RU2143685C1 - Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов - Google Patents
Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2143685C1 RU2143685C1 RU98109504A RU98109504A RU2143685C1 RU 2143685 C1 RU2143685 C1 RU 2143685C1 RU 98109504 A RU98109504 A RU 98109504A RU 98109504 A RU98109504 A RU 98109504A RU 2143685 C1 RU2143685 C1 RU 2143685C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- leukocytes
- monocytes
- granulocytes
- lymphocytes
- stained
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности, к патофизиологии и терапии. Способ основан на заборе из пальца и окрашивании образца крови раствором метиленовой сини. Затем нагревают пробирку с исследуемым образцом на водяной бане при 98oС в течение 10 мин. Вводят каплю окрашенного содержимого в камеру Горяева и подсчитывают лейкоциты в 100 больших квадратах. Абсолютное количество лейкоцитов переводят в проценты и рассчитывают лейкоцитарную формулу по трем видам указанных клеток. Способ пригоден в научных исследованиях и для проведения учебных практических занятий со студентами, позволяет упростить технологию, в 2-4 раза сократить расход времени.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к патофизиологии и терапии.
Известен способ дифференциального подсчета различных видов лейкоцитов (лейкоцитарной формулы), включающий забор крови, приготовление из нее мазка на предметном стекле, высушивание мазка на воздухе в течение 3-5 минут, фиксацию в метаноле или этаноле в течение 5 минут, высушивание на воздухе 10-20 минут, окраску азур-эозиновыми красителями (по способу Романовского или какому-нибудь другому) в течение 2-3 минут (быстрая окраска) или в течение 20-45 минут (обычная по длительности окраска), смыв краски и высушивание окрашенного мазка (10 минут и более); общий расход времени 30-52 минуты (см. "Справочник по клиническим лабораторным методам исследования" под редакцией проф. Е. А.Кост, издание 2-ое, М.: Медицина, 1975; стр.38-43). Недостатками данного способа являются необходимость приготовления мазков на предметных стеклах и последующей их окраски, двукратный смыв, высушивание, дополнительный отдельный подсчет общего числа лейкоцитов в счетной камере (Горяева или др.).
Технической задачей изобретения является упрощение способа дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов за счет сокращения стадий процесса и времени исследования.
Решение указанной задачи достигается следующим путем: забирают из пальца в пипетку 0,02 мл крови, вводят ее в пробирку, содержащую 0,38 мл 3%-ной уксусной кислоты, промывают пипетку той же уксусной кислотой, встряхивают содержимое пробирки в течение 2 минут (для лизиса эритроцитов), добавляют 1-2 капли 1%-ного водного раствора метиленовой сини, нагревают пробирку в водяной бане при 98oC в течение 10 минут, вводят каплю окрашенного содержимого пробирки в камеру Горяева и подсчитывают лейкоциты в ее 100 больших квадратах. Дифференциацию гранулоцитов (суммарно нейтрофилов, эозинофилов, базофилов), моноцитов и лимфоцитов проводят по признакам, описанным в литературе (см. Козловская Л.В., Мартынова М.А. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования (с элементами программирования), М.: Медицина, 1975; стр.59-71). Подсчет общего абсолютного количества отдельных видов лейкоцитов (грануло-, лимфо- и моноцитов) в 1 мкл крови (т.е. лейкоцитарный профиль) проводят по формуле: Количество изучаемого вида лейкоцитов в 100 больших квадратах камеры Горяева, деленное на количество малых квадратов, содержащихся в 100 больших квадратах, умноженное на коэффициент перевода 1 маленького квадрата и соответствующий ему объем в 1 мкм, и умноженный на разведение лейкоцитов в уксусной кислоте - 20 (0,02+0,38=0,4; 0,4:0,02= 20). Складывают найденные абсолютные количества всех видов лейкоцитов и получают общее число лейкоцитов в 1 мкл. Абсолютные количества отдельных лейкоцитов (т. н. редуцированный лейкоцитарный профиль) переводят в проценты и получают лейкоцитарную формулу по трем видам клеток (гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов).
Пример. У пациента Б. (история болезни N 6102/326) стерильным одноразовым ланцетом произведен забор 0,02 мл крови из пальца. Кровь помещена в пробирку, содержащую 0,38 мл 3%-ной уксусной кислоты, добавлены 2 капли 1%-ного водного раствора метиленовой сини, пробирка нагрета в водяной бане при 98oC в течение 10 минут. Капля окрашенного содержимого пробирки внесена в камеру Горяева под покровное стекло. Произведен подсчет лейкоцитов в 100 больших квадратах по характерным для каждого вида лейкоцитов признакам по формуле:
2. 6 палочкоядерных гранулоцитов• 50 = 300 палочкоядерных гранулоцитов в 1 мкм
3. 31 лимфоцит •50 = 1550 лимфоцитов в 1 мкм
4. 9 моноцитов •50 = 450 моноцитов в 1 мкм
Сложив найденные абсолютные количества всех видов лейкоцитов, получают общее число лейкоцитов в 1 мкл.
2. 6 палочкоядерных гранулоцитов• 50 = 300 палочкоядерных гранулоцитов в 1 мкм
3. 31 лимфоцит •50 = 1550 лимфоцитов в 1 мкм
4. 9 моноцитов •50 = 450 моноцитов в 1 мкм
Сложив найденные абсолютные количества всех видов лейкоцитов, получают общее число лейкоцитов в 1 мкл.
Общее число лейкоцитов в 1 мкм крови: 4300+300+1550+450=6600 клеток/мкм.
Абсолютные количества отдельных лейкоцитов переведены в проценты, получена лейкоцитарная формула.
Общее количество затраченного времени - 14 минут.
Дифференциация клеток по предлагаемой методике легка и отличается высокой точностью, поэтому она пригодна не только для специальных научных исследований (например, для изучения генерации активных форм кислорода хемилюминесцентным методом), но и для проведения учебных практических занятий со студентами.
При применении предлагаемого способа дифференциального подсчета гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов упрощается технология, отпадает необходимость в изготовлении, высушивании, окрашивании и смыве мазков, в дополнительном подсчете общего количества лейкоцитов в счетной камере, что значимо сокращает расход времени в 2-4 раза.
Claims (1)
- Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов, включающий забор образца крови, окрашивание образца метиленовой синью в кислой среде и подсчитывание абсолютного количества лейкоцитов с использованием камеры Горяева, отличающийся тем, что окрашивание образца проводят при нагревании на водяной бане при температуре 98oС в течение 10 мин, и после подсчета абсолютного количества лейкоцитов рассчитывают лейкоцитарную формулу по трем указанным видам клеток.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU98109504A RU2143685C1 (ru) | 1998-05-19 | 1998-05-19 | Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU98109504A RU2143685C1 (ru) | 1998-05-19 | 1998-05-19 | Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2143685C1 true RU2143685C1 (ru) | 1999-12-27 |
Family
ID=20206199
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU98109504A RU2143685C1 (ru) | 1998-05-19 | 1998-05-19 | Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2143685C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2548741C2 (ru) * | 2009-03-05 | 2015-04-20 | Макрокьюэ, Лтд. | Активированная лейкоцитарная композиция |
US9132154B2 (en) | 2009-03-05 | 2015-09-15 | Macrocure Ltd. | Activated leukocyte composition and uses for wound healing |
US9168287B2 (en) | 2010-09-09 | 2015-10-27 | Macrocure, Ltd. | Activated leukocyte conditioned supernatant and uses for wound healing |
-
1998
- 1998-05-19 RU RU98109504A patent/RU2143685C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник под ред. Меньшикова В.В. - М.: Медицина, 1987, с.123-125. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования / Под ред. Кост Е.В. - М.: Медицина, 1975, с.38-43. Козловская Л.В. и др. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. - М.: Медицина, 1975, с.59-71. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям / Под ред. Кост Е.А. и др. - М.: Медицина, 1964, с.43-46. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2548741C2 (ru) * | 2009-03-05 | 2015-04-20 | Макрокьюэ, Лтд. | Активированная лейкоцитарная композиция |
US9132154B2 (en) | 2009-03-05 | 2015-09-15 | Macrocure Ltd. | Activated leukocyte composition and uses for wound healing |
US9168287B2 (en) | 2010-09-09 | 2015-10-27 | Macrocure, Ltd. | Activated leukocyte conditioned supernatant and uses for wound healing |
US9439950B2 (en) | 2010-09-09 | 2016-09-13 | Macrocure, Ltd. | Activated leukocyte conditioned supernatant and uses for wound healing |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9757729B2 (en) | Microfluidic device | |
Krishan | Rapid flow cytofluorometric analysis of mammalian cell cycle by propidium iodide staining. | |
Yunis et al. | G-banding and chromosome structure | |
CN108398361A (zh) | 利用红细胞dna损伤信号预测血液病转归的方法及其应用 | |
Bojmar et al. | Extracellular vesicle and particle isolation from human and murine cell lines, tissues, and bodily fluids | |
RU2143685C1 (ru) | Способ дифференциального подсчета гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов | |
Hancock et al. | The relationship between human megakaryocyte nuclear DNA content and gene expression | |
Young et al. | Suppressive effect of alcoholic liver disease sera on lymphocyte transformation | |
Jones | Papanicolaou staining of air‐dried smears: value in rapid diagnosis | |
RU2384844C2 (ru) | Способ обнаружения нейтрофильных ловушек | |
Gese | The concentration of certain inorganic constituents in the blood of the Cynthia pupa Samia walkeri Felder and Felder | |
RU2350951C2 (ru) | Способ окраски эозинофильных лейкоцитов в мазках мокроты | |
SU1749834A1 (ru) | Способ оценки фагоцитарной активности нейтрофилов | |
Cohn et al. | Constancy of DNA content in adrenal medulla nuclei of cold-treated rats | |
CN116858646B (zh) | 一种用于非靶代谢检测中的质控品配制及应用方法 | |
CN108276372A (zh) | 一种检测高半胱氨酸的荧光分子探针 | |
Boseila | Identification and Counting of Basophil leucocytes | |
SU709062A1 (ru) | Способ определени лизосомального катионного белка лейкоцитов | |
Azad et al. | DIAGNOSIS OF ANEMIA USING MULTIPLE RBCS PARAMETER IN INFANT | |
CN116448650A (zh) | Sytox在检测外周血红细胞成熟度中的应用及检测试剂和方法 | |
RU2178170C1 (ru) | Способ диагностики гнездной алопеции | |
SU663379A1 (ru) | Реактив дл лизиса эритроцитов | |
RU2098824C1 (ru) | Способ определения кишечных инфекций | |
SU1569651A1 (ru) | Способ определени сенсибилизации организма к промышленным аллергенам | |
RU1789927C (ru) | Способ иммунодиагностики инфекции |