TWI820720B

TWI820720B - 一種含雜原子環丁烷取代基的吡啶酮衍生物的應用

Info

Publication number: TWI820720B
Application number: TW111118990A
Authority: TW
Inventors: 李永國; 陳小寧; 馬紅岩
Original assignee: 大陸商廣州嘉越醫藥科技有限公司
Priority date: 2021-05-20
Filing date: 2022-05-20
Publication date: 2023-11-01
Also published as: TW202302098A; CN115364097A; WO2022242769A1; CN115364097B

Abstract

本發明揭示了一種含雜原子環丁烷取代基的吡啶酮衍生物的應用。本發明提供一種物質A在製備藥物中的應用，所述物質A為如式Ⅰ所示化合物、其藥學上可接受的鹽；所述藥物為治療和/或預防糖尿病足的藥物。本發明的物質A或包含物質A的藥物對糖尿病足病人具有良好的活性。

Description

一種含雜原子環丁烷取代基的吡啶酮衍生物的應用

本申請主張申請日為2021年5月20的中國專利申請2021105610935和2022年5月6日的中國專利申請2022105321130優先權。本申請引用上述中國專利申請的全文。

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體地，本發明涉及一種含雜原子環丁烷取代基的吡啶酮衍生物的應用。

糖尿病足是伴隨糖尿病發生的一種慢性併發症，為糖尿病周圍血管、神經病變所造成的下肢發生異常改變的一種總稱，由於併發感染，導致肢端壞疽，這也是直接使患者面臨殘疾的一個重要誘因。由於其多見於下肢、足趾以及足底部，所以被臨床叫做是糖尿病足。主要是由於長時間的處於高血糖狀態下，沒有得到理想的控制，導致下肢大血管與微血管發生病理性的改變，繼而肢端陷入到缺血、缺氧的狀態下，使組織喪失掉活力。

糖尿病足創面癒合過程是一個複雜的、多階段的過程，由於各種複雜性，患者血管生成和再上皮化不足，嚴重發炎是嗜中性顆粒細胞浸潤引起的另一個有害因素。此外，糖尿病足是劇烈發炎的結果。由於糖尿病患者發生糖尿病足的風險增加，導致生活品質下降，生產力損失，也給醫療系統帶來了巨大的經濟負擔，患有糖尿病足的2型糖尿病患者每年的直接和間接醫療費用約為13561美元。有證據表明導致傷口癒合延遲的各種因素包括血糖位準升高、胰島素抵抗增加、血管生成和膠原沉積減少、浸潤反應延遲、傷口部位血液供應受阻、顆粒組織形成減少和血液黏度增加。儘管在過去的幾十年裡對糖尿病足的研究取得了巨大的突破，但有效地治療糖尿病足仍然是一個挑戰。

本發明所要解決的技術問題是現有治療糖尿病足的藥物結構較為單一。本發明提供了含雜原子環丁烷取代基的吡啶酮衍生物的應用，該物質及包含該物質的藥物具有促進糖尿病足傷口癒合的能力。

本發明提供了一種物質A在製備藥物中的應用，所述藥物為治療和/或預防糖尿病足的藥物；所述物質A為如式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受的鹽。

所述應用中，所述藥物透過增加糖尿病足病人的傷口癒合能力治療和/或預防糖尿病足。

所述應用中，所述藥物包含①物質A和②藥學上可接受的載劑。

所述應用中，所述藥物的劑型為外用製劑，例如乳膏劑、軟膏劑或凝膠劑，優選為凝膠劑。

所述應用中，所述藥物的施用頻率可為1次/日、2次/日或3次/日。每次施用所述藥物時，所述藥物所含有的所述物質A的劑量可根據受試者/患者的實際治療效果來確定。較佳地，所述應用中，所述物質A中的如式Ⅰ所示化合物的質量占所述藥物的0.1-4%，例如0.1%、0.2 %、0.3 %、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0 %、1.1%、1.2 %、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2.0%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3.0 %、3.1%、3.2 %、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%或4.0%。

所述應用中，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.3-3%，例如0.3%、1%或3%。

所述應用中，所述藥物由0.3-3%如式Ⅰ所示化合物、1%卡波姆940NF、50%丙二醇、13%二乙二醇單乙基醚、1%三乙醇胺和水組成，水補足100%。

本發明還提供了一種藥物組成物，其包括物質A和藥學上可接受的載劑；所述物質A為如式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受的鹽；所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.1-4%；。

所述組成物中，較佳地，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.3-3%；例如0.3%、1%或3%。

所述組成物由0.3-3%所述如式Ⅰ所示化合物、1%卡波姆940NF、50%丙二醇、13%二乙二醇單乙基醚、1%三乙醇胺和水組成，水補足100%。

所述組成物中，較佳地，所述組成物用於治療和/或預防糖尿病足。

本發明還提供了一種外用組成物，其包括物質A和藥學上可接受的載劑；所述物質A為如式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受的鹽；。

所述外用組成物中，較佳地，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.1-4%；優選地，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.3-3%，例如0.3%、1%或3%。

所述外用組成物中，較佳地，所述外用組成物可用於治療和/或預防糖尿病足。

所述外用組成物中，所述藥學上可接受的載劑為本領域此類外用組成物常規的載劑；較佳地，所述藥學上可接受的載劑至少為卡波姆、丙二醇、二乙二醇單乙基醚、三乙醇胺和水。

本發明中，所述卡波姆選自卡波姆940NF、卡波姆934、卡波姆974、卡波姆981或卡波姆1342中的一種或多種。

所述外用組成物中，所述外用組成物的劑型可為乳膏劑、軟膏劑或凝膠劑，例如凝膠劑。

所述外用組成物由0.3-3%所述如式Ⅰ所示化合物、1%卡波姆940NF、50%丙二醇、13%二乙二醇單乙基醚、1%三乙醇胺和水組成，水補足100%。

本發明還提供了一種凝膠劑，其包括物質A藥學上可接受的載劑；所述物質A為如式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受的鹽；。

所述凝膠劑中，較佳地，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.1-4%；優選地，所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率為0.3-3%，例如0.3%、1%或3%。

所述凝膠劑中，較佳地，所述凝膠劑可用於治療和/或預防糖尿病足。

所述凝膠劑中，所述藥學上可接受的載劑為本領域此凝膠劑常規的載劑；較佳地，所述藥學上可接受的載劑為卡波姆、丙二醇、二乙二醇單乙基醚、三乙醇胺和水。

所述凝膠劑中，用質量百分數計，所述凝膠劑包括0.3-3%如式Ⅰ所示化合物、1%所述卡波姆940NF、50%所述丙二醇、13%所述二乙二醇單乙基醚、1%所述三乙醇胺，由水補足100%。

本發明中提及到的所述如式Ⅰ所示化合物的質量分率是指式所述Ⅰ所示化合物的結構對應的質量占藥物或組成物的總質量，例如當所述Ⅰ所示化合物以鹽形式存在時，以其陰離子計算質量占比。

除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。

這裡所採用的術語“藥學上可接受的”，是針對那些化合物、材料、組成物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。

術語“藥學上可接受的載劑”是指能夠遞送本發明有效量活性物質、不干擾活性物質的生物活性並且對宿主或者患者無毒副作用的任何製劑或載劑介質，代表性的載劑包括水、油、蔬菜和礦物質、乳膏基質、洗劑基質、軟膏基質。這些基質包括懸浮劑、增粘劑、皮膚滲透促進劑等。它們的製劑為化妝品領域或局部藥物領域的技術人員所周知。關於載劑的其他資訊，可以參考Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins(2005)，該文獻的內容透過引用的方式併入本文。

術語“治療”指治療性療法。涉及具體病症時，治療指：(1)緩解疾病或者病症的一種或多種生物學表現，(2)干擾(a)導致或引起病症的生物級聯中的一個或多個點或(b)病症的一種或多種生物學表現，(3)改善與病症相關的一種或多種症狀、影響或副作用，或者與病症或其治療相關的一種或多種症狀、影響或副作用，或(4)減緩病症或者病症的一種或多種生物學表現發展。

術語“預防”是指獲得或發生疾病或障礙的風險降低。

術語“治療有效量”是指在給予患者時足以有效治療本文所述疾病或病症的化合物的量。“治療有效量”將根據化合物、病症及其嚴重度、以及欲治療患者的年齡而變化，但可由本領域技術人員根據需要進行調整。

術語“患者”是指根據本發明的實施例，即將或已經接受了該化合物給藥的任何動物，哺乳動物為優，人類最優。術語“哺乳動物”包括任何哺乳動物。哺乳動物的實例包括但不限於牛、馬、羊、豬、貓、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、猴、人等，以人類為最優。

在不違背本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。

本發明所用試劑和原料均市售可得。

本發明的積極進步效果在於：本發明提供了一種物質A在製備藥物中的應用，所述物質A為如式Ⅰ所示化合物或其藥學上可接受的鹽。本發明的物質A或包含物質A的藥物對糖尿病足病人具有良好的活性。

具體實施方式

下面透過實施例的方式進一步說明本發明，但並不因此將本發明限制在所述實施例範圍之中。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商品說明書選擇。

1. 下述實施例中的化合物Ⅰ是指。

2. 實驗材料：

1)受試物：將化合物Ⅰ製備為分別含有質量分率0.3%的化合物Ⅰ、質量分率1%的化合物Ⅰ和質量分率3%的化合物Ⅰ的凝膠劑；以質量分率3%的化合物Ⅰ的凝膠劑為例，其各成分的質量分率如下表1所示：表1

原佐劑占比	(w/w)%
化合物Ⅰ	3.0
卡波姆940NF	1.0
丙二醇	50.0
二乙二醇單乙基醚	13.0
三乙醇胺	1.0
水	32.0
合計	100.0

化合物I占比0.3%和1%質量分率的凝膠劑，與上述化合物I占比3%的凝膠劑的製備方法區別僅在於化合物Ⅰ的質量分率不同，變化部分的質量分率用水補足100%。

供應方：化合物Ⅰ由廣州嘉越醫藥科技有限公司提供，也可按照WO2017177974A1中實施例2製備得到；

給藥方式：每個創面50 mg直接給藥。

2)陽性對照品：

金因肽(重組人表皮生長因子外用溶液)規格：2000IU/mL，15mL/支

供應方：珠海億勝生物製藥有限公司 實施例 1STZ誘導大鼠糖尿病後製作全層背部皮膚缺損模型及藥效評價；

1.動物：Wistar 大鼠，雄性，15-16 周，體重約220g；供應商：上海西普爾-必凱實驗動物有限公司；

本研究中使用50隻STZ糖尿病大鼠，模擬I型糖尿病，另有8隻正常大鼠作為對照組(正常空白凝膠對照組(無STZ))。STZ糖尿病大鼠建模方式如下：雄性Wistar大鼠，秤重後按照80 mg/kg劑量腹腔注射鏈佐黴素(STZ，新鮮配製，溶於0.1M檸檬酸鹽緩衝液(pH4.5))。STZ共計腹腔注射注射鏈佐黴素兩次，時隔5天進行。第二次STZ注射3天後空腹血糖位準＞250 mg/dl定義為糖尿病模型大鼠，糖尿病大鼠建模成功後1周至8周均可進行皮膚創口癒合研究。

2.給藥組別及給藥方案如表2。表2

組別	大鼠個數	受試物	劑量	給藥時間 ^a
G1：模型空白凝膠對照組	10	空白凝膠	50mg凝膠	2次/天，持續給藥18天
G2：模型0.3%化合物Ⅰ治療組	10	0.3%化合物Ⅰ	50mg凝膠	2次/天，持續給藥18天
G3：模型1%化合物Ⅰ治療組	10	1%化合物Ⅰ	2次/天，持續給藥18天
G4：模型3%化合物Ⅰ治療組	10	3%化合物Ⅰ	2次/天，持續給藥18天
G5：模型金因肽對照組	10	金因肽	0.04 mL	2次/天，持續給藥18天
G6：正常空白凝膠對照組(無STZ)	8	空白凝膠	50mg凝膠	2次/天，持續給藥18天

a：若有傷口未癒合的動物，將延長給藥至傷口癒合

3.背部全層皮膚缺損模型製備

糖尿病模型大鼠使用印章標記背部皮膚，全層切除造成標準面積創口。皮膚全層切除手術日定為實驗的第1天。具體手術過程如下：

1) 手術前，動物2-5%異氟烷麻醉，背部進行脫毛備皮，手術區域使用碘伏消毒，並用75％酒精脫碘消毒；

2) 所有動物使用帶有圓形的印章標記大鼠背部皮膚，在大鼠背中線做一個圓形的全層皮膚切除，深至筋膜層，每個切口直徑約為1.5 cm。每隻動物手術部位基本保持一致;

3) 術後每8-12小時在傷口處皮下注射8 mg/kg的布比卡因(生理鹽水稀釋至0.25%)。所有的動物都將受到密切監控，直到它們恢復意識。每天對動物進行監測，如果疼痛症狀持續存在，動物將繼續接受疼痛藥物治療。

4.給藥

所有實驗組局部用藥。用藥前用生理鹽水沖洗傷口，用無菌棉籤吸乾殘留水分，然後塗抹藥物。金因肽組溶液均勻塗抹在傷口及周圍皮膚，每天換藥兩次。其餘組的凝膠樣品從周邊向內塗抹，先主要塗抹在病變的邊緣，然後往內覆蓋，每天換藥兩次。傷口造模後立即塗藥，各組連續用藥18天。具體給藥資訊見表2。

5.藥效評價指標

1)血糖監測：所有動物均採用尾靜脈採血的方式獲得血液樣品，採用血糖儀在第0/9/18天測定各動物的空腹血糖含量；

2)傷口閉合的評價：

用異氟烷麻醉大鼠後，把直尺擺放在傷口附近作為參考標尺，採用數位相機在第1天，第4天，第8天，第11天，第14天，第18天保持固定焦距、像素條件下對大鼠背部創面進行拍照，獲得的圖像使用軟體處理測量創面面積。

6. 統計分析

實驗數據用平均值±標準誤差表示(mean ± S.E.M.)。數據由Graphpad Prism或SPSS採用對應的統計方法分析。p ＜ 0.05認為有顯著性差異。

7. 結果

1)禁食血糖表3受試物化合物Ⅰ局部用藥對糖尿病大鼠禁食血糖位準的影響

組別	禁食血糖(mg/dl)
第 0天	第9天	第18天
G1:模型空白凝膠對照組	445.68±7.17***	429.48±14.96***	456.48±14.89***
G2:模型0.3%化合物Ⅰ治療組	431.64±20.81	449.64±7.22	433.62±5.81
G3:模型1%化合物Ⅰ治療組	432.9±9.21	447.3±10.77	474.3±7.32
G4:模型3%化合物Ⅰ治療組	418.86±12.33	428.22±13.68	465.66±12.26
G5:模型金因肽對照組	432.54±12.9	451.8±11.33	464.04±3.71
G6:正常空白凝膠對照組	85.5±1.86	83.93±1.63	90.9±1.67

註： ***，p＜0.001，與正常空白凝膠對照組相比。

實驗期間，分別在第0/9/18天檢測動物禁食血糖，從圖1和表3可以看出，與正常空白凝膠對照組G6比較，所有糖尿病模型組G1-5動物血糖顯著升高，並在實驗過程中穩定維持在400mg/dL以上。與模型空白凝膠對照組G1比較，各給藥物組藥物處理對動物血糖沒有顯著的影響。

2)創面開放率

本實驗在術後當天開始治療給藥，每日兩次在創面塗抹藥物，用藥時間至術後第18天或至傷口完全癒合。在局部用藥11天後，參考藥物金因肽組的創面開放率顯著低於模型空白凝膠對照組(22.43%±1.37% vs. 27.99%±2.31%, P＜0.05)，提示金因肽具有促進糖尿病傷口癒合的作用。與模型空白凝膠對照組相比，1%和3%化合物Ⅰ在用藥第11天時亦顯著降低創面開放率(19.66%±1.93% vs. 27.99%±2.31%, P＜0.01; 22.23%±0.87% vs. 27.99%±2.31%, P＜0.05)，提示化合物Ⅰ在1%和3%濃度下均有促進糖尿病創口癒合作用(表4和圖2)。在局部用藥14天後，也觀察到受試物化合物Ⅰ凝膠在1%和3%濃度位準下，創面開放率有減小的趨勢，但無統計學差異(表4)。各實驗組第1天和第11天創面癒合代表性照片如圖3所示。表4受試物化合物Ⅰ局部用藥對糖尿病大鼠創面開放率的影響

組別	創面開放率（%）
第1天	第4天	第8天	第11天	第14天	第18天
模型空白凝膠對照組	100%± 0%	92.96%± 3.08%	58.52%± 2.74%	27.99%± 2.31%	8.72%± 1.11%	1.59%± 0.47%
模型0.3%的化合物Ⅰ治療組	100%± 0%	94.82%± 2.58%	54%± 2.22%	24.5%± 2.25%	7.75%± 1.86%	1.22%± 0.54%
模型1%的化合物Ⅰ治療組	100%± 0%	94.25%± 3.09%	55.4%± 3.29%	19.66%± 1.93%**	5.47%± 0.86%	0.78%± 0.35%
模型3%的化合物Ⅰ治療組	100%± 0%	93.96%± 2.67%	56.92%± 1.98%	22.23%± 0.87%*	6%± 1.04%	2.01%± 0.52%
模型金因肽對照組	100%± 0%	91.82%± 3.18%	52.36%± 2.84%	22.43%± 1.37%*	8.17%± 0.92%	1.79%± 0.73%
正常空白凝膠對照組	100%± 0%	101.13%± 3.51%	54.21%± 3.58%	19.21%± 1.09%**	4.26%± 0.61%*	0.85%± 0.33%

註：*，p＜0.05，**，p＜0.01，與模型空白凝膠對照組相比。創面開放率=開放創面面積(O)/創面初始面積(I)*100%

結論：採用STZ誘導大鼠糖尿病後製作全層背部皮膚缺損模型，受試物每天兩次局部給藥持續18天，與模型空白凝膠對照組相比，1%和3%化合物Ⅰ凝膠及對照品金因肽在給藥後第11天顯著降低傷口創面開放率，結果顯示1%和3%化合物Ⅰ促進傷口癒合。

雖然以上描述了本發明的具體實施方式，但是本領域的技術人員應當理解，這些僅是舉例說明，在不違背離本發明的原理和實質的前提下，可以對這些實施方式做出多種變更或修改。因此，本發明的保護範圍由所附申請專利範圍限定。

圖1為化合物Ⅰ凝膠局部用藥對糖尿病大鼠禁食血糖的影響；圖2為化合物Ⅰ局部用藥11天對糖尿病大鼠創面開放率的影響；圖3為各實驗組第1天和第11天創面癒合代表性照片。

Claims

一種物質A在製備藥物中的應用，其特徵在於，所述物質A為如式I所示化合物或其藥學上可接受的鹽；所述藥物為促進糖尿病足傷口癒合的藥物；
如請求項1所述物質A在製備藥物中的應用，其特徵在於，所述藥物包含
物質A和
藥學上可接受的載劑；和/或，所述藥物的施用頻率為1次/日、2次/日或3次/日；和/或，所述藥物的劑型為外用製劑；和/或，所述物質A中的如式I所示化合物的質量占所述藥物的0.1-4%。
如請求項2所述物質A在製備藥物中的應用，其特徵在於，所述藥物的劑型為乳膏劑、軟膏劑或凝膠劑；和/或，所述物質A中的如式I所示化合物的質量占所述藥物的0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2.0%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、 2.8%、2.9%、3.0%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%或4.0%。
如請求項2所述物質A在製備藥物中的應用，其特徵在於，所述藥物的劑型為凝膠劑。
一種藥物組成物，其特徵在於，其包括物質A和藥學上可接受的載劑；所述物質A為如式I所示化合物或其藥學上可接受的鹽；所述如式I所示化合物的質量分率為0.3-1%；
如請求項5所述的藥物組成物，其特徵在於，所述如式I所示化合物的質量分率為0.3%或1%。
如請求項5所述的藥物組成物，其特徵在於，所述藥物組成物為外用組成物。
如請求項7所述的藥物組成物，其特徵在於，所述藥學上可接受的載劑至少為卡波姆、丙二醇、二乙二醇單乙基醚、三乙醇胺和水；和/或，所述外用組成物中，所述外用組成物的劑型為乳膏劑、軟膏劑或凝膠劑。
如請求項8所述的藥物組成物，其特徵在於，所述卡波姆選自卡波姆940NF、卡波姆934、卡波姆974、卡波姆981或卡波姆1342中的一種或多種。
如請求項7所述的藥物組成物，其特徵在於，所述外用組成物中，所述外用組成物的劑型為凝膠劑。
如請求項7所述的藥物組成物，所述外用組成物由0.3-1%所述如式I所示化合物、1%卡波姆940NF、50%丙二醇、13%二乙二醇單乙基醚、1%三乙醇胺和水組成，水補足100%。
如請求項5所述的藥物組成物，其特徵在於，所述藥物組成物為凝膠劑。
如請求項12所述的藥物組成物，其特徵在於，所述藥學上可接受的載劑至少為卡波姆、丙二醇、二乙二醇單乙基醚、三乙醇胺和水。
如請求項12或13所述的藥物組成物，其特徵在於，所述凝膠劑中，用質量百分數計，所述凝膠劑包括0.3-1%如式I所示化合物、1%所述卡波姆940NF、50%所述丙二醇、13%所述二乙二醇單乙基醚、1%所述三乙醇胺，由水補足100%。