WO1997043912A1 - Composition alimentaire destinee a abaisser la teneur en graisses dans le corps et a ameliorer la composition du corps et procede afferent - Google Patents

Description

明 細 書

体脂肪率低下体組成改善食組成物及び体脂肪率 低下体組成改善方法

技 術 分 野

本発明は新 しい体脂肪率低下体組成改善食組成物及び 体脂肪率低下体組成改善方法に関する。

背 景 技 術

近年、 健康やシ ェ イ プア ッ プ、 ダイ エ ツ ト 等に対する 意識が高ま り、 例えばジ ョ ギング、 サイ ク リ ング、 登山 等のスポーツ人口が増えてお り、 之等の運動時に、 エネ ルギ一を補給する と共に、 筋肉増加、 シ ェ イ プア ッ プ等 を図 り 得る、 良質の高蛋白質を容易且つ簡便に摂取でき る食品組成物が種々 研究開発されつつあ る。 本発明者ら も、 上記スポーツ時の栄養補給のための食品組成物を提 供する こ とを 目的と して鋭意研究を重ねた結果、 先にこ の目的に適 した高蛋白高粘性栄養補給食品組成物の開発 に成功 した （特公平 7 — 1 0 2 1 1 2 号公報参照） 。 こ の ものは、 スポー ツ時の栄養補給の他に も、 例えば病院 内において、 術後の回復期、 肝疾患回復期、 腎疾患等の 患者がべ ッ ト上で容易、 簡便に摂取でき る ものであ っ た 力、 これを摂取する ヒ トの脂肪低下や体組成改善には、 尚充分な効果を奏 し得る ものではなかつ た。 従っ て本発明の 目 的は、 上記脂肪低下、 体組成の改善 を行ない得る新 しい食品組成物乃至その摂取方法を提供

" る とに i>る。

本発明者 らはこ の 目 的よ り、 引き続き研究を重ねた結 果、 上記食品組成物を始めとする特定の食品類を、 運動 との関連において、 所定の摂取タ イ ミ ン グによ り 摂取さ せる時には、 実に驚 く べき こ とに、 筋肉重量を増加させ るだけでな く、 脂肪重量を低下させ、 体組成を改善でき る こ とを見いだ した。 本発明は こ の新 しい知見によ り 完 成された ものである。

発 明 の 開 示

即ち、 本発明によれば、 乾燥重量基準で蛋白質 1 0 〜 6 5 % (重量％、 以下同 じ） 、 脂肪 5 〜 2 5 %及び炭水 化物 1 5 〜 7 0 %を含有する食品組成物を、 運動前、 運 動中及び/又は運動後に、 好ま し く は休息期前の運動後 に、 摂取させる こ とを特徴とする体脂肪率低下体組成改 善方法及びそのための体脂肪率低下体組成改善食組成物 が提供される。

特に好ま しい本発明組成物と しては、 乾燥重量基準で 蛋白質 4 0 ~ 6 5 % (重量％、 以下同 じ） 、 脂肪 5 〜 2 5 %及び炭水化物 1 5 〜 4 0 %か らな り、 粘度力 5 0 0 〜 3 0 0 0 c p ( 3 0 ° (：、 B型粘度計によ る ） の 範囲にあ り 且つア ミ ノ 酸ス コア一 （ 2 〜 5才を基準とす る ） が 8 0以上であ る ものを例示でき る。

こ こで、 ア ミ ノ 酸ス コア一 （ 2 ~ 5才を基準とする） は、 1 9 8 5年の F A O /WH O / U N U合同委員会で 策定 した以下のア ミ ノ 酸評点パタ ー ン （学齢期前 2 〜 5 歳） に従う ものであ る。

ア ミ ノ 酸略号 蛋白暂当 り の必須ア ミ ノ 酸（mg/g蛋白晳） H i s 1 9

I 】 e 2 8

L e u 6 6

L y s 5 8

C y s 2 5

Γ y r 6 3

T h r 3 4

T r p 1 1

V a 1 3 5

合計 （ H i s込み） 3 3 9

( H i s 除 く ） 3 2 0

尚、 蛋白質量は 「窒素 x 6. 2 5 」 であ る。

本発明組成物は、 それ自体良質の蛋白質を高濃度で含 有するのみな らず、 栄養補給に必要な脂肪及び炭水化物 をバラ ンスよ く 含んでお り、 これが運動前、 運動中及び /又は運動後、 特に休息期前の運動後に摂取される 時に は、 該運動によ り体蛋白質同化作用が亢進された状態に おいて、 筋肉組織等に選択的に蛋白質が取 り 込まれる一 方、 脂肪がエネルギー源と して燃焼消費される結果、 体 組成を改善 して、 シ ェイ プア ッ プ、 体作 り、 筋肉増加、 筋力強化等をみごとに行な う こ とができ る。

以下、 本発明の栄養補給食品組成物につき詳述すれば. 該組成物は上記特定組成の蛋白質、 脂肪及び炭水化物を 含有する こ とを必須と して、 他は通常の この種栄養補給 食品等と同様に して調製する こ とができ る。

上記蛋白質と しては、 例えばカゼイ ン及びその塩類、 ゼラチ ン及びその塩類、 水溶性ゼラ チ ン （酵素分解ゼラ チ ン等） 、 全脂粉乳、 脱脂粉乳、 大豆蛋白、 コー ン グル テ ン ミ ール、 小麦蛋白等を、 脂肪と しては、 例えば大豆 油、 オ リ 一ブ油、 中鎖 ト リ グ リ セラ イ ド （ M C T ) 、 綿 実油、 ヒマ ヮ リ 油、 カ カオ脂、 ゴマ油、 米油、 サフ ラ ヮ 一油、 落花生油、 パーム油、 菜種油等を、 ま た炭水化物 と しては例えばデキス ト リ ン、 蔗糖、 果糖、 ブ ドウ糖等 の単糖類、 麦芽糖、 マル ト ース等の二糖類、 フ ラ ク トォ リ ゴ糖、 ラ ク トオ リ ゴ糖、 ガラ ク ト シ ノレラ ク ト ー ス、 ラ ク ト シ ユ ー ク ロース等のオ リ ゴ糖等をそれぞれ例示する こ とができ る。 本発明組成物における上記各成分の配合割合は、 以下 の範囲か ら選択されるのがよい。

成 分 ΙΛ¾(Λ

權 ,口 S口 (wt¾) fill '口 S口 (wt%) (wt¾)

1 0 〜 6 5 4 0 〜 6 5 4 0 ~ 5 3 脂 肪 5 ~ 2 5 5 〜 2 5 1 0 ~ 1 8 炭水化物 1 5 〜 7 0 1 5 〜 4 0 2 0 ~ 3 5 尚、 上記蛋白質量は、 蛋白源と しての純分換算量で表 わされ、 これは原料物質の窒素含量をゲルダール法によ り 測定 して求めた ものである。

更に、 本発明組成物には、 必要に応 じて こ の種栄養補 給食品に通常添加配合される こ とのよ く 知 られている各 種の添加剤を配合する こ とができ る。 該添加剤と しては. 例えば各種ビタ ミ ン類、 ミ ネラル類、 合成香料及び天然 香料等の香料、 天然甘味剤 （ ソーマチ ン、 ステ ビア等） . 合成甘味剤 （サ ッ カ リ ン、 ステ ビア抽出物、 ァスバルテ ーム等） 、 着色料等や風味物質 （チーズ、 チ ョ コ レー 卜 等） 、 更に例えばポ リ デキス 卜 ロ ース、 ぺク チ ン酸及び その塩類、 アルギン酸及びその塩類等の所謂ダイ ェタ リ —フ ァ イバ'一等を例示する こ とができ る。 之等は 1 種単 独でも ま た 2種以上組合わせて も利用でき る。 之等添加 剤の配合割合は、 特に限定される ものではないが、 通常 本発明組成物 1 0 0 重量部に対 して 0 〜 2 0 重量部程度 の範囲から選択されるのが一般的である。

本発明組成物は、 上記各成分を混合 して調製され、 そ の調製方法は特に制限される ものではない力 例えば脂 溶性成分 （油脂及びその他の油脂溶解性原料成分） に、 必要に応 じて レ シチ ン、 シ ュ ガーエステル等の通常慣用 される乳化剤及び蛋白質、 糖質等の乳化補助剤を加え、 混合物を常法に従い機械的に、乳化する方法を採用でき、 これによ り、 本発明組成物を調製でき る。

か く して得られる本発明組成物 （液剤形態の本発明食 品） は、 これを適当な容器に充填 した後、 レ トル ト殺菌 ( 1 2 0 °C、 2 0 分） して保存性を有する製品とする こ とができ、 これは直接又は適宜希釈 して利用でき る。

上記のごと く して調製される本発明組成物は、 腸管内 での分解 （消化） 吸収を適当な速度で進行させ得、 浸透 圧も低 く、 従っ て これを摂取する ヒ ト の下痢発生のおそ れをほぼ完全に回避 して、 この種食品本来の栄養状態改 善効果を奏 し得る と共に本発明に従う 適当な摂取タ イ ミ ングでの摂取によ り、 本発明所期の脂肪低下、 体組成改 善効果を安定 して且つ充分に発揮させ得る。

その摂取量は、 これを摂取する ヒ ト の年齢、 体重、 性 別、 摂取目 的等に応 じて適宜決定でき、 特に限定的では ないが、 通常、 乾燥重量と して 1 回約 1 0 ~ 3 0 g、 全 容量と して約 5 0 - 3 0 0 c c の範囲か ら選択されるの がよい。

本発明においては、 上記特定組成の組成物を、 運動前. 運動中及び Z又は運動後、 特に休息期前の運動後に摂取 させる こ とが重要である。 こ こ で、 「休息期前」 とは、 夕方以降寝るまでの期間をいい、 「運動」 とは、 例えば. 体操、 散歩、 ジ ョ ギング、 サイ ク リ ング、 ゴルフ、 テニ ス、 スイ ミ ング、 マラ ソ ン、 ト ラ イ アス ロ ン等を問わな いが、 通常用い られる意味における筋肉を働かせる こ と をいう。 ま た 「運動後」 とは、 上記運動の直後乃至 1 時 間後、 好ま し く は直後をいい、 イ ンタ ーバルのあ る運動 については、 全運動終了後をい う もの とする。 ま た、 上 記マラ ソ ンや ト ラ イ アス ロ ン等のよ う に運動が長期に亘 つ て行なわれる ものでは、 その運動中に本発明組成物を 摂取させるのが望ま しい。

か く して、 本発明によれば、 上記特定の摂取タイ ミ ン グで特定食品組成物を摂取させる こ とによ っ て、 ェネル ギー補給、 筋肉増加、 体蛋白増加、 シ ェ イ プア ッ プ等の 所望の効果を奏 し得、 しかもその摂取 自体非常に容易簡 便であ る利点があ る。

かかる本発明の体脂肪率低下体組成改善食組成物の特 定の摂取手段によれば、 殊に脂肪組織重量の低下、 筋肉 重量の増加等の改善が認め られ、 ま た本発明組成物はそ の摂取によ っ て も下痢、 嘔吐、 吐気、 腹部不快感等の副 作用が極めて軽微であ る利点 も あ る。

図面の簡単な説明

図 1 は、 試験例 2 に従う 実験の実験スケ ジ ュ ールを示 す。

図 2 は、 試験例 2 に従う 実験の結果であ る被験物投与 中の動脈血漿フ ニニルァラ二 ン濃度の変化量を示すグラ フであ る。

図 3 は、 試験例 3 に従う 実験の実験スケ ジ ュールを示 す。

図 4 は、 試験例 3 に従う 実験の結果であ る被験物摂取 か らの血漿フ ュ ニルァ ラニ ン濃度の変化量を示すグラ フ である。

図 5 は、 試験例 4 に従い求め られた 1 2 週間の体重、 体脂肪並びに除脂肪体重の変化量を示すグラ フであ る。

図 6 は、 試験例 5 に従う 食事負荷試験における実験ス ケ ジュ ールを示す。

図 7 は、 試験例 5 に従う 試験開始 と終了時の食事負 荷試験におけ る酸素摂取量を規定食摂取 1 5 分前か ら経 時的にプロ ッ 卜 したグラ フであ る。 図 8 は、 試験例 6 に従う 試験における実験スケ ジユ ー ルを示す。

図 9 は、 試験例 6 に従う 試験における動脈血漿総ア ミ ノ 酸濃度の変化を示すグラ フであ る。

図 1 0 は、 試験例 6 に従う 試験における動脈血漿イ ン ス リ ン濃度の変化を示すグラ フであ る。

図 1 1 は、 試験例 6 に従う 試験における後肢のフ ニ二 ルァラニ ン（Phe )パ'ラ ンスを示すグラ フであ る。

図 1 2 は、 試験例 6 に従う 試験における腸管の必須ァ ミ ノ 酸（E AA )バラ ンスを示すグラ フ であ る。

図 1 3 は、 試験例 6 に従う 試験における尿中尿素窒素 排泄量の変動を示すグラ フである。

図 1 4 は、 試験例 6 に従う 試験における肝臓の尿素窒 素バラ ンスを示すグラ フである。

図 1 5 は、 試験例 7 に従う 試験における実験スケ ジュ 一ノレを示す。

図 1 6 は、 試験例 7 に従う 試験における尿中尿素窒素 放出を示すグラ フである。

図 1 7 は、 試験例 8 に従う 試験における、 被験物摂取 からの血漿総ァ ミ ノ 酸濃度の変化を示すグラ フである。

図 1 8 は、 試験例 8 に従う 試験における、 被験物摂取 から摂取 3 0 分後までの血漿総ァ ミ ノ 酸濃度の変化量を 示すグラ フである。

図 1 9 は、 試験例 8 に従う 試験における、 被験物摂取 からの血清ィ ンス リ ン濃度の変化を示すグラ フである。

図 2 0 は、 試験例 9 に従う 試験における、 被験物摂取 3 0分後の血漿総ア ミ ノ 酸濃度の変化量を求めたグラ フ cj'ある。

図 2 1 は、 試験例 9 に従う試験における、 被験物摂取 からの経時的血清ィ ンス リ ン濃度を求めたグラフである。

発明 実施するための最良の形態

以下、 本発明を更に詳し く 説明するため、 好適組成を 有する本発明体脂肪率低下体組成改善食組成物の調製例 を実施例と して挙げ、 次いで本発明組成物を含む各種食 品組成物の摂取タイ ミ ングによる効果を明らかにする試 験例を挙げる。 尚、 各例中、 ％とあるは重量％を示す。 実施例 1 〜 1 3

カゼイ ンナ ト リ ウム、 カゼイ ンカノレシゥム、 ゼラ チ ン 砂糖を水中に投入し、 攪拌、 溶解後、 N a C 1 等の ミ ネ ラル分を更に投入し、 攪拌溶解して A液を調製する。 一 方、 カゼイ ンを水に溶解し、 N a O Hを加え中和溶解し た後、 M g S 0 ₄等の ミ ネラル分、 ビタ ミ ン類、 油類を加 え、 攪拌溶解して B液を調製する。

上記 A液と B液の両液を混合し、 攪拌後、 液量を調整 し、 これに ビタ ミ ン類、 フ レ 等を加えて乳化 して、 本発明食品組成物を得る。 得 られた液をそれぞれ 8 0 m 1 ずつチュ ーブタ イ プの容器に充填 し、 滅菌 して製品 とする。

下記第 1 表に、 上記で調製 した本発明組成物の組成 (成分及び配合量） と共に、 粘度 （ 3 0 ° (：、 B 型粘度計 によ る） 及びア ミ ノ 酸ス コァ一 （ 2 5 才を基準とする ） を示す。

尚、 ビタ ミ ン類及び ミ ネ ラル類の種類及び配合量は次 の通 り であ る。

〈 ビタ ミ ン類〉

ビタ ミ ン A 1 1 5 5 I U

ビタ ミ ン B 0. 9 2 m g

ビタ ミ ン B 2 0. 9 2 m g

ビタ ミ ン B ₆ 0. 9 2 m g

ビタ ミ ン B i 2 2. Ί Ί fi

ビタ ミ ン C 3 4. 6 4 m g

ビタ ミ ン D 9 2. 3 6 I U

ビタ ミ ン E 6. 9 3 I U

ン ト テ ン酸 4. 6 2 m g

ナイ ァ シ ン 9. 2 4 m g

葉 酸 1 8 4. 7 2 ^ g ピオチ ン 1 3 8. 5 4 g ビタ ミ ン 6 9. 2 7 g コ リ ン 1 1 5. 4 5 m g

〈 ミ ネ ラ ル類〉

C a 2 3 0. 9 0 m g

P 0 2 3 0. 9 0 m g

M g 9 2. 3 6 m g

N a 3 2 3. 2 6 m g K 6 0 0. 3 4 m g

C 1 4 6 1. 8 0 m g

F e 7. 3 9 m g

Z n 3. 6 9 m g

C u 0. 4 6 m g

M n 9. 2 4 m g I 3 4. 6 4 ^ g

ι

例 No. 誦 I 実 I例 2 誦 3 誦 4 Mm 5 蛋白質 (g/80ml) 9. 5 10.2 13.0 12.2 10.8

(w/w¾) 41. 3 48. 1 65. 0 61. 0 53.2 糖 質 （g/8Qml) 9.2 7.5 5.2 3.0 6.9

(w/w%) 40. 0 35.4 26. 0 15. 0 41.7 脂 質 (g/80ml) 4. 3 3. 5 1.8 5. 0 2.8

(w/w¾) 18.7 16.5 9. 0 25. 0 14. 1 エネルキ、 '一（Kcal) 114 103 89 105 94 蛋白質成分

カゼイ ン 5.0 4.9. 6. 9 6. 7 5. 6 カセ"インナトリウム 2. 1 ― 2. 2 1. 1 力セ>、インカルシウム 2. 2 3.7 3. 3 3. 3 1. 1 全脂粉乳 ― 4.7 3. 9 一 5. 6 脱脂粉乳 ― 3.0 1.5 ― 2. 9 ゼラ チ ン 0.8 1.4 1.2 酵素分解セ フチン 2.2

小麦粉 3. 0 2. 0 チーズ 2. 7 2.0

糖質成分

精製白糖 7.0 2.4 2. 7 3. 0 1.7 脂'^:成分

米 油 4.2 0. 1 5. 0 1. 0 チョコレー卜 3.0

その他の成分

ビタ ミ ン 適量 適量 適量 適量 適量 ミ ネラノレ 適量 適量 適量 適量 適量 香 料 適量 適量 適量 適量 適量 粘 度 （30°C )cp 1780 840 2220 1240 2150 ァミノ gスコア一 100 100 100 100 100 1 表 （続き ）

例 No. 謹 6 実 7 誦 8 誦 9 実 10 蛋白質 (g/80ml) 9.0 12.0 8.8 10.0 9.6 (w/w¾) 45.0 59.7 44.2 50.0 48.7 糖 質 （g/8Gral) 8.0 7.0 8.3 5.2 6.7 (w/w¾) 40.0 34.8 41.7 26.0 34.0 脂 質 (g/80ml) 3.0 1. 1 2.8 4.8 3.4 (w/w%) 15.0 5.5 14. 1 24.0 17.3 エネルキ、 '一（Kcal) 95 86 94 104 96 蛋白質成分

カゼイ ン 5.6 6.9. 4.9 5.0 4.9 カセ"インナトリウム 1.1 1. 1 3.3 3.1 カセ' "インカルシウム 2.2 1.7

全脂粉乳 3.7 1.5 5.6 3.5 脱脂粉乳 1.5 1.5 0.9 1.5 1.8 ゼラチ ン 0.6 0.9 0.6 0.4 薛素分解セ、'ラチン 1. 1 1. 1

小麦粉 5.6 4.0 2.0 1.0 チーズ 3.2 3.8 3.2 3.6 糖質成分

精製白糖 1.7 3.3 5.7 0.5 3.5 脂質成分

米 油 0.8 0.9 1.0 1.0 1.2 チョコレー卜 3.0

その他の成分

ビタ ミ ン 適量 適量 適量 適量 適量 ミ ネ ラノレ 適量 Μ虽 適量 適量 適量 適量 適量 適量 適量 適量 粘 度 （30°C )cp 1880 2310 1250 1220 760 ァミノ s コア- 92 100 100 100 100 1 表 （続き ） 例 No. 実圆 11 実關 12 議 13 蛋白質（g/80ml) 9.8 11.2 9.4

(w/w¾) 51.0 52.1 49.5 糖 質 （g/80ml) 6.3 7.1 6.3

(w/w¾) 32.8 33.0 33.2 脂 質 （g/80ml) 3.1 3.2 3.3

(w/w¾) 16.1 14.9 17.4 ェネルギー（Kcal) 92 102 93 蛋白質成分

カゼイ ン 5.6 ' 6.3 4.8 カセ、 'インナトリウム - 一 1.5 カセ、 "インカルシウム 2.9 3.0 1.8 全脂粉乳 4.3 2.5 3.2 脱脂粉乳 3.8 2.5 ゼラ チ ン 0.7 0.2 ― 酵素分解セ、'ラチン - 0.4 - 小麦粉 1.4 0.8 1.0、 チーズ 2.4 ― 1.4 糖質成分

精製白糖 3.5 1.7 1.5 脂質成分

米 油 1.1 1.1 0.9 チョコレー卜 3.3 2.6 その他の成分

ビタ ミ ン 適量 適量 適量 ミ ネ ラノレ 適量 適量 適量 香 料 適量 適量 適量 粘 度 （30°C )cp 900 2500 1000 ア ミ ノ 酸ス コ ア一 100 100 100 試験例 1

こ の試験は、 玉木らの方法 C Med. Sc i . Spor t s Exe rc. , 24. 881 ( 1992 ) 3 を改良 した運動負荷方法を用いて、 卜 レーニングタイムの違い及び ト レーニング後の食餌タイ ミ ングの違いによる脂肪や筋肉重量等の変化を調べたも のであ り、 以下の如 く して実施された。

( 1 ) 実験動物

4 週令 S D系雄性ラ ッ ト 5 2 匹を、 1 0 匹ずつの ト レ 一二ング群 （運動群、 3群） 及び 1 1 匹ずつのコ ン ト 口 ール群 （非運動群、 2群） に分けた。

( 2 ) 飼育

飼育温度は 2 3 ± 1 °Cと した。

飼育室の照明は朝 7 時から夜 7時を明期と した。 餌は 1 回 1 時間、 1 日 2 回の ミ ーノレフ イ デイ ングで、 A I N 一 9 3 G (成長期ラ ッ ト の標準飼料） を摂取させ、 摂取 量は 5群中、 最も少ない群の平均値に合わせるペアーフ ィ ーデイ ングと した。 尚、 試験期間中水は自由摂取させ た。

供試食品組成物と しては、 下記第 2表に記載の組成を 有する精製飼料を用いた。 第 2

カゼイ ン と しては一般用 ミ ルク カゼイ ンを、 セル口 一 スパウダー と しては結晶セル ロ ー ス 「ア ビセノレ p H 1 0 2 」 を用い、 第 3 プチル ヒ ドロキノ ンは大豆油に添加 し

運動群では更に、 朝食前に運動をさせる群 （運動終了 時刻 7 時） 2 群 （第 1 群及び第 3 群） と夕食前に運動を させる群 （運動終了時刻 1 9 時直後か ら給餌） （第 2 群） とにわけ、 上記第 1 群には 7 時か ら餌を与え、 第 3 群に は運動 4 時間後の 1 1 時か ら餌を与えた。 尚、 夕食は全 ての群で 1 9 時から給餌 した。

コ ン ト ロ ール群は、 朝食を 7 時か ら給餌する群 （第 4 群） 及び 1 1 時から給餌する群 （第 5 群） と した。

尚、 ラ ッ ト は夜行性なので、 朝 7 時〜 8 時の朝食は、 休息期前、 即ち ヒ ト の夕食に該当 し、 1 9 時か ら 2 0 時 の夕食は、 ヒ トの朝食に該当する。

( 3 ) 運動負荷

運動負荷は、 玉木 らの レ ジスタ ンス ト レーニ ング方法 [ Med. Sci. Sports Exerc. , 24. 881 ( 1992 )] を改良 しヽ 以下の条件で、 各群 1 0 匹に同時に ト レーニ ン グを行な う よ う に行な っ た。 '、

(3-1) セ ッ ト の拘束時間 ： 0. 3 秒間 1 0 Vの電気刺激 を 3 秒間隔で繰 り 返 し 1 5 回与える （約 5 0 秒、 1 5 X 3 秒） 。

(3-2) リ フテ ィ ング回数 ： 1 5 回、 2 分間隔のス ワ ッ ト 運動を、 1 日 に 1 0 セ ッ ト （約 3 0 分間、 1 0 X 3 分） 行ない、 これを週 3 回 （ 日、 月及び水曜日、 木曜日屠殺 群又は 日、 火及び木曜日、 金曜日 屠殺群） 1 0 週間行な つ た ο

(3-3) 荷重の程度 ： 最大荷重の 6 5 〜 7 0 % と した。 (3-4) ト レーニ ング強度スケ ジュ ール ： 0 ~ 2週は 7 0 0 g x l 5 回、 1 0 セ ッ ト、 2 ~ 4週は、 9 0 0 g X 1 5 回、 1 0セ ッ ト、 4 〜 6週は 1 2 0 0 8 1 5回、 1 0セ ッ ト、 6 ~ 8 週は、 1 4 0 0 g x l 5 回、 1 0セ ッ ト及び 8 〜 1 0週は 1 5 0 0 g x l 5 回、 1 0 セ ッ ト と した。

( 4 ) 評価項目

木曜日又は金曜日 に、 最終運動の 2 4 時間後、 絶食 1 2時間の時点で断頭屠殺 し、 1 匹当た り 8分以内の解 剖時間を要 して解剖 し、 骨格筋重量、 体重、 肝臓、 心臓、 脂肪組織重量について評価 した。

( 5 ) 結果

得られた結果は、 第 3表〜第 5表に示す通 り であ る。 第 3表には、 体重、 肝臓重量及び心臓重量を測定 した 結果を示す。

第 4表には、 骨格筋 〔 ヒ ラ メ 筋 （Soleus) ， 腓腹筋 ( Gastrocnemius) ， 足底筋 ( Plantaris) , 前脛骨筋 (Tibia) , 長趾伸筋 （EDL) ， 大腿四頭筋 （Quadriceps) 及び上腕三頭筋 （Triceps brachii) 〕 重量 （ m g ) を求 めた結果を示す。

第 5表には、 白色脂肪組織 （副睾丸（Epididymal)、 腎 周囲（Perirenal), 腸管膜（Mesenteric) ) 及び肩甲骨間褐 色脂肪組織 （ Interscapular brown) 重量 （ m g ) を求め た結果を示す。

第 3 表

4 表

ヒ ラ メ 筋 腓 腹 筋 前脛骨筋（mg)

(mg) (mg) 第 1 群 409土 1 · 5181 ± 84*' ** 1893土 46*' ** 第 2 群 395 ± 1 5174土 108 ' 1825土 57^¾ 第 3 群 384土 12 5207 ± 74*· 1826 ± 43* 第 4 群 388土 15 4846 ± 117 1724土 44 第 5 群 353 ± 15 4713 ± 128 1549土 62 第 4 表 （続き ）

第 5 表

第 5 表 （続き ） 腸間膜（mg) 肩甲骨間（mg) 第 1 群 4268土 339* ^§ 278土 24^s 第 2 群 5682 ± 343 312土 20 第 3 群 5837土 558 331 ± 21 第 4 群 6246 ± 346 316土 16 第 5 群 6829 ± 457 345 ± 22 各表の数値は、 平均土 S E で示され、 第 3 表中、 ※は 第 2 群に対する p く 0. 0 5 を、 ※※は第 3 群及び第 5 群に対する P く 0. 0 1 を、 # は第 4 群に対する p く 0. 0 5 をそれぞれ示す。

第 4 表中、 ※は第 4 群に対する p < 0. 0 5 を、 ※※ は第 5 群に対する p く 0. 0 1 を、 # は第 5 群に対する P < 0. 0 5 を、 § は第 3 群に対する p < 0. 0 1 を、 $ は第 3 群、 第 4 群及び第 5 群に対する p < 0. 0 1 を それぞれ示す。

ま た、 第 5 表において、 ※は第 2 群及び第 3 群に対す る p < 0. 0 5 を、 ※※は、 第 2 群、 第 3 群、 第 4 群及 び第 5 群に対する p < 0. 0 1 を、 # は第 5 群に対する P < 0. 0 5 を、 § は第 4 群及び第 5 群に対する p < 0. 0 1 をそれぞれ示す。

上記各表よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

即ち、 ト レーニ ングの時期を、 休息期前と した 1 群 (本発明群） では、 活動期前と した 2 群に比 して脂肪組 織重量が有意に少な く な つ てお り、 脂肪率低下を図 り得 る こ とが判る。 ま た、 休息期前で、 ト レ一ニ ング後す ぐ に食餌を与えた 1 群では、 ト レーニ ン グ後 しば ら く おい てか ら食事餌を与えた 3 群と比べて も脂肪組織重量はよ り少な く な つ てお り、 よ り 効果的に脂肪率低下を図 り 得 る こ とが判る。

試験例 2

こ の試験は、 ィ ヌ の慢性力二ユ レ一 シ ヨ ンモデルにフ ェニルァラニ ンの動静脈較差及び安定同位体 L 一 [ ² H ₅ ) フ エ二ルァラニ ンを用いた体蛋白代謝測定法を応用 して、 運動後のア ミ ノ 酸 · ブ ドウ糖混液の投与タ イ ミ ングの違 いによ る、 骨格筋のア ミ ノ 酸取 り 込み及び骨格筋蛋白質 合成 · 分解速度等の変化を調べた ものであ り、 以下の如 く して実施された。

( 1 ) 実験動物

1 5 力月 齢の雄 ビーグル犬 1 0 頭を用いた。

( 2 ) 動物モデルの作製

ネ ンブタ ール全身麻酔下で、 大動脈及び外腸骨静脈に 採血用の慢性カテーテルを、 ま た外類静脈及び門脈に投 与用の慢性カテーテルをそれぞれ留置 し、 外腸骨動脈に は血流量測定用カ フを装着 して、 術後 2 週間の回復期間 の後、 本試験に用いた。

( 3 ) 供試組成物 （被験物） 及び投与方法

被験物と しては、 下記第 6 表記載の組成を有する総合 ア ミ ノ 酸製剤 （ 「ア ミ バ レ ン」 、 株式会社大塚製薬株ェ 場社製、 1 0 % ) と、 1 0 %ブ ドウ糖注射液 （株式会社 大塚製薬工場社製） を等量混合 して用いた。 投与は、 門脈に留置 した 力 テ一テルか ら 門脈内 に 1 0 1 / k g Z h で持続投与 した。 第 6

成 分 200 ml中 300 ml中 400 ml中

L一口イシン 2. 80g 4. 20g 5. 60g

L一イソ πイシン 1. 60g 2. 40g 3. 20g

L "リン 1. 60g 2. 40g 3. 20g

酸いリシ、'ン 2. 96g 4. 44g 5. 92g

(L-リシ" ンとして） (2 . lOg) o • 15g) (4 . 20g) いトレ才ニン 1. 14g 1. 71g 2. 28g o レトリフ° 卜ファン 0. 40g o. 60g 0. 80g し一メチ才ニン 0. 78g 1. 17g 1. 56g し一フエ二ルァラニン 1. 40g 2. lOg 2. 80g し一システィン 0. 20g 0. 30g 0. 40g し—チ πシ、'ン 0. lOg 0. 15g 0. 20g し一アルキ"ニン 2. lOg 3. 15g 4. 20g し一ヒスチシ、、ン 1. OOg 1. 50g 2. OOg

Lーァラニン 1. 60g 2. 40g 3. 20g

L-フ。口リン 1. OOg 1. 50g 2. OOg レセリン 0. 60g 0. 90g 1. 20g アミ/酢接 1. 18g 1. 77g 2. 36g

L-ァス Λ。ラキ "ン酸 0. 20g 0. 30g 0. 40g し-ク、'ルタミン酸 0. 20g 0. 30g 0. 40g

アミノ较含有量 20. OOg 30. OOg 40. OOg 必須アミ/! [含有量（E) 11. 82g 17. 73g 23. 64g 非必須了ミノ较含有量（N) 8 . 18g 12. 27g 16. 36g

E/N 1. 44 1. 44 1. 44

アミノ駭含有率 30. 0w/w¾ 30. 0w/w% 30. 0 w / w % 第 6 表 （続き ）

( 4 ) 実験方法

実験スケ ジ ュ ールを図 1 に示す。

実験開始時に、 外頸静脈か ら L 一 〔 ² H ₅〕 フ ニニルァ ラニ ン （ L - [ring -² H 5 ]Phenylalanineと表示） をプラ イ ム（prime)と して 4. 4 mol/ k g 投与 し、 その後は 6. 6 μ mol/ k g / h ( constant ) で実験終了ま で持続 投与 した。

採血は、 図 1 に矢印で示 したポイ ン ト にて、 大腿動脈 及び外腸骨静脈か ら行な っ た。

( 5 ) 運動負荷

ト レ ツ ド ミ ル走 （速度 1 O k m Z h、 傾斜 1 2 % ) を 1 5 0 分間負荷 した。

( 6 ) 実験条件

実験は、 運動直後投与と運動 2 時間後投与条件で、 各 条件の間に 2 週間の回復期間をおいて、 ラ ンダムに ク ロ スオーバ'一法で行な つ た。 運動直後投与条件では、 運動直後か ら被験物を 2 時間 持続投与 し、 運動 2 時間後投与条件では、 運動 2 時間後 から被験物を 2 時間持続投与 した。

( 7 ) 評価項目

1. 血漿フ ヱニルァラニ ン安定同位体比 ： ガス ク ロマ ト グラ フ 一質量分析法

2. 血漿ア ミ ノ 酸 ： 高速ア ミ ノ 酸分析計 （ 日 立製作所製

L 一 8 5 0 0型）

3. 血漿グルコ ース ： Glu_ D H法

4. 血漿 F F A : 酵素法

5. 血漿イ ン シ ュ リ ン ： R I A法

6. 血漿 C P K : R I A法

7. 血流量 ： ド ッ プラ ー法

8. へマ ト ク リ ッ ト値 ：

9. 後肢骨格筋における フ ヱ ニルァラニ ンの取 り 込みと 放出パ、ラ ンス ：

バラ ン ス = (動脈濃度一 静脈濃度） X 血流量 X ( 1 —へマ ト ク リ ツ ト値 / 1 0 0 ) Z体重

1 0. 蛋白合成 · 分解速度 ：

Barrettらの方法 〔Biochem. J.， 245, 223 -228 ( 1987 )] に準 じて算出 した。

( 8 ) 結果 得られた結果は、 図 2 (被験物投与中の動脈血漿フ ニ 二ルァラニ ン濃度の変化量） 並びに下記第 7 表 （被験物 投与中の後肢のフ ェニルァラニ ン取 り 込み速度） 及び第 8表 （蛋白合成速度及び分解速度） に示す通 り であ る。 図 2 は、 横軸に被験物投与開始か らの時間 (分） をと り、 被験物投与開始か らの動脈血漿フ ニルァラニ ン濃 度の変化量 （ nmolZ m 1、 縦軸） をプロ ッ ト した もので あ り、 （ 1 ) は運動直後投与条件 （ n = 1 0 ) を、 （ 2 ) は運動 2 時間後投与条件 ( n = 1 0 ) を示す： ま た、 各 数値は、 平均土標準偏差 ( S D ) で示さ れ、 図中の * は 運動直後投与条件に対する p < 0. 0 5 を、 * * は、 運 動直後投与条件に対する p < 0. 0 1 をそれぞれ示す。

第 7 表

投与 15分 - 45分 投与 60分- 120分 投与 15分- 120分 nmol/kg/分 nmol/kg/分 nmol /kg/分 運動直後 4. 4 4 土 1 0. 9 4 土 8. 1 5 ± 6 投与条件 5. 8 6 6. 5 9

運動 2時間後 4. 0 7 土 5. 3 6 士 4. 8 1 土 投与条件 6. 0 7 2. 3 1 ^¾ 2. 8 1 ^¾¾

※は運動直後投与条件に対 して P = 0. 0 4 9 を示 し

※※は同条件に対 して P = 0. 0 6 5 を示す。 8

※は運動直後投与条件における合成速度の結果に対 し て ρ = 0. 0 2 8 を示す。

上記各表の数値は、 各条件 1 0例の平均値 ±標準偏差 ( S D ) で示され、 統計は対応のあ る t -検定で行な つ 十- 上記図及び各表よ り 次の こ とが明 らかであ る。

即ち、 表 7 に示す通 り、 被験物投与 1 5 分目か ら 1 2 0分 目 ま では、 後肢骨格筋のフ ヱニルァラニ ン の取 り 込みが運動直後投与条件で運動 2 時間後投与条件と比 較 して大きい傾向であ り （ 8. 1 5 ± 6 v s 4. 8 1 土 2. 8 1 nmol/ k g Z分、 p = 0. 0 6 5 ) 、 被験物投 与 6 0分目力、 ら 1 2 0分目では、 有意に大きかっ た ( 1 0. 9 4 ± 6. 5 9 V s 5. 3 6 ± 2. 3 1 nniol/ k g Z分、 p = 0. 0 4 9 ) 。

ま た、 表 8 に示すよ う に、 被験物投与中の蛋白合成速 度 も、 運動直後投与条件が運動 2 時間後投与条件よ り 有 意に大き力、つ た （ 2 9. 7 ± 9. 6 V s 2 2. 0 ± 1 0. 1 nmol/ k g Z分、 p = 0. 0 2 8 ) 。

之等の こ とから、 運動直後に蛋白質を摂取する こ とは 運動終了か ら時間が経っ てか ら摂取する よ り も体蛋白質 合成に有効であ る こ とが判る。

試験例 3

この試験は、 運動直後又は運動 2 時間後に本発明組成 物 （実施例 1 と同様に して調製さ れた蛋白質 1 0. 0 g ( 4 8. 3 % ) 、 糖質 7. 7 g ( 3 7. 2 % ) 及び脂質 3. 0 g ( 1 4. 5 % ) を 1 本 7 8 m i 当た り に含み、 粘度力 2 3 0 0 c p ( 3 0 °C ) であ り、 ア ミ ノ 酸ス コア 一が 1 0 0である組成物） を摂取 した場合、の血中ァ ミ ノ 酸の変化を調べた ものであ り、 以下の通 り 実施された。 ( 1 ) 被験者

運動部に所属する健常な大学生 5 名を被験者と した。 ( 2 ) 実験条件

運動直後摂取条件と運動 2 時間後摂取条件について、 ク ロ スオーバー法で実験を行な つ た。

( 3 ) 実験方法

実験スケ ジュ ールは図 3 に示す通 り である。

図中、 実験当 日 の 8 : 0 0 力ヽ らの E x は、 6 0 % V 0 2 ma x相当 （最大酸素摂取量の 6 0 %に相当） の 自転 車ェルゴメ ータ ー運動 （ 6 0 分） を示す。 また、 摂取時 及び採血時は矢印にて示される。

即ち、 運動直後摂取条件では、 運動終了後直ちに本発明 組成物 1 本を摂取 し、 運動 2 時間後摂取条件では、 運動 終了後 2 時間経過 した後に本発明組成物 1 本を摂取 し、 両条件と も上記摂取の直前、 摂取 3 0 分後、 6 0 分後及 び 1 2 0 分後に採血を行な っ た。

尚、 実験前日 の三食 （朝、 昼、 夜） 及び実験当 日 の三 食は同 じメ ニュ ー と した。

( 4 ) 評価

血漿フ エ二ルァラニ ン濃度を、 高速ア ミ ノ 酸分析計 ( 日 立製作所製 L 一 8 5 0 0 型） を用いて測定、 評価 し た。

( 5 ) 結果

得 られた結果は、 図 4 に示す通 り であ る。

図 4 は、 横軸に被験物摂取か らの時間 （分） をと り、 血漿フ ェニルァラニ ン濃度の被験物摂取か らの変化量 ( nmo l / m 1 、 縦軸） をプロ ッ ト した ものであ り、 （ 1 ) は運動直後投与条件 （ n = 5 ) を、 （ 2 ) は運動 2 時間 後投与条件 （ _n = 5 ) を示す。 ま た、 各数値は、 平均土 標準偏差 （ S D ) で示され、 p は運動直後摂取条件に対 する有意水準を示す。 統計は対応のあ る t 一検定で行な ゥ た ₀

上記図 4 よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

即ち、 被験物摂取後 6 0 分の時点における血漿フ ニ二 ルァラニ ン濃度の上昇度は、 運動直後摂取条件で運動 2 時間後摂取条件と比較 して有意に小さ く、 摂取後 1 2 0 分目 の時点において も小さ い傾向であ っ た。 こ の こ とは 運動直後摂取条件は、 運動 2 時間後摂取条件よ り も多 く の フ ヱ二ルァラニ ンが組織に取 り 込まれている こ とを示 唆する ものと考え られ、 運動直後に本発明組成物を摂取 する こ とは、 運動終了から時間が経っ てから摂取する よ り も体蛋白質合成に有効であ る こ とが判る。

試験例 4

本試験は、 ヒ ト で軽い レ ジ ス タ ン スエク ササイ ズ直後 に本発明組成物を摂取させる こ とが体組成を改善する可 能性について検討 した ものであ り、 以下の通 り 実施 した,

( 1 ) 被験者

肥満傾向にある女性 1 5 名 （平均体重 ： 6 2 . 3 土 2 . 8 k g、 平均年齢 ： 2 2 . 5 ± 1 . 0 歳） を被験者 と した。

( 2 ) ウ ェイ ト コ ン ト ロ ールプロ グラ ム

被験者を、 1 2 週間に亘つ て、 以下のウェイ ト コ ン ト ロ ールプロ グラ ムに従わせた。 即ち、 被験者は毎 日 ダン ベルを使用 した軽い レ ジ ス タ ンス運動を 3 0分間行ない. 祭 日 を除 く 月曜日 から金曜 日 ま では、 夕食を規定食と し. 間食と飲酒を禁止 した。 朝食は試験前普段食べている メ ニュ ーを調査 しなるべ く 同 じメ ニュ ー と した。 昼食は 自 由 と し、 土曜、 日 曜及び祭 日 も 自 由 と した。 ま た、 運動 は基本的には 1 日 1 回、 夕方に行なわせ、 運動か ら夕食 ま では最低 1. 5 時間の間隔をと つ た。

( 3 ) 実験条件

被験者を本発明組成物摂取群 （試験例 3 に記載の本発 明組成物 +運動， n = 7 ) と本発明組成物無摂取群 （運 動のみ， n = 8 ) の 2群に分け、 本発明組成物摂取群に は運動直後に試験例 3 に記載の供試組成物 （被験物） を 摂取させた。

( 4 ) 評価項目

1.体重

2.皮下脂肪厚 ： Harpenden皮脂厚計

( British indicators社製）

3.体脂肪率 ： 皮下脂肪厚の値か ら長嶺の式と Brozekの式 力、 ら算出 した。

• 長嶺の式

男性 1 8歳以上 D=l.0913 - 0.00116 x S 女性 1 8 歳以上 D- 1.0897 - 0.00133 x S

D 体密度、 S = 皮下脂肪厚 （ πιιη、 上腕背部と肩 胛骨下部の和）

- Brozekらの式

F=4.570/D - 4. 142

F = 体脂肪率 （％ )

( 5 ) 結果

得 られた結果は、 図 5 に示す通 り であ る。

図 5 は、 1 2 週間の体重、 体脂肪 （図中、 「脂肪重量」 と記載する ） 並びに除脂肪体重 （図中、 「除脂肪重量」 と記載する ） の変化量 （試験開始前を基準 （ 0 ) と して 1 2 週間後の各値の増加 も し く は減少値 （ k g ) ) を示 すグラ フであ り、 図中、 左側は本発明組成物摂取群 （本 発明組成物 +運動） の結果を示 し、 右側は無摂取群 （運 動のみ） の結果を示 し、 ★印は試験開始前値 （表中 Preと 記載） に対する P < 0. 0 5 を示す。

体脂肪量は （体重） X (体脂肪率） と して、 除脂肪体 重は （体重） ― （体脂肪量） と して、 それぞれ算出 した。

該図よ り、 以下の こ とが明 らかであ る。

両群と も に体脂肪量が有意に減少 したカ^ 平均値では 本発明組成物摂取群で 3. 6 k g の減少に対 して、 無摂 取群では 1. 4 k g の減少であ り、 本発明組成物摂取群 で体脂肪量の減少が大き い傾向が認め られた。

ま た、 除脂肪重量は両群と もに增加する傾向であ るが- 本発明組成物摂取群で 1. 6 k gの増加に対 して、 無摂 取群では 0. 6 k gの増加であ り、 やは り本発明組成物 摂取群で除脂肪重量の増加が大きい傾向が認め られた。

之等の こ とは、 本発明組成物を運動直後に摂取する こ とで、 体組成改善効果が高ま る可能性を示 している。 ま た、 本試験におけ る被験者のエネルギー並びに蛋白質の 摂取量には違いがなかっ た こ とか ら、 こ の効果は摂取夕 ィ ミ ングに起因する作用であ る こ とが明 らかとな っ た。 試験例 5

本試験は、 ヒ ト で軽い レ ジスタ ンスエクササイ ズ直後 に本発明組成物を摂取する こ と カ 、 エネルギー代謝を亢 進する可能性について検討 した ものであ り、 以下の通り 実施された。

( 1 ) 被験者

肥満傾向にあ る男性 1 5 名 （平均体重 ： 7 5. 1 土 2. 5 k g、 平均年齢 ： 3 3. 9 ± 1. 7歳） を被験者 と した。

( 2 ) ウェイ ト コ ン ト ロールプロ グラ ム

被験者は、 1 2 週間に亘つ て以下のウェイ ト コ ン ト 口 ールプロ グラ ムに従わせた。 即ち、 被験者は毎日 ダンべ ルを使用 した軽い レ ジ ス タ ン ス運動を 3 0 分間行ない、 祭 日 を除 く 月 曜日 か ら金曜 日 ま では、 夕 を規定食と し、 間食と飲酒を禁止 した。 朝食は試験前普段食べている メ ニューを調査 しなるべ く 同 じメ ニュ ー と した。 昼食は 自 由 と し、 土曜、 日 曜及び祭日 も 自 由 と した。 ま た、 運動 は基本的には 1 日 1 回、 夕方に行なわせ、 運動か ら夕食 までは最低 1. 5 時間の間隔をと つ た。

( 3 ) 実験条件

被験者を本発明組成物摂取群 （本発明組成物 +運動， n = 8 ) と本発明組成物無摂取群 （運動のみ， n = 7 ) の 2群に分け、 本発明組成物摂取群には運動直後に試験 例 3 に記載の被験物 （本発明組成物） を摂取させた。

( 4 ) 食事負荷試験

試験開始前と終了時の 2 回、 下記第 9表記載の食事を 図 6の実験スケ ジ ュ ールに従い与える食事負荷試験を行 ない、 図 6 に 1 ~ 1 4 と して示す、 安静時（安静— 2 ) と 食事摂取後の安静時 （安静 - 2 ) にそれぞれ呼気ガスを 採取 し、 それ らの各酸素摂取量を測定 して、 安静時の代 謝率と食事後の代謝率 （ V0₂(ml/kg(BW)/min) をそれぞれ 算出 した。 尚、 代謝率の測定は、 後記 （ 5 ) 2.に示す方 法に従っ て行な つ た。 第 9 表

( 5 ) 評価項目

1 ·酸素摂取量 ： ダグラ スバ ッ グ法によ る。

2.安静時の代謝率並びに食事後の代謝率 ： Ferranniniの 方法 （ Metabolism, 37, 287 - 301， 1988 )によ る。

( 6 ) 結果

得 られた結果は、 図 7及び第 1 0 に示す通 り であ る 図 7 は、 試験開始前と終了時の食事負荷試験における 酸素摂取量を規定食摂取 1 5 分前 （ 一 1 5 と表示） 力、 ら 経時的にプロ ッ ト したグラ フ （縦軸 =酸素消費量 V 〇 2 ( m 1 Z k g体重 Z分） 、 横軸 =規定食摂取からの時間 (分） ） であ り、 上段が本発明組成物摂取群 （本発明組 成物 +運動） の結果、 下段が運動のみを行なわせた無摂 取群の結果を示 している。 ま た図には時間 0分を食餌摂 取と して矢印を付 して示 し C CDてあ り、 図中、 ★印は試験開 始前値に対する p く 0. 0 5 を示す。

O C

第 1 0 表は、 試験開始前 ( baseline) 及び終了時 ( wkl2) のそれぞれにおける、 本発明組成物摂取群 （本 発明組成物 +運動， n = 8 ) 及び無摂取群 （運動のみ， n = 7 ) についての、 上記酸素摂取量から算出 した安静 時の代謝率（J/kg/min)及び食事後の代謝率（ J/kg/min)の 変化を示す。

1 0

本発明組成物摂取群 無 摂 取 群

開始荊 終了時 P = mm 終了時 P = 安静時 68.1土 73.6土 69. 1土 69.9土

代謝率 2.2 2.0 2.2 3.8 N. S. 食事後 81.4土 86.6土 79.6土 80.3土

代謝率 2.2 2.8 2.4 4.9 N. S. 各値 （単位 ： J Z k g体重 /分） は、 平均土標準誤差 を示 し、 N. S. は有意差な しを示す。

上記図よ り、 以下の こ とが明 らかであ る。

即ち、 図 7 に示す如 く、 本発明組成物摂取群 （上段） では試験終了時に食事負荷試験時の酸素摂取量が試験開 始時よ り も有意に増加 した （ ― 1 5、 1 5、 3 0、 4 5、 6 0、 7 5、 9 0 及び 1 3 5 分） カ^ 無摂取群 （下段） は変化 しなかつ た。

また、 第 1 0 表に示す如 く、 摂取群では酸素摂取量か ら算出 した安静時の代謝率並びに食事後の代謝率が、 試 験終了時に有意に増加 した。 しか しなが ら、 無摂取群は 変ィ匕 しなカヽっ た。

之等の こ とは、 本発明組成物を運動直後に摂取する こ とで、 ェネルギ一消費が高ま る可能性、 言い換える と、 肥満しに く い体質にな る可能性を示 している。

試験例 6

こ の試験は、 ィ ヌ の慢性力二ユ レー シ ヨ ン モデルを用 いて、 運動前から運動中にかけてア ミ ノ 酸 · ブ ドウ糖混 液を投与 した場合の、 骨格筋や内臓のア ミ ノ 酸バラ ン ス 尿中尿素窒素排泄、 筋グ リ コーゲ ン等の変化を調べた も のであ り、 以下の如 く して実施された。

( 1 ) 実験動物 1 1 ヶ 月 齢の雄雑種犬 1 0 頭 （平均体重 ： 1 7. 0 ± 0. 6 k g ) を使用 した。

( 2 ) 動物モデル作成

ネ ン ブタ ール全身麻酔下で、 動脈、 大腿静脈、 肝静脈 及び門脈に採血用の慢性カテーテルを、 外頸静脈に被験 物投与用の慢性カテーテルをそれぞれ留置 し、 外腸骨動 脈、 肝動脈及び門脈に血流量測定用プロ ーブを装着 した < 術後 2 週間の回復期間を置き、 白血球数、 へマ ト ク リ ツ ト値、 食欲及び体重変化か ら回復を確認 して、 実験に用 いた。

( 3 ) 実験条件

実験は、 A G群 [ア ミ ノ 酸十 グルコ ース投与条件 （ァ ミ パ レ ン 1 0 % (大塚製薬工場） と 1 0 %ブ ドウ糖注射 液 （大塚製薬工場） を等量混合 して投与 ] 、 A A群 [ァ ミ ノ 酸投与条件 （ァ ミ ノ、。 レ ン 1 0 % (大塚製薬工場） と 生理食塩液 （大塚製薬工場） を等量混合 して投与 ] 、 G 群 [グルコ ース投与条件 （ 1 0 Q/6ブ ドウ糖注射液 （大塚 製薬工場） 単独投与 ] 及び S群 [生食投与条件 （生理食 塩液 （大塚製薬工場） 単独投与 ] の 4 群について、 各条 件の間に 2 週間の回復期間をおいて、 ラ ンダムに ク ロ ス オーバー法で行な つ た。

( 4 ) 実験方法 実験スケ ジ ュ ールを図 8 に示 した。

実験 1 ： 1 時間の安静後、 外頸静脈 か ら被験物を 1 0 m 1 k _g Z h r の速度で 3 . 5 時間持続投与 した。 被 験物投与開始 6 0 分後カヽら ト レ ッ ド ミ ル走を 2 . 5 時間 負荷した。 運動終了 と同時に被験物の投与を終了 し、 回 復期と して保定器に動物を 3 時間保定 した。 なお、 安静 期と回復期には、 生理食塩液を尿量確保のために投与 し た。 3 時間の回復期後、 動物を代謝ケー ジに戻 し給餌 し た。

採血と採尿は、 図 8 に示すポイ ン ト で経時的に行な つ \— o

( 5 ) 運動負荷

ト レ ツ ド ミ ル走 （速度 1 0 K m Z h r、 傾斜 1 2 % ) を 1 5 0 分間負荷 した。

( 6 ) 評価項目

1 . 血漿ア ミ ノ 酸 ： 高速ア ミ ノ 酸分析計 （ 日立製作所製

L 一 8 5 0 0 型） によ る。

2 . 血漿グルコース ： G 1 u — D H法によ る。

3 . 血漿 F F A : 酵素法によ る。

4 . 血漿イ ン シ ュ リ ン ： R I A法によ る。

5 . 尿素窒素 ： U V法によ る。

6 - 血漿 C P K ： U V法によ る。 7. 血漿 L D H : U V法によ る。

8. 血中乳酸 ： 酵素法 (DIAGLUCA;T0Y0B0) によ る。

9. 血流量 ： ド ッ プラー法によ る。

1 0. へマ ト ク リ ッ ト値

1 1. グ リ コーゲ ンの定量 ： L o らの方法 （ J. Appl. Physiol, 28, 234- 236, 1970 ) によ る。

1 2. 骨格筋の Pheの取 り 込みと放出のバラ ンス

バラ ンス = (動脈濃度一大腿静脈濃度） X 外腸骨動脈 血流量 X ( 1 _へマ ト ク リ ッ ト値 Z 1 0 0 ) Z体重 1 3. 腸管の必須ア ミ ノ 酸の取 り 込みと放出のバラ ンス バラ ンス = (動脈濃度 - 門脈濃度） X 門脈血流量 X ( 1 一 へマ ト ク リ ッ ト値 Z 1 0 0 ) /体重

( 7 ) 統計処理 .、

各時点での群間の比較と各群間における経時変化の比 較を、 Fisher PLSDで行な っ た。 計算は統計計算ソ フ ト Stat- viewを用いて行な っ た。 なお結果はすべて平均値土 標準誤差で示 し、 有意差は 5 %以下と した。

( 8 ) 結果

得られた結果は、 図 9〜 1 4 に示す通 り であ る。

図 9 は、 動脈血漿総ア ミ ノ 酸濃度の変化 （縦軸 ： 動脈 血漿総ア ミ ノ 酸濃度 （nmol/ml) 、 横軸 ： ト レ ッ ド ミ ル走 開始を 0分とする経過時間（Time, min) ) を示す。 図 1 0 は、 イ ンス リ ン濃度の変化 （縦軸 ： 動脈血漿ィ ン ス リ ン濃度 （ U/ml) 、 横軸 ： ト レ ッ ド ミ ル走開始を 0 とする経過時間（Time, min)) を示す。

図 1 1 は、 後肢のフ エ二ルァ ラニ ン（Phe)バラ ンスを示 すグラ フ （縦軸 ： 後肢の Pheノくラ ンス （ nmol/kg/min) 、 横軸 ： ト レ ッ ド ミ ル走開始を 0 とする経過時間（Time, min) でめる。

図 1 2 は、 腸管の必須ア ミ ノ 酸（EAA)バラ ンスを示すグ ラ フ （縦軸 ： 腸管の E A Aノくラ ンス （nmol/kg/min) 、 横 軸 ： ト レ ッ ド ミ ル走開始を 0 とする経過時間（Time, min)) である。

図 1 3 は、 尿中尿素窒素排泄量の変動を示すグラ フ (縦軸 ： 尿中尿素窒素排泄速度 （mg/h) 、 横軸 ： 図 8 に 示す実験スケ ジュ ールにおける、 対照期、 安静期、 運動 期及び回復期（0- 1.5h及び 1.5_3h)の各時点） であ る。

図 1 4 は、 肝臓の尿素窒素バラ ン スを示すグラ フ （縦 軸 ： 尿素窒素放出速度 （ g/kg/min) 、 横軸 ： ト レ ッ ド ミ ル走開始を基準 （ 0分） とする経過時問（Time, min)) である。

図 9 一 1 4 における数値は、 全て平均 土 S E で示され、 異な る アルフ ァ ベ ッ ト （ a、 b等） は、 それぞれの群間 における p < 0. 0 5 の有意差を示 し、 ★印は、 投与前 値に対する p く 0 . 0 5 を示す。 ま た、 図 1 3 _ 1 4 に おける数値は平均土 S E で示され、 ★印は、 投与前値に 対する P く 0 . 0 5 の有意差を示 し、 す は群間における P < 0 . 0 5 を示す。

上記各図表よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

a ) 図 9 に示す如 く、 ア ミ ノ 酸を含有する A G及び A A 投与によ り、 運動前及び運動中の血漿総ア ミ ノ 酸濃度が 有意に高 く 維持さ れた。 また、 図 1 0 に示す如 く、 A G 及び G投与によ り、 イ ンス リ ン濃度の上昇が認め られた。 A Gではグルコース投与量が Gの半量に もかかわ らず、 ィ ンス リ ン濃度の上昇が最も大きかっ た。

こ の結果は、 ア ミ ノ 酸投与によ り 血中ア ミ ノ 酸濃度の 維持が可能であ り、 ア ミ ノ 酸と糖質を同時に投与する こ とで、 糖質だけを投与する よ り もィ ン ス リ ン分泌刺激が 強いこ とを示唆 している。

b ) 図 1 1 に示す如 く、 ア ミ ノ 酸を含有する A G及び A A投与によ り、 運動前の後肢の Ph eバラ ン ス が放出から 取 り込みに転 じたカ 、 運動中は P h eバラ ン ス が低下 し、 A Aでは放出 とな っ た。 しか しながら、 A Gでは ± 0 付 近を維持 した。

こ の結果は、 運動前からア ミ ノ 酸を投^する こ とで筋 タ ンパク分解が抑制され、 同時に糖質を投与する こ とで 運動中の筋夕 ンパク 分解ま で も抑制でき る可能性を示唆 する。

ま た、 A Gのみで運動中の筋タ ンパク 分解抑制作用が 認め られる メ カニズム と して、 A Gのィ ンス リ ン分泌刺 激作用が考え られる。

c ) 図 1 2 に示す如 く、 ア ミ ノ 酸を含有する A G及び A A投与によ り、 運動前及び運動中の腸管の E A Aの取 り 込みが増加 した。

この結果は、 運動前からア ミ ノ 酸を投与する こ とで運 動前な らびに運動中の腸管タ ンパク 分解が抑制される可 能性を示唆する。

d ) 図 1 3 に示す如 く、 投与開始か ら回復 3 時間までの 尿中尿素窒素排泄量は、 A G で A A よ り も有意に小さ力、 つ た。 ま た、 図 1 4 に示す如 く、 肝臓の尿中尿素の放出 も A Gで A A よ り も抑制されていた。

こ の結果は、 ア ミ ノ 酸と同時に糖質を投与する こ とで、 ア ミ ノ 酸の脱ァ ミ ノ が抑制される こ と、 即ち体蛋白合成 以外 （主にエネルギー源と しての利用） に利用 さ れるの が抑制される こ とを示唆する。

この尿中尿素窒素排泄量のデー タ をサポー 卜するデ一 夕 と して、 運動直後に投与 した場合で も、 ア ミ ノ 酸 糖質 がア ミ ノ 酸単独よ り も尿中尿素窒素排泄量が少ないとい う データが使用でき る （後記試験例 7 の図 1 6 参照） 。 試験例 7

この試験は、 ィ ヌ の慢性力二ユ レー シ ヨ ンモデルを用 いて、 運動後にア ミ ノ 酸 · ブ ドウ糖混液を投与 した場合 の、 尿中尿素窒素排泄の変化を、 ア ミ ノ 酸のみを投与 し た場合と比較検討 した ものであ り、 以下の如 く して実施 された。

( 1 ) 実験動物

1 5 ヶ 月 齢の雄 ビー グル犬 1 0 頭 （平均体重 ：

1 1 . 8 ± 0 . 3 k g ) を使用 した。

( 2 ) 実験条件

実験は、 A G群 [ア ミ ノ 酸 +糖質投与条件 （ア ミ パ レ ン 1 0 % (大塚製薬工場） と 1 0 %ブ ドウ糖注射液 （大 塚製薬工場） を等量混合 して投与 ] 及び A A群 [ァ ミ ノ 酸単独投与条件 （ア ミ バ レ ン 1 0 % (大塚製薬工場） と 生理食塩液 （大塚製薬工場） を等量混合 して投与 ] の 2 条件について、 各条件の間に 2 週間の回復期間をおいて ラ ンダムに ク ロ スォ一ノく一法で行な っ た。

( 3 ) 実験方法

実験スケ ジュ ールを図 1 5 に示 した。

9 0 分間の安静後、 運動と して ト レ ッ ド ミ ル走を負荷 した。 運動直後か ら被験物を門脈内に 1 0 m 1 / k g / h r の速度で 4 時間持続投与 した。 運動直後か ら被験物 投与中の全尿を採取 した （ 0 — 1 時間を回復 0-1、 1 - 2 時間を回復 1-2、 2 - 3 時間を回復 2- 3及び 3 — 4 時間を 回復 3- 4とする ） 。

( 5 ) 運動負荷

ト レ ッ ド ミ ル走 （速度 1 0 K m Z h r、 傾斜 1 2 % ) を 1 5 0 分間負荷 した。

( 6 ) 評価項目

1.尿中尿素窒素 ： U V法によ る。

( 7 ) 統計処理

群間の比較は、 対応のある t-検定で行っ た。 計算は統 計計算ソ フ ト Stat- viewを用いて行な っ た。 なお結果はす ベて平均値土標準誤差で示 し、 有意差は 5 %以下と した。 ( 8 ) 結果

得 られた結果は、 図 1 6 に示す通 り であ る。

図 1 6 は、 運動直後からの各単位時間当た り の尿中尿 素窒素排泄速度 （ mg/h) を示すグラ フである。

上記図よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

a ) 図 1 6 に示す如 く、 回復 2 - 3 時問及び回復 3 — 4 時間の尿中尿素窒素排泄速度は、 ア ミ ノ 酸と糖質を同時 に投与 したほ う カ^ ア ミ ノ 酸のみを投与する よ り も有意 に小さ力、つ た。 こ の結果は、 ア ミ ノ 酸と同時に糖質を投与する こ とで、 ア ミ ノ 酸の脱ァ ミ ノ 化反応が抑制さ れる。 即ち、 体蛋白 合成以外に利用 される のを抑制する こ とを示唆する。

試験例 8

運動前に本発明組成物を摂取させた場合の血中ァ ミ ノ 酸と血中イ ンス リ ンの変化を、 市販プロ テイ ンパウダー (蛋白質単独） ある いは市販糖質食品 （糖質単独） を摂 取させた場合と比較検討 した ものであ り、 以下の如 く し て実施された。

( 1 ) 被験者

大学体育学部の男子学生 5 名を被験者と した。

( 2 ) 実験条件

試験例 3 に記載の本発明組成物を摂取させる条件

( P - 1 3 ) と、 本発明組成物と同 じ蛋白質量の市販プ ロティ ンパウダーを摂取させる条件 （ P P ) 及び本発明 組成物と同 じカ ロ リ ーで約 3 倍の糖質量とな る市販糖質 食品を摂取させる条件 （ C H O ) について、 ク ロ スォ一 パ'一法で行な つ た。

市販プロテイ ンパウ ダー と しては、 明治製菓株式会社 製 「SAVAS P rot e i nXX J を使用 し、 市販糖質食品と しては 森永製菓株式会社製 「ウィ ダ一 エネルギーイ ン」 を使用 した。 ( 3 ) 実験方法

実験前日 の三食 （朝、 昼、 夕） 及び実験当 日 の二食 (昼、 夕） は規定食と した。

実験当 日 の 8 ： 3 0 に被験物を摂取させ、 被験物摂取 の 3 0分後の 9 ： 0 0 カヽ ら 6 0 % V O ₂ maxネ目当の ト レ ッ ド ミ ノレ走を 6 0分間行な っ た。

採血は、 摂取前、 摂取 3 0 分後 （運動開始直前） 、 運 動終了直後 （摂取 9 0 分後） 、 運動終了後 3 0分 （摂取 1 2 0分後） 、 運動終了後 6 0分 （摂取 1 5 0分後） 及 び運動終了後 1 2 0分 （摂取 2 1 0分後） の各時点で行 な つ た o

( 4 ) 評価項目

1.血漿ア ミ ノ 酸 ： 高速ア ミ ノ 酸分析計によ 。

2.血清イ ン シ ユ リ ン ： R I A法によ る。

( 5 ) 結果

得られた結果は、 図 1 7 〜図 1 9 に示す通 り であ る。 図 1 7 は、 被験物摂取からの血漿総ア ミ ノ 酸濃度の変 化を示す。 図中、 縦軸は血漿総ア ミ ノ 酸濃度 （nmol/ml) 及び横軸は摂取後の時間 （ min) であ り、 3 0 - 9 0 分が ト レ ッ ド ミ ル走 （図には運動と記載） である。

図 1 8 は、 P — 1 3群、 P P群及び C H 0群における、 被験物摂取か ら 3 0 分後までの血漿総ァ ミ ノ 酸濃度の変 化 fi (nmol/ml)を示す o

図 1 9 には、 被験物摂取からの血清イ ンス リ ン濃度の 変化（ ϋ/ml)を示す。

各図の値は、 平均土 SD(mean土 sd)で示され、 図 1 7 中、 ★は 0 分に対する p < 0. 0 5 の有意差を示す。 ま た、 図 1 7 及び図 1 8 における異なる ァ ノレ フ ァベ ッ ト a、 b 及び c は、 群間における p く 0. 0 5 を示す。 図 1 9 中、 ★は 0 分に対する p く 0. 0 5 を、 # は P P に対する p < 0. 0 5 を示す。 統計は対応のある t-検定で行な っ た。

上記図よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

a ) 図 1 7 に示す如 く、 本発明組成物摂取 （ P — 1 3群） と市販プロテイ ンパウ ダー摂取 （ P P群） では、 摂取 3 0 分後で、 血漿総ア ミ ノ 酸濃度が有意に上昇 して運動 中の血漿総ア ミ ノ 酸濃度を高 く 維持 した。 ま た、 之等各 群は、 市販糖質食品摂取 （ C H O群） と比較 して運動終 了後 3 0 分まで有意に高かっ た。 さ らに、 被験物摂取 3 0 分後までの血漿総ア ミ ノ 酸濃度の上昇量は、 本発明 組成物摂取で市販プロティ ンパウ ダー摂取よ り も有意に 大き力、つ た （図 1 8 参照） 。

この こ とは、 本発明組成物を運動前摂取する こ とで、 運動中の血中ア ミ ノ 酸 レベルを高 く 維持 し、 運動中の体 蛋白分解を抑制する可能性を示唆 している。 ま た、 本発 明組成物は市販プロティ ンパウ ダーよ り も消化吸収に優 れている可能性も示唆 している。

b ) 図 1 9 に示す如 く、 被験物摂取 3 0 分後の血清イ ン ス リ ン濃度は、 本発明組成物摂取 （ P - 1 3 群） では摂 取によ り 上昇 したカ^ 市販プロ テイ ンパウ ダー摂取

( P P群） では上昇せず、 被験物摂取 3 0 分後の血清ィ ンス リ ン濃度は本発明組成物摂取で市販プロティ ンパゥ ダー摂取よ り も有意に高かっ た。

こ の こ とは、 本発明組成物は糖質を含有する こ と に基 づいて、 イ ンス リ ン分泌刺激作用があ る こ とを示唆 して いる。 イ ンス リ ンは、 組織のア ミ ノ 酸の取 り 込みゃ体蛋 白合成を促進 し、 体蛋白分解を抑制する作用を持つこ と から、 本発明組成物のイ ンス リ ン分泌刺激作用は、 体蛋 白合成に有利と考え られる。

試験例 9

こ の試験は、 運動直後に試験例 3 に記載の本発明組成 物を摂取させた場合の血中ァ ミ ノ 酸と血中ィ ンス リ ンの 変化を、 糖質を含ま ない市販プロテイ ンパウ ダーを摂取 させた場合と比較検討 した ものであ り、 以下の如 く して 実施された。

( 1 ) 被験者

運動部に所属する健常な大学生男子 1 2 名を被験者と した。

( 2 ) 実験条件

本発明組成物を 1本 （ 7 8 m 1 ) 摂取させる条件 （ P - 1 3 ) と、 糖質を含ま ない以外は同 じ蛋白質量の巿販プ 口ティ ンパウ ダーを摂取させる条件 （ P P ) と について. ク ロ スオーバ一法で行な つ た。

市販プロテイ ンパウ ダー と しては、 明治製菓株式会社 製 「SAVAS ProteinXXJ を使用 した。

( 3 ) 実験方法

実験前日 の三食 （朝、 昼、 夕） 及び実験当 日 の三食は 規定食と した。

実験当 日 の 1 6 ： 0 0 カヽら 7 0 % V O ₂ max相当の 自転 車ェルゴメ ータ ー運動を 5 0分間行なわせた後に、 2 5 k gのバーベルを 1 0 回挙上させる運動を負荷 した。 運 動終了後、 直ちに被験物を摂取させた。 採血は、 被験物 摂取前 （運動終了直後） 、 摂取 3 0分後、 摂取 6 0分後 及び摂取 1 2 0分後の各時点で行な っ た。

( 4 ) 評価項目

1. 血漿ア ミ ノ 酸 ： 高速ア ミ ノ 酸分析計によ る。

2. 血清イ ン シュ リ ン ： R I A法によ る。

( 5 ) 結果

得られた結果を、 図 2 0及び図 2 1 に示す。 図 2 0 は、 被験物摂取か らの血漿総ア ミ ノ 酸濃度の変 化を示すグラ フ （縦軸 ： 血漿総ア ミ ノ 酸濃度 （ ninol/ml) 横軸 ： 摂取後の時間 （ min) ) であ る。

図 2 1 は、 被験物摂取からの血清イ ンス リ ン濃度の変 化を示すグラ フ （縦軸 ： 血清イ ンス リ ン濃度 （ ^ U/ml)、 横軸 ： 摂取後の時間 （ min) ) であ る。

各図の値は、 平均土 SD(mean土 sd)で示され、 図 2 1 中 の★は 0 分に対する p < 0. 0 5 の有意差を、 は市販 プロテイ ンパウ ダー群 （ P P ) に対する p く 0. 0 5 を 示す。 統計は対応のある t-検定で行な っ た。

上記図よ り、 以下のこ とが明 らかであ る。

a ) 図 2 0 に示す如 く、 被験物摂取 3 0 分後の血漿総ァ ミ ノ 酸濃度は、 本発明組成物摂取 （ P — 1 3 群） で、 市 販プロテイ ンパウダー摂取 （ P P群） と比較 して有意に 高かっ た。 こ のこ とは、 本発明組成物がプロテイ ンパゥ ダ一よ り も消化吸収に優れている可能性を示 している。 b ) 図 2 1 に示す如 く、 被験物摂取 3 0 分後の血清イ ン ス リ ン濃度は、 本発明組成物摂取では上昇 したが、 市販 プロテイ ンパウ ダー摂取では上昇せず、 被験物摂取 3 0 分後の血清イ ンス リ ン濃度は、 本発明組成物摂取で市販 プロティ ンハ。ウ ダ一摂取よ り も有意に高かっ た。

こ の こ とは、 本発明組成物は糖質が添加されている こ とで、 イ ンス リ ン分泌刺激作用があ る こ とを示 している ₍ イ ンス リ ンは、 組織のア ミ ノ 酸の取 り 込みや体蛋白合成 を促進 し、 体蛋白分解を抑制する作用を持つこ とか ら、 本発明組成物のィ ンス リ ン分泌刺激作用は体蛋白合成に 有利であ る。

Claims

請 求 の 範 囲

1. 乾燥重量基準で蛋白質 1 0 〜 6 5 重量％、 脂肪 5 〜 2 5 重量％及び炭水化物 1 5 〜 7 0 重量％を含有 し 運動前、 運動中及び/又は運動後に摂取される こ とを 特徴とする体脂肪率低下体組成改善食組成物。

2. 乾燥重量基準で蛋白質 1 0 〜 6 5 重量％、 脂肪 5 〜 2 5 重量％及び炭水化物 1 5 〜 7 0 重量％を含有 し. 休息期前の運動後に摂取される こ とを特徴とする体脂 肪率低下体組成改善食組成物。

3. 請求項 1 に記載の体脂肪率低下体組成改善食組成 物を、 運動前、 運動中及び Z又は運動後に摂取させる こ とを特徴とする体脂肪率低下体組成改善方法。

4. 請求項 2 に記載の体脂肪率低下体組成改善食組成 物を、 休息期前の運動後に摂取させる こ とを特徴とす る体脂肪率低下体組成改善方法。