UA125925C2 - Композиція для згортання молока, що містить суміш хімозинів, харчова та кормова композиції, що містять суміш хімозинів, застосування композиції для згортання молока, спосіб одержання продукту на основі молока та спосіб одержання ферментованого молочного продукту з використанням композиції для згортання молока - Google Patents
Композиція для згортання молока, що містить суміш хімозинів, харчова та кормова композиції, що містять суміш хімозинів, застосування композиції для згортання молока, спосіб одержання продукту на основі молока та спосіб одержання ферментованого молочного продукту з використанням композиції для згортання молока Download PDFInfo
- Publication number
- UA125925C2 UA125925C2 UAA201708448A UAA201708448A UA125925C2 UA 125925 C2 UA125925 C2 UA 125925C2 UA A201708448 A UAA201708448 A UA A201708448A UA A201708448 A UAA201708448 A UA A201708448A UA 125925 C2 UA125925 C2 UA 125925C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- coagulant
- milk
- chymosin
- composition according
- ratio
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 169
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 title description 3
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 claims abstract description 175
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims abstract description 57
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims abstract description 57
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims abstract description 37
- 108090000746 Chymosin Proteins 0.000 claims description 114
- GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N n,n,5,7-tetramethyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-amine Chemical compound C1=C(C)C=C2C(N(C)C)CCCC2=C1C GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 111
- 229940080701 chymosin Drugs 0.000 claims description 108
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 96
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 96
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 96
- 101000914103 Bos taurus Chymosin Proteins 0.000 claims description 59
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 claims description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 36
- 235000008983 soft cheese Nutrition 0.000 claims description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 14
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 claims description 12
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000303258 Annona diversifolia Species 0.000 claims description 4
- 235000020246 buffalo milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000020248 camel milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- 235000020255 yak milk Nutrition 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000235395 Mucor Species 0.000 claims 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims 2
- 241000881711 Acipenser sturio Species 0.000 claims 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- 241000581017 Oliva Species 0.000 claims 1
- 235000003976 Ruta Nutrition 0.000 claims 1
- 240000005746 Ruta graveolens Species 0.000 claims 1
- 241000656145 Thyrsites atun Species 0.000 claims 1
- 241000289690 Xenarthra Species 0.000 claims 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 claims 1
- 235000005806 ruta Nutrition 0.000 claims 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 abstract description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 46
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 42
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 42
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 41
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 36
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 23
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 23
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 23
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 12
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 10
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 10
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 9
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 8
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 7
- 101000914078 Ovis aries Chymosin Proteins 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010064037 prorennin Proteins 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- 241000235388 Mucorales Species 0.000 description 4
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-n-(6-hydrazinyl-6-oxohexyl)pentanamide Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)NCCCCCC(=O)NN)SC[C@@H]21 IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000002887 multiple sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 108091005502 Aspartic proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000035101 Aspartic proteases Human genes 0.000 description 1
- 241000218993 Begonia Species 0.000 description 1
- 238000003462 Bender reaction Methods 0.000 description 1
- 241001416153 Bos grunniens Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M Cetrimide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101100498160 Mus musculus Dach1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100411639 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) mus-41 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 101150081777 RAD5 gene Proteins 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 101100411620 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) rad15 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 206010041347 Somnambulism Diseases 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108700023707 TUG1 Proteins 0.000 description 1
- 241000718541 Tetragastris balsamifera Species 0.000 description 1
- 230000015468 UV-damage excision repair Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 208000027697 autoimmune lymphoproliferative syndrome due to CTLA4 haploinsuffiency Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000902900 cellular organisms Species 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 241000238565 lobster Species 0.000 description 1
- 235000004213 low-fat Nutrition 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000004651 near-field scanning optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108010001845 prepepsinogen Proteins 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/04—Making cheese curd characterised by the use of specific enzymes of vegetable or animal origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
- A23C19/0326—Rennet produced by fermentation, e.g. microbial rennet; Rennet produced by genetic engineering
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/068—Particular types of cheese
- A23C19/0682—Mould-ripened or bacterial surface ripened cheeses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6478—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
- C12N9/6483—Chymosin (3.4.23.4), i.e. rennin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/23—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
- C12Y304/23004—Chymosin (3.4.23.4), i.e. rennin
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Винахід стосується композиції для згортання молока, що містить щонайменше 70 % мас./мас. коагулянту із співвідношенням C/P (відношення коагуляції до преципітації) більш ніж 5 IMCU/mU та від 15 до 30 % мас./мас. коагулянту із співвідношенням C/P у діапазоні від 0,05 до 1,5 IMCU/mU (міжнародні одиниці згортання молока/мл), де коагулянт із співвідношенням C/P більше 5 IMCU/mU представлений хімозином верблюда, а коагулянт із співвідношенням C/P у діапазоні від 0,05 до 1,5 IMCU/mU є бичачим хімозином або коагулянтом з мукору, і де % мас./мас. означає концентрацію одного коагулянту у загальній кількості коагулянтів. Винахід стосується також харчової або кормової композиції, що містить суміш двох або більше коагулянтів, та стосується застосування композиції, способу отримання продукту на основі молока та способу отримання ферментованого молочного продукту.
Description
коагулянтів, та стосується застосування композиції, способу отримання продукту на основі молока та способу отримання ферментованого молочного продукту. 1 о
Бичзачий хімозии В МВСБУУІЬВУ ЖАБЗСЮаАБІВ ВІвиУКОКВі ВКВЬКЕНОМЬ БОББОКОСТО
Свечий хімовив МВСЬУТОаУ КАББОСАБІХ ВІРОХУКсКРі ВКаЬКЖЕАСІЬ ВОББОКООХе хХінсзнн б, Васстіавцяе МАСЬУчУОМаА ЗАББОЛБОІТ ВІРШНКЦКТІ ВКВБКЕВаИМО БОЕБОВООХА
Хімозим С. Ягомецахіиа МВСЬУУЬаА МАВБОАБОЇТ КІРІНЕСИТІ ВКАБЬКЕВИЦЬ БОББОВООХА
Саннячий хівозим -ТБОЕМЬБАУ ТАББОСОСІТ КУРІВКОКВЬ ВКБОКЕНВОВО БОГЬОКОРХА
Шурячий хівозин МЕСЕЧУБІОБАУ ПАІАОБИУУТ ВІКЬИКОКЬ КМТЬКЕОВОЬ БОКБАНМОХЕ зі 150
Бичачний хімозин В ІБВКУЗСЕСЕ ТАБУ ОБИУКОКІХЬ БТРЕОБЕККУЄ РОТОВЗОЕИУ овечий хімозин УВЗВЕУВСЖсСЕ УАБУРОТНУХ ОБОУКВКІХЬ СТРРОВЕТУЦ КОТОБІОКНУ
Хімовив б, Бастхїіавав УВКУБВЬсСК УАВЕВОТЗХЕ ПеОУКОКІХІ ОТЕРОБЕТУУ КОТОВА
Хімозив С. бЗкощейавків УБВКУБЕБЬССя УДВЖЕЬТОХІ ОБОЖЕОКІХІ сТВЕРОБЯИТУ? ОХОТУ
Свивячий кімозин ВОБКУВОЕСЕ ТАВЕРЬТМУВ ПТОЖКОКІЖІ СТВРОБЕТУТ? КБТОЯБЕІНУ
ШУрячий хімозин ЕВЕКМЯМІСМ ЗТАБЕРЬТНУВ ОБЕЖКОВІїМ ОТРРОЖЕКУЧ КЕКБИЗЕБНУ
М 159
Бичачий хімозин В РБІТСЕБКАС КМВОБЕОРЕК З5ТКОМТОКЕ ПВЗІНЖСТОоВМ СІСТИ
Овечей хімазин ваїітСКанАс КиВОовКОРВЕ ЗаТЕОМіЄсКЕ ОБІнжОТОоВМ БІОТИ
Хімозим С. бБвсссіапих РБІТСКВНАС КИННЕКОРАК ЗБТЕВНООКЕ ББІНХОТОяЕ ЕОКЬОТОЖИЕ
Хімозин С, ЯІсотедчахіцеа вБІчСсКВМУЄ КИНиКЕВЕВК ЗаРЕВКТ КР 1БІНУСтТОЗМ БОРРБОТОТУЕ свинячий хімозин вБУХСКНОАС ОННИКЕМНЕОК БЕТКОМООКе вет тОотавіІ ООКБОТОоТУМ
Щурачий хімозин РЕУХСВИКУС КМНМИКЕОВОК ЗЕТЕОМНЬВКЕ БЕУдУусТиВУ БОКЬАХОТУТ 00
Бнчачий хімозин В УаМІУрІССтТ УСЬЯТОКВОЮ УКТХАКЕТНЗІ ОМАРА БЕУЗІРУКОЦИ вечий хімозин чВМІЧрІОСТ тТОБЕТОКРОЮ УКТУАЖЕТОЇ 1ОМаАУРЕСАВ БІБУРУКОНМ хішозин ос. расехіапив УМІСТ УССЕТКОВОЕ УКТХВЕКООІ БОБАХЕяЬАВ БІБУРЧЕВНМ
Хівозинм С. бготедякіце ФтЕМІУПРИШТ ТОБеТЕОРБЕ УЕТХЗБЕТЗІ реЬатРЕЗБЬАЗ БУБУРУКОМИ сСвимачий хімовив УАСІУНВАНОТ УСЬБТОБРБО ТЕТУБЕКОСІ БшБОХвЕБАВ БУТУКУКОМИ
Шурячий хіновин УВОІУТУРНОТ УСОЯТЕБРОО ТЕТУЗРЕООІ ПОБАХЕТКАЗ КУЗУРІКОММ 2 250
Бичачий хімовнн В МУВНЕУАОЮІ КЕВУУМОВМСО БІМОТЬОАТО вЗУУТОВЬИ ЗРУТУДОХНИ
Овечзий хімезин мІВаБУДОЮІ. КЕШУТМОВЯІСО ВМІЛО АТО РОХУТОБИВЯ РУТЬОКУМНО
Хімозня С, Басскіавив МОоВИБУАВОЇ КЗУЖМОВВСО ПаМОТЬСАТО ВЗУТТЯ УВУТУСОТНО
Хімовив С. Якощейакійе МОВНУ АВОЇ, КВУХМОВНОСО СОМІТІСАТО РЕЖТРОВиНИ УРУТЬСОЧНО спкивячий хімозин МмнЕнБУудДОог, КачжМаКнНоВ СОМОИТЬСВХОо ВЖЕ ТОВЬНИ ЧВУТМОУМО
Шурячий хімозив мувньУасорІ. КБЗУМВКЕМОО СЕМОТЬСАТО ОБЖКІСВЬНИ чРУТЧОСУНО 251 380
Бичачий хімозин В ЕТУПИУКІВО "УУАСЕВОСО АТББбТСсТВКІ УБРІВОТЬКМІ ООВІЗАТОМО овечий хімазин ЕТЧОВУТІЧО АУУАСЕООСО АІБОТаТВИІ УСЕЗаОХОМІ ООАТОАТОМО
Хівмозивн С. Баскківапиа тТУОшУТІМО УАУАСУСОСО АТЬОТОТВУуВ БОРОВОТІКІ ОМАЇ1САТЕМЕ
Хімозим С. йакотедакічв ЕТУПИУТІМО УАТАСУСОСО АІБОИТОТУу: БОРОВОЇСЬКІ ОМАТОАТЕМЕ свимичий хімозив тТУЮВУтТІМС УУУАССОСО АІБОТОТаМІ ДОВБаШІЬВІ ОМЛІВЗАТЕВО
Щувячий хімозим ЕТУЮВКІТІМО КУЧУАСОСОПВ АчБОТОТАІ ТОВОВОІЬМІ ОНЛІСВУЄОО з50
БВичачий хімозин В ХСЕКОІОСОВ СЛУМеТУУЕВ ЇМОКМІРІТЕ ЗаУТВОРОБЕ СТБОКОВЕМЕ овечий хінозии УсЕКВІЮСОВ ГаБМетТуткв ІЇМОКМУуРЬТЕ УАХТЕОВВОК СТОКОМ
Хімозвин б. Вассківхие УСЕВЕрВУМСОЇ АБМЕТУЧЕЕ ІВОВОКРЬАР ЗАУТЗКрОВЕ СТОбРОвОМИ
Хімознн с. бакомейзківа УСЕКОУМСОМ БИОМЕТУУЕЕ ІМСВОХРЬЯР ЗАУТЗКОБЕ СТВООСОМНИ
Свинячий хімсозии УСЕЕрІБВСсоЗ ББВМРТУУЮЕ І1Б5ОВМУРЬВР БАЖТМОВОЗЕ СТВОРОвОоБЕ
Щурячий хімозкн НОСКРІЮСКА БМЕМЕТУУКЕ ІЇІВСВЕКРІОВР ЗАХІМОКОСЯ СОаНОЕК,.Но 351 ЗІ
Бичачий хімозим В БОКЧІБСОУК ІВКУЖИМЕВЕ АБМЬБУСІАКА ї сСвечий хімозиа ВНОМІБСОУК 1ВБУЖаУКИА АММЬУСЬДКА
Хімозни СК, бБасскіавпих ВЕБНІБСОУК ТВЖУЗЗУКОВ АММАУССАКА Її
Хімозин С. акопеаахіцв ВЕБМІБСОУК 1ВЕХУВУКИВ АММАУСБАКА Її саннячий хімозин вВОНМІБОотУук ТОЖУУЗУКОВ АММВУСТАКА Її
Шурячий хімозим ВОМІБсвУую ІКБЕУБУКОВ АМНЕУОБАКА Її фіг. 7
Винахід стосується композицій коагулянтів та/або їх сумішей, властивості яких покращено для застосування у сироварінні.
Ферментативна коагуляція молока під дією ферментів, залучених до його згортання, як-то хімозину та пепсину, є одним з найбільш важливих процесів у виробництві сирів.
Ферментативна коагуляція молока є двохфазним процесом, в першій фазі якого протеолітичний фермент, хімозин або пепсин атакує к-казеїн, що призводить до появи метастійкого стану (тобто стану нестійкої рівноваги) в міцелярній структурі казеїну. В другій фазі цього процесу відбувається подальша коагуляція молока з утворенням згустку.
Хімозин (ЕС 34234) та пепсин (ЕС 34231) є ферментами згортання молока зі шлунку ссавців та являють собою аспарагінові протеази, які належать до великого класу пептидаз.
Якщо вироблення хімозину та пепсину відбувається у клітинах слизової оболонки шлунку, то ці ферменти відповідно будуть мати вигляд ферментативно активного препрохімозину та препепсиногену. У разі екскреції хімозину відбувається відщіплення М-кінцевого пептидного фрагменту, тобто пре-фрагменту (сигнального пептиду) цієї молекули з отриманням прохімозину, який містить про-фрагмент. Прохімозин є суттєво неактивною формою ферменту, яка проте стає активованою у кислих умовах та перетворюється на активний хімозин за рахунок автокаталітичного усунення власного про-фрагмента. Це активування відбувається іп мімо у шлунковій порожнині при відповідних значеннях рнН або іп міїго у кислих умовах.
Структурні та функціональні характеристики бичачого (тобто з тварин виду Во5 їашйгив) препрохімозину, прохімозину та хімозину було докладно досліджено. Пре-частина молекули бичачого препрохімозину містить 16 АА-залишків та про-частина відповідного прохімозину складається з 42 АА-залишків. Активний бичачий хімозин містить 323 залишки та існує у вигляді суміші двох форм, А та В, обидві з яких є активними.
В природних умовах вироблення хімозину відбувається в організмі певних видів ссавців, як- то биків, верблюдів, кіз, буйволів, овець, свиней, людини, мавп та щурів.
Вже кілька років бичачий хімозин можна придбати на ринку для потреб молочної промисловості.
У Міжнародній патентній публікації М/002/36752А2 (Спг. Напхеп) описано вироблення рекомбінантного хімозину верблюда.
Зо У Міжнародній патентній публікації УМО2013/174840А1 (Сп. Напзеп) наведено опис мутантів/варіантів бичачого хімозину та хімозину верблюда.
У Міжнародній патентній публікації М/02013/164479А2 (О5М) наведено опис мутантів бичачого хімозину.
Описані нижче посилання в цьому контексті може бути розглянуто, як посилання, в яких надано опис мутантів хімозину: - Зи2иКі еї а!: 5йе дігесівєд тиїадепевів гемеаїв Тшпсійопа! сопігіршіоп ої Тнг218, Гуз220 апа
Азр304 іп спутовзіп ("Сайт-спрямований мутагенез виявив функціональну роль амінокислот
Тпг218, Гуз220 та А5р304 в молекулі хімозину"), Ргоївіп Епдіпеегіпод, мої. 4, дапиагу 1990, раде5 69-71; - ЗМИ2ИиКі еї а!: АПегайоп ої саїаїуїіс ргорепіез ої спутозіп Бу 5іїе-дігесівєдй тигадепезів (Змінення каталітичних властивостей хімозину шляхом сайт-спрямованого мутагенезу"), Ргоїеїіп
Епдіпеегіпо, мої. 2, Мау 1989, радев 563-569; - мап деп Вгіпк еї а!: Іпсгеахзей ргодисцоп ої спутовзіп Бу адіусозуіайоп ("Покращене вироблення хімозину, досягнуте за рахунок глікозилування"), Чдоигпаї ої Біотесппоіоду, мої. 125, Беріетбрег 2006, раде5 304-310; - Рій5 еї а!: Ехрге55іоп апі сНагасієгізайоп ої спутовіп рН оріїта тшиїапі5 ргоодисей іп
Тгісодепта геезеі ("Експресія та характеристика хімозинових рН-оптимальних мутантів, вироблених грибами Тгісодепта геевзеї"), доигпаї ої Біотесппоіоду, мої. 28, Магсп 1993, радев 69- 83; - Ма. М/ЦШатв еї а!: Миїадепезів, Біоспетіса! спагасієгіганоп апа Х-гау зігисіига! апапїувів ої роїпі тшапів ої Ббоміпе спутовіп ("Мутагенез, біохімічна характеристика та рентгеноструктурний аналіз точкових мутантів бичачого хімозину"), Ргоївіп епдіпеегіпд дезідп апа 5еїесііоп, мої. 10,
Зерієтрег 1997, радез 991-997; - Зігор єї а!: Епдіпеєегіпа епгуте 5иЇб5іїє зресіїсйпу: ргерагайоп, Кіпеїїс спагасівгігайоп, апа х- гау апаїузів аг 2.0 АМС гезоїшіоп ої Ма!1їтрне 5йе тшареай са спутовіп ("Субсайтна специфічність штучно розробленого ферменту: отримання, рентгеноструктурний аналіз з роздільністю 2 А та кінетичні характеристики бичачого хімозину з мутацією в ділянці маі11трне"), Віоспетівігу, мої. 29, Осіобег 1990, радез 9863-9871;
- Зураппее еї а!: 5йе-5ресіїйс тиїайопв ої са! спутовіп В у/пісн іпПнепсе тіїК-сіоніпа асіїмну ("Сайт-специфічні мутації телячого хімозину В, які впливають на активність згортання молока"),
Еоса Спетівігу, мої. 62, дипе 1998, радез 133-139; - 7Напа єї а!: Еипсійопаї! ітріїсайопв ої аізиіде ропа, Суз45-Сувз50, іп гесотбіпапі ргоспутозіп (Функціональні наслідки дисульфідного зв'язку Суз45-Суз50 у рекомбінантному прохімозині"),
Віоспітіса єї Біорпузіса асіа, мої. 1343, Оесетбег 1997, раде5 278-286.
Слід зазначити, що вищевказані посилання попереднього рівня техніки зосереджено на дослідженнях молекулярної структури та її впливу на специфічність або активність хімозинів.
Жодне з цих посилань не присвячено комбінованим діям різних хімозинів з різними властивостями та з різних джерел.
Винахідниками було виявлено, що специфічні коагулянти та/або їх суміші може бути застосовано для регулювання рівня бактеріального підкислення та кінцевої точки підкислення під час вироблення сиру.
Крім того, винахідниками було виявлено, що винахід дозволяє регулювати розвиток структури м'якого сиру під час дозрівання та зберігання шляхом надання специфічних сумішей хімозинів.
Як обговорено у наведених тут прикладах, винахідники також визначили кількість коагулянтних сумішей, які мали привабливі, с точки зору промислового виробництва, риси, як- то, наприклад, прискорений розвиток твердості сиру, який перевищує очікувані результати.
На основі порівняльного аналізу коагулянтних сумішей, винахідники визначили кількість сумішей, важливих з точки зору того, що в результаті отримання суміші фахівець також може отримати покращену та відмінну коагулянтну дію.
Всі визначення термінів, які містяться в цьому документі відповідають тому, що було б зрозуміло фахівцеві у відповідному технічному контексті.
Термін "коагулянт" стосується ферменту, застосованого для згортання молока у процесі сироваріння. Для повного висвітлення цього питання хімозин слід розглядати, як коагулянт.
Термін "коагулянт з високим показником С/Р" або "коагулянт з високим рівнем С/Р" стосується коагулянту, як-то, наприклад, хімозину, який має показник С/Р (відношення коагуляції до преципітації) 24,5 як-то, наприклад, С/Р»5, як-то, наприклад, С/Р»б, як-то,
Зо наприклад, С/Р»7 або С/Р в межах 6-12. Наявні в продажу приклади коагулянтів з високим показником С/Р включають сполуки СпуМах М або СпуМах М1000 (Спг. Напхеп А/5) та
МахігепхО5 (О5М).
Термін "коагулянт з низьким показником С/Р" або "коагулянт з низьким рівнем С/Р" стосується коагулянту, як-то, наприклад, хімозину, який має показник С/Р (відношення коагуляції до преципітації) С/Р«4,5, як-то, наприклад, С/Р«4, як-то, наприклад, С/Р, як-то, наприклад, С/Р«2, як-то, наприклад, С/Р«1,5, як-то, наприклад, С/Р-1, як-то, наприклад, С/Р«0,5 або С/Р«0,1. Наявні в продажу приклади коагулянтів 3 низьким показником С/Р включають сполуки Наппіїазе І Ф, Наппіїазе ХРО, Тпегтоїазефб та МайшгепФф) (всі від Спг. Напзеп А/5).
Термін "коагулянтна суміш" стосується сумішей ферментів, застосованих для згортання молока, наприклад у процесі сироваріння.
Термін "хімозин" стосується ферменту класу ЕС 34234. Хімозин має високу специфічність та він згущує молоко шляхом руйнування одиничного 105-5ег-РНпе-|-Меї-АІа-108 зв'язку в каппа- ланцюзі казеїну. Як варіант, хімозин також є відомим в цій галузі, як ренін.
Термін "активність хімозину" стосується ферментативної активності хімозину, як буде зрозуміло фахівцям в цьому контексті. Досвідчений фахівець також знає, як в цьому разі визначити відповідну активність хімозину.
В наведеному тут робочому Прикладі 2 надано приклад стандартного способу визначення специфічної активності хімозину, яка, як варіант, також має назву згортаючої активності або активності згортання молока. Наприклад, цю активність може бути визначено із застосуванням способу КЕМСАТ, який є стандартним способом, розробленим Міжнародною федерацією підприємств молочної промисловості (спосіб ІОРЕ).
Термін "виділений варіант" означає варіант, модифікований рукою людини.
Термін "зрілий поліпептид" означає пептид у власній кінцевій формі після трансляції та будь- яких пост-трансляційних модифікацій, як-то М-кінцевої обробки, С-кінцевого усічення, глікозилування, фосфорилювання тощо. В цьому контексті відповідний зрілий поліпептид хімозину може бути розглянуто у вигляді активної поліпептидної послідовності цього ферменту, тобто без послідовностей пре- та / або про-частини.
Термін "батьківський поліпептид" або "батьківський поліпептид, який має активність хімозину" означає поліпептид, призначений для здійснення змінення з метою отримання ферментних варіантів за винаходом. Батьківським поліпептидом може бути поліпептид природного походження (дикого типу) або його варіант.
Термін "тотожність послідовності" стосується спорідненості між двома амінокислотними послідовностями або між двома нуклеотидними послідовностями та її може бути обчислено відповідно за способами, які є доступними для фахівців в цій галузі.
Термін "варіант" означає пептид, який має активність хімозину та містить змінення, тобто заміщення, вставку та/або делецію в одному або більше (в кількох) положеннях. Заміщення означає заміщення амінокислоти в певному положенні іншою амінокислотою; делеція означає видалення амінокислоти в певному положенні; та вставка означає додавання 1-3 амінокислот, прилеглих до амінокислоти в певному положенні.
Термін хімозиновий пептид "дикого типу" означає хімозин, отриманий внаслідок експресії організму, який зустрічається в природі, як-то, наприклад, ссавця (наприклад, бика чи верблюда), якого можна зустріти в природному середовищі.
Термін "коагулянти з різних джерел" стосується коагулянтів, отриманих з різних організмів або, як варіант, отриманих шляхом генетичної модифікації. Отже, в контексті цього винаходу, бичачий хімозин дикого типу та генетично модифікований бичачий хімозин вважаються коагулянтами з різних джерел.
Опис фігур.
Фіг. 1: Вирівнювання наявних тут відповідних різних послідовностей хімозину. Бичачий хімозин з послідовністю ЗЕО ІО Ме:1 тут позначено, як "Во5 ромі5 спутовзіп В" та хімозин верблюда з послідовністю ЗЕО ІЮ Мо:2 має позначку "Сатеїи5 аготедагіив". Застосовуючи бичачий хімозин з послідовністю ЗЕО ІЮ Мо: 1, як зразкову послідовність, як тут описано, можна, наприклад, побачити, що цей бичачий хімозин має "У" в положенні 10 та хімозин верблюда в тому ж положенні має "А". Також, наприклад, може бути помітно, що бичачий/щурячий хімозин має "ОО" у положенні 352 та хімозин верблюда/ С. Басігіапи5 має "Е" в тому ж положенні 352.
Відносно наведених на Фіг. 1 послідовностей хімозину також слід додати, що послідовність овечого хімозину має 94,5 95 тотожності з послідовністю бичачого хімозину ЗЕО ІЮО Мо: 1; послідовність хімозину С. расігіапих має 83,2 95 тотожності з послідовністю ЗЕ ІЮ Мо: 1; послідовність хімозину Сатеїи5 аготеаагіи5 (послідовність хімозину верблюда 5ЕО ІЮ Мо: 2) має 84 95 тотожності з послідовністю бичачого хімозину 5ЕО ІЮ Ме: 1; послідовність свинячого хімозину має 80,3 95 тотожності з послідовністю бичачого хімозину 5ЕО ІЮО Ме: 1 та послідовність щурячого хімозину має 71,9 95 тотожності з послідовністю бичачого хімозину ЗЕО ІЮ Мо: 1.
Як буде зрозуміло фахівцям в цьому контексті, наведені тут відповідні відсоткові тотожності послідовностей зрілого поліпептиду хімозину овець, свиней, щурів, верблюда або бактріану (С. расігіапи5) з послідовністю зрілого поліпептиду 5ЕО ІЮ Мо: 1 (послідовність бичачого хімозину, тобто амінокислотні положення 59-381 послідовності ЗЕ ІО Мо: 1) є відносно подібними до вищезазначених відсоткових тотожностей послідовностей.
Фіг. 2: Твердість сирів типу брі, отриманих з допомогою різних коагулянтних сумішей.
Фіг. 3: Липкість сирів типу брі, отриманих з допомогою різних коагулянтних сумішей.
Фіг. 4: Показник рН під час операції виймання продукту з прес-форми для сирів типу брі, отриманих з допомогою різних коагулянтних сумішей.
Фіг. 5: Величина сухої маси (ОМ) під час операції виймання продукту з прес-форми для сирів типу брі, отриманих з допомогою різних коагулянтних сумішей.
Фіг. 6: Відносна протеолітична специфічність відбору коагулянтів, які представляють особливий інтерес в цьому винаході.
Фіг. 7: Швидкість коагуляції та розвиток твердості сиру в трьох різних коагулянтних розчинах, як-то в розчині хімозину верблюда (коагулянт СпуМах Ф М1000, помічено суцільною червоною смугою), розчині бичачого хімозину (коагулянт СпуМахФа», помічено зеленими ламаними смугами) та суміші хімозину верблюда та бичачого хімозину зі співвідношенням 80/20 (коагулянт
СпумМахезоїй, помічено синьою пунктирною смугою).
Як буде тут детально описано, винахід стосується композицій, які містять два або більше різних коагулянтів.
У суміжному аспекті, винахід стосується композицій для згортання молока, які містять суміш двох або більше коагулянтів різного походження.
У суміжному аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, в якій два або більше коагулянтів мають різні співвідношення С/Р та/або різну активність згортання молока, як-то, наприклад, з різницею принаймні у три рази.
У суміжному аспекті, активність згортання молока визначають від значення часу, потрібного для видимої флокуляції стандартного молочного субстрату, отриманого з суміші бо низькотемпературного та знежиреного сухого молока з розчином хлориду кальцію (0,5 г/л з рН -
6,5). Час згортання для зразка сичужного ферменту порівнюють з часом згортання, отриманим для зразкового стандарту, який має відому активність згортання молока та має такий саме ферментний склад за стандартом ІОЕ 110БВ, як і зразок. Зразки та зразкові стандарти вимірюють в однакових хімічних та фізичних умовах. Активність варіантів зразків спочатку доводять до величини у З ІМСО/мл (де ІМСИ є Міжнародною одиницею згортання молока) із застосуванням буферу з 84 мм оцтовою кислотою (рН 5,5), а потім 200 мкл ферменту наливають у скляну пробірку, яка містить 10 мл попередньо нагрітого молока (32 "С) та яку розташовано на водяній бані, здатній підтримувати постійну температуру 32 "С хз 17 С при постійному перемішуванні.
Загальну активність (силу) згортання молока для зразка сичужного ферменту обчислюють в
Міжнародних одиницях згортання молока (ІМС) на мл відносно стандартного зразка, який має такий саме ферментний склад, як і зразок, відповідно за наступною формулою:
Сила у ІМСО/мл - 5 стандарту х Т стандарту х О зразка
О стандарту х Т зразка
З стандарту: Активність згортання молока за міжнародним зразковим стандартом для сичужного ферменту.
Т стандарту: Час згортання (в секундах), отриманий для стандартного розчинення. о зразка: Коефіцієнт розведення для зразка
Ор стандарту: Коефіцієнт розведення для стандарту
Т зразка: Час згортання (в секундах), отриманий для розведеного зразка сичужного ферменту від часу його додавання до часу флокуляції.
Визначення загального вмісту білка.
Загальний вміст білка було визначено із застосуванням набору Ріегсе ВСА Ргоїеїп аналіз Кії від компанії Тпепто Зсіепійс у відповідності з інструкціями від постачальників.
Обчислення специфічної активності згортання.
Специфічну активність згортання (ІМСИи/мг загального білка) було визначено шляхом поділу активності згортання (ІМСИ/мл) на загальний вміст білка (мг загального білка на мл).
У наведеному тут робочому Прикладі З наведено приклад стандартного способу визначення протеолітичної активності.
Зо Наприклад, загальну протеолітичну активність може бути виміряно із застосуванням міченого флуоресцентною міткою казеїну Водіру-РЇ, як субстрату (Еп2Спек; Моїесшіаг
Віоргоре5, Ебб38). Застосування похідних казеїну, значною мірою мічених рН-нечутливою зеленою флуоресцентною міткою Водіру-РЇ призводить до майже повного зупинення реакції флуоресценції кон'югату та гідроліз, каталізований протеазою призводить до вивільнення флуоресцентної мітки Водіру-РЇ. Цей спосіб є дуже чутливим, що є важливим для цього експерименту, оскільки коагулянти з високим показником С/Р часто мають низьку загальну протеолітичну активність у порівнянні з коагулянтами з низьким значенням С/Р.
Цей аналіз було здійснено у 0,2 М фосфатному буфері, доведеному до бажаного значення рН при кінцевій концентрації субстрату у 0,04 мг/мл. Перед перемішуванням однієї частини субстрату з однією частиною ферменту (обидві було отримано у фосфатному буфері) всі ферментні варіанти було нормалізовано до 50 ІМСО/мл (відповідно за Прикладом 2). Субстрат та фермент було перемішано у 96-луночних мікротитрувальних планшетах Мипс Ріоцого, які було щільно запечатано та піддано інкубуванню протягом години при 32 "С. Після інкубування планшети розпечатали та флуоресценцію дослідили з допомогою флуориметру.
Як відомо в цій галузі, відповідне так зване С/Р відношення визначають шляхом ділення специфічної активності згортання (СХІМСИО/мл) на протеолітичну активність (Р3УтИ/мл).
Як відомо в цій галузі, збільшене відношення С/Р головним чином свідчить про зменшення втрат білка через його неспецифічне руйнування протягом, наприклад, процесу виробництва сиру, тобто про покращення виходу сиру та про зменшення розвитку гіркого смаку сиру під час його дозрівання.
Інший аспект винаходу стосується композицій, які містять два або більше різних хімозинів та які надають бажані властивості стосовно твердості сирного згустку та швидкості коагуляції.
Одним способом вимірювання є застосування приладу СНУМОдгарипФ, який дозволяє обчислити час флокуляції молока, а також розвиток твердості сирного згустку під час отримання сиру.
Відповідне програмне забезпечення вимірює швидкість утворення у згустку білкової мережі та перетворює знайдені відмінності густини молока та в'язко-еластичних властивостей згустку на зрозумілі для користувача графічні дані, які може бути застосовано для отримання характеристик коагулянту або для визначення оптимального часу розрізання згустку.
З допомогою приладу СНУМОдгарпФф вимірюють час флокуляції молока, твердість згустку та його розвиток, а також швидкість утворення білкової мережі.
Для обробки молока отриманий контейнер з 500 г молока відповідно за метою молочної композиції нагрівають до температури згортання у 38 "С на водяній бані. Це нагрівання триває годину перед додаванням сичужного ферменту. Перед застосуванням молока також здійснюють контроль та реєстрацію його рН.
Прикладом бажаного складу молока є:
Збагачене молоко з 3,8 956 вмістом білка, яке пройшло високотемпературну обробку (30 секунд при 90 С), рН сичужного згортання: 6,18 при 38 "С та 6,28 при (4 "С).
Температура сичужного згортання: 38 "С.
Цей тип молока відповідає складу молока, яке застосовують для отримання м'якого сиру молочного типу.
Для отримання бажаного коагулянту було перевірено три розчини - хімозин верблюда (СпуМах? М1000), бичачий хімозин (СпуМахФя) та м'який хімозин СпумМмахМ (суміш 80 95 хімозину верблюда (СпуМахФ М1000) та 2095 бичачого хімозину (СпуМахФ ж)). Кожен коагулянтний розчин може бути отримано з силою у 20 ІМСОи/мл (розчин у теплій воді). Метою цього розчинення було постачання достатньої кількості коагулянту до зразка молока для забезпечення його належного розподілення.
Кожен коагулянтний розчин може бути додано до молока (1 мл розчину на 500 г молока, таким чином 40 ІМСО/л). Після додавання коагулянту зразок перемішували 30 сек. шляхом обертання. Після цього обертання у прилад Спутодгарп було завантажено по 10 мл кожного коагулянтного розчину.
Як відомо в цій галузі, всі різні поліпептидні послідовності природного хімозину дикого типу, отриманого з різних видів ссавців (як-то, наприклад, корів, верблюдів, овець, свиней або щурів) мають відносно високу ступінь схожості / тотожності.
Приклад цього наведено на Фіг. 1 на основі вирівнювання різних відповідних послідовностей хімозину.
У присутньому контексті, як показано на Фіг.1, отриманий природним шляхом хімозин дикого типу (як-то бичачий хімозин або хімозин верблюда) тут може бути прикладом батьківського поліпептиду, тобто батьківського поліпептиду, з яким здійснюють змінення з метою отримання поліпептиду хімозинового варіанту за винаходом.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, в якій два або більше коагулянтів з різними швидкостями утворюють а51 та/або р-казеїн.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, в якій два або більше коагулянтів мають різну загальну протеолітичну активність, як-то, наприклад, з різницею принаймні у три рази.
Отже, в одному аспекті, винахід стосується композицій, як описано вище, які містять принаймні один коагулянт з відношенням С/Р, яке перевищує 5 ІМСО/ти та принаймні другий коагулянт з відношенням С/Р, яке складає 0,05-1,5 ІМСО/ти.
Наприклад, ця композиція може містити один коагулянт, масова частка якого буде складати принаймні 50 95 та відношення С/Р перевищувати 5 ІМСШ/ти, а також другий коагулянт, масова частка якого буде складати принаймні 15 95 та відношення С/Р складати 0,05-1,5 ІМСО/тИ, де масова частка є показником концентрації одного з коагулянтів відносно загальної кількості коагулянту. У додатковому аспекті, винахід стосується композиції, яка містить один коагулянт з масовою часткою принаймні у 70 9о та відношенням С/Р, яке перевищує 5 ІМСО/ти та другий коагулянт з масовою часткою в межах 15-30 95 та відношенням С/Р, яке складає 0,05-1,5
ІМСИО/ту, де масова частка є показником концентрації одного з коагулянтів відносно загальної кількості коагулянту.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить суміш двох або більше коагулянтів, отриманих з двох або більше різних тваринних або мікробних видів або родів.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить суміш двох або більше коагулянтів, які є варіантами того ж самого батьківського коагулянту.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, в якій два або більше різних види або роди вибрано з переліку, який складається з корів, буйволів, верблюдів, свиней, щурів, овець або мукоральних грибів.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, в якій принаймні один з двох або більше різних коагулянтів отримано з коагулянту, отриманого з корів, 60 буйволів, верблюдів, свиней, щурів, овець або мукоральних грибів.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить молоко, як-то, наприклад, соєве молоко, овече молоко, козяче молоко, молоко буйволиці, молоко самиці яка, молоко лами, верблюже молоко або коров'яче молоко; та
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка є сумішшю бичачого коагулянту та коагулянту іншого походження або сумішшю коагулянту верблюда та коагулянту іншого походження.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить 10-50 95, як-то, наприклад, 20 95 коагулянту, який не є коагулянтом верблюда або не є бичачим коагулянтом, відносно загальної кількості коагулянту.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить коагулянт з високим відношенням С/Р та коагулянт з низьким відношенням С/Р. У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, яка містить 10-50 95, як- то, наприклад, 2095 коагулянту з низьким відношенням С/Р відносно загальної кількості коагулянту.
У додатковому втіленні винахід стосується харчової або кормової композиції, яка містить суміш двох або більше коагулянтів, як описано вище. Ця харчова або кормова композиція може бути м'яким сиром, як-то, наприклад, сиром брі або камамбер.
У іншому спорідненому аспекті, винахід стосується композиції, як тут наведено, призначеної для виготовлення м'якого сиру, як-то, наприклад, сиру брі або камамберу та вибірково для виготовлення м'якого сиру, який дозріває з поверхні.
Також винахід стосується застосування композиції відповідно за будь-яким описаним тут аспектом у процесі виготовлення м'якого сиру. Цю композицію, як описано у наведених тут аспектах, може бути додано не пізніше, ніж через 20 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 15 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 10 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 5 хвилин після додавання однієї або кількох заквасочних культур.
У разі необхідності до операції отримання продукту на молочній основі також може бути додано будь-які додаткові виробничі операції.
Наприклад, винахід стосується способу отримання ферментованого молочного продукту, який полягає у застосуванні наступних операцій:
Зо (а) додавання заквасочної культури до молока та інкубування цієї культури при температурі 28-42 "С протягом принаймні 5 хвилин; (Б) додавання композиції, яка містить два або більше різних коагулянтів з загальною концентрацією 2000 ІМСИО/100І-3500 ІМСОЛ 001; (с) додаткове інкубування культури при температурі 28-42 "С протягом принаймні трьох годин; (4) відокремлення сироватки з отриманням сиру.
Цей спосіб переважно може бути застосовано для отримання м'якого сиру, як-то, наприклад, брі або камамберу.
В цьому разі знову слід додати, що композиції, як описано у будь-якому з наведених тут аспектів, можуть, як у спорідненому втіленні, бути доданими не пізніше, ніж через 20 хвилин, як- то, наприклад, не пізніше, ніж через 15 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 10 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 5 хвилин після додавання однієї або більше заквасочних культур.
Визначення амінокислотного положення в бажаному хімозині.
Як було обговорено вище, в якості еталонної послідовності для визначення амінокислотного положення у зазначеному відповідному бажаному хімозиновому поліпептиді (наприклад, у хімозині верблюда, овечому, бичачому хімозині тощо) тут було застосовано загальновідому послідовність бичачого хімозину, наведену тут, як ЗЕО ІЮ Мо: 1.
Слід зазначити, що визначення амінокислотного положення у зазначеному тут бажаному відповідному хімозиновому поліпептиді (наприклад, у хімозині верблюда, овечому, бичачому хімозині тощо) із застосуванням добре відомих, як вказано вище, комп'ютерних програм стає досить рутинною справою для фахівця в цій галузі.
Спосіб отримання виділеного варіанту хімозинового поліпептиду.
Як було обговорено вище та як відомо у цій галузі, користуючись звичайними загальними знаннями фахівець може регулярно виробляти та очищати хімозин та його варіанти Іншими словами, коли фахівець має відповідний батьківський поліпептид, який має бажану хімозинову активність (наприклад, хімозину корів, верблюдів, овець, свиней або щурів), то отримання варіанту цього хімозину буде для нього звичайною рутинною справою.
Прикладом доступного способу отримання та виділення хімозину (варіантного або 60 батьківського) може бути застосування добре відомої технології, наприклад, технології,
розробленої на основі грибкової рекомбінантної експресії / вироблення продукту, як, наприклад, описано у УУО02/367524А2 (Спг. Напзеп).
Як відомо в цій галузі, активність хімозину може бути визначено із застосуванням так званого відношення С/Р, яке визначають діленням специфічної активності згортання (С) на протеолітичну активність (Р).
У наведеному тут робочому Прикладі 2 описано прийнятний спосіб визначення специфічної активності згортання (С) та у наведеному тут робочому Прикладі З описано прийнятний спосіб визначення протеолітичної активності (Р).
Як було обговорено вище, в якості еталонної послідовності для визначення амінокислотного положення у зазначеному тут відповідному бажаному хімозиновому поліпептиді (наприклад, у хімозині верблюда, овечому, бичачому хімозині тощо) тут було застосовано загальновідому послідовність бичачого хімозину, наведену, як ЗЕО ІЮ Мо: 1.
Як було обговорено вище, у разі застосування, наприклад, обговорених тут комп'ютерних програм вирівнювання послідовності, для фахівця в цій галузі стає рутинною справою визначення певного відповідного амінокислотного положення у певному відповідному бажаному хімозиновому поліпептиді (наприклад, у хімозині верблюда, овечому, бичачому хімозині тощо).
В цьому контексті фахівцеві стає зрозуміло, що відповідний наведений тут батьківський поліпептид, який має хімозинову активність може також, наприклад, бути варіантом, наприклад, відповідного хімозину дикого типу. Наприклад, варіант хімозину верблюда який містить, наприклад, 5-10 змінень (наприклад заміщень) порівняно з поліпептидною послідовністю хімозину верблюда дикого типу (5ЕО ІЮ Мо: 2) відповідно за, наприклад, наведеним тут першим аспектом буде залишатися вважатися батьківським поліпептидом, який має принаймні 65 95 тотожності власної послідовності до послідовності зрілого поліпептиду 5ЕО ІЮ Мо: 1 (бичачий хімозин).
Інакше кажучи, зазначений тут відповідний виділений варіант хімозинового поліпептиду може містити змінення (наприклад заміщення) у інших положеннях, ніж положення, зазначені, наприклад, тут у першому аспекті.
Втілення також стосується виділеного варіанту хімозинового поліпептиду, змінення якого включають заміщення, делецію або вставку у принаймні одному амінокислотному положенні
Зо відповідно до будь-якого з положень, наприклад, зазначеного тут першого аспекту.
Може бути бажаним, щоб різниця між цими хімозинами полягала в існуванні принаймні одного змінення в цьому пептиді, яким є заміщення, тобто відповідний зазначений тут коагулянт стосується виділеного варіанту поліпептиду бичачого хімозину, як-то, наприклад, варіанту, змінення якого містить заміщення у принаймні одному амінокислотному положенні, яке відповідає будь-якому з положень 51 та/або 221, переважно АБІМ та К221М у батьківській послідовності зрілого бичачого хімозину.
Батьківський поліпептид переважно має принаймні 70905 тотожності послідовності з послідовністю зрілого поліпептиду 5ЕО ІЮО Мо: 1 (бичачий хімозин) та більш переважно цей батьківський поліпептид має принаймні 75 95 тотожності послідовності з послідовністю зрілого поліпептиду ЗЕО ІЮ Мо: 1 (бичачий хімозин)
Наприклад, прийнятним тут відповідним батьківським поліпептидом може бути бичачий хімозин А та як відомо у цій галузі, бичачий хімозин А може мати лише одну амінокислотну відмінність порівняно з наведеною тут послідовністю бичачого хімозину В (ЗЕО ІО Мо: 1).
Як було обговорено вище, у зазначених тут робочих прикладах наведено варіанти застосування поліпептидної послідовності ЗЕО ІЮ Мо: 1 (бичачого хімозину), як батьківського поліпептиду та ці варіанти тут може бути позначено, як варіанти бичачого хімозину.
Відповідно, у переважному втіленні, батьківський поліпептид має принаймні 90 95 тотожності послідовності зі зрілою поліпептидною послідовністю 5ЕО ІЮ Ме: 1 (бичачий хімозин), більш переважно цей батьківський поліпептид має принаймні 95 95 тотожності послідовності зі зрілою поліпептидною послідовністю ЗЕО І Мо: 1 (бичачий хімозин) та більш переважно цей батьківський поліпептид має принаймні 97 95 тотожності послідовності зі зрілою поліпептидною послідовністю 5ЕО ІО Ме: 1 (бичачий хімозин). Може бути бажаним, щоб батьківський поліпептид був зрілим поліпептидом з послідовністю ЗЕО ІЮО Мо: 1 (бичачий хімозин).
Як зрозуміло фахівцям в цьому контексті, зазначений тут відповідний батьківський поліпептид, який має хімозинову активність може, наприклад, також бути варіантом відповідного хімозину дикого типу.
Спосіб отримання продукту на молочній основі.
Як було обговорено вище, композицію, яка містить два або більше різних коагулянтів, як тут описано, може бути застосовано у відповідності з зазначеним, наприклад, для отримання бо бажаного продукту на молочній основі (як-то, наприклад, сирного продукту).
Як було обговорено вище, аспект винаходу стосується способу отримання харчового або кормового продукту, який полягає у додаванні ефективної кількості коагулянтної суміші, як тут описано, до харчового або кормового інгредієнту (інгредієнтів) та у здійсненні додаткових виробничих операцій для отримання цього харчового або кормового продукту.
Переважно цим харчовим або кормовим продуктом є а продукт на молочній основі та спосіб його отримання полягає у додаванні до молока ефективної кількості коагулянтної суміші, як тут описано та у здійсненні додаткових виробничих операцій для отримання продукту на молочній основі.
Застосоване молоко може, наприклад, бути соєвим молоком, овечим молоком, козиним молоком, молоком буйволиці, самиці яка, лами, верблюда або коров'ячим молоком.
Зазначений продукт на молочній основі може, наприклад, бути ферментованим молочним продуктом, кварком або сиром.
Також винахід стосується наступних пов'язаних з цим загальних аспектів:
Аспект 1. Композиція для згортання молока, яка містить суміш двох або більше коагулянтів з різним відношенням С/Р.
Аспект 2. Композиція для згортання молока, яка містить суміш двох або більше коагулянтів різного походження, як-то, наприклад, хімозину верблюда та бичачого хімозину.
Аспект 3. Композиція за аспектом 1 або 2, в якій ці два або більше коагулянтів мають різну загальну протеолітичну активність, наприклад, з різницею принаймні у три рази.
Аспект 4. Композиція за будь-яким з попередніх аспектів, яка містить принаймні один коагулянт з відношенням С/Р, яке перевищує 5 ІМСО/тО та принаймні другий коагулянт з відношенням С/Р, яке складає 0,05-1,5 ІМСО/ти.
Аспект 5. Композиція за будь-яким з попередніх аспектів, яка містить один коагулянт з відношенням С/Р, яке перевищує 5 ІМСШ/ту, масова частка якого складає принаймні 50 95 та другий коагулянт з відношенням С/Р, яке складає 0,05-1,5 ІМСО/тИ, масова частка якого складає принаймні 15 95, причому зазначена тут масова частка є ознакою концентрації одного коагулянту відносно загальної кількості коагулянту.
Аспект 6. Композиція за будь-яким з попередніх аспектів, яка містить суміш двох або більше коагулянтів, отриманих з двох або більше різних тваринних або мікробних видів або родів.
Аспект 7. Композиція за будь-яким з попередніх аспектів, яка містить один коагулянт з відношенням С/Р, яке перевищує 5 ІМСШ/ту, масова частка якого складає принаймні 70 95 та другий коагулянт з відношенням С/Р, яке складає 0,05-1,5 ІМСО/тИ та масова частка якого складає 15-30 95, причому зазначена тут масова частка є ознакою концентрації одного коагулянту відносно загальної кількості коагулянту.
Аспект 8. Композиція за будь-яким з аспектів 1-7, в якій принаймні один з двох або більш різних коагулянтів отримано з коагулянту, отриманого від корови, буйволу, верблюда, свині, щура, вівці та/або з мукоральних грибів.
Аспект 9. Композиція за будь-яким з попередніх аспектів, яка містить молоко, як-то, наприклад, соєве молоко, овече молоко, козяче молоко, молоко буйволиці, молоко самиці яка, молоко лами, верблюже молоко або коров'яче молоко.
Аспект 10. Композиція за аспектом 9, в якій молоко є коров'ячим молоком.
Аспект 11. Композиція за аспектом 9 або 10, в якій молоко містить приблизно 3-5 95 білка, як-то 3,5-4,5 95 білка, як-то 3,8 95 білка.
Аспект 12. Композиція за будь-яким з аспектів 9-11, в якій молоко містить приблизно 1,5-5 95 жиру, як-то 2,5-4 до жиру, як-то 3,5 95 жиру.
Аспект 13. Композиція за будь-яким з аспектів 1 до 12, яка є сумішшю бичачого коагулянту та коагулянту іншого походження або є сумішшю коагулянту верблюда та коагулянту іншого походження, як-то, наприклад, сумішшю бичачого хімозину та хімозину верблюда.
Аспект 14. Харчова або кормова композиція, яка містить суміш двох або більше коагулянтів відповідно за будь-яким з попередніх аспектів.
Аспект 15. Харчова або кормова композиція за аспектом 14, яка є м'яким сиром, як-то, наприклад, сиром брі або камамбером.
Аспект 16. Харчова або кормова композиція за аспектом 15, в якій м'який сир є м'яким сиром, який дозріває з поверхні.
Аспект 17. Застосування композиції за будь-яким з аспектів 1-13 у процесі виготовлення м'якого сиру.
Аспект 18. Застосування за аспектом 17, в якому композицію відповідно за будь-яким з аспектів 1-13 додають до молока не пізніше, ніж через 20 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 15 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 10 хвилин, як-то, наприклад, не 60 пізніше, ніж через 5 хвилин після додавання однієї або більше заквасочних культур.
Аспект 19. Спосіб отримання продукту на основі молока, який полягає у додаванні ефективної кількості композиції відповідно за будь-яким з аспектів 1-13 та у здійсненні додаткових виробничих операцій для отримання продукту на молочній основі.
Аспект 20. Спосіб отримання ферментованого молочного продукту, який полягає у застосуванні наступних операцій: (а) додаванні заквасочної культури до молока та інкубування цієї культури при температурі 28-42 "С протягом принаймні 5 хвилин; (5) додаванні композиції за будь-яким з аспектів 1-13 із загальною концентрацією 2000-3500
ІМСШИ/Л 001; (с) додатковому інкубуванні культури при температурі 28-42 "С протягом принаймні трьох годин; (а) відокремленні сироватки з отриманням сиру.
Аспект 21. Спосіб за аспектом 20, в якому композицію за будь-яким з аспектів 1-13 додають не пізніше, ніж через 20 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 15 хвилин, як-то, наприклад, не пізніше, ніж через 10 хвилин після додавання однієї або більше заквасочних культур.
Аспект 22. Спосіб за аспектом 20 або 21, який застосовують для отримання м'якого сиру, як- то, наприклад, сиру брі або камамберу.
ПРИКЛАДИ
ПРИКЛАД 1: Вирівнювання та нумерація білкових послідовностей хімозину та варіантних послідовностей.
Білкові послідовності хімозину було вирівняно із застосуванням алгоритму СіиетаїМу, наданого Європейським інститутом біоінформатики (ЕВІ) (див. "ЕВІ, засоби множинного вирівнювання послідовностей, СІ О5ТАЇ МУ", пЕр:/Ллимли.ері.ас.ик/Гооі5/мза/сіивтам/2/), як описано у вид. Гагкіп МА, ВіасК5Нівід5 с, Вгомуп МР, Спеппа В, МесСенідап РА, МеУмїПат Н, Маїепійп Е,
Маіасе ІМ, М/їїт А, Горе А, Тпотрзоп 90, сірзоп ТУ, Ніддіпз ОС (2007). Віоіптоптаїййсв 23(21), 2947-2948.
Параметри налаштування алгоритму Сіеїаму2 для множинних вирівнювань послідовностей були наступними: матриця порівняння амінокислот - ВГОБОМ, штраф за відкриття пролому -
Зо 10, штраф за продовження пролому - 0,05, проміжок між проломами - 8, без кінцевих проломів, ітерація - відсутня, максимальна кількість ітерацій - 1, кластеризація - МУ.
Як зразкову послідовність було застосовано послідовність препрохімозину бичачого хімозину В (інвентарний номер бази даних сСепрапк РОО794, тут наведено, як ЗЕО ІЮ Мо: 1), в якій М-кінцевий метіонін має номер 1 (МЕАСІ...... та С-кінцевий ізолейцин (в білковій послідовності ...!АКАЇ) має номер 381. Вирівнювання варіантів було здійснено у порівнянні з бичачим препрохімозином В та нумерацію залишків було здійснено відповідно до подібного залишку бичачого хімозину.
ПРИКЛАД 2: Визначення специфічної активності хімозину. 2.1 Визначення активності згортання молока.
Активність згортання молока було визначено із застосуванням способу КЕМСАТ, який є стандартним способом, розробленим Міжнародною федерацією підприємств молочної промисловості (спосіб ІОР).
Визначення активності згортання молока було здійснено від часу, потрібного для є появи видимої флокуляції стандартного молочного субстрату, отриманого з низькотемпературного молочного порошку з низьким вмістом жиру у розчині хлориду натрію з концентрацією 0,5 г/ л (рН 2 6,5). Час згортання зразка згустку порівнювали з часом згортання стандартного зразка, який мав відому активність згортання молока та який мав такий саме ферментний склад відповідно за Стандартом ІБ 110В, як і досліджуваний зразок. Вимірювання зразків та зразкових стандартів було здійснено в однакових хімічних та фізичних умовах. Величину активності варіантних зразків було скориговано до приблизно З ІМСО/мл з допомогою 84 мМ оцтовокислого буферу, рН якого складав 5,5. Після цього 200 мкл ферменту було додано до 10 мл попередньо нагрітого молока (32 "С) в скляній пробірці, яку було розташовано на водяній бані з підтриманням постійної температури у 32" С х 17 С та постійним перемішуванням.
Загальну активність (силу) згортання молока для згустку було обчислено у Міжнародних одиницях згортання молока (ІМС) на мл відносно стандарту, який мав такий саме ферментний склад, як і зразок відповідно за наступною формулою:
Сила у ІМСО/мл - 5 стандарту х Тстандарту х О зразка
О стандарту х Т зразка
З стандарту: Активність згортання молока міжнародного зразкового стандарту для згустку. бо Т стандарту: Час згортання в секундах, отриманий для стандартного розведення.
Ор зразка: фактор розведення для зразка.
Ор стандарту: фактор розведення для стандарту.
Т зразка: Час згортання в секундах, отриманий для розведеного згустку зразка від початку додавання ферменту до часу флокуляції. 2.2 Визначення загального вмісту білка.
Загальний вміст білка було визначено із застосуванням набору Ріегсе ВСА Ргоївїп Авзау Кії від компанії Тпепто Зсіепійіс відповідно за інструкціями від постачальників. 2.3 Обчислення специфічної активності згортання.
Специфічну активність згортання (ІМСО/мг загального білка) було визначено шляхом ділення активності згортання (ІМСО/мл) на загальний вміст білка (мг загального білка / мл).
ПРИКЛАД 3: Визначення протеолітичної активності.
Загальну протеолітичну активність було виміряно із застосуванням міченого флуоресцентною міткою казеїну Водіру-РЇ,, як субстрату (Еп2:Спек; Моїесшаг Віоргобе5, Еб638).
Застосування казеїнових похідних, значну частину яких було помічено нечутливою до рн зеленою флуоресцентною міткою Водіру-РЇ призвело до майже повного зупинення реакції флуоресценції кон'югату з вивільненням флуоресцентної мітки Водіру-РЇ. за рахунок гідролізу, каталізованого протеазою. Цей спосіб є дуже чутливим, як і було потрібно для цього експерименту, оскільки сполука СНУМАХ М мала найнижчу загальну протеолітичну активність серед всіх досі відомих коагулянтів.
Цей аналіз було здійснено у 0,ю2 М фосфатному буфері, який було доведено до бажаного значення рН з кінцевою концентрацією субстрату у 0,04 мг/мл. Перед перемішуванням однієї частини субстрату з однією частиною ферменту, обидві з яких було отримано у фосфатному буфері, всі ферментні варіанти було нормалізовано до величини у 50 ІМСШ/мл (відповідно за
Прикладом 2). Потім субстрат та фермент змішали разом у лунках 96-луночних мікротитрувальних планшетів РісогоМипс"М, які було запечатано та піддано інкубуванню при 32 "С протягом 60 хв. Після інкубування планшети розпечатали та флуоресценцію дослідили з допомогою флуорометру.
ПРИКЛАД 4: Оцінка двох типів коагулянтної суміші: суміші хімозину верблюда та бичачого хімозину та коагулянтної суміші хімозину верблюда та грибів МОсог міенеї.
Зо Застосування коагулянту з великим значенням відношення С/Р, як-то сполуки СпуМахеМ у технологічному процесі отримання м'якого сиру є цікавим з кількох причин та деякими з найважливіших з них є збільшення терміну зберігання, зменшення гіркого смаку, збільшення вилучення жиру завдяки підвищеній стійкості при різанні, зменшення періоду відновлення після підкислення, особливо у разі застосування штамів з великою швидкістю росту.
Проте загальним зміненням, яке в деяких випадках можна розглядати за замовчуванням було збільшення твердості сиру.
З метою зберігання переваг, обумовлених великим значенням відношення С/Р, як-то відношенням С/Р для сполуки СпумМмахеМ та зменшенням твердості сиру було здійснено визначення суміші СпумМмахаМ та інших коагулянтів з нижчим відношенням С/Р.
Було отримано м'які стабілізовані сири типу брі з різними відношеннями коагулянту та здійснено аналіз цих сирів після їх вилучення з прес-форми та протягом терміну зберігання.
Молоко: (однакове для всіх досліджень) - Білки: 36,2 г/л (без додавання сироваткового протеїну) - Жир: 61,7 г/л - Відношення жиру/білка: 1,7 - Пастеризація: 72 "С/20сек - Загальний об'єм / дослідження: 500 л (5 резервуарів по 100 л) - Доданий Сасі2: 15г 100 л - Температура під час додавання коагулянту: 40 "С - рН під час додавання коагулянту: 6,3 - Доза коагулянту: 3000 ІМСИО/Л100 л молока (відповідно до 8287 ІМСИ/ г білків).
Коагулянтні суміші: - Перший досліджений тип суміші: коагулянт СпуМах ФМ, який містив 20 95, 30 95 або 50 95 препарату СпуМахб (бичачий коагулянт з низьким відношенням С/Р), позначений на Фіг.2-5 червоними лініями з квадратними відмітками. - Другий досліджений тип суміші: суміш препарату СпуМмахеМ з 20 95 або 30 95 коагулянтом
Наппійазеф (коагулянт з грибків МОсог міепеї з низьким відношенням С/Р), позначений на Фіг.2-5 блакитними лініями з відмітками у вигляді ромбів. - Застосування чистого препарату СпуМмах?М з тими ж саме дозами та параметрами, як бо стандартного зразка. Цей зразок, який було застосовано для обох типів суміші та який не містив інших, ніж СпуМахеМ компонентів було наведено в першій колонці таблиць, включених у Фіг.2-
Результати: (Вибрано середні значення для 5 резервуарів) - РН під час вилучення з прес-форми (Фіг. 4): помічено легку схильність до набуття нижчого значення рН під час вилучення з прес-форми у разі збільшення компоненту з низьким відношенням С/Р для обох типів застосованих коагулянтів з низьким відношенням С/Р: від. рн 5,06 для зразка чистого СпуМахеМ до рН 5,03 для суміші з 20 95 коагулянтом НаппіїазефФ та зберігання рН на позначці 5,06 для суміші з 20 96 коагулянтом СпуМах?). Наближаючись до точності рН-метру, ця мінливість все ж була значною, оскільки вона є середнім значенням для 5 резервуарів. Для сумішей з 30 95 коагулянтом НаппіїазефФ рН складав 5,03 (так само, як і для суміші з 20 95 коагулянтом Наппііазеф)) та для суміші з коагулянтом СпуМахое він складав 5,02 (також подібно до результатів, отриманих для сумішей з 20 95 та 30 95 коагулянтом Наппіїазеф)).
Показник рН для 50 95 суміші з коагулянтом СпуМахФф був подібним для рН для 30 95 суміші. Це свідчить про те, що застосування суміші коагулянту з великим відношенням С/Р, як-то
СпумМахеМ та коагулянту з низьким відношенням С/Р, як--о СпуМах? або Наппіазхе?Ф має схильність до зниження величини рН під час вилучення м'якого сиру типу брі з прес-форми. Ця схильність вже спостерігається при застосуванні 20 95 коагулянту НаппіїазефФ, тоді як для коагулянту СпуМахоб її можна побачити лише у разі застосування більш, ніж 30 95 концентрації. - Текстура: Вимірювання текстури сирів після їх 25-денного зберігання було здійснено із застосуванням пенетрометру ТАХТА з гільйотинним різаком. - Твердість (Фіг. 2): Було чітко спостережено зменшення твердості при зростанні у сумішах відсоткової частки коагулянту з низьким відношенням С/Р з наступним отриманням сталого стану для великих відсоткових значень. Для сумішей з коагулянтом СпуМах? твердість зменшувалася від 1325 г для тестового зразка чистого СпуМмахеаМ до 1180 г для 20 95 суміші та потім до 1022 г для 30 95 суміші. Для сумішей з коагулянтом НаппіїазефФ твердість одразу зменшилася до 1050 г у разі застосування 20 95 суміші та потім трималася приблизно на такому саме значенні (1053 г) у разі застосування 30 95 суміші. - Липкість (Фіг. 3): Липкість помітно зростала у разі змішування СпумМахеМ з коагулянтом,
Зо який мав низьке відношення С/Р. Для 20 95 сумішей було помічено легке зростання липкості для обох типів коагулянтів з низьким відношенням С/Р: від показника у 50 д/5 для зразка чистого коагулянту СпуМахеМ до 72 д/5 у разі застосування 20 956 коагулянту СпуМахо та 59 д/з у разі застосування суміші з 2095 коагулянтом НаппіїазефФ. Ці значення відповідають наявності прийнятній липкості отриманих сирів. Потім, у разі застосування обох типів сумішей з 30 95 коагулянтом було досягнуто значення липкості, які наближалися до 95 (96 для СпуМахФф та 92 для Наппіїазеф) та ці величини були чітко пов'язаними з липкістю, яка є неприйнятною для сирів. - Оптимальна текстура: Метою цього експерименту було зменшення твердості, хоча липкість самого продукту не була бажаною характеристикою. Отже, оптимальними сумішами для покращення текстури сиру були обидві типи 20 95 коагулянтів з низьким відношенням С/Р. - Суха маса (ОМ) продукту при вилученні з прес-форми (Фіг. 5): У разі застосування сумішей було спостережено збільшення сухої маси у порівнянні зі зразком чистого коагулянту
СпумМахеМ. Для обох типів сумішей при застосуванні 20 95 та 30 95 коагулянту було виявлено збільшення сухої маси (ОМ) продукту при вилученні з прес-форми, яка від показника у 48,2 95 для зразка з чистим СпуМахеМ у разі застосування 20 95 сумішей збільшилася до 49 95 для суміші з СпуМахб та до 50,5 956 для суміші з Наппііазефб та у разі застосування 30 95 сумішей показник сухої маси відповідно сягнув 52 95 для суміші з СпуМахФ та 52,5 95 для суміші з
НаппіїазеФф). - Порівняння сухої маси з твердістю: Порівнюючи ці результати, отримані для сухої маси продукту з вимірюваннями текстури можна побачити, що навіть якщо сири, отримані із застосуванням досліджуваних сумішей були більш сухішими під час їх вилучення з прес-форми порівняно до зразків, отриманих із застосуванням чистого коагулянту СпуМахеМ, то все одне їх текстура була м'якішою. Це свідчить про те, що змішування коагулянту СпумахеМ з коагулянтами з більш низьким показником С/Р дуже ефективно впливає на зменшення твердості продукту навіть при збільшенні сухої маси. - Оптимальні результати: З допомогою цих результатів можна побачити, що оптимальне відношення для суміші СпуМах?М та СпуМахФ), а також для суміші СпуМах?М та НаппіазеФ наближається до 20 95 зі збереженням переваг коагулянту з великим відношенням С/Р та зменшеною твердістю у разі, коли вона є небажаною.
ПРИКЛАД 5: Визначення коагуляційної поведінки бичачого хімозину, хімозину верблюда та сумішей хімозинів.
Для того, щоб простежити за коагуляційною поведінкою дослідники застосували прилад
СНУМОдгарп (запатентований компанією Сг. Напзеп), який дозволяє здійснити оцінку часу флокуляції молока та розвиток твердості сирного згустку під час виробництва сиру.
Програмне забезпечення цього приладу також призначено для вимірювання швидкості розвитку білкової мережі сирного згустку та з його допомогою змінення показників щільності молока та в'язко-еластичності сирного згустку перетворюються на зручні для користувача графічні дані, які може бути застосовано для характеристичного аналізу коагулянту або для визначення оптимального часу розрізання сирного згустку.
З допомогою приладу СНУМОдгарпФ вимірюють час флокуляції молока, твердість та розвиток згустку та швидкість розвитку білкової мережі.
Отримання молока.
Було отримано контейнер (500 г) з молоком відповідно до мети застосування молочної композиції, який перед додаванням сироватки спочатку нагріли на водяній бані протягом години до температури згортання сичужного згустку у 38 "С. Перед застосування молока було здійснено контроль та реєстрацію його рН.
Склад молока.
Було застосовано збагачене молоко, яке містило 3,895 білка та пройшло високотемпературну (30 с при 90 "С) обробку. рН під час сичужного згортання: 6,18 при 38 "С та 6,28 при 4 "С.
Температура сичужного згортання: 38 "С. Цей тип молока відповідає складу молока, застосованого для отримання м'якого сиру молочного типу.
Отримання коагулянту.
Було перевірено три коагулянтних розчини, як-то хімозин верблюда (СпуМах? М1000), бичачий хімозин (СпуМах?аю) та СпуМахМз5оїй (суміш 80 95 хімозину верблюда (СпуМах? М1000) та 2095 бичачого хімозину (СпуМахФ ж-)). Кожен коагулянтний розчин було отримано з активністю у 20 ІМСО/мл, розчиненим в теплій воді. Метою цього розчинення було надання
Зо молочному зразку такої кількості коагулянту, якої буде достатньо для забезпечення його розповсюдження.
Кожен коагулянтний розчин було додано до молока (1 мл розчину / 500 г молока, з отриманням таким чином активності коагулянту у 40 ІМСО/л). Після додавання коагулянту зразок перемішували 30 секунд шляхом обертання. Після цього по 10 мл кожного коагулянтного розчину було завантажено у прилад Спумодгарй.
Результати.
Як зображено на Фіг. 7, швидкість коагуляції у випадку застосування суміші бичачого хімозину та хімозину верблюда (СпуМахмМ5ой) перевищує швидкість коагуляції, спостережену у випадку окремого застосування хімозину верблюда (СпуМах? М1000) або бичачого хімозину (СпумМахж). Це є дуже несподіваним явищем, оскільки кваліфікований вчений очікував би, що активність суміші буде знаходитися у відповідності з середньозваженим значенням двох компонентів, включених до її складу.
Посилання: 1: М 002/36752А2 (Снпг. Напзеп) 2: Зи2иКі єї а!: Зйе дігесієд тиїадепевів гемеаїв5 Тшпсійопа! сопігіршіоп ої Тиг218, Гуз220 апа
Азр304 іп спутобвіп ("Сайт-спрямований мутагенез виявив функціональне значення амінокислот
Тпг218, Гуз220 та Азр304 в молекулі хімозину"), Ргоївіп Епдіпеегіпод, мої. 4, хдапиагу 1990, радев5 69-71
З: Би2икі еї аі!: АМегайоп ої саїауїс ргорепіез ої спутозіп Бу віїе-дігесієй тиадепевів ("Змінення каталітичних властивостей хімозину шляхом сайт-спрямованого мутагенезу"), Ргоїеїп
Епдіпеегіпо, мої. 2, Мау 1989, радез 563-569 4: мап деп ВгіпкК еї аїЇ: Іпсгеахей ргодисіоп ої спутовзіп ру діусозуїайоп ("Збільшення вироблення хімозину шляхом глікозилування"), Чоцигпа! ої БіоїесппоЇоду, мої. 125, Зеріетрег 2006, радез5 304-310. 5: Рій еї а!: Ехргезвіоп апа сНагасієгізайоп ої спутовіп рН оріїта тшиапів ргодисей іп
Тгісодепта геезеі ("Експресія та характеристика хімозинових рН-оптимальних мутантів, вироблених грибами Тгісодепта геезеї), Уоигпаї ої Біотесппоіоду, мої. 28, Магсп 1993, раде5 69-83 6: М.О. М Шіатв еї а!: Миїадепезів, Біоспетісаї! спагасієгігайноп апа Х-гау зігисішга! апаїувів ої роїпі тшиїапів ої Ббоміпе спутовіп ("Мутагенез, біохімічна характеристика та рентгеноструктурний аналіз точкових мутантів бичачого хімозину"), Ргоївіп епдіпеегіпд дезідп апа 5еїесііоп, мої. 10,
Зерієтрег 1997, радез 991-997 7: Зігор еї а!: Епдіпеєегіпд епгуте з!Їбв5іїє зресіїісіу: ргерагаїйоп, Кіпеїйс спагасієгігайноп, апа х- гау апаїувіє аг 2.0 АМС гезоїшіоп ої Ма11трпе 5йе тшарвеа саїї спутовіп ("Субсайтна специфічність штучно розробленого ферменту: телячий хімозин з мутацією у сайті Ма!111рне та його отримання, кінетична характеристика та дані рентгеноструктурного аналізу з роздільністю 2,0 А"), Віоспетізвігу, мої. 29, Осіорег 1990, раде5 9863-9871 8: Зуираппеє еєї а!: 5йе-зресіїс тшиайопв ої саїї спутовіп В у/пісй іпїсепсе тіїК-сіойіпу асімну ("Сайт-специфічні мутації телячого хімозину В, які впливають на активність згортання молока"),
Еоса Спетівігу, мої. 62, дипе 1998, радез 133-139 9: 2йапдуд еї аї!: ЕРипсійпа! ітріїсайопе ої аібийіаеє Бропа, Сувз45-Субз50, іп тесотбіпапі ргоспутовіп ("Функціональні наслідки дисульфідного зв'язку Суз45-Субз50 у рекомбінантному прохімозині"), Віоспітіса еї Біорпузіса асіа, мої. 1343, Оесетрбег 1997, радез 278-286. 10: М/О2013/174840А1 (Снг. Напзеп). 11: М/О2013/164479А2 (О5М). пЕевлІіК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ «10» КР. ГАНСЕН АК «об Сумі кімозинів З покращеними впаставостями згортання молеака ех РОТ хів й «170» Багемумй вус 3.5 «Де 1 «дії 333 «а» РЕТ «Віде корова «Юх ї
СЯ мо УвВЕ Аа ек ма Рез іео Ти Ав тугі зи Авр Бет СНИ ТуУг
З 5 Ко 15
Вне Су ув На бує без су ТК бло був синю Ре т Уві Кей о 278 З
Рна Аар' тт сМу Баг Зет Авр Ре Тр ові Ето Зеє На Ту Сув Кук
З5 40 45 дегАвп АВ ув уз Ави Нів СЯ Аго Рв Азов Ето Ага ув бег БОГ
БО в БО
ТвеВпе іп Авп С ец му ув то ен ве Не БЕ Ту слу ТР Су
З 70 та ща рег ме сна Су пе ев Су Ту Авр о Гвг маі гл ма БегАхи Пе о За 5
Уві Аво Це іп зі Тнг Ма СУ Сео бер Те й Сто го Му дер що 305 зо ча вне Тиг Туг Аа со пе Ар Оу Ма ву Зі Мега Туг то чів 120 125
Бе во АВ Зег Тут вег Пе Ро ув ме Ар Азв Мо Ме Ава 130 135 Зав ато Нв ви уві Ав СБ Авр ви Ре Баг уві тує МО Авр Ага Ал 150 5 150
Су в є Зег Мега Тег іви (в Аа Не Ар то баг Тує Тут 5 170 175
Твгсну Бек бе Ні Тр мні Рез а тах маса ма тує тв Ай
Во 185 18
Віа Те Узі Авробеє Маг тА Пе жна С; а ве Ма Ав стув СМ т95 дю и
Ср іх Суз СІ ла пе ем Азот Об: Те бег ув Кей Уві СТУ 51 как о
Бгто же Зег Аво Ле ви Ави Це с і Аа це у АВ ТО «5 З а ай
Ава Зі Туг сну З Ре Ар Не Аво Суз Азр Ав де) Заг ут Ме 745 2 255
Бета ма еве св Ме Ав Су су МН Туг БР еу Те ето 259 ВЕ 27
Заг Ав Ту Тит Бех Чіп Авр си Су пе ув ТБг Бег (іу Ва ія
МІВ Ко 285
Бек іЗи Ап Ні щег Сі ув Тер йе ви Ох Акр Ма Єна Це Ага за Кз З
Со тує Туг бБег ча Не Ав А А Азп Ави Гец ув ом вм Аве 05 кв: З ЗО уж Ана це «рід» 2 «Віа ЗХ «пі» РТ «дах СуУйВО а са УВІ АМа же у ето ви НВ АБА ГуУг іо Авроак В ТМ і є їв 16 нев сну мух Пе Туг де Су Те бує Б ЗБ Ва вне тн Уві ви
Рнедев не Оу Бета Аво не тр УВЕР беге Гук Сувіув
З Б 55
Кег АП Вів ув ув Авл МНів з Ага Ре дер Руна дух г Баг
Б 5 50
Тв Ба св Ал а Сх Був б без Ба» (ей тує єму ТНК Оу це 76 75 ща
За ме ою ЗУ Пе ке у Тус Ар пе а ТУ У Заг Ада й що що За
УВІ Авр бе Скп С Тк УЖЕ СТУ Се баг Твій о го Сх Авр 1 зах о зві вна Ту Гуг Аа Се На йо СПУ Ве в СУ Ме Аа тує Ето
Не 1520 1-5
СахгівцАнв ще с Туг З па Ето УВП АБО ав МВ ВК АЙ 1 135 140
Ага НЕ еш ма Ав стіп Аярівм не Бак ма Тут Ме Аво то Аеп 145 10 155 10 а ЗШ бе Ме ен тн ви су Авіа Пе Авр го Бек Тут Тут 1655 370 176
Тис Ох Заг ія Нів Тр ма! Рто ма! Твг А с са тує їтр в 180 185 180
Річна Тег Уві АвБр Бег Не Тег а Зег Су лав аг ма) Ада був С т 00 що
СУ Ву св ій Ада Ме бе Авр ТйК Слу Тв Заг ів бен маг у 215 2
Рго зе Баг Авр а Се Ав Пе ства Ава Ве Кхру ема тт -о 23 3 Кв
АзА СНИ Гук СВК ОВ еле Аво Пе Азо Суз Аво Авп во Бех Тут Ме 250 255
Руе Тк ма Ме! Єна о Ме вл СУ і ув Ме Ту Ето і во Те Кто во 255 то
Зег Лів Тук Тнг Зате Са Авр ій ЗМ Ре був ТАК баг іх Ре ій жо 80 258 зе Зівдзп Ато Зег 3 Зі Тр Не Гео лу Ар ча Не Пе Ах 290 285 00 (НИ Туг Туг баг МАЕ Ре Авр Аку Айва Лю Ази ем Мар М ви дів 305 мо 35 ЗО
Муз Аа ее
«102 3 «и» ЗАЗ «Ех ножа «дО З су до ма Аа ве Уві го во Те Аве Тут Кер дво Яегон Тек
З ї 10 ї5
Не Су ув Пе тубі у Тег бе Бк б Яма Те Ма! дви 20 ше За
Рів лво Ті су Заг Заг Авр Ріо Тер Маг го Зег Пе Гук ув ме
За «п «5
ВегАва а сувітв Ав Нів біл чо Ре Ар то вед був Баг бог
Б ва
Тег ей й Авп Се Му ук Ру ам бог Ве Аг Тр Ск ТЕ Км ва та ТВ во
Же Мі Сі Зх Б ви Су Тут Авр Те уз ве має Бак Ав Те 85 що о
Уа ав Ттве си СА Те має іх де Зак Тг Сів С то су Авр ню 65 на ча! не Ту Тег АВ Си Ра ав СТУ Бе ев Мей Аа кує Ро че 1 і25
Кегіви Аів Зег Си Тег Бег уві Ро щі Ре Авр АБ Меї Ме Ахр 130 т35 140 гад ам ча Аа Ні Азов Ме Баг уві Тут Мет Ар Ага Ав 145 1 35 18
Су се Су Бег Мак Бе тля Гео сну йдя Не люр роз зе тує Туг тво тка їв
Твеову бекі во Мів Тер маг екв мав тег бе сли а Тут бр Суть 185 чо що
Бізе Ті ні ву мат ме Я Ве Бак Су Ав ма! МВ аа сту тва ою ОБ су Су Суя сти Ага їв Ти Ар Те ЗВУ ТИХ мог і уж їж чав С
КІ 215 чо
Без Баг Заг Авр Ще ви Ави Пе С сп ія Пе Су дія Кк ів вай о я тА
Авп вів Бук Су Сі ре Арі Авро су Авро егіво Зег ет Мей заБ зо 255
Ето Тк ма ма Ре СНО Пе за Су ув МК Тут чо Бец Ті РУЮ еВ о ет
Ти АВ Ту не За зв СН З СНУ Рие Сує Тв ес а сни т75 28 Во
Єіж СЯМ Дом Ніх бек Ні Си Тур Ле бе сем Аер мВ не Пе Акад
Р тя Зо
Со Тут Бук баг УВІ Бе мер АТО Мід Ав АБИ і жа м Су бе Ада
З Зо З15 зго
Їжа Ав Пе «й й «ВІ 323 «ій ВК «10 вівця
«Оп 4
Ху Са Уві Аів бБег Уві Рго ви Те Ав Туг Се Авродаг ів Ту х 5 18 т5
Ге СУ уз о Туг бе Ск Ту Ру Рез ій Сн пе Тесей цем 2-0 25 За
Ева дво Ту су Вега Аза на Тр а Рго Зв Ме Тугсувіув
Кі я «В цеси Ав Суз ув АБА НВ З Аг Ра лад Ро ллє вес Ве ня 50
ТУ Ре С Ан ме Су Гуя Рез ен бек бе Ага Тут іжЖ Тв ЗУ
Ба 7 75 во
Берг Мей Сук (ОБУ КВ ен слу Тут аер Тр ма! й УВЕбаглев Пе ва ва вк
Аве Не а се тн ма; Сиу бе Зак ве ім Ре ру Ар що тк о чаї Рі ТВ ту АК о Ре Ав ЗУ Не Сем Му Мага Тут га 150 128
Бегіви А баг Ох Тук Заг М Рую уд Бе АерАві Ме Ме Ар 133 15 145 зга Аг вв УВІ Ав Сі-Авр бе Ре Берг уві Тут Ме Ар Ат баг ї85 15 155 150 ма С дес Бе ев Тв ец ЗМ Аа пе Аве Рг баг тує Ту 155 їй 375
ТІК СмУ Бегіе Нв Торі ето уві Тог ее сів і ув Ту тр и
ВЕ 185 що
Би тн ам вер бег ме Ту Пе бе Спбу Аа мМяК Уа! Айя був СО 185 ОО 205
УВУ Су Се Сіл Ада бе Бен дер Твг сну Те Зег ря фе ча Су 2 21 Ка та Баг Мет Ар Пе ви Авт ре Стр СН АКа Пе СУК іа Кг Си еВ 2 35 тв
Авп сно Ту Му Со РНе ер Пе Авр уз Ар Бек 3іем Бех Заг МК 245 я ЕВ
Ба Тег а Біне СВО Пе делі СУ Був Ме Тег Руз бе Те Ре
Ба та та
Тег Ав Тук Ти ве яна с СО Ре був ТП ба сму Бне Сщв та зай 285
Ск со Аве Нв Жех Ме СА Тер пе ем Су Ар Уві ве Не Ал їн Туг Туг Бек УЗ Ро ларі Ако Аве яв лет ем МВ! Ж Се Аа
Зо о как ЗО ух Аа Пе «Ві Х «11» 383 «Іри РТ «3» верблюд «Кей
Язж ув Ма Ав Ало СО Ко ви ТВе бе Туг і ви Ав Вега тує і Б в те
Рана Су був Бе Туг Ве СМ Тв Ро з сів іш Рре тт Уа ма! м 25 Зо
Ріє Аве Те Су Бе ек Аа Сена Ттромаі Ру Бек Ве Тук суз був
ЗВ чо «5
ЗегАча УВІ уз бух яп На Ні Агу не Ази Бгто ео ув бЗег Бет ха Ба 5
Тк не Агу Ази же СК Іа Ко Бе чек Це М Ту СК ТЕ сне 85 70 75 що ет Ме с МУ ве бео СИ Туг Ав Тв щі Торг має яма деп Не йо во Есе
Уа Ар був Аа З Тиг і у мем Бег Тк си си Ро см є о ТОБ о ча Ме гАг мг Заг со не Ав су Не Ге Су Бе АВ Тег Ро в 1320 1265 ех с ед Аба Заг вм Тут ет Ма! го УВІ ЕТ АерАви Ма Ме Ар 130 За 140
Ако Нів Ге мя Аж Аа бр і ем ре бек зі Ту Ме? Авр Аг) АБИ
ТЕ То 155 1650 су Спа Су Зег Мей це твг ау у вія пе Аво Рго Ваг т Туг 155 170 175 "Тк СВУ Ваг ес ів Тр мі Раз МТК ев с ВИ Тут Тр ів во 185 ща
Бра т маг Авр дак Уа ЕМ Пе дбав Су маг Ар маг Ар Су Уві 155 за 205
Сх у слив СИ Ав Пе ва Аво Те СИУ ТВ бе Уві дво на Му 2 215 24
Ра зе ЗегАвр Ме во ув бів й Ме іа ее СУ Аа тег Є -В аа иа ке
Аа АНІ Те СУ СНО Нащо У Ави сту сіу аа Кеш АР ек Ве «ай во ЗБЕ
Бех тк мяї Май Юна С3НУ Пе Ап Су Ану Ар Ту Ро бе Зег Рг 250 це тв 5ег лів Тут Те Багіув Ар ВИ у на Суз Ти Зег оіу Рів ен
ТВ 280 Ф8б
Сіра Ап Ачи бегонію Те бе Су Ар уві Ме йв Ага то 58 ЖЮ с тує Ту заг уд Рів Ар Аг Аа еп Ав Ага Уві у Бам дід 595 мо 515 Зо
Гуз А Це кій» б «ех ей «вій РК «Щі1д» свиня «ох б су сі ма! Аа Заг Ск Рго ле ТА Ази Ту бач Аве ТВ ЗИ Туг 1 5 то 15
РНа ЗУ же Пе тук Це Су ТЕ Рго Руо На Су Реве Тег ма Ма! 2о «В ки
Рна Азв їн Ох Вет бог Сл бе рові Ро бег уві Губсув ух
Зк «а 45 бог АВО ів у З Ави Мі Мі Аг Рене деп то Богів баг Бак що 5 що
Терно з Ав оц Ар іме то Мен бе Не ів ТУ Му ТЕ Ох вк то 75 що
Ява в и Су ББе ви Су Тут Аве Те Уві Ме ча АВОУ Ве
Во що ще чаї Аве Аня ів Сл Тр ма у Бе ак Тк 0 СВи бу век Авр 300 105 о
Ще бе То тук ке СВІ Річе ер су Не бан сЯу ех СУ Туг ев
ЕК 325 125
ЄМ ке А екс ж КН Уг Рто уві пе Аве Ах Ме Ме НІ
ІТ 85 140
А Нівіви ма Аа і Авріви Ре діа Уа тує Ме бег Ату Ана 145 8 358 що дер СНОМ баг Ме би Те ен СНУ Ав пе дер бю ен Тут Тук 55 370 1 "везе бат вм іх Троя Ро ма! Те Ве г екю тує Тр єни 185 185 о вне Тв УВІ Аве Заг УВІ ТВ Ме Авл су Мі ВИ УаЕАа Сурв Ав ее ох
ОВ ОЇ; був Ст Ав Ме без Аво Ти Му Те бог МОЄ ех Ав СНУ 2 215 ко
Різ в бага Ка ян ва Пе сх Мет Ада Ве бік Ав Тв См 285 3 35 ЗО
Зегсчп Туг З І Біне дер Не Аво бух у Бегіви бет бег ме! зав КЕ КЕ
Без те УВУ ее сли Ве Зегііу Аг Ве Туг Кто ам Рах та 280 ява ТО
БегАв ТЯ Тег Аза СНИ Авр Оцу Не ух Те бе СПУ Нв ій тТ5 28 288
Су Ар агіув вег Мів Ткр Не ес у май ма вна Пе КР я 25 З са Кук Тукбег Уві Ре зр Ага Ав Авп ва дл ВЕ СПУ Сен мів
ЗА З 315 зго
Га ща Нев «ИН т «1» З «Віа» РЕТ «Ії: корова «ЩО
Аа Аа Те зАяЕ баг С ЗИ то аю Зп йо Тугі во Аа Тег ї 5 43 т сію тує ра слу Те Ме ре Не СНУ ТК Ро Ав сів Аве бле тн я за а Не Річ Аво Ту сту ее Заг Ап ви Тр мав Ро Бег Не Тег
КЕ 40 я сув Заг Баг ІН Ав Сув ТТГ Ав Нв Азп Аку Веде Ру З А 50 5 ВО баг Ваг Тк Туг (36 Ав Тв Зако Те ів бег бе ТВе Туг Су в то 76 во
Тв оМмУ Баг Ме Те у Ве бе су Тугаво ве ак ем УВЕСНУ
Су Не Заг Ав Те АВ Се Де Бе Су в ет Ба Та Ето що ЩІ о ну че ема ет ЖАВ Рг Ре Аво с Пе Бен Ох Кеш Аня не 320 так "Чукбто баг Це бат Баг Заг А ВЕ Сну ча ее Ар Ав ЗЕ юю 135 тай пев АБО М СНУ в Ві Баг и дерев ве ема тТугсез зе 145 що 155 1850
БегАва сів Слю бе Зу Зеє УВІ Мак бе не іу Ар Не дер бат з зо ЗВ
Зег тує Туг Заг слу Зег еє Ап То уві Бро ме! Яег Май (ів Су 180 185 350
Туг Тер Бій Ме Тег АН Авр Бек іа Ті Ме Ава СМ См Бек Де
Ще Ой в
Ав був Бе лАар св був Сі А Пе Ма Авр мг МУ Те Зегіву «о В хо зви Ав З Рг Те тва Не баг Аа Не Са Зв Туг де С 225 ад 236 450
Аа Заг спи Аво бат Бек Су НН мі мні Ме Зег Сув ек ет Це дае бегіви Рез АБО Це ма ема Тв Пе Авт ох ма ся Туга о 25 ТО заз! бує Бо БегоАВа Тук Це Мем є ще й Су Це уз ше Бег їв а а «пу не СПИ Сну Ме Азо Пе бБег Ту Заг Баг У Ар во тр це
РІ 25 Зо
Сеч бу Ар Уа че ее Аг м Тут Ріє ТНК уві Бе яр аа
Зо зю З За лврАки Се Ще СЯ Ше Ате блю ля Аа
За ЗО «ах В «ау» ЗВ «іш РКК «кі мукоральні грибки кю В діва А Азо кі ес УВІ Азор тя Рез у Тує Тук Аве Рі ля
З В 11 15
Мен о Км Туг Аза а рю май баг Ве сну Тек ета сну С Аве
Ра Зо
Бра ен меш дви РТ АБО ТИ У Заг шеглАяр Те Те мае Ре МНЕ
За я 5
Був Су Сук ТКе ук Бек КМ ЗУ був МВ іє Баг Ат ре Єве дв що ща ща го Баг йів Заг Зе ТК ве ух Аа ТНРАєт Пе Ажи Бец вп Це
70 75 ВО
Тв Туг Оу ти У СіУ Ав Ави СНУ ви Тут На Си Аве Зах На що зо но ів Не СТУ Ар е Тв ВІ ТЕ Бе Слина Сераів тує а АЮ зо 15 ча дви ла Зх Кто Тема ім дію Зв Ре Авл Аа Аво ів ЕБе че 120 325
Кер дер су цем Ре (3іу Аза Аа Ту Ру АвроАв Те Аве Мен Є
За Не БЕЗ. вів сб Тег Су Бек ТВ Турки Тр ані мі Ави бе Туг ув 145 т 155 15 а С ви Пе Бех бак Ето ес на Вес Туг Ме два Ті Ав 185 то ІЗ дек СЗе Тв ЄМу Су ма Уа ре Зі: СЛУ У Ав яп Те лез ем 180 тяВ з
ЄЗБу СЗУ Авр пе вія Тук Те дя щі Маг нах Дю Ту Су у Тут тав що в
Тугене Те Акр Ак ето Мей Тс Р; Це Те ма Аврв СНУ Бег Ав 13 вів 2 вача Ак Рв Заг Аг Би» «Ві ід Ре тн Пе Ажро Тве Му Тк 2? 230 ЗЕ -40
Ав бе не Пе Ме то Зег ву АІЖ АКЯ Баг ув не ма Цив Аа гав тБа веб дів ето АарАВ ТНК ОВ ТВе Зі СМ в Тер УВЕ а бе ув
ВО 285 т із ек Кук іп Аж Закіун Бег те Не Бе Пе ай Ме тує 875 го -85
Весну Заг ес бег Аве ТЕН Те Снм Ме ет У ен уві За ух ке, та За
Ме без бен Ру Уві бар СИ б Аж Сбц Твх сууз М Ре Пе ба
З Зо ЖЕ зЗаа
Кез бо Авр (іх (Му вол Си Тут бе А іх деп ви ре ви
Зо За 335
Рів Ре мні Аби Уві ТугАво пе Сх Ап Авп Ат пе СУ Ка Аа зай ЗВ З
Его ен Аз Баг Аа Тег СЯ Авл ім
Зх зво 10 В «віх ЗО «віз РТ «13» грибки роду Букжнней «Ох
Зак ті (бу Заг Ав Та тв Ту бо Ще Ар Бен оц Ар АврА
Е В 10 ї5
Тук Насті Рез ма ав Не су ТО Ру Авра сНа Тк зіву еп бак о 2 ча
Аврене Ако Тін ОМ Бег БегАяр и То МАЕ Бне бек Бегон Тве 0 4
ТЕ АВ Баг сь ма Ар їх СНИ ТРК Ме Ту Те Різ Заг ід аг 5 Ба о
Тв те А іже во Се же у Аа ТНК гра ее Зв Ту СПУ ве КЕ т що
Авр Су баг Заг Бе Заг Су Ар ма! Тут ТНгАвр Тве ві Бак уві во ва ЕІ. 3 Су ви Тег маг тег сх іа Ав Ма С бет лів ув св щі а те на
Бас бах Бе бю Те ЗШ Адо бог Те Пе Авр 3у Се ви Сх ге
ЕК 120 50 іа ее Баг ТРУ Мем Ав ТЕ ві Зв бо Тік си п у ТАНЕ ЯЗ 13 138 143
Ве Аврааи А іує А Бе і ви Авр Бек то Уа ін Тих А Ава 145 яко 155 160
Сех ж Туг Ні Аа біз су Пт Тут Аве На іх Ра Не Аво ТЕ 155 4170 5
ТнЕАвВ тус Тнк Оу бет бе ТР ує Тек АВ У бе Тв ув А 86 їх тво
СНУ Річе Тор бо Тер Тве бек Тек Оу Туга Уві ЄЗу Бах СУ ТРУ 195 205 205
Ра їує Баг ТВ бе Не йяр су Це ма ар п Су Тек Ту Се о т58 В ви тур рви Ро ів Тв УВЕ Ум Ве Аа Туг Тр АВ Си Зі ЗВУ
В кас 23 ай
Су ва ув Зеє Бе Бех Заг уві СЛУ СЛУ Туга Не то ув Зеє ес БО ЗБЕ
Аа пе во Рез Бен Єва Тк не су ма су бек Ана Ану Не уд що Коса хо
Не сте ну Авр ж пе АЖо Ре у Р ів ее Ту хе ее Бех -т5 «НО тва
Зеббув Ре Му Су Бе и мес ет СТУ Ще СН» Не Аня З
КЕ яко зе
Бра сер а А ви ув Ав Аза Кемер лев Су АВ
З 1 ЗБ ЗО
Тек Те ето Аг ву МУ Бе Аа шаг іа
ЗЕ ЗО
Claims (22)
1. Композиція для згортання молока, що містить щонайменше 70 9о мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р (відношення коагуляції до преципітації) більше ніж 5 ІМСШ/ти та від 15 до 30 95 мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/тИ (міжнародні одиниці згортання молока/мл), де коагулянт із співвідношенням С/Р більше 5 ІМСШ/тИи представлений хімозином верблюда, а коагулянт із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/тпИ є бичачим хімозином або коагулянтом з мукору, і де 9о мас./мас. означає концентрацію одного коагулянту у загальній кількості коагулянтів.
2. Композиція за п. 1, де композиція містить 80 95 мас./мас. хімозину верблюда та 20 95 мас./мас. бичачого хімозину або коагулянту з мукору.
3. Композиція за будь-яким з пп. 1-2, де композиція містить молоко, вибране з соєвого молока, овечого молока, козячого молока, молока буйволиці, молока яка, молока лами, молока верблюдиці або коров'ячого молока.
4. Композиція за п. З, де молоком є коров'яче молоко.
5. Композиція за п. З або 4, в якій молоко містить приблизно 3-5 95 білка.
6. Композиція за будь-яким з пп. 3-5, в якій молоко містить переважно від 3,5 до 4,5 95 білка, більш переважно 3,8 95 білка.
7. Композиція за будь-яким з пп. 4-6, в якій молоко містить приблизно 1,5-5 95 жиру.
8. Композиція за будь-яким з пп. 4-7, де молоко містить переважно від 2,5 до 4 95 жиру, більш переважно 3,5 95 жиру.
9. Харчова композиція, що містить суміш двох або більше коагулянтів, при цьому ця суміш має щонайменше 70 95 мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р більш ніж 5 ІМСО/ти та від 15 до 30 95 мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/тИ, де коагулянт із співвідношенням С/Р більше 5 ІМСО/тИ представлений хімозином верблюда, а коагулянт із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/ти є бичачим хімозином або коагулянтом з мукору, і де 95 мас./мас. означає концентрацію одного коагулянту у загальній Зо кількості коагулянтів.
10. Харчова композиція за п. 9, де композиція є м'яким сиром.
11. Харчова композиція за п. 10, в якій м'який сир є м'яким сиром, який дозріває з поверхні.
12. Харчова композиція за пп. 10-11, де м'яким сиром є брі або камамбер.
13. Кормова композиція, що містить суміш двох або більше коагулянтів, при цьому ця суміш має щонайменше 70 95 мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р більш ніж 5 ІМСО/ти та від 15 до 30 95 мас./мас. коагулянту із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/тИ, де коагулянт із співвідношенням С/Р більше 5 ІМСО/ ти представлений хімозином верблюда, а коагулянт із співвідношенням С/Р у діапазоні від 0,05 до 1,5 ІМСО/ти є бичачим хімозином або коагулянтом з мукору, і де 95 мас./мас. означає концентрацію одного коагулянту у загальній кількості коагулянтів.
14. Кормова композиція за п. 13, де композиція є м'яким сиром.
15. Кормова композиція за п. 13, в якій м'який сир є м'яким сиром, який дозріває з поверхні.
16. Кормова композиція за пп. 14-15, де м'яким сиром є брі або камамбер. Зо
17. Застосування композиції за будь-яким з пп. 1-8 для виготовлення м'якого сиру.
18. Застосування за п. 17, в якому композицію за будь-яким з пп. 1-34 додають до молока не пізніше, ніж через 20 хв, переважно не пізніше, ніж через 15 хв, більш переважно не пізніше, ніж через 10 хв, ще більш переважно не пізніше, ніж через 5 хвилин, після додавання однієї або більше заквашувальних культур.
19. Спосіб отримання продукту на основі молока, який полягає у тому, що додають ефективну кількість композиції за будь-яким з пп. 1-8 при температурі від 28 до 42 "С та здійснюють додаткові виробничі операції для отримання продукту на молочній основі.
20. Спосіб отримання ферментованого молочного продукту, який включає наступні операції: (а) додають заквашувальну культуру до молока та інкубують культуру при температурі 28-42 7 протягом принаймні 5 хв, (б) додають композицію за будь-яким з пп. 1-8 із загальною концентрацією 2000-3500 ІМСИО/Л 001 (ІМСОЛО0 л), (с) додатково інкубують культуру при температурі 28-42 "С протягом принаймні трьох годин, (а) відокремлюють сироватку з отриманням сиру.
21. Спосіб за п. 20, в якому композицію за будь-яким з пп. 1-8 додають не пізніше, ніж через 20 хв, переважно не пізніше, ніж через 15 хв, більш переважно не пізніше, ніж через 10 хв, ще більш переважно не пізніше, ніж через 5 хвилин, після додавання однієї або більше заквашувальних культур.
22. Спосіб за п. 20 або 21, де отриманий сир є м'яким сиром принаймні брі або камамбер
1 «0 Бкчазий хімозин В МАСЬУУББАМ ЖАББОВАБІХ ВХЕОУКОКУЬ ВКАСЖЕНОЇЬ БПЕСОВОХО Овезий кімозий МЯСЬУТУБЬАМ ЄАБПЕОСВБІТ ВІРИУКОКРІ ВКЕЛАОЖЕВИЬВ БОЖКО Кімозни б. Васскіздаз МаСсЬУтЬАА сАБеоанохХ ВІРОНКОКТЬ ВКАОЖЕВСЬ» БО ОоВОоЗУа Хімозин с. акотедахиа МВСБУХУКЕЬАА САБЯОВЕСІТ ВІРІНКСККТЬ ВКАЇЖЕНОВЬ БОТООВООУА Семнячий хімазин "ХВСКУКБАМ САБеОСОСІТ ВУРІЖКаКИ» ВЕБІЖЕНОВЬ ВОКЛОКОРУА Шурячий хімазин МВСЕУССЬАХ ГАТАОЗНУМТ ВІРІНКОКО, ВВТЕКШОСЬО БОКОВКНОУЕ зі 150 Бичачий хімозин В ІЗЗКтВЗаИКак УвлУРОтТиУи ОНЗОХКОКІтЬ стеРОБРЕУО КОТаЧИПРЯ Оречий хімозих "ВВЕУВСтсЕ УЗБУБОТВУЄ ДООХЕОКІХІ. сСТЕРОБЕТОИ КОТСпБВОТНЯУ Хіназин 2. Басетіатів УВВКУВаЬИК УБАБРОТВУй ОБОУЖОКІХІ СТКРОБЕТУУ КрТСОВОБИХ хХімазинв 2. Зготедакзив УЗЗКУВЗНИК УБАЕРОТЗЕИ ОБОХЕОКІУІ СТВРаБЕТУУ КрТОоЗальЬНУ свинячий хімозин ЬЗЗКУЗЗКСИ УАБЕРОТКУ! ПТОУЖОКІХІ СТЕРОБЕТУУ КрТОЗаБЬНУ Щукачий хімозвин ТЗЕККОМІСМ УАБЕРЬТКЕХО ПОБТЖСЬІУУ СТРЕОБЕКУУ КРТОЗЗБЬНУ М зай Вичачимй хімовмио В тБІУСКИНАС КМНОВЕОВНК ББУКОМасКВ вих М ОООМУОТУЄ Овсчий хімозин вВІУсКВНА; кМНОоВЕбеНи ББІКОМіСКВ ББІвжетоаМ ОБІТИ Хішозин С, Басіхівних тетуУсСкенви ХМУВвебеНИи БЕТЕВМІСКВ ЬБІВУЄТОВІ БОКЬОУЮТУЄ Хімозин 2, йкомедзакіца ТаТУСКБНУЄ КЕННВКбРВНК ББТЕВМІєКЕ ББІВУЖТОНМ БОКЬЗУЮТУТ свивнкзий хімозин вЕУУСКаПЬИІ ОМННКЕМРеХ БВТКЕОМИОКе ББІДУусТОВІ ОСЕБОУОТУМ Шурязчий хімезни КБУХСВВКУУС ДМНЯКЕОРОИ БЕТРОМІЯКР БЕМОУЄТОВУ БОКЕАУВТУТ 153 200 Бкичачий хімнсзин В УЗМІчртує УСЬБТОБЕОо УЕТХАБКРОСІ БоемахеаОво БуУІвУЄТВМ Овечий кімсжмя УЗМІОХУК УОзОЗТОБеОо МЕХХАБЕОСЇ фоемахвооьх БУЖУРУКИММ Хімозив С. Юасстіайов озЗВІчОвМОУуК УСЬЗТБОвОоЖ УКТУБЕРрОІ ВавахеоАВ БУСУРУКОМИ Кімозин п. Згомедатійи ВІ ОРМОТ УСЬЗТЕОРОЕ УКТУНЕУЦЗІЇ СзБАХРЕБАВ КУЗУРУРИЮУ Свимячий хімозин УАЗІЧОАНОТ УСЬБІОБРЯЮ ЗЕТУБКООІ ЇБОХРЕБАВ БУТУРУРОММ Шурячуй хімозин УББІУРНОЇ УСМБТЕЕРОЮ ЕТУВРКІМ3І ХЗБАХРТЕАВ КЕЗЧРХЕрИМ 221 250 Бичачий хімозин В ММЕНІВОВІ. КДУУМОВМО КБМЬТІЗАІО Рута БНЯ РУКУ О Орочиа німозин мова УБОПІ КІУМУуУМОВяСО БЗМЕЬТОСАІо вежа МРУТЬОКУКО Хімазан С. басехійпиав МмовноУВері, ЕВУУМОВНСО ЗВМОТОЗАТО РЗХЕТОВБНИ УР О Хімазан с. акопейалкіда МмОовньЬУЗирі, ЕБУУМеВНОЙй БЗМОТІАТИ РвВХтРОЗеНИ УВУТСОСУНО секавнчай хімовиий МНЕНЬУВОЮЬ ЖАМУМаКИЕ БІМІТІАТ рРЗХУТОВЬНИ ХВУТМОГУМО Шурячий хімозии миманьчАбюю жЕЗзМуУМенННІй ЗБМОТІКжАТО ОБУКТОВЬНИ ХРУКАХМО 251 КІВ Бичачий хімозни В КТУрБУТІБО УУЧАСЕВОСО АІВСТОТВКІ, МОВІ ООАТаАтОМО овечий хімознн ЕТТЮОЗУТІВО АУУАСЕСОСО АТЬСТСУВКІ УСВОТЬМІ ООАХСАТОМО Ххімозмн С, Басегіапиа УТМПОЗМТІМІ УДУВСУООСО АТВОТСУБУЮ ЖОРЕНОХЬКІ ОМАТОАХЕНВ хХімозин С, йхомтейатіва ТТУЮрОУРІМОа УАУВСУБОСО АЗБИТСЕБУЮ ЖОННЬКІ ОМАТОАХЕНЕ свинячий хімозМн ЕТУЮЗУТІМХ УУУВИМООСО АТЬОТСТВМЕ АСЕЗВАХЬМІ ОМАТОБАТЕБО бурячий хімозив ЖТУЮВВІТІМО БУУВСОЗОСР АУБОТСТАВЬ ТОРОВОТЬМІ ОНМІЗАЖХ заї 350 Бичачий хімозин й тХОБЕРЕОВСОМ БЕУМРТУУЮЕ ХМОКМУРЬТР ЗАсТВОСОчК СТБОКОЗЕМА пвечий хімозим тЗЕРОЇПСре ПаБМеТУУКЕ ХВОЖМУРОТР ХвХТВОКУК СТБОКОУКМИ Хімозмн о б. вВзесгкіапих ТЗЕЖРБУМССЗ ПАБМЕТУУЄК ХМОВОЕЕСАВ БАХТЗКООЯЕ СТОКОВЕ Хімозна с. бгопедатіцв чЧЕКРУМСОМ ОАЯМеТУУЖК ХМОМЮУРІЯВ ЗЗХТВКООСЕ СТВОКОБОКИХ Сенначий хімозин УсЕКеХИСоВ оаОМЕТУУКЕ ХБОММУВОве ЗБХТВОрОсЕ ставок Щурячна хімозим НОСЕСХОСИВ ОМЕМЕТУЧКЕ ХМОВЕЖТИКЕ сАХТМОКОСа СВК, зі 381 Бичзазий хімозвиноВ ВОКИТЬОЗУК ІДЖУУНУКрА АММБУОГСАКА Х Ожечий хімезин ЗНОМІНЗЗУК ІВБУУЗУЕрА АМННЕМОСЦАКА ЇХ Хімозмн о с, Вайсхіявнпиз ЗБІМНХІЗОУК ІВЖУХОУКОА АМНЯУСИАКА І Хімозин С, йкстейзЕіиа ЗБІНТІСВУК ІВБУУБУЖОВ АННВУСЬАКА ї Свинячий хімсзив ЗОНИ СУю ХОКУХБУКОВ АМЯВУСЬККА щурячий хімохий ЯОМИХООЮУЮЕ КЕЕТХБУКЮВ АЖМИМОЬВКА 1
Фіг. 1
Н ! ; Твердість сирів типу брі, отриманих з допомогою ! : різних коагулянтних сумішей і Н ЗА ПИ КУ ТУ я ЕК АТ ТУ КА А А ТУ У М ут тн щу ; : : Ко й ч чу ' ши й пе і ЗЕЖУ сення мяч не метання одн пакетика птнтрнттнтминтнях пн зт корені пк юю м : В) 20 : що : 5 ї. У ре в фе те тертя КК х ЗА Я ПЕТТІ КУ УЖ Кт УК ня Кт ВиЛЬ Ух Коліт деЖ М ТК тт» ех пжжх: У Ку Ж ККУ іх ен Ше 1325 м1во ши и и ІННИ ро ен 1325 оса | Моз | щ ше і шо | Відсоткова частка кожулянту з низьким відношенням СІВ в оданзі а ковгулянтом СвуУМахм г) і Фіг, 2 ооо во ви о пов олива прийо нори попи опт коп ві о опо пос в вв а нав ки йо кв ЛПинкість сирів типу орі, отриманих з допомогою ! різних коагулянтних сумішей ! за ДИТ божу кт Ук ЖЖ кю КУ КТ КУ ж КЕКС тини с Ж «уні ЧАС Же Кв нь МЖК КУ СК у зе Р тій ке уп УЧ пут лютих пен ДЕ ТАТУ З ал чех, ії В З і : 55 - нн и, Пп ОО В ВОЮ і й | ; го и а а п СК М а п ї я є. : ї а вин ЖК оон ротового кт птн рового З х 75 я - оо нлопнакннжнн вхо ювелірні кн ккнкенн» і ; Н КК В М п ; Її » і т фен етютттнютттьтотюттнно ооо еф есеососессосовестекностчетеккн нн нкрнооесопеві есе ороєесвнвсев НК оос пк еіткокнк ютоегех» Н й Н і «і - Н Е й і в ще ях І винна щ | Кожексювнк хстедессговстессесо сосфюхкююткххкю соток сою жо тотем оре ко скік оре осовою ооо союсепкровсек рекет і Дт спон новина зна палива лана полтава нина аланін; УМА У У МУ УК УЖ У п а і 7 6 Й ща ЕН нн нн НН М НЕ п ни в в в Кп в в в КМ а Й 50 | Бе вх | і Духу ек кю еехуюю екю соку сою Мк: хюомехфме Ж КМ ММ ММК М СИМ УМ УК Ки мети МКУ Ту мен Н Відсоткова часта наапутянту я низки зіджншнням СЯ ві сузайні з яса СіумихН Гі Н ї І Тонке нтів ен осетер непо осно окогаокоеемеотевобесосевогооенотою акесисгос осо вссосеоноо оте нннноосюсессной
Фіг. З
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP15154513 | 2015-02-10 | ||
| PCT/EP2016/052842 WO2016128476A1 (en) | 2015-02-10 | 2016-02-10 | Blends of chymosins with improved milk-clotting properties |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA125925C2 true UA125925C2 (uk) | 2022-07-13 |
Family
ID=52462246
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201708448A UA125925C2 (uk) | 2015-02-10 | 2016-02-10 | Композиція для згортання молока, що містить суміш хімозинів, харчова та кормова композиції, що містять суміш хімозинів, застосування композиції для згортання молока, спосіб одержання продукту на основі молока та спосіб одержання ферментованого молочного продукту з використанням композиції для згортання молока |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20180110234A1 (uk) |
| EP (1) | EP3255997A1 (uk) |
| JP (1) | JP7144143B2 (uk) |
| KR (1) | KR20170115614A (uk) |
| CN (1) | CN107208082A (uk) |
| AU (1) | AU2016217885B2 (uk) |
| BR (1) | BR112017014809A2 (uk) |
| CA (1) | CA2976358A1 (uk) |
| MX (1) | MX2017010058A (uk) |
| RU (1) | RU2741804C2 (uk) |
| UA (1) | UA125925C2 (uk) |
| WO (1) | WO2016128476A1 (uk) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2741723T5 (es) | 2012-05-25 | 2023-01-23 | Chr Hansen As | Variantes de quimosina con propiedades mejoradas de coagulación de leche |
| UA121380C2 (uk) | 2014-02-26 | 2020-05-25 | Кр. Гансен А/С | Поліпептид хімозину з удосконаленими властивостями щодо згортання молока |
| JP6856551B2 (ja) | 2015-06-22 | 2021-04-07 | セーホーエル．ハンセン アクティーゼルスカブ | 改善された特性を有するキモシン変異体 |
| EP3344049A1 (en) | 2015-08-31 | 2018-07-11 | Chr. Hansen A/S | Variants of chymosin with improved properties |
| CN109640677A (zh) | 2016-05-19 | 2019-04-16 | 科·汉森有限公司 | 具有改善的凝乳特性的凝乳酶的变体 |
| AU2017267273B2 (en) | 2016-05-19 | 2021-10-21 | Chr. Hansen A/S | Variants of Chymosin with improved milk-clotting properties |
| JP7219473B2 (ja) * | 2017-08-28 | 2023-02-08 | 静岡県公立大学法人 | コリバクチンおよびコリバクチン産生菌の検出方法および検出プローブ |
| CN111601509A (zh) * | 2018-01-11 | 2020-08-28 | 科·汉森有限公司 | 提高干酪产量的培养物、促凝剂和技术之间的相互作用 |
| RU2727431C1 (ru) * | 2019-06-21 | 2020-07-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр пищевых систем им. В.М. Горбатова" РАН | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата комбинированного состава |
| CN110483631B (zh) * | 2019-08-07 | 2022-07-05 | 华中农业大学 | 中黑盲蝽生殖相关蛋白PG及其编码基因、dsRNA干扰序列和应用 |
| WO2023001832A1 (en) | 2021-07-20 | 2023-01-26 | Chr. Hansen A/S | Composition for clotting milk, methods and uses thereof |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2494086A1 (fr) * | 1980-11-18 | 1982-05-21 | Granday Presure Sa | Composition de coagulant pour fromagerie comprenant au moins une enzyme fongique coagulante, et produits fromagers ainsi obtenus |
| DK18884D0 (da) * | 1984-01-16 | 1984-01-16 | Hansens Lab | Fremgangsmade til fremstilling af ost |
| CH662246A5 (fr) * | 1985-03-12 | 1987-09-30 | Nestle Sa | Fromage frais. |
| EP0835061A1 (en) * | 1995-06-30 | 1998-04-15 | Novo Nordisk A/S | A process for making cheese |
| EP1334182B2 (en) * | 2000-11-06 | 2021-03-24 | Chr. Hansen A/S | Method of producing non-bovine chymosin and use hereof |
| ATE307488T1 (de) * | 2001-08-03 | 2005-11-15 | Hansens Lab | Verfahren und vorrichtung zur herstellung eines milchproduktes |
| AR042484A1 (es) * | 2002-12-17 | 2005-06-22 | Novozymes As | Proceso para producir queso |
| EP2117331A1 (en) * | 2007-02-13 | 2009-11-18 | Chr. Hansen A/S | Coagulation of milk |
| CN101715836A (zh) * | 2009-11-19 | 2010-06-02 | 天津科技大学 | 一种新鲜软质干酪及其制备方法 |
| EA035275B1 (ru) | 2012-05-03 | 2020-05-22 | ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. | Варианты химозина с повышенной специфичностью и их применение в получении сыра |
| ES2741723T5 (es) | 2012-05-25 | 2023-01-23 | Chr Hansen As | Variantes de quimosina con propiedades mejoradas de coagulación de leche |
-
2016
- 2016-02-10 US US15/549,359 patent/US20180110234A1/en not_active Abandoned
- 2016-02-10 CN CN201680007308.6A patent/CN107208082A/zh active Pending
- 2016-02-10 JP JP2017539425A patent/JP7144143B2/ja active Active
- 2016-02-10 BR BR112017014809A patent/BR112017014809A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2016-02-10 RU RU2017129334A patent/RU2741804C2/ru active
- 2016-02-10 MX MX2017010058A patent/MX2017010058A/es unknown
- 2016-02-10 AU AU2016217885A patent/AU2016217885B2/en not_active Ceased
- 2016-02-10 CA CA2976358A patent/CA2976358A1/en not_active Abandoned
- 2016-02-10 EP EP16703796.9A patent/EP3255997A1/en active Pending
- 2016-02-10 UA UAA201708448A patent/UA125925C2/uk unknown
- 2016-02-10 KR KR1020177025364A patent/KR20170115614A/ko not_active Application Discontinuation
- 2016-02-10 WO PCT/EP2016/052842 patent/WO2016128476A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP7144143B2 (ja) | 2022-09-29 |
| RU2017129334A3 (uk) | 2019-09-10 |
| WO2016128476A1 (en) | 2016-08-18 |
| MX2017010058A (es) | 2017-11-13 |
| KR20170115614A (ko) | 2017-10-17 |
| RU2017129334A (ru) | 2019-03-12 |
| RU2741804C2 (ru) | 2021-01-28 |
| BR112017014809A2 (pt) | 2018-01-09 |
| AU2016217885A1 (en) | 2017-08-10 |
| US20180110234A1 (en) | 2018-04-26 |
| AU2016217885B2 (en) | 2020-01-23 |
| JP2018505672A (ja) | 2018-03-01 |
| CN107208082A (zh) | 2017-09-26 |
| CA2976358A1 (en) | 2016-08-18 |
| EP3255997A1 (en) | 2017-12-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA125925C2 (uk) | Композиція для згортання молока, що містить суміш хімозинів, харчова та кормова композиції, що містять суміш хімозинів, застосування композиції для згортання молока, спосіб одержання продукту на основі молока та спосіб одержання ферментованого молочного продукту з використанням композиції для згортання молока | |
| Sutarno et al. | Genetic diversity of local and exotic cattle and their crossbreeding impact on the quality of Indonesian cattle | |
| Schlumpberger et al. | AUT1, a gene essential for autophagocytosis in the yeast Saccharomyces cerevisiae | |
| Price et al. | Sugar transporters of the major facilitator superfamily in aphids; from gene prediction to functional characterization | |
| Widmer et al. | Identification of a second human acetyl-CoA carboxylase gene | |
| CN109071626A (zh) | 用于检测气味、香味和味道的生物传感器 | |
| CN106994124A (zh) | 遗传性疾病的预防/改善剂 | |
| Kadivar et al. | Correlation of adiponectin mRNA abundance and its receptors with quantitative parameters of sperm motility in rams | |
| UA118956C2 (uk) | Варіант хімозину з поліпшеними молокозгортальними властивостями | |
| CN102037359A (zh) | 吞噬细胞的功能评价方法 | |
| Sebastiani et al. | Marker-assisted selection of dairy cows for β-casein gene A2 variant | |
| Yeh et al. | cDNA cloning, identification, tissue localisation, and transcription profile of a transglutaminase from white shrimp, Litopenaeus vannamei, after infection by Vibrio alginolyticus | |
| Gregersen et al. | Bovine chromosomal regions affecting rheological traits in rennet-induced skim milk gels | |
| de Moura Souza et al. | Tough aged meat presents greater expression of calpastatin, which presents postmortem protein profile and tenderization related to Nellore steer temperament | |
| CN105837670A (zh) | 百子莲生长素响应因子ApARF2及其编码基因和探针 | |
| Su et al. | Natural endogenous human matriptase and prostasin undergo zymogen activation via independent mechanisms in an uncoupled manner | |
| Ikeda et al. | Molecular isolation and characterization of novel four subisoforms of ECE-2 | |
| Bantog et al. | Gene expression of NAD+-dependent sorbitol dehydrogenase and NADP+-dependent sorbitol-6-phosphate dehydrogenase during development of loquat (Eriobotrya japonica Lindl.) fruit | |
| Price et al. | Cloning and expression of the liver and muscle isoforms of ovine carnitine palmitoyltransferase 1: residues within the N-terminus of the muscle isoform influence the kinetic properties of the enzyme | |
| CN1705743B (zh) | 猪uroplakinⅡ启动子和使用所述启动子生产有用蛋白质的方法 | |
| CN105063023A (zh) | 一种锌指核酸酶介导的猪mstn基因突变序列及其应用 | |
| Ueda et al. | Isolation of several cDNAs encoding yeast peroxisomal enzymes | |
| Faro et al. | Structural and functional aspects of cardosins | |
| WO1998015837A1 (en) | Assay for duroc muscle fibre type | |
| Schauer-Vukasinovic et al. | Cloning, expression and functional characterization of rat napsin |