CN109966776B - 核酸萃取方法及其萃取卡匣 - Google Patents
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Abstract
一种萃取卡匣，包括一萃取模块以及一储液模块。储液模块连通上述萃取模块，包括一储液模块本体、一检体室、一塞盖、一酒精室以及一第一通道。储液模块本体包括一第一侧、一第二侧以及一检体填液孔，上述第一侧相反于上述第二侧，上述检体填液孔形成于上述第一侧。检体室形成于上述储液模块本体，上述检体室连通上述检体填液孔，上述检体室包括一第一检体室连接孔以及一第二检体室连接孔，上述第一检体室连接孔相对上述第二侧更靠近上述第一侧。塞盖适于密封上述检体填液孔。酒精室形成于上述储液模块本体。第一通道连通上述酒精室以及上述检体室的上述第一检体室连接孔。
Description
技术领域
本发明的实施例涉及一种萃取卡匣，尤其涉及一种具有储液模块的萃取卡匣。
背景技术
在公知的储液模块中，检体室通常会有一压力供给开孔，以连接压力源。通过上述压力供给开孔，可以控制检体室内的检体的流动。然而，由于检体中往往包含病毒、细菌或其他污染物，上述等污染物会通过压力供给开孔而跑到检验设备或外部环境，造成污染，不但可能会造成检测结果失准，也可能会危害检验人员的健康。
发明内容
本发明的实施例为了欲解决公知技术的问题而提供的一种萃取卡匣，包括一萃取模块以及一储液模块。储液模块连通上述萃取模块，包括一储液模块本体、一检体室、一塞盖、一酒精室以及一第一通道。储液模块本体包括一第一侧、一第二侧以及一检体填液孔，上述第一侧相反于上述第二侧，上述检体填液孔形成于上述第一侧。检体室形成于上述储液模块本体，上述检体室连通上述检体填液孔，上述检体室包括一第一检体室连接孔以及一第二检体室连接孔，上述第一检体室连接孔相对上述第二侧更靠近上述第一侧。塞盖适于密封上述检体填液孔。酒精室形成于上述储液模块本体。第一通道连通上述酒精室以及上述检体室的上述第一检体室连接孔。
在一实施例中，上述酒精室包括一酒精室连接孔，上述酒精室连接孔相对上述第一侧更靠近上述第二侧，上述第一通道连通上述酒精室连接孔以及上述第一检体室连接孔。
在一实施例中，上述储液模块还包括一第一混合室以及一第二通道，上述第一混合室形成于上述储液模块本体，上述第二检体室连接孔相对上述第一侧更靠近上述第二侧，上述第二通道连通上述第二检体室连接孔以及上述第一混合室。
在一实施例中，上述储液模块还包括一第二混合室、一第三通道以及一第四通道，上述第二混合室形成于上述储液模块本体，上述第三通道连通上述第一混合室以及上述第二混合室，上述第四通道连通上述第二混合室以及上述萃取模块。
在一实施例中，上述储液模块还包括一第一清洁液室、一第二清洁液室、一第五通道以及一第六通道，上述第一清洁液室以及上述第二清洁液室形成于上述储液模块本体，上述第五通道连通上述第一清洁液室以及上述第一混合室，上述第六通道连通上述第二清洁液室以及上述第一混合室。
在一实施例中，上述储液模块还包括一洗脱剂存放室以及一第七通道，上述洗脱剂存放室形成于上述储液模块本体，上述第七通道连通上述洗脱剂存放室以及上述萃取模块。
在一实施例中，本发明提供一种核酸萃取方法，包括下述步骤。首先，提供一萃取卡匣，上述萃取卡匣包括一萃取模块以及一储液模块，上述储液模块连通上述萃取模块，上述储液模块包括一检体室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清洁液室、一第二清洁液室以及一洗脱剂存放室。接着，将一酒精置入上述酒精室，将一第一清洁液置入上述第一清洁液室，将一第二清洁液置入上述第二清洁液室，将一洗脱剂置入上述洗脱剂存放室。再，将一检体置入上述检体室。接着，将上述检体室内的上述检体升温。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述酒精室内的上述酒精注入上述检体室，上述检体以及上述酒精混成一混合液。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述混合液移入上述第一混合室，并，将上述混合液于上述第一混合室以及上述第二混合室中来回充分混合。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述混合液移至上述萃取模块以进行核酸抓取，并且，将上述混合液被移至上述萃取模块的一第一废液室。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述第一清洁液分次从上述第一清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室。并且，将上述第一清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块。再，将上述第一清洁液移至上述萃取模块的上述第一废液室。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述第二清洁液分次从上述第二清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室。并且，将上述第二清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块。再，将至少部分的上述第二清洁液移至上述萃取模块的一第二废液室。
在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述洗脱剂存放室内的上述洗脱剂移至上述萃取模块，以从上述萃取模块内取出核酸。
应用本发明实施例的萃取卡匣，上述检体室的上述检体填液孔被塞盖所密封，上述检体室内的混合液通过从上述酒精室而来的气压，而被移至上述第一混合室。因此，检体室内的检体内的病毒、细菌等污染物无法轻易的从上述储液模块泄漏。即使上述检体内的污染物通过上述第一检体室连接孔(位于检体室上方)以及上述第一通道进入上述酒精室，上述污染物也会被酒精室内的酒精消毒而无法造成污染。本发明实施例的萃取卡匣可降低检体对分析仪内部或周围环境的污染，提高分析结果的准确度，并维护操作人员的健康。
附图说明
图1A为本发明实施例的萃取卡匣的组合图。
图1B为本发明实施例的萃取卡匣的爆炸图。
图2A为本发明实施例的储液模块的细部结构。
图2B为本发明实施例的第三通道的细部结构。
图3A、图3B、图3C、图3D、图3E、图3F、图3G、图3H、图3I为本发明实施例的储液模块的运作步骤。
图4A、图4B、图4C为本发明实施例的核酸萃取方法的流程图。
附图标记如下：
C～萃取卡匣
1～萃取模块
2～储液模块
21～检体室
211～塞盖
212～检体填液孔
213～第一检体室连接孔
214～第二检体室连接孔
22～酒精室
221～第一通道
222～酒精室连接孔
23～第一混合室
231～第二通道
24～第二混合室
241～第三通道
242～第四通道
242A～第四通道出口
25～第一清洁储存室
251～第五通道
26～第二清洁储存室
261～第六通道
27～洗脱剂存放室
271～第七通道
281～酒精
282～第一清洁液
283～第二清洁液
284～洗脱剂
285～检体
286～混合液
29～储液模块本体
291～第一侧
292～第二侧
3～取样模块
4～连通模块
S11、S12、S13、S14、S15、S16、S17、S18、S21、S22、S23、S24、S25、S26、S27～步骤
具体实施方式
图1A为本发明实施例的萃取卡匣C的组合图。图1B为本发明实施例的萃取卡匣C的爆炸图。搭配参照第1A、1B图，萃取卡匣C包括一萃取模块1、一储液模块2、一取样模块3、连通模块4等元件。萃取卡匣C适于置入于一分析仪之中。上述分析仪包括一第一气压供应模块、一第二气压供应模块以及一检测模块，上述第一气压供应模块以及上述第二气压供应模块对萃取卡匣C提供气压，以控制萃取卡匣C内的液体流动。上述检测模块对萃取卡匣C进行加热、散热，并对上述萃取卡匣C内的检体进行检测分析。
参照图1B，储液模块2通过上述连通模块4连通萃取模块1，同时，储液模块2内的各腔室亦可透上述连通模块4连通。图2A为本发明实施例的储液模块2的细部结构。搭配参照图2A，储液模块2包括一储液模块本体29、一检体室21、一塞盖211、一酒精室22以及一第一通道221。储液模块本体包括一第一侧291、一第二侧292以及一检体填液孔212，第一侧291相反于上述第二侧292，检体填液孔212形成于第一侧291。检体室21形成于储液模块本体29，检体室21连通检体填液孔212，检体室21包括一第一检体室连接孔213以及一第二检体室连接孔214，第一检体室连接孔213相对第二侧292更靠近第一侧291。塞盖211适于密封检体填液孔212。酒精室22形成于储液模块本体29。第一通道221连通酒精室22以及检体室21的第一检体室连接孔213。
参照图2A，在一实施例中，酒精室22包括一酒精室连接孔222，酒精室连接孔222相对第一侧291更靠近第二侧292，第一通道221连通酒精室连接孔222以及第一检体室连接孔213。
参照图2A，在一实施例中，储液模块2还包括一第一混合室23以及一第二通道231，第一混合室23形成于储液模块本体29，第二检体室连接孔214相对第一侧291更靠近第二侧292，第二通道231连通第二检体室连接孔214以及第一混合室23。
参照图2A、图2B，在一实施例中，储液模块2还包括一第二混合室24、一第三通道241以及一第四通道242，第二混合室24形成于储液模块本体29，第三通道241连通第一混合室23以及第二混合室24，第四通道242连通第二混合室24以及萃取模块1。第三通道241连接第一混合室23以及第二混合室24的底部。
参照图2A，在一实施例中，储液模块2还包括一第一清洁液室25、一第二清洁液室26、一第五通道251以及一第六通道261，第一清洁液室25以及第二清洁液室26形成于储液模块本体29，第五通道251连通第一清洁液室25以及第一混合室23，第六通道261连通第二清洁液室26以及第一混合室23。
参照图2A，在一实施例中，储液模块2还包括一洗脱剂存放室27以及一第七通道271，洗脱剂存放室27形成于储液模块本体29，第七通道271连通洗脱剂存放室27以及萃取模块1。
参照图3A～3I，其为本发明实施例的储液模块2的运作步骤。参照图3A，首先，储液模块2内原始存放的四种试剂，分别为：酒精281(酒精室22)、第一清洁液282(第一清洁液室25)、第二清洁液283(第二清洁液室26)以及洗脱剂284(洗脱剂存放室27)。接着，参照图3B，检体285被加入检体室21，萃取卡匣C被置入分析仪的检测模块后，检体室21的检体285被升温至60度。再者，请参照图3C，检体室21的检体285被升温至60度之后，酒精室22内的酒精281被注入检体室21，检体室21内的检体285以及酒精281混成一混合液286。接着，参照图3D以及图3E，检体室21内的检体285以及酒精281的一混合液286被移入第一混合室23(图3D)，并于第一混合室23以及第二混合室24中充分混合(图3E)。
在一实施例中，充分混合的检体285以及酒精281的混合液286被移至萃取模块1以进行核酸抓取，并被移至萃取模块1的一第一废液室。
接着，参照图3F以及图3G，第一清洁液282分次从第一清洁液室25被移至第一混合室23以及第二混合室24中，以清洁第一混合室23以及第二混合室24。第一清洁液282并被移至萃取模块1以清洁萃取模块1。第一清洁液282最后被移至萃取模块1的上述第一废液室。
接着，请参照图3H以及图3I，第二清洁液283分次从第二清洁液室26被移至第一混合室23以及第二混合室24中，以清洁第一混合室23以及第二混合室24。第二清洁液283并被移至萃取模块1以清洁萃取模块1。至少部分的第二清洁液283最后被移至萃取模块1的一第二废液室。在此实施例中，部分的第二清洁液283被移至萃取模块1的上述第一废液室，而最后部分的第二清洁液283被移至萃取模块1的上述第二废液室。
最后，洗脱剂存放室27内的洗脱剂284被移至萃取模块1，以从萃取模块1内取出核酸，包含核酸的洗脱剂284接着被移至取样模块3，以进行后续的定量取样的流程。
请搭配参照图2A以及图3B，图3B为应用本发明实施例的萃取卡匣，检体室21的检体填液孔212被塞盖211所密封，检体室21内的混合液286通过从酒精室22而来的气压，而被移至第一混合室23。因此，检体室21内的检体285内的病毒、细菌等污染物无法轻易的从上述储液模块泄漏。即使检体285内的污染物通过上述第一检体室连接孔(位于检体室21上方)以及第一通道221进入酒精室22，上述污染物也会被酒精室22内的酒精消毒而无法造成污染。本发明实施例的萃取卡匣可降低检体285对分析仪内部或周围环境的污染，提高分析结果的准确度，并维护操作人员的健康。
搭配参照图2A、图3D以及图3E，其为应用本发明实施例的萃取卡匣，混合液286可以于第一混合室23以及第二混合室24间，经由第三通道241来回移动并充分混合，由此，可以最小的空间达成充分混合混合液286的效果。在一实施例中，第四通道242具有一第四通道出口242A，第四通道出口242A高于第一混合室23以及第二混合室24的顶部，第四通道出口242A高于混合液286的液面，由此防止混合液286非预期的通过第四通道出口242A而进入萃取模块1。
参照图2A，在一实施例中储液模块2除了塞盖211以外的部分可以为一体成型。
图4A～4C为本发明实施例的核酸萃取方法的流程图。参照图4A，本发明提供一种核酸萃取方法，包括下述步骤。首先，提供一萃取卡匣，上述萃取卡匣包括一萃取模块以及一储液模块，上述储液模块连通上述萃取模块，上述储液模块包括一检体室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清洁液室、一第二清洁液室以及一洗脱剂存放室(S11)。接着，将一酒精置入上述酒精室，将一第一清洁液置入上述第一清洁液室，将一第二清洁液置入上述第二清洁液室，将一洗脱剂置入上述洗脱剂存放室(S12)。再，将一检体置入上述检体室(S13)。接着，将上述检体室内的上述检体升温(S14)。
参照图4B，在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述酒精室内的上述酒精注入上述检体室，上述检体以及上述酒精混成一混合液(S15)。将上述混合液移入上述第一混合室，并且将上述混合液于上述第一混合室以及上述第二混合室中来回充分混合(S16)。将上述混合液移至上述萃取模块以进行核酸抓取(S17)，并且将上述混合液被移至上述萃取模块的一第一废液室(S18)。
参照图4C，在一实施例中，上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述第一清洁液分次从上述第一清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室(S21)。并且，将上述第一清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块(S22)。再，将上述第一清洁液移至上述萃取模块的上述第一废液室(S23)。将上述第二清洁液分次从上述第二清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室(S24)。并且，将上述第二清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块(S25)。再，将至少部分的上述第二清洁液移至上述萃取模块的一第二废液室(S26)。上述核酸萃取方法其还包括下述步骤：将上述洗脱剂存放室内的上述洗脱剂移至上述萃取模块，以从上述萃取模块内取出核酸(S27)。
在一实验中，申请人以含有高浓度待测核酸(Mh plasmid:106copies/mL,CytBplasmid)的口腔细胞保存液作为阳性样本，不含待测核酸的口腔细胞保存液作为阴性样本，执行阳性与阴性样本的交错检测，确认接续阳性检体后检测的阴性检测试结果为未检出核酸。经过实验验证，应用本发明实施例的萃取卡匣，可有效防止交叉污染。
试验1:连续四次高浓度阳性与阴性样本交替检测(检测顺序:阳性→阴性→阳性→阴性)
结果：阴性检体未检出
| 测试样本 | 高阳性 | 阴性 | 高阳性 | 阴性 |
| Mh plasmid1 Cq | 25.11 | N/A | 26.48 | N/A |
| CytB plasmid Cq | 24.54 | N/A | 28.1 | N/A |
试验2：连续五次高浓度阳性检测后接续阴性样本(检测顺序：阳性→阳性→阳性→阳性→阳性→阴性)
结果：阴性检体未检出
| 测试样本 | 高阳性 | 高阳性 | 高阳性 | 高阳性 | 高阳性 | 阴性 |
| Mh plasmid1Cq | 28.33 | 27.81 | 27.18 | 24.82 | 26.44 | N/A |
| CytB plasmid Cq | 26.89 | 23.51 | 25.85 | 24.68 | 28.58 | N/A |
虽然本发明已以具体的较佳实施例公开如上，然其并非用以限定本发明，本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内，仍可作些许的更动与润饰，因此本发明的保护范围当视随附的权利要求所界定为准。
Claims (12)
1.一种萃取卡匣，包括：
一萃取模块；以及
一储液模块，连通上述萃取模块，上述储液模块包括：
一储液模块本体，包括一第一侧、一第二侧以及一检体填液孔，上述第一侧相反于上述第二侧，而上述检体填液孔形成于上述第一侧；
一检体室，形成于上述储液模块本体，上述检体室连通上述检体填液孔，上述检体室包括一第一检体室连接孔以及一第二检体室连接孔，上述第一检体室连接孔相对上述第二侧更靠近上述第一侧；
一塞盖，适于密封上述检体填液孔，
一酒精室，形成于上述储液模块本体；以及
一第一通道，连通上述酒精室以及上述检体室的上述第一检体室连接孔，其中上述第一通道至少部分位于上述酒精室与上述第二侧之间；
其中上述酒精室包括一酒精室连接孔，上述第一通道连通上述酒精室连接孔以及上述第一检体室连接孔。
2.如权利要求1所述的萃取卡匣，其中上述酒精室连接孔相对上述第一侧更靠近上述第二侧。
3.如权利要求2所述的萃取卡匣，其中上述储液模块还包括一第一混合室以及一第二通道，上述第一混合室形成于上述储液模块本体，上述第二检体室连接孔相对上述第一侧更靠近上述第二侧，上述第二通道连通上述第二检体室连接孔以及上述第一混合室。
4.如权利要求3所述的萃取卡匣，其中上述储液模块还包括一第二混合室、一第三通道以及一第四通道，上述第二混合室形成于上述储液模块本体，上述第三通道连通上述第一混合室以及上述第二混合室，上述第四通道连通上述第二混合室以及上述萃取模块，上述第四通道具有一第四通道出口，上述第四通道出口相较于上述第一混合室以及上述第二混合室更靠近上述第二侧。
5.如权利要求4所述的萃取卡匣，其中上述储液模块还包括一第一清洁液室、一第二清洁液室、一第五通道以及一第六通道，上述第一清洁液室以及上述第二清洁液室形成于上述储液模块本体，上述第五通道连通上述第一清洁液室以及上述第一混合室，上述第六通道连通上述第二清洁液室以及上述第一混合室。
6.如权利要求5所述的萃取卡匣，其中上述储液模块还包括一洗脱剂存放室以及一第七通道，上述洗脱剂存放室形成于上述储液模块本体，上述第七通道连通上述洗脱剂存放室以及上述萃取模块。
7.一种核酸萃取方法，包括：
提供一萃取卡匣，上述萃取卡匣包括一萃取模块以及一储液模块，上述储液模块连通上述萃取模块，上述储液模块包括一检体室、一酒精室、一第一混合室、一第二混合室、一第一清洁液室、一第二清洁液室以及一洗脱剂存放室；
将一酒精置入上述酒精室，将一第一清洁液置入上述第一清洁液室，将一第二清洁液置入上述第二清洁液室，将一洗脱剂置入上述洗脱剂存放室；
将一检体置入上述检体室；
将上述检体室内的上述检体升温；以及
将上述酒精室内的上述酒精注入上述检体室，上述检体以及上述酒精混成一混合液。
8.如权利要求7所述的核酸萃取方法，其还包括：
将上述混合液移入上述第一混合室；以及
将上述混合液于上述第一混合室以及上述第二混合室中来回充分混合。
9.如权利要求8所述的核酸萃取方法，其还包括：
将上述混合液移至上述萃取模块以进行核酸抓取；以及
将上述混合液被移至上述萃取模块的一第一废液室。
10.如权利要求9所述的核酸萃取方法，其还包括：
将上述第一清洁液分次从上述第一清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室；
将上述第一清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块；以及
将上述第一清洁液移至上述萃取模块的上述第一废液室。
11.如权利要求10所述的核酸萃取方法，其还包括：
将上述第二清洁液分次从上述第二清洁液室被移至上述第一混合室以及上述第二混合室中，以清洁上述第一混合室以及上述第二混合室；
将上述第二清洁液被移至上述萃取模块以清洁上述萃取模块；以及
将至少部分的上述第二清洁液移至上述萃取模块的一第二废液室。
12.如权利要求11所述的核酸萃取方法，其还包括：
将上述洗脱剂存放室内的上述洗脱剂移至上述萃取模块，以从上述萃取模块内取出核酸。
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