WO2002043752A1 - Agents therapeutiques de potentialisation d'effet a base d'interferon - Google Patents

Description

明 細 書 インターフヱロン治療効果増強剤 技 分 輕

本発明は、 ラクトフエリンを有効成分として含有するイン夕一フエロン治療効 果増強剤に関する。 更に詳しくは、 本発明は、 金属非飽和ラクトフエリン、 金属 飽和ラクトフエリン、 又はアポラクトフエリン （以下、 これらをまとめてラクト フェリン類と記載することがある。 ） を有効成分とするインタ一フヱロンによる 各種疾病の治療効果の増強剤に関する。 さらに、 本発明は、 該ラクトフエリンの 使用、 インターフヱロン及びラクトフヱリンを有効成分とする薬剤、 並びに該薬 剤を用いた病気の治療方法に関する。 背 景 技 術

インターフヱロンは B型慢性肝炎、 C型慢性肝炎、 腎がん、 多発性骨髄腫など の疾病の治療に広く用いられている。 しかしながら、 その効果は必ずしも高くな く、 特に、 高ウィルス量の症例等では、 イン夕一フエロン抵抗性が認められ、 十 分な治療効果が得られないという問題点があった。例えば、 イン夕一フエロンひ 2 bによる C型慢性肝炎に対しての著効率は 2 9 . 8 %、 多発性骨髄腫に対して の著効率は 2 0 . 8 %にすぎない （日本医薬情報セン夕一編、 医療薬日本医薬品 集 2 0 0 0年版、 第 2 7 5頁、 薬業時報社、 1 9 9 9年） 。

本発明は前記事情に鑑みてなされたものであり、 副作用がなく、 安価なイン夕 一フエロンによる各種疾病の治療効果の増強剤、 該増強剤の有効成分の使用、 該 増強剤の有効成分とィン夕ーフヱロンとを有効成分とする薬剤、 及び該薬剤を用 いた治療方法を提供することを課題とする。 発 明 の 閧 示 本発明者らは、 インターフェロンの有効性を高める薬剤について鋭意研究を行 つた結果、 ラクトフエリンに着目した。

ラクトフエリンは、 涙、 唾液、 末梢血、 乳汁等に含まれている無害、 かつ天然 の鉄結合蛋白質 （1分子当たり 2個の鉄イオンを結合可能） であり、 分子量は、 ゥシ ·ラクトフエリンが 8 6 , 0 0 0、 ヒト ·ラクトフエリンが 8 8， 0 0 0で ある （今堀和友 ·山川民夫監修、 「生化学辞典」、 第 2版、 第 1 3 9 0頁、 東京 化学同人、 1 9 9 0年） 。

ラクトフエリンは、 大腸菌、 カンジダ菌、 クロストリジゥム菌等の有害微生物 に対して抗菌作用を示すこと [ジャーナル 'ォブ 'ぺディアトリクス（Journal o f Pediatrics) 、 第 9 4卷、 第 1頁、 1 9 7 9年]、 ヒト及び動物の腸内にビフ ィズス菌、 乳酸菌等の有用細菌を定着させるのに有効であること （特許第 2 5 3 2 9 1 1号）、 ビフィズス菌増殖因子であること （特開平 2— 2 2 5 4 1 9号公 報） 、 in vitroで C型肝炎ウィルスなどに対して抗ウィルス作用を示すこと （加 藤 宣之編著、 「C型肝炎ウィルス」、 株式会社アイピーシ一、 第 1 0 1頁、 2 0 0 0年） 、 並びにラクトフヱリン経口摂取による C型慢性肝炎患者に対する臨 床治療効果が報告されている [バイオ■インダストリー （Bio Industry) 、 第 1 7卷、 第 4 5頁、 2 0 0 0年] 。

しかしながら、 この治療効果は低ウィルス量の症例に限定された効果であり、 イン夕一フエ口ン抵抗性の高ゥィルス量の症例では効果は認められていない [ジ ャパ二一ズ ·ジャーナノレ ·ォブ ·キャンサー · リサーチ (Japanese Journal of C ancer Reserch) 、 第 9 0卷、 第 3 6 7頁、 1 9 9 9年] 。

更に、 ラクトフヱリンは、 免疫賦活作用 （特開平 7— 1 7 9 3 5 5号公報） 、 細胞増殖作用 （特開平 6— 4 8 9 5 5号公報） 、 抗腫瘍作用 [キャンサー■ リサ —チ （Cancer Research) 、 第 5 4巻、 第 2 3 1 0頁、 1 9 9 4年]、 疾病の治 療剤に応用した抗リゥマチ剤 （特開平 5— 1 8 6 3 6 8号公報） 、 及び薬剤に起 因する慢性肝障害に対する肝機能改善剤 （W O 0 0 / 0 6 1 9 2号公報） 等、 様 々な作用をもつ乳タンパク質として開示されている。 しかしながら、 ラクトフヱリンがウィルス性慢性肝炎に代表される各種疾病の 治療におけるイン夕一フエロンの有効性を高める作用を有することは知られてお らず、 文献も皆無であった。

本発明者らは、 ラクトフエリンの投与が、 ラクトフエリン非投与に比べ、 イン ターフヱロンによる各種疾病の治療効果を顕著に増強させる事実を見い出し、 本 発明を完成した。 特に、 前述のとおり、 インターフェロン又はラクトフエリンの それそれ単独使用では、 治療効果が低いか若しくはないィンターフェロン抵抗性 の高ウィルス量のウィルス性疾病に対して、 両者の併用により、 治療効果の増強 が認められたことは予想外の驚くぺき事実であった。

前記課題を解決する本発明の第一の発明は、 ラクトフエリンを有効成分として 含有するイン夕一フエ口ン治療効果増強剤である。

また、 前記課題を解決する本発明の第二の発明は、 ラクトフエリンを有効成分 として含有するウィルス性慢性肝炎治療用のィン夕一フエ口ン治療効果増強剤で める。

また、 前記課題を解決する本発明の第三の発明は、 インターフェロン治療効果 増強剤の製造のためのラクトフエリンの使用である。

また、 前記課題を解決する本発明の第四の発明は、 ウィルス性慢性肝炎治療用 のィン夕一フエロン治療効果増強剤の製造のためのラクトフエリンの使用である また、 前記課題を解決する本発明の第五の発明は、 イン夕一フエロン及びラク トフエリンを有効成分とする薬剤である。 該桀剤は、 B型慢性肝炎用、 C型慢性 肝炎用、 腎がん用及び多発性骨髄腫用であることを好ましい態様とする。

また、 前記課題を解決する本発明の第六の発明は、 かかる薬剤の投与を含むこ とを特徴とする病気の治療方法である。 発明を実施するための最良の形態

次に本発明について具体的に説明する。 本発明の有効成分として使用するラクトフエリン類は、 市販品であってもよく 、 あるいは哺乳類 （例えば、 ヒト、 ゥシ、 スィギユウ、 ゥマ、 ャギ、 ヒヅジ等） の初乳、 移行乳、 常乳、 末期乳等、 これらの処理物である脱脂乳、 ホェ一等から 、 イオン交換クロマトグラフィー等の常法により分離したラクトフエリンであつ てもよい。 さらにラクトフエリンから常法により鉄を除去したアポラクトフエリ ン、 アポラクトフエリンに鉄、 銅、 亜鉛、 マンがん等の金属を一部又は完全にキ レートさせた金属非飽和ラクトフエリン、 又は金属飽和ラクトフエリンであって もよい。

また、 天然のヒト ·ラクトフエリンは、 大量に製造することはできないが、 組 換え D NA技術により得られる組換え真菌、 組換え乳牛 （トランスジエニック · カウ） 等により生産されるヒト ·ラクトフヱリンも本発明に使用することができ る。

本発明のィン夕一フエ口ン治療効果増強剤は、 ラクトフエリン及びその他の成 分を配合し、 公知の方法により種々の態様に製剤化され、 投与される。 具体的製 剤として、 錠剤 （糖衣錠、 コ一ティング錠、 バヅカル錠を含む。 ） 、 散剤、 カブ セル剤、 （ソフトカプセルを含む。 ） 、 顆粒剤 （コーティングしたものを含む。 ) 、 丸剤、 トローチ剤、 液剤、 又はこれらの製剤学的に許容され得る徐放製剤、 経口剤、 経腸剤、 注射剤等を例示することができる。

前記の製剤は、 公知の製剤学的製法に準じ、 製剤として薬理学的に許容され得 る担体、 賦形剤、 崩壊剤、 滑沢剤、 着色剤等と共に医薬組成物として製剤化され る。

これらの製剤に用いる担体及び賦形剤としては、 乳糖、 ブドウ糖、 白糖、 マン 二トール、 馬鈴薯澱粉、 トウモロコシ澱粉、 炭酸カルシウム、 リン酸カルシウム 、 硫酸カルシウム、 結晶セルロース、 カンゾゥ末、 ゲンチアナ末等を例示するこ とができる。 また、 結合剤としては、 例えば澱粉、 ゼラチン、 シロップ、 ポリビ ニルアルコール、 ポリビニルエーテル、 ポリビニルピロリ ドン、 ヒドロキシプロ ピルセルロース、 ェチルセルロース、 メチルセルロース、 カルボキシメチルセル 口—ス等を例示することができる。

また、 崩壊剤としては、 澱粉、 寒天、 ゼラチン末、 カルボキシメチルセル口一 スナトリウム、 カルボキシメチルセルロースカルシウム、 結晶セルロース、 炭酸 カルシウム、 炭酸水素ナトリウム、 及びアルギン酸ナトリウム等を、 それそれ例 示することができる。

更に、 滑沢剤としては、 ステアリン酸マグネシウム、 水素添加植物油、 及びマ クロゴール等、 着色剤としては医薬品に添加することが許容されている赤色 2号 、 黄色 4号、 青色 1号等を、 それそれ例示することができる。

錠剤及び顆粒剤は、 必要に応じて、 白糖、 ヒドロキシプロピルセルロース、 精 製セラック、 ゼラチン、 ソルビトール、 グリセリン、 ェチルセルロース、 ヒドロ キシプロピルセルロース、 ヒドロキシプロピルメチルセルロース、 ポリビニルビ 口リドン、 フ夕ル酸セルロースァセテ一ト、 ヒドロキシプロピルメチルセルロー スフ夕レート、 メチルメタクリレート、 及びメタアクリル酸重合体等により被膜 することもできる。

本発明のインターフヱロン治療効果増強剤は、 有効成分であるラクトフヱリン を薬剤 1 g当たり少なくとも l mg含むことが望ましく、 投与量は年齢、 症状等 により異なるが、 ヒト体重 l k g当たり少なくとも l m gの割合で投与され、 1 日当たり 2 O m g〜 l 5 g、 特に 1 0 O mg〜 l 0 g投与することが望ましい。 更に、 本発明のインタ一フエロン治療効果増強剤の形態としては、 医薬品に限 定されず、 特定保健用食品に代表される飲食品形態の製品を含む。

また、 本発明のインターフェロン治療効果増強剤の投与時期は、 インターフ ェロン療法開始以前、 開始と同時、 開始以降のいずれであってもよい。

本発明のィンターフェ口ン治療効果増強剤により、 その有効性が増強されるィ ンターフェロン ( I F N) は、 天然型のイン夕一フエロン 、 イン夕一フエロン β、 又は遺伝子組み換え型のイン夕一フヱロンひ 2 a、 インターフェロンひ 2 b のいずれのインターフェロン若しくはそれらの製剤であってもよい。

本発明のィン夕ーフヱロン治療効果増強剤の投与対象疾病としては、 ィン夕ー フエロンによりその治療効果が認められている B型慢性肝炎、 C型慢性肝炎、 腎 がん、 多発性骨髄腫などのいずれであってもよいが、 特に、 現代社会においては 、 ウィルス性慢性肝炎が全疾病に占める割合が高いことに照らして、 本発明の第 二の発明として明記したウイルス性慢性肝炎治療用とすることが、 最も有効であ る。

また、 本発明のイン夕一フエロン治療効果増強剤は、 イン夕一フエロン抵抗性 のウィルス性疾病に対して、 極めて有効であることから、 投与対象疾病として、 インターフェロン抵抗性の C型慢性肝炎 [具体的には、 感染ウィルスの種類がゲ ノタイプ lbの HCV (C型肝炎ウィルス） である C型慢性肝炎、 又は HCV— RNA量が少なくとも 10 OKI U/mlの高ウィルス量を示す C型慢性肝炎] を選択することが望ましい。

また、 本発明の薬剤は、 インターフェロンとラクトフエリンの両成分を有効成 分として含有するものである。 該薬剤は、 B型慢性肝炎用、 C型慢性肝炎用、 腎 がん用、 多発性骨髄腫用として用いることが望ましい。 本発明の薬剤は、 イン夕 —フヱロン抵抗性のウィルス性疾病に対して極めて有効であることから、 投与対 象疾病として、 イン夕一フエロン抵抗性の C型慢性肝炎 [具体的には、 感染ウイ ルスの種類がゲノタイプ 1 bの HCV (C型肝炎ウィルス） である C型慢性肝炎 、 又は HCV— RNA量が少なくとも 10 OKIU/mlの高ウィルス量を示す C型慢性肝炎] を選択することが、 特に望ましい。

本発明の薬剤は、 有効成分であるラクトフエリンを薬剤 1 g当たり少なくとも lmg含むことが望ましく、 投与量は年齢、 症状等により異なるが、 ヒト体重 1 kg当たり少なくとも lmgの割合で投与され、 1日当たり 2 Omg〜l 5 g、 特に 100 mg〜 10 g投与することが望ましい。

本発明の薬剤は、 インターフェロン、 ラクトフエリン及びその他の成分を配合 し、 インターフェロン治療効果増強剤と同様の方法により、 種々の態様に製剤化 することができる。

次に、 試験例を示して本発明を詳細に説明する。 試験例 1

この試験は、 ラクトフエリンによるイン夕一フエロンの治療効果の増強作用を 調べるために行った。

( 1 ) 試料の調製

ラクトフエリン （森永乳業社製） を使用した。

( 2 ) 被験者

感染ウィルスの種類がゲノタイプ 1 bの HCV (C型肝炎ウィルス） である C 型慢性肝炎患者、 及び感染ウィルスの種類がゲノタイプ 2 aの HCV (C型肝炎 ウィルス） であり HCV— RNA量が少なくとも 100 111/!111を示す〇型 慢性肝炎患者の計 12名をイン夕一フエロン単独療法群 6名と、 イン夕一フヱロ ン及ぴラクトフエリンの併用療法群 6名の 2群に無作為に分け、 被験者とした。

( 3 ) 試験方法

前記両群とも、 ひ型イン夕一フヱロンを、 1日当たり 1000万単位 2週間連 日投与後、 週 3回の割合で計 24週間投与した。

加えて、 併用療法群のみ、 イン夕一フエロン投与中及び投与後 6ヶ月間ラクト フェリンを、 1日当たり 1. 8 gを連日経口投与した。

投与開始より経時的に採血し、 血清中のグル夕ミン酸一ピルビン酸トランスァ ミナ一ゼ （glutamic- pyruvic transaminase^ 以下、 GPTと略記することがあ る。 ） 値及び血中のウィルス量を測定した。

これらの結果から、 前記両群の治療成績を比較検討した。 尚、 イン夕一フエ口 ン治療終了後 6ヶ月の時点で、 ウィルスが排除され、 肝機能 （GPT値） が正常 化したものを治療効果著効と判定し、 イン夕一フエ口ン治療中はウィルスが検出 されなくなつたが、 イン夕一フエロン治療終了後 6ヶ月の時点で、 ウィルスが再 度検出されたが、 GPT値は正常化したものを治療効果有効と判定した。 これ以 外のものを治療効果無効と判定した。

(4) .試験結果

ラクトフエリンのィン夕ーフヱロン治療効果の増強は次のとおりである。 各療法群による治療効果の有効率は、 単独療法群が 6例中全てが無効で有効率 0%であったのに対して、 併用療法群は、 6例中 4例 （内 2例有効、 2例著効） が有効以上の治療効果を示し、 有効率 67%であった。

即ち、 ラクトフエリンによるイン夕一フエロンの治療効果の増強作用が認めら また、 この試験の結果は、 イン夕一フエロン抵抗性の症例の治療に、 ラクトフ エリンとィン夕一フエロンの併用が極めて有効であることを示している。

尚、 感染ウィルスの種類がゲノタイプ 2 aの HCV (C型肝炎ウィルス） であ り H C V— R N A量が 100 K I U/m 1未満を示す C型慢性肝炎患者 2名に対 して、 前記と同様に、 併用療法試験を行ったところ、 いずれも著効が認められた ο

次に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、 本発明は以下の実施例に 限定されるものではない。

実 施 例

実施例 1 (ゥシ ·ラクトフエリンを配合した錠剤の調製）

次の組成からなる錠剤のウィルス性慢性肝炎治療用のィン夕一フエ口ン治療効 果増強剤を次の方法により製造した。

ゥシ ·ラクトフエリン (ミライ社製） 20. 0 (%) ビフィ ドバクテリゥム■ロンガム菌末 (森永乳業社製) 15. 0 ラクチュロース （森永乳業社製） 20. 0 還元麦芽糖 （東和化成工業社製） 27. 6 甘味料 （日研化学社製） 15. 2 滑沢剤 （理研ビタミン社製） 1. 8 香料 （長谷川香料社製） 0. 4 ゥシ ·ラクトフエリン、 ビフイ ドバクテリウム ·ロンガム菌末、 ラクチュロ一 ス、 還元麦芽糖、 甘味料、 滑沢剤及び香料の混合物を常法により打錠し、 錠剤を 得た。 実施例 2 (ゥシ ·ラクトフエリンを配合した錠剤の調製）

次の組成からなる錠剤のィン夕一フエ口ン治療効果増強剤を次の方法により製 造した。

ゥシ ·ラクトフエリン (ミライ社製) 40. 0 (%) 乳糖 （森永乳業社製） 18. 5 トウモロコシ澱粉 (日清製粉社製） 30. 7 ステアリン酸マグネシウム （太平化学産業社製） 1. 4 カルボキシメチルセルロースカルシウム （五徳薬品社製） 9. 4 ゥシ ·ラクトフエリン、 乳糖、 トウモロコシ澱粉及びカルボキシメチルセル口 —スカルシウムの混合物に、 滅菌精製水を適宜添加しながら均一に混練し、 50 °Cで 3時間乾燥させ、 得られた乾燥物にステアリン酸マグネシゥムを添加して混 合し、 常法により打錠し、 錠剤を得た。

実施例 3 (ゥシ ·ラクトフエリンを配合したシロップ剤の調製）

次の組成からなるシロップ剤のィン夕一フエ口ン治療効果増強剤を常法により 製造した。

ゥシ ·ラクトフエリン (ミライ社製) 8. 0 (%) 果糖ブドウ糖液糖 （参松工業社製） 12. 4 クェン酸 （上野製薬社製） 0. 2 クェン酸ナトリウム （丸善製薬社製） 0. 2 カルボキシメチルセルロースカルシウム （五徳薬品社製） 0. 2 精製水 （大塚製薬社製） 79. 0 実施例 4 (カプセル入りゥシ ·ラクトフエリンの調製）

次のとおり、 カプセル剤のイン夕一フエ口ン治療効果増強剤を製造した。 乳糖 （和光純薬工業社製） 600 g、 トウモロコシデンプン （日清製粉社製） 400 g_s 結晶セルロース （和光純薬工業社製） 400 g及びゥシ 'ラクトフェ リン （ミライ社製） 600 gを、 50メッシュ篩 （ャマト科学社製） により篩分 けし、 厚さ 0. 5 mmのポリエチレン製の袋にとり、 転倒混合し、 全自動カプセ ル充填機 (Cesere Pedini 社製。 プレス式） を用い、 前記粉末をカプセル （日本 エランコ社製。 1号ゼラチンカプセル、 Op. Yellow No.6 Body、 空重量は 7 5 m g) に内容量 2 7 5 mgで充填し、 ラクトフエリン 8 2 m g入りのカプセル剤 7 , 0 0 0個を得た。

実施例 5 (ヒト 'ラクトフエリン散剤の調製）

次のとおり、 散剤のイン夕一フエ口ン治療効果増強剤を製造した。

予め 6号篩 （井内盛栄堂社製） で篩分けしたヒト ·ラクトフエリン粉末 （ミラ ィ社製） 1 0 0 g及び乳糖 （森永乳業社製） 5 0 0 gを乳鉢中で混和し、 これに 予め 5号篩 （井内盛栄堂社製） で篩分けした乳糖 （森永乳業社製） 4 0 0 gを添 加して混和し、 全量を再度 5号篩で篩分けし、 1包 5 gずつ分包機 （東京商会。 ◦ MP— 9 O A) により分包し、 1 0 %ヒト ·ラクトフエリン散剤 2 0 0包を得 た。 産業上の利用可能性

以上詳細に記載したとおり、 本発明は、 以下のような効果を奏するものであり 、 医薬品や健康食品等の分野に利用することができる。

( 1 ) 牛乳等の食品由来の蛋白質を主成分として含有するので、 経済的で且つ長 期間連続摂取しても副作用がほとんどない。

( 2 ) ウィルス性慢性肝炎に代表される各種疾病の治療におけるィン夕一フエ ロンの有効性を増強する作用を有する。

( 3 ) イン夕一フエ口ン抵抗性の C型慢性肝炎患者の治療に著効を有する。

Claims

請 求 の 範 囲

1 . ラクトフエリンを有効成分として含有するインターフェロン治療効果増強剤 o

2 . ラクトフエリンを有効成分として含有するウィルス性慢性肝炎治療用のイン 夕一フヱロン治療効果増強剤。

3 . インターフェロン治療効果増強剤の製造のためのラクトフエリンの使用。

4 . ウィルス性慢性肝炎治療用のィン夕ーフヱロン治療効果増強剤の製造のため のラクトフエリンの使用。

5 . インターフヱロン及びラクトフ リンを有効成分とする薬剤。

6 . B型慢性肝炎用である請求項 5記載の薬剤。

7 . C型慢性肝炎用である請求項 5記載の薬剤。

8 . 腎がん用である請求項 5記載の薬剤。

9 . 多発性骨髄腫用である請求項 5記載の薬剤。

1 0 . 請求項 5記載の薬剤の投与を含むことを特徴とする病気の治療方法。