WO1998052936A1 - Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention - Google Patents
Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention Download PDFInfo
- Publication number
- WO1998052936A1 WO1998052936A1 PCT/FR1998/001029 FR9801029W WO9852936A1 WO 1998052936 A1 WO1998052936 A1 WO 1998052936A1 FR 9801029 W FR9801029 W FR 9801029W WO 9852936 A1 WO9852936 A1 WO 9852936A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- formula
- ppm
- group
- compound
- nmr
- Prior art date
Links
- 0 *C(CCc1c2[s]cc1)C2=O Chemical compound *C(CCc1c2[s]cc1)C2=O 0.000 description 1
- NHPNSMHPYFWPLZ-UHFFFAOYSA-N OC(CCCc1c[s]c2c1cccc2)=O Chemical compound OC(CCCc1c[s]c2c1cccc2)=O NHPNSMHPYFWPLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBPGVXFCVFABEF-UHFFFAOYSA-N OC(CCSc1ccc[s]1)=O Chemical compound OC(CCSc1ccc[s]1)=O NBPGVXFCVFABEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DODWVZSLOOEOKB-UHFFFAOYSA-N Sc1cc(cccc2)c2[s]1 Chemical compound Sc1cc(cccc2)c2[s]1 DODWVZSLOOEOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
- C07D333/54—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
- C07D333/54—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D333/58—Radicals substituted by nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D333/76—Dibenzothiophenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D495/04—Ortho-condensed systems
Definitions
- the subject of the present invention is compounds with anti-free radical activity, as well as pharmaceutical compositions containing them, methods for obtaining them, and their use in the treatment of pathologies in which abnormally high concentrations of extracellular glutamate occur.
- Alzheimer's, Parkinson's, amyotrophic lateral sclerosis Alzheimer's, Parkinson's, amyotrophic lateral sclerosis.
- Molecules capable of antagonizing the neurotoxic action of glutamate in the acute pathological cases mentioned above were the subject of European patent application 0 396 734 of November 20, 1989. They are arylcyclohexy lamins acting in as non-competitive N-methyl-D-aspartate receptor antagonists (NMDA). This receptor, on which glutamate acts, is responsible for the massive entry of Ca ⁇ + ions inside neurons, in the presence of abnormally high concentrations of extracellular glutamate, which causes neuronal death. These non-competitive NMDA antagonists bind to the phencyclidine receptor (PCP) and thus block the entry of Ca ⁇ + ions.
- PCP phencyclidine receptor
- the astrocytic transporter of glutamate which is the main mechanism of withdrawal of extracellular glutamate by recapture, is inhibited by the action of radicals. This results in an accumulation of glutamate not only due to a significant release but also, perhaps predominantly, to a non-capture.
- Radicals in the central nervous system are currently the subject of a great deal of work.
- Many molecules often of natural origin such as vitamin E, vitamin C, melatonin, ginkgo biloba derivatives, glutathione are proposed as radical scavengers as well as molecules of synthetic origin.
- the main problem to be solved is the tropism of these structures for the CNS.
- As the chain of radical formation generally begins with the production of superoxide anion. and that a fairly ubiquitous enzyme (superoxide dismutase, SOD) is responsible for destroying them during normal metabolism, many studies are interested. Some studies are trying to directly use this suitably vectored enzyme.
- the aim of the present invention is to provide compounds whose main properties are those:
- CNS cerebellum and spinal cord.
- the invention also aims to provide pharmaceutical compositions which can be used in the treatment of pathologies affecting the CNS and in which abnormally high concentrations of extracellular glutamate are involved.
- the invention also aims to provide processes for the preparation of said compounds and pharmaceutical compositions.
- the subject of the invention is the compounds having the above-mentioned properties, and of general formula (I) below:
- R ⁇ and R2 independently of one another represent a hydrogen atom, an alkyl group of 1 to 5 carbon atoms, in particular a methyl group, a hydroxyl group, a halogen atom, in particular a chlorine, bromine, iodine or fluorine, or R and R2 form, in association with the carbon atoms which carry them, a ring, aromatic or not, substituted or not, of 4 to 8 carbon atoms in the ring, in particular a ring benzene,
- R3 represents a hydrogen atom or an alkyl group of 1 to 5 carbon atoms, in particular a methyl group
- - X and Y independently of each other represent CH2, or a heteroatom such as a sulfur atom S, or a group of formula
- R4 and R5 independently of one another represent a hydrogen atom or an alkyl group of 1 to 5 carbon atoms, in particular a methyl group, or R4 and R5 form in association with the atom nitrogen which carries them a heterocycle, aromatic or not, substituted or unsubstituted, from 4 to 8 carbon atoms in the ring, optionally comprising an additional heteroatom in the ring, in particular a ring of formula
- Rg represents a hydrogen atom or an alkyl group of 1 to 5 carbon atoms, in particular a methyl group, or a hydroxyl group, or a heteroatom such as O or S.
- the invention relates more particularly the compounds of the above-mentioned formula (I) in which at least one of X or of Y represents a group of formula
- R4 and R5 are as defined above.
- a more particular subject of the invention is the compounds of formula (I) mentioned above, in which:
- R ⁇ and R2 represent a hydrogen atom, or R and R2 form in association with the carbon atoms that they carry a benzene ring,
- R3 represents a hydrogen atom or an alkyl group of 1 to 5 carbon atoms, in particular a methyl group
- R4 and R5 represent a hydrogen atom, or R4 and R5 form, in association with the nitrogen atom which carries them, a heterocycle of formula:
- R represents a hydrogen atom, a methyl group. or a hydroxyl group,. or a heteroatom such as O or S.
- a more particular subject of the invention is also the compounds as defined above, of formula (II) below:
- R3, R4, and R5 have the meanings indicated above, and Y represents CH2 or a sulfur atom S.
- a particularly preferred compound of formula (II) is the compound IC023 represented by the following formula:
- Another particularly preferred compound of formula (II) is compound IC 180 represented by the formula below
- a more particular subject of the invention is also the compounds as defined above, of formula (III) below:
- R3, R4, and R5 have the meanings indicated above.
- Particularly preferred compounds of formula (IV) are those represented by the following formulas:
- a more particular subject of the invention is also the compounds as defined above, of formula (V) below:
- Particularly preferred compounds of formula (V) are those represented by the following formulas:
- a subject of the invention is also the use of at least one compound of the following general formula
- - X, Y, U and V independently of one another, represent CHR3, R3 being as defined above, or a heteroatom such as a sulfur atom S, at least one of X, Y, U or V, represents a group of formula
- a more particular subject of the invention is the aforementioned use of the compounds of formula (I) described above in which at least one of X or Y represents a group of formula
- R4 and R5 are as defined above, and in particular the compounds described above of formulas (II), (III), (IV) and (V).
- ischemia in particular those caused by cerebral hemorrhages, blood clots, cerebrovascular accidents (strokes) such as those resulting from cardiac accidents, or even arterial spasms caused by a lack of supply of cells,
- the subject of the invention is also any pharmaceutical composition, comprising, as active principle, at least one compound as described above, optionally in the form of a salt, in particular of hydrochloride, in association with a pharmaceutically acceptable vehicle.
- compositions of the invention are in a form which can be administered orally, parenterally or rectally.
- the doses of active principle in said pharmaceutical compositions are advantageously between approximately 0.1 to approximately 50 mg / kg / day.
- the invention more particularly relates to any pharmaceutical composition as described above, characterized in that: the dosage of the forms which can be administered parenterally in the context of the treatment of acute conditions is between 0.1 to 10 mg / kg / day intravenously, and between 0.5 to 30 mg / kg / day intramuscularly, the dosage of the forms which can be administered orally or parenterally in the context of the treatment of chronic conditions is, respectively, between 5 to 50 mg / kg / day orally, and between 0.1 to 5 mg / kg / day intramuscularly.
- the above-mentioned compounds of the invention can be obtained by implementing the following preparation methods: 1) the compounds of formula (II) in which R4 and R5 are as defined above, Y represents CH2 and R3 represents a hydrogen atom, namely the compounds of the following formula (Ha):
- HNR4R5 in which R4 and R5 are as defined above, advantageously in the form of an acetic (or hydrochloric) acid salt for approximately 5 days at approximately 80 ° C., which leads to the obtaining of the compounds of formula (IVa) above,
- HNR4R5 in which R4 and R5 are as defined above, advantageously in the form of an acetic (or hydrochloric) acid salt for approximately 5 days at approximately 80 ° C., which leads to the obtaining of the compounds of above formula (IVb),
- the temperature is slowly brought back to -30 ° C (maintained for ten minutes).
- the medium is then cooled to -78 ° C for the introduction in one go of 4.9 ml (0.078 mole) of methyl iodide.
- the medium is stirred for 2 h at room temperature. Hydrolyzed with 30 ml of ice water.
- the THF is concentrated then the aqueous phase is extracted with ether which is dried over MgS ⁇ 4 and concentrated. 4.09 g of transparent oil are obtained.
- the oil is chromatographed in preparative HPLC on 250 g of 0.04 mm silica - eluent: heptane.
- the organic phase is washed with water and then extracted with a solution of sodium carbonate.
- the hydrochloric salt is formed in 3N hydrochloric ether, concentrated and dried overnight at 40 ° C. under vacuum.
- the reductive amination reaction was carried out with 0.7 eq of NaBFl3CN.
- the amine is chromatographed on neutral alumina; eluent petroleum ether / ether
- the reductive amination reaction was carried out with 0.7 eq of NaBH3CN.
- the amine is chromatographed on neutral alumina; eluent petroleum ether / ether
- the reductive amination reaction was carried out with 0.7 eq of NaBH3CN.
- the amine is chromatographed on neutral alumina; eluent petroleum ether / ether
- the reductive amination reaction was carried out with 0.7 eq of NaBH3CN and at room temperature for 1 week.
- the amine is chromatographed on neutral alumina; eluent petroleum ether / ether (50/50).
- .123 0.48; 4.62 (t. 1 H, H7); 3.42 at 1.33 (m, 16H, cH2).
- H12-H14 2.70-2.55 (m; 5H; H4-H1 1-H15); 1.98-1.70 (m. 4H, H5-H6).
- the reductive amination reaction was carried out with 0.7 eq of NaBFl3CN and 1 eq of pyridine.
- microanalysis (C, 7 H 22 SN 2 .2HCl.H 2 O) theoretical% C (54, 14); % II (6.89); % N (7.42): analysis% C (54.18); % H (6.5); % N (7.47).
- the medium is brought to reflux for 8 days.
- the amine is chromatographed on neutral alumina; eluent petroleum ether / ether
- the culture medium is made up to 30 ml, mixed and placed at 400 ⁇ l per well. The medium is changed twice a week for 18 days. The last change is made 4 days before treatment and in an environment without decomplemented fetal calf serum. (MEM 31.5ml + 20% glucose 1.05ml). The treatment takes place on the 18th or 19th day.
- Each well is washed with 750 ⁇ l of buffer (NaCl 124 mM, KC1 4.6 mM. CaCl 2 l, 2 mM, MgCl 2 l, 3 mM, KH 2 PO 4 0.416 mM, NaHCO 26.75 mM, glucose 10 mM; pH 7.4) for 10 min.
- the cells are incubated in the presence of xanthine (500 ⁇ M) and of the product tested (from 0 to ImM). After 10 min, the xanthine oxidase (50 mU / ml) is added and the mixture is again incubated for 10 min.
- Figures 3 to 8 are the average of at least 4 independent experiments in which the protective power of ICI 80, IC023, IC241, IC2-16, ICI 78, IC140, IC209, IC237, IC146, IC193, IC194, IC242, IC207 , IC2-19, IC219, IC2-21, and IC249, depending on the dose, was tested against a fixed concentration of radicals, therefore X / XO.
- the recapture gain seems linear (we find in some experiments up to 100%).
- the compounds of the invention are not by themselves inhibitors of
- the animals are male Wistar strain rats weighing 250 g. Under general anesthesia, the animals are placed in a stereotaxic device. A cannula guide is introduced by microsurgery into the striatum (coordinates A: +0.02 cm; W: -0.30 cm and H: -0.65 cm from point 0 defined according to Paxinos and Watson). Three to four screws are placed on the animal's skull and the whole is fixed with dental cement (Durelon). After a recovery period during which the animals are used to the experimenter, a CMA 12 microdialysis cannula is inserted into the guide so that the cellophane membrane protrudes by 2 mm into the brain tissue. All infusions are performed on alert animals.
- a cannula guide is introduced by microsurgery into the striatum (coordinates A: +0.02 cm; W: -0.30 cm and H: -0.65 cm from point 0 defined according to Paxinos and Watson). Three to four screws are placed on the animal's skull and
- a physiological solution (NaCl: 140 mM; KG: 5 mM; CaCl 2 : 3.9 mM) to which 250 ⁇ iM of sodium salicylate are added immediately, is injected into the system with a constant flow rate of 1 ⁇ l.min "1 .
- the fluid exiting the cannula is not collected during the two first hours of infusion. Thereafter, samples are collected in fractions every 20 minutes for 8 hours, and immediately frozen at -30 ° C.
- the salicylic acid present in the perfusion liquid reacts with the liberated OH radicals at the infusion site to form a compound, 2,3-dihydroxybenzoic acid (2,3-DBHA), which is specific for this reaction.
- This reaction product is quantified in each sample by High Pressure Liquid Chromatography followed by Electrochemical Detection.
- the stationary phase is a C l 8 grafted silica.
- the mobile phase is a solution (KH 2 P0 4 : 30 mM;
- EDTA 0.1 mM: sorted hylamine 2 ⁇ M; 1.1 .mu.M sodium octanesulfonate) containing 12% methanol / acetonitrile 2/1 and equilibrated to pH 3.28 with citric acid. This mobile phase is maintained at 25 ° C and injected with a flow rate equal to 1, 3 ⁇ l.min. "The oxidation potential is set at 0.55 volts.
- Infusion 1 after two hours of infusion under normal conditions, used to establish the basic release profile of free radicals, the infusion liquid was replaced by a medium additionally containing 1.5 mM of glutamate
- Infusion 2 one week after infusion 1, the animals undergo a new infusion session, the protocol of which differs slightly from the first session.
- One of the products of the invention is added to the perfusion medium, at a concentration of 1 mM, and kept present one hour before the introduction of glutamate, during the introduction of glutamate, then one hour after the stimulus.
- FIG. 9 shows that the release of free radicals induced by glutamate, and visualized by the variation in the concentration of 2,3-dihydiOxybenzoic acid a was completely blocked by injection of a compound of the invention. This blockage was found in all the individuals tested.
- Infusion 3 one week after the second infusion, the animals are again infused according to a protocol identical to the first infusion.
- Figure 9 still set for the same individual, shows first of all that the system is fully functional in the sense that despite multiple introductions and extractions of the cannula microdialysis, despite multiple infusions, despite repeated stimulation by glutamate, and despite the in situ treatment with the derivative IC 180, an injection of glutamate into the striatum is still capable of promoting the local release of free radicals. This effect was found in all animals.
- the animals are euthanized by decapitation. Brains are extracted in less than a minute without further fractionation. The meninges are quickly separated and the brains are rinsed in a large volume of physiological saline before being frozen at -30 ° C. The blood is collected on EDTA in tubes maintained at 0 ° C. After centrifugation, the plasma is separated and aliquots are stored at -30 ° C. After thawing, the brains are weighed and homogenized in cold in 3 volumes of NaOH (0, 1N), using an Ultra-Turrax mill. An internal standard, in adequate concentration, is added to each sample to take account of individual variations in extraction. The ground material is extracted directly in three times by a total of 6 volumes of ethyl acetate, sui ⁇ is whenever a high speed centrifugation.
- the plasma is treated in an analogous manner.
- the extracts are filtered through a 0.22 ⁇ m Millipore membrane and. after evaporation of solvent under a stream of nitrogen, dried extracts were stored at - 30 ° C.
- IC 180 One of the compounds of the invention (IC 180), diluted in physiological saline, is injected at a concentration equal to 20 mg.kg " .
- FIG. 10 shows that 30 minutes later, it is preferentially found in the brains of animals, and clearly identifiable in the plasma. Its concentration decreases by approximately 50% in the brain, 1 hour after the injection. However, in the plasma of the same animals, the drug is only very weakly detectable. brain and plasma therefore increases between 30 and 60 minutes after the injection. As a result, the drug is shown to:
- FIG. 1 histogram of the inhibition of glutamate reuptake by astrocytes; the percentage of [3 H] glutamate reuptake is represented on the ordinate; columns 1 to 8 correspond respectively to the percentages of recapture in the absence of X / XO (1), in the presence of X / XO (2), in the presence of
- IC023 is indicated on the abscissa.
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
L'invention a pour objet les composés de formule générale (I), dans laquelle: R1 et R2 représentent un atome d'hydrogène, ou forment un cycle, notamment un cycle benzénique, R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle, notamment un groupe méthyle, X et Y indépendamment l'un de l'autre représentent un atome de carbone, ou un hétéroatome tel qu'un atome de soufre S, ou un groupe de formule (a) dans laquelle R4 et R5 représentent un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, ou R4 et R5 forment un hétérocycle, et leur utilisation pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies liées à des concentrations anormalement élevées de glutamate extracellulaire.
Description
COMPOSES POUR LA PREPARATION DE MEDICAMENTS DESTINES AU TRAITEMENT DE PATHOLOGIES IMPLIQUANT LE GLUTAMATE EXTRACELLULAIRE, ET LEURS PROCEDES D'OBTENTION
La présente invention a pour objet des composés à activité antiradicalaire, ainsi que des compositions pharmaceutiques les contenant, leurs procédés d'obtention, et leur utilisation dans le cadre du traitement de pathologies dans lesquelles interviennent des concentrations anormalement élevées en glutamate extracellulaire.
Les concentrations neurotoxiques de glutamate extracellulaire causent la mort neuronale dans divers cas pathologiques aigus : traumatismes, ischémies, toxiques exogènes. Le même type de processus de mort neuronale prend également place au cours d'affections chroniques neurodégénératives :
Alzheimer, Parkinson, sclérose latérale amyotrophique.
Des molécules capables d'antagoniser l'action neurotoxique du glutamate dans les cas pathologiques aigus cités plus haut, ont fait l'objet de la demande de brevet européen 0 396 734 du 20 novembre 1989. Il s'agit d'arylcyclohexy lamines agissant en tant qu'antagonistes non compétitifs du récepteur N-méthyl-D-aspartate (NMDA). Ce récepteur, sur lequel agit le glutamate, est responsable de l'entrée massive des ions Ca^+ à l'intérieur des neurones, en présence de concentrations anormalement élevées de glutamate extracellulaire, ce qui provoque la mort neuronale. Ces antagonistes non compétitifs du NMDA se fixent sur le récepteur de la phencyclidine (PCP) et bloquent ainsi l'entrée des ions Ca^ + .
Toutefois, ces molécules n'agissent pas sur la concentration extracellulaire en glutamate, et sont surtout susceptibles d'être utilisées dans les cas d'urgences dans le cadre du traitement des pathologies aiguës susmentionnées. Des travaux italiens récents tendent à démontrer que la libération de radicaux libres issus de l'oxygène, qui accompagne la libération de glutamate, pourrait amplifier l'action délétère de ce dernier (Volterra A et al. Reactive oxygen species inhibit high-affinity glutamate uptake: molecular mechanism and neuropathological implications. Ann. N. Y. Acad. Sci. 738, 153-162 (1994). Volterra A et al. Glutamate uptake is inhibited by arachidonic acid and oxygen radicals via two distinct and additive mechanisms. Mol. Pharmacol. 46, 986-992 (1994). Volterra A et al. Glutamate uptake inhibition by oxygen free radicals in rat cortical astrocytes. J. Neurosci. 14, 2924-2932 (1994). Volterra A
et al. Inhibition of high-affinity glutamate transport in neuronal and glial cells by arachidonic acid and oxygen-free radicals. Molecular mechanisms and neuropathological relevance. Ren Physiol Biochem 17, 165-167 (1994)).
En effet, le transporteur astrocytaire du glutamate, qui est le principal mécanisme de retrait du glutamate extracellulaire par recapture, est inhibé par l'action des radicaux. Il en résulte une accumulation de glutamate non seulement due à une libération importante mais également, peut-être de façon prédominante, à une non-capture.
Les radicaux dans le système nerveux central (SNC) font actuellement l'objet de très nombreux travaux. De nombreuses molécules souvent d'origine naturelle comme la vitamine E, la vitamine C, la mélatonine, les dérivés de ginkgo biloba, le glutathion sont proposées comme capteurs de radicaux de même que des molécules d'origine synthétique. Le principal problème à résoudre est le tropisme de ces structures pour le SNC. Comme la chaîne de formation des radicaux débute en général par la production d'anion supéroxyde. et qu'une enzyme assez ubiquitaire (supéroxyde dismutase, SOD) est chargée de les détruire au cours d'un métabolisme normal, de nombreuses recherches s'y intéressent. Des travaux essaient d'utiliser directement cette enzyme convenablement vectorisée. C'est notamment l'une des voies envisagées pour le traitement de la sclérose latérale amyotrophique d'origine familiale (Ikeda K. et al. , 1995, 5(5), 383-390). Il faut noter cependant que ces techniques de vectorisation d'enzymes s'adressent plutôt à des actions intracellulaires, et sont donc susceptibles d'être accompagnées d'effets secondaires importants.
La présente invention a pour but de fournir des composés dont les principales propriétés sont celles :
- de pénétrer facilement et rapidement le SNC (composés lipophiles passant la barrière hématoencéphalique),
- de posséder de préférence une faible affinité, voire aucune affinité, pour le récepteur de la PCP, - de ne pas pénétrer dans les cellules (ayant donc une action extracellulaire), ce qui limite leur domaine d'action donc leurs effets secondaires éventuels,
- et d'être capables de protéger le(s) transporteur(s) de glutamate des astrocytes, en agissant en tant que capteurs de radicaux libres issus de l'oxygène dans l'espace extracellulaire du SNC. De cette façon, en protégeant les transporteurs non encore inhibés, la recapture de glutamate astrocytaire demeure active, capable donc de limiter les taux de glutamate et, par conséquent, les effets neurotoxiques.
Il convient de souligner que l'expression SNC utilisée dans ce qui précède et ce qui suit, comprend le cerveau, le cervelet et la moelle épinière.
L'invention a également pour but de fournir des compositions pharmaceutiques susceptibles d'être utilisées dans le cadre du traitement de pathologies affectant le SNC et dans lesquelles sont impliquées des concentrations anormalement élevées de glutamate extracellulaire.
L'invention a également pour but de fournir des procédés de préparation desdits composés et compositions pharmaceutiques.
L' invention a pour objet les composés ayant les propriétés susmentionnées, et de formule générale (I) suivante :
dans laquelle :
- R\ et R2 indépendamment l'un de l'autre représentent un atome d'hydrogène, un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, un groupe hydroxyle, un atome d'halogène, notamment un atome de chlore, brome, iode ou fluor, ou R et R2 forment, en association avec les atomes de carbone qui les portent, un cycle, aromatique ou non, substitué ou non, de 4 à 8 atomes de carbones dans le cycle, notamment un cycle benzénique,
- R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle,
- X et Y indépendamment l'un de l'autre représentent CH2, ou un hétéroatome tel qu'un atome de soufre S, ou un groupe de formule
N
I
CH dans laquelle R4 et R5 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, ou R4 et R5 forment en association avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle, aromatique ou non, substitué ou non, de 4 à 8 atomes de carbone dans le cycle, comportant le cas échéant un hétéroatome supplémentaire dans le cycle, notamment un cycle de formule
dans laquelle A représente :
. un groupe
Z
dans lequel Z représente CH ou N, Rg représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, ou un groupe hydroxyle, ou un hétéroatome tel que O ou S. L' invention concerne plus particulièrement les composés de formule (I) susmentionnée dans laquelle l'un au moins de X ou de Y représente un groupe de formule
CH
dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus. L'invention a plus particulièrement pour objet les composés de formule (I) susmentionnée, dans laquelle :
- R\ et R2 représentent un atome d'hydrogène, ou R et R2 forment en association avec les atomes de carbone qu'ils portent un cycle benzénique,
- R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle,
- l'un de X ou de Y représente un groupe de formule
I CH
dans laquelle R4 et R5 représentent un atome d'hydrogène, ou R4 et R5 forment en association avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de formule :
dans laquelle A représente : . un groupe
Z
dans lequel Z représente CH ou N, R représente un atome d'hydrogène, un groupe méthyle. ou un groupe hydroxyle, . ou un hétéroatome tel que O ou S.
L' invention a plus particulièrement pour objet encore les composés tels que définis ci-dessus, de formule (II) suivante :
dans laquelle R3, R4, et R5 ont les significations indiquées ci-dessus, et Y représente CH2 ou un atome de soufre S.
Des composés de formule (II) particulièrement préférés sont ceux représentés par les formules suivantes :
ICI 94
Un composé de formule (II) particulièrement préféré, est le composé IC023 représenté par la formule suivante :
Un autre composé de formule (II) particulièrement préféré, est le composé IC 180 représenté par la formule suiva
L' invention a plus particulièrement pour objet encore les composés tels que définis ci-dessus, de formule (III) suivante :
dans laquelle R3, R4 et R5 ont les significations indiquées ci-dessus. Des composés de formule (III) particulièrement préférés sont ceux représentés par les formules suivantes :
ICI 46
IC2-16
L'invention a plus particulièrement pour objet encore les composés tels que définis ci-dessus, de formule (IV) suivante :
dans laquelle R3, R4, et R5 ont les significations indiquées ci-dessus.
Des composés de formule (IV) particulièrement préférés sont ceux représentés par les formules suivantes :
IC249 IC2-19 IC2-21
L'invention a plus particulièrement pour objet encore les composés tels que définis ci-dessus, de formule (V) suivante :
Des composés de formule (V) particulièrement préférés sont ceux représentés par les formules suivantes :
L'invention a également pour objet l'utilisation d'au moins un composé de formule générale suivante
dans laquelle :
- Rj et R2 sont tels que définis ci-dessus,
- X, Y, U et V, indépendamment l'un de l'autre, représentent CHR3, R3 étant tel que défini ci-dessus, ou un hétéroatome tel qu'un atome de soufre S, l'un au moins de X, Y, U ou V, représente un groupe de formule
* R5
N
I CH dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, pour la préparation d'un médicament (neuroprotecteur) destiné au traitement de pathologies liées à des concentrations anormalement élevées de glutamate extracellulaire.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée des composés de formule (I) décrite ci-dessus dans laquelle l'un au moins de X ou Y représente un groupe de formule
Parmi les pathologies susceptibles d'être traitées dans le cadre de la présente invention, on peut citer :
- les cas pathologiques aigus de mort neuronale tels que :
. les ischémies, notamment celles causées par les hémorragies cérébrales, les caillots sanguins, les accidents vasculaires cérébraux (AVC) tels que ceux provenant d'accidents cardiaques, ou encore les spasmes artériels causés par un manque d'alimentation des cellules,
. les traumatismes du système nerveux central en général, notamment ceux de la moelle épinière, . l'attaque cérébrale (STROKE),
. les effets de toxiques exogènes sur le SNC,
- les affections chroniques neurodégénératives telles que :
. la maladie d'Alzheimer,
. la maladie de Parkinson, . la chorée de Huntington, . la sclérose latérale amyotrophique, . les effets du vieillissement. L' invention a également pour objet toute composition pharmaceutique, comprenant, à titre de principe actif, au moins un composé tel que décrit ci- dessus, le cas échéant sous forme de sel, notamment de chlorhydrate, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
Avantageusement, les compositions pharmaceutiques susmentionnées de l'invention se présentent sous une forme administrable par voie orale, parentérale ou rectale.
Les doses de principe actif dans lesdites compositions pharmaceutiques sont avantageusement comprises entre environ 0, 1 à environ 50 mg/kg/jour.
L' invention a plus particulièrement pour objet toute composition pharmaceutique telle que décrite ci-dessus, caractérisée en ce que : le dosage des formes administrables par voie parentérale dans le cadre du traitement des affections aiguës est compris entre 0,1 à 10 mg/kg/jour par voie intraveineuse, et entre 0,5 à 30 mg/kg/jour par voie intramusculaire, le dosage des formes administrables par voie orale ou parentérale dans le cadre du traitement des affections chroniques est compris, respectivement, entre 5 à 50 mg/kg/jour per os, et entre 0, 1 à 5mg/kg/jour par voie intramusculaire.
Avantageusement, les composés susmentionnés de l'invention peuvent être obtenus par mise en oeuvre des procédés de préparation suivants : 1) les composés de formule (II) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, Y représente CH2 et R3 représente un atome d'hydrogène, à savoir les composés de formule (Ha) suivante :
sont obtenus par le procédé comprenant les étapes suivantes :
- réaction du thiophène et de l'anhydride succinique, avantageusement en présence d'AlCl3 sous agitation pendant environ 5 heures à température
ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (1), selon le schéma réactionnel suivant :
- traitement du composé (1) ainsi obtenu par de l'hydrazine en présence de potasse sous agitation avantageusement pendant environ 7 heures à 190°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (2) suivant :
- cyclisation du composé (2) ainsi obtenu par traitement de ce dernier par de l'anhydride acétique en présence d'acide orthophosphonque avantageusement pendant environ 2 heures 30 minutes à 120°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (3) suivant :
- réaction entre le composé (3) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5. dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Ha) susmentionnée,
2) les composés de formule (II) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, Y représente un atome de soufre S, et R3 représente un atome d'hydrogène, à savoir les composés de formule (Ilb) suivante :
sont obtenus par le procédé comprenant les étapes suivantes :
- réaction du thiophène et du soufre, avantageusement en présence de n- butyllithium sous agitation pendant environ 1 heure à 0-5 °C, ce qui conduit à l 'obtention du composé (4) suivant :
- traitement du composé (4) ainsi obtenu par de l'acide 3- bromopropanoïque, avantageusement sous agitation pendant environ 24 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (5) suivant :
- cyclisation du composé (5) ainsi obtenu par traitement de ce dernier par de l'anhydride trifluoroacetique avantageusement pendant environ 3 heures 30 minutes à 36°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (6) suivant :
- réaction entre le composé (6) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Ilb) susmentionnée,
3) les composés de formule (II) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, Y représente CH2 ou un atome de soufre S, et R3 représente
un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, à savoir les composés de formule (Ile; Y = CH2), et les composés de formule (Ild; Y = S) suivantes:
sont respectivement obtenus par les procédés a) et b) comprenant les étapes suivantes : a) - traitement du composé (3) susmentionné avec un halogène d' alkyle de formule XR3 dans laquelle X représente un atome d'halogène, notamment un atome d'iode, et R3 est tel que défini ci-dessus, sous agitation. avantageusement pendant environ 2 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (7) suivant :
- réaction entre le composé (7) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80 °C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Ile) susmentionnée, b) - traitement du composé (6) susmentionné avec un halogène d'alkyle de formule XR3 dans laquelle X représente un atome d'halogène, notamment un atome d'iode, et R3 est tel que défini ci-dessus, sous agitation, avantageusement pendant environ 2 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (8) suivant :
4) les composés de formule (III) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un atome d'hydrogène, à savoir les composés de formule (Ma) suivante :
sont obtenus par :
- traitement du composé (3) susmentionné par de l'hydrazine en présence de potasse sous agitation, avantageusement pendant environ 8 heures à 190 °C, puis par une hydrolyse à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (9) suivant :
- traitement du composé (9) ainsi obtenu par du nitrate de cérium IV sous agitation, avantageusement pendant environ 2 heures à -15 °C puis environ 2 heures supplémentaires à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (10) suivant :
5) les composés de formule (III) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, à savoir les composés de formule (Illb), et les composés de formule (IIIc) suivantes:
- réaction entre le composé (11) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80 °C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Mb) susmentionnée, b) - traitement du composé (7) susmentionné par de l'hydrazine en présence de potasse sous agitation, avantageusement pendant environ 8 heures à 190°C, puis par une hydrolyse à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (12) suivant :
- traitement du composé (12) ainsi obtenu par du nitrate de cérium IV sous agitation, avantageusement pendant environ 2 heures à -15°C puis environ 2 heures supplémentaires à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (13) suivant :
- réaction entre le composé (13) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Me) susmentionnée,
6) les composés de formule (IV) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un atome d'hydrogène, à savoir les composés de formule (IVa) suivante :
sont obtenus par : - réaction du benzothiophène et du soufre, avantageusement en présence de n-butyllithium sous agitation pendant environ 1 heure à 0-5 °C, ce qui conduit à l'obtention du composé (14) suivant :
- traitement du composé (14) ainsi obtenu par de l'acide 3- bromopropanoïque, avantageusement sous agitation pendant environ 24 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (15) suivant :
- cyclisation du composé (15) ainsi obtenu par traitement de ce dernier par de l'anhydride trifluoroacetique avantageusement pendant environ 3 heures 30 minutes à 36°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (16) suivant :
- réaction entre le composé (16) ainsi obtenu et un composé de formule
HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (IVa) susmentionnée,
7) les composés de formule (V) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un atome d'hydrogène, à savoir les composés de formule (Va) suivante :
sont obtenus par : réaction du benzothiophène et de l'anhydride succinique, avantageusement en présence d'AlCl sous agitation pendant environ 5 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (17), selon le schéma réactionnel suivant :
- traitement du composé (17) ainsi obtenu par de l'hydrazine en présence de potasse sous agitation avantageusement pendant environ 6 heures à 180°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (18) suivant :
- cyclisation du composé (18) ainsi obtenu par traitement de ce dernier par de l'anhydride acétique en présence d'acide orthophosphorique avantageusement pendant environ 7 heures à 130°C, ce qui conduit à l'obtention du composé (19) suivant :
8) les composés de formule (IV) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, à savoir les composés de formule (IVb) suivante:
sont obtenus par :
- traitement du composé (16) susmentionné avec un halogène d' alkyle de formule XR3 dans laquelle X représente un atome d'halogène, notamment un atome d'iode, et R3 est tel que défini ci-dessus, sous agitation, avantageusement pendant environ 2 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (20) suivant :
- réaction entre le composé (20) ainsi obtenu et un composé de formule
HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (IVb) susmentionnée,
9) les composés de formule (V) dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, et R3 représente un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, à savoir les composés de formule (Vb) suivante:
sont obtenus par :
- traitement du composé (19) susmentionné avec un halogène d' alkyle de formule XR3 dans laquelle X représente un atome d'halogène, notamment un atome d'iode, et R3 est tel que défini dans ci-dessus, avantageusement pendant environ 2 heures à température ambiante, ce qui conduit à l'obtention du composé (21) suivant :
- réaction entre le composé (21) ainsi obtenu et un composé de formule HNR4R5, dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus, avantageusement sous forme d'un sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) pendant environ 5 jours à environ 80°C, ce qui conduit à l'obtention des composés de formule (Vb) susmentionnée.
L' invention sera davantage illustrée à l'aide de la description détaillée qui suit d'exemples de synthèse de composés de l'invention, et d'étude de leurs propriétés de capture des radicaux OH-, et de leurs effets sur la recapture du glutamate par les astrocytes.
α) exemples de synthèse de composés de l'invention
Les produits finaux ont été obtenus à partir des dérivés cétoniques correspondants par réaction d'animation réductrice. C'est pourquoi l'élaboration des différentes cétones nécessaires est abordée avant les réactions d'amination elles mêmes.
I-Synthèse des dérivés cétoniques
A) oxo-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzot iophène a) acide 4-(2-thiényl)-4-céto-butyrique
Dans un tricol sous atmosphère d'azote, muni d'un agitateur magnétique et refroidi au bain de glace on place 3,57 g (0,036 mole) d'anhydride succinique, 10,46 g (0.036 mole) d'AlCl3 ainsi que 35 ml de nitrobenzène. On introduit alors goutte à goutte 2,85 ml (0,036 mole) de thiophène dissous dans 17ml de nitrobenzène. Le milieu jaune devient brun hétérogène au cours de l'addition. L'agitation est maintenue 5h à température ambiante. Le milieu refroidi au bain de glace est hydrolyse par 25 ml d'HCl 36 % dilué dans 20 ml d'eau glacée. Le nitrobenzène est entraîné à la vapeur et le résidu restant est repris dans une solution de Na2Cθ3. Un nouvel entraînement à la vapeur élimine les produits volatils et le solvant restant. La phase aqueuse est acidifiée puis extraite à l'éther qui est séché sur MgS04 et concentré. L'acide est obtenu sous forme de 3,6 g de paillettes jaune clair brillantes après recristallisation dans l'eau. Rendement = 55
RMN ' H (CDC13) δ ppm : 7,77 (d, 1H, H5'); 7,66 (d, 1 H, H3'); 7,15 (m, 1 H, H4'):
3,28 (t, 21-1. 113); 2,82 (t, 2H, H2).
RMN 1 3C (CDCI3) δ ppm : 192,27 (C4); 180 (Cl); 144,54 (C2'); 133,7( C3'); 132.04 (C5'); 128,071 (C4'); 33,58 (C3); 27,87 (C2).
b) acide 4-(2-thiényl)-butyrique
Dans un bicol muni d'un agitateur magnétique on place 3,6 g (0,019 mole) d'acide 4-(2-thiényl)-4-céto-butyrique, 2,74 ml (0,07 mole) d'hydrazine 98%, 3,69 g (0,066 mole) de potasse ainsi que 42 ml de diéthylène glycol. Le milieu est
chauffé 7h à 190°C. Le milieu est jaune limpide homogène. Revenu à température ambiante, on hydrolyse par 200 ml d'eau. Le diéthylène glycol est extrait par 5 fois 100 ml d'éther. La phase aqueuse est alors acidifiée jusqu'à pH 1 et extraite. L'acide est repris dans une solution de soude 5 % lavée à l'éther puis acidifié et repris une dernière fois dans l'éther que l'on sèche sur MgS04 et concentre. On obtient 2,74 g d'une huile jaune clair. Rendement = 85 %.
RMN ] H (CDC13) δ ppm : 7,15 (d, 1H, H3'); 6,96 (t, 111, H4'); 6,84 (d, 1 H, H5'); 2.93 (t, 2H, H2); 2,45 (t, I II. H4); 2,04 (q, 2H, H3).
RMM 13C (CDC13) δ ppm : 143,63 (Cl); 127,27 (C3'): 124,84 (C5'); 123 (C4'): 33,3 (C2): 28,48 (C4); 26,06 (C3).
c) oxo-4 tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène
1) Dans un bicol muni d'un agitateur magnétique, on place 2,74 g (0,023 mole) d'acide 4-(2-thiényl)-butyrique dissous dans 3,91 ml d'anhydride acétique en présence de 0,08 ml d'acide orthophosphonque à 85 %. Le milieu rouge-brun homogène est chauffé à 120°C durant 2h30. Refroidi au bain de glace, le milieu est hydrolyse par 20 ml d'eau. La phase aqueuse est basifiée par une solution de soude à 20 % et est extraite par 3 fois 12 ml de CH2CI2. La phase organique est rincée à l'eau jusqu'à pH 7, séchée sur MgSθ4 et concentrée. On obtient 2,23 g de solide blanc recristallisé dans l'éther de pétrole. Rendement = 65 % 2)Dans un tricol sous atmosphère d'azote, muni d'un agitateur magnétique et d'une ampoule d'addition, on place 1 g (0,006 mole) d'acide 4-(2-thiényl)- butyrique dissous dans 5 ml d'éther anhydre. On ajoute alors goutte à goutte une solution de 0,51 ml (0,007 mole) de chlorure de thionyle dissous dans 1 ml d'éther anhydre. Le milieu orange-brun est placé 4h au reflux. L'éther et le chlorure de thionyle en excès sont distillés. Le résidu est repris dans quelques millilitres de
CS2 puis est refroidi au bain de glace. On ajoute lentement 0,67 ml (0,006 mole) de SnCl4 dissous dans 5 ml de CS2. Le milieu devenu noir hétérogène est vivement agité à température ambiante durant une nuit. Le milieu rouge-noir est décomposé sur glace et 20 ml d'HCl 5 %. Le CS2 est concentré puis la phase
aqueuse est extraite par 3 fois 10 ml d'éther. La phase organique est lavée à la soude 5 %. à l'eau, séchée sur MgSO4 et concentrée. On obtient 550 mg de solide blanc recristallisé dans l'éther de pétrole. Rendement = 62 %
RMN ] H (CDC13) δ ppm : 7,24-7,21 (d, 1 H, d, 1 H, H2-H3) .123=0,34; 3.04 (t. 1 H,
H5); 2,57 (m, 1H, H7); 2,22 (m, 1H, H6).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 193,33 (C4); 155,75 (C9); 136,97 (C8); 124.8 (C2); 122,4 (C3): 38, 18 (C7); 25,45 (C5); 24,24 (C6).
B) oxo-7-tetrahydro-4,5,6,7-benzothiophène a) tetrahydro-4,5,6,7 benzothiophène
Dans un tricol muni d'un agitateur magnétique, on place 1 ,1 g (0,007 mole) d'oxo-4-tétrahydiO-4,5,6,7 benzothiophène, 0,96 ml (0,028 mole) d'hydrazine 98 %. 1.36 g (0,024 mole) de potasse dissous dans 20 ml de diéthylène glycol. Le milieu est placé 8h à 190°C. Revenu à température ambiante, le milieu est hydrolyse par 100 ml d'eau. La phase aqueuse est extraite à l'éther qui est lavé plusieurs fois par de petites quantités d'eau, séché sur MgS04 et concentré. On obtient 950 mg d'huile transparente. Rendement = 95 %
RMN l H (CDC13) δ ppm : 7,03-6,74 (d, 1 H, d, 1 H, H2-H3) J23=0,29: 2.75-2,63 (t, 2H, t, 2H. H4-H7); 1 ,82 (m, 4H, H5-H6).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 129,18 (C9), 125,98 (C8), 123,31 (C3), 1 19.62 (C2), 25,49 (C4). 24,87 (C7), 23,63 (C5), 22,88 (C6).
b) oxo-7-teιrahydro-4,5,6,7-benzothiophène
Dans un tricol muni d'un agitateur magnétique, d'une ampoule d'addition et refroidi à -15°C, on place 1 g (0,0072 mole) de tétrahydro-4.5,6.7-benzothiophène dissous dans 35 ml d'un mélange AcOH/H2θ (50/50). On ajoute goutte à goutte 15,88 g (0,03 mole) de nitrate de cérium IV dissous dans 70 ml d'AcOH/H2θ (50/50). Tout au long de l'addition le milieu doit rester jaune clair (voire légèrement orangé). Après 2h d'agitation à -15°C on laisse revenir à température ambiante et agiter 2h supplémentaires. Le milieu est alors jaune intense. Le milieu est dilué par 50 ml d'eau puis est extrait à l'éther. La phase organique est lavée à la soude 5 %, à l'eau, séchée sur MgS04 et concentrée. L'huile obtenue est chromatographiée sur silice, éluant EP/Et2θ (60/40), pour donner 800 mg d'huile jaune. Rendement = 72 %.
RMN ! H (CDC13) δ ppm : 7,62-6,98 (d, 1H, d, 1H, H2-H3) .123=0,63; 2,89 (t, 2H, H6); 2,62 (t, 2H, H4); 2,18 (q, 2H, H5).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm :170,8 (C7); 153,13 (C8); 136,27 (C9); 133,702 (C2); 128,152 (C3); 38,09 (C6); 25,87 (C4); 24,26 (C5).
C) oxo-4-méthyl-5-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène
Dans un tricol sous atmosphère d'azote, muni d'un agitateur magnétique et d'une ampoule d'addition, on place 3,68 ml (0,026 mole) de diisopropy lamine dissous dans 20 ml de THF anhydre. On ajoute goutte à goutte 16,42 ml (0.026 mole) de n-butvlllithium à 1 ,6 M dans l'hexane. L'introduction terminée le milieu est agité
une demie heure à température ambiante. Le milieu est refroidi à -80°C puis 4 g (0,026 mole) d'oxo-4-tétrahydro-4,5,6,7- benzothiophène dissous dans 3 ml de THF sont ajoutés. La température est lentement ramenée à -30°C (maintenue une dizaine de minutes). Le milieu est ensuite refroidi à -78°C pour l'introduction en une seule fois de 4,9 ml (0,078 mole) d'iodure de méthyle. Le milieu est agité 2h à température ambiante. On hydrolyse par 30 ml d'eau glacée. Le THF est concentré puis la phase aqueuse est extraite à l'éther qui est séché sur MgSθ4 et concentré. On obtient 4,09 g d'huile transparente. L'huile est chromatographiée en HPLC préparative sur 250 g de silice 0,04 mm - éluant : heptane. Une fraction de 1 g de mélange des produits mono- et di- méthylés est isolée suivie d'une fraction de 2,3 g de produit monométhylé pur. Enfin la cétone de départ est récupérée. Taux de transformation = 72 %. Rendement en monométhylé isolé = 52 %.
RMN lH (CDC13) δ ppm : 7,38-7,06 (2d, 2H, H2-H3) J23=0.32; 3.07 (m, 2H, H7); 2,61 -2.3-2,08 (3m, 3H, H5-H6); 1 ,26 (d, 3H, Me).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 196,5 (C4); 155,9 (C8); 136,4 (C9); 124,33 (C3); 123,079 (C2); 41,35 (C5); 32,51 (C7); 24,53 (C6); 14.83 (C10).
D) oxo-4-tétrahydro-4,5,6,7-thio-7-benzothiophène a) acide S-(2'-thiophényl)-3-thio-propanoïque
Dans un tricol sous atmosphère inerte, muni d'une agitation magnétique, d'une ampoule d'addition et refroidi à 0°C à l'aide d'une machine à froid on place 6,7 ml
(0,083 mole) de thiophène dissous dans 40 ml de THF. On ajoute goutte à goutte
49 ml (0,079 mole) de n-butyllithium 1 ,6M dans l'hexane de telle manière que la température reste inférieure à 20 °C. Après une heure d'agitation à 0-5°C on ajoute en 20 min 2,51 g (0,079 mole) de soufre préalablement séché à l'étuve; on laisse agiter 2h. puis le milieu est hydrolyse par 16 ml d'eau purgée à l'azote; la température reste inférieure à 10 °C et le milieu est jaune intense. Dans un autre bicol une solution de 4,8 g de K2CO3 dissous dans 16 ml d'eau est purgée à l'azote. On ajoute par spatulée 10,94 g d'acide 3-bromo-propanoïque et laisse agiter jusqu'à ce que le milieu soit limpide. Cette solution est alors ajoutée goutte à goutte au premier milieu tout en maintenant la température inférieure à 5°C; le
milieu devenu vert est agité 24h à température ambiante. Le THF concentré, la phase aqueuse est lavée par 10 ml de toluène, acidifiée par 16 ml d'HCl 6N puis extraite par 3 fois 40 ml de toluène. La phase organique est concentrée; l'eau restante est éliminée par un deuxième entraînement azéotropique réalisé avec 20 ml de toluène. On obtient 13,5 g d'huile jaune. Rendement = 86 %.
RMN l H (CDC13) δ ppm : 9,61 (s, 1H, acide); 7,39 (d, 1 H, H5'): 7, 18 (d, 1 H. H3'): 7.00 (q. 1 H, H4); 3,02 (t, 1H, H3); 2,68 (t, 1 H, H2).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 177,84 (C l ); 134,82 (C5'); 132.66 (C2'); 130.09 (C3'): 127.62 (C4'); 34,22 (C3); 33, 14 (C2).
b) oxo-4-tétrahydro-4,5,6,7-thio-7-benzothiophène
Dans un bicol sous azote, muni d'une agitation magnétique, on place 13,5 g (0,072 mole) d'acide S-(2'-thiophényl)-3-thio-propanoïque et ajoute lentement 1 1 ml d'anhydride trifluoroacetique. Le milieu devenu noir est placé 3h30 à 36°C. On refroidit au bain de glace, hydrolyse par 50 ml d'eau puis basifie la solution jusqu'à pH9. La phase aqueuse est extraite au toluène qui est à son tour lavé à l'eau puis concentré. Le produit obtenu est rapidement chromatographié sur silice- éluant EP/Et2θ (50/50). On obtient 10 g de solide jaune clair qui une fois recristallisé dans l'éther de pétrole donne 8,5 g de cristaux blancs, (lors de la recristallisation quelques traces de produit oxo-7 sont éliminés). Rendement = 70%.
RMN ] H (CDC13) δ ppm : 7,46-7,02 (2d, 2H, H2-H3); 3,37 (t, 1 H. H6); 2,87 (t. 2H, H4).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 188,96 (C4), 150,91 (C9), 135,00 (C8), 126,08 (C3). 121 ,81 (C2), 38,16 (C6), 30,04 (C5).
E) synthèse oxo-l-tétrahydro-l,2,3,4-thio-9-fluorène a) acide 4-oxo-4-(3'-benzothiophényl)-buιyrique
Dans un tricol sous atmosphère d'azote, muni d'une agitation magnétique et refroidi au bain de glace, on place 16 g (0,1 19 mole) de benzothiophène, 1 1 ,9 g (0.1 19 mole) d'anhydride succinique dissous dans 250 ml de dichlorométhane. Le milieu est transparent hétérogène. On introduit en 40 minutes 32 g (0.24 mole) d'AlCl3; le milieu est alors rouge-noir hétérogène et très épais. L'introduction finie on agite lh à 0°C puis une nuit à température ambiante. Le milieu est hydrolyse par 30 ml HC1 36 % dilué dans 40 ml de glace. L'agitation devient très difficile. La phase organique est lavée à l'eau puis extraite par une solution de carbonate de sodium. La phase aqueuse est chauffée en présence de charbon actif, filtrée puis acidifiée et extraite au dichlorométhane. Cette dernière phase est séchée sur MgS04 et concentrée. On obtient 18 g d'huile jaune très épaisse qui cristallise à froid. Le produit majoritaire est le produit désiré mais un tiers est alkyle en position 2' du benzothiophène; les deux produits seront séparés ultérieurement. Rendement global = 65 %.
RMN l H (Acétone d6) δ ppm : 8,73 (d, IH, H4'); 7,96 (d, IH. HT); 7,45 (m. 2H, H5'-H6'); 3,36 (t, 2H, H3); 2,76 (t, 2H, H2).
RMN 1 C (Acétone d6) δ ppm : 194,9 (C4), 174,57 (Cl), 140,095 (C9); 138,72 (C8); 137,61 (C2); 135,49 (C3); 126,42-126,17-126.14 ( C4-C5-C7); 123,28 (C6); 35,32 (Ci l); 28,30 (C12).
b) acide 4-(3'-benzothiophényl)-butyrique
Dans un bicol muni d'un agitateur magnétique, on place 18 g (0,077 mole) d'acide 4-oxo-4-(3'-benzothiophényl)-butyrique, 1 1,12 ml (0.3 mole) d'hydrazine 98 %. 16,8 g (0,3 mole) de potasse dissous dans 150 ml de diéthylène glycol. Le milieu est chauffé 6h à 180°C. Le milieu est repris à l'eau, lavé à l'éther puis acidifié jusqu'à pH 1 et extrait à l'éther. La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur MgSθ4 et concentrée. On obtient 1 1,1 1 g d'huile orange. Rendement = 60 %.
RMN Η (CDC13) δ ppm : 7,76-7,67 (2d, 2H, H4'-H7'); 7.35 (m, 3H, FI2'-H5'- H6'); 3,02 (t, 2H, H2); 2,49 (t, 2H, H4); 2,14 (q, 2H, H3).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 179,14 (Cl); 144,8 (C9'); 140,04 (C8'); 139,3 (C3'); 124,14-123,59-122,87-122,12-121 ,18 (C2\ C4\ C5\ C6' ,C7').
c) oxo-l-tétrahydro-1 ,2,3,4 thio-9-fluorène
1 ) Dans un bicol sous atmosphère d'azote, muni d'un agitateur magnétique, on place 1 1 ,1 1 g (0,05 mole) d'acide 4-(3-benzothiophényl)-butyrique, 8,65 g d'anhydride acétique ainsi que 0,17 ml d'acide orthophosphonque à 85 %. Le milieu est placé 7h à 130°C. On hydrolyse par 10 ml d'eau glacée et extrait la cétone à l'éther. La phase organique est lavée à la soude 10 % puis à l'eau jusqu'à pH 7. séchée sur MgS04 et concentrée. On obtient 10,37 g de solide rouge. Ce solide est rapidement chromatographié sur silice et élue par un mélange EP/Et2θ (60/40). On obtient 9 g de solide blanc contenant 25 % de dérivé oxo-4
et 75 % de dérivé oxo-1. Rendement = 60 %. Le produit pur est obtenu par chromatographie sur silice, éluant EP/Acétone (9/1 ). puis recristallisation de la fraction enrichie en dérivé oxo-1 dans l'éther.
2) Dans un bicol sous atmosphère d'azote, muni d'un agitateur magnétique, on place 5,7 g (0,026 mole) d'acide 4-(3-benzothiophényl) butyrique dans 10 ml de toluène. On ajoute goutte à goutte 6,1 ml (0,028 mole) d'anhydride trifluoroacetique. Le milieu devient noir. Après 24h d'agitation à température ambiante la réaction est arrêtée. Traitée comme précédemment, on obtient 5,2 g d'un solide rougeâtre puis après chromatographie rapide 5 g de solide blanc contenant un tiers de dérivé oxo-4 et 2/3 de dérivé oxo- 1. Rendement = 65 %
RMN lH (CDC13) δ ppm :8,61 (d, IH, H5); 7,56 (d, IH, H8); 7,31 (m, 2H, H6- H7); 2,85 (t, 2H, H4); 2,46 (t, 2H, FI2); 2,03 (m, 2H, H3).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 193,18 (Cl); 159,99 (C9a): 137.17 (C4b); 137 (C8a); 129,48 (C4a); 126.26-123,8-123,1-1 19,9 (C5-C6-C7-C8); 35,52 (C4); 26,14 (C2); 24,00 (Ci l ).
F) oxo-4-tétrahydro-l,2,3,4-dithio-l,9-fluorène a) acide S-(2'-benzothiophényl)-3-thio-propanoïque
Dans un tricol sous atmosphère inerte, muni d'une agitation magnétique, d'une ampoule d'addition et refroidi à -20°C à l'aide d'une machine à froid on place
16,66 g (0,124 mole) de benzothiophène dissous dans 15 ml de THF. On ajoute goutte à goutte 77,8 ml (0,124 mole) de n-butyllithium 1 ,6M dans l'hexane en gardant la température entre -25°C et -20°C. A la fin de l'addition, le milieu est orangé onctueux hétérogène et est placé à reflux. Après 2h00, le reflux est arrêté et le lithium est refroidi à -20°C. 3,96 g (0,124 mole) de soufre en poudre préalablement séché à l'étuve sont introduits par spatulées puis l'agitation est maintenue trois heures supplémentaires à 0°C-5°C avant l'hydrolyse qui s'effectue
par 24 ml d'eau purgée à l'azote. Dans un autre bicol, une solution de 7, 1 8 g de 2CO3 dissous dans 24 ml d'eau est purgée à l'azote. On ajoute par spatulée 16,36 g d'acide 3-bromo-propanoïque et laisse agiter jusqu'à ce que le milieu soit limpide. Cette solution est alors ajoutée goutte à goutte au premier milieu qui se trouve à 0°C, tout en maintenant la température inférieure à 5°C; le milieu rouge biphasique est agité 16h00 à température ambiante. Le THF concentré, la phase aqueuse est lavée par quelques millilitres de toluène puis est basifiée par HC1 6N avant d'être extraite au toluène. La phase organique est concentrée (l'eau restante est éliminée azéotropiquement par quelques millilitres de toluène supplémentaires). On obtient 29,35 g (0,123 mole) de solide jaune clair. Rendement quantitatif.
RMN l H (CDC13) δ ppm : 7,74 (m, 2H, H4'-FI7'), 7,36 (m, 3H, H3'-H5'-H6*), 3.14 (t, I I I. H3). 2.74 (t, I H, FI2). RMN1 C (CDC13) δ ppm : 177,34 (C l ), 141 ,98 (C91). 139,53 (C81), 135.1 1 (C2' ).
129,90 (C3'). 124,64 (C51), 124,47 (C6'), 123,22 (C71). 121 ,86 (C4'), 32,24 (C3), 3 1.92 (C2).
b)oxo-4-tétrahydro- 1 ,2,3,4-dithio- 1 ,9-fluorène
Dans un tricol sous atmosphère inerte muni d'une agitation magnétique et d'une ampoule d'addition sont ajoutés goutte à goutte 40 ml d'anhydride trifluoroacetique sur 29,35 g (0,123 mole) d'acide S-(2'-benzothiophényl) 3-thio- propanoïque dissous dans 90 ml de toluène. Le milieu est placé à 40°C pendant 3h30, puis on refroidit au bain de glace, hydrolyse par 50 ml d'eau puis basifie la solution jusqu'à pH 9. La phase aqueuse est extraite au toluène qui est à son tour lavé à l'eau puis concentré. On obtient 20 g de solide jaune clair contenant quelques traces de produit 1-oxo (3-alkylation sur le benzothiophène).
Rendement=75%. Le produit secondaire est éliminé par recristallisation dans l'acétate d'éthvle.
RMN l H (CDC13) δ ppm : 8,65 (t, I H, 118), 7,68 (t, I H, H5), 7.42 (m, 2H, H6- H7), 3,42 (t, 2H, H2), 2,97 (t, 2H, H3).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 189.30 (C4), 157,1 (C4a), 136,94 (C4b). 136,05 (C8a). 127,32 (C9a), 127,32-125,96 (C6-C7), 124,82-121 ,0 (C5-C8), 39.04 (C3). 29,82 (C2).
II) Synthèse des dérivés aminés
Mode opératoire global
Pour les dérivés pipéridine, N-méthyl pipérazine, morpholine et thiomorpholine, on forme dans un premier temps les sels d'acide acétique correspondants: on place 1 eq d'aminé dans de l'éther anhydre et ajoute goutte à goutte un équivalent d'acide acétique (2 eq dans le cas de la N-méthyl pipérazine) dissous dans l'éther. (La formation du sel s'effectue sous azote dans le cas de la thiomorpholine). Après une heure d'a -*g(=>i*tation on concentre l'éther et sèche le sel une nuit à 40°C sous vide.
Dans le cas de la 4-hydroxypipérazine on forme le sel chlorhydrique dans l'éther chlorhydrique 3N, concentre et sèche une nuit à 40°C sous vide.
Dans un bicol sous azote, muni d'une agitation magnétique et d'une garde à actigel, on place 1 eq de cétone et 10 eq d'aminé sous forme de sel d'acide acétique (ou chlorhydrique) dissous dans 20 volumes de MeOH. On ajoute 1 ,5 eq de
NaBFl3CN et chauffe 5 jours à 80°C. Le milieu est hydrolyse par de l'eau glacée, le méthanol est concentré puis la phase aqueuse basique est extraite à l'éther. L'aminé est reprise dans de l'eau acide (jusqu'à pHl) rincée à l'éther puis basifiée (pH 9) avant d'être une dernière fois extraite à l'éther, qui est alors séché sur MgS04 et concentré. Les dérivés sont purifiés par chromatographie sur alumine neutre-éluant EP/Et2θ (60/40). Le passage au chlorhydrate se fait par dissolution de l'aminé dans un minimum d'éther et ajout goutte à goutte dans de l'éther chlorhydrique 3N.
Λ) pipéridino-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC023)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (50/50). Rendement=73%.
Base :
RMN l H (CDC13) δ ppm : 7,10-7,08 (2d, 211, H2-H3) J23=0,073ppm; 3,79 (t, IH, H4); 2,77 à 0,94 (m, 16H, alkyls). RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 138,32 (C9); 137,27 (C8); 127,34 (C3); 121 ,07 (C2);
61,9 (C4); 49,66 (C10-C14); 26,72-25,05-24,94-22,88 (C5-C7-C12-C13-C14); 21 ,21 (C6) GC-MS : 90oC/10°min/250°C; 13,74 min; 221/193/178/137/136/86.
Chlorhydrate :
RMN lH (CDC13) δ ppm : 12,072 (s, IH, ammonium); 7,51-7,48 (2d, 2H, H2-H3)
.123=0,81 ; 4,6 (t, I H, H4); 3,47 à 1,42 (m, 16H, alkyls).
RMN i 3C (CDC13) δ ppm : 142,28 (C9); 127,72 (C3); 127,63 (C8); 123,63 (C2);
61 ,38 (C4); 51,66-47,39 (C1 1-C15); 24,46-22,77-22,36-22,26-22,01 (C5-C6-C7- C14-C12-C13). Pf=182-183°C.
Microanalyse -.théorique : %C(60,28); %H (7,84); %N (5,45); %S (12,44); analyse
%C (60,497); %H (7,724); %N (5,322); %S (12,542).
B) morpholine-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC 180)
L'aminé brut est recristallisée dans l'éther. Rendement quantitatif.
Base
RMN l H (CDC13) δ ppm : 7,05 (t, 2H, H2-H3); 3,71 (m, 5FI, H4-H12-H14); 2,74-
2,55 (m; 5H; H7-H1 1-H15); 1 ,74 (m, 4H. H5-H6).
RMN 1 C (CDC13) δ ppm : 137,2 (C9); 136,8 (C8); 127 (C3); 121 ,3 (C2); 67,9
(C12-C14); 60,7 (C4); 49,03 (C1 1-C15); 25,51 (C7); 22,75 (C5); 22,06 (C6).
Chlorhydrate :
RMN lH (CDC13) δ ppm : 1 1 ,8 (s, IH, ammonium); 7,57-7,54 (2d, 2H, H2-H3)
.123=0,69: 4,7 (t, 2H, H12); 4,4 (t, IH, H4); 3,95 (t, 2H, H14); 3,38-3,04-2,85 (m, 6H, H7-H1 1-H15); 2,24-1 ,98 (m, 4H, H5-H6).
RMN i 3C (CDC13) δ ppm : 142,2 (C9); 128,1 (C3); 126,58 (C8); 124,06 (C2);
63,43-62,6 (C12-C14); 61,25 (C4); 49,58 (Ci l); 46,25 (Cl 5); 25 (C7); 23,4 (C5);
22,5 (C6). Pf = 197-197,3 °C. microanalyse: théorique %C(55,533); %H (6,935); %N (5,394); %0 (6,165); %S (12,33); analyse %C (55,461); %H (6,927); %N (5,42); %O (6,289); %S (12,315).
C) thiomorpholine-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC 193)
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBFl3CN. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther
(60/40). Rendement=63%
Base :
RMN lH (CDC13) δ ppm : 7,04 (s, 2H, H2-H3); 3,79 (t, IH, H4); 2.81 -2,64 (m. 10I-I. Hl 1 -H12-H14-H15-H17); 2,2-1,59 (m, 4H, H5-H6).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 138,6 (C9); 138 (C8); 126 (C3); 122 (C2); 62 (C4): 50,6 (C1 1-C15); 28,66 (C12-C14); 25 (C7); 23,3 (C5); 22 (C6).
Chlorhydrate : RMN lH (CDC13) δ ppm :7,59-7,57 (2d, 2H, H2-H3) .123=0,85; 4,22 (t, I H, H4):
4,69-3,68-3,27-3-2,8-2,56 (m, 10H, FI7-H1 1-H12-H14-H15); 2,16-1.87 (m, 4H.
FI5-H6).
RMN 13c (CDC13) δ ppm : 142,71 (C9); 127,72 (C3); 127,01 (C8); 124,01 (C2);
62,80 (C4); 53 (Cl 1-C15); 48,6 (C12-C14); 24,82 (C7); 24,49 (C5); 22,18 (C6). Pf = 201 ,7-201 ,9 °C microanalyse : théorique %C(52,298); %H (6,532); %N (5,08); %S (23,224): analyse %C (52,476); %H (6,686); %N (5,06); %S (23,49).
D) N-méthyl-pipérazine-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC 194)
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBH3CN. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther
(60/40). Rendement=50%.
Base :
RMN l H (CDC13) δ ppm : 7,03-7,02 (d, 2H, H2-H3) ; 3,79 (t, IH, H4); 2,28 (s, 3H. Me): 2,75-0,89 (m, 14H, CH2 ).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 137,77 (C9); 137,46 (C8); 127.26 (C3): 121 ,22 (C2); 60.79 (C4); 55,68 (C12-C14); 45,91 (C16-C1 1 -C15); 24,93 (C7): 22,54 (C5); 21,34 (C6).
Chlorhydrate :
RMN ] H (CDC13) δ ppm : 7,525-7,38 (2d, 2H, H2-H3) .123=057; 4,81 (t, I H,
H4); 2.92 (s, 3H, Me); 4,5 à 1,54 (m, 14H, CH2 ).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 143,77 (C9); 127,07 (C8); 126,01 (C3); 124,67 (C2);
61 ,73 (C4); 49,72-49,44 (C12-C14); 46,23 (C16); 42,75-42,38 (C1 1 -C15); 24,27 (C7); 21.94 (C5); 21 ,64 (C6). Pf = 176 °C. microanalyse : théorique %C(50,522); %H (7,12); %N (9,06); %S (10,355); analyse %C (50,6); %H (7,37); %N (8,75); %S(10,38).
E) (4-hydroxy-pipéridine)-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC209)
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBH3CN. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther
(80/20). Rendement=47%.
Base :
RMN ! H (CDC13) δ ppm : 7,05 (t, 2H; H2-H3); 3,8 (t, I H, H4); 3.69 (m, I H, H13); 2,73 à 1 ,4 (m, 14H, CH2).
RMN 13c (CDC13) δ ppm : 137,95 (C9); 137,5 (C8); 127,15 (C3); 121 ,3 (C2); 61 ,14 (C4); 44,65 (C1 1 -C15); 35,28-35,1 (C12-C14); 24,96 (C7); 22,73 (C5); 21 ,35 (C6).
Chlorhydrate :
RMN l H (DMSO) δ ppm : 10,86 (s, IH, ammonium); 7,43-7,40 (2d, 2H, H2-H3)
J23=0,83; 4,65 à 1 ,81 (m, 16H, alkyls).
RMN 13c (DMSO) δ ppm : 142,2 (C9); 128,9 (C8); 127,81 (C3); 123.7 (C2);
64,83 (C13); 59,9 (C4); 49,2-45,12 (C1 1-C15); 30,9-29,3 (C12-C 14); 24,16 (C7); 21 ,72 (C5); 21 ,4 (C6). Pf = 220,4-220,7°C. microanalyse : théorique %C(57,058); %H (7,31); %N (5,1 17); %O (5,846); analyse %C (57,25); %H (7,485) %N (5,362); %0 (6,23).
F) amino-4-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (IC088 ou ICI 40)
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBH3CN et à température ambiante durant 1 semaine. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant CH2 I2 + 1% MeOH. Rendement=88%.
Base : RMN ] H (CDC13) δ ppm : 7,05 (t, 2H, H2-H3); 3,95 (t, I II. H4); 2.77 (t, 211.
NH2); 2.2-1.42 (m, 6H, CH2).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 139,2 (C9); 136,5 (C8); 128,36 (C3); 122,18 (C2); 47,39 (C4); 33,63 (C7); 24,97 (C5); 20,94 (C6).
Chlorhydrate :
RMN lH (CDCL3+l%DMSO) δ ppm : 8,66 (s, 3H, ammonium); 7,2-7,18 (2d.
2H, FI2-H3) .123=0,39; 4,32 (t, IH, H4); 2,71 à 1 ,67 ( m, 6H, cH2).
RMN 13c (CDCL3+l%DMSO) δ ppm : 140,68 (C9); 130,69 (C8); 124,13 (C3);
123,45 (C2); 46,55 (C4); 28,27 (C7); 24,82 (C5); 20 (C6). Pf = 224,5-225,3 °C. microanalyse : théorique %C(50,69); %H (6,331 ); %N (7,386); %S ( 16.88): analyse %C (50,94); %H (6,438); %N (7,507); %S (16.514).
G) amino-7-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (ICI 78)
NH,
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBH3CN. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant CH2CI2 + 1 % MeOH. Rendement =42% .
Base :
RMN lH (CDCL3) δ ppm : 6,94 (2d, 2H, H2-H3) J23 =0,38ppm; 4,08 (t, IH, H7); 2,6 (m, 2H, NH2); 2,21 à 1,45 (m, 6H, H4-H5-H6). RMN 1 C (CDCL3) δ ppm : 141,65 (C9); 136, 1 (C8); 127,36 (C3); 123,03 (C2); 48,27 (C7); 35,5 (C4); 25,5 (C6); 21 ,4 (C5).
GC-MS : 60°C/10°min/250°C; 12,03 min; 153/125/110/97/80.
Chlorhydrate :
RMN lH (CDCL3 + l %DMSO) δ ppm : 8,79 (s, 3H, ammonium); 6,96-6,88 (2d, 2H, H2-H3) J23 = 0,45; 4,43 (t, IH, H7); 2,642 à 1 ,78 (m, 6H, CH2).
RMN 13C (CDCL3 + l %DMSO) δ ppm : 139,67 (C8); 132, 13 (C9); 128,52
(C3); 125,44 (C2); 46,55 (C7); 29,5 (C4); 26,42 (C6); 20 (C5). Pf = 205-
205, 5°C. microanalyse : théorique %C(50,693); %H (6,331); %N (7,386); %S (16,883); analyse %C (50,83); %H (6,256); %N (7,205); %S (17,037).
H) pipéridino-7-tétrahydro-4,5,6,7-benzothiophène (ICI 46)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (50/50).
Base :
RMN ll-I (CDCL3) δ ppm : 6,95-6,93 (2d, 2H, H2-H3); 3,99 (t, 1H,H7); 3,05 à
1 ,45 (m, 16H, CH2).
RMN i 3C (CDCL3) δ ppm : 140 (C9); 137,45 (C8); 127,21 (C3); 123,92 (C2);
62,26 (C7); 51,05-49,71 (C1 1-C15); 26,53-25,57-24,83-22,71-22,66-22,03 (C4-
C5-C6-C12-C13-C14).
Chlorhydrate :
RMN I ff (CDCL3) δ ppm : 1 1 ,79 (s, I H, ammonium); 7.09-7,06 (2d. 2H, H2-H3)
.123=0.48; 4,62 (t. I H, H7); 3,42 à 1 ,33 (m, 16H, cH2).
RMN πC (CDCL3) δ ppm : 143,31 (C9); 127,94 (C3); 126.87 (C2); 125.41 (C8);
62, 16 (C7); 51 ,806-48,96 (C1 1 -C15); 25,38-22,96-22.43-22,24-20,93 (C4-C5-C6-
C12-C13-C14). Pf = 171 -172 °C. microanalyse : théorique %C(60,68); %H (7,84); %N (5.45); %S (12.44); analyse
%C (60,75); %H (7,79); %N (5,365); %S (12,21).
1) morpholino-4-tétrahydro-4.5,6,7-benzothiophène (IC2- 16)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (60/40). Rcndement=58%.
Base
RMN I H (CDC13) δ ppm : 7,15-6,74 (2d, 2H, H2-H3) J23=0.4; 3,71 (m, 511. IT7-
H12-H14); 2,70-2,55 (m; 5H; H4-H1 1-H15); 1,98-1,70 (m. 4H, H5-H6).
RMN 13c (CDC13) δ ppm : 138,62 (C9); 137,64 (C8); 127,34 (C3); 123,88 (C2):
67,52 (C12-C14); 61,63 (C7); 48,77 (C1 1-C15); 25,51 (C4); 22,44 (C5); 22,08
(C6).
Chlorhydrate : RMN lH (CDC13) δ ppm : 7,31 -6,82 (2d, 2H, H2-H3) .123=0,49; 4,64-1 ,19 (m.
14H, H7-H12-H14-H4-H1 1-H15-H5-H6).
RMN 1 3C (CDC13) δ ppm : 143,58 (C9); 128,05 (C3); 127,31 (C2); 124,56 (C8); 63,68-63,26 (C12-C14); 62,17 (C7); 48,33 (C1 1 -C15); 25,26 (C4); 24.99 (C5); 20,52 (C6). Pf = 172,6-172,7°C.
microanalyse : théorique %C(55,53); %H (6,93); %N (5,39); %S (12.33); analyse %C (55,54); %H (6,80); %N (5,55); %S (12,43).
J) pipéridino-4-tétrahydro-4,5,6,7-thio-7-benzothiophène (IC237)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole. Rendement=70%.
Base :
RMN ] H (CDCL3) δ ppm : 7,09-6,98 (2d, 2H, FI2-H3) .123=0,104; 3,78 (t, IH.
H4); 3,14-0,93 (m, 14H, CH2).
RMN 13c (CDCL3) δ ppm : 134,68 (C9); 129,93 (C8); 128,58 (C3); 1 19,83 (C2);
60,32 (C4); 49,99 (C1 1-C15); 27,31 (C6-C5); 22,50 (C12-C14-C13).
Chlorhydrate :
RMN l H (CDCL3) δ ppm : 1 1,93 (s,lH, ammonium); 7,49-7,46 (2d, 2H, H2-H3)
.123=0,602; 4.78 (t, IH, H4); 3,52 à 1 ,32 (m, 14H, CH2).
RMN 13c (CDCL3) δ ppm : 136,9 (C9); 129 (C3); 124,12 (C8); 122,73 (C2); 60,07 (C4); 51 ,47-49,45 (Ci l -Cl 5); 26,91 (C6); 24,42 (C5); 22,89-22,41 (Cl 2-
C14); 22.24 (C13). Pf = 177,9-187,1 °C. microanalyse : théorique %C(52,298); %H (6,532); %N (5,08); %S (23,22): analyse %C (52,281); %H (6,583); %N (4,871); %S (23,481).
K) morpholine-4 tétrahydro-4,5,6,7-thio-7-benzothiophène (IC241)
L'aminé est recristallisée dans l'éther. Rendement=65%.
Base :
RMN !H (CDCL3) δ ppm : 7,02-7 (2d, 2H, H2-H3) J23=0,05ppm; 3,7 (m, 5H,
H4. H 12. H 14); 3,2 à 2,1 (m, 8H, FI5-H6-H1 1-H15).
RMN ! 3C (CDCL3) δ ppm : 130,33 (C9); 126,98 (C3); 122 (C8); 1 18,14 (C2);
67,45 (C12-C14); 60,75 (C4); 52-49,4 (C1 1-C15); 26.47 (C5); 22,8 (C6).
Chlorhydrate :
RMN ] H (DMSO) δ ppm : 1 1 ,12 (s, I H, ammonium); 7,47 (d, 2H, H2-H3)
.123=0,06; 4,72 (t, IH, H3); 3,94 à 2,12 (m, 12H, CH2).
RMN 1 3C (DMSO) δ ppm : 136,9 (C9); 130,07 (C3); 123,98 (C8); 122,12 (C2);
63.28-62.99 (C12-C14); 59,07 (C4); 50,27-47,83 (C1 1-C15); 23,92 (C5); 22,22
(C6). Pf = 192,8-192,9 °C. microanalyse : théorique %C(47,59); %H (5,76); %N (5,04); analyse %C
(47.498): %H (6,088); %N (4,886).
L) (N-méthyl pipérazine)-4-tétrahydro-4,5,6,7-thio-7-benzothiophène (IC242)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (60/40). Rendement=77%.
Base :
RMN l H (CDCL3) δ ppm : 7,17-7,14 (2d, 2H, H2-H3), 3,8 (t. IH, H4), 3,44-2,09
(m, 13 H, H4-H5-H6-H1 1-H12-H14-H15), 2,18 (s, 3H, H 16).
Chlorhydrate :
RMN I fl (DMSO) δ ppm : 12,02 (s, lH,ammonium), 7,49 (d, 2H, H2-H3), 4,75
(s, I H, ammonium), 3,64-2,13 (m, 13H, H4-FI5-H6-H1 1-H12-H14-H15), 2,84 (s,
3H, H16).
RMN 13C (DMSO) δ ppm : 136,04 (C9), 129,5 (C3), 124,74 (C8), 122,25 (C2),
58,87 (C4). 49,93 (C12-C14), 46,73 (Cl 6), 42,17 (Ci l), 41 ,01 (C15), 24,88 (C6).
22,81 (C5). Pf=156,8-157,5°C. microanalyse : théorique %C(44,069); %H (6,115); %N (8,56); %S (19,57) analyse %C (44,185); %H (6,242); %N (8,69); %S (19,796).
M) pipéridino-l -tétrahydiO-l ,2,3,4-thio-9-fluorène (IC207)
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBFl3CN et 1 eq de pyridine. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (80/20). Rendement=30%.
Base :
RMN l H (CDCL3) δ ppm : 8,5-7,78 (2d, 2H. H5-H8); 7,27 (m, 2H, H6-H7); 4,15 (t, I H, HI); 2,84 à 1 ,43 (m, 16H, CH2).
RMN 1 3C (CDCL3) δ ppm : 140 (C8a); 139,35 (C9a); 138,06 (C4b); 130,64 (C4a): 124.25-123.35-123,25-121,6 (C5, C6. C7, C8); 60,86 (Cl ); 49,35 (C l l - C15); 26,66-26,19-25-22,36-21 ,22(C2-C3-C4-C12-C13-C14).
Chlorhydrate :
RMN l H (CDCL3) δ ppm : 1 1 ,58 (s,lH, ammonium); 7,83-7,45 (2d, 2H, H5-H8);
7,39 (m, 2H, H6-H7); 4,53 (s, IH, HI); 3,8 à 1,3 (m, 16H, CH2).
RMN 13c (CDCL3) δ ppm : 147,47 (C8a); 138,57 (4b); 138,28 (C9a); 124.76-
124.26-122,65-120,77 (C5-C6-C7-C8); 122 (C4a); 60,35 (Cl); 53,65 (C15); 52,8 (Ci l ); 24,64-24,59-22,84-22,38-21 ,83-17,2 (C2-C3-C4-C12-C13-C14). Pf
=201 ,7-202°C. microanalyse : théorique %C(66,37); %H (7,15); %N (4,551); analyse %C
(66,59); %H (7,33); %N (4,251)
N) morpholine- -tétra
La réaction d'amination réductrice a été effectuée avec 0,7 eq de NaBH3CN et 1 cq de pyridine. L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther (80/20). Rendement=30%
Chlorhydrate :
RMN l H (CDCL3) δ ppm : 1 1 ,9 (s, I H, ammonium); 7,78 (d. 2H. H aromatiques); 7,32 (m, 2H, H aromatiques); 4,86 (m, IH, HI); 4,5 à 1.24 (m. 14H, CH2).
RMN 1 3C (CDCL3) δ ppm : 169,52 (C8a); 148,1 (C4b); 138,37 (C9a); 124.86- 124,38-122,75 (C5-C6-C7-C8); 120,57 (C4a); 63,42-63,21 (C12-C14); 60.96 (Cl); 51.63 (Cl 1-C15); 24,63-24 (C2-C4); 17,59 (C3). Pf = 198,4-198,5°C. microanalyse : théorique %C(62,06); %H (6,459); %N (4,522); analyse %C (62,084): %H (6,445); %N (4,92).
O) N-méthyl-pipérazine-l-tétrahydro-1 ,2,3,4-thio-9-fluorène (IC2-38)
Base :
RMN l l l (CDCL3) δ ppm : 8,34 (d, IH, H8); 7,72 (d, I H, H5); 7,28 (m, 2FI. H6-
H7); 4.1 (t, IH, HI). 2,28 (s, 3H, Me), 2,83-1 ,7 (m, 14H, CH2).
RMN ' X (CDCL3) δ ppm : 140,32 (C8a); 139,98 (C9a): 138,41 (C4b); 130 (C4a): 124.12-123,62-123,54-121 ,89 (C5-C6-C7-C8); 59,86 (C l ); 55.90 (C12- C14-C 1 1 -C 15); 46,29 (C16); 26,17-22,99-21,65 (C2-C3-C4). Pf =205.2-205,3°C. microanalyse : (C,7H22SN2.2HCl.H2O) théorique %C(54, 14); %I I (6,89); %N (7,42): analyse %C (54,18); %H (6,5); %N (7,47).
P) thio-l -piperidino-4 tétrahydro-l ,2,3,4-thio-9-fluorène (IC249)
Base :
RMN l ll (CDCL3) δ ppm : 8,08 (d, I H, H5), 7,68 (d, IH, H8), 7.28 (m. 2H, H6- H7). 4,06 (t. I H, H4), 3,13-0,89 (m, 14H, CH2).
Chlorhydrate : RMN lH (DMSO) δ ppm : 10,22 (s, IH, ammonium), 8,02 (d, I H, H5), 7,95 (d,
I H. H8). 7.39 (m, 2H, H6-H7), 5,05 (t, IH, H4), 4,50-1 ,36 (m, 14H, CFI2). RMN 1 3C (DMSO) δ ppm : 140,53 (C8a), 139,79 (C4b), 136,05 (C4a), 125,15 (C9a), 123,88-122,28-120,76-1 18,45 (C5-C6-C7-C8) 56,97 (C4), 52,14-51 ,07 (Cl 1 -C15), 22,55 (C2), 22,24 (C12-C14-C3), 21,45 (C13). Pf=169,2-169,4°C. microanalyse : théorique %C(59,01); %H (6,14); %N (4,23) analyse %C (59,09);
%H (6,29): %N (4,1 1 ).
Q) lhio- l -morpholino-4-tétrahydro-1.2,3,4-thio-9-fluorène (IC2-19)
L'aminé est recristallisée dans l'éther. Rendement=60%
Base :
RMN ] H (CDCL3) δ ppm : 7,91 (d, IH, H5), 7,68 (d, I H, H8), 7,33 (m, 2H, H6-
H7), 4,02 (t, I H, H4), 3,70-0,90 (m, 12H, CH2).
RMN 13c (CDCL3) δ ppm : 140,09 (C8a), 137,1 (C4b), 134,81 (C4a). 124,99
(C9a), 123.9-123,07-121 ,39-121,35 (C5-C6-C7-C8), 67,47 (C12-C14), 56,56
(C4), 49,89 (C l 1-C15), 25,16 (C2), 23,91 (C3).
Chlorhydrate :
RMN ] 1 I (CDCL3) δ ppm : 12,08 (s, IH, ammonium), 7.72 (m, 2H, H5-H8), 7,33 (m, 2H, H6-H7), 4,93 (t, IH, H4), 4,51-2,92 (m, 12H, CH2).
RMN 13c (CDCL3) δ ppm : 142,7 (C8a), 138,66 (C4b), 136,97 (C4a), 125,26
(C9a), 124,13-122,22-1 19,19-1 16,01 (C5-C6-C7-C8), 63,58-63,12 (C12-C14),
59,44 (C4). 53,25-50,72 (Cl 1-C15), 30,85 (C2), 23,85 (C3). Pf=128,6-128,7°C. microanalyse : (C15H17NOS2.HCl).l/2(H20) théorique %C(53,52); %H (5,35); %N (4,16); %S (19,01); %O (7,13) analyse %C (53,20); %H (5,77); %N (4,3); %S
( 19,00); %O (7,30).
R) lhio-1 -(N-méthyl pipérazine)-4-tétrahydro-l,2,3,4-thio-9-fluorène (IC2-21)
L'aminé est chromatographiée sur alumine neutre; éluant éther de pétrole / éther
(60/40). Rendement=68%.
Base :
RMN Ifl (CDCL3) δ ppm : 7,92 (d, IH, FI5), 7,66 (d, IH, H8), 7,24 (m, 2H, H6- H7), 4,04 (t, IH, H4), 3,33-0,85 (m, 12H, CH2), 2,26 (s, 3H, Me).
RMN 1 c (CDCL3) δ ppm : 140,16 (C8a), 137,05 (C4b), 134,39 (C4a), 125,58 (C9a).123,81-123-121,72-121,28 (C5-C6-C7-C8), 56,42 (C4), 55,64 (C12-C14), 49,1 (C16), 45,95 (C11-C15), 25,50 (C2), 23,95 (C3).
Chlorhydrate :
RMN ]H (DMSO) δ ppm : 11,71 (s, III, ammonium), 7,94 (d, 211, H5-H8), 7,39
(m, 2H, H6-H7).4,89 (s, IH, ammonium), 3,51-1,90 (m, 13 H, CFI2-FI4), 2,79 (s,
3 H, Me).
RMN 13c (DMSO) δ ppm : 139,60 (C8a), 136,21 (C4b-C4a), 125,06 (C9a), 123,86-122,22-120,90 (C5-C6-C7-C8), 56,57 (C4-C12-C14), 47,55 (Cl 6), 47,55-
46,28 (C11-C15), 22,7 (C2), 22,58 (C3). Pf=165-165,2°C. microanalyse : théorique %C(50,96); %H (5,83); %N (8,49); %S (16,97) analyse
%C (50,49); %H (5,93); %N (8,36); %S (16,99).
β) étude des propriétés biologiques des composés de l'invention
A) Test chimique de capture des radicaux OH- : (Free Rad. Res. Comms., Vol.14, Nos 5-6, pp.363-372)
Réaction :
Dans des tubes à hémolyses en verre refroidis au bain de glace, sont placés 200ml de tampon (30 mM Na2HPθ4.7H2O, 40 mM NaCl, 0, 1 mM EDTA), 125 ml de déoxyribose à 2.10-3 mM ainsi que 125 ml de solution 4 fois plus concentrée d'inhibiteur de radicaux (concentration finale de 0 à 0,5 mM). Au temps 0 sont ajoutés 50 ml de FeSθ4 à 10"3 mM (dans l'eau). Après 15 min d'incubation la réaction est arrêtée par 250 ml d'acide trichloroacétique à 3 % auxquels sont joints 250 ml de solution d'acide thiobarbiturique à 1 ,5 % (dans l'eau). Les tubes sont placés à 100°C pendant 10 min puis refroidis pour être révélés à l'UV à 532 nm. La relation linéaire A0/A= 1 + ks/kdr
[(compétiteur)/(2-déoxyribose)] a été utilisée, avec A0 et A les absorbances en absence et en présence de compétiteur, ks la constante de vitesse de réaction du compétiteur avec OH- et kdr= l ,9 * 10^ M_l sec'l la constante de vitesse de réaction du 2-déoxyribose avec OH-. Ainsi ks est égal à la pente de la droite A0/A = f((compétiteur)/(2-déoxyribose)) multipliée par kdr.
Test chimique de capture de radicaux OH' (p 36 du précédent document)
Composé kyiσ'M'sec 1) (±SEM)
D-mannose 0.94±0,06 vitamine C 1 ,87±0,17
TCP 2,75±0,13 ac.salicyl. 3,02±0,18
IC088 3,37±0,25
IC023 3,6X0,16
IC193 3,41±0,25
IC180 3,75±0,33
IC194 3,50±0,23
IC209 3,27±0,50
IC178 2,76±0,06
ICI 63 2,80±0,26
IC2-16 3,33±0,15
IC237 3,45±0,19
IC241 3,01±0,14
IC242 3,00±0,19
Les dérivés de l'invention sont tous chimiquement des capteurs d'OH'. Ils sont majoritairement aussi voir plus efficaces pour certains (5 composés entre 3,37 et 3.75) que l'acide salicylique (3,02±0,18) et bien supérieurs à la vitamine C
( 1.87±0.17) ou au D-mannose (0.94±0,06).
B) Mode opératoire sur cultures d'astrocytes et génération de radicaux par le couple xanthine/xanthine oxydase (X/XO) Mise en culture :
Dans des boîtes de culture 24 puits sont placés, dans chaque puits, 400/xl de D-lysine à 25μg / ml (9ml de D-lysine à lOOμg par ml de tampon borate (0, 1M pH 8,4) + 27 ml d'eau). Les puits sont placés à l'étuve (5 % CO2, 37 °C) pendant une nuit. Chaque puits est rincé par 2 fois 750μl de Hanks avant de recevoir le milieu de culture. 3 demi cortex latéraux sont prélevés sur rats de 1 à 2 jours. (L'hyppocampe, le striatum ainsi que les méninges sont retirés). Les demi cortex sont placés dans 2 ml de trypsine-EDTA puis mis à l'étuve durant
30min. L'action de la trypsine est arrêtée par 10% de sérum de veau foetal décomplémenté (200μl). Le sérum et la trypsine sont retirés puis les cellules sont dissociées à la pipette dans 10ml de milieu (MEM 225ml + SVF-D 25ml + glucose 20% 7,5ml) (MEM = milieu essentiel minimum ; SVF-D = sérum de veau foetal décomplémenté). Le milieu de culture est complété à 30ml, mélangé et placé à 400μl par puits. Le milieu est changé 2 fois par semaine durant 18 jours. Le dernier changement s'effectue 4 jours avant le traitement et par un milieu sans sérum de veau foetal décomplémenté. (MEM 31,5ml + glucose 20% 1 ,05ml). Le traitement a lieu au 18 ou 19°ème jour.
Test des produits :
Chaque puits est lavé par 750 μl de tampon (NaCl 124mM, KC1 4,6mM. CaCl2 l ,2mM, MgCl2 l ,3mM, KH2PO4 0,416mM, NaHCO 26,75mM, glucose lOmM; pH 7,4) durant 10 min. Les cellules sont incubées en présence de xanthine (500 μM) et du produit testé (de 0 à ImM). Au bout de 10 min on ajoute la xanthine oxydase (50mU/ml) et on laisse à nouveau incuber 10 min. La libération de radicaux est arrêtée par 3 lavages à la catalase (3000U/ml). La recapture de glutamate s'effectue alors dans une solution de glutamate radioactif (3H) à 40μM (dilution isotopique 1/20000). La recapture est arrêtée par 3 lavages au tampon froid. Les cellules sont décrochées à la soude 0,2N et la radioactivité est mesurée.
Contrôles
Dans un premier temps nous avons contrôlé que l'inhibition de recapture observée en présence de X/XO est bien due à un processus radicalaire. Pour cela nous avons introduit à la place des produits testés deux enzymes: la SOD (SuperOxyde Dismutase) et la catalase (figure 1). Alors que la SOD (qui active la dismutation des radicaux anions superoxides en eau oxygénée) ne peut à elle seule contrer l'effet de X/XO, la catalase (qui transforme l'eau oxygénée en oxygène et eau) permet de retrouver un taux de recapture normal. Ainsi la réaction de Fenton transformant l'eau oxygénée en OH- est court-circuitée. Cette expérience ne permet pas de distinguer complètement les effets respectifs de H2O2 et de OH- . Cependant, puisqu'il semble y avoir suffisamment d'élément réducteur dans le milieu pour favoriser la formation d'H2θ2 à partir de O2 il paraît vraisemblable qu'une partie importante d'H2θ2 donne des OH- (entité radicalaire très réactive). Dans un deuxième temps nous avons porté notre attention sur la relation qui existe entre la quantité de radicaux (ici la quantité de X/XO) et le pourcentage d'inhibition. Comme nous le voyons sur la figure 2, cette relation est linéaire (du moins dans le domaine des concentrations utilisées). Ce résultat nous laisse donc préjuger du type de courbe attendu en présence de produit. Les figures 3 à 8 sont la moyenne d'au moins 4 expériences indépendantes dans lesquelles le pouvoir protecteur de ICI 80, IC023, IC241 , IC2-16, ICI 78, IC140, IC209, IC237, IC146, IC193, IC194, IC242, IC207, IC2-19, IC219, IC2-21 , et IC249, en fonction de la dose a été testé contre une concentration fixe de radicaux, donc de X/XO. Dans le cas de ICI 80, le gain de recapture semble linéaire (on retrouve dans certaines expériences jusqu'à 100%). Nous avons par ailleurs montré que le produit seul (sans présence de X/XO) n'a aucune action sur la recapture. En ce qui concerne IC023, le début de la courbe est comparable mais, dès 15 % de recapture retrouvée, l'effet inverse se produit. Comme IC023 seul ne devient "toxique" qu'à partir de ImM, l'évolution observée à partir de 0,6 mM pourrait traduire l'existence de métabolites mal tolérés par les cellules. Le dérivé morpholine ICI 80 est plus intéressant.
Action des dérivés sur la xanthine oxydase : (Free Radical Biology & Medicine, Vol 20, No 1 , pp.35-43, 1996) Les expériences étant réalisées en présence de X/XO, nous avons vérifié que ces résultats n'étaient pas dus à une inhibition de l'enzyme.
Dans un volume final de 2ml on place 5ml de xanthine 20mM dans la soude 0, 1N ainsi que lOOmM et 500mM de produit à tester dans du tampon
phosphate à pH 7,4. La cinétique est amorcée par l'ajout de 50ml de solution de xanthine oxydase à 0.56U/ml. La formation d'urée est suivie par spectrographie UV à 290nm. L'allopurinol est un inhibiteur de référence.
Les composés de l'invention ne sont pas par eux-mêmes inhibiteurs de la
XO.
C) tests in vivo sur perfusion intracérébrale et génération de radicaux par injection de glutamate.
Préparation expérimentale : [J. Neurosci. Methods, 72 (1997) 123-135]
Les animaux sont des rats mâles de souche Wistar pesant 250 g. Sous anesthésie générale, les animaux sont placés dans un appareil de stéréotaxie. Un guide de canule est introduit par microchirurgie dans le striatum (coordonnées A : +0,02 cm; L : -0,30 cm et H : -0,65 cm par rapport aux point 0 défini selon Paxinos et Watson). Trois à quatre vis sont disposées sur le crâne de l'animal et l'ensemble est fixé par du ciment dentaire (Durelon). Après une période de récupération pendant laquelle les animaux sont habitués à l'expérimentateur, une canule de microdialyse CMA 12 est insérée dans le guide de sorte que la membrane de cellophane dépasse de 2 mm dans le tissu cérébral. Toutes les perfusions sont réalisées sur animaux vigiles. Une solution physiologique (NaCl : 140 mM; KG : 5 mM; CaCl2 : 3,9 mM) à laquelle sont ajoutés extemporanément 250 μiM de salicylate de Na, est injectée dans le système avec un débit constant de 1 μl.min"1. Le fluide sortant de la canule n'est pas collecté pendant les deux
premières heures de perfusion. Par la suite, des échantillons sont recueillis par fraction toutes les 20 minutes pendant 8 heures, et immédiatement congelés à - 30 °C.
Méthode de mesure : L'acide salicylique présent dans le liquide de perfusion réagit avec les radicaux OH libérés au site de perfusion pour former un composé, l'acide 2,3- dihydroxybenzoïque (2,3-DBHA), qui est spécifique de cette réaction. Ce produit de réaction est quantifié dans chaque échantillon par Chromatographie Liquide Haute Pression suivie d'une Détection Electrochimique. La phase stationnaire est une silice greffée C l 8. La phase mobile est une solution (KH2P04 : 30 mM ;
EDTA : 0,1 mM: trié hylamine 2 μM; octanesulfonate de sodium 1.1 μM) contenant 12 % d'un mélange méthanol/acétonitrile à 2/1 et équilibrée à pH 3,28 par de l'acide citrique. Cette phase mobile est maintenue à 25 °C et injectée avec un débit égal à 1 ,3 μl.min" . Le potentiel d'oxydation est fixé à 0,55 Volts.
Analyse :
L'analyse a été effectuée en trois étapes.
Perfusion 1 : après deux heures de perfusion dans des conditions normales, servant à établir le profil de libération de base des radicaux libres, le liquide de perfusion a été remplacé par un milieu contenant en plus 1 ,5 mM de glutamate de
Na, tous les autres composants restant identiques au milieu initial. Après 1 heure de perfusion par ce mélange, le milieu normal est réintroduit et la perfusion poursuivie. La figure 9 montre que l'introduction du glutamate provoque dans les fractions ultérieures une augmentation considérable de la libération de l'acide 2,3- dihydroxybenzoïque. Compte tenu des variations individuelles, ce profil de sécrétion, montré ici chez un individu, est reproductible (sensibilité, porosité de la microdialyse). A la fin de cette perfusion, les canules de microdialyse sont extraites des cerveaux et les animaux retrouvent leurs conditions habituelles de stabulation.
Perfusion 2 : une semaine après la perfusion 1 , les animaux subissent une nouvelle séance de perfusion dont le protocole diffère légèrement de la première session. Un des produits de l'invention est ajouté au milieu de perfusion, à la concentration de 1 mM, et maintenu présent une heure avant l'introduction du glutamate, pendant l'introduction du glutamate, puis une heure après le stimulus.
La figure 9 montre que la libération de radicaux libres induite par le glutamate, et visualisée par la variation de la concentration en acide 2,3-dihydiOxybenzoïque a
été totalement bloquée par injection d'un composé de l'invention. Ce blocage a été retrouvé chez tous les individus testés.
Perfusion 3 : une semaine après la seconde perfusion, les animaux sont à nouveau perfusés selon un protocole identique à la première perfusion. La figure 9, établie toujours pour le même individu, montre tout d'abord que le système est pleinement fonctionnel, en ce sens que malgré de multiples introductions et extractions de la canule de microdialyse, malgré de multiples perfusions, malgré de multiples stimulations par le glutamate, et malgré le traitement in situ par le dérivé IC 180, une injection de glutamate dans le striatum est toujours capable de promouvoir la libération locale de radicaux libres. Cet effet a été retrouvé chez tous les animaux.
Ceci démontre tout d'abord que lors de la seconde perfusion, l'absence de réponse à la stimulation glutamatergique était bien due à la présence du composé de l' invention, et non à une possible détérioration de la physiologie du système nerveux central. Ceci démontre de plus que l'introduction in situ de la drogue (IC
1 80) n'a pas eu de conséquence toxique secondaire, dans les conditions de l'étude.
γ) les composés de l'invention sont concentrés dans le cerveau
Préparation expérimentale : [Amer. J. Physiol., 267 (1994) R164-R170] Sous anesthésie générale, des cathéters formés par des tubes de polyéthylène souple et inerte de PE50 (Clay Adams) sont mis en place dans la carotide droite de rats mâles de souche Wistar pesant 250 g, et glissés sous la peau pour émerger au niveau de la nuque en un site inaccessible pour l'animal. Les injections sont effectuées 5 jours après, afin de permettre aux animaux une récupération post- opératoire optimale. Ce dispositif permet des injections systémiques aisées et très rapides sur l'animal vigile.
Méthode de mesure :
Au temps spécifié après l'injection, les animaux sont euthanasiés par décapitation. Les cerveaux sont extraits en moins d'une minute sans fractionnement ultérieur. Les méninges sont rapidement séparées et les cerveaux sont rincés dans un grand volume de sérum physiologique avant d'être congelés à -30°C. Le sang est recueilli sur EDTA dans des tubes maintenus à 0°C. Après centrifugation, le plasma est séparé et des fractions aliquotes sont conservées à - 30°C.
Après décongélation, les cerveaux sont pesés et homogénéisés à froid dans 3 volumes de NaOH (0, 1N), au moyen d'un broyeur Ultra-Turrax. Un standard interne, en concentration adéquate, est ajouté à chaque échantillon pour tenir compte des variations individuelles de l'extraction. Les broyats sont directement extraits en trois fois par un total de 6 volumes d'acétate d'éthyle, sui\ is chaque fois d'une centrifugation à haute vitesse.
Hormis l'étape de broyage, les plasma sont traités de manière analogue. Les extraits sont filtrés à travers une membrane Millipore de 0.22 μm et. après évaporation du solvant sous courant d'azote, les extraits secs sont stockés à - 30°C.
La présence et la concentration du composé IC 180 dans les échantillons a été mise en évidence par comparaison avec des échantillons standards de concentration connue après séparation pai Chromatographie Liquide Flaute Pression sur une colonne de silice suivie d'une détection UV à 230 uni.
Analyse :
Un des composés de l'invention (IC 180), dilué dans du sérum physiologique, est injecté à une concentration égale à 20 mg.kg" . La figure 10 montre que 30 min après, il est retrouvé préférentiellement dans le cerveau des animaux, et nettement identifiable dans le plasma. Sa concentration décroît environ de 50% dans le cerveau, 1 heure après l'injection. Cependant, dans le plasma des mêmes animaux, la drogue n'est que très faiblement détectable. Le rapport des concentrations entre le cerveau et le plasma augmente donc entre 30 et 60 minutes après l'injection. En conséquence, il est montré que la drogue :
- est dépourvue d'effet toxique rapide dans les conditions de l'étude;
- pénètre facilement et rapidement dans le système nerveux central, où elle est à même d'atteindre ses objectifs.
LEGENDES DES FIGURES
- Figure 1 : histogramme de l' inhibition de la recapture du glutamate par les astrocytes ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est représenté en ordonnée ; les colonnes 1 à 8 correspondent respectivement aux pourcentages de recapture en l'absence de X/XO (1), en présence de X/XO (2), en présence de
X/XO et de SOD (3), en présence de X/XO et de catalase (Cat) (4), en présence
de X/XO, SOD et de Cat (5), en présence de SOD (6), en présence de Cat (7), en présence de SOD et de Cat (8).
- Figure 2 : courbe de l'inhibition de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration de X/XO ; le pourcentage d'inhibition de la recapture est indiqué en ordonnée ; les concentrations en X/XO sont indiquées en abscisse en μM/mU (multipliées par 10 pour XO (XO x 10 ; mU = milliUnités).
- Figure 3 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration des composés IC241 (V), ICI 80 (T), IC2-16 (A), IC178 (•), IC140 (o), IC209 (B) et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est représenté en ordonnée, et la concentration (en mM) des composés est indiquée en abscisse.
- Figure 4 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration de IC023 (•), et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3 H] glutamate est représenté en ordonnée, et la concentration (en mM) de
IC023 est indiquée en abscisse.
- Figure 5 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration des composés IC237 (•), IC146 (o), IC193 (V), et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est représenté en ordonnée, et la concentration (en μM) des composés est indiquée en abscisse.
- Figure 6 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration des composés IC194 (•), IC242 (o), et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est représenté en ordonnée, et la concentration (en mM) des composés est indiquée en abscisse.
- Figure 7 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration des composés IC207 (V), IC219 (Θ), IC2-21 (o), IC249 (•), et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est
représenté en ordonnée, et la concentration (en μM) des composés est indiquée en abscisse.
- Figure 8 : courbe de la recapture du glutamate par les astrocytes en fonction de la concentration des composés IC2-19 (•), et en présence d'une quantité fixe de X/XO bloquant à 50% la recapture de glutamate ; le pourcentage de recapture de [3H]glutamate est représenté en ordonnée, et la concentration (en μM) de IC2-19 est indiquée en abscisse.
- Figure 9 : courbe de la sécrétion de radicaux libres en réponse à la stimulation par le glutamate. Blocage par injection de la drogue ICI 80 ; première perfusion (D), deuxième perfusion (A), troisième perfusion (o) ; les fractions recueillies sont indiquées en abscisse ; la concentration en fmole/5μl de 2,3-DBHA formé est indiqué en ordonnée.
- Figure 10 : courbe du rapport des concentrations de ICI 80 dans le cerveau et le plasma ([IC180]cerveau/[IC180]plasma, indiqué en ordonnée), en fonction du temps (indiqué en minutes en abscisse).
Claims
1. Composés de formule générale (I) suivante
dans laquelle :
- R et R2 indépendamment l'un de l'autre représentent un atome d'hydrogène, un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, un groupe hydroxyle, un atome d'halogène, notamment un atome de chlore, brome, iode ou fluor, ou R\ et R2 forment, en association avec les atomes de carbone qui les portent, un cycle, aromatique ou non, substitué ou non, de 4 à 8 atomes de carbones dans le cycle, notamment un cycle benzénique,
- R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle,
- X et Y indépendamment l'un de l'autre représentent CH2, ou un hétéroatome tel qu'un atome de soufre S, ou un groupe de formule
/ \
N A
\ /
dans laquelle A représente : . un groupe
Z
dans lequel Z représente CH ou N, R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, ou un groupe hydroxyle, ou un hétéroatome tel que O ou S, l'un au moins de X ou de Y représente un groupe de formule
Rx ^R5 N
I CH
dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis ci-dessus.
2. Composés selon la revendication 1 , de formule (I) dans laquelle :
- R\ et R2 représentent un atome d'hydrogène, ou R\ et R2 forment en association avec les atomes de carbone qu'ils portent un cycle benzénique,
- R3 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 5 atomes de carbone, notamment un groupe méthyle, - l' un de X ou de Y représente un groupe de formule
dans laquelle R4 et R5 représentent un atome d'hydrogène, ou R4 et R5 forment en association avec l'atome d'azote qui les porte un hétérocycle de formule :
/ \
N A
\ /
dans laquelle A représente un groupe
*6 y z \
dans lequel Z représente CH ou N, et R représente un atome d'hydrogène, un groupe méthyle, ou un groupe hydroxyle, ou un hétéroatome tel que O ou S.
3. Composés selon la revendication 1 ou la revendication 2. de formule (II) suivante :
dans laquelle R3, R4, et R5 ont les significations indiquées dans la revendication 1 ou la revendication 2, et Y représente -CH2- ou un atome de soufre S.
4. Composés selon la revendication 3, représentés par les formules suivantes :
ICI 94
5. Composés selon la revendication 1 ou la revendication 2, de formule (III) suivante :
dans laquelle R3, R4 et R5 ont les significations indiquées dans la revendication 1 ou la revendication 2.
6. Composés selon la revendication 5, représentés par les formules suivantes :
ICI 46
IC2-16
7. Composés selon la revendication 1 ou la revendication 2, de formule (IV) suivante :
dans laquelle R3, R4, et R5 ont les significations indiquées dans la revendication 1 ou la revendication 2.
8. Composés selon la revendication 7, représentés par les formules suivantes •
IC249 IC2-19 IC2-21
9. Composés selon la revendication 1 ou la revendication 2, de formule (V) suivante :
10. Composés selon la revendication 9, représentés par les formules suivantes :
11. Utilisation d'au moins un composé de formule générale suivante
dans laquelle :
- R et R2 sont tels que définis dans la revendication 1 ou 2,
- X, Y, U et V, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CHR3-, R3 étant tel que défini dans la revendication 1 ou 2, ou un hétéroatome tel qu'un atome de soufre S, l'un au moins de X, Y, U ou V, représente un groupe de formule x R5
N
I
CH
dans laquelle R4 et R5 sont tels que définis dans la revendication 1 ou 2, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies liées à des concentrations anormalement élevées de glutamate extracellulaire.
12. Utilisation selon la revendication 11, d'au moins un composé tel que décrit dans l'une des revendications 1 à 10.
13. Utilisation selon la revendication 11 ou 12, dans le cadre du traitement :
- de cas pathologiques aigus de mort neuronale tels que :
. les ischémies, notamment celles causées par les hémorragies cérébrales, les caillots sanguins, les accidents vasculaires cérébraux (AVC) tels que ceux provenant d'accidents cardiaques, ou encore les spasmes artériels causés par un manque d'alimentation des cellules,
. les traumatismes du système nerveux central en général, notamment ceux de la moelle épinière, . l'attaque cérébrale (STROKE),
. les effets de toxiques exogènes sur le SNC,
- des affections chroniques neurodégénératives telles que :
• la maladie d'Alzheimer,
. la maladie de Parkinson, . la chorée de Huntington,
. la sclérose latérale amyotrophique
. les effets du vieillissement.
14. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif au moins un composé tel que décrit dans l'une des revendications 1 à 11, le cas échéant sous forme de sel, notamment de chlorhydrate, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
15. Composition pharmaceutique selon la revendication 14, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme administrable par voie orale, parentérale ou rectale, et en ce que les doses de principe actif sont comprises entre environ 0,1 à environ 50 mg/kg/jour.
16. Composition pharmaceutique selon la revendication 14 ou la revendication 15, caractérisée en ce que : le dosage des formes administrables par voie parentérale dans le cadre du traitement des affections aiguës est compris entre 0, 1 à 10 mg/kg/jour par voie intraveineuse, et entre 0,5 à 30 mg/kg/jour par voie intramusculaire, le dosage des formes administrables par voie orale ou parentérale dans le cadre du traitement des affections chroniques est compris, respectivement, entre 5 à 50 mg/kg/jour per os, et entre 0, 1 à 5mg/kg/jour par voie intramusculaire.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP98928355A EP0984953A1 (fr) | 1997-05-22 | 1998-05-22 | Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention |
| US09/424,208 US6514967B1 (en) | 1997-05-22 | 1998-05-22 | Compound for preparing medicines for treating pathologies involving extracellular glutamate, and methods for obtaining same |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9706265A FR2763589B1 (fr) | 1997-05-22 | 1997-05-22 | Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention |
| FR97/06265 | 1997-05-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO1998052936A1 true WO1998052936A1 (fr) | 1998-11-26 |
Family
ID=9507124
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/FR1998/001029 WO1998052936A1 (fr) | 1997-05-22 | 1998-05-22 | Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6514967B1 (fr) |
| EP (1) | EP0984953A1 (fr) |
| FR (1) | FR2763589B1 (fr) |
| WO (1) | WO1998052936A1 (fr) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX2007006178A (es) * | 2004-11-23 | 2007-06-20 | Ptc Therapeutics Inc | Fenoles substituidos como agentes activos que inhiben la produccion del factor de crecimiento endotelial vascular. |
| CN115894434A (zh) * | 2022-11-14 | 2023-04-04 | 山东厚德精诚药业有限公司 | 一种4-哌嗪基苯并噻吩盐酸盐的制备方法 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3972895A (en) * | 1974-04-05 | 1976-08-03 | American Cyanamid Company | Benzothienylisothiocyanates |
| US4036979A (en) * | 1974-01-25 | 1977-07-19 | American Cyanamid Company | Compositions containing 4,5,6,7-tetrahydrobenz[b]thien-4-yl-ureas or derivatives and methods of enhancing growth rate |
| US4134899A (en) * | 1975-11-04 | 1979-01-16 | American Cyanamid Company | Novel 4,5,6,7-tetrahydro-7-oxy(oxy)benzo [b]thiophen-4-amine compounds useful as animal growth regulants |
| US4154740A (en) * | 1976-03-23 | 1979-05-15 | American Cyanamid Company | Substituted tetrahydrobenzothiophenes and method of preparation thereof |
| EP0207563A2 (fr) * | 1985-07-01 | 1987-01-07 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Méthode pour maîtriser des mauvaises herbes |
| EP0280268A1 (fr) * | 1987-02-27 | 1988-08-31 | Ciba-Geigy Ag | Thiénothiopyranes |
| EP0289066A1 (fr) * | 1987-04-02 | 1988-11-02 | Janssen Pharmaceutica N.V. | 1H Imidazoles-1,5 substitués |
| EP0314852A2 (fr) * | 1987-11-06 | 1989-05-10 | Ciba-Geigy Ag | Procédé de préparation d'acide imidazol-1-substitué carbonique et dérivés |
| WO1990005524A2 (fr) * | 1988-11-21 | 1990-05-31 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Compositions pharmaceutiques pour la neuroprotection contenant des arylcyclohexylamines |
| WO1991009032A1 (fr) * | 1989-12-18 | 1991-06-27 | Novo Nordisk A/S | Composes de piperidine et composition pharmaceutique |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU581865B2 (en) * | 1983-11-15 | 1989-03-09 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Herbicidal substituted-thiophene sulfonamides |
| JPS62138489A (ja) * | 1985-12-12 | 1987-06-22 | Tokuyama Soda Co Ltd | 臭素化チオフエンの製造方法 |
| FR2734819B1 (fr) * | 1995-05-31 | 1997-07-04 | Adir | Nouveaux composes de la piperazine, de la piperidine et de la 1,2,5,6-tetrahydropyridine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
-
1997
- 1997-05-22 FR FR9706265A patent/FR2763589B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-05-22 US US09/424,208 patent/US6514967B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-05-22 WO PCT/FR1998/001029 patent/WO1998052936A1/fr not_active Application Discontinuation
- 1998-05-22 EP EP98928355A patent/EP0984953A1/fr not_active Withdrawn
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4036979A (en) * | 1974-01-25 | 1977-07-19 | American Cyanamid Company | Compositions containing 4,5,6,7-tetrahydrobenz[b]thien-4-yl-ureas or derivatives and methods of enhancing growth rate |
| US3972895A (en) * | 1974-04-05 | 1976-08-03 | American Cyanamid Company | Benzothienylisothiocyanates |
| US4134899A (en) * | 1975-11-04 | 1979-01-16 | American Cyanamid Company | Novel 4,5,6,7-tetrahydro-7-oxy(oxy)benzo [b]thiophen-4-amine compounds useful as animal growth regulants |
| US4154740A (en) * | 1976-03-23 | 1979-05-15 | American Cyanamid Company | Substituted tetrahydrobenzothiophenes and method of preparation thereof |
| US4156670A (en) * | 1976-03-23 | 1979-05-29 | American Cyanamid Company | Substituted tetrahydrobenzothiophenes and method of preparation thereof |
| EP0207563A2 (fr) * | 1985-07-01 | 1987-01-07 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Méthode pour maîtriser des mauvaises herbes |
| EP0280268A1 (fr) * | 1987-02-27 | 1988-08-31 | Ciba-Geigy Ag | Thiénothiopyranes |
| EP0289066A1 (fr) * | 1987-04-02 | 1988-11-02 | Janssen Pharmaceutica N.V. | 1H Imidazoles-1,5 substitués |
| EP0314852A2 (fr) * | 1987-11-06 | 1989-05-10 | Ciba-Geigy Ag | Procédé de préparation d'acide imidazol-1-substitué carbonique et dérivés |
| WO1990005524A2 (fr) * | 1988-11-21 | 1990-05-31 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Compositions pharmaceutiques pour la neuroprotection contenant des arylcyclohexylamines |
| WO1991009032A1 (fr) * | 1989-12-18 | 1991-06-27 | Novo Nordisk A/S | Composes de piperidine et composition pharmaceutique |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| UEMATSU N ET AL: "Asymmetric Transfer Hydrogenation of Imines", J. AM. CHEM. SOC. (JACSAT,00027863);96; VOL.118 (20); PP.4916-17, Research Development Corporation of Japan;ERATO Molecular Catalysis Project; Toyota; 470-03; Japan (JP), XP002080164 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US6514967B1 (en) | 2003-02-04 |
| FR2763589B1 (fr) | 2001-01-05 |
| EP0984953A1 (fr) | 2000-03-15 |
| FR2763589A1 (fr) | 1998-11-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0706512B1 (fr) | Derives d'acetamide et leur utilisation comme modificateurs du comportement de prise alimentaire | |
| US20200190074A1 (en) | Lactam compound as fxr receptor agonist | |
| HU228956B1 (en) | Phenyl-piperazine derivatives as serotonin reuptake inhibitors | |
| EP0487408A1 (fr) | Dérivés d'oxazolopyridines leurs procédés de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| FR2513250A1 (fr) | Nouvelles cyclobutene-3,4-diones substituees | |
| CN103038223A (zh) | 作为金属螯合剂的脱氮杂去铁硫辛类似物 | |
| CN104470893A (zh) | 氟化2-氨基-4-(苄基氨基)苯基氨基甲酸酯衍生物 | |
| AU2009330131B2 (en) | Compounds and methods for the treatment of pain and other diseases | |
| EP0239436B1 (fr) | Nouveau dérivé tricyclique dénommé acide (chloro-3 méthyl-6 dioxo-5,5 dihydro-6, 11 dibenzo (c,f) thiazépine (1,2) yl-11 amino) -5 pentanoique, son procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui le contiennent | |
| AU771865B2 (en) | Novel quaternary ammonium derivatives, method for preparing same and pharmaceutical use | |
| WO1998052936A1 (fr) | Composes pour la preparation de medicaments destines au traitement de pathologies impliquant le glutamate extracellulaire, et leurs procedes d'obtention | |
| EP0301936B1 (fr) | Dérivés de pipéridine, leur préparation et leur application en thérapeutique | |
| EP2094675A1 (fr) | Sel de 3-benzyl-2-méthyl-2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahydrobenzo[d]isoxazol-4-one | |
| AU2018276382B2 (en) | Synergistic compositions comprising (R)-dimiracetam (1) and (S)-dimiracetam (2) in a non-racemic ratio | |
| EP2010481A1 (fr) | Composes de type 1, 4-naphtoquinones, compositions les comprenant et utilisation de ces composes en tant qu'agents anti -cancereux | |
| CA2045849A1 (fr) | Derives d'oxazolo pyridines, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| CH661271A5 (fr) | Derives de piperazine et d'homopiperazine, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques les renfermant. | |
| CH637112A5 (fr) | Derives benzylideniques. | |
| EP0813529B1 (fr) | Analogues de l'arginine ayant une activite en tant qu'inhibiteurs de la no synthase | |
| CH658786A5 (fr) | Medicaments qui contiennent d'alpha-(n-pyrrolyl)-acides ou de leurs sels ou esters. | |
| US20020161030A1 (en) | Sulpur derivatives containing a retroamide bond as inhibitors of endothelin-converting enzymes | |
| JP3857428B2 (ja) | 抗真菌剤 | |
| FR2697520A1 (fr) | Dérivés de benz[e]indende. | |
| EP0430800A1 (fr) | Nouvelles benzothiazolinones substituées, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| EP0022737B1 (fr) | Imines dérivées de l'amino-5 benzodioxole-1,3 utiles comme médicaments et leur préparation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AK | Designated states |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): JP US |
|
| AL | Designated countries for regional patents |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE |
|
| DFPE | Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101) | ||
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application | ||
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 1998928355 Country of ref document: EP |
|
| WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 09424208 Country of ref document: US |
|
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: JP Ref document number: 1998550064 Format of ref document f/p: F |
|
| WWP | Wipo information: published in national office |
Ref document number: 1998928355 Country of ref document: EP |
|
| WWW | Wipo information: withdrawn in national office |
Ref document number: 1998928355 Country of ref document: EP |