TWI685564B - 核酸萃取方法及其萃取卡匣 - Google Patents

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TWI685564B
TWI685564B TW107145106A TW107145106A TWI685564B TW I685564 B TWI685564 B TW I685564B TW 107145106 A TW107145106 A TW 107145106A TW 107145106 A TW107145106 A TW 107145106A TW I685564 B TWI685564 B TW I685564B
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黃菘斌
劉興倫
高于凱
李怡臻
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台達電子工業股份有限公司
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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/04—Solvent extraction of solutions which are liquid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA

Abstract

一種萃取卡匣，包括一萃取模組以及一儲液模組。儲液模組連通該萃取模組，包括一儲液模組本體、一檢體室、一塞蓋、一酒精室以及一第一通道。儲液模組本體包括一第一側、一第二側以及一檢體填液孔，該第一側相反於該第二側，該檢體填液孔形成於該第一側。檢體室形成於該儲液模組本體，該檢體室連通該檢體填液孔，該檢體室包括一第一檢體室連接孔以及一第二檢體室連接孔，該第一檢體室連接孔相對該第二側更靠近該第一側。塞蓋適於密封該檢體填液孔。酒精室形成於該儲液模組本體。第一通道連通該酒精室以及該檢體室之該第一檢體室連接孔。

Description

核酸萃取方法及其萃取卡匣
本發明之實施例係有關於一種萃取卡匣，特別係有關於一種具有儲液模組之萃取卡匣。
在習知之儲液模組中，檢體室通常會有一壓力供給開孔，以連接壓力源。透過該壓力供給開孔，可以控制檢體室內之檢體的流動。然而，由於檢體中往往包含病毒、細菌或其他污染物，該等污染物會通過壓力供給開孔而跑到檢驗設備或外部環境，造成污染，不但可能會造成檢測結果失準，也可能會危害檢驗人員的健康。
本發明之實施例係為了欲解決習知技術之問題而提供之一種萃取卡匣，包括一萃取模組以及一儲液模組。儲液模組連通該萃取模組，包括一儲液模組本體、一檢體室、一塞蓋、一酒精室以及一第一通道。儲液模組本體包括一第一側、一第二側以及一檢體填液孔，該第一側相反於該第二側，該檢體填液孔形成於該第一側。檢體室形成於該儲液模組本體，該檢體室連通該檢體填液孔，該檢體室包括一第一檢體室連接孔以及一第二檢體室連接孔，該第一檢體室連接孔相對該第二側更靠近該第一側。塞蓋適於密封該檢體填液孔。酒精室形成於該儲液模組本體。第一通道連通該酒精室以及該檢體室之該第一檢體室連接孔。
在一實施例中，該酒精室包括一酒精室連接孔，該酒精室連接孔相對該第一側更靠近該第二側，該第一通道連通該酒精室連接孔以及該第一檢體室連接孔。
在一實施例中，該儲液模組更包括一第一混合室以及一第二通道，該第一混合室形成於該儲液模組本體，該第二檢體室連接孔相對該第一側更靠近該第二側，該第二通道連通該第二檢體室連接孔以及該第一混合室。
在一實施例中，該儲液模組更包括一第二混合室、一第三通道以及一第四通道，該第二混合室形成於該儲液模組本體，該第三通道連通該第一混合室以及該第二混合室，該第四通道連通該該第二混合室以及該萃取模組。
在一實施例中，該儲液模組更包括一第一清潔液室、一第二清潔液室、一第五通道以及一第六通道，該第一清潔液室以及該第二清潔液室形成於該儲液模組本體，該第五通道連通該第一清潔液室以及該第一混合室，該第六通道連通該第二清潔液室以及該第一混合室。
在一實施例中，該儲液模組更包括一洗脫劑存放室以及一第七通道，該洗脫劑存放室形成於該儲液模組本體，該第七通道連通該洗脫劑存放室以及該萃取模組。
在一實施例中，本發明提供一種核酸萃取方法，包括下述步驟。首先，提供一萃取卡匣，該萃取卡匣包括一萃取模組以及一儲液模組，該儲液模組連通該萃取模組，該儲液模組包括一檢體室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清潔液室、一第二清潔液室以及一洗脫劑存放室。接著，將一酒精置入該酒精室，將一第一清潔液置入該第一清潔液室，將一第二清潔液置入該第二清潔液室，將一洗脫劑置入該洗脫劑存放室。再，將一檢體置入該檢體室。接著，將該檢體室內之該檢體升溫。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該酒精室內之該酒精注入該檢體室，該檢體以及該酒精混成一混合液。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該混合液移入該第一混合室，並，將該混合液於該第一混合室以及該第二混合室中來回充分混合。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該混合液移至該萃取模組以進行核酸抓取，並且，將該混合液被移至該萃取模組之一第一廢液室。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該第一清潔液分次從該第一清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室。並且，將該第一清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組。再，將該第一清潔液移至該萃取模組之該第一廢液室。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該第二清潔液分次從該第二清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室。並且，將該第二清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組。再，將至少部分之該第二清潔液移至該萃取模組之一第二廢液室。
在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該洗脫劑存放室內之該洗脫劑移至該萃取模組，以從該萃取模組內取出核酸。
應用本發明實施例之萃取卡匣，該檢體室之該檢體填液孔被塞蓋所密封，該檢體室內的混合液係透過從該酒精室而來的氣壓，而被移至該第一混合室。因此，檢體室內的檢體內的病毒、細菌等污染物無法輕易的從該儲液模組洩漏。即使該檢體內的污染物通過該第一檢體室連接孔(位於檢體室上方)以及該第一通道進入該酒精室，該污染物也會被酒精室內的酒精消毒而無法造成污染。本發明實施例之萃取卡匣可降低檢體對分析儀內部或周圍環境的污染，提高分析結果的準確度，並維護操作人員的健康。
第1A圖係顯示本發明實施例之萃取卡匣C的組合圖。第1B圖係顯示本發明實施例之萃取卡匣C的爆炸圖。搭配參照第1A、1B圖，萃取卡匣C包括一萃取模組1、一儲液模組2、一取樣模組3、連通模組4等元件。萃取卡匣C適於置入於一分析儀之中。該分析儀包括一第一氣壓供應模組、一第二氣壓供應模組以及一檢測模組，該第一氣壓供應模組以及該第二氣壓供應模組對萃取卡匣C提供氣壓，以控制萃取卡匣C內的液體流動。該檢測模組對萃取卡匣C進行加熱、散熱，並對該萃取卡匣C內之檢體進行檢測分析。
參照第1B圖，儲液模組2透過該連通模組4連通萃取模組1，同時，儲液模組2內之各腔室亦可透該連通模組4連通。第2A圖係顯示本發明實施例之儲液模組2的細部結構。搭配參照第2A圖，儲液模組2包括一儲液模組本體29、一檢體室21、一塞蓋211、一酒精室22以及一第一通道221。儲液模組本體包括一第一側291、一第二側292以及一檢體填液孔212，第一側291相反於該第二側292，檢體填液孔212形成於第一側291。檢體室21形成於儲液模組本體29，檢體室21連通檢體填液孔212，檢體室21包括一第一檢體室連接孔213以及一第二檢體室連接孔214，第一檢體室連接孔213相對第二側292更靠近第一側291。塞蓋211適於密封檢體填液孔212。酒精室22形成於儲液模組本體29。第一通道221連通酒精室22以及檢體室21之第一檢體室連接孔213。
參照第2A圖，在一實施例中，酒精室22包括一酒精室連接孔222，酒精室連接孔222相對第一側291更靠近第二側292，第一通道221連通酒精室連接孔222以及第一檢體室連接孔213。
參照第2A圖，在一實施例中，儲液模組2更包括一第一混合室23以及一第二通道231，第一混合室23形成於儲液模組本體29，第二檢體室連接孔214相對第一側291更靠近第二側292，第二通道231連通第二檢體室連接孔214以及第一混合室23。
參照第2A、2B圖，在一實施例中，儲液模組2更包括一第二混合室24、一第三通道241以及一第四通道242，第二混合室24形成於儲液模組本體29，第三通道241連通第一混合室23以及第二混合室24，第四通道242連通第二混合室24以及萃取模組1。第三通道241連接第一混合室23以及第二混合室24的底部。
參照第2A圖，在一實施例中，儲液模組2更包括一第一清潔液室25、一第二清潔液室26、一第五通道251以及一第六通道261，第一清潔液室25以及第二清潔液室26形成於儲液模組本體29，第五通道251連通第一清潔液室25以及第一混合室23，第六通道261連通第二清潔液室26以及第一混合室23。
參照第2A圖，在一實施例中，儲液模組2更包括一洗脫劑存放室27以及一第七通道271，洗脫劑存放室27形成於儲液模組本體29，第七通道271連通洗脫劑存放室27以及萃取模組1。
參照第3A～3I圖，其係顯示本發明實施例之儲液模組2的運作步驟。參照第3A圖，首先，儲液模組2內原始存放的四種試劑，分別為：酒精281(酒精室22)、第一清潔液282(第一清潔液室25)、第二清潔液283(第二清潔液室26)以及洗脫劑284(洗脫劑存放室27)。接著，參照第3B圖，檢體285被加入檢體室21，萃取卡匣C被置入分析儀之檢測模組後，檢體室21之檢體285被升溫至60度。再者，請參照第3C圖，檢體室21之檢體285被升溫至60度之後，酒精室22內之酒精281被注入檢體室21，檢體室21內之檢體285以及酒精281混成一混合液286。接著，參照第3D以及3E圖，檢體室21內之檢體285以及酒精281之一混合液286被移入第一混合室23(第3D圖)，並於第一混合室23以及第二混合室24中充分混合(第3E圖)。
在一實施例中，充分混合之檢體285以及酒精281之混合液286被移至萃取模組1以進行核酸抓取，並被移至萃取模組1之一第一廢液室。
接著，參照第3F以及3G圖，第一清潔液282分次從第一清潔液室25被移至第一混合室23以及第二混合室24中，以清潔第一混合室23以及第二混合室24。第一清潔液282並被移至萃取模組1以清潔萃取模組1。第一清潔液282最後被移至萃取模組1之該第一廢液室。
接著，請參照第3H以及3I圖，第二清潔液283分次從第二清潔液室26被移至第一混合室23以及第二混合室24中，以清潔第一混合室23以及第二混合室24。第二清潔液283並被移至萃取模組1以清潔萃取模組1。至少部分之第二清潔液283最後被移至萃取模組1之一第二廢液室。在此實施例中，部分之第二清潔液283被移至萃取模組1之該第一廢液室，而最後部分之第二清潔液283被移至萃取模組1之該第二廢液室。
最後，洗脫劑存放室27內之洗脫劑284被移至萃取模組1，以從萃取模組1內取出核酸，包含核酸之洗脫劑284接著被移至取樣模組3，以進行後續之定量取樣之流程。
請搭配參照第2A以及第3B圖，第3B圖係為應用本發明實施例之萃取卡匣，檢體室21之檢體填液孔212被塞蓋211所密封，檢體室21內的混合液286係透過從酒精室22而來的氣壓，而被移至第一混合室23。因此，檢體室21內的檢體285內的病毒、細菌等污染物無法輕易的從該儲液模組洩漏。即使檢體285內的污染物通過該第一檢體室連接孔(位於檢體室21上方)以及第一通道221進入酒精室22，該污染物也會被酒精室22內的酒精消毒而無法造成污染。本發明實施例之萃取卡匣可降低檢體285對分析儀內部或周圍環境的污染，提高分析結果的準確度，並維護操作人員的健康。
搭配參照第2A圖、第3D圖以及第3E圖，其為應用本發明實施例之萃取卡匣，混合液286可以於第一混合室23以及第二混合室24間，經由第三通道241來回移動並充分混合，藉此，可以最小的空間達成充分混合混合液286的效果。在一實施例中，第四通道242具有一第四通道出口242A，第四通道出口242A高於第一混合室23以及第二混合室24的頂部，第四通道出口242A高於混合液286的液面，藉此防止混合液286非預期的通過第四通道出口242A而進入萃取模組1。
參照第2A圖，在一實施例中儲液模組2除了塞蓋211以外的部分可以為一體成型。
第4A～4C圖係顯示本發明實施例之核酸萃取方法之流程圖。參照第4A圖，本發明提供一種核酸萃取方法，包括下述步驟。首先，提供一萃取卡匣，該萃取卡匣包括一萃取模組以及一儲液模組，該儲液模組連通該萃取模組，該儲液模組包括一檢體室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清潔液室、一第二清潔液室以及一洗脫劑存放室(S11)。接著，將一酒精置入該酒精室，將一第一清潔液置入該第一清潔液室，將一第二清潔液置入該第二清潔液室，將一洗脫劑置入該洗脫劑存放室(S12)。再，將一檢體置入該檢體室(S13)。接著，將該檢體室內之該檢體升溫(S14)。
參照第4B圖，在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該酒精室內之該酒精注入該檢體室，該檢體以及該酒精混成一混合液(S15)。將該混合液移入該第一混合室，並且將該混合液於該第一混合室以及該第二混合室中來回充分混合(S16)。將該混合液移至該萃取模組以進行核酸抓取(S17)，並且將該混合液被移至該萃取模組之一第一廢液室(S18)。
參照第4C圖，在一實施例中，該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該第一清潔液分次從該第一清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室(S21)。並且，將該第一清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組(S22)。再，將該第一清潔液移至該萃取模組之該第一廢液室(S23)。將該第二清潔液分次從該第二清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室(S24)。並且，將該第二清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組(S25)。再，將至少部分之該第二清潔液移至該萃取模組之一第二廢液室(S26)。該核酸萃取方法其更包括下述步驟：將該洗脫劑存放室內之該洗脫劑移至該萃取模組，以從該萃取模組內取出核酸(S27)。
在一實驗中，申請人以含有高濃度待測核酸(Mh plasmid:106 copies/mL, CytB plasmid)的口腔細胞保存液作為陽性樣本，不含待測核酸的口腔細胞保存液作為陰性樣本，執行陽性與陰性樣本的交錯檢測，確認接續陽性檢體後檢測的陰性檢測試結果為未檢出核酸。經過實驗驗證，應用本發明實施例之萃取卡匣，可有效防止交叉汙染。 試驗1:連續四次高濃度陽性與陰性樣本交替檢測 (檢測順序:陽性è陰性è 陽性è 陰性) 結果：陰性檢體未檢出 試驗2:連續五次高濃度陽性檢測後接續陰性樣本(檢測順序:陽性è陽性è 陽性è陽性è 陽性è陰性) 結果：陰性檢體未檢出
雖然本發明已以具體之較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此項技術者，在不脫離本發明之精神和範圍內，仍可作些許的更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
C‧‧‧萃取卡匣1‧‧‧萃取模組2‧‧‧儲液模組21‧‧‧檢體室211‧‧‧塞蓋212‧‧‧檢體填液孔213‧‧‧第一檢體室連接孔214‧‧‧第二檢體室連接孔22‧‧‧酒精室221‧‧‧第一通道222‧‧‧酒精室連接孔23‧‧‧第一混合室231‧‧‧第二通道24‧‧‧第二混合室241‧‧‧第三通道242‧‧‧第四通道242A‧‧‧第四通道出口25‧‧‧第一清潔儲存室251‧‧‧第五通道26‧‧‧第二清潔儲存室261‧‧‧第六通道27‧‧‧洗脫劑存放室271‧‧‧第七通道281‧‧‧酒精282‧‧‧第一清潔液283‧‧‧第二清潔液284‧‧‧洗脫劑285‧‧‧檢體286‧‧‧混合液29‧‧‧儲液模組本體291‧‧‧第一側292‧‧‧第二側3‧‧‧取樣模組4‧‧‧連通模組S11、S12、S13、S14、S15、S16、S17、S18、S21、S22、S23、S24、S25、S26、S27‧‧‧步驟
第1A圖係顯示本發明實施例之萃取卡匣的組合圖。 第1B圖係顯示本發明實施例之萃取卡匣的爆炸圖。 第2A圖係顯示本發明實施例之儲液模組的細部結構。 第2B圖係顯示本發明實施例之第三通道的細部結構。 第3A、3B、3C、3D、3E、3F、3G、3H、3I圖係顯示本發明實施例之儲液模組的運作步驟。 第4A、4B、4C圖係顯示本發明實施例之核酸萃取方法之流程圖。
2‧‧‧儲液模組
21‧‧‧檢體室
211‧‧‧塞蓋
212‧‧‧檢體填液孔
213‧‧‧第一檢體室連接孔
214‧‧‧第二檢體室連接孔
22‧‧‧酒精室
221‧‧‧第一通道
222‧‧‧酒精室連接孔
23‧‧‧第一混合室
231‧‧‧第二通道
24‧‧‧第二混合室
242‧‧‧第四通道
242A‧‧‧第四通道出口
25‧‧‧第一清潔液儲存室
251‧‧‧第五通道
26‧‧‧第二清潔液儲存室
261‧‧‧第六通道
27‧‧‧洗脫劑存放室
271‧‧‧第七通道
29‧‧‧儲液模組本體
291‧‧‧第一側
292‧‧‧第二側

Claims (12)

  1. 一種萃取卡匣，包括：一萃取模組；以及一儲液模組，連通該萃取模組，該儲液模組包括：一儲液模組本體，包括一第一側、一第二側以及一檢體填液孔，該第一側相反於該第二側，而該檢體填液孔形成於該第一側；一檢體室，形成於該儲液模組本體，該檢體室連通該檢體填液孔，該檢體室包括一第一檢體室連接孔以及一第二檢體室連接孔，該第一檢體室連接孔相對該第二側更靠近該第一側；一塞蓋，適於密封該檢體填液孔，一酒精室，形成於該儲液模組本體；以及一第一通道，連通該酒精室以及該檢體室之該第一檢體室連接孔，其中該第一通道至少部分位於該酒精室與該第二側之間，其中，該酒精室包括一酒精室連接孔，該酒精室連接孔相對該第一側更靠近該第二側，該第一通道連通該酒精室連接孔以及該第一檢體室連接孔。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之萃取卡匣，其中該儲液模組更包括一第一混合室以及一第二通道，該第一混合室形成於該儲液模組本體，該第二檢體室連接孔相對該第一側更靠近該第二側，該第二通道連通該第二檢體室連接孔以及該第一混合室。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之萃取卡匣，其中該儲液模組更包括一第二混合室、一第三通道以及一第四通道，該第二混合室形成於該儲液模組本體，該第三通道連通該第一混合室以及該 第二混合室，該第四通道連通該該第二混合室以及該萃取模組，該第四通道具有一第四通道出口，該第四通道出口相較於該第一混合室以及該第二混合室更靠近該第二側。
  4. 如申請專利範圍第3項所述之萃取卡匣，其中該儲液模組更包括一第一清潔液室、一第二清潔液室、一第五通道以及一第六通道，該第一清潔液室以及該第二清潔液室形成於該儲液模組本體，該第五通道連通該第一清潔液室以及該第一混合室，該第六通道連通該第二清潔液室以及該第一混合室。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之萃取卡匣，其中該儲液模組更包括一洗脫劑存放室以及一第七通道，該洗脫劑存放室形成於該儲液模組本體，該第七通道連通該洗脫劑存放室以及該萃取模組。
  6. 一種核酸萃取方法，包括：提供一萃取卡匣，該萃取卡匣包括一萃取模組以及一儲液模組，該儲液模組連通該萃取模組，該儲液模組包括一檢體室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清潔液室、一第二清潔液室以及一洗脫劑存放室；將一酒精置入該酒精室，將一第一清潔液置入該第一清潔液室，將一第二清潔液置入該第二清潔液室，將一洗脫劑置入該洗脫劑存放室；將一檢體置入該檢體室；以及將該檢體室內之該檢體升溫。
  7. 如申請專利範圍第6項所述之核酸萃取方法，其更包括： 將該酒精室內之該酒精注入該檢體室，該檢體以及該酒精混成一混合液。
  8. 如申請專利範圍第7項所述之核酸萃取方法，其更包括：將該混合液移入該第一混合室；以及將該混合液於該第一混合室以及該第二混合室中來回充分混合。
  9. 如申請專利範圍第8項所述之核酸萃取方法，其更包括：將該混合液移至該萃取模組以進行核酸抓取；以及將該混合液被移至該萃取模組之一第一廢液室。
  10. 如申請專利範圍第9項所述之核酸萃取方法，其更包括：將該第一清潔液分次從該第一清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室；將該第一清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組；以及將該第一清潔液移至該萃取模組之該第一廢液室。
  11. 如申請專利範圍第10項所述之核酸萃取方法，其更包括：將該第二清潔液分次從該第二清潔液室被移至該第一混合室以及該第二混合室中，以清潔該第一混合室以及該第二混合室；將該第二清潔液被移至該萃取模組以清潔該萃取模組；以及將至少部分之該第二清潔液移至該萃取模組之一第二廢液室。
  12. 如申請專利範圍第11項所述之核酸萃取方法，其更包括：將該洗脫劑存放室內之該洗脫劑移至該萃取模組，以從該萃取模組內取出核酸。
TW107145106A 2017-12-26 2018-12-14 核酸萃取方法及其萃取卡匣 TWI685564B (zh)

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