TWI684457B - 香蕉皮水萃取物的用途 - Google Patents
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Abstract
一種香蕉皮水萃取物的用途,係應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,該香蕉皮水萃取物係以口服的方式投予一所需個體;其中,該香蕉皮水萃取物係以水作為一萃取溶劑,於20~70℃之溫度下萃取一香蕉皮樣品所獲得,該香蕉皮樣品之含水量介於5~20%之間。
Description
本發明係關於一種香蕉皮水萃取物的用途,特別係關於一種香蕉皮水萃取物應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物的用途。
紫外光(ultraviolet,簡稱UV)為波長介於10~400nm之間的電磁波,依據其波長的不同,主要可以區分為UVA、UVB及UVC三大類,太陽光所發散的UVC會被臭氧層所吸收,不會直接照射到地表,而可以直接照射到地表的UVA及UVB中,約有95%以上為UVA,只有極少部分為UVB;然而UVB所攜帶之能量較大,可以直接穿透至表皮層,造成表皮肥厚、角質增厚及皮膚紅腫發炎等症狀,也會破壞細胞內的DNA,使DNA發生突變,並促進活性氧物質的生成而造成蛋白質、脂質及細胞膜的破壞,對皮膚的傷害極大。
一般而言,消費者會藉由穿著長袖防曬衣物或手持防曬傘來減少紫外光的照射,然而穿著長袖防曬衣物難免會讓消費者感到悶熱,而手持防曬傘也難免會造成不便;又或者,消費者亦可以藉由於皮膚塗抹具有防曬係數的防曬乳來阻絕紫外光對皮膚的傷害,然而防曬乳除了會讓皮膚有悶熱感,更可能會導致痘痘的發生,且更需要定時補擦而造成消費者的不便。因此,如果能夠以口服的方式使皮膚吸收及利用具有防止UVB照射對皮膚造成傷害的活性成分,便能免除上述問題。
為解決上述問題,本發明提供一種香蕉皮水萃取物的用途,係將萃取自香蕉皮之活性成分,應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物者。
本發明之香蕉皮水萃取物的用途,係應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,該香蕉皮水萃取物係以口服的方式投予一所需個體;其中,該香蕉皮水萃取物係由包含以下步驟之方法製備獲得:提供一香蕉皮樣品,該香蕉皮樣品之含水量介於5~20%之間;於25~32℃的溫度下,以乙醇濃度為95%的乙醇水溶液萃取該香蕉皮樣品24小時,並連續萃取5次以獲得一乙醇萃取液,將該乙醇萃取液經減壓濃縮以去除乙醇,以獲得含水率為4.25%的乙醇浸膏;將該乙醇浸膏混合一第一萃取溶劑,該第一萃取溶劑包含等體積之水及乙酸乙酯,進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得一第一水層溶液,將該第一水層溶液經減壓濃縮移除水後得一浸膏;將該浸膏混合6倍體積的一第二萃取溶劑,該第二萃取溶劑包含等體積之水及丁烷,進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得一第二水層溶液;及將該第二水層溶液進行減壓濃縮及冷凍乾燥。據此,藉由萃取自香蕉皮之活性成分,可以抑制UVB的照射所誘發之角質細胞的死亡及發炎等現象,因而可以應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,為本發明之功效。
本發明之香蕉皮水萃取物的用途,其中,該香蕉皮水萃取物係以每天每公斤所需個體投予80毫克之劑量投予該所需個體。
第1圖:用以製備本發明第三實施例之香蕉皮水萃取物的流程圖。
第2a圖:第B1~B9組之相對細胞存活率的長條圖。
第2b圖:第B1~B3及B4’~B9’組之相對細胞存活率的長條圖。
第3圖:第B1~B3、B7~B9及B7’~B9’組之每顆細胞IL-6生成量的長條圖。
第4圖:第C1~C3組之細胞存活率提升百分比的折線圖。
第5圖:第D1~D4組之背部皮膚、耳朵皮膚的蘇木精-伊紅染色結果。
第6a圖:第D1~D4組之背部皮膚厚度的長條圖。
第6b圖:第D1~D4組之耳朵皮膚厚度的長條圖。
為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂,下文特舉本發明之較佳實施例,並配合所附圖式,作詳細說明如下:本發明之香蕉皮水萃取物,係可以抑制UVB的照射所誘發之角質細胞的死亡及發炎等現象,因而可以應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,該香蕉皮水萃取物與醫藥學上可以接受之載劑或賦形劑組合形成一醫藥組合物,其中,該香蕉皮水萃取物係可以製備成任何方便食用之型式,如錠劑、膠囊、粉劑、粒劑或液劑等,或者將該香蕉皮水萃取物與其他食品或飲料組合,以適於食用之樣態供生物體以口服方式服用。
其中,該香蕉皮水萃取物係可以藉由一包含以下步驟之方法所製得:提供一香蕉皮樣品;以一萃取溶劑萃取該香蕉皮樣品;及將香蕉皮粗萃液進行濃縮,獲得該香蕉皮水萃取物。
詳而言之,該香蕉皮樣品係指芭蕉科(Musaceae)芭蕉屬(Musa)香蕉種(M.x paradisiaca)之多年生草本植物的果皮,一般被視為農業廢棄物。該香蕉皮樣品可以預先進行乾燥,使其含水量介於5~20%之間,例如係可以選擇以吹風乾燥、冷凍乾燥、噴霧乾燥或加熱乾燥等方式,使該香蕉皮樣品之含水量介於5~20%之間;此外,該香蕉皮樣品亦可
以預先碎成粉粒,以增加該香蕉皮樣品與該萃取溶劑之接觸表面積,藉此提升後續萃取之萃取效率。
該萃取溶劑可以選擇為水,較佳可以為符合食用、藥用等級的純水,藉此使萃取獲得之香蕉皮水萃取物符合食品及藥品的規範。
舉例而言,該香蕉皮樣品係能夠以重量體積比為1:2~1:20的比例與該萃取溶劑混合(即,每1公斤之香蕉皮樣品與2~10公升之萃取溶劑混合),並於20~70℃之溫度下進行萃取24~72小時,上述萃取亦可以重複數次,使該香蕉皮樣品所富含之活性成分可以完整溶出於該萃取溶劑,進而獲得富含該香蕉皮樣品之活性成分的水萃取液,此為本發明所屬技術領域中具有通常知識者所廣泛應用,在此不加以贅述。
又或者,本發明所屬技術領域中具有通常知識者亦可以選擇以乙醇濃度為70~95%的乙醇水溶液作為該萃取溶劑萃取該香蕉皮樣品,獲得一乙醇萃取液,並將該乙醇萃取液經由水及他種溶劑的分配萃取,並收集水層以獲得該水萃取液。
前述水萃取液經過減壓濃縮及冷凍乾燥,即可以獲得該香蕉皮水萃取物,藉由此一程序,係可以使該香蕉皮水萃取物之活性成分更加濃縮,是以僅需使用少量之香蕉皮水萃取物即可以發揮最佳療效。
為證實本發明之香蕉皮水萃取物確實具有防止UVB照射對皮膚造成傷害的活性,遂進行以下試驗:
(A)香蕉皮水萃取物的製備:
於第一實施例中,係選用高雄美濃地區之老北蕉品種(Musa sp.Cavendish(AAA))的成熟香蕉,以自來水洗滌1小時後自然風乾,取出香蕉果肉後殘餘之香蕉皮作為該香蕉皮樣品(含水量為5~20%),將該香蕉皮樣品(共1.2公斤)混合2.4公升之RO水於25~32℃下萃取24小時,並連續萃取5次,收集各次的水萃取液,經過減壓濃縮及冷凍乾燥後
獲得第一實施例的香蕉皮水萃取物(18.6公克)。
於第二實施例中,同樣選用前述之香蕉皮作為該香蕉皮樣品,將該香蕉皮樣品(共1.2公斤)混合2.4公升之RO水於60℃恆溫水槽中萃取24小時,並連續萃取5次,收集各次的水萃取液,續經過減壓濃縮及冷凍乾燥後獲得第二實施例的香蕉皮水萃取物(45.3公克)。
請參照第1圖所示,於第三實施例中,同樣選用前述之香蕉皮作為該香蕉皮樣品,將該香蕉皮樣品(共0.984公斤)混合20公升之乙醇濃度為95%乙醇水溶液於25~32℃下萃取24小時,並連續萃取5次,獲得該乙醇萃取液(經減壓濃縮移除乙醇後得一乙醇浸膏,共452.5公克,含水率為4.25%);將該乙醇浸膏(共408.8公克)混合24.5公斤之第一萃取溶劑(包含等體積之水及乙酸乙酯)以進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得該第一水層溶液(經減壓濃縮移除水後得一浸膏);將該浸膏混合6倍體積之第二萃取溶劑(包含等體積之水及丁烷)以進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得該第二水層溶液,經過減壓濃縮及冷凍乾燥後獲得第三實施例的香蕉皮水萃取物(266.6公克)。
此外,另將第1圖所示之乙醇萃取液、丁烷層溶液、乙酸乙酯層溶液、己烷層溶液、甲醇層溶液分別經減壓濃縮及冷凍乾燥,獲得香蕉皮乙醇萃取物、香蕉皮丁烷萃取物(5.2公克)、香蕉皮乙酸乙酯萃取物(27.2公克)、香蕉皮己烷萃取物(24.3公克)、香蕉皮甲醇萃取物(3.0公克),以利進行後續試驗的比較。
(B)第三實施例之香蕉皮水萃取物的角質細胞存活率
本試驗係以人類角質細胞株HaCaT作為試驗細胞株,以波長為315nm之UVB照射30秒(UV CROSSLINKER XLE-1000B,電壓120V、頻率60Hz),續如各組細胞中加入如第1表所示之香蕉皮萃取物(濃度分別為20μg/mL及200μg/mL,回溶於DMSO中),並於培養24小時後
進行存活率的分析。
請參照第2a圖所示,無論是第B7組的香蕉皮乙醇萃取物或第B8組的香蕉皮水萃取物(第三實施例)均可以有效提升人類角質細胞株的細胞存活率。
此外,為比較該香蕉皮樣品的含水量差異是否會影響萃取獲得之香蕉皮水萃取物的具有防止UVB照射對皮膚造成傷害的活性,另將含水量為3%以下的香蕉皮樣品同依據第1圖之流程進行萃取,並獲得第B4’~B9’組之香蕉皮甲醇萃取物、香蕉皮乙酸乙酯萃取物、香蕉皮己烷萃取物、香蕉皮乙醇萃取物、香蕉皮水萃取物及香蕉皮丁烷萃取物。
請參照第2b圖所示,第B7’組的香蕉皮乙醇萃取物及第B8’組的香蕉皮水萃取物雖仍可以提升人類角質細胞株的細胞存活率,惟其效果顯然低於第2a圖所示之第B7、B8組,顯示該香蕉皮樣品之含水量較佳應調整為介於5~20%之間。
接著,另取前述第B1~B3組、第B7~B9組及第B7’~B9’組的細胞之上清液,以ELISA法分析上清液中的IL-6含量,除以細胞個數,計算每顆細胞之IL-6生成量,結果如第3圖所示,UVB的照射處理會使人類角質細胞株生成促發炎細胞激素IL-6,而第B8組的香蕉皮水萃取物(第三實施例)則可以顯著降低IL-6的生成量,顯示本發明之香蕉皮水萃物能夠抑制UVB的照射所誘發的發炎反應。
(C)第一、二、三實施例之香蕉皮水萃取物的比較
本試驗同以人類角質細胞株HaCaT作為試驗細胞株,以波長為315nm之UVB照射30秒(UV CROSSLINKER XLE-1000B,電壓120V、頻率60Hz),續如各組細胞中加入如第3表所示之香蕉皮水萃取物(濃
度分別為5μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL及300μg/mL,回溶於DMSO中),並於培養24小時後進行存活率的分析。
請參照第4圖所示,相較於僅照射UVB且未處理香蕉皮水萃取物之控制組的細胞存活率,處理前述第一、二、三實施例的香蕉皮水萃取物均可以有效提升人類角質細胞株的細胞存活率,其中以第C3組的香蕉皮水萃取物(第三實施例)為佳,第C1組的香蕉皮水萃取物(第一實施例)次之。
(D)第三實施例之香蕉皮水萃取物的角質厚度增加狀況
依據前述試驗可以得知,該第三實施例之香蕉皮水萃取物的防止UVB照射對皮膚造成傷害的活性優於第一、二實施例之香蕉皮水萃取物,故後續試驗皆以該第三實施例之香蕉皮水萃取物進行。
本試驗係選用BALB/c雌鼠作為試驗動物,經口餵食如第4表所述之萃取物共14天,並於第8天開始每天照射150mJ/cm2之UVB直到第14天(照射的部位為已刮除體毛之背部及不具有體毛的耳朵),最後於第15天犧牲各組小鼠後,將各組小鼠的背部皮膚、耳朵皮膚進行蘇木精一伊紅染色。
各組小鼠的背部皮膚、耳朵皮膚的蘇木精一伊紅染色結果如第5圖所示,另第6a、6b圖則為將背部皮膚及耳朵皮膚的厚度之定量結果,其結果顯示,照射UVB會使小鼠的背部皮膚、耳朵皮膚的表皮層增厚,而餵食該香蕉皮水萃物可以有效減少皮膚表皮層增厚的現象。
接著以免疫組織染色法觀察各組小鼠的背部皮膚中的第一型膠原蛋白的分布,其結果如第5圖所示,餵食該香蕉皮水萃物可以有效減緩UVB照射所造成的第一型膠原蛋白流失的現象。
綜合上述,本發明之香蕉皮水萃取物的用途,藉由萃取自香蕉皮之活性成分,可以抑制UVB的照射所誘發之角質細胞的死亡及發炎等現象,因而可以應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,為本發明之功效。
此外,由於該香蕉皮水萃取物能夠應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,使原本被認定為農業廢棄物的香蕉皮具有新的經濟價值,農民將不再只能望堆積如山的香蕉皮興嘆,而是能夠為香蕉皮創造出新的經濟出路,為本發明之功效。
雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示,然其並非用以限定本發明,任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內,相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇,因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
Claims (2)
- 一種香蕉皮水萃取物的用途,係應用於製備防止UVB照射對皮膚造成傷害的藥物,該香蕉皮水萃取物係以口服的方式投予一所需個體;其中,該香蕉皮水萃取物係由包含以下步驟之方法製備獲得:提供一香蕉皮樣品,該香蕉皮樣品之含水量介於5~20%之間;於25~32℃的溫度下,以乙醇濃度為95%的乙醇水溶液萃取該香蕉皮樣品24小時,並連續萃取5次以獲得一乙醇萃取液,將該乙醇萃取液經減壓濃縮以去除乙醇,以獲得含水率為4.25%的乙醇浸膏;將該乙醇浸膏混合一第一萃取溶劑,該第一萃取溶劑包含等體積之水及乙酸乙酯,進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得一第一水層溶液,將該第一水層溶液經減壓濃縮移除水後得一浸膏;將該浸膏混合6倍體積的一第二萃取溶劑,該第二萃取溶劑包含等體積之水及丁烷,進行分配萃取,並連續萃取5次,收集各次的水層以獲得一第二水層溶液;及將該第二水層溶液進行減壓濃縮及冷凍乾燥。
- 如申請專利範圍第1項所述之香蕉皮水萃取物的用途,其中,該香蕉皮水萃取物係以每天每公斤所需個體投予80毫克之劑量投予該所需個體。
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