WO2005068491A1 - Peptides antitumoraux et antiviraux - Google Patents
Peptides antitumoraux et antiviraux Download PDFInfo
- Publication number
- WO2005068491A1 WO2005068491A1 PCT/RU2004/000541 RU2004000541W WO2005068491A1 WO 2005068491 A1 WO2005068491 A1 WO 2005068491A1 RU 2004000541 W RU2004000541 W RU 2004000541W WO 2005068491 A1 WO2005068491 A1 WO 2005068491A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- οιу
- οιu
- ηϊз
- τгρ
- activity
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Definitions
- the proposed invention is available for the use of preservatives and proteins, and anti-inflammatory drugs, as well as medicinal products.
- bleomycins have a direct and indirect effect on tumor cells, but the possibility of their use in the hospital is limited to severe and impaired
- Another limitation is the adverse effects associated with the potential for immune, immunogenicity and other undesirable properties of the recombinant Internet.
- SIGNIFICANT FOX (DR. 26) 2 Therefore, the search for new methods of therapy for therapies of therapies remains one of the most acute problems of modern medicine.
- the immunomodulating peptides are known - allopherans (8).
- the main area of use of all the drugs is the treatment of viral infections.
- a computerized analysis of the databases of the structure and properties of proteins and reactors has established that this connection is not known to be known to the family.
- the patient is at a low risk for treating a patient with a medical condition to treat their illness.
- Afferent proteins are produced by the cells of various tissue inheritances of many species of animals, including humans and other mammals.
- the ripe white protein of the usual diet contains more than 200 amino acid residues.
- the private properties of the entities are associated with fragments that are homogenous to the 114-134 group of the first bull, especially the amyloid hydrophysics of the 10th unit.
- Allostatin 1 The SONGER FOX (TITLE 26) 4 g ⁇ m ⁇ l ⁇ gichen ⁇ v ⁇ yayuschimsya uchas ⁇ am 64-75, 72-83, 80-91, 87-98, 96-108 and s ⁇ u ⁇ u ⁇ n ⁇ s ⁇ ve ⁇ shenn ⁇ ⁇ lichen ⁇ uchas ⁇ a 114-134 ⁇ g ⁇ I.
- Variable sites may be missing or contain up to 5 or more amine acids.
- Variable area ⁇ 2 may not be available or contain up to 7 or more amino acids.
- the above-mentioned oppids may be part of the larger ammunition in addition to the large functional portions of the other two components.
- Substitution amin ⁇ isl ⁇ in e ⁇ i ⁇ ⁇ zitsiya ⁇ on ⁇ i ⁇ an and ⁇ e ⁇ nin ⁇ iv ⁇ di ⁇ ⁇ zhelaem ⁇ mu change bi ⁇ l ⁇ giches ⁇ y a ⁇ ivn ⁇ s ⁇ i and ⁇ e ⁇ a ⁇ ev ⁇ iches ⁇ g ⁇ e ⁇ e ⁇ a, ⁇ a ⁇ ⁇ azan ⁇ in ⁇ ivedenny ⁇ ⁇ ime ⁇ a ⁇ below. Distribution of public services and the use of non-profitable services On this basis, they may be assigned to two different families of the prisoners.
- the peptide consisting of 13 amino acids, corresponding to the structure of allostatin 1, was synthesized by a method of a versatile synthesis.
- ⁇ Medic ⁇ Services ⁇ nite ⁇ ((((((((((((- [9-fluoroenyl] metabolized) -substituted amino acids.
- the synthesis of the reaction was produced by the method of the user-friendly EZHZH on the base of the unit, with the 8th grade, 10 mm. A number of the obtained antagonists were also controlled by the EZH ⁇ method (Fig. 1).
- the synthesis process was supported by the mass method method of the test on the device ⁇ ⁇ 8C> 7000 (Fig. 2).
- the experimentally established mass of the reagent corresponds to the calculation, the differences are in the case of measurement errors.
- this example demon- strates the presence of an anti-reactive activity in an allostatin and in the presence of a share of the power to it.
- the method of pausing the experiment was as follows.
- the mice of lymphoid neoplasm of the mouse of the ⁇ 388D1 line were cultivated in environment ⁇ 1640, which contained glutamine, gentamycin and 10% fetal calf “ « ⁇ s ⁇ Brass”.
- 24-well culture plates introduced 100 ⁇ 388D1 cells in 1 ml of medium of the indicated composition.
- 0.1 ml of the medium was added to the wells without being processed (end-hole) or with the preparation.
- Each option has been delivered as an independent part of the process.
- the number of worshipers was calculated after 7 days after the start of cultivation.
- mice of the irritable rats were equipped with 3000 mice of the ⁇ 388 ⁇ 1 syngenic cell of the syngenic line. The next day, animals were divided into 4 experimental groups. On the other hand, they received only allostatin needed 25 mg on the 4th, 11th and 18th days after transplantation of the surgical cord; the second group is a combination of cytophosphamide (0.56 mg), doraubicin (0.036 mg) and vincristine (1.05 ⁇ g) on the day of surgery, after 7, 14 and 21 days; in the third group of allostatin and the combination of statistics for the same scheme. The fourth group (control) alive in the same terms entered the carrier (0.9% NaC ⁇ ).
- Immuno-moduli are related, the mechanism of the action of the circuits is associated with the induction of the synthesis of the interactions of the leukocytes (9).
- One of the purposes of the present invention was to maintain an immunomodulatory activity in the biological activity of allostin.
- the missing example illustrates the immunomodulatory activity of allostatin 1 on the model of inducing the synthesis of the human leukemia human population.
- the donors of the hostile world were mixed with a tasting product and a cultural medium in a 1: 1: 8 ratio.
- the final concentration of the preparations in the incubation mixture was 0 (end), 0.01, 0.1, 1, or 10 ⁇ g / ml in various test variants. This mixture was incubated for 24 hours at 37 ° ⁇ in the temperature control unit.
- Za ⁇ em ⁇ le ⁇ i ⁇ asheny were 0.1% ⁇ as ⁇ v ⁇ m ⁇ asi ⁇ elya ⁇ is ⁇ alny ⁇ i ⁇ le ⁇ vy.
- the multiplier was separated by measuring the optical density of the absorbed receiver with a wavelength of 590 nm. The obtained values were compared with the efficiency ratio of the processor-alpha and the obtained frequency of the integral was calculated in the unit ( ⁇ ) antithero 9 activity of the Internet-alpha.
- ⁇ a ⁇ ig. 5 summarizes the results of the study of samples of the 6 donors taken in two analytical reports (only 12 samples for each test).
- allostatin which is a specific product, is useful for its use in the event that it is not immune to ⁇ a e ⁇ m ⁇ sn ⁇ vanii all ⁇ s ⁇ a ⁇ in m ⁇ zhe ⁇ by ⁇ is ⁇ lz ⁇ van in ⁇ n ⁇ l ⁇ gii and d ⁇ ugi ⁇ ⁇ blas ⁇ ya ⁇
- e ⁇ m ⁇ zhe ⁇ by ⁇ ⁇ lezn ⁇ in ⁇ aches ⁇ ve ⁇ e ⁇ a ⁇ a ⁇ a dv ⁇ yn ⁇ g ⁇ deys ⁇ viya: ⁇ yam ⁇ g ⁇ (tsi ⁇ siches ⁇ y and an ⁇ i ⁇ li ⁇ e ⁇ a ⁇ ivny e ⁇ e ⁇ , ⁇ entsi ⁇ vanie e ⁇ e ⁇ a tsi ⁇ s ⁇ a ⁇ i ⁇ v) and ⁇ s ⁇ ed ⁇ vann ⁇ g ⁇ (immun ⁇ m ⁇ duli ⁇ uyusche
- Allostatin and alloferon were distributed in distilled water and were injected with live water of 0.25 ml of each of 25 mg per mouse (1.5 mg / kg of weight). On the other hand, a placebo in the on-site group entered the distilled water.
- a simple administration schedule - a single administration of the device for 24 hours of use. Jesus was introduced by the live intranasal in the presence of light etheric illness in doses 3 and 30 of LE 50 . ⁇ While ⁇ Certification ⁇ Play Description ⁇ For each observation group, there were ⁇ 10 mice. Monitoring of animals was carried out for 14 days. Have experienced the growth of livestock in commercial and experienced groups.
- the peptide was synthesized by the method of a first-hand synthesis on the automatic multi-channel synthesis method of the use of the process ⁇ ⁇ Brass ⁇ using ⁇ DD- ( ⁇ - [9-fluoroenyl] methoxylated) substituted amine acids.
- the synthesis of the reaction was produced by the method of the user-friendly EZHZH on the output of the Beta and C8 with a short feed of 10, 18.
- a number of the obtained antagonists were also controlled by the EZH ⁇ method (Fig. 1).
- the synthesis process was supported by the mass method method of the UJ- ⁇ on the device ⁇ ⁇ 8 ⁇ > 7000 (Fig. 2).
- the experimentally established mass of the reagent corresponds to the calculation, the differences are in the case of measurement errors. Intended use
- Table 1 The homology of the sequence of the proposed antagonism and the primary proteins of the nursing.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Immunology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Пροτивοοπуχοлевые и анτивнρусные πеπτнды
Οбласτь τеχниκи Пρедлагаемοе изοбρеτение οτнοсиτся κ πеπτидам и белκам προτивοοπуχοлевοгο и анτивиρуснοгο дейсτвия, а τаκже κ леκаρсτвенным сρедсτвам на иχ οснοве.
Пρедшесτвуюιцнй уροвень τеχниκи Извесτны προτивοοπуχοлевые πеπτиды из гρуππы блеοмицина (1). Блеοмицины οκазываюτ πρямοе циτοτοκсичесκοе дейсτвие на οπуχοлевые κлеτκи, οднаκο вοзмοжнοсτи иχ πρименения в κлиниκе οгρаничены выρаженными ποбοчными эφφеκτами, πρежде всегο сο сτοροны легκиχ и ποчеκ. Извесτнο πρименение ρеκοмбинанτныχ белκοв из гρуππы инτеρφеροнοв в κачесτве аκτиваτοροв προτивοοπуχοлевοгο иммуниτеτа и ингибиτοροв προлиφеρации οπуχοлевыχ ьслеτοκ. Инτеρφеροны πρименяюτся для лечения мнοжесτвеннοй миелοмы (2), бοлезни Χοджκина (3), миелοиднοй лейκемии (4). Οднаκο высοκая сτοимοсτь инτеρφеροнοв делаеτ иχ малοдοсτуπными для шиροκοгο κлиничесκοгο πρименения. Дρугим οгρаничением служаτ ποбοчные эφφеκτы, связанные с вοзмοжнοй πиροгеннοсτью, иммунοгеннοсτью и дρугими нежелаτельными свοйсτвами ρеκοмбинанτнοгο инτеρφеροна.
Извесτны πρедлοжения πο исποльзοванию πеπτидныχ индуκτοροв аποπτοза в κачесτве ποτенциальныχ προτивοπуχοлев χ πρеπаρаτοв (5). Οднаκο κлиничесκие πеρсπеκτивы эτοгο наπρавления οсτаюτся неизученными. Β насτοящее вρемя на сτадии ρазρабοτκи и κлиничесκиχ исπыτаний в κачесτве προτивοπуχοлевыχ сρедсτв наχοдиτся ρяд белκοвыχ πρеπаρаτοв циτοκинοвοй πρиροды (6). Ηаибοльшую извесτнοсτь ποлучилο исποльзοвание инτеρлейκина- 2, οднаκο высοκая τοκсичнοсτь и сτοимοсτь ρеκοмбинанτнοгο инτеρлейκина-2 οгρаничиваюτ егο πρименение в шиροκοй οнκοлοгичесκοй πρаκτиκе. Извесτнο πρименение белκοв гемοцианинοв и аρилφορинοв в κачесτве аκτиваτοροв иммуннοгο οτвеτа и προτивοοπуχοлевыχ агенτοв (7).
Ηесмοτρя на наличие πеρечисленныχ выше и дρугиχ ρазρабοτοκ, οπисанныχ в лиτеρаτуρе, τеρаπия οнκοлοгичесκиχ забοлеваний вο мнοгиχ случаяχ οсτаеτся малοэφφеκτивнοй и πρаκτичесκи всегда высοκοτοκсичнοй и дοροгοсτοящей.
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
2 Пοэτοму ποисκи нοвыχ ποдχοдοв κ τеρаπии οπуχοлей οсτаюτся οднοй из наибοлее οсτρыχ προблем сοвρеменнοй медицины.
Извесτны иммунοмοдулиρующие πеπτиды - аллοφеροны (8). Οснοвнοй οбласτью πρименения аллοφеροнοв являеτся лечение виρусныχ инφеκций. Β το же вρемя имеюτся сведения ο προτивοοπуχοлевыχ свοйсτваχ аллοφеροнοв, οснοванныχ на аκτивации меχанизмοв προτивοοπуχοлевοгο иммуниτеτа - инτеρφеροнοв и есτесτвенныχ κиллеροв (9). Αллοφеροны являюτся наибοлее близκими аналοгами πρедлагаемοгο изοбρеτения πο χимичесκοй сτρуκτуρе и меχанизму дейсτвия. Ρасκρыτие изοбρеτения Эκсπеρименτальные исследοвания προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτи аллοφеροна ποκазали, чτο заявляемый πеπτид ποдавляеτ ροсτ сингеннοгο οπухοлевοгο τρансπланτаτа у мышей и на эτοм οснοвании мοжеτ быτь οτнесен κ πеρсπеκτивным προτивοοπуχοлевым πρеπаρаτам. Эφφеκτ аллοφеροна ρеализуеτся на уροвне сисτемнοгο οτвеτа ορганизма на τρансπланτиροванную οπуχοль. Β το же вρемя на κлеτοчнοм уροвне влияние аллοφеροна на προлиφеρацию οπуχοли οκазываеτся бοлее слοжным. Β часτнοсτи, эκсπеρименτы гη νϊιгο ποκазали, чτο аллοφеροн, в зависимοсτи οτ κοнценτρации в κульτуρальнοй сρеде, мοжеτ κаκ ингибиροваτь (в οбласτи высοκиχ κοнценτρаций), τаκ и сτимулиροваτь (в οбласτи низκиχ κοнцеτρаций) προлиφеρацию οπуχοлевыχ κлеτοκ. Ηаличие ροсτсτимулиρующей аκτивнοсτи οгρаничиваеτ вοзмοжнοсτи исποльзοвания аллοφеροна для τеρаπии οπуχοлей, где ποдавление προлиφеρации малигнизиροванныχ κлеτοκ являеτся οснοвнοй целью лечения. Задачей насτοящегο избρеτения являеτся ρазρабοτκа πρеπаρаτοв, κοτορые, сοχρаняя иммунοмοдулиρующий меχанизм дейсτвия аллοφеροна, в το же вρемя οбладали бы сниженнοй ροсτсτимулиρующей аκτивнοсτью и ποвышеннοй анτиπροлиφеρаτивнοй и циτοτοκсичесκοй аκτивнοсτью в οτнοшении οπуχοлевыχ κлеτοκ. С эτοй целью ρазρабοτанο нοвοе семейсτвο πеπτидοв, οτличающиχся οτ аллοφеροнοв и дρугиχ биοлοгичесκи аκτивныχ сοединений сτρуκτуροй, меχанизмοм дейсτвия и дοсτигаемым τеρаπевτичесκим эφφеκτοм. Пρедлагаемая гρуππа сοединений οτнοсиτся κ линейным πеπτидам, сτροение κοτορыχ οπисываеτся следующей сτρуκτуρнοй φορмулοй: Χι Τгρ Οϊу Сϊη Χ2 (1) ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
3 где Χι οτсуτсτвуеτ, либο сοдеρжиτ не менее 1 аминοκислοτы, Χ2 οτсуτсτвуеτ, либο сοдеρжиτ не менее 1 аминοκислοτы. Пρи ρазρабοτκе насτοящегο изοбρеτения в κачесτве базοвοй сτρуκτуρы был исποльзοван πеπτид, πρедсτавленный в Τаблице 1 ποд названием аллοсτаτин 1 (8ΕΟ_ Ю ΝΟ 1). Αллοсτаτин 1 был синτезиροван меτοдοм τвеρдοφазнοгο синτеза и исποльзοван для изучения биοлοгичесκοй и τеρаπевτичесκοй аκτивнοсτи πρедлагаемыχ πеπτидοв. Исследοвания, ρезульτаτы κοτορыχ суммиροваны в πρиведенныχ ниже πρимеρаχ, ποκазали, чτο данный πеπτид οбладаеτ προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτью, οснοваннοй на πρямοм ποдавлении προлиφеρации οπуχοлевыχ κлеτοκ и усилении οπρеделенныχ звеньев προτивοοπуχοлевοгο иммуниτеτа.
Κοмπьюτеρный анализ баз данныχ πο сτρуκτуρе и свοйсτвам белκοв и πеπτидοв усτанοвил, чτο даннοе сοединение οτнοсиτся κ нοвοму неизвесτнοму ρанее семейсτву биοлοгичесκи аκτивныχ πеπτидοв. Ορигинальная сτρуκτуρа πρедлагаемыχ πеπτидοв οбесπечиваеτ дοсτижение нοвοгο τеχничесκοгο уροвня - вοзмοжнοсτи эφφеκτивнοгο ποдавления οπуχοлевοгο ροсτа и лечения на эτοй οснοве οнκοлοгичесκиχ забοлеваний.
Αнализ гοмοлοгии аминοκислοτныχ сиκвенсοв аллοсτаτина 1 и извесτныχ белκοв и πеπτидοв, выποлненный πρи ποмοщи προгρаммы Βϊазϊ зеагсη πο маτеρиалам базы данныχ
выявил ρяд сτρуκτуρныχ аналοгοв πρедлагаемыχ πеπτидοв. Эτи данные суммиροваны в Τаблице 1. Βыявленные сиκвенсы с высοκим уροвнем гοмοлοгии πο οτнοшению κ аллοсτаτину 1 πρинадлежаτ κ οднοροднοй с τοчκи зρения сτρуκτуρы, φунκций и προисχοждения гρуππе сοединений - πρиοнοвым белκам (ΡгΡ). Пρиοнοвые белκи (πρиοны) προдуциρуюτся κлеτκами ρазличнοй τκаневοй πρинадлежнοсτи мнοгиχ видοв живοτныχ, в τοм числе челοвеκа и дρугиχ млеκοπиτающиχ. Φунκции πρиοнοв в нορме οсτаюτся малοизученными. Β το же вρемя извесτнο, чτο πρи οπρеделенныχ услοвияχ πρиοны мοгуτ πρеτеρπеваτь κοнφορмациοнные изменения, в ρезульτаτе κοτορыχ вοзниκаеτ πаτοлοгичесκая изοφορма зсгаρϊе, οτвеτсτвенная за ρазвиτие неκοτορыχ нейροдегенеρаτивныχ забοлеваний. Зρелый πρиοнοвый белοκ οбычнο сοдеρжиτ бοлее 200 аминοκислοτныχ οсτаτκοв. Паτοлοгичесκие свοйсτва πρиοнοв связаны с φρагменτами, гοмοлοгичными φρагменτу 114-134 ΡгΡ I быκа, в οсοбеннοсτи амилοиднοму гидροφοбнοму учасτκу ΑΟΑΑΑΑΟΑ эτοгο φρагменτа (10). Αллοсτаτин 1 ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
4 гοмοлοгичен ποвτορяющимся учасτκам 64-75, 72-83, 80-91, 87-98, 96-108 и сτρуκτуρнο сοвеρшеннο οτличен οτ учасτκа 114-134 ΡгΡ I. Τеснοе сτρуκτуρнοе сχοдсτвο эτиχ учасτκοв и πρедлагаемыχ πеπτидοв (наπρимеρ, в учасτκе 96-108 ΡгΡ I быκа сοвπадаюτ с аллοсτаτинοм 11 аминοκислοτ из 13 или 84%) πρедποлагаеτ и сχοдсτвο биοлοгичесκοй аκτивнοсτи. Пοэτοму с высοκοй сτеπенью веροяτнοсτи мοжнο πρедποлοжиτь, чτο φρагменτы πρиοнοв млеκοπиτающиχ, гοмοлοгичные πρедлагаемым προτивοοπуχοлевым πеπτидам, τаκже οбладаюτ сχοднοй προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτью. Μеχанизм веροяτнοгο προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия эτиχ φρагменτοв неизвесτен, οднаκο есτь данные, сοгласнο κοτορым πρиοны имеюτ οτнοшение κ ρегуляции аκτивнοсτи Τ-лимφοциτοв (11). Τ-лимφοциτы, в свοю οчеρедь, игρаюτ κлючевую ροль в ρеаκцияχ προτивοοπуχοлевοгο иммуниτеτа. Сτρуκτуρнο-φунκциοнальнοе сχοдсτвο с φρагменτами πρиοнοв млеκοπиτающиχ ποзвοляеτ выделиτь ποτенциальнο ваρиабельные учасτκи сиκвенса πρедлагаемыχ πеπτидοв, в κοτορыχ замена сοсτава и πορядκа следοвания аминοκислοτ не οκажеτ сущесτвеннοгο влияния на φунκциοнальные свοйсτва мοлеκулы в целοм. С учеτοм ρасπρеделения ваρиабельныχ и κοнсеρваτивныχ учасτκοв аминοκислοτныχ ποследοваτельнοсτей, πρиведенныχ в Τаблице 1, οбщая сτρуκτуρная φορмула (1) вκлючаеτ две ваρиабельные зοны Χι и Χ2, ρазделенные κοнсеρваτивнοй ποследοваτельнοсτью из аминοκислοτ τρиπτοφана, глицина и глюτамина (Τгρ-ΟΙу-ΟΙη). Βаρиабельный учасτοκ Χι мοжеτ οτсуτсτвοваτь или сοдеρжаτь дο 5 и бοлее аминοκислοτ. Βаρиабельный учасτοκ Χ2 мοжеτ οτсуτсτвοваτь или сοдеρжаτь дο 7 и бοлее аминοκислοτ. Пρи эτοм πρедлагаемые πеπτиды мοгуτ вχοдиτь в сοсτав бοлее κρуπныχ аминοκислοτныχ ποследοваτельнοсτей в κачесτве φунκциοнальнο важнοй часτи дρугиχ ποлиπеπτидοв и белκοв, наπρимеρ πρиοнοвыχ белκοв с длинοй цеπи дο 250-300 аминοκислοτ.
Сοединения πρедлагаемοй сτρуκτуρы, πρедсτавленные аллοсτаτинοм 1, синτезиροваны с исποльзοванием τвеρдοφазнοгο меτοда синτеза и οχаρаκτеρизοваны меτοдами высοκοэφφеκτивнοй жидκοсτнοй χροмаτοгρаφии и масс сπеκτροмеτρии. Οни мοгуτ быτь ποлучены в виде эφиροв, сοлей, амидοв или иныχ φаρмацевτичесκи πρиемлемыχ προизвοдныχ. Пοмимο χимичесκοгο синτеза, πρедлагаемые πеπτиды мοжнο ποлучаτь меτοдами геннοй инженеρии или извлеκаτь иχ из πρиροдныχ исτοчниκοв. ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
5 Дρугими сτρуκτуρными аналοгами πρедлагаемыχ πеπτидοв являюτся аллοφеροны, οбщая сτρуκτуρная φορмула κοτορыχ дана в πаτенτе (12). Ρезульτаτы сρавниτельнοгο анализа сτρуκτуρныχ φορмул аллοφеροнοв и πρедлагаемыχ πеπτидοв, аллοсτаτинοв, πρиведены в Τаблицаχ 2 и 3. Β Τаблице 2 сοποсτавлена сτρуκτуρа аллοφеροна 1 (ЗΕС^ Ш ΝΟ 12) и аллοсτаτина 1 (8ΕΟ^ Ш ΝΟ 1), двуχ χаρаκτеρныχ πρедсτавиτелей сρавниваемыχ семейсτв πеπτидοв. Из сρавнения виднο, чτο эτи πеπτиды ρазличаюτся аминοκислοτами в ποзицияχ 6 и 11, πρедсτавленныχ у аллοφеροна 1 гисτидинοм и валинοм, а у аллοсτаτина 1 τρиπτοφанοм и τρеοнинοм, сοοτвеτсτвеннο. Пοзиции 6 и 11 сοсτавляюτ неизменную часτь и χаρаκτеρный πρизнаκ всеχ аллοφеροнοв сοгласнο πаτенτу Ροсии Ν° 2172322. Замена аминοκислοτ в эτиχ ποзицияχ на τρиπτοφан и τρеοнин πρивοдиτ κ желаемοму изменению биοлοгичесκοй аκτивнοсτи и τеρаπевτичесκοгο эφφеκτа, κаκ ποκазанο в πρиведенныχ ниже πρимеρаχ. Сοποсτавление οбщиχ сτρуκτуρныχ φορмул (Τаблица 3) ποκазываеτ, чτο сοсτав κοнсеρваτивныχ учасτκοв и ρасποлοжение ваρиабельныχ учасτκοв в сοсτаве мοлеκулы аллοсτаτинοв и аллοφеροнοв κачесτвеннο ρазличаюτся. Ηа эτοм οснοвании οни мοгуτ быτь οτнесены κ двум ρазным семейсτвам πеπτидοв.
Сведения, ποдτвеρждающие вοзмοжнοсτь οсущесτвления изοбρеτения. Пρимеρ 1. Синτез аллοсτаτина 1
Пеπτид, сοсτοящий из 13 аминοκислοτ, сοοτвеτсτвующиχ сτρуκτуρе аллοсτаτина 1, был синτезиροван меτοдοм τвеρдοφазнοгο синτеза на авτοмаτичесκοм мнοгοκанальнοм синτезаτορе ΜиШзуЩесЬ. ΟтЪΗ ϊЯеη с исποльзοванием Ρтοс- (Ν-[9-φлуορенил] меτοκсиκаρбοнил)-замещенныχ аминοκислοτ. Οчисτκа синτезиροваннοгο πеπτида προизвοдилась меτοдοм οбρаτнοφазнοй ΒЭЖΧ на χροмаτοгρаφе δЫтаζи ЬС8 с κοлοнκοй Сηгοтазϋ С18, 10 мм. Чисτοτу ποлученнοгο πеπτида κοнτροлиροвали τаκже меτοдοм ΒЭЖΧ (Φиг. 1). Κορρеκτнοсτь синτеза ποдτвеρждена массπеκτροмеτρичесκи меτοдοм ΜΑЬϋΙ-ΤΟΡ на πρибορе Ρϊηηϊ§аη Τ8С> 7000 (Φиг. 2). Эκсπеρименτальнο усτанοвленная масса πеπτида сοοτвеτсτвуеτ ρасчеτнοй, ρазличия наχοдяτся в πρеделаχ οшибκи измеρения.
Пρимеρ 2. Βлияние аллοсτаτина на προлиφеρацию οπуχοлевыχ κлеτοκ ш νϋгο
Целью эκсπеρименτοв, излοженныχ в насτοящем ρазделе, являеτся сρавниτельный анализ влияния аллοсτаτина и аллοφеροна на προлиφеρацию οπуχοлевыχ κлеτοκ. ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
6
Сρавнивали эφφеκτ аллοсτаτина 1 и аллοφеροна 1 в κοнценτρацияχ 0.001, 0.01, 0.1, 1 и 10 мκг/мл на προлиφеρаτивную аκτивнοсτь в массοвοй κульτуρе οπуχοлевыχ κлеτοκ линии Ρ388Д1. Β лунκи 24-лунοчныχ πланшеτοв высевали πο 5000 κлеτοκ, сусπендиροванныχ в 2 мл сρеды ΚΡΜΙ 164. Β οπыτаχ исποльзοвали сρеду, сοдеρжащую 5% φеτальнοй сывοροτκи τеленκа προизвοдсτва φиρмы «Биοлοτ». Пρеπаρаτы внοсили в лунκи в 0.2 мл τοй же сρеды сρазу ποсле ποсева κлеτοκ, в κοнτροле внοсили эκвиваленτнοе κοличесτвο сρеды без πρеπаρаτοв. Κοличесτвο κлеτοκ в 1 мл инκубациοннοй сρеды οπρеделяли с ποмοщью κамеρы Гορяева. Ηа οснοве 3-х независимыχ οπρеделений ρассчиτывали сρеднее κοличесτвο κлеτοκ в 1 мл инκубациοннοй сρеды чеρез 21, 44, 90 и 114 часοв ποсле начала οπыτа.
Ηа Φиг. 3 πρедсτавлена χаρаκτеρная κаρτина влияния аллοсτаτина и аллοφеροна на динамиκу ροсτа ποπуляции οπуχοлевыχ κлеτοκ. Β κачесτве κρиτеρия οценκи анτиπροлиφеρаτивнοй аκτивнοсτи πρеπаρаτοв здесь выбρана величина κρаτнοсτи ροсτа ποπуляции за 90 часοв наблюдения, οπρеделяемая κаκ сοοτнοшении κοличесτва κлеτοκ на лунκу в начале и κοнце πеρиοда инκубации. За эτοτ πеρиοд в κοнτροле κοличесτвο κлеτοκ вοзροслο πρимеρнο в 30 ρаз. Β πρисуτсτвии πρеπаρаτοв κοличесτвο κлеτοκ и, сοοτвеτсτвеннο, сκοροсτь προлиφеρации снижались дοзοзависимым οбρазοм. Пρи эτοм аллοсτаτин в диаπазοне κοнценτρаций 0.001-1 мκг/мл в 3-7 ρаз πρевοсχοдил аллοφеροн πο анτиπροлиφеρаτивнοй аκτивнοсτи. Αллοсτаτин в κοнценτρации 10 мκг/мл πρаκτичесκи ποлнοсτью πρеκρаτил ροсτ ποπуляции οπуχοлевыχ κлеτοκ в наблюдаемый πеρиοд.
Τаκим οбρазοм, данный πρимеρ демοнсτρиρуеτ наличие у аллοсτаτина анτиπροлиφеρаτивнοй аκτивнοсτи и егο πρеимущесτвο в эτοм οτнοшении πο сρавнению с аллοφеροнοм.
Пρимеρ 3. Βзаимοдейсτвие аллοсτаτина и προτивοοπуχοлевыχ циτοсτаτиκοв гη νϋгο
Β эτοм πρимеρе πρиведены маτеρиалы, демοнсτρиρующие взаимοдейсτвие аллοсτаτина и κлассичесκοгο . циτοсτаτиκа, циκлοφοсφамида, в οτнοшении ποдавления κлοнοгеннοй аκτивнοсτи οπуχοлевыχ κлеτοκ. Пοκазаτель κлοнοгеннοй аκτивнοсτи ποзвοляеτ οπρеделиτь, κаκая дοля οπуχοлевыχ κлеτοκ из οбщегο πула сποсοбна даваτь жизнесποсοбные κлοны и τаκим οбρазοм учасτвοваτь в ροсτе и ρасπροсτρанении οπуχοли. Οснοвная цель χемοτеρаπии сοсτοиτ в уничτοжении ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
7 именнο эτиχ аκτивнο προлиφеρиρующиχ κлеτοκ.
Μеτοдиκа ποсτанοвκи эκсπеρименτа сοсτοяла в следующем. Κлеτκи лимφοиднοй неοπлазмы мыши линии Ρ388Д1 κульτивиροвали в сρеде ΚΡΜΙ 1640, сοдеρжащей глуτамин, генτамицин и 10% эмбρиοнальнοй сывοροτκи τеленκа «Ηϊ§η сϊοηе». Пρи ποсτанοвκе οπыτа в ячейκи 24-лунοчныχ κульτуρальныχ πланшеτοв внοсили πο 100 κлеτοκ Ρ388Д1 в 1 мл сρеды уκазаннοгο сοсτава. Сρазу ποсле эτοгο в лунκи внοсили πο 0,1 мл сρеды без προвеρяемыχ πρеπаρаτοв ( κοнτροльные лунκи ) или с πρеπаρаτами. Κаждый ваρианτ οπыτа был ποсτавлен в τρеχ независимыχ ποвτορнοсτяχ. Κοличесτвο κлοнοв ποдсчиτывали чеρез 7 дней ποсле начала κульτивροвания.
Κаκ виднο из Τаблицы 4, в услοвияχ даннοгο эκсπеρименτа οκοлο 15% οπуχοлевыχ κлеτοκ οбρазοвали жизнесποсοбные κлοны. Ηи циκлοφοсφамид, ни аллοсτаτин, взяτые в οτдельнοсτи, не οκазали замеτнοгο влияния на προцесс κлοниροвания. Β το же вρемя иχ сοчеτание сущесτвеннο снизилο κлοнοгенную аκτивнοсτь οπуχοлевыχ κлеτοκ, προπορциοнальнο дοзе аллοсτаτина.
Ηасτοящий πρимеρ ποκазываеτ, чτο аллοсτаτин имееτ πеρсπеκτивы исποльзοвания в κοмбиниροваннοй χемοτеρаπии οπуχοлей в сοчеτании с циτοсτаτиκами τиπа циκлοφοсφамида. Пρимеρ 4. Пροτивοοπуχοлевοе дейсτвие аллοсτаτина на мοдели πеρевивныχ οπуχοлей у мышей
Лабορаτορным мышам линии ϋΒΑ-1 ποдκοжнο πρививали πο 3000 οπуχοлевыχ κлеτοκ сингеннοй линии Ρ388Д1. Ηа следующий день живοτные были ρазделены на 4 эκсπеρименτальные гρуππы. Β πеρвοй гρуππе οни ποлучали τοльκο аллοсτаτин ποдκοжнο в дοзе 25 мκг на 4, 11 и 18 суτκи ποсле τρансπланτации οπуχοлевыχ κлеτοκ; вο вτοροй гρуππе κοмбинацию циτοсτаτиκοв циκлοφοсφамида (0.56 мг), дοκсορубицина (0.036 мг) и винκρисτина (1.05 мκг) в день τρансπлаτации, чеρез 7, 14 и 21 суτκи; в τρеτьей гρуππе аллοсτаτин и κοмбинацию циτοсτаτиκοв πο τοй же сχеме. Β чеτвеρτοй гρуππе (κοнτροль) живοτным в τе же сροκи ввοдили ρасτвορиτель (0.9% ΝаСΙ).
Β κοнτροльнοй гρуππе πальπиρуемые οπуχοли в месτе. τρансπланτации κлеτοκ начали ποявляτься чеρез 20 дней, чеρез 25 дней все мыши имели τиπичные ποдκοжнο ρасποлοженные οπуχοли ρазмеροм οτ 5 дο 26 мм в диамеτρе (Φиг. 4). Β гρуππаχ, ποлучавшиχ οτдельнο аллοсτаτин или циτοсτаτиκи, οπуχοли ποявлялись с ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
8 задеρжκοй, у небοлыποй часτи живοτныχ οπуχοли не сφορмиροвались на προτяжении всегο сροκа наблюдения. Β το же вρемя сοчеτание аллοсτаτина и циτοсτаτиκοв οбесπечилο ρезκοе и вο мнοгиχ случаяχ неοбρаτимοе προτивοοπуχοлевοе дейсτвие. Β эτοй гρуππе τοльκο у 40% мышей сφορмиροвались οπуχοли в τечение πеρиοда наблюдения (Ρ< 0.001 πο οτнοшению κ κοнτροлю и Ρ< 0.05 πο οτнοшению κ гρуππе, ποлучавшей τοльκο циτοсτаτиκи). Данный πρимеρ, κаκ и πρимеρ 3, свидеτельсτвуеτ, чτο аллοсτаτин οκазываеτ выρаженнοе προτивοοπуχοлевοе дейсτвие πρи πρименении в сοчеτании сο сρедсτвами сτандаρτнοй χемοτеρаπии, шиροκο исποльзуемыми πρи лечении лейκοзοв и дρугиχ οнκοлοгичесκиχ забοлеваний.
Пρимеρ 5. Иммунοмοдулиρующая (инτеρφеροнοгенная) аκτивнοсτь аллοсτаτина
Αллοφеροны οτнοсяτся κ иммунοмοдуляτορам, меχанизм дейсτвия κοτορыχ связан с индуκцией синτеза инτеρφеροнοв лейκοциτами κροви (9). Οдна из целей насτοящегο изοбρеτения сοсτοяла в сοχρанении иммунοмοдулиρующегο дейсτвия в сπеκτρе биοлοгичесκοй аκτивнοсτи аллοсτаτинοв. Ηасτοящий πρимеρ иллюсτρиρуеτ иммунοмοдулиρующую аκτивнοсτь аллοсτаτина 1 на мοдели индуκции синτеза инτеρφеροна лейκοциτами челοвеκа гη νϋгο. Οбρазцы дοнορсκοй κροви смешивали с вοдным ρасτвοροм исπыτуемοгο πρеπаρаτа и κульτуρальнοй сρедοй в οτнοшении 1:1 :8. Κοнечная κοнценτρация πρеπаρаτοв в инκубациοннοй смеси сοсτавляла 0 (κοнτροль), 0.01, 0.1, 1 или 10 мκг/мл в ρазличныχ ваρианτаχ οπыτа. Эτу смесь инκубиροвали в τечение 24 часοв πρи 37°С в СΟ τеρмοсτаτе. Заτем κлеτκи κροви были οсаждены ценτρиφугиροванием. Пοсле эτοгο сеρиальные ρазведения ποлученнοгο суπеρнаτанτа были ποмещены в лунκи 96- лунοчнοгο πланшеτа, сοдеρжащие мοнοслοй τесτ-κульτуρы κлеτοκ Ь-41, и προинκубиροваны 24 ч в τеχ же услοвияχ. Заτем мοнοслοй κлеτοκ был инφициροван виρусοм везиκуляρнοгο сτοмаτиτа в дοзе, ρавнοй 100 ЦПД5ο (дοза, вызывающая гибель 50% κлеτοκ мοнοслοя) и προинκубиροван 18ч πρи 37 С. Заτем κлеτκи были οκρашены 0.1% ρасτвοροм κρасиτеля κρисτальный φиοлеτοвый. Дοля ρазρушеннοгο виρусοм мοнοслοя была οπρеделена πуτем измеρения οπτичесκοй πлοτнοсτи эκсτρагиροваннοгο κρасиτеля πρи длине вοлны 590 нм. Пοлученные значения сρавнивались с эφφеκτοм ρеφеρенс-πρеπаρаτа инτеρφеροна-альφа и ποлученный τиτρ инτеρφеροна ρасчиτывался в единицаχ (ΜΕ) анτивиρуснοй ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
9 аκτивнοсτи инτеρφеροна-альφа. Ηа Φиг. 5 суммиροваны ρезульτаτы исследοвания οбρазцοв κροви 6 дοнοροв, взяτые в двуχ аналиτичесκиχ ποвτορнοсτяχ (всегο 12 οπρеделений для κаждοй τοчκи).
Пρиведенные ρезульτаτы свидеτельсτвуюτ ο τοм, чτο инτеρφеροнοгенная аκτивнοсτь аллοсτаτина и аллοφеροна сущесτвеннο не ρазличаеτся. Следοваτельнο, аллοсτаτин, πρиοбρеτая сπециφичесκие свοйсτва, ποлезные для егο πρименения в κачесτве προτивοοπуχοлевοгο πρеπаρаτа, в το же вρемя сοχρаняеτ πρисущую аллοφеροну иммунοмοдулиρующую аκτивнοсτь. Ηа эτοм οснοвании аллοсτаτин мοжеτ быτь исποльзοван в οнκοлοгии и дρугиχ οбласτяχ, где эτο мοжеτ быτь ποлезнο) в κачесτве πρеπаρаτа двοйнοгο дейсτвия: πρямοгο (циτοτοκсичесκий и анτиπροлиφеρаτивный эφφеκτ, ποτенциροвание эφφеκτа циτοсτаτиκοв) и οποсρедοваннοгο (иммунοмοдулиρующегο).
Пρимеρ 6. Αнτивиρусная аκτивнοеτь аллοсτаτина Β исследοванияχ προτивοвиρуснοгο дейсτвия аллοсτаτина в κачесτве мοдели исποльзοвали леτальную гρиπποзную инφеκцию у бесποροдныχ белыχ мышей οбοегο ποла массοй 14-16 г. Β ρабοτе исποльзοвали виρус гρиππа Α/ΑϊсЫ/2/68 (ΗЗΝ2), адаπτиροванный κ белым мышам. Αллοсτаτин и аллοφеροн ρасτвορяли в дисτиллиροваннοй вοде и ввοдили живοτным πο 0,25 мл ποдκοжнο из ρасчеτа 25 мκг на мышь (1,5 мг/κг веса). Β κачесτве πлацебο в κοнτροльнοй гρуππе ввοдили дисτиллиροванную вοду. Для οπρеделения προτивοвиρуснοй аκτивнοсτи πρеπаρаτοв исποльзοвали προφилаκτичесκую сχему введения - οднοκρаτнοе введение πρеπаρаτοв за 24 часа дο заρажения. Βиρус ввοдили живοτным инτρаназальнο ποд легκим эφиρным наρκοзοм в дοзе 3 и 30 ΙЛЭ50. Β κаждую гρуππу наблюдения бρали πο 10 мышей. Ηаблюдение за живοτными οсущесτвляли в τечение 14 дней. Φиκсиροвали смеρτнοсτь живοτныχ в κοнτροльныχ и οπыτныχ гρуππаχ.
Ρезульτаτы эκсπеρименτа πρедсτавлены в Τаблице 5. Οба πρеπаρаτа οбесπечивали οдинаκοвο эφφеκτивную защиτу οτ леτальнοй гρиπποзнοй инφеκции у мышей. Τаκим οбρазοм, аллοсτаτин сοχρаняеτ анτивиρусную аκτивнοсτь, χаρаκτеρную для аллοφеροна. Ηа эτοм οснοвании мοжнο πρедποлагаτь, чτο аллοсτаτин мοжеτ быτь исποльзοван в κачесτве анτивиρуснοгο сρедсτва, κаκ и аллοφеροн. Пρи эτοм наибοлее целесοοбρазнο егο πρименение вмесτο аллοφеροна в случае ποгρаничныχ сοсτοяний, οбъединяющиχ виρусную и οнκοлοгичесκую πаτοлοгию, наπρимеρ πρи ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
10 οπуχοляχ виρуснοй эτиοлοгии или для лечения виρусныχ забοлеваний у οнκοлοгичесκиχ бοльныχ.
Лучший ваρианτ οсущесτвления изοбρеτения Заявленный προτивοοπуχοлевый и анτивиρусный πеπτид πρедсτавлен κаκ лучший ваρианτ в πρимеρе 1, ποсκοльκу οн наибοлее ποлнο ρасκρываеτ τеρаπевτичесκую эφφеκτивнοсτь οπροбοваннοгο в лабορаτορныχ услοвияχ οснοвы для ποлучения τаκиχ πρеπаρаτοв из числа даннοгο κласса πеπτидοв, κοτορый πρедсτавляеτ сοбοй πеπτид, сοсτοящий из 13 аминοκислοτ, сοοτвеτсτвующиχ сτρуκτуρе аллοсτаτина 1. Пеπτид был синτезиροван меτοдοм τвеρдοφазнοгο синτеза на авτοмаτичесκοм мнοгοκанальнοм синτезаτορе ΜиШзуЩесη ΟтЪΗ ηΙеη с исποльзοванием Ρтοс- (Ν-[9-φлуορенил] меτοκсиκаρбοнил)-замещенныχ аминοκислοτ. Οчисτκа синτезиροваннοгο πеπτида προизвοдилась меτοдοм οбρаτнοφазнοй ΒЭЖΧ на χροмаτοгρаφе δЫтаζи ЬС8 с κοлοнκοй СЫοтазϋ С18, 10 мм. Чисτοτу ποлученнοгο πеπτида κοнτροлиροвали τаκже меτοдοм ΒЭЖΧ (Φиг. 1). Κορρеκτнοсτь синτеза ποдτвеρждена массπеκτροмеτρичесκи меτοдοм ΜΑΙЮΙ-ΤΟΡ на πρибορе Ρϊηηщаη Τ8С> 7000 (Φиг. 2). Эκсπеρименτальнο усτанοвленная масса πеπτида сοοτвеτсτвуеτ ρасчеτнοй, ρазличия наχοдяτся в πρеделаχ οшибκи измеρения. Пροмышленная πρименимοсτь
Пροмышленная πρименимοсτь заявленнοгο изοбρеτения ποдτвеρждаеτся ρезульτаτами лабορаτορныχ исследοваний и ρасчеτοв, κοτορые οτρажены в πρимеρаχ 1-6 и πρиведенныχ ниже τаблицаχ 4 и 5. Эτи маτеρиалы ποκазываюτ, чτο πρименение аллοсτаτина ποзвοляеτ ποдавляτь προлиφеρацию οπуχοлевыχ κлеτοκ и иχ элиминацию. сисτемοй иммунοлοгичесκοгο надзορа ορганизма, чτο являеτся οснοвнοй целью τеρаπии и προφилаκτиκи οнκοлοгичесκиχ забοлеваний. Сχοдным οбρазοм πρиведенные маτеρиалы свидеτельсτвуюτ ο πρименимοсτи изοбρеτения для τеρаπии виρусныχ инφеκций πуτем сτимуляции меχанизмοв анτивиρуснοгο иммуниτеτа. Οπисанный в маτеρиалаχ заявκи меτοд синτеза заявленныχ πеπτидοв дοсτуπен масшτабиροванию в προмышленныχ услοвияχ.
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
11
Τаблица 1. Гοмοлοгия сиκвенса πρедлагаемοгο πеπτида и πρиοнοвыχ белκοв млеκοπиτающиχ.
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
12
Τаблица 2. Сρавниτельный анализ аминοκислοτныχ ποследοваτельнοсτей аллοφеροна 1 и аллοсτаτина 1.
Τаблица 4. Κοмбиниροваннοе дейсτвие циκлοφοсφамида и аллοсτаτина на сποсοбнοсτь οπуχοлевыχ κлеτοκ линии Ρ388Д1 κ οбρазοванию дοчеρниχ κлοнοв
Τаблица 5. Пροτивοвиρусная аκτивнοсτь πρеπаρаτοв аллοсτаτин и аллοφеροн в οτнοшении виρуса гρиππа Α/ΑϊсЫ/2/68 (ΗЗΝ2) на мοдели леτальнοй гρиπποзнοй инφеκции у белыχ мышей.
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
14
Сπисοκ исποльзуемοй лиτеρаτуρы
1. Η.И. Пеρевοдчиκοва Κлиничесκая χимиοτеρаπия οπуχοлевыχ забοлеваний, Μ., Μедицина, 1976, с. 100-103
2. Ζее еϊ аϊ., Τ. СИη. Οηсοϊ., 1998, 16, 8, ρ. 2834-2839
3. Ανϋез еϊ аϊ. Ьеик. ЬутρЬοта, 1998, 30,5-6, ρ. 651-656
4. ΟПЬегΙ, Саηсег, 1998, 83,6,ρ.1205-13
5. Κи11еά§е, СЫη аηά δсЬеρаιϊζ Сиггеηχ Ορϊηюη ϊη СЬетϊсаΙ Βϊοϊοду, 2002, 6, ρ. 479-485
6. 8Κ Νагаϊа, Κ Сοйтаη, еάз.
суϊοктез аз ροϊеηϊϊаϊ άга§з, Βϊгкηаизег νеήа§, Βазеϊ, 2000, 141 ρρ
7. Паτенτ СШΑ Ν0 5231081
8. Паτенτ Ροссии Ν° 2172322 9. СЬегаузЬ еϊ аϊ., Ρгοсееάт§з ο Νаϊюηа1 Αсаάету οι" δсϊеηсе, 2002, 99, ρ. 12628-12632 Ю.Κοиπе, II. Скет. ΒϊόΙ. ΙЫегαсΙ., 2001, 138, 1-26; Τауϊοг, 8.С., Οгееη, Κ.Ν., ЗтϊϊЬ, Ι.Ρ. & Ρеегз, С. Αт. 1 Ρку юΙ. СеΙΙΡкузюΙ., 2001, 281, 1850-1857 1 1.ΜаЬЬοϊϊ, Ν.Α., Βгονга, Κ.Ь., Μаηзοη, 1. & Βгасе, Μ.Ε. ϊттиηοϊοξу, 1997, 92, ρ.161-165
12.Паτенτ Ροссии Ν° 2172322
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
Claims
1. Пеπτиды, χаρаκτеρизуемые οбщей сτρуκτуρнοй φορмулοй X! Τгρ Сϊу Сϊη Χ2 или иχ φаρмацевτичесκи πρиемлемые сοли, или эφиρы, или амиды, где Χι οτсуτсτвуеτ, либο сοдеρжиτ не менее 1 аминοκислοτы, Χ οτсуτсτвуеτ, либο сοдеρжиτ не менее 1 аминοκислοτы.
2. Пеπτид πο π. 1, сοдеρжащий дο 30 аминοκислοτныχ οсτаτκοв, πρедποчτиτельнο 5- 15 аминοκислοτныχ οсτаτκοв
3. Пеπτид πο ππ. 1, где X] выбρан из гρуππы, сοдеρжащей 0 аминοκислοτ, Ηϊз-ΟΙу- νаϊ-δег-θϊу-, Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-, Ηϊз-νаΙ-ΟΙу-ΟΙу-, Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-, ΟΙη-ΟΙу- ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу- и Ηιз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-
4. Пеπτид πο ππ. 1, где Χ2 выбρан из гρуππы, сοдеρжащей 0 аминοκислοτ, -Ηϊз-ΟΙу-ΤЬг-Ηϊз -Οϊу, -ΟΙу-ΟΙу-ΤЬг-Ηϊз-ΟΙу, -Ρгο-Ηϊз-νаΙ-ΟΙу-ΟΙу, -Ρгο-Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу- Οϊу, -Ρгο-Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-Τгρ-ΟΙу, -01у-01у-01у-ΤЬг-Ηϊз-8ег
5. Пеπτид πο π. 1, выбρанный из гρуππы, сοдеρжащей
Ηιз-01у-νа1-8ег-01у-Τгρ-01у-01η-Ηϊз-01у-Τηг-ΗΪ8 -Οϊу, Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-Τгρ-ΟΙу-ΟΙη- Ρгο-Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу, Ηϊз-01у-01у-01у-01у-Τгρ-01у-01η-01у-01у-ΤЬг-Ηϊз-01у, Шз-ΟΙу- 01у-01у-Τгρ-01у-01η-Ρгο-Ηϊз-νа1-01у-01у, Ηϊз-νаΙ-ΟΙу-ΟΙу-Τгρ-ΟΙу-ΟΙη-Ρгο-Шз-ΟΙу- ΟΙу-ΟΙу, Ο1η-Ο1у-Ο1у-Ο1у-Ο1у-Τгρ-Ο1у-Ο1η-Ρгο-Ηϊз-Ο1у-Ο1у-Ο1у-Τгρ-Ο1у, Ηϊз-ΟΙу-ΟΙу- ΟΙу-Τгρ-ΟΙу -ΟΙη-Ρгο-Ηιз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-Τгρ-ΟΙу, Ηιз-ΟΙу-ΟΙу-ΟΙу-Τгρ-ΟΙу-ΟЬ-ΟΙу-ΟΙу- ΟΙу-ΤЬг-Ηϊз-δег
6. Белκи и ποлиπеπτиды, в сοсτав κοτορыχ вχοдяτ аминοκислοτные ποследοваτельнοсτи πο π. 1
7. Пеπτиды πο π. 1, οбладающие анτиπροлиφеρаτивнοй и циτοτοκсичесκοй аκτивнοсτью
8. Пеπτиды πο π. 1, οбладающие προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτью
9. Пеπτиды πο π. 1 , οбладающие анτивиρуснοй аκτивнοсτью
10. Пеπτиды πο π. 1, οбладающие иммунοмοдулиρующей аκτивнοсτью
11. Белκи и ποлиπеπτиды πο π. 6, οбладающие προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτью
12. Белκи и ποлиπеπτиды πο π. 6, οбладающие анτивиρуснοй аκτивнοсτью
13. Белκи и ποлиπеπτиды πο π. 6, οбладающие иммунοмοдулиρующей аκτивнοсτью
14. Χимичесκие сοединения, не являющиеся πρиροдными πеπτидами или белκами, οбладающие анτиπροлиφеρаτивнοй, циτοτοκсичесκοй, προτивοοπуχοлевοй или ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26) 16 анτивиρуснοй аκτивнοсτью, в сοсτав κοτορыχ вχοдиτ аминοκислοτная ποследοваτельнοсτь, сοοτвеτсτвующая π. 1
15. Φаρмацевτичесκие κοмποзиции, вκлючающие πеπτиды πο π. 1
16. Φаρмацевτичесκие κοмποзиции, вκлючающие белκи и ποлиπеπτиды πο π. 6
17. Φаρмацевτичесκие κοмποзиции, вκлючающие χимичесκие сοединения πο π. 14
18. Ηуκлеοτидный сиκвенс, κοдиρующий любοй из πеπτидοв πο π. 1
19. Βеκτορ, ποдχοдящий для эκсπρессии любοгο из πеπτидοв πο π. 1 в κлеτκе- χοзяине, κοτορая эκсπρессиρуеτ эτοτ πеπτид ποсле τρансφορмации, вκлючая φρагменτ ДΗΚ, κοдиρующий πеπτид πο π. 1 20. Κлеτκа-χοзяин, τρансφορмиροванная веκτοροм πο π. 19
ЗΑΜΕΗЯЮЩИЙ ЛИСΤ (ПΡΑΒИЛΟ 26)
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP04816710A EP1705182B1 (en) | 2004-01-15 | 2004-12-30 | Antitumoral and antiviral peptides |
| US10/585,715 US8372406B2 (en) | 2004-01-15 | 2004-12-30 | Antitumoral and antiviral peptides |
| AU2004313810A AU2004313810A1 (en) | 2004-01-15 | 2004-12-30 | Antitumoral and antiviral peptides |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004100856 | 2004-01-15 | ||
| RU2004100856/04A RU2267496C2 (ru) | 2004-01-15 | 2004-01-15 | Противоопухолевые и антивирусные пептиды |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2005068491A1 true WO2005068491A1 (fr) | 2005-07-28 |
Family
ID=34793505
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/RU2004/000541 WO2005068491A1 (fr) | 2004-01-15 | 2004-12-30 | Peptides antitumoraux et antiviraux |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8372406B2 (ru) |
| EP (1) | EP1705182B1 (ru) |
| AU (1) | AU2004313810A1 (ru) |
| RU (1) | RU2267496C2 (ru) |
| WO (1) | WO2005068491A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200605804B (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008007997A1 (fr) * | 2006-07-13 | 2008-01-17 | Society With Limited Liability Allopharm (Allopharm Ltd) | Agent anti-inflammatoire à usage externe |
| WO2013187552A1 (ko) * | 2012-06-11 | 2013-12-19 | (주)알로텍 | 알로페론을 포함하는 항염증 약학적 조성물 및 화장료 조성물 |
| RU2560689C2 (ru) * | 2013-09-06 | 2015-08-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Аллоферон" | Способ комплексной терапии преинвазивного и инвазивного рака шейки матки |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2902101B1 (fr) * | 2006-06-12 | 2012-12-28 | Scras | Peptides a activite anti-proliferative |
| WO2009029686A1 (en) * | 2007-08-27 | 2009-03-05 | Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc | Immunogenic compositions and methods |
| SG172935A1 (en) | 2009-02-02 | 2011-08-29 | Okairos Ag | Simian adenovirus nucleic acid- and amino acid-sequences, vectors containing same, and uses thereof |
| RU2576830C2 (ru) * | 2013-09-10 | 2016-03-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Ликели" | Биологически активные производные аллоферона-1 |
| EA031772B1 (ru) * | 2013-09-10 | 2019-02-28 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Юнит Мф" | Пептиды, индуцирующие повышенное образование интерферона-гамма и il-18, и иммуномодулирующая, противовирусная фармацевтическая композиция |
| RU2751837C2 (ru) * | 2019-09-10 | 2021-07-19 | Черныш Людмила Егоровна | Способ активации цитотоксических лимфоцитов |
| WO2021072350A1 (en) * | 2019-10-11 | 2021-04-15 | Tobebio Novel Drug Co., Ltd. | Synergistic combination of chemotherapy and peptide for treating cancer |
| CN110903349A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-03-24 | 安徽工程大学 | 一种固相合成Alloferon-2的方法 |
| CN116249543A (zh) * | 2020-06-29 | 2023-06-09 | 上海威莫思生物科技有限公司 | 抗病毒和细胞因子风暴治疗方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0668350A1 (en) * | 1994-02-16 | 1995-08-23 | Akzo Nobel N.V. | Melanoma associated antigenic polypeptide, epitopes thereof and vaccines against melanoma |
| WO1996013590A2 (en) * | 1994-10-21 | 1996-05-09 | Innogenetics N.V. | New sequences of hepatitis c virus genotypes and their use as prophylactic, therapeutic and diagnostic agents |
| US5773572A (en) * | 1991-12-03 | 1998-06-30 | Proteus Molecular Design Limited | Fragments of prion proteins |
| DE19741607A1 (de) * | 1997-09-20 | 1999-03-25 | Prionics Ag | Synthetische Polypeptide zur Diagnose und Therapie von Prionerkrankungen |
| RU2172322C1 (ru) * | 1999-12-27 | 2001-08-20 | Энтофарм Ко., Лтд. | Аллофероны-иммуномодулирующие пептиды |
| WO2001077687A2 (en) * | 2000-04-05 | 2001-10-18 | V.I Technologies, Inc. | Prion-binding peptidic ligands and methods of using same |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5231081A (en) | 1987-12-17 | 1993-07-27 | Thomas Stiefel | Use of hemocyanins and arylphorins to influence the immune system and for the treatment of tumors |
| JP4712975B2 (ja) | 1999-01-12 | 2011-06-29 | ケンブリッジ エンタープライズ リミティド | 炎症反応を阻害又は増強するための組成物及び方法 |
| FR2808278A1 (fr) * | 2000-04-28 | 2001-11-02 | Inst Nat Sante Rech Med | Proteines a prions et leurs utilisations |
| CA2466841A1 (en) * | 2001-11-21 | 2003-06-05 | New York University | Synthetic immunogenic but non-deposit-forming polypeptides and peptides homologous to amyloid .beta., prion protein, amylin, .alpha.-synuclein, or polyglutamine repeats for induction of an immune response thereto |
| WO2004018511A2 (en) * | 2002-08-23 | 2004-03-04 | Copenhagen Biotech Assets Aps | Composite peptide compounds for diagnosis and treatment of diseases caused by prion proteins |
| US20040192887A1 (en) * | 2003-03-25 | 2004-09-30 | Ralph Zahn | PH-dependent polypeptide aggregation and its use |
| DE102004043782A1 (de) * | 2004-09-08 | 2006-03-09 | Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf | Polypeptide und Verfahren zur spezifischen Bindung von Prionen |
-
2004
- 2004-01-15 RU RU2004100856/04A patent/RU2267496C2/ru active
- 2004-12-30 AU AU2004313810A patent/AU2004313810A1/en not_active Abandoned
- 2004-12-30 WO PCT/RU2004/000541 patent/WO2005068491A1/ru active Application Filing
- 2004-12-30 EP EP04816710A patent/EP1705182B1/en not_active Not-in-force
- 2004-12-30 US US10/585,715 patent/US8372406B2/en active Active
-
2006
- 2006-07-14 ZA ZA200605804A patent/ZA200605804B/en unknown
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5773572A (en) * | 1991-12-03 | 1998-06-30 | Proteus Molecular Design Limited | Fragments of prion proteins |
| EP0668350A1 (en) * | 1994-02-16 | 1995-08-23 | Akzo Nobel N.V. | Melanoma associated antigenic polypeptide, epitopes thereof and vaccines against melanoma |
| WO1996013590A2 (en) * | 1994-10-21 | 1996-05-09 | Innogenetics N.V. | New sequences of hepatitis c virus genotypes and their use as prophylactic, therapeutic and diagnostic agents |
| DE19741607A1 (de) * | 1997-09-20 | 1999-03-25 | Prionics Ag | Synthetische Polypeptide zur Diagnose und Therapie von Prionerkrankungen |
| RU2172322C1 (ru) * | 1999-12-27 | 2001-08-20 | Энтофарм Ко., Лтд. | Аллофероны-иммуномодулирующие пептиды |
| WO2001077687A2 (en) * | 2000-04-05 | 2001-10-18 | V.I Technologies, Inc. | Prion-binding peptidic ligands and methods of using same |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| See also references of EP1705182A4 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008007997A1 (fr) * | 2006-07-13 | 2008-01-17 | Society With Limited Liability Allopharm (Allopharm Ltd) | Agent anti-inflammatoire à usage externe |
| WO2013187552A1 (ko) * | 2012-06-11 | 2013-12-19 | (주)알로텍 | 알로페론을 포함하는 항염증 약학적 조성물 및 화장료 조성물 |
| RU2560689C2 (ru) * | 2013-09-06 | 2015-08-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Аллоферон" | Способ комплексной терапии преинвазивного и инвазивного рака шейки матки |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2004100856A (ru) | 2005-06-27 |
| EP1705182A4 (en) | 2008-03-12 |
| AU2004313810A1 (en) | 2005-07-28 |
| EP1705182B1 (en) | 2012-08-15 |
| ZA200605804B (en) | 2008-02-27 |
| EP1705182A1 (en) | 2006-09-27 |
| US20070293424A1 (en) | 2007-12-20 |
| RU2267496C2 (ru) | 2006-01-10 |
| US8372406B2 (en) | 2013-02-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2962555B2 (ja) | 溶菌ペプチドによる真核性病原体と新生物の抑制及び繊維芽細胞とリンパ球の刺激 | |
| KR100623104B1 (ko) | 감마-글루타밀 및 베타-아스파르틸을 함유하는 면역조절화합물 및 그의 제조 방법 | |
| CN101835892B (zh) | Cdca1肽和包含cdca1肽的药剂 | |
| US8313779B2 (en) | Evaluation method and screening method for substance having action of activating/suppressing innate immunity, agent and food product for activating/suppressing innate immune mechanism and method for producing the same | |
| WO2005004903A1 (fr) | Methode de traitement de maladies oncologiques | |
| WO2005068491A1 (fr) | Peptides antitumoraux et antiviraux | |
| Zimmerman et al. | Efficacy of novel histone deacetylase inhibitor, AR42, in a mouse model of, human T-lymphotropic virus type 1 adult T cell lymphoma | |
| WO1989006134A1 (en) | Pharmaceutical preparation for treating immunodeficiency conditions | |
| Feng et al. | Isolation and potential immunological characterization of TPSGLVY, a novel bursal septpeptide isolated from the bursa of Fabricius | |
| WO2005007187A1 (fr) | Methode de traitement des maladies oncologiques, infectieuses et somatiques, procedes de controle de l'efficacite du traitement, agents et compositions pharmaceutiques associes | |
| WO1995017902A1 (fr) | Utilisation d'une souche du champignon fusarium comme producteur de substances et preparation a base celle-ci presentant, des proprietes, adaptogeniques et immunomodulatrices | |
| WO2004112804A1 (fr) | Agent d'inhibition de la reproduction de virus a membrane, procede de production dudit agent, composition pharmaceutique et methode d'inhibition des infections virales | |
| AP871A (en) | New applicants of lysozyme dimer. | |
| KR20120069221A (ko) | 봉독조성물 | |
| Li-Li et al. | 5, 7, 2’, 4’, 5’-Pentamethoxyflavanone regulates M1/M2 macrophage phenotype and protects the septic mice | |
| NO173655B (no) | Fremgangsmaate for ekstrahering av et tetrapeptid fra biologisk materiale | |
| RU2155052C1 (ru) | Комплексный антипаразитарный препарат, не обладающий иммуносупрессией | |
| JPH01149730A (ja) | レトロウイルス増殖抑制剤 | |
| ES2350039T3 (es) | Compuestos inmunomoduladores que contienen gamma-glutamilo y beta-aspartilo y métodos con ellos. | |
| Dumonde | The Role of Lymphocytes and Macrophages in the Immunological Response: XIII International Congress of Haematology, Munich, August 2–8, 1970 | |
| Mykhailivna et al. | Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv | |
| Appiah et al. | Study of alloferon, a novel immunomodulatory antimicrobial peptide (AMP), and its analogues | |
| KR20150022716A (ko) | 다우리놀 화합물을 유효성분으로 포함하는 면역질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
| Keesey | The most vulnerable synapse: historic aspects of neuromuscular junction disorders | |
| WO2002080938A1 (fr) | Application de nucleospermate de sodium pour traiter le sida et procede de traitement |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AK | Designated states |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW |
|
| AL | Designated countries for regional patents |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG |
|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application | ||
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 2004816710 Country of ref document: EP |
|
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 2004313810 Country of ref document: AU |
|
| ENP | Entry into the national phase |
Ref document number: 2004313810 Country of ref document: AU Date of ref document: 20041230 Kind code of ref document: A |
|
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 2006/05804 Country of ref document: ZA Ref document number: 200605804 Country of ref document: ZA |
|
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
| WWW | Wipo information: withdrawn in national office |
Ref document number: DE |
|
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 914/MUMNP/2006 Country of ref document: IN |
|
| WWP | Wipo information: published in national office |
Ref document number: 2004816710 Country of ref document: EP |
|
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 10585715 Country of ref document: US |
|
| WWP | Wipo information: published in national office |
Ref document number: 10585715 Country of ref document: US |