UA124235C2 - Новий цигарковий фільтр, який містить альгініт - Google Patents

Abstract

Винахід належить до цигаркового фільтра. Зокрема, представлений винахід належить до нового цигаркового фільтра, у якому використовуються матеріали природного походження, які до цього не використовувались у цій галузі техніки. Точніше, представлений винахід належить до цигаркового фільтра, який може використовуватися для поглинання токсичних компонентів цигаркового диму і послаблення ураження тканини, спричинюване цигарковим димом, на органах дихання, серцево-судинній системі та на слизовій оболонці. Зокрема, представлений винахід належить до цигаркового фільтра, який містить альгініт.

Description

ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ

Представлений винахід відноситься до цигаркового фільтра. Зокрема, представлений винахід відноситься до нового цигаркового фільтра, у якому використовуються матеріали природного походження, які до цих пір не використовувались у цій спеціальній галузі. Точніше, представлений винахід відноситься до цигаркового фільтра, який може використовуватися для поглинання токсичних компонентів цигаркового диму, і послаблення ушкодження тканини, спричинюваного цигарковим димом, на органах дихання, серцево-судинній системі і слизовій оболонці. Головним чином, представлений винахід відноситься до цигаркового фільтра, який містить альгініт.

РІВЕНЬ ТЕХНІКИ

Паління тютюну є широко розповсюдженою шкідливою людською звичкою, яка, як відомо, спричиняє серйозну і часто невиправну шкоду здоров'ю. На даний момент, паління є одним з найбільш документованих причинних факторів, які роблять внесок у розвиток раку легенів і хронічне обструктивне захворювання легенів (СОРО). Шкода здоров'ю, спричинена палінням, створює серйозні соціальні і фінансові проблеми у всьому світі. Наприклад, в країнах

Європейського Союзі тільки передчасна смерть понад 500000 людей спричиняється шкідливими впливами паління.

Приблизно 50 років тому управління голови медичної служби США видало перший звіт про паління і здоров'я (0.5. Оераптенпі ої Неапй, Едисаййоп апа УмеїГаге, 1964). Цей звіт оцінив, що середній курець мав у 9-10 разів вищий шанс розвитку раку легенів порівняно з особою, що не палить, тоді як завзяті курці мали підвищений ризик приблизно у 20 раз вищий. Окрім того, звіт вказав, що паління було основною причиною хронічного бронхіту, і що існував зв'язок між палінням і емфіземою, а також серцево-судинними захворюваннями. Слід відзначити, що хронічний бронхіт і емфізема тепер розглядаються як два аспекти хронічного обструктивного захворювання легенів (СОРО)). За останні 50 років управління голови медичної служби США видало численну кількість звітів про паління і здоров'я, деякі з яких стосувалися спеціалізованих тем, таких як припинення паління, паління під час вагітності і вплив тютюнового диму на навколишнє середовище. Самий останній звіт був виданий у 2014 році - точно через 50 років після першого звіту (0.5. Оерапйтепі ої Неайй апа Нитап зегмісе5, 2014). За останні 50 років

Зо список хвороб, пов'язаних з палінням, значно розширився. Фокусуючись тільки на раку, на даний момент існує численна кількість типів раку, пов'язаних з палінням, на додаток до раку легенів, включаючи рак верхніх дихальних шляхів (мезофаринкс, глотка, трахея та бронхи), рак шлунку, рак печінки, рак нирок, рак підшлункової залози, рак сечового міхура, рак шийки матки, колоректальний рак і гострий мієлолейкоз. Більше того, управління головної медичної служби

США вказує, що ймовірно 20 мільйонів американців передчасно померли протягом останніх 50 років через вплив паління. Беручи до уваги очевидні шкідливі впливи паління, пом'якшення цих впливів є величезною проблемою охорони здоров'я і будь-які заходи, які можуть здійснюватися для послаблення цієї проблеми, без сумніву варті дослідження. Без сумніву, найкращим заходом є припинення паління. Виграші від припинення паління добре відомі (дивіться, наприклад, Радегеігбт, 2002). Однак, існує багато курців, які обирають не припиняти паління, або вважають занадто важким припинення паління. Хоча припинення паління повинно бути найефективнішим заходом, застосування нової технології, такої як нові фільтри, які ефективно видаляють шкідливі складові диму, може суттєво послабити захворювання, пов'язане з тютюном. Як наслідок, будь-які заходи, які можуть прийматися для послаблення впливу паління на здоров'я, будуть мати суттєвий виграш. Без питання, найбільш очевидною спробою послабити впливи паління на здоров'я завдяки модифікації цигарки є додавання цигаркового фільтра. Однак, застосування фільтрів не було особливо успішним.

Одна з найраніших пропозицій додати фільтр до цигарок безсумнівно була зроблена

Ернстом Віндером - епідеміолог, який був одним з перших вчених, що продемонстрував зв'язок паління цигарок з раком легенів. Раннє дослідження, виконане у співавторстві з Віндером і опубліковане у 1988 році, оцінило відмінність у ризику захворювання на рак легенів у курців, які палять цигарки з фільтром, і у курців, які палять цигарки без фільтру (М/упадег апа Кабаї, 1988).

Це дослідження звернуло увагу на відмінність між цими двома типами курців що стосується раку типу І (КІ) та ІІ «КІЇ) за Крейбергом. (У той час була діюча номенклатура Крейберга, де рак легенів типу КІ включає рак сквамозних клітин, рак легенів, який складається з великих клітин, і рак легенів, який складається з дрібних клітин, тоді як рак легенів типу КІЇ включав тільки аденокарциному легенів.) Для чоловіків та жінок було виявлено зниження кількості хворих на приблизно 45-50 95, що стосується пухлин типу КІ, хоча це не мало жодного статистичного значення, у той час як у чоловіків спостерігалась слабка відмінність і жодної відмінності у жінок бо для пухлин типу КІЇ. Цигаркові фільтри стали надзвичайно популярними у другій половині 20-го сторіччя, коли у 1950 році у США приблизно 0,595 цигарок продавалося з фільтрами із зростанням цієї кількості до 88,5 95 у 1976 році (Майопаї! Іпзійше оп Огид Абизе, 1977). На сьогоднішній день близько 10095 цигарок, які продаються у всьому світі, є цигарками з фільтрами. Протягом того ж періоду часу, коли застосування фільтрів в США зростало швидкими темпами (1950-1976), визначені обчислювальною машиною показники потрапляння смоли з цигарок в організм людини з огляду на об'єм їх продажу знизилися з 37 мг до 16 мг (Ноїйтапп О еї аїІ., 1996). Зниження потрапляння смоли в організм людини протягом цього періоду часу було наслідком двох трендів. Першим, як відзначено вище, було просто швидке зростання використання цигарок з фільтром. Однак, другий був наслідком зростанням з часом показників ефективності фільтрів. Цигарковий фільтр концептуально є досить простим і складається з пористого тіла із заданого матеріалу, який може поглинати як цигаркову смолу так і газову фазу. Хоча деякі ранні фільтри використовували паперові волокна як поглинальний матеріал, на даний момент більшість фільтрів використовують волокна ацетату целюлози.

Тому, фільтр є просто паперовою трубкою, заповненою ацетатом целюлози, яка кріпиться до цигарки шляхом використання обгортки. Зростаюча ефективність може досягатися як збільшенням маси ацетату целюлози у фільтрі так і зменшенням діаметра волокна. До цих пір можна брати тільки обидва ці наближення, однак, врешті решт, через те, що опір затягуванню цигарки стає значно більшим, продукт стає неприйнятним для споживача. Наближення, використовуване фактично усіма тютюновими компаніями для вирішення цієї проблеми, полягало у виконанні отворів в обгортці фільтра. Таким чином, курець вдихає суміш повітря та диму. Вентиляційні отвори знижують опір затягуванню і вбираючи повітря, а також дим, дим розріджується і виділення складових диму послаблюється. Чим сильніша вентиляція, тим більшим є кількість засмоктуваного повітря і меншою є кількість диму, яка вдихається курцем.

Хоча більшість експертів погоджуються, що цигарка з фільтром знижує ризик паління принаймні до деякої міри порівняно з цигаркою без фільтра, цигарки з низьким виділенням смоли, які характеризувалися як ті, що знижували потрапляння смоли в організм навіть до рівня, нижчого ніж той, який можна було досягти нормальним цигарковим фільтром, не приводили до виграшу в охороні здоров'я. Цей висновок базується на даних населення і епідеміологічних дослідженнях. Було представлено значну кількість даних, які документують той факт, що курці

Зо отримують суттєвий виграш при палінні "цигарки з потраплянням малої кількості смоли в організм" або для підтримання рівня нікотину або рівня смаку, таким чином підвищуючи реальне виділення диму, яке перевищує обрахований обчислювальною машиною вихід. Окрім того, низка вчених виразила думку, що курець може навмисно або ненавмисно блокувати вентиляційні отвори, таким чином, також суттєво підвищуючи виділення диму (0.5. Оерагітепі ої Неаййп апа Нитап 5бегуісе5, 2001). Одним реальним результатом цих проблем є те, що принаймні в США та ЄС на упаковках для цигарок більше не дозволяється вказувати визначені обчислювальною машиною виходи смоли та нікотину. Не дивлячись на ці проблеми, все ще можна розробляти нові фільтри, які можуть послаблювати впливи паління на стан здоров'я, зокрема, коли такі фільтри можуть розроблятися без потреби у вентиляції. Такі фільтри можуть розроблятися для вибіркового видалення спеціальної газової фази і напівлетких компонентів диму, які представляють цікавість. Важливо відзначити, що дим складається з газової фази, напівлетких компонентів і порошкової фази. Складові, для яких існує підтвердження впливів на стан здоров'я, можна знайти в усіх трьох фазах. На сьогоднішній день не існує технології, яка дозволяє вибірково фільтрувати компоненти порошкової фази; однак, можуть вибірково фільтруватися газова фаза та напівлеткі компоненти. Чудовим прикладом такого фільтра, який на сьогоднішній день має комерційне застосування, є вуглецевий фільтр. Фактично увесь японський ринок складається з цигарок з вуглецевим фільтром, у той час як ці продукти використовують приблизно 5095 курців Південної Кореї. Низка інших технологічних вдосконалень було втілено у розробці фільтрів, проте жодне з них не має на сьогоднішній день значного комерційного застосування. На сьогоднішній день, фільтр безпосередньо інтегрується у вигляді сегменту у ротовий кінець цигарки таким чином, що цигарковий дим повинен проходити крізь фільтр перед надходженням у дихальні шляхи та легені. На даний момент тільки З 95 усіх цигарок у світі продаються без фільтра. Хоча цигарковими фільтрами можна зменшити кількість шкідливих речовин, які доходять до курця, це головним чином здійснюється просто зменшенням кількості диму, який доходить до ротового кінця цигарки. В більшості випадків існує мало причин, щоб не здійснювати вибіркову фільтрацію. Таким чином, дослідники сильно зацікавлені у розробці цигаркового фільтра, який може вибірково видаляти певні небезпечні складові диму для послаблення наслідків паління для стану здоров'я.

Цигарковий дим містить багато хімічно активних частинок, таких як низькомолекулярні 60 карбонильні сполуки, вільні радикали, хініни, ціанід водню, оксиди азоту та ароматичні аміни, які є високотоксичними, мутагенними та канцерогенними. Тому, вибіркове зменшення кількості цих речовин в цигарковому димі може знизити ризики для здоров'я, спричинювані палінням.

У більшій мірі, державні постанови вимагають більших показників ефективності фільтрування для зниження кількості тютюнового диму, який доходить до курця.

Використовуючи доступні на сьогоднішній день ацетатцелюлозні фільтри, можна досягати деякої селективності шляхом додавання до фільтра більших концентрацій частинок, таких як активоване вугілля або інші природні речовини. Однак, більша концентрація порошкового матеріалу змінює характеристики затягування для курця. Більше того, частинки активованого вугілля у фільтрі роблять внесок у зниження кількості шкідливих летких речовин у цигарковому димі, але через відсутність неспарених електронів вони не можуть надавати необхідного додатного електрона для доповнення неспарених електронів вільних радикалів. Тому, вуглець не придатний для підрахунку впливу вільних радикалів на різні тканини, які роблять внесок у запалювальні та інші шкідливі процеси в тілі, спричинювані цигарковим димом.

Однією важливою властивістю цигарки є перепад тиску в її тілі. Термін "перепад тиску в тілі" або "ЕРО" стосується статичної різниці тиску між двома кінцями цигарки, коли по ній протікає повітряний потік при стійких умовах. Більші величини ЕРО змушують курця прикладати більшу силу затягування до курильного виробу.

Через те, що зростаюча ефективність традиційних фільтрів підвищує ЕРО фільтрів, публіка і, тому, виробники слабко використовують ці продукти. Тому, залишається зацікавленість у розробці вдосконалених і ефективніших фільтрів, які мінімально впливають на характеристики затягування цигарок з одночасним видаленням вищих рівнів певних складових в головному струмені тютюнового диму, таких як ті, що вказані вище, а також монооксид вуглецю і феноли.

Найбільш загальновідомим наповнювачем у виробників цигаркових фільтрів є ацетат целюлози, який має ступінь заміщення приблизно 2,5 ацетатні групи на ангідроглюкозний блок.

Під час виготовлення ацетатний полімер типово екструдується як волокнистий джгут і змішується з одним або більшою кількістю пластифікаторів (наприклад, триацетином, поліеєтиленгліколем, гліцерином). Обробки ацетатцелюлозного джгута описуються, наприклад, в патенті 05 2953838 (Стаулога еї аї.), і в патенті О5 2794239 (Стаулога еї а1І.). У багатоволоконні джгути, використовувані у виробництві фільтрів тютюнового диму, можуть вводитися різні текучі

Зо субстанції. Ці текучі субстанції, які можуть використовуватися в джгуті окремо або в комбінації з рідиною або газоподібними носіями, можуть бути ароматизаторами, агентами для флуоресценції джгута, мастилами, розчинами для проклеювання, композиціями для кінцевої обробки, пластифікаторами або подібним. Такі текучі субстанції передбачені для впливу на бажані фізичні або ароматичні характеристики цигаркового диму за допомогою обробленого текучою субстанцією джгута. Способи введення текучих субстанцій описуються, наприклад, в патенті 05 5387285 (Кімег5).

Ацетатцелюлозні волокна, які формують фільтрувальний елемент, типово покриваються композицією для кінцевої обробки фільтра. Такі композиції є головним чином емульсіями на основі води, які складаються з багатьох компонентів. Кожен компонент може виконувати спеціальну функцію або під час обробки волокон або під час наступного застосування фільтра, виготовленого з волокон. Типові компоненти композиції для кінцевої обробки фільтра включають мастила для зниження тертя таким чином, що волокна можна обробляти без руйнування, антистатичні агенти для зниження накопичення статичного заряду на волокнах і емульгатори для інгібування розділення фаз у композиції волокна під час обробки. Інші допоміжні компоненти можуть включати антимікробні агенти, гідрофільні агенти або інші хімічно активні сполуки. Після формування з волокнистого джгута матеріалу для виготовлення фільтра, можуть наноситися пластифікатори для розм'якшення волокна і для надання можливості формування зв'язків між волокнами для зміцнення фільтра з отриманням бажаної міцності/консистенції. Поверхнева хімія ацетату целюлози і пластифікатора може забезпечувати ароматизацію диму, що цілююом бажано і прийнятно для курців. Певні інші дизайни фільтрів/хімічні композиції можуть забезпечувати різний аромат диму. На даний момент, фільтри з неацетатцелюлозного джгута головним чином не є прийнятними і не мають комерційного успіху.

Рівень техніки містить кілька публікацій, які відносяться до цигаркових фільтрів і різних вдосконалень, внесених у них.

Документ УМО2013/1869838 розкриває цигарковий фільтр, який містить тіло, яке містить штапельне волокно з естеру целюлози, пульпу і сіль лужного металу та розчинний у воді аніонний полімер. Тіло фільтра має вміст лужного металу 2-100 мкмоль на його грам.

Розчинний у воді аніонний полімер може містити принаймні один елемент, вибраний з групи, до бо якої входять поліакрилова кислота і полісахарид, який має карбоксильну групу.

Японський патент Мо 3677309 розкриває матеріал цигаркового фільтру у формі листа, який має паперову структуру і містить незвите штапельне волокно естеру целюлози і збиту пульпу, при цьому збита пульпа має ступінь збивання зі ступенем свободи за Шопером-Ріглером 20- 90"5К, а незвите штапельне волокно естеру целюлози є штапельним волокном, яке має середню довжину 1-10 мм їі тонину 1-10 деньє. Цей документ зазначає те, що у приготуванні листового матеріалу може використовуватися зв'язуюча речовина (наприклад, розчинний у воді адгезив) за умови, що він не має негативних впливів на здоров'я і не послаблює смак та апетитність тютюнового диму, і може не приводити до руйнування матеріалу фільтра. Загалом, кількість зв'язуючої речовини переважно є якомога малою (наприклад, не більше ніж 10 мас. 95 від загальної маси матеріалу) Приклад у цьому документі описує листовий матеріал, виготовлений з незвитого штапельного волокна ацетату целюлози і збитої пульпи шляхом вологого папероробного процесу, на який потім розпилювали водний розчин карбоксиметилцелюлози (З мас. 95 на основі маси сухого матеріалу).

Японська заявка на патент з публікацією Мо 7-75542 розкриває цигарковий фільтр, який містить джгут з волокна естеру целюлози і розчинний у воді полімер, який міститься у джгуті і зв'язує волокно, при цьому джгут обробляється з одержанням стрижня фільтра з використанням не більше ніж 25 масових частин води по відношенню до 100 масових частин джгута. Приклади у цьому документі включають цигарковий фільтрувальний мундштук, одержаний додаванням 5 мас. 96 натрієвої солі карбоксиметилцелюлози як розчинного у воді полімеру до відкритого звитого волоконного джгута ацетату целюлози і подачею відкритого джгута до обгортальної машини для обгортання відкритого джгута обгорткою фільтра.

Японська заявка на патент з публікацією Мо 8-322539 (патентний документ 3, )Р-8-322539А) розкриває цигарковий фільтр, який містить нетканий матеріал, до складу якого входить композиція естеру целюлози і зв'язуюча речовина, яка має гарну дисперсність у воді, при цьому з нетканого матеріалу скручують стрижень. Приклади у цьому документі включають тіло фільтра, виготовлене продуванням дротяної сітки зі штапельним волокном з ацетату целюлози повітряним потоком для ламінування або осадження, і розпиленням ламінувального матеріалу на дріт з 10 мас. 95 595 водного розчину карбоксиметилцелюлози, пресуванням і сушінням вологого ламінату, підданням одержуваного нетканого матеріалу обробці гофрувальним

Зо валком, а потім згортанням матеріалу.

Міжнародна публікація Мо У/О 2014/164492 відноситься до фільтрів диму, які знижують концентрацію моноксиду вуглецю і фенолу в струмені диму. Згадані фільтри містять частину з пористої маси, яка містить активні частинки, частинки зв'язуючої речовини і активне покриття, нанесене на принаймні частину активних частинок і частинок зв'язуючої речовини, при цьому активні частинки і частинки зв'язуючої речовини зв'язуються між собою в точках контакту; і фільтрувальну частину. В деяких випадках, фільтр може містити частину з пористою масою, яка містить активні частинки і частинки зв'язуючої речовини, при цьому активні частинки і частинки зв'язуючої речовини зв'язуються між собою в точках контакту без адгезиву; і фільтрувальну частину, яка містить активну домішку. Хоча цей фільтр диму може надавати кращі результати, його виготовлення є досить складним, а матеріали, використовувані для досягання бажаного ефекту фільтрування, є дорогими.

Високоефективний цигарковий фільтр описується в документі УМО 2010/125412. Цигарковий фільтр містить, на додаток до загальних компонентів цигаркових фільтрів, псевдобоміт (АІСОН.Н2гО) і виноградні компоненти, астаксантин і журавлину як антиоксидант. Вигідним ефектом цигаркового фільтра є також використання виноградних компонентів у формі розмелених кісточок і шкірки винограду. Робиться посилання на документ УМО 2010/125412.

Як згадано вище, добре відомо, що паління є головною проблемою здоров'я людей і важливим етіологічним фактором, який робить внесок у розвиток раку легенів і хронічної обструктивної хвороби легенів. Тому, розвиток нових технологій для послаблення хвороби легенів, спричинюваної палінням цигарок, повинен мати значний виграш.

Відповідно, задачею представленого винаходу є надання цигаркового фільтра, який має переваги рішень, які вже належать рівню техніки, але, у той же час, найкращим чином усуває їх недоліки. Подальшою задачею представленого винаходу є надання цигаркового фільтра, який додатково знижує шкідливий вміст цигаркового диму порівняно з відомими цигарковими фільтрами.

На подив було виявлено, що задачі винаходу можуть успішно вирішуватися, якщо у цигарковому фільтрі застосовується природна речовина - альгініт, який для цього до цих пір не використовувався.

Наші експерименти показали, що можна досягти значного зниження кількості шкідливих речовин в цигарковому димі порівняно з сьогоднішніми фільтрами, якщо у фільтрах використовувати альгініт.

ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ

Представлений винахід відноситься до цигаркового фільтру, який додатково знижує шкідливий вміст цигаркового диму порівняно з відомими цигарковими фільтрами. Згадані вигідні властивості отримуються внаслідок застосування в цигаркових фільтрах альгініту. Альгініт може використовуватися окремо або у комбінації з іншими речовинами, вже використовуваними у цигаркових фільтрах.

Альгініт є породою осадового походження, яка складається з біомаси водоростей і туфи - вулканічного пилу, перетвореного на глину. В Пліоцені приблизно 3-5 мільйонів років тому в озерах карпатського басейну мала місце інтенсивна вулканічна активність. Ця активність створила добре відомі базальтові гори, у той же час також формуючи спеціальні туфові кільця.

Після затухання вулканічної активності, туфові кільця були затоплені водою, таким чином сформувавши кратерні озера (маари). Вода кратерних озер нагрівалась гарячими мінеральними джерелами і гарячі розчини, які містилися в ній, збагачували воду мікроелементами, мінеральними солями та іншими поживними речовинами. Елементи у мінеральних колоїдах, які одержуються з деградації скляного матеріалу вулканічної туфи, додатково збагачували поживний вміст кратерних озер. У тихих водах кратерних озер накопичувалися великі кількості водоростей (зокрема зелених водоростей Воїгіососси5 Бгашпії) та інших плаваючих тварин або рослинних організмів. Накопичені рослинні та тваринні організми, які померли і змішалися із залишками листя і пилком, вимивалися з густої берегової рослинності і осідали на дні кратерних озер. У безкисневому середовищі разом з розщепленим туфом та іншими мертвими планктонними організмами вони накопичувалися у вигляді гниючого (сапропель) бруду. На фазі відкладання мулу в кратерних озерах тіла більших тварин потрапляли в теплий бруд і в результаті бруд збагачувався фосфорними матеріалами. Ця виснажена і затвердла біомаса піддавалась спеціальним фізичним і хімічним змінам протягом кількох мільйонів років і перетворилась на свою сьогоднішню форму: кам'яний альгініт.

Альгініт є землистою породою, яка має глинисту структуру, яка складається інколи з

Зо листоподібних від'єднуваних тонких шарів. Альгініт не має токсичного впливу (дивіться роботу

Ог. БОНі барог А; АЇдіпії. Ісптегіеїб їапи!тапу. А; АІдіпй а Мебда;7аазадег ев

КогпуегеїмедеЇІетегі АІарймапу їемеКепузеде (1993-2013) 2014). Він має блідо-зелений колір (зелений) або сірий, який інколи перетворюється на червонувато-жовтий. Його шарувату структуру можна краще побачити під час десикації і часто між тонкими шарами можна знайти відбитки або залишки рослин.

Його найважливіша фізична властивість полягає у тому, що він може зв'язувати 0,5-1,0 л води на кілограм. Альгініт складається з 80-90 956 глини і мульних фракцій, при цьому осад містить крупніші частинки поблизу берега. В останній фазі замулених кратерів (лагуни) вміст органічного матеріалу зменшується, а вміст бетоніту збільшується. Склад альгініту показує сильне відхилення у зразках, взятих з одних і тих же місць. Середній вміст гумусу складає 30 95, сягаючи інколи 45 95. Середній вміст вапна (у формі СасСоОз) складає 33 95, інколи сягаючи 40 95.

Було підтверджено, що викопна біомаса містить 64 елементи. Це означає, що альгініт головним чином багатий на макро- і мікроелементи з наступними найважливішими елементами: азот (М): 0,5 9У5, фосфор (у формі РгОб5): 0,6 95, калій (у формі К2О): 0,9 95, магній (Ма): 1,0 95. Типовими мінеральними компонентами є монтморилоніт, ілліт, доломіт, кальцит, арагоніт, кварц, гіпс, плагіоклаз, сидерит, магнезит, пірит і ортоклаз. На додаток до вищезгаданих, важливішими мікроелементами є залізо (Ре), марганець (Мп), мідь (Си), цинк (2п), кобальт (Со), нікель (Мі), літій (1), титан (Ті), хром (Сг) і кадмій (Са). Однією із спеціальних характеристик інгредієнтів гумусу є його біохімічний ефект покращення росту рослин. Коли альгініт використовується у сільському господарстві, гумусові кислоти створюють ензимоподібний і також гормоноподібний підсилюючий ефект, і завдяки регулюванню здатності водопоглинання коріння - також опосередкований підсилюючий вплив на ріст рослин.

Альгініт має широке застосування для різних цілей. У вирощуванні фруктів та інших рослин альгініт може використовуватися для меліорації. Його одноразове застосування підвищує плодючість грунту на 20-30 95 у перший рік. Завдяки його глинистим мінералам штучні добрива повинні використовуватися на вищому рівні, таким чином, збільшуючи перенесення фосфору, азоту і калію з грунту у грунтові води, річки та озера. Його дія триває 4-6 років. Альгініт є природним матеріалом, нескінченно довго зберігає свою якість, не може надмірно використовуватися і навіть застосування вищих рівнів не має жодних шкідливих ефектів. бо Альгініт може також використовуватися як грунт для садівництва у формі сумішей. Шляхом домішування інших природних матеріалів, таких як цеоліт, перліт, торф або базальт, готувалися безреагентні високоефективні грунтові суміші. Застосування альгініту приводить до підвищення кількості і якості виходу у вирощуванні овочів і декоративних рослин або у садівництві, або в плівкових теплицях під час збору урожаю. Альгініт може також використовуватися як ініціатор у посадкових лунках для лісових дерев. Застосування альгініту приводить до кількісного збільшення на 6-13 95 і на 20 95 швидшого росту. Розпилення суспензії з альгінітом восени має рослиннозахисний ефект і допомагає гібернації дерев, тоді як розпилення весною забезпечує захист від шкідників. В результаті розпилення альгініту вміст марганцю, заліза, цинку та міді в рослинах зростає, у той час як вміст кальцію у фруктах забезпечує кращий смак і довший термін зберігання. У тваринництві альгініт, змішаний з рідким гноєм, надає високоефективний продукт для застосування у додатковій обробці органічних добрив або для заміни їх. Альгініт послаблює період деградації добрива і може поєднуватися з іншими споживними речовинами. Змішування альгініту з останнім приводить до кращого добрива і покращує ріст домашніх тварин і домашньої птиці. Альгініт також забезпечує захист навколишнього середовища. Внаслідок своєї сильної поглинальної спорідненості він ефективно зв'язує запахи тваринних стійл і знижує концентрацію 5О2 і МНз у повітряному просторі (дивіться, наприклад, угорський патент Мо 189.383: "Ргосеб55 Тог Біпадіпд ої дабзе5 м/йй ипрівазапі 5теї! ргоодисей Бу аїівзоїміпу огдапіс таїепа!5 апа ог ргодисіп ої огдапіс тапиге мйй підн епПісієпсу").

Людське застосування альгініту включає його застосування як мулу для вирішення проблем з суглобами, ревматизмом і спортивними травмами, а також має переваги у одержанні з нього мазі проти ревматизму. Альгініт також корисний у лікуванні варикозу вен і псоріазу, і може також використовуватися для регенерації шкіри та загального покращення стану шкіри. Окрім того, альгініт може також використовуватися як основа для медичних освіжувачів.

Альгініт можна знайти в Угорщині і він постачається на ринок численною кількістю угорських фірм, наприклад Сегсе-Аїдіпії КА, (сегсе, Ниподагу).

На подив, на даний момент було виявлено, що альгініт ефективний у новій технічній галузі.

Наші досліди підтверджують, що альгініт особливо ефективний при використанні у цигаркових фільтрах окремо або в поєднанні з іншими відомими компонентами, як обговорено нижче.

Неочікувано було виявлено, що застосування альгініту в цигаркових фільтрах приводило до

Зо суттєво менших кількостей активних форм кисню (КО) у слині, до формування значно меншої кількості активних форм кисню (КОБ5) у сироватці крові, до слабшого ендотеліального пошкодження, до слабкішого ураження легеневого епітелію, до значно вищого рівня глутатіону, до слабкішого ураження тканин легенів і меншого запалення тканин легенів, при цьому згадані переважні властивості детально розкриваються нижче.

Застосування альгініту призводить до значно меншої кількості активних форм кисню (КО5) у слині. Хоча сама по собі слина має певну концентрацію вільних радикалів, цигарковий дим призводить до збільшення рівня вільних радикалів. Оцінено, що існує більше ніж 1017 вільних радикалів на затяжку цигаркового диму (Спигсп апа Ргуог, 1985; Спигсп ОРЕ, Ргуог УМА, "Егее- гадіса! спетівігу ої сідагене 5тоКе апа йб охісоіодіса! ітріїсайоп5, " Епмігоп Неакй Регзресі, 1985, 64:111-26). Беручи до уваги те, що вільні радикали можуть взаємодіяти з численною кількістю органічних субстратів для одержання активних форм кисню (КО5), не дивно, що цигарковий дим підвищує рівень активних форм кисню (КО5) у слині. Однак, на додаток до радикалів, які містяться у цигарковому димі, формування значної кількості радикалів, а також пряме одержання активних форм кисню (КО5) може випливати з запалювального процесу, спричиненого цигарковим димом, приводячи до вищих рівнів нейтрофілів і макрофагів (Меззпег апа Ветнага, 2014; Мевзпег В, Ветнага р, "ЗтокКіпу апа сагаіомазсціаг дізеазе. МесНапізтв ої епаоїпеїїа! дустипсбоп апа еапу айегодепевів, " Апегіозсіеєг Тпготр Мавзс Віої, 2014, 34:509-15).

Ми визначили антиоксидантну здатність необробленої слини наших волонтерів, у яких при палінні однієї цигарки знову збирали слину. Ми визначили зміну рівня антиоксидантної здатності у слині з використанням диму від контрольної цигарки. Ми повторили ту ж вправу з різними фільтрами, які містили тільки моноальгініт і альгініт у чотирьох різних комбінаціях з виноградною шкіркою і насінням (55Ф:5), альгініт - спеціальний оксид алюмінію, альгініт - цеоліт, альгініт - вуглець у пропорції 50-50 95. Усі комбіновані фільтри з альгінітом приводили до значно меншого спаду антиоксидантної здатності в слині порівняно з контрольним фільтром. Сам альгініт створює суттєву різницю в антиоксидантній здатності порівняно з контролем, але усі комбіновані цигарки проявляли себе краще ніж сам альгініт, що чітко підтверджує, що альгініт і його комбінації діють синергічно.

Застосування альгінітового фільтра призводило до формування в сироватці крові значно меншої кількості активних форм кисню (КО5). Експеримент, який демонструвував це, був бо подібний до експерименту з слиною, але він проводився з сироваткою крові. Сама сироватка має певну концентрацію вільних радикалів. Хоча сама по собі сироватка має певну концентрацію вільних радикалів, цигарковий дим спричиняє підвищення рівня вільних радикалів. Оцінено, що існує більше ніж 1077 вільних радикалів на затяжку цигаркового диму (Спигсй апа Ргуог, 1985). Беручи до уваги, що вільні радикали можуть взаємодіяти з численною кількістю органічних субстратів для одержання активних форм кисню (КО5), не дивно, що цигарковий дим знижує антиоксидантну здатність сироватки. Однак, на додаток до радикалів, які містяться у цигарковому димі, формування значної кількості радикалів, а також пряме одержання активних форм кисню (КО5) може випливати із запалювального процесу, викликаного цигарковим димом, що приводить до підвищених рівнів нейтрофілів і макрофагів (Меззпег апа Вегпіага, 2013). Ми визначили антиоксидантну здатність необробленої сироватки.

Потім ми використали нашу машину для паління для подачі усього цигаркового диму крізь трубку з сироваткою. Ми визначили зміну антиоксидантної здатності в сироватці з використанням диму з контрольної цигарки. Ми повторювали ту ж вправу з різними фільтрами, які містили тільки моноальгініт і суміш альгініту з чотирма різними фільтрувальними матеріалами, тобто, альгініт - виноградна шкірка і насіння (555), альгініт - спеціальний оксид алюмінію, альгініт - цеоліт, альгініт - вуглець. Усі фільтри, які містили альгініт, проявляли значно менший спад антиоксидантної здатності в сироватці порівняно з контрольним фільтром.

Застосування альгініту надавало дим, який спричиняв слабкіше ендотеліальне ураження.

Клітини, які розташовані на внутрішній поверхні кров'яних судин, називаються ендотеліаальними клітинами. Ці клітини мають важливу роль у захисті цих судин. Після ураження ендотелію, часто це називають ендотеліальною дисфункцією, ризики серцево-судинних захворювань зростають.

Оскільки дим, при полишенні легенів крізь альвеолі, надходить до потоку крові, відбувається контакт ендотелію з димом і спочатку приводить до дисфункції ендотелію, добре відомої як та, що є ключовим першим етапом у розвитку пов'язаного з палінням серцево-судинного захворювання (Атрозе апа Вагиа, 2004; Атбгозе УА, Вагиа К5, "пе рашйорпузіоЇоду ої сідагене апа сагаіомазсціаг дізеазе. Ап ирааїе, 7") Ат Сої! Сагаїйої, 2004, 43:1731-7; Мез5зпег апа Ветнпага, 2014). Ми визначили ураження ендотеліальних клітин, яке відбувається, коли ендотеліальні клітини контактують з усім димом, порівняно з необробленими клітинами. Значно слабше ураження клітин відбувається, коли та ж клітинна лінія вводиться в контакт з відфільтрованим альгінітом димом або димом, відфільтрованим комбінацією, яка містить альгініт.

Застосування альгініту також надавало дим, який спричиняв слабкіше ураження епітелію легенів. Епітелій легенів є першою лінією захисту від захоплених вдиханням токсичних речовин.

Відомо, що клітини альвеолярного епітелію вражаються контактом з димом, призводячи до смерті клітин (Кох підег еї аї., 2011; Козтідег В, Меззіег ЕМ, Спи НМУ, Мазоп КУ, "Нитап аїмеоїаг еріїнеїа! сеї! іп)игу іпдисейд ру сідагене зтокКе, " РІо5 Опе, 2011, б:е26059), що засвідчується зменшенням кількості здорових клітин порівняно з необробленими клітинами. Дим, відфільтрований альгінітвмісним фільтром, спричиняв захворювання у значно меншої кількості здорових клітин порівняно з контрольною цигаркою. Оскільки некротичні епітеліальні клітини секретують протеїни в легені, що ініціює запалення, яке, в решті решт, може привести до раку легенів або СОРО, захист епітелію фільтрами, які містять альгініт і комбінацію чотирьох різних фільтрувальних матеріалів, спарених з альгінітом, тобто, альгініт з виноградною шкіркою та насінням (555), альгініт - спеціальний оксид алюмінію, альгініт - чітко є виграшем для здоров'я курців.

Рівні глутатіону були також значно вищими з димом від цигарки з альгінітним фільтром порівняно з контрольною цигаркою. Епітеліальні і ендотеліальні клітинні лінії вводилися в контакт з усім домом контрольної цигарки та димом цигарки з фільтром, який містить альгініт та комбінацією альгінту з виноградною шкіркою та насінням (555), альгініт - спеціальний оксид алюмінію, альгініт - вуглець. Визначення рівнів глутатіону вказували значно вищі рівні глутатіону в клітинах, які контактували з димом від цигарок з альгінітним фільтром, порівняно з контрольною цигаркою. Беручи до уваги те, що добре відомо, що глутатіон захищає від оксидативного стресу (Каптап апа МасМее, 2000; Каптап І, МасМее МУ, "Охідаїйме 5іге55 апа гедшайоп ої дішаніопе іп Їшпуд іпбйаттацйоп, " Еиг Кезріг У, 2000, 16:534-54), це означає, що альгінітвмісні фільтри краще захищають вроджений захисний механізм легенів від ураження тканини легенів, спричинюваного оксидативним стресом, ніж контрольна цигарка.

Відфільтрований альгінітом дим спричиняв слабше ураження в тканинах легенів і слабше запалення порівняно з димом контрольної цигарки. Тривимірна тканина легенів, названа сфероїдами, отримувалась з людських клітин з відомим профілем, зокрема епітеліальних клітин легенів, фібробластів, ендотеліальних клітин і макрофагів. Тривимірна структура дозволяє клітинам розвивати функціональну організацію, подібну до тієї що знайдена у їх іп мімо бо дублікатах. Тривимірні моделі пропонують набагато кращу експериментальну модель для симулювання іп мімо навколишнього середовища ніж традиційні монокультурні-моношарові (20) системи. Біохімічний профіль культури тривимірної тканини на подив подібний до біохімічного профілю живого організму. Тривимірні сфероїди реагують із зовнішніми стимулами подібно до живої периферійної тканини легенів. Їх запалювальний процес майже ідентичний і також вони виробляють поверхнево-активну речовину. Коли ці тривимірні сфероїди вводилися в контакт з цигарковим димом, відфільтрованим новими альгінітними цигарковими фільтрами, рівень цитокінів ІЇ/-8 ї 1/-6 (відомих медіаторів запалення) виражалися значно меншим ступенем порівняно з контрольними цигарками.

Як вказано вище, альгініт може використовуватися у фільтрах винаходу окремо або у поєднанні з іншими речовинами, використовуваними у цигаркових фільтрах до дати подачі представленого винаходу. Такі матеріали, а також їх приготування і застосування відомі фахівцям у цій галузі.

Наприклад, коли стосовно цигаркових фільтрів згадуються "вуглець" або "виноград", або "компоненти винограду", вони означають активоване вугілля, розмелене виноградне насіння та розмелена шкірка, хоча з попереднього рівня техніки для фахівця у цій галузі очевидно, що виноградні компоненти можуть бути присутніми також в інших формах. Ці компоненти, а також їх доступність також добре відома для фахівців у цій галузі.

Представлений винахід розкривається детальніше за допомогою наступних прикладів.

Приклади передбачені тільки для ілюстрації. З Прикладів фахівець у цій галузі легко зрозуміє, що навіть один альгініт має значно кращі фільтрувальні характеристики по відношенню до відомих фільтрувальних матеріал. Більше того, Приклади, які містять дані, які стосуються сумішей, які містять альгініт і певні фільтрувальні матеріали, які належать до попереднього рівня техніки, прояснять фахівцю у цій галузі, що альгініт діє синергічно з іншими фільтрувальними матеріалами. Що стосується згаданих матеріалів, ми також посилаємося, наприклад, на очисники вільних радикалів, розкриті в документі МО 2010/125412, згаданому вище і на який тут робиться посилання. Тому, хоча не всі суміші, які містять альгініт, перелічені в прикладах, фахівець у цій галузі зрозуміє, що суміші альгініту можуть довільно змінюватися у протилежному напрямі іншими придатними фільтрувальними матеріалами, і що усі такі суміші охоплюються представленим винаходом.

Зо Приклад 1.: Застосування альгініту приводить до значно меншого посилення антиоксидантного стану у слині і сироватці - експерименти Будапештського Університету

Технології та Економіки (ВОТ)

Ціллю цього дослідження було вивчення впливів різних фільтрів на здатність цигаркового диму змінювати антиоксидантний стан зразків (сироватка і слина). Визначення параметрів зразків сироватки здійснювали за допомогою комплекту КАМООХФ ТАБ. Зразки сироватки одержували відновленням ліофілізованої сироватки, параметри якої визначали або після відновлення (контрольна) або після барботування неї відфільтрованим цигарковим димом.

Загальний антиоксидантний стан слини визначали до і після паління традиційних або експериментальних цигарок, оснащених фільтрами згідно з винаходом. Дані, отримані нашими вимірами, можуть відображати зв'язувальну здатність вільних радикалів та активних форм кисню (КО5) фільтрів.

Матеріали та способи

Вимірювання антиоксидантного стану бензидиновою пробою та комплектом КапдохФ для визначення загального антиоксидантного стану (ТАБ)

Вимірювання антиоксидантного стану проводилися широковикористовуваною бензидиновою пробою та традиційним доступним комплектом Капдох? для визначення загального антиоксидантного стану (ТАБ). Бензидинова проба використовує систему, яка виробляє пероксид (пероксид водню і пероксидазу), та чутливий до пероксиду хромоген (бензидин).

Одержані іп зйи пероксиди реагують з хромогеном для надання проміжної сполуки з піковою спектральною поглинальною здатністю при довжині хвилі 620 нм, яка здатна виявлятися спектрофотометром. Антиоксиданти, присутні у зразку, конкурують з хромогеном у їх реакції з пероксидами і приховують генерування здатного до детекції сигналу. Порівнюючи здатне до виявлення формування хромогену зразків з негативним контролем без антиоксидантів та з позитивним контролем з відомою концентрацією антиоксидантів, можна оцінювати антиоксидантний стан зразків.

Використовувані реагенти та інструменти

Реагент А (розчинений у очищеній воді Типу ІЇ) - 155 мМ хлориду натрію (КеапаїЇ, саї. по. 24640-1-08-38) - 25 мОд/мл пероксидази хріну (5ідтає), саї. по. 77332) бо - 233 мкМ дигідрохлорид бензидину (ЗідтаФ), саї. по. В3383)

Реагент В (розчинений в очищеній воді Типу І) - 250 мкМ сечовини-пероксиду водню (ЗідтаєФ), саї. по. 289132)

Зразки

Зразки слини брали з 17 об'єктів до і після паління цигарки. Волонтерів відбирали лабораторії, які дотримуються міжнародних стандартів і забезпечують якісну звітність в судах, в

Будапештському Університеті Технології та Економіки. Кожен волонтер звітував о 8-9 годині ранку про збір слини, паління цигарки і знову про збір слини. Кожен ранок палилася одна контрольна цигарка і збиралася слина. Кожен волонтер палив 4 різні цигарки (відрізнялися фільтром); дві - 4-7 грудня 2015 року і дві -5-8 січня 2016 року. Курців просили звітувати про паління без вживання того ранку якоїсь їжі або рідини і без чищення своїх зубів щіткою. Слину заморожували у льоді і подавали на оцінювання в початкових умовах до лабораторій

Будапештського Університету Технології та Економіки.

Ві 1111Г11111111111вік

Зразки сироватки відновлювалися з ліофілізованої сироватки (Апаїуйсоп СопігопогтФ РІ ОБ) згідно з інструкціями виробників в очищеній воді Типу ІІ. Параметри зразків сироватки визначалися або безпосередньо (контрольні) або після барботування сироватки відфільтрованим системою Оріїгійег цигарковим димом. Цигарки палилися з використанням лінійної 8-портової машини Рійгопа 5М302 для паління. Цигарки палилися згідно зі стандартом

ЇБО 3308 зі 10095 заблокованих вентиляційних отворів фільтра. Дим пропускали крізь кембриджський фільтр (скловолоконний фільтр довжиною 44мм, агі по. 80202851, Вогоуаіді КС) і одержувану газову фазу пропускали крізь силіконову трубку і барботували в скляному контейнері (імпінджер), який містив 1,5 мл розчину сироватки. Після кожної цигарки, подушку кембриджського фільтра міняли новою, після кожної цигарки силіконову трубку міняли новою.

Фільтри позначали цифрами 1-3.

Контрольні та вимірювальні інструменти - негативний контроль (очищена вода Типу ІЇ) - позитивний контроль (Стандарт калібрування від Капдох? (комплект для визначення загального антиоксидантного стану саї. по. МХ 2332))

Зо - КапдохФ) (комплект для визначення загального антиоксидантного стану) - Спектрофотометр (Тпепто Зсіепіййстм МийізКап м (30 Місгоріаїе Зресігорпоїотеїег)

Бензидинова проба

Виміри проводили мікропланшетним спектрофотометром, описаним вище, клітини інкубували при 37 "С на 96 лунковому планшеті. На мікропланшеті хімічно активну суміш одержували наступним чином: 5 мкл зразка або контролю і 250 мкл Реагента А піпеткою поміщали в лунки. Потім суміш гомогенізували і зчитували мікропланшетним рідером.

Початкове зчитування спектральної поглинальної здатності при довжині хвилі А-620 нм виконували перед додаванням 50 мкл Реагента В для ініціювання формування пероксиду, після чого зчитування спектральної поглинальної здатності виконували при довжині хвилі А-620 нм протягом 0-3 хвилин. Результати вимірювань спектральної поглинальної здатності розглядали як виміряні величини спектральної поглинальної здатності через 2,5 хвилини після початку вимірювання. Усі зразки і контролі зберігалися на льоді і показники кожного зразка вимірювали у

З паралельних лунках для статистичного аналізу.

Спосіб з використанням комплекту Капдох?Ф для визначення загального антиоксидантного стану (ТАБ)

Вимірювання проводили згідно з наданим довідником з використанням мікропланшетного спектрофотометра, описаного вище. Використовуючи мікропланшет замість кюветки, усі об'єми необхідних реагентів зменшувалися у 4 рази. Це надавало кінцевий реакційний об'єм 305 мкл, що випливав з додавання 5 мкл зразка або контролю, 250 мкл Реагента А і 50 мкл Реагента В, як описано в довіднику.

Цигарковий матеріал

Цигарки, використовувані в експерименті, постачалися компанією Оріїгійег 24. Деталі та виробництво цигарок були наступними. Еталонні цигарки КепійисКу З3К4РГ виготовлялися і компонувалися Університетом штату Кентуккі, КХ 05. Еталонні цигарки постачалися угорській компанії Орійгійег 2 корпорацією Сеїапезе Согрогайоп, Магом5, МА, 05. Компонувалися цигаркові фільтри, а контрольні цигарки виготовлялися компанією Оріїгінкег 2. Фільтрувальні стрижні Се Ех виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезе Согрогайоп. Вони містили різні фільтрувальні матеріали, інколи змішані. Додаткові матеріали ацетатних фільтрів з різними характеристиками сплітання, які, таким чином, забезпечували різні значення перепаду тиску, виготовлялися і постачалися корпорацією СеІапезе Согрогайоп. Ацетатні частини (2,9/41,000) фільтрів довжиною 27 мм еталонних цигарок КепіисКу (ККС) ЗК4АЕ видалялися і викидалися.

Фільтрувальні стрижні, виготовлені технологією Сех корпорації Сеїапезе, містили різні наповнювачі. Вводили один вибраний фільтрувальний стрижень з орієнтацією в напрямі до тліючої поверхні цигарки, а додаткову ацетатну частину вибирали і вводили у фільтр, гарантуючи, що значення перепаду тиску (загальний опір затягуванню) цигарки (закриті вентиляційні отвори фільтра) було тим же що й значення перепаду тиску еталонних цигарок

Кепіиску (КЕКС) (опір затягуванню 170 мм НгО -/- 2 95). Стрижні корпорації Сеіапебхе мали довжину 12 мм. Ацетатні частини мали довжину 15 мм. Загальна довжина фільтра становила 27мМм.

Короткий Опис фільтрів, використовуваних в експерименті й Стрижень довжиною 12 мм корпорації СеІапезе: 50 95 й Стрижень довжиною 12 мм корпорації СеІапезе: 50 95

Результати

Під час досліду, виконуваного на слині і сироватці, отримували наступні результати.

Експеримент над сироваткою

Зміна

Стан активних форм Антиоксидантна

Зразок й антиоксидантного кисню здатність стан

Сироватка 1 Контрол. З 9о 67 9о

Фільтр 1 44 96 56 до - 16 95

Фільтр2 47 Чо 53 о -21 95

Сироватка 2 Контрол. 21 95 79 96

Фільтр З ЗО бо 70 до -11 95

Зміна антиоксидантного стану зображена на фіг. 1.

Вимірювання проводили у п'яти реплікатів. Результати вказують, що фільтр З кращий для контрольної цигарки (фільтр 1).

Результати вимірів характеристик зразка слини бензидиновою пробою

Зо Вимірювання проводили з 17 об'єктами. Параметри кожного зразка, взятого з об'єктів, вимірювали З рази.

Середнє зниження антиоксидантного стану

Фільтр 1 Зниження антиоксидантного стану 29 96

Фільтр 2 Зниження антиоксидантного стану З 9о

Фільтр З Зниження антиоксидантного стану 12 95

Статистичний аналіз експерименту над слиною

- Оцінка статистичної значущості змін антиоксидантного стану до і після паління цигарки проводилася з використанням узгодженого парного тесту УмМісохоп (Загзой-ЗТАТІЗТІСА10).

Результати вважалися суттєвими при р«е0,05.

Пара змінних Помічені досліди суттєві при р«0,5000

Зміна антиоксидантного стану до і після паління з Фільтром 1 є суттєвою. Результати, отримані з досліду, вказують сильну статистичну відмінність.

Пара змінних Помічені досліди суттєві при р«0,5000

Зміна антиоксидантного стану до і після паління з Фільтром 2 є суттєвою. Результати, отримані з досліду, вказують сильну статистичну відмінність.

Пара змінних Помічені досліди суттєві при р«0,5000

Статистична суттєва зміна антиоксидантного стану відсутня до і після паління з Фільтром 3; хоча існує помітна відмінність (р-0,065) вона не досягає порогового значення для статистичної значущості. - Оцінка статистичної значущості змін антиоксидантного стану, спричиненої палінням різних цигарок, проводився з використанням узгодженого парного тесту УмМісохоп (е8азой -

ЗТАТІЗТІСА10). Результати вважалися суттєвими при р«е0,05.

Пара змінних Помічені досліди суттєві при р«0,5000

Зміна антиоксидантного стану між фільтром 1 і 2 не суттєва.

Пара змінних Помічені досліди суттєві при р«0,5000

Зміна антиоксидантного стану між фільтром 1 і З є суттєвою.

Демонстрація результатів зниження антиоксидантного стану з використанням ящичкової діаграми

Одержувана ящичкова діаграма багатьох змінних зображена на Фіг. 2. Периферійні точки на графіку зображені окремо (іаї5опй-ЗТАТІЗТІСАТ10).

Зо Висновки

Наші результати показують, що цигарковий дим, який проходив або крізь Фільтр 1 або 2, знижував антиоксидантний стан сироватки на 15-20 95. Фільтр З спричиняв значно менше зниження антиоксидантної здатності порівняно з контролем.

Зчитування спектральної поглинальної здатності зразків слини порівнювалися з позитивними і негативними контролями для оцінювання антиоксидантного стану. Наші результати вказують, що цигарковий дим, який проходив крізь Фільтри 1 і 2, знижував антиоксидантний стан слини на приблизно 30 95, що було статистично суттєвим, тоді як Фільтр

З знижував антиоксидантний стан на 1295, що є статистично значущим порівняно з контрольною цигаркою. Ці результати узгоджуються з результатами вимірів параметрів сироватки. Наші результати показують, що компоненти фільтрів винаходу мають суттєвий вплив на здатність цигаркового диму змінювати антиоксидантний стан зразків за описаних умов досліду.

Приклад 2.: Застосування альгініту спричиняє значно менше підсилення антиоксидантного стану у слині і сироватці - експерименти, проведені проф. Тібором Сарвашем

В додатковому експерименті також наступним чином досліджувався вплив цигаркового диму, відфільтрованого фільтрами винаходу, на слину і сироватку.

Матеріали та способи

Цигарки, використовувані в експерименті, були еталонним цигарками КепіисКу ЗКА4БЕ, виготовленими і скомпонованими Університетом штату Кентуккі, КМ, 05. Контрольні цигарки постачалися угорській компанії Оріїгінег 2ті корпорацією СеІапезе Согрогайоп, Магтомв, МА, 05.

Цигаркові фільтри компонувалися, а контрольні цигарки виготовлялися компанією Оріігінег Ат.

Фільтрувальні стрижні СеїЕх виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезхе Согрогайоп.

Вони містили різні фільтрувальні матеріали, інколи змішані. Додаткові матеріали ацетатного фільтра з різними характеристиками сплітання, які, таким чином, забезпечували різні значення перепаду тиску, виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезе Согрогайоп. Ацетатні частини довжиною 27 мм (2,9/41,000) фільтра еталонної цигарки КепіисКу ЗКАЕ видалялися і викидалися. Фільтрувальні стрижні, виготовлені технологією СеїПЕх корпорації Сеїапезе

Согрогайоп, містили різні наповнювачі. Вводили один вибраний фільтрувальний стрижень повернутим до тліючої поверхні цигарки, вибирали додаткову ацетатну частину і вводили у фільтр, гарантуючи, що значення перепаду тиску (загальний опір затягуванню) цигаркового фільтру (закриті вентиляційні отвори фільтра) дорівнювало значенню перепаду тиску еталонної цигарки КепіисКу (КЕКС) (опір затягуванню 170 мм НгО ч-/- 2 95). Стрижні корпорації Сеіапезе

Согрогайоп мали довжину або 10 мм, або 12 мм, або 15 мм. Ацетатні частини мали довжину або 17 мм, або 15 мм, або 12 мм. Загальна довжина фільтра складала 27"мм. Параметри цигарок, оснащених фільтрувальними стрижнями СеїІЕх, які містили різні наповнювачі, вимірювалися і порівнювалися з контролем у цій біологічній оцінці.

В експериментах використовували наступні фільтри:

Цеоліт«Вуглець ся - 5 льгініт- Вуглецевий стрижень монострижень

Альгініт і Виноград -- : . о льгініт і Вуглець -- : . о льгініт і Виноград

Зо Експериментальний пристрій

Цигарки палилися в лабораторії, яка дотримується міжнародних стандартів і забезпечує якісну звітність в судах, в Університеті Технології та Економіки (Будапешт) у лінійній 8-портовій машині Рійгопа 5М302 для паління згідно зі протоколом стандарту ІЗО 3308. Цигарки палилися з блокованими вентиляційними отворами фільтра. Цигарковий дим пропускали крізь кембриджській фільтр (скловолоконний фільтр довжиною 44 мм, агп.по: 80202851, Вогома!аі

КС), а одержувана газова фаза пропускалася крізь силіконову трубку і барботувалась у скляному контейнері (імпінджер), який містив 1,5 мл розчину сироватки. Після кожної цигарки, подушку кембриджського фільтра міняли на нову і після кожної цигарки силіконову трубку міняли на нову.

Вимірювання антиоксидантної здатності сироватки

Для оцінювання зв'язувальної здатності вільних радикалів нових експериментальних цигаркових фільтрів, використовували два способи: 1.) Вапдох - комплект для визначення загальної антиоксидантної здатності (куплений у компанії Кападох І аб. Ц., Ститіїп, ОК) 2.) НАР - пероксид - бензидинова проба.

Контрольна сироватка для комплекту Сопігопогт Ріи5 постачалась компанією Апаїуйсоп

ВіотесппоЇодіеє АС, (зепптапу. Паління цигарок і обробка сироватки димом здійснювали в лабораторіях, які дотримуються міжнародних стандартів і забезпечують якісну звітність в судах, в Університеті Технології та Економіки (Будапешт) і зчитування показників проб здійснював др.

Сарваш в Центральному Дослідному Інституті для виробничо-адміністративного лікувального комплексу в Енергетичному Центрі Угорської Академії Наук (Будапешт). Використовували свіжо приготовані реагенти. Контрольну сироватку розводили у 5 мл подвійно дистильованої води.

Після пропускання цигаркового диму (1 цигарка) крізь кембриджський фільтр, одержувану газову фазу барботували у 1,5 мл роведеної сироватки згідно з протоколом стандарту ІЗО 3308 із заблокованими вентиляційними отворами фільтра. Після цього, 20 мкл обробленої сироватки змішували з 1 мл Реагента 1 (композиція надається нижче), гомогенізували і ініціювали реакцію 200 мкл Реагента 2 (композиція надана нижче). Зміну спектральної поглинальної здатності вимірювали через З хвилини. Спектральну поглинальну здатність барботованої сироватки порівнювали з спектральною поглинальною здатністю непрореагованої контрольної сироватки.

Контрольну величину визначали без контрольної сироватки з використанням 20 мкл подвійно дистильованої води. Вимірювання також здійснювали на планшетному рідері (параметри: 5 мкл сироватки, 250 мкл реагента КІ, 50 мкл реагента Кг).

Проба Капаох для визначення загального антиоксидантного стану в сироватці

Принцип проби: АВТ5 (2,2,-Азіно-біс(З-етилбензтіазолін-б-сульфонат) інкубують з пероксидазою (метміоглобін) і Н2Ог2 для одержання радикального катіону АВТ. Він має відносно стабільний синьо-зелений колір, який визначається при довжині хвилі 600 нм.

Антиоксиданти в доданому зразку спричиняють приглушення цього кольору до ступеня, пропорційного їх концентрації.

Зразок: контрольна сироватка для комплекту Сопігопогт

Фосфатний Буферизований Соляний Розчин

Метміоглобін

Пероксид водню (у стабілізованій формі) б-гідрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбонова кислота

Коо)

Процедура

Довжина хвилі: 600 нм

Кюветка: світлова доріжка довжиною 1 см

Температура: 37 С

Вимірювання: відносно повітря

Подвійно дистильовану воду змішують з 1 мл реагента К2. Стандарт змішують з 1 мл реагента К2. Зразок змішують з 1 мл реагента К2. Кожен розчин гарно змішують, інкубують для досягання необхідної температури і зчитують початкову спектральну поглинальну здатність (АТ). До кожного розчину додають 200 мкл КЗ. Одночасно запускали міксер та таймер.

Спектральну поглинальну здатність зчитують точно через З хвилини (Аг). Загальний антиоксидантний стан, виражений у95, встановлюють шляхом порівняння значення спектральної поглинальної здатності реагента та сироватки.

НЕР пероксид-бензидинова проба

Реагент 1: НЕР (пероксидаза хріну) 9000 од/л, гідрохлорид бензидину 233 мкмоль/л,

Хлорид натрію 155 ммоль/л,

Реагент 2: Пероксид карбаміду 0,36 ммоль/л

Розчинник: Подвійно дистильована вода

Інструмент: Ультрафіолетовий-Візуально Інформаційний спектрофотометр, температура 2576

Використовували свіжоприготовані реагенти. Контрольну сироватку розводили у 5 мл подвійно дистильованої води. Після фільтрування цигаркового диму з використанням кембриджського фільтра (1 цигарка), одержувану газову фазу барботували в 1,5 мл розчину сироватки згідно з протоколом стандарту ІБО 3308. Вентиляційні отвори фільтра блокувалися.

Після цього, 20 мкл обробленого розчину сироватки змішували з 1 мл Реагента 1 і гомогенізували, а реакцію ініціювали 200 мкл Реагента 2. Зміну спектральної поглинальної здатності при довжині хвилі 620 нм вимірювали безпосередньо через З хвилини. Спектральну поглинальну здатність барботованої сироватки порівнювали з спектральною поглинальною здатністю непрореагованої контрольної сироватки. Контрольний результат отримували без контрольної сироватки з використанням 20 мкл подвійно дистильованої води. Результати експериментів підсумували в Таблицях. Вимірювання також проводили на планшетному рідері (параметри: 5 мкл сироватки, 250 мкл реагента КІ, 50 мкл реагента К2.

Результати 1. НЕР пероксид-бензидинова проба

ДОК НМ В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В В ВВ

Антиоксидантну здатність і покращення, співставлені з контролем, зображені на Фіг. З і, відповідно, Фіг. 4. 2, порівняння порожнини та фільтрів СеІЕх винаходу у сироватці

НЕР пероксид-бензидинова проба

Конуролена лона пивна кеиеюву КК Кк ді

ПОоМОожЖинЕа ЗМО МЕ ЗО АК КИС ЕН ВМНОгова СУ ВКМ 55 5 С

Порожнина зоомг Збевявини ЗО лина бан 5 НО ще

ВЕН арее ем НАОВ НВ БО вунен ННЯ НАЮ У ОО ОБ

Антиоксидантна здатність і покращення порівняно з контролем зображені на фіг. 5 і, відповідно, Фіг. 6. 3, проба Капаох

Експерименти над сироваткою повторювали з методологією, яка використовує комплект

Капаох для визначення загальної антиоксидантної здатності. Результати показані нижче.

Коо)

пвдатні НН ро 00000000 вонтролем

ПОВ ши В о НИ

Б ЯН ЕІ

ЕДЕМ : рек : нов. орироватиа де 80

СТИ Н ВИ Ма КМ АДМ

Антиоксидантна здатність, зміна антиоксидантної здатності для контролю сироватки і зміна антиоксидантної здатності для цигарки КепіисКу показані на Фіг. 7, Фіг. 8 і, відповідно, Фіг. 9.

Результати для сироватки з використанням методології Капдох підтвердили, що фільтри винаходу як у структурах СеїІЕх так і в порожнині значно покращують антиоксидантний стан, ініційований газовою фазою цигаркового диму. Вважаючи, що цигарковий дим потрапляє в потік крові через кілька секунд після вдихання, застосування фільтра винаходу може приводити до здоровішого стану ендотелію у курців.

Вимірювання антиоксидантної здатності слини

Для оцінювання зміни стану вільних радикалів слини після паління і порівняння різних цигарок з фільтром, визначали і порівнювали ініційовані зміни слини курця.

Матеріали та способи

Цигарки, використовувані в експерименті, були еталонними цигарками КепіисКу ЗКАБЕ, виготовленими і скомпонованими Університетом штату Кентуккі, КУ, 05. Контрольні цигарки постачалися угорській компанії Оріїгінег 2ті корпорацією Сеіапезе Согрогаїййоп, Магтомв, МА, 05.

Цигаркові фільтри компонувалися, а контрольні цигарки вироблялися компанією Оріїгінег 2.

Фільтрувальні стрижні СеїЕх виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезхе Согрогайоп.

Вони містили різні фільтрувальні матеріали, інколи змішані. Додаткові матеріали ацетатного фільтра з різними характеристиками сплітання, які, таким чином, забезпечують різні величини перепаду тиску, виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезхе Согрогайоп. Ацетатні частини (2,9/41,000) фільтра довжиною 27 мм еталонних цигарок КепійисКу ЗКАЕ видалялися і викидалися. Фільтрувальні стрижні, які виготовляються технологією СеїПЕх корпорації Сеіапезе

Согрогайоп, містили різні наповнювачі. Один вибраний фільтрувальний стрижень вводили повернутим до тліючої поверхні цигарки, додаткову ацетатну частину вибирали і вводили у фільтр, гарантуючи, що значення перепаду тиску (загальний опір затягуванню) цигарки (закриті вентиляційні отвори фільтра) було тим же що й значення перепаду тиску в еталонних цигарках

КепіисКу (КЕКС) (опір затягуванню 170 мм НО ч-/- 2 95). Стрижні корпорації Сеіапезе Согрогайоп мали довжину або 10 мм, або 12 мм, або 15 мм. Ацетатні частини мали довжину або 17 мм, або 15 мм, або 12 мм. Загальна довжина фільтра становила 27 мм. Під час цього біологічного оцінювання показники цигарок, оснащених фільтрувальними стрижнями Сех, які містили різні наповнювачі, вимірювалися і порівнювалися з контролем.

Експериментальний пристрій

Зразки слини бралися з 38 об'єктів до та після паління цигарки. Лабораторії, які дотримуються міжнародних стандартів і забезпечують якісну звітність в судах, в

Будапештському Університеті Технології та Економіки набирали волонтерів. Кожен волонтер звітував о 8 - 9 годині ранку про збір слини, паління цигарки і знову збір слини. Кожен ранок палилася одна контрольна цигарка і збиралася слина в результаті її паління. Кожен волонтер палив 6 різних цигарок (відрізнялися фільтром) 19 жовтня - 20 листопада 2015 року. Курців просили звітувати про паління, не споживаючи якоїсь їжі або рідини того ранку і не чистячи свої зуби щіткою. Слину заморожували у льоді і подавали на оцінювання до лабораторій КЕКІ.

НЕР пероксид-бензидинова проба

Реагент 1: НЕР (пероксидаза хріну) 9000 од/л, гідрохлорид бензидину 233 мкмоль/л, хлорид натрію 155 ммоль/л,

Реагент 2: Пероксид карбаміду 0,36 ммоль/л

Розчинник: Подвійно дистильована вода

Інструмент: Ультрафіолетовий-Візуальний Інформаційний спектрофотометр, температура 2576

Використовували свіжоприготовані реагенти. Контроль розчиняли у 5 мл подвійно дистильованої води. Збирали слину, взяту у волонтерів. Після цього 20 мкл обробленого розчину слини змішували з 1 мл Реагента 1 і гомогенізували, а реакцію ініціювали 200 мкл

Реагента 2. Зміна спектральної поглинальної здатності при довжині хвилі 620 нм вимірювалась безпосередньо через З хвилини. Спектральну поглинальну здатність слини, зібраної після паління, порівнювали з спектральною поглинальною здатністю непрореагованої контрольної слини. Контрольний результат одержували без контрольної слини з використанням 20 мкл подвійно дистильованої води. Результати експериментів підсумовані в Таблицях.

У досліді задіяли 38 волонтерів згідно з наступним:

Курець Некурець Курець Некурець 18-24 роки 18-24 роки 25-40 років 25-40 роки 41-59 років 41-59 років

Результати

Результати проби зображені на Фіг. 10 ї ФІГ 11. де на ФІГ 11 Цигарка 1 - еталонна цигарка

КепінскКку, Цигарка 2 - Вуглецевий Стрижень, Цигарка З - Альг-Виноградний Стрижень і Цигарка 4 -Альг-Виноградна Порожнина

Короткий Опис фільтрів, використовуваних в експерименті

Фі 1 Контрольна талона Кеті Б

МТВ Цигарка Кептоску а в Кобн еешненн ізш о

Фільти З сю кт СеКра- 2-5

БО альний 5055 Виногова п оВільтря ; до п або 50-50 п

Результати аг да 155 115

Висновок

Наші експерименти над слиною підтвердили, що фільтри винаходу як в структурах СеїЕх так і в порожнині значно покращували антиоксидантну здатність, яка забезпечується цигарковим димом. Вважаючи, що цигарковий дим потрапляє в потік крові через кілька секунд після вдихання його, ми гадаємо, що ці дані стверджують, що фільтри представленого винаходу можуть робити внесок у здоровіший стан ендотелію у курців. Наші експерименти над слиною підтвердили, що фільтри винаходу як в структурах СеїІЕх так і в порожнині значно покращують антиоксидантну здатність в роті. Ми гадаємо, що це може робити внесок у здоровішу слизову оболонку у курців.

Приклад 3.: Вплив композиції цигаркового фільтра на спричинену димом смерть ендотеліальних і епітеліальних клітин.

Цигарковий дим є складною комбінацією хімікатів, які характеризуються високими рівнями оксидантів. Зростаюча кількість наукових робіт показує, що цигарковий дим спричиняє активацію легеневих судинних ендотеліальних клітин, що пов'язано з втратою ендотеліальної захисної функції. Ця втрата є ознакою ендотеліальної дисфункції. У цьому способі спричинений цигарковим димом оксидативний стрес приводить до ураження ендотеліальних клітин, що дозволяє проникнення моноцитів і активованих макрофагів. Ураження ендотеліального захисту може навіть являти собою ранній елемент пошкодження легенів у відповідь на контакт з цигарковим димом.

Також було показано, що цигарковий дим призводить до апоптозу альвеолярної тканини легенів завдяки апоптозу їх епітеліальних клітин, що робить внесок у розвиток хронічного захворювання легенів, такого як емфізема. Хоча усі типи клітин у легенях можуть вражатися оксидативним пошкодженням, епітеліальні клітини є основною мішенню для оксидантивного ураження через те, що вони утворюють першу лінію захисту в легенях. Тому, не дивно, що ураження епітелію цигарковим димом є важливим процесом у патогенезі пов'язаної з палінням хвороби легенів.

Низка досліджень показали, що високоактивні складові диму, леткі канцерогени та активні форми кисню (КО), отримані з цигаркового диму, і вражені цигарковим димом клітини роблять внесок у ураження легенів, яке включає ураження епітелію завдяки смерті клітин, і у подальше одержання хімічно активних форм кисню (КО5) в активованих епітеліальних клітинах. Тому, захист епітелію від ураження цигарковим димом вважається важливим для боротьби з численними хворобами легенів, пов'язаними з палінням цигарок. Наші дослідження показали, що композиція цигаркових фільтрів може бути важливою у зміні впливу цигаркового диму на спричинену смерть епітеліальних клітин, що представляють першу клітинну лінію, яка зіштовхується з цигарковим димом, а також ураження епітеліальних клітин. Фільтри, які могли б

Зо ефективніше видаляти компоненти цигаркового диму, які мають найвищий потенціал ураження епітеліальних клітин, а також ендотеліальних клітин, можуть послаблювати спричинюване цигарковим димом ураження легенів.

Матеріали, Об'єкти та Способи

Цигарки, використовувані в експерименті, були еталонними цигарками КепіисКу ЗКАБЕ, виготовленими і скомпонованими Університетом штату Кентуккі, КУ 05. Цигарки постачалися угорській компанії ОрійБійег 2 корпорацією Сеїапезе Согрогайоп, Магтом5, МА, И5.

Компонувалися цигаркові фільтри, а контрольні цигарки постачалися компанією Оріїгінег 2...

Фільтрувальні стрижні СеПЕх виготовлялись і постачалися корпорацією Сеіапезе Согрогаїйоп.

Вони містили різні фільтрувальні матеріали, інколи змішані. Додаткові матеріали ацетатних фільтрів з різними характеристиками сплітання, які, таким чином, забезпечують різні значення перепаду тиску, виготовлялися і постачалися корпорацією СеїЇїапезе Согрогаййоп. Ацетатні частини (2,9/41000) фільтрів довжиною 27мм еталонних цигарок КепіисКу ЗК4АЕ видаляли і викидали. Фільтрувальні стрижні, виготовлені технологією Сех корпорації СеїЇапезе

Согрогайоп, містили різні наповнювачі. Один вибраний фільтрувальний стрижень вводили в цигарку повернутим до тліючої торцевої поверхні цигарки, додаткову ацетатну частину вибирали і вводили у фільтр, гарантуючи те, що перепад тиску (загальний опір затягуванню) цигарки (закриті вентиляційні отвори фільтра) був тим же що й перепад тиску в еталонних цигарках КепіисКу (ККС) (опір затягуванню 170 мм НегО ч/- 2 95). Стрижні корпорації Сеіапезе

Согрогайоп мали довжину або 10 мм або 12 мм, або 15 мм. Ацетатні частини мали довжину або 17 мм, або 15 мм, або 12 мм. Загальна довжина фільтра становила 27 мм. У цьому біологічному оцінюванні вимірювали і порівнювали з контролем показники цигарок, оснащених фільтрувальними стрижнями СеїЕх, які містили різні наповнювачі.

Ендотеліальні клітини грають важливу роль у розвитку СОРО, оскільки захисна функція ендотеліальних клітин є важливою для функціонування здорових легенів; тому, втрата ендотеліальної захисної функції може робити внесок у інфільтрацію лейкоцитів, що є характерним знаком легеневих хвороб, які включають СОРО. Спричинена димом смерть клітин і запалення ендотеліальних клітин роблять внесок у розвиток СОРЮО. Тут ми показуємо, що, використовуючи різні композиції цигаркових фільтрів, ми можемо змінювати композицію диму і послаблювати руйнівні біологічні ефекти. Фіг. 2 показує, що дим від фільтрів, які містять суміш бо Альгініт/Цеоліт/Вуглець/Виноград, є менш руйнівними для ендотеліальних клітин.

Епітеліальні клітини є важливими компонентами легеневої тканини і відіграють суттєву роль у розвитку раку легенів та СОРО. Використовуючи легеневу епітеліальну клітинну лінію А549, ми показали, що фільтри, які містять суміш Альгініт/Цеоліт/Вуглець/Виноград, суттєво зменшують смертність епітеліальних клітин, таким чином, ймовірно приводячи до нижчого ризику виникнення СОРО. Результати показали, що фільтри винаходу, які містять суміш

Альгініт/Цеоліт/Вуглець/Виноград, видаляють деякі компоненти диму і, таким чином, спричиняють менше ураження епітеліальних і ендотеліальних клітин легенів. Захист епітеліальних і ендотеліальних клітин може робити внесок у послаблення розвитку спричинюваної цигарковим димом СОРО та іншої хвороби дихальних шляхів.

Одержання екстракту цигаркового диму

Екстракт цигаркового диму одержували, як описано вище (Спеп еї аі.; Спеп 2Н, Гат НС, іп

У, Кіт НР, Сао .), І ве 5, Медідро Е, Рагатезмжагап Н, Вуїег ЗМУ, Спої АМ. Ашорнаду ргоївіп тістоїшриЇе-аззосіаїєйд ргоївїп 1 дні снаіп-ЗВ (І СЗВ) асіїманез ехіппвзіс ароріовів дигіпа сідагене 5токКе-іпдисей етрпузета. Ргос Май Асай сі ОБА. 2010 Мом 2; 107(44)18880-5). Для одержання екстракту цигаркового диму, палилися контрольні еталонні цигарки КепіисКу ЗКАЕ з фільтром (Тобрассо Кезеагсйпй Іпбійше, Мпімегейу ої КепійсКу, Іехіпдіоп, КУ) шляхом використання перистальтичного насосу (МУУК Іпіегпайопа!), який використовує різні типи фільтрів. Збирали увесь дим. Кожну цигарку палили 4 хвилини з полишенням недопалку довжиною 15 мм і дим барботували крізь 7,5 мл середовища для росту клітин за допомогою силіконовою трубки. рН цього розчину, який розглядався як 100 95 міцний екстракт цигаркового диму, встановлювали рівним 7,45 і використовували протягом 15 хвилин після одержання. Після паління кожної цигарки, силіконову трубку заміняли на нову.

НОМЕС і клітинна культура А549 та обробки.

НОМЕС клітини (Ендотеліальні Клітини Пуповинної Вени Людини) одержували з Іопа (Апапеїт, СА, О5А) Саї. по.: С2519А) і вирощували в середовищі росту ендотеліальних клітин (опга, Апапеїт, СА, О5А) у вологій атмосфері, яка містила 5 95 СО». Для аналізу смерті клітин, 5 х 103 НОМЕС» на лунку висівали у 96-лункові планшети в середовищі росту ендотеліальних клітин, яке містило фактори росту і 2 95 сироватку. Перед кожним експериментом середовище заміняли свіжим середовищем, яке не містило фактор росту і містило 1 95 сироватку, і

Зо інкубували 10 95 екстракт диму протягом 24 годин.

Людські альвеолярні базальні епітеліальні клітини аденокарциноми А5б49 одержували з

Європейської Колекції Автентифікованих Клітинних Культур (ЕСАСС) (Сеї пе: А549 Саї. по.: 86012804). Клітини А549 вирощували у мінімальному ессенціальному середовищі Ігла, модифікованому способом Дульбекко (ОМЕМ), яке містило 10 95 РС5 у вологій атмосфері, яка містила 5 95 СО». Для аналізу смерті клітин, 5 х 103 клітин А549 на лунку додавали у 96-лункові планшети у мінімальному ессенціальному середовищі Ігла, модифікованому способом

Дульбекко (ОМЕМ), яке містило 10 95 відфільтрованого диму цигарки (ЕС5), і обробляли 10 95 екстрактом цигаркового диму (С5) протягом 24 годин.

Досліди щодо Життєздатності Клітин

МТТ проба

Клітини висівали у 96-лункові планшети з початковою щільністю, яка надана на Фігурах, і вирощували протягом ночі перед обробкою димом. Після інкубаційного періоду, середовище видаляли і заміняли на 4 години КРМІ-розчином, який містив відповідну кількість розчину МТТ (3-(4,5-диметилтіазол-2-іл)-2,5-дифенілтетразолін бромід) (Спетісоп Іпс., ЕІ Зедипадо, СА) (14).

Реакцію МТТ завершували додаванням НСІ до середовища в кінцевій концентрації 10 мМ.

Кількість нерозчинного у воді голубого формазанового барвника, отриманого з МТТ, була пропорційною кількості живих клітин і визначалась рідером Апіпоз І абієсп 200 проби зв'язаного ензимом імуносорбента при довжині хвилі 550 нм після розчинення голубого формазанового осаду у 1095 505 (додецилсульфат натрію). Усі експерименти проводилися у принаймні 6 реплікатах і повторювалися три рази.

Проба Сульфородаміну В (5КВ).

Клітини інкубували у 96-лункових планшетах протягом 24 годин, як описано вище. Культурне середовище потім викидали, а клітини фіксували іп 5йи додаванням 100 мкл холодної 10 95 (мас./о0б.) трихлороцтової кислоти і інкубували протягом 30 хвилин при температурі 476.

Надосадову рідину викидали, а планшети промивали п'ять разів водопровідною водою і сушили на повітрі протягом 24 годин. Додавали розчин ЗКВ (100 мкл) в концентрації 0,4 95 (мас./об.) у 195 оцтовій кислоті, а планшети інкубували протягом 20 хвилин при кімнатній температурі.

Після забарвлення, незв'язаний барвник видаляли промиванням п'ять раз 195 оцтовою кислотою, а планшети сушили на повітрі. Зв'язаний барвник потім робили розчинним (200 мкл) бо 10 мМ Ттгі5 (рН 10,5), а спектральну поглинальну здатність зчитували 96-лунковим планшетним рідером при довжині хвилі 560 нм, віднімаючи вимірювання фону при довжині хвилі 600 нм з використанням багаторежимної детекторної системи Рготеда Сіотах.

Результати: вплив диму на людські епітеліальні та ендотеліальні клітини легенів

Як відзначалося, епітеліальні клітини легенів відіграють важливу роль у розвитку хронічної обструктивної хвороби легенів (СОРО)). Зміни композиції цигаркового фільтра потенційно може надавати дим, який повинен знижувати смертність епітеліальних клітин порівняно з димом від традиційної цигарки. Тому, ми проаналізували роль різних композицій фільтра на спричинювану димом смертність епітеліальних клітин. Фіг. 1 зображає впливи різних композицій фільтра на смертність серед клітин А549. Результати, зображені на Фіг. 1, одержували з використанням 10 95 екстракту диму, застосованого до клітинних культур. Однак, ймовірно, що результати з використанням 10 95 концентрації диму є коректнішими, оскільки зростаючі концентрації диму показували проліферативний вплив цигаркового диму. Дані на Фіг. 12 вказують, що три фільтри винаходу, які місять Альгініт/Цеоліт/Розмелену Виноградну Шкірку і Насіння (5555), альгініт/з55(0 і альгініт/вуглець, суттєво знижують спричинювану димом смертність епітеліальних клітин А549.

Фіг. 13 показує впливи різних композицій фільтрів на спричинювану димом смерть

Ендотеліальних Клітин Пуповинної Вени Людини (НОМЕС). Тут ми використовували 4 цигарки для кожного вимірювання для кожного з фільтрів і використовували 6 реплікатів, і ці дані показують, що фільтри винаходу, які містять різні фільтрувальні матеріали у фільтрі, суттєво знижують спричинювану димом смертність ендотеліальних тканин.

Ці експерименти показували, що цигаркові фільтри винаходу суттєво змінюють структуру виживання епітеліальних і ендотеліальних клітин, які контактують з цигарковим димом. Це може бути корисним у боротьбі з хворобами судинної системи та органів дихання, спричинюваних цигарковим димом.

Приклад 4.: Вироблення запалювальних цитокінів після контакту з цигарковим димом у 3- вимірній моделі тканини людських легенів

Паління цигарки є головним фактором, пов'язаним з багатьма складними хворобами легенів. Контакт з димом може викликати запалювальні процеси завдяки вивільненню запалювальних цитокінів. Макрофаги відіграють важливу роль у запалювальному процесі і є

Зо особливими джерелами інтрелейкіна-8 (ІІ -8) і інтерлейкіна-б (ІІ -6). ІІ -8 є багатофункціональним цитокіном, який, в більшій мірі, діє як нейтрофільний хемоатрактант, у той час як 1-6 зв'язаний з погіршеним метаболізмом у пацієнтів, які страждають від СОРО. Оскільки обидва цитокіни відіграють важливу роль в багатьох хворобах легенів, таких як СОРО, фіброз легенів або астма; здається доцільним дослідити вплив нових цигаркових фільтрів на рівні цих цитокінів в нашій нещодавно розробленій комплексній системі моделі легенів. Запалювальні процеси в легенях пов'язані з виробленням кількох цитокінів і потраплянням нейтрофілів у дихальні шляхи. 1-6 та

І/-8 відіграють важливі ролі в ініціюванні і поширенні запалювальних процесів. Контакт з цигарковим димом може активувати запалення завдяки підсилювальній секреції прозапалювальних цитокінів, що приводить до хронічного запалення. Цигарковий дим може також викликати зміни на рівні органу, такого як деструкція дихальних шляхів і втрата поверхонь газообміну, що можуть приводити до погіршених функцій легенів. Усі ці негативні впливи можуть робити внесок у появу тяжких хвороб, які включають СОРО або рак. Використовуючи культуру

З-вимірної тканини як спосіб дослідження, можна оцінювати комбінацію клітин, яка діє як функціональний тканинний блок, порівняно з окремими клітинами. Тканина легенів містить епітеліальні клітини, які мають відмінну клітинну архітектуру. Ці клітини мають спеціалізовані контакти клітина-клітина, поляризовану морфологію і кріпляться до нижньої основної мембрани.

Збереження цих ознак є важливим для нормального функціонування тканини, включаючи проліферацію, диференціацію, виживання і секрецію. Клітини природно ростуть у З-вимірному середовищі. Просторове розташування клітин в цьому середовищі показує як вони взаємодіють між собою і їх мікросередовище. У свою чергу, міжклітинні сигнали погіршують морфологію і ряд клітинних функцій. Тому, коли кандидати в лікарські засоби або токсичні агенти досліджуються з використанням проб на клітинній основі, використовувані способи вирощування культур повинні симулювати найприроднішу можливу форму представлення іп мімо. Найприроднішим способом симуляції росту клітин тканини для дослідження застосування лікарських засобів є, ймовірно, 3- вимірність. іп міго дослідження цигаркового диму ускладнене. Було оцінено велику кількість клітинних ліній, але усі вони мають власні обмеження. ІІ -8 і 1-6 можуть вироблятися кількома запалювальними і легеневими клітинами, але дослідження одного особливого типу клітин може невірно представляти загальний вплив контактування з димом. Клітини, які ростуть у 2-вимірних клітинних культурах, запросто використовуються в кількох типах фармакологічного досліду, але бо ці іп міго обставини менш релевантні для іп мімо ситуації ніж у випадку для системи З3-вимірної моделі. Тривимірні культури легеневих клітин краще представляють те, що відбувається іп мімо, маючи архітектуру і структуру експресії, яка близько узгоджується з людськими легенями.

Оскільки легеня є складаним органом, необхідно дослідити біологічні процеси в комплексній системі моделі, беручи до уваги те, що розташування клітин впливає на задану відповідь особливого стимулу. З-вимірна тканина легенів Хумельтіса поєднує багато типів клітин, які представляють більшість клітин дихального тракту.

Способи

Нормальні первинні людські дрібні епітеліальні клітини дихальних шляхів (ЗАЕС) і нормальні людські фібробласти легенів (МНІ ЕР) купувалися у компанії І оп7а. Ці клітини бралися у анонімних донорів різної статі і віку. Людські периферійні моноцити бралися позитивним відбиральним мікрокульковим комплектом СО14 (Мінепуї Віоїес). Для З-вимірного вирощування, клітини БАЕС і МНІЕ змішувалися у пропорції 1:1 (ЗМ сфероїди) і людські моноцити також змішувалися з цими людськими первинними клітинами (ЗММ сфероїди). Клітини висівалися на нижній 96-лунковий О-подібний планшет. Сфероїди обробляли екстрактами цигаркового диму (СЕ) протягом 48 годин перед вимірюванням. Цигарки, використовувані в експерименті, були еталонними цигарками КепійсКу ЗКАЕ, виготовленими і скомпонованими Університетом штатом

Кетуккі, КМУ, 05. Цигарки постачалися угорській компанії Оріїгікег 2 корпорацією СеїІапезе

Согрогайоп, Маггом5, МА 05. Цигаркові фільтри компонувалися, а контрольні цигарки виготовлялися компанією Орійбійег 2. Фільтрувальні стрижні Сех виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезе Согрогайоп. Додаткові матеріали ацетатного фільтра з різними характеристиками сплітання, які, таким чином, забезпечують різні значення перепаду тиску, виготовлялися і постачалися корпорацією Сеїапезе Согрогайоп. Ацетатні частини фільтрів довжиною 27мм (2,9/41,000) еталонних цигарок Кепіиску (ККС) ЗК4АЕ видалялися і викидалися. Фільтрувальні стрижні, які виготовлені технологією СеїПЕх корпорації СеїІапезе

Согрогайоп і містять різні наповнювачі, вводилися повернутими до тліючої поверхні цигарки.

Додаткову ацетатну частину вибирали і вставляли у фільтр, гарантуючи, що значення перепаду тиску (загальний опір затягуванню) цигарки (закриті вентиляційні отвори фільтра) мали ту ж величину перепаду тиску що й еталонні цигарки КепіисКу (ККС) (опір затягуванню 170 мм НгО -/- 2 90). Стрижні корпорації Сеіапезе Согрогайоп мали довжину 12 мм. Ацетатні частини мали

Зо довжину 15 мм. Загальна довжина фільтра становила 27 мм. Виготовляли загалом два різних фільтра і ними оснащували еталонні цигарки КепійисКу (ККС5). Показники диму від цигарок, оснащених фільтрами представленого винаходу, фільтрами СеїЇЕх, які містять різні наповнювачі, вимірювали та порівнювали з контролем під час біологічного оцінювання.

Категоризація цигарок була наступною:

Цигарка 1: ЕЄталонна Цигарка КепіисКу (ККС)

Цигарка 2: Вуглецевий монострижневий фільтр СеІКоа-12-С

Цигарка 3: Фільтрувальний стрижень, який містить суміш Альгініт/Виноград, СеіКоа-12-АС

Екстракт цигаркового диму (СЗЕ) отримували барботуванням диму з 2 цигарок крізь 10 мл середовища культури клітин при сталому повітряному потоку, подаваному гідротехнічним вакуумним насосом (ВіоКай) протягом загального періоду тривалістю дві хвилини. Відкрите середовище фільтрували за стерильних умов насосним фільтром з діаметром отворів сітки 0,22 мкм. Розсіяння світла на розчиненому сипкому матеріалі показувало відсутність суттєвої відмінності в інтервалі довжин хвиль 320-350 нм. Цей розчин вважали 100 95 екстрактом. Для кожного експерименту екстракт цигаркового диму (С5Е) отримували протягом 30 хвилин.

Екстракт цигаркового диму (С5Е) (0,5 95) наносили на культури тривимірної тканини протягом 48 годин. Після 48 годин вимірювалися показники запалювальних цитокінів, одержаних 3- вимірними мікротканинами, у надосадовому середовищі Цитометричним Кульковим

Комплектом для визначення Людських Запалювальних Цитокінів (ВО Віозсіепсе5). Цей комплект надає кількісне вимірювання рівнів протеїну 1-8 і І/-6 в надосадовій культурі тканини. Спосіб базується на флуоресцентних кон'югованих мікрокульках відомого розміру і детекторному реагенті, який надає сигнал, пропорційний кількості зв'язаного цитокіну. Під час З годинної інкубації, уловлювальні мікрокульки формують комплекс з цитокіном з надосадової фази разом з детекторним реагентом. Інтенсивність флуоресценції аналізували проточним цитометром

ЕАС5 Сапіо ІІ (ВО Імуноцитометричні Системи, Егетродедет, ВеїЇдішт) з використанням програмного забезпечення ВО БАСЗ ОІМА Уб і дані аналізували програмним забезпеченням

ЕС5 Ехргез55 М3. Результати представляють середню інтенсивність флуоресценції кон'югованих мікрокульок після зв'язування І/--6 і 1І--8.

Результати

Для дослідження одержання запалювальних цитокінів в залежності від типу фільтра, бо сфероїди обробляли екстрактом цигарокового диму (С5Е) від стандартних цигарок і двох різних цигарок, які містять фільтр, протягом 48 годин. Дані показують, що в ЇЇ -8 і ІЇ-6 знижувався вміст агрегатів, які містять макрофаги, після обробки екстрактом цигаркового диму (С5Е) з З цигарок з фільтром, вказуючи знижену здатність ініціювати запалювальний процес. Відмінності підтверджені як статистично суттєві для обох цитокінів.

Фіг. 14. зображає людський протеїн ІЇ-8 в надосадових фазах сфероїдів легенів, які містять макрофаги, після 48 годин у З клітинних агрегатах (ЗАЕС, фібробласти і макрофаги).

Фіг. 15. зображає людський протеїн ІЇ/-б6 в надосадових фазах сфероїдів, які містять макрофаги, після 48 годин.

Зниження рівнів цитокінів був статистично суттєвим тільки в агрегатах, які містять макрофаги, і тільки після 48 годин. В агрегатах, сформованих тільки фібробластами і первинними клітинами (не макрофагами), зниження рівнів цитокінів не було суттєвим або після 24 або 48 годин. З цигарки знижували рівні цитокінів до рівня, визначеного в контрольному середовищі.

Висновки

І -6 ї 1--8 відграють важливі ролі у ініціюванні і поширенні запалювальних процесів. Контакт з цигарковим димом може активувати запалення завдяки враженню тканини, таким чином, підсилюючи секрецію прозапалювальних цитокінів, що може приводити до хронічного запалення. Ймовірно, культури З-вимірної людської тканини показують близьку спорідненість з біохімічними і патологічними процесами людських тканин іп мімо. З цього приводу, може бути доцільним припустити, що статистично суттєве зниження досліджених цитокінів в імунологічно активних агрегатах (які містять макрофаги), коли дим фільтрується Фільтром ЖЗ3, може бути вигідним також у іп мімо навколишньому середовищі. Дані підсумовуються наступним чином (ЗМ підтримують агрегати, які містять первинні епітеліальні клітини і фібробласти, у той час як ЗММ підтримують агрегати, які містять епітеліальні клітини, фібробласти і макрофаги): . І сна ЗМ загод. сіни шк : Ом и да щ зе. ее Я 5 0 ДН НИ НИ НЕ МНК НН Я п ев

ШК БОЮ 00 00000ОВЖОЮ 001000 005 ОБЖ 0000 СОВОЇ

В ни М НН в -- нн Фо З вони 0:00 ЖЖ Я КАК : КОТУ ОІВ ЗХ ї ХВ Н С Н ис о БММ вом : пн он ше Б Ш ол ! КОНЯ: МКМ авнн у рід ЯК ї ВОК ЯМЛЬНЕИХ Її ВаНУБЯ УКОСИ НИ ММ Кі ЯН я МНВК І пн п й чт не ши шин ан ши

МО ОА 0 ЗАВБХ НЯ НИК ії дао її А о ВОВАЮ ї ВАХ Е и ко 0:00 1. АВ ії КИЙ 1 ЯМИ її ЩНЖ її ЗНОВ: я щи

Короткий Опис

Вищезгадані Приклади чітко демонструють те, що альгініт особливо ефективний, коли

Зо використовується окремо в цигаркових фільтрах або в комбінації з іншими відомими компонентами, як описано вище. Неочікувані і нові ознаки винаходу полягають в тому, що застосування альгініту в цигаркових фільтрах приводило до значно менших кількостей форм активного кисню (КО5) в слині, до значно слабшого формування активних форм кисню (КО) в сироватці крові, до слабшого ендотеліального ураження, до слабшого ураження епітелію легенів, до значно вищого рівня глутатіону, до слабшого ураження тканин легенів і слабшого запалення в тканині легенів.

Іп мйго біологічні досліди вибиралися таким чином, що вони мали чіткий і добре встановлений зв'язок з іп мімо біологічними шляхами, які були задокументовані для причинних зв'язків більшості пов'язаних з палінням хвороб. Окрім того, в кожному випадку, було показано, що фільтри винаходу виробляли дим, який був значно безпечніший в іп міго дослідах ніж дим, отриманий з еталонного фільтра цигарки КепіисКу. Ці результати, тому, надають сильне підтвердження того, що цигарки, оснащені цими фільтрами, можуть гарно послаблювати поточні впливи паління цигарок на здоров'я.

Приклади показали, окрім того, що навіть сам по собі альгініт має значно кращі фільтрувальні характеристики по відношенню до відомих фільтрувальних матеріалів, і що альгініт та фільтрувальні матеріали, які належать до попереднього рівня техніки, діють синергічно. Тому, хоча не всі комбінації згадані у прикладах, для фахівця у цій галузі очевидно, що будь-яка комбінація альгініту і відомих фільтрувальних матеріалів в конкретній технічній галузі будуть мати ті ж властивості. Тому, представлений винахід чітко охоплює усі такі комбінації.

Claims (17)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Застосування альгініту для фільтрування цигаркового диму.

2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що альгініт використовують у цигаркових фільтрах.

3. Застосування альгініту для виготовлення цигаркових фільтрів.

4. Застосування за п. 2, яке відрізняється тим, що альгініт використовують окремо або у комбінації з іншими речовинами, використовуваними у цигаркових фільтрах для послаблення шкідливих впливів цигаркового диму.

5. Застосування за п. 4, яке відрізняється тим, що інші речовини вибирають з групи, до якої входять активоване вугілля або виноградні компоненти.

6. Застосування за п. 5, яке відрізняється тим, що інша речовина є активованим вугіллям.

7. Застосування за п. 5, яке відрізняється тим, що інша(ї) речовина(и) є виноградним(и) компонентом(ами).

8. Застосування за п. 7, яке відрізняється тим, що виноградні компоненти мають вигляд розмеленого насіння та шкірки винограду.

9. Альгініт для застосування у зниженні ризику ураження людини цигарковим димом.

10. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що його використовують у формі цигаркових фільтрів, які містять альгініт.

11. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику ураження означає меншу кількість активних форм кисню (КО) в слині.

12. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає меншу кількість активних форм кисню (КО5) в сироватці.

13. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає менше ураження епітеліальних клітин.

14. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає менше ураження ендотеліальних клітин.

15. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає вищий рівень глутатіону.

16. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає менше ураження в тканинах легенів.

17. Альгініт для застосування за п. 9, який відрізняється тим, що зниження ризику уражень означає менше запалення в тканинах легенів.

Зміна антиоксидантної здатності Ку: шин нн п п в в в ; рон нн нн п В В НН ВН В В В : : пря пен фра ее нн зетнннннннннннннннх Ж о УВУ ох і НЯ ооооююннхуєннлиттялятитн тоні -- -2035 ПН АН пн дент; нн и в п в п Фільтр1 Фільтр 2 Фільтр З

Фіг. 1 Ящичкова діаграма багатьох змінних Крупноформатна таблиця 2 у бензидиновій пробі 13м717с (13 волонтерів, 17 цигарок) 1009, Медіана; Ящичок: 2525-7575; М/пі5Кег; Вуса о оч у пи п ИЙ нн і о ДО ння шо поолятнннносо--4 І Медіана (12595-75956 Т Вуса «0 : попе - я . о Викиди Фільтр 1 Фільтр 2 Фільтр З я Екстремуми

Фіг. 2 піинонсидантно зд Петі Конан умо с ОО о НН о м. о її с 5-0 С» Б СО Мо ЕН ПОН ПОН ОВ СОБООС КОХ З з ОК КК ОО ОККО По МОХ КЕ с о 1 о о. о. о. ИН М ИН 0. ПН о. ОО ОКО ВУ с о. 5. о с с о. г . с о. с с є п ОС ЕКОН ЕЕ ЕК о. ОВК : с ШЕ нн Ве ОО г З ОК Ки Я АЛИЧА з ПА ККАКАХ КАМ ІК ЕН М й ДЛ НД

Фіг. З ПЕК НК ПІНИ г і Ми 0 ОО 0 доск : оналення порівня о М 3 ВМО ЕК оо я озЗкОо сш ша Ви пе Я о. пе | г с с її с ПК о о в Ни ПИШЕ я ще ; с. с В й нн я а ОО с о МОХ Я ПЕ о ОО Вена ПИТИ . ИН Я ще ПИп ПИПИИМ ОО Я в ДН ППО ПКПНННК КВ ХХ ТИПИ ШИТИ ПИППИПИШИ ИНШПИНИИНИ ХО

С . с с ог Пон ; КО, Я ПОП ІКЕОВООО Ох о МО с : . ОО о. Но ВВ ВЕ ОВВ КО ВК ОО Е ОО ОО ОВ п пня ВВ в МО о В 55 п ВН ОКО Во ЗВ ех ОООХОК о КОЖ о с 0 МОХ о о ВО У КО о оон КК еВ ОО ех Е 00 ШЕ нн : і ненні КВ нн КЕН ок кни ЦО М о що «ВЕНА в що ах лу нн он НОшея ОО х В НН ю НН ПАНИННАНК нання о Я

Фіг. 4

/"Антиоксидантна здатність (35) - Дим Після Подушки Кембриджського Фільтра.дГ с о п. о . с с с о .- о с о с с с о ОО о 1 її с о. с о що с с шо о. ш- 3 5352323З3902902 5Б:2(Б - - - 6 -. п ан чн нн НС

Фіг. 5 и 0000 Вдосконалення порівняно зКонтролемію). С - ше її 11 СС М З З п СХ

Фіг. 6 і аншнанння Ядетнить Ск) «Дим Після бодишня емевадннно д ї МОНЕ о а зе ї ЕЕ КК КА пи : УК С її у З .

с о. с п с с г ша с о ОО пає :

Фіг. 7 Обмін Антисксидентної Здатності для Контве о КО: о о КК в

-н. с . г с

Фіг. 8 в й с о пе 1 ше щ с кв п КОКО ТОК КЕ же у ЗИМ М п о 7 ку вмгліц СТЬ т -щ я п

Ящичкова діаграма багатьох змінних 18у738с (18 волонтерів, 38 цигарок) Медіана; Ящичок: 2596-7595; МУпізКег: Вуса 8095 во Ї 40961 ди пеня о о ро ї ш 8 о аз Медіана (1259-75, мини - 1. Вуса Цигарка1 Цигарка З о ВИКИДИ. Цигарка 2 Цигарка 4 ж Екстремуми

Фіг. 11

Вплив композиції фільтра на спричинювану димом смерть у клітинній лінії АбА9 епітелію людських легенів Дим МТТ 2015 09 03 Ед що І. щі щ щі щ щ що пн шинишниш ше ши НС о І НН ка о аа в и ВИ ог аз ши ниття ««ер«оООі порівнано з Ме11 (контрольний Фільтр) зебр«б,ові порівняно з необробленими клітинами Клітини АННОЮ ЗХ клітинулунку МНевброблено Б4 реплінати, іншими є За реплікати

Мо.31: Комтроль КАС

Мо. 18: Вуглец. моностр довж, 1Омм 0 Сетод-10-С

МоО.19: Альт. моностр. довж, 10Ммм Сеікод-10-А

Мо.Зі1: Цеоліт, моностр,. довж. ї0О0мм 0 Свійоб-10-Х

Мо. «8:йлЬГ ВО ств, 50506 д. ібмм Сеінод-10-Аб

Мо. З Вукл.иАльс, сто. 50506 д. ми Секой1О-сА

Мо. 27:55 бмм/Цеол, 5мм/Альт. Бмм СеіКой-15- СА

Фіг. 12

Вплив композиції фільтра на спричинювану димом смерть НОУЕС ендотеліальних клітин 58 105 ДИМ НИОМЕС 5хХ10 клітин/лунку 2016 01 05 08 жк жк двб- п: нй кож щ о о с о

" с.

ЩІ . ще і Необроблені Контроль Ме Б» ша ме клітини 105 дим 105 дим 105 дим 1056 дим

1. САМ 150 тв АБ як р«0001 порівняно з Ме 6 (контрольний фільтр) ША Я ; й я. оте і: ткрео, 01, ред 001 порівняно з необробленими клітинами З Смик Те АЮ ; | | ; : і ; В у " п» не відрізняється від необроблених клітин Я Но с ще в.

Є п.-8 й й . о : ТЯ не ІЙ В ІЗ хе Ве в ня ях воли ти тю ую т или ким тили жю и Ве иваоня я о ЗМ с х я г п Па НН 000 ОО оон В . те КЗ шен нн НН о вв вн и дво Зоо ше ше 3 пп ж ие

0-3. о осо вен с ос нення с- се зосооих КЕ 0 ВУ ОК МОБ ПЕКИНННН НН "Же ОККО ОХ ї її. пн ння ші моенєноннсев ш. що шин ток іш ШИ БИ що

І . п їт23 МК В З ЗОМ КК КО КВ

Фіг. 15 0 КомпютернаверсткаЛ.Ціхановська.д/ 00000000 ДП "Український інститут інтелектуальної власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601