UA113094C2 - Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів - Google Patents
Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів Download PDFInfo
- Publication number
- UA113094C2 UA113094C2 UAA201501207A UAA201501207A UA113094C2 UA 113094 C2 UA113094 C2 UA 113094C2 UA A201501207 A UAA201501207 A UA A201501207A UA A201501207 A UAA201501207 A UA A201501207A UA 113094 C2 UA113094 C2 UA 113094C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- fibrin gel
- enzyme
- obtaining
- blood plasma
- bone
- Prior art date
Links
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 title claims abstract description 53
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 title claims abstract description 53
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 title claims abstract description 53
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 title abstract description 12
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 title abstract description 8
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title abstract description 7
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 title description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 title description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title description 3
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 title description 2
- 108010077727 ecamulin Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 12
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 abstract description 7
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000012190 activator Substances 0.000 abstract description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 4
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 abstract description 3
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 abstract description 3
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000002435 venom Substances 0.000 abstract description 3
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 abstract description 3
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 abstract description 3
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 abstract description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 48
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 108010080379 Fibrin Tissue Adhesive Proteins 0.000 description 5
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 5
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 5
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 5
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 4
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 4
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 4
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 4
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 101001038021 Lonomia obliqua Lopap Proteins 0.000 description 3
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000002747 omentum Anatomy 0.000 description 3
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 2
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 241000243820 Polychaeta Species 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 description 2
- 239000002874 hemostatic agent Substances 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 239000003106 tissue adhesive Substances 0.000 description 2
- IJVRPNIWWODHHA-UHFFFAOYSA-N 2-cyanoprop-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)C(=C)C#N IJVRPNIWWODHHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 2-octyl Chemical group 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 108010027612 Batroxobin Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 201000000023 Osteosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 230000002358 autolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002210 batroxobin Drugs 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 description 1
- 229960002713 calcium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000002729 catgut Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000003275 diaphysis Anatomy 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000535 fibrinogen concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000007468 re-laparotomy Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Винахід стосується ортопедії, травматології та хірургії і може бути використаний для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності прояву запальних процесів шляхом використання аутологічного фібринового гелю при його нанесенні на уражену ділянку. Аутологічний фібриновий гель одержують одностадійно при взаємодії плазми крові пацієнта з активатором протромбіну - ферментом екамуліном, виділеним з отрути змії ефи багатолускової, в присутності іонів кальцію.
Description
Винахід належить до медицини, а саме до ортопедії, травматології та хірургії, і може бути використаний для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності прояву запальних процесів. Аутологічний фібриновий гель дозволяє знизити алерго- та імуногенність, що підвищує ефективність лікування. У контактну ділянку вводять аутологічний фібриновий гель, утворений із плазми крові пацієнта та активатора протромбіну - ферменту екамуліну з отрути ефи багатолускової.
Відомо про використання в клінічній практиці композицій на основі біополімерів (желатину, колагену, фібрину та ін.) і поліефірів (етилового, н-бутилового, 2-октилового, 2-ціанакрилового), які мають гемостатичні та репараційні властивості. Однак у цих композитів є ряд недоліків: значне зниження здатності до склеювання в середовищі черевної порожнини, подразливість тканин від окремих видів адгезивів, які містять формальдегідні компоненти (1-41.
Відомо про використання фібринового клею як хірургічного адгезиву чи гемостатичного агента в вигляді спеціальних наборів, що містять концентрований фібриноген, отриманий з плазми крові донорів, у поєднанні з білюовим активатором тваринного походження, таким як тромбін чи батроксобін, для одержання гетерологічного фібринового клею (5-81.
Основними недоліками препаратів, виготовлених з плазми крові донорів, є можливість розвитку алергічних реакцій на чужорідні білки, небезпека передачі гематогенних інфекцій (гепатити В, С та ВІЧ-інфекція), складність виготовлення і використання: багатостадійність, багатокомпонентність, довготривала попередня підготовка білкового препарату можливість спонтанної полімеризації фібриногену у флаконі.
Найближчим аналогом аутологічного фібринового гелю є фібриновий герметик, отриманий з аутологічної крові |9Ї, виготовлення якого проводять шляхом отримання концентрату фібриногену з плазми крові пацієнта або карантинизованої плазми крові одного донора. В подальшому до отриманого концентрату додають необхідні компоненти (тромбін, кальцію хлорид, апротинін) та отримують фібриновий герметик. Основними недоліками цього способу є використання великих об'ємів крові (60-150 мл), що обмежує використання герметику у дітей та хворих із порушеннями системи гемостазу, складність виготовлення (багатостадійність), можливість передачі гематогенних вірусних інфекцій з препаратом тромбіну (гепатит В, С та
ВІЧ-інфекція), складність визначення виходу фібриногену, що пов'язано зі збереженням умов
Зо стерильності. Крім того, для нанесення фібринового герметика на контактну ділянку необхідний спеціальний пристрій - двосекційний шприц.
Відомо, що регенерація кісток при захворюванні та переломах кісток відбувається ефективніше за присутності біологічно активних низькомолекулярних білкових компонентів плазми крові |101І.
Задачею винаходу, що заявляється, є: створити простий у виконанні одностадійний спосіб одержання аутологічного вірус-безпечного фібринового гелю (далі - фібринового гелю) для клінічного використання безпосередньо перед застосуванням в ортопедії, травматології й хірургії з використанням набору для одержання фібринового гелю.
Задачу винаходу, що заявляється, вирішують шляхом взаємодії плазми крові пацієнта з ферментом екамуліном як (активатором протромбіну) в присутності іонів кальцію, що забезпечує утворення тромбіну в плазмі крові та, в свою чергу, приводить до перетворення фібриногену на фібрин з утворенням фібринового гелю, який має адгезивні властивості; та включенням до набору для одержання фібринового гелю необхідних стерильних компонентів: ліофілізованого ферменту екамуліну, розчину кальцію хлориду та фізіологічного розчину.
Фібриновий гель з власної плазми крові пацієнта сприяє зупиненню кровотечі, регенерації кісткових і м'яких тканин, знижує інтенсивність запальних процесів, виключає небезпеку інфікування, відторгнення та загрозу алергічних реакцій, забезпечує неантигенність та відсутність подразнюючої дії, відзначається високим ступенем моделювання ураженої поверхні тканин та високою щільністю прилягання до них, простотою нанесення аплікації. Виконання способу одержання фібринового гелю потребує незначної кількості крові пацієнта - 5-20 мл; швидкість утворення фібринового гелю залежить від кількості ферменту екамуліну (0,10-1,00 мг), доданого до плазми крові, час його утворення триває від 50 до 100 с.
Екамулін - фермент, який виділяють з отрути змії ефи багатолускової Е. тийіздоатацизв (11.
Фермент екамулін - ліофілізована порошкоподібна речовина білого кольору, легко розчинна в воді, є активатором протромбіну.
Для приготування аутологічної композиції фібринового гелю спочатку одержують плазму з крові пацієнта, до якої додають розчин ферменту екамуліну та розчин кальцію хлориду; суміш обережно перемішують та вносять безпосередньо на уражену поверхню.
Набір для одержання фібринового гелю включає стерильні компоненти: ліофілізований бо фермент екамулін; розчин кальцію хлориду; фізіологічний розчин.
Приклад 1. Спосіб одержання фібринового гелю.
Для отримання аутологічної плазми крові безпосередньо перед застосуванням фібринового гелю проводять забір крові пацієнта з вени вакутайнером у кількості 5-20 мл в залежності від розмірів ураженої зони; кров центрифугують на препаративній центрифузі загального призначення протягом 10 хв. з прискоренням 1200-1400 9, потім плазму крові, яка знаходиться в супернатанті, переносять у пластикову пробірку.
Для одержання фібринового гелю до стерильної пробірки, що містить 1 мл аутологічної плазми крові, при температурі (2025) "С додають 0,1 мл розчину ферменту екамуліну в фізіологічному розчині концентрації 0,15 мг/мл та 0,1 мл розчину кальцію хлориду концентрації 5 96. Через 6025 с від моменту додавання ферменту екамуліну суміш переносять на уражену зону, розподіляючи її рівномірно, де час утворення фібринового гелю від моменту змішування компонентів складає (70210) с. За необхідності час утворення фібринового гелю може бути змінений шляхом використання іншої кількості ферменту екамуліну.
Вихід - кількісний: з 1,0 мл плазми крові отримують 1,2 мл фібринового гелю.
Приклад 2.
Одержання фібринового гелю проводять, як описано в Прикладі 1, але при цьому додають 0,1 мл розчину ферменту екамуліну в фізіологічному розчині концентрації 1,0 мг/мл. Через 4055 с від моменту додавання ферменту екамуліну суміш переносять на уражену зону, розподіляючи її рівномірно, де час утворення фібринового гелю при такій концентрації екамуліну від моменту змішування компонентів складає (505) с.
Вихід - кількісний: з 1,0 мл плазми крові отримують 1,2 мл фібринового гелю.
Приклад 3.
Одержання фібринового гелю проводять, як описано в Прикладі 1, але при цьому додають іншу кількість ферменту екамуліну, а саме: 0,1 мл розчину ферменту екамуліну в фізіологічному розчині концентрації 0,10 мг/мл. Через 80410 с від моменту додавання ферменту екамуліну суміш переносять на уражену зону, розподіляючи її рівномірно, де час утворення фібринового гелю при такій концентрації ферменту екамуліну від моменту змішування компонентів складає (90-10) с. Вихід - кількісний: з 1,0 мл плазми крові отримують 1,2 мл фібринового гелю.
Приклад 4. Стимуляція репаративного остеогенезу та зниження інтенсивності запальних
Зо процесів при застосуванні фібринового гелю.
Апробацію способу, що заявляється, проводять на кролях віком 7 місяців та вагою 2 кг.
Досліди проводять на моделі перелому променевої кістки шляхом проведення остеотомії діафіза променевої кістки.
Всіх експериментальних тварин після моделювання перелому поділяють на дві групи: дослідну та контрольну. Тваринам дослідної групи після проведення остеосинтезу перед накладанням швів на м'які тканини в зону перелому наносять композицію для одержання фібринового гелю через 40-60 с після змішування компонентів. При нанесенні фібринового гелю на місце перелому відмічають його високу адгезивність та щільність прилягання до ураженої поверхні. Тварин контрольної групи залишають без нанесення фібринового гелю на область перелому.
Згідно з клінічними та рентгенологічними даними, на 3-ю добу після остеотомії у всіх тварин спостерігають виражені ознаки запальної реакції операційних ран, зокрема набряк, почервоніння та болючість травмованих тканин. Тварини не опираються на травмовані кінцівки.
Рентгенологічно констатують поперечні переломи з добре вираженою лінією фрактури (фіг. 1, 2). Лізису країв кісткових уламків не спостерігають. Реакції з боку ендо- та периоста відсутні.
На 18-у добу після остеотомії в тварин дослідної групи відмічають відсутність ознак запалення, рентгенологічно спостерігають помірну періостальну реакцію зони перелому, утворення сполучнотканинного мозоля з добре вираженими процесами остеосклерозу (мінералізації) (фіг. 3), тварини повністю опираються на кінцівку.
Натомість у тварин контрольної групи на цей термін після остеотомії відмічають виражену набряклість м'яких тканин (фіг. 4) та помірну їх болючість при пальпації. Рентгенологічно відмічають масивну, нерівномірну періостальну реакцію, локалізовану поза зоною дефекту.
Спостерігають слабко виражені тканинно-специфічні структури в ділянці дефекту з початковими етапами їх мінералізації.
При застосуванні фібринового гелю на уражених тканинах живого організму відмічають його неантигенність, відсутність подразнюючої дії на прилеглі тканини, високий ступінь моделювання ураженої поверхні, простоту аплікації швидке утворення водо- та повітронепроникного желеподібного гелю.
Інтенсивне зниження запального процесу в місці застосування аутолітичного фібринового гелю, порівняно з контролем, свідчить про відсутність подразнювальної та імуностимулюючої дії гелю, що заявляється.
Таким чином, показано, що застосування фібринового гелю, що заявляється, стимулює репаративні процеси остеогенезу та сприяє зниженню запального процесу.
Приклад 5. Стимуляція регенерації тканин печінки.
Операцію поводять методом лапаротомії на безпородних собаках. На латеральній стороні правої долі печінки роблять розріз довжиною 4 см та глибиною 0,8-1 см. У контролі після зупинки кровотечі накладають вузлові шви з кетгуту (фіг. 5). У досліді собаці перед закриттям черевної порожнини на рану печінки наносять композицію для одержання фібринового гелю через 30-40 с після змішування компонентів (фіг. б).
За тваринами ведуть спостереження та проводять релапаротомію на 6-у добу для аналізу стану швів. Головною відмінною ознакою рани печінки собаки в досліді на 6-у добу після операції є адгезія сальника до поверхні рани в випадку використання фібринового гелю (фіг. 7).
Сальник зростається з капсулою печінки тонкою смужкою лише в ділянці розрізу та легко відпрепаровується, залишаючи незначні ерозивні дефекти капсули печінки та капілярну кровотечу, яка зупиняється самостійно. Візуально паренхіма печінки в зоні поверхні рани суттєво не відрізняється від здорової. У даній ділянці на поверхні вже починає проглядатися типовий органний малюнок, а сама вона набуває темно-червоного кольору. Лише по лінії розрізу під самою капсулою проглядається тоненька (близько 1 мм) світла смужка, що свідчить про помірний розвиток сполучної тканини. Шви слабко візуалізуються, їх можна помітити лише за "втисненнями" на капсулі печінки.
У контролі адгезивних явищ з боку очеревини чи сальника собаки не спостерігається (фіг. 8).
Проте відмічається більш потужна сполучнотканинна реакція, яка яскраво виражена з боку капсули печінки. Так, остання суттєво потовщена не тільки вздовж місця розрізу, а й виходить за межі накладених швів та повністю покриває їх зверху, у зв'язку з чим має випинання над поверхнею в місцях зав'язаних вузлів. Поряд з цим паренхіма печінки навколо травмованої ділянки має світліший колір, що свідчить про суттєвий розвиток післяопераційного запального процесу та пов'язані з ним дегенеративно-дистрофічні зміни гепатоцитів. Органний малюнок у
Зо цій ділянці не проглядається. Поряд з цим, добре візуалізовуються й самі шви, які в даний період знаходяться лише на початковій стадії їх резорбції. При цьому навколо них відмічається потужна сполучнотканинна реакція.
Таким чином, макроморфологічна характеристика загоєння рани печінки свідчить, що застосування фібринового гелю сприяє швидкому загоєнню рани печінки, в основному, за рахунок активації паренхіматозного регенеративного потенціалу та щонайменше сполучнотканинного. При цьому фібриновий гель обмежує та помірно знижує розвиток посттравматичної запальної реакції що візуально свідчить про значно меншу зону дистрофічних уражень.
Приклад 4. Набір інгредієнтів для одержання фібринового гелю, що заявляється.
При виконанні способу, що заявляється, використовують набір для одержання фібринового гелю з 10 мл плазми крові, до якого входять наступні стерильні компоненти: - ліофілізований фермент екамулін у флаконах -0,10; 0,15; 1,00 мг; - фізіологічний розчин в ампулі - 1,0 мл; З ампули; - розчин кальцію хлориду концентрації 5 95 в ампулі - 1,0 мл; З ампули.
У флакон з ліофільно висушеним ферментом екамуліном вносять 0,1 мл фізіологічного розчину; реагент готовий для використання через 20 хв. після розчинення.
Таким чином, створено новий оригінальний одностадійний спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів у людини і тварини з використанням набору для одержання аутологічного фібринового гелю.
Перевагами способу, що заявляється, є: - одностадійність одержання фібринового гелю з плазми крові пацієнта безпосередньо перед клінічним застосуванням, що значно спрощує технологію та скорочує час його одержання порівняно з аналогами; - невеликий за об'ємом відбір крові пацієнта - 10-20 мл (проти 60-150 мл, як у найближчому аналогу). - швидке утворення водо- та повітронепроникного аутологічного фібринового гелю на ураженій поверхні (45-100 с від моменту змішування компонентів); - інфекційна безпечність завдяки використанню ферменту екамуліну як активатора 60 протромбіну (замість тромбіну, як в аналогах);
- неантигенність та відсутність подразнюючої дії аутологічного фібринового гелю на прилеглі тканини; - простота нанесення аплікації, високий ступінь моделювання ураженої поверхні, висока щільність прилягання до тканин фібринового гелю; - стимулювання регенерації кісткових і м'яких тканин та зниження інтенсивності запальних процесів людини та тварини; - використання набору для одержання аутологічного фібринового гелю.
Аутологічний фібриновий гель може бути рекомендований для застосування в ортопедії, травматології, хірургії.
Джерела інформації: 1. Истранов Л.П., Абоянц Р.К., Истранова Е.В. Местньюе гемостатические средства на основе коллагена Хирургия - 2006. - Т. 08, Мо 2. - С. 4-8. Авторское свидетельство РФ Мо 725289 от 31.07.1975 г.; патент РФ Мо 2156140 от 17.11.1999 г. 2. Попов В.А., Сиротинкин Н.В., Головаченко В.А. Латексньій тканевой клей и его применениєе в хирургии. - Полимерь и медицина. - 2006. - 1. - б. 25-26. 3. ВО 2157243, опубл. 10.10.2000. 4. ВО 2242987, опубл. 27.12.2004. 5. Раї. 05 8491564, дшу 23, 2013. 6. Арр. 05 20130299407 АТ, Мом.14, 2013. 7. Пат. ЮА 10419, опубл. 25.12.1996. 8. ВО 2193868, опубл. 10.12.2002 р. 9. Пат. ВО 2143924, опубл. 10.01.2000. 10. О.Л. Гребнева, Д.В. Самусенко, М.А. Ковинька, С.Н. Лунева. Компоненть! фракционированной плазмь крови и их роль в механизме оптимизации репаративного остеогенеза // Гений ортопедии. - 2013. - Мо 2. - б. 102-105. 11. Соловьев Д.А., Платонова Т.Н., Угарова Т.П. Вьіделениє и характеристика зкамулина - активатора протромбина из яда зфьї многочешуйчатой Еспів тийіздатаїйив5. // Биохимия. - 1996. - Т.61. - вьпп. 6. - С. 1094-1105.
Коо)
Claims (2)
1. Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю шляхом взаємодії плазми крові з ферментом у присутності іонів кальцію, який відрізняється тим, що проводять взаємодію аутологічної плазми крові з ферментом екамуліном.
2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що аутологічну плазму крові людини чи тварини змішують із розчином ферменту екамуліну концентрації 0,10-1,00 мг/мл при об'ємному співвідношенні 1:0,1, додаючи 0,1 мл розчину кальцію хлориду концентрації 5 95.
З. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що використовують набір для одержання аутологічного фібринового гелю, який містить стерильні компоненти: - ліофілізований фермент екамулін у флаконах, мг -0,01;:50,15; 1,00; - розчин кальцію хлориду концентрації 5 9о в ампулах, мл - 1,0; - фізіологічний розчин у ампулах, мл - 1,0.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA201501207A UA113094C2 (xx) | 2015-02-13 | 2015-02-13 | Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAA201501207A UA113094C2 (xx) | 2015-02-13 | 2015-02-13 | Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA113094C2 true UA113094C2 (xx) | 2016-12-12 |
Family
ID=58044257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201501207A UA113094C2 (xx) | 2015-02-13 | 2015-02-13 | Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA113094C2 (uk) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021194461A1 (en) * | 2020-06-22 | 2021-09-30 | Palladin Instytute Of Biochemistry Of The National Academy Of Sciences Of Ukraine | The method of production of a haemostatic agent and a haemostatic agent for major bleeding control |
-
2015
- 2015-02-13 UA UAA201501207A patent/UA113094C2/uk unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021194461A1 (en) * | 2020-06-22 | 2021-09-30 | Palladin Instytute Of Biochemistry Of The National Academy Of Sciences Of Ukraine | The method of production of a haemostatic agent and a haemostatic agent for major bleeding control |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Thorn et al. | Autologous fibrin glue with growth factors in reconstructive maxillofacial surgery | |
| JP4666764B2 (ja) | 血漿から安定で、長期型のトロンビンを調製するための装置および方法、並びにこれにより形成されたトロンビン | |
| RU2104701C1 (ru) | Способ ввода фибринового сгустка (его варианты) и комплект средств для ввода (его вариант) | |
| DE69433939T2 (de) | Hämostatisches pflaster | |
| JP2018164757A (ja) | 単独でまたはヒアルロン酸と組み合わせて、多血小板血漿（ｐｒｐ）または骨髄遠心分離液（ｃｅｎｔｒａｔｅ）（ｂｍｃ）を調製するための新しい規格化および医療デバイス | |
| US20040197319A1 (en) | Wound healing composition derived from low platelet concentration plasma | |
| Fattahi et al. | Clinical applications of fibrin sealants | |
| Valbonesi | Fibrin glues of human origin | |
| DK165169B (da) | Anvendelse af stoffer fra blodplader til fremstilling af topiske saarhelingsmidler | |
| Say et al. | Is platelet-rich plasma injection an effective choice in cases of non-union? | |
| WO2017117996A1 (zh) | 一种外科止血生物制品及其使用方法 | |
| ES2216323T3 (es) | Medicina para promover la cicatrizacion y que contiene trombocitos. | |
| JPH02129224A (ja) | フィブリンの製造法 | |
| JP2016514716A (ja) | 組織の再生および創傷の治療のための植え込み型製剤、それらの製剤化方法、および該植え込み型製剤を用いる患者の治療方法 | |
| Burnouf et al. | Blood‐derived biomaterials: fibrin sealant, platelet gel and platelet fibrin glue | |
| Silberstein et al. | An autologous fibrinogen‐based adhesive for use in otologic surgery | |
| KR102260452B1 (ko) | 흡수성 체내용 지혈조성물의 제조방법 및 그에 따라 제조된 지혈조성물 | |
| CA2787883A1 (en) | Method for improved fibrin sealing | |
| ES2362430T3 (es) | Composiciones de osteoblastos de fibrina mezclada semi-solidificada para aglutinación de fractura ósea y su procedimiento de fabricación. | |
| US11744917B2 (en) | Tissular formulation or adhesive obtained from a blood composition containing platelets, and method for the preparation of said formulation | |
| UA113094C2 (xx) | Спосіб одержання аутологічного фібринового гелю для стимуляції регенерації кісткових і м'яких тканин і зниження інтенсивності запальних процесів | |
| WO2004011023A1 (de) | Thrombingenerierfähige und thrombinhältige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel | |
| Goczyńska et al. | Fibrin glues—the current state of knowledge | |
| Burnouf | Blood-derived, tissue engineering biomaterials | |
| RU2820448C2 (ru) | Тканевая композиция или адгезив, полученные из композиции крови, содержащей тромбоциты, и способ приготовления указанной композиции |