UA74811C2 - Спосіб одержання екстракту з cyclamen europaeum l. та екстракт, одержаний в такий спосіб, для лікування синуситу - Google Patents

Abstract

Даний винахід належить до способу одержання ізольованого екстракту рослини Cyclamen europaeum L. за допомогою водної екстракції, та його застосування для виготовлення лікарського засобу для лікування синуситу.

Description

опірність патогенній мікрофлорі цих продуктів, ко- Сусіатеп еипгораєцт Ї. тра в свою чергу є досить небезпечною. Другим завданням даного винаходу є застосу-

На першому етапі гострого синуситу ці мето- вання ізольованого екстракту у відповідності до дики лікування передбачають внутрішнє застосу- винаходу з метою виготовлення медикаментів для вання найсучасніших антибіотиків, таких як ампі- лікування синуситу. цилін та амоксициклін. Якщо це виявиться Відповідно до першого завдання винаходу, був неефективним, призначають амоксициклін та кла- розроблений спосіб одержання ізольованого екст- вуланову кислоту або цефалоспоріни 2-го й 3-го ракту дикої рослини Сусіатеп еигораецит Г., який поколінь (ЕМеп ЕК. Умаїй, МО, СПпгопіс віпизйів іп відрізняється тим, що при цьому застосовується спіййгеп. дошгпаї! ої Реадіанісв, 1995, 127 (3) 339; водна екстракція. Вона включає:

Іпехрепзіме Апіїріоїсе аге аз ЕПесіїме аз Мемег, а) перший етап - вижимання попередньо очи-

Моге Ехрепзіме Опев іп Тгєайпуд Асше Васіегіаї! щених й оброблених бульб;

Зіпивійів. Рге55 НеїІєазе, Магсп 23, 1999. Адепсу г Б) другий етап - очищення рідкої фракції,

Неайй Саге Роїїсу апа Незеагсі, НоскКміМйе, МО.; отриманої після вижимання, що включає: апа Сієпп Ізаасзоп, МО, ЕААР, ЕАС5, 5іпивійів іп р-ї) додання етилового спирту до вищезгада-

Спіаоса), Ред. Сіїп. ої М Ат., 1996, 43(6) :13051. ної рідкої фракції;

Значення антибіотиків у лікуванні хронічного р-її) її подальше зберігання у холодильній ка- синуситу в порівнянні з гострим сінуситом менше, мері за температури між 2"7С і 257"С, переважно між оскільки головною задачею є відновлення норма- 4"С і 8"С протягом 10-48 годин, переважно 18-20 льного насичення повітрям пазух решітчастої кіст- ГОДИН, і; ки, до якої застосовують протизастійні засоби міс- р-ії) потім, фільтрування. цевої дії, котрі в поєднанні з антибіотикотерапією Бажано, щоб етап фільтрування б-ійї) проходив усувають набрякання слизової оболонки, покра- у дві стадії: спочатку, через фільтр первинного щують відтік та відновлюють функціонування євс- очищення і, потім, через дрібнопористий бактери- тахієвої труби і пазух решітчастої кістки носу. Од- цидний фільтр під тиском 0,25:20,005МПа. нак, застосування протизастійних засобів місцевої У переважній більшості випадків проводять дії протягом більш ніж 5 днів може викликати обу- додатковий етап, тому що тверда фракція залиш- мовлений медикаментами риніт. (еїдег, К.5., ку, одержана після першого вижимання, ще міс-

Ргозресів ог апсіМйагу (еайтепі ої віпивіів іп (Ше тить велику кількість біологічно активних речовин, 19905. 9. АПегду Сіїп. Іттипої., 1992, 90:478)|. У відновлення яких представляє собою підвищення випадку патологій у хронічній формі застосовують результату способу, на основі якого може бути хірургічне втручання, тобто очищення носових одержаний ізольований екстракт винаходу. пазух безпосередньо за допомогою проколювання. Вищезгаданий додатковий етап включає:

Беручи до уваги все зазначене вище можна а-ї) підготовку твердої фракції, що залишилася стверджувати, що лікування як гострого, так і хро- після вижимання, а саме - додання води у співвід- нічного синуситу - це довгий і складний процес, ношенні 1:0,5-1,8, переважно 1:0,64-0,66. Перша який в залежності від ступеня тяжкості може за- цифра - вага бульби в грамах до вижимання, а йняти кілька років. Крім того, проаналізовані пер- цифри 0,5-1,8 та 0,64-0,66 - об'єм води, доданої до шоджерела не змогли підтвердити загальну ефек- твердої фракції, одержаної після першого вижи- тивність лікування, що застосовувалося у мання; звичайній практиці. а-і) витримування температури приготованої

Вирішення проблем, пов'язаних з синуситом, суміші між 2070 і 80"С, переважно між 607С і 707С, можливе за умов пошуку й вивчення нових мето- протягом однієї години й здійснення другого вижи- дик лікування. мання; і

На сучасному рівні техніки має місце викорис- а-ії) потім, змішування у змішувальному реак- тання альтернативного лікування, що включає торі рідкої фракції, одержаної після другого вижи- залучення біологічно активних речовин природно- мання (екстракт залишків), з рідкою частиною, го походження. Однак, бібліографічних даних що- одержаною після першого вижимання (сік). до переважної більшості речовин природного по- З цього моменту починається етап Б) - очи- ходження на рівні техніки не існує. щення рідкої фракції, який описаний вище (див.

Дика рослина Сусіатеп епйгораецт Г., що у Фігуру 1). даному винаході називається цикламеном, відно- Також був розроблений спосіб одержання ізо- ситься до родини примулових, і хоча вона є попу- льованого екстракту дикої рослини Сусіатеп лярною в багатьох країнах світу, її використання ешораєишт Г.., який відрізняється тим, що застосо- зводиться лише до декоративних цілей. Про її лі- вується спиртова екстракція. Вона включає: кувальні властивості відомо дуже мало, хоча зга- а) перший етап - розтирання в порошок попе- дується про використання соку або порошку, оде- редньо очищених і оброблених бульб; ржаного з рослини, для лікування головного болю. Б) другий етап - виділення біологічно активних

Таким чином, в сучасному рівні розвитку техні- речовин, що включає: ки альтернативного антибіотикам засобу для ліку- р-ї) додання спирту, бажано етанолу, до по- вання синуситу не існує. рошку, одержаного з бульб, у співвідношенні між

Даний винахід усуває недоліки, про які зазна- 171 ї 1:5, переважно 1:3, бульб та розчинника від- чалося вище, й крім цього надає ряд переваг, що повідно; будуть висвітлені нижче. р-ї) доведення до кипіння у спирті приготова-

Першим завданням даного винаходу є спосіб ної суміші та зберігання її там протягом години одержання ізольованого екстракту дикої рослини перед тим, як буде здійснена спиртова екстракція;

с) третій етап - очищення спиртової витяжки, демонструють практичну сторону втілення вина- що включає: ходу. с-ї) додання сорбенту з метою видалення бар- Фігура 1 показує графік послідовності техноло- вників із спиртової витяжки у співвідношенні між гічних операцій винаходу способу одержання ізо- 30:0,5 і 30:22, переважно 30:11, сировини та сорбен- льованого екстракту за допомогою водної екстрак- ту відповідно; ції. с-ії) очищення з охолодженням на зворотному Фігура 2 показує графік послідовності техноло- холодильнику; і гічних операцій винаходу способу одержання ізо- с-ії) потім, фільтрування. льованого екстракту за допомогою спиртової екст-

У переважній більшості випадків за тих самих ракції. умов проводять другу екстракцію б-ії), що дозво- Далі слідує більш детальний опис способу ляє одержати близько 20905 загальної кількості са- одержання ізольованого екстракту за допомогою понінів. В даному випадку спиртові витяжки першої водної та спиртової екстракцій. і другої екстракцій змішують до проведення етапу Далі слідує опис переважного варіанту втілен- очищення (див. Фігуру 2). ня способу одержання ізольованого екстракту ди-

Сорбентом, який використовують для очищен- кої рослини Сусіатеп епгораеит ГГ. за допомогою ня спиртової витяжки, може бути активоване ву- водної екстракції. гілля, гель кремнієвої кислоти, глина та оксид У першому втіленні винаходу бульбу цикламе- алюмінію ІІ. Найкращі результати були одержані ну очищують за допомогою проточної води доти, при застосуванні оксиду алюмінію ІІ. доки земля, пісок й інші забруднення повністю не

Вихідний вимір кількості виділених з рослини зникнуть з її поверхні. Після цього її чистять щіт- біологічно активних речовин складений на основі кою задля видалення мікрочастинок землі, піску і гемолітичного індексу. Бульби виду цикламен міс- т.п. Потім бульби миють дистильованою водою і тять цикламен-сапонін, який гідролізується утво- залишають висихати на свіжому повітрі. Згодом рюючи цикламіретин сапогеніну та вуглеводи сухі бульби кладуть у ванну, повністю покривають (глюкози й арабінози). Крім сапоніну, були виявле- 9595 етанолом і залишають на 1 годину. ні сахароза (глюкоза, фруктоза й інші полісахари- Очищені бульби вміщують під прес, де з них ди), смолисті речовини, барвники та фенольні су- механічно видавлюється сік. Процентне співвід- міші. Вміст води у бульбах перевищує 70905. ношення одержаного соку або рідкої фракції коли-

Гемолітичний індекс показує кількість одержа- вається в межах 55-6595 відносно твердої фракції ного сапоніну. Якщо вона нижче гемолітичного після вижимання. індексу, який складає 300 одиниць, комерційної Завдяки високій гемолітичній активності одер- переваги у повторенні процесу вижимання або жаних залишків, виділення сапоніну відбувається одержання другої витяжки немає, адже протягом за допомогою знесоленої води. Необхідне співвід- двох етапів вижимання або екстракції з рослини ношення твердої фракції й рідини, потрібної за було одержано близько 96-9895 біологічно актив- результатами досліджень для екстракції, стано- них речовин. вить 1:0,64-0,66 відповідно.

Після першого вижимання або екстракції пер- Дане співвідношення було знайдене з метою шої витяжки значення гемолітичного індексу рідкої забезпечення найвищої гемолітичної активності фракції знаходиться між 8000 і 12000 одиниць, а зразків. Оптимальні температури для екстракції після другого вижимання або екстракції другої ви- знаходяться в межах 60-70"С, а час екстракції тяжки - між 300 і 500 одиниць. Таким чином, дода- становить 60 хвилин. Дотримання вищезазначених ткові етапи вижимання або екстракції третьої ви- температур і часу веде до максимізації обміну са- тяжки є недоцільними з економічної точки зору, поніну у водній витяжці. Ті самі параметри є опти- адже значення гемолітичного індексу одержаної мальними й з технологічної точки зору, адже як рідкої фракції буде нижче норми. тільки температура досягає 80"С, екстракт стає

Отже, значення гемолітичного індексу одер- в'язким і непідходящим для фільтрування із-за жаного ізольованого екстракту знаходиться між часткового гідролізу полісахаридів, тоді як подов- 6000 і 12000, а рівень кислотності - між5,0 і 6,8. ження часу веде до збільшення виходу сапоніну.

Другим завданням даного винаходу є викорис- Було виявлене, що друга екстракція залишків тання одержаного ізольованого екстракту відпо- за допомогою води забезпечує одержання гемолі- відно до одного з описаних способів з метою виго- тичного індексу на рівні 300-500 одиниць, що озна- товлення медикаментів для лікування синуситу. чає необхідність лише одної екстракції.

Для реалізації зазначеного завдання винахід Як тільки була проведена екстракція, частину пропонує ізольований екстракт дикої рослини залишків вміщають під прес і піддають вижиман-

Сусіатеп епгораеит Г., який містить велику кон- ню. Сік та екстракт залишків змішують в реакторі, центрацію сапоніну, а також сахарозу (глюкозу, проводячи звідти загальну екстракцію. фруктозу й інші полісахариди), смолисті речовини, Одержані водні витяжки (сік бульбнвитяжка з барвники, фенольні суміші та інші поки не виявле- залишків) так само як і кінцеві продукти містять ні допоміжні речовини, котрі безперечно мають досить багато домішок й тому потребують додат- такі терапевтичні властивості, що цілком придатні кового очищення. для виготовлення медикаменту для лікування си- Більшість домішок можна усунути додаванням нуситу. до витяжок 15 відсотків 9695 етилового спирту й

Задля кращого розуміння того, про що йшлося їхнім подальшим зберіганням у холодильній камері вище, необхідно додати дві фігури, які схематично протягом 18-20 годин. Як тільки цей час закінчить- й виключно шляхом не обмежувального прикладу ся, витяжки фільтрують через фільтр первинного очищення, а потім - через дрібнопористий бакте- гістологічної інформації, оптимальний період для рицидний фільтр. Цю останню стерилізовану фі- другого інтраназального введення становить 48 льтрацію кінцевих витяжок проводять під тиском годин. 0,25250,005МПа. Концентрації препарату зберігають свою ефе-

За допомогою фільтрування розчин стає про- ктивність у розчинах зі співвідношенням між 1:100 і зорим і залишається незмінним протягом двох 1:500. місяців при зберіганні його в холодильній камері за Умови застосування препарату, так само як і температури 4-8"С. Даний розчин є базовою речо- характеристики реакцій його введень, практично виною для виготовлення медикаменту для ліку- виключають будь-які можливості поглинання його вання синуситу. з поверхні слизової оболонки та здійснення неба-

У другому втіленні винаходу розкривається жаного системного впливу. спосіб одержання ізольованого екстракту дикої Токсикологічне дослідження рослини Сусіатеп епгореашт ГГ. за допомогою Системні токсичні властивості ізольованого спиртової екстракції. екстракту та медикаменту, що його містить, були

Очищені й попередньо оброблені бульби рі- досліджені на мишах-альбіносах та пацюках за жуть на маленькі шматочки, вміщають у ванну й допомогою внутрішньочеревного, внутрішньовен- покривають 9695 етиловим спиртом у співвідно- ного та перорального застосування. Діючи так не- шенні 1:3 твердої маси (сировини) та розчинника можливо помістити достатньо великі дози інтрана- відповідно. Суміш підігрівають доти, доки розчин зально, тому спосіб є рекомендованим для не закипить і залишають на 60 хвилин. Другу екст- клінічного дослідження. ракцію проводять за тих самих умов, що дозволяє Токсичні прояви в усіх способах застосування одержати близько 2095 загальної кількості сапоні- були в основному притаманні сапоніну: типове нів. пригнічення діяльності центральної нервової сис-

Спиртові витяжки, одержані з першої і другої теми й уповільнена (до 3-х днів) смертність у ви- екстракції змішують й очищують охолоджування із падку внутрішньочеревного та перорального за- зворотним холодильником з метою видалення стосування; внутрішньосудинний гемоліз та барвників. миттєва смертність у випадку внутрішньовенного

Очищення проводять за допомогою оксиду застосування; локалізована подразнююча дія на алюмінію ІЇ при температурі 40-502С. Його повто- слизову оболонку. рюють три рази протягом 15-20 хвилин кожний. Летальні однократні дози перорального вве-

Оптимальне співвідношення маси сировини та дення, застосовані у досліді з мишами, станов- маси сорбенту становить 30:1 відповідно. лять:

Очищена витяжка є базовою речовиною для (а) Спиртова витяжка: 050 - 1337,7523мг/кг; виготовлення медикаменту для лікування синуси- ГО084 - 1894мг/кг, 016 - 781мг/кг; ту. Дана витяжка залишається незмінною протягом (б) Водна витяжка: 050 - 1466,5537мГг/кг; двох місяців при зберіганні її в холодильній камері 084 - 2107мг/кг, 016 - 826мг/кг; за температури 4-86. (с) Медикамент: ІГ050 - 2386 ,84ж285мг/кг; І 084 -

Вивчення фармакологічних властивостей ізо- 3852мг/кг, ГО16 - 920мг/кг; льованого екстракту винаходу показало, що засто- Відповідно до загальної токсикологічної кла- сування його слабких концентратів спричиняє зво- сифікації 050 індексів, ізольований екстракт і ротну секрецію з носової порожнини. Тобто, за медикамент, що його містить, належать до елеме- допомогою вищезазначеного екстракту цілком нтів помірної або незначної токсичності з локалізо- можливо одержати розчини з різною концентраці- ваною подразнюючою дією середнього ступеню. єю, іншими словами, розробити дозування. Однократна нетоксична неефективна доза

Дослідження зворотної реакції, проведене при медикаменту, застосована у досліді з мишами, застосуванні 2-3 крапель медикаменту, приготова- становить 10 мг/кг, тобто 1/250 1050, вона пере- ного з ізольованого екстракту винаходу, в носову вищує максимальну однократну терапевтичну дозу порожнину кроликів і собак, не виявило ні інкуба- (0,0Змг/кг), рекомендовану для клінічних дослі- ційного періоду реакції, ні будь-яких змін тривало- джень, приблизно в 350 разів. сті секреції й не залежало від того, застосовують Субтоксична токсичність нетоксичної дози ме- препарат щоденно (кожні 24 години) чи через дикаменту була досліджена на мишах у експери- день. менті, що стосувався терапевтичного інтраназаль-

Інформація, отримана з гістологічних дослі- ного введення, який тривав протягом двох тижнів. джень, показала, що застосування препарату не Цей експеримент виявив випадки небажаного про- спричиняє такої побічної дії як подразнення, нато- никнення препарату з носової порожнини у шлу- мість зменшує запалення слизової оболонки. нок.

Друге введення рекомендованих доз препара- Друге пероральне введення медикаменту про- ту ізольованого екстракту винаходу в носову по- тягом 14 днів у дозі 1О0мг/кг виявилося нешкідли- рожнину не викликало негативних змін у звичай- вим для мишей. ному стані та поведінці тварин. Безпечність ізольованого екстракту та меди-

Терапевтична дія препарату, складовою час- каменту, введеного п'ять разів, була виявлена за тиною якого є ізольований екстракт винаходу, що допомогою результатів вивчення специфічної фа- базується на стимулюванні інтенсивності секреції рмакологічної активності цих препаратів у випадку епітелію слизової оболонки в цілому, разом з си- застосування максимальних "терапевтичних" кон- роваткою й підслизовими залозами сприяє інтен- центрацій. сивному дренуванню носових пазух. Відповідно до Локалізована подразнююча дія медикаменту проявляється в найвищій мірі у з'єднувальній тка- ливо якщо взяти до уваги те, що неможливо пог- нині, але її не було виявлено в слизовій оболонці линути або проковтнути препарат з носової поро- шлунку, слизова ж оболонка носової порожнини за жЖнини. ступенем подразливості знаходиться між вищезга- Не дивлячись на той факт, що специфічне вті- даними двома. лення цього винаходу було описане й охарактери-

Клінічні випробовування медикаменту в роз- зоване, цілюом очевидно, що фахівці у даній обла- чинах зі співвідношенням від 1:100 до 1:500, що сті зможуть запропонувати варіанти й модифікації, приблизно рівноцінно 1/350-1/500 "нетоксичної" або замінити одні складові іншими - технічно рів- пероральної дози, застосованої у досліді з миша- ноцінними, без відходу від суті винаходу, визначе- ми, можуть вважатися повністю безпечними, особ- ної у формулі винаходу, що додається. . Дистильована к Сировина Прес Заляшки тн чіл вода печіння : І

ШІ о Екстракт

Сік залитків

Спільний змішувач стннннтнннннтенняя ОБУ стано витяжок !

Й і Фільтр Дрібнопористий і Хололильца первийного бактерицидні камера ачзиштецня - фільтр фіг. 1

Сировина:

Г Порошковий. порта Розхиранця у Друта подрібнювач екстракція порошок. 1 екстракція

Перша Друга т | летекка витяжка

Сорбент | сс ГГ щі

Ї Фільтр | Очедшення з оходод- Спільний аг і женням із застосував. змішувач первинного ням зворотного спиртових очищення 1 холозильника Й й вин на ну витяжок

Фіг. 2

Комп'ютерна верстка О.Воробєй Підписне Тираж 26 прим.

Міністерство освіти і науки України

Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна

ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601