることにより、発光や発色の度合 V、を本体部 2aを通じて測定することができる。給液部 2bは本体部 2aよりも幾分大径 となるように形成されており、その一端 (上端)が開口されることにより給液口 4となって いる。被測定液や洗浄液等の液体は給液口 4から注入され、注入された液体は給液 部 2bから本体部 2aに流下する。
[0019] 給液部 2bの内径や長さ及び本体部 2aの内径や長さは測定する液体の量や粘度、 測定方法等に応じて適宜変更されるものであり、 ELISA法に用いる場合、給液部 2b は、例えば 5〜7mm程度の内径、 10〜 15mm程度の長さに設定され、本体部 2aは 、例えば 2. 5〜3. Omm程度の内径、 25〜30mm程度の長さに設定される。
[0020] 本体部 2aの内部には、固相担体微粒子 5が充填される。この場合、本体部 2a内部 における長さ方向の両端部（上下端部）には、透水性の隔壁 6、 7が設けられており、 固相担体微粒子 5は、これらの隔壁 6、 7の間に充填される。隔壁 6、 7は透水性メン ブランフィルタ材ゃ、グラスウールフィルタ材など如何なる透水性材力 構成しても良 い。このような充填を行うことにより、固相担体微粒子 5が細管 2から漏出することを防 止することができる。また、隔壁 7はその厚さやポアサイズなどの調節により液流制御 機構を構成する一部材として機能させることもできる。
[0021] 固相担体微粒子 5は被測定液との間で免疫反応を行うものであり、抗体または抗原 の一方が結合した状態となっている。すなわち、抗原を測定する場合には、その抗原 と反応する抗体が結合され、抗体を測定する場合には、その抗体に対応した抗原が 結合されるものである。なお、本発明においては、ハプテンについても抗原と称する ものとする。固相担体微粒子 5の微粒子としては、ガラスビーズ或いはポリスチレンビ ーズが好適に使用でき、多孔質ビーズ (多孔質担体)とすることも可能である。これら の微粒子は、本体部 2aに充填された総量における表面積が極力広くなるように、そ の平均粒径が調整され、例えば、直径 100〜250 /ζ πιの範囲内で適宜選択される。 このような微粒子への抗体または抗原の結合は、物理的吸着や共有結合など免疫 測定法の通常の方法によって行うことが可能である。
[0022] 抗体または抗原の結合に際しては、予め微粒子の表面処理を行うこともできる。こ の表面処理としては、例えば、微粒子がガラスビーズの場合には、純水やアルコール によって洗浄、乾燥した後、シラン類の有機溶液中で超音波処理してシリルイ匕処理し 、その後、洗浄することにより行うことができる。また、シランシリルイ匕に替えて、又は加 えてアミノ基シラン処理や、カルボキシル処理することも可能である。このような表面 処理の後、抗原又は抗体を結合し、ブロッキング処理を施すことにより免疫測定法に 用いられる。ブロッキング処理は、測定目的の抗原又は抗体以外の蛋白質やポリべ プチドなどによる非特異吸着を防止することができれば、如何なるブロッキング剤、ブ ロッキング処理法によっても良ぐ例えば、アルブミン、スキムミルク、ゼラチン、カゼィ ンの外、市販のブロッキング剤などを使用することができる。
[0023] 廃液回収管 3は、本体部 2aにおける給液口 4との反対側の端部（下端部）に同軸的 に連結される。廃液回収管 3は、本体部 2aの下端部に外側力も嵌合する連結口 10 を有しており、この連結口 10が本体部 2aに嵌合することにより廃液回収管 3が細管 2 と連結される。連結された廃液回収管 3は、測定開始時力 測定が終了した後の廃 棄時に至るまで細管 2と一体となって処理や操作が行われる。
[0024] 廃液回収管 3は、ガラス、榭脂等によって有底の筒状に成形されている。この廃液 回収管 3は、細管 2に注入された液体を吸引して貯留するものであり、このため液体 が廃液回収管 3に移動するように廃液回収管 3及び細管 2が相互に連通するようにな つている。この連通は、細管 2の底面の略中央部分に貫通孔を形成すると共に、この 貫通孔に対応した貫通孔を廃液回収管 3の上端部に形成することにより行われる。こ れらの貫通孔は、同じ径となるように形成されており、細管 2の貫通孔と廃液回収管 3 の貫通孔とが連通することにより連通路 11が形成される。
[0025] 廃液回収管 3の内部には、縦長状の空間 15が形成されており、この空間内には細 管 2に注入された液体を吸引する吸液部材 13が設けられる。この実施の形態におい て、吸液部材 13は空間 15の底部側に支承された吸液保持部材 14と、吸液保持部 材 14と上述した連通路 11との間に掛け渡された誘導部材 12とによって構成されて いる。これらの吸液保持部材 14及び誘導部材 12は、毛管力によって液体を吸引し、 且つ保持することが可能な、例えば、布、不織布、繊維状紙材等を使用することがで きる。このような吸液保持部材 14及び誘導部材 12の材料には、紙材ゃ木綿材のよう な天然素材の他、例えば、ポリビニルアルコール系、ポリアクリル酸塩系、酢酸ビニル •アクリル酸塩系、澱粉'アクリル酸グラフト系などの親水性樹脂からなり、吸液により 膨潤する高吸水性榭脂材も使用可能であり、また、このような高吸水性榭脂材を複数 組み合わせた材料や、高吸水性榭脂材と天然素材とを組み合わせた材料カゝら構成 しても良い。高吸水性榭脂材としては、上述のような親水性樹脂の架橋体、多孔質化 体、多孔質ィ匕架橋体なども使用できる。
[0026] 吸液保持部材 14は、測定のために細管 2に注入された被測定液や洗浄液等の全 ての液体を給液して保持できる吸液能力を有するように、その大きさ等が設定される
。このように測定に用いた全ての液体を吸液保持部材 14が保持することにより、液体 が廃液回収管 3の内部に封じ込められるため、二次汚染を防止することができ、安全 性が飛躍的に向上する。
[0027] 誘導部材 12は、上端部が連通路 11の下面部分と接触した状態で空間 15内を長さ 方向に延びており、その下端部分が吸液保持部材 14に差し込まれることにより連通 路 11からの液体を吸引して吸液保持部材 14に誘導するように作用する。
[0028] 廃液回収管 3は細管 2における測定が化学発光や生物発光など発光測定の際に は、光等が漏れてノイズとならないようにする必要があり、このため廃液回収管 3は遮 光性を有するように構成される。このためには、例えば、廃液回収管 3の全体を黒色 としたり、廃液回収管 3の周囲を遮光性シートによって覆った構造とすることが好まし い。また、この実施形態の反応容器 1においては、細管 2の本体部 2a内の発光測定 ではなぐ連通路 11内の液体の吸光度又は蛍光強度を測定することもでき、この場 合には、廃液回収管 3としては透光性を有している必要があり、このため廃液回収管 3としては透明な材料が使用される。すなわち、廃液回収管 3としては、測定の態様 に応じて遮光性である力透光性であるかが選択されるものである。
[0029] この実施形態において、吸液保持部材 14がセットされた空間 15の上方には、遊び 空間 17が設けられている。遊び空間 17は、空間 15の上方に設けられることにより吸 液保持部材 14の配置領域の上流側に位置している。このような構造とすることにより 、使用する液体の量が多い等の理由により吸液保持部材 14から液体が溢れ出た場 合であっても、吸液保持部材 14の上流側に遊び空間 17が設けられているため、液 体を廃液回収管 3の内部に保持することができ、安全性が向上する。また、吸液によ り膨潤し数倍以上の重量比で水分を保持する高吸水性榭脂材を含む材質の吸液保 持部材 14を用い、遊び空間 17について、吸液保持部材 14の膨潤を見込む容積と することちでさる。
[0030] このように細管 2に廃液回収管 3を連結して廃液回収管 3内に液体を回収し貯溜す る構造では、 2次汚染を防止するためのタンクを反応容器 1外に設ける必要がなくな る。従って、タンクば力りでなくタンクと反応容器とを接続するための接続部品が不要 となり、簡単な構造とすることができると共に、測定を簡易に行うことができる。
[0031] 廃液回収管 3の側面部分には、通気孔 19が形成されている。通気孔 19は、廃液回 収管 3の内部の圧力を常圧とするためのものであり、これにより液体は連通路 11内を 自然流下することが可能となっている。通気孔 19は吸液保持部材 14の上方、すなわ ち吸液保持部材 14の上流側に位置するように形成されており、このため吸液保持部 材 14力も液体が溢れ出ても、通気孔 19から外部に漏出することを防止することが可 能となっている。
[0032] 液流制御機構は、細管 2内の液流を制御して液体が細管 2内に所定時間保持され るように調整するものである。このように液体を細管 2内に所定時間保持することによ り、酵素反応や発光 ·発色反応を確実に行うことができ、高精度な測定が可能となる。
[0033] 液流制御機構の具体的な部材としては、上述した連通路 11や吸液部材 13 (特に、 誘導部材 12)が関与するものである。例えば、連通路 11の径ゃ長さを液体の粘度等 に合わせて変更して連通路 11内の通液速度を調整したり、吸液部材 13の吸引力を 調整したり、さらには、これらを組み合わせて液流を制御しても良い。このように液流 制御機構を設けて細管 2内の液流を制御することにより、外部での吸引力の調整が 不要となるため、制御が容易となると共に、ポンプ等外部の吸引手段が不要となり、 簡単な構造とすることができる。
[0034] 上述した誘導部材 12及び吸液保持部材 14からなる吸液部材 13としては、含水液 体を吸収したときに吸熱作用を有する材料を用いることができる。この材料としては、 キシリトール、エリスリトール等を含有する吸水性繊維を用いることができる。また、吸 液部材 13としては、含水液体を吸収したときに吸熱を行う硝酸カリウム、塩ィ匕カリウム 、硝酸アンモ-ゥム、尿素をその内部に保持した構造としても良い。
[0035] このように吸液部材 13が含水液体の吸収によって吸熱を行うことにより、廃液回収 管 3内の空間 15が減圧状態となるため、細管 2内の液体を連通路 11を通じて円滑に 吸液部材 13に吸収することができる。このように吸液部材 13が吸熱作用を有し、この 吸熱作用により連通路 11内の通液速度が変更されることから吸液作用を有した吸液 部材 13も液流制御機構として機能するようになって 、る。
[0036] 上述した通気孔 19に対しては、通気孔 19周囲の廃液回収管 3にシール材 21を貼 り付けることにより封鎖することも可能である。シール材 21は粘着剤により通気孔 19 を封鎖するものであり、適宜、剥離及び再粘着可能となっている。従って、測定に際 しては、シール材 21を剥離して廃液回収管 3の内部を常圧状態とし、測定に用いた 液体の捕集後にはシール材 21によって通気孔 19を封鎖することが可能となる。これ により、反応容器 1の廃棄の際に、通気孔 19を通じて液体が流れ出ることがなぐ二 次汚染を防止することができ、より安全性の高いものとすることができる。
[0037] 細管 2の給液口 4に対しても同様であり、給液口 4を封鎖する剥離及び再粘着可能 なシール材 23を用いることができる。そして、測定に際してはシール材 23を剥離して 給液口 4からの液体の注入を可能とし、測定終了後にシール材 23によって給液口 4 を封鎖することにより、反応容器 1の廃棄の際に給液口 4から液体が漏れ出ることが なぐ安全性を向上させることができる。
[0038] 図 2は、本発明の第 2実施形態の反応容器 31を示す。この実施形態においても、 細管 2と、細管 2の下端部に連結された廃液回収管 3と、液流制御機構とを有してい る。この場合、細管 2及び廃液回収管 3は外径が略同一となっており、外面に凹凸が ないため、取り扱い性や保存性が向上している。
[0039] 細管 2は、酵素反応部位及び測定部位としての本体部 2aと、本体部 2aの上端に一 体的に設けられた給液部 2bとによって構成されており、全体が透光材料によって形 成されている。細管 2の本体部 2aの上部には微粒子収容室 33が上部に形成されて おり、この微粒子収容室 33に第 1実施形態と同様の固相担体微粒子 5が充填されて いる。微粒子収容室 33の上下端部には、第 1実施形態と同様の透水性の隔壁 6、 7 が設けられることにより、固相担体微粒子 5が細管 2から漏出することが防止されてい る。
[0040] 細管 2の本体部 2aには、微粒子収容室 33から下方に長くなるように延びたサブ測 定部 35がー体的に形成されており、このサブ測定部 35に透光性のドレインチューブ 34が挿入されている。ドレインチューブ 34は、サブ測定部 35に下方力ゝら揷入される ことにより上端部が隔壁 7に当接しており、これによりドレインチューブ 34は微粒子収 容室 33と連通した状態となっている。この連通により、微粒子収容室 33を通過した液 体がドレインチューブ 34内に入り込むことが可能となっている。 [0041] この実施形態では、固相担体微粒子 5が充填されて ヽる微粒子収容室 33 (すなわ ち本体部 2a)で酵素反応による発光や発色を測定することができる。これに加えて、 サブ測定部 35が長くなつており、且つこのサブ測定部 35にドレインチューブ 34が揷 入された構造となっているため、ドレインチューブ 34に入り込んだ液体の発色の度合 V、をサブ測定部 35で測定することが可能となって 、る。
[0042] ドレインチューブ 34は本体部 2aの下端から下方に露出するように延設されており、 この延設部分 34bが廃液回収管 3の空間 15内に挿入されて 、る。これによりドレイン チューブ 34は、細管 2に注入された液体を廃液回収管 3に導き出す連通路 11となつ ている。
[0043] 廃液回収管 3の内部には、吸液保持部材 14が設けられる。吸液保持部材 14は廃 液回収管 3の底部に位置するように設けられており、ドレインチューブ 34から流下す る液体を吸引して保持する。吸液保持部材 14としては、第 1実施形態と同様に細管 2 に注入された全ての液体を保持する吸液能力を有するように、その大きさ等が設定さ れるものである。従って、測定に用いた全ての液体を廃液回収管 3の内部に封じ込め ることができるため、二次汚染を防止することができ、安全性が向上する。この実施形 態では、第 1実施形態の誘導部材 12が設けられておらず、吸液保持部材 14だけで 吸液部材 13を構成して 、る。
[0044] この実施形態において、吸液保持部材 14の上部の空間 15は縦長となることにより 、空間 15の上方部分が遊び空間 17となっている。従って、測定に用いる液体の量が 多いため、吸液保持部材 14から液体が溢れ出た場合であっても、液体を廃液回収 管 3の内部に保持することが可能となっている。
[0045] この実施形態においても、液流制御機構は、細管 2に注入された液体が細管 2内に 所定時間保持するように液流を制御する。このような制御を行うため、この実施形態 における液流制御機構は、ドレインチューブ 34の内径やその長さ、微粒子収容室 33 の内径やその長さ、固相担体微粒子 5の径ゃ充填密度、隔壁 7の厚さやポアサイズ 等を調整することにより構成される。また、吸液保持部材 14として、含水液体を吸収 したときに吸熱作用を有する部材を用いた場合には、吸液保持部材 14も液流制御 機構として作用する。 [0046] なお、この実施形態においても空間 15の上部における廃液回収管 3の側面部分に 通気孔 19が形成されている。また、この通気孔 19に対しては、シール部材 21が剥離 及び再粘着 (再貼付)可能に貼り付けられる。細管 2の吸液口 4に対してもシール材 2 3が剥離及び再粘着可能に貼り付けられるものである。
[0047] この実施形態の反応容器 31における寸法例を説明すると、反応容器 31の直径は 7〜： LOmm、長さは 70〜： LOOmm、微粒子収容室 33の内径は 2〜3mm、長さは 10 mm、ドレインチューブ 34の内径は 1〜1. 5mm、長さは 14mmに設定することがで きる。また、廃液回収管 3は長さが 40〜50mmと設定することにより、その容積を 1. 0 〜1. 5mLとすることができる。
[0048] このような実施形態では、第 1実施形態と同様に、細管 2内に注入された液体を廃 液回収管 3内に貯留するため二次汚染を防止することができる。また、液流制御機構 を設けて細管 2内の液流を制御しているため、液体吸引力の調整が不要となり、簡単 な構造とすることができる。なお、本第 2実施形態において、反応容器 31が適用可能 な免疫測定法の種類や、各部材の材質、構造、形状などを含む第 1実施形態と同様 の部分については重複する説明を省略する。
産業上の利用可能性
[0049] 本発明による反応容器は、固相酵素免疫測定法 (ELISA)、蛍光酵素免疫測定法
(FEIA)、化学発光酵素免疫測定法 (CLEIA)、生物発光酵素免疫測定法 (BLEI A)などの酵素免疫測定法 (EIA)や、酵素を使用しない蛍光免疫測定法 (FIA)、ィ匕 学発光免疫測定法 (CLIA)、生物発光免疫測定法 (BLIA)のような如何なる免疫測 定法にも適用可能である。各種免疫測定法に基づいて被測定液や洗浄液、反応試 薬を注入することにより、固相担体微粒子が充填された細管内における発光量や吸 光度、蛍光強度などを直接測定することが可能であり、短時間の内に被測定液中の 物質の同定や定量を高感度で簡便に行うことができる。そして、本発明の反応容器 は、細管内に注入された液体を吸液部材が吸引することにより廃液回収管内に貯留 して 2次汚染を防止する構造となっているため、タンクを別途反応容器外に設ける必 要がなぐ測光装置と反応容器とを接続するための接続部品が不要となり、簡単な構 造とすることができると共に、 2次汚染防止のための接続作業が不要となり、測定を簡 易に行うことができる。また、本発明の反応容器は、液流制御機構を有し、細管内の 液流を制御しているため、吸引力の調整が不要であり、制御が容易となると共に、ポ ンプ等の外部の吸引手段や測光装置への送液制御手段などを不要とする。さらに、 免疫測定に使用された後には、反応容器はそのままオートクレープ処理又は焼却等 により廃棄処分可能であり、取扱者に対する安全衛生管理上にも有用である。

Claims

請求の範囲
[1] 免疫測定用使い捨ての反応容器であって、
一端に給液口を有し、抗体または抗原の！/ヽずれか一方が結合した固相担体微粒 子が内部に充填された細管と、
細管に注入された液体を吸弓 Iする吸液部材が内部に設けられ、連通路を通じて細 管の下流側に連結された廃液回収管とを含んでなり、
液体を細管内に所定時間保持するように細管内の液流を制御する液流制御機構 を有して!/ヽることを特徴とする反応容器。
[2] 前記液流制御機構は、前記吸液部材の液体吸引力制御と前記連通路内での通液 速度制御とを少なくとも含んでいることを特徴とする請求項 1記載の反応容器。
[3] 前記吸液部材は、吸液した液体を保持する吸液保持部材と、この吸液保持部材と 前記連通路とに掛け渡されて連通路力 の液体を吸液保持部材に吸引する誘導部 材とを有していることを特徴とする請求項 1又は 2記載の反応容器。
[4] 前記廃液回収管における吸液保持部材の配置領域の上流側に遊び空間が形成さ れて!ヽることを特徴とする請求項 3記載の反応容器。
[5] 前記廃液回収管における吸液保持部材の配置領域の上流側に通気孔が形成され ていることを特徴とする請求項 3又は 4項記載の反応容器。
[6] 前記通気孔がシール材により封鎖可能となっていることを特徴とする請求項 5記載 の反応容器。
[7] 前記給液口がシール材により封鎖可能となっていることを特徴とする請求項 1乃至
6の 、ずれか 1項記載の反応容器。
[8] 前記吸液部材は、含水液体を吸液したときに吸熱作用を有する部材であることを特 徴とする請求項 1乃至 7のいずれ力 1項記載の反応容器。
[9] 前記固相担体微粒子の微粒子がガラスビーズであることを特徴とする請求項 1乃至
8の 、ずれか 1項記載の反応容器。
[10] 前記固相担体微粒子の微粒子が多孔質ビーズであることを特徴とする請求項 1乃 至 9の 、ずれか 1項記載の反応容器。
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