UA30460U - Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові - Google Patents
Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові Download PDFInfo
- Publication number
- UA30460U UA30460U UAU200712546U UAU200712546U UA30460U UA 30460 U UA30460 U UA 30460U UA U200712546 U UAU200712546 U UA U200712546U UA U200712546 U UAU200712546 U UA U200712546U UA 30460 U UA30460 U UA 30460U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- neutrophils
- functional state
- smears
- blood
- fixation
- Prior art date
Links
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims abstract description 13
- DWCZIOOZPIDHAB-UHFFFAOYSA-L methyl green Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C(C=1C=CC(=CC=1)[N+](C)(C)C)=C1C=CC(=[N+](C)C)C=C1 DWCZIOOZPIDHAB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims abstract description 6
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 7
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 10
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 abstract 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 201000010000 Agranulocytosis Diseases 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 206010024328 Leukaemoid reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229960004905 gramicidin Drugs 0.000 description 1
- ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N gramicidina Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові включає забір крові, підготовку мазка, його фіксацію, забарвлювання, мікроскопічне дослідження нейтрофілів. Мазки фіксують у парах формаліну, забарвлюють метиловим зеленим, повторно фіксують у парах формаліну, забарвлюють еозином і за кількістю забарвлених гранул визначають функціональний стан нейтрофілів.
Description
Опис винаходу
Спосіб відноситься до гематології і стосується клінічних лабораторних методів дослідження. 2 Відомий спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові, який прийнятий за аналог |Истаманова
Т.С., Алмазов В.А. Лейкопении и агранулоцитозь!ї. -Л.: Медгиз, 1961. -С.235-237), що включає: забір крові та поміщення її краплини на предметне скло, накривання покривним склом, краї останнього обкантовують розплавленим парафіном, препарат поміщають у термонагрівальний столик, закріплений на мікроскопі, який автоматично підтримує температуру 372С, дослідження нейтрофілів проводять за допомогою фазово-контрастного пристрою, з'єднаного зі звичайним мікроскопом, реєстрацію руху нейтрофілів здійснюють за допомогою рисувального апарату.
Спільними із рішенням, що заявляється, ознаками, є: забір крові, поміщення її краплини на предметне скло, накривання покривним склом, мікроскопічне дослідження нейтрофілів.
Цей спосіб потребує особливої апаратури, що ускладнює його широке використання й не дозволяє т отримувати порівняльні результати, тому що не забезпечує високу точність результатів дослідження.
Відомий спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів, який полягає в дослідженні фагоцитозу ІКост
Е.А. Стенко М.М. Советский грамицидин и его применение в клинической практике. Лабораторнье исследования и оценка их результатов //Научнье трудьі! Клинической больницьі имени С.П. Боткина. -М.: 1947. -6б.253-256)Ї, прийнятий за прототип. Як об'єкт фагоцитозу використовують живих і вбитих мікробів. Спосіб включає: забір крові, набирання у пробірку Відаля одним і тим самим капіляром від апарату Панченкова: 1 капіляр 495 розчину цитрату натрію, 2 капіляра крові, 1 капіляр одноденної живої культури з 1-2 х109 мікробних тіл у їмл, або вбитих мікробів з концентрацією 4х109 тіл у їмл, ретельно перемішують і витримують у термостаті при 372С протягом 1год., потім вміст пробірок знову ретельно перемішують, роблять на предметних ов стеклах дуже тонкі мазки, висушують їх на повітрі, фіксують протягом ЗОхв. рідиною Нікіфорова, що складається з рівних кількостей етилового спирту та сірчаного ефіру, фіксовані мазки заливають на 25-40хв. розведеною - фарбою Романовського, яку готують таким чином: З3,8г сухої фарби Романовського розчиняють у 250мл чистого метилового спирту. Розчин залишають на 3-5 діб, часто збовтуючи для кращого розчинення фарби, потім додають 250мл чистого гліцерину та знову залишають на 3-5 діб, періодично збовтуючи, перед споживанням о зо барвник титрують, тобто декілька фіксованих мазків крові фарбують протягом ЗОхв. (1-2 краплі фарби на Тмл дистильованої води), за добре забарвленим препаратом встановлюють потрібну кількість крапель фарби на мл ре) води та час забарвлення, визначають у 100 нейтрофілах у світловому мікроскопі процент фагоцитуючих клітин « (показник фагоцитарної активності) й середню кількість мікробів у кожному з фагоцитованих нейтрофілів (фагоцитарний індекс). (ав)
Цей спосіб складний, потребує наявності мікробних культур. Джерелом помилок є: забруднення культури, у с зв'язку з чим перед кожним дослідженням потрібно перевіряти культуру бактеріоскопічним методом; споживання нестерильних реактивів.
Спільними з прототипом ознаками є: забір крові, приготування мазка, його фіксація, забарвлення та мікроскопічне дослідження. «
В основу корисної моделі поставлено завдання розробити спосіб визначення функціонального стану з с нейтрофілів крові, який шляхом подвійної фіксації і забарвлення мазків крові метиловим зеленим та еозином дозволяє чітко виявити в клітинах специфічні гранули та підрахувати їх кількість і за їх величиною зробити з висновок про функціональний стан нейтрофілів.
Суттєвими ознаками способу є: - забір крові; со - приготування мазка; - його фіксація в парах формаліну; о - забарвлення метиловим зеленим; їх - повторна фіксація в парах формаліну; - забарвлення еозином; (22) - мікроскопування; з - підрахунок середньої кількості забарвлених гранул у нейтрофілах; - визначення функціонального стану нейтрофілів.
Відмінними від прототипу ознаками є: подвійна фіксація мазків, використання як фіксатора парів формаліну, забарвлення мазків метиловим зеленим та еозином, визначення функціонального стану нейтрофілів за кількістю забарвлених гранул. с Спосіб здійснюють таким чином:
Проводять забір крові; готують мазки; фіксують мазки в парах формаліну протягом 5--1хв., для чого у чашку
Петрі наливають 20-5бмл формаліну, на дно чашки кладуть дві скляні палички, на палички мазками донизу бо поміщають два предметні скла й закривають чашку; мазки забарвлюють протягом 1--0,5хв. 196 водним розчином метилового зеленого; виконують повторну фіксацію мазків протягом 30--5хв. парами формаліну, промивання мазків дистильованою водою протягом 1--0,5хв, їх забарвлення 195 водним розчином еозину протягом 30 5х8в., промивання мазків дистильованою водою, висушування на повітрі, дослідження мазків з імерсією у світловому мікроскопі, на забарвлених препаратах у цитоплазмі нейтрофілів виявляються фіолетові гранули, на 100 65 нейтрофілах визначають середню кількість забарвлених гранул, із розрахунку на одну клітину і за цією величиною роблять висновок про функціональний стан нейтрофілів.
У нормі середня кількість забарвлених гранул у нейтрофілі складає 130 -4,1. При хронічному мієлоїдному лейкозі вона буде значно нижча - 82--3,6 (р«0,001). При лейкемоїдних реакціях кількість гранул у нейтрофілах суттєво не відрізняється від норми (138-5,4; р»0,05).
Приклад 1
У здорової (контрольної) особи проводили забір крові із кінчика пальця. Краплю крові наносили на предметне скло та готували мазок, який фіксували протягом 5 хвилин у парах формаліну, забарвлювали впродовж їхв. 196 водним розчином метилового зеленого, повторно фіксували мазок у парах формаліну протягом ЗОхв., промивали дистильованою водою протягом їхв., забарвлювали 195 водним розчином еозину 70 протягом ЗОхв., промивали дистильованою водою протягом 5бхв., підсушували на повітрі, досліджували в світловому мікроскопі з імерсійною системою. Кількість гранул у нейтрофілах здорової людини складає 130-4.1.
Приклад 2
В особи, хворої на хронічний мієлоїдний лейкоз, мазки крові обробляли, як вказано у випадку зі здоровою особою. Кількість забарвлених гранул у нейтрофілах була менша, ніж у здорової особи та складала 823,6 15. (р«0,001), що вказує на недостатність специфічної функції клітин.
Приклад З
В осіб з лейкемоїдною реакцією мазки крові обробляли, як вказано у випадку зі здоровою особою. Кількість забарвлених гранул у нейтрофілах суттєво не відрізнялась від контролю 128 -3,4; (р»0,05), що може бути показником нормального функціонального стану клітин.
Таким чином, запропонований спосіб дозволяє чітко виявляти гранули в нейтрофілах і за їх кількістю робити висновок про функціональний стан клітин. Спосіб може застосовуватися в діагностиці гематологічних захворювань, наприклад, у диференціальному діагнозі лейкозів і лейкемоїдних реакцій.
Claims (1)
- Формула винаходу З Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові, що включає забір крові, підготовку мазка, його фіксацію, забарвлювання, мікроскопічне дослідження нейтрофілів, який відрізняється тим, що мазки фіксують у парах формаліну, забарвлюють метиловим зеленим, повторно фіксують у парах формаліну, забарвлюють (2 еозином і за кількістю забарвлених гранул визначають функціональний стан нейтрофілів. «с Офіційний бюлетень "Промислова власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних чи мікросхем", 2008, М 4, 25.10.2008. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і о науки України. Зо «о- . и? о о (22) с2 60 б5
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200712546U UA30460U (uk) | 2007-11-12 | 2007-11-12 | Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200712546U UA30460U (uk) | 2007-11-12 | 2007-11-12 | Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA30460U true UA30460U (uk) | 2008-02-25 |
Family
ID=39818047
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200712546U UA30460U (uk) | 2007-11-12 | 2007-11-12 | Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA30460U (uk) |
-
2007
- 2007-11-12 UA UAU200712546U patent/UA30460U/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107219111A (zh) | 一种远缘杂交甜菜的染色体制片方法 | |
| Paray et al. | Gram staining: a brief review | |
| CN111004838A (zh) | 骨髓涂片荧光原位杂交技术在多发性骨髓瘤中的应用 | |
| CN102590488B (zh) | 调控斑马鱼卵黄蛋白原水平的方法 | |
| CN109946278A (zh) | 荧光染料dapi对细胞dna进行染色定量的癌症筛查和诊断方法 | |
| CN109892320A (zh) | 一种细胞保存液及其制备方法和应用 | |
| Soares et al. | Light microscopy in aquatic ecology: methods for plankton communities studies | |
| CN105994252B (zh) | 一种液基薄层细胞保存液及其制备方法 | |
| UA30460U (uk) | Спосіб визначення функціонального стану нейтрофілів крові | |
| CN103308361A (zh) | 一种染色体制片方法 | |
| CN105861626A (zh) | 一种基于水凝胶微阵列芯片的抗菌药物筛选方法 | |
| US20070134130A1 (en) | Biological specimen collection and transfer device and method of use | |
| Shukla et al. | Forensic Applications of Compound Microscope | |
| CA2230889A1 (en) | Stain and capillary slide to detect animal and plant cells | |
| UA33801C2 (uk) | Спосіб визначення функціональної активності нейтрофілів крові | |
| RU2562588C2 (ru) | Набор для тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце | |
| CN111380736A (zh) | 一种荧光染色液配置方法及荧光染色液 | |
| RU2143685C1 (ru) | Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов | |
| CA2860590A1 (en) | Fixative composition for cytology, cell fixation method and its applications | |
| CN103710435B (zh) | 骨髓染色体提取试剂盒 | |
| CN102660644B (zh) | 调控斑马鱼卵黄蛋白原mRNA水平的方法 | |
| RU2425370C2 (ru) | Композиции для окраски мазков крови, костного мозга, пунктатов и отпечатков различных органов | |
| Maclean | Automation in staining of cytologic specimens | |
| CN113933130A (zh) | 一种人芽囊原虫染色标本的制备方法及其应用 | |
| UA66574A (en) | Method for determining content of acidic and base proteins in leucocytes of biological material |