WO2003004666A2 - Procede de reduction enantioselectif d'une cetone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluoromethyle sur le cycle aromatique - Google Patents
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- WO2003004666A2 WO2003004666A2 PCT/FR2002/002251 FR0202251W WO03004666A2 WO 2003004666 A2 WO2003004666 A2 WO 2003004666A2 FR 0202251 W FR0202251 W FR 0202251W WO 03004666 A2 WO03004666 A2 WO 03004666A2
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- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/22—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group aromatic
Definitions
- the subject of the present invention is a method of enantioselective reduction of a prochiral aromatic ketone comprising at least one trifluoromethyl group on the aromatic ring, according to a biocatalysis or bioconversion method.
- optically active phenylalkanolic compounds and in particular (R) or (S -1-phenylethanol, are compounds widely used as synthons in the field of pharmacy and agrochemistry.
- the objective is to obtain the enantiomer having the desired property and to minimize the formation of the other enantiomer.
- the described method leading to an alcohol (S), the objective of the invention is to provide a desired optically active alcohol of configuration (R) according to a method of enantioselective reduction of the corresponding ketone.
- a method of enantioselective reduction of a prochiral aromatic ketone comprising at least one trifluoromethyl group on the aromatic cycle characterized in that the reduction is carried out in the presence of the enzyme from Lactobacillus.
- the preferred enzyme used according to the invention is the enzyme originating from Lactobacillus Kefiri.
- the method of the invention provides predominantly access to the alcohol of configuration (R).
- ketone compound denotes the starting substrate, namely, the prochiral aromatic ketone comprising at least one trifluoromethyl group on the aromatic cycle. According to the invention, the reduction is carried out in the presence of an enzyme of the alcohol dehydrogenase type.
- a first variant of the invention consists in using the isolated enzyme. Another variant of the invention is to bring into play a biomass comprising said enzyme.
- ketone compound corresponding to the general formula is used in the process of the invention:
- Ri represents an alkyl, alkenyl, cycloalkyl, aryl or arylalkyl group
- - n is a number at least equal to 1, preferably between 1 and 3, - at least one trifluoromethyl group is in position 3, 4 or 5.
- alkyl means a linear or branched hydrocarbon chain having from 1 to 15 carbon atoms and preferably from 1 or 2 to 10 carbon atoms.
- alkenyl is meant a hydrocarbon group, linear or branched having from 2 to 15 carbon atoms, comprising one or more double bonds, preferably 1 to 2 double bonds.
- cycloalkyl is meant a cyclic hydrocarbon group, comprising from 3 to 8 carbon atoms, preferably a cyclopentyl or cyclohexyl group.
- aryl is meant an aromatic mono- or polycyclic group, preferably mono- or bicyclic comprising from 6 to 12 carbon atoms, preferably phenyl or naphthyl.
- arylalkyl is meant a hydrocarbon group, linear or branched carrying a monocyclic aromatic ring and comprising from 7 to 12 carbon atoms, preferably benzyl.
- Ri represents an alkyl group having from 1 to 4 carbon atoms, preferably 1 or 2, - and n is a number equal to 1 or 2.
- the reduction is carried out by using preferentially, the enzyme originating from Lactobacillus Kefiri.
- the microorganism is a collection microorganism DSM20587.
- the reduction can be carried out in the presence of the isolated enzyme or of a biomass containing it.
- the enzyme is introduced into a buffered medium having a pH of around 7, preferably obtained with a phosphate buffer comprising 0.1 mol / l of mono- and dipotassium phosphate.
- a co-factor is added, namely, NADPH (nicotine-adenine-dinucleotide-phosphate).
- NADPH nicotine-adenine-dinucleotide-phosphate
- the final concentration of the co-factor in the final medium is preferably between 0.1 to 1 mmol / l.
- the co-factor which undergoes oxidation during the reaction is regenerated by conventional means such as, for example, the use of a secondary alcohol, preferably cyclopentanol or l isopropanol.
- the amount of alcohol used is in excess of the stoichiometry of the substrate. It is determined so that the concentration of alcohol in the medium is between 20 to 100 mmol / l.
- the ketone compound to be reduced is then introduced. It is implemented at a concentration advantageously between 5 to 20 mmol / l.
- the reaction is carried out at a temperature preferably between 30 ° C and 37 ° C.
- the reaction is carried out at atmospheric pressure and the reaction medium is preferably stirred.
- the medium is kept under stirring for a period which can be very variable. It is most often between 6 and 24 hours.
- the optically active alcohol obtained is separated in the usual way, for example, by carrying out an extraction using a suitable organic solvent such as, for example, dichloromethane, ethyl ether, ethyl acetate or any other suitable solvent.
- a suitable organic solvent such as, for example, dichloromethane, ethyl ether, ethyl acetate or any other suitable solvent.
- the enzyme contained in the cells of the microorganism is used.
- a first step in the process of the invention consists in carrying out the fermentation of the strain Lactobacillus Kefiri, in a conventional medium used to cultivate Lactobacilli.
- a second step is to carry out the reduction reaction in the presence of the biomass previously obtained.
- a fermentation medium comprising, for example, a carbon source, a nitrogen source and mineral salts.
- carbon sources mention may in particular be made of maltose, glucose, sucrose, lactose, glycerol, starch, sorbitol, mannitol, propylene glycol.
- yeast extracts beef extracts, peptone, ammonium sulphate, ammonium citrate, sodium nitrate or any other source of nitrogen containing amino acids.
- mineral salts can be added and in addition to those mentioned as a nitrogen source, there may be mentioned sodium acetate, magnesium sulfate, manganese sulfate or potassium phosphate. Reference will be made to the examples to illustrate the composition and the concentrations of the various constituents of the fermentation medium.
- Lactobacilli The cultivation of Lactobacilli is carried out anaerobically or pseudo-anaerobically and the skilled person knows how to conduct fermentation under these conditions. From a practical point of view, the fermentation medium is seeded with an inoculum of Lactobacillus, preferably Lactobacillus Kefiri which is present, most often in the form of an aqueous suspension which may contain a cryo-protective agent for example , dimethylsulfoxide or glycerol at a concentration, for example, from 10 to 20% by weight. Fermentation takes place at a pH advantageously between 6 and 7 and at a temperature preferably between 25 to 30 ° C.
- a cryo-protective agent for example , dimethylsulfoxide or glycerol
- the fermentation time is generally 2 to 4 days and is most often 3 days.
- the biomass is recovered in a conventional manner. For example, a centrifugation can be carried out for approximately 3 to 15 min, then the supernatant is removed by decantation and a pellet is recovered, which is most often washed with physiological water.
- the Lactobacillus biomass obtained is 1 to 5 g / l expressed in dry cells.
- the enantioselective reduction of the ketone compound is then carried out in the presence of the Lactobacillus biomass expressing the activity of alcohol dehydrogenase.
- the biomass is introduced in an amount of 10 to 30 g of dry matter per liter of reaction medium also comprising a buffer.
- a buffered medium having a pH of approximately 7 is chosen as above, preferably obtained with a phosphate buffer comprising 0.1 mol / l of mono- and dipotassium phosphate.
- the ketone compound to be reduced is then introduced. It is implemented at a concentration advantageously between 5 to 20 mmol / l.
- the reaction is carried out at a temperature advantageously between 30 ° C. and 37 ° C.
- the reaction is carried out at atmospheric pressure and the reaction medium is preferably stirred.
- the medium is kept under stirring for a period which can be very variable. It is most often between 6 and 24 hours.
- the biomass is separated in a conventional manner, for example by centrifugation.
- the supernatant comprising the optically active alcohol is recovered and separated, in a usual manner for example, by carrying out an extraction using a suitable organic solvent such as, for example, dichloromethane, ethyl ether, ethyl acetate or any other suitable solvent.
- a suitable organic solvent such as, for example, dichloromethane, ethyl ether, ethyl acetate or any other suitable solvent.
- the optically active alcohol can be obtained from a prochiral ketone with an excellent yield and a very high enantiomeric excess of up to 100%.
- the alcohol obtained mainly is of configuration (R).
- the strain Lactobacillus kefiri DSM20587 is cultivated in quasi-anaerobic static culture in the Man-Rogosa-Sharp medium (MRS) described below at 25 ° C, for 72 hours.
- MRS Man-Rogosa-Sharp medium
- the culture medium [MRS medium (Difco-0881)] has the following composition: - Peptone n ° 3 10 g
- the pH is 6.5.
- the medium is first of all sterilized in a conventional manner by heating in an autoclave at a temperature of 121 ° C., for 20 min.
- the medium (100 ml) is seeded with 0.1 ml of a cell suspension of Lactobacillus Kefiri socked in glycerol water (15% glycerol) and incubated for 72 hours at 25 ° C.
- the biomass obtained is 1.5 g / l expressed in dry cells.
- the cells obtained are washed with physiological water.
- BTA 3,5-bis (trifluoromethyl) acetophenone
- the enantiomeric excess ee expressed in% which is the ratio between [(R) - (S)] and [(R) + (S)] x 100, is determined by gas chromatography (GPC) on the chiral column Chiralsil Dex CB: 100 ° C to 160 ° C with a speed of 2 ° C per min.
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Abstract
La présente invention a pour objet un procédé de réduction énantiosélectif d'une cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique.Le procédé de l'invention qui permet d'accéder majoritairement ô un alcool de configuration (R) est caractérisé par le fait que la réduction de la cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique est effectuée en présence de l'enzyme provenant de Lactobacillus.
Description
PROCEDE DE REDUCTION ENANTIOSELECTIF D'UNE CETONE
AROMATIQUE PROCHIRALE COMPRENANT AU MOINS UN GROUPE
TRIFLUOROMETHYLE SUR LE CYCLE AROMATIQUE.
La présente invention a pour objet un procédé de réduction énantiosélectif d'une cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique, selon un procédé de biocatalyse ou de bioconversion.
Les composés de type phénylalcanolique, optiquement actifs, et en particulier le (R) ou (S -1-phényléthanol, sont des composés très utilisés comme synthons dans le domaine de la pharmacie et de l'agrochimie.
L'objectif est d'obtenir l'énantiomère ayant la propriété recherchée et de minimiser la formation de l'autre énantiomère.
Il est connu selon K. Nakâmura (J. Org. Chem. 1998, 63, 8957- 8964) d'effectuer une réduction d'un dérivé d'acétophénone portant un groupe trifluorométhyle, en position o-, m- ou p-, en alcool, à l'aide de l'enzyme provenant de Geotrichum candidum. Toutefois, l'alcool obtenu présente une configuration (S).
Le procédé décrit conduisant à un alcool (S), l'objectif de l'invention est de fournir un alcool optiquement actif souhaité de configuration (R) selon un procédé de réduction énantiosélectif de la cétone correspondante.
II a maintenant été trouvé et c'est ce qui constitue l'objet de la présente invention, un procédé de réduction énantiosélectif d'une cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique caractérisé par le fait que la réduction est effectuée en présence de l'enzyme provenant de Lactobacillus. L'enzyme préférée mise en œuvre selon l'invention est l'enzyme provenant de Lactobacillus Kefiri.
Le procédé de l'invention permet d'accéder majoritairement à l'alcool de configuration (R).
Dans la suite du présent texte, on désigne par « composé cétonique », le substrat de départ à savoir, la cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique.
Conformément à l'invention, la réduction est effectuée en présence d'une enzyme de type alcool-déshydrogénase.
Une première variante de l'invention consiste à mettre en œuvre l'enzyme isolée. Une autre variante de l'invention est de mettre en jeu une biomasse comprenant ladite enzyme.
Intervient dans le procédé de l'invention, un composé cétonique répondant à la formule générale :
- Ri représente un groupe alkyle, alcényle, cycloalkyle, aryle ou arylalkyle,
- n est un nombre au moins égal à 1 , de préférence compris entre 1 et 3, - au moins un groupe trifluorométhyle est en position 3, 4 ou 5.
Dans le cadre de l'invention, on entend par « alkyle », une chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée ayant de 1 à 15 atomes de carbone et de préférence de 1 ou 2 à 10 atomes de carbone. Par « alcényle », on entend un groupe hydrocarboné, linéaire ou ramifié ayant de 2 à 15 atomes de carbone, comprenant une ou plusieurs doubles liaisons, de préférence, 1 à 2 doubles liaisons.
Par « cycloalkyle », on entend un groupe hydrocarboné cyclique, comprenant de 3 à 8 atomes de carbone, de préférence, un groupe cyclopentyle ou cyclohexyle.
Par « aryle », on entend un groupe mono- ou polycyclique aromatique, de préférence, mono- ou bicyclique comprenant de 6 à 12 atomes de carbone, de préférence, phényle ou naphtyle.
Par « arylalkyle », on entend un groupe hydrocarboné, linéaire ou ramifié porteur d'un cycle aromatique monocyclique et comprenant de 7 à 12 atomes de carbone, de préférence, benzyle.
Les substrats mis en œuvre préférentiellement dans le procédé de l'invention répondent à la formule (I) dans laquelle :
- Ri représente un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, de préférence, 1 ou 2,
- et n est un nombre égal à 1 ou 2.
Si le composé de formule (I) comprend un seul groupe trifluorométhyle (n = 1), celui est avantageusement en position 3 ou 4.
Si le composé de formule (I) comprend deux groupes trifluorométhyle (n = 2), ceux-ci se situent de préférence, en position 3 et 4 ou 3 et 5.
Selon le procédé de l'invention, on effectue la réduction en mettant en œuvre préférentiellement, l'enzyme provenant de Lactobacillus Kefiri.
Cette enzyme est disponible dans le commerce et commercialisée par la Société Fluka sous la dénomination 05643. Le microorganisme est un microorganisme de collection DSM20587.
Comme mentionné précédemment, on peut conduire la réduction en présence de l'enzyme isolée ou d'une biomasse la contenant.
Selon la première variante de l'invention, on introduit l'enzyme dans un milieu tamponné ayant un pH d'environ 7, de préférence obtenu avec un tampon phosphate comprenant 0,1 mol/l de phosphate mono- et dipotassique.
On ajoute un co-facteur à savoir, NADPH (nicotine-adénine-dinucléotide- phosphate). Généralement, on en met de telle sorte que la concentration finale du co-facteur dans le milieu final soit compris de préférence, entre 0,1 à 1 mmol/l. Selon un mode préféré de l'invention, on régénère le co-facteur qui subit une oxydation en cours de réaction, par un moyen classique tel que par exemple, la mise en oeuvre d'un alcool secondaire, de préférence, le cyclopentanol ou l'isopropanol.
La quantité d'alcool mise en œuvre est excédentaire par rapport à la stœchiometne du substrat. Elle est déterminée de telle sorte que la concentration de l'alcool dans le milieu soit comprise entre 20 à 100 mmol/l.
On introduit ensuite le composé cétonique à réduire. Il est mis en œuvre à une concentration avantageusement comprise entre 5 à 20 mmol/l.
On conduit la réaction à une température de préférence, comprise entre 30°C et 37°C.
La réaction est conduite sous pression atmosphérique et le milieu réactionnel est de préférence, agité.
On maintient le milieu sous agitation pendant une durée qui peut être très variable. Elle est le plus souvent comprise entre 6 et 24 heures. En fin de réaction, on sépare l'alcool optiquement actif obtenu d'une manière habituelle par exemple, en effectuant une extraction à l'aide d'un solvant organique adéquate tel que par exemple, le dichlorométhane, l'éther éthylique, l'acétate d'éthyle ou de tout autre solvant convenant.
Selon l'autre variante du procédé de l'invention et qui est préférée, on met en œuvre l'enzyme contenue dans les cellules du microorganisme.
Une première étape du procédé de l'invention consiste à effectuer la fermentation de la souche Lactobacillus Kefiri, dans un milieu classique utilisé pour cultiver les Lactobacilli.
Une deuxième étape est d'effectuer la réaction de réduction en présence de la biomasse précédemment obtenue.
A cet effet, on part d'un milieu de fermentation comprenant par exemple, une source de carbone, une source d'azote et des sels minéraux. Comme exemples de sources de carbone, on peut mentionner notamment, le maltose, le glucose, le saccharose, le lactose, le glycérol, l'amidon, le sorbitol, le mannitol, le propylène glycol.
Pour ce qui est de la source d'azote, on peut faire appel de préférence aux extraits de levure, aux extraits de bœuf, à la peptone, au sulfate d'ammonium, au citrate d'ammonium, au nitrate de sodium ou toute autre source d'azote contenant des acides aminés.
Généralement, des sels minéraux peuvent être ajoutés et en plus de ceux cités comme source d'azote, on peut mentionner l'acétate de sodium, le sulfate de magnésium, le sulfate de manganèse ou le phosphate de potassium. On se référera aux exemples pour illustrer la composition et les concentrations des différents constituants du milieu de fermentation.
La culture des Lactobacilli s'effectue, en anaérobie ou pseudo-anaérobie et l'Homme du Métier sait parfaitement conduire la fermentation dans ces conditions. D'un point de vue pratique, on ensemence le milieu de fermentation avec un inoculum de Lactobacillus, de préférence, Lactobacillus Kefiri qui se présente, le plus souvent sous forme d'une suspension aqueuse pouvant contenir un d'agent cryo-protecteur par exemple, le diméthylsulfoxyde ou le glycérol à raison d'une concentration, par exemple, de 10 à 20 % en poids. La fermentation s'effectue à un pH compris avantageusement entre 6 et 7 et à une température comprise de préférence, entre 25 à 30°C.
La durée de fermentation est généralement de 2 à 4 jours et est le plus souvent de 3 jours.
En fin de fermentation, on récupère la biomasse d'une manière classique. Par exemple, on peut effectuer une centrifugation d'environ 3 à 15 min puis on élimine le surnageant par décantation et l'on récupère un culot qui est le plus souvent lavé avec de l'eau physiologique.
La biomasse de Lactobacillus obtenue est de 1 à 5 g/l exprimée en cellules sèches.
On effectue ensuite la réduction enantioselective du composé cétonique en présence de la biomasse de Lactobacillus exprimant l'activité d'alcool- déshydrogénase.
On introduit la biomasse à raison de 10 à 30 g de matières sèches par litre de milieu réactionnel comprenant également un tampon.
On choisit comme précédemment un milieu tamponné ayant un pH d'environ 7, de préférence obtenu avec un tampon phosphate comprenant 0,1 mol/l de phosphate mono- et dipotassique.
On introduit ensuite le composé cétonique à réduire. Il est mis en œuvre à une concentration avantageusement comprise entre 5 à 20 mmol/l.
On conduit la réaction à une température avantageusement comprise entre 30°C et 37°C. La réaction est conduite sous pression atmosphérique et le milieu réactionnel est de préférence, agité.
On maintient le milieu sous agitation pendant une durée qui peut être très variable. Elle est le plus souvent comprise entre 6 et 24 heures.
En fin de réaction, on sépare la biomasse d'une manière classique, par exemple par centrifugation. On récupère le surnageant comprenant l'alcool optiquement actif et on le sépare, d'une manière habituelle par exemple, en effectuant une extraction à l'aide d'un solvant organique adéquate tel que par exemple, le dichlorométhane, l'éther éthylique, l'acétate d'éthyle ou de tout autre solvant convenant. Conformément au procédé de l'invention, on peut obtenir l'alcool optiquement actif à partir d'une cétone prochirale avec un excellent rendement et un excès énantiomérique très élevé pouvant atteindre 100 %. L'alcool obtenu majoritairement est de configuration (R).
On donne ci-après des exemples de réalisation de l'invention donnés à titre illustratif et sans caractère limitatif.
Exemple 1 :
Culture de la souche exprimant l'alcool-déshydrogénase. La souche Lactobacillus kefiri DSM20587 est cultivée en culture statique quasi-anaérobie dans le milieu Man-Rogosa-Sharp (MRS) décrit ci-dessous à 25°C, pendant 72 heures.
Le milieu de culture [milieu MRS (Difco-0881)] a la composition suivante :
- Peptone n°3 10 g
- Extrait de bœuf 10 g
- Extrait de levures 5 g
- Dextrose 20 g
- Tween 80 (ester de sorbitol) 1 g
- Citrate d'ammonium 2 g
- Acétate de sodium 5 g
- Sulfate de magnésium 0,1 g
- Sulfate de manganèse 0,05 g
- Phosphate dipotassique 2 g
- Eau 1 I
Le pH est de 6,5.
Le milieu est tout d'abord stérilisé d'une manière classique par chauffage dans un autoclave à une température de 121°C, pendant 20 min.
Le milieu (100 ml) est ensemencé avec 0,1 ml d'une suspension cellulaire de Lactobacillus Kefiri sockée dans l'eau glycérole (15 % de glycérol) et incubée 72 heures à 25°C.
La biomasse obtenue est de 1 ,5 g/l exprimée en cellules sèches.
Les cellules obtenues sont lavées par de l'eau physiologique.
Exemple 2:
Réduction de la 3,5-bis(trifluorométhyl)acétophénone (BTA). Les cellules obtenues telles que décrites dans l'exemple 1 , sont mises en suspension dans un tampon phosphate 0,1 mol pH 7 à une concentration cellulaire de 15 g de matières sèches par litre. A 37°C, on ajoute la BTA à raison de 10 mmol/l.
Après 8 h, la réaction est complète, les cellules sont séparées par centrifugation ; le surnageant étant extrait avec du dichlorométhane.
Le solvant organique est évaporé et le rendement est déterminé par analyse par chromatographie liquide sur une colonne phase reverse (colonne LiChrospher 100 RP- 18,5 μm ; éluant A : eau / acide trifluoroacetique 0,1 %
(v/v) et éluant B : acétonitrile / acide trifluoroacetique 0,1 % (v/v); gradient 90 A /
10 B à 10 A / 90 B en 5 min).
L'excès énantiomérique ee exprimé en % qui est le rapport entre [(R) - (S)] et [(R) + (S)] x 100, est déterminé par chromatographie en phase gazeuse (CPG) sur la colonne chirale Chiralsil Dex CB : 100°C à 160°C avec une vitesse de 2°C par min.
Les résultats obtenus sont les suivants :
Rendement en alcool (R) : 100 % Pureté optique : ee = 100 % en alcool (R)
Exemples 3 et 4
On répète le mode opératoire des exemples 1 et 2 mais en mettant en œuvre des substrats cetoniques monosubstitués par un groupe trifluorométhyle à savoir :
- 3-trifluorométhylacétophénone (exemple 3),
- 4-trifluorométhylacétophénone (exemple 4).
Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau (I) :
Tableau (I)
Claims
REVENDICATIONS
1 - Procédé de réduction énantiosélectif d'une cétone aromatique prochirale comprenant au moins un groupe trifluorométhyle sur le cycle aromatique caractérisé par le fait que la réduction est effectuée en présence de l'enzyme provenant de Lactobacillus.
2 - Procédé selon la revendication 1 caractérisé par le fait que l'enzyme mise en œuvre est l'enzyme provenant de Lactobacillus Kefiri.
3 - Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé par le fait que le composé cétonique répond à la formule générale :
- n est un nombre au moins égal à 1 , de préférence compris entre 1 et 3,
- au moins un groupe trifluorométhyle est en position 3, 4 ou 5.
4 - Procédé selon la revendication 3 caractérisé par le fait que le composé cétonique répond à la formule générale (I) dans laquelle Ri représente un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, de préférence, 1 ou 2.
5 - Procédé selon l'une des revendications 3 et 4 caractérisé par le fait que le composé cétonique répond à la formule générale (I) dans laquelle n est égal à 1 ou 2.
6 - Procédé selon la revendication 3 caractérisé par le fait que le composé cétonique répond à la formule (I) dans laquelle n est un nombre égal à 1 et le groupe trifluorométhyle est en position 3 ou 4.
7 - Procédé selon la revendication 3 caractérisé par le fait que le composé cétonique répond à la formule (I) dans laquelle n est un nombre égal à 2 et les deux groupes trifluorométhyle se situent en position 3 et 4 ou 3 et 5.
8 - Procédé selon la revendication 3 caractérisé par le fait que le composé cétonique est choisi parmi :
- la 3,5-bis(trifluorométhyl)acétophénone,
- la 3-trifluorométhylacétophénone, - la 4-trifluorométhylacétophénone.
9 - Procédé selon l'une des revendications 1 et 2 caractérisé par le fait que l'on met en œuvre l'enzyme isolée.
10 - Procédé selon la revendication 9 caractérisé par le fait que l'on introduit l'enzyme dans un milieu tamponné ayant un pH d'environ 7, on ajoute un co- facteur à savoir, NADPH et le composé cétonique à réduire.
11 - Procédé selon la revendication 10 caractérisé par le fait que l'on régénère le co-facteur par la mise d'un alcool secondaire, de préférence, le cyclopentanol ou l'isopropanol.
12 - Procédé selon la revendication 10 caractérisé par le fait que l'on conduit la réaction à une température de préférence, comprise entre 30°C et 37°C.
13 - Procédé selon la revendication 10 caractérisé par le fait que l'on sépare, en fin de réaction, l'alcool optiquement actif, de préférence, par extraction à l'aide d'un solvant organique.
14 - Procédé selon l'une des revendications 1 et 2 caractérisé par le fait que l'on effectue la réduction en présence d'une biomasse comprenant ladite enzyme.
15 - Procédé selon la revendication 14 caractérisé par le fait que l'on effectue la fermentation de la souche Lactobacillus, de préférence, Lactobacillus Kefiri, puis l'on conduit la réaction de réduction en présence de la biomasse précédemment obtenue.
16 - Procédé selon la revendication 15 caractérisé par le fait que l'on ensemence un milieu de fermentation comprenant une source de carbone, une source d'azote et des sels minéraux avec un inoculum de Lactobacillus, de préférence, Lactobacillus Kefiri.
17 - Procédé selon la revendication 16 caractérisé par le fait que la fermentation s'effectue à un pH compris entre 6 et 7 et à une température comprise de préférence, entre 25 à 30°C.
18 - Procédé selon la revendication 16 caractérisé par le fait que l'on récupère la biomasse de Lactobacillus à raison de 1 à 5 g/l exprimée en cellules sèches.
19 - Procédé selon la revendication 15 caractérisé par le fait que l'on introduit la biomasse dans un milieu tamponné ayant un pH d'environ 7 et l'on ajoute le composé cétonique à réduire.
20 - Procédé selon la revendication 19 caractérisé par le fait que l'on conduit la réaction à une température de préférence, comprise entre 30°C et 37°C.
21 - Procédé selon la revendication 19 caractérisé par le fait que l'on sépare, en fin de réaction, l'alcool optiquement actif, de préférence, par extraction à l'aide d'un solvant organique.
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| HAGE, A. ET AL: "Asymmetric reduction of ketones via whole cell bioconversions and transfe hydrogenation: complementary approaches" TETRAHEDRON: ASYMMETRY, vol. 12, no. 7, 8 mai 2001 (2001-05-08), page 1025-1034 XP002248235 * |
| NAKAMURA K ET AL: "Asymmetric reduction of ketones by the acetone powder of Geotrichum candidum" JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY. EASTON, US, vol. 63, no. 24, 27 novembre 1998 (1998-11-27), pages 8957-8964, XP002157672 ISSN: 0022-3263 cité dans la demande * |
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