TWI753089B - Ｊａｋ１選擇性抑制劑 - Google Patents

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Abstract

本文揭露了具有化學式 (I) 之化合物，
Figure 107101685-A0304-11-0001-1
及其藥學上可接受的鹽，其中R1 -R8 具有本文定義的含義中的任一者。還揭露了包含具有化學式 (I) 之化合物的醫藥組成物及其使用方法。

Description

JAK1選擇性抑制劑
JAK（傑納斯相關激酶（Janus-associated kinase））家族包括四個非受體酪胺酸激酶，JAK1、JAK2、JAK3和Tyk2，它們在細胞介素和生長因子介導的信號轉導中起著關鍵作用（辛德勒（Schindler C）和達尼爾（Darnell JE Jr.），生物化學年評（Annu. Rev. Biochem ）1995；64:621-651）。激酶JAK1尤其與I型干擾素（例如IFNα），II型干擾素（例如IFNγ），普通gc鏈（例如IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21）和介白素-6家族（IL-10、IL-13和IL-22）（N Engl J Med （新英格蘭醫藥雜誌）2013, 368, 161-170）相互作用。在該等細胞介素與其受體結合後，發生受體寡聚化，導致相關JAK激酶的細胞質尾部移動接近並且促進JAK激酶上的酪胺酸殘基的反式磷酸化和活化。磷酸化的JAK激酶結合並且活化各種信號轉導子和轉錄活化子（STAT）蛋白。該等STAT蛋白然後二聚化並且轉移位置到細胞核，在細胞核中它們同時起信號分子和轉錄因子的作用，並且最終結合存在於細胞介素應答基因啟動子中的特定DNA序列（Leonard等人，（2000），J. Allergy Clin. Immunol. （過敏臨床免疫學雜誌）105:877-888）。JAK/STAT通路中的傳訊中斷導致各種免疫缺陷和自身免疫性疾病，如過敏、氣喘、斑禿、移植（同種異體移植）排斥、類風濕性關節炎、肌肉萎縮性脊髓側索硬化症和多發性硬化症、以及實體和血液學癌症。參見例如 Frank, (1999),Mol. Med. （分子醫學）5:432-456 Vijayakriishnan等人，Trends Pharmacol. Sci （藥理科學趨勢）2011 ,32 , 25-34以及Flanagan等人，；Open Rheumatol J .（風濕病學雜誌）2012, 6, 232-244；N Engl J Med （新英格蘭醫藥雜誌）2013, 368, 161-170；Exp. Dermatol. （實驗皮膚病學）2014, 23, 7-11；J. Med. Chem. （醫藥化雜誌） 2014 ,57 , 5023-5038,J Allergy Clin Immunol （過敏臨床免疫學雜誌）2014；133:1162-74，以及Expert Opin Orp Drug （非處方藥物專家觀點） (2015) 3 (4), 419-431。
JAK1的一個重要原理係能夠在受體的不同亞基的胞內結構域處與其他JAK激酶配對。例如，JAK3與各種細胞介素受體的普通γ鏈（gc）相關聯並且與JAK1配對（Immunol.Rev.（免疫學綜述）2008, 223, 132-142）。已經表明JAK1比JAK3顯著，並且儘管JAK3有活性（Chem.Biol.（化學生物學）2011, 18 (3), 314-323），JAK1的抑制足以使藉由普通γ鏈的傳訊失活。因此，JAK1的選擇性抑制足以治療許多與經由JAK1/JAK3-STAT途徑的細胞介素傳訊有關的炎性和自身免疫性疾病。然而，開發對其他JAK激酶幾乎不具有或不具有脫靶活性的選擇性JAK1抑制劑一直具有挑戰性。具體而言，目前在臨床開發中鑒定為JAK1選擇性抑制劑的化合物僅表現出邊際JAK1選擇性。（Future Med.Chem.（醫藥化學展望）(2015)7 (2), 203-235）。例如，在用於治療自身免疫性疾病的活性開發中針對JAK1抑制劑的生物化學測定中報導的JAK1/JAK2選擇性比率（例如Filgotinib（J. Med. Chem. （醫藥化學雜誌） 2014, 57, 9323-9342）和ABT-494（WO 2015061665-圖1）係2.8，這個值係基於在大約ATP的Km下測得的IC50 。因此，預期該等化合物將具有針對其他JAK激酶的一些靶活性，以及因此由於使用了更多選擇性JAK1抑制劑而受限制的額外副作用。因此，需要開發高度有效和選擇性的JAK1抑制劑來治療JAK1相關的障礙，例如白血病、淋巴瘤、移植排斥（例如胰島移植排斥、骨髓移植應用（例如移植物抗宿主病））、自身免疫性疾病（例如1型糖尿病）和炎症（例如氣喘、過敏反應），同時沒有與脫靶活性相關的實際或感知的副作用，例如貧血。
本揭露涉及具有選擇性JAK1抑制的新穎化合物。因此，本文提供了具有化學式 (I) 之化合物： 化學式 (I) 其中： R1 、R3 、和R4 各自獨立地選自氫和甲基； R2 選自氫、甲基、和-CH2 CH2 OH； n係1或2； R5 選自甲基、乙基、和-CH2 OR8 ； R6 選自甲基、氯、和氟； R7 選自甲基、乙基、和環丙基；並且 R8 選自甲基、乙基和苄基； 或其藥學上可接受的鹽。
本揭露還提供了包含具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體的醫藥組成物。
還揭露了治療JAK1相關的障礙（例如1型糖尿病、狼瘡、多發性硬化症、類風濕性關節炎、牛皮癬、氣喘、異位性皮膚炎、自身免疫性甲狀腺疾病、潰瘍性結腸炎、克隆氏病、COPD、白癜風和斑禿）之方法，該等方法包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I) 之化合物用於治療JAK1相關的障礙之用途，包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療JAK1相關的障礙的藥劑或配製物中之用途。在另一個實施方式中，揭露了醫藥組成物，該等醫藥組成物包含具有化學式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於治療JAK1相關的障礙。
還揭露了在受試者中抑制JAK1之方法，該等方法包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽用於抑制受試者中的JAK1之用途，包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽在製造用於抑制受試者中的JAK1的藥劑或配製物中之用途。在另一個實施方式中，揭露了醫藥組成物，該等醫藥組成物包含具有化學式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於抑制受試者中的JAK1。
本揭露還提供了可用於製備具有化學式 (I) 之化合物的方法和中間體。
化合物
在一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I) 之化合物： 化學式 (I) 其中： R1 、R3 、和R4 各自獨立地選自氫和甲基； R2 選自氫、甲基、和-CH2 CH2 OH； n係1或2； R5 選自甲基、乙基、和-CH2 OR8 ； R6 選自甲基、氯、和氟； R7 選自甲基、乙基、和環丙基；並且 R8 選自甲基、乙基和苄基； 或其藥學上可接受的鹽。 在一些實施方式中，R1 -R4 中的每一個獨立地選自氫和甲基。 在一些實施方式中，R1 、R3 、和R4 全都是氫。 在一些實施方式中，n係1。 在一些實施方式中，R5 係甲基或-CH2 OR8 。 在一些實施方式中，R6 係甲基或氟。 在一些實施方式中，R7 係甲基。 在一些實施方式中，R8 係甲基。 在至少一個實施方式中，R1 、R3 和R4 係H；R2 係甲基；R6 係氟；R7 係甲基；R5 係-CH2 OR8 ；並且R8 係甲基。
在一個實施方式中，具有化學式 (I) 之化合物係具有化學式 (Ia) 之化合物： 化學式 (Ia) 其中： R1a 、R3a 、和R4a 各自獨立地選自氫和甲基； R2a 選自氫、甲基、和-CH2 CH2 OH； n係1或2； R5a 選自甲基、乙基、和-CH2 OR8a ； R6a 選自甲基、氯、和氟； R7a 選自甲基、乙基、和環丙基；並且 R8a 選自甲基、乙基和苄基； 或其藥學上可接受的鹽。 在一些實施方式中，R1a -R4a 中的每一個獨立地選自氫和甲基。 在一些實施方式中，R1a 、R3a 、和R4a 全都是氫。 在一些實施方式中，n係1。 在一些實施方式中，R5a 係甲基或-CH2 OR8a 。 在一些實施方式中，R6a 係甲基或氟。 在一些實施方式中，R7a 係甲基。 在一些實施方式中，R8a 係甲基。 在至少一個實施方式中，R1a 、R3a 和R4a 係H；R2a 係甲基；R6a 係氟；R7a 係甲基；R5a 係-CH2 OR8a ；並且R8a 係甲基。
在一個實施方式中，具有化學式 (I) 之化合物係具有化學式 (Ib) 之化合物： 化學式 (Ib) 其中： R5b 選自甲基、乙基、和-CH2 OR8b ； R6b 選自甲基、氯、和氟； R7b 選自甲基、乙基、和環丙基；並且 R8b 選自甲基、乙基和苄基； 或其藥學上可接受的鹽。 在一些實施方式中，R5b 係甲基或-CH2 OR8b 。 在一些實施方式中，R6b 係甲基或氟。 在一些實施方式中，R7b 係甲基。 在一些實施方式中，R8b 係甲基。 在至少一個實施方式中，R6b 係氟；R7b 係甲基；R5b 係-CH2 OR8b ；並且R8b 係甲基。
在一些實施方式中，揭露了表1的化合物或其藥學上的鹽：[ 表 1]
Figure AA1
Figure AA2
Figure AA3
Figure AA4
Figure AA5
Figure AA6
Figure AA7
Figure AA8
Figure AA9
Figure AA10
揭露的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 之化合物或表1的化合物可以使用本文所述的方法和過程製備。在一個方面，揭露的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 之化合物或表1的化合物根據實例中所述的方法製備。
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 之化合物或表1的化合物能夠以各種立體異構形式存在，並且本揭露涉及每種化合物可能存在的每種立體異構形式和其混合物（包括外消旋體）。應當理解的是，取代基可以在碳原子的手性中心被附接，因此，揭露的化合物包括鏡像異構物、非鏡像異構物和外消旋物。術語“鏡像異構物”包括彼此為不可重疊的鏡像的若干對的立體異構物。一對的鏡像異構物的1 : 1混合物係外消旋混合物。在適當的情況下，該術語被用於指定外消旋混合物。術語“非鏡像異構物”或“鏡像異構物”包括具有至少兩個不對稱原子，但彼此不互為鏡像的立體異構物。根據卡恩-英戈爾德-普雷洛格（Cahn-Ingold-Prelog）R-S系統規定絕對立體化學。當化合物係純鏡像異構物時，可藉由R抑或S規定在每個手性中心的立體化學。對於絕對組態未知的分辨化合物，可以取決於它們在鈉D線的波長處旋轉平面偏振光的方向（右旋或左旋）來指定(+)或(-)。就結構或化學名稱不表示手性而言，該結構或名稱旨在涵蓋對應於該結構或名稱的任何單一立體異構物，以及立體異構物的任何混合物，包括外消旋體。
語言“藥學上可接受的鹽”包括保留了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 之化合物或表1的化合物的生物有效性和特性的酸加成鹽。藥學上可接受的鹽可以使用無機酸或有機酸來形成，例如，乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、膽茶鹼（chlortheophyllonate）、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽（ethandisulfonate）、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、palmoate、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、次水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽。可以從中衍生鹽的無機酸包括，例如，鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以從中衍生鹽的有機酸包括，例如，乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、磺基水楊酸等。
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1中的化合物的藥學上可接受的鹽可以藉由常規化學方法從鹼性或酸性部分來合成。通常，此類鹽可以藉由該等化合物的游離酸形式與適當的鹼（如Na+ 、Ca2+ 、Mg2+ 、或K+ 的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等）的化學計算量反應，或藉由該等化合物的游離鹼形式與適當的酸的化學計算量反應來製備。典型地，此類反應在水中或在有機溶劑中或在這兩者的混合物中進行。通常，在可行的情況下，使用非水介質如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、或乙腈係希望的。另外的合適的鹽的列表可以發現，例如，在“雷明頓氏藥物科學（Remington's Pharmaceutical Sciences）”，第20版，麥克出版公司（Mack Publishing Company），伊斯頓，賓夕法尼亞州，（1985）；斯塔爾（Stahl）和韋穆特（Wermuth），“醫藥鹽手冊：性質、選擇和使用（Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use）”（威利（Wiley）-VCH，魏因海姆，德國，2002）。
在此給出的任何化學式還旨在表示對於具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1中的化合物的未標記的形式連同同位素標記形式。同位素標記的化合物具有由在此給出的化學式所描繪的結構，除了一個或多個原子係由具有選定的原子質量或質量數的原子代替。可摻入到具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、15 N、16 F、31 P、32 P、35 S、36 Cl和125 I。具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物可以包括各種同位素標記的化合物，其中存在放射性同位素，例如2 H、3 H、13 C和14 C。同位素標記的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物通常可藉由熟習該項技術者已知的常規技術或藉由與在附隨的實例中所描述的那些類似的過程使用適當的同位素標記的試劑替代以前採用的非標記的試劑來製備。 醫藥組成物
在至少一個實施方式中，本揭露包括醫藥組成物，該等醫藥組成物包含具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、和藥學上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑。
語言“藥學上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑”包括在合理的醫學判斷的範圍，適合用於與人類和動物的組織接觸而不產生過度毒性、刺激、過敏反應、或其他問題或併發症，同時具有相稱的合理受益/風險比的那些化合物、材料、組成物、和/或劑型。藥學上可接受的賦形劑、載體和稀釋劑在本領域中是公知的，並且藥學上可接受的賦形劑、載體和稀釋劑的任何實際選擇取決於醫藥組成物的預期用途和給藥方法。
所揭露的該等組成物可以處於適於口服使用的形式（例如作為片劑、錠劑、硬或軟膠囊，水性或油性懸浮液、乳液、可分散的粉劑或顆粒劑、糖漿或酏劑），適用於局部使用的形式（例如作為乳膏、軟膏、凝膠、或水性或油性溶液或懸浮液），適用於藉由吸入給藥的形式（例如作為精細分散粉末或液體氣霧劑），適用於藉由吹入給藥的形式（例如作為精細分散粉末）或適用於腸胃外給藥的形式（例如作為無菌水性或油性溶液用於靜脈內、皮下、肌肉或肌內給藥或作為栓劑用於直腸給藥）。
所揭露的該等組成物可以藉由常規程序使用本領域熟知的常規藥物賦形劑獲得。因此，旨在用於口服使用的組成物可以包含，例如，一種或多種著色劑、甜味劑、調味劑和/或防腐劑。
用於片劑配製物的適合的藥學上可接受的賦形劑包含，例如惰性稀釋劑，如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；造粒和崩散劑，例如玉米澱粉或海藻酸；粘合劑，如澱粉；潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑，如乙基或丙基對羥基苯甲酸酯；和抗氧化劑，如抗壞血酸。片劑配製物可以是未包衣的或包衣的，以改變其在胃腸道中的分解和隨後的活性成分的吸收，或使用常規包衣劑以及本領域熟知的程序以改進它們的穩定性和/或外觀。
用於口服使用的組成物可以處於以下形式：硬膠囊，其中活性成分係與惰性的固體稀釋劑（例如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土）混合的，或軟膠囊，其中活性成分係與水或油（如花生油、液體石蠟、或橄欖油）混合的。
水性懸浮液通常包含呈精細粉末形式或呈奈米或微粉化顆粒形式的活性成分，連同一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯-吡咯啶酮、黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑如卵磷脂或環氧烷與脂肪酸的縮合產物（例如聚氧化乙烯硬脂酸酯）、或氧化乙烯與長鏈脂肪醇的縮合產物（例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇）、或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物（如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯）、或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物（例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇）、或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物（如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯）、或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物（例如聚乙烯去水山梨醇單油酸酯）。該水性懸浮液還可以包含一種或多種防腐劑如乙基或丙基對羥基苯甲酸酯；抗氧化劑，如抗壞血酸；著色劑；調味劑；和/或甜味劑，如蔗糖、糖精或阿斯巴甜（aspartame）。
油性懸浮液可以藉由將該活性成分懸浮於植物油例如落花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油或在礦物油如液體石蠟中配製。該油性懸浮液還可以包含增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。甜味劑（如以上列出的那些）以及調味劑可以被添加以提供適口的口服製劑。該等組成物可以藉由添加抗氧化劑（如抗壞血酸）保存。
適合於藉由添加水製備水性懸浮液的可分散粉末和顆粒總體上包含該活性成分連同分散劑或潤濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑。適合的分散劑或濕潤劑和懸浮劑藉由以上已經提及的那些示例。另外的賦形劑（如甜味劑、調味劑和著色劑）也可以存在。
該等醫藥組成物還可以處於水包油乳劑的形式。該油狀相可以是植物油（如橄欖油或落花生油）或礦物油（例如像液體石蠟）或該等中任一項的混合物。適合的乳化劑可以是，例如天然存在的樹膠（例如阿拉伯膠或黃芪膠）、天然存在的磷脂（如大豆、卵磷脂）、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯（例如去水山梨醇單油酸酯）和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物如聚氧乙烯去水山梨醇單油酸酯。該等乳劑還可以包含甜味劑、調味劑和防腐劑。
醫藥組成物還可以呈無菌可注射水性或油性懸浮液的形式，它可以根據已知程序，使用上述適當的分散劑或潤濕劑和懸浮劑中的一者或多者來配製。無菌可注射製劑也可以是在非毒性的、胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑（例如在1,3-丁二醇溶液）中的無菌可注射溶液或懸浮液。
用於藉由吸入和/或吹入給藥的組成物可以是處於常規加壓氣溶膠的形式，被安排為抑或作為包含精細分散固體的氣溶膠或液體液滴分配該活性成分。可以使用常規氣溶膠噴射劑如揮發性氟化的烴並且將氣溶膠裝置方便地安排為分配計量的量的活性成分。對於配製物進一步的資訊，讀者可參考培格曼出版社（Pergamon Press）1990的綜合藥物化學數據庫（Comprehensive Medicinal Chemistry）（科溫漢施（Corwin Hansch）；編輯部），第5卷第25.2章。
結合一種或多種賦形劑以產生單一劑型的活性成分的量將必然變化，這取決於該治療的主體和具體給藥途徑。對於給藥途徑和給藥方案的進一步的資訊，讀者可參考培格曼出版社1990的綜合藥物化學數據庫（Comprehensive Medicinal Chemistry）（科溫漢施（Corwin Hansch）；編輯部），第5卷第25.3章。取決於例如具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽（即，活性成分）的效價和物理特徵，可以提及的醫藥組成物包括其中活性成分係以至少1%（或至少10%、至少30%或至少按重量計50%）存在的那些。也就是說，該醫藥組成物的活性成分比該等其他組分（即，賦形劑、載體和稀釋劑的添加）的比率係至少1 : 99（或至少10 : 90、至少30 : 70或至少按重量計50 : 50）。
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物和其藥學上可接受的鹽可以一天一次、兩次、三次或在24小時時段內根據醫學上必需的次數被給予。熟習該項技術者將很容易地能夠基於受試者來確定每個個體劑量的量。在一些實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物和其藥學上可接受的鹽以一種劑型給予，或者在一些實施方式中以多種劑型給予。 方法
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物和其藥學上可接受的鹽可以抑制JAK1激酶和與JAK1激酶有關的相關蛋白質活性，例如可以在以下例證的試驗中顯示的，並且因此可用於治療期望和/或需要這種抑制的那些障礙。因此，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物和其藥學上可接受的鹽可用於治療期望和/或需要JAK1激酶被抑制或減少的那些障礙，或者在一些實施方式中，係期望和/或需要與JAK1激酶有關的蛋白質活性被抑制或減少的障礙。因此預期具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物和其藥學上可接受的鹽可用於治療可從抑制JAK1激酶獲益的障礙，例如呼吸疾病/障礙和/或炎症和/或具有炎性成分的疾病。
因此，在至少一個實施方式中，還揭露了在受試者中抑制JAK1激酶之方法，該等方法包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽用於抑制JAK1激酶之用途。
在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在製造用於抑制JAK1激酶的藥劑中之用途。
在又另一個實施方式中，揭露了醫藥組成物，該等醫藥組成物包括具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於抑制JAK1激酶。
在本揭露的至少一個實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出小於或等於約0.010微莫耳的JAK1酶抑制活性（IC50 ）。在至少另一個實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在細胞IL-13誘導的JAK-STAT6-螢光素酶測定中顯示出小於或等於約0.050微莫耳的抑制活性（IC50 ）。
在本揭露的一個實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出小於或等於約0.010微莫耳的JAK1酶抑制活性（IC50 ），以及在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出大於或等於約0.5微莫耳的JAK2和JAK3酶抑制活性（IC50 ）。在至少一個其他實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出小於或等於約0.010微莫耳的JAK1酶抑制活性（IC50 ），以及在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出大於或等於約0.5微莫耳的JAK2和JAK3酶抑制活性（IC50 ），以及在細胞IL-13誘導的JAK-STAT6-螢光素酶測定中顯示出小於或等於約0.050微莫耳的抑制活性（IC50 ）。
在另一個實施方式中，揭露了治療JAK1相關的障礙之方法，該等方法包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物用於治療JAK1相關的障礙之用途，包括向受試者給予有效量的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療JAK1相關的障礙的藥劑或配製物中之用途。
在另一個實施方式中，揭露了具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療JAK相關的障礙的藥劑中之用途。
在另一個實施方式中，揭露了醫藥組成物，該等醫藥組成物包括具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽，用於治療JAK1相關的障礙。
根據本揭露內容，術語“JAK1相關的障礙”包括例如1型糖尿病、狼瘡、多發性硬化症、類風濕性關節炎、牛皮癬、氣喘、異位性皮膚炎、自身免疫性甲狀腺疾病、潰瘍性結腸炎、克隆氏病、COPD、白癜風和斑禿。
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、和其藥學上可接受的鹽可以以不同的劑量給藥，這取決於給藥途徑。例如，口服劑量可以在約0.01 mg/kg體重/天（mg/kg/天）至約100 mg/kg/天之間，例如約0.01至約20 mg/kg/天之間，例如約1.0至約15 mg/kg/天，例如約12.5 mg/kg/天。在恒速輸注期間，靜脈內劑量範圍可以從約0.5 mg/kg/天至約50 mg/kg/天。吸入劑量可以在約0.0001 mg/kg/天至約0.10000 mg/kg/天，例如約0.0001 mg/kg/天至約0.001 mg/kg/天，例如約0.0006 mg/kg/天的範圍內。吸入劑量也可根據使用的遞送裝置而變化。例如，經由乾粉吸入器裝置的吸入劑量範圍可以在約0.010 mg/kg/天至約0.020 mg/kg/天之間。
在任何情況下，醫師、或技術人員將能夠確定最適當的於單獨患者的實際劑量，這可以隨著給藥的途徑，待治療病症的類型和嚴重性，連同物種、年齡、體重、性別、腎功能、肝臟功能的和具體治療的患者的響應變化。上述劑量係平均情況示例；當然可以存在單獨的情況，其中更高的或更低劑量範圍係有利的，並且該等係在本發明的範圍內。
如本文所用，術語“有效量”包括將在受試者中引起以下生物學或醫學的反應的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽的量，例如降低或抑制與JAK1相關的酶或蛋白質活性和/或改善JAK1相關的障礙的症狀和/或減緩或延緩JAK1相關的障礙的進展。這種作用可以是客觀的（即藉由一些測試或標記可測量）或主觀的（即受試者給出了或感受到作用指示）。
術語“受試者”包括溫血哺乳類動物，例如，靈長類、牛、豬、羊、狗、貓、兔、大鼠和小鼠。在一些實施方式中，該受試者係靈長類，例如，人類。在一些實施方式中，該受試者患有JAK1相關的障礙。在一些實施方式中，該受試者需要治療（例如，該受試者將從生物學或醫學治療上收益）。
語言“抑制”（“inhibit”、“inhibition”或“inhibiting”）包括生物活性或過程的基線活性的降低。在一些實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽抑制JAK1激酶。在一些實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽係選擇性JAK1抑制劑。語言“選擇性JAK1抑制劑”包括抑制JAK1但是對JAK2或JAK3或者對JAK2和JAK3兩者無活性或活性較低的具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽。因此，在一些實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物或其藥學上可接受的鹽抑制JAK1激酶，但對JAK2或JAK3或者對JAK2和JAK3兩者無活性或活性較低。例如，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出小於或等於約0.010微莫耳的JAK1酶抑制活性（IC50 ），以及在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出大於或等於約0.5微莫耳的JAK2和JAK3酶抑制活性（IC50 ）。在至少一個其他實施方式中，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出小於或等於約0.010微莫耳的JAK1酶抑制活性（IC50 ），以及在生理學ATP濃度為5 mM時顯示出大於或等於約0.5微莫耳的JAK2和JAK3酶抑制活性（IC50 ），以及在細胞IL-13誘導的JAK-STAT6-螢光素酶測定中顯示出小於或等於約0.050微莫耳的抑制活性（IC50）。
語言“治療”（“treat”、“treating”和“treatment”）包括減少或抑制在受試者中與JAK1激酶相關的酶或蛋白活性，改善在受試者中JAK1相關的障礙的一種或多種症狀，或減緩或延緩在受試者中JAK1相關的障礙的進展。因此，具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、或其藥學上可接受的鹽在治療性和/或預防性治療上述病症中均被指出。[ 實例 ]
具有化學式 (I)、(Ia)、(Ib) 或表1的化合物、和其藥學上可接受的鹽可使用本文所述的方法和程序或使用類似的方法和程序來製備。應該理解的是，在給出典型或例舉的過程條件（即反應溫度、時間、反應物的莫耳比、溶劑、壓力等）的情況下，除非另有說明，否則也可以使用其它過程條件。最佳反應條件可以隨所用的特定反應物或溶劑而變化，但是這種條件可由熟習該項技術者確定。
另外，對熟習該項技術者來說顯而易見的是，常規保護基團可能是必要的，以防止某些官能團發生不希望的反應。特定官能團的合適保護基團的選擇以及合適的保護和去保護條件在本領域中是公知的。例如，T. W. Greene和G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis（有機合成中的保護基團），第三版，Wiley，紐約，1999和其中引用的參考文獻中描述了許多保護基團及其引入和去除。提供了製備本發明化合物的方法作為本發明進一步的實施方案，並且藉由以下程序進行說明。分離的鏡像異構物的立體化學分配係基於在酶抑制研究中針對JAK1的生物活性來進行，如在表 24 中所示。中間體 1 ： 7- 硝基 -3-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜環戊硼烷 -2- 基 )-1- 甲苯磺醯基 -1H- 吲哚 步驟 1
在25°C下，經5分鐘的時段在空氣下將NaOH（599 g，14986.55 mmol）在水（1500 mL）中的溶液逐滴添加至7-硝基-1H-吲哚（243 g，1498.65 mmol）和四丁基硫酸氫銨（50.9 g，149.87 mmol）在DCM（3000 mL）中的攪拌的混合物中。將所得混合物在25°C下攪拌持續20分鐘。在空氣下添加4-甲基苯基磺醯氯（371 g，1948.25 mmol），並且將所得的混合物在25°C下攪拌16小時。反應混合物用DCM（2000 mL）來稀釋，並且依次用水（2 x 500 mL）、10%水性K2 CO3 （2 x 500 mL）和1 M HCl（2 x 500 mL）和飽和NaCl（2 x 500 mL）來洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥、過濾並蒸發。當剩下大約200 mL DCM時，添加EtOAc（500 mL）。減壓除去溶劑。當剩下約200 mL EtOAc時，添加MTBE（1000 mL）。藉由過濾來收集沈澱，用MTBE（1000 mL）洗滌並且真空乾燥，得到7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（402 g，85%），為白色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.39 (s, 3H), 7.09 (d, 1H), 7.40 - 7.55 (m, 3H), 7.75 - 7.85 (m, 3H), 7.95 - 8.00 (m, 1H), 8.06 (d, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 317。步驟 2
在80°C下，將溴（81 mL，1580 mmol）滴加到在CCl4 （1000 mL）中的7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（50 g，158 mmol）中。將所得的溶液在80°C下攪拌6小時。將混合物冷卻至室溫，真空濃縮，殘餘物用EtOAc洗滌，得到3-溴-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（53 g，85%），呈褐色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.41 (s, 3H), 7.55 - 7.62 (m, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.85 - 7.92 (m, 3H), 7.96 (d, 1H), 8.49 (s, 1H)。 m/z (ES-), [M-H]+ = 393。步驟 3
將3-溴-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（200 g，506 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷)（193 g，759 mmol）、乙酸鉀（99 g，1012 mmol）和PdCl2 (dppf)（18.5 g，25.3 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1500 mL）中的溶液用氮氣脫氣3次，並且該反應混合物在90°C下攪拌8小時。將該混合物冷卻至室溫並且在真空中濃縮。將固體用水處理、過濾、用甲醇洗滌、真空乾燥，得到7-硝基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（150 g，67%），呈灰色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.41 (s, 12H), 2.47 (s, 3H), 7.38 - 7.43 (m, 3H), 7.66 (d, 1H), 7.87 (d, 2H), 8.24 (s, 1H), 8.29 - 8.32 (d, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 443。中間體 2 ： 3-(2- 氯 -5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-7- 硝基 -1- 甲苯磺醯基 -1H- 吲哚
將7-硝基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚，中間體 1 （50 g，113 mmol）裝入裝有冷凝器和氮氣入口的1 L反應器中。將2,4-二氯-5-甲基嘧啶（24 g，147 mmol）和2-甲基四氫呋喃（200 mL，4體積）加入到反應器中。將碳酸鉀（46.9 g，339 mmol）在水（10 mL，2體積）中的溶液脫氣並且用N2 回填，並且加入到反應混合物中。將反應器脫氣並且回填（3xN2 ），向反應混合物中加入二氯[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀二氯甲烷加合物（4.62 g，5.65 mmol），脫氣並且再次用N2 回填（3x）並且然後將反應緩慢加熱至60°C。30分鐘後形成沈澱。攪拌反應1小時，並且將反應器溫度設定為25°C。冷卻30分鐘後，內部溫度為42°C並且添加庚烷（1體積）。然後將反應器溫度設定為 +5°C。在20°C下，添加水（4體積）並且在1小時內繼續冷卻至 +5°C，並且然後攪拌2小時。用布氏漏斗過濾反應混合物，並且將固體用水（4體積）和EtOAc（2體積）洗滌，得到淡黃色固體，將其在氮氣流下乾燥。將固體在EtOAc（1體積）中攪拌、過濾並且將所得固體真空乾燥，得到（42.8 g）。合併母液，並且在真空中蒸發得到（20 g）。將700 g在庚烷中漿化的二氧化矽填充在柱（10 × 300 mm）上。將固體溶於DCM中，合並且並且裝載到柱上。DCM完全洗提後，用庚烷中的20% EtOAc洗提柱，然後用庚烷中的20%-50% EtOAc梯度洗提。將所需化合物合並且並且在真空中蒸發。將殘餘物在庚烷（0.5體積）中的50% EtOAc中漿化，過濾並且在氮氣流下乾燥，得到3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（35.6 g，71%），呈固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.40 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 7.54 (d, 2H), 7.61 (t, 1H), 7.91 (d, 2H), 7.95 - 8.04 (m, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.79 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 442.9。中間體 3 ： 3-(2- 氯 -5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-7- 硝基 -1H- 吲哚
將3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚，中間體 2 （2.477 g，5.59 mmol）溶於1,4-二㗁𠮿/水2 : 1（75 mL）中，並且加入3.8 M氫氧化鈉（22 mL，83.9 mmol）。將所得反應混合物加熱至50°C持續2 h。使反應混合物冷卻至室溫並且藉由加入2M HCl中和。將形成的固體濾出，用EtOAc，Et2 O洗滌並且真空乾燥得到3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1H-吲哚（1.894 g，117%（濕）），呈固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.52 (s, 3H), 7.47 (t, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.90 (d, 1H), 12.66 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 289.2。中間體 4 ： 3-(2,5- 二氯嘧啶 -4- 基 )-7- 硝基 -1H- 吲哚 步驟 1
在25°C在氮下將PdCl2 (dppf)*CH2 Cl2 （0.554 g，0.68 mmol）添加至在THF/水4 : 1（75 mL）中的7-硝基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷（dioxaborolan）-2-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚，中間體 1 （3.00 g，6.78 mmol）、2,4,5-三氯嘧啶（1.617 g，8.82 mmol）和K2 CO3 （2.81 g，20.35 mmol）中。將所得混合物在80°C下攪拌4小時。使反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc（150 mL）稀釋並且用鹽水（150 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由快速二氧化矽層析法純化，使用在石油醚中的8%-30% EtOAc梯度作為流動相。將純級分在真空中蒸發，並且將殘餘物從乙腈中結晶得到1-((4-氯苯基)磺醯基)-3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-硝基-1H-吲哚（1.43 g，43.4%），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.42 (s, 3H), 7.52 (d, 2H), 7.66 (t, 1H), 7.91 - 8.14 (m, 3H), 8.52 (dd, 1H), 8.90 (s, 1H), 9.08 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 463。步驟 2
在25°C將NaOH（2.202 g，55.05 mmol）在水（30 mL）中的溶液加入到3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（1.7 g，3.67 mmol）的1,4-二㗁𠮿（30 mL）中的攪拌懸浮液中。將所得混合物在50°C下攪拌1小時，然後冷卻至室溫。將反應混合物用EtOAc（200 mL）稀釋，用水（50 mL）、飽和的NaHCO3 （50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌。將有機層用Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發得到3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-硝基-1H-吲哚,（0.500 g，44.1%），呈黃色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.34 (t, 1H), 8.06 (dd, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.87 (dd, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 309。中間體 5 ： 2- 氟 -3-( 甲基磺醯基 ) 苯胺 步驟 1
在25°C在氮氣下在1分鐘的時間內將碘化亞銅(I)（1.002 g，5.26 mmol）一次性加入到在1,4-二㗁𠮿（10 mL）中的3-溴-2-氟苯胺（5 g，26.31 mmol）、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺（0.464 g，5.26 mmol）和碘化鈉（7.89 g，52.63 mmol）中。將所得到的懸浮液在110°C下攪拌持續1天。將反應混合物經過矽藻土過濾並且真空濃縮。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法純化，使用在石油醚中的5%-30% EtOAc梯度作為流動相。將純級分在真空中蒸發，得到2-氟-3-碘苯胺（5.00 g，80%），為棕色油狀物。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 5.32 (bs, 2H), 6.59 - 6.83 (m, 2H), 6.83 - 6.93 (m, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 238。步驟 2
在氮下將碘化亞銅(I)（0.402 g，2.11 mmol）添加至在DMSO（20 mL）中的2-氟-3-碘苯胺（5.00 g，21.10 mmol）、甲烷亞磺酸鈉（3.23 g，31.64 mmol）、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺（0.558 g，6.33 mmol）中。將所得到的懸浮液在95°C下攪拌持續18小時。將該反應混合物用EtOAc（50 mL）稀釋，用水（50 mL）和鹽水（50 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC使用EtOAc /石油醚1 : 1純化，得到呈無色油狀物的2-氟-3-(甲基磺醯基)苯胺（3.20 g，80%），其在靜置時固化。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 3.20 (s, 3H), 3.96 (bs, 2H), 6.97 - 7.13 (m, 2H), 7.20 - 7.31 (m, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 190。用指定的亞磺酸鹽重複上述過程得到表 2 中描述的中間體 6 ： [ 表 2 ]
Figure AA11
 中間體 7 ： (3- 溴 -2- 氟苯基 )( 乙基 ) 硫烷
在-78°C下在氮氣下歷時10分鐘將二異丙基胺基鋰（17.14 mL，34.29 mmol）滴加到在THF（250 mL）中的1-溴-2-氟苯（5.00 g，28.57 mmol）中。將所得混合物在-78°C下攪拌持續60分鐘。歷時20分鐘滴加1,2-二乙基二硫烷（5.20 g，42.54 mmol）。將所得混合物在-78°C下攪拌60分鐘，然後在室溫下過夜。將該反應混合物用水（50 mL）淬滅，並且用EtOAc（2 x 250 mL）萃取。將合併的有機萃取物用Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。藉由快速二氧化矽層析法，使用在戊烷中的0-10% EtOAc梯度作為洗提液來純化殘餘物。將純級分在真空中蒸發得到(3-溴-2-氟苯基)(乙基)硫烷（5.27 g，78%），呈無色油狀。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) 1.32 (t, 3H), 2.95 (q, 2H), 6.90 - 7.04 (m, 1H), 7.22 - 7.34 (m, 1H), 7.35 - 7.47 (m, 1H)。中間體 8 ：三級丁基 (3-( 乙基硫代 )-2- 氟苯基 ) 胺基甲酸酯
在25°C在氮下將(3-溴-2-氟苯基)(乙基)硫烷，中間體 7 （4.14 g，17.61 mmol）一次性加入到在1,4-二㗁𠮿（80 mL）中的環己烷-1,2-二胺（6.03 g，52.82 mmol）、磷酸鉀鹽（3.74 g，17.61 mmol），碘化亞銅(I)（8.38 g，44.02 mmol）和胺基甲酸三級丁酯（10.31 g，88.04 mmol）中。所得混合物在100°C下攪拌6小時，然後冷卻至室溫。將反應混合物過濾並且在真空中蒸發。藉由快速二氧化矽層析法使用戊烷中的0-10% EtOAc的梯度來純化殘餘物。將純級分在真空中蒸發得到三級丁基 (3-(乙基硫代)-2-氟苯基)胺基甲酸酯（1.412 g，29.6%），呈黃色油狀。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.31 (t, 3H), 1.55 (s, 9H), 2.94 (q, 2H), 6.73 (bs, 1H), 6.91 - 7.19 (m, 2H), 7.92 - 8.05 (m, 1H)。中間體 9 ：三級丁基 (3-( 乙基磺醯基 )-2- 氟苯基 ) 胺基甲酸酯
在0°C和氮氣下將三級丁基 (3-(乙基硫代)-2-氟苯基)胺基甲酸酯，中間體 8 （1.4 g，5.16 mmol）一次性加入到在DCM（15 mL）中的3-氯苯-1-碳過氧酸（2.67 g，15.48 mmol）中。將所得混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，過濾，用飽和NaHCO3 （2 × 50 mL）和鹽水（50 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。藉由用石油醚/EtOAc 3 : 1展開的製備型TLC純化殘餘物，以提供三級丁基 (3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基)胺基甲酸酯,（1.650 g，105%），呈黃色油狀。m/z (ES-), [M-H]+ = 302。中間體 10 ： 3-( 乙基磺醯基 )-2- 氟苯胺
在20°C將2,2,2-三氟乙酸（10.0 g，87.70 mmol）添加至在DCM（20 mL）中的三級丁基 (3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基)胺基甲酸酯，中間體 9 （1.65 g，5.44 mmol）中。將所得的混合物在25°C下攪拌1小時。將反應混合物在真空中蒸發，再溶於DCM（50 mL）中，用飽和NaHCO3 （2 × 100 mL）和鹽水（100 mL）洗滌。有機層用Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發，以提供3-(乙基磺醯基)-2-氟苯胺（0.786 g，71.1%），呈黃色油狀。1 H NMR δ (CDCl3 , 400 MHz) δ 1.32 (t, 3H), 3.32 (q, 2H), 3.60 - 4.10 (bs, 2H), 7.00 - 7.17 (m, 2H), 7.17 - 7.34 (m, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 204。中間體 11 ： 3-(2-((2- 氟 -3-( 甲基磺醯基 ) 苯基 ) 胺基 )-5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1H- 吲哚 -7- 胺 步驟 1
3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚，中間體 2 （20.0 g，45.16 mmol）、2-氟-3-(甲基磺醯基)苯胺鹽酸鹽，中間體 5 （11.2 g，49.68 mmol）、碳酸銫（30.9 g，94.8 mmol）、Pd2 (dba)3 （4.14 g，4.52 mmol）和2'-(二環己基膦基)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯]2-胺（3.55 g，9.03 mmol）在氮氣下裝入1 L反應器中。在室溫下加入2-甲基四氫呋喃（200 mL）和水（100 mL）。將反應抽真空並且用N2 （3x）回填，並且然後加熱至72.5°C（Tr = 80°C）並且攪拌4小時（3小時後形成棕色沈澱）。添加庚烷（400 mL，20 vol），停止加熱並且在30分鐘內將反應物冷卻至17°C。將沈澱攪拌10分鐘，並且然後用布氏漏斗過濾。將濾餅用水（2 vol x 3）、EtOAc /庚烷1 : 2（3 vol × 3）洗滌，並且然後在真空/氮氣下乾燥，以提供N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（25.93 g，96%），呈褐色固體。不經進一步純化繼續進行。m/z (ES+), [M+H]+ = 596.2。步驟 2
在1L反應器中，在室溫下裝入3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（27.0 g，45.3 mmol），添加2-甲基四氫呋喃（250 mL）和3.8M NaOH（水性）（250 mL），以給出棕色不溶性混合物。將該混合物加熱至85°C並且攪拌過夜。將庚烷（10 vol）裝入反應混合物中，在40 min 內冷卻至17°C並且攪拌30 min。用布氏漏斗過濾固體，並且將濾餅用水（3 x 40 mL）洗滌，水洗pH值：pH試紙測定為10-11。向濾餅中添加40 mL水並且漿化，同時用0.5 N HCl調節pH至7。將固體再次用布氏漏斗過濾，用水（50 mL）洗滌，在氮氣/真空下乾燥20 min，並且然後用庚烷/EtOAc（4 × 40 mL）洗滌。（藉由LCMS發現45%未反應的原料，化合物在相同條件下再次反應）。將固體裝入1L反應器中，並且添加2-甲基四氫呋喃（250 mL）和3.8M NaOH（水性）（250 mL），以給出棕色不溶性混合物。將該混合物加熱至85°C並且攪拌過夜。將庚烷（10 vol）裝入反應混合物中，在40 min內冷卻至17°C並且攪拌30 min。用布氏漏斗過濾固體，並且將濾餅用水（3 × 40 mL）洗滌，水洗pH值：pH試紙測為10-11。向濾餅中添加40 mL水並且漿化，同時用0.5 N HCl調節pH至7。將固體再次用布氏漏斗過濾，用水（50 mL）洗滌，在氮氣/真空下乾燥20 min，並且然後用庚烷/EtOAc（4 × 40 mL）洗滌並且乾燥，以提供N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（20.0 g，100%）。 m/z (ES+), [M+H]+ = 442.1。步驟 3
將N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（11.0 g，24.9 mmol）裝入1L反應器中,並且添加2-甲基四氫呋喃/EtOH 2 : 1（330 mL）。將反應器加熱至80°C，攪拌10 min 以獲得溶解，然後緩慢冷卻至30°C。在室溫和氮氣下添加10% Pd-C（2.00 g，24.9 mmol，50%濕度）和在水（10 mL）（吸熱）中的甲酸銨（9.43 g，149.5 mmol）溶液。將反應混合物緩慢加熱至80°C並且攪拌15 min。然後使其冷卻至40°C-50°C，在氮氣下在布氏漏斗上過濾（小心），用熱THF/EtOH 1 : 1（50 mL）洗滌濾餅，濃縮濾液並且與DCM（50 mL）一起在真空下蒸發，以提供3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺10.0 g，98%），呈褐色固體。 m/z (ES+), [M+H]+ = 412.4。中間體 12 ： N-(3-( 乙基磺醯基 )-2- 氟苯基 )-5- 甲基 -4-(7- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 ) 嘧啶 -2- 胺
在23°C下，在氮氣下，將Pd2 (dba)3 （159 mg，0.17 mmol）和2'-(二環己基膦)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯]-2-胺（136 mg，0.35 mmol）添加到在DMF（15 mL）中的3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1H-吲哚，中間體3（500 mg，1.73 mmol）、3-(乙基磺醯基)-2-氟苯胺，中間體 10 （352 mg，1.73 mmol）和碳酸銫（1693 mg，5.20 mmol）中。將所得的溶液在80°C下攪拌3小時。將反應混合物經過矽藻土過濾，並且將溶劑在真空下蒸發，以提供呈黑色固體的N-(3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（ 1.22 g，155%）。不經進一步純化使用。m/z (ES+), [M+H]+ = 456。使用指定的起始中間體重複上述過程得到表 6 中所述的中間體 13-14 ： [ 表 6 ]
Figure 107101685-A0304-0001
 a 將反應混合物在真空中濃縮。b 將反應混合物用EtOAc（200 mL）稀釋，用水（50 mL）和鹽水（200 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC（使用DCM/MeOH 5 : 1作為洗提液）進行純化。中間體 15 ： 3-(2-((3-( 乙基磺醯基 )-2- 氟苯基 ) 胺基 )-5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1H- 吲哚 -7- 胺
將在MeOH/THF/水1 : 1 : 1（75 mL）中的N-(3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺，中間體 12 （1.406 g，3.09 mmol）、氯化銨（0.991 g，18.52 mmol）和鐵（1.034 g，18.52 mmol）在60°C下攪拌3小時。將該反應混合物經矽藻土過濾，並且在減壓下除去溶劑。使用DCM/MeOH 10 : 1作為洗提液，藉由製備型TLC純化殘餘物，以提供3-(2-((3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺（0.600 g，46%），呈褐色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.11 (t, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.33 (q, 2H), 5.12 (bs, 2H), 6.39 (d, 1H), 6.74 (t, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.44 - 7.66 (m, 2H), 7.94 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.34 (t, 1H), 9.03 (s, 1H), 11.34 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 426。用指定的起始中間體重複上述步驟，以給出表 7 中所述的中間體 16-17 ： [ 表 7 ]
Figure 107101685-A0304-0002
 a 將該反應混合物經過矽藻土過濾，在真空中蒸發並且再溶於DCM（50 mL）中。將有機相用水（2 x 50 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。b 將反應攪拌2 h。將反應混合物經過矽藻土過濾，用EtOAc（100 mL）稀釋。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。中間體 18 ： 3-(5- 氟 -2-((2- 氟 -3-( 甲基磺醯基 ) 苯基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 基 )-1H- 吲哚 -7- 胺 步驟 1
將碳酸鉀（40.9 mL，678.28 mmol）的溶液裝入配有溫度計和氮氣入口的1 L反應器中。在室溫（23°C）下用N2 使混合物脫氣三次。添加7-硝基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚，中間體 1 （100 g，226.09 mmol）、2,4-二氯-5-氟嘧啶（49.1 g，293.92 mmol）和甲基THF（1000 mL），並且在室溫下攪拌10 min。將所得混合物用氮氣脫氣3次。向反應混合物中添加二氯[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀二氯甲烷加合物（9.23 g，11.30 mmol），將所得混合物脫氣並且再次回填（3xN2 ），並且在23°C下攪拌過夜以給出黃色沈澱。在室溫下將庚烷（500 mL）裝入反應混合物並且攪拌10 min。然後停止攪拌，並且使沈澱物沈降下來。將反應混合物冷卻至5°C並且攪拌1 h。經過玻璃漏斗過濾沈澱，用水洗滌直到水達到中性pH（13 vol，置換沖洗（displacement wash），1.3 L）。然後將濾餅在室溫下用EtOAc/庚烷混合物1 : 1（5 x 2 vol，1 L）、庚烷（2 x 200 mL，2 x 2vol）洗滌，並且將固體在35°C下在真空下乾燥過夜，以提供3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（97 g，有效收率89%）。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.41 (s, 3H), 7.51 (d, 2H), 7.69 (t, 1H), 7.95 (d, 2H), 8.01 (dd, 1H), 8.75 (d, 1H), 8.81 (dd, 1H), 9.01 (d, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 447.2。步驟 2
將3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚（89.5 g，200.30 mmol）、2-氟-3-(甲基磺醯基)苯胺鹽酸鹽，中間體 5 （54.2 g，240.36 mmol）、Pd2 (dba)3 （9.17 g，10.01 mmol）和2'-(二環己基)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯]-2-胺（7.88 g，20.03 mmol）在氮氣下添加到2 L反應器中。在室溫下添加脫氣的2-2-甲基四氫呋喃（1000 mL）和在水（450 mL）中的碳酸銫（137 g，420.62 mmol）溶液，並且將反應混合物脫氣（x7）。然後將反應加熱至72.6°C，並且然後攪拌過夜。將反應冷卻至4°C-5°C並且攪拌至少30 min。用布氏漏斗過濾固體，用冷的2-2-甲基四氫呋喃（300 mL，3 vol）、水（3 x 300 mL，3 vol）和EtOAc/庚烷混合物1 : 2（3 x 300 mL，3 vol）洗滌，並且在40°C的真空下乾燥,以提供5-氟-N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-4-(7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（77.89 g，有效收率65%），呈褐色固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.56 - 2.64 (m, 3H), 3.42 (d, 3H), 7.52 - 7.64 (m, 4H), 7.73 (t, 1H), 7.98 - 8.09 (m, 3H), 8.22 (t, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.79 (d, 1H), 8.94 (d, 1H), 9.89 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 600.2。步驟 3
在室溫下，將5-氟-N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-4-(7-硝基-1-甲苯磺醯基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（97.7 g，129.87 mmol）裝入5L反應器中。添加THF（100 mL）和3.8 M NaOH（水性）（1000 mL）的混合物，以給出棕色不溶混合物。將混合物回流加熱至75°C並且攪拌過週末。向反應混合物中裝入THF（10 vol）和庚烷（10 vol）。然後將其在40 min內冷卻至17°C，攪拌60 min，並且在布氏漏斗上過濾固體。將濾餅用1 M檸檬酸（500 mL，直到pH中性）、水（5 x 300 mL，直到pH中性）、然後用庚烷/EtOAc（4 x 400 mL）洗滌。將固體在真空下乾燥,以提供5-氟-N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（55.0 g，95%）。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 3.27 - 3.38 (m, 3H), 7.30 (t, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.64 (t, 1H), 8.11 - 8.29 (m, 3H), 8.52 (d, 1H), 8.98 (d, 1H), 9.60 (s, 1H), 12.57 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 446.2。步驟 4
在室溫下，在氮氣下向在THF/EtOH 2 : 1（600 mL）中的5-氟-N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-4-(7-硝基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（59.5 g，123.5 mmol，92.5% Wt)的攪拌懸浮液中添加10% Pd/C（12.0 g，123.5 mmol，50% 濕度）和在水（50 mL）中的甲酸銨（46.8 g，741.4 mmol）溶液。將反應混合物緩慢加熱至70°C並且攪拌30 min。裝入12 g活性炭並且將混合物攪拌15 min。將反應混合物冷卻至40°C，並且在氮氣下用布氏漏斗（紙）過濾。將濾餅用THF/EtOH（160 mL）洗滌。將濾液濃縮至4 vol，並且將所得漿液冷卻至室溫，並且在氮氣下過濾。將固體用水（2 vol）、乙醇（2 vol）洗滌並且在40°C下在氮氣/真空下乾燥,以提供呈淺棕色固體的3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺（44.3 g，86%）。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 3.28 (s, 3H), 5.20 (bs, 2H), 6.43 (dd, 1H), 6.78 (t, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.57 - 7.63 (m, 1H), 7.66 (d, 1H), 8.09 - 8.25 (m, 2H), 8.38 (d, 1H), 9.34 (s, 1H), 11.57 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 416.3。中間體 19 ： 3-(2- 氯 -5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-7- 硝基 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲哚
在0°C下，將氫化鈉（在礦物油中的60%分散液）（1.32 g，33.10 mmol）分批添加到在無水THF（150 mL）中的3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1H-吲哚，中間體 3 （6.37 g，22.07 mmol）的黃色攪拌懸浮液中。攪拌25 min後（停止放出氣體），快速滴加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷（4.10 mL，23.17 mmol）。5分鐘後，除去冷卻浴，並且將反應在環境溫度下攪拌1.5小時。添加另外的氫化鈉（在礦物油中的60%分散液）（130 mg，3.3 mmol）和(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷（0.4 mL，2.3 mmol）。將該反應再攪拌40 min，然後用飽和NaHCO3 （水性）淬滅，並且用Et2 O稀釋淺黃色混合物。將該層分離，並且用Et2 O (x2)萃取水性層。將合併的有機層用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物溶於氯仿中並且藉由自動矽膠快速層析法使用120 g柱純化。使用在己烷中的5% EtOAc梯度持續3 min、然後在用在己烷中的5% - 45% EtOAc經25分鐘的梯度作為流動相。使用波長254 nm收集產物，以提供3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚（9.21 g，100%），呈黃色固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ -0.16 (s, 9H) 0.60 - 0.73 (m, 2H) 2.51 - 2.52 (m, 3H) 3.11 - 3.22 (m, 2H) 5.72 (s, 2H) 7.48 (t, 1H) 7.94 (d, 1H) 8.57 (s, 1H) 8.64 (s, 1H) 8.84 (d, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 419.2。中間體 20 ： 3-(2-((2- 氟 -3-( 甲基磺醯基 ) 苯基 ) 胺基 )-5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲哚 -7- 胺 步驟 1
在25°C下，在氮氣下將碳酸銫（2.333 g，7.16 mmol）添加到在DMF（20 mL）中的3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-硝基-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚，中間體 19 （1.0 g，2.39 mmol）、2-氟-3-(甲基磺醯基)苯胺，中間體 5 （0.542 g，2.86 mmol）、Pd2 (dba)3 （0.219 g，0.24 mmol）和2-二環己基-2'-(N,N-二甲基胺基)-聯苯（Davephos）（0.188 g，0.48 mmol）中。將所得混合物在80°C下攪拌3小時，並且然後允許冷卻至室溫。將反應混合物用EtOAc（200 mL）稀釋，用水（50 mL）、飽和的NaHCO3 （50 mL）和鹽水（100 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥、過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由快速矽膠層析法純化，使用在石油醚中的5%-60% EtOAc梯度作為流動相。將純的級分在真空中蒸發，以提供N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（0.940 g，69%），呈黃色固體。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ -0.08 (s, 9H), 0.74 - 0.87 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 3.22 - 3.38 (m, 5 H), 5.67 (s, 2H), 7.21 - 7.33 (m, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.48 - 7.60 (m, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.89 (t, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 572.2。步驟 2
將N-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)-5-甲基-4-(7-硝基-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺（2.76 g，4.83 mmol）、鐵（11.59 g，207.59 mmol）和鹽酸銨（11.10 g，207.59 mmol）溶於MeOH/THF/水1 : 1 : 1（120 mL）中，並且在70°C下攪拌4 h。允許該反應混合物冷卻至室溫。將固體濾出，將濾液倒入水（200 mL）中並且用DCM（8 x 40 mL）萃取。將合併的有機萃取物藉由分相器過濾並且在真空中蒸發，以提供呈橙色膠的3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺（2.52 g，96%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.05 (s, 9H), 0.87 - 0.93 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.56 - 3.65 (m, 2H), 5.05 (s, 2H), 5.73 (s, 2H), 6.53 (d, 1H), 6.78 (t, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.28 (d, 2H), 9.13 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 542.3。中間體 21 ： (S)-2- 溴 -N-(3-(2-((2- 氟 -3-( 甲基磺醯基 ) 苯基 ) 胺基 )-5- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1H- 吲哚 -7- 基 ) 丙醯胺
在25°C下，將DIPEA（0.679 mL，3.89 mmol）一次性添加到在DMF（3 mL）中的3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （ 2 00 mg，0.49 mmol）和(S)-2-溴丙酸（149 mg，0.97 mmol）中。將得到的溶液冷卻至-40°C，在-40°C下滴加1-丙烷膦酸環酐（619 mg，0.97 mmol），並且繼續攪拌30 min。將反應混合物用DCM（25 mL）稀釋並且用鹽水（2 x 50 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC使用MeOH/DCM 1 : 20作為洗提液進行純化，以提供(S)-2-溴-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺,（224 mg，84%），呈褐色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.86 (d, 3H), 2.42 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 4.78 - 4.90 (m, 1H), 7.01 (t, 1H), 7.38 - 7.52 (m, 2H), 7.57 (t, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.25 - 8.34 (m, 2H), 9.21 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 11.37 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 546。中間體 22 ： (R)-2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸二鹽酸鹽 步驟 1
將(S)-甲基2-羥基丙酸酯（250 g，2.40 mol）、DCM（1500 mL）和2,6-二甲基吡啶（656.7 g，6.13 mol）置於3000 mL四頸圓底燒瓶中，並且將混合物冷卻至-78°C。在-78°C攪拌下滴加三氟甲磺酸酐（630 g，2.23 mol），並且然後將所得溶液在室溫下攪拌3 h。將反應混合物用水（1000 mL）稀釋，用1M HCl（3 x 500 mL）和鹽水（1 x 500 mL）洗滌。將有機相用無水Na2 SO4 乾燥、過濾並且在真空中濃縮。然後在0°C下，將殘餘物滴加到攪拌的含有1-甲基哌𠯤（213.3 g，2.13 mol）、DCM（800 mL）、水（400 mL，）和碳酸鉀（491.3 g，3.53 mol）的3000 mL四頸圓底燒瓶中。將所得溶液在室溫下攪拌過夜，然後用DCM（500 mL）稀釋。將所得混合物用水（1 x 500 mL）和鹽水（500 mL）洗滌。將有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中濃縮。藉由製備性矽膠層析法，使用在石油醚中的17%-50%乙酸乙酯梯度作為流動相來純化殘餘物，以提供(R)-甲基2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（226 g，68%）呈淡黃色油. m/z (ES+), [M+H]+ = 187。步驟 2
向3000 mL四頸圓底燒瓶中添加氯化氫（2000 mL，60.34 mol，6M/L）隨後添加(R)-甲基2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（226 g，1.21 mol）。將所得溶液在100°C下攪拌過夜，並且然後在真空中濃縮。將所得混合物用乙腈（1000 mL）稀釋，並且將收集的固體過濾。將產物在室溫下用乙醇（1 g/20 mL）重結晶（x5），以提供(R)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽（124 g，42%），呈白色固體。1 H NMR (300MHZ,CD3 OD) δ1.69 - 1.71 (d, 3H), 3.04 (s, 3H), 3.83 (m, 8H), 4.35 - 4.42 (m, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 173。中間體 23 ： (R)- 甲基 2-((S)-3,4- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸酯
將2,6-二甲基吡啶（0.672 mL，5.77 mmol）添加到(S)-甲基2-羥基丙酸酯（500 mg，4.81 mmol）在DCM（5 mL）中的冷卻至-78°C的溶液中。將混合物攪拌5 min，並且然後滴加三氟甲磺酸酐（0.974 mL，5.77 mmol）。將反應物攪拌30 min，除去冷卻並且使反應混合物經30 min達到室溫。用1M HCl （水性）（20 mL）洗滌溶液，用分相器乾燥，並且然後緩慢添加到懸浮於DCM（10 mL）中的(S)-1,2-二甲基哌𠯤二鹽酸鹽（0.944 g，5.05 mmol）和在水（10 mL）中的碳酸鉀（1.993 g，14.42 mmol）溶液的混合物中。將反應在室溫下攪拌18 h。將各相分離。將有機相用鹽水（25 mL）洗滌，用分相器乾燥並且在真空中蒸發，以獲得(R)-甲基2-((S)-3,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（0.726 g，75%），呈淡橙色油。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 1.05 (d, 3H), 1.29 (d, 3H), 2.1 - 2.25 (m, 2H), 2.25 - 2.37 (m, 4H), 2.46 (t, 1H), 2.69 - 2.83 (m, 3H), 3.28 (q, 1H), 3.70 (s, 3H)。 使用指定的胺重複上述程序，以給出表8中所述的中間體24：[ 表 8 ]
Figure AA12
 中間體 25 ： (R)-2-((S)-3,4- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸二鹽酸鹽
將(R)-甲基2-((S)-3,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯，中間體23（726 mg，3.62 mmol）在6M HCl（6 mL，36.00 mmol）中攪拌回流16 h。（反應已經乾燥）。添加水（6 mL）並且攪拌2 h。將反應物冷卻至室溫，並且在真空中濃縮溶劑。將殘餘物懸浮於乙腈中並且在室溫下攪拌1 h。將固體過濾出，用乙腈洗滌並且在真空中乾燥，以獲得(R)-2-((S)-3,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽（626 mg，66.6%），呈固體。1 H NMR (500 MHz, D2 O) δ 1.33 (d, 3H), 1.37 - 1.48 (m, 3H), 2.88 (s, 3H), 3.07 - 3.23 (m, 1H), 3.28 - 3.85 (m, 7H)。使用指定的起始中間體重複上述程序，以給出表 9 中所述的中間體 26 ： [ 表 9 ]
Figure 107101685-A0304-0003
 a 將殘餘物溶於水/乙腈中並且冷凍乾燥。將殘餘的半固體懸浮於乙腈中並且在室溫下攪拌1 h。將固體過濾，用乙腈洗滌並且在真空中乾燥。中間體 27 ： (R)-2-((R)-2,4- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸二鹽酸鹽 步驟 1
將2,6-二甲基吡啶（0.868 mL，7.45 mmol）添加到(S)-甲基2-羥基丙酸酯（0.646 g，6.21 mmol）在DCM（10 mL）中的冷卻的-78°C溶液中。將混合物攪拌5 min ，並且然後滴加三氟甲磺酸酐（1.259 mL，7.45 mmol）。將反應物攪拌45 min，除去冷卻，並且使反應混合物達到室溫並且攪拌1 h。用1M HCl（水性）（20 mL）洗滌溶液，用分相器乾燥並且在真空中濃縮。將殘餘物溶於乙腈（5 mL）中並且添加到在乙腈（10 mL）中的(R)-1,3-二甲基哌𠯤二鹽酸鹽（1.22 g，6.52 mmol）和碳酸鉀（2.57 g，18.63 mmol）的懸浮液中。將反應物在N2 氣氛下加熱至60°C持續20 h。將反應冷卻至室溫，過濾出固體，用乙腈洗滌，並且在真空中蒸發濾液。將殘餘物溶於DCM（10 mL）和8% NaHCO3 （水性）（10 mL）中，搖動並且分離各相。將水相用DCM（10 mL）萃取。將合併的萃取物用分相器乾燥並且在真空中蒸發,以獲得(R)-甲基2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（0.589 g，47.4%，80% de），呈淺色油。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.94 (d, 3H), 1.06 (d, 3H), 1.82 (t, 1H), 2.03 (t, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.37 - 2.55 (m, 3H), 2.55 - 2.67 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.66 - 3.74 (m, 1H)。（所描述的最豐富的非鏡像異構物）步驟 2
將(R)-甲基2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（589 mg，2.94 mmol）溶於6 M HCl（水性）（5 mL，30.00 mmol）中,並且回流18 h。將反應物冷卻至室溫，在真空中蒸發溶劑成半固體殘餘物。將二乙醚添加到殘餘物中，攪拌30 min，濾出固體並且在真空中乾燥，以獲得(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽（623 mg，82%），呈淺色固體。1 H NMR (500 MHz, D2 O) δ 1.32 (d, 3H), 1.41 (d, 3H), 2.89 (s, 3H), 3.08 - 3.91 (m, 7H), 4.25 - 4.51 (m, 1H)。（所描述的最豐富的非鏡像異構物）中間體 28 ：甲基 3- 甲氧基 -2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸酯
在氮氣下將1-甲基哌𠯤（100 g，988.4 mmol）和碳酸鉀（164 g，1186 mmol）在無水乙腈（800 mL）中漿化。將甲基2-溴-3-甲氧基丙酸酯（201 g，988.4 mmol）在50°C-60°C下經40分鐘的時間添加到漿液中。將得到的混合物在氮氣下在61°C下加熱23小時，並且然後冷卻至20°C。將固體濾出。將濾液蒸發成油狀殘餘物，將其溶於1M HCl （1000 mL）中。然後用4M HCl（~300 mL）將pH調節至1。將所得溶液用DCM（200 mL）萃取。用飽和Na2 CO3 （1000 mL）將該水溶液鹼化至pH 9，並且用DCM（2 x 500 mL）萃取。然後用氫氧化鈉將水相的pH升至10-11，並且用DCM（2 x 500 mL）萃取。將四個有機相合併，並且在真空中蒸發，以獲得甲基3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（181 g，85%）。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 2.07 (s, 3H), 2.14 - 2.34 (m, 4H), 2.39 - 2.52 (m, 4H), 3.14 (s, 3H), 3.22 (dd, 1H), 3.42 (dd, 1H), 3.48 - 3.56 (m, 4H)。中間體 29 ：甲基 2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸酯
在20°C下，在氮氣下，將碳酸鉀（1.987 g，14.38 mmol）添加到在乙腈（20 mL）中的甲基2-溴丙酸酯（2.041 g，12.22 mmol）和1-甲基哌𠯤（1.20 g，11.98 mmol）中。將所得混合物在60°C下攪拌18小時。將振動的橙色混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋並且過濾。將橙色溶液在真空中濃縮。將殘餘物溶於乙醚中並且過濾。將濾液在真空中蒸發，以提供甲基2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯,（2.2 g，99%），呈油狀。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.23 (dd, 3H), 2.21 (d, 3H), 2.28 - 2.65 (m, 8H), 3.16 - 3.27 (m, 1H), 3.63 (s, 3H). m/z (ES+), [M+H]+ = 187。使用指定的反應物重複上述程序以給出表 10 中所述的中間體 30-44 ： [ 表 10]
Figure AA13
Figure AA14
Figure AA15
Figure AA16
Figure AA17
 a 將反應混合物用乙酸乙酯（50 mL）稀釋。將反應混合物經過矽藻土過濾。在真空下蒸餾除去溶劑。將反應混合物用Et2 O（50 mL）稀釋。將該反應混合物經過矽藻土過濾。將溶劑藉由真空蒸餾除去。b 使用3當量的碳酸鉀。C 將反應混合物過濾。將溶劑在減壓下除去。將混合物重新溶於EA中並且用HCl洗滌。將水層合併，並且用Na2 CO3 將其pH調節至8。將水層用EtOAc洗滌。將有機層合併並且在真空中蒸發。D 將反應混合物過濾，並且在真空中蒸發溶劑。將殘餘物用EtOAc（50 mL）稀釋，經過矽藻土過濾並且將濾液在真空中蒸發。e 使用2當量的碳酸鉀。f 濃縮濾液之後。將殘餘物溶於DCM（150 mL）中，反萃取到0.1 M HCl（水性）（200 mL）中並且分離各相。將水相用DCM（150 mL）洗滌，並且然後藉由添加K2 CO3 (s)鹼化至pH 10。然後將化合物用DCM（3 x 125 mL）萃取並且在真空中蒸發。中間體 45 ： 2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸二鹽酸鹽
在0°C下，將甲基2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯，中間體 29 （6.00 g，32.21 mmol）逐滴添加到6M HCl（70 mL，420.00 mmol）中。將所得混合物在100°C下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫，並且用DCM（2 x 2000 mL）洗滌。將水相在減壓下除去，以提供2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽（6.00 g，76%），呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.54 (d, 3H), 2.83 (s, 3H), 3.47 - 3.90 (m, 8H), 4.25 - 4.45 (m, 1H), 12.21 (bs, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 173。使用指定的起始中間體重複上述過程，以給出表 11 中所述的中間體 46-47 ： [ 表 11 ]
Figure 107101685-A0304-0004
 a 將反應混合物冷卻至室溫，然後在真空濃中縮。將殘餘物懸浮於乙腈或乙醚中並且在室溫下攪拌。將固體濾出並且在真空中乾燥。中間體 48 ： 3- 甲氧基 -2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸鋰
將氫氧化鋰（0.321 g，13.39 mmol）在水（5 mL）中的溶液添加到3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸甲基酯，中間體 28 （1.93 g，8.92 mmol）在THF（5 mL）中的溶液中。添加幾滴MeOH直至反應混合物變澄清。將反應在40°C加熱24 h。將有機物在真空中蒸發。將殘餘物用水稀釋並且凍乾（x3），以獲得3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰,（1.92 g，103%），呈固體。1 H NMR (500 MHz, D2 O) δ 2.06 (s, 3H), 2.48 (bs, 8H), 2.99 (t, 1H), 3.20 (s, 3H), 3.46 - 3.57 (m, 2H)。使用指定的起始中間體重複上述程序，以給出表 12 中所述的中間體 49-59 ： [ 表 12]
Figure 107101685-A0304-0005
 a 使用THF/MeOH 1 : 1作為溶劑。b 使用3當量LiOH。C 將反應混合物用水（30 mL）稀釋。將水層用EtOAc或乙醚洗滌並且凍乾。d 使用MeOH作為溶劑。e 反應溫度：50°Cf 反應溫度：60°C。g 將1M HCl（10 mL）添加到反應混合物中，然後將其凍乾。h 使用2 eq.LiOH。中間體 60 ： (S)- 甲基 3- 乙氧基 -2- 羥基丙酸酯
在25°C下，在氮氣下，將三氟甲磺酸鎂（1.577 g，4.90 mmol）添加到溶於乙醇（10 mL）中的(S)-甲基環氧乙烷-2-甲酸酯（2.00 g，19.59 mmol）中。將所得混合物在50°C下攪拌30小時。將溶劑在減壓下除去。將反應混合物用EtOAc（50 mL）稀釋並且用鹽水（25 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC（使用EtOAc/石油醚1 : 1）進行純化，以提供(S)-甲基3-乙氧基-2-羥基丙酸酯,（1.788 g，61.6%），呈無色油狀。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 1.20 (t, 3H), 2.46 (bs, 1H), 3.45 - 3.67 (m, 2H), 3.74 (d, 2H), 3.83 (s, 3H), 4.19 - 4.41 (m, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 203。中間體 61 ： (S)- 甲基 3- 乙氧基 -2-((( 三氟甲基 ) 磺醯基 ) 氧基 ) 丙酸酯
在-78°C下，在氮氣下，將2,6-二甲基吡啶（1.643 mL，14.11 mmol）添加到在DCM（30 mL）中的(S)-甲基3-乙氧基-2-羥基丙酸酯，中間體 60 （1.9 g，12.82 mmol）中。再次維持完全冷卻後，經由注射泵經1小時滴加三氟甲磺酸酐（2.341 mL，14.11 mmol）。將所得溶液在-78°C下攪拌30分鐘，然後加溫至室溫並且再攪拌1小時。將反應混合物用DCM（100 mL）稀釋，用1M HCL（75 mL）洗滌，並且在真空下乾燥有機相，以提供(S)-甲基3-乙氧基-2-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙酸酯（3.30 g，92%）,呈淡棕色油。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 1.23 (t, 3H), 3.48 - 3.75 (m, 2H), 3.82 - 4.01 (m, 3H), 4.23 - 4.46 (m, 2H), 5.22 - 5.36 (m, 1H)。中間體 62 ： (R)- 甲基 3- 乙氧基 -2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸酯
在0°C下經5分鐘，將碳酸鉀（3.26 g，23.55 mmol）溶於水（420 mL）中，並且滴加到在DCM（15 mL）中的(S)-甲基3-乙氧基-2-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙酸酯，中間體 61 （3.3 g，11.78 mmol）和1-甲基哌𠯤（1.769 g，17.66 mmol）的溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌15小時。將反應混合物用DCM（500 mL）稀釋並且用水（100 mL）和鹽水（100 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC（使用石油醚/ EtOAc 1 : 1）純化，以提供(R)-甲基3-乙氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（2.40 g，88%），呈黃色油狀。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 1.18 (t, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.36 - 2.60 (m, 4H), 2.60 - 2.79 (m, 4H), 3.35 - 3.60 (m, 3H), 3.61 - 3.84 (m, 4H), 4.21 (q, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 231。中間體 63 ： (R)-3- 乙氧基 -2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸鋰
在25°C下，將在水（6 mL）中的氫氧化鋰（204 mg，8.51 mmol）添加到在THF/MeOH 1 : 1（12 mL）中的(R)-甲基3-乙氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯，中間體 62 （980 mg，4.26 mmol）中。將所得溶液在室溫下攪拌15小時。將溶劑在減壓下去除。將殘餘物用MeOH（50 mL）稀釋，用石油醚（2 x 50 mL）洗滌並且在真空中蒸發，以提供(R)-3-乙氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸（421 mg，45.7%）。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) δ 1.19 (t, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.34 - 2.78 (m, 8H), 2.97 - 3.08 (m, 1H), 3.42 - 3.59 (m, 2H), 3.70 (dd, 1H), 3.76 - 3.87 (m, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 217。中間體 64 ： 3-( 苄氧基 )-2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸鈉 步驟 1
在配備有溫度計的圓底燒瓶中，將(S)-2-胺基-3-(苄氧基)丙酸（3.00 g，15.37 mmol）溶於硫酸（18.44 mL，36.88 mmol）中並且用冰浴冷卻至0°C。在60 min內分小份添加亞硝酸鈉（1.696 g，24.59 mmol）在水（10 mL）中的溶液，保持內部溫度低於3°C。將反應混合物在0°C攪拌，並且允許緩慢溫熱至室溫過夜。添加NaOH（50%，水性，w/w，2.8 mL）直到pH 4。然後添加乙酸乙酯（25 mL），劇烈攪拌反應混合物，同時添加2M H2 SO4 （水性）將pH降低至pH 3。將各相分離，並且將水相用EtOAc（3 x 25 mL）萃取。將合併的有機相經MgSO4 乾燥，經相分離器過濾並且在真空中濃縮，以提供(S)-3-(苄氧基)-2-羥基丙酸（2.55 g，85%，98.0% ee）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 3.78 (dd, 1H), 3.83 (dd, 1H), 4.37 (t, 1H), 4.61 (d, 2H), 7.28 - 7.4 (m, 5H)。沒有觀察到可交換的質子。步驟 2
將乙醯氯（4.28 mL，60.14 mmol）逐滴添加到冰浴0°C的冷甲醇（14 mL）中。將混合物在0°C下攪拌5分鐘，並且在0°C下轉移到在甲醇（14.00 mL）中的(S)-3-(苄氧基)-2-羥基丙酸（2.36 g，12.03 mmol）溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌40分鐘。添加原甲酸三甲酯（2.66 mL，24.06 mmol），並且將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將該反應混合物在真空中濃縮。將殘餘物藉由自動快速層析法在Biotage® KP-SIL 50 g柱上純化，使用在庚烷中的50% EtOAc對12 CV作為流動相。使用257 nm的波長檢測化合物。收集產物並且在真空中蒸發，以提供(S)-甲基3-(苄氧基)-2-羥基丙酸酯（1.94 g，77%）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 3.04 (d, 1H), 3.76 (d, 2H), 3.79 (s, 3H), 4.31 - 4.36 (m, 1H), 4.54 (d, 1H), 4.61 (d, 1H), 7.27 - 7.37 (m, 5H)。步驟 3
將三氟甲磺酸酐（1.543 mL，9.13 mmol）逐滴添加到在甲苯（20 mL）中的(S)-甲基3-(苄氧基)-2-羥基丙酸酯（1.92 g，9.13 mmol）和DIPEA（1.595 mL，9.13 mmol）的冰浴0°C冷溶液中。將反應在25°C下攪拌30分鐘，並且然後冷卻至-78°C。添加在甲苯（20 mL）中的1-甲基哌𠯤（1.013 mL，9.13 mmol）和DIPEA（1.595 mL，9.13 mmol）的混合物，（保持溫度低於-70°C）。將反應混合物冷卻攪拌過夜，在此期間冷卻浴達到-40°C。允許反應混合物升溫至室溫，過濾並且在真空中濃縮。將殘餘物藉由自動快速層析法在Biotage® KP-SIL 50 g柱上純化，使用在庚烷中的66% EtOAc對12 CV作為流動相，隨後是在MeOH中的0.2M NH3 對10CV為流動相。使用波長250 nm檢測產物。收集產物級分並且在真空中蒸發，以提供(R)-甲基3-(苄氧基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（1.32 g，66%，96.0% ee）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 2.42 (s, 3H), 2.5 - 2.71 (m, 4H), 2.71 - 2.83 (m, 4H), 3.49 (t, 1H), 3.66 - 3.74 (m, 4H), 3.78 (dd, 1H), 4.53 (dd, 2H), 7.24 - 7.39 (m, 5H). m/z (ES+), [M+H]+ = 293.6。步驟 4
將(R)-甲基3-(苄氧基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸酯（308 mg，1.05 mmol）溶於甲醇（1.5 mL）和水性1M 氫氧化鈉（1.05 mL）中，並且在室溫下攪拌16 h。添加另外的水性1M 氫氧化鈉（0.2 mL）並且將反應混合物在室溫下再攪拌2 h，並且在45°C下攪拌3 h。然後使反應達到室溫並且用水（5 mL）稀釋並且凍乾，以給出粗鈉-3-(苄氧基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸鹽（356 mg），呈固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.10 (s, 3H), 2.16 - 2.34 (m, 4H), 2.52 - 2.63 (m, 4H), 2.91 (dd, 1H), 3.58 (dd, 1H), 3.65 (dd, 1H), 4.39 - 4.48 (m, 2H), 7.23 - 7.28 (m, 1H), 7.28 - 7.36 (m, 4H). m/z (ES+), [M+H]+ = 279.2。中間體 65 ： 2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 丁酸鋰
在氮氣下，將氫氧化鋰（ 0.335 g ， 14.00 mmol ） 添加到在THF（6 mL）、水（6 mL）和MeOH（1 mL）中的乙基2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁酸酯，中間體 30 （2.00 g，9.33 mmol）中。將所得到的懸浮液在40°C下攪拌持續24小時。將反應混合物在真空中濃縮。將殘餘物用水（10 mL）稀釋，用乙醚（2 x 10 mL）萃取，將水層冷凍乾燥，以提供2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁酸鋰（1.680 g，97%），呈淺黃色固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.82 (t, 3H), 1.38 - 1.68 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.16 - 2.48 (m, 4H), 2.49 - 2.67 (m, 5H)。中間體 66 ： 2-(4-( 三級 - 丁氧基羰基 ) 哌 𠯤 -1- 基 ) 丙酸鋰 步驟 1
在20°C下，在氮氣下，將碳酸鉀（0.890 g，6.44 mmol）添加到在乙腈（10 mL）中的2-溴丙酸甲基酯（0.897 g，5.37 mmol）和哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（1.00 g，5.37 mmol）中。將所得混合物在60°C下攪拌18小時。將反應混合物用乙酸乙酯（50 mL）稀釋，經過矽藻土過濾並且將濾液在真空中蒸發。將反應混合物用乙醚（50 mL）稀釋。將反應混合物經過矽藻土過濾，並且在真空中蒸發濾液，以提供呈無色油的三級丁基 4-(1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸酯（1.80 g，123%），將其直接用於下一步。1 H NMR (300 MHz, CDCl3 ) 1.33 (d, 3H), 1.46 (s, 9H), 2.45 - 2.75 (m, 4H), 3.25 - 3.60 (m, 5H), 3.72 (s, 3H). m/z (ES+), [M+H]+ = 273。步驟 2
將在水（5 mL）中的氫氧化鋰（0.158 g，6.61 mmol）溶液添加到在THF/MeOH 1 : 1（10 mL）中的4-(1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（1.80 g，6.61 mmol）的溶液中。將所得的溶液在60°C下攪拌4小時。將溶劑在真空中蒸發。將殘餘物用水（15 mL）稀釋並且凍乾，以提供2-(4-(三級-丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)丙酸鋰，（1.60 g，91%）呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, D2 O) 1.13 (d, 3H), 1.35 (s, 9H), 2.40 - 2.55 (m, 4H), 2.89 (q, 1H), 3.26 - 3.47 (m, 4H). m/z (ES+), [M+H]+ = 259。實例 1 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-基)丙醯胺
在0°C下，在氮氣下，將碳酸鉀（101 mg，0.73 mmol）添加到在DMF（5 mL）中的(S)-2-溴-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，中間體 21 （200 mg，0.37 mmol）和2-(哌𠯤-1-基)乙醇中。將所得混合物在0°C攪拌18小時，然後冷卻至室溫，經過矽藻土過濾並且在真空中蒸發。在30 mL/min流速下經7 min，使用在水（0.05% NH3 xH2 O）中的41%-58%乙腈的梯度，將產物藉由XBridge C18 OBD柱上的製備型非手性HPLC純化。將產物收集並且在真空中蒸發，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-基)丙醯胺（100 mg，50%），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.47 (d, 3H), 2.47 (s, 3H), 2,85 - 3.43 (m, 13H), 3.45 -3.60 (m, 1H), 3.86 (t, 2H), 7.06 (t, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.30 - 7.54 (m, 1H), 7.54 - 7.72 (m, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.47 (bs, 1H), 8.58 (t, 1H).m/z (ES+), [M+H]+ = 596。實例 2 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
在25°C下，將DIPEA（13.9 mL，78.08 mmol）一次性添加到在DCM（70 mL）中的(R)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽，中間體 22 （3.34 g，13.64 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （4.00 g，9.72 mmol）中。將所得到的溶液在25°C下攪拌持續10分鐘。然後在0°C下滴加1-丙烷膦酸環酐T3P（50 wt%）（12.37 g，19.44 mmol）。將該溶液在0°C下攪拌1小時，然後在真空中濃縮。將殘餘物藉由C18-快速層析純化，使用5%-60% MeOH水溶液梯度作為流動相。合併純的級分並且在真空中蒸發。使用在CO2 中的40% EtOH和40 mL/min的流速，藉由在ChiralCel OD-H（20 x 250 mm）上的製備型手性-HPLC來純化殘餘物。使用220 nm的波長檢測鏡像異構物。收集主要異構物（異構物1），以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺（1.85 g，30%），呈黃色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.26 (d, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.30 - 2.75 (m, 11H), 3.25 (s, 3H), 3.27 - 3.40 (m, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.30 - 7.48 (m, 2H), 7.48 - 7.65 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.23 - 8.40 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 11.38 (s, 1H)。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) δ -121.22. m/z (ES+), [M+H]+ = 566。 使用所示中間體重複實例2所述的程序，以給出下表17中所述的實例3-5：[ 表 17]
Figure 107101685-A0304-0006
 a 在室溫下加入T3P。b 將反應混合物蒸發至乾燥，並且重新溶於EtOAc或DCM（50 mL）中，並且用飽和NaHCO3 （2 x 100 mL）和鹽水（2 x 100 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用DCM/MeOH 10 : 1或20 : 1作為洗提液，藉由製備型TLC純化殘餘物。c 使用在IPA中的50%己烷（0.1% DEA）和20 mL/min的流速，通在過ChiralPak IA（21.2 x 150 mm，5 µm）柱上的製備型手性-HPLC純化粗產物。使用220和254 nm的波長檢測化合物。收集主要的異構物並且在真空中蒸發。d 反應時間：2小時e 在XBridge C18 OBD柱上使用遞增梯度的在水（0.05% NH3 xH2 O）中的乙腈，用非手性製備性HPLC純化。f 在20 mL/min流速下經30 min，使用在EtOH/MeOH 35 : 15中的50%己烷，在Phenomenex Lux 5u Cellulose-4，AXIA Packed（250 x 21.2 mm，5 µm）上的手性純化。使用波長254和220 nm檢測異構物。收集主要的異構物並且在真空中蒸發。g 在XBridge C18 OBD製備柱（100 Å，5 µm，19 x 250 mm）上使用遞增梯度的在水（0.1% FA）中的乙腈，用手性製備型HPLC純化，流速為20 mL/min。在220和254 nm的波長下檢測化合物。實例 6 (S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
從實例2的反應中收集異構物2並且在真空中蒸發。使用在水（0.1% FA）中的MeOH 10%-60%的梯度，藉由C18-快速層析法將殘餘物再次純化。將純的級分在真空中蒸發。使用在CO2 中的40% EtOH並且在40 mL/min流速下，在ChiralCel OD-H（20 x 250 mm）上藉由製備型SFC對殘餘物進行再純化。使用220 nm的波長檢測異構物。收集異構物2，以提供(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺（40 mg）呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.41 (d, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.49 - 2.87 (m, 8H), 3.15 (s, 3H), 3.39 (q, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.14 (dd, 1H), 7.28 - 7.38 (m, 1H), 7.53 - 7.63 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.09 (dd, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.51 - 8.61 (m, 1H)。19 F NMR (400 MHz, CD3 OD) δ -125.65. m/z (ES+), [M+H]+ = 566。實例 7 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺步驟 1
將(R)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽，中間體 26 （113.0 mg，0.42 mmol）和二(1H-咪唑-1-基)甲酮（127 mg，0.78 mmol）溶於DMF（3 mL）中，並且在室溫下攪拌1 h。添加3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （90.0 mg，0.17 mmol）並且將混合物在50°C下攪拌16小時。允許反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc（10.0 mL）稀釋並且倒入飽和的Na2 CO3 （30 mL）中。搖動該相，分離並且將水相用EtOAc（3 x 15 mL）萃取。將合併的有機萃取物藉由分相器過濾並且在真空中蒸發。在Waters Sunfire C18 ODB（5 μm，19 x 150mm）柱上使用在0.1M HCO2 H（水性）中的5%-95%乙腈的梯度（pH = 3），藉由反相製備型HPLC純化殘餘物。收集產物級分並且凍乾，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺（125 mg，104%（出現水）），呈淺黃色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.07 (s, 9H), 0.85 - 0.92 (m, 2H), 0.98 (d, 6H), 1.24 (d, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.20 - 2.33 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.64 (d, 2H), 2.72 - 2.82 (m, 2H), 3.10 (q, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.45 - 3.57 (m, 2H), 5.68 (d, 1H), 5.78 (d, 1H), 7.06 (t, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.55 (t, 1H), 8.16 - 8.22 (m, 2H), 8.28 (t, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.45 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 724。步驟 2
將(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺（97.0 mg，0.13 mmol）溶於DCM（1.3 mL）中，並且添加TFA（0.25 mL，3,37 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌60 h。將反應用DCM稀釋並且倒入飽和的NaHCO3 （10 mL）中。搖動該相，分離並且將水相用DCM（3 x 5 mL）萃取。將有機萃取物合併，藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。在120巴和140 mL/min流速下，使用在CO2 中的35% EtOH/DEA 100 : 0.5，藉由在Celbarcoat（250 x 30 mm，5 µm）柱上的手性SFC純化殘餘物。在270 nm處檢測到產物峰。收集產物並且在真空中蒸發。藉由SFC在Waters BEH（5 μm，30 x 250 mm）柱上使用在CO2 中的20 mM MeOH/NH3 流動相將殘餘物再純化。收集產物級分並且凍乾,以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例7 （21 mg，27%）。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.98 (d, 6H), 1.28 (d, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.21 - 2.35 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.62 - 2.69 (m, 2H), 2.71 - 2.81 (m, 2H), 3.19 (q, 1H), 3.25 (s, 3H), 6.98 (t, 1H), 7.35 - 7.44 (m, 2H), 7.51 - 7.58 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.25 - 8.35 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.57 (s, 1H), 11.39 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 594。實例 8 (R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
將(R)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽，中間體 26 （199 mg，0.73 mmol）和1,1'-羰基二咪唑（91 mg，0.56 mmol）溶於DMF（2 mL）中，並且在室溫下攪拌1.5 hr。添加3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 18 （202 mg，0.49 mmol）並且將反應物加熱至60°C持續3 h。允許反應物冷卻至室溫。添加DCM（25 mL）並且將有機相用8%NaHCO3 （3 x 25 mL）洗滌，用分相器乾燥並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的25%-65%乙腈的梯度，流速為100 mL/min，在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上藉由製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在229 nm處檢測化合物。收集產物並且凍乾，以獲得(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例 8 （188 mg，65%，99.4% de），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.98 (d, 6H), 1.28 (d, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.2 - 2.34 (m, 2H), 2.65 (d, 2H), 2.7 - 2.81 (m, 2H), 3.19 (q, 1H), 3.27 - 3.34 (m, 3H), 7.03 (t, 1H), 7.38 - 7.5 (m, 2H), 7.58 - 7.66 (m, 1H), 8.14 - 8.25 (m, 2H), 8.28 (d, 1H), 8.43 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 11.60 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 598.3。實例 9 (R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，異構物1步驟 1
將3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （225 mg，0.42 mmol）、2-((3S,5S)-4-(三級-丁氧基羰基)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 55 （143 mg，0.50 mmol）和吡啶（0.088 mL，1.04 mmol）溶於DCM（5.0 mL）中，並且將所得反應混合物冷卻至0°C。向冷卻的反應混合物中添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三膦烷 2,4,6-三氧化物, T3P（0.371 mL，1.25 mmol），並且使反應混合物緩慢地達到室溫。將反應攪拌16 h。將反應用水淬滅，用DCM（5 mL）稀釋，倒入10% Na2 CO3 （30 mL）中，搖動，分離各相，將水相用DCM（3 x 10 mL）萃取。將合併的有機萃取物藉由分相器過濾並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的45%-95%乙腈梯度，流速為100 mL/min，在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上藉由製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在270nm處檢測化合物。收集產物級分並且凍乾，以提供(2S,6S)-三級丁基 4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯（256 mg，76%），呈固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.08 (d, 9H), 0.78 - 0.97 (m, 2H), 1.18 - 1.31 (m, 9H), 1.39 (s, 9H), 2.32 - 2.47 (m, 5H), 2.61 - 2.78 (m, 2H), 3.18 - 3.36 (m, 4H), 3.42 - 3.57 (m, 2H), 3.77 - 3.89 (m, 2H), 5.70 (d, 1H), 5.75 - 5.86 (m, 1H), 7.06 (t, 1H), 7.27 - 7.45 (m, 2H), 7.55 (t, 1H), 8.14 - 8.23 (m, 2H), 8.27 (t, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 9.53 (d, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 810。步驟 2
向溶於DCM（2.0 mL）中的(2S,6S)-三級丁基4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯（179.8 mg，0.22 mmol）中添加TFA（0.5 mL，6.73 mmol），並且將混合物在室溫下攪拌96 h。將反應用DCM稀釋，藉由添加水淬滅，倒入飽和NaHCO3 （10 mL）中，搖動，分離各相，並且將水相用EtOAc（3 x 5 mL）萃取。將合併的有機萃取物藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。異構物藉由手性SFC在Chiralpak IB（250 x 30 mm，5 µm）柱上使用在CO2 中的30% EtOH/DEA 100 : 0.5、在120巴和150 mL/min流速下分離。收集異構物1並且在真空中蒸發，以獲得(R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺異構物1，實例9 （ 5 0 mg，41%，97% ee）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 1.22 - 1.33 (m, 6H), 1.39 (d, 3H), 2.19 - 2.36 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.69 - 2.8 (m, 2H), 3.14 - 3.28 (m, 4H), 3.29 - 3.41 (m, 2H), 6.77 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 7.20 - 7.31 (m, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.50 (t, 1H), 7.73 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.99 (t, 1H), 9.83 (s, 1H), 11.45 (s, 1H)。有一個可交換的質子沒有觀察到。實例 10 (S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺
收集來自實例9步驟2合成的異構物2並且在真空中蒸發，以獲得(S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例 10 （48 mg，36%，90% ee）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 1.24 - 1.32 (m, 6H), 1.35 (d, 3H), 2.33 - 2.47 (m, 5H), 2.61 - 2.78 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 3.33 - 3.44 (m, 3H), 6.79 (d, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.2 - 7.31 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.50 (t, 1H), 7.72 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.99 (t, 1H), 9.87 (s, 1H), 11.45 (s, 1H)。有一個可交換的質子沒有觀察到。實例 11 (R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物1步驟 1
將3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 18 （318 mg，0.77 mmol）、2-((3S,5S)-4-(三級 - 丁氧基羰基 )-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 55 （235 mg，0.80 mmol）和DIPEA（0.535 mL，3.06 mmol）溶於DMF（2 mL）中，並且添加2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)（306 mg，0.80 mmol）。將反應物加熱至50°C持續1.5小時，並且然後冷卻至環境溫度。將反應混合物用DCM（25 mL）和5% Na2 CO3 （水性）（25 mL）稀釋，搖動並且分離各相。將水相用DCM（2 x 25 mL）萃取。將合併的有機相用Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的45%-85%乙腈的梯度，經20分鐘，流速為100 mL/min，在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上藉由製備型HPLC純化化合物。藉由UV在230 nm處檢測化合物。收集產物並且凍乾。在120巴下並且在70 ml/min流速下，使用在CO2 中的35% EtOH/DEA 100 : 0.5作為洗提液，藉由使用Celbarcoat（250 x 20 mm，5 µm）柱上的手性SFC將非對應異構物分離。在300 nm檢測到非鏡像異構物。收集第一洗提化合物並且作為異構物1在真空中蒸發。將殘餘物溶於乙腈/水中並且凍乾，以獲得(2S,6S)-三級丁基 4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯 異構物1（62.0 mg，25.3%，99.9% de），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.19 - 1.34 (m, 9H), 1.39 (s, 9H), 2.40 (dd, 2H), 2.75 (dd, 2H), 3.26 - 3.37 (m, 4H), 3.75 - 3.87 (m, 2H), 7.04 (t, 1H), 7.39 - 7.51 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 8.14 - 8.25 (m, 2H), 8.28 (d, 1H), 8.44 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 11.54 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 684.3。步驟 2
將 (2S,6S)-4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（62 mg，0.09 mmol）溶於DCM（4 mL）中，並且添加TFA（1 mL，12.98 mmol）。將反應在室溫下攪拌1 h，然後在真空中蒸發。將殘餘物溶於DCM（25 mL）、8% NaHCO3 （水性）（25 mL）中，搖動並且將該相分離。將水相用DCM（25 mL）萃取。將合併的有機相用相分離器乾燥並在真空中蒸發。藉由SFC在Waters BEH 2-EP（5 μm，30 x 250 mm）柱上使用MeOH/NH3 20 mM作為洗提液純化殘餘物。收集產物並且在真空中蒸發，以獲得(R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例 11 （32.7 mg，61.8%）。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.06 (d, 6H), 1.26 (d, 3H), 2.12 - 2.21 (m, 2H), 2.61 (dd, 2H), 3.06 - 3.14 (m, 2H), 3.20 (q, 1H), 3.30 (s, 3H), 7.03 (t, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.59 - 7.65 (m, 1H), 8.16 - 8.24 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.43 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 11.63 (bs, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 584.2。實例 12 (S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物2步驟 1
收集來自實例11步驟1的反應的第二洗提化合物並且在真空中蒸發。將殘餘物溶於乙腈/水中-白色固體崩散。將固體過濾，用乙腈/水洗滌並且在真空中乾燥，以獲得(2S,6S)-三級丁基4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯 異構物2（89 mg，36.3%，99.3% de），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.18 - 1.31 (m, 9H), 1.39 (s, 9H), 2.44 (dd, 2H), 2.69 (dd, 2H), 3.26 - 3.36 (m, 3H), 3.49 (q, 1H), 3.78 - 3.89 (m, 2H), 7.03 (t, 1H), 7.38 - 7.51 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 8.15 - 8.24 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.44 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.73 (s, 1H), 11.60 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 684.2。步驟 2
將三級丁基 (2S,6S)-4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯 異構物2（89 mg，0.13 mmol）溶於DCM（4 mL）中，並且添加TFA（1 mL，12.98 mmol）。將反應在室溫下攪拌1 h並且然後在真空中蒸發。將殘餘物溶於DCM（25 mL）、8% NaHCO3 （水性）（25 mL）中，搖動並且將各相分離。將水相用DCM（25 mL）萃取。將合併的有機相用相分離器乾燥並在真空中蒸發。將殘餘物溶於DMSO中，並且藉由SFC在Waters BEH 2-EP（5 μm，30 x 250 mm）柱上使用MeOH/NH3 20 mM作為洗提液純化。收集產物並且在真空中蒸發，以提供(S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例 12 （32.4 mg，42.6%）。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.06 (d, 6H), 1.19 (d, 3H), 2.21 (dd, 2H), 2.52 - 2.59 (m, 2H), 3.08 - 3.17 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.37 - 3.5 (m, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.58 - 7.67 (m, 1H), 8.13 - 8.23 (m, 2H), 8.26 (d, 1H), 8.43 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 11.67 (bs, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 584.2。實例 13 (S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺,
在15°C下，在氮氣下，將DIPEA（2.54 mL，14.58 mmol）添加到在DCM（50 mL）中的2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁酸鋰，中間體 65 （1.81 g，9.72 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （2.00 g，4.86 mmol）中。將該混合物攪拌10 mins，在0°C下滴加T3P（在EtOAc中50%）（6.18 g，9.72 mmol），並且將反應在0°C下攪拌1小時。然後將溶劑在真空中濃縮。使用在水（NH4 HCO3 ）中的5%-80% MeOH梯度，藉由快速C18快速層析法純化殘餘物。將純級分蒸發至乾。在SunFire製備型C18 OBD柱（5 µm，30 x 100 mm）上使用極性逐漸降低的乙腈中的水混合物（含有NH4 HCO3 ）作為洗提液，藉由製備型HPLC將殘餘物再純化。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。使用在CO2 中的50% IPA（0.1% DEA）並且在150 mL/min流速下，藉由在ChiralPak AD-H（50 x 250 mm，5 µm）柱上的製備型手性SFC將鏡像異構物分離。使用UV在254 nm處檢測鏡像異構物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺，實例13 （200 mg，7%，96.4% ee），呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.05 (t, 3H), 1.77 - 1.99 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.45 - 2.90 (m, 8H), 3.11 - 3.23 (m, 4H), 7.02 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.52 - 7.62 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.06 - 8.15 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.51 - 8.61 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (400 MHz, CD3 OD) δ -125.77. m/z (ES+), [M+H]+ = 580。實例 14 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺
收集來自實例13的合成的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺異構物2，實例 14 （200 mg，7%，92.8% ee），呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.05 (t, 3H), 1.77 - 1.99 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.45 - 2.95 (m, 8H), 3.11 - 3.23 (m, 4H), 7.02 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.52 - 7.62 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.06 - 8.15 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.51 - 8.61 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (400 MHz, CD3 OD) δ -125.72. m/z (ES+), [M+H]+ = 580。使用所示中間體重複上述實例 13 和 14 的程序，以給出下表 18 中所述的實例 15-18 ： [ 表 18]
Figure 107101685-A0304-0007
 a 不使用反相HPLC純化。b 使用在CO2 中的50% MeOH（0.1% DEA）作為流動相並且在150 mL/min流速下，藉由在Chiralpak AS-H（50 x 250mm，5 µm）柱上的手性SFC將該等異構物分離。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。c DMF作為溶劑使用。d 在XBridge Prep C18 OBD 柱（5 µm，19 x 150 mm）上，極性降低的使用在乙腈中的水混合物（含有0.1%甲酸）作為洗提液，藉由製備型HPLC純化該化合物。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。e 使用在CO2 中的45% IPA（0.1% DEA）並且在40 mL/min流速下，藉由在ChiralPak AD-H（20 x 250 mm，5 µm）柱上的製備型手性SFC將該等異構物分離。使用UV在220 nm處檢測異構物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。實例 19 (S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺
在氮氣下，將3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （300mg，0.73 mmol）添加到在DCM（1 mL）中的2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丁酸鋰，中間體 49 （313 mg，1.46 mmol）、1-丙烷膦酸環酐，T3P（在EtOAc中50%）（928 mg，1.46 mmol）和DIPEA（1.019 mL，5.83 mmol）中。將所得的溶液在25°C下攪拌1小時。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，用飽和NaHCO3 （2 x 100 mL）、鹽水（2 x 100 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物藉由製備型TLC使用DCM/MeOH 10 : 1進行純化。將產物級分在真空中蒸發。使用在己烷中的50% IPA（0.1% DEA）作為流動相並且在15 mL/min流速下，藉由在ChiralPak-AD-H-SL001（20 x 250 mm) 柱上的製備型手性HPLC將非鏡像異構物分離。使用UV在254和220 nm處檢測非鏡像異構物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺，實例 19 （30 mg，24%，99.9% ee），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.07 (t, 3H), 1.17 (d, 6H), 1.75 - 1.98 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.52 - 2.70 (m, 2H), 2.89 (dd, 2H), 2.93 - 3.10 (m, 2H), 3.11 - 3.25 (m, 4H), 7.03 (t, 1H), 7.17 (dd, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.54 - 7.64 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 8.10 (dd, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.52 - 8.62 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -121.25. m/z (ES+), [M+H]+ = 608。實例 20 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺
收集來自實例19合成的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)丁醯胺異構物2，實例20 (5 mg，4%，90% ee），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.09 (t, 3H), 1.25 - 1.45 (m, 6H), 1.70 - 1.98 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.98 - 3.13 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.15 - 3.60 (m, 5H), 7.03 (t, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.53 - 7.65 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.50 - 8.65 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d 6 ) δ -121.11. m/z (ES+), [M+H]+ = 608。使用所示中間體重複上述實例 19 和實例 20 的步驟，以給出下表 19 中所述的實例 21-23 ： [ 表 19]
Figure 107101685-A0304-0008
 a 使用在水（0.05%NH3 H2 O）中的30%-55%乙腈的梯度並且在30 mL/min流速下洗提，藉由在XBridge Prep C18 OBD 柱（5 µm，19 x 150 mm）上的製備型HPLC再次純化殘餘物。在220和254 nm的波長下檢測到該化合物。收集含有所需化合物的級分並且在真空中蒸發。b 使用己烷（0.1% DEA）/EtOH/MeOH 50 : 35 : 15和220 mL/min流速，藉由在Phenomenex Lux 5u Cellulose-4, AXIA Packed（250 x 21.2 mm，5 µm）柱上的製備型手性HPLC將該等異構物分離。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。c 在XBridge Prep C18 OBD 柱（5 µm，19 x 150 mm）上，使用極性逐漸降低的在乙腈中的水混合物（含有0.1%NH4 HCO3 ）作為洗提液，藉由製備型HPLC純化。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。實例 24 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺步驟 1
在氮氣下，將DIPEA（0.637 mL，3.65 mmol）添加到在DMF（10 mL）中的3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （500 mg，1.22 mmol）、2-(4-(三級 - 丁氧基羰基 )哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 66 （ 6 28 mg，2.43 mmol）、EDC（349 mg，1.82 mmol）和HOBT（279 mg，1.82 mmol）中。將所得的溶液在25°C下攪拌15小時。將反應混合物倒入水（75 mL）中，用EtOAc（2 x 75 mL）萃取。將合併的有機層用鹽水（3 x 100 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用DCM/MeOH 8 : 1，將殘餘物藉由製備型TLC純化，以提供4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（440 mg，55.6%），呈淺黃色固體。m/z (ES+), [M+H]+ = 652。步驟 2
在20°C下，將TFA（0.050 mL，0.64 mmol）逐滴添加到在DCM（20 mL）中的4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（420 mg，0.64 mmol）中。將所得的溶液在20°C下攪拌2小時。將溶劑在真空中蒸發。將殘餘物用DCM（50 mL）稀釋，用NaHCO3 （2 x 50 mL）洗滌，並且在真空中蒸發有機層。使用100%MeOH（0.1% DEA）作為洗提液和20 mL/min流速，藉由在Phenomenex Lux 5u Cellulose-4，AXIA Packed（250 x 21.2 mm，5 µm）上的製備型手性HPLC將鏡像異構物分離。在254和220 nm的波長下檢測到異構物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺 異構物1，實例24 （53 mg，27%，99.9% ee），呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.26 (d, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.45 - 2.65 (m, 4H), 2.73 - 2.85 (m, 4H), 3.22 - 3.40 (m, 4H), 6.98 (t, 1H), 7.35 - 7.50 (m, 2H), 7.50 - 7.62 (m, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.25 - 8.37 (m, 2H), 9.18 (s, 1H), 9.73 (s, 1H), 11.48 (bs, 1H)。有一個可交換的質子沒有觀察到。19 F NMR (376 MHz, DMSO-d6 ) -121.21.m/z (ES+), [M+H]+ = 552。實例 25 (S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺
收集來自實例24步驟2的反應的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例25 （47 mg，24%，92.6% ee），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.25 (d, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.43 - 2.65 (m, 4H), 2.68 - 2.85 (m, 4H), 3.22 - 3.40 (m, 4H), 6.97 (t, 1H), 7.35 - 7.50 (m, 2H), 7.50 - 7.62 (m, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.25 - 8.37 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 11.43 (bs, 1H)。有一個可交換的質子沒有觀察到。19 F NMR (282 MHz, DMSO-d6 ) -121.20.m/z (ES+), [M+H]+ = 552。實例 26 (R)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺步驟 1
在25°C下，將DIPEA（1.02 mL，5.83 mmol）一次性添加到在DCM（5 mL）中的2-((3R,5R)-4-(三級-丁氧基羰基)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)丁酸鋰，中間體 56 （438 mg，1.46 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （300 mg，0.73 mmol）中。將所得溶液在25°C下攪拌10 mins。在0°C下滴加1-丙烷膦酸環酐T3P（928 mg，1.46 mmol），並且將反應物攪拌1小時。將該反應混合物在真空中濃縮。使用MeOH/DCM 1 : 10，將殘餘物藉由製備型TLC進行純化，以提供(2R,6R)-三級丁基4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯（200 mg，39.5%），呈黃色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.03 - 1.11 (m, 3H), 1.18 - 1.52 (m, 15H), 1.81 - 1.92 (m, 2H), 2.35 - 2.80 (m, 5H), 2.82 - 2.93 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.75 - 3.99 (m, 2H), 4.08 - 4.21 (m, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.18 (dd, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.52 - 7.61 (m, 1H), 7.91 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.51 - 8.61 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。非鏡像異構物混合物。 m/z (ES+), [M+H]+ = 694。步驟 2
在25°C下，將TFA（5 mL，64.90 mmol）添加到在DCM（20 mL）中的(2R,6R)-三級丁基4-(1-((3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸酯（370 mg，0.53 mmol）中，將所得混合物在室溫下攪拌2小時。將溶劑在真空中濃縮。在30 mL/min流速下經7分鐘，使用在水（0.03% NH3 H2 O）中的30-50%乙腈的梯度，藉由在XBridge Prep C18 OBD柱（5 μm，19 x 150 mm）上的反相製備層析法將殘餘物純化。使用220和254 nm的波長檢測化合物。使用在己烷中的50% EtOH（0.1% DEA），在15 mL/min流速下經85 min，藉由在ChiralPak-AD-H-SL001（20 x 250 mm）上的製備型手性HPLC將非鏡像異構物分離。使用220和254 nm的波長檢測化合物。收集第一洗提化合物並且在真空中蒸發，以提供R-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺，實例26 （78 mg，28%，99.0% ee）。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.09 (t, 3H), 1.41 (d, 6H), 1.80 - 2.00 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.77 (dd, 2H), 3.07 (dd, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.28 - 3.40 (m ,1H), 3.55 - 3.72 (m, 2H), 7.02 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.53 - 7.62 (m, 1H), 7.92 (d, 1H), 8.05 - 8.13 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.40 - 8.49 (m, 2H), 8.50 - 8.60 (m, 1H)。19 F NMR (376 MHz, CD3 OD) δ -125.59. m/z (ES+), [M+H]+ = 594。實例 27 (S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺
收集來自實例26步驟2的反應的第二洗提化合物並且在真空中蒸發，以提供(S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺實例 27 （30.0 mg，13%，99.9% ee），呈白色固體。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.07 (t, 3H), 1.22 (d, 6H), 1.80 - 1.93 (m, 2H), 2.40 - 2.58 (m, 5H), 2.81 (dd, 2H), 3.07 - 3.18 (m, 4H), 3.19 - 3.29 (m, 2H), 7.03 (t, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.53 - 7.63 (m, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.05 - 8.15 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.52 - 8.62 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。m/z (ES+), [M+H]+ = 594。用指定的中間體重複上述實例 26 和 27 的過程，以給出下表 20 中所述的實例 28-33 ： [ 表 20]
Figure 107101685-A0304-0009
 a 將來自步驟1的反應混合物用EtOAc或DCM（300 mL）稀釋，用水（150 mL）和鹽水（125 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用DCM/MeOH 20 : 1或30 : 1，藉由製備型TLC純化殘餘物。b 使用己烷 : EtOH : MeOH 50 : 35 : 15作為流動相和20 mL/min流速，藉由在Phenomenex Lux 5u Cellulose-4，AXIA Packed（250 x 21.2 mm，5 µm）柱上的製備型手性HPLC將異構物分離。使用波長254和220 nm檢測化合物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。c 步驟2：使用在水（10 mmol/L NH4 HCO3 ）中的15%-45%乙腈作為流動相在和25 mL/min流速，藉由在XBridge Shield RP18 OBD柱（5 µm，19 x 150 mm）上的製備型HPLC純化。使用波長254和220 nm檢測化合物。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。d 使用100% MeOH（0.1% DEA）作為流動相,並且以20 mL/min的流速經21 min，藉由在(R,R)-WHELK-O1-Kromasil（50 x 250 mm，5 µm）上的製備性手性HPLC將異構物分離。使用254和220 nm的波長檢測異構物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。e 步驟2：在XBridge Prep C18 OBD柱（5 µm，19 x 150 mm）上，使用極性逐漸降低的在乙腈中的水混合物（含有0.05%甲酸）作為洗提液，藉由製備型HPLC純化。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。實例 34 (S)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
將3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 48 （430 mg，2.06 mmol）、2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)（785 mg，2.06 mmol）和DIPEA（1.068 mL，6.11 mmol）溶於DMF（10 mL）中，並且在室溫下攪拌5 min，並且然後添加3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 18 （635 mg，1.53 mmol）。將反應在室溫下攪拌2 h，然後用DCM（75 mL）和5% Na2 CO3 （水性）（50 mL）稀釋，搖動並且將各相分離。將水相用DCM（2 x 50 mL）萃取。將合併的有機相用分相器乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的15%-65%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化化合物。藉由UV在220 nm處檢測化合物。收集產物峰並且凍乾。然後從乙腈中結晶，並且藉由過濾收集固體，用最少量的乙腈洗滌並且在真空中乾燥。在150巴和140 mL/min流速下，使用在CO2 中的25% IPA/DEA 100 : 0.5，藉由在CelluCoat（250 x 30 mm，5 µm）柱上的手性SFC將鏡像異構物分離。藉由UV在270 nm處檢測鏡像異構物。收集第一洗提鏡像異構物並且凍乾，以提供N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例34 （213 mg，23%，99.9% ee），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.14 (s, 3H), 2.24 - 2.44 (m, 4H), 2.56 - 2.67 (m, 2H), 2.68 - 2.8 (m, 2H), 3.24 - 3.35 (m, 6H), 3.50 (t, 1H), 3.67 (dd, 1H), 3.79 (dd, 1H), 7.04 (t, 1H), 7.41 - 7.55 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 8.19 (t, 1H), 8.22 - 8.32 (m, 2H), 8.44 (d, 1H), 9.46 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 11.47 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 600.2。實例 35 (R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
收集來自實例34的第二洗提鏡像異構物並且凍乾。藉由攪拌在EtOH/水（3 : 1）（5 mL）中的懸浮液將殘餘物重結晶，使用油浴加熱至70°C並且添加種晶。然後將油浴溫度設定為23°C，並且允許懸浮液緩慢達到室溫。繼續攪拌5天，以給出含有短針狀晶體的乳白色漿狀物，混合有較長的針狀晶體。在攪拌下將懸浮液加熱至70°C，然後關閉加熱和攪拌，並且允許混合物緩慢達到室溫（2x）。只有完好的長針形晶體。在不攪拌的情況下將懸浮液靜置一週。在40°C下，將固體濾出並且在真空中乾燥，以提供呈白色針狀晶體的(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例35 （186 mg，20%，99.4% ee）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.14 (s, 3H), 2.23 - 2.45 (m, 4H), 2.57 - 2.67 (m, 2H), 2.69 - 2.78 (m, 2H), 3.26 - 3.34 (m, 6H), 3.50 (t, 1H), 3.67 (dd, 1H), 3.79 (dd, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.4 - 7.55 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 8.13 - 8.33 (m, 3H), 8.44 (d, 1H), 9.46 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 11.48 (s, 1H).19 F NMR (470 MHz, DMSO-d6 ) δ -120.52, -147.75. m/z (ES+), [M+H]+ = 600.5。
將實例35的樣品安放在單晶矽（SSC）晶片固定件上，並且用θ-θ PANalytical X’Pert PRO記錄粉末X射線繞射（X射線的波長為1.5418Å，鎳過濾的銅輻射，電壓為45 kV，燈絲發射40 mA）。使用自動可變發散和抗散射狹縫並且使該等樣品在測量期間旋轉。使用PIXCEL探測器（有效長度3.35° 2θ），使用0.013°步長和233秒步長測量時間從2-50°2θ掃描樣品。晶體的特徵峰位置在下面的表21中列出（由XRPD確定）並且如圖 1 所示 : [ 表 21] -實例35的五個最大特徵峰：
Figure 107101685-A0304-0010
 熟習該項技術者將會理解，本文呈現的繞射圖數據不應被解釋為絕對的並且提供與在此揭露的那些基本上一致的粉末繞射圖的任何結晶形式落入本文揭露的範圍內（對於進一步的資訊參見Jenkins, R & Snyder, R.L.“X射線粉末繞射導論（Introduction to X-Ray Powder Diffractometry）”，John Wiley & Sons出版社，1996）。實例 36 (S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺
將HATU((1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽)（832 mg，2.19 mmol）添加到在DMF（1 mL）中的3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （300 mg，0.73 mmol）、2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁酸鋰，中間體 58 （511 mg，2.55 mmol）和DIPEA（1.273 mL，7.29 mmol）中。將所得的溶液在25°C下攪拌16小時。使用在水（0.03% NH3 H2 O）中的30%-55%乙腈的梯度作為洗提液和30 mL/min流速，藉由在XBridge Prep C18 OBD柱（5μm，19 x 150mm）上的反相製備層析法純化粗產物。使用220和254 nm的波長檢測化合物。使用在CO2 中的50% MeOH/乙腈1 : 1（0.1% DEA）和50 mL/min流速，藉由在(R,R)WHELK-01 5/100 Kromasil（250 x 21.1 mm）柱上的手性SFC將鏡像異構物分離；使用220 nm的波長檢測化合物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺，實例36 （40 mg，6%，99.9% ee）。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.08 (t, 3H), 1.72 - 2.02 (m, 4H), 2.38 - 2.50 (m, 6H), 2.70 - 2.85 (m, 4H), 2.88 - 3.10 (m, 4H), 3.15 (s, 3H), 3.27 - 3.40 (m, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.26 (d, 1h), 7.34 (t, 1H), 7.52 - 7.65 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.08, (d, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.52 - 8.63 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (376 MHz, CD3 OD) δ -125.64. m/z (ES+), [M+H]+ = 594。實例 37 (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺
收集來自實例36合成的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺，（40 mg，6%，99.9% ee）。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 1.07 (t, 3H), 1.73 - 2.03 (m, 4H), 2.39 - 2.49 (m, 6H), 2.68 - 2.83 (m, 4H), 2.88 - 3.09 (m, 4H), 3.15 (s, 3H), 3.27 - 3.40 (m, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.25 (d, 1h), 7.34 (t, 1H), 7.52 - 7.62 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.08, (d, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.50 - 8.63 (m, 1H)。沒有觀察到可交換的質子。19 F NMR (376 MHz, CD3 OD) δ -125.70。 m/z (ES+), [M+H]+ = 594。使用所示中間體重複上述實例 36 和 37 的程序 ，以給出下表22中所述的實例 38-45 ： [ 表 22]
Figure 107101685-A0304-0011
 a 將反應混合物倒入水（50 mL）中並且用EtOAc（2 x 75 mL）萃取。將合併的有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用石油醚/EtOAc 10 : 1，將殘餘物藉由製備型TLC純化。b 使用在水（0.03% NH3 H2 O）中的35%-50%乙腈和20 mL/min的流速，在Sunfire Prep C18 OBD柱（19 x 150 mm，5 µm）上，藉由反相製備型層析法純化粗品。c 使用極性逐漸降低的在乙腈中的水混合物（含有0.5%甲酸）作為洗提液，在XBridge Prep C18 OBD 柱（5µm，19 x 150 mm）上，藉由製備型HPLC純化。將含有所需化合物的級分在真空中蒸發。d 使用在EtOH/MeOH 35 : 15中的50%己烷（0.1% DEA）作為流動相和20 mL/min流速，藉由在Phenomenex Lux 5u Cellulose-4，AXIA Packed （250 x 21.2 mm，5 µm）柱上的製備型手性HPLC將異構物分離。使用波長254和220 nm檢測異構物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。e 使用DCM/MeOH 10 : 1、8 : 1或7 : 1，將殘餘物藉由製備型TLC進行純化。f 使用100% MeOH和18 mL/min流速，藉由在Chiralpak IC（20 x 250 mm，5µm）上的製備型手性HPLC將異構物分離。使用波長254和220 nm檢測化合物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。g 使用100% MeOH（用DEA改性）作為流動相，藉由在ChiralPak IA（21.2 x 150 mm，5 µm）上的製備型手性HPLC分離異構物。收集所需的異構物並且在真空中蒸發。實例 46 (R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺
將2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙酸二鹽酸鹽，中間體 47 （175 mg，0.68 mmol）和CDI（84 mg，0.52 mmol）溶於DMF（2 mL）中，並且在室溫下攪拌1.5 h。添加3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 18 （187 mg，0.45 mmol）並且將反應加熱至60°C持續4 h。允許反應物冷卻至室溫。添加DCM（25 mL）並且將有機相用8% NaHCO3 （3 x 25 mL）洗滌，用分相器乾燥並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的25%-70%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化化合物。藉由UV在228 nm處檢測化合物。收集產物並且凍乾。在120巴下使用在CO2 中的40% IPA/DEA100 : 0.5作為洗提液和140 ml/min流速，藉由藉由CelluCoat（250 x 30 mm，5 µm）柱上的手性SFC將鏡像異構物分離。藉由UV在270 nm處檢測化合物。收集第一洗提化合物並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的25%-70%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。將化合物藉由UV在228 nm處檢測。收集產物級分並且凍乾以獲得(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺，實例46 （40 mg，30%，99.9% ee），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.25 (d, 3H), 1.71 - 1.82 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.52 - 2.67 (m, 4H), 2.77 - 2.89 (m, 4H), 3.23 - 3.39 (m, 3H), 3.57 (q, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.37 - 7.51 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 8.13 - 8.24 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.44 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.77 (s, 1H), 11.61 (bs, 1H).19 F NMR (470 MHz, DMSO-d6 ) δ -120.55, -147.73. m/z (ES+), [M+H]+ = 584.4。實例 47 (S)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺步驟 1
將3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （300 mg，0.55 mmol）和2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 69 （103 mg，0.55 mmol）懸浮於DCM（5 mL）中，並且添加吡啶（0.134 mL，1.66 mmol）。將混合物冷卻至0°C並且逐滴添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三膦烷2,4,6-三氧化物, T3P（0.989 mL，1.66 mmol）。將反應混合物在22°C下攪拌1 h。添加另一部分2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 53 （20 mg，0.11 mmol）和T3P（200 µL, 0.34 mmol）。將該混合物攪拌30 min。將反應混合物用DCM（15 mL）稀釋，並且用飽和NaHCO3 （5 mL）淬滅，並且在室溫下攪拌5 min。將有機層分離並且將水層用DCM（2x5 mL）萃取。將合併的有機相經MgSO4 乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，以提供2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺（377 mg，96%）。 m/z (ES+), [M+H]+ = 710.5。步驟 2
將2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺（335 mg，0.47 mmol）溶於DCM(3.5 mL）中，用冰浴冷卻，並且添加TFA（1.083 mL，14.16 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。添加DCM（5 mL），隨後添加TFA（1 mL）並繼續攪拌5 h。然後將反應混合物在40°C下加熱過夜。添加DCM（25 mL），然後添加NaHCO3 （10 mL）和MeOH（1 mL）。將有機層分離並將水層用DCM（2 x 20 mL）萃取。將合併的有機相經MgSO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。將殘餘物重新溶解於DCM（25 mL）、飽和NaHCO3 （10 mL）和MeOH（1 mL）中，搖動並且將有機層分離。將水層用DCM（2 x 20 mL）萃取。將合併的有機相經MgSO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處收集化合物並且在真空中蒸發。在120巴下使用在CO2 中的35% EtOH/TEA 100 : 0.5作為流動相和80 mL/min流速，藉由在Chiralpak IB（30 x 250 mm，5 µm）柱上的手性SFC將非鏡像異構物分離。藉由UV在260 nm處檢測化合物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例47 （20 mg，8%，99.9% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.03 (d, 3H), 1.30 (d, 3H), 1.86 (t, 1H), 2.07 - 2.23 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.54 - 2.63 (m, 2H), 2.68 - 2.78 (m, 1H), 2.79 - 2.91 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.69 (q, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.32 - 7.47 (m, 2H), 7.49 - 7.61 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.22 - 8.35 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 11.38 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 580.4。實例 48 (R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺
收集來自實例 47 步驟2的反應的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺（22 mg，9%，99.2% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.11 (d, 3H), 1.16 (d, 3H), 2.02 (t, 1H), 2.11 - 2.23 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.44 - 2.49 (m, 1H), 2.54 - 2.66 (m, 3H), 2.66 - 2.78 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.76 - 3.89 (m, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.51 - 7.59 (m, 1H), 8.00 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.23 - 8.36 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 11.37 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 580.4。實例 49 (R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺
將(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸二鹽酸鹽，中間體 27 （573 mg，2.21 mmol）和CDI（275 mg，1.70 mmol）在DMF（2 mL）中、在室溫下攪拌1 h（氣體逸出）。添加溶於DMF（2 mL）中的3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 18 （816 mg，1.47 mmol）並且將反應物在50°C下攪拌5 h。將反應用DCM（25 mL）和5% Na2 CO3 （水性）（25 mL）稀釋，搖動並且將各相分離。將水相用DCM（2 x 25 mL）萃取。將合併的有機相用分相器乾燥並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的15%-65%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在235 nm處檢測化合物。將產物凍乾，以提供(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例49 （234 mg，32%），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.11 (d, 3H), 1.16 (d, 3H), 2.02 (t, 1H), 2.1 - 2.23 (m, 4H), 2.42 - 2.54 (m, 1H), 2.54 - 2.67 (m, 3H), 2.67 - 2.78 (m, 1H), 3.25 - 3.36 (m, 3H), 3.77 - 3.88 (m, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.57 - 7.68 (m, 1H), 8.15 - 8.24 (m, 2H), 8.29 (d, 1H), 8.43 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 11.55 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 584.3。實例 50 (S)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺
將3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （387 mg，0.94 mmol）和2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丁酸二鹽酸鹽，中間體 46 （300 mg，1.10 mmol）懸浮於無水DCM（25 mL）中並且添加吡啶（0.3 mL，3.71 mmol）。將混合物在冰浴中冷卻至0°C並且逐滴添加T3P（1.5 mL，2.52 mmol）。將冰浴除去，並且將反應混合物在23°C下攪拌20 min。將反應混合物用飽和NaHCO3 （20 mL）淬滅並且在23°C下攪拌30 min。將有機層分離並且將水相用DCM（2 x 20 mL）萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-70%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經25分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。收集第一洗提異構物並且凍乾，以提供(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺，實例50 （ 2 05 mg，37%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.97 (t, 3H), 1.10 (d, 3H), 1.65 - 1.77 (m, 2H), 1.77 - 1.87 (m, 1H), 1.91 - 2.01 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.55 - 2.67 (m, 2H), 2.67 - 2.77 (m, 1H), 2.81 - 2.94 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.55 (t, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.5 - 7.58 (m, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.24 - 8.34 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 11.20 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 594.4。實例 51 (R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺
收集來自實例50反應的第二洗提異構物並且凍乾，以提供(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺，實例51（210 mg，38%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.95 (t, 3H), 1.13 (d, 3H), 1.57 - 1.69 (m, 1H), 1.72 - 1.86 (m, 1H), 2.00 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 2.23 (m, 4H), 2.38 - 2.58 (m, 6H), 2.72 - 2.81 (m, 1H), 2.81 - 2.91 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.44 - 3.53 (m, 1H), 6.98 (t, 1H), 7.35 - 7.45 (m, 2H), 7.51 - 7.6 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.24 - 8.36 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 11.32 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 594.4。使用所示中間體重複上述實例 50-51 的程序，以給出下表 23 中所述的實例 52-57 [ 表 23]
Figure 107101685-A0304-0012
 a 分部分地添加更多的T3P。b 在0°C下1 h後，在室溫下，經3小時將DIPEA（0.9 mL，5.15 mmol）和另外的T3P（3.0 mL，5.04 mmol）分小份添加到反應混合物中。實例 58 (R)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺步驟 1
將3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （210 mg，0.39 mmol）和2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 51 （97 mg，0.44 mmol，~84%wt）懸浮於DCM（10 mL）中，並且添加吡啶（0.10 mL，1.24 mmol）。將該混合物冷卻至0°C並且逐滴滴加T3P（0.9 mL，1.51 mmol，在EtOAc中50%wt）。將反應混合物在22°C下攪拌1小時。添加2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 51 （24 mg，0.11 mmol），隨後添加T3P（0.2 mL，0.34 mmol）並且將反應混合物在22°C下攪拌30 min。將反應混合物用飽和NaHCO3 （20 mL）淬滅並且22在°C下攪拌15 min。將有機層分離並且將水層用DCM（2 x 10 mL）萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。在120巴和140 mL/min流速下，使用在CO2 中的32% EtOH/DEA 100 : 0.5，藉由CelluCoat（5 µm，250 x 30 mm）柱上的手性SFC將非鏡像異構物分離。藉由UV在220 nm處檢測化合物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物1（125 mg，45%，99.9% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.09 (s, 9H), 0.77 - 0.89 (m, 1H), 0.92 - 1.17 (m, 4H), 1.25 (d, 3H), 1.81 - 1.95 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.22 - 2.34 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.43 - 2.62 (m, 3H), 2.67 - 2.86 (m, 2H), 3.07 - 3.65 (m, 6H), 5.72 (d, 1H), 5.87 (d, 1H), 7.05 (t, 1H), 7.35 - 7.48 (m, 2H), 7.51 - 7.6 (m, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.23 - 8.31 (m, 1H), 8.31 - 8.41 (m, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.86 (s, 1H)。步驟 2
將2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物1（123 mg，0.17 mmol）溶於無水DCM（2 mL）中並且添加TFA（3 mL）。將反應混合物在環境溫度下攪拌19 h。添加DCM（10 mL），然後添加NaHCO3 （10 mL）和MeOH（1 mL）。將有機層分離並且將水層用DCM/MeOH 5 : 1（2 x 6 mL）的混合物萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。收集產物並且凍乾，以提供(R)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例58 （63 mg，63%），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.03 (d, 3H), 1.30 (d, 3H), 1.86 (t, 1H), 2.08 - 2.22 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.46 - 2.62 (m, 2H), 2.68 - 2.78 (m, 1H), 2.79 - 2.91 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.69 (q, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.33 - 7.45 (m, 2H), 7.5 - 7.59 (m, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.25 - 8.36 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.64 (s, 1H), 11.36 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 580.3。實例 59 (S)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物2步驟 1
收集來自實例58步驟1的反應的第二洗提異構物並且在真空中蒸發以提供2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物2（120 mg，43%，99.7% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.09 (s, 9H), 0.81 - 0.91 (m, 1H), 0.95 - 1.16 (m, 7H), 1.95 (t, 1H), 2.03 - 2.18 (m, 4H), 2.33 - 2.43 (m, 4H), 2.43 - 2.57 (m, 1H), 2.58 - 2.72 (m, 3H), 3.25 (s, 3H), 3.4 - 3.56 (m, 2H), 3.84 (s, 1H), 5.73 (d, 1H), 5.87 (d, 1H), 7.04 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.55 (t, 1H), 8.11 - 8.22 (m, 2H), 8.27 (t, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.84 (s, 1H)。步驟 2
將2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺 異構物2（118 mg，0.17 mmol）溶於無水DCM（2 mL）中並且添加TFA（3 mL）。將反應混合物在環境溫度下攪拌19小時。添加DCM（10 mL），然後添加NaHCO3 （10 mL）和MeOH（1 mL）。將有機層分離並且將水層用DCM/MeOH 5 : 1（2 x 6 mL）的混合物萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。將產物級分凍乾以提供(S)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺，實例59 （74 mg，77%），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 1.12 (d, 3H), 1.16 (d, 3H), 2.02 (t, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.16 - 2.22 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.43 - 2.48 (m, 1H), 2.54 - 2.66 (m, 3H), 2.67 - 2.77 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.76 - 3.88 (m, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.51 - 7.59 (m, 1H), 8.00 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.26 - 8.34 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 11.36 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 580.5。實例 60 (R)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺步驟 1
將2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)丁酸鋰，中間體 52 （104 mg，0.52 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （210 mg，0.39 mmol）溶於DCM（10 mL）中並且添加吡啶（0.1 mL，1.24 mmol）隨後添加T3P（1.0 mL，1.68 mmol）。將反應混合物在22°C下攪拌過夜。將反應混合物用NaHCO3 （15 mL）淬滅，再攪拌另外的10 min，並且用DCM（3 x 7 mL）萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20-80%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。將純的級分合併並且凍乾。使用在CO2 中的23% EtOH/DEA 100 : 0.5，在120巴和150 mL/min流速下，藉由在Chiralpak IB（30 x 250 mm，5 µm）柱上的手性SFC將非鏡像異構物分離。使用UV在270 nm處檢測化合物。收集第一洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺異構物1（69 mg，24%，99.3% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.08 (s, 9H), 0.80 - 0.96 (m, 2H), 0.99 (t, 3H), 1.06 (d, 3H), 1.63 - 1.87 (m, 3H), 2.06 - 2.16 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.56 (d, 2H), 2.73 - 2.86 (m, 3H), 3.25 (s, 3H), 3.31 (s, 1H), 3.47 - 3.56 (m, 2H), 5.78 (dd, 2H), 7.05 (t, 1H), 7.37 - 7.44 (m, 2H), 7.52 - 7.59 (m, 1H), 8.13 - 8.21 (m, 2H), 8.28 (t, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.61 (s, 1H)。步驟 2
將2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺異構物1（67 mg，0.09 mmol）溶於DCM（2 mL）並且添加TFA（3 mL）。將反應混合物在22°C下攪拌17 h。添加DCM（10 mL）和NaHCO3 （15 mL），搖動，分離各相，將水層用DCM（2 x 5 mL）萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上藉由製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。收集產物峰並且凍乾，以提供(R)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺，實例60 （ 3 1 mg，56%)，呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.97 (t, 3H), 1.10 (d, 3H), 1.62 - 1.88 (m, 3H), 1.97 (t, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.55 - 2.67 (m, 2H), 2.67 - 2.77 (m, 1H), 2.82 - 2.95 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.56 (t, 1H), 6.97 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.55 (t, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.24 - 8.37 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 11.22 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 594.4。實例 61 (S)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺步驟 1
收集來自實例60步驟1的第二洗提異構物並且在真空中蒸發，以提供2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺（133 mg，47%，95.9% de）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ -0.09 (s, 9H), 0.82 - 0.91 (m, 1H), 0.92 - 1.02 (m, 4H), 1.12 (d, 3H), 1.53 - 1.66 (m, 1H), 1.69 - 1.84 (m, 1H), 1.91 - 2.02 (m, 1H), 2.02 - 2.1 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.43 - 2.66 (m, 4H), 2.74 - 2.84 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.48 - 3.56 (m, 3H), 5.77 (d, 1H), 5.84 (d, 1H), 7.05 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.52 - 7.59 (m, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.24 - 8.31 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.73 (s, 1H)。步驟 2
將2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺異構物2（131 mg，0.18 mmol）溶於DCM（2 mL）中並且添加TFA（3 mL）。將反應混合物在22°C下攪拌17 h。添加DCM（10 mL）和NaHCO3 （15 mL）搖動，分離各相，將水層用DCM（2 x 5 mL）萃取。將合併的有機相藉由分相器過濾並且在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以19 mL/min的流速經20分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 19 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。收集產物並且凍乾，以提供(S)-2-((S)-2,4-二甲基哌𠯤-1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺異構物2，實例61 （65 mg，60%），呈白色固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 0.95 (t, 3H), 1.13 (d, 3H), 1.56 - 1.70 (m, 1H), 1.72 - 1.85 (m, 1H), 2.01 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 2.23 (m, 4H), 2.34 - 2.58 (m, 6H), 2.73 - 2.81 (m, 1H), 2.81 - 2.91 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.45 - 3.54 (m, 1H), 6.98 (t, 1H), 7.36 - 7.46 (m, 2H), 7.50 - 7.59 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.25 - 8.37 (m, 2H), 9.16 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 11.33 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 594.5。實例 62 (R)-3-乙氧基-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
在0°C下，將DIPEA（688 µl，3.94 mmol）一次性添加到在DCM（1 mL）中的(R)-3-乙氧基-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸鋰，中間體 63 （237 mg，1.09 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 11 （180 mg，0.44 mmol）中。將所得溶液在0°C下攪拌10 min。然後在0°C下逐滴添加1-丙烷膦酸環酐、T3P（835 mg，1.31 mmol）。將該溶液在室溫下攪拌1小時。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，用飽和NaHCO3 （2 x 50 mL）和鹽水（2 x 50 mL）洗滌。將該有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中蒸發。使用DCM/MeOH 20 : 1作為洗提液，藉由製備型TLC純化殘餘物。使用在MTBE（0.1% DEA）中的20% IPA作為洗提液，以20 mL/min的流速經19分鐘，藉由在Chiralpak IA（20 x 250 mm，5 µm）上的製備型手性HPLC純化產物（50% ee）。使用254和220 nm的波長檢測產物。收集主要的異構物，以提供(R)-3-乙氧基-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例62 （40 mg，15%，99.7% ee），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.21 (t, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.42 (s, 6H), 2.50 - 2.73 (m, 4H), 2.74 - 3.02 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.45 - 3.65 (m, 3H), 3.86 (dd, 1H), 3.97 (dd, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.13 (d, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.49 - 7.63 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.47 - 8.52 (m, 1H).19 F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -125.71. m/z (ES+), [M+H]+ = 610。實例 63 (R)-3-乙氧基-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
用中間體18和63重複上面實例62所述的步驟，以給出實例 63 （80 mg，24%，97.9% ee），呈白色固體。
使用在己烷（0.1% DEA）中的50% IPA，以14 mL/min的流速經56分鐘，藉由在ChiralPak-AD-H-SL002，（20 x 250 mm）上的製備型手性HPLC純化。使用254和220 nm檢測化合物。將主要的異構物在真空中蒸發。1 H NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 1.21 (t, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.45 - 2.72 (m, 4H), 2.73 - 3.02 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 3.44 - 3.66 (m, 3H), 3.78 - 4.04 (m, 2H), 7.00 - 7.21 (m, 2H), 7.42 (t, 1H), 7.58 - 7.73 (t, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.23 - 8.37 (m, 2H), 8.42 (t, 1H)。 沒有觀察到可交換的質子19 F NMR (282 MHz, CD3 OD) δ -149.01, -124.61 m/z (ES+), [M+H]+ = 614。實例 64 (R)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺步驟 1
將3-(苄氧基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙酸鈉，中間體 64 （317 mg，0.93 mmol）和3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-胺，中間體 20 （448 mg，0.83 mmol）懸浮於乙酸乙酯（20 mL）中並且添加吡啶（0.25 mL，3.09 mmol）。將反應混合物冷卻至0°C。逐滴添加T3P（1.0 mL，1.68 mmol，在乙酸乙酯中50% wt）。將反應混合物在0°C下攪拌10 min並且然後在22°C下攪拌4 h。將反應混合物冷卻至0°C，逐滴添加T3P（1.0 mL，1.68 mmol）並且在22°C攪拌3 h。將反應混合物再一次冷卻至0°C，逐滴添加T3P（0.5 mL，0.84 mmol）並且在22°C下攪拌2 h。將反應混合物再一次冷卻至0°C，逐滴添加T3P（0.5 mL，0.84 mmol）並且在下22°C繼續攪拌16 h。添加水（5 mL）並且將混合物在22°C下攪拌30 min。添加NaHSO4 （20 mL），隨後添加DCM（10 mL）並且將各相分離。將水相用DCM（2 x 10 mL）萃取。將合併的有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空下濃縮，以提供 3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺（690 mg，定量），將其直接進入下一步。m/z (ES+), [M+H]+ = 802.3。步驟 2
將3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺 異構物2（600 mg，0.75 mmol）溶於無水DCM（3 mL）中並且在環境溫度下將TFA（3 mL，26 mmol）添加至攪拌溶液中。將反應混合物在下22°C攪拌4 h。添加TFA（2 mL）並且將反應混合物在22°C下攪拌3天。添加TFA（2 mL）並且繼續攪拌4天。添加TFA（2 mL）並且將混合物在22°C下攪拌過夜。添加DCM（20 mL）並且將混合物用飽和NaHCO3 （50 mL）中和並且添加MeOH（3 mL）。將有機層分離並且將水相用10% MeOH/DCM（2 x 11 mL）萃取。將合併的有機相經相分離器過濾，然後用二氧化矽小塞過濾，將其用DCM和MeOH的混合物洗滌。將合併的濾液在真空中濃縮。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的20%-80%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經30分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在269 nm處檢測化合物。收集產物峰並且凍乾。使用100% MeOH 100 : 0.1作為洗提液和在40 mL/min流速下，藉由在Lux C4柱（30 x 250 mm，5 µm）上的製備型手性HPLC將鏡像異構物分離。藉由UV在260 nm處檢測化合物。收集第二洗提異構物並且在真空中蒸發。使用在H2 O/ACN/NH3 95/5/0.2緩衝液中的25%-75%乙腈梯度，以100 mL/min的流速經25分鐘，藉由在XBridge C18柱（10 μm，250 x 50 ID mm）上的製備型HPLC純化殘餘物。藉由UV在270 nm處檢測化合物。將純的級分凍乾，以提供(R)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺，實例64 （161 mg，32%），呈固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.15 (s, 3H), 2.26 - 2.44 (m, 7H), 2.59 - 2.69 (m, 2H), 2.71 - 2.82 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.58 (t, 1H), 3.79 (dd, 1H), 3.91 (dd, 1H), 4.54 (s, 2H), 6.98 (t, 1H), 7.24 - 7.36 (m, 5H), 7.40 (t, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.52 - 7.58 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.26 - 8.33 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 11.21 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 672.5。實例 65 (S)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺
收集來自實例64步驟2的反應的第一洗提異構物並且在真空中蒸發。將殘餘物溶於乙腈/水中並且凍乾，以提供(S)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌𠯤-1-基)丙醯胺實例 65 （63 mg，12%），呈固體。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 2.15 (s, 3H), 2.27 - 2.44 (m, 7H), 2.59 - 2.69 (m, 2H), 2.72 - 2.82 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.58 (t, 1H), 3.79 (dd, 1H), 3.91 (dd, 1H), 4.54 (s, 2H), 6.98 (t, 1H), 7.24 - 7.37 (m, 5H), 7.40 (t, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.51 - 7.58 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.26 - 8.33 (m, 2H), 9.17 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 11.21 (s, 1H). m/z (ES+), [M+H]+ = 672.4。實例 66 (R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺步驟 1
在25°C下，在空氣下，將碳酸鉀（4.21 g，30.45 mmol）添加到在乙腈（60 mL）中的甲基2-溴-3-甲氧基丙酸酯（3 g，15.23 mmol）和三級丁基哌𠯤-1-甲酸酯（3.12 g，16.75 mmol）中。將所得混合物在室溫下攪拌15小時。將反應混合物經過矽藻土過濾並且將濾餅用另外的乙腈洗滌。合併濾液並且在減壓下除去溶劑。將粗產物藉由快速氧化鋁層析純化，洗提梯度為在石油醚中0至100% EtOAc的溶液。將純的級分蒸發至乾燥，以提供三級丁基4-(1,3-二甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸酯（2.300 g，50.0%），呈無色油狀。 m/z (ES+), [M+H]+ = 303。步驟 2
將氫氧化鋰（0.238 g，9.92 mmol）添加到在MeOH（5 mL）、THF（5.00 mL）和水（25 mL）的溶劑混合物中的三級丁基4-(1,3-二甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸酯（1.0 g，3.31 mmol）的漿液中，然後在室溫下攪拌1小時。將該溶劑在真空中濃縮，以提供粗2-(4-(三級-丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)-3-甲氧基丙酸鋰（1.200 g），呈黃色固體。m/z (ES+), [M+H]+ = 289。步驟 3
在室溫下，將2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三膦烷（5398 mg，9.99 mmol）添加到中間體 33 （415 mg，1.00 mmol）、2-(4-(三級-丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)-3-甲氧基丙酸鋰（588 mg，2.00 mmol）和DIPEA（1.745 mL，9.99 mmol）)在DCM（30 mL）中的溶液中，然後在室溫下攪拌過夜。將反應物用水（100 mL）稀釋，用DCM（3 x 20 mL）萃取。將合併的有機相用水（10 mL）和鹽水（10 mL）洗滌，然後用Na2 SO4 乾燥，過濾並且在真空中濃縮。藉由製備性HPLC（XBridge Prep C18 OBD 柱，5μ二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長），使用極性逐漸降低的水（含有0.05% NH3）和MeCN的混合物作為洗提液來純化粗產物。將含有所需化合物的級分蒸發至乾燥，以提供三級丁基4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸酯（305 mg，44.5%），呈黃色固體。m/z (ES+), [M+H]+ = 686。步驟 4
將三級丁基4-(1-((3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)胺基)-3-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)哌𠯤-1-甲酸酯（300 mg，0.44 mmol）添加到1 : 3 TFA-DCM（10 mL）的溶液中，然後在室溫下攪拌1 h。將該溶劑然後在真空中濃縮，使用極性逐漸降低的水（含有0.1%甲酸）和MeCN的混合物作為洗提液，藉由製備型HPLC（XBridge Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19 mm直徑，150 mm長）純化粗產物。將適當的級分濃縮至乾燥，以提供N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺（200 mg，78%），呈黃色固體。藉由chiralpak ID-3柱上的製備性手性-HPLC，用在MTBE（用0.1% DEA改性）中的10% MeOH作為洗提液等度洗提進一步純化化合物。將含有第一洗提化合物的級分濃縮至乾燥，以提供實例66，(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺（39.0 mg，19.43%），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 2.50 (s, 3H), 2.68-2.71 (m, 2H), 2.80 - 2.90 (m, 6H), 3.30 (s, 3H), 3.62 - 3.69 (m, 2H), 3.76 - 3.83 (m, 1H), 7.00-7.06 (t, 1H), 7.44-7.49 (t, 1H), 7.60 - 7.65 (m, 2H), 8.16 - 8.27 (m, 3H), 8.40 - 8.44 (m, 2H), 9.47 (s, 1H), 10.25 (s, 1H), 12.20 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 586。實例 67
將實例66的第二洗提異構物的級分濃縮至乾燥，以提供實例 67 ，(S)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌𠯤-1-基)丙醯胺（35.0 mg，17.50%），呈白色固體。1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 2.50 (s, 3H), 2.73 (m, 2H), 2.83 - 2.92 (m, 6H), 3.30 (s, 3H), 3.64 - 3.69 (m, 2H), 3.76 - 3.82 (m, 1H), 7.00-7.06 (t, 1H), 7.44-7.49 (t, 1H), 7.60 - 7.65 (m, 2H), 8.16 - 8.27 (m, 3H), 8.41 - 8.44 (m, 2H), 9.47 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 12.29 (s, 1H)。 m/z (ES+), [M+H]+ = 586。實例 68 ：酶抑制研究
使用重組的JAK1（胺基酸866-1154，生命技術公司（Life Technologies），#PV4774，卡爾斯巴德，加利福尼亞州）、JAK2（胺基酸831-1132，AstraZeneca R&D Boston（阿斯利康波斯頓研發中心））、或JAK3（胺基酸781-1124，AstraZeneca R&D Boston）在50 mM HEPES pH 7.3、1 mM DTT、0.01% Tween-20、50 µg/ml BSA、和10 mM MgCl2 的緩衝液條件下進行酶抑制研究。JAK酶在昆蟲細胞中作為N末端GST融合表現，並且藉由谷胱甘肽親和和尺寸排阻層析來進行純化。在以30、3、0.3、0.03、0.003和0 µM最終測試濃度給予的抑制劑的存在下，酶在它們5 mM的生理ATP的近似高端處進行試驗。
對於JAK1，4 nM酶與1.5 µM肽底物（FITC-C6-KKHTDDGYMPMSPGVA-NH2 (SEQ ID NO:1)，Intonation公司，波士頓，麻塞諸塞州）一起孵育。對於JAK2，0.3 nM酶與1.5 µM肽底物（5FAM-GEEPLYWSFPAKKK-NH2 (SEQ ID NO:2)，Intonation公司，波士頓，麻塞諸塞州）一起孵育。對於JAK3，0.1 nM酶與1.5 µM肽底物（5FAM-GEEPLYWSFPAKKK-NH2 (SEQ ID NO:2)，Intonation公司，波士頓，麻塞諸塞州）一起孵育。將磷酸化和非磷酸化的肽分離，並藉由Caliper LC3000系統（卡尺生命科學公司（Caliper Life Sciences），麻塞諸塞州）定量用於計算抑制百分率。該測試的結果顯示於表24中。實例 69 ：細胞白細胞介素誘導的 JAK-STAT6- 螢光素酶測定（ pSTAT6 ）
生成基於U937單核細胞的穩定細胞系，其具有在STAT6啟動子（U937-STAT6-Luc）的控制下在基因組中併入的螢光素酶報導基因。使細胞在37°C和5% CO2 下在生長培養基（具有GlutaMAX和25mM Hepes，10%FCS，1%鈉，1%非必需胺基酸和0.5 mg/ml遺傳黴素（用於選擇）的RPMI 1640）中的懸浮液中生長。
藉由在250 g離心5分鐘來收集細胞，並重懸於測定緩衝液（20 mM HEPES，1×HBSS和0.1% BSA）中至1000細胞/μl。為了刺激細胞，使用也分別溶解於測定緩衝液中至300 pM或7 nM的白細胞介素（IL-13）。這在最後的測定中分別給出150 pM和3.5 nM，誘導至Emax 的80%的信號。將測試和對照化合物以在DMSO中5 nl/孔以10 mM至0.5 nM的系列稀釋施加於測定板（低vol白色384-孔板）。
向每個孔中加入4 μl細胞和4 μl白細胞介素（IL-13），將平板密封並在37°C孵育4½ h，然後在室溫下孵育30 min。藉由添加4 μl/孔的SteadyGlo（Promega公司）的使測試顯色，並且20分鐘後在具有螢光濾光片的Envision讀板儀上讀板。
在測定中，化合物因此被稀釋1600倍，並且抑制白細胞介素誘導信號的劑量-響應曲線確定了化合物的IC50 。該測定確定了IC50 範圍為2 nM至2 μM的化合物，相對於對照和測試化合物。[ 表 24]
Figure 107101685-A0304-0013
 實例 70- 斑禿體內劑量滴定研究
將本揭露範圍內的化合物口服給予具有建立的斑禿（AA）的C3H/HeJ小鼠，劑量逐漸增加，直至觀察到明顯毛髮生長。毛髮生長表示為基於每週評估的毛髮指數得分（HIS），並與健康小鼠（全毛 = HIS為300）和完全AA（無毛 = HIS為0）的小鼠進行比較。A. 動物組 組1 - (n = 6) 斑禿小鼠治療組 組2 - (n = 6) 未治療的斑禿小鼠（對照組） 組3 - (n = 6) 健康對照B. 治療
所有這三組以6 × 6保持在設施中的模克隆（macrolon）籠子中，使用12 ± 12 h光照/黑暗循環，21°C ± 2°C和55% ± 15%相對濕度。齧齒動物食物和水隨意供應。在開始研究之前和就在終止之前拍攝照片。每週監測一次體重（BW）和HIS。每天一次，第1組小鼠飼喂5 g用在10 mL自來水中的實例35的化合物浸泡的粉碎的齧齒動物飼料，逐步增加劑量（每週監測一次BW和HIS）： 1. 以0.5 mg/kg體重（BW）飼喂2週， 2. 以2.5 mg/kg體重（BW）飼喂2週，並且 3. 以12.5 mg/kg體重（BW）飼喂2週。C. 終止
在實例35的化合物的最高濃度下的最後一次給藥後1-2小時，已經觀察到明顯毛髮生長並且記錄毛髮生長得分，將第1組小鼠處死。從眼後采血到EDTA塗膜的試管（Multivette 300，Sarstedt）中並且保持在冰上。藉由離心（4°C，4000G，5分鐘）獲得血漿，並且將50 μL轉移至96孔NUNC平板並且儲存於-20°C直至藉由LC-MSMS對藥物濃度進行分析。D. 結果
所有三個組的結果在圖2中以圖表形式呈現，其中Y軸上是HIS並且X軸上是時間（週）。E. 結果
實例35的化合物在終止時的平均血漿暴露量（總濃度）為338 nM，並且HIS = 218。 該等結果表明： 1. 實例35的化合物在最高劑量下產生所需的響應，儘管為了達到HIS = 300需要更長的治療時間。 2. 12.5 mg/kg BW將是完整實驗（12週）的較佳的劑量，顯示出完全效果（HIS = 300）。實例 71-OVA 肺炎模型體內藥效動力學性質研究
將Brown Norway大鼠致敏並且用雞卵巢白蛋白（OVA）激發。（Clinical and Experimental Allergy（臨床和實驗過敏學），37 (2007) 973-988）。吸入一定量的在本揭露範圍內的微粉化化合物之後，測量OVA激發的Brown Norway大鼠的肺中氣道炎症的減少使用以下操作步驟測量為與受激發但未處理的大鼠相比的支氣管肺泡灌洗（BAL）中嗜酸性球的減少百分比。作為模型對照，使用了模型參考化合物布地奈德（Budesonide）的靜脈注射過量劑量（2 × 300 μg/kg）。A. 動物組 將74隻動物分成8個實驗組並且如下處理： 第1組（鹽水/鹽水/空氣），n = 6-第0天（S1）和第7天（S2）的假（Sham）（鹽水）致敏和第14天（P1）的假（鹽水）激發。處理-室內空氣 第2組（OVA/鹽水/乳糖），n = 8 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物致敏，然後是在第14天（P1）靜脈注射假（鹽水）激發。處理-DPI乳糖。 第3組（OVA/OVA/乳糖），n = 12 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理-DPI乳糖。 第4組（OVA/OVA/實例35），n = 10 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理-DPI.實例35的化合物，目標劑量為0.03μg/ kg 第5組（OVA/OVA/實例35），n = 10 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理-DPI.實例35的化合物，目標劑量為0.3μg/ kg 第6組（OVA/OVA/實例35），n = 10 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理-DPI.實例35的化合物，目標劑量為3μg/ kg 第7組（OVA/OVA/實例35），n = 10 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理-DPI.實例35的化合物，目標劑量為30μg/ kg 第8組（OVA/OVA/布地奈德），n = 8 - 在第0天（S1）和第7天（S2）用Al(OH)3 /OVA混合物、然後是靜脈注射致敏。在第14天（P1）OVA激發處理 -第14天靜脈注射布地奈德（模型參考化合物）在2 x 300 μ g/kg，每天2次。B. 實驗程序
在開始第一次致敏之前（S1），記錄體重（BW），並且所有大鼠尾部用識別號碼標記。在S2之前和終止點之前（D15）另外記錄BW。確定所有動物的BAL。在終止時，執行者（研究者）不知道各個老鼠的狀態，i. 致敏
大鼠在第0天和第7天皮下（s.c.）注射OVA/Al(OH)3 （100 μg OVA：100 mg Alum在1 ml生理鹽水中/大鼠）混合物，和大鼠腹膜內（i.p.）注射0.5 ml百日咳桿菌毒素/大鼠（0.1 μg/ ml）。假致敏用相同體積和策略的皮下和腹膜內注射等滲鹽水來執行。ii. 化合物給藥 乾粉吸入（DPI）操作程序
每個暴露系統包括流過型暴露吸入室、大鼠約束管和改良萊特粉塵進給（Modified Wright Dust Feed）機制。藉由在吸氣端口之一（AP40，47 mm，Millipore）的過濾器取樣來對每個劑量水平的吸入腔室中的氣溶膠濃度進行測量。實例35的化合物的不同劑量係藉由以下來實現的：改變暴露時間，同時保持測試製品的濃度和曝光室中的流量恒定。將第2組和第3組的大鼠暴露於約束管中的乳糖（Battelle室）。假設暴露持續時間為2-10分鐘，體重為250 g，使用下式計算目標吸入劑量（μg/kg）：
Figure 107101685-A0304-0014
 其中C = 氣溶膠濃度（μg/L）。RMV：呼吸分鐘體積（L/min）= 4.19 × BW（g）0.66/1000（McMahon 1977）D = 暴露持續時間。BW體重（kg）。 根據過濾分析結果，肺負載量（肺劑量）可按下式計算： 肺劑量 = 吸入劑量 * 肺部沈積分數 模型參考化合物（布地奈德）的氣管內給藥
在OVA激發前一天稱重大鼠。在激發時，將大鼠用異氟烷混合物（空氣和4%異氟烷）以30°-40°角仰臥位麻醉，並用媒介物或化合物滴注。這種氣管內滴注係藉由使用改良的金屬套管與推注球在末端進行。將大鼠頭朝上仰臥放入籠中，直到恢復意識。每天給予兩次參考化合物，在第一次每日給藥6小時後，進行第二次每日給藥。滴注量：0.25 mL/大鼠。iii. 激發（用 OVA 誘發）
在OVA激發前5分鐘（5'），從舌靜脈收集血液（0.2 ml），並在96-深孔板上收集血漿（60 μl/孔）。誘發（provocation）發生在第14天（P1），並在化合物給藥後2小時進行。用異氟醚（Isoflurane）混合物（空氣和4%異氟烷）麻醉大鼠，角度為30°-40°仰臥位放置，並用等滲鹽水或OVA（0.1 mg/ml）滴注。這種氣管內滴注係藉由使用改良的金屬套管與推注球在末端進行。將大鼠頭朝上仰臥放入籠中，直到恢復意識。假激發用相同體積和策略的靜脈內滴注等滲鹽水來執行。滴注量：0.25 mL/大鼠。iv. 終止和支氣管肺泡灌洗
在OVA激發22小時後（P1），將大鼠腹膜內注射1 ml戊巴比妥（50 mg/ml）以使其安樂死。從頸內靜脈中取血到在EDTA包被的管中，離心（Rotanta 46R，480 xg，10分鐘，20°C），並將血漿樣品收集在置於乾冰上的2 × 96-深孔板（60 μl/孔）中，並且儲存在-70°C以下用於進一步分析。藉由用PBS手動灌注全肺進行支氣管肺泡灌洗（BAL）。氣管暴露後，插入聚乙烯管（PE120）並用縫線結紮。將管連接至注射器，在室溫下預先填充4.2 ml PBS，緩慢注入肺中，在肺中持續10秒。藉由緩慢的抽吸將流體重新收集到注射器中。將此過程進行兩次。將最終的BAL液轉移到試管（4 ml，聚丙烯（PP））中。稱量BAL樣品管（假設1 ml的BALF等於1 g）。將BAL保持在冰上直到離心（Rotanta 46R，300 xg，10分鐘，4°C）。離心後，將上清液分置於放在乾冰上的4 × 96孔板（0.1 ml/孔）中，保存並在-70°C以下存儲直到介質分析。然後將細胞沈澱重新懸浮於0.5 ml PBS中並保持在冰上直至對細胞計數。使用半自動SYSMEX XT-1800i Vet（Sysmex，神戶日本）和門控程序：BALrOVAi來計數細胞總數和差異數。C. 結果 基於過濾器分析，實現微粉化的實例35的以下肺劑量（μg/kg體重）： 第4組：0.08 第5組：0.11 第6組：0.6 第7組：4.76 結果呈現為具有以上p值的橫條圖，作為替代方案n.s.表明不顯著，以及與圖3中每個實驗組的未處理組3（OVA/OVA）相比嗜酸性球的減少%。 該等結果表明： 1. 在肺劑量為0.08、0.11、0.6和4.76 μg/kg時，實例35的化合物將BAL中的嗜酸性球減少了7%（不顯著）、28%（不顯著）、68%（p ＜ 0.01）和61%（p ＜ 0.01）。 2. OVA誘發（第3組）顯著增加BAL中嗜酸性球的數量。 3. 實例35的化合物以劑量依賴性方式顯著減少嗜酸性球的存在，與OVA對照（第3組）相比，最大抑制為68%，並且從0.6 μg/kg劑量觀察到抑制穩定階段。 4. 過量劑量的模型參考化合物布地奈德（Budesonide）2 * 300 mg/kg（組8）顯示嗜酸性球的抑制率為97%，這在針對該模型觀察到的範圍內。
［圖 1 ］顯示了對於實例35所列的標題化合物的結晶形式之粉末X射線繞射圖。
［圖 2 ］顯示了與未治療的小鼠相比，用0.5 mg/kg實例35的化合物治療具有確定的斑禿的C3H/HeJ小鼠後的毛髮指數得分（HIS）。
［圖 3 ］顯示了與激發但未治療的大鼠相比，在用實例35的化合物治療後在OVA激發的Brown Norway大鼠中在支氣管肺泡灌洗中嗜酸性球的減少百分比。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 107101685-A0304-11-0002-1

Claims (20)

  1. 一種具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，
    Figure 107101685-A0305-02-0137-1
     其中：R1、R3、和R4各自獨立地選自氫和甲基；R2選自氫、甲基、和-CH2CH2OH；n係1或2；R5選自甲基、乙基、和-CH2OR8；R6選自甲基、氯、和氟；R7選自甲基、乙基、和環丙基；並且R8選自甲基、乙基、和苄基。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R1-R4各自獨立地選自氫和甲基。
  3. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R1、R3、和R4全都是氫。
  4. 如申請專利範圍第3項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R2係甲基。
  5. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R5係甲基或-CH2OR8。
  6. 如申請專利範圍第1-5項中任一項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R8係甲基。
  7. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R6係甲基或氟原子。
  8. 如申請專利範圍第1-5項中任一項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R6係氟原子。
  9. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R7係甲基。
  10. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，具有化學式(Ia)之結構：
    Figure 107101685-A0305-02-0138-2
     其中：R1a、R3a、和R4a各自獨立地選自氫和甲基；R2a選自氫、甲基、和-CH2CH2OH；n係1或2； R5a選自甲基、乙基、和-CH2OR8a；R6a選自甲基、氯、和氟；R7a選自甲基、乙基、和環丙基；並且R8a選自甲基、乙基和苄基。
  11. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，具有化學式(Ib)之結構：
    Figure 107101685-A0305-02-0139-3
     其中：R5b選自甲基、乙基、和-CH2OR8b；R6b選自甲基、氯、和氟；R7b選自甲基、乙基、和環丙基；並且R8b選自甲基、乙基和苄基。
  12. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，選自：(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-(2-羥基乙基)哌
    Figure 107101685-A0305-02-0139-4
    -1-基)丙醯胺； (R)-N-(3-(2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-5
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-(3-(乙基磺醯基)-2-氟苯基胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-6
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-(3-(環丙基磺醯基)-2-氟苯基胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-7
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氯-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-8
    -1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-9
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-10
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-11
    -1-基)丙醯胺；(R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-12
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-13
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(R)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-14
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(S)-2-((3S,5S)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-15
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0140-16
    -1-基)丁醯胺； (R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-17
    -1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-18
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-19
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-20
    -1-基)丁醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-21
    -1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-22
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-23
    -1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-24
    -1-基)丁醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-25
    -1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(哌
    Figure 107101685-A0305-02-0141-26
    -1-基)丙醯胺； (R)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-27
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-28
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-29
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(R)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-30
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-31
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(R)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-32
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-33
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(R)-2-((3R,5R)-3,5-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-34
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-35
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0142-36
    -1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丁醯胺； (R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-37
    -1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-38
    -1-基)丁醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-39
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-((3S,5S)-3,4,5-三甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-40
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)丙醯胺；(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-41
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-42
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0143-43
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺； (S)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-44
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-45
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-46
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-47
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-48
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-49
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(S)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-50
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(R)-2-((R)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-51
    -1-基)-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基丙醯胺；(R)-2-((S)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-52
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(S)-2-((S)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-53
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丙醯胺；(R)-2-((S)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-54
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺；(S)-2-((S)-2,4-二甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0144-55
    -1-基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)丁醯胺； (R)-3-乙氧基-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-56
    -1-基)丙醯胺；(R)-3-乙氧基-N-(3-(5-氟-2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-57
    -1-基)丙醯胺；(R)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-58
    -1-基)丙醯胺；(S)-3-(苄氧基)-N-(3-(2-((2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基)胺基)-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-59
    -1-基)丙醯胺；(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-60
    -1-基)丙醯胺；(S)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-61
    -1-基)丙醯胺；或其藥學上可接受的鹽。
  13. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其係(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-62
    -1-基)丙醯胺或其藥學上可接受的鹽。
  14. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其係(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-63
    -1-基)丙醯胺。
  15. 如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受的鹽，其係(R)-N-(3-(5-氟-2-(2-氟-3-(甲基磺醯基)苯基胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-7-基)-3-甲氧基-2-(4-甲基哌
    Figure 107101685-A0305-02-0145-64
    -1-基)丙醯胺之藥學上可接受的鹽。
  16. 一種醫藥組成物，包含如申請專利範圍第1-15項中任一項之化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體。
  17. 一種如申請專利範圍第1-15項中任一項之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療JAK1相關的障礙的藥劑中之用途。
  18. 如申請專利範圍第17項之用途，其中該JAK1相關的障礙選自1型糖尿病、狼瘡、多發性硬化症、類風濕性關節炎、牛皮癬、氣喘、異位性皮膚炎、自身免疫性甲狀腺疾病、潰瘍性結腸炎、克隆氏病和斑禿。
  19. 一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含如申請專利範圍1-15中任一項之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療JAK1相關的障礙。
  20. 如申請專利範圍第19項之醫藥組成物，其中該JAK1相關的障礙選自1型糖尿病、狼瘡、多發性硬化症、類風濕性關節炎、牛皮癬、氣喘、異位性皮膚炎、自身免疫性甲狀腺疾病、潰瘍性結腸炎、克隆氏病和斑禿。
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