TWI789921B - 胜肽組合物及水稻早摘果實用於製備瘦身組合物及促進益生菌生長組合物之用途 - Google Patents
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Abstract
一種胜肽組合物,以及水稻早摘果實益生質用於製備瘦身組合物及促進益生菌生長組合物的用途,其中胜肽組合物或水稻早摘果實益生質包括:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 8所示之胜肽。
Description
本發明涉及一種水稻早摘果實的用途,將水稻早摘果實用於製備瘦身組合物,以及將水稻早摘果實用於促進益生菌生長組合物的用途。
水稻,學名為
Ozaya sativa。水稻是禾本科稻屬的一至二年生草本植物,也是稻屬中作為糧食的最主要的一種,又稱為亞洲型栽培稻、亞洲稻。其為單子葉,植株直立叢生。
水稻的果實稱為稻穀,長0.5~0.7公分,短圓或長楕圓形,果實要經礱穀機脫去稻殼後,可得到糙米。糙米再經加工碾去米糠層、胚芽及少部分的胚乳,即為食用的白米。白米是人類主食,也可釀成米酒或清酒,也可加工製成米粉、米麩、蘿蔔糕等食品。
益生質也被稱為益生元或益菌生。益生質是指的是不容易被體內上消化道所分解,來到腸道時卻更容易被微生物所利用的物質。益生質提供給益生菌較佳的營養來源,藉以達到好菌增生,壞菌減少的效能。
有鑑於此,本發明提供一種水稻早摘果實益生質用於製備瘦身組合物及促進益生菌生長組合物的用途。本發明提供的水稻早摘果實益生質除了能提供益生菌營養來源,其亦富含人體所需的營養素,也能更進一步改善人體的體質。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質包括:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 8所示之胜肽。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質採用水稻早摘果實製成,上述的水稻早摘果實是指摘取時間為開花後15至25天內的水稻果實。在一實施例中,水稻早摘果實益生質包括膳食纖維。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質是由水稻早摘果實通過水提取後,再以複合酵素水解所製得。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升瘦體素、脂聯素或葡萄糖載體蛋白4蛋白的含量。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升人體腸道內益生菌數量。在一實施例中,上述益生菌為嗜酸乳桿菌、羅伊式乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、副乾酪乳桿菌或比菲德氏龍根菌。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低人體脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於減少人體腰圍、軀幹脂肪含量及雙腿脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低空腹血糖、空腹胰島素或胰島素阻抗值。
在一實施例中,組合物為食品、飲品或營養補充劑。在一實施例中,組合物內的水稻早摘果實益生質的有效劑量為500mg。
在一實施例中,胜肽組合物包括:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO: 8其中至少一、或SEQ ID NO:9所示之胜肽。在一實施例中,胜肽組合物採用水稻早摘果實製成,水稻早摘果實是指摘取時間為開花後15至25天的水稻果實。
綜上,任一實施例的水稻早摘果實益生質用於製備瘦身組合物及促進益生菌生長組合物。並且,水稻早摘果實益生質包括SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO: 8中所示的至少一胜肽。在一些實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升瘦體素、脂聯素或葡萄糖載體蛋白4蛋白的含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升人體腸道內益生菌數量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低人體脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於減少人體腰圍、軀幹脂肪含量及雙腿脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低空腹血糖、空腹胰島素或胰島素阻抗值。
在一些實施例中,水稻早摘果實益生質能用於製備瘦身組合物的用途。在一些實施例中,水稻早摘果實益生質能用於製備促進益生菌生長組合物的用途。其中,水稻早摘果實益生質包括:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 8所示的至少一胺基酸序列,且各胺基酸序列為水稻早摘果實經過特定水解酶及特定萃取製程所製的胜肽片段。
應理解,「胜肽」為介於胺基酸和蛋白質之間的物質,係由多個胺基酸組成。並且,作為生物活性物質的胜肽可為「經分離的胜肽」或「經合成的胜肽」。其中,「經分離的胜肽」是指從生物體或生物體衍生物中分離出來的胜肽片段,且此胜肽片段具有生物活性。「經合成的胜肽」是指藉由儀器或人工實驗操作依照欲得到的胺基酸序列合成的胜肽片段,且此胜肽片段具有生物活性。並且,本文所述及的用語「經分離的胜肽」等同於「分離的胜肽」或「分離胜肽」,且用語「經合成的胜肽」等同於「合成的胜肽」或「合成胜肽」。
於此,當胜肽包含SEQ ID NO: 1至SEQ ID NO: 8中所示的多種胺基酸序列時,此些胺基酸序列可為由相同蛋白質所分離出的胜肽片段,或者由不同蛋白質所分離出的胜肽片段。
在一些實施例中,胜肽片段可以來自能量儲存蛋白類。例如:穀蛋白(Glutelin)或其片段、谷蛋白7.8/31K (Glutelin7.8/31K)或其片段、醇溶蛋白(Os05g0329400 protein)或其片段等。
在一些實施例中,胜肽片段可以來自糖基轉移蛋白類。例如:糖基轉移酶(Glycosyltransferase)或其片段、(Glucose-1-phosphate adenylyltransferase)等。於此,糖基轉移蛋白可以抑制脂肪細胞分化,達到減少油脂堆積的功效,若缺乏糖基轉移蛋白會使胰島素分泌降低。
在一些實施例中,胜肽片段可以來自葡萄糖磷酸蛋白(Alpha-1,4 glucan phosphorylase)。在一些實施例中,胜肽片段可以來自超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase)。在一些實施例中,胜肽片段可以來自醛脫氫蛋白(Aldehyde dehydrogenase)。在一些實施例中,胜肽片段可以來自(Nudix hydrolase domain-containing protein)、(Glyco_hydro_18 domain-containing protein)或無特徵蛋白(Uncharacterized protein)。於此,超氧化物岐化酶可通過降低氧化壓力,抑制高油脂飲食所引發的肥胖,並降低內臟脂肪含量。
在一些實施例中,水稻早摘果實是指未成熟的水稻稻穀,水稻學名為
Ozaya sativa。在一些實施例中,水稻早摘果實是指沒有經過任何加工的未成熟的水稻稻穀。在一些實施例中,水稻早摘果實的摘取時間為處於糊熟期(又稱蠟熟期)的果實,即開花後15至25天內的果實,外殼呈青色,故又稱為青米。在一些實施例中,水稻早摘果實的摘取時間為開花期15至25天的全果實,全果實是指未經去殼的果實,即包括稻殼、米糠、胚牙及胚乳。在一些實施例中,水稻品種可以採用台灣地區特有種,舉例而言,台南11號、高雄147號。
在一些實施例中,水稻早摘果實益生質是指水稻早摘果實粉末。在一些實施例中,水稻早摘果實益生質是指水稻早摘果實經過乾燥之後研磨成的粉末。在一些實施例中,水稻早摘果實益生質是指水稻早摘果實經過乾燥之後研磨並以120mesh孔徑過篩所得的粉末。
在一些實施例中,水稻早摘果實益生質是指將水稻早摘果實經由水解步驟、失活步驟及滅菌步驟後所製得。舉例而言,水稻早摘果實益生質是指將水稻早摘果實經由切碎後與水及鹼性蛋白酶混合進行水解步驟、再加熱到85至95℃維持10到30分鐘進行失活步驟、以135℃到140℃下保持3秒到5秒進行滅菌步驟所製得。
在一些實施例中,水解步驟包括在水稻早摘果實益生質內添加鹹性蛋白酶及適量的水,使鹹性蛋白酶在適當的環境下作用一段時間。在一些實施例中,適當的環境指在40℃~60℃下,一段時間指1~5小時。在一些實施例中,失活步驟是指將完成水解步驟的水稻早摘果實益生質加熱使其失去活性,舉例而言,加熱可以是指在85℃至95℃下反應10至30分鐘。在一些實施例中,水解步驟中使用的鹼性蛋白酶(Alcalase 2.4FG,Novozyme)。
在一些實施例中,失活步驟之後還可以包括過濾步驟和滅菌步驟,以提高產品的保存品質。舉例而言,失活步驟之後,待其冷卻後以濾紙進行過濾,使水稻早摘果實澄清,再將過濾後的水稻早摘果實進行超高溫滅菌(Ultra-high temperature,UHT),於此,超高溫滅菌是指在135℃至140℃下保持3秒至5秒,最後可以再使用0.2μm濾膜過濾除菌與去除細小雜質。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質更包括膳食纖維。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升瘦體素(Leptin)的含量。於此,瘦體素可以抑制食慾並且增加新陳代謝,提升體內的能量消耗。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升脂聯素(Adiponectin)的含量。於此,脂聯素由脂肪細胞(adipocytes)所分泌一種功能性胜肽,其跟維持體內葡萄糖及脂質的代謝平衡有關,脂聯素提升可以降低脂肪堆積,促進肌肉細胞燃燒脂肪轉換成能量,並且預防冠狀動脈疾病。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升葡萄糖載體蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)的含量。於此,葡萄糖載體蛋白4蛋白是integral membrane glucose transporte的家族成員,當葡萄糖載體蛋白4蛋白增加時,可以促進肌肉、脂肪及肝臟組織對血液內葡萄糖的汲取作用,將葡萄糖帶進上述組織的細胞內加以利用,具有平衡血糖的功能。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於提升人體腸道內益生菌數量。在一實施例中,上述益生菌為嗜酸乳桿菌、羅伊式乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、副乾酪乳桿菌或比菲德氏龍根菌。
在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低人體脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於減少人體腰圍、軀幹脂肪含量及雙腿脂肪含量。在一實施例中,水稻早摘果實益生質用於降低空腹血糖、空腹胰島素或胰島素阻抗值。
在一實施例中,組合物為食品、飲品或營養補充劑。在一實施例中,組合物內的水稻早摘果實益生質的有效劑量為500mg。
在一些實施例中,前述之任一組合物可為食用產品(即食品組合物)。換言之,食用產品包含特定含量的水稻早摘果實益生質。在一些實施例中,食用產品可為一般食品、保健食品、膳食補充品或食品添加物(food additive)。
上述保健食品(food for special health use, FoSHU)也可稱為功能(性)食品(functional food),是指加工成使得供給營養之外而且有效地表現出生物體調節功能的高效果的食品。在此“功能(性)”是指對人體的結構和功能調節營養素或者對生理學作用等保健用途獲得有用的效果。本發明的食品可以通過本領域常用的方法製備,在上述製備時,可以通過添加本領域通常添加的原料和成分來製備。另外,上述食品的劑型只要被認爲是食品的劑型就可以不受限制地製備。本發明的食品用組合物可以以多種形式的劑型製備,並且與一般藥品不同,以食品爲原料,因而具有沒有因長期服用藥品而可能産生的副作用等的優點,具有優異的可攜帶性使得本發明的食品可以作爲用於增強免疫增強效果的輔助劑來攝入。
在一些實施例中,前述之食用產品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於口服的劑型。在一些實施例中,一般食品可為但不限於:飲料(beverages)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)或調味料。
上述組合物可以進一步包含生理學上可接受的載體,並且載體的種類沒有特別限制,並且可以使用本技術領域中常用的任何載體。
另外,上述組合物可以包含通常用於食品組合物中而可提高氣味、味道、視覺等的附加成分。例如,可以包含0.1-5重量%的維生素A、C、D、E、B1、B2、B6、B12、菸鹼酸(niacin)、生物素(biotin)、葉酸(folate)、泛酸(panthotenic acid)等。另外,可以包含鋅(Zn)、鐵(Fe)、鈣(Ca)、鉻(Cr)、鎂(Mg)、錳(Mn)、銅(Cu)、鉻(Cr)等的礦物質。另外,可以包含賴氨酸、色氨酸、半胱氨酸、纈氨酸等的氨基酸。
另外,上述組合物可以包含氧化防止劑(丁基羥基茴香醚(BHA)、丁基羥基甲苯(BHT)等)、著色劑(焦油色素等)、香料(香蘭素、內酯類等)、成色劑(亞硝酸鈉、亞硝酸鈉等)、防腐劑(山梨酸鉀、苯甲酸鈉、水楊酸、脫氫乙酸鈉等)、漂白劑(亞硫酸鈉)、調味料(MSG谷氨酸鈉等)、甜味料(甘素(dulcin)、甜蜜素(cyclamate)、糖精(saccharin)、鈉等)、膨脹劑(明礬、D-酒石酸氫鉀等)、強化劑、乳化劑、增稠劑(糊料)、皮膜劑、膠基礎劑、泡沫抑制劑、溶劑、改良劑等的食品添加物(food additives)。上述添加物可以根據食品的種類擇一或多進行添加以適當的量。
在一些實施例中,能藉由習知方法於原料製備時添加任一實施例的水稻早摘果實益生質(即作為食品添加物),或是於食品的製作過程中添加任一實施例的水稻早摘果實益生質(即作為食品添加物),而與任一種可食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食用產品。
在一些實施例中,前述之組合物可為醫藥品。換言之,此醫藥品包含有有效含量的水稻早摘果實益生質。
在一些實施例中,前述之醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於經腸道或口服的投藥劑型。這些投藥劑型包括,但不限於:錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pill)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。
在一些實施例中,前述之醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於非經腸道地(parenterally)或局部地(topically)投藥的劑型,這些投藥劑型包括,但不限於:注射品(injection)、無菌的粉末(sterile powder)、外部製劑(external preparation)以及類似之物。在一些實施例中,該醫藥品可以一選自於由下列所構成之群組中的非經腸道途徑(parenteral routes)來投藥:皮下注射(subcutaneous injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮內注射(intradermal injection)以及病灶內注射(intralesional injection)。
在一些實施例中,醫藥品可進一步包含有被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如,醫藥上可接受的載劑可包含下列的試劑中一種或多種:溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
在一些實施例中,醫藥上可接受的載劑包含有一選自於由下列所構成之群組中的溶劑:水、生理鹽水(normal saline)、磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline, PBS)、含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)。
範例一:水稻早摘果實益生質的製備
原料:
(1) 採用摘取時間為開花後15至25天內的台南11號品種水稻全果實為水稻早摘果實。
(2) 鹼性蛋白酶(Alcalase 2.4FG,Novozyme)(市售)。
首先,乾燥後的水稻早摘果實進行粉碎至粉末狀。於此,這些粉末狀的水稻早摘果實為水稻早摘果實益生質A。
接著,將水稻早摘果實益生質A以1:20 (w/v) 混合在RO逆滲透水中,形成水稻早摘果實溶液。
在水稻早摘果實溶液中加入鹼性蛋白酶,以1:100(W/W) 比率的鹼性蛋白酶與水稻早摘果實溶液進行酵素水解,水解時間為4小時、水解溫度為55℃、水稻早摘果實溶液的pH值為6,形成水解水稻早摘果實溶液。
將水解水稻早摘果實溶液加熱到85℃維持30分鐘後致使鹼性蛋白酶失活,將該水解水稻早摘果實溶液冷卻後,以1號濾紙(Advantec)進行過濾,將過濾後該水解水稻早摘果實溶液進行滅菌,於此,滅菌是指在135℃下維持4秒,最後可以再使用0.2μm濾膜過濾除菌與去除細小雜質。最終所製得為水稻早摘果實益生質B。
範例二:組成分鑑定
將範例一的水稻早摘果實益生質A與其他備選水稻早摘果實以及市售的糙米、白米進行組成份的鑑定。此組成分鑑定委託台灣SGS檢驗科技股份有限公司進行鑑定。
樣品一為本案範例一的由台南11號水稻早摘果實製成的水稻早摘果實益生質A。樣品二以台南14號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。樣品三為以高雄147號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。樣品四為市售成熟水稻未經去殼的糙米為原料(台南11號),並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。樣品五為市售成熟水稻經去殼的白米為原料(台南11號),並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。各樣品取100g,並且分別鑑定其所含的熱量、碳水化合物、膳食纖維、粗蛋白、粗脂肪、鈣、鎂、鐵、鈉及鉀的含量。其結果如下表一:
表一
樣品一 | 樣品二 | 樣品三 | 樣品四 | 樣品五 | |
熱量(大卡) | 330.7 | 373.6 | 348.3 | 371.2 | 353 |
碳水化合物(g) | 65.5 | 74.7 | 71.5 | 76.9 | 78 |
膳食纖維(g) | 4.8 | 6 | 5.1 | 3.4 | 0.5 |
粗蛋白(g) | 9.3 | 8.1 | 6.3 | 7.9 | 6.9 |
粗脂肪(g) | 2.1 | 3.1 | 2.17 | 2.4 | 0.6 |
鈣(mg) | 12.5 | 19.2 | 19.7 | 12.7 | 10 |
鎂(mg) | 138.2 | 152.8 | 143.8 | 135.9 | 12 |
鐵(mg) | 1.03 | 1.53 | 1.47 | 0.97 | 0.2 |
鈉(mg) | 0.57 | 2.17 | 1.72 | 1.07 | 1 |
鉀(mg) | 298.7 | 262.5 | 352.9 | 170.9 | 76 |
由上述的組成分鑑定可知,屬於水稻早摘果實的樣品一到樣品三,其總熱量比白米或糙米更低,碳水化合物的含量比白米或糙米更低,膳食纖維最高可以達到白米的12倍總多,微量原素中的鎂、鐵、鉀比白米或糙米含量更高,其中樣品一及樣品二的粗蛋白含量也較其他樣品更高。
總體而言,以現代營養學的觀點看來,水稻早摘果實更符合現代人的營養需求。其中,樣品一更是具有最低的熱量、碳水化合物及鈉含量,並且含有最高的粗蛋白。
範例三:總多醣鑑定
將範例一的水稻早摘果實益生質A與其他品種的水稻早摘果實進行組總多醣的鑑定。多醣是重要的生物高分子,在生物中有儲存能量(例如澱粉)和組成結構(例如幾丁質)的作用。
樣品一以台南11號水稻早摘果實為原料所製成的水稻早摘果實益生質A。樣品二以台南14號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。樣品三為以高雄147號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
於此,總多醣體含量係以酚-硫酸(phenol-sulfuric acid)法測定。將100μL樣品一、二及三與不同濃度的葡萄糖標準溶液(0、25、50、75、100及125mg/mL)混合於試管中。接著加入0.5mL酚溶液與2.5mL硫酸進行反應。將試管以光譜訊號感測器(spectrophotometer)測量其在750nm之吸光值,並換算所含有的水溶性多醣體含量百分比。
分析結果顯示,樣品一的總多醣為1.29%,樣品二的總多醣為3.37%,樣品三的總多醣含量為1.74%。
範例四:總多酚鑑定
將範例一的水稻早摘果實益生質A與其他備選水稻早摘果實以及市售的糙米、白米進行組成份的鑑定。多酚是植化素的一種,多酚類物質通常具有很強的抗氧化作用。
樣品一以台南11號水稻早摘果實為原料所製成的水稻早摘果實益生質A。樣品二以台南14號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。樣品三為以高雄147號水稻早摘果實為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得,樣品四為市售成熟水稻經去殼的白米為原料,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
將各樣本以水稀釋10倍後取100mL到離心管中。接著,加入500μL之Folin-Ciocalteu酚試劑至離心管中與稀釋後的樣本混合並靜置3分鐘後,再加入400μL之7.5%碳酸鈉混勻靜置30分鐘後以得到待測反應溶液。於二次靜置後,取200μL之待測反應溶液至96孔板中,並測量待測反應溶液於750nm下之吸光值。
並且,以沒食子酸(Gallic acid)作為標準品製作標準曲線。於此,配置0μL/mL、20μL/mL、40μL/mL、60μL/mL、80μL/mL、及100μL/mL之沒食子酸的標準溶液,並分別取100μL之各濃度的標準溶液至10mL離心管中。加入500μL之Folin-Ciocalteu酚試劑至離心管內與標準溶液混合並靜置3分鐘後,再加入400μL之7.5%碳酸鈉混勻靜置30分鐘後以得到標準反應溶液。取200μL之標準反應溶液96孔板中,並測量其在750nm下之吸光值,以獲得標準曲線。
接著,利用標準曲線將待測反應溶液的吸光值換算成每100g樣品中的總多酚含量。於此,可得到樣品一的總多酚含量為79.6mg、樣品二的總多酚含量為86.5mg、樣品三的總多酚含量為93.2mg、樣品四的總多酚含量僅有1.5mg。
範例五:胜肽定序及蛋白質鑑定
將範例一的水稻早摘果實益生質B進行胜肽定序及蛋白質身分鑑定,同時以市售糙米(即成熟未去殼的水稻)依範例一中與水稻早摘果實益生質B製程中相同的步驟製得糙米益生質。再將水稻早摘果實益生質B及糙米益生質進行胜肽定序及蛋白質身分鑑定,以進一步了解二者的差異。
首先,水稻早摘果實益生質B以去離子水配置為20mg/ml的濃度後,以液相層析質譜儀(LC-MS/MS)進行蛋白質鑑定。並且,液相層析質譜儀(LC-MS/MS)為四級棒-飛行時間式串聯質譜儀系統(Q-TOF),其中液相層析系統(LC system)的型號為UltiMate 3000 RSLCnano LC Systems(廠牌Thermo Fisher Scientific),且質譜儀(Mass Spectrometer)的型號為Exactive™ Plus Orbitrap Mass Spectrometer。於此,液相層析系統內裝設的分離管柱號為C18分離管柱(Acclaim PepMap C18, 75 μm I.D. x 25 cm nanoViper, 2 μm, 100 Å(Thermo Fisher Scientific))。液相層析質譜儀所使用的溶液系統為緩衝溶液A(0.1% Formic acid溶於100%去離子水)及緩衝溶液B(0.1% Formic acid溶於100%ACN)。液相層析質譜儀設定的分離梯度為5%緩衝溶液B到拉梯度到90%緩衝溶液B、流速設定為每分鐘流300奈升(300 nl/min)及拉梯度30分鐘。
於質譜儀的設定值中,檢視質譜掃描(survey scan)設定為掃描在100m/z(質荷比)至1500m/z範圍內的所有離子化的分離胜肽。在資料依靠收集模式(information dependent aquisition, CID)中,設定胜肽的偵測範圍是100-5000道爾頓(dalton, Da)。接著,分析這些分離胜肽並對應產生多個MS/MS圖譜,並利用Mascot分析程式將這些MS/MS圖譜於資料庫(NCBI及UniProt)中進行檢索,進而得到相較於糙米益生質,水稻早摘果實益生質B特有的胜肽的胺基酸序列,如表二所示。
表二
序列編號 | 序列 | 分子量 |
SEQ ID NO:1 | RQGDVIALPAGVA | 1.27 kDa |
SEQ ID NO:2 | ILAGDHL | 0.74 kDa |
SEQ ID NO:3 | NSIDSSTIASNIK | 1.35 kDa |
SEQ ID NO:4 | VSDSQIPLTGAHSIIGR | 1.75 kDa |
SEQ ID NO:5 | ISPSAPVVR | 0.93 kDa |
SEQ ID NO:6 | VSPDVQF | 0.79 kDa |
SEQ ID NO:7 | VRSLPNYGGL | 1.08 kDa |
SEQ ID NO:8 | PHYSNGATL | 0.96 kDa |
SEQ ID NO:9 | VRQQYGIAASPF | 1.34 kDa |
由上表二可知,其中,屬於醇溶蛋白(Prolamin,由Os05g0329400基因編譯而成)的SEQ ID NO: 9胜肽片段,屬於一種內部控制胜肽,在水稻早摘果實益生質B及糙米益生質中皆有定序到其存在。
其中,有八種胜肽僅在水稻早摘果實益生質B可見到,就是序列SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7及SEQ ID NO: 8所示之胜肽。
上述各種胜肽所屬之功能性蛋白質鑑定資訊,如下表三所示。
表三
序列編號 | 身分鑑定資訊 |
SEQ ID NO:1 | 穀蛋白第一型7.8/31K (Glutelin I7.8/31K) |
SEQ ID NO:2 | 葡萄糖-1-磷酸腺苷醯基轉移酶(Glucose-1-phosphate adenylyltransferase) |
SEQ ID NO:3 | 葡萄糖磷酸蛋白(Alpha-1,4 glucan phosphorylase) |
SEQ ID NO:4 | 超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase) |
SEQ ID NO:5 | 醛脫氫蛋白(Aldehyde dehydrogenase) |
SEQ ID NO:6 | 具有Nudix水解酶結構域的蛋白(Nudix hydrolase domain-containing protein) |
SEQ ID NO:7 | 具有Glyco_hydro_18結構域的蛋白(Glyco_hydro_18 domain-containing protein) |
SEQ ID NO:8 | 具有N端內輸蛋白結構域的蛋白(Improtin N-terminal domain-containing protein) |
SEQ ID NO:9 | 醇溶蛋白(Os05g0329400 protein) |
意即,SEQ ID NO:1屬於穀蛋白第一型的胜肽片段,SEQ ID NO:2屬於葡萄糖-1-磷酸腺苷醯基轉移酶的胜肽片段,SEQ ID NO:3屬於葡萄糖磷酸蛋白的胜肽片段,SEQ ID NO:4屬於超氧化物岐化酶的胜肽片段,SEQ ID NO:5屬於醛脫氫蛋白的胜肽片段,SEQ ID NO:6屬於具有Nudix水解酶結構域的蛋白的胜肽片段,SEQ ID NO:7屬於具有Glyco_hydro_18結構域的蛋白的胜肽片段,SEQ ID NO:8屬於具有N端內輸蛋白結構域的蛋白的胜肽片段,SEQ ID NO:9屬於醇溶蛋白的胜肽片段。
於此可知,水稻早摘果實益生質B包含上述分離出來的9種胜肽的胺基酸序列,即SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:9。並且可合理推知水稻早摘果實益生質B具有上述胜肽所對應的功能性蛋白質,並應具有該功能性蛋白質所具有的作用。並且,水稻早摘果實益生質B係以水稻早摘果實益生質A進一步加工製得,也就是說水稻早摘果實益生質A亦包含上述的9種胜肽的胺基酸序列。
範例六:提升瘦體素
(leptin)
含量上的效用評估
首先,將小鼠脂肪細胞3T3-L1 (購自於ATCC
®CL-173™)培養於前脂肪細胞擴增培養液(Pre-adipocyte Expansion Medium),其中包含90%之杜貝可氏改良的依格氏培養基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium, DMEM)(Gibco)、10%之牛血清(Bovine Serum,購自Gibco,美國),且加入1%之青黴素/鏈黴素(Penicillin-streptomycin,購自Gibco,美國)。
接下來,於96孔培養盤的每孔中加入200 μL的前脂肪細胞擴增培養液,使每孔具有1×10
4個3T3-L1細胞。並且在37℃下培養48小時後,移除前脂肪細胞擴增培養液。
之後,添加分化培養液(Differentiation Medium),其中包含90%之杜貝可氏改良的依格氏培養基、10%胎牛血清(FBS)、1%之青黴素/鏈黴素(Penicillin-streptomycin)、1.0 μM/mL地塞米松(Dexamethasone, DEXA,品牌Sigma)、0.5 mM/mL甲基異丁基黄嘌呤(Methylisobutylxanthine, IBMX,品牌Sigma)及1.0 μg/mL胰島素(Insulin)(Sigma),每2天替換新鮮的分化培養液。4天之後,將分化培養液替換成脂肪細胞維持培養基(Adipocyte maintenance medium),其中包含90%之杜貝可氏改良的依格氏培養基(DMEM)(Gibco)、10%胎牛血清(FBS)、1%之青黴素/鏈黴素(Penicillin-streptomycin)及1.0 μg/mL胰島素,每2天替換新鮮的脂肪細胞維持培養基。在開始分化誘導後的7-10天後,細胞已完全分化。接著,使用顯微鏡觀察脂肪滴形成。
而後,將上述分化完成的3T3-L1細胞分成2組,其中包括實驗組A、實驗組B及空白組。將0.0625%的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組A的細胞中,將0.125 %的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組B的細胞中,而空白組的細胞則不做任何處理。
在培養12天之後(每48小時替換新鮮的脂肪細胞維持培養基),收集培養基並使用小鼠LEP (瘦體素) ELISA套組(Mouse LEP(Leptin) ELISA Kit)(Elabscience)取得各組瘦體素含量。
圖1是本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升瘦體素含量之結果圖。由圖1可見,與空白組相較之下,實驗組A的瘦體素含量提升(提升15.79%),實驗組B的瘦體素含量有顯著提升(提升83.99%)。本實施例的結果顯示,本發明水稻早摘果實益生質可有效提升瘦體素含量,藉此達到調控體重或瘦身的功效。
範例七:提升脂聯素(
Adiponectin
)含量上的效用評估
首先,將小鼠骨髓基質細胞(後續簡稱OP9細胞)培養於培養基,其中,培養基包括MEMAM細胞培養液(Minimum Essential Medium Alpha Medium,購自Gibco,美國)、20%之胎牛血清(Fetal Bovine Serum,購自Gibco,美國,Cat#10437-028),且加入0.1%之青黴素/鏈黴素(Penicillin-streptomycin,購自Gibco,美國)。於此,OP9細胞購自美國典型培養物保存中心(American Type Culture Collection,ATCC®)之OP9細胞株(ATCC CRL-2749)。
接著,取24孔培養盤,將每孔接種8×10
4個OP9細胞及500μL上述培養基,在37℃下培養7天。此7天的細胞培養期間每隔3天更換培養基。7天後,以顯微鏡(放大倍率400x)觀察細胞內油滴形成,藉以確認細胞已完全分化為脂肪細胞。
然後,將分化完成的脂肪細胞分為以下三組:實驗組A、實驗組B與空白組。將0.0625%的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組A的細胞中,將0.125%的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組B的細胞中,而空白組的細胞則不做任何處理。
在37℃下培養24小時之後,將孔內培養液移至 1.5 ml 微量離心管。於 2-8℃以 1000 xg 離心 15 分鐘,將離心後的上清液移至新的 1.5 ml 微量離心管,接著將上清液稀釋2000倍,接著以脂聯素檢測試劑套組(購自CUSABIO,型號CSB-E07272m)進行檢測。詳細操作步驟可參照脂聯素檢測試劑套組所附的使用說明書執行,可參見https://www.cusabio.com/uploadfile/Ins/CSB-E07272m.pdf。
最終,以ELISA讀取儀(BioTek)讀取各組之OD548nm讀值(O.D.值越大,表示脂聯素的含量越高)。最後使用Excel軟體中的student t-test 進行統計分析。經過吸光值的比較換算並乘回稀釋倍數,在空白組的脂聯素含量為100%時,換算實驗組A及實驗組B的脂聯素含量如圖2。
圖2是本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升脂聯素含量之結果圖。由圖2可見,與空白組相較之下,實驗組A的脂聯素含量提升(提升34.5%),實驗組B的脂聯素含量有顯著提升(提升15.1%)。本實施例的結果顯示,本發明水稻早摘果實益生質可有效提升脂聯素含量,具有減脂的潛力。
範例八:提升葡萄糖載體蛋白
4(glucose transporter 4
,
GLUT4)
表現量上的效用評估
首先,將肝組織細胞(後續簡稱HepG2細胞)培養於培養基,其中,培養基包括Dulbecco改良Eagle細胞培養液、10%之胎牛血清(Fetal Bovine Serum,購自Gibco,美國),且加入1%之青黴素/鏈黴素(Penicillin-streptomycin,購自Gibco,美國)。於此,HepG2細胞購自美國典型培養物保存中心(American Type Culture Collection,ATCC®)之HepG2細胞株(ATCC® HB-8065™)。
接著,取6孔培養盤,將每孔接種1×10
5個HepG2細胞及2mL上述培養基,在37℃下培養72小時。
然後,將HepG2細胞分為以下三組:實驗組A、實驗組B與空白組。將0.0625%的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組A的細胞中,將0.125%的水稻早摘果實益生質B添加至實驗組B的細胞中,而空白組的細胞則不做任何處理。
在37℃下培養24小時之後,添加0.5M胰島素(購自Sigma,型號I9278-5ML)處理24小時。每孔以1mL的1×PBS(購自Gibco,美國)清洗兩次後,加入200µL胰蛋白酶於避光狀態下反應5分鐘。將細胞放入裝有培養基的試管中,以300g離心5分鐘後,去除懸浮液,再以1×PBS清洗一次,再度以300g離心5分鐘,去除上清液之後,用2%的FBS再懸浮30~60分鐘,再度以300g離心5分鐘,去除上清液之後,再以1×PBS使細胞沉澱。最後,以1:200的比例添加GLUT4抗體(購自invitrogen,型號MA5-17176)30分鐘後,以1×PBS清洗二次,以1:200的比例添加Alexa 488 山羊IgG(購自invitrogen,型號A11001)10分鐘後,以1×PBS清洗二次。
最終,以流式細胞儀(型號BD Accuri C6 Plus)讀取各組之螢光量。經過比較換算後,在空白組的GLUT4蛋白表現量為100%時,換算實驗組A及實驗組B的GLUT4蛋白表現量如圖3。
圖3是本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升葡萄糖載體蛋白4表現量之結果圖。由圖3可見,與空白組相較之下,實驗組A的葡萄糖載體蛋白4表現量提升(提升13.5%),實驗組B的葡萄糖載體蛋白4表現量有顯著提升(提升24.7%)。本實施例的結果顯示,本發明水稻早摘果實益生質可有調節葡萄糖利用率,具有瘦身的潛力。
範例九:不同原料對於促進益生菌生長的效用評估
為評估不同原料對於促進益生菌生長的效用,本評估中基於果寡糖促進益生菌生長量為100%的基礎下,換算各實驗組促進益生菌生長量的相對表現量來表達。
各實驗組採用的原料來源如下:
(1)空白組:果寡糖採購自MEIJI CO., Ltd.。
(2)實驗組:範例一製得的水稻早摘果實益生質A。
(3)對照組a:仙人掌,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
(4)對照組b:牛蒡,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
(5)對照組c:筍殼,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
(6)對照組d:綠豆殼,並依據本案範例一水稻早摘果實益生質A的製程步驟所製得。
本評估中,採用芽孢乳酸菌(Bacillus coagulans)TCI711菌株、唾液乳桿菌(Lactobacillus salivarius)TCI153菌株以及嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)TCI633菌株進行後續評估。
其中,芽孢乳酸菌TCI711菌株寄存於財團法人食品工業發展研究所(寄存編號為BCRC 910807、DSM33163),TCI711菌株具有可降低血液中重金屬的濃度,降低氧化物質對肝臟細胞傷害,提升肝臟細胞粒線體的活性,並可降低脂肪肝的形成的效用。
其中,唾液乳桿菌TCI153菌株寄存於財團法人食品工業發展研究所(寄存編號為BCRC 910982、DSM33503),TCI153菌株具有改善肌膚、促進細胞重組、聚集膠原蛋白、促進細胞合成彈力蛋白的效用。
其中,嗜熱鏈球菌TCI633菌株寄存於財團法人食品工業發展研究所(寄存編號為BCRC 910636),TCI633菌株具有治療骨質疏鬆症、減緩骨質流失、加強骨密度、及強化骨骼的效用。
將預培養的TCI711菌株、TCI153菌株以及TCI633菌株依3%(約1x10
4CFU/mL)之接種量加入含1%(w/w)各原料的培養基內(體積5mL),於37°C下培養48小時,培養後以稀釋塗抹法塗盤計數菌量。
圖4是不同原料對於促進益生菌生長的效用評估結果圖。由圖4可見,與空白組相較之下,實驗組的水稻早摘果實益生質A對芽孢乳酸菌具有比果寡糖更佳的促進生長作用(提升15%),實驗組的水稻早摘果實益生質A對嗜熱鏈球菌具有比果寡糖更佳的促進生長作用(提升42%),實驗組的水稻早摘果實益生質A對唾液乳桿菌雖未比果寡糖有更佳的促進生長作用,但仍可達到其90%的效能。
本實施例的結果顯示,本發明水稻早摘果實益生質可有效促進不同種的益生菌生長,尤其對於芽孢乳酸菌和嗜熱鏈球菌效果更佳。
範例十:促進益生菌之生長的效用評估
為評估水稻早摘果實益生質對於促進不同種類益生菌生長的效用。進行評估的益生菌種類包括:嗜酸乳桿菌株、羅伊式乳桿菌株、鼠李糖乳桿菌株、副乾酪乳桿菌株以及比菲德氏龍根菌。
各實驗組採用的益生菌種如下:
(1)空白組A:果寡糖+嗜酸乳桿菌。
(2)實驗組A:範例一所製得的水稻早摘果實益生質A+嗜酸乳桿菌。
(3)空白組B:果寡糖+鼠李糖乳桿菌。
(4)實驗組B:範例一所製得的水稻早摘果實益生質A+鼠李糖乳桿菌。
(5)空白組C:果寡糖+副乾酪乳桿菌。
(6)實驗組C:範例一所製得的水稻早摘果實益生質A+副乾酪乳桿菌。
(7)空白組D:果寡糖+羅伊氏乳桿菌。
(8)實驗組D:範例一所製得的水稻早摘果實益生質A+羅伊氏乳桿菌。
(9)空白組E:果寡糖+比菲德氏龍根菌。
(10)實驗組E:範例一所製得的水稻早摘果實益生質A+比菲德氏龍根菌。
本評估中,採用的嗜酸乳桿菌是採購自美國典型培養物保藏中心(ATCC)(ATCC 4356)、羅伊式乳桿菌是採購自美國典型培養物保藏中心(ATCC)(ATCC PTA-6475)、TCI366鼠李糖乳桿菌是採購自財團法人食品工業發展研究所(寄存編號為BCRC910942、DSM33290)、TCI058副乾酪乳桿菌是採購自財團法人食品工業發展研究所(寄存編號為BCRC910882、DSM33286)或比菲德氏龍根菌是採購自美國典型培養物保藏中心(ATCC) (寄存編號為ATCC BAA-999)。
將預培養活化的上述的嗜酸乳桿菌株、羅伊式乳桿菌株、鼠李糖乳桿菌株、副乾酪乳桿菌株或比菲德氏龍根菌株依3%(約1x10
4CFU/mL)之接種量加入含1%(w/w)果寡糖或水稻早摘果實益生質A的培養基內(體積5mL),於37°C下培養48小時,之後使用分光光度計測量OD值,即測定培養基的混濁度再換算為相對菌數,其中波長選用600nm以測量各組的活菌濃度。
圖5是本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在促進益生菌生長之效用結果圖。本評估中基於各空白組中果寡糖促進益生菌生長量為1%的基礎下,換算對應的各實驗組促進益生菌生長量的相對菌數來表達。例如:基於空白組A中果寡糖促進嗜乳酸桿菌生長量為1%的基礎下,換算實驗組A促進嗜乳酸桿菌生長量的相對菌數為52.98%。由於圖5中各空白組的數據均為1,為使圖5簡化與易讀,圖5中並未將各空白組的數據繪製出來。
由圖5可見,實驗組A中的水稻早摘果實益生質對嗜酸乳桿菌而言,具有比果寡糖明顯更佳的促進生長作用(提升52.98%),實驗組B中的水稻早摘果實益生質對羅伊式乳桿菌而言,具有比果寡糖明顯更佳的促進生長作用(提升29.6%),實驗組C中的水稻早摘果實益生質對副乾酪乳桿菌而言,具有比果寡糖明顯更佳的促進生長作用(提升27.8%),實驗組D中的水稻早摘果實益生質對羅伊氏乳桿菌而言,具有比果寡糖明顯更佳的促進生長作用(提升27.38%),實驗組E中的水稻早摘果實益生質對比菲德氏龍根菌而言,具有比果寡糖更佳的促進生長作用(提升46.62%)。
本實施例的結果顯示,本發明水稻早摘果實益生質可有效促進不同種的益生菌生長,尤其對於嗜酸乳桿菌和比菲德氏龍根菌效果更佳。
範例十一:水稻早摘果實人體實驗評估
受試者共8位,選擇之受試者年齡於24歲到40歲之間。其中4位受試者為實驗組A,另外4位受試者為實驗組B。
實驗組A的受試者直接服用蒸熟的具有如SEQ ID NO: 1到SEQ ID NO: 8所示的胜肽的水稻早摘果實,每人每日服用180g,其餘維持一般日常的飲食狀態。並於服用1周後,檢測其體重、全身體脂、軀幹體脂、腰圍及臀圍等項目的前後變化值。
實驗組B的受試者直接服用蒸熟的白米,每人每日服用180g,並於服用1周後,檢測其體重、全身體脂、軀幹體脂、腰圍及臀圍等項目的前後變化值。
於此,前後變化值是指測試開始前的各項目的初始數值減去該項目1周後的結果數值。
圖6為瘦身效用人體實驗評估一的體重變化值結果圖。其中,實驗組A的四位受試者平均體重降低了0.5公斤(kg),實驗組B的四位受試者平均體重增加了0.3公斤(kg)。
圖7為瘦身效用人體實驗評估一的全身體脂變化值結果圖。其中,實驗組A的四位受試者平均全身體脂減少了0.3%,實驗組B的四位受試者平均全身體脂增加了0.4%。
圖8為瘦身效用人體實驗評估一的軀幹體脂變化值結果圖。其中,實驗組A的四位受試者平均軀幹體脂減少了0.3%,實驗組B的四位受試者平均軀幹體脂增加了0.3%。
圖9為瘦身效用人體實驗評估一的腰圍變化值結果圖。其中,實驗組A的四位受試者平均腰圍降低了0.8公分(cm),實驗組B的四位受試者平均腰圍增加了1公分(cm)。
圖10為瘦身效用人體實驗評估一的臀圍變化值結果圖。其中,實驗組A的四位受試者平均腰圍增加了0.3公分(cm),實驗組B的四位受試者平均腰圍增加了0.5公分(cm)。
範例十二:水稻早摘果實益生質人體實驗評估
透過受試者服用範例一所製得的水稻早摘果實益生質A,每人每日服用500mg,並於服用四周後,檢測其全身體脂肪、軀幹體脂肪、腰圍、總脂肪重量及比例、軀幹脂肪重量、雙腿脂肪重量、空腹血糖、空腹胰島素及胰島素組抗值等項目的變化值。於此,受試者有10人,選擇之受試者均為體脂大於25%。
圖11為人體實驗評估全身體脂肪率變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均全身體脂肪率為33.5%,服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均全身體脂肪率為33.0%。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進全身體脂肪率的降低達到0.5%。
圖12為人體實驗評估軀幹體脂肪率變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均軀幹體脂肪率為33.9%,服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均軀幹體脂肪率為33.7%。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進軀幹體脂肪率的降低達到0.2%。
於此,圖11及圖12中的全身體脂肪率與軀幹體脂肪率量測採用體脂量測儀(品牌:TANITA BC-601FS)。
圖13為人體實驗評估腰圍變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均腰圍為88.6公分(cm),服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均腰圍為87.8公分。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進腰圍的降低達到0.8公分。
圖14為人體實驗評估總脂肪重量變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均總脂肪重量為21.6公斤(kg),服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均總脂肪重量為20.5公斤。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進總脂肪重量的降低達到1.1公斤。
圖15為人體實驗評估總脂肪比例變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均總脂肪比例為33.92%,服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均總脂肪比例為32.4%。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進總脂肪比例的降低達到1.52%。
圖16為人體實驗評估軀幹脂肪重量變化結果圖。於此,軀幹係指全身扣除頭部與四肢的部分。其中,10位受試者的初始平均總脂肪重量為12104.4公克(g),服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均總脂肪重量為11573.2公克。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進總脂肪重量的降低達到531.2公克。
圖17為人體實驗評估雙腿脂肪重量變化結果圖。其中,10位受試者的初始平均總脂肪重量為6842公克(g),服用水稻早摘果實益生質四周後10位受試者的最終平均總脂肪重量為6710.4公克。意即,四周的時間水稻早摘果實益生質可以促進總脂肪重量的降低達到131.6公克。
於此,圖14到圖17中的總脂肪重量、總脂肪比例、軀幹脂肪重量及雙腿脂肪重量量測採用雙能量X光吸收儀(簡稱DXA,品牌:Horizon
®DXA System)。
在上述10位受試者中,有1位是經診斷為高血糖患者。此位受試者分別於第0周、第2周及第4周進行血液檢測。檢測項目包括空腹血糖、空腹胰島素及胰島素阻抗值,委託台灣立人檢驗所進行檢測。
圖18為人體實驗空腹血糖變化結果圖。其中,受試者的初始平均空腹血糖為142mg/dL,服用水稻早摘果實益生質二周後受試者的最終平均空腹血糖為154mg/dL,服用水稻早摘果實益生質四周後受試者的最終平均空腹血糖為112mg/dL。一般而言,正常的空腹血糖範圍在74mg/dL~118mg/dL之間,也就是說,四周的時間水稻早摘果實益生質可以使高血糖患者的空腹血糖降低到正常值範圍,效果明顯。
圖19為人體實驗空腹胰島素變化結果圖。其中,受試者的初始平均空腹胰島素為25.9 uIU/mL,服用水稻早摘果實益生質二周後受試者的最終平均空腹胰島素為22.9 uIU/mL,服用水稻早摘果實益生質四周後受試者的最終平均空腹胰島素為15.96 uIU/mL。一般而言,正常的空腹胰島素範圍在4uIU/mL ~16uIU/mL之間,也就是說,四周的時間水稻早摘果實益生質可以使高血糖患者的空腹胰島素降低到正常值範圍,效果明顯。
圖20為人體實驗胰島素阻抗值變化結果圖。其中,受試者的初始平均胰島素阻抗值(Insulin Resistance;IR)為9.08,服用水稻早摘果實益生質二周後受試者的最終平均胰島素阻抗值為8.71,服用水稻早摘果實益生質四周後受試者的最終平均胰島素阻抗值為4.41。一般而言,正常的胰島素阻抗值小於1(<1),在大於等於1.9的情況下為輕微胰島素阻抗,在大於等於2.9的情況下為嚴重胰島素阻抗。也就是說,本次受試者胰島素組抗值降低了50%以上,效果明顯。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上,然其並非用以限定本發明,任何熟習此技藝者,在不脫離本發明之精神所作些許之更動與潤飾,皆應涵蓋於本發明的範疇內,因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
無
圖1為本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升瘦體素含量之結果圖。
圖2為本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升脂聯素含量之結果圖。
圖3為本發明一實施例的水稻早摘果實益生質在提升葡萄糖載體蛋白4蛋白表現量之結果圖。
圖4為不同植物原料對於促進益生菌生長的效用評估結果圖。
圖5為本發明一實施例的水稻早摘果實益生質促進益生菌生長的效用評估結果圖。
圖6為瘦身效用人體實驗評估一的體重變化值結果圖。
圖7為瘦身效用人體實驗評估一的全身體脂變化值結果圖。
圖8為瘦身效用人體實驗評估一的軀幹體脂變化值結果圖。
圖9為瘦身效用人體實驗評估一的腰圍變化值結果圖。
圖10為瘦身效用人體實驗評估一的臀圍變化值結果圖。
圖11為人體實驗評估全身體脂肪率變化結果圖。
圖12為人體實驗評估軀幹體脂肪率變化結果圖。
圖13為人體實驗評估腰圍變化結果圖。
圖14為人體實驗評估總脂肪重量變化結果圖。
圖15為人體實驗評估總脂肪比例變化結果圖。
圖16為人體實驗評估軀幹脂肪重量變化結果圖。
圖17為人體實驗評估雙腿脂肪重量變化結果圖。
圖18為人體實驗空腹血糖變化結果圖。
圖19為人體實驗空腹胰島素變化結果圖。
圖20為人體實驗胰島素阻抗值變化結果圖。
財團法人食品工業發展研究所 (台灣);民國109年3月27日;寄存編號:BCRC 910982。
財團法人食品工業發展研究所 (台灣);民國103年6月23日;寄存編號:BCRC 910636。
財團法人食品工業發展研究所 (台灣);民國106年12月13日;寄存編號:BCRC 910807。
財團法人食品工業發展研究所 (台灣);民國108年9月17日;寄存編號:BCRC 910942。
財團法人食品工業發展研究所 (台灣);民國108年4月15日;寄存編號:BCRC 910882。
Claims (12)
- 一種水稻早摘果實益生質用於製備瘦身組合物的用途,其中該水稻早摘果實益生質包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7及SEQ ID NO:8所示之胜肽。
- 如請求項1所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質採用一水稻早摘果實製成,該水稻早摘果實是指摘取時間為開花後15至25天的水稻果實。
- 如請求項2所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質是由該水稻早摘果實通過水提取後,再以鹹性蛋白酶水解後所製得。
- 如請求項1所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質用於提升瘦體素、脂聯素或葡萄糖載體蛋白4蛋白的含量。
- 如請求項1所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質用於降低人體脂肪含量。
- 如請求項1所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質用於減少人體腰圍、軀幹脂肪含量及雙腿脂肪含量。
- 一種水稻早摘果實益生質用於製備促進益生菌生長組合物的用途,其中該水稻早摘果實益生質包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7及SEQ ID NO:8所示之胜肽。
- 如請求項7所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質是由一水稻早摘果實通過水提取後,再以鹹性蛋白酶水解後所製得。
- 如請求項7所述的用途,其中該益生菌為嗜酸乳桿菌、羅伊式乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、副乾酪乳桿菌或比菲德氏龍根菌。
- 如請求項1至9中任一項所述的用途,其中該水稻早摘果實益生質的有效劑量為500mg。
- 一種胜肽組合物,其包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7及SEQ ID NO:8所示之胜肽。
- 如請求項11所述的胜肽組合物,其中該胜肽組合物採用一水稻早摘果實製成,該水稻早摘果實是指摘取時間為開花後15至25天內的水稻果實。
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期刊 Susan M. Tosh, Nicolas Bordenave: 全谷物燕麦和大麦及其可溶性膳食纤维对促进心脏健康、改善血糖和调节肠道菌群作用的新进展. Nutrition Reviews® Vol. 78(S1) :12–107. (2020. 07.31) |
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