TWI827429B - 羰基橋連雜環類化合物、及其組合物與應用 - Google Patents

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Abstract

本發明屬於化學醫藥領域，具體涉及具有式（I）的結構的羰基橋連雜環類化合物、立體異構體或其藥學上可接受的鹽，以及含有這些化合物的藥物組合物和這些化合物或組合物在藥物製備中的應用。這類化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽等可用於與受體相互作用蛋白1激酶（RIPK1）相關的自身免疫性疾病、腫瘤以及神經退化性疾病的治療或預防。

Description

羰基橋連雜環類化合物、及其組合物與應用
本發明屬於藥物化學領域，具體涉及一類羰基橋連雜環類化合物、其立體異構體、藥學上可接受的鹽，及其藥物組合物和它們在治療與受體相互作用蛋白1激酶（RIPK1）相關的自身免疫性疾病、腫瘤、炎症性疾病以及神經退化性疾病的藥物製備中的應用。
早期，人們認為細胞的死亡方式主要有兩種，細胞凋亡（apoptosis）與細胞壞死（necrosis）。細胞凋亡是細胞為維持機體內環境穩定，由基因所控制的細胞自主有序的死亡，在生物體的進化、內環境的穩定以及系統發育中起著重要的作用。細胞壞死則是細胞受到物理、化學等環境因素的影響，如機械損傷、毒物、微生物、輻射等，引起的細胞死亡的病理過程。2005年，Degterev A等首次發現並報導了一種通過一系列生化分子調控的有序的細胞壞死過程，並命名為壞死性凋亡（Necroptosis，也稱程式性壞死），該過程是一種用TNF-α、FasL或者TRAIL等刺激死亡受體產生的程式性的細胞壞死，形態學上表現出細胞腫脹、細胞體積增大、細胞器功能紊亂、細胞膜完整性受破壞、細胞內容物釋放以及ROS的大量產生等。細胞壞死性凋亡最初被認為是宿主為了抵抗具有抗凋亡作用的病毒而進化產生的一種防禦方式，但是後期發現伴隨著壞死性凋亡的發生會導致炎性因數失衡，引起急性或慢性炎症性疾病。
受體相互作用蛋白1激酶（RIPK1）屬於TKL家族絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶。RIPK絲胺酸/蘇胺酸激酶家族成員具有相同的N-末端激酶結構域，但是具有不同的結合結構域。研究發現，受體相互作用蛋白1可調控細胞凋亡過程。RIPK-1 的死亡結構域與TNFR1、Fas、TRAILR1、TRAILR2 等死亡受體結合，它們也能與含有死亡結構域的其他蛋白結合，比如TRADD、FADD等，與後者結合是啟動 caspase-8 以及誘導凋亡的必備條件。RIPK-1中間結構為 RIPK 同型相互作用靶點，通過該位置RIPK-1能夠與RIPK-3相互作用。Kelliher等研究發現RIPK-1先天缺陷的小鼠因細胞的大量凋亡，出生後不到3天便死亡，這說明RIPK-1也參與調節細胞凋亡。另外，先天RIPK-1缺陷的細胞對TNF誘導的細胞死亡相當敏感，或許是因為該種細胞不能有效的啟動NF-kB。
另一方面，研究也發現RIPK-1以及RIPK-3也參與細胞的壞死性凋亡過程。大多數細胞類型中，死亡受體TNFR1、Fas以及TRAILR介導細胞凋亡。啟動TNFR1能夠通過cIAP1以及cIAP2觸發RIPK-1的泛素化，泛素化的RIPK-1決定細胞下一步的去向是繼續存活還是走向死亡。當細胞凋亡通路被泛caspase抑制劑z-VAD-fmk阻斷後，細胞的死亡便走向壞死性凋亡。在該過程中，RIPK-1的活性是關鍵因素，它受 FasL、TNF以及TRAIL死亡受體調控。
最近的研究表面，壞死性凋亡過程與多種疾病相關，包括腫瘤、自身免疫性疾病、神經退化性疾病、炎症性疾病等等。由此可知，RIP家族激酶與腫瘤、自身免疫性疾病、神經退化性疾病、炎症性疾病等多種疾病的發生有著密切的關係。
例如，在針對阿茲海默症的研究中，Claudia Balducci等人研究發現，活化的小神經膠質細胞在阿茲海默症的演化中扮演了重要的角色(Pharmacological Research. 2018; 130：402-413)。同時，小神經膠質細胞高度表達RIPK-1，RIPK-1抑制劑在體外可以保護 A β誘導的神經元死亡並降低小神經膠質細胞的增殖。而且，在阿茲海默態樣的大鼠模型中，RIPK-1抑制劑可以改善其學習和記憶能力。除阿茲海默症外，RIPK-1抑制劑也有望用於其他多種神經退化性疾病，包括帕金森氏症、肌萎縮側索硬化症和亨丁頓舞蹈症等。
目前關於RIPK-1抑制劑的研究不是很多，只有少量進入了臨床階段的研究。亟需更多基於RIPK-1抑制劑的藥品的研究和開發。另一方面，能夠穿透血腦屏障的RIPK-1抑制劑更是少有研究。對於上文提及的阿茲海默症以及許多其他神經退化性疾病來說，藥物穿透血腦屏障的能力對治療效果至關重要。
另外，在現代的藥物研發中，臨床前動物試驗是非常重要的一環，在研究初期通常通過大鼠或者小鼠進行試驗。從轉換醫學的角度來看，動物模型及其結果與相應的人類疾病的病理生理和治療，應該具有相應性和適應性。因此，需要開發的化合物在人與鼠之間的生物活性最好有較小的種屬差異。GSK在專利申請WO018/092089中公開了大量具有一定RIPK-1抑制活性的化合物，但是這些化合物對於鼠源細胞的抑制活性較差，不利於通過動物實驗進行藥物開發。
本申請提供了一類羰基橋連雜環類化合物，表現出良好的RIPK-1抑制活性以及穿透血腦屏障的能力。值得強調的是此類化合物，不僅對人源RIPK-1具有極強的抑制活性，同時對鼠源RIPK-1也具有極強的抑制活性。換句話說，本申請的化合物用動物實驗的結果外推至人的疾病有一定的相似性和適應性，有利於通過動物實驗進行藥物開發，有望作為RIPK-1抑制劑應用於治療腫瘤、自身免疫性疾病、神經退化性疾病和炎症性疾病的藥物的製備中。
本發明所提供式（I）表示的化合物，其藥學上可接受的鹽，或立體異構體，其可用於製備治療或預防與RIPK1相關的疾病的藥物。 式（I） 式（I）中， 式（I）中，X為CH或者N； L為O、S、NH、羰基、碸基或者亞碸基； R 1為C 1-C 10烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 6烷氧基、氰基、-NR aR b、C 3-C 8環烷基氧基、-CONH-R 5、C 3-C 8環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C 1-C 6烷氧基、-SO 2-R 5、-SO-R 5、-CO-R 5、C 2-C 6炔基、C 2-C 6烯基、C 1-C 4烷氧基C 1-C 6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-8元雜脂環基、C 1-C 6烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 10烷基， 所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-8元雜脂環基， R 5為氫、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基， R a和R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 1-C 6烷氧基取代C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基C 1-C 6烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基、C 1-C 3烷硫基取代C 1-C 6烷基、單或雙C 1-C 3烷基取代或非取代氨基取代的C 1-C 6烷基； R 2為氫、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、鹵素； R 3、R 4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
在一些實施方案中，優選地，所述化合物具有如下式（II）的結構： 式(II)， 式（II）中， R 1為C 1-C 10烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 6烷氧基、氰基、-NR aR b、C 3-C 8環烷基氧基、-CONH-R 5、C 3-C 8環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C 1-C 6烷氧基、-SO 2-R 5、-SO-R 5、-CO-R 5、C 2-C 6炔基、C 2-C 6烯基、C 1-C 4烷氧基C 1-C 6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-8元雜脂環基、C 1-C 6烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 10烷基， 所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-8元雜脂環基， R 5為氫、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基， R a和R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 1-C 6烷氧基取代C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基C 1-C 6烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基、C 1-C 3烷硫基取代C 1-C 6烷基、單或雙C 1-C 3烷基取代或非取代氨基取代的C 1-C 6烷基； R 2為氫、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、鹵素； R 3、R 4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
在一些實施方案中，優選地，R 1為C 1-C 8烷基、C 3-C 6環烷基、4-6元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 3烷氧基、氰基、C 3-C 6環烷基氧基、C 3-C 6環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 6環烷基、鹵素、4-6元雜脂環基、氧代取代4-6元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-6元雜脂環基、C 1-C 3烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 8烷基，
所述4-6元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-6元雜脂環基。
在一些實施方案中，優選地，R 1為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、辛基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、或者由1至3個選自羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、氰基、環丁基氧基、環戊基氧基、環己基氧基、環丁基、環戊基、環己基、4-羥基環己基、4-羥基-4-甲基環己基、氟、氯、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、呱啶-1-基、呱啶-4-基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1-甲基-吡咯烷-2-基、1-甲基-呱啶-4-基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基中的取代基所取代的C 1-C 8烷基。
在一些實施方案中，更優選地，R 1為甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基、羥己基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、甲氧基戊基、甲氧基己基、四氫吡喃-4-基、4-甲基-4-羥基戊基、四氫吡喃-4-基乙基、四氫吡喃-4-基甲基、四氫吡喃-4-基丙基、四氫吡喃-4-基丁基、3-甲基-3-羥基丁基、2-甲基-2-羥基丙基、5-甲基-5-羥基己基、氟丙基、氟乙基、2,2-二氟-3-羥基-丙基。
在一些實施方案中，R 1為被1-羥基環丙基、1-羥基環丁基、1-羥基環戊基或1-羥基環己基所取代的C 1-C 8烷基；
更優選地，R 1為1-羥基環丙基甲基、1-羥基環丁基甲基。
在一些實施方案中，更優選地，R 1為羥基和/或鹵素取代C 1-C 6烷基；最優選地，R 1為羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基、羥己基、2-甲基-2-羥基丙基、3-甲基-3-羥基丁基、4-甲基-4-羥基戊基、5-甲基-5-羥基己基、氟丙基、氟乙基、2,2-二氟-3-羥基-丙基。
在一些實施方案中，優選地，R 2為氫、甲基、甲氧基、氟、氯、溴；更優選地，R 2為氟。
在一些實施方案中，優選地，R 3、R 4各自獨立地為氫、氟、氯、甲基；更優選地，R 3、R 4各自獨立地為氟。
在一些實施方案中，優選地，所述化合物具有如下式（III）的結構： 式（III）， 其中，X為CH或者N； L為O、S、NH、羰基、碸基或者亞碸基； R 1為C 1-C 10烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 6烷氧基、氰基、-NR aR b、C 3-C 8環烷基氧基、-CONH-R 5、C 3-C 8環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C 1-C 6烷氧基、-SO 2-R 5、-SO-R 5、-CO-R 5、C 2-C 6炔基、C 2-C 6烯基、C 1-C 4烷氧基C 1-C 6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-8元雜脂環基、C 1-C 6烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 10烷基， 所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-8元雜脂環基， R 5為氫、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基， R a和R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 1-C 6烷氧基取代C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基C 1-C 6烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基、C 1-C 3烷硫基取代C 1-C 6烷基或者單或雙C 1-C 3烷基取代或非取代氨基取代的C 1-C 6烷基； R 2為氫、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、鹵素； R 3、R 4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
在一些實施方案中，優選地，所述化合物具有如下式（IV）的結構： 式（IV）， 其中，R 1為C 1-C 10烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 6烷氧基、氰基、-NR aR b、C 3-C 8環烷基氧基、-CONH-R 5、C 3-C 8環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C 1-C 6烷氧基、-SO 2-R 5、-SO-R 5、-CO-R 5、C 2-C 6炔基、C 2-C 6烯基、C 1-C 4烷氧基C 1-C 6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-8元雜脂環基、C 1-C 6烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 10烷基， 所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-8元雜脂環基， R 5為氫、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基， R a和R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 1-C 6烷氧基取代C 1-C 6烷基、羥基取代C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基C 1-C 6烷基、4-8元雜脂環基取代C 1-C 6烷基、C 1-C 3烷硫基取代C 1-C 6烷基或者單或雙C 1-C 3烷基取代或非取代氨基取代的C 1-C 6烷基； R 2為氫、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、鹵素； R 3、R 4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
在一些實施方案中，優選地，R 1為C 1-C 8烷基、C 3-C 6環烷基、4-6元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C 1-C 3烷氧基、氰基、C 3-C 6環烷基氧基、C 3-C 6環烷基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代C 3-C 6環烷基、鹵素、4-6元雜脂環基、氧代取代4-6元雜脂環基、羥基和/或C 1-C 4烷基取代4-6元雜脂環基、C 1-C 3烷硫基中的取代基所取代的C 1-C 8烷基， 所述4-6元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-6元雜脂環基。
在一些實施方案中，優選地，R 1為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、辛基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、或者由1至3個選自羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、氰基、環丁基氧基、環戊基氧基、環己基氧基、環丁基、環戊基、環己基、4-羥基環己基、4-羥基-4-甲基環己基、氟、氯、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、呱啶-1-基、呱啶-4-基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1-甲基-吡咯烷-2-基、1-甲基-呱啶-4-基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基中的取代基所取代的C 1-C 8烷基。
在一些實施方案中，更優選地，R 1為甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基、羥己基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、甲氧基戊基、甲氧基己基、四氫吡喃-4-基、4-甲基-4-羥基戊基、四氫吡喃-4-基乙基、四氫吡喃-4-基甲基、四氫吡喃-4-基丙基、四氫吡喃-4-基丁基、3-甲基-3-羥基丁基、2-甲基-2-羥基丙基、5-甲基-5-羥基己基、氟丙基、氟乙基、2,2-二氟-3-羥基-丙基。
在一些實施方案中，R 1為被1-羥基環丙基、1-羥基環丁基、1-羥基環戊基或1-羥基環己基所取代的C 1-C 8烷基；更優選地，R 1為1-羥基環丙基甲基、1-羥基環丁基甲基。
在一些實施方案中，更優選地，R 1為羥基和/或鹵素取代C 1-C 6烷基；最優選地，R 1為羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基、羥己基、2-甲基-2-羥基丙基、3-甲基-3-羥基丁基、4-甲基-4-羥基戊基、5-甲基-5-羥基己基、氟丙基、氟乙基、2,2-二氟-3-羥基-丙基。
在一些實施方案中，優選地，R 2為氫、甲基、甲氧基、氟、氯、溴；更優選地，R 2為氟。
在一些實施方案中，優選地，R 3、R 4各自獨立地為氫、氟、氯、甲基；更優選地，R 3、R 4各自獨立地為氟。
在一些實施方案中，本申請的化合物為前述化合物的氘代化合物，更優選地為前述結構式（I）-（IV）中任一項中吡唑基5位被氘代的化合物。
本申請的典型化合物如下所示：
根據本申請的一些實施方案，所述化合物的藥學上可接受的鹽為選自所述化合物的鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、高氯酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、羥基乙酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、安息香酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、羥乙基磺酸鹽、苯磺酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、2-萘磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、環己氨基磺酸鹽、水楊酸鹽、己糖酸鹽、三氟乙酸鹽、鋁鹽、鈣鹽、氯普魯卡因鹽、膽鹼鹽、二乙醇胺鹽、乙二胺鹽、鋰鹽、鎂鹽、鉀鹽、鈉鹽和鋅鹽中的一種或多種。
本發明的另一方面涉及所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物、或氘代物在製備治療與RIPK1相關疾病的藥物中的應用，其中，所述與RIPK1相關的疾病包括眼底疾病、乾眼症、銀屑病、白癜風、皮炎、斑禿、類風濕性關節炎、結腸炎、多重硬化、系統性紅斑狼瘡、克羅恩病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B 細胞和 T 細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌、炎性腸病、潰瘍性結腸炎、視網膜脫離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰腺炎、特應性皮炎、脊椎關節炎、痛風、SoJIA、乾燥綜合征、全身性硬皮病、抗磷脂綜合征、血管炎、骨關節炎、非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎、腎炎、乳糜瀉、自身免疫ITP、移植排斥、實體器官的缺血再灌注損傷、敗血症、全身性炎症反應綜合征、腦血管意外、心肌梗死、亨丁頓舞蹈症、阿茨海默症、帕金森氏症、變應性疾病、哮喘、特應性皮炎、多發性硬化症、I 型糖尿病、韋格納肉芽腫、肺結節病、白塞氏病、白細胞介素-1 轉換酶相關的發熱綜合征、慢性阻塞性肺病、腫瘤壞死因數受體相關的週期性綜合症和牙周炎。
本發明的又一方面提供了一種藥物組合物，該藥物組合物包括本申請的醯胺基橋連雜環類化合物、其立體異構體、溶劑化物、藥學上可接受的鹽或氘代化合物，以及一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
根據本申請的一些實施方案，該藥物組合物還可以包括一種或多種其他治療劑。
本發明還涉及一種治療RIPK1 激酶介導的疾病或病症的方法，其包括對有需要的患者(人或其他哺乳動物，尤其是人) 給藥治療有效量的式(I)化合物或其鹽，所述RIPK1 激酶介導的疾病或病症包括前述提及的那些。
除非另有說明，在本申請(包括說明書和權利要求書)中使用的以下術語具有下面給出的定義。在本申請中，除非另外說明，使用“或”或“和”意味著“和/或”。此外，術語“包括”以及其它形式的使用，例如“包含”、“含有”和“具有”，不是限制性的。本文使用的章節標題僅僅是為了組織的目的，而不應解釋為對所述的主題的限制。
發明詳述
除非有特殊說明，烷基表示具有指定數目碳原子的飽和直鏈、支鏈烴基，術語C 1-C 10烷基表示含有1至10個碳原子的烷基部分，同理C 1-C 3烷基表示含有1至3個碳原子的烷基部分，比如，C 1-C 6烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、n-丁基、異丁基、仲-丁基、叔-丁基、n-戊基、3-(2-甲基)丁基、2-戊基、2-甲基丁基、新戊基、n-己基、2-己基和2-甲基戊基等。
當取代基術語例如“烷基”與其它取代基術語組合使用時，例如在術語“C 1-C 3烷氧基C 1-C 6烷硫基”或“羥基取代C 1-C 10烷基”中，該連接取代基術語(例如烷基或烷硫基)旨在包含二價的部分，其中連接點通過所述連接取代基。“C 1-C 3烷氧基C 1-C 6烷硫基”的實例包括但不限於甲氧基甲硫基、甲氧基乙硫基和乙氧基丙硫基等。“羥基取代C 1-C 10烷基”的實例包括但不限於羥基甲基、羥基乙基和羥基異丙基等。
烷氧基由先前描述的直鏈或支鏈烷基與-O-形成的烷基-O-基團，例如，甲氧基、乙氧基等等。類似的，烷硫基由先前描述的直鏈或支鏈烷基與-S-形成的烷基-S-基團，例如，甲硫基，乙硫基等等。
烯基和炔基包括直鏈、支鏈烯基或炔基，術語C 2-C 6烯基或者C 2-C 6炔基表示具有至少一個烯基或炔基的直鏈或支鏈烴基。
術語“鹵代C 1-C 10烷基”表示在包括1 到10個碳原子的烷基部分的一個或多個碳原子上具有一個或多個可以相同或不同的鹵素原子的基團。“鹵代C 1-C 10烷基”的實例可以包括但不限於-CF 3(三氟甲基)、-CCl 3(三氯甲基)、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基和六氟異丙基等。類似的，術語“鹵代C 1-C 10烷氧基”表示由所述的鹵代C 1-C 10烷基與-O-形成的鹵代烷基-O-基團，可以為例如三氟甲氧基、三氯甲氧基等等。
術語“C 1-C 3醯基”包括甲醯基（-CHO）、乙醯基（CH 3CO-）、乙醯基（C 2H 5CO-）。
術語“-CO-R 5、-SO 2-R 5、-SO-R 5、-CONH-R 5”分別表示“ 、 、 、 ”。
“環烷基”表示含有指定數目碳原子的非芳香的、飽和的、環狀的烴基。例如，術語“(C3-C6) 環烷基”指的是具有3-6 個環碳原子的非芳香的環狀烴環。示例性的“(C3-C6) 環烷基”包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
術語“芳基”表示包含芳香的單環或雙環烴原子團的基團或部分，其含有6到12個碳環原子且具有至少一個芳香環。“芳基”的實例為苯基、萘基、茚基和二氫茚基(茚滿基)。通常，在本發明化合物中，芳基為苯基。
在這裡使用的術語“雜脂環基”，除非有特殊說明，代表未被取代的或已被取代的穩定的4至8元非芳香的單環飽和環體系，它們由碳原子以及從N，O，S中選的1至3個雜原子組成，其中N，S雜原子可以被隨意氧化，N雜原子還可以被隨意季銨化。這類雜環的例子包括但不限於氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、1,3- 二氧雜環戊烷基、呱啶基、呱嗪基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、1,3- 二噁烷基、1,4- 二噁烷基、1,3- 氧硫雜環戊烷基、1,3- 氧硫雜環己烷基、1,3- 二噻烷基、1,4- 氧硫雜環戊烷基、1,4- 氧硫雜環己烷基、1,4- 二噻烷基、嗎啉基、硫嗎啉基。
在這裡使用的術語“雜芳基”表示包含芳香的單環或雙環原子團( 其含有5 到10 個環原子) 的基團或部分，其包括1 到3個獨立地選自氮、氧和硫的雜原子。該術語還包括雙環雜環芳基，其中含有與雜環烷基環部分稠合的芳基環部分，或者含有與環烷基環部分稠合的雜芳基環部分。除非有特別說明，代表未被取代或已被取代的穩定的5或6元單環芳香環體系，也可以代表未被取代或已被取代的9或10個環原子的苯稠雜芳環體系或二環雜芳環體系，它們由碳原子和由1至3個從N，O，S中選擇的雜原子組成，其中N、S雜原子可以被氧化，N雜原子還可以被季銨化。雜芳基可以和任何雜原子或碳原子連接組成一個穩定的結構。雜芳基的示例性實例包括但不限於呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、異噻唑基、吡啶基、氧代-吡啶基(吡啶基-N-氧化物)、噠嗪基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、苯並呋喃基、異苯並呋喃基、2,3- 二氫苯並呋喃基、1,3- 苯並二氧雜環戊烯基、二氫苯並二氧雜環己烯基、苯並噻吩基、吲嗪基、吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、苯並咪唑基、二氫苯並咪唑基、苯並噁唑基、二氫苯並噁唑基、苯並噻唑基、苯並異噻唑基、二氫苯並異噻唑基、吲唑基、咪唑並吡啶基、吡唑並吡啶基、苯並三唑基、三唑並吡啶基、嘌呤基、喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、1,5- 二氮雜萘基、1,6- 二氮雜萘基、1,7- 二氮雜萘基、1,8- 二氮雜萘基和蝶啶基。
術語“羰基”指的是-C(O)-基。術語“鹵素”和“鹵”表示氯、氟、溴或碘取代基。“氧代”表示雙鍵的氧部分；例如，如果直接連接到碳原子上形成一個羰基部分(C ＝ O)。“羥基”旨在表示-OH 原子團。本文所用術語“氰基”是指基團-CN。
術語“各自獨立地”是指當一個以上的取代基選自許多可能的取代基時，那些取代基可以相同或不同。
很清楚，式I的化合物、異構體、晶型或前藥及其可藥用鹽可以存在溶劑化形式和非溶劑化形式。例如溶劑化形式可以是水溶形式。本發明包括所有這些溶劑化的和未溶劑化的形式。
本發明的化合物可能有不對稱的碳原子，根據它們的理化差異，通過已知技術上已成熟的方法，比如，通過色譜或分步結晶法，這種非對映異構的混合物可以被分離成單一的非對映異構體。對映異構體的分離可通過先用適當有旋光活性的化合物進行反應，把對映異構的混合物轉化成非對映異構的混合物，分離非對映異構體，再把單一非對映異構體轉化(水解)成相應的純的對映異構體。所有這樣的異構體，包括非對映異構體混合物和純對映體被認為是該發明的一部分。
作為活性成分的本發明的化合物，以及製備該化合物的方法，都是本發明的內容。而且，一些化合物的晶型形式可以作為多晶體存在，這種形式也可以被包括在目前的發明裡。另外，一些化合物可以和水（即水合物）或普通的有機溶劑一起形成溶劑化物，這種溶劑化物也被包括在此項發明的範疇內。
本發明的化合物可以以游離的形式用於治療，或者在適當情況下以藥學上可接受的鹽或其它衍生物的形式用於治療。如本文所用，術語“藥學上可接受的鹽”是指本發明的化合物的有機鹽及無機鹽，此鹽適用於人類和低等動物，無過度毒性、刺激性、過敏反應等，具有合理的利益/風險比。胺，羧酸，膦酸鹽，和其它類型的化合物的藥學上可接受的鹽在所屬領域中是眾所周知的。該鹽可以由本發明的化合物與合適的游離堿或酸反應而成。包括但不限於，與無機酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、高氯酸或與有機酸如乙酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、丙二酸形成的鹽，或通過使用本領域熟知的方法，例如離子交換法，來得到這些鹽。其他藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2 - 羥基乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、過3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽等。代表性的堿或鹼土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。其他藥學上可接受的鹽包括適當的無毒的銨、季銨，和使用諸如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根，低級烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽形成的胺基陽離子。
本發明的藥物組合物包含本文所述結構式（I）化合物或其藥學上可接受的鹽、激酶抑制劑（小分子，多肽，抗體等）、免疫抑制劑、抗癌藥、抗病毒劑、抗炎劑、抗真菌劑、抗生素或抗血管過度增生化合物的另外的活性劑；以及任何藥學上可接受的載體、佐劑或賦形劑。
本發明的化合物可以作為單獨使用，也可以與一種或多種其它本發明的化合物或與一種或多種其它藥劑聯合使用。當聯合給藥時，治療劑可以配製成同時給藥或順序地在不同的時間給藥，或者所述治療劑可以作為單一組合物給藥。所謂“組合療法”，指的是使用本發明的化合物與另一種藥劑一起使用，給藥方式為每種藥劑同時共同給藥或每種藥劑順序給藥，無論哪種情況，目的都是要達到藥物的最佳效果。共同給藥包括同時遞送劑型，以及每種化合物分別的單獨劑型。因此，本發明的化合物的給藥可以與已知的本領域的其他療法同時使用，例如，在癌症治療中使用放射治療或細胞生長抑制劑、細胞毒性劑、其它抗癌劑等附加療法來改善癌症狀。本發明並不限於給藥的順序;本發明的化合物可以先前施用，同時施用，或在其他抗癌劑或細胞毒性劑之後施用。
為了製備這一發明的藥學成分，作為其活性成分的分子式（I）的一種或多種化合物或鹽類可緊密的與藥學載體混合在一起，這是根據傳統的製藥配料技術而進行的，其中的載體可根據按不同的給藥方式（例如，口服或腸外給藥）設計好的製備形式而採用多種多樣的形式。適當的藥學上可接受的載體在技術上是眾所周知的。對一些這類藥學可接受的載體的描述可以在《藥學賦形劑手冊》裡找到，該書由美國藥學會和英國藥學社聯合出版。
本發明藥物組合物可以有以下形式，比如說，適合口服給藥，例如藥片，膠囊，藥丸，藥粉，持續釋放的形式，溶液或懸浮液；用於胃腸外注射如透明液，懸浮液，乳狀液；或者用於局部用藥如膏，霜；亦或作為栓劑用於直腸給藥。藥學成分也可以單位劑量的形式適合用於精確劑量的一次性給藥。該藥學成分將包括一種傳統的藥學載體或賦形劑以及根據目前的發明製成的作為活性成分的化合物，另外，也可以包括其他的醫學或藥學製劑，載體，輔助劑，等等。
治療性化合物也可給於哺乳動物而非人類。給一個哺乳動物所用的藥物劑量將取決於該動物的種類以及它的疾病狀況或其所處的失調狀態。治療性化合物可以以膠囊，大丸藥，藥片藥水的形式喂給動物。也可以通過注射或灌輸的方式讓治療性化合物進入動物體內。我們根據符合獸醫實踐標準的傳統的方式製備好這些藥物形式。作為一種可選擇的方式，藥學合成藥可以同動物飼料混合在一起喂給動物，因此，濃縮的飼料添加劑或預拌和料可以備以混合普通的動物飼料。
本發明的又一目的是在於提供一種用於治療有需要的受試者中癌症的方法，其包括給受試者施用含本發明的化合物的組合物的治療有效量的一種方法。
本發明還包括本發明的化合物或其藥學上可接受的衍生物的使用，製造用於治療與RIPK1相關的疾病包括眼底疾病、乾眼症、銀屑病、白癜風、皮炎、斑禿、類風濕性關節炎、結腸炎、多重硬化、系統性紅斑狼瘡、克羅恩病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B 細胞和 T 細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌、炎性腸病、潰瘍性結腸炎、視網膜脫離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰腺炎、特應性皮炎、脊椎關節炎、痛風、SoJIA、乾燥綜合征、全身性硬皮病、抗磷脂綜合征、血管炎、骨關節炎、非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎、腎炎、乳糜瀉、自身免疫ITP、移植排斥、實體器官的缺血再灌注損傷、敗血症、全身性炎症反應綜合征、腦血管意外、心肌梗死、亨丁頓舞蹈症、阿茨海默症、帕金森氏症、變應性疾病、哮喘、特應性皮炎、多發性硬化症、I 型糖尿病、韋格納肉芽腫、肺結節病、白塞氏病、白細胞介素-1 轉換酶相關的發熱綜合征、慢性阻塞性肺病、腫瘤壞死因數受體相關的週期性綜合症和牙周炎。
本發明還提供了製備相應化合物的方法，可以使用多種合成方法製備本文所述的化合物，包括下述實施例中所涉及的方法，本發明的化合物或者其藥學上可接受的鹽，異構體或水合物可以使用下述方法與有機化學合成領域已知的合成方法，或通過本領域技術人員理解對這些方法的變化方法合成，優選方法包括但不限於下述方法。
為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明，並不用於限定本發明。實施例中未注明具體技術或條件的，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件或者按照產品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。本文所使用的術語“和/或”包括一個或多個相關的所列項目的任意的和所有的組合。下面提供的實施例可以更好的說明本發明，除非特別說明，所有的溫度為℃。本申請部分化合物的命名採用chemdraw生成後翻譯為中文所得。
縮寫HATU – N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)六氟磷酸脲 DIEA – N,N-二異丙基乙胺 DMF – N,N-二甲基甲醯胺 DMSO –二甲基亞碸 PE – 石油醚(沸點60-90ºC) EA – 乙酸乙酯
化合物的合成
中間體 A 的製備
中間體A-1的合成
步驟1)：將3,5-二氟苯甲醛(30 g，211.1 mmol)溶於DMF中，常溫攪拌下分批加入(三苯基亞正膦基)乙醛（CAS號2136-75-6）(70.7 g, 232.2 mmol)，加熱至80℃反應15小時。降至室溫，加水和乙酸乙酯萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌後乾燥濃縮，柱層析（洗脫劑：PE/EtOAc=100:0至100:10）純化得到3-(3,5-二氟苯基)丙烯醛25.1 g, 收率71%，MS:169[M+H] +；
步驟2)：把N 2H 4.H 2O (7.15 g, 223.03 mmol)加入到乙醇(300 mL)中，攪拌狀態下，加入醋酸(14.5 mL，252 mmol)，升溫至40℃後緩慢滴加3-(3,5-二氟苯基)丙烯醛(25 g，149 mmol)的乙醇(20 mL)溶液，80℃反應過夜。濃縮後由柱層析（洗脫劑：PE/EtOAc=100:0至3:1）純化得到產物20 g, 收率74%，MS：183[M+H] +；
由同樣的方法合成如下中間體A-2和A-3：
結構 名稱 MS（[M+H] +）
A-2 5-(2-氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑 165
A-3 5-苯基-4,5-二氫-1H-吡唑 147
表1. 中間體A-2和A-3的結構、名稱和表徵資料
中間體B-1的合成：2-(2-氟-5-(3-甲氧基丙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷
步驟1)：將3-溴-4-氟苯酚(330mg, 1.73mmol)、碳酸鉀(718.98 mg, 5.20 mmol)、1-溴-3-甲氧基丙烷(540 mg, 3.50 mmol)置於DMF (5 mL)中，80℃反應2小時。反應液加入水，EA萃取三次，有機相經飽和食鹽水洗滌後用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，粗產物經薄層色譜純化（以PE:EA=5:1為流動相），得到2-溴-1-氟-(4-甲氧基丙基)苯醚 (421 mg, 93% yield)；
步驟2)：將2-溴-1-氟-(4-甲氧基丙基)苯醚(421 mg, 1.60 mmol)、頻哪醇酯(815 mg, 3.21 mmol)、KOAc(472 mg, 4.81 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(235 mg, 321 umol)加於1,4-二氧六環(10 mL)中，氬氣保護條件下，100℃反應16小時。反應液加水稀釋後用乙酸乙酯萃取，有機相經飽和食鹽水洗後用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，柱層析純化（以PE:EA=5:1為流動相），得到2-(2-氟-5-(3-甲氧基丙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷395mg, 收率80%。
由同樣的方法合成如下中間體B-2——B-30：
編號 結構 名稱
B-2 2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-3 3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇
B-4 2-(3-(3-甲氧基丙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-5 4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丁-1-醇
B-6 2-(3-(4-甲氧基丁氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-7 2-甲基-5-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)戊-2-醇
B-8 4,4,5,5-四甲基-2-(3-((四氫-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-1,3,2-二氧雜硼烷
B-9 4,4,5,5-四甲基-2-(3-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲氧基)苯基)-1,3,2-二氧雜硼烷
B-10 2-(2-氯-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-11 3-(4-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇
B-12 3-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇
B-13 4-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)-2-甲基丁-2-醇
B-14 2-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)乙-1-醇
B-15 1-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)-2-甲基丙-2-醇
B-16 5-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)-2-甲基戊-2-醇
B-17 5-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)戊-1-醇
B-18 6-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)-2-甲基己-2-醇
B-19 2-(2-氟-5-(3-氟丙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-20 2-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-21 2-(5-(3-甲氧基丙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-22 4-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丁-1-醇
B-23 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-5-((四氫-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-1,3,2-二氧雜硼烷
B-24 3-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇
B-25 2-甲基-5-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)戊-2-醇
B-26 2-(5-(4-甲氧基丁氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
B-27 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-5-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲氧基)苯基)-1,3,2-二氧雜硼烷
B-28 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-5-(2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基)苯基)-1,3,2-二氧雜硼烷
B-29 4-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丁-1-醇
B-30 2,2-二氟-3-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇
表2. 中間體B-2——B-30的結構和名稱
實施例
實施例1：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
步驟1)：將1-(叔丁氧基羰基)呱啶-4-羧酸(24g, 105mmol)、中間體A-1（5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑）(21.9g, 120 mmol)、HATU(39.9 g, 105 mmol)、DIEA (27.1 g, 210 mmol)加入DMF (150 mL)中，氬氣保護條件下，25℃反應1小時。反應液使用二氯甲烷稀釋，經飽和食鹽水洗滌後用無水硫酸鈉乾燥，之後過濾減壓濃縮，得到的產物進一步用柱層析純化，最終得到33.0 g, 收率80%。MS:394[M+H] +；
步驟2)：將4-[3-(3,5-二氟苯基)-3,4-二氫吡唑-2-羰基]呱啶-1-羧酸叔丁酯(26 g, 66.09 mmol)溶於1,4-二氧六環(60 mL)中，然後加入鹽酸(4 M的1,4-二氧六環溶液體系, 82.61 mL)溶液，室溫攪拌過夜，反應完成後抽濾，固體溶於甲醇中，然後加入碳酸鈉固體，調至pH為8，攪拌30分鐘，然後加乙酸乙酯稀釋，抽濾，固體用乙酸乙酯洗兩次，濾液旋幹，柱層析純化(二氯甲烷/甲醇/三乙胺=500/100/5)得15.5 g, 收率80%。MS: 294[M+H] +；
步驟3)：將(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(呱啶-4-基)甲酮(3.0 g, 10 mmol)，2-氟-4-溴吡啶(3.5 g, 20 mmol)和三乙胺(3.05 g, 30 mmol)的DMSO(20 ml)溶液加熱至80℃反應16小時，冷卻後加入乙酸乙酯稀釋，水洗，乾燥，濃縮，柱層析純化得到黃色固體產物3.93 g, 收率88%，MS: 449, 451[M+H] +；
步驟4)：(1-(4-溴吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮 (450mg, 1mmol)、中間體B-2(2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷)(250mg, 1mmol)、碳酸鉀 (210mg, 2mmol)和Pd(PPh 3) 4(58mg, 0.05mmol)溶於1,4-二氧六環(8 mL)和水(0.8 mL)的混合溶劑中，氬氣保護條件下升溫至80℃攪拌反應5小時。反應液過濾，濃縮，柱層析純化(流動相：PE/EtOAc)最終得到黃色固體產物130 mg。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.33 – 7.22 (m, 3H), 7.12 - 7.10 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.01 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.93 – 6.80 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 11.9, 4.9 Hz, 1H), 4.50 – 4.41 (m, 2H), 4.23 – 4.14 (m, 2H), 3.71 -3.68 (m, 2H), 3.57 – 3.42 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.00 – 2.87 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.90 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.76 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.58 - 1.54 (m, 2H). MS: 521[M+H] +。
實施例2：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-(3-甲氧基丙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4 -基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-4代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 19.0 Hz, 3H), 7.11 (t, J= 9.4 Hz, 1H), 7.06 – 6.96 (m, 2H), 6.92 – 6.80 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 13.0 Hz, 2H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.50 – 3.48 (m, 4H), 3.26 (s, 3H), 2.92 (dd, J= 12.7, 9.5 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.1 Hz, 1H), 2.03 – 1.86 (m, 3H), 1.76 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 1.65 – 1.48 (m, 2H).MS:535[M+H] +。 實施例2          實施例3
實施例3：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-((四氫-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-8代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (dd, J= 8.9, 7.2 Hz, 1H), 7.32 – 7.22 (m, 3H), 7.16 – 7.00 (m, 3H), 6.92 – 6.79 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 11.9, 4.9 Hz, 1H), 4.69 (dt, J= 8.7, 4.5 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 11.8 Hz, 2H), 3.86 (dt, J= 11.6, 4.4 Hz, 2H), 3.55 – 3.39 (m, 4H), 2.93 (dt, J= 13.0, 10.3 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.1, 5.0 Hz, 1H), 2.00 – 1.98 (m, 3H), 1.90 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 1.76 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.67 – 1.43 (m, 3H). MS: 547 [M+H] +。
實施例4：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-20代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.07 (m, 3H), 6.92 – 6.72 (m, 5H), 6.59 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.1, 5.0 Hz, 1H), 4.43 – 4.34 (m, 2H), 4.13 – 4.05 (m, 2H), 3.68 – 3.60 (m, 2H), 3.51 – 3.49 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.00 – 2.86 (m, 2H), 2.80 – 2.68 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.88 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.74 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.53 – 1.50 (m, 2H). MS:535 [M+H] +。 實施例4               實施例5
實施例5：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(3-甲氧基丙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-21代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.91 – 6.79 (m, 3H), 6.78 – 6.71 (m, 2H), 6.57 (dd, J= 5.1, 1.2 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.39 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 4.01 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.55 – 3.41 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.99 – 2.85 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.98 – 1.84 (m, 3H), 1.74 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.64 – 1.43 (m, 2H).MS:549 [M+H] +。
實施例6：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-甲基-5-((四氫-2H-吡喃-4-基))氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-23代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.96 – 6.77 (m, 4H), 6.73 (s, 1H), 6.57 (dd, J= 5.1, 1.2 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.57 (dt, J= 8.7, 4.5 Hz, 1H), 4.39 (d, J= 13.0 Hz, 2H), 3.83 (dt, J= 11.6, 4.4 Hz, 2H), 3.55 – 3.41 (m, 4H), 2.92 (q, J= 11.2 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.02 – 1.84 (m, 4H), 1.73 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.63 – 1.46 (m, 3H). MS:561 [M+H] +。 實施例6              實施例7
實施例7：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-(4-羥基丁氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-5代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.32 – 7.21 (m, 3H), 7.16 – 7.07 (m, 1H), 7.06 – 6.95 (m, 2H), 6.93 – 6.80 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.51 – 4.41 (m, 3H), 4.06 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.51 – 3.42 (m, 4H), 2.93 (q, J= 11.5 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.1, 5.1 Hz, 1H), 1.90 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.83 – 1.71 (m, 3H), 1.65 – 1.45 (m, 4H). MS: 535 [M+H] +。
實施例8：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-((4-羥基-4-甲基戊基)氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-7代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.31 – 7.20 (m, 3H), 7.12 (tt, J= 9.3, 2.3 Hz, 1H), 7.06 – 6.95 (m, 2H), 6.92 – 6.79 (m, 3H), 5.39 – 5.30 (m, 1H), 4.45 (d, J= 13.4 Hz, 2H), 4.20 (s, 1H), 4.04 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.54 – 3.36 (m, 2H), 2.93 (td, J= 12.6, 9.4 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.06 – 1.84 (m, 2H), 1.84 – 1.72 (m, 3H), 1.64 – 1.46 (m, 3H), 1.11 (s, 6H). MS:563 [M+H] +。 實施例8            實施例9
實施例9：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(4-羥基丁氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-22代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.27 – 7.07 (m, 3H), 6.86 – 6.84 (m, 3H), 6.78 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.39 – 5.29 (m, 1H), 4.48 – 4.34 (m, 3H), 3.97 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.54 – 3.39 (m, 4H), 2.92 (q, J= 11.0, 10.6 Hz, 2H), 2.81 – 2.68 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.06 – 1.95 (m, 1H), 1.88 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.75 – 1.65 (mp, 3H), 1.63 – 1.43 (m, 3H).MS:549 [M+H] +。
實施例10：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-((4-羥基-4-甲基戊基)氧基)-2-甲基苯基) )吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-25代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.87 – 6.84 (m, 3H), 6.77 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (dd, J= 5.1 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.1, 4.9 Hz, 1H), 4.39 (d, J= 12.9 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.95 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.54 – 3.39 (m, 2H), 2.99 – 2.88 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 19.1, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.05 – 1.99 (m, 1H), 1.88 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.80 – 1.68 (m, 3H), 1.61 – 1.42 (m, 3H), 1.10 (s, 6H). MS: 577 [M+H] +。 實施例10              實施例11
實施例11：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-甲基)-5-(2-(四氫-2H-吡喃-4- 基) 乙氧基) 苯基) 吡啶-2-基) 呱啶-4-基) 甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-28代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.91 – 6.79 (m, 3H), 6.79 – 6.71 (m, 2H), 6.58 (d, J= 5.1Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 11.8 Hz, 2H), 4.01 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.87 – 3.78 (m, 2H), 3.49 – 3.48 (m, 2H), 3.27 – 3.25 (m, 4H), 2.92 (q, J= 11.1, 10.6 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.1, 5.1 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.99 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 1.88 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.78 – 1.43 (m, 7H). MS:589 [M+H] +。
實施例12：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-(3-羥基丙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基) 甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-3代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.32 – 7.22 (m, 3H), 7.12 (tt, J= 9.4, 2.3 Hz, 1H), 7.06 – 6.97 (m, 2H), 6.92 – 6.79 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 11.9, 5.0 Hz, 1H), 4.57 (t, J= 5.1 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 13.4 Hz, 2H), 4.11 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.63 – 3.42 (m, 4H), 2.93 (dt, J= 13.2, 9.9 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.89 (p, J= 6.2 Hz, 3H), 1.76 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 1.65 – 1.48 (m, 2H). MS:521 [M+H] +。 實施例12                       實施例13
實施例13：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-(4-甲氧基丁氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-6代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.32 – 7.21 (m, 3H), 7.11 (t, J= 9.4 Hz, 1H), 7.06 – 6.96 (m, 2H), 6.92 – 6.79 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 11.9, 5.0 Hz, 1H), 4.49 – 4.40 (m, 2H), 4.06 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.54 – 3.36 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (dt, J= 12.9, 9.8 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.90 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 1.81 – 1.64 (m, 5H), 1.55 (dt, J= 20.8, 12.2 Hz, 2H). MS:549 [M+H] +。
實施例14：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(3-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲氧基)苯基) 吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-9代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.14 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.38 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.32 – 7.21 (m, 3H), 7.12 (t, J= 9.3 Hz, 1H), 7.06 – 6.97 (m, 2H), 6.93 – 6.80 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 11.9, 4.9 Hz, 1H), 4.49 – 4.41 (m, 2H), 3.95 – 3.84 (m, 4H), 3.55 – 3.40 (m, 4H), 2.93 (td, J= 12.6, 9.4 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.0, 4.9 Hz, 1H), 2.06 – 1.95 (m, 1H), 1.90 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 1.80 – 1.66 (m, 3H), 1.55 (dd, J= 21.9, 12.5 Hz, 2H), 1.36 - 1.32 (m, 2H).MS: 561 [M+H] +。 實施例14                   實施例15
實施例15： (5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(3-羥基丙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-24代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.22 (m, 1H), 7.19 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.12 (t, J= 9.3 Hz, 1H), 6.91 – 6.80 (m, 3H), 6.78 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 11.9, 5.0 Hz, 1H), 4.53 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 4.38 (dd, J= 13.2, 3.8 Hz, 2H), 4.02 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.59 – 3.41 (m, 4H), 2.92 (dt, J= 12.8, 9.5 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.92 – 1.79 (m, 3H), 1.74 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.64 – 1.44 (m, 2H). MS: 535 [M+H] +。
實施例16：(1-(4-(2-氯-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-10代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.45 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.17 – 7.07 (m, 1H), 7.06 – 6.95 (m, 2H), 6.88 – 6.80 (m, 3H), 6.66 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.39 – 5.29 (m, 1H), 4.39 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 4.18 – 4.10 (m, 2H), 3.69 – 3.62 (m, 2H), 3.50 - 3.48 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 2.95 - 2.92 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 18.9, 5.0 Hz, 1H), 1.89 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.74 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.61 – 1.43 (m, 2H). MS:555 [M+H] +。 實施例16                     實施例17
實施例17：(1-(4-(2-氯-5-(3-羥基丙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-11代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.44 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.27 – 7.23 (m, 1H), 7.13 - 7.11 (m, 1H), 7.04 – 6.92 (m, 2H), 6.85 - 6.82 (m, 3H), 6.65 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.39 – 5.29 (m, 2H), 4.38 (d, J= 12.2 Hz, 2H), 3.59 – 3.41 (m, 4H), 2.93 (d, J= 11.9 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.0 - 1.97 (m, 2H), 1.88 - 1.85 (m, 3H), 1.74 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.61 – 1.43 (m, 2H). MS: 555 [M+H] +。
實施例18：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-羥基丙氧基)苯基)吡啶-2-基))呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-12代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.19 (m, 2H), 7.16 – 7.04 (m, 2H), 6.99 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.86 – 6.82 (m, 2H), 6.76 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.56 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 11.9 Hz, 2H), 4.06 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.60 – 3.40 (m, 4H), 2.93 (q, J= 10.8 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.87 – 1.85 (m, 3H), 1.74 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.63 – 1.42 (m, 2H).MS:539 [M+H] +。 實施例18                  實施例19
實施例19：(5-(2-氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶- 4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在步驟1中用中間體A-2代替中間體A-1，在步驟4中用中間體B-20代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.34 – 7.24 (m, 2H), 7.23 – 7.10 (m, 3H), 7.05 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 6.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.80 – 6.71 (m, 2H), 6.58 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.45 (dd, J= 12.1, 5.1 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 13.0 Hz, 2H), 4.12 – 4.05 (m, 2H), 3.67 – 3.60 (m, 2H), 3.54 – 3.50 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 2.92 (td, J= 12.9, 7.5 Hz, 2H), 2.71 (dd, J= 19.0, 5.2 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.86 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.73 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 1.58 – 1.46 (m, 2H). MS: 517 [M+H] +。
實施例20：(5-(2-氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(3-羥基丙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶- 4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在步驟1中用中間體A-2代替中間體A-1，在步驟4中用中間體B-24代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.34 – 7.25 (m, 2H), 7.22 – 7.12 (m, 3H), 7.05 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 6.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.57 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.45 (dd, J= 12.0, 5.1 Hz, 1H), 4.53 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 4.02 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.59 – 3.51 (m, 2H), 3.32 (br, 2H), 2.91 (q, J= 11.1, 10.6 Hz, 2H), 2.77 – 2.64 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.08 - 2.00 (m, 1H), 1.85 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 1.73 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.62 – 1.42 (m, 2H). MS: 517 [M+H] +。 實施例20                    實施例21
實施例21：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-羥基-3-甲基丁氧基)苯基)吡啶) -2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-13代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.30 – 7.19 (m, 2H), 7.18 – 7.03 (m, 2H), 7.00 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.79 (m, 2H), 6.76 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.47 – 4.31 (m, 3H), 4.11 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.48 - 3.40 (m, 2H), 2.93 (dt, J= 12.7, 10.3 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.95 – 1.80 (m, 3H), 1.75 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 1.55 - 1.52 (m, 2H), 1.16 (s, 6H). MS: 567 [M+H] +。
實施例22：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(2-羥基乙氧基)苯基)吡啶-2-基))呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-14代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.29 – 7.19 (m, 2H), 7.18 – 6.96 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.73 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.90 (br, 1H), 4.45 – 4.36 (m, 2H), 4.03 (t, J= 5.0 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 4.9 Hz, 2H), 3.55 – 3.29 (m, 2H), 3.01 – 2.86 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.89 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 1.75 (d, J= 12.5 Hz, 1H), 1.56 - 1.53 (m, 2H).MS: 525 [M+H] +。 實施例22                 實施例23
實施例23：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(2-羥基-2-甲基丙氧基)苯基)吡啶)-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-15代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.17 – 6.96 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.88 – 6.80 (m, 2H), 6.77 (dd, J= 5.2, 1.7 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.40 (d, J= 12.9 Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.48 – 3.40 (m, 2H), 2.94 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.89 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.75 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.63 – 1.43 (m, 2H), 1.20 (s, 6H).MS:553 [M+H] +。
實施例24：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-((4-羥基-4-甲基戊基)氧基)) 苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-16代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.18 – 6.94 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.73 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.45 – 4.36 (m, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.99 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.48 – 3.40 (m, 2H), 2.93 (dt, J= 13.4, 10.0 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.94 – 1.85 (m, 1H), 1.82 – 1.69 (m, 3H), 1.64 – 1.44 (m, 4H), 1.10 (s, 6H). MS:581 [M+H] +。 實施例24                    實施例25
實施例25：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-((5-羥基戊基)氧基)苯基)吡啶- 2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-17代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.18 – 6.95 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.73 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.42 - 4.38 (m, 3H), 4.00 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.55 – 3.30 (m, 4H), 2.93 (q, J= 11.4 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.89 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.76 - 1.70 (m, 3H), 1.62 – 1.39 (m, 6H). MS:567 [M+H] +。
實施例26：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-((5-羥基-5-甲基己基)氧基)) 苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-18代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.18 – 6.95 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.88 – 6.80 (m, 2H), 6.77 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.45 – 4.39 (m, 2H), 4.11 (s, 1H), 4.00 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.48 – 3.40 (m, 2H), 2.93 (q, J= 11.2 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.94 – 1.85 (m, 1H), 1.79 – 1.65 (m, 3H), 1.62 – 1.34 (m, 6H), 1.07 (s, 6H).MS:595 [M+H] +。 實施例26                      實施例27
實施例27：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-氟丙氧基)苯基)吡啶-2-基) )呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-19代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.29 – 7.21 (m, 2H), 7.17 – 6.98 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 6.87 – 6.80 (m, 2H), 6.77 (dt, J= 5.1, 1.7 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.68 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 4.56 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 4.40 (dd, J= 13.3, 3.5 Hz, 2H), 4.12 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.55 – 3.36 (m, 2H), 2.93 (dt, J= 12.9, 9.9 Hz, 2H), 2.74 (ddd, J= 19.0, 5.0, 1.8 Hz, 1H), 2.18 – 2.04 (m, 2H), 1.94 – 1.85 (m, 1H), 1.75 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 1.64 – 1.43 (m, 2H).MS:541 [M+H] +。
實施例28：(1-(4-(5-(2-甲氧基乙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-苯基-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在步驟1中用中間體A-3代替中間體A-1，在步驟4中用中間體B-20代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.36 – 7.15 (m, 5H), 7.13 – 7.10 (m, 2H), 6.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.80 – 6.70 (m, 2H), 6.58 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 5.34 – 5.29 (m, 1H), 4.42 – 4.33 (m, 2H), 4.12 – 4.05 (m, 2H), 3.68 – 3.60 (m, 2H), 3.42 – 3.36 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 2.94 – 3.88 (m, 2H), 2.67 (dd, J= 18.9, 4.7 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.91 – 1.82 (m, 1H), 1.73 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.55 – 1.51 (m, 2H). MS: 499 [M+H] +。 實施例28                       實施例29
實施例29：(5-(2-氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(3-羥基丙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在步驟1中用中間體A-2代替中間體A-1，在步驟4中用中間體B-24代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.34 – 7.24 (m, 2H), 7.22 – 7.12 (m, 3H), 7.10 – 7.01 (m, 1H), 6.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.78 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 5.43 – 5.38(m, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.37 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 4.02 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.58 – 3.46 (m, 4H), 2.92 (d, J= 9.1 Hz, 2H), 2.71 (dd, J= 19.0, 5.1 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.07 – 1.95 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.73 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.63 – 1.45 (m, 2H). MS: 517 [M+H] +。
實施例30：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-甲氧基丙氧基)苯基)吡啶-2-基 )呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-1代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.29 – 7.19 (m, 2H), 7.17 – 7.04 (m, 2H), 7.00 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.86 – 6.82 (m, 2H), 6.79 – 6.73 (m, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 13.0 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.55 – 3.41 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (dt, J= 13.3, 10.5 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.1, 5.0 Hz, 1H), 2.01 – 1.84 (m, 3H), 1.75 (d, J= 13.1 Hz, 1H), 1.58 – 1.52 (m, 2H). MS: 553 [M+H] +。 實施例30 實施例31
實施例31：(1-(4-(5-(3-羥基丙氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-苯基-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於，不同之處在於在步驟1中用中間體A-3代替中間體A-1，在步驟4中用中間體B-24代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.36 – 7.27 (m, 2H), 7.27 – 7.14 (m, 3H), 7.14 – 7.07 (m, 2H), 6.87 (dd, J= 8.4, 2.7 Hz, 1H), 6.78 – 6.69 (m, 2H), 6.57 (dd, J= 5.1, 1.3 Hz, 1H), 5.34 – 5.29 (m, 2H), 4.38 (d, J= 12.8 Hz, 2H), 4.02 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.59 – 3.43 (m, 2H), 2.98 – 2.88 (m, 2H), 2.74 – 2.62 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.02 – 1.96 (m, 3H), 1.85 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 1.73 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 1.66 – 1.38 (m, 2H). MS: 499 [M+H] +。
實施例32：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(4-甲氧基丁氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-26代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.07 (m, 3H), 6.85 (dd, J= 11.4, 8.4 Hz, 3H), 6.78 – 6.71 (m, 2H), 6.58 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (dd, J= 13.2, 3.6 Hz, 2H), 3.97 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.60 – 3.41 (m, 4H), 3.22 (s, 3H), 3.00 – 2.85 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 18.9, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.88 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.79 – 1.44 (m, 7H).MS: 563 [M+H] +。 實施例32                            實施例33
實施例33：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-甲基-5-((四氫-2H-吡喃-4-基)) 甲氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-27代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.85 (dd, J= 15.5, 8.4 Hz, 3H), 6.78 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 12.5 Hz, 2H), 3.91 – 3.79 (m, 4H), 3.54 – 3.41 (m, 4H), 2.92 (q, J= 10.7 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.99 (br, 1H), 1.88 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.70 (dd, J= 27.6, 12.7 Hz, 3H), 1.61 – 1.46 (m, 2H), 1.31 (qd, J= 12.2, 4.5 Hz, 2H). MS: 575 [M+H] +。
實施例34：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(4-甲氧基丁氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-26代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.06 (m, 3H), 6.88 – 6.82 (m, 3H), 6.78 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.43 – 4.34 (m, 2H), 3.97 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.50 – 3.40 (m, 2H), 3.36 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.92 (q, J= 11.2 Hz, 2H), 2.74 (ddd, J= 18.9, 5.0, 1.8 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.88 (d, J= 13.1 Hz, 1H), 1.78 – 1.46 (m, 7H). MS:563 [M+H] +。 實施例34 實施例35
實施例35：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(5-(4-羥基丁氧基)-2-甲基苯基)吡啶-2-基) 呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-22代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.12 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.07 (m, 3H), 6.88 – 6.81 (m, 3H), 6.77 – 6.70 (m, 2H), 6.57 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 5.35 – 5.31 (m, 2H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 3.96 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.56 – 3.46 (m, 2H), 2.92 (q, J= 11.0 Hz, 2H), 2.80 – 2.68 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.03-1.98 (m, 4H), 1.88 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 1.75 – 1.69 (m, 2H), 1.58 – 1.50 (m, 3H). MS:549 [M+H] +。
實施例36：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(4-羥基丁氧基) 苯基) 吡啶) -2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於，不同之處在於在步驟4中用中間體B-29代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.17 – 6.95 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.73 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.49 – 4.35 (m, 4H), 4.01 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.55 – 3.42 (m, 3H), 3.01 – 2.86 (m, 2H), 2.74 (ddd, J= 19.1, 5.0, 1.8 Hz, 1H), 1.94 – 1.85 (m, 1H), 1.78 - 1.71 (m, 3H), 1.64 – 1.43 (m, 4H). MS: 553 [M+H] +。 實施例36 實施例37
實施例37：(1-(4-(5-(2,2-二氟-3-羥基丙氧基)-2-氟苯基) 吡啶) -2-基)呱啶-4-基) (5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基) 甲酮
採用與實施例1相似的方法進行製備，不同之處在於在第4步中用中間體B-30代替中間體B-2進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.33 – 7.05 (m, 5H), 6.95 (s, 1H), 6.89 – 6.75 (m, 3H), 5.67 (t, J= 6.2 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.39 (t, J= 12.9 Hz, 4H), 3.76 (td, J= 13.8, 6.2 Hz, 2H), 3.48 (m, 2H), 2.94 (dt, J= 12.7, 10.4 Hz, 2H), 2.74 (dd, J= 19.1, 5.0 Hz, 1H), 1.90 (d, J= 12.7 Hz, 1H), 1.76 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.64 – 1.44 (m, 2H). MS:575 [M+H] +。
實施例38： (5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-羥基丙氧基)苯基)嘧啶-2-基) )呱啶-4-基)甲酮
步驟1）：將2,4-二氯嘧啶(1.00 g, 6.71 mmol)、中間體B-12的3-(4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基)丙-1-醇(2.58 g, 8.73 mmol)、碳酸鉀(1.86 g, 13.4 mmol)、Pd[PPh 3] 4(776mg, 0.671 mmol)加入乙醇(12 mL)和甲苯 (6 mL)的混合溶劑中，氬氣保護條件下，升溫至55℃反應8小時。反應液用乙酸乙酯稀釋後經飽和食鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥後過濾濃縮，粗產物柱層析純化得到3-(3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-氟苯氧基)丙基-1-醇1.48 g, 收率78%；
步驟2）：將 3-(3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-氟苯氧基)丙基-1-醇(741 mg, 2.62 mmol)、呱啶-4-羧酸乙酯(412.35 mg, 2.62 mmol)、碳酸銫(1.71 g, 5.25 mmol)加入DMF (8 mL)，氬氣置換後在85℃下反應3小時。反應液用二氯甲烷稀釋，經飽和食鹽水洗滌後用無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾減壓濃縮，得到產品907 mg，收率85.71%。MS:404 [M+H] +；
步驟3）：將 1-(4-(2-氟-5-(3-羥基丙氧基)苯基)嘧啶-2-基)呱啶-4-甲酸乙酯 (650 mg, 1.61 mmol)、NaOH (321 mg, 8.03 mmol)加入MeOH (10 mL)和H 2O (2 mL)中，室溫攪拌反應3小時；0℃條件下用鹽酸(2N濃度)調節pH值至3，反應液用二氯甲烷稀釋後經飽和食鹽水洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥有機相，經過濾減壓濃縮最終得到1-(4-(2-氟-5-(3-羥基丙氧基)苯基)嘧啶-2-基)呱啶-4-甲酸532 mg, 收率87.92%；MS:376[M+H] +；
步驟4）：將1-(4-(2-氟-5-(3-羥基丙氧基)苯基)嘧啶-2-基)呱啶-4-甲酸 (190 mg, 0.5mmol)、中間體A-1(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑) (100mg, 0.55 mmol)、HATU(190 mg, 0.5 mmol)、DIEA (129 mg, 1 mmol)  加入DMF (3 mL)中，氬氣保護條件下，25℃反應2小時。反應液用二氯甲烷稀釋後經飽和食鹽水洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥有機相，再經過濾減壓濃縮，得到的產物進一步用柱層析純化，最終得到產物78 mg, 收率29%。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.44 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.32 – 7.19 (m, 2H), 7.18 – 7.05 (m, 2H), 7.00 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 6.88 – 6.81 (m, 2H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.75 (d, J= 13.1 Hz, 2H), 4.60(t, J= 5.0 Hz, 1H),4.08 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.55 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.51 – 3.35 (m, 2H), 3.04 (td, J= 12.5, 9.7 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 1.98 – 1.76 (m, 4H), 1.56 – 1.49 (m, 2H). MS: 540 [M+H] +。
實施例39：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-(3-羥基-3-甲基丁氧基)苯基)嘧啶) -2-基)呱啶-4-基)甲酮
採用與實施例38相似的方法進行製備，不同之處在於在第1步中用中間體B-13代替中間體B-12進行反應。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.44 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.31 – 7.21 (m, 2H), 7.17 – 7.04 (m, 2H), 7.00 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 6.88 – 6.80 (m, 2H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.79 – 4.71 (m, 2H), 4.41 (s, 1H), 4.13 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.55 – 3.35 (m, 2H), 3.04 (td, J= 12.5, 8.5 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.1, 5.0 Hz, 1H), 1.97 – 1.75 (m, 4H), 1.51 (dd, J= 17.4, 12.0 Hz, 2H), 1.16 (s, 6H).MS:568[M+H] +。
立體異構體的分離
對實施例18、21、23和24所得的外消旋體通過手性柱進行了分離純化。分離採用色譜儀（島津 LC-20A）進行，分離條件如下：
色譜柱 : CHIRALPAK  IC
柱尺寸 : 0.46 cm I.D. × 15 cm L
注射量 : 5.0 uL
流動相 : n-Hexane/EtOH=60/40(V/V)
流速 : 1.0mL/min
波長 : UV254nm
溫度 : 25 oC
在分離出來的兩個峰中，收集保留時間更長的那一個峰，旋轉蒸發除去溶劑，得到對映異構體的純品。將上述活性對映異構體的絕對構型指定為（S）。
消旋體 保留時間 （min） S型立體異構體
實施例18 6.68 實施例40
實施例21 4.75 實施例41
實施例23 5.71 實施例42
實施例24 4.96 實施例43
實施例44：[5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基]-[1-[4-[5-(2-乙基-2-羥基丁氧基)-2-氟苯基]吡啶-2-基]呱啶-4-基]甲酮
步驟1）：將2-溴乙酸甲酯(14.42 g, 94.24 mmol)、3-溴-4-氟苯酚 (6 g, 31.41 mmol)、碳酸鉀(13.03 g, 94.24 mmol) 置於DMF (30 mL)中，氬氣保護條件下，80℃反應12小時。反應液用乙酸乙酯稀釋，然後用水和飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，之後過濾減壓濃縮，粗產物柱層析純化，最終得到2-(3-溴-4-氟-苯氧基)乙酸甲酯 6 克，收率73%。
步驟2）：將2-(3-溴-4-氟-苯氧基)乙酸甲酯(1 g, 3.80 mmol)溶於四氫呋喃中，0°C 氬氣保護條件下，滴加乙基溴化鎂 (2.0M的四氫呋喃溶液) (5.7 mL)，此溫度下反應2小時。加入飽和氯化銨水溶液淬滅反應，反應液經矽藻土抽濾，濾液用乙酸乙酯萃取，有機相經水和飽和食鹽水洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥，後過濾減壓濃縮，粗產物經柱層析純化，最終得到3-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]戊-3-醇800毫克,收率72%。
步驟3）：將3-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]戊-3-醇 (800 mg, 2.75 mmol)，頻哪醇酯(907.06 mg, 3.57 mmol)，Pd(dppf)Cl 2(120.63 mg, 164.86 μmol)和醋酸鉀(539.31 mg, 5.50 mmol) 溶於1,4-二氧六環(15 mL) 中，氬氣保護條件下，緩慢升至100℃，反應8小時，冷卻至室溫，反應液加矽藻土抽濾，後用乙酸乙酯稀釋，然後用水和飽和食鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥後，過濾減壓濃縮溶劑，粗產物柱層析純化，最終得到3-[[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]甲基]戊-3-醇 800 毫克，收率90% 。
步驟4）：將(1-(4-溴吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮(100 mg, 222.57 μmol)、3-[[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]甲基]戊-3-醇(112.92 mg, 333.86 μmol)、碳酸鉀(61.52 mg, 445.15 μmol)、Pd(dppf)Cl 2(16.29 mg, 22.26 μmol)溶於1,4-二氧六環 (5 mL) 和 水(0.5 mL) 的混合溶劑中，氬氣保護條件下，緩慢升至100℃，反應8小時。反應液用乙酸乙酯稀釋後用水和飽和食鹽水洗滌，取有機相用無水硫酸鈉乾燥，後過濾減壓濃縮溶劑，經矽膠柱層析純化，最終得到[5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基]-[1-[4-[5-(2-乙基-2-羥基丁氧基)-2-氟苯基]吡啶-2-基]呱啶-4-基]甲酮40 毫克，收率31% 。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 – 7.18 (m, 2H), 7.17 – 6.97 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.89 – 6.80 (m, 2H), 6.76 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 5.34 (dd, J= 12.0, 4.9 Hz, 1H), 4.44 – 4.32 (m, 3H), 3.77 (s, 2H), 3.48 (dd, J= 18.8, 12.1 Hz, 1H), 3.37 (dd, J= 11.7, 3.9 Hz, 1H), 3.00 – 2.87 (m, 2H), 2.80 – 2.66 (m, 1H), 1.89 (d, J= 13.3 Hz, 1H), 1.75 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 1.59 – 1.47 (m, 6H), 0.83 (t, J= 7.5 Hz, 6H). MS: 581[M+H] +
實施例45：[5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H吡唑-1-基]-[1-[4-[2-氟-5-[(1-羥基環丙基)甲氧基]苯基]吡啶-2-基]呱啶-4-基]甲酮
步驟1）：將2-(3-溴-4-氟-苯氧基)乙酸甲酯(500 mg, 1.80 mmol)溶於THF (8 mL)中，0°C 氬氣保護條件下，滴加乙基溴化鎂 (2M的四氫呋喃溶液，0.9毫升, 1.80 mmol)，此溫度下反應30分鐘後，緩慢升至25℃，繼續反應16 小時。加入飽和氯化銨水溶液淬滅反應，過濾得濾液用二氯甲烷萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌後經無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，矽膠柱層析純化最終得到1-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]環丙醇 180毫克，收率38%。
步驟2）：將 1-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]環丙醇(180 mg, 689.42 μmol)、頻哪醇酯(370.63 mg, 1.46 mmol)、醋酸鉀(238.73 mg, 2.43 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(88.99 mg, 121.63 μmol) 置於1,4-二氧六環 (10 mL) 中，氬氣保護條件下，100℃反應3 小時 ，反應液濃縮後經柱層析純化，最終得到1-[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]-2-甲基-環丙-2-醇 170毫克，收率80%。
步驟3）：將 (1-(4-溴吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮(80 mg, 178.06 μmol)、1-[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]-2-甲基-環丙-2-醇(71.33 mg, 231.48 μmol)、碳酸鉀(49.22 mg, 356.12 μmol)、Pd(dppf)Cl 2(13.03 mg, 17.81 μmol)溶於1,4-二氧六環(3 mL)和水(0.4 mL)的混合溶劑中，氬氣保護條件下，緩慢升至80℃，反應6小時。反應液用乙酸乙酯稀釋，後用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥後過濾減壓濃縮溶劑，粗產物柱層析純化，最終得到[5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H吡唑-1-基]-[1-[4-[2-氟-5-[(1-羥基環丙基)甲氧基]苯基]吡啶-2-基]呱啶-4-基]甲酮28毫克，收率29%。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.15 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.30 – 7.20 (m, 2H), 7.18 – 7.05 (m, 2H), 7.03 – 6.94 (m, 2H), 6.89 – 6.76 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.38 (d, J= 13.0 Hz, 2H), 3.55 – 3.32 (m, 2H), 2.99 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 2.75 (dd, J= 19.0, 5.0 Hz, 1H), 2.55 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 1.91 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.76 (d, J= 13.1 Hz, 1H), 1.63 – 1.46 (m, 2H), 0.97 (t, J= 7.3 Hz, 4H). MS: 551[M+H] +
實施例46：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-((1-羥基環丁基)甲氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
步驟1）：將1-羥基環丁烷羧酸(500 mg, 4.31 mmol)溶於THF (10 mL)中， 氬氣保護條件下，室溫分批加入氫化鋁鋰(490.25 mg, 12.92 mmol)，升至80℃，繼續反應1小時。冰浴中，依次加入0.5ml水，1.5mL 20%NaOH水溶液，0.5mL水，淬滅完畢後，過濾並收集濾液，濾液減壓濃縮，最終得到粗品1-(羥甲基)環丁醇 400毫克,收率91%。
步驟2）：將1-(羥甲基)環丁醇(400 mg, 3.92 mmol)、對甲基苯磺醯氯(1.12 g, 5.87 mmol)、三乙胺(1.19 g, 11.75 mmol, 1.64 mL)、 DMAP (47.85 mg, 391.65 μmol) 置於二氯甲烷(20 mL) 中，氬氣保護條件下，25℃反應16小時。反應液加入飽和碳酸鈉水溶液攪拌30分鐘，再用乙酸乙酯萃取三次，有機相經飽和食鹽水洗滌後用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，粗產物柱層析純化得到(1-羥基環丁基)甲基 4-對甲苯磺酸酯 430毫克，收率43%。
步驟3）：將(1-羥基環丁基)甲基 4-對甲苯磺酸酯(430 mg, 1.68 mmol)、3-溴-4-氟-苯酚 (106.81 mg, 559.20 μmol)、碳酸鉀(231.86 mg, 1.68 mmol)加入DMF (10 mL)中，氬氣保護條件下，80℃加熱攪拌反應16小時。反應體系加入水，用乙酸乙酯萃取三次，有機相經飽和食鹽水洗滌後用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮，柱層析純化最終得到1-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]環丁醇 150毫克，收率98%。
步驟4）：將1-[(3-溴-4-氟-苯氧基)甲基]環丁醇(150 mg, 545.23 μmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-1,3,2-二氧雜硼烷(179.99 mg, 708.80 μmol)、Pd(dppf)Cl 2(23.94 mg, 32.71 μmol)、醋酸鉀(107.02 mg, 1.09 mmol)溶於1,4-二氧六環(10 mL) 中，氬氣保護條件下，緩慢升至100℃，反應8小時。反應液冷卻至室溫後加矽藻土抽濾，濾液用乙酸乙酯稀釋，後用水和飽和食鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥後過濾減壓濃縮溶劑，粗產物柱層析純化（洗脫劑：PE:EA=3:1），最終得到1-[[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]甲基]環丁醇 (150 mg, 486.77 μmol, 產率：89.28%) 。
步驟5）：將(1-(4-溴吡啶-2-基)呱啶-4-基)(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)甲酮 (100 mg, 222.57 μmol)、1-[[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]甲基]環丁醇(107.56 mg, 333.86 μmol)、碳酸鉀(61.52 mg, 445.15 μmol)、Pd(dppf)Cl 2(16.29 mg, 22.26 μmol) 溶於1,4-二氧六環(5 mL) 和 水 (0.5 mL) 的混合溶劑中，氬氣保護條件下，緩慢升至100℃ ，反應8小時。反應液用乙酸乙酯稀釋，經水和飽和食鹽水洗滌後再用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓後濃縮溶劑，柱層析純化得到(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基)(1-(4-(2-氟-5-((1-羥基環丁基)甲氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮(40毫克，收率32%) 。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.29 – 7.19 (m, 2H), 7.17 – 7.00 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 6.88 – 6.74 (m, 3H), 5.34 (dd, J= 12.0, 5.0 Hz, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.40 (dd, J= 13.4, 3.7 Hz, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.48 (dd, J= 19.1, 12.0 Hz, 1H), 3.40 – 3.35 (m, 1H), 3.01 – 2.87 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 18.9, 4.9 Hz, 1H), 2.11 (t, J= 9.1 Hz, 2H), 2.00 (dt, J= 12.5, 9.5 Hz, 2H), 1.89 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 1.75 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.66 – 1.49 (m, 4H). MS: 565[M+H] +
實施例47：(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基-5-氘)(1-(4-(2-氟-5-(2-羥基-2-甲基丙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮
步驟1）：將3,5-二氟苯甲醛 (800 mg, 5.63 mmol)置於THF (18 mL)中，0℃下向溶液中分批加入NaBH 4(354mg)，0℃反應2小時。反應液加0.5mL丙酮淬滅後減壓濃縮，經矽膠柱純化最終得到二氘-(3,5-二氟苯基)甲醇 800毫克，收率97.24%。
步驟2）：將二氘-(3,5-二氟苯基)甲醇(800 mg, 5.47 mmol)置於二氯甲烷 (54 mL)中，向溶液中加入MnO 2(2.38g)，25℃反應20小時。反應液過濾收集濾液後減壓濃縮，最終得到粗品氘代3,5-二氟苯甲醛600毫克，收率77%.
步驟3）：將氘代3,5-二氟苯甲醛 (143 mg, 999.24 μmol)、乙醛(66.03 mg, 1.50 mmol) 置於水中，氬氣保護，0℃下向反應液中滴加1N的 NaOH水溶液 (1.1 mL)，25℃下反應16小時。TLC顯示沒有原料後，向反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取三次，有機相用飽和食鹽水洗滌，後用無水硫酸鈉乾燥，過濾減壓濃縮後柱層析（PE:EA=20:1）純化，最終得到(E)-3-氘-3-(3,5-二氟苯基)丙-2-烯醛 60毫克，收率36%。
步驟4）：把水合肼(17.05 mg, 532.08 μmol) 加入到乙醇(2 mL)中，攪拌狀態下，加入乙酸(36.21 mg, 603.03 μmol, 34.49 μL)，升溫至40℃，緩慢滴加(E)-3-氘-3-(3,5-二氟苯基)丙-2-烯醛(60 mg, 354.72 μmol)，于80℃封管加熱並反應過夜。將反應液濃縮，經矽膠板純化（PE/EtOAc=3:1）得到產物5-氘-5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫吡唑 20 毫克，收率31%。
步驟5）：將1-[4-[2-氟-5-(2-羥基-2-甲基-丙氧基)苯基]-2-吡啶基]呱啶基-4-甲酸 (178.13 mg, 458.58 μmol)、5-氘-5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫吡唑(70 mg, 382.15 μmol)、HATU (174.36 mg, 458.58 μmol)、DIEA (148.17 mg, 1.15 mmol, 199.68 μL)置於DMF (5 mL)中，氬氣保護條件下，25℃反應16小時。反應液用二氯甲烷稀釋後經飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，後過濾減壓濃縮，得到的產物進一步用高效製備液相純化，最終得到(5-(3,5-二氟苯基)-4,5-二氫-1H-吡唑-1-基-5-氘)(1-(4-(2-氟-5-(2-羥基-2-甲基丙氧基)苯基)吡啶-2-基)呱啶-4-基)甲酮50毫克，收率24%。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.16 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.28 – 7.18 (m, 2H), 7.17 – 6.97 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 6.88 – 6.80 (m, 2H), 6.85 – 6.73 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.44 – 4.36 (m, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.48 (dd, J= 19.1, 1.7 Hz, 1H), 3.37 (dt, J= 7.5, 3.6 Hz, 1H), 3.01 – 2.87 (m, 2H), 2.74 (dd, J= 19.0, 1.8 Hz, 1H), 1.90 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.76 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 1.65 – 1.44 (m, 2H), 1.21 (s, 6H). MS: 554[M+H] +
1-[4-[2- 氟 -5-(2- 羥基 -2- 甲基 - 丙氧基 ) 苯基 ]-2- 吡啶基 ] 呱啶基 -4- 甲酸的合成：
（一）1-[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]-2-甲基-丙-2-醇的合成
第一步：將3-溴-4-氟-苯酚 (5 g, 26.18 mmol)、2,2-二甲基環氧乙烷 (5.66 g, 78.54 mmol)、碳酸鉀(10.85 g, 78.54 mmol)置於DMF (50 mL) 中，氬氣保護條件下，於100 ℃ 反應16小時。反應液用二氯甲烷稀釋後經飽和食鹽水洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，然後過濾減壓濃縮，最終得到1-(3-溴-4-氟-苯氧基)-2-甲基-丙-2-醇 (5 g, 19.00 mmol, 收率72.6%) 。
第二步：將1-(3-溴-4-氟-苯氧基)-2-甲基-丙-2-醇(30 g, 114.02 mmol)、頻哪醇酯 (34.75 g, 136.83 mmol)、醋酸鉀(22.38 g, 228.05 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(4.17 g, 5.70 mmol) 置於1,4-二氧六環(300 mL) 中，氬氣保護條件下，於90 ℃反應16 小時。反應液過濾減壓濃縮，粗產物柱層析純化，最終得到1-[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]-2-甲基-丙-2-醇 (25 g, 80.60 mmol, 收率70.7%) 。
（二）1-(4-溴-2-吡啶基)呱啶基-4-甲酸甲酯的合成
將2-氟-4-溴-吡啶 (3.52 g, 20 mmol) 和呱啶基-4-甲酸甲酯 (2.86 g, 20.00 mmol) 溶於DMF (50 mL)，加入三乙胺 (4.05 g, 40.00 mmol, 5.58 mL) ，加熱至80℃反應3小時。反應液降至室溫後加水稀釋，用乙酸乙酯萃取兩次，將有機相合併，並用飽和食鹽水洗滌三次，然後乾燥濃縮，剩餘物用矽膠柱層析純化得到產品1-(4-溴-2-吡啶基)呱啶基-4-甲酸甲酯 (5.1 g, 17.05 mmol, 收率85.2%)
（三）1-[4-[2-氟-5-(2-羥基-2-甲基-丙氧基)苯基]-2-吡啶基]呱啶基-4-甲酸的合成
第一步：將1-[4-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯氧基]-2-甲基-丙-2-醇(372.20 mg, 1.2 mmol) 和1-(4-溴-2-吡啶基)呱啶基-4-甲酸甲酯(299.16 mg, 1.00 mmol) 溶解在1,4-二氧六環(10 mL) 中，加入Pd(dppf)Cl 2(878.04 mg, 1.20 mmol) ，置換氮氣環境，升溫80°C反應1小時，體系降至室溫，墊矽藻土過濾，濾液濃縮得粗品，矽膠板純化得到1-[4-[2-氟-5-(2-羥基-2-甲基-丙氧基)苯基]-2-吡啶基]呱啶基-4-甲酸甲酯 (400 mg, 993.89 μmol, 收率82.8%)
第二步：將1-[4-[2-氟-5-(2-羥基-2-甲基-丙氧基)苯基]-2-吡啶基]呱啶基-4-甲酸甲酯(400 mg, 993.89 μmol) 溶解在MeOH (5 mL) 中，加入LiOH.H 2O (83.41 mg, 1.99 mmol) ，常溫反應1小時，反應液濃縮後加水，以及鹽酸調節至pH=6，收集析出的固體，乾燥得產品1-[4-[2-氟-5-(2-羥基-2-甲基-丙氧基)苯基]-2-吡啶基]呱啶基-4-甲酸(350 mg, 901.06 μmol, 收率90.66%)
對照例
參照WO2018/092089公開的內容，合成了如下兩個化合物作為對照。 對照例1                        對照例2
實驗例 1. 化合物對 HT29 細胞中 RIPK1 磷酸化抑制的 Western Blot 檢測
本實驗通過Western blot檢測誘導HT29細胞程式性壞死過程中待測化合物對胞內RIPK1及其磷酸化的影響，以驗證化合物對RIPK1磷酸化的抑制作用。
一、主要實驗試劑 / 儀器
名稱 貨號 品牌
McCoy's 5A SH30200.01 Hyclone
BCA蛋白濃度測定試劑盒 P0012 碧雲天
HT29細胞 HTB-38 ATCC
Phospho-RIP (Ser166) (D1L3S) Rabbit mAb 65746s CST
RIP (D94C12) XP Rabbit mAb 3493s CST
Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight 680 Conjugate) 5366s CST
Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight 800 4X PEG Conjugate) 5151s CST
β-Actin(8H10D10)Mouse mAb 3700s CST
Precision Plus ProteinTM Dual Color Standards 1610374 Bio-Rad
10%Mini-PROTEAN ®TGX Stain-Free TMProtein Gels 4568034 Bio-Rad
AT-406 (SM-406) S2754 Selleck chem
Z-VAD-FMK S7023 Selleck chem
Human TNF-α 300-01A-10 Peprotech
電泳儀電源PowerPacTM 基礎電泳儀電源 1645050 Bio-Rad
Mini-PROTEAN® Tetra 電泳槽 1658004 Bio-Rad
Trans-Blot® TurboTM 全能型蛋白轉印系統 1704155 Bio-Rad
Odyssey CLX紅外螢光掃描成像系統 CLX-1688 LI-COR
表3. 實驗例1所用主要試劑與儀器
二、實驗過程
1. 細胞收集及蛋白樣品提取 a) 收集狀態良好的HT29細胞，用McCoy's 5A完全培養基重懸計數，以1×10 6/1 mL/孔的細胞密度將細胞種植于12孔板中，在37 ℃細胞培養箱中過夜。 b) 向上述12孔板中先加Z-VAD-FMK（終濃度為20μM），30分鐘後再加入誘導劑（其中TNF-α終濃度為20ng/mL，AT-406終濃度為100nM）以及不同濃度的待測化合物，在37 ℃細胞培養箱中孵育7小時。 c) 完全裂解液的配製：取一管分裝好的RIPA裂解液，解凍後分別加入磷酸酶抑制劑、Roche蛋白酶抑制劑（磷酸酶抑制劑：RIPA=1:100；Roche蛋白酶抑制劑：RIPA=4:100），放在冰上待用。 d) 棄細胞培養液上清，用PBS洗2遍後於每孔中加入配製好的完全細胞裂解液100 μL，冰上裂解15 分鐘，裂解過程中間歇搖晃。 e) 裂解完全後轉移至提前標記好的1.5 mL離心管中於4℃，14000 rpm下離心20 分鐘。 f) 取上清，轉移至做好標記的600 μL離心管中，置於冰上。 g) 用BCA試劑盒檢測並計算蛋白濃度。
2. 預製膠每孔加入待測蛋白樣品或者預染雙色蛋白分子量標準品，蛋白上樣量為40~50 ug/孔。
3. 恒壓100V條件下電泳，當凝膠上預染雙色蛋白分子量標準品條帶跑出泳道下邊緣時，停止電泳。
4. 電泳結束後，取下凝膠夾，用剝膠鏟輕輕撬起短玻璃板，棄去上層濃縮膠，輕輕剝下分離膠後置於轉膜液中。
5. 根據凝膠大小剪一塊大小適中的NC膜，先用純水浸濕，然後浸入預冷過的轉膜液中；同時將濾紙浸泡在轉膜緩衝液中。
6. 在轉印匣中按照濾紙、NC膜、凝膠、濾紙的順序組裝，然後將轉印匣放入Trans-Blot® Turbo內，調取儀器自帶的“Standard SD”程式完成轉膜。
7. 用去離子水稍加漂洗載有蛋白的NC膜，根據Marker條帶指示按所需檢測蛋白的分子量大小裁剪膜，加入封閉液使膜浸沒，於室溫下在搖床上緩慢搖動封閉1小時。
8. 封閉完成後將NC膜放入抗體孵育盒中，加入稀釋好的一抗後於室溫下搖床上輕搖孵育1小時。
9. 孵育完成後用TBST洗膜3次，每次10 分鐘。
10. 根據一抗來源選擇二抗，按1:10000~1:15000比例用二抗稀釋液稀釋二抗，加入抗體孵育盒後將膜浸沒于其中，於室溫下搖床上輕搖孵育1小時。
11. 孵育完成後用TBST洗膜3次，每次10 分鐘。
12. 用純水漂洗膜一次，用Odyssey CLX紅外螢光掃描成像系統掃描膜獲取圖像，並採用其系統自帶的灰度讀取功能讀取條帶的螢光信號值。
三、 典型實驗結果及分析
根據螢光強度值計算目標蛋白其磷酸化相對於目標蛋白的表達占比，進而以對照組為基準計算給藥組中目標蛋白磷酸化的標準化表達倍數，計算方法如下： 目標蛋白磷酸化的標準化表達倍數= A/B A: 加藥組目標蛋白磷酸化的螢光強度值 /加藥組目標蛋白的螢光強度值 B: 不加藥組目標蛋白磷酸化的螢光強度值 /不加藥組目標蛋白的螢光強度值
通過上述方法對實施例40的化合物進行了測試，結果如圖1和圖2所示，圖1是不同濃度化合物下RIPK1總蛋白和磷酸化蛋白的Western Blot圖片，圖2是根據上圖條帶螢光強度值進行定量計算得到的RIPK1磷酸化相對於RIPK1總蛋白的表達占比。實驗結果顯示實施例40的化合物直接抑制了RIPK1的磷酸化活性並呈現劑量依賴關係，而對RIPK1無明顯的抑制作用。
實驗例 2. 化合物抑制細胞壞死的實驗方法（ CCK8 法）
本實驗例2在誘導HT29和L929細胞系細胞程式性壞死的條件下，加入不同濃度的待測化合物，測試待測化合物對程式性壞死的拯救效果的IC 50。
一、主要實驗試劑、儀器及材料
名稱 品牌 貨號/名稱
DMSO Sigma D2650 (100 mL)
台盼藍 GENIA Stock G8003
McCOY's 5A Hylcone SH30200.01
MEM Hyclone SH30024.01
胎牛血清 Hyclone SV30087.03
馬血清 GIBCO 16050122
CCK-8 同仁化學 CK04
GSK2982772 Selleckchem S8484
AT-406 Selleckchem S2754
Z-VAD-FMK Selleckchem S7023
Human TNF-α PeproTech 300-01A
Murine TNF-α PeproTech 315-01A)
HT29 ATCC HTB-38
L929 ATCC CCL-1
多功能讀板機 PerkinElmer Envision
表4. 試驗例2所用主要試劑與儀器 化合物：溶于DMSO配成10 mM溶液； TNF-α ：初始濃度為100 μg/mL； Z-VAD-FMK ：溶于DMSO配成10 mM溶液； AT-406 ：溶于DMSO配成10 mM溶液。
細胞系：HT29用含10%胎牛血清、100 U/mL 青黴素、100 μg/mL 鏈黴素的McCOY's 5A培養基培養，L929用含10%馬血清、100 U/mL 青黴素、100 μg/mL 鏈黴素的MEM培養基培養。
二、具體實驗方法：
1. 用DMSO溶解待測化合物形成儲藏液並進行梯度稀釋，然後再用相應培養基稀釋得到10倍工作濃度溶液。
2. 將處於對數生長期的細胞用培養液稀釋調整至特定細胞濃度，添加80 μL細胞懸液至96孔板中，使得HT29和L929的細胞密度分別為1.2*10 4cells/孔和2.0*10 4cells/孔。置於37℃、5%二氧化碳氣體培養箱中培養過夜。
3. 在已接種細胞的96孔板中每孔加入10 μL化合物溶液。待測化合物最高濃度為10 μM，9個濃度，4倍梯度稀釋，雙複孔。同時設置不加化合物的對照組。
4. 細胞繼續培養30分鐘後，于每孔中加入10 μL誘導劑混合液，其中HT29細胞中Human TNF-α、AT-406和Z-VAD-FMK的終濃度分別為20 ng/mL，1 μM和20 μM；L929細胞中Murine TNF-α和Z-VAD-FMK的終濃度分別為20 ng/mL和25 μM。
5. 將已加化合物和誘導劑的96孔板置於37℃、5%二氧化碳氣體培養箱中繼續培養，其中HT29細胞培養16小時，L929細胞培養4-8小時後，用CCK8檢測細胞活力，並用GraphPad Prism軟體製作量效曲線並計算IC 50。
表5列出了本發明中部分化合物抑制HT29和L929細胞壞死的測定結果，其中A表示IC 50小於或等於10 nM，B表示IC 50大於10 nM但小於或等於50 nM，C表示IC 50大於50 nM但小於或等於100 nM，D表示IC 50大於100 nM但小於或等於400 nM，E表示IC 50大於400 nM但小於或等於4000 nM，F表示IC 50大於4000 nM。
由下表所示的結果可以發現，本申請的化合物對於人源HT29細胞和鼠源L929細胞均表現出非常優異的抑制活性，其中對於人源HT29細胞的抑制活性優於對於鼠源L929細胞的抑制活性，但是差異較小。而對照例1和對照例2的化合物，對於人源HT29細胞的抑制活性顯著劣於本申請的化合物，同時，二者對於鼠源L929細胞幾乎沒有抑制活性，沒有得到有意義的測試結果。
表5、本發明部分化合物抑制HT29細胞壞死的測定結果
實施例 編號 HT29 IC 50(nM) L929 IC 50(nM) 實施例 編號 HT29 IC 50(nM) L929 IC 50(nM)
1 B C 23 A A
2 B C 24 A B
3 B C 25 A B
4 B B 26 A B
5 B C 27 A C
6 B C 28 A C
7 B B 29 B C
8 B B 30 A C
9 B B 31 A B
10 A A 32 A B
11 B C 33 A B
12 A C 34 B C
13 B C 35 B C
14 B B 36 A C
15 A B 37 A B
16 B C 38 B C
17 B C 39 A C
18 A C 40 A B
19 A B 41 A B
20 B B 42 A A
21 A B 43 A B
22 A C
44 A B 46 A B
45 A B 47 B B
對照例1 E F 對照例2 E F
實驗例 3.小分子化合物藥代動力學試驗
本實驗通過對SD大鼠、CD-1小鼠或比格犬單次口服及靜脈注射給予本申請部分化合物後，研究了本申請化合物的藥代動力學特徵，及本申請化合物穿透血腦屏障的能力。
（一）所用試劑、儀器以及動物
表6. 試驗試劑
試劑 供應商 貨號 批號
DMSO Innochem D3851 INAH03010
Kolliphor®HS 15 (Solutol) SIGMA 42966 BCBZ6212
乙腈 Fisher 75-05-8 186342
甲酸 DIKMA 64-18-6 2486917
乙酸銨 SIGMA 431311 MKCD5084
超純水 自製 - -
表7. 試驗儀器
儀器 品牌 型號
液相質譜聯用儀（LC-MS） AB Sciex 5500 Q-trap
高速冷凍離心機 Thermo ST 40R
十萬分之一天平 梅特勒 XPE205
單孔移液器 Eppendorf Research plus系列
電動12孔排槍 Thermo Novus系列
表8. 試驗動物
動物&品系： SD大鼠（雄性） CD-1小鼠（雄性） 比格犬（雄性）
動物等級： SPF級 SPF級 普通級
動物來源： 北京華阜康生物科技股份有限公司                 北京華阜康生物科技股份有限公司                 北京瑪斯生物技術有限公司     
體重範圍，年齡： 給藥首日180g-350g，8周（以體重為主） 給藥首日20g-30g，8周 （以體重為主） 給藥首日6-15kg，6-12月（以體重為主）
（二）樣品製劑配製
1. 靜脈注射（IV）組：稱取適當數量的待測化合物，完全溶解於適當體積的溶媒中，進行攪拌、渦流和/或超聲處理。得到溶液後，將逐漸增加溶媒至終體積以達到目標濃度，渦旋、超聲，得到均一溶液，用0.22 μm 的PVDF 濾膜過濾。
2. 口服（PO）組：稱取適當數量的待測化合物，完全溶解於適當體積的溶媒中，進行攪拌、渦流和/或超聲處理。得到溶液後，將逐漸增加溶媒至終體積以達到目標濃度，渦旋、超聲，得到均一溶液。
表9. 測試化合物所進行的藥代動力學試驗及溶媒配製
化合物 實驗 IV/PO組給藥溶媒
實施例18 大鼠PK&BBB IV/PO：DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85
實施例18 比格犬 PK IV：0.9%NaCl +3摩爾倍馬來酸 PO：Solutol/H 2O=10/90
實施例40 小鼠 PK&BBB IV/PO：DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85
實施例40 大鼠PK&BBB IV/PO：DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85
實施例42 大鼠 PK&BBB IV/PO：DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85+2摩爾倍馬來酸
實施例42 比格犬 PK IV：0.9%NaCl +2.5摩爾倍鹽酸 PO：Solutol/H 2O=5/95
（三）給藥及取樣
根據動物體重對動物隨機分組，分組後各組動物體重相當（不超過平均體重的±20%）。同時，IV組不禁食，PO組禁食過夜（＞12小時），並於給藥後2小時給予食物。所有動物自由飲水。以下表10和表11分別給出了給藥方案和藥代動力學採樣方案。
表10-1. 實施例18、實施例40和實施例42大鼠PK給藥方案
分組 給藥方式 動物數量 樣品 給藥劑量 給藥體積 製劑濃度
(mg/kg) (mL/kg) (mg/mL)
1 IV 3 全血 3 1 3
2 PO 3 全血 30 10 3
3 PO 3 全血/腦 30 10 3
表10-2. 實施例40小鼠PK給藥方案
分組 給藥方式 動物數量 樣品 給藥劑量 給藥體積 製劑濃度
(mg/kg) (mL/kg) (mg/mL)
1 IV 3 全血 2 5 0.4
2 PO 3 全血 20 10 2
3 PO 3 全血/腦 20 10 2
表10-3.實施例18比格犬PK給藥方案
分組 給藥方式 動物數量 樣品 給藥劑量 給藥體積 製劑濃度
(mg/kg) (mL/kg) (mg/mL)
1 IV 3 血漿 1 1 1
2 PO 2 血漿 3 3 1
表10-4.實施例42比格犬PK給藥方案
分組 給藥方式 動物數量 樣品 給藥劑量 給藥體積 製劑濃度
(mg/kg) (mL/kg) (mg/mL)
1 IV 3 全血 1 1 1
2 PO 3 全血 3 3 1
表11-1. 大鼠藥代動力學採樣方案
分組 給藥方式 樣品採集 抗凝劑 藥代動力學時間點
1 IV 頸靜脈插管（JVC） K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後5、15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
2 PO 頸靜脈插管（JVC） K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
3 PO 心臟采血，麻醉動物，採集腦組織。 K 2EDTA 全血：2小時 腦組織：2小時
按照上述方案對大鼠進行給藥，並在預定的時間點進行血液和腦組織樣品的採集和處理（採集和處理按本領域常規方法進行）。
表11-2. 小鼠藥代動力學採樣方案
分組 給藥方式 樣品採集 抗凝劑 藥代動力學時間點
1 IV 足背 K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後5、15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
2 PO 足背 K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
3 PO 心臟采血，麻醉動物，採集腦組織。 K 2EDTA 全血：2小時 腦組織：2小時
按照上述方案對小鼠進行給藥，並在預定的時間點進行血液和腦組織樣品的採集和處理（採集和處理按本領域常規方法進行）。
表11-3. 實施例18的比格犬藥代動力學採樣方案
分組 給藥方式 樣品採集 抗凝劑 藥代動力學時間點
1 IV 末梢血管穿刺(頭靜脈或隱靜脈) K 2EDTA 血漿：給藥前，給藥後5、15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
2 PO 末梢血管穿刺(頭靜脈或隱靜脈) K 2EDTA 血漿：給藥前，給藥後15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
表11-4. 實施例42的比格犬藥代動力學採樣方案
分組 給藥方式 樣品採集 抗凝劑 藥代動力學時間點
1 IV 末梢血管穿刺(頭靜脈或隱靜脈) K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後5、15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
2 PO 末梢血管穿刺(頭靜脈或隱靜脈) K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
（五）樣品分析
腦稱重，加入4倍的超純水勻漿。全血樣品和腦勻漿液分別加入6倍體積的乙腈（小鼠PK的全血樣品加入20倍體積的乙腈），渦旋1min後，4℃，4500rpm離心15min，根據儀器回應，上清液用稀釋液稀釋，用LC/MS分析樣品。
（六）資料分析：
將用WinNonlin軟體進行藥代動力學參數計算。如有適用的血漿/全血的藥物濃度-時間資料，將計算以下藥代動力學參數：CL（清除率）；V d（表觀分佈容積）；T 1/2（消除半衰期）；C max（達峰濃度）；T max（達峰時間）；AUC（血藥濃度-時間曲線下面積）；MRT（平均滯留時間）；F%（生物利用度）。
測試結果示於下表12-14中，分別給出了本申請實施例化合物18、40和42在各時間點的血藥濃度，以及各藥代動力學參數值，同時給出了本申請實施例化合物18、40和42在大鼠或小鼠的腦和血液中的濃度及其比值。由上面的結果可知，本申請實施例18、40和42的化合物表現出了優異的藥代動力學性質以及穿透血腦屏障的能力。
表12-1. 本申請實施例18的化合物的 大鼠 / 比格犬試驗的血藥濃度（ ng/mL）
時間點（ hr ） 大鼠 比格犬
IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg IV 1 mg/kg PO 3 mg/kg
0 0 0 0 0
0.083 1169 ± 149 / 843 ± 237 /
0.25 571 ± 31 85.6 ± 26.6 575 ± 222 469
0.5 275 ± 24 239 ± 47 334 ± 229 1064
1 94.7 ± 10.7 309 ± 103 170 ± 148 1455
2 25.5 ± 4.7 165 ± 90 57.9 ± 63.2 932
4 4.13 ± 0.75 68.7 ± 31 26.0 ± 24.1 138
7 0.927 ± 0.301 23.5 ± 5.2 10.0 ± NA 82.4
24 NA 0.557 ± NA NA 4.41
表12-2. 本申請實施例40的化合物的 小鼠 / 大鼠試驗的血藥濃度（ ng/mL）
時間點（ hr ） 小鼠 大鼠
IV 2 mg/kg PO 20 mg/kg IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg
0 0 0 0 0
0.083 632 ± 86 / 865 ± 45 /
0.25 323 ± 81 284 ± 26 496 ± 33 185 ± 86
0.5 150 ± 53 405 ± 46 295 ± 29 416 ± 92
1 60.7 ± 28.5 399 ± 77 119 ± 14 547 ± 248
2 12.3 ± 8.4 163 ± 2 61.9 ± 8.5 372 ± 258
4 1.77 ± 1.12 34.9 ± 19.0 13.2 ± 5 109 ± 99
7 0.854 ± NA 4.85 ± 3.83 2.37 ± 0.77 59.8 ± 34.9
24 NA NA NA 0.930 ± NA
表12-3. 本申請實施例42的化合物的 大鼠 / 比格犬試驗的血藥濃度（ ng/mL）
時間點（ hr ） 大鼠 比格犬
IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg IV 1 mg/kg PO 3 mg/kg
0 0 0 0 0
0.083 798 ± 302 / 535 ± 62 /
0.25 565 ± 166 266 ± 89 451 ± 77 645 ± 362
0.5 445 ± 70 654 ± 74 390 ± 13 1323 ± 406
1 368 ± 53 1253 ± 67 253 ± 49 1174 ± 696
2 303 ± 39 1297 ± 178 236 ± 69 1315 ± 320
4 269 ± 25 1380 ± 387 176 ± 29 560 ± 231
7 199 ± 23 1553 ± 153 133 ± 14 406 ± 145
24 19.9 ± 2.4 237 ± 95 32.9 ± 13.5 260 ± 19
表13-1. 本申請實施例18的化合物的 大鼠 / 比格犬試驗的藥代參數
參數 大鼠 比格犬
IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg IV 1 mg/kg PO 3 mg/kg
T max(hr) / 1.00 ± 0.00 / 1.00
C max(ng/mL) / 309 ± 103 / 1455
T 1/2(hr) 1.06 ± 0.07 3.10 ± 0.24 1.13 ± 0.65 4.55
AUC 0-t (hr*ng/mL) 559 ± 62 922 ± 357 682 ± 447 4213
AUC inf(hr*ng/mL) 560 ± 62 967 ± 285 699 ± 474 4239
Cl _obs(mL/min/kg) 90.1 ± 10.7 / 31.4 ± 17.4 /
V d(L/kg) 8.24 ± 0.68 / 2.42 ± 0.54 /
F% / 17.3 ± 5.1 / 183
表13-2. 本申請實施例40的化合物的 小鼠 / 大鼠試驗的藥代參數
參數 小鼠 大鼠
IV 2 mg/kg PO 20 mg/kg IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg
T max(hr) / 0.833 ± 0.289 / 1.17 ± 0.76
C max(ng/mL) / 421 ± 64 / 581 ± 228
T 1/2(hr) 0.755 ± 0.299 0.967 ± 0.208 1.07 ± 0.08 2.84 ± 0.46
AUC 0-t (hr*ng/mL) 307 ± 82 861 ± 54 588 ± 56 1904 ± 868
AUC inf(hr*ng/mL) 308 ± 82 869 ± 57 592 ± 57 1968 ± 768
Cl _obs(mL/min/kg) 114 ± 30.5 / 85.0 ± 8.4 /
V d(L/kg) 6.97 ± 1.13 / 7.84 ± 0.50 /
F% / 28.2 ± 1.9 / 33.2 ± 13.0
表13-1. 本申請實施例42的化合物的 大鼠 / 比格犬試驗的藥代參數
參數 大鼠 比格犬
IV 3 mg/kg PO 30 mg/kg IV 1 mg/kg PO 3 mg/kg
T max(hr) / 6.00 ± 1.73 / 1.17 ± 0.76
C max(ng/mL) / 1583 ± 205 / 1510 ± 396
T 1/2(hr) 5.25 ± 0.14 6.33 ± 1.56 8.72 ± 3.00 18.1 ± 5.0
AUC 0-t (hr*ng/mL) 3986 ± 225 24192 ± 2747 2923 ± 268 11174 ± 2941
AUC inf(hr*ng/mL) 4137 ± 234 26495 ± 3062 3376 ± 342 18035 ± 939
Cl _obs(mL/min/kg) 12.1 ± 0.7 / 4.97 ± 0.51 /
V d(L/kg) 5.50 ± 0.38 / 3.70 ± 1.05 /
F% / 64.0 ± 7.4 / 127 ± 28
表14. 本申請實施例18、40和42的化合物在腦和全血中的濃度及比值 (採樣時間，給藥後2h)
實施例 種屬 給藥劑量（ mg/kg ）          血藥濃度 (ng/mL) 腦濃度   (ng/g) 腦 / 血 比值
18 大鼠 30 266 397 1.49
40 小鼠 20 132 244 1.85
40 大鼠 30 274 309 1.13
42 大鼠 30 2153 1970 0.915
本發明所提供的生物學資料表明，本發明的化合物有利於治療或預防由於RIPK1激酶異常而引起的疾病。因此，本發明的化合物有利於治療與RIPK1相關的疾病包括眼底疾病、乾眼症、銀屑病、白癜風、皮炎、斑禿、類風濕性關節炎、結腸炎、多重硬化、系統性紅斑狼瘡、克羅恩病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B 細胞和 T 細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌、炎性腸病、潰瘍性結腸炎、視網膜脫離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰腺炎、特應性皮炎、脊椎關節炎、痛風、SoJIA、乾燥綜合征、全身性硬皮病、抗磷脂綜合征、血管炎、骨關節炎、非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎、腎炎、乳糜瀉、自身免疫ITP、移植排斥、實體器官的缺血再灌注損傷、敗血症、全身性炎症反應綜合征、腦血管意外、心肌梗死、亨丁頓舞蹈症、阿茨海默症、帕金森氏症、變應性疾病、哮喘、特應性皮炎、多發性硬化症、I 型糖尿病、韋格納肉芽腫、肺結節病、白塞氏病、白細胞介素-1 轉換酶相關的發熱綜合征、慢性阻塞性肺病、腫瘤壞死因數受體相關的週期性綜合症和牙周炎。本發明的化合物可以作為單一療法或聯合療法，可以與多個本發明的化合物聯合用藥或與本發明以外的其他藥物聯合用藥。
以上所述僅為本發明的較佳實施方式而已，並不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。
無
圖1示出了實施例40的化合物對RIPK1磷酸化抑制的Western Blot圖片。 圖2示出了實施例40的化合物對RIPK1磷酸化相對於RIPK1總蛋白的表達占比。

Claims (17)

  1. 一種如式(I)表示的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物：
    Figure 112100009-A0305-02-0093-1
     式(I)中，X為CH或者N；L為O、S、NH、羰基、碸基或者亞碸基；R1為C1-C10烷基、C3-C8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C1-C6烷氧基、氰基、-NRaRb、C3-C8環烷基氧基、-CONH-R5、C3-C8環烷基、羥基和/或C1-C4烷基取代C3-C8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C1-C6烷氧基、-SO2-R5、-SO-R5、-CO-R5、C2-C6炔基、C2-C6烯基、C1-C4烷氧基C1-C6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C1-C4烷基取代4-8元雜脂環基、C1-C6烷硫基中的取代基所取代的C1-C10烷基，所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-8元雜脂環基，R5為氫、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、羥基取代C1-C6烷基、C3-C8環烷基、4-8元雜脂環基取代C1-C6烷基， Ra和Rb各自獨立地為氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6烷氧基取代C1-C6烷基、羥基取代C1-C6烷基、C3-C8環烷基C1-C6烷基、4-8元雜脂環基取代C1-C6烷基、C1-C3烷硫基取代C1-C6烷基、單或雙C1-C3烷基取代或非取代氨基取代的C1-C6烷基；R2為氫、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、鹵素；R3、R4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
  2. 如請求項1所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，所述化合物具有如下式(II)的結構：
    Figure 112100009-A0305-02-0094-2
     式(II)中，R1為C1-C10烷基、C3-C8環烷基、4-8元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C1-C6烷氧基、氰基、-NRaRb、C3-C8環烷基氧基、-CONH-R5、C3-C8環烷基、羥基和/或C1-C4烷基取代C3-C8環烷基、羧基、鹵素、鹵代C1-C6烷氧基、-SO2-R5、-SO-R5、-CO-R5、C2-C6炔基、C2-C6烯基、C1-C4烷氧基C1-C6烷氧基、4-8元雜脂環基、氧代取代4-8元雜脂環基、羥基和/或C1-C4烷基取代4-8元雜脂環基、C1-C6烷硫基中的取代基所取代的C1-C10烷基，所述4-8元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作 為環原子的4-8元雜脂環基，R5為氫、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、羥基取代C1-C6烷基、C3-C8環烷基、4-8元雜脂環基取代C1-C6烷基，Ra和Rb各自獨立地為氫、C1-C6烷基、C3-C8環烷基、C1-C6烷氧基取代C1-C6烷基、羥基取代C1-C6烷基、C3-C8環烷基C1-C6烷基、4-8元雜脂環基取代C1-C6烷基、C1-C3烷硫基取代C1-C6烷基、單或雙C1-C3烷基取代或非取代氨基取代的C1-C6烷基；R2為氫、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、鹵素；R3、R4各自獨立地為氫、鹵素、甲基。
  3. 如請求項1或2所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R1為C1-C8烷基、C3-C6環烷基、4-6元雜脂環基、或者由1至3個選自羥基、C1-C3烷氧基、氰基、C3-C6環烷基氧基、C3-C6環烷基、羥基和/或C1-C4烷基取代C3-C6環烷基、鹵素、4-6元雜脂環基、氧代取代4-6元雜脂環基、羥基和/或C1-C4烷基取代4-6元雜脂環基、C1-C3烷硫基中的取代基所取代的C1-C8烷基，所述4-6元雜脂環基為含有1-2個選自N、O、S中的原子作為環原子的4-6元雜脂環基。
  4. 如請求項3所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R1為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、辛基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡 喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、或者由1至3個選自羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、氰基、環丁基氧基、環戊基氧基、環己基氧基、環丁基、環戊基、環己基、4-羥基環己基、4-羥基-4-甲基環己基、氟、氯、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫吡喃-2-基、四氫吡喃-3-基、四氫吡喃-4-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、呱啶-1-基、呱啶-4-基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1-甲基-吡咯烷-2-基、1-甲基-呱啶-4-基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基中的取代基所取代的C1-C8烷基。
  5. 如請求項4所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R1為甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、羥乙基、羥丙基、羥丁基、羥戊基、羥己基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、甲氧基戊基、甲氧基己基、四氫吡喃-4-基、4-甲基-4-羥基戊基、四氫吡喃-4-基乙基、四氫吡喃-4-基甲基、四氫吡喃-4-基丙基、四氫吡喃-4-基丁基、3-甲基-3-羥基丁基、2-甲基-2-羥基丙基、5-甲基-5-羥基己基、氟丙基、氟乙基、2,2-二氟-3-羥基-丙基。
  6. 如請求項3所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R1為被1-羥基環丙基、1-羥基環丁基、1-羥基環戊基或1-羥基環己基所取代的C1-C8烷基。
  7. 如請求項6所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R1為1-羥基環丙基甲基、1-羥基環丁基甲基。
  8. 如請求項1或2所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R2為氫、甲基、甲氧基、氟、氯、溴。
  9. 如請求項1或2所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，R3、R4各自獨立地為氫、氟、氯、甲基。
  10. 如請求項1所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，所述化合物具有如下式(III)的結構：
    Figure 112100009-A0305-02-0097-3
  11. 如請求項2所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，所述化合物具有如下式(IV)的結構：
    Figure 112100009-A0305-02-0097-4
  12. 如請求項1所述的化合物、立體異構體、或其藥 學上可接受的鹽、或其氘代物，其中，所述化合物選自如下結構：
    Figure 112100009-A0305-02-0098-6
    Figure 112100009-A0305-02-0099-7
    Figure 112100009-A0305-02-0100-9
    Figure 112100009-A0305-02-0101-11
     。
  13. 一種如請求項2至請求項12中任一項所述化合物的氘代物。
  14. 一種如請求項1至請求項12中任一項所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物、或如請求項13所述的氘代物在製備治療與RIPK1相關疾病的藥物中的應用。
  15. 如請求項14所述的應用，其中，所述與RIPK1相關的疾病包括：眼底疾病、乾眼症、銀屑病、白癜風、皮炎、斑禿、類風濕性關節炎、結腸炎、多重硬化、系統性紅斑狼瘡、克羅恩病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質 母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B細胞和T細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌、炎性腸病、潰瘍性結腸炎、視網膜脫離、色素性視網膜炎、黃斑變性、胰腺炎、特應性皮炎、脊椎關節炎、痛風、SoJIA、乾燥綜合征、全身性硬皮病、抗磷脂綜合征、血管炎、骨關節炎、非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性肝膽疾病、原發性硬化性膽管炎、腎炎、乳糜瀉、自身免疫ITP、移植排斥、實體器官的缺血再灌注損傷、敗血症、全身性炎症反應綜合征、腦血管意外、心肌梗死、亨丁頓氏舞蹈症、阿茨海默症、帕金森氏症、變應性疾病、哮喘、特應性皮炎、多發性硬化症、I型糖尿病、韋格納肉芽腫、肺結節病、白塞氏病、白細胞介素-1轉換酶相關的發熱綜合征、慢性阻塞性肺病、腫瘤壞死因數受體相關的週期性綜合症和牙周炎。
  16. 一種藥物組合物，包括請求項1至請求項12中任一項所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽、或其氘代物、或包括請求項13所述的氘代物，以及一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
  17. 如請求項16所述的藥物組合物，更包括一種或多種其他治療劑。
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