WO1996024592A1

WO1996024592A1 - Derives 5-aminoflavone

Info

Publication number: WO1996024592A1
Application number: PCT/JP1996/000181
Authority: WO
Inventors: Tsutomu Akama; Shun-Ichi Ikeda; Hiroyuki Ishida; Uichiro Kimura; Katsushige Gomi; Hiromitsu Saito
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.
Priority date: 1995-02-06
Filing date: 1996-01-31
Publication date: 1996-08-15
Also published as: EP0755928A4; CA2187197A1; DE69620514D1; EP0755928A1; EP0755928B1; DE69620514T2; AU4547496A

Description

明細書

5-ァミノフラボン誘導体

技術分野

本発明は、抗菌活性、抗エストロゲン活性および抗腫瘍活性を有する 5-ァミノフラボン誘導体に関する。

背景技術

フラボン（2-フヱニル -4H-卜べンゾピラン- 4- オン）の 5位にアミノ基を有し、 8位にフッ素を有する誘導体としては、抗細胞活性を有する化合物（特開平 2- 138277号公報）が開示されているが、該化合物は 4 ' 位にアミノ基を有さず、具体的な実施例の記載もない。 5位および 4 ' 位にアミノ基を有する誘導体としては、抗細胞活性を有する化合物（特開平 2-256673号公報）が開示されているが、該化合物は 6位および 8位にフッ素を有さず、 7位にも置換基を有していない。また、 5位および 4，位にアミノ基を有し、 6位および 8位にフッ素を有する化合物としては、抗細胞活性を有する化合物（特開平 5-286962号公報）が開示されているが、該化合物は 7位に置換基を有していない。

5位にアミノ基を有するその他の誘導体としては、 6位がヒドロキシである化合物 [Chem. Abs t. , 41 卷， 120f， 1947年] 、抗ウィルス作用を有し 3位がアルコキシである化合物（特開昭 62- 223179 号公報）、抗アレルギー等の作用を有する化合物（特開昭 50-52070号公報）、 7位がメチルである化合物 [Arch. Pharm. (We i nhe i m) , 322巻， 589 頁， 1989年] 、およびチロシンキナーゼ阻害作用を有し、 5位、 7位および 4 ' 位にアミノ基を有する化合物 [J. Med. Chem. , 37卷， 3353頁， 1994年] がそれぞれ開示されている。また、 6位およびまたは 8位にハロゲンを有し、 4 ' 位にアミノ基を有する誘導体 [ I nd i an J. Chem. , 1巻， 477 頁， 1963年] が開示されているが、これらの抗細胞活性については知られていない。

また、上記の各フラボン誘導体において、それらの抗エストロゲン活性については知られていない。

発明の開示

本発明は、式（ I )

(I)

[式中、 Xは、置換低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルコキシまたは NR¹ R² (式中、 R' および R² は、同一または異なって、水素、置換もしくは非置換の低級アルキルを表すか、 R¹ と R² が一緒になつて、 Nをはさんで形成される置換もしくは非置換の複素環基を表す）を表し、 Y¹ および Y² は、同一または異なって、水素、ハロゲンまたは低級アルキルを表す] で表される 5-ァミノフラボン誘導体 [以下、化合物（ I ) という。他の式番号の化合物についても同様である。なお、化合物（ I a) 、 ( l b) 等は、化合物（ I ) に包合されることを意味する] またはその薬理上許容される塩に関する。

式（ I ) の各基の定義において、低級アルキルおよび低級アルコキシにおけるアルキル部分としては、直鎖または分枝状の炭素数 1〜6の、例えば、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、 sec-ブチル、 tert- ブチル、ペンチル、イソァミル、へキシル等が挙げられる。複素環基としては、ピロリジニル、ピペリジノ、ピペラジニル、モルホリノ、ホモピペラジニル等が挙げられる。ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素の各原子を表す。ここで、置換低級アルキルおよび置換低級アルコキシにおける置換基としては、同一または異なつて、置換数 1〜3の、例えば、 NR³ R⁴ (式中、 R³ および R⁴ は、同一または異なって、水素、置換もしくは非置換の低級アルキルを表すか、 R 3 と R⁴ が一緒になつて、 Nをはさんで形成される置換もしくは非置換の複素環基を表す）、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルコキン、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノィル、低級アルカノィルォキン、ビニル等が挙げられる。低級アルキルおよび低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノィル、低級アル力ノィルォキシにおけるアルキル部分、複素環基およびハロゲンは、前記各基の定義と同義である。また、置換低級アルキルにおける置換基としては、 NR⁵ R^K

(式中、 R⁵ および R⁶ は、同一または異なって、水素または低級アルキルを表す）が挙げられ、低級アルキルは前記と同義である。各複素環基における置換基としては、同一または異なって、置換数 1〜3の、前記置換低級アルキルにおける置換基および低級アルキル等が挙げられ、低級アルキルは前記と同義である。化合物（ I ) の薬理上許容される塩としては、薬理上許容される酸あるいは塩基の付加塩が挙げられ、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩あるいはメタンスルホン酸塩、シユウ酸塩、酢酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クェン酸塩等の有機酸塩、またはナトリウム塩、力リウム塩等の塩基付加塩が挙げられる。

次に、化合物（ I ) の製造法について説明する。

なお、以下に示した製造方法において、定義した基が実施方法の条件下変化するか、または方法を実施するのに不適切な場合、有機合成化学で常用される方法、例えば、官能基の保護、脱保護等の手段に付すことにより容易に実施することができる。

製造法 1

化合物（ I ) において Xが置換低級アルキルである化合物（ l a) は、次の反応工程に従い製造することができる。

工程（ 1 )

(式中、 Xa は、 Xの定義中の置換低級アルキルを表し、 Y' および Y² は、前記と同義である）

参考例 1に記載の方法あるいはそれに準じて得られる化合物（π) を、化合物 ( I a) の置換低級アルカノィル部分に相当するカルボン酸を溶媒とし、濃硫酸の存在下で加熱することにより、ビバロイル基の除去とエステル化を同時に行い、化合物（ l a) を得ることができる。濃硫酸は、溶媒中の濃度 1〜18規定で用いるのが好ましい。反応は、室温〜用いる溶媒の沸点、好ましくは 50〜100 °Cで行い、 0.1 〜10時間で完了する。

製造法 2

化合物（ I ) において Xが置換もしくは非置換の低級アルコキシである化合物 ( l b) は、次の反応工程に従い製造することができる。

(式中、 Xbは、 Xの定義中の置換もしくは非置換の低級アルコキシを表し、 Υ' および Y² は、前記と同義である）

工程（2)

参考例 2に記載の方法あるいはそれに準じて得られる化合物（III)を、ピリジン中、必要により 0.1〜 1当量のジメチルァミノピリジンの存在下、（X_bCO)₂0 で表される化合物 1〜 5当量と反応させることにより、化合物（ I b) を得ることができる。反応は、 0°C〜室温で行い、 1〜10時間で完了する。

製造法 3

化合物（ I ) において Xが NR¹ R² (式中、 R¹ およびは前記と同義である）である化合物（ I c) は、次の反応工程に従い製造することができる。

(IV) (Vc)

[式中、 X_r は、 Xの定義中の NR ' R² (式中、 R ¹ および R 2 は前記と同義である）を表し、 Y¹ および Y² は、前記と同義である]

工程（3 )

参考例 3に記載の方法あるいはそれに準じて得られる化合物（IV) を、溶媒中、 2〜 5当量の塩基の存在下、 1〜 5当量の p-二トロフエニルクロ口ホルメ一卜と反応させて炭酸エステルとした後、化合物（ I ) の X_r 部分に相当するァミンを加えて力ルバモイル化することにより、化合物（V c ) を得ることができる。溶媒としては、ジクロロメタン、ジクロロェタン、ジメチルホルムアミド等が用いられる。塩基としては、トリェチルァミン、ジイソプロピルェチルァミン、ピリジン、ジメチルァミノピリジン等が用いられる。反応は、 0 °C〜室温で行い、 1〜10時間で完了する。

工程（ 4 )

工程（3 ) で得られる化合物（V c ) を、テトラヒドロフラン等の溶媒中、 0.01〜0.2 当量のパラジゥムテトラキストリフエニルホスフィンの存在下、 1〜 10当量のギ酸— トリエチルァミンで処理することにより、化合物（ I c) を得ることができる。反応は、 0 °C〜室温で行い、 1〜10時間で完了する。

また、化合物（ I a) は、次の反応工程に従い製造することもできる。

(IV i

ェ ( 6：

^Χ

工程（5)

(式中、 Xa 、 Y¹ および Y² は、前記と同義である）

参考例 3に記載の方法あるいはそれに準じて得られる化合物（IV) と、化合物 ( l a) の置換低級アルカノィル部分に相当するカルボン酸またはその反応性誘導体 1〜20当量とを、不活性溶媒中、 1〜20当量の縮合剤または塩基の存在下に反応させることにより、化合物（Va) を得ることができる。カルボン酸の反応性誘導体としては、酸ハロゲン化物、酸無水物、種々の活性エステル等が挙げられる。不活性溶媒としては、ジクロロメタン、ジクロロエタン、トルエン、ジメチルホルムアミド等が用いられる。縮合剤としては、カルボニルジイミダゾ一ル、ジシクロへキシルカルボジイミド、ヨウ化 2-クロ口- N- メチルピリジニゥム等が用いられる。塩基としては、ピリジン、トリェチルァミン等の三級ァミン、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水素化ナトリウム等が用いられる。反応は、 0°C〜用いる溶媒の沸点、好ましくは室温〜 80°Cで行い、 1時間〜 1週間で完了する。工程（6)

工程（5) で得られる化合物（Va) を、前記工程（4) の方法に準じて処理することにより、化合物（ I a) を得ることができる。

ここで得られる化合物（ l a) の一部は、これを合成中間体としてさらに新たな誘導体に導くこともできる。例えば、化合物（ l a) において、 X_a が（CH₂) „ NR ^! R" (式中、 nは、 1 〜 6の整数を表し、 R ³ および R は、前記と同義である）である化合物 ( I aa) は、 X_a が（CH₂) „ Y (式中、 Yは、塩素、臭素またはヨウ素を表す）である化合物（ l ab) を、不活性溶媒中、 1〜10当量の HNR³ (式中、 R ' および R は、前記と同義である）で表されるァミンと、必要により塩基の存在下に反応させることにより得ることができる。不活性溶媒としては、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、ジォキサン等が用いられる。塩基としては、トリェチルァミン、ジイソプロピルェチルァミン、ピリジン、ジメチルァミノピリジン、炭酸力リウム、炭酸ナトリゥム等が用いられる。反応は、 0〜100 °C、好ましくは 50〜70°Cで行い、 1〜10時間で完了する _c 上記各製造法における中間体および目的化合物は、有機合成化学で常用される精製法、例えば、濂過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィ一等に付して単離精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次の反応に供することもできる。

化合物（ I ) の塩を取得したいとき、化合物（ I ) が塩の形で得られる場合にはそのまま精製すればよく、また遊離の形で得られる場合には、通常の方法により適当な溶媒に溶解または懸濁し、所望の酸または塩基を添加し塩を形成させて単離精製すればよい。

また、化合物（ I ) およびその薬理上許容される塩は、水または各種溶媒との付加物の形で存在することもあるが、これら付加物も本発明に包含される。

本発明によって得られる化合物（ I ) の具体例を第 1表に示す。

化合物番号 X γ1 Y²

1 N(CH₂CH₃)₂ H

2 N N-CH₃ ^F H

3 NH(CH₂)₂N(CH₃)₂ H

4 CH₂CI F H

5 (CH₂)₂Br F H

6 CH₂N(CH₃)₂ H

^F

7 \ ' "2/Z'*\^WP '3/2 H

8 (CH₂)₃N(CH₃)2 H

9 H

10 CH₂ N N-CH₃ H

11 CH₂ 0 H

12 CH₂ N >-OH H

13 CH₂N(CH₃)(CH₂)₂N(CH₃}₂ H

14 CH₂NHCH₂COOCH₃ H

15 OCH₂CH=CH₂ H

16 CH₂CI CI CI

17 CH₂N(CH₃)₂ CI CI 本発明化合物（ I ) は、抗エストロゲン活性を有する。このことは、成熟マウスに化合物（ I ) を投与することによる子宮重量の減少作用で示される。また、化合物（ I ) は、マイクロプレート内の培地中でのヒト乳癌細胞の増殖を抑制し. さらに、ヌ一ドマウスに移植したヒト乳腫瘍の増殖も抑制する。

このような生物活性を有する化合物は、代表的な抗エストロゲン剤であるタモキンフェンが有効であると同じ症状の治療、例えば、乳腫瘍、非排卵性不妊あるいは月経不順の治療に有効である。

次に、代表的な化合物（ I ) の活性について実験例により具体的に示す。

実験例 1

成熟マウスの子宮重量に及ぼす効果

生後 9週齢の成熟雌性 BALB/cマウスを 2群に分け、 1群 6匹で、片方の群に被験化合物を 4 日間反復経口投与した。 5日後に子宮を摘出し、重量を測定した ( その結果を第 2表に示す。第 2 表

化合物番号投与量（mg kg) 子宮重量（mg)

無処理 - 106

6 25 67 実験例 2

ヒト乳癌細胞（MCF-7) 生育阻害試験

96穴マイクロタイタープレートの各穴に、 RPMI 1640培地に 10 %牛胎児血清、 10"M エストラジオール（シグマ社製）、 100 単位 Zmlのぺニシリンおよび 100 g/mlのストレブトマイシンを添加した培地（以下、培地 Bという）で 5 X 10⁴ 個 Zmlに調製した MCF- 7 細胞を 0. 1ml ずつ分注した。該プレートを炭酸ガスインキュベータ一内で 37°C、 20時間培養後、培地 Bにより適宜希釈した検体（試験化合物）を 0. 05mlずつ加え、炭酸ガスインキュベータ一内で 37°C、 72時間培養した。培養上清を除去後、残渣に 0. 02%ニュートラルレツドを添加した培地 Bを 0. 1ml ずつ加え、 37°Cで 1 時間炭酸ガスインキュベーター内で培養し、細胞を染色した。培養上清を除去後、残渣を生理食塩水で 1回洗浄した。次いで、 0. 001 規定塩酸 Z30!¾ェタノールで色素を抽出後、マイクロプレートリーダ一により 550 nmの吸光度を測定した。無処理細胞と既知濃度の検体で処理した細胞の吸光度を比較することにより細胞の増殖を 50% 阻害する検体濃度（ I C ₅。）を算出した。その結果を第 3表に示す。第 3 表

化合物番号 IC₈₀ (μΜ)

0.35

2 0.23

6 0.026

7 0.019

8 0.029

9 0.033

10 0.087

11 0.017

12 0.018

14 0.013

15 0.081

実験例 3

エストロゲン依存性ヒト乳癌 MCF- 7 に対する抗腫瘍効果

ヒ卜ホルモン依存性乳癌 MCF- 7 の腫瘍片（2mm角）を？〜 9週齢の雌性 BALB/c- nu/nu マウス（日本クレア）の腹側部皮下に移植した。腫瘍の増殖を促進するために、移植当日および移植後 2週目の計 2回、 12. 5 jt g のプロピオン酸ェストラジオールを大腿部筋肉内に投与した。移植後 3〜 4週目に腫瘍の体積が 25ないし 200M1³に達したマウスを選別し、 1群 5匹で、被験化合物を週 5日間、 2週間反復経口投与した。また、投与開始日に、プロピオン酸ェストラジオ一ルを、再度追加投与した。経日的に腫瘍の長径と短径を測定し、腫瘍体積を楕円体の近似値として次の式で算出した。長径 (mm)X〖短径 (mm)J²

臛 «{^X(mm³)

2 投与開始時の腫瘍体積（V。：)を測定後、経日的に腫瘍体積（V) を測定して V/V。を算出し、対照群の V/V。値に対する薬剤投与群の V/V_u値の割合（τ/c) を求めた。その結果を第 4表に示す。第 4 表

化合物番号投与量（mg/kg) T/C 判定日（日）

6 25 0.012 15,17

7 25 0.041 18

8 25 0.15 14

9 25 0.042 14

10 25 0.070 14

11 25 0.044 18

12 25 0.035 18

13 25 0.022 24

14 25 0.013 25 実験例 4

抗菌活性

化合物（ I ) の枯草菌 (Bacillus subtilis #10107) に対する抗菌活性 [最小生育阻止濃度（M I C ； ^g/ml) ] を第 5表に示す。最小生育阻止濃度は、寒天希釈法により PH7.0 で測定した。第 5 表

化合物番号 MIC (Ug/ml)

3 8 3 3

6 26 0

1 0 4

8 1 0 4

以下に、実施例および参考例を示す。なお、下記実施例中および参考例中の各化合物の物理化学データは、以下の機器類によつて測定した。

Ή匪： JEOL JNM-GX270 (270MHz)

JEOL JNM-EX270(270MHz)

HITACHI R-90H(90MHz) MS . ： JEOL JMS-D300

JEOL JMS-SX102

発明を実施するための最良の形態

実施例 1

5-ァミノ -2- (4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 7- [(ジェチルカルバモイルォキシ）メチル ]-6， 8-ジフルォロ- 4H- 1-ベンゾピラン- 4_ オン（化合物 1 )

( 1 ) 参考例 3で得られる化合物（IVa)(303 mg, 0.722 mmol) をジメチルホルムアミド（15 mL)に溶解し、氷冷下、トリェチルァミン（0.30 mL， 2.2 mmol) および P-ニトロフヱニルクロ口ホルメート（293 mg， 1.44 mmol)を加え、室温でー晚撹拌した。反応液を氷冷し、ジェチルアミン（0.75 mL, 7.2 nunol)を加え、同温度で 4.5 時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム）で精製し、 2-(4- ァリルォキシカルボニルァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 5-ァミノ- 7- [( ジェチル力ルバモイルォキシ）メチル ]- 6，8-ジフルォ口- 4H- 1-ベンゾピラン- 4-オン（239 mg, 収率 64X)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) 5 (ppm) 1.12 (t， J = 7.3 Hz, 6H)， 3.20 (q, J = 7.3 Hz, 2H)， 3.28 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 4.72 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.2-5.5 (m, 2H), 5.32 (s， 2H)， 5.7-6.2 (m， 1H), 6.23 (brs, 2H), 6.57 (s, 1H), 7.09 (d, J = 3.3 Hz, 1H)， 7.5-7.8 (m, 2H)， 8.32 (t, J = 8.5 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 520 (M+H 分子式 C₂₅H₂₄F₃N₃0₆ = 519

( 2 ) 上記化合物（223 mg, 0.429 mmol) をテトラヒドロフラン（20 mいに溶解し、ギ酸一卜リエチルァミン（0.29 mいおよびパラジウムテトラキストリフヱニルホスフィン（50 mg, 0.043 mmol)を加え、室温で 40分間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィー（クロ口ホルム）で精製し、酢酸ェチルーへキサンから再結晶することにより、化合物 1 (105 mg，収率 56%)を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDC ） δ (ppm) 1.12 (brs, 6H), 3.2-3.4 (m, 4H), 5.30 (s， 2H), 6.58 (s, 1H)， 6.83 (t, J = 8.9 Hz, 1H)， 7.5-7.6 (m, 2H) FABMS (m/e) 436 (M+H )' 分子式 C_{2 I}H₂ N = 435

実施例 2

- 5-ァミノ- 2-(4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6， 8 -ジフルォロ- 7-[(4- メチルピペラジニル）カルボ二ルォキシメチル]- 4H-1- ベンゾピラン- 4- オン（化合物 2)

( 1 ) 参考例 3で得られる化合物（IVa) (420 mg, 1.00 mmol)およびジェチルァミンの代わりに N-メチルビペラジン（0.35 niL， 3.0 匪 ol)を用い、実施例 1 ( 1 ) と同様にして、 2-(4- ァリルォキシカルボニルァミノ -3- フルオロフヱ二ル）- 5- ァミノ- 6,8- ジフルォロ- 7- [(4- メチルビペラジニル）カルボニルォキシメチル] -4H- 1_ベンゾピラン- 4-オン（294 mg, 収率 54¾)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1.05 (ppm) 2.31 (s, 3H), 2.38 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 3.52 (t， J = 5.1 Hz, 4H), 4.72 (d, J = 5.5 Hz, 2H)， 5.2-5.5 (m， 2H), 5.33 (s, 2H), 5.7-6.2 (m, 1H)， 6.23 (brs, 1H), 6.56 (s, 2H)， 7.15 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 7.5-7.7 (m, 2H)， 8.30 (t, J = 8.1 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 547 (M+H )⁺ 分子式 C₂₆H₂₅F 0₆ = 546

(2) 上記化合物（294 mg, 0.539 mmol) を用い、実施例 1 (2) と同様にして、化合物 2 (232 mg, 収率 93 )を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDC ） δ (ppm) 2.31 (s， 3H)， 2.39 (brs, 4H)， 3.52 (brs,

4H)， 4.20 (brs, 2H), 5.32 (s， 2H)， 6.22 (brs, 2H), 6.48 (s， 1H), 6.84 (t，

J = 8.4 Hz, 1H), 7.5-7.6 (m, 2H)

FABMS (m/e) 463 (M+H )¹ 分子式 C₂ ， F 0₄ = 462

実施例 3

5-ァミノ -2- (4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 7- [N-(2-ジメチルァミノエチル）力ルバモイルォキシメチル] -6,8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 3)

( I ) 参考例 3で得られる化合物（IVa)(420 mg, l.00 mmol)およびジェチルァミンの代わりに Ν,Ν-ジメチルエチレンジァミン（0.33 mL， 3.0 mmol)を用い、実施例 I ( I ) と同様にして、 2-(4- ァリルォキシカルボニルァミノ- 3- フルォ

I 3 口フヱニル）- 5-ァミノ- 7- [N- (2- ジメチルアミノエチル）力ルバモイルォキシメチル] - 6，8-ジフルォロ- 4H-卜べンゾピラン- 4- オン（265 mg, 収率 50 )を得た。 Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) (5 (ppm) 2.23 (s， 6H)， 2.42 (t， J = 5.9 Hz, 2H)，

3.28 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 4.72 (d, J = 5.7 Hz, 2H)， 5.1-5.5 (m， 2H)， 5.30 (s， 2H), 5.7-6.2 (m， 1H)， 6.22 (brs, 2H), 6.56 (s， 1H), 7.05 (brs, 2H),

7.5-7.7 (m, 2H)， 8.31 (t， J = 8.1 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 535 (M+H 分子式 C₂₅H₂₅F 0₆ = 534

(2) 上記化合物（265 mg, 0.496 mmol) を用い、実施例 1 (2) と同様にして、化合物 3 (176 mg, 収率 79¾ί)を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDC ) <5 (ppm) 2.22 (s， 6H)， 2.43 (t, J = 5.4 Hz, 2H)，

3.29 (q, J = 5.4 Hz, 2H), 4.20 (brs, 2H)， 5.29 (s， 2H)， 5.38 (m, 1H)， 6.21 (brs, 2H)， 6.47 (s， 1H), 6.83 (t, J = 8.9 Hz, 1H)， 7.5-7.6 (m, 2H) FABMS (m/e) 451 (M+H V 分子式 C_{2 l}H₂,F₃N₄0< = 450

実施例 4

5 -ァミノ- 2-(4-ァミノ- 3- フルオロフェニル）-7- [(クロロアセトキシ）メチル] _6， 8-ジフルォ口- 4H-卜べンゾピラン- 4- オン（化合物 4)

参考例 1で得られる化合物（IIa)(10.8 g， 20.0 mmol)にクロ口酢酸（100 g, 1.06 mol) および硫酸（30 mいを加え、 100 °Cで 20分間撹拌した。反応液を氷水 (1 いに注ぎ、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をジイソプロピルエーテル（250 inいでトリチユレーシヨンすることにより、化合物 4 (8.00 g, 収率 97ϋ を得た。

Ή NMR (90 MHz, DMS0-d₆) δ (ppm) 4.40 (s， 2H), 5.36 (s， 2H), 6.00 (brs, 2H), 6.66 (s， 1H), 6.87 (t， J = 8.9 Hz, 1H)， 7.06 (brs, 2H), 7.5-7.7 (m, 2H)

FABMS (m/e) 413 (M+H )^f 分子式 C, ₈H,

412

実施例 5

5 -ァミノ- 2-(4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 7-[(3_ブロモプロピオ二ルォキシ）メチル ]-6， 8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 5)

参考例 1で得られる化合物（na)(504 mg, 1.00 難 ol)に 3-ブロモプロピオン酸 (7.65 g, 50.0 mmol)および硫酸（1.5 mL) を加え、 100 °Cで 10分間撹拌した。反応液を氷水（100 mL) に注ぎ、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：ァセトニトリル =19:1) で精製することにより、化合物 5 (163 mg, 収率 35X)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1 5 (ppm) 2.97 (t, J = 6.8 Hz, 2H)， 3.58 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 5.36(t， J = 1.5 Hz, 2H), 6.49 (s， 1H)， 6.83 (t， J = 8.7 Hz, 1H), 7.4-7.7 (in, 2H)

FABMS (m/e) 473， 471 (M+H)' 分子式 C, ₉H ⁷⁹BrF₃N₂0. = 470

実施例 6

5 -ァミノ _2- (4-ァミノ -3- フルオロフヱ二ル）- 7- [(ジメチルァミノァセトキシ）メチル ]-6, 8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 6 )

実施例 4で得られた化合物 4 (1.50 g, 3.63 mmol)をジメチルホルムアミド (30 mL) に溶解し、ジメチルァミン塩酸塩（1.48 g, 18.2 mmol)および炭酸カリゥム（2.50 g， 18.2 隱 ol)を加え、 50°Cで 30分間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、酢酸ェチルーへキサンから再結晶することにより、化合物 6 (1.18 g, 収率 77¾)を得た。このものは、酢酸ェチルに溶解し、 1 規定塩酸/ 2-プロパノール溶液（3 mL) を加え、析出した結晶を濾取することにより、塩酸塩とした。

Ή NMR (270 MHz, DMS0- d₆) δ (ppm) 2.84 (s, 6H)， 4.27 (s, 2H), 5.42 (s， 2H), 6.73 (s， 1H)， 6.87 (t， J = 8.9 Hz, 1H)， 7.5-7.7 (m, 2H), 10.3 (brs, 1H)

FABMS (m/e) 422 (M+H )' 分子式 C₂₀H F = 421

実施例 7

5 -ァミノ- 2- (4 -アミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 7- [(3- ジメチルァミノプロピォニルォキシ）メチル ]-6, 8-ジフルォ口- 4H-卜べンゾピラン- 4- オン（化合物 7 ) 実施例 5で得られた化合物 5 (130 mg, 0.276 mmol) をジメチルホルムアミド (5 mL) に溶解し、ジメチルアミン塩酸塩（112 mg, 1.38 mmol)およびジィソプ口ピルェチルアミン（0.24 mL, 1.38 mmol) を加え、 50°Cで 30分間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナ卜リウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：メタノール = 9:1 ) で精製することにより、ィ匕合物 7 (122 mg, 収率 86¾)を得た。このものは、実施例 6と同様にして、塩酸塩とした。

Ή NMR (270 MHz, DMSO- d₆) δ (ppm) 2.75 (d， J - 4.5 Hz, 6H), 2.93 (t, J = 7.4 Hz, 2H)， 3.31 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 5.31 (s, 2H)， 6.10 (brs, 2H), 6.72 (s, 1H), 6.88 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13 (brs, 2H)， 7.60 (dd, J =8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H)， 7.66 (dd, J = 12.9 Hz, 2.0 Hz, 1H), 10.2 (brs, 1H) FABMS (m/e) 436 (M+H )' 分子式 C₂ , H, oFaN.O. = 435

実施例 8

5 -ァミノ -2- (4-ァミノ -3- フルオロフヱ二ル）- 7-[(4-ジメチルァミノブチリルォキシ）メチル ]_6，8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4_ オン（化合物 8 ) ( 1 ) 4-ジメチルァミノ酪酸塩酸塩（3.99 g， 23.8 mmol)をジメチルホルムァミド（50 mいに溶解し、 Ν,Ν' - カルボ二ルジィミダゾール（3.86 g, 23.8 mmol) を加え、 80°Cで 2.5 時間撹拌した。ここへ参考例 3で得られる化合物（IVa)U.OO g, 2.38 mmol) を加え、同温度でさらに 2時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムク口マトグラフィー（クロ口ホルム：メタノール = 9:1 ) で精製することにより、 2 -（4- ァリルォキシカルボニルァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 5-ァミノ- 7- [(4- ジメチルァミノブチリルォキシ）メチル ]_6， 8-ジフルォ口- 4H-1-ベンゾピラン- 4 - オン（1.27 g，収率 100¾ί) を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) 5 (ppm) 1.6-2.0 (m， 2H)， 2.1-2.5 (m, 4H)， 2.23 (s, 6H)， 4.72 (d, J = 5.7 Hz, 2H)， 5.2-5.5 (m， 2H), 5.30 (s， 2H), 5.7-6.2 (m， 1H)， 6.23 (brs, 2H), 6.56 (s， 1H), 7, 10 (brs, 1H), 7.5-7.7 (m, 2H), 8.31 (t， J = 7.9 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 534 (M+H )' 分子式 ₆F 0« = 533 ( 2 ) 上記化合物（1.27 g, 2.38 mmol)を用い、実施例 1 ( 2 ) と同様にして、化合物 8 (567 mg, 収率 53¾!)を得た。

Ή NMR (270 MHz, DMS0-d_B) δ (ppm) 1.94 (q, J = 7.9 Hz, 2H)， 2.48 (t, J 二 7.9 Hz, 2H)， 2.73 (s， 6H)， 3.04 (m, 2H)， 5.27 (s, 2H)， 6.14 (brs, 2H),

6.72 (s, 1H)， 6.87 (t, J = 8.4Hz， 1H)， 7.13 (brs, 2H)， 7.60 (dd， J = 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 12.9 Hz, 2.0 Hz, 1H), 10.2 (brs, 1H)

FABMS (m/e) 450 (M+H )⁺ 分子式 C₂₂H₂ N₃0< = 449

実施例 9 - 5-ァミノ- 2- (4-ァミノ - 3- フルオロフヱ二ル）- 6， 8-ジフルォロ- 7- [( ピベリジノアセトキシ）メチル ]-4H- 1- ベンゾピラン- 4- オン（化合物 9 )

実施例 4で得られた化合物 4 (515 mg, 1.25 mmol)をジメチルホルムアミド (10 mL) に溶解し、ピペリジン（0.62 mL, 6.2 議 ol)およびジイソプロピルェチルアミン（0.22 mL, 1.25 mmol) を加え、 50°Cで 2時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（クロ口ホルム：ァセトニトリル = 4:1 ) で精製し、酢酸ェチルから再結晶することにより、化合物 9 (441 mg, 収率 775 を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDCh) δ (ppm) 1.44 (quint., J = 5.4 Hz, 2H)， 1.64 (quint. J = 5.4 Hz, 4H)， 2.57 (t, J = 5.4 Hz, 2H)， 3.28 (s, 2H)， 4.21 (brs, 2H), 5.34 (s, 2H), 6.23 (brs, 2H)， 6.49 (s， 1H), 6.84 (t， J = 8.9 Hz, 1H), 7.5-7.6 (m, 2H)

FABMS (m/e) 462 (M+H 分子式 C₂₃H₂₂F 0₄ = 461

実施例 1 0

5-ァミノ- 2_(4 -ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6,8-ジフルォロ- 7- [(4- メチルピペラジニルァセトキシ）メチル ]- 4H-1- ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 0 ) ピぺリジンの代わりにメチルビペラジン（0.69 mL, 6.2 mmol)を用い、実施例 9と同様にして、化合物 1 0 (408 mg，収率 695 を得た。

Ή N R (270 MHz, CDC ) δ (ppm) 2.33 (s， 3H), 2.55 (brs, 4H), 2.66 (brs, 4H), 3.28 (s， 2H), 4.21 (brs, 2H), 5.34 (s， 2H)， 6.23 (brs, 2H), 6.49 (s, 1H)， 6.84 (t， J - 8.4 Hz, 1H)， 7.5-7.6 (m, 2H)

FABMS (m/e) 477 (M+H )^! 分子式 C₂ N₃( = 476

実施例 1 1

5-ァミノ- 2- (4-アミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6， 8-ジフルオロ- 7-[( モルホリノアセトキシ）メチル ]- 4H- 1- ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 1 )

ピぺリジンの代わりにモルホリン（0.55 mL, 6.2 mmol)を用い、実施例 9と同様にして、化合物 1 1 (350 mg，収率 6 )を得た。

Ή NMR (270 MHz, DMS0 - d₆) δ (ppm) 2.4-2.6 (m, 4H), 3.56 (t, J - 4.7 Hz, 4H), 5.28 (s， 2H), 6.10 (brs, 2H), 6.71 (s， 1H)， 6.87 (t， J = 8.9 Hz, 1H)， 7.12 (brs, 2H)， 7.60 (dd, J = 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H)， 7.66 (dd， J = 12.9 Hz, 2.0 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 464 (M+H )' 分子式 C₂₂H₂ N₃0₅ = 463

実施例 1 2

5 -ァミノ- 2- (4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6, 8 -ジフルォロ -7- [(4- ヒドロキシピベリジノアセトキシ）メチル ]-4Η-1- ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 2 ) ピぺリジンの代わりに 4-ヒドロキシピペリジン（633 mg, 6.2 讓 ol) を用い、実施例 9と同様にして、化合物 1 2 (518 mg, 収率を得た。

Ή NMR (270 MHz, DMS0-d₆) δ (ppm) 1.3-1.5 (m， 2H)， 1.6-1.8 (m, 2H), 2.1- 2.3 (m, 2H), 2.6-2.8 (m， 2H)， 3.23 (s， 2H), 3.3-3.5 (m, 1H), 4.53 (d, J = 4.0 Hz, 1H)， 5.26 (brs, 2H)， 6.12 (brs, 2H)， 6.71 (s， 1H), 6.87 (t, J = 8.9 Hz, 1H)， 7.12 (brs, 2H)， 7.60 (dd, J = 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 12.9 Hz, 2.0 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 478 (M+H )+ 分子式 C₂₃H₂₂F 0_Γ, = 477

実施例 1 3

5-ァミノ- 2-(4-ァミノ - 3- フルオロフヱニル） -7- N- (2-ジメチルアミノエチル）- N-メチルアミノアセトキシ] メチル } -6,8- ジフルォ口- 4H-卜べンゾピラン -4- オン（化合物 1 3 )

ピぺリジンの代わりに N， N, N' - トリメチルエチレンジァミン（0.80 mL, 6.2 iranol) を用い、実施例 9と同様にして、化合物 1 3 (398 mg, 収率 67¾)を得た。 Ή NMR (270 MHz, CDCh) δ (ppm) 2.33 (s， 6H)， 2.43 (s， 3H)， 2.51 (t, J =

6.4 Hz, 2H)， 2.74 (t, J - 6.4 Hz, 2H)， 3.41 (s, 2H)， 4.20 (brs, 2H)， 5.33 (s， 2H), 6.24 (brs, 1H)， 6.49 (s， 1H)， 6.85 (t， J = 8.7 Hz, 1H)， 7.5-7.6 (m, 2H)

FABMS (m/e) 479 (M+H )' 分子式 C₂₃H₂₅F 0₄ = 478

実施例 1 4

5 -ァミノ _2- (4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6,8-ジフルォロ- 7-[( メトキシカルボニルメチルアミノアセトキシ）メチル ]-4H- 1- ベンゾピラン - 4_ オン（化合物 1 4 )

ピぺリジンの代わりにグリシンメチルエステル塩酸塩（783 mg， 6.2 mmol) を用い、実施例 9と同様にして、化合物 1 4 (291 mg, 収率 50 )を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDC1₃) δ (ppm) 3.50 (s, 2H), 3.53 (s， 2H), 3.73 (s， 3H)， 4.20 (brs, 2H)， 5.36 (s， 2H), 5.41 (brs, 1H), 6.24 (brs, 2H)， 6.49 (s, 1H), 6.84 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 7.5-7.6 (m, 2H)

FABMS (m/e) 466 (M+H )⁺ 分子式 C_{2 l}H_{l 8}F₃N₃0₆ = 465

実施例 1 5

7-ァリルォキシカルボニルォキシメチル- 5- ァミノ - 2- (4-ァミノ- 3- フルォロフエ二ル）- 6, 8-ジフルォ口- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 5 )

参考例 2で得られる化合物（Illa)(336 mg， 1.00 画 ol) をピリジン（20 mいに溶解し、氷冷下、ジァリルピロカーボネート（1.0 mL, 5.0 mmol) および 4-ジメチルァミノピリジン（27 mg, 0.20 mmol) を加え、室温で 4時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を 1規定塩酸で 2回、水、飽和食塩水で各 1回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリ力ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノ一ル = 200:1 ) で精製し、酢酸ェチル—へキサンから再結晶することにより、化合物 1 5 (172 mg, 収率 41¾)を得た。

Ή NMR (270 MHz, CDCh) δ (ppm) 4.67 (d， J = 5.9 Hz, 2H)， 5.28 (dd, J ： 10.4 Hz, 1.0 Hz, 1H)， 5.37 (dd, J = 17.3 Hz, 1.0 Hz, 1H)， 5.38 (s， 2H)， 5.96 (ddd, J = 17.3 Hz, 10.4 Hz, 5.9 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.84 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 7.5-7.6 (m， 2H)

FABMS (m/e) 421 (M+H )' 分子式 C₂₀H, N₂(h = 420

実施例 1 6

5-ァミノ - 2_(4 -ァミノ- 3， 5- ジクロロフヱニル） -7- [(クロロアセトキシ）メチル] -6， 8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 6 )

参考例 5で得られる化合物（llb)(3.14 g, 5.66 mmol)にクロ口酢酸（26.7 g, 283 難 ol) および硫酸（8.0 mL) を加え、 100 °Cで 20分間撹拌した。反応液を室温で放冷後、氷水に注ぎ、析出した結晶を濾取することにより、化合物 1 6 (2.40 g,収率 91!0を得た。

Ή NMR (90 MHz, DMS0-d₆) 5 (ppm) 4.44 (s， 2H), 5.36 (t, J = 1.5 Hz, 2H), 6.84 (s, 1H)， 7.88 (s, 2H)

FABMS (m/e) 463 (M+H 分子式 C₁₈H, , ³⁵ChF₂N₂0, = 462

実施例 1 7

5-ァミノ -2 -（4-ァミノ- 3,5- ジクロロフヱ二ル）- 7- [(ジメチルァミノアセトキシ）メチル ]- 6，8-ジフルォロ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン（化合物 1 7 )

実施例 1 6で得られた化合物 1 6 (2.00 g, 4.31 隱 ol)をジメチルホルムアミド（80 mいに溶解し、ジメチルアミン塩酸塩（1.76 g, 21.6 mmol)およびジイソプロピルェチルアミン（3.75 mL, 21.6 mmol) を加え、 50°Cで 3時間撹拌した。反応液に水を加えた後、析出した結晶を濾取し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：メタノール = 9:1 ) で精製することにより、化合物 1 7 (1.68 g，収率 83 )を得た。

Ή NMR (270 MHz, DMS0-d₆) <5 (ppm) 2.25 (s， 6H), 3.24 (s, 2H)， 5.27 (brs, 2H)， 6.37 (brs, 2H), 6.83 (s, 1H)， 7.11 (brs, 2H)， 7.87 (s, 2H)

FABMS (m/e) 472 (M+H 分子式 C₂₀H, ₇ ³⁵ C1₂F₂N₃0, = 471

参考例 1

6, 8-ジフルォロ- 2-(3-フルォロ -4- ビバロイルァミノフエニル） -7-ヒドロキシメチル -5- ビバロイルァミノ- 4H-1-ベンゾピラン- 4- オン [化合物（I la) ]

2， 4-ジフルオロフェノール（104 g， 796 mmol)をジクロロメタン（800 mL) に溶解し、氷冷下、トリェチルアミン（132 mいおよびクロロギ酸ェチル（92.0 mL) を加え、 -10 〜0 °Cで 2 時間撹拌した。反応液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去することにより、 1 -エトキンカルボニルォキシ -2， 4- ジフルォロベンゼン（156 g,収率 97¾ί)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1J δ (ppm) 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.33 (q, J = 7.0

Hz, 2H)， 6.7-7.3 (m, 3H)

E1MS (m/e) 202 (M ' ) 分子式 C₉H₈F₂0_:, = 202

上記で得られた 1 -エトキンカルボニルォキシ _2，4- ジフルォロベンゼン（50.5 g, 250 圆 ol)を濃硫酸（115 mいに溶解し、内温を 10〜20。Cに保ちながら発煙硝酸（15.9 mいを加え、同温度で 1時間撹拌した。反応液を氷水に注ぎ、酢酸ェチル（500 mL) で抽出した。有機層を飽和食塩水で 2回洗浄後、無水硫酸ナトリゥムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をメタノール（1.0 L)に溶解し、水（50 mL) および炭酸水素ナトリウム（40 g) を加え、室温で 16時間撹拌した。反応液を濾過し、メタノールを減圧留去した。水（200 mL) を加え、溶液の pHを 5とし、酢酸ェチル（200 mL) で 2回抽出した。有機層を水（400 mL) で 1回、飽和食塩水（400 mL) で 1回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去することにより、 2， 4-ジフルォロ- 5- ニトロフヱノール（41.6 g, 収率 95¾ί)を得た。

Ή NMRC90 MHz, CDC ) 5(ppm) 7.23 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.6 Hz, 7.3 Hz, 1H)

EIMS (m/e) 175 (M ' ) 分子式 C F , = 175

上記で得られた 2, 4-ジフルォ口- 5- ニトロフエノール（24.9 g， 142 議 ol) を酢酸ェチル（150 mL) に溶解し、 10% パラジウム炭素（5.0 g)を加え、水素気流下、 50〜60 で 27時間撹拌した。反応器を窒素置換した後、反応液を吸引濾過した。濾液から溶媒を減圧留去後、残渣をへキサンでトリチユレーシヨンすることにより、 5-ァミノ- 2, 4- ジフルオロフェノール（19, 8 g，収率 96¾)を得た。

Ή 匪 (90MHz, CDCh) δ (ppm) 4.75 (brs, 2H), 6.37 (t， J - 9.1 Hz, 1H)， 6.87 (t, J = 11.1 Hz, 1H)， 9.21 (s， 1H)

EIMS (m/e) 145 (M ⁺ ) 分子式 C₆H_nF₂N0 = 145

上記で得られた 5-ァミノ- 2, 4- ジフルオロフヱノール（18.9 g, 130 mmol) をピリジン（45 mいに溶解し、氷冷下、ピバロイルクロリド（16.0 mいを 8 分間で滴下し、さらに同温度で 30分間撹拌した。反応液に 1規定塩酸水溶液を加え、エーテルで抽出した。有機層を 1規定塩酸水溶液、水および飽和食塩水で各 1回ずつ洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をへキサンでトリチュレーンヨンすることにより、 2,4-ジフルォ口- 5- ビバロイルアミノフヱノール（27.0 g，収率 91 )を得た。

Ή 刚 R (90MHz, CDC1_;)) <5 (ppm) 1.35 (s， 9H)， 6.90 (t， J = 10.4 Hz, 1H)， 7.65 (brs, 1H), 7.94 (brs, 1H), 8.24 (dd, J = 9.1 Hz, 8.0 Hz, 1H)

EIMS (m/e) 229 (M ' ) 分子式 CuH, N0₂ = 229

上記で得られた 2， 4-ジフルォロ- 5- ビバロイルアミノフヱノール（2.15 g， 9.39 mmol)をジクロロメタン（40 mいに溶解し、 3, 4-ジヒドロ- 2H-ピラン（4.3 mL) およびカンファースルホン酸（44 mg)を加え、室温で 4.3 時間撹拌した。反応液を 5!¾炭酸カリウム水溶液に加え、クロ口ホルムで抽出した。有機層を水で 1回、飽和食塩水で 1回洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をへキサンでトリチュレーンヨンすることにより、 2- (2， 4- ジフルオロ- 5- ビバロイルアミノフエノキン）テトラヒドロピラン（2.51 g, 収率 85%) を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃)5 (ppm)l.31 (s， 9H), 1.4-2.2 (m, 6H)， 3.4-4.2 (m， 2H)， 5.43 (brs, 1H)， 6.89 (t， J = 10.4 Hz, 1H), 7.44 (brs, 1H)， 8.25 (t, J = 8.5 Hz, 1H)

EIMS (m/e) 313 (M ⁺ ) 分子式 CJ_{2 l}F₂N0₃ = 313

アルゴン雰囲気下、ジイソプロピルアミン（35 mL, 250 隱 ol)をテトラヒドロフラン（120 mL) に溶解し、氷冷下、 n-ブチルリチウム（1.6 M へキサン溶液 140 mL, 224 隨 ol) を内温 0〜 5 °Cで滴下し、 - 60 °C以下まで冷却した。ここへ上記で得られた 2- (2,4- ジフルォ口- 5- ビバロイルァミノフヱノキシ）テトラヒドロピラン（31.3 g， 100 議 ol) のテトラヒドロフラン溶液（200 mL) を、内温 -60 °C以下で、 1時間で滴下した。さらに同温度で 20分間撹拌した後、ジメチルホルムアミド（15.5 mL, 200 mmol)を内温- 60 °C以下で滴下した。さらに室温で 30分間撹拌した後、反応液に水を加え、酢酸ェチルで 2回抽出した。有機層を水で 1回、飽和食塩水で 1回洗浄後、無水硫酸ナトリウ厶で乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣を酢酸ェチル（140 mL) —へキサン（100 mL) から再結晶することにより、 2,6-ジフルォ口- 3- ビバロイルァミノ- 5-(2-テトラヒドロビラ二ルォキシ）ベンズアルデヒド（19.0 g，収率 56¾ί)を得た。母液を濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸ェチル：へキサン = 5:1 〜4:1 ) で精製することにより、さらに同化合物（6.94 g, 収率 20X)を得た。

Ή 画 (90 MHz, CDC )(5 (ppm) 1.32 (s, 9H), 1.5-2.0 (m, 6H)， 3.5-4.1 (m， 2H), 5.47 (brs, 1H), 7.49 (brs, 1H), 8.55 (t, J = 8.4 Hz, 1H)， 10.4 (s， 1H)

FABMS (m/e) 342 (M+H )+ 分子式 C,₇H_{2 I}F = 341

上記で得られた 2, 6-ジフルォ口- 3- ビバロイルァミノ -5- (2-テトラヒドロビラニルォキシ）ベンズアルデヒド（25.4 g, 74.5 mmol)をメタノール（300 mL) に溶解し、氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム（1.41 , 37.3 mmol)を加え、同温度で 15分間撹拌した。反応液に水を加え、約 100 mしになるまで濃縮した。齚酸ェチルで 2回抽出し、有機層を飽和食塩水で 1回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去することにより、 2， 6-ジフルォロ- 3- ビバロイルァミノ- 5 - (2 - テトラヒドロビラニルォキシ）フヱニルメタノール（25.5 g, 収率 lOO!O を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC )(5 (ppm) 1.31 (s， 9H)， 1.5-2.1 (m, 6H)， 3.5-4.1 (m， 2H), 4.78 (brs, 2H), 5.43 (brs, 1H), 7.49 (brs, 1H)， 8.20 (t, J = 8.6Hz, 1H)

FABMS (m/e) 344 (M+H )+ 分子式 C,₇H₂ N0₄ = 343

上記で得られた 2， 6-ジフルォロ- 3- ビバロイルァミノ- 5- (2-テトラヒドロビラニルォキシ）フヱニルメタノ一ル（74.9 g, 218 mmol) をジクロロメタン（700 mL) に溶解し、 3， 4-ジヒドロ- 2H-ピラン（40.0 mL, 436 mmol)およびカンファースルホン酸（1.00 g, 4.36 mmol)を加え、室温で 30分間撹拌した。反応液を 0.5 規定水酸化ナトリウ水溶液（500 mいに注ぎ、クロ口ホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去することにより、 2- [2,6- ジフルォロ- 5- ビバロイルァミノ- 3-(2-テトラヒドロビラ二ルォキシ）フヱニルメトキシ] テトラヒドロピラン（92.1 , 収率 99¾)を得た。 Ή NMR (90 MHz, CDC ) δ (ppm) 1.31 (s, 9H), 1.4-2.0 (m, 12H), 3.4-4.1 Cm, 4H), 4.4-5.0 (m, 3H), 5.43 (brs, 1H)， 7.46 (brs, 1H), 8.24 (t, J 二 8.4 Hz, 1H)

FABMS (m/e) 428 (M+H )' 分子式 C₂₂H_{3 l}F₂N0_r, = 427

窒素気流下、上記で得られた 2- [2， 6- ジフルォロ- 5- ビバロイルァミノ- 3- (2- テトラヒドロビラニルォキシ）フエニルメトキシ] テトラヒドロビラン（92.1 g, 216 mmol) をテトラヒドロフラン（800 mL) に溶解し、内温- 60 °C以下まで冷却した。 n-ブチルリチウム（1.6 M へキサン溶液 340 mL, 545 隱 ol)を内温- 60 °C で滴下し、 -30 °Cまで昇温した。同温度で 5分間撹拌後、再度 -60 °C以下まで冷却した。クロロギ酸ェチル（42.0 mL, 440 mmol)を内温- 60 °C以下で滴下し、 10 分間撹拌した。反応液に水を加え、室温まで昇温し、酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（へキサン：齚酸ェチル = 5:1 〜3:1 ) で精製することにより、ェチル 3， 5- ジフルォロ- 2- ビバロイルァミノ - 6-(2-テトラヒドロビラ二ルォキシ）- 4-[(2-テトラヒドロビラニルォキシ）メチル] ベンゾエー卜（86.7 g, 収率 80¾)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) <5 (ppm) 1.29 (s, 9H)， 1.38 (t, J = 7.0 Hz, 3H)， 1.4-2.1 (m, 12H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.35 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.5-4.9 (m, 3H), 5.32 (brs, 1H)， 7.57 (brs, 1H)

FABMS (m/e) 500 (M+H )' 分子式 C₂₅H₃₅F₂N0₇ = 499

アルゴン雰囲気下、水素化ナトリウム（60¾S 油状物 7.88 g, 197 画 ol)をへキサンで 3回洗浄した後、 1,4-ジォキサン（60 mいおよびトルエン（60 mいの混合溶媒に懸濁し、加熱還流した。ここに上記で得.られたェチル 3,5- ジフルオロ- 2 - ビバロイルァミノ- 6- (2-テトラヒドロビラニルォキシ） -4- [(2-テトラヒドロピラニルォキシ）メチル] ベンゾェ一卜（30.9 g, 61.9 mmol)および後述の参考例

4で得られる 3'- フルォロ- 4' -ビバロイルァミノァセトフヱノン（13.3 g, 56.3 mmol) を 1,4-ジォキサン（150 mL) およびトルエン（150 mL) の混合溶媒に溶解した溶液を 10分間で滴下し、さらに 4時間加熱還流後、氷浴で冷却した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで 3回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去することにより、 1- 13,5-ジフルォロ- 2 - ビバロイルァミノ- 6- (2-テトラヒドロビラニルォキシ） -4-[(2-テトラヒドロピラニルォキシ）メチル] フエニル 1 -3-(3-フルォロ- 4- ビバロイルァミノフエ二ル） -1,3-プロパンジオンの粗精製物を得た。このものは、そのまま次の工程に供した。

上記粗精製物（41.0 g) をエタノール（240 mL) に溶解し、塩酸（60 mいを加え、室温で一晩撹拌した。反応液に水（500 mL) を加えた後、析出した結晶を濂取し、酢酸ェチル（200 mL) —ジイソプロピルエーテル（300 mL) でトリチユレ —シヨンすることにより、化合物（Ila)(13.8 g, 収率 495 を得た。母液を濃縮後、残渣をクロ口ホルム一メタノールから再結晶することにより、さらに化合物（11a) (3,66 g,収率 13X)を得た。母液を濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：ァセトニ卜リル = 9:1 ) で精製することにより、さらに化合物（Ila)(1.60 g, 収率 5.6 ) を得た。

Ή NMR (90 MHz, DMS0-d₆) δ (ppm) 1.27 (s， 9H), 1.29 (s， 9H), 4.6-4.7 (m, 2H)， 5.56 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.07 (s， 1H)， 7.7-8.0 (m, 3H), 9.20 (brs, 1H)， 10.0 (brs, 1H)

EIMS (m/e) 504 (M ' ) 分子式 C₂₆H"F₃N₂0₅ = 504

参考例 2

5-ァミノ- 2- (4-ァミノ- 3- フルオロフヱ二ル）- 6, 8-ジフルォロ- 7- ヒドロキシメチル - 4H- 1-ベンゾピラン- 4- オン [化合物（Ilia)]

参考例 1で得られた化合物（Ila)(903 mg, 1.79 議 ol)にエタノール（40 ）および濃塩酸（20 mいを加え、 6.5 時間加熱還流した。反応液を氷冷後、 10規定水酸化ナトリウム水溶液を加えて pHを 7 〜8 に調整し、析出した結晶を濾取した。この結晶をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：メタノール二 40:1〜9:1 ) で精製し、酢酸ェチルでトリチユレ一ションすることにより、化合物（IIIa)(364 mg，収率 605 を得た。

Ή NMR (270 MHz, DMSO- d_f;) δ (ppm) 4.5-4.6 (m, 2H)， 5.44 (t, J = 4.9 Hz, 1H)， 6.11 (brs, 2H), 6.69 (s， 1H)， 6.87 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.03 (brs, 2H), 7.5-7.7 (m, 2H)

EIMS (m/e) 336 (M ' ) 分子式 CJi N₂0_:, ： 336

参考例 3

2- (4- ァリルォキシカルボニルァミノ - 3- フルオロフヱニル） -5-ァミノ- 6,8- ジフルォ口- 7- ヒドロキシメチル -4H-卜べンゾピラン- 4- オン [化合物（IVa) ] 参考例 2で得られた化合物（II la)(6.72 mg, 20.0 mrool)をピリジン（200 mL) に溶解し、氷冷下、クロ口ギ酸ァリル（10.6 mL, 100 mmol)を滴下した。室温で 1.5 時間撹拌後、水を加え、析出した結晶を濂取した。このものをエタノール (500 mいに溶解し、 2規定水酸化ナトリウム水溶液（18 mいを加え、室温で 1.5 時間撹拌した。反応液に水を加え、析出した結晶を濂取することにより、化合物 (IVa)(6.92 g, 収率 82 )を得た。

Ή NMR (90 MHz, DMS0-d₆) δ (ppm) 4.5- 4.7(m， 4H)， 5.1-5.5 (m, 2H)， 5.7-6.2 (m, 1H)， 6.90 (s, 1H)， 7.01 (brs, 2H), 7.7-8.0 (m, 4H), 9.79 (brs, 1H) FABMS (m/e) 421 (M+H V 分子式 C₂₀H, N₂0₅ = 420

参考例 4

3' - フルォロ- 4 ' -ビバロイルアミノアセトフエノン

4 -ブロモ -2- フルォロア二リン（250 g, 1.32 mol)をピリジン（500 mL) に溶解し、氷冷下、ピバロイルクロリド（178 mL， 1.45 mol) を滴下し、 10分間撹拌した。反応液を氷水（1.5 いに注ぎ、析出した結晶を濾取した。 1規定塩酸および水で洗浄後、減圧乾燥することにより、 4-ブロモ -2- フルォ口- N- ビバロイルァニリン（350 g,収率 975 を得た。

アルゴン雰囲気下、上記で得られた 4-ブロモ _2- フルォ口- N- ビバロイルァニリン（70.6 g, 258 mmol) をトルエン（500 mL) に溶解し、卜エトキシビニルトリブチルスズ（108 mL, 310 mmol) および塩化ビス（トリフニルホスフィン）パラジウム（II) (1.80 g， 2.57 誦 ol)を加え、 100 °Cで 5時間撹拌した。反応液を氷冷し、 2規定塩酸（500 mL) を加え、室温で 2時間撹拌した後、不溶物を濾別した。濂液を酢酸ェチルで 1回抽出し、有機層に 10%フッ化アンモニゥム水溶液（500 mL) を加え、室温で 3時間撹拌した。不溶物を濾別し、有機層を水で 1 回、飽和食塩水で 1回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル = 6:1 〜4:1 ) で精製することにより、 3，- フルォロ- 4 ' -ビバロイルァミノァセトフエノン（60.8 g, 収率 99¾)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) <5 (ppm) 1.35 (s， 9H), 2.57 (s， 3H)， 7.6-7.9 (m， 3H)，

8.53 (t, J = 8.4 Hz, 1H)

BIMS (m/e) 237 (M ' ) 分子式

237

参考例 5

2- (3， 5- ジクロロ- 4- ビバロイルァミノフヱニル）- 6, 8-ジフルォロ- 7- ヒドロキシメチル -5- ビバロイルァミノ- 4H-卜べンゾピラン- 4- オン [化合物（lib) ]

3' - フルォロ- 4，-ビバロイルァミノァセトフヱノンの代わりに後述の参考例 6 で得られる 3，， 5' -ジクロロ- 4' -ビバロイルァミノァセトフヱノンを用い、参考例 1 と同様にして、化合物（lib) (3.34 g，通算収率 64 )を得た。

Ή NMR (90 MHz, D S0-d₆)5 (ppm) 1.29 (s， 18H), 4.68 (brs, 2H)， 7.22 (s, 1H)， 8.16 (s， 2H)， 9.51 (brs, 1H)， 9.88 (brs, 1H)

FABMS (m/e) 555 (M+H 分子式 C₂₆H ₂₆ ^{3 r}'Cl ₂F₂N₂0r, = 554

参考例 6

3',5' -ジクロロ- 4 '-ビバロイルアミノアセトフエノン

4-ブロモ -2- フルォロア二リンの代わりに 4-ブロモ -2, 6- ジクロロア二リンを用い、参考例 4と同様にして、 3，， 5， -ジクロロ- 4' -ビバロイルァミノァセトフエノン（8.93 g，通算収率 86!¾)を得た。

Ή NMR (90 MHz, CDC1₃) <5 (ppm) 1.38 (s， 9H)， 2.58 (s, 3H), 7.26 (brs, 1H)， 7.90 (s， 2H)

EIMS (m/e) 287 (M ⁺ ) 分子式 C, ₃H, r,³⁵Cl₂N0₂ = 287

産業上の利用可能性

本発明により、抗菌活性、抗エストロゲン活性および抗腫瘍活性を有する 5- ァミノフラボン誘導体を提供することができる。

Claims

請求の範囲

1. 式（ I )

(Γ)

[式中、 Xは、置換低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルコキシまたは NR'R^ (式中、 R' および R² は、同一または異なって、水素、置換もしくは非置換の低級アルキルを表すか、 R¹ と R² が一緒になつて、 Nをはさんで形成される置換もしくは非置換の複素環基を表す）を表し、 Y¹ および Y² は、同一または異なって、水素、ハロゲンまたは低級アルキルを表す] で表される 5-アミノフラボン誘導体またはその薬理上許容される塩。

2. Xが置換低級アルキルを表す請求の範囲 1記載の 5-ァミノフラボン誘導体またはその薬理上許容される塩。

3. Y¹ およびの少なくとも一方がハロゲンを表す請求の範囲 1または 2 記載の 5-ァミノフラボン誘導体またはその薬理上許容される塩。