TWI654989B - 餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途 - Google Patents

Abstract

一種餘甘子萃取物用於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，包含提供一餘甘子萃取物。當包含餘甘子萃取物的醫藥組合物被提供予MERRF症候群患者的細胞時，餘甘子萃取物提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體進行氧化磷酸化反應與三磷酸線苷(ATP)合成的能力。

Description

餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅 纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途

本發明係關於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物，特別是一種利用餘甘子萃取物製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途。

粒線體(Mitochondria)是細胞內進行氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所。由於三磷酸腺苷為細胞活動的能量來源，所以粒線體又有「細胞能量工廠」之稱。除了為細胞提供能量外，粒線體還參與細胞分化、細胞資訊傳遞和細胞凋亡等過程，並擁有調控細胞生長周期的能力。

然而，對於粒線體疾病的患者來說，患病的粒線體因活性不足而使患者的細胞產生的問題。舉例來說，MERRF症候群(Myoclonic Epilepsy with Ragged Red Fibers Syndrome)即為一種粒線體疾病。約80%MERRF症候群患者是由於粒線體DNA的tRNA^Lys基因發生A8344G點突變，使得MERRF症候群患者因細胞中粒線體呼吸鏈複合體酵素功能嚴重缺損，導致粒線體產生的能量不足以滿足細胞生長與代謝的需求。

本發明係提供一種利用餘甘子萃取物製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，藉此提高MERRF症候群患者的粒線體活性，進而提升MERRF症候群患者的粒線體所產生的能量。

本發明揭露一種餘甘子萃取物用於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，包含提供餘甘子萃取物。當包含餘甘子萃取物的醫藥組合物被提供予MERRF症候群患者的細胞時，餘甘子萃取物提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體進行氧化磷酸化反應與三磷酸線苷(ATP)合成的能力。

根據上述本發明所揭露的餘甘子萃取物用於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，提供餘甘子萃取物予MERRF症候群患者的細胞，可提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體進行氧化磷酸化反應與三磷酸線苷(ATP)合成的能力。如此一來，MERRF症候群患者的粒線體在受到餘甘子萃取物活化後，使得MERRF症候群患者的粒線體所產生的能量增加，滿足細胞進行生長與代謝時對能量的需求。

以上之關於本揭露內容之說明及以下之實施方式之說明係用以示範與解釋本發明之精神與原理，並且提供本發明之專利申請範圍更進一步之解釋。

以下在實施方式中詳細敘述本發明之詳細特徵以及優點，其內容足以使任何熟習相關技藝者了解本發明之技術內容並據以實施，且根據本說明書所揭露之內容、申請專利範圍及圖式，任何熟習相關技藝者可輕易地理解本發明相關之目的及優點。以下之實施例係進一步詳細說明本發明之觀點，但非以任何觀點限制本發明之範疇。

餘甘子(例如Phyllanthus Emblica或Emblica Officinale)，又稱餘柚子、油柑、庵摩勒(Amalaka)、馬六甲樹(Pokok Melaka)、印度醋栗(Indian Gooseberry)，屬於大戟科餘甘子屬(Emblica)之落葉亞喬木，分佈於自印度至馬來西亞地區及中國南部，一般認為印度為原產地。

本發明使用之餘甘子萃取物之取得方式例如以二氧化碳作為超臨界流體萃取餘甘子果實，或者是以甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、重量百分濃度0.1至5%的氯化鈉水溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鉀水溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鈣水溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鎂水溶液或重量百分濃度0.1至5%的氯化鈉乙醇溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鉀乙醇溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鈣乙醇溶液、重量百分濃度0.1至5%的氯化鎂乙醇溶液作為溶劑萃取餘甘子果實而得到一初萃液。接著，將初萃液過濾純化後得到本發明所使用的餘甘子萃取物。餘甘子萃取物可使用噴霧乾燥(Spray dry)或真空乾燥進行乾燥程序而得到易於保存的餘甘子萃取物粉末。

餘甘子萃取物含有重量百分比35%至55%之Emblicanin-A與Emblicanin-B混合物、重量百分比4%至15%之Punigluconin、重量百分比10%至20%之Pedunculagin、重量百分比5%至15%之Rutin與重量百分比10%至30%之Gallo-ellagitannoids。餘甘子萃取物之紅外線吸收光譜於3403.6±5公分 ^-1(cm ^-1)、2931.6±5公分 ^-1(cm ^-1)、1385.0±5公分 ^-1(cm ^-1)、1318.6±5公分 ^-1(cm ^-1)、1623.5±5公分 ^-1(cm ^-1)、1451.3±5公分 ^-1(cm ^-1)、1352.1±5公分 ^-1(cm ^-1)、1218.4±5公分 ^-1(cm ^-1)、1148.6±5公分 ^-1(cm ^-1)、1035.7±5公分 ^-1(cm ^-1)、3403.6±5公分 ^-1(cm ^-1)具有特徵吸收峰。餘甘子萃取物之高效能液相層析圖譜(HPLC Chromatogram)於1.620±0.5分鐘、2.148±0.5分鐘、3.265±0.5分鐘與4.370±0.5分鐘具有特徵峰信號。

Emblicanin-A(2,3-di-O-galloyl-4,6-(S)-hexahydroxydiphenoyl-2-keto-glucono-lactone)之結構如式一所示。 式一

Emblicanin-B(2,3,4,6-bis-(S)-hexahydroxydiphenoyl-2-keto-glucono-lactone)之結構如式二所示。 式二

Punigluconin(2,3-di-O-galloyl-4,6-(S)-hexahydroxydiphenoyl gluconic acid)之結構如式三所示。 式三

Pedunculagin(2,3,4,6-bis-(S)-hexahydroxydiphenoyl-D-glucose)之結構如式四所示。 式四

Rutin(3’,4’,5,7-tetrahydroxyflavono-1,3-O-rhamnoglucoside)之結構如式五所示。 式五

當提供濃度為每毫升30至50微克(μg/ml)之餘甘子萃取物水溶液予MERRF症候群患者的細胞，進入MERRF症候群患者的細胞的餘甘子萃取物提高細胞內的粒線體的活性。如此一來，經餘甘子萃取物活化的粒線體進行氧化磷酸化反應合成的三磷酸線苷數量提高，粒線體的基礎耗氧量提高，粒線體的最大耗氧能力提高以及粒線體的預存耗氧能力提高。因此，餘甘子萃取物可作為醫藥組合物的活性成分。包含餘甘子萃取物的醫藥組合物可用於提升MERRF症候群患者的粒線體活性。

提供餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物予細胞的方法例如為以食用的方式由口攝取餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物。以食用的方式提供餘甘子萃取物予細胞時，餘甘子萃取物的有效劑量為324毫克(mg)至540毫克(mg)。此處之有效劑量係根據細胞實驗之有效劑量與人體公斤數之換算公式以及本領域習用換算通則進行換算得到。換算公式如下：人體有效劑量(毫克)=細胞實驗之有效劑量(微克/毫升)×小鼠體重(公斤)×折算係數×人體重(公斤)。折算係數是由動物與人體的每公斤體重劑量折算係數表查表得到。當小鼠體重為20g以及人體體重公斤數為60公斤時，折算係數為9.01。

為方便以食用的方式由口攝取餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物，餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物可製成例如液體狀、固體狀、顆粒狀、粉體狀、糊狀或凝膠狀的餘甘子萃取物加工品。餘甘子萃取物加工品中可搭配作為添加劑的賦形劑或呈味劑，以提升風味與方便食用。

賦形劑例如為小麥澱粉、米澱粉、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、糊精、環糊精等澱粉類；結晶纖維素類；乳糖、葡萄糖、砂糖、還原麥芽糖、飴糖、果寡糖、乳化寡糖等糖類；山梨糖醇、赤藻糖醇、木糖醇、乳糖醇、甘露醇等糖醇類。

呈味劑例如為龍眼萃取物、荔枝萃取物、柚子萃取物等各種果汁萃取物；蘋果汁、橘子汁、檸檬汁等各種果汁；桃子香料、梅子香料、酸乳酪香料等各種香料；乙醯磺胺酸鉀、蔗糖素、赤藻糖醇、寡糖類、甘露糖、木糖醇、異構化糖類等各種甜味劑；檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、葡萄糖酸等各種酸味劑；綠茶、烏龍茶、巴拿巴茶(Banaba Tea)、杜仲茶、鐵觀音茶、薏苡茶、七葉膽茶、茭白茶、昆布茶等各種茶成分；阿拉比卡(Coffee Arabica)、羅布斯塔(Coffee Robusta)、賴比瑞亞(Coffee Liberica)等各種咖啡成分等。

再者，餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物亦可包覆於膠囊中以方便由口攝取餘甘子萃取物。餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物可以乾燥粉末之形式被包覆於硬膠囊中。餘甘子萃取物或是包含餘甘子萃取物的醫藥組合物亦可以溶液狀、懸浮液狀、糊狀、粉末狀或顆粒狀的形式被包覆於軟膠囊中。

軟膠囊中用於溶解或分散餘甘子萃取物之油脂類例如為萼梨油、杏仁油、亞麻仁油、小茴香油、白蘇油、橄欖油、橄欖角鯊烯、甜橙油、胸棘鯛油(orange roughy oil)、芝麻油、蒜油、可可脂、南瓜子油、洋甘菊油、胡蘿蔔油、胡瓜油、牛油脂肪酸、夏威夷核果油、越橘子油、糙米胚芽油、大米油、小麥胚芽油、紅花油、牛油樹油脂、液狀牛油樹油脂、紫蘇油、大豆油、月見草油、山茶油、玉米油、菜子油、鋸葉棕萃取油(saw palmetto extract oil)、薏苡油、桃仁油、洋芹子油、蓖麻油、葵花子油、葡萄子油、琉璃苣油、澳洲胡桃油、繡線菊油(meadowfoam oil)、棉子油、花生油、龜油、貂油、蛋黃油、魚油、棕櫚油、棕櫚仁油、木蠟、椰子油、長鏈/中鏈/短鏈之脂肪酸三甘油酯、二酸甘油酯、牛油、豬油、角鯊烯、角鯊烷、姥鮫烷、以及該等油脂類之氫化物等。其中，琉璃苣油與月見草油含有大量伽瑪亞麻油酸(Gamma-Linolenic Acid，GLA)，伽瑪亞麻油酸屬於人體必須脂肪酸，其具有保濕、促進細胞再生以及提升棕脂(Brown Fat)活躍度以促進脂肪燃燒的功能。

此外，著色劑、防腐劑、增黏劑、結合劑、崩解劑、分散劑、穩定劑、膠化劑、抗氧化劑、界面活性劑、防腐劑、pH值調整劑等符合政府單位規定之添加物亦可依照政府單位規定之劑量標準與加工生產之需求添加於餘甘子萃取物加工品中。

以下藉由本發明實施例一、實施例二、比較例一與比較例二說明本發明所揭露之餘甘子萃取物用於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途。

本發明之實驗使用的餘甘子萃取物係將餘甘子( Emblica Officinalis)的果實浸於重量百分濃度1%之氯化鈉水溶液，再以65℃至75℃的蒸汽浴(Steam bath)加熱一小時，接著進行過濾，接著再冷凍3天，接著透過噴霧乾燥(Spray dry)程序得到餘甘子萃取物粉末。乾燥後的餘甘子萃取物型態為棕色粉末(Brown powder)。餘甘子萃取物含有重量百分比27%之Emblicanin-A、重量百分比23%之Emblicanin-B、重量百分比8%之Punigluconin、重量百分比14%之Pedunculagin、重量百分比10%之Rutin與重量百分比10%至30%之Gallo-ellagitannoids。本發明之餘甘子萃取物不以 Emblica Officinalis之萃取物為限，其他具有不同學名但具有相似成分之餘甘子之萃取物也具有相同之效果。

圖1為本發明實施例一與實施例二使用的餘甘子萃取物之紅外線吸收光譜。圖2為本發明實施例一與實施例二使用的高效能液相層析圖譜。如圖1所示，餘甘子萃取物之紅外線吸收光譜於3403.6公分 ^-1(cm ^-1)、2931.6公分 ^-1(cm ^-1)、1385.0公分 ^-1(cm ^-1)、1318.6公分 ^-1(cm ^-1)、1623.5公分 ^-1(cm ^-1)、1451.3公分 ^-1(cm ^-1)、1352.1公分 ^-1(cm ^-1)、1218.4公分 ^-1(cm ^-1)、1148.6公分 ^-1(cm ^-1)、1035.7公分 ^-1(cm ^-1)、3403.6公分 ^-1(cm ^-1)具有特徵吸收峰。如圖2所示，餘甘子萃取物之高效能液相層析圖譜(HPLC Chromatogram)於1.620分鐘、2.148分鐘、3.265分鐘與4.370分鐘具有特徵峰信號。

實驗使用的細胞為MERRF症候群患者的初代(Primary)纖維母細胞。實驗用細胞的準備方式為於24孔的孔盤的每一個孔中植入15,000顆MERRF症候群患者的纖維母細胞後培養24個小時。接著，移除孔中的培養液，再根據各實施例與各比較例的條件，對孔中的MERRF症候群患者的纖維母細胞進行處理。

於實驗過程中，準備實施例一之實驗樣品時，首先將濃度為每毫升40微克(40 μg/ml)的餘甘子萃取物水溶液加入MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中並浸泡24小時。接著，移除MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中的餘甘子萃取物水溶液，完成實施例一之實驗樣品準備。

準備實施例二之實驗樣品時，首先將濃度為每毫升40微克的餘甘子萃取物水溶液加入MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中並浸泡24小時。接著，移除MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中的餘甘子萃取物水溶液，並將濃度為400 μM的H ₂O ₂水溶液加入孔中，使細胞浸泡於濃度為400 μM的H ₂O ₂水溶液中30分鐘。接著，移除MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中的H ₂O ₂水溶液，並以磷酸緩衝生理食鹽水(Phosphate buffered saline，PBS)清洗細胞，完成實施例二之實驗樣品準備。

準備比較例一之實驗樣品時，移除MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中的培養液後，留下的MERRF症候群患者的纖維母細胞即為比較例一之實驗樣品。

準備比較例二之實驗樣品時，首先將濃度為400 μM的H ₂O ₂水溶液加入孔中，使細胞浸泡於濃度為400 μM的H ₂O ₂水溶液中30分鐘。接著，移除MERRF症候群患者的纖維母細胞所在的孔中的H ₂O ₂水溶液，並以磷酸緩衝生理食鹽水(Phosphate buffered saline，PBS)清洗細胞，即完成比較例二之實驗樣品準備。

接著，以海馬生物能量測定儀量測孔中實施例一與比較例一的MERRF症候群患者的纖維母細胞的氧氣消耗量。根據文獻記載，以過氧化氫處理細胞可模擬細胞內氧化產生自由基之狀況，藉此對細胞在氧化壓力下的粒線體活動進行研究。因此，實施例二與比較例二的MERRF症候群患者的纖維母細胞係以過氧化氫處理後，再以海馬生物能量測定儀量測實施例二與比較例二的MERRF症候群患者的纖維母細胞的氧氣消耗量。

海馬生物能量測定儀的測量原理與流程如下。首先，偵測孔中細胞的基礎耗氧量。接著，加入三磷酸線苷合成酶抑制劑以抑制粒線體產生三磷酸線苷，此時減少的耗氧量即為粒線體進行氧化磷酸化反應以合成三磷酸線苷的耗氧量，亦即是粒線體的基礎耗氧量(Basal Respiration)。三磷酸線苷合成酶抑制劑例如為寡黴素(Oligomycin)。接著，加入適當濃度的抗耦合劑，在不破壞粒線體內膜的電子傳遞鏈的情況下，讓粒線體以極限狀況空轉以評估粒線體的最大耗氧能力(Maximal Respiration)。抗耦合劑例如為Carbonyl cyanide-4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone (FCCP)。最後，加入電子傳遞鏈抑制劑已完全關閉粒線體的耗氧，藉此確認量測的背景值，亦即是非粒線體耗氧量(Non-mitochondrial Respiration)。電子傳遞鏈抑制劑例如為魚藤酮(Rotenone)與抗黴素A(Antimycin A)之組合。

粒線體的基礎耗氧量等於細胞的基礎耗氧量減去非粒線體耗氧量。粒線體的基礎耗氧量減去合成三磷酸線苷消耗的氧氣量等於克服氫離子洩漏(Proton Leakage)的耗氧量。粒線體的最大耗氧能力減去粒線體的基礎耗氧量等於粒線體的預存耗氧能力(Spare Respiratory Capacity)。粒線體的三磷酸線苷媒合效率(Coupling Efficiency)等於合成三磷酸線苷耗氧量除以粒線體的基礎耗氧量。

實施例一、實施例二、比較例一與比較例二的實驗參數與實驗量測結果如圖3至圖9所示。圖3為本發明實施例一與比較例一之粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量示意圖。圖4為本發明實施例一與比較例一之粒線體的基礎耗氧量示意圖。圖5為本發明實施例一與比較例一之粒線體的最大耗氧能力示意圖。圖6為本發明實施例一與比較例一之粒線體的預存耗氧能力示意圖。圖7為本發明實施例二與比較例二之粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量示意圖。圖8為本發明實施例二與比較例二之粒線體的基礎耗氧量示意圖。圖9為本發明實施例二與比較例二之粒線體的最大耗氧能力示意圖。

表一 <TABLE border="1" borderColor="#000000" width="85%"><TBODY><tr><td> </td><td> 餘甘子 萃取物 濃度 </td><td> H₂O₂ 水溶液 濃度 </td><td> 合成ATP的耗氧量 </td><td> 粒線體的基礎耗氧量 </td><td> 粒線體的最大耗氧能力 </td><td> 粒線體的預存耗氧能力 </td></tr><tr><td> (μg/ml) </td><td> (μM) </td><td> (pmol/min/10⁵個細胞) </td></tr><tr><td> 實施例一 </td><td> 40 </td><td> - </td><td> 41 </td><td> 69 </td><td> 145 </td><td> 130 </td></tr><tr><td> 實施例二 </td><td> 40 </td><td> 400 </td><td> 36 </td><td> 61 </td><td> 111 </td><td> - </td></tr><tr><td> 比較例一 </td><td> - </td><td> - </td><td> 37 </td><td> 62 </td><td> 113 </td><td> 112 </td></tr><tr><td> 比較例二 </td><td> - </td><td> 400 </td><td> 28 </td><td> 44 </td><td> 100 </td><td> - </td></tr></TBODY></TABLE>

如圖3所示，實施例一之合成三磷酸線苷的耗氧量高於比較例一之合成三磷酸線苷的耗氧量。如圖4所示，實施例一之粒線體的基礎耗氧量高於比較例一之粒線體的基礎耗氧量。如圖5所示，實施例一之粒線體的最大耗氧能力高於比較例一之粒線體的最大耗氧能力。如圖6所示，實施例一之粒線體的預存耗氧能力高於比較例一之粒線體的預存耗氧能力。因此，由圖3至圖6可知實施例一之MERRF症候群患者的纖維母細胞在經過餘甘子萃取物處理後，MERRF症候群患者的纖維母細胞內的粒線體的活性得到提升。實施例一的粒線體的活性提升具體表現在粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量增加，粒線體的基礎耗氧量增加，粒線體的最大耗氧能力增加，以及粒線體的預存耗氧能力增加。再者，粒線體的預存耗氧能力增加也代表了粒線體與MERRF症候群患者的纖維母細胞面對可對細胞造成壓力的各種狀況時，對各種狀況的應變能力的提升。

如圖7所示，實施例二之合成三磷酸線苷的耗氧量高於比較例二之合成三磷酸線苷的耗氧量。如圖8所示，實施例二之粒線體的基礎耗氧量高於比較例二之粒線體的基礎耗氧量。如圖9所示，實施例二之粒線體的最大耗氧能力高於比較例二之粒線體的最大耗氧能力。因此，由圖7至圖9可知實施例二之MERRF症候群患者的纖維母細胞在經過餘甘子萃取物處理後，即使是在氧化壓力下，MERRF症候群患者的纖維母細胞內的粒線體的活性也得到了提升。實施例二的粒線體的活性提升具體表現在粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量增加，粒線體的基礎耗氧量增加，以及粒線體的最大耗氧能力增加。

根據上述實驗測試結果，在氧化壓力下與在一般情況下，以餘甘子萃取物水溶液處理後的MERRF症候群患者的纖維母細胞，其內部的粒線體的活性都得到提升。藉此，MERRF症候群患者的纖維母細胞內的粒線體產生的能量增加，使得MERRF症候群患者的纖維母細胞可利用於細胞生長與代謝的能量增加。

根據上述本發明所揭露的餘甘子萃取物用於製備提升MERRF症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，提供餘甘子萃取物予MERRF症候群患者的細胞，可提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體進行氧化磷酸化反應與三磷酸線苷(ATP)合成的能力。如此一來，MERRF症候群患者的粒線體在受到餘甘子萃取物活化後，使得MERRF症候群患者的粒線體所產生的能量增加，滿足細胞進行生長與代謝時對能量的需求。

再者，提供餘甘子萃取物予MERRF症候群患者的細胞，亦可提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體的基礎耗氧量增加以及最大耗氧能力。藉此，細胞進行生長與代謝時對能量的需求進一步得到滿足。

再者，提供餘甘子萃取物予MERRF症候群患者的細胞，亦可提高MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體的預存耗氧能力。如此一來，粒線體與MERRF症候群患者的細胞面對可對細胞造成壓力的各種狀況時，對各種狀況的應變能力的提升。

此外，提供餘甘子萃取物予MERRF症候群患者的細胞後，即使MERRF症候群患者的細胞處在承受氧化壓力的狀況下，MERRF症候群患者的細胞內的粒線體的活性也可得到提升。

雖然本發明以前述之實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明。本發明所示之數值或數值範圍，係包含本發明所屬領域具通常知識者可理解的容許度範圍。在不脫離本發明之精神和範圍內，所為之更動與潤飾，均屬本發明之專利保護範圍。關於本發明所界定之保護範圍請參考所附之申請專利範圍。

無

圖1為本發明實施例一與實施例二使用的餘甘子萃取物之紅外線吸收光譜。 圖2為本發明實施例一與實施例二使用的餘甘子萃取物之高效能液相層析圖譜。 圖3為本發明實施例一與比較例一之粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量示意圖。 圖4為本發明實施例一與比較例一之粒線體的基礎耗氧量示意圖。 圖5為本發明實施例一與比較例一之粒線體的最大耗氧能力示意圖。 圖6為本發明實施例一與比較例一之粒線體的預存耗氧能力示意圖。 圖7為本發明實施例二與比較例二之粒線體合成三磷酸線苷的耗氧量示意圖。 圖8為本發明實施例二與比較例二之粒線體的基礎耗氧量示意圖。 圖9為本發明實施例二與比較例二之粒線體的最大耗氧能力示意圖。

Claims (10)

1. 一種餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變(Myoclonic Epilepsy with Ragged Red Fibers Syndrome，MERRF)症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中：當包含該餘甘子萃取物的該醫藥組合物被提供予一肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的細胞時，該餘甘子萃取物提高該MERRF症候群患者的細胞內的複數個粒線體進行一氧化磷酸化反應與一三磷酸線苷(ATP)合成的能力；其中該餘甘子萃取物包含有重量百分比35%至55%之Emblicanin-A與Emblicanin-B混合物、重量百分比4%至15%之Punigluconin、重量百分比10%至20%之Pedunculagin、重量百分比5%至15%之Rutin與重量百分比10%至30%之Gallo-ellagitarnoids；其中該餘甘子萃取物之紅外線吸收光譜分別於3403.6±5公分^-1(cm^-1)、2931.6±5公分^-1(cm^-1)、1385.0±5公分^-1(cm^-1)、1318.6±5公分^-1(cm^-1)、1623.5±5公分^-1(cm^-1)、1451.3±5公分^-1(cm^-1)、1352.1±5公分^-1(cm^-1)、1218.4±5公分^-1(cm^-1)、1148.6±5公分^-1(cm^-1)、1035.7±5公分^-1(cm^-1)、3403.6±5公分^-1(cm^-1)具有個別的一特徵吸收峰；其中該餘甘子萃取物之高效能液相層析圖譜(HPLC Chromatogram)分別於1.620±0.5分鐘、2.148±0.5分鐘、3.265±0.5分鐘與4.370±0.5分鐘具有個別的一特徵峰信號。
2. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中該餘甘子萃取物係以食鹽水為溶劑對餘甘子果實進行萃取所得到。
3. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中該餘甘子萃取物以一餘甘子萃取物水溶液的形式提供予該MERRF症候群患者的細胞。
4. 如請求項3所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中該餘甘子萃取物水溶液的濃度為每毫升30至50微克(μg/ml)。
5. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中提供包含該餘甘子萃取物的該醫藥組合物予該MERRF症候群患者的細胞的步驟包含食用包含該餘甘子萃取物的該醫藥組合物。
6. 如請求項5所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中食用的該餘甘子萃取物的有效劑量為324毫克(mg)至540毫克(mg)。
7. 如請求項6所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中包含該餘甘子萃取物的該醫藥組合物被包覆於軟膠囊或硬膠囊中。
8. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中得到該餘甘子萃取物的該些粒線體的一三磷酸腺苷最大極限產量得到提升。
9. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中得到該餘甘子萃取物的該些粒線體的一預存耗氧能力(Spare Respiratory Capacity)得到提升。
10. 如請求項1所述之餘甘子萃取物用於製備提升肌陣攣性癲癇發作伴破碎紅纖維病變症候群患者的粒線體活性的醫藥組合物之用途，其中得到該餘甘子萃取物的該些粒線體進行該氧化磷酸化反應的一基礎耗氧量得到提升。