WO2000052021A1 - Nouveaux derives du sulfofucosylacylglycerol et leur utilisation comme medicaments - Google Patents

Description

明 細 書

新規なス ルホ フ コ シルァ シル グ リ セロール誘導体および その医薬と しての用途

技術分野

本発明は、 新規なス ルホ フ コ シルァ シルダ リ セ ロ一ル誘導 体に関する。 本発明の新規なス ルホ フ コ シルァ シルダ リ セ ロ ール誘導体は、 医薬、 具体的には、 DNA 合成酵素阻害剤およ び制癌剤 と して有用である。

背景技術

藻類、 高等植物等の天然物に含まれる含硫糖脂質には、 生 理活性を有する ものがある こ と が知 られている。

例 え ば 、 太 田 ら の 文 献 (Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 46(4)， (1998) ) には、 紅藻ス ギ ノ リ カゝら得 られ る特定のス ノレホキ ノ ボシルァ シルグ リ セ ロール誘導体が、 高 等生物 DNA合成酵素 αおよび /3 の阻害活性並びに HIV 由来逆 耘写酵素阻害活性を示すこ と が記載されている。

ま た 、 ζΚ 品 ら の 文 献 (Biochemical Pharmacology, 55， 537-541, (1998) ) には、 シダ植物から得られる特定のス ル ホキノ ボシルァ シルダ リ セ ロール誘導体が、 子ゥ シ DNA合成 酵素 ひ 型およびラ ッ ト DNA 合成酵素 /3 型への阻害活性を示す が、 HIV 由来逆転写酵素活性には影饗を及ぼさ ないこ と が記 載されている。

一方、 佐原 らの文献（British Journal of Cancer, 75(3)， 324-332, (1997))には、 ゥニ体内成分から得られる スルホキ ノ ボシルモ ノ アシルグ リ セ ロール画分がイ ン . ビボおよびィ ン · ビ ト ロ で制癌作用を示すこ と が記載されている。

しカゝ しなが ら、 これら太田 ら、 水品 らおよび佐原らの何れ の文献に開示 される含硫糖脂質も、 その構成糖が Ct 一キノ ボ ー ス （ 6 —デォキシ一 ひ 一 グノレコー ス ） のものであるス ノレホ キ ノ ボシルァ シルグ リ セ ロール誘導体であ り 、 構成糖がフ コ ー ス （ 6 —デォキシガラ ク トース ） である ものは知 られてい ない。

さ らに、 特表平 5 — 5 0 1 1 0 5 号には、 スルホキノ ボシ ルジァ シルグ リ セ ロ ー ル誘導体が抗ゥイ ノレ ス活性、 具体的に は、 抗ヒ ト免疫不全ウ ィ ルス活性を有する こ と が記載されて いるが、 D N A 合成酵素阻害活性ゃ抗癌活性を有する こ と は記 載されていない。

発明の開示

そ こ で、 本発明は、 構成糖と してフ コース を有する新規な スルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体およびその医薬と しての用途を提供する こ と を 目 的 とする。

すなわち、 本発明は、 次の一般式 （ 1 ) ： H

(式中、 R _{1 0 1} は、 高級脂肪酸のァ シル残基を表 し、 R _{1 0 2} は、 水素原子又は高級脂肪酸のァ シル残基を表す。） によ り 表 される化合物を提供する。

また、 本発明は、 一般式 （ 1 ) によ り 表される化合物およ びその薬学的に許容される塩からなる群から選択される少な く と も 1 種を有効成分と して含有する医薬も提供する。

発明を実施するための最良の形態

本明細書において、 保護基の 「炭素数」 と は、 当該保護基 を非置換と してみな した場合の炭素原子の数をい う 。従って、 例えば、 R ¹ によ り 表される基が置換ア ルキル基である場合、 その炭素数と は、 当該ア ルキル基に置換する置換基の炭素原 子を含ま ない、アルキル基の骨格部分の炭素原子の数をい う。 保護基がアルキル基以外の場合について も 同様である。

まず、 本発明の一般式 （ 1 ) で表される ス ルホフ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体 （以下、 「本発明の ス ルホ フ コ シルァ シル グ リ セ ロ ール誘導体」 と もい う ） につ い て詳細に説明す る。

本発明のスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体は、 次 の一般式 （ 1 ) ：

(式中、 R ioi は、 高級脂肪酸のァ シル残基を表 し、 R ₁₀₂ は、 水素原子又は高級脂肪酸のァ シル残基を表す。） によ り 表 される ものである。

上記一般式 （ 1 ) において、 R ₁₀₁ は、 高級脂肪酸のァシ ル残基を表す。 R ₁₍)i によ り 表される高級脂肪酸のァ シル残 基を提供する脂肪酸には、 直鎖状又は分岐状の、 飽和又は不 飽和高級脂肪酸が含まれる。

本発明 のス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ーノレ誘導体を医薬 と して用いる場合、 R ₁₀₁ は、 特に、 胃癌および大腸癌等の 固形癌に対する制癌活性の観点から直鎖状飽和高級脂肪酸の ァ シル残基が好ま し く 、 CH₃ (CH₂) _nC0- (n は、 12〜 24 の整数

(好ま し く は、 12〜24 の偶数） である。） によ り 表される基 が更に好ま しい。 本発明者らは、 本発明のス ルホフ コ シルァ シル グ リ セ 口 一ル誘導体にお い て 、 R 丄 ₀ i に よ り 表 される 基 ： CH₃(CH₂)_nC0-の n の値が 24 を越えた場合にも制癌活性 があ る こ と を予測 してレ、 る。 しカゝ し なが ら 、 その よ う な長鎖 のァ シル残基を有する ス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘 導体は、 製造コ ス ト等の観点から実用的でない。

上記一般式 （ 1 ) において、 R ₁₀₂ は、 水素原子又は高級 脂肪酸のァ シル残基を表す。 高級脂肪酸のァ シル残基を提供 する脂肪酸には直鎖状又は分岐状の、 飽和又は不飽和高級脂 肪酸が含まれ、 具体的には、 R ₀ i において述べたものが含 まれる。

本発明のスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体を医薬 と して用いる場合、 R i 02 は、 特に、 胃癌および大腸癌等の 固形癌に対する制癌活性の観点から水素原子である こ と が好 ま しい。

上記一般式 （ 1 ) において、 ス ルホフ コ シ ドの糖骨格は、 舟形、 いす型のいずれの配置を も と り 得る。 しかしなが ら、 いす型の も ののほ う が、 安定性の観点から好ま しレ、。 また、 ス ルホ フ コ ース と グ リ セ ロ ール と の結合は、 _α結合であって も 3 結合であ っ て も よ い。 ま た、 グ リ セ ロ ール部分の 2 位の 炭素 （不斉炭素） における絶対配置は、 S 又は Rの何れであ つても よい。

本発明 の ス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体の製造 方法を以下に説明する。

本発明 のスノレホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体は、 次 のス キーム 1 に示す反応式に従い、 （工程 A ) 〜 （工程 J ) を 経て製造する こ と ができ る。

ス キーム 1

化合物 1 1

(工程 A ) D-ガラ ク トース の C I 炭素に結合する水酸基を _プロぺ ニ ル化する。 （工程 B ) ガラ ク トース の C 6 炭素の 水酸基を保護する。 （工程 C ) ガラ ク ト ース の C 2 、 C 3 およ び C 4 炭素に結合する水酸基を保護する。 （工程 D ) 先に保護 した 6 炭素の保護基を脱保護する。 （工程 E ) C 6 炭素に結 合する水酸基をカ ルボ二ルチオ基に変換 し得る基 （例えば、 アルキルスルホニルォキ シ基又はァ リ 一ルスノレホニノレォキシ 基）に置換する。（工程 F ) C 6 炭素をカルボ二ルチオ化する。

(工程 G ) C 1 炭素に結合する 2 —プロぺニル基をジオール 化する。 （工程 H ) 得られたジオールの両方又は 1 位の水酸基 のみを所望の高級脂肪酸によ り エス テル化する。 （工程 I ) C 6 炭素のカルボ二ルチオ基を スルホ ン酸塩化する。 （工程 J ) 得られたスルホ ン酸塩の C 2 、 C 3 および C 4 炭素の保護基 を脱保護する こ と によ り 、 塩の形態にある 、 本発明のスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体を製造する こ と ができ る。 こ の よ う に して得られた塩は、 塩酸等の酸によ る滴定に供す る こ と によ り 、 本発明のスノレホフ コ シルァ シルグ リ セ ロール 誘導体にする こ と ができ る。

上記工程 A〜 J を さ らに詳細に説明する。

工程 Aの 2 —プロぺニル化は、 ガラ ク トース と ァ リ ノレ ア ノレ コールを ト リ フルォロ メ タ ンスルホ ン酸等の強酸の存在下に、 通常、 室温から 1 0 0 °C、 好ま し く は 8 0 °C〜 9 0 °Cの温度 で、 通常、 半 日 から 2 日 間反応させる こ と によ り 行 う こ と 力 S でき る。 但 し、 反応条件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 B においては、 C 6 炭素に結合する水酸基を保護 し、 C 6 炭素に一 O R ⁶ を結合させる （こ こで、 R 6 は、 アルキ ル基又は置換シ リ ル基を表す。）。 水酸基を保護 し得る化合物 と しては、 R ⁶ によ り 表される 基がアルキル基又は置換シ リ ル基になる よ う な化合物を用い る こ と ができ る。

R ⁶ によ り 表される アルキル基には、 好ま し く はかさ高い、 置換のアルキル基が含まれる。 置換基にはメ チル基、 フエ二 ル基等が含まれる。 置換アルキル基の具体例 と しては、 t -ブ チル基、 ト リ チル基等を挙げる こ と ができ る。

R ⁶ によ り 表される基が置換シ リ ノレ基である場合、 置換シ リ ル基の置換基には、 低級アルキル基、 好ま し く は炭素数 1 〜 4 のアルキル基 （例えば、 メ チル基、 ェチル基、 イ ソプロ ピル基、 t 一ブチル基）、 およびァ リ ール基、 好ま し く は炭素 数 6 のァ リ ール基 （例えば、 フ ヱ ニル基） 等が含まれる。 R

⁶ によ り 表される置換シ リ ル基は、 好ま し く は 3 置換のシ リ ル基であ り 、 よ り 好ま し く は t ーブチルジフ エニルシ リ ル基 等が含まれる。

工程 B における水酸基の保護は、 R 6 がアルキル基である 化合物 3 を得る場合、 乾燥ピ リ ジン等の有機溶媒に溶解した 化合物 2 の溶液に、 R ⁶— Xで表される化合物 （式中、 R ⁶ は 上で規定 したアルキル基、 Xは塩素原子等のハロ ゲン原子。） を添カ卩 し、 p — ジメ チルァ ミ ノ ピ リ ジン （ D M A P ) 等の触 媒の存在下に室温で反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。 化合物 R 6— X と しては、 ト リ チルク ロ リ ドが、 製造コ ス ト 、 反応の容易性の観点から好ま し く 用い られる。

R 6 が置換シ リ ル基である化合物 3 を得る場合、 化合物 R ⁶ 一 X と して t — ブチノレジフ エ 二ルシ リ ノレク ロ リ ド等を用 レヽ、 イ ミ ダゾ一ル等の触媒の存在下、 室温で、 通常、 半 日 から 2 日 間反応 させる こ と に よ り 行 う こ と ができ る。 但し、 反応条 件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 C においては、 C 2 、 C 3 および C 4 炭素に結合する 水酸基を保護 し、 それぞれ一〇 R l、 - O R 2 および— O R ³ (こ こ で、 R ¹〜 R ³ は、 互いに独立 して、 アルキル基又は置 換シ リ ル基を表わす。）にする。これらの水酸基の保護は、 N , N — ジメ チルホ ルムア ミ ド （ D M F ) 等の有機溶媒に溶解 し た化合物 3 の、 C 2 、 C 3 および C 4 炭素に結合する水酸基 を水素化ナ ト リ ウ ム等によ り 活性化 し、 水酸基を保護 し得る 化合物を室温で反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。

水酸基を保護 し得る化合物 と しては、 ベ ンジルブ口 ミ ド、 p — メ ト キシベンジルブロ ミ ド、 t —ブチルジメ チルシ リ ノレ ク ロ リ ド、 ト リ エチノレ シ リ ノレク ロ リ ド等を用レ、る こ と ができ る。 ベンジルブロ ミ ドは、 特に、 R i ₀ i R 丄 ₀ 2 によ り 表 さ れるァ シル残基が飽和の ものである場合において保護基の安 定性の観点から好ま し く 用いる こ と ができ る。 これらの水酸 基を保護 し得る化合物を用いる場合の反応は、 それぞれの保 護基に適 した反応条件によ り 行 う こ と ができ る。

工程 Dにおける C 6 炭素に結合する保護基の脱保護は、 メ タ ノ ール等の有機溶媒に溶解 した化合物 4 の溶液を、 p — ト ルエ ン ス ルホ ン酸等の触媒の存在下に室温で、 通常、 1 2 時 間カゝら 1 日 間反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。但し、 反応条件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 E においては、 化合物 5 の C 6 炭素の水酸基に、 R ⁴、 すなわちアルキルス ノレホニル基又はァ リ一ノレスルホ二ル基を 結合させる こ と によ り 、 当該水酸基を一 O R 4 に転化 して化 合物 6 を得る。

この一 O R 4 基への転化は、 有機溶媒に溶解 した化合物 5 の溶液に、 アルキルスルホ二ル基を有する化合物又はァ リ一 ルスルホニル基を有する化合物等を添加 し、 反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。 アルキルスルホ二ル基を有する化 合物のアルキル基と しては、 好ま し く は非置換のアルキル基 であって、 よ り 好ま し く は低級アルキル基、 さ らによ り 好ま し く は炭素数 1〜 2 のアルキル基 （メ チル基、 ェチル基） 力 S 含まれる。 アルキルス ルホ 二ル基を有する化合物 と して は、 式 ： R ⁴ — X (式中、 R 4 はアルキルス ルホ二ル基を表 し、 Xはハ ロ ゲ ン原子を表す。） で表される ものを用いる こ と ができ 、その具体例を挙げる と 、メ タ ンスルホニルク 口 リ ド、 エタ ンス ルホニルク ロ リ ド等が含まれる。

一方、 ァ リ 一ルスルホ ニル基を有する化合物のァ リ ール基 と しては、 非置換又は置換のァ リ ール基であって、 好ま し く は炭素数 6 のァ リ ール基 （例えば、 フ エ ニル基） が含まれる。 置換したァ リ ール基の場合、 その置換基と しては、 p —メ チ ル基、 P — メ ト キシ基等が含まれる。 ァ リ ールス ルホニル基 を有する化合物 と して は、 式 ： R 4 " — X (式中、 R 4 " は、 ァ リ ールス ルホニル基を表 し、 X はノ、ロ ゲン原子を表す。） で 表される ものを用いる こ と ができ 、 その具体例を挙げる と p — ト ノレエ ンスノレホニノレク ロ リ ド、 p — メ ト キシベンゼ ンスノレ ホ -ルク ロ リ ドお よ びベンゼ ンス ルホニルク ロ リ ド等が含ま れる。

これ ら のァノレキノレス /レホニノレ基又はァ リ ーノレス /レホニノレ基 を有する化合物の う ち、 p — トノレエ ンス ルホニル基 （ ト シル 基） を有する も のが反応の容易性の観点から好ま しい。

工程 E の反応において、 有機溶媒と しては、 ピ リ ジン、 ジ ク ロ ロ メ タ ン等を用レ、る こ と ができ る。

上記の反応は、 必要に応 じて、 D M A P等の触媒の存在下 に室温で、 通常、 2 時間から 1 日 間で行 う こ と ができ る。 但 し、 反応条件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 F において、 化合物 6 の ス ノレ ホ ニルォキシ基 （一 O R ⁴ ) をカルボ二ルチオ基 { — S C ( = O ) R 5 (こ こ で、 R 5 は、 水素原子、 アルキル基又はァ リ ール基を表す。） } に置換 する。

こ の反応では、 有機溶媒中の化合物 6 のアルキルスルホ二 ルォキ シ基又はァ リ 一ル ス ノレホニルォキ シ基をカ ノレボニルチ ォ基に置換する こ と のでき る化合物 （以下、 「〇 一置換基— S 一置換基化合物」 と もい う 。） を反応 させる こ と によ り 化合物 7 が得られる。

O —置換基— S —置換基化合物には、 チォカルボン酸のァ ルカ リ 金属塩およびアル力 リ 土類金属塩が含まれる。 チォカ ルボ ン酸には、 チオギ酸、 並びに低級チォカ ルボン酸、 好ま し く は炭素数 1 〜 2 の脂肪族炭化水素が置換 した脂肪族チォ カルボン酸 （例えば、 チォ酢酸、 チォプロ ピオン酸）、 および 好ま し く は炭素数 6 〜 1 0 の芳香族炭化水素が置換した芳香 族チォカ ルボ ン酸 （例えば、 チォ安息香酸） 等が含まれる。 これらのチォカルボン酸と塩を形成する アル力 リ 金属には、 カ リ ウム、 ナ ト リ ウ ム等が含まれ、 ア ルカ リ 土類金属には、 マグネ シウム、 カ ノレ シゥム等が含まれる。

上記 O —置換基→ S —置換基化合物の う ち、 チォ酢酸の塩 は、 反応の安定性の点および後の工程において硫黄原子を酸 化 しやすい点から好ま し く 用いる こ と ができ る。

反応に用いる有機溶媒には、 へキサメ チル リ ン酸 ト リ ア ミ ド、 N ， N — ジメ チノレホノレム ア ミ ド、 ジメ チルス ノレホキシ ド 等が含まれる。

上記反応は、 通常、 室温ない し 1 0 0 °C前後において、 通 常、 1 時間〜 1 日 間撹拌する こ と によ り 行 う こ と ができ る。 但し、 反応条件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 Gのジォ一ル化は、 t ーブタ ノ ールおよび水等の溶媒 混液に溶解 した化合物 7 の溶液に、 四酸化ォス ミ ゥム等の酸 化剤を添加 し、 ト リ メ チルア ミ ン N —ォキシ ド等の再酸化剤 を共存させ、 室温で、 通常 1 時間〜 1 日 間反応させる こ と に よ り 行 う こ と ができ る。 但 し、 反応条件の設定によ って反応 時間は異なる。

工程 Hのエステル化反応によ り 、 所望の脂肪酸がダ リ セ ロ ール と エ ス テ ル結合 したス ノレホ フ コ シルア シノレ グ リ セ 口 一ル 誘導体を得る こ と ができ る。 こ の反応は、 ジク ロ ロ メ タ ン等 の適当 な有機溶媒に溶解 した化合物 8 の溶液に、 最終生成物 に対応する脂肪酸を添加 し、 必要に応 じて、 ェチルジメ チル ァ ミ ノ プロ ピルカルポジイ ミ ド （ E D C I ) — D M A P系等 の適当な触媒の存在下に反応させる こ と に よ り 行 う こ と がで き る

工程 Hの反応において、 添加すべき脂肪酸と しては、 上述 した一般式 （ I ) の R lOl によ り 表される ァ シル残基を有す る高級脂肪酸を用いる こ と ができ る。

工程 Hの反応によ り 、 化合物 9 において、 R 10 i および R

102 が、 添加 した高級脂肪酸のァ シル残基である本発明の— 般式 （ 1 ) で表される ジァ シルエステルと 、 R丄 0丄 のみに高 級脂肪酸のァ シル残基が結合 したモ ノ ァ シルエス テルの混合 物が得られる。 工程 Hの反応においては、 所望に応 じて、 添 加すべき 高級脂肪酸を 2 種以上用いる こ と もでき る。 こ の場 合、 R 10丄 および R i 02 が同 じァ シル残基または異なるァ シ ル残基である一般式 （ 1 ) で表される ジァ シルエステルと 、 R 101 が互いに異なるァ シル残基であるモ ノ エス テル と の混 合物が得られる。

これらのモ ノ エステルと ジエステルの混合物は、 必要に応 じて ク ロマ 卜 グラ フ ィ 一等によ り 各々 のエステルに単離 し、 次の工程 I の反応に供する こ と ができ る。

また、 所望によ り 、 上記工程 Hで得られたモ ノ エ ス テルに 対 して R 1₀ i のァ シル残基と は別のァ シル残基を有する脂肪 酸を反応させる こ と によ り 、 R ₁₀₂ と R lOl が異なるァ シル 残基である ジエステルを得る こ と もでき る。 この更なるエス テル化の反応条件は、 脂肪酸が異なる こ と 以外は、 工程 Hの もの と 同 じ条件に設定する こ と ができ る。

工程 I のスルホン酸塩化は、 酢酸および酢酸力 リ ゥ ムを用 いて緩衝 した有機溶媒中の化合物 9 の溶液に、 O X O N E ( 2 K H S 0₅、 K H S 0₄、 K ₂ S 0₄)、 等の酸化剤を添加 し、 室温で、 通常 1 2 〜 2 4 時間反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。但 し、反応条件の設定によ って反応時間は異なる。

工程 J のじ 2 〜 C 4 炭素に結合する保護基の脱保護は、 用 いた保護基および結合する高級脂肪酸のァ シル残基に合った 脱保護の方法で行 う こ と ができ る。 例えば、 保護基がベンジ ル基であ り 、 R丄 0丄 および R 02 が飽和の高級脂肪酸のァシ ル残基である場合、 エタ ノ ール等の有機溶媒に溶解 した化合 物 1 0 の溶液を、 パラ ジウム—活性炭 （ P d — C ) 等の触媒 の存在下に水素ガ ス雰囲気下に室温で反応させる こ と によ り 行 う こ と ができ る。 また、 R ₁₀₁ および R ₁₍)2 によ り 表され る高級脂肪酸のァ シル残基の少な く と も一方が不飽和の高級 脂肪酸のァ シル残基である場合には、 用いた保護基に合った 脱保護法であ り 、 なおかつ不飽和脂肪酸の二重結合を維持で き る方法によ り 行 う こ と ができ る。 例えば、 シ リ ル系の保護 基の場合は、 酸触媒 （例えば、 ト リ フルォロ酢酸） で脱保護 する こ と ができ る。

なお、 出発物質である ガラ ク トースは溶液中で ct —ァ ノ マ 一および —ァ ノ マーの構造を と り う るため、 各工程の生成 物は、 ひ 一および j3 —ァ ノ マーの混合物と なる。 これらの混 合物は、 ク ロ マ ト グラ フ ィ ーに供する こ と 等によ り 分離する こ と ができ る。 また、 工程 Aの後で結晶化させる こ と によ り α —ァ ノ マーを分離する こ と もでき る。

次に、 本発明のス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロール誘導体 およびその薬学的に許容される塩からなる群から選択される 少な く と も 1 種を有効成分と して含有する医薬について説明 する。

本発明の ス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体には、 フ コ ース と グ リ セ ロ ールの結合が _α 結合又は /3 結合である異 性体、 グ リ セ ロ ールの C 2 炭素 （不斉炭素） における異性体 等が含まれる。 本発明の医薬は、 その活性に悪影響を及ぼさ ない限 り 、 これらの異性体を単独で含有する こ と も、 2種以 上の異性体の混合物を含有する こ と もでき る。

本発明において、 医薬と しての用途には、 D N A 合成酵素阻 害剤および制癌剤が含まれる。

本発明の医薬において用い得る薬学的に許容される塩には、 例えば、 ナ ト リ ゥムおよび力 リ ゥムのよ う な一価の陽イ オン の塩が含まれるが、これら に限定される も のではない。以下、 本発明のスルホフ コ シルァ シルグ リ セ ロール誘導体およびそ の薬学的に許容される塩からなる群の化合物を 「本発明の医 薬活性物質」 と も い う 。

本発明の医薬活性物質は、 例えば、 経口投与、 非経口投与 する こ と ができ る。 本発明の医薬活性物質は、 これらの投与 経路に応 じて、 適切な薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤 等 と組み合わせる こ と によ り 薬学的製剤にする こ と ができ る。

経口投与に適 した剤型と しては、 固体、 半固体、 液体又は 気体等の状態の も のが含まれ、 具体的には、 錠剤、 カプセル 剤、 粉末剤、 顆粒剤、 溶液剤、 懸濁剤、 シロ ップ剤、 エ リ キ シル剤等を挙げる こ と ができ るが、 これらに限定される もの ではない。 本発明の医薬活性物質を錠剤、 カ プセル剤、 粉末剤、 顆粒 剤、 溶液剤、 懸濁剤等に製剤化するためには、 それ自 体は既 知の方法を用いて、 本発明の医薬活性物質をバイ ンダー、 錠 剤崩壊剤、 潤滑剤等 と 混合 し、 さ らに、 必要に応 じて、 希釈 剤、 緩衝剤、 浸潤剤、 保存剤、 フ レーバー剤等と 混合する こ と によ り 行 う こ と ができ る。 一例を挙げる と 、 上記バイ ンダ —には、 結晶セノレ ロ ー ス 、 セノレ 口 一 ス誘導体、 コ ー ンス タ 一 チ、 ゼラチン等が、 錠剤崩壊剤には、 コーンス ターチ、 馬鈴 薯デンプン、 カ ルボキ シメ チルセル ロ ースナ ト リ ゥム等が、 潤滑剤には、タルク 、ステア リ ン酸マグネシウム等が含まれ、 さ ら には、 ラ タ トース 、 マ ンニ トール等の よ う な従来用い ら れている添加剤等を用いる こ と ができ る。

また、 本発明の医薬活性物質は、 液体、 微細粉末の形態の ものを、 気体又は液体の噴霧剤 と共に、 又は必要に応 じて浸 潤性付与剤のよ う な既知の助剤 と 共に、 エア 口 ゾル容器、 ネ ブライ ザ一のよ う な非加圧容器に充填 し、 エア ロ ゾル剤又は 吸入剤の形態で投与する こ と もでき る。 噴霧剤 と しては、 ジ ク ロ 口 フルォロ メ タ ン、 プロ ノ ン、 窒素等の加圧ガス を用い る こ と ができ る。

本発明の医薬活性物質を非経口投与する場合、 例えば、 直 腸投与および注射等によ り 投与する こ と ができ る。

直腸投与には、例えば、坐薬と して投与する こ と ができ る。 坐薬は、 それ自 体は既知の方法によ り 、 本発明の医薬活性物 質を、体温で融解するが室温では固化 しているカカオバター、 カ ーボ ン ワ ッ ク ス 、 ポ リ エチ レ ン ダ リ コ ールの よ う な賦形剤 と混合 し、 成形する こ と によ り 製剤化する こ と ができ る。 注射によ る投与と しては、 皮下、 皮内、 静脈内、 筋肉内等 に投与する こ と ができ る。 これらの注射用製剤は、 それ自 体 は既知の方法によ り 、 本発明の医薬活性物質を、 植物性油、 合成脂肪酸グ リ セ リ ド、 高級脂肪酸のエステル、 プロ ピ レン ダ リ コールのよ う な水性又は非水性の溶媒中に溶解、 懸濁又 は乳化 し、 さ らに、 所望によ り 、 可溶化剤、 浸透圧調節剤、 乳化剤、 安定剤および保存料の よ う な従来用いられている添 加剤 と 共に製剤化する こ と ができ る。

本発明の医薬活性物質を溶液、 懸濁液、 シロ ップ、 エ リ キ シル等の形態にするためには、 注射用滅菌水や規定生理食塩 水のよ う な薬学的に許容される溶媒を用いる こ と ができ る。

本発明の医薬活性物質は、 薬学的に許容 される他の活性を 有する化合物 と 併用 して薬学的製剤 とする こ と もでき る。

本発明の医薬活性物質の投与量は、 投与形態、 投与経路、 対象 とする疾病の程度や段階等に応 じて適宜設定、 調節する こ と ができ る。 一例を挙げる と 、 経口投与する場合は、 医薬 活性物質と して、 1 〜 1 0 m g / k g体重/日 、 注射剤 と して投与す る場合は、 医薬活性物質と して、 1〜 5 m g / k g体重/日 、 直腸投 与する場合は、 医薬活性物質と して、 1〜 5 m g / k g 体重/日 に設 定する こ と ができ るが、 これらに限定される ものではない。

本発明の医薬活性物質を制癌剤 と して用いる場合、 本発明 の医薬活性物質が効果を奏する こ と のでき る癌には、 悪性腫 瘍と しての性質を有する ものが含まれ、 例えば、 ヒ ト を含む ほ乳類の腺癌、 上皮癌、 肉腫、 神経膠腫、 黒色腫、 リ ンパ腫 等のよ う な固形癌、 および白血病等のよ う な液性癌がある。 実施例

以下、 本発明を例を挙げて説明する。 しか しなが ら、 本発 明は、 これらの例に限定される ものではない。

合成例

本発明のス ルホ フ コ シルァ シル グ リ セ ロ ール誘導体の製造 工程を、 ス ルホ フ コ シルァ シル グ リ セ ロ ール α誘導体を例に あげて次のスキーム 2 に示す。

ス キーム 2

反応条件

a; ァリルアルコール、 トリフルォロメタンスルホン酸、 90°C

b; ピリジン、 トリチルク口リ ド、 p -ジメチルァミノピリジン (D AP)、 室温

c;水素化ナトリゥム、 ベンジルブ口ミ ド、 Ν,Ν-ジメチルホルムアミ ド、 室温 d; メタノール、 p-トルエンスルホン酸一水和物、 室温

e; ピリジン、 P-トルエンスルホニルクロリ ド、 DMAP、 室温

f,エタノール、 チォ酢酸力リゥム、 還流

g; t -ブタノ一ル、 水、 四酸化オスミウム、 トリメチルァミン N-ォキシドニ水和物、 室温 h; ジクロロメタン、 脂肪酸、 DMAP,

1 -ェチル- 3- (3 -ジメチルァミノプロピル) -カルポジイミ ド塩酸塩、 室温

i;酢酸、 鲊酸カリゥム、 0X0NE、 室温

j;エタノール、 パラジウム-炭素、 水素、 室温 上記ス キーム 2 では、 工程 h に よ り 得られるモ ノ エ ステル と ジエ ス テルの混合物は、ク ロマ ト グラ フ ィ 一によ り 分離 し、 各々 のエス テルを工程 i に供する こ と ができ る。

<例 1 〉

経路 a ； 1— 0— (2 プロぺニノレ）— α— D—ガラ ク トース （II)

D—ガラ ク ト ー ス （ I ) 50.0g (278mmol)をァ リ ノレ ア ノレコー ル 140mL に加え十分に溶解 し、 その溶液に氷冷下にて ト リ フ ルォロ メ タ ンス ルホ ン酸 0.5mL を徐々 に添加 した。 その後油 浴下 80°Cで撹拌 しなが ら 24 時間反応させた。 反応が十分進 行 した段階で ト リ エチルア ミ ン 1. OmL で中和 した後、 減圧濃 縮 し、 シ リ 力 ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ ー （ク ロ ロ ホ ル ム ： メ タ ノ ー ノレ = 6 : 1→5 ： 1—4 : 1)で精製 し、 淡黄色油 状物質を得た。 これを熱エタ ノ ールに溶解 し、 冷却する こ と に よ り 結晶 化 さ せ て 、 無色針状結晶 を 得た （収 量 16.6g 75.5隱 1、 収率 27.2%)

融点 ； 145〜 148°C。 [ a ]D= + 172.2° (c 0.97、 CHCI3)

経路 b ; 1—0— (2 プロぺニル）—6-0—ト リ フエニルメ チノレ— α - D - ガラ ク トース （III)

化合物 （II) 11. lg (50.2mmol)を乾燥ピ リ ジン 50mL に溶解 し、 その溶液に ト リ チルク ロ リ ド 16.8g (60.2mmol)、 p-ジメ チノレア ミ ノ ピ リ ジン (DMAP) 614mg ( 5.02mmo 1 )を添カロ し、 撹 拌 しなが ら 40°Cで 24 時間反応 した。 その後冷水 1 OOmL をカロ えて反応を停止 し、 酢酸ェチルで抽出 （200mLX3 回） し、 有機 層を合わせて 1.0N 塩酸で pH 4 まで中和 し、 飽和食塩水で洗 浄（200mLX2 回）後、 無水硫酸ナ ト リ ウムで乾燥、 濾過、 減圧 濃縮 し、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ ー （ク ロ 口 ホ ルム ： メ タ ノ ール = 20 : 1→ 15 ： 1)で精製 し、 淡黄色油状 物質を得た （収量 21.3g 46. lmmol、 収率 91.8% )

[ ひ ] D= + 64.2° (c 1.48、 CHCI3)

経路 c ； 2, 3, 4— ト リ 一 0—べンジノレ一 1—0—（2一プロぺニノレ ） ー6_0一 ト リ フ エ ニ ノレ メ チノレ - ひ — D—ガラ ク ト ー ス （IV)

ミ ネラルオイ ル中に拡散されている 60% 水素化ナ ト リ ウ ム 1.81g (45.2mmol)を反応器に取 り 、 乾燥へキサン 50mL で よ く 洗浄 した後へキサンを取 り 除き 、 乾燥 N， N-ジメ チルホ ノレムア ミ ド 40mL に溶角 したィ匕合物 (III) 5.24g (11.3mmol) を氷冷下にて徐 々 に添加 し、 15 分後室温に戻 し、 撹拌 しなが ら 1 時間反応 した。

次に再び氷冷下にてベンジルブロ ミ ド 7.73g (45.2mmol) を徐々 に添加 し、 15 分後室温に戻 し、 撹拌 しなが ら 4 時間反 応 した。 その後メ タ ノ ール 20mし、 冷水 100mし を加えて反応を 停止 し、 酢酸ェチルで抽出 （150mL X 3 回） し、 有機層を合わせ て飽和食塩水で洗浄（200mL X 2 回）後、 無水硫酸ナ ト リ ゥムで 乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー （へキサ ン ： 酢酸.ェチル = 10 : 1)で精製 し、 無色針 状結晶を得た （収量 5. 97g 8. 15mmol、 収率 72. 1% )

融点 ； 117〜 119。C。 [ ct ] D= + 32. 0° (c 1. 00、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm^{- 1}) ； 3070 & 3010 (Ar) 、 1945 & 1860 & 1810 (一置換 Ar)、 1640 (末端二重結合）、 1595 & 1585 & 1490 (Ar)、 1110〜 980 (CO) , 900 840 ( ct -へキ ソース）

½ 匪 R (300MHz, CDCI3 + TMS, δ ) ； 7. 41 ~ 7. 08 (30H、 m、 Ar)、 5. 99- 5. 88 (1H、 m、 -CH = CH2) . 5. 31 (1H、 d、 J= 17. 2、 -CH = CH_2) , 5. 21 (1H、 d、 J= 10. 7, - CH = C¾)、 4. 87 (1H、 d、 J= 12. 3、 Ar-CH_2) , 4. 85 (1H、 d、 J= 4. 5、 H_l)、 4. 82 (1H、 d、 J= 11. 9、 Ar-CH2) , 4. 79 (1H、 d、 J= 11. 8、 Ar-CH.2) 4. 72 (1H、 d、 J= 11. 8、 Ar-CH.2) , 4. 57 (1H、 d、 J= 11. 9、 Ar_(¾) 、 4. 46 (1H、 d、 J= 11. 3、 Ar -^)、 4. 16 (1H、 ddd、 J= 1. 1 & 5. 3 & 12. 9、 -0-CH.2-CH = CH2) , 4. 04 (1H、 ddd、 J= 0. 9 & 6. 6 & 12. 9、 -0_C _2 - CH二 CH2) 、 4. 00〜 3. 94 (2H、 m、 H - 2 & H - 3) 、 3. 91 (1H、 br s、 H - 4)、 3. 85 (1H、 t、 J= 6. 2、 H - 5)、 3. 40 (1H、 dd、 J= 6. 2 & 9. 3、 H - 6 a)、 3. 11 (1H、 dd、 J= 6. 6 & 9. 0 、 H-6 b)

(IV )

経路 d ; 2, 3, 4— ト リ ー 0—ベ ンジノレ一 1一 0— (2—プロぺニノレ）—ひ一 D— ガラ ク ト 一ス （ V )

化合物 （IV) 4. 89g (6. 68mmol)を酢酸 ： メ タ ノ 一ノレ = 1 : 1 溶液 60mL に懸濁 し、 p- ト ルエ ン ス ルホ ン酸一水和物 1. 27g (6. 68mmol)を添加 し、 はげ し く 撹拌 しなが ら溶解させた （反 応時間 1 時間）。 その後冷 5N 水酸化ナ ト リ ゥム水溶液 1 OOmL を加えて反応を停止 し、 酢酸ェチルで抽出 （200mL X 3 回） し、 有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄（200mL X 2 回）後、 無水硫 酸ナ ト リ ウムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロマ ト グラ フ ィ ー （へキサン ： 酢酸ェチノレ = 6 : 1→4 ： 1— 2 : 1)で精製 し、無色透明油状物質を得た （3. Ilg 6. 34mmol、 収率 94. 9% )

[ α ] D= + 23.0° (c 1. 13、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm"¹) ； 3400 (OH)、 3070 & 3000 (Ar)、 1950 & 1870 & 1810 (—置換 Ar)、 1630 (末端二重結合）、 1585 & 1495 (Ar)、 1140〜 980 (CO)、 910 & 830 ( α -へキ ソー ス ） lH 隱 (300MHz, CDCl3 + TMS、 δ ) ； 7.63〜 7.24 (15Η、 m、 Ar) , 5.93〜 5.87 (1Η、 m、 -CH = CH2) , 5. 30 (1Η、 d、 J= 17.2、 - CH=CH2)、 5. 20 (1H、 d、 J= 10. 3、 - CH二 CH2)、 4. 98 (1H、 d、 J= 11.6、 Ar- Cfi2)、 4.91 (1H、 d、 J= 3. 5、 H- 1)、 4.91 (1H、 d、 J= 11.6、 Ar - C ）、 4.83 (1H、 d、 J= 12.0、 Ar-CH?) , 4. 76 (1H、 d、 J= 11. 7、 Ar-CH_2) , 4. 68 (1H、 d、 J= 12.9、 Ar-CH?.) 4.64 (1H、 d、 J= 11.9, Ar-CH.2) , 4. 17- 3.96 (4H、 tn、 H - 2 & H-3 & _0- C i2一 CH = CH2) 、 3. 96 (1H、 br s、 H- 4) 、 3. 79 (1Hゝ t、 J= 5. 7、 H-5)、 3. 70 (1H、 dd、 J=l 1. 0 & 6.4、 H-6 a)、 3.49 (1H、 br、 H-6 b)

経 路 e ； 2, 3, 4- ト リ —0— ベ ン ジ ノレ — 1— 0— (2— プ 口 ぺ ニ ノレ） — 6— 0— (4—ト リ ノレ ス ノレ ホ ニ ノレ ） — a — D—ガラ ク ト 一 ス （VI)

ィ匕合物 （V ) 3. 06g (6. 25mmol)を乾燥ピ リ ジン 50mL に溶 解 し、 DMAP 76.4mg (625 μ mol)、 p— ト ノレエ ンス ノレホ ニルク ロ リ ド 1. 79g (9. 38mmol)を添加 し、 撹拌 しなが ら室温で一晚反 応 した。 その後、 冷水 200mL を加えて反応を停止 し、 酢酸ェ チルで抽出 （200mL X 3 回） し、 有機層を合わせて 1. ON および 0. 1N 塩酸で pH 4 まで中和 し、 飽和食塩水で洗浄（200mL X 2 回）後、 無水硫酸ナ ト リ ウ ムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲノレフ ラ ッ シ ュ ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー （へキサ ン ： 酢酸ェ チル = 4 ： 1)で精製 し、 無色透明油状物質を得た （収量 3. 78g 5.88mmol、 収率 94. 1% )

[ ct ] D= + 35. 2° (c 1. 05、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm—¹) ； 3070 & 3010 (Ar)、 1950 & 1870 & 1800 (—置換 Ar)、 1640 (末端二重結合）、 1595 & 1495 (Ar)、 1150 〜 950 (CO)、 950 & 850 ( ct -へキ ソ一ス）。

½隨 R (300MHz, CDCI3 + TMS, 6 ) ； 7. 72 (2H、 d、 J= 8.3、 Ts Me 側の H)、 7. 37〜 7· 24 (15Η、 m、 Ar) , 7. 19〜 7. 16 (2H、 m、 Ts S02 側の H)、 5.93〜 5.82 (1H、 m、 -CH = CH2)、 5. 28 (1H、 dd、 J= 1. 5 & 17. 2、 -CH = CH2)、 5. 19 (lH、 dd、 J= 1.2 & 10. 3、 -CH = CH2_) ^ 4.92 (1H、 d、 J= 11. 3、 Ar-CH.2) ^ 4.86 (1H、 d、 1= 11. 7, Ar-CH2) , 4· 80 (1Η、 d、 J= 2.9、 H- 1)、 4. 78 (1H、 d、 J= 11. 8、 Ar-CH.2) 4. 75 (1H、 d、 J= 11. 7、 Ar-CH?) , 4.64 (1H、 d、 J= 12. 0、 Ar - C ）、 4.45 (1H、 d、 J= 11. 3、 Ar- (¾)、 4. 10〜 3.86 (8H、 m、 -0-CH_2-CH = CH2 & H - 2 & H - 3 & H - 4 & H - 5 & H-6 a, b)、 2. 1 (3H、 s、 Ts CH3)

経路 f ; 2， 3, 4— ト リ 一 0一ペン ジノレー 1— 0— (2—プロぺニノレ ） — 6—デ才 キ シ- 6-ァセチルチオ- a -D-ガラ ク ト ース （VII)

ィ匕合物 （VI) 3. 10g (5. 66mmol)をへキサメ チル リ ン酸 ト リ ア ミ ド 24mL に溶解 し、 チォ酢酸カ リ ウム 1. 29g (11. 3mmol) を添加 し、 その後油浴下 100〜 110°Cで撹拌 しなが ら 3 時間反 応 した。 その後、 冷水 lOOmL を加えて反応を停止 し、 酢酸ェ チルで抽出 （150mL X 3 回） し、 有機層を合わせて飽和食塩水で 洗浄（200mL X 2 回）後、 無水硫酸ナ ト リ ウムで乾燥、 濾過、 減 圧濃縮 し、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ ー （へキ サン ： 酢酸ェチル = 10 : 1→ 8 ： 1)で精製 し、 褐色油状物質を 得た （収量 2. 42g 4. 41mmol、 収率 77.9% )

[ α ] D= + 36.8° (c 0.95、 CHCI3) 一 1

IR (CHCl3、 cm ^l) ； 3050 & 3010 (Ar)、 1940 & 1860 & 1800 一置換 Ar)、 1670 (SCOCH3) , 1595 & 1575 & 1495 (Ar)、 1150

- 900 (CO)、 840 ( ひ 一へキ ソース）

1

H NMR (300MHz, CDCl3 + TMS_s δ ) ； 7. 56— 7.22 (15H、 m、

Ar) , 5.91 (1H、 m、 一 CM = CH2)、 5. 30 ( 1 H、 d、 J = 17. 2、 一 CH = Cy_2)、 5.20 (1H、 d、 J= 10. 3, - CH = C ）、 5. 03— 4. 59 (7H、 m、 Ar-CH.2 & H - 1)、 4. 19〜 4. 13 (1H、 m、 -0-C|i2 - CH2)、 4. 07〜 3.92 (3H、 m、 -0-CH.2-CH = CH2 & H - 2 & H - 3)、 3.89 (1H、 br s、 H - 4)、 3. 76— 3. 71 (1H、 m、 H - 5)、 3.02— 2.97 (2H、 m、 H~6 a, b)、 2.29 (3H、 s、 SCOCH3)

経路 g ； 3一 0— (2, 3， 4一 卜 リ ー 0—べンジノレ一 6—デォキシ— 6一ァセチ ノレチォ— α — D—ガラ ク ト ビラ ノ シノレ） -グ リ セ ロ ー ノレ （VIII) ィ匕合物 （VII) 2. 36g (4. 31mmol)を t—ブタ ノ ーノレ ： 水 = 4 ： 1 溶液 20mL に溶解 し、 ト リ メ チルァ ミ ン N-ォキシ ドニ水和 物 1. 08g (9.48mmol)、 四酸化オス ミ ウム- 1 -ブタ ノ ール溶液 (0.05M) 5mL を添加 し、撹拌 しなが ら室温で 24 時間反応 した。 その後活性炭 2g を加え、撹拌 しなが ら室温で 1 時間放置 し、 四酸化オス ミ ウムを吸着させた後、 吸引濾過 した。 次に冷水 300mL を力□えて反応を停止 し、 酢酸ェチルで抽出 （200mL X 3 回） し、 有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄（200mLX 2 回）後、 無水硫酸ナ ト リ ウムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲル フ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ ー（へキサン ： 酢酸ェチノレ = 1 : 1)で精製 し、 淡褐色油状物質を得た （収量 2. 22g 3. 81mraol, 収率 88. 3% )

[ ひ ] D= + 27. 8° (c 1. 08、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm"¹) ； 3300 (OH)、 3060 & 3020 (Ar)、 1950 & 1870 & 1810 (—置換 Ar)、 1670 ( SCOCH3 )、 1600 & 1580 & 1495

(Ar)、 1100~ 940 (CO)、 910 & 850 ( α -へキ ソー ス ）

1

H NMR (300MHz, CDCI3 + TMS, δ ) ； 7. 41— 7. 24 (15H、 m、

Ar)、 5.00 (1H、 d、 J= 11.4、 Ar-CH_2) , 4.84〜 4.67 ( 4H、 m、 Ar - C & H - 1)、 4. 65 (1H、 d、 J= 11.9、 Ar - C 2)、 4. 60 (1H、 d、 J= 11.4, Ar-CH.2) , 4.05 - 3. 39 ( 9H、 m、 Gly-la, b & Gly - 2 & Gly- 3a， b & H- 2 & H - 3 & H - 4 & H - 5) 3. 03 (1H、 dd、 J = 7.6 & 13. 7、 H - 6 a)、 2. 93 (1H、 ddd、 J= 1.2 & 5.8 & 13. 5、 H-6 b)、 2. 30 (3H、 s、 SCOCH3)

経路 h ； 3— 0— (2, 3, 4— 卜 リ ー 0—べンジノレ一 6—デォキシー 6—ァセチ ノレチォ—ひ — D—ガラ ク ト ビラ ノ シノレ ） — 1， 2—ジ— 0—ノ、。 ノレ ミ ト イ ノレ —ク" リ セ ロ ーノレ （IX— 1)お よび 3— 0— (2, 3， 4一 ト リ ー 0—ベンジノレ - 6-デ ォ キ シ - 6-ァ セ チ ノレ チ ォ - ひ - D-ガ ラ ク ト ピ ラ ノ シ ノレ） 一 1—0—ノヽ。 ノレ ミ トイノレ一グ リ セ 口 一 ノレ （IX— 2) 化合物 （VII I) 558mg (958 μ mo 1 ) を乾燥ジク ロ ロ メ タ ン 30mL に溶解 し、 1-ェチル -3- (3-ジメ チルァ ミ ノ プロ ピノレ ） - カ ノレボ ジ イ ミ ド塩酸塩 312mg (1. 63mmol) 、 DMAP 11. 7mg (95. 8 mol) , ノ、。ノレ ミ チン酸 368mg (1. 44mmol)を添力 Q し、 撹拌 しな が ら室温にて 3 時間反応 した。 その後ジク ロ ロ メ タ ン 1 OOmL を加え反応を停止 し、 飽和食塩水で洗浄（lOOmL X 1 回） し、 無 水硫酸ナ ト リ ウムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ 一（へキサン ： 齚酸ェチノレ = 10 : 1 — 4 ： 1-→ 2 ： 1)で精製 した （収量ジエ ス テ ル 340mg 321 mo 1 ； モ ノ エ ス テル 468mg 571 _μ mol、 収率（双方合わせて） 93. 1 % )

〇ジエ ス テル体 ； 白濁 した油状物質

[ α ] D二 + 24. 5° (c 0. 94、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm"¹) ； 1730 (0C0CH2)、 1680 (SC0CH3)、 1495 (Ar)、 1135- 1020 (CO)、 905 & 835 ( α -へキ ソ ー ス ） lH NMR (300MHz, CDCl3 + TMS、 δ ) ； 7. 40~ 7. 24 (15Η、 m、 Ar) 、 5. 28〜 5. 23 (1Η、 m、 Gly - 2)、 5. 00 (1H、 d、 J= 11. 4、 Ar-CH.2) , 4. 88- 4. 72 ( 4H、 m、 Ar— C^J^ & H - 1 )、 4. 67〜 4. 59 (2H、 m、 Ar-CH.2) 、 4. 39- 4. 32 (1H、 m、 Gly- l a) 、 4. 23- 4. 14 (1H、 m、 Gly - 1 b) 、 4. 04— 3. 99 (1H、 m、 H - 2)、 3. 89— 3. 87 (2H、 m、 H - 3 & H - 4)、 3. 80〜 3. 72 (1H、 _m、 Gly- la)、 3. 67 (1H、 t、 J= 6. 7、 H-5)、 3. 58〜 3. 48 (lH、 m、 Gly-lb)、 3. 07〜 2. 91 (2H、 m、 H-6 a, b)、 2. 36~ 2. 24 (7H、 m、 SC0C{i & 0C0C ）、 1. 62 〜 1. 58 (4H、 m、 OCOCH2CH.2) , 1. 25 (48H、 br、 - C 2 -）、 0. 86 (6H、 t、 J= 6. 4、 CH3)

〇モ ノ エ ス テル体 ； 無色透明油状物質 [ a ] D= + 32. 9° (c 0. 96、 CHC I 3)

IR (CHC I 3 , cm"¹)； 3400 (OH)、 1730 (OCOCH2) > 1690 (SCOCH3) , 1490 (Ar)、 1160〜 970 (CO)、 910 & 840 ( ct -へキ ソー ス ） lH NMR (300MHz, CDC I 3 + TMS, δ ) ； 7. 41— 7. 25 (15H、 m、 Ar)、 5. 01 (1H、 d、 J= 11. 3、 Ar-CH_2_) 4. 86〜 4. 64 ( 5H、 m、 Ar - Cii & H - 1)、 4. 61 (1H、 d、 J= 11. 4、 Ar-CH.2_) > 4. 18〜 3. 40 (9H、 m、 Gly-la, b & Gly - 2 & Gly - 3a， b & H- 2 & H - 3 & H - 4 & H - 5)、 3. 07〜 2. 90 (2H、 m、 H - 6 a， b)、 2. 36— 2. 31 (5H、 m、 SC0C i & OCOC!i?.) 、 1. 64〜 1. 58 (2H、 m、 OCOCH2CH.2)、 1. 25 (24H、 br、 -CH.2-) , 0. 88 (3H、 t、 J= 6. 2、 CH3)

H) 経路 i— 1 ； 3— 0—（2, 3， 4— ト リ _0—ペ ン ジノレー 6 デ才キシー 6ース ノレ ホ— ct — D—ガラ ク ト ビラ ノ シノレ ） — 1， 2—ジ 0-ノ ノレ ミ ト イ ノレ —グ リ セ ロール ナ ト リ ウム塩 （X - 1)

ィ匕合物 （IX— 1) 303mg (286 mol)を醉酸 20mL に溶角 し、 酢酸力 リ ウム 500mg、 0X0NE (2KHSO5 , KHS04、 K2SO4) 527mg を添加 し、 撹拌 しなが ら室温にてー晚反応 した。 その後冷 3N 水酸化ナ ト リ ゥム水溶液 lOOmL を加えて反応を停止 し、 酢酸 ェチルで抽出（100mL X 3 回） し、 有機層を合わせて飽和炭酸水 素ナ ト リ ゥ ム溶液（50mL X 1)で中和後、 飽和食塩水（lOOmL X 2 回）で洗浄 し、 無水硫酸ナ ト リ ウ ムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シ ュ ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー （ク ロ 口 ホル ム 100%— ク ロ 口 ホルム ： メ タ ノ ール = 10 : 1)で精製 し、 無 色透明油状物質を得た （収量 257mg 237 μ mol, 収率 82. 9% ) [ ひ ] D= + 48. 5° (c 1.01、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm—¹) ； 1720 (0C0CH2)、 1490 (Ar)、 1160〜 990 (CO)

²H 隠 (300MHz, CDCI3+TMS, δ ) ； 7. 25 (15H、 m、 Ar)、 5. 25 (1H、 br、 Gly- 2) 、 4.91— 2. 96 (4H、 br m、 Ar - C & H- 1

& Gly - 1 a， b & Gly - 3 a, b & H - 2 & H - 3 & H - 4 & H - 5 & H - 6a， b)、 2. 21〜 2. 18 (4H、 br、 OCOCH2)、 1. 49 (4H、 br、 OCOCH2CH2)、

1. 25 (48H、 br、 0. 88 (6H、 t、 J= 6. 5、 CH3)

経路 i一 2 ; 3— 0— (2， 3, 4— 卜 リ ー 0一べンジノレ一 6ーデォキ シ— 6ース ノレホ—ひ — D—ガ ラ ク ト ビ ラ ノ シノレ ） — 1—0—ノ、。 ノレ ミ ト イ ノレ —グ リ セ ロ ール ナ ト リ ウ ム塩 （ X - 2)

ィ匕合物 （IX— 2) 430mg (524 / mol)を醉酸 20mL に溶角 ¥ し、 酢酸力 リ ウム 500mg、 0X0NE (2KHS05、 KHSO K2SO4) 966mg を添加 し、 撹拌 しなが ら室温にて一晩反応 した。 その後冷 3N 水酸化ナ ト リ ゥ ム水溶液 lOOmL を加えて反応を停止 し、 酢酸 ェチルで抽出 （100mLX 3 回） し、 有機層を合わせて飽和炭酸水 素ナ ト リ ゥム溶液（50mL X 1)で中和後、 飽和食塩水（100mL X 2 回）で洗浄 し、 無水硫酸ナ ト リ ウ ムで乾燥、 濾過、 減圧濃縮 し、 シ リ カ ゲノレ フ ラ ッ シ ュ ク ロ マ ト グ ラ フ ィ 一 （ク ロ ロ ホノレ ム 100%— ク ロ 口 ホルム ： メ タ ノ ーノレ = 5 : 1)で精製し、 無色 透明油状物質を得た （442mg 521 mo 1、 収率 99.4% )

[ α ] D= + 57. 3° (c 0· 89、 CHCI3)

IR (CHCl3、 cm—¹) ； 3400 (OH)、 1720 (OCOCH2) > 1490 (Ar)、 1200〜 1020 (CO) ₀ lU NMR (300MHz, CDCI3 + T S, 8 ) ； 7. 29— 7. 22 (15H、 br、 Ar) _Λ 4. 90〜 4. 45 (7H、 br m、 Ar - Cy_2 & H- 1)、 4. 13〜 3. 58 (9H、 br m、 Gly-1 a, b & Gly - 2 & Gly - 3a， b & H_2 & H - 3 & H - 4

& H - 5) 、 3. 38 (1H、 br、 H - 6a)、 3. 08 (2H、 br, H- 6 a)、 2. 16

(2H、 br、 OCOCH2) , 1.45 (2H、 br、 OCOCH2CH2) , 1.24 (24H、 br、 -CH.2-) , 0.88 (3H、 t、 J= 6. 5、 CH3)

(X - 1 ： R₁₀₁=R₁₀₂二パル , .

X- 2 ： R₁₀₁ =パルミ トイル、 Ri02⁼H) 経路 j- 1 ； 3-0- (6-デォキシ -6-ス ノレホ - c -D-ガラ ク ト ビラ ノ シ ノレ ）— 1 , 2 ジ— 0—ノ、。 ノレ ミ ト イ ル―グ リ セ ロ ー ノレ ナ ト リ ゥ ム塩 (XI - 1) 化合物 （X— 1) 227mg (209 μ mol)をエタ ノ ール 20mL に溶 解 し、 10%パラ ジウム -炭素 （Pd- C) l. OOg を添加 し、 フ ラ ス コ内を水素で置換 し、 撹拌 しなが ら室温で一晩反応 した。 反 応液を吸引濾過 し、 減圧濃縮後、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー （ク ロ ロ ホ ノレム ： メ タ ノ ーノレ = 10 : 1→ 7 ： 3→ ク ロ ロ ホ ノレム ： メ タ ノ ール ： 水 = 70 : 30 : 4)で精製し、 白色 非結晶状固形物質を得た （収量 l l lmg 136 μ mol、 収率 65. 1 % ) lH NMR (300MHz, CDC 13 + CD3 OD + D 20 + TMS , δ ) ； 5. 30〜 5. 28 (1H、 m、 Gly - 2) 、 4. 83 (1H、 d、 J= 3. 3、 H - 1) 、 4. 36〜 4. 11 (3H、 m、 Gly - 3a， b & H- 2) 、 、 4. 05 (1H、 br s、 H - 4) 、 3. 98〜 3. 90 (1H、 m、 H- 3)、 3. 82~ 3. 78 (1H、 m、 Gly la) 、 3. 75— 3. 71 (1H、 m、 Gly - 3b) 、 3. 65〜 3. 55 (1H、 m、 H - 5) 、 3. 22 (1H、 dd、 J= 6. 6 & 13. 9、 H - 6 a) 、 3. 10〜 3. 06 (1H、 m、 H - 6 b) 、 2. 37〜 2. 29 (4H、 m、 OCOCH2) 1. 59 (4H、 br、 OCOCH2CH.2) 1. 26 (48H、 br、 -CH2-) , 0. 88 (6H、 t、 J= 6. 7、 CH3) 経路 j- 2 ； 3-0- (6-デォキシ- 6-ス ノレホ- _α - D-ガラ ク ト ビラ ノ シル）—1— 0—パノレ ミ ト イ ノレ—グ リ セ ロ ールナ ト リ ゥム塩（XI - 2) ィ匕合物 ( X -2) 442mg ( 521 mo 1 )をエタ ノ ーノレ 20mL に溶 解 し、 10%Pd- C 1. 00g を添加 し、 フラ ス コ 内を水素で置換 し、 撹拌 しなが ら室温で一晩反応 した。 反応液を吸引濾過 し、 減 圧濃縮後、 シ リ カ ゲルフ ラ ッ シュ ク ロ マ ト グラ フ ィ ー （ク ロ ロ ホ ノレ ム ： メ タ ノ ー ノレ = 10 : 1→ 7 : 3~→ク ロ ロ ホ ノレ ム ： メ タ ノ ール ： 水： = 70 : 30 : 4)で精製 し、 無色透明油状物質を得た

(収量 270mg 467 μ mol、 収率 89. 6% )

[ a ]D= + 57. 6° (c 0. 59、 CH3OH) lW NMR (300MHz、 CD3OD, δ ) ； 4. 70 (1H、 d、 J= 2. 2、 H - 1)、 4· 21〜 4. 12 (1H、 m、 Gly_3 a)、 4. 09〜 4. 04 (1H、 m、 Gly_3 b)、 4. 00〜 3. 96 (1H、 m、 H - 2) 、 3. 87〜 3. 84 ( 2H、 m、 H - 3 & H - 4)、 3. 71〜 3. 57 (2H、 m、 Gly - , b) 、 3. 30〜 3. 23 (1H、 m、 H - 5) 、 3. 10〜 3. 01 (1H、 m、 H- 6 a) 、 2. 99〜 2. 90 (1H、 m、 H - 6 b) 、 2.38〜 2. 23 (2H、 m、 OCOCJi ）、 1. 52〜 1 47 (2H、 m、 OCOCH2CH2)、 1. 30 (24H、 br、 -CH.2-) , 0. 78 (3H、 t、 J= 6. 5、 CH— 3)

(X I - 1 ： R₁₀₁ = R₁₀₂=パルミ トイル X I - 2 : R₁₀₁ =パルミ トイル、 Ri02=H) く例 2 >

上記例 1 の工程 h において用いたパル ミ チン酸の代わ り に ミ リ スチン酸を用いたこ と以外は例 1 と 同様に工程 h〜 j の 反応を行い、 3-0- (6-デォキシ- 6-スルホ -ひ -D-ガラ ク ト ピラ ノ シノレ） — 1 , 2—ジ— 0—ミ リ ス トイ ノレ-グ リ セ ロ ー ノレ · ナ ト リ ゥム 塩およ び 3-0- (6-デォキ シ -6-ス ノレホ - _α -D-ガラ ク ト ビラ ノ シノレ ） — 1—0—ミ リ ス ト イ ノレ —グ リ セ ロ ー ノレ · ナ ト リ ゥ ム塩を合 成 した。

〇ジエ ス テル体 （収量 82. 7mg 109 mol 収率 64. 5%) 無色 透明油状物質

〇モ ノ エステル体 （収量 191mg 374 mol 収率 73. 5%)無色透 明油状物質

<例 3 〉 上記例 2 と 同様、 パ ル ミ チン酸の代わ り に、 ステア リ ン酸 を用レヽる こ と によ り 、 3-0- (6-デォキシ -6-スルホ - a -D-ガラ ク ト ビラ ノ シノレ ） 1， 2 ジ -0-ステア ロ イ ノレ-グ リ セ ロ ー ノレ · ナ ト リ ゥ ム塩および 3-0- (6-デォキシ -6-ス ノレホ - α - D-ガラ ク ト ビ ラ ノ シル） - 1 -0-ス テ ア ロ イ ノレ-グ リ セ ロ ール . ナ ト リ ゥム塩を合成 した。

〇ジエ ス テル体 （収量 188mg 215 μ mol 収率 87.8%) 白色 非結晶状固形物質

〇モ ノ エス テル体 （収量 212mg 350 mol 収率 85.4%)無色 透明油状物質

本発明の一般式 （ 1 ) で表される化合物についての生理学 的ア ツセィ を行った。

<ア ツセィ 1 >

DNA 合成酵素 α型に対する阻害効果検定を次の方法によ り 行った。

ゥ シ胸腺から抗体カ ラムによって単一に精製された DNA合 成酵素 _α型 0. 05Uおよび被験化合物 （DMS0 に溶解 した、 下記 表 1 に示すス ルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体（以下、

「SFAG」 と省略する） SFAG SFAG2, SFAG3、 SFAG4、 SFAG5、 SFAG6) をそれぞれ混合 し、 更に酵素反応に必要な無機塩類 緩衝液、 [ ³H] ラベルされた dTTP、 铸型 DNA 鎖を含む反応用 コ ンノ ゥ ン ドを加え、 37°Cで 60 分間ィ ンキュベー ト した。 酵素反応を止めた後、 反応後生成物を専用フ ィ ルタ 一に定 着させ、 液体シンチ レー シ ョ ンカ ウ ンタ一によ り 測定 した。 酵素合成された dTTP 量を、 [ 3_H] 放射線量（cpm) と して結果 を算出 した。 なお、 用いたスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ 口一 ル誘導体は、 何れも、 グ リ セ ロ ールの 2位の炭素における絶 対配置が S である もの と Rである ものの混合物である。

得られた結果を IC₅₀ と して次の表 1 に併せて示す。 1 ： DNA合成酵素 _α型に対する阻害効果

上記表 1 から明 らかなよ う に、 試験 した化合物はいずれも DNA合成酵素 ひ型に対する有意な阻害活性を有している。

次の 2 つのァ ッセィ において用いた大腸癌および胃癌細胞 は、 本発明の医薬活性物質が効果を奏する こ と のでき る癌細 胞の一例である。 即ち、 これらのア ツセィ は、 本発明の医薬 活性物質が効果を奏 し得る癌細胞を限定する こ と を意図する も のではない。

<ア ツセィ 2 〉

大腸癌培養細胞に対する制癌テス ト を次の方法で行った。 大腸癌細胞 DLD- 1 を、 RPMI 1640 培地 （ 10%子ゥ シ血清含有） で維持、 継代 した。 被験化合物 （上記表 1 に示す化合物 SFAG1 〜SFAG3) をそれぞれ培地に懸濁、 希釈 し、 3 103 個7ゥェ ルの細胞と 共に、 96 穴シャ ー レで培養 した。 48 時間培養後、 MTT ノ ッ セ (Mosmann, T: Journal of immunological method, 5, 55-63 ( 1983) )を行い、 生存率を比較 した。

得られた結果を IC₅₀ と して次の表 2 に示す

表 2 ： 大腸癌細胞に対する制癌活性

上記表 2 から明 らかなよ う に、 試験 した化合物は、 何れも 大腸癌細胞に対する有意な制癌活性を有する。

< ア ツセィ 3 >

胃癌培養細胞に対する制癌テ ス ト を、 大腸癌細胞 DLD- 1 の 代わ り に胃癌細胞 NUGC- 3 を用いた以外はア ツセィ 2 と 同 じ 方法で行った。

得られた結果を I C₅₀ と して次の表 3 に示す。

表 3 ： 胃癌細胞に対する制癌活性

上記表 3 から明 らかなよ う に、 試験 した化合物は、 何れも 胃癌細胞に対する有意な制癌活性を有する。

ア ツセィ 2 およびア ツセィ 3 で示された通 り 、 試験 した化 合物 は 、 各 々 単独 で 、 従 来 の 技術の 欄 で述 べ た佐原 ら ( British Journal of Cancer, 75 (3), 324 - 332 ( 1997) )力 S開 示する スルホキ ノ ボシルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体の混合物 と 同 レベル又はそれ以上の制癌活性を有する と みられる。 産業上の利用可能性

以上説明 した よ う に、 本発明によれば、 一般式 （ 1 ) によ り 表される新規なスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体 が提供される。

また、 本発明によれば、 一般式 （ 1 ) によ り 表されるスル ホフ コ シルァシルグ リ セ ロール誘導体およびその薬学的に許 容される塩からなる群から選択される少な く と も 1 種を有効 成分と して含有する医薬が提供される。

Claims

5再 求 の 範 囲

次の一般式 （ 1

0 H

(式中、 R _l0l は、 高級脂肪酸のァ シル残基を表 し、 R ₁₀₂ は、 水素原子又は高級脂肪酸のァ シル残基を表す。） によ り 表 される新規なスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体。

2 . —般式 （ 1 ) において、 R ₁₀₁ カ C H ₃ ( C H ₂) _n C O 一 （ n は 1 2 〜 2 4 の整数。） で表されるァ シル残基であ り 、 R 102 が水素原子又は C H 3 ( C H ₂) _n' C 〇 一 （ η ' は 1 2 〜

2 4 の整数。）で表されるァ シル残基である こ と を特徴とする 請求の範囲第 1 項に記載のスルホ フ コ シルァ シルダ リ セ ロ ー ノレ誘導体。

3 . —般式 （ 1 ) の R i02 が水素原子である請求の範囲第 2項に記載のスルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロ ール誘導体。

4 . 一般式 （ 1 ) のスノレホフ コース と グ リ セ ロールと の結 合が α 結合である請求の範囲第 3 項のスルホ フ コ シルァ シル グ リ セ ロール誘導体。

5 . 請求の範囲第 1 項ない し第 4 項のいずれか 1 項に記載 さ れる 一般式 （ 1 ) で表される スルホ フ コ シルァ シルグ リ セ ロールおよびその薬学的に許容される塩からなる群から選択 される少な く と も 1 種を有効成分と して含有する医薬。

6 . D N A合成酵素阻害剤である請求の範囲第 5 項の医薬。

7 . 制癌剤である請求の範囲第 5 項の医薬