TWI522131B - 具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途 - Google Patents

Description

具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途

本發明係有關於一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途，尤其是指內含一具有促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復能力之間質幹細胞條件培養基的一囊體的微膠囊結構；藉此，可應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養。

按，在日常生活中，不論是因為內在因素或是外在因素，人體常遭受到不同的損傷，例如：皮膚老化、皮膚傷口、肺部損傷、角膜損傷、肝臟損傷、腎臟損傷或是骨質疏鬆。不同之損傷之累積與加劇最終造成人們健康與生活品質之下降。

皮膚老化原因包括外在因素(日曬、污染、自由基傷害、抽煙)和內在因素(細胞自然死亡、自然老化、荷爾蒙減少、免疫力降低)，進而造成皮膚暗沉與皺紋、斑點之產生。皮膚傷口產生原因包括手術、外傷或是局部皮膚及其下方的軟組織長時間受到壓迫所造成細胞缺氧而壞死。引起肺部損傷(此處所指之肺部損傷係指肺部表皮細胞受損)可能原因包括：輸血、疾病、使用過度(例如：換氣過度)或吸入有害物質(例 如：游泳池的氯氣、香菸內含的尼古丁與焦油或是粉塵)，進而造成胸痛、呼吸困難、氣短、咯血與感染等症狀，長期下來會導致肺功能受損；而現行針對肺部損傷的治療方法包括手術與呼吸治療。引發角膜損傷(此處所指之角膜損傷係指角膜表皮細胞受損)之可能原因包括用眼過度、搔癢、佩戴隱形眼鏡或是紫外線之傷害，進而造成流淚、視線不清、疼痛與異物感等症狀，嚴重狀況下會導致失明；而現行針對角膜損傷的治療方法包括：藥物治療、雷射手術和眼角膜移植手術。引發肝臟損傷之可能原因包括藥物引發的急性肝臟損傷、病毒性(例如肝炎病毒)所引發之肝臟損傷、酒精性肝損傷、因飲食習慣不當所引發之脂肪肝、因熬夜疲勞引發的肝功能下降、或是環境汙染造成之肝臟損傷，嚴重狀況下可造成肝衰竭甚至須進行肝臟移植。腎臟損傷則好發於老人、血管疾病患者(例如：高血壓病患)、慢性病患者(例如：糖尿病病患)、使用大量藥物者(例如：類風溼關節炎病患與化療之病患)、手術後或大創傷後之病人(例如：產婦)或是攝入毒物者，其症狀包括尿量減少、不適、噁心嘔吐、下肢浮腫與腎小球過濾率迅速下降，嚴重狀況下須進行腎臟移植。骨質疏鬆則是一種鈣質由骨骼往血液淨移動的礦物質流失現象，進而造成骨質量減少、骨骼內孔隙增大、骨骼呈現中空疏鬆現象，骨質疏鬆發生之速率取決於破骨細胞和成骨細胞活性的消長。骨質疏鬆症的危險因子包括：性別(尤其是女性)、太早停經、種族(尤其是白人和亞洲人)、骨頭結構較細、身體質量指數過低、抽煙、酗酒、活動量不足、具有家族病史；目前做法多建議針對停經婦女補充雌激素或是針對一般人提出多補充飲食中鈣與維生素D3攝取以減緩骨質疏鬆之發生。而上述造成不同之損傷之原因是處於現今世界的人們所難以避免的。

文獻研究顯示幹細胞可藉由分泌生長因子達到促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復之效果。上述之皮膚老化、皮膚傷口、肺部損傷、角膜損傷、肝臟損傷、腎臟損傷或是骨質疏鬆之病症可藉由幹細胞移植治療中獲得改善。其中，骨質疏鬆可透過幹細胞促進血管新生以增加骨骼養分之供應而達到改善。然而，幹細細胞移植之缺點在於其尚屬實驗階段且為侵入式治療方式，故目前尚未普遍施行；然而，利用幹 細胞培養基作為提供生長因子之來源的替代方案。生長因子商品化的過程中面臨長時間儲存造成活性成分變質之疑慮，故發展一應用於商品內生長因子保存之結構具有其重要性；此外，就一般具有上述損傷之症狀的使用者而非病患而言，其損傷程度未達需要治療之程度，僅希望藉由日常之保養而獲得改善者，該具有損傷修復能力之產品使用的便利性越顯重要；為此，提出一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途具有其產業利用性。發明人因此集思研發一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途，藉以應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養(肺部損傷與角膜損傷修復之應用請參見發明人等同日申請的另一項專利申請案「具有幹細胞條件培養基組合液之微膠囊結構」，而皮膚傷口修復與皮膚保養之應用請參見發明人等同日申請的另一項專利申請案「具有幹細胞條件培養基組合液之微膠囊敷料」)。

今，發明人即是鑑於目前缺乏一種可應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養用途的含有間質幹細胞條件培養基之結構性產品，於是乃一本孜孜不倦之精神，並藉由其豐富之專業知識及多年之實務經驗所輔佐，而加以改善，並據此研創出本發明。

本發明主要目的為提供一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途，以由低溫溶解蠟所構成的一囊體包裹具有促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復之一間質幹細胞條件培養基以形成一微膠囊結構，藉以應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養用途。

為了達到上述實施目的，本發明人乃研擬如下一種含有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構，係至少包括有一間質幹細胞條件培養基 以及一用以容置該間質幹細胞條件培養基的囊體。

再者，本發明再提供一種含有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構的製造方法，其步驟至少包括有步驟一：培養間質幹細胞；步驟二：收集間質幹細胞條件培養基；以及步驟三：加熱低溫溶解蠟並混合該間質幹細胞條件培養基以製備含有該間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構。

在本發明的一實施例中，其中該囊體可例如為由低溫溶解蠟所構成；其中該低溫溶解蠟之熔點可介於35℃至45℃之間。

在本發明的一實施例中，其中該間質幹細胞條件培養基之來源可例如為原代培養之間質幹細胞或市售間質幹細胞株；其中該市售間質幹細胞株例如為瓦頓氏凝膠間葉幹細胞(Wharton’s jelly mesenchymal stem cells(WJ-MSC))時，則可進一步添加人類包皮纖維母細胞培養之條件培養基。

在本發明的一實施例中，其中該間質幹細胞條件培養基可進一步添加甘油、維生素C醣苷、人類寡胜肽-1、人類寡胜肽-3、人類寡胜肽-6或純水其中之一。

在本發明的一實施例中，其中該微膠囊結構與一稀釋液可進一步設入一立體噴瓶內，以供使用者直接噴灑於咽喉部或角膜，用以促進肺部損傷或角膜損傷修復。

在本發明的一實施例中，其中該微膠囊結構可進一步設入一敷料內，以供皮膚傷口之修復或皮膚保養。

在本發明的一實施例中，其中該微膠囊結構可進一步設入一保健食品內，以供使用者直接食用，用以促進肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復。

藉此，以該微膠囊結構之設置可避免該間質幹細胞條件培養基內含之活性成分變質；此外，該間質幹細胞條件培養基可促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復，進而應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養用途。

(1)‧‧‧囊體

(2)‧‧‧容置空間

(3)‧‧‧間質幹細胞條件培養基

第一圖：本創作較佳實施例之微膠囊結構之示意圖

第二圖：本發明微膠囊結構之製造方法流程圖

第三圖：間質幹細胞條件培養基對小鼠後肢缺血狀況之影響

第四圖(A)：利用激光多普勒血流成像儀分析間質幹細胞條件培養基對小鼠後肢缺血狀況之影響之影像圖

第四圖(B)：利用激光多普勒血流成像儀分析間質幹細胞條件培養基對小鼠後肢缺血狀況之影響之定量圖

第五圖(A)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之蘇木精-伊紅染色結果之影像圖

第五圖(B)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之蘇木精-伊紅染色結果之定量圖

第六圖(A)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之馬森三色染色染色結果之影像圖

第六圖(B)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之馬森三色染色染色結果之定量圖

第七圖(A)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之CD31免疫染色結果之影像圖

第七圖(B)：28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之CD31免疫染色結果之定量圖

本發明之目的及其結構設計功能上的優點，將依據以下圖面所示之較佳實施例予以說明，俾使審查委員能對本發明有更深入且具體之瞭解。

首先，請參閱第一圖所示，係為本創作較佳實施例之微膠囊結構之示意圖，本發明之微膠囊結構，係至少包括有一間質幹細胞條件培養基(3)與一囊體(1)；其中間質幹細胞條件培養基(3)可促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復；囊體(1)可由由低溫溶解蠟所構成，其中囊體(1)係呈中空狀並形成一容置空間(2)可容置間質幹細胞條件培養基(3)；藉由微膠囊結構之設置可避免間質幹細胞條件培養基(3)內含之活性成分變質。

再者，請參閱第二圖所示，係為本發明微膠囊結構之製造方法流程圖，其製造方法係至少包括有：步驟一：培養間質幹細胞；其中間質幹細胞可為原代培養之間質幹細胞或市售間質幹細胞株；步驟二：收集間質幹細胞條件培養基(3)；其中市售間質幹細胞株為瓦頓氏凝膠間葉幹細胞時，則進一步可添加人類包皮纖維母細胞培養之條件培養基；以及步驟三：加熱低溫溶解蠟並混合間質幹細胞條件培養基(3)以製備含有間質幹細胞條件培養基(3)之微膠囊結構。

微膠囊結構之間質幹細胞條件培養基(3)可進一步添加甘油、維生素C醣苷、人類寡胜肽-1、人類寡胜肽-3、人類寡胜肽-6或純水其中之一；且微膠囊結構與一稀釋液可進一步設入一立體噴瓶內，以供使用者直接噴灑於咽喉部或角膜，用以促進肺部損傷或角膜損傷修復；此外，其中微膠囊結構可進一步設入一敷料內，以供皮膚傷口之修復或皮膚保養；且其中微膠囊結構可進一步設入一保健食品內，以供使用者直接食用，用以促進肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復。

以下利用數個實施例以說明本發明之應用。實施例一以原代培養之間質幹細胞作為間質幹細胞條件培養基(3)來源，以肢體缺血模型分析間質幹細胞條件培養基(3)對血管新生之影響。實施例二則以考慮本發明於實際實施時幹細胞來源對使用者之安全性為前提，以市售之瓦頓氏凝膠間葉幹細胞細胞株而非原代培養之間質幹細胞作為間質幹細胞條件培養基(3)來源。然其並非用以限定本發明，本發明技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾。

實施例一：間質幹細胞條件培養基對血管新生之影響

1．細胞培養

原代培養之間質幹細胞生長於完全培養基(complete growth medium，CCM)(內含10%胎牛血清、100units/ml盤尼西林和10μg/ml鏈黴素的α-MEM培 養基(購自Gibco))於溫度37℃且含有5%二氧化碳之環境下培養。細胞以離心方式回收並於細胞數達到100細胞數/平方公分時更換細胞培養盤皿，於CCM中培養且每2-3天更換一次培養基。約8-9天，細胞生長可達佔滿生長平面空間80%之程度時回收繼代培養之細胞。

2．製備間質幹細胞條件培養基

間質幹細胞被以5000細胞數/平方公分之比例置於細胞培養盤皿且於CCM一天。間隔每兩天，貼附之細胞被以磷酸緩衝液清洗三次，CCM被置換成不含胎牛血清之α-MEM培養基以產生原代培養之間質幹細胞條件培養基(3)。培養48小時候收集間質幹細胞條件培養基(3)，以2000rpm轉速10分鐘之方式分離間質幹細胞條件培養基(3)且通過0.3μm之濾膜。間質幹細胞條件培養基(3)以Vivaspin 20(cut-off 3KDa，購自GE Health care UK Ltd.，Buckinghamshire，UK)濃縮至起始濃度之20倍。濃縮之間質幹細胞條件培養基(3)被冷凍存放於-80℃備用。

3．肢體缺血模型

動物試驗之方法受到台大醫院之動物照護和使用委員會之審查與批准。六周大雄性Balb/C小鼠於本實驗中使用。研究符合美國國立衛生研究院出版之實驗室動物照護和使用指南。利用10mg/kg甲苯噻嗪和100mg/kg氯胺酮進行全身麻醉，於小鼠的大腿向膝部作一皮膚切口，於切開皮下脂肪組織後將接近鼠蹊部之近側位置下方之股動脈露出。然後將股動脈於大腿中間部位雙重地紮起，將5mm長度之股動脈切除。於動脈切除後的1、8、15和22天，於切除部位附近之股薄肌肌肉注射50μl的20倍間質幹細胞條件培養基(3)或α-MEM。於第28天利用頸椎脫位法犧牲雄性Balb/C小鼠。激光多普勒血流成像儀之數據結果以平均值±標準偏差表示。所有數據利用以一Bonferroni post-hoc test之一2-way ANOVA方式分析。當P<0．05視為顯著差異。

4．血流再灌注之評估

激光多普勒血流成像儀用於一連串對新生血管非侵入式生理評估。以一連串對後肢表面血流量掃描(包括處理後的第1、7、14、21和28天)加以監控小鼠生理狀況。數位彩色圖像編碼被加以分析以定量大腿至腳趾間區域的血流量，且再灌注之平均數值被加以計算。

5．實驗結果

以下實驗係為間質幹細胞條件培養基(3)對血管新生之影響之分析。圖中標示之α-MEM為控制組，實驗組之間質幹細胞條件培養基(3)標示為primary(是指細胞來源為原代培養之間質幹細胞)。在後肢缺血小鼠的模型中，比較將間質幹細胞條件培養基(3)和α-MEM直接注入內收肌(adductor muscles)(即側肢血管重塑區域)對後肢缺血狀況之改善程度，結果顯示間質幹細胞條件培養基(3)在肢體缺血模型中具有側肢血管重塑之功能。如第三圖所示，係為間質幹細胞條件培養基對小鼠後肢缺血狀況之影響，接受控制組注射(即注射α-MEM)者，80%小鼠(全部10隻小鼠中有8隻小鼠)遭受後肢缺損(limb lose)，而20%小鼠(全部10隻小鼠中有2隻小鼠)足部壞死(Foot necrosis)。然而，接受間質幹細胞條件培養基(3)注射者沒有後肢缺損之狀況，保肢率(limb salvage)為50%。如第四圖所示，係利用激光多普勒血流成像儀分析間質幹細胞條件培養基對小鼠後肢缺血狀況之影響，第四圖(A)和(B)分別為影像圖和定量圖，激光多普勒血流成像儀分析顯示，於28天後，接受控制組注射(即注射α-MEM)者缺血後肢的血流量(LDPI of flow rate)僅為40%之非缺血後肢的血流量。然而，接受間質幹細胞條件培養基(3)注射者較接受控制組注射(即注射α-MEM)者具有顯著之血流量改進的現象。如第五圖所示，係為28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之蘇木精-伊紅染色結果，第五圖(A)和(B)分別為影像圖和定量圖。蘇木精-伊紅(H&E)染色結果顯示：接受間質幹細胞條件培養基(3)注射者較接受控制組注射之缺血後肢的肌肉尺寸增加。如第六圖所示，係為28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之馬森三色染色染色結果，第六圖(A)和(B)分別為影像 圖和定量圖。馬森三色(Masson’s trichrome)染色結果顯示：接受間質幹細胞條件培養基(3)注射者較接受控制組注射之缺血後肢的肌肉壞死區域比例下降。如第七圖所示，係為28天時內收肌恢復狀況之組織學分析之CD31免疫染色結果，第七圖(A)和(B)分別為影像圖和定量圖。以CD31免疫染色結果顯示：接受間質幹細胞條件培養基(3)注射者較接受控制組注射之缺血後肢的表皮細胞密度增加。總和上述結果證實間質幹細胞條件培養基(3)具有促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復之功能。

實施例二：微膠囊結構之製造

首先，以瓦頓氏凝膠間葉幹細胞作為間質幹細胞條件培養基(3)來源。瓦頓氏凝膠間葉幹細胞生長於CCM(內含10%胎牛血清、100units/ml盤尼西林和10μg/ml鏈黴素的α-MEM培養基(購自Gibco))於溫度37℃且含有5%二氧化碳之環境下培養。細胞以離心方式回收並於細胞數達到100細胞數/平方公分時更換細胞培養盤皿，於CCM中培養且每2-3天更換一次培養基。約8-9天，細胞生長可達佔滿生長平面空間80%之程度時回收繼代培養之細胞。接著，將瓦頓氏凝膠間葉幹細胞以5000細胞數/平方公分之比例置於細胞培養盤皿且於CCM培養一天。間隔每兩天，貼附之細胞被以磷酸緩衝液清洗三次，培養基被置換成不含胎牛血清之α-MEM培養基以產生瓦頓氏凝膠間葉幹細胞之間質幹細胞條件培養基(3)。培養48小時候收集條件培養基，以2000rpm轉速10分鐘之方式分離條件培養基且通過0.3μm之濾膜。間質幹細胞條件培養基(3)以Vivas pin 20濃縮至起始濃度之20倍。濃縮之間質幹細胞條件培養基(3)被冷凍存放於-80℃備用。習知離心與過濾步驟可達成收集間質幹細胞條件培養基(3)之目的，故不進一步限定之，藉由濃縮方式使間質幹細胞條件培養基(3)達到欲求之濃度。文獻指出瓦頓氏凝膠間葉幹細胞培養之間質幹細胞條件培養基(3)內含多種人類生長因子，其中表皮生長因子(EGF)、鹼性纖維母細胞生長因子(b-FGF)和皮膚幹細胞生長因子(SCF)與表皮細胞修復與再生有關；其中表皮生長因子 結合在表皮的基底層細胞膜的表皮生長因子受體(EGFR)上，可加速表皮細胞分裂；而鹼性纖維母細胞生長因子具有協助血管新生(angiogenesis)、傷口癒合的功能，且同時具有強化纖維母細胞(fibroblast)的功能，藉由刺激纖維母細胞，使纖維母細胞達到活化之目的；此外，皮膚幹細胞生長因子主要作用為誘導基底層幹細胞增生；然而，瓦頓氏凝膠間葉幹細胞培養之間質幹細胞條件培養基(3)內鹼性纖維母細胞生長因子相對含量較少，故可藉由添加內含較多鹼性纖維母細胞生長因子之人類包皮纖維母細胞培養之條件培養基加以補充。之後，加熱低溫溶解蠟並混合間質幹細胞條件培養基(3)以製備含有間質幹細胞條件培養基(3)之微膠囊結構；其中低溫溶解蠟之熔點介於35℃至45℃之間；藉由加熱低溫溶解蠟至一高於低溫溶解蠟之熔點卻不至於使間質幹細胞條件培養基(3)活性成分變性的溫度，再使間質幹細胞條件培養基(3)與低溫溶解蠟均勻混合，以達到水合作用之效果，藉由疏水性作用使低溫溶解蠟形成脂質顆粒型態之囊體(1)以包裹容置間質幹細胞條件培養基(3)。可依實際需求進一步以振盪或是擠壓方式改變脂質顆粒型態(例如單層膜、雙層膜或多層膜之結構)與尺寸，以獲得微膠囊之結構。將微膠囊之結構進行冷凍乾燥以移除水分，以便於儲存與運送。藉由微膠囊結構之設置可避免間質幹細胞條件培養基(3)內含之活性成分變質。

此外可依據實際需求於間質幹細胞條件培養基(3)中進一步添加甘油、維生素C醣苷、人類寡胜肽-1、人類寡胜肽-3、人類寡胜肽-6或純水其中之一；其中，甘油可增加表皮細胞保溼度；維生素C醣苷係維他命C後面再加上二個葡萄糖分子的誘導體，不僅具有維他命C其強大的還原力與抗氧化作用，且更具有較佳的安定性；而人類寡胜肽-1(俗稱的表皮生長因子)、人類寡胜肽-3(俗稱的鹼性纖維母細胞生長因子)和人類寡胜肽-6(俗稱之皮膚幹細胞生長因子)之添加則可針對單一成分進行補充與增強其效果。

值得注意的是，製備微膠囊結構使用之溫度視使用低溫溶解蠟之種類加以調整；而間質幹細胞條件培養基(3)、甘油、維生素C醣苷、 人類寡胜肽-1、人類寡胜肽-3、人類寡胜肽-6和純水添加比例可視微膠囊結構之用途與欲達成之效果進行調整；然非以本例所舉為限，本發明之原則可用於任何一種含有間質幹細胞條件培養基(3)之微膠囊結構、其製造方法與其用途應用中。

由上述之一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途與實施說明可知，本發明具有以下優點：

1. 本發明藉由微膠囊結構之設置可避免間質幹細胞條件培養基內含之活性成分變質。

2. 本發明藉由間質幹細胞條件培養基可促進表皮細胞再生、血管新生和表皮細胞損傷修復，進而應用於促進肺部損傷、角膜損傷、皮膚傷口、肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復或皮膚保養用途。

3. 本發明藉由微膠囊結構之設置可便於進一步應用於不同用途中且利於使用者日常之使用。

綜上所述，本發明之一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途，的確能藉由上述所揭露之實施例，達到所預期之使用功效，且本發明亦未曾公開於申請前，誠已完全符合專利法之規定與要求。爰依法提出發明專利之申請，懇請惠予審查，並賜准專利，則實感德便。

惟，上述所揭之圖示及說明，僅為本發明之較佳實施例，非為限定本發明之保護範圍；大凡熟悉該項技藝之人士，其所依本發明之特徵範疇，所作之其它等效變化或修飾，皆應視為不脫離本發明之設計範疇。

(1)‧‧‧囊體

(2)‧‧‧容置空間

(3)‧‧‧間質幹細胞條件培養基

Claims (6)

1. 一種具有間質幹細胞條件培養基之微膠囊結構於促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復功能之用途，係施予一適量之微膠囊結構於一患部；其中微膠囊結構係至少包括有：一間質幹細胞條件培養基：係將瓦頓氏凝膠間葉幹細胞生長於添加人類包皮纖維母細胞條件培養基的完全培養基(CCM)培養，於細胞生長佔滿生長平面空間80%之程度時以離心方式回收，並將回收之瓦頓氏凝膠間葉幹細胞以5000細胞數/平方公分之比例置於不含胎牛血清之α-MEM培養基，培養後再以離心方式分離條件培養基且通過0.3μm之濾膜，以促進表皮細胞再生、血管新生、表皮細胞損傷修復及肌肉損傷修復；以及一囊體：係由低溫溶解蠟所構成，其中該囊體係呈中空狀並形成一容置空間以容置該間質幹細胞條件培養基，以避免該間質幹細胞條件培養基內含之活性成分變質。
2. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該囊體係由低溫溶解蠟所構成，且該低溫溶解蠟之熔點介於35℃至45℃之間。
3. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該間質幹細胞條件培養基進一步添加甘油、維生素C醣苷、人類寡胜肽-1、人類寡胜肽-3、人類寡胜肽-6或純水其中之一。
4. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中微膠囊結構與一稀釋液係進一步設入一立體噴瓶內，以供使用者直接噴灑於咽喉部或角膜，用以促進肺部損傷或角膜損傷修復。
5. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中微膠囊結構係進一步 設入一敷料內，以供皮膚傷口之修復或皮膚保養。
6. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中微膠囊結構係進一步設入一保健食品內，以供使用者直接食用，用以促進肝臟損傷、腎臟損傷以及骨質疏鬆之修復。