TWI487533B

TWI487533B - 抑制肌肉收縮的化合物

Info

Publication number: TWI487533B
Application number: TW099124330A
Authority: TW
Inventors: Sanz Nuria Garcia; Den Nest Wim Van; Serraima Cristina Carreno; Montiel Antonio Ferrer; Puche Juan Cebrian; Domenech Nuria Alminana; Ballester Gregorio Fernandez
Original assignee: Lipotec Sa
Priority date: 2009-07-24
Filing date: 2010-07-23
Publication date: 2015-06-11
Also published as: CN102470160B; CA2768386A1; AU2010275688B2; HK1170415A1; MX2012001077A; US20120121675A1; TW201116289A; US8946166B2; CN102470160A; EP2456457A1; JP2013500245A; BR112012001322A2; JP5782439B2; EP2456457B1; KR20120104159A; PL2456457T3; WO2011009626A1; BR112012001322B1; ES2527022T3; AU2010275688A1

Description

抑制肌肉收縮的化合物

本發明關於能夠抑制肌肉收縮之肽及有用於治療及/或保養皮膚的含有該等肽之美容或醫藥組成物，較佳地用於治療及/或保養由肌肉收縮(特別為乙醯膽鹼受體群聚)導致的症狀、失調症及/或疾病。

肌肉收縮為生理過程，其中由於先前的激發刺激源使肌肉產生張力且縮短或伸長(或亦可維持相同的長度)。該等收縮使幾乎所有的高等動物產生動力，導致例如其所覆蓋的腔體的內容物排出(平滑肌)或有機體向其周圍移動或其他物體移動(橫紋肌)。

肌肉係由可收縮的多核形肌肉纖維(由數個肌肉細胞融合生成之多核細胞)所形成，該肌肉纖維係經排列形成受神經元突軸中的突觸球體神經支配的部位。在神經元與肌肉纖維之間的界面被稱為神經肌肉界面或NMJ。神經元以動作電位形式傳遞刺激源，且此引起神經傳遞物乙醯膽鹼(ACh)釋出至突觸間隙。負責接收訊號及引起肌肉收縮的乙醯膽鹼受體(AChR)累積在NMJ的突觸後部位中。

AChR係根據彼等與特定的激動劑結合而分類成兩大族群：菸鹼乙醯膽鹼受體(nAChR)及蕈毒鹼乙醯膽鹼受體(mAChR)。菸鹼乙醯膽鹼受體係由於與彼等結合之生物鹼菸鹼的高親和性而以此命名；然而蕈毒鹼乙醯膽鹼受體係以高親和性與生物鹼蕈毒鹼結合。菸鹼乙醯膽鹼受體可依次根據彼等與α-銀環螺毒素結合或不結合的能力而分類。nAChR為離子型受體(ionotropic receptor)，亦即彼等與路徑係藉由配位子結合而開啟的離子通道偶合。mAChR為促代謝性受體(metabotropic receptor)或與G蛋白偶合的受體；在該情況中，離子循環係取決於以配位子結合觸發之一或多種代謝路徑。

神經肌肉界面係經分類為一般的神經傳遞模式，因此其作用功能已被詳細說明。動作電位到達運動神經元的末端部位且引起電壓依賴性鈣通道在突觸前膜中開啟，造成局部細胞內的鈣增加。Ca²⁺ 離子與連結充滿神經傳遞物ACh的突觸小囊泡至血漿膜的蛋白質結合。在此情況中，突觸短桿素(synaptobrevin)蛋白與突觸融合蛋白(syntaxin)及SNAP-25強力結合，形成SNARE複合體(與突觸小體(synaptosomal)連結的蛋白受體)，其能夠在小囊泡與血漿膜之間融合且引起ACh胞外分泌至突觸間隙。此神經傳遞物散佈於整個突觸空間且與ACh結合在突觸後膜中。ACh(或另一激動劑)的結合引起通道開啟且此能夠使鈉離子向細胞內部循環及使鉀離去。鈉進入引起去極化，去極化係經由細胞膜傳遞，直到其到達觸發鈣從內質網向細胞溶質釋出的特定區域為止，該釋出誘發肌肉收縮。

分子層級之nAChR為由5種以放射對稱排列且形成2.5奈米直徑之細孔的單體所形成之五聚體蛋白。該等次單元通常以化學計量法(α)₂ -β-γ-δ呈現，且已揭示有17種次單元類型：10種以α命名的類型α1至α10-，4種以次單元β命名的類型β1至β4-，以及γ、δ和ε[Lindstrom J.(1997)“Nicotinic acetylcholine receptors in health and disease” Mol. Neurobiol. 15:193-222]。次單元層級之分子組成物細緻地決定受體的功能性：在神經肌肉界面中，例如nAChR在胚胎期為雜五聚體(α1)₂ -β1-γ-δ，而彼等在成人期為雜五聚體(α1)₂ -β1-δ-ε。次單元γ變成ε已被連結至神經肌肉界面的成熟作用，且與成人肌肉中的結構維護連結[Yumoto N.,Wakatsuki S. and Sehara-Fujisawa A.(2005)“The acetylcholine receptor gamma-to-epsilon switch occurs in individual endplates” Biochem. Biophys. Res. Commun. 331:1522-1527]。

神經肌肉界面為特定結構，其功能係確保有效且快速的動作電位傳遞，俾以引起突觸後肌肉中的去極化，其為此肌肉收縮必要的訊號。為了在神經元與肌肉纖維之間達成快速的訊息轉移，突觸前區與突觸後膜需要有適當的空間配置。突觸前部位係以ACh小囊泡的存在為特徵，而幾乎所有的肌肉纖維AChR集中在突觸後部位中且稠密地堆疊。AChR群聚為複雜的過程，此過程為NMJ的形成及其維護的關鍵[Hoch W.(1999)“Formation of the neuromuscular junction. Agrin and its unusual receptors” Eur. J. Biochem. 265:1-10]。

AChR群聚需要各種蛋白質的交互作用，其中三種蛋白質最突出：agrin、MuSK(肌肉特異性激酶)及rapsyn。咸信蛋白質agrin負責觸發導致受體群聚[Mittaud P.,Camilleri A. A.,Willmann R.,Erb-Vgtli S.,Burden S. J. and Fuhrer C.(2004)“A single pulse of agrin triggers a pathway that acts to cluster acetylcholine receptors” Mol. Cell Biol. 18:7841-7854]，且造成AChR的磷酸化作用、群聚及穩定之路徑。蛋白質rapsyn能夠於培養時誘發AChR群聚且已經論證在rspsyn不足的突變體中，AChR群聚的形成可被抑制[Apel E. D.,Roberds S. L.,Campbell K. P. and Merlie J. P.(1995)“Rapsyn may function as a link between the acetylcholine receptor and the agrin-binding dystrophin-associated glycoprotein complex” Neuron 1:115-126]。連結agrin及rapsyn之因子為MuSK[Valenzuela D. M.,Stitt T. N.,DiStefano P. S.,Rojas E.,Mattson K.,Compton D. L.,Nuez L.,Park J. S.,Stark J. L.,Gies D. R.,Thomas S.,Le Beau M. M.,Femald A. A.,Copeland N. G.,Jenkins N. A.,Burden S. J. Glass D. J. and Yancopoulos G. D.(1995)“Receptor tyrosine kinase specific for the skeletal muscle lineage: Expression in embryonic muscle,at the neuromuscular junction,and after injury” Neuron 3:573-584]。MuSK為具有激酶活性之受體，其在需要被稱為MASC(肌肉相關特異性組份)之額外組份的交互作用中使蛋白質agrin磷酸化。經由配位子結合的MuSK之活化作用本身不足以引起AChR群聚，且已提出在MuSK與rapsyn之間的交互作用被稱為RATL(rapsyn相關之跨膜連結分子)之因子調停，經由此交互作用使AChR-rapsyn複合體可與agrin-MASC-MuSK複合體交互作用，且形成成熟的NMJ之突觸後裝置(postsynaptic apparatus)[Zhou H.,Glass D. J.,Yancopoulos G. D. and Sanes J. R.(1999)“Distinct domains of MuSK mediate its abilities to induce and to associate with postsynaptic specializations” J. Cell Biol. 146:1133-1146]。頃發現編碼MuSK之基因受到嚴重的肌肉疾病擾亂，諸如先天性肌無力症候群，為一種由神經傳遞降低所引起的疾病，其中病患遭受肌肉無力[Chevessier F.,Faraut B.,Ravel-Chapuis A.,Richard P.,Gaudon K.,BauchS.,Prioleau C.,Herbst R.,Goillot E.,Ioos C.,Azulay J. P.,Attarian S.,Leroy J. P.,Fournier E.,Legay C.,Schaeffer L.,Koenig J. Fardeau M.,Eymard B.,Pouget J. and HantaD.(2004)“MUSK,a new target for mutations causing congenital myasthenic syndrome” Hum. Mol. Genet. 13:3229-3204]，且MuSK在此疾病中的相關角色已經由小鼠模式的建立予以確認，其中MuSK基因缺少其激酶控制且亦顯示肌肉無力的表現型[Chevessier F.,Girard E.,MolgJ.,Bartling S.,Koenig J.,HantaD.,and Witzemann V.(2008)“A mouse model for congenital myasthenic syndrome due to MuSK mutations reveals defects in structure and function of neuromuscular junctions” Hum. Mol. Genet. 17:3577-3595]。

肌肉收縮係由中樞神經系統控制；腦控制自主性收縮，而脊髓控制非自主性反映。兩種過程受到經調節釋出之神經傳遞物乙醯膽鹼的媒介。然而，不同的失調症或神經性疾病係以非自主性肌肉痙攣或緊張不全症為特徵，其中肌肉持續地過度收縮[Fahn S.(1988)“Concept and classification of dystonia” Adv. Neurol. 50:1-8]。運動的現象取決於所涉及的肌肉及收縮強度。在其最輕微的形式中，緊張不全症可出現被認為是正常的單純誇張運動，而在其最嚴重的形式中，緊張不全症甚至可引起傷殘的異常肢體姿勢。取決於受影響的身體部位而定，將緊張不全症分類成(1)局部緊張不全症，局限在特定的身體部位，尤其包含眼周圍肌肉或臉痙攣的緊張不全症、頸緊張不全症或痙攣性斜頸症、喉緊張不全症或痙攣性緊張不全症、口顎緊張不全症、手部緊張不全症(諸如作家或音樂家的痛性痙攣)或腳部緊張不全症、睡中磨牙、半邊顏面神經痙攣、抽搐症及斜視；(2)全身性緊張不全症，其影響較大的部位或全身；(3)多發性緊張不全症，其涉及二或多個不相關的身體部位；(4)節段性緊張不全症，其影響二或多個相鄰的身體部位，包含梅格斯氏(Meige’s)症候群；及(5)半身緊張不全症，其涉及單邊手臂及腿，包含由中風造成的緊張不全症[Jinnah H. A. and Hess E. J. (2008)“Experimental therapeutics for dystonia”,Neurotherapeutics 5:198-209；Brooke M. H.(1986)“A clinician’s view of neuromuscular disease”,Baltimore,Williams & Wilkins；Layzer R. B.(1986)“Muscle pain,cramps and fatigue”in Myology,AG Engel,BQ Banker,eds,New York,McGraw-Hill]。

在臉上傳遞表情的臉部肌肉之重複收縮導致在特定區域的皺痕。皺紋或表情紋的出現隨著從約30歲起的年齡開始在一些由皮膚真皮層中的細胞消失所引起之與肌肉纖維方向垂直排列的凹痕(有些是線狀)之區域中變得更清晰。其深度取決於個體年齡及引起皺痕的肌肉收縮之頻率與強度而定。涉及表情紋出現的主要肌肉為那些圍繞眼睛與睫毛的肌肉及那些在前額、唇部、嘴巴、臉頰和頸部肌肉。該等肌肉經發現在臉部的皮下結締額頭部位，肌肉從此部位向皮膚聳起且肌肉本身插入角質皮層的最深部位。肌肉收縮可導致皮膚聳起、收縮或擴張運動。初期的皺紋出現為最典型的年齡及皮膚老化跡象。皮膚老化為具有兩個主要因素的過程：由於時間推移的年齡因素及由於暴露於紫外線照射(UV)程度的光誘發或光老化因素。數種環境因素的總和亦促成皮膚老化，諸如暴露於菸草煙、暴露於污染及氣候條件，諸如冷及/或風。皮膚的〝老化〞及〝光老化〞術語係指皮膚出現的清晰變化，諸如皺紋、細紋、粗糙、表情紋、妊娠紋、斷紋、凹痕、鬆弛、皮膚下垂(諸如下垂的臉頰)、喪失彈性、喪失緊實性、彈性組織變性、角質化及喪失平滑性。

自1990年代以來，使用肉毒桿菌毒素(由Allergan以Botox銷售)注入肌肉中，以減少肌肉收縮且治療相關疾病，諸如緊張不全症及/或疼痛。亦曾使用神經毒素注射來治療及/或保養皮膚，以減少、延緩或預防老化及/或光老化跡象為目標，且特別放鬆臉部表情及減少皺紋的形成或皺紋的出現減至最小。其作用機制係基於阻斷ACh在神經肌肉界面之突軸的突觸前端中釋出，因此避免神經傳遞及肌肉收縮。毒素與突觸前膜中的受體結合，內在化及成為細胞質。其活性負責毀壞三分子的突觸短桿素SNARE複合體，SANP-25及突觸融合蛋白，其避免突觸小囊泡與外胞漿膜結合及釋出ACh至突觸間隙。

雖然經論證肉毒桿菌神經毒素的效果非常持久，因為彼等在不可逆的SNARE複合體破壞之後花費數週再建立完整的肌肉功能性神經分佈，但是其投予不無風險。主要的風險在於其毒性：甚至低於50微克為成人的致命劑量。肉毒桿菌神經毒素引起肌肉麻痺且甚至可由於心跳停止而引起死亡。由於物質固有的危險及投予方法：直接注入肌肉內，肉毒桿菌毒素的投予因此應由專科醫師進行。經由肉毒桿菌毒素阻斷以AChR水平的神經傳遞不具有足以正好抑制肌肉收縮的特異性，但是其具有病患可能不希望且可引起副作用(諸如噁心、疼痛或紅斑)的其它活性。

醫藥領域亦使用其他的化合物抑制肌肉收縮，包括γ-胺基丁酸受體(GABA)調節劑(諸如氯苯胺丁酸(Baclofen)或苯並二氮呯)、α₂ -腎上腺素受體激動劑(諸如替扎尼定(tizanidine)或可樂寧(clonidine))、AChR調節劑(諸如從箭毒衍生之生物鹼)、對抗AChR的特定抗體(諸如那些在專利US 6,780,413 B2中所述者)或理阿諾鹼(ryanodine)受體激動劑(諸如硝苯呋海因(dantrolene))。沒有一個該等治療沒有副作用，因為許多該等化合物作用在中樞神經系統層級，且可能引起量眩、鎮靜，且甚至在持續治療時引起成癮。

美容工業亦進行以不同的方法發展用於治療表情紋的新化合物，且因此以減少、延緩或預防老化及/或光老化跡象為目標治療及/或保養皮膚，經由局部施予以避免在注射肉毒桿菌毒素之後發生可能的副作用及因此比較安全。先前技藝已揭示以抑制突觸層級的神經肌肉界面為目標的不同產品來避免表情紋出現或使表情紋柔和。專利EP 1180524 B1及WO9734620說明從蛋白質SNAP-25所衍生之肽的用途，在SNARE複合體的形成作用中與SANP-25起突觸前競爭作用，引起ACh的釋出減少且抑制在NMJ中的神經元傳遞。專利EP 1809685 A2說明AChR的拮抗劑肽，其以類似於瓦格勒素(waglerin)-1的作用機制以突觸後起作用，以阻斷神經傳遞及預防皺紋出現。有活性的美容五肽-3亦藉由抑制AChR而以突觸後起作用，以類似於筒箭毒鹼(tubocurarine)的作用機制阻斷神經傳遞及預防皺紋出現。

然而，沒有任何以美容或醫藥領域所發展之化合物能夠以類似於肉毒桿菌毒素的有效性，但無風險的方式抑制肌肉收縮。因此，仍有需要鑑證能夠與現有之劑共同投予而抑制肌肉收縮之新劑，俾以達成更好的緊張不全症治療結果，以及使皺紋及特別使表情紋減少及/或柔和，且因此以減少、延緩或預防老化及/或光老化跡象為目標治療及/或保養皮膚。

本發明的詳細說明

本發明提供上述問題的解決辦法。本發明申請者驚訝地發現某些合成肽在抑制AChR群聚方面呈現重要的有效性且因此有用於治療及/或保養由肌肉收縮(特別為乙醯膽鹼受體群聚)導致的症狀、失調症及/或疾病，以及治療及/或保養皮膚。

定義

為了容易理解本發明，本發明包括一些術語及詞句在本發明的上下文中使用時的意義。

在本發明的上下文內，應了解〝皮膚〞為包含從最外層或角質層至最下層或皮下組織之層，包括所述二者。該等層係由不同類型的細胞所組成，尤其諸如角質化細胞、纖維母細胞、黑色素細胞及/或脂肪細胞。

在本發明的上下文內，〝保養皮膚〞包含預防老化及/或光老化跡象。

在本說明內，用於胺基酸之縮寫係依照在Eur. J. Biochem.(1984) 138:9-37及J. Chem(1989) 264:633-673中所規定之IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature規則。

因此，例如Asp代表NH₂ -CH(CH₂ COOH)-COOH，Asp-代表NH₂ -CH(CH₂ COOH)-CO-，-Asp代表-NH-CH(CH₂ COOH)-COOH，及-Asp-代表-NH-CH(CH₂ COOH)-CO-。因此，當代表肽鍵之連字號置於符號右邊時，則其消除胺基酸的1-羧基之OH(在此以非離子化之慣用形式代表)，而置於符號左邊時，則其消除胺基酸的2-胺基之H；此兩種修飾可應用於相同的符號(參見表1)。

縮寫〝Ac-〞係在本說明中用於指明乙醯基(CH₃ -CO-)，及縮寫〝Palm-〞係用於指明棕櫚醯基(CH₃ -(CH₂ )₁₄ -CO-)。

術語〝非環狀脂族基團〞係在本發明中用於涵蓋例如但不限於直鏈或支鏈烷基、烯基及炔基。

術語〝烷基〞係關於飽和、直鏈或支鏈基團，其具有介於1與24，較佳為介於1與16，更佳為介於1與14，甚至更佳為介於1與12個之間的碳原子，且甚至又更佳為1、2、3、4、5或6個碳原子，且以單鍵與分子的其餘部分結合，該烷基包括例如但不限於甲基、乙基、異丙基、異丁基、第三丁基、庚基、辛基、癸基、十二烷基、月桂基、十六烷基、十八烷基、戊基、2-乙基己基、2-甲基丁基、5-甲基己基及類似基團。

術語〝烯基〞係關於直鏈或支鏈基團，其具有介於2與24，較佳為介於2與16，更佳為介於2與14，甚至更佳為介於2與12個之間的碳原子，甚至又更佳為2、3、4、5或6個碳原子，具有一或多個碳-碳雙鍵，較佳為具有1、2或3個共軛或非共軛碳-碳雙鍵，其係經由單鍵與分子的其餘部分結合，該烯基包括例如但不限於乙烯基、油基、亞麻基(linoleyl)及類似基團。

術語〝炔基〞係關於直鏈或支鏈基團，其具有介於2與24，較佳為介於2與16，更佳為介於2與14，甚至更佳為介於2與12個之間的碳原子，甚至又更佳為2、3、4、5或6個碳原子，具有一或多個碳-碳三鍵，較佳為具有1、2或3個共軛或非共軛碳-碳三鍵，其係經由單鍵與分子的其餘部分結合，該炔基包括例如但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、戊炔基(諸如1-戊炔基)及類似基團。

術語〝脂環基〞係在本發明中用於涵蓋例如但不限於環烷基或環烯基或環炔基。

術語〝環烷基〞係關於飽和單-或多環脂族基團，其具有介於3與24，較佳為介於3與16，更佳為介於3與14，甚至更佳為介於3與12個之間的碳原子，甚至又更佳為3、4、5或6個碳原子，且其係經由單鍵與分子的其餘部分結合，該環烷基包括例如但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、甲基環己基、二甲基環己基、八氫茚、十氫萘、十二氫萉及類似基團。

術語〝環烯基〞係關於非芳族單-或多環脂族基團，其具有介於5與24，較佳為介於5與16，更佳為介於5與14，甚至更佳為介於5與12個之間的碳原子，甚至又更佳為5或6個碳原子，具有一或多個碳-碳雙鍵，較佳為具有1、2或3個共軛或非共軛碳-碳雙鍵，其係經由單鍵與分子的其餘部分結合，該環烯基包括例如但不限於環戊-1-烯-1-基及類似基團。

術語〝環炔基〞係關於非芳族單-或多環脂族基團，其具有介於8與24，較佳為介於8與16，更佳為介於8與14，甚至更佳為介於8與12個之間的碳原子，甚至又更佳為8或9個碳原子，具有一或更多個碳-碳三鍵，較佳為具有1、2或3個共軛或非共軛碳-碳三鍵，其係以單鍵與分子的其餘部分結合，該環炔基包括例如但不限於環辛-2-炔-1-基及類似基團。

術語〝芳基〞係關於芳族基團，其具有介於6與30，較佳為介於6與18，更佳為介於6與10個之間的碳原子，甚至更佳為6或10個碳原子，其包含以碳-碳鍵結合或稠合之1、2、3或4個芳族環，該芳基尤其包括例如但不限於苯基、萘基、聯苯基、茚基、菲基或蒽基；或芳烷基。

術語〝芳烷基〞係關於以芳族基團取代之烷基，其具有介於7與24個之間的碳原子，且包括例如但不限於-(CH₂ )_1-6 -苯基、-(CH₂ )_1-6 -(1-萘基)、-(CH₂ )_1-6 -(2-萘基)、-(CH₂ )_1-6 -CH(苯基)₂ 及類似基團。

術語〝雜環基〞係關於雜環或3-10員烴環，其中環原子中之一或多者，較佳為環原子中之1、2或3個原子係不同於碳之元素，諸如氮、氧或硫，且可為飽和或不飽和。以本發明為目的，雜環可為環、單環、雙環或三環系統，其可包括稠合環系統；且雜環基中之氮、碳或硫原子可隨意地氧化；氮原子可隨意地四級化；且雜環基可部分或完全飽和，或可為芳族。隨著漸增的優先選擇，術語雜環係關於5或6員環。

術語〝雜芳基烷基〞係關於以經取代或未經取代之芳族雜環基取代之烷基，烷基具有從1至6個碳原子，而芳族雜環基具有介於2與24個之間的碳原子及從1至3個碳以外的原子，且包括例如但不限於-(CH₂ )_1-6 -咪唑基、-(CH₂ )_1-6 -三唑基、-(CH₂ )_1-6 -噻吩基、-(CH₂ )_1-6 -呋喃基、-(CH₂ )_1-6 -吡咯啶基及類似基團。

當在本技術領域中使用時，在上述定義之基團上可有某些程度的取代基。因此，在本發明的任何基團上可有取代基。在本文件中述及本發明之基團中的經取代之基團係表明經指定之基可在一或多個有效位置上被一或多個取代基取代，較佳在1、2或3個位置上，更佳在1或2個位置上，甚至更佳在1個位置。該等取代基包括例如但不限於C₁ -C₄ 烷基、羥基、C₁ -C₄ 烷氧基、胺基、C₁ -C₄ 胺基烷基、C₁ -C₄ 羰氧基、C₁ -C₄ 氧羰基、鹵素(諸如氟、氯、溴及碘)、氰基、硝基、疊氮基、C₁ -C₄ 烷基磺醯基、硫醇基、C₁ -C₄ 烷硫基、芳氧基(諸如苯氧基)、-NR_b (C=NR_b )NR_b R_c ，其中R_b 及R_c 係獨立選自由下列所組成之群組：H、C₁ -C₄ 烷基、C₂ -C₄ 烯基、C₂ -C₄ 炔基、C₃ -C₁₀ 環烷基、C₆ -C₁₈ 芳基、C₇ -C₁₇ 芳烷基、3-10員雜環基或胺基之保護基。

本發明化合物

本發明化合物係以通式(I)定義：

R₁ -W_n -X_1n -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -R₂ (I)

其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其特徵在於：AA₁ 係選自由-Asp-、-Glu-及-Pro-所組成之群組；AA₂ 為-Asp-；AA₃ 係選自由-Tyr-及-Agr-所組成之群組；AA₄ 係選自由-Phe-及-Tyr-所組成之群組；AA₅ 係選自由-Arg-及-Lys-所組成之群組；AA₆ 係選自由-Leu-及-Met-所組成之群組；W、X、Y及Z係彼等各自獨立選自由經編碼的胺基酸或未經編碼的胺基酸所組成之群組；n、m、p及s係彼等各自獨立選擇且具有介於0與1之間的值；R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、經取代或未經取代之非環狀脂族基團、經取代或未經取代之脂環基、經取代或未經取代之雜環基、經取代或未經取代之雜芳基烷基、經取代或未經取代之芳基、經取代或未經取代之芳烷基及R₅ -CO-，其中R₅ 係選自由下列所組成之群組：H、經取代或未經取代之非環狀脂族基團、經取代或未經取代之脂環基、經取代或未經取代之芳基、經取代或未經取代之芳烷基、經取代或未經取代之雜環基、及經取代或未經取代之雜芳基烷基；及R₂ 係選自由下列所組成之群組：-NR₃ R₄ 、-OR₃ 及-SR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自由下列所組成之群組：H、經取代或未經取代之非環狀脂族基團、經取代或未經取代之脂環基、經取代或未經取代之雜環基、經取代或未經取代之雜芳基烷基、經取代或未經取代之芳基、及經取代或未經取代之芳烷基。

R₁ 及R₂ 基團係分別與肽序列之胺基末端(N-末端)及羥基末端(C-末端)結合。

根據本發明較佳的具體例，R₁ 係選自由H或R₅ -CO-所組成之群組，其中R₅ 係選自由下列所組成之群組：經取代或未經取代之C₁ -C₂₄ 烷基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 烯基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 炔基、經取代或未經取代之C₃ -C₂₄ 環烷基、經取代或未經取代之C₅ -C₂₄ 環烯基、經取代或未經取代之C₈ -C₂₄ 環炔基、經取代或未經取代之C₆ -C₃₀ 芳基、經取代或未經取代之C₇ -C₂₄ 芳烷基、經取代或未經取代之具有3-10個環員的雜環基、及經取代或未經取代之具有2至24個碳原子與1至3個碳以外的原子和具有1至6個碳原子的烷基鏈之雜芳基烷基。更佳地，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、第三丁醯基、己醯基、2-甲基己醯基、環己烷羧基、辛醯基、癸醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基、棕櫚醯基、硬脂醯基、油醯基及亞麻醯基(linoleoyl)。甚至更佳地，R₁ 為H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基或棕櫚醯基。在甚至更佳的具體例中，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基。

根據另一較佳的具體例，R₂ 為-NR₃ R₄ 、-OR₃ 或-SR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自由下列所組成之群組：H、經取代或未經取代之C₁ -C₂₄ 烷基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 烯基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 炔基、經取代或未經取代之C₃ -C₂₄ 環烷基、經取代或未經取代之C₅ -C₂₄ 環烯基、經取代或未經取代之C₈ -C₂₄ 環炔基、經取代或未經取代之C₆ -C₃₀ 芳基、經取代或未經取代之C₇ -C₂₄ 芳烷基、經取代或未經取代之具有3-10個環員的雜環基、及經取代或未經取代之具有2至24個碳原子與1至3個碳以外的原子和具有1至6個碳原子的烷基鏈之雜芳基烷基。R₃ 及R₄ 可隨意地經由飽和或不飽和碳－碳鍵結合，與氮原子形成環。更佳地，R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自由下列所組成之群組：H、經取代或未經取代之C₁ -C₂₄ 烷基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 烯基、經取代或未經取代之C₂ -C₂₄ 炔基、經取代或未經取代之C₃ -C₁₀ 環烷基、經取代或未經取代之C₆ -C₁₅ 芳基、經取代或未經取代之具有3-10個環員的雜環基、經取代或未經取代之具有3至10個環員和具有1至6個碳原子的烷基鏈之雜芳基烷基。更佳地，R₃ 及R₄ 係選自由下列所組成之群組：H、甲基、乙基、己基、十二烷基或十六烷基。甚至更佳地，R₃ 為H及R₄ 係選自由下列所組成之群組：H、甲基、乙基、己基、十二烷基或十六烷基。根據甚至更佳的具體例，R₂ 係選自-OH與-NH₂ 。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基或棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Glu-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-，AA₆ 為-L-Leu-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基及十六烷基，R₂ 較佳為-OH或-NH₂ 。更佳地，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基及R₂ 為-NH₂ 。甚至更佳地，n、m、p及s為0。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基或棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Pro-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Lys-，AA₆ 為-L-Leu-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基及十六烷基，R₂ 較佳為-OH或-NH₂ 。更佳地，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基及R₂ 為-NH₂ 。甚至更佳地，n、m、p及s為0。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基或棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Glu-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Arg-，AA₄ 為-L-Phe-，AA₅ 為-L-Arg-，AA₆ 為-L-Met-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基及十六烷基，R₂ 較佳為-OH或-NH₂ 。更佳地，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基及R₂ 為-NH₂ 。甚至更佳地，n、m、p及s為0。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基及棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Glu-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-，AA₆ 為-L-Met-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基及十六烷基，R₂ 較佳為-OH或-NH₂ 。更佳地，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基及R₂ 為-NH₂ 。甚至更佳地，n、m、p及s為0。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基及棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Pro-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-，AA₆ 為-L-Met-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係獨立選自H、甲基、乙基、己基、十二烷基及十六烷基，R₂ 較佳為-OH或-NH₂ 。更佳地，R₁ 為乙醯基或棕櫚醯基及R₂ 為-NH₂ 。甚至更佳地，n、m、p及s為0。

根據本發明的另一具體例，R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、月桂醯基、肉豆蔻醯基及棕櫚醯基，較佳地，R₁ 係選自由H、乙醯基及棕櫚醯基所組成之群組，且R₂ 係選自由-OH及-NH₂ -所組成之群組。

較佳地，式(I)化合物係選自由下列所組成之群組：

Ac-Asp-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Asp-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-OH,

Ac-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH₂

Ac-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Ac-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-OH,

Ac-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Met-NH₂

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Leu-NH₂

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ,

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-OH,

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-OH,

Ac-Glu-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-OH,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-OH,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-Gly-Gly-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-Gly-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-OH,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH₂ ,

Ac-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-OH,

Ac-Gly-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-Gly-NH₂ ,

Ac-Gly-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Gly-Gly-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-OH,

Ac-Pro-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-OH,

Ac-Pro-Asp-Arg-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Arg-Tyr-Lys-Leu-OH,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃

Ac-Pro-Asp-Tyr-Phe-Lys-Leu-NH₂

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-OH,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-OH,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-OH,

Ac-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Met-NH₂

H-GluAsp-Arg-Phe-Arg-Met-NH₂

Palm-Ala-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-Gly-NH₂ ;

Palm-Asp-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Asp-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-OH,

Palm-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Palm-Asp-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-OH,

Palm-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Arg-Phe-Arg-Met-OH,

Palm-Glu-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-OH,

Palm-Glu-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-OH,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Phe-Arg-Leu-OH,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-Gly-Gly-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-OH,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-Gly-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH₂ ,

Palm-Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-OH,

Palm-Gly--Glu-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Gly-Gly-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Arg-Phe-Lys-Leu-OH,

Palm-Pro-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Arg-Tyr-Arg-Leu-OH,

Palm-Pro-Asp-Arg-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Arg-Tyr-Lys-Leu-OH,

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Leu-OH,

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-NH₂ ,

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Met-OH,

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-NH₂ ,y

Palm-Pro-Asp-Tyr-Tyr-Lys-Leu-OH,

其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽。

本發明之肽可以立體異構物或立體異構物之混合物存在，例如形成肽之胺基酸可具有L-、D-組態，或彼此獨立為消旋性。因此，有可能獲得異構混合物以及消旋混合物或非鏡像異構混合物，或純非鏡像異構物或鏡像異構物，其係取決於不對稱碳的數量及其異構物或異構混合物的存在而定。本發明之肽的較佳結構為純異構物，亦即鏡像異構物或非鏡像異構物。

例如，當所述AA₁ 可為-Glu-時，則應了解AA₁ 係選自-L-Glu-、-D-Glu-或二者(消旋或非消旋)之混合物。同樣的，當所述AA₂ 可為-Asp-時，則應了解其可為-L-Asp-、-D-Asp-或二者(消旋或非消旋)之混合物。在本文件中所述之製備方法允許熟習本技藝者藉由選擇具有適當組態之胺基酸而獲得本發明之肽的每一立體異構物。

在本發明的上下文中，術語〝未編碼的胺基酸〞係指未以基因碼編碼的任何天然或非天然胺基酸，尤其例如但不限於瓜胺酸、鳥胺酸、肌胺酸、鎖鏈素、正纈胺酸、4-胺基丁酸、2-胺基丁酸、2-胺基異丁酸、6-胺基己酸、1-萘基丙胺酸、2-萘基丙胺酸、2-胺基苯甲酸、4-胺基苯甲酸、4-氯苯基丙胺酸、2,3-二胺基丙酸、2,4-二胺基丁酸、環絲胺酸、肉鹼、半胱胺酸、青黴胺、焦麩胺酸、噻吩基丙胺酸、羥基脯胺酸、別-異白胺酸、別-蘇胺酸、異六氫菸鹼酸(isonipecotic acid)、異絲胺酸、苯基甘胺酸、砈(astatine)、β-丙胺酸、正白胺酸、N-甲基胺基酸、β-胺基酸或γ-胺基酸，以及彼之衍生物。非天然胺基酸的名單可見於論文“Unusual amino acids in peptide synthesis”by D. C. Roberts and F. Vellaccio,in The Peptides,Vol. 5(1983),Chapter VI,Gross E. and Meienhofer J.,Eds.,Academic Press,New York,USA中或專精此領域之公司的商業目錄中，尤其諸如PolyPeptide Laboratories、Bachem、Novabiochem、Sigma-Aldrich、Peptides International、Advanced ChemTech、Chem-Impex、Maybridge Chemical、Chirotech Technology、Peninsula Laboratories或RSP Amino Acid Analogues。

在本發明的上下文中，當n、m、p及/或s不同於0時，則清楚地了解W、x、Y及/或Z之性質不使本發明之肽的活性難以達成，但其促成AChR群聚抑制作用或對其不具效應。

在本發明的上下文中，亦有以本發明所提供之肽的美容或醫藥上可接受之鹽。術語〝美容或醫藥上可接受之鹽〞意謂經許可用於動物及更特別用於人類之鹽，且包括用於形成鹼加成鹽之鹽，不論是否為無機鹽，尤其例如但不限於鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、錳、銅、鋅或鋁，或有機鹽，尤其例如但不限於乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、精胺酸、離胺酸、組胺酸或哌；或用於形成酸加成鹽之鹽，不論是否為有機鹽，尤其例如但不限於乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、丙二酸鹽、順丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、反丁烯二酸鹽、苯甲酸鹽、天冬胺酸鹽、麩胺酸鹽、琥珀酸鹽、油酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽或葡萄糖酸鹽，或無機鹽，尤其例如但不限於氯化物、硫酸鹽、硼酸鹽或碳酸鹽。鹽的性質非關鍵，其先決條件係該鹽為美容或醫藥上可接受。本發明之肽的美容或醫藥上可接受之鹽可以本技藝中熟知的慣用方法獲得[Berge S. M. Bioghley L. D. and Monkhouse D. C.(1977) “Pharmaceutical Salts” J. Pharm. Sci. 66:1-19]。

本發明的另一觀點係關於如本發明所述之通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養由肌肉收縮(特別為乙醯膽鹼受體群聚)導致的症狀、失調症及/或疾病。

在另一特別的觀點，本發明係關於如本發明所述之通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於抑制肌肉收縮，特別用於抑制乙醯膽鹼受體群聚。

在另一特別的觀點，其中欲治療之由肌肉收縮導致的失調症及/或疾病為緊張不全症，而更特別為臉部緊張不全症，例如但不限於臉痙攣、扭轉性緊張不全症、頸緊張不全症或斜頸症、喉緊張不全症或痙攣性緊張不全症、口顎緊張不全症、胺體緊張不全症(諸如作家或音樂家的痛性痙攣)或腳部緊張不全症、睡中磨牙、半邊顏面神經痙攣、抽搐症及/或斜視；節段性緊張不全症、梅格斯氏症候群、多發性緊張不全症、半身緊張不全症、多巴胺反應緊張不全症及瀨川(Segawa)緊張不全症。

在另一特別的觀點，本發明係關於如本發明所述之通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養皮膚，較佳為治療及/或保養臉部皮膚。

在另一特別的觀點，該治療及/或保養皮膚係指治療及/或預防老化及/或光老化跡象。

在另一特別的觀點，本發明係關於如本發明所述之通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養受皺紋及/或表情紋影響的皮膚。

製備方法

本發明之肽、其立體異構物或其美容或醫藥上可接受之鹽的合成法可根據先前技藝中已知的慣用方法執行，諸如固相肽合成法[Stewart J. M. and Young J. D.(1984)“Solid Phase Peptide Synthesis,2nd edition”Pierce Chemical Company,Rockford,Illinois；Bodanzsky M. and Bodanzsky A.(1984)“The practice of Peptide Synthesis”Springer Verlag,New Cork；Lloyd-Williams P.,Albericio F. and Giralt E.(1997)“Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins”CRC,Boca Raton,FL,USA]、溶液合成法、固相合成法與溶液合成法或酵素合成法之組合[Kullmann W.(1980)“Proteases as catalysts for enzymic syntheses of opioid peptides”J. Biol. Chem. 255:8234-8238]。肽亦可藉由經或未經基因改造之菌株發酵而獲得，俾以生產所欲序列，或藉由控制動物或植物來源(較佳為植物來源)蛋白質水解而獲得，以釋放含有至少所欲序列之肽片段。

例如，獲得本發明的式(I)之肽的方法包含下列步驟：

-將具有經保護之N-末端及游離之C-末端的胺基酸偶合在具有游離之N-末端及經保護或與固態載體結合之C-末端的胺基酸上；

-　移除N-末端的保護基；

-　重複N-末端的保護基偶合及移除順序，直到獲得所欲肽序列為止；

-　移除C-末端的保護基或從固態載體分離。

較佳地，將C-末端與固態載體結合，且該方法係在固相上進行，因此包括將具有經保護之N-末端及游離之C-末端的胺基酸偶合在具有游離之N-末端及與聚合物載體結合之C-末端的胺基酸上；移除N-末端的保護基；及依需要重複該順序許多次，以獲得所欲長度之肽，且最終從原始的聚合物載體分離所合成之肽。

胺基酸側鏈的官能基在整個合成期間以暫時性或永久性保護基適當地保護，且可在與從聚合物載體分離肽的過程同時地或互不相關地去保護。

另一選擇地，固相合成法可藉由將肽偶合在聚合物載體上或事先與聚合物載體結合的胺基酸上的收斂式策略來進行。收斂式合成策略廣為熟習本技藝者所知且說明於Lloyd-Williams P.,Albericio F. and Giralt E. in“Convergent solid phase peptide synthesis”(1993)Tetrahedron 49:11065-11133中。

該方法可包含使用先前技藝中已知的標準方法及條件以不同的次序去保護N-末端及C-末端及/或從聚合物載體分離肽的額外階段,隨後可修改該等末端的官能基。N-末端及C-末端的隨意修改可以與聚合物載體結合的式(I)之肽進行或在肽已從聚合物載體分離時進行。

另一選擇地，R₁ 可藉由本發明之肽的N-末端與化合物R₁ -J的反應而引入，其中R₁ 係如上所述，且J為脫離基，尤其例如但不限於甲苯磺醯基、甲磺醯基及鹵素基團；經由在適當的鹼及溶劑存在下的親核取代反應而引入，其中具有未涉入N-C鍵形成作用的官能基之片段經暫時性或永久性保護基適當地保護。

隨意地及/或另外，R₂ 基可藉由其中R₂ 為-OR₃ 、-NR₃ R₄ 或-SR₃ 的化合物HR₂ 與對應於其中R₂ 為-OH的式(I)之肽的互補片段的反應而引入，該反應係在在適當的溶劑及鹼(諸如N,N-二異丙基乙胺(DIEA)或三乙胺)或添加劑(諸如1-羥基苯並三唑(HOBt)或1-羥基氮雜苯並三唑(HOAt))和脫水劑(尤其諸如碳二醯亞胺、脲陽離子鹽、鏻鹽或脒陽離子鹽(amidinium salt))的存在下進行；或藉由以例如亞硫醯氯事先形成醯基鹵化物而引入，藉此獲得根據本發明的通式(I)之肽，其中具有未涉入N-C鍵形成作用的官能基之片段以暫時性或永久性保護基適當地保護，或另一選擇地，其他的R₂ 基可藉由同時併入從聚合物載體的肽分離過程中而引入。

熟習本技藝者可輕易了解C-末端及N-末端的去保護/分離步驟及彼等後續的衍生作用可根據先前技藝中已知的方法以不同的次序執行[Smith M. B. and March J.(1999)“March’s Advanced Organic Chemistry Reactions,Mechanisms and Structure”,5th Edition,John Wiley & Sons,2001]。

術語〝保護基〞係關於封鎖官能性有機基團且可在受控制條件下移除的基團。保護基、其相關反應性及維持其為惰性的條件為熟習本技藝者所知。

胺基的代表性保護基之實例尤其為醯胺，諸如醯胺乙酸酯、醯胺苯甲酸酯、醯胺特戊酸酯；胺基甲酸酯，諸如苯甲氧基羰基(Cbz或Z)、2-氯苯甲基(ClZ)、對-硝基苯甲氧基羰基(pNZ)、第三丁氧基羰基(Boc)、2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc)、2-(三甲矽基)乙氧基羰基(Teoc)、9-茀基甲氧基羰基(Fmoc)或烯丙氧基羰基(Alloc)、三苯甲基(Trt)、甲氧基三苯甲基(Mtt)、2,4-二硝基苯基(Dnp)、N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基環己-1-亞基)乙基(Dde)、1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基亞環己基)-3-甲基丁基(ivDde)、1-(1-金剛烷基)-1-甲基乙氧基羰基(Adpoc)，較佳為Boc或Fmoc。

羧基的代表性保護基之實例尤其為酯，諸如第三丁酯(tBu)、烯丙酯(All)、三苯基甲酯(三苯甲酯，Trt)、環己酯(cHx)、苯甲酯(Bzl)、鄰-硝基苯甲酯、對-硝基苯甲酯、對-甲氧基苯甲酯、三甲矽基乙酯、2-苯基異丙酯、茀基甲酯(Fm)、4-(N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基亞環己基)-3-甲基丁基]胺基)苯甲酯(Dmab)；本發明較佳的保護基為All、tBu、cHex、Bzl及Trt酯。

三官能性胺基酸的側鏈可在合成法期間以與N-末端及C-末端之保護基互不相關的暫時性或永久性保護基保護。

精胺酸側鏈的胍基尤其可以硝基、烯丙氧基羰基(Alloc)、對-甲苯磺醯基(tosyl，Tos)、2,2,5,7,8-五甲基苯並二氫吡喃-6-磺醯基(Pmc)、2,2,4,6,7-五甲基二氫苯並呋喃-5-磺醯基(Pbf)或4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺醯基(Mtr)保護。酪胺酸側鏈的羥基尤其可以2-溴苯甲氧基羰基(2-BrZ)、第三丁基(t-Bu)、烯丙基(All)、苯甲基(Bzl)或2,6-二氯苯甲基(2,6-diClZ)保護。可使用尤其下列者保護離胺酸側鏈的胺基：醯胺，諸如醯胺乙酸酯、醯胺苯甲酸酯、醯胺特戊酸酯；胺基甲酸酯，諸如苯甲氧基羰基(Cbz或Z)、2-氯苯甲基(ClZ)、對-硝基苯甲氧基羰基(pNZ)、第三丁氧基羰基(Boc)、2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc)、2-(三甲矽基)乙氧基羰基(Teoc)、9-茀基甲氧基羰基(Fmoc)或烯丙氧基羰基(Alloc)、三苯甲基(Trt)、甲氧基三苯甲基(Mtt)、2,4-二硝基苯基(Dnp)、N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基環己-1-亞基)乙基(Dde)、1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基亞環己基)-3-甲基丁基(ivDde)或1-(1-金剛烷基)-1-甲基乙氧基羰基(Adpoc)。可使用尤其下列者保護天冬胺酸及麩胺酸側鏈的羧基：酯，諸如第三丁酯(tBu)、烯丙酯(All)、三苯基甲酯(三苯甲酯，Trt)、環己酯(cHx)、苯甲酯(Bzl)、鄰-硝基苯甲酯、對-硝基苯甲酯、對-甲氧基苯甲酯、三甲矽基乙酯、2-苯基異丙酯、茀基甲酯(Fm)、4-(N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基亞環己基)-3-甲基丁基]胺基)苯甲酯(Dmab)。甲硫胺酸側鏈係以亞碸保護或未經保護。

在較佳的具體例中，所使用之保護基策略為其中胺基以Boc保護，羧基以Bzl、cHx或All保護，精胺酸側鏈以Tos保護，離胺酸側鏈以ClZ、Fmoc或Alloc保護，天冬胺酸及麩胺酸側鏈以Bzl、cHx或All保護，酪胺酸側鏈以2-BrZ或Bzl保護及使用未經保護之甲硫胺酸側鏈的策略。

在另一較佳的具體例中，所使用之保護基策略為其中胺基以Boc保護，羧基以tBu、All或Trt保護，精胺酸側鏈以Pbf或Pmc保護，離胺酸側鏈以Boc或Mtt保護，天冬胺酸及麩胺酸側鏈以tBu或All保護，酪胺酸側鏈以tBu保護及使用未經保護之甲硫胺酸側鏈的策略。

該等與其他額外的保護基、彼之引入及移除的實例可見於文獻中[Greene T. W. and Wuts P. G. M.,(1999)“Protective groups in Organic Synthesis” John Wiley & Sons,New York；Atherton B. and Sheppard R. C.(1989) “Solid Phase Peptide Synthesis: A practical approach" IRL Oxford University Press]。術語〝保護基〞亦包括在固相合成法中所使用之聚合物載體。

當合成全部或部分係以固相發生時，則在本發明的方法中所使用之可能的固態載體包含聚苯乙烯載體、接枝在聚苯乙稀之聚乙二醇及類似物，例如但不限於對甲基二苯甲胺樹脂(MBHA)[Matsueda G. R. and Stewart J. M.(1981) “A p-methylbenzhydrylamine resin for improved solid phase synthesis of peptide amides” Peptides 2:45-50]、2-氯三苯甲基樹脂[Barlos K.,Gatos D.,Kallitsis J. Papaphotiu G.,Sotiriu P.,Wenqing Y. and W. Schfer(1989)“Darstellung geschtzter Peptid-Fragmente unter Einsatz substituierter Triphenylmethyl-Harze” Tetrahedron Lett. 30:3943-3946；Barlos K.,Gatos D.,Kapolos S.,Papaphotiu G.,Schfer W. and Wenqing Y.(1989)“Veresterung von partiell geschtzten Peptid-Fragmenten mit Harzen. Einsatz von 2-Chlorotritylchlorid zur Synthese von Leul-castrin I” Tetrahedron Lett. 30:3947-3951]、TentaGel樹脂(Rapp Polymere GmbH)、ChemMatrix樹脂(Matrix Innovation,Inc)及類似物，其可包括或可不包括不穩鍵聯基，諸如5-(4-胺甲基-3,5-二甲氧基苯氧基)-戊酸(PAL)[Albericio F.,Kneib-Cordonier N.,Biancalana S.,Gera L.,Masada R. I.,Hudson D. and Barany G. (1990)“Preparation and application of the 5-(4-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)aminomethyl-3,5-dimethoxyphenoxy)valeric acid(PAL) handle for the solid-phase synthesis of C-terminal peptide amides under mild conditions” J. Org. Chem. 55:37303743]、2-[4-胺甲基-(2,4-二甲氧基苯基)]苯氧基乙酸(AM)[Rink H. (1987)“Solid-phase synthesis of protected peptide fragments using a trialkoxy-diphenyl-methylester-resin” Tetrahedron Lett. 28:3787-3790]、Wang[Wang S. S.(1973)“p-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p- Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazide Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments”J. Am. Chem. Soc. 95:1328-1333]及類似物，允許同時去保護及從聚合物載體分離肽。

美容或醫藥組成物

可投予本發明之肽，其係以彼等在哺乳類(較佳為人類)體內的作用位置產生肽接觸點的任何方式來抑制AChR群聚，且呈含有該等肽之組成物形式投予。

關於此點，本發明的另一觀點為美容或醫藥組成物，其包含至少一種通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物或/或其美容或醫藥上可接受之鹽與至少一種美容或醫藥上可接受之佐劑。此等組成物可以熟習本技藝者已知的慣用方法製備[“Harry’s Cosmeticology”,Eight edition(2000)Rieger M. M.,ed.,New York Chemical Pub.,NY,US；”Remington: The Science and Practice of Pharmacy”,Twentieth edition(2003)Genaro A. R.. ed.,Lippincott Williams & Wilkins,Philadelphia,US]。

本發明之肽係根據彼之序列及在N-末端及/或C-末端上任何可能的修改而在水中具有可變的溶解度。因此，本發明之肽可以水溶液併入組成物中，而不溶於水中者可溶解在美容或醫藥上可接受之慣用溶劑中，例如但不限於乙醇、丙醇、異丙醇、丙二醇、甘油、丁二醇或聚乙二醇或其任何組合。

應投予的本發明之肽的美容或醫藥有效量以及其劑量係取決於許多因素而定，包括年齡；病患狀況；欲治療、保養或預防之症狀、失調症或疾病的性質或嚴重性；投予途徑和頻率及特別為欲使用之肽的性質。

應了解〝美容或醫藥有效量〞意謂無毒性但足以提供所欲效果的本發明之肽或肽類量。本發明之肽係以達成所欲效果的美容或醫藥有效濃度用於本發明的美容或醫藥組成物中；在較佳形式中，以組成物總重量計係介於0.00000001%(重量計)與20%(重量計)之間，較佳地介於0.000001%(重量計)與20%(重量計)之間，更佳地介於0.0001%(重量計)與10%(重量計)之間，且甚至更佳地介於0.0001%(重量計)與5%(重量計)之間。

本發明之肽亦可併入美容或醫藥輸送系統及/或持續釋放系統中。

術語〝輸送系統〞係關於與本發明之肽一起投予之稀釋劑、佐劑、賦形劑或載劑。該等美容或醫藥載劑可為液體，諸如水、油或界面活性劑，包括石油、動物、植物或合成來源，例如但不限於花生油、大豆油、礦物油、芝麻油、蓖麻油、聚山梨醇酯、山梨醇酐酯、醚硫酸酯、硫酸酯、甜菜鹼、葡萄糖苷、麥芽糖苷、脂肪醇、壬苯聚醇(nonoxynol)、帕洛沙姆(poloxamer)、聚氧乙烯、聚乙二醇、右旋糖、甘油、毛地黃皂苷及類似物。在E. W. Martin之“Remington’s Pharmaceutical Sciences，，中說明作為適當載劑的稀釋劑、佐劑或賦形劑。

術語〝持續釋放〞係以慣用意義使用，其係關於在一段期間內提供逐漸釋放化合物的此化合物釋放系統，且較佳地在整個期間內具有相對固定的化合物釋放水平，雖然未必一定。

輸送或持續釋放系統的實例為脂質體、混合脂質體、油質體、非離子質體(niosome)、乙醇脂體(ethosome)、毫粒子、微粒子、奈米粒子和固態脂質奈米粒子、奈米結構化脂質載體、海棉、環糊精、小囊泡、微胞、界面活性劑之混合微胞、界面活性劑-磷脂質之混合微胞、毫球體、微球體和奈米球體、脂球體(liposphere)、毫膠囊(millicapsule)、微膠囊和奈米膠囊，以及微乳液和奈米乳液，可添加該等以達成更大的活性成份穿透性及/或改良其藥物動力與藥效性質。較佳的輸送或持續釋放系統為脂質體、界面活性劑-磷脂質之混合微胞及微乳液，更佳為具有反微胞之內部結構的油包水型微乳液。

持續釋放系統可以先前技藝中已知的方法製備，且含有該系統之組成物可以例如局部或穿透皮膚投予，包括黏性貼片、無黏性貼片、閉合型(occlusive)貼片及微電貼片，或以全身性投予，例如但不限於口服或非經腸，包括鼻腔、直腸或皮下植入或注射，或直接植入或注射至特定的身體部位，且較佳地應釋放相對固定量的本發明之肽。持續釋放系統中所含之肽量係取決於例如欲投予組成物的位置、本發明之肽的動力學和持續釋放時間，以及欲治療、保養或預防之症狀、失調症及/或疾病性質而定。

本發明之肽亦可吸附在固態有機聚合物或固態無機載體上，例如但不限於滑石、膨土、矽石、澱粉或麥芽糊精。

含有本發明之肽的組成物亦可併入與皮膚直接接觸的織物、不織布及醫療裝置中，不論係藉由與織物、不織布或醫療裝置之結合系統的生物降解，或藉由織物、不織布或醫療裝置與身體之間的摩擦，由於身體含水量、皮膚的pH或體溫而因此釋放本發明之肽。此外，織物及不織布可用於製造與身體直接接觸的衣物。較佳地，含有本發明之肽的織物、不織布及醫療裝置係用於治療及/或保養由AChR群聚導致(特別為肌肉收縮導致)的症狀、失調症及/或疾病。

織物、不織布、衣物、醫療裝置及用於固定肽於織物、不織布、衣物、醫療裝置(彼等為上述之輸送系統及/或持續釋放系統)之工具的實例可見於文獻中且為先前技藝中所知[Schaab C. K.(1986)“Impregnating Fabrics With Microcapsules”,HAPPI May 1986；Nelson G.(2002)“Application of microencapsulation in textiles”Int. J. Pharm. 242:55-62；”Biofunctional Textiles and the Skin”(2006)Curr. Probl. Dermatol. v.33,Hipler U. C. and Elsner P.,eds. S. Karger AG,Basel,Switzerland；Malcom R. K.,McCullagh S. D.,Woolfson A. D.,Gorman S. P.,Jones D. S. and Cuddy J.(2004)“Controlled release of amodel antibacterial drug from a nove1 self-lubricating silicone biomaterial” J. Cont. Release 97:313-320]。較佳的織物、不織布、衣物及醫療裝置為繃帶、紗布、T恤、襪子、連褲襪、內衣、束腹、手套、尿布、衛生棉、衣服、床罩、擦拭布、黏性貼片、無黏性貼片、閉合型貼片、微電貼片及/或面膜。

含有本發明之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物可用於不同類型之局部或穿透皮膚施予之組成物中，隨意地包括用於調配所欲投予形式必要的美容或醫藥上可接受之賦形劑[Fauli i Trillo C.(1993)之”Tratado de Farmacia Galnica”,Luzn 5,S. A. Ediciones,Madrid]。

局部或穿透皮膚施予之組成物可生產成任何固態、液態或半固態調配物，例如但不限於乳霜、複合乳液(例如但不限於水包油型及/或水包聚矽氧型乳液、水包油型及/或聚矽氧乳液、水/油/水型或水/聚矽氧/水型乳液及油/水/油型或聚矽氧/水/聚矽氧型乳液)、無水組成物、水性分散液、油、奶狀物、香脂、泡沫、洗劑、凝膠、乳凝膠(cream gel)、水醇溶液、水甘醇(hydroglycolic)溶液、水凝膠、塗擦劑、漿液(sera)、皂、洗髮精、潤髮乳、漿液(serum)、多醣膜、軟膏、慕斯(mousse)、香膏劑、粉末、條狀物、筆狀物及噴霧劑或氣溶膠(噴霧劑)，包括免沖洗型和沖洗型調配物。該等局部或穿透皮膚施予之調配物可使用熟習本技藝者已知的技術併入不同類型的固態附件中，例如但不限於繃帶、紗布、T恤、襪子、連褲襪、內衣、束腹、手套、尿布、衛生棉、衣服、床罩、擦拭布、黏性貼片、無黏性貼片、閉合型貼片、微電貼片或面膜；或可將該等調配物併入不同的化妝產品中，尤其諸如化妝粉底(諸如液態粉底和粉餅)、卸妝液、卸妝乳、遮瑕膏、眼影、唇膏、護唇膏、唇彩及蜜粉。

本發明之美容及醫藥組成物可包括增加本發明之肽經皮吸收之劑，尤其例如但不限於二甲亞碸、二甲基乙醯胺、二甲基甲醯胺、界面活性劑、腙(1-十二基氮雜環庚-2-酮)、醇、尿素、乙氧基二甘醇、丙酮、丙二醇或聚乙二醇。此外，本發明之美容及醫藥組成物可以離子電滲、超聲波導入、電穿孔、微電貼片、機械性壓力、滲透壓梯度、密合治療(occlusive cure)、微注射器、利用壓力之無針注射(諸如以氧壓力注射)或其任何組合的方式施予欲治療之局部區域，以達成本發明之肽的更大穿透性。施予區域係由欲治療及/或保養之症狀、失調症及/或疾病性質而決定。

此外，含有本發明之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物可用於不同類型之口服投予調配物中，較佳呈口服化妝品或藥形式，例如但不限於膠囊(包括明膠膠囊、軟膠囊、硬膠囊)、錠劑(包括糖衣錠劑)、粉末、顆粒、咀嚼膠、溶液、懸浮液、乳液、糖漿、多醣膜、膠凍或明膠，且可用於熟習本技藝者已知的任何其他形式中。本發明之肽可特別併入任何形式之功能性食品或強化食品中，例如但不限於餐條或壓塊或未壓塊粉末。該等粉末可溶於水、蘇打水、乳製品、大豆衍生物中，或可併入餐條中。本發明之肽可以常用於口服組成物或食品補充劑的賦形劑及佐劑調配，例如但不限於食品工業中常用的脂肪組份、水性組份、保濕劑、防腐劑、增稠劑、調味劑、香味、抗氧化劑及著色劑。

含有本發明之肽、其立體異構物、其混合物或其美容及/或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物亦可以局部或穿透皮膚途徑，以及任何其他適當的途徑投予，例如口服或非經腸途徑，就此等途徑的組成物包括所欲投予形式之調配物必要的醫藥上可接受之賦形劑。在本發明的上下文中，術語〝非經腸〞包括鼻腔、耳廓、眼睛、直腸、尿道、陰道途徑、皮下、皮內、血管內注射(諸如靜脈內)、肌肉內、眼球內、玻璃體內、角膜內、脊椎內、脊髓內、顱內、子宮頸管內、腦內、腦脊膜內、關節內、肝臟內、胸腔內、氣管內、椎管內及腹膜內，及任何其他類似的注射或灌注技術。投予活性成分之不同的醫藥形式及獲得該等形式必要的賦形劑之評論可見於例如“Tratado de Farmacia Galnica”C. Fauli Trillo,1993,Luzn 5,S. A. Ediciones,Madrid中。

在本發明所述之美容及醫藥組成物中所含有之美容或醫藥上可接受之佐劑包括用於治療及/或保養皮膚之組成物中常使用的額外成份，尤其例如但不限於其他抑制AChR群聚之劑、其他抑制肌肉收縮之劑、抗膽鹼能劑、彈性蛋白酶抑制劑、基質金屬蛋白酶抑劑劑、黑色素合成刺激和抑制劑、增白或脫色劑、色素原劑(pro-pigmenting agent)、仿曬劑、抗老化劑、NO-合成酶抑制劑、5α-還原酶抑制劑、離胺醯基-及/或脯胺醯基-羥化酶抑制劑、抗氧化劑、自由基清除劑及/或抗空氣污染之劑、反應性羰基物種清除劑、抗糖化劑、抗組織胺劑、止吐劑、抗病毒劑、抗寄生蟲劑、乳化劑、潤膚劑、有機溶劑、液體推進劑、皮膚調理劑，諸如保濕劑、保濕物質、α羥酸、β羥酸、濕潤膏、表皮水解酵素、維生素、顏料或著色劑、染料、膠化聚合物、增稠劑、界面活性劑、軟化劑、防皺劑、能夠減輕或治療眼袋之劑、去角質劑、抗微生物劑、抗真菌劑、抑真菌劑、殺細菌劑、抑細菌劑、刺激真皮或表皮巨分子合成及/或能夠抑制或預防彼等退化之劑，諸如膠原合成刺激劑、彈性蛋白合成刺激劑、核心蛋白聚糖(decorin)合成刺激劑、層黏蛋白(laminin)合成刺激劑、防禦素(defensin)合成刺激劑、伴隨蛋白(chaperone)合成刺激劑、水通道蛋白(aquaporin)合成刺激劑、玻尿酸合成刺激劑、纖連蛋白(fibronectin)合成刺激劑、靜默信息調節蛋白(sirtuin)合成刺激劑、刺激角質層之脂質與組份(腦醯胺、脂肪酸等)合成之劑、抑制膠原退化之劑、其他抑制彈性蛋白退化之劑、抑制絲胺酸蛋白酶(諸如組織蛋白酶G)之劑、刺激纖維母細胞增生之劑、刺激角質細胞增生之劑、刺激脂肪細胞增生之劑、刺激黑色素細胞增生之劑、刺激角質細胞分化之劑、刺激脂肪細胞分化之劑、抑制乙醯膽鹼酯酶之劑、皮膚鬆弛劑、葡萄糖胺聚糖合成刺激劑、抗角化過度劑、粉刺溶解劑(comedolytic agent)、抗牛皮癬劑、DNA修復劑、DNA防護劑、穩定劑、止癢劑、敏感性皮膚治療及/或保養劑、皮膚緊實劑、除妊娠紋劑、收斂劑、調節皮脂產生之劑、解脂劑或刺激脂肪分解之劑、抗蜂窩組織劑、止汗劑、刺激癒合之劑、協助癒合劑、刺激表皮再生之劑、協助表皮再生之劑、細胞激素生長因子、鎮靜劑、消炎劑及/或止痛劑、麻醉劑、作用於毛細血管循環及/或微循環之劑、刺激血管生成之劑、抑制血管滲透性之劑、靜脈滲透劑(venotonic agent)、作用於細胞代謝之劑、改善真皮-表皮界面之劑、誘發毛髮生長之劑、毛髮生長抑制劑或延緩劑、防腐劑、香料、螯合劑、植物萃取物、精油、海洋萃取物、自生物發酵法所獲得之劑、無機鹽、細胞萃取物與防曬劑(抗紫外線A及/或B之活性有機或無機光防護劑)，其先決條件係該等額外成分與組成物的其他組份且尤其與本發明組成物中所含有的通式(I)之肽具有物理與化學相容性。此外，該等額外成份的性質不應該以不可接受的方式改變本發明之肽的優勢。該等額外成份的性質可為合成或天然的，諸如植物萃取物，或從生物技術法獲得或從合成法與生物技術之組合獲得。額外的實例可見於the CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary & Handbook,12th Edition(2008)。在本發明的上下文中，應了解生物技術法為在有機體或其一部分中生產活性成分或其一部分的任何方法。

本發明的額外觀點係關於含有美容或醫藥有效量之至少一種根據通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物，且該組成物亦含有美容或醫藥有效量之至少一種為防皺劑及/或抗老化劑之萃取物，尤其例如但不限於深裂葉葡萄(Vitis vinifera)、冰狗玫瑰(Rosa canina)、薑黃(Curcuma longa)、鳶尾草(Iris pallida)、可可樹(Theobroma cacao)、銀杏(Ginkgo biloba)、高山火絨草(Leontopodium Alpinum)或杜沙藻(Dunaliella salina)；或至少一種為防皺劑及/或抗老化劑之合成化合物或生物發酵產物，尤其例如但不限於由Sederma銷售之Matrixyl[INCI：棕櫚醯基五肽-4]、Matrixyl 3000[INCI：棕櫚醯基四肽-7，棕櫚醯基寡肽]、Essenskin^TM [INCI：羥基甲硫胺酸鈣]、Renovag[INCI：替普瑞酮(Teprenone)]或Dermaxyl[INCI：棕櫚醯寡肽]，由Pentapharm/DS M銷售之Vialox[INCI：五肽-3]、Syn-Ake[INCI：二肽二胺基丁醯基苯甲基醯胺二乙酸酯]、Syn-Coll[INCI：棕櫚醯基三肽-5]、Phytaluronate[INCI：刺槐豆(locust bean)(角豆樹(Ceratonia siliqua))膠]或Preregen[INCI：野生大豆(大豆)蛋白質，氧化還原酶]，由Laboratoires Srobiologiques/Cognis銷售之Myoxinol^TM [INCI：水解黃蜀葵(Hibiscus Esculentus)萃取物]、Syniorage^TM [INCI：乙醯基四肽-11]、Dermican^TM [INCI：乙醯基四肽-9]或DN-AGE^TM LS[INCI：翅果鐵刀木葉(Cassia Alata leaf)萃取物]，由Exsymol銷售之Algisum C[INCI：甲基矽烷醇甘露糖醛酸酯]或Hydroxyprolisilane CN[INCI：甲基矽烷醇羥基脯胺酸天冬胺酸酯]，市售之Argireline[INCI：乙醯基六肽-8]、SNAP-7[INCI：乙醯基七肽-4]、SNAP-8[INCI：乙醯基八肽-3]、Leuphasyl[INCI：五肽-18]、Aldenine[INCI：水解小麥蛋白質、水解大豆蛋白質、三肽-1]、Preventhelia^TM [INCI：二胺基丙醯基三肽-33]、Decorinyl^TM [INCI：三肽-10瓜胺酸]、Trylagen^TM [INCI：假交替單胞菌假互生單胞菌(Pseudoalteromonas)發酵萃取物、水解小麥蛋白質、水解大豆蛋白質、三肽-10瓜胺酸、三肽-1]、Eyeseryl[INCI：乙醯基四肽-5]、Peptide AC29[INCI：乙醯基三肽-30瓜胺酸]、Lipochroman-6[INCI：二甲基甲氧基苯並二氫吡喃醇]、Chromabright^TM [INCI：棕櫚酸二甲基甲氧基苯並二氫吡喃酯]、Antarcticine[INCI：假交替單胞菌發酵萃取物]、Vilastene^TM [INCI：離胺酸HCl、卵磷脂、三肽-10瓜胺酸]、乙醯基-精胺醯基-苯基甘胺醯基-色胺醯基-苯基甘胺酸、乙醯基-精胺醯基-苯基甘胺醯基-纈胺醯基-甘胺酸或乙醯基-精胺醯基-苯基甘胺醯基-纈胺醯基-苯基甘胺酸，由Institut Europeen de Biologie Cellulaire銷售之Kollaren[INCI：三肽-1、聚葡萄糖]，由Vincience/ISP銷售之CollaxylIS[INCI：六肽-9]、Laminixyl IS^TM [INCI：七肽]、Orsirtine^TM GL[INCI：稻(Oryza Sativa)(稻米)萃取物]、D’Orientine^TM IS[INCI：海棗(Phoenix Dactylifera)(棗)籽萃取物]、Phytoquintescine^TM [INCI：單穀小麥(Einkorn)(雙倍體小麥(Triticum Monococcum))萃取物]或Quintescine^TM IS[INCI：二肽-4]，由Infinitec Activos銷售之BONT-L-Peptide[INCI：棕櫚醯基六肽-19]，由Seppic銷售之Deepaline^TM PVB[INCI：棕櫚醯基水解小麥蛋白質]或SepiliftDPHP[INCI：二棕櫚醯基羥基脯胺酸]，由Gattefoss銷售之GatulineExpression[INCI：印度金鈕釦(Acmella oleracea)萃取物]、GatulineIn-Tense[INCI：金鈕扣花(Spilanthes Acmella Flower)萃取物]或GatulineAge Defense 2[INCI：胡桃(Juglans Regia)(胡桃(Walnut))籽萃取物]，由Biotechmarine銷售之Thalassine^TM [INCI：海藻萃取物]，由Atrium Innovations/Unipex Group銷售之ChroNOline^TM [INCI：己醯基(caprooyl)四肽-3]或Thymulen-4[INCI：乙醯基四肽-2]，由Coltica銷售之EquiStat[INCI：蘋果(Pyrus Malus Fruit)萃取物、大豆(Glycine Soja Seed)萃取物]或Juvenesce[INCI：乙氧基二甘醇和辛酸三酸甘油酯、視網醇、熊果酸、維生素K1、伊洛馬司他(Ilomastat)]，由Mibelle Biochemistry銷售之Ameliox[INCI：肌肽，生育酚，水飛薊(Silybum marianum fruit)萃取物]或PhytoCellTec Malus Domestica[INCI：蘋果(Malus Domestica Fruit)細胞培養物]，由Silab銷售之Bioxilift[INCI：大茴香籽(Pimpinella Anisum)萃取物]或SMS Anti-Wrinkle[INCI：番荔枝(Annona Squamosa)籽萃取物]，Ca²⁺ 通道拮抗劑，例如但不限於乙雙苯丙胺(alverine)、錳鹽或鎂鹽、某些二級胺或三級胺、視網醇和其衍生物、艾地苯醌(idebenone)和其衍生物、輔酶Q10和其衍生物、乳香酸和其衍生物、GHK和其衍生物及/或鹽、肌肽和其衍生物、DNA修復酵素，例如但不限於光裂合酶或T4內核酸切酶，或氯化物通道拮抗劑。

本發明的額外觀點係關於包含美容或醫藥有效量之至少一種根據通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物，且該組成物另外包含美容或醫藥有效量之至少一種為抑制AChR群聚之劑及/或肌肉收縮抑制劑及/或抗膽鹼能劑之萃取物，尤其例如但不限於顛茄(Atropa belladonna)、莨菪(Hyoscyamus niger)、曼德拉草(Mandragora officinarum)、管箭毒(Chondodendron tomentosum)、曼陀羅木屬(Brugmansia genus)植物或曼陀羅屬(Datura genus)之萃取物，及至少一種為抑制AChR群聚之劑及/或肌肉收縮抑制劑及/或抗膽鹼能劑之合成化合物或生物發酵產物，尤其例如但不限於肉毒桿菌毒素、SNAP-25蛋白質所衍生之肽、氯苯胺丁酸、卡比多巴(carbidopa)、左旋多巴(levodopa)、溴麥角克普汀(bromocriptine)、氯苯甘油胺酯(chlorphenesin)、氯座沙宗(chlorzoxazone)、多尼培秦(donepezil)、美芬諾酮(mephenoxalone)、利血平(reserpine)、丁苯那秦(tetrabenazine)、硝苯呋海因、硫秋水仙苷(thiocolchicoside)、替扎尼定、可樂寧、丙環定(procyclidine)、格隆胺(glycopyrrolate)、阿托品(atropine)、海西胺(hyoscyamine)、苯扎托品(benztropine)、東莨菪鹼(scopolamine)、普敏太定(promethazine)、苯海拉明(diphenhydramine)、乘暈寧(dimenhydrinate)、二環明(dicyclomine)、環苯扎平(cyclobenzaprine)、奧芬那君(orphenadrine)、黃酮哌酯(flavoxate)、環戊醇胺酯(cyclopentolate)、異丙托溴銨(ipratropium)、奧昔布寧(oxybutynin)、哌侖西平(pirenzepine)、提多平(tiotropium)、苯海索(trihexyphenidyl)、托特羅定(tolterodine)、托吡卡胺(tropicamide)、索非那新(solifenacin)、達非那新(darifenacin)、美貝維林(mebeverine)、咪噻吩(trimethaphan)、阿曲庫銨(atracurium)、(cisatracurium)、多沙庫銨(doxacurium)、法紮溴銨(fazadinium)、二甲箭毒(metocurine)、咪伐庫銨(mivacurium)、泮庫溴銨(pancuronium)、必倍庫銨(pipecuronium)、雷帕庫銨(rapacuronium)、筒箭毒鹼(tubocurarine)、二甲基筒箭毒鹼、羅庫銨(rocuronium)、維庫羅寧(vecuronium)、丁二醯二膽鹼(suxamethonium)、18-甲氧基冠狗牙花定鹼(18-methoxylcoronaridine)、肌安寧(carisoprodol)、非巴胺酯(febarbamate)、甲丙胺酯(meprobamate)、美索巴莫(methocarbamol)、苯丙胺酯(phenprobamate)、提貝美特(tibamate)、抗痙劑，諸如左乙拉西坦(levetiracetam)、司替戊醇(stiripentol)、苯巴比妥(phenobarbital)、甲基苯巴比妥、戊巴比妥(pentobarbital)、美沙必妥(metharbital)、巴比沙隆(barbexaclone)、去氧苯比妥(primidone)、卡巴氮平(carbamazepine)、除癲達(oxcarbazepine)、苯並二氮呯，例如但不限於氯硝西泮(clonazepam)、氯唑侖(cloxazolam)、氯氮平酸鹽(clorazepate)、地西泮(diazepam)、氟托西泮(flutoprazepam)、勞拉西泮(lorazepam)、米達唑侖(midazolam)、硝西泮(nitrazepam)、硝甲西泮(nimetazepam)、芬納西泮(phenazepam)、替馬西泮(tempazepam)、四氫西泮(tetrazepam)或克羅巴札(clobazam)。

本發明的額外觀點係關於包含醫藥有效量之至少一種根據通式(1)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其醫藥上可接受之鹽的醫藥組成物，且該組成物包含醫藥有效量之至少一種為消炎劑及/或止痛劑之天然萃取物或精油，尤其例如但不限於羥基積雪草苷(madecassoside)、紫錐菊(echinacea)、莧紫花油(amaranth oil)、檀香精油(sandalwood oil)、桃樹葉萃取物、蘆薈萃取物、山金車(Amica montana)、艾蒿(Artemisia vulgaris)、杜衡屬(Asarum maximum)、金盞花(Calendula officinalis)、辣椒屬(Capsicum)、石胡荽(Centipeda cunninghamii)、德國洋甘菊(Chamomilla recutita)、文殊蘭(Crinum asiaticum)、金縷梅(Hamamelis virginiana)、南非鈎麻(Harpagophytum procumbens)、貫葉連翹(Hypericum perforatum)、聖母百合(Lilium candidum)、錦葵(Malva sylvestris)、澳洲茶樹(Melaleuca alternifolia)、馬鬱蘭(Origanum majorana)、野馬鬱蘭(Origanum vulgare)、桂櫻(Prunus laurocerasus)、迷迭香(Rosmarinus officialis)、白榴樹皮(Salix alba)、水飛薊(Silybum marianum)、小白菊(Tanacetum parthenium)、百里香(Thymus vulgaris)、美勾藤(Uncaria guianensis)或山桑子(Vaccinum myrtillus)，或至少一種為消炎劑及/或止痛劑之合成化合物或生物發酵產物，尤其例如但不限於莫美他松糠酸鹽(mometasone furoate)和去氫皮質醇、非類固醇消炎藥物，包括環加氧酶或脂肪加氧酶抑制劑、康護寧(benzydamine)、乙醯基水楊酸、迷迭香酸(rosmarinic acid)、熊果酸、甘油酸酯之衍生物、α-沒藥醇(α-bisabolol)、薁和類似物、水田芥(sericoside)、魯斯可皂甙元(ruscogenin)、七葉皂苷(escin)、氯化丁二醯膽鹼(scoline)、芸香苷和類似物、氫皮質酮、氯倍他索(clobetasol)、地塞米松、潑尼松(prednisone)、撲熱息痛(paracetamol)、阿莫潑林(amoxiprin)、貝諾酯(benorilate)、膽鹼水楊酸鹽、雙氟尼酸(diflunisal)、法斯胺(faislamine)、水楊酸甲酯、水楊酸鎂、賽拉特(salsalate)、雙氯芬酸(diclofenac)、醋氯芬酸(aceclofenac)、阿西美辛(acemetacin)、溴吩拿克(bromfenac)、抑特拉(etodolac)、引朵美辛(indometacin)、奧沙美辛(oxametacin)、丙穀美辛(proglumetacin)、舒林酸(sulindac)、托美辛(tolmetin)、布洛芬(ibuprofen)、右布洛芬(dexibuprofen)、卡洛芬(carprofen)、芬布芬(fenbufen)、芬諾洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、右酮洛芬(dexketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、氯索洛芬(loxoprofen)、萘普生(naproxen)、米若洛芬(miroprofen)、噁丙秦(oxaprozin)、普拉洛芬(pranoprofen)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、舒洛芬(suprofen)、甲芬那酸(mefenamic acid)、甲氯芬那酸酯(meclofenamate)、甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、氟芬那酸(flufenamic acid)、托芬那酸(tolfenamic acid)、萘丁美酮(nabumetone)、保泰松(phenylbutazone)、阿扎普帕宗(azapropazone)、氯菲宗(clofezone)、凱布宗(kebuzone)、美塔米唑(metamizol)、莫菲布宗(mofebutazone)、羥布宗(oxyphenbutazone)、菲那宗(phenazone)、磺吡酮(sulfinpyrazone)、吡羅昔康(piroxicam)、羅諾西卡(lornoxicam)、美洛西卡(meloxicam)、替諾昔康(tenoxicam)、塞立可西(celecoxib)、艾托庫西比(etoricoxib)、魯米庫西比(lumiracoxib)、帕瑞庫西比(parecoxib)、羅費庫西比(rofecoxib)、瓦迪庫西比(valdecoxib)、尼美舒利(nimesulide)、萘普西諾(naproxinod)、氟丙喹宗(fluproquazone)或利克飛隆(licofelone)；嗎啡、可待因(codein)、羥氫可待酮(oxycodone)、氫可待酮(hydrocodone)、海洛因(diamorphine)、沛西汀(pethidine)、托拉麻醇(tramadol)、丁基原啡因(buprenorphine)、苯佐卡因(benzocaine)、力多卡因(lidocaine)、氯普魯卡因(chloroprocaine)、丁卡因(tetracaine)、普魯卡因(procaine)、三環抗抑鬱劑、阿米曲替林(amitriptyline)、痛痙寧(carbamazepine)、加巴噴丁(gabapentin)、普加巴林(pregabalin)、泛醯醇(pantenol)、生物素、月桂亞胺基二丙酸生育酚磷酸二鈉、環比洛胺(ciclopirox olamine)、去甲二氫癒創木酸、由Atrium Innovations/Unipex Group銷售之Neutrazen^TM [INCI：水、丁二醇、聚葡萄糖、棕櫚醯基三肽-8]、由Institut Euroopen de Biologie Cellulaire/Unipex Group銷售之Meliprene[INCI：聚葡萄糖、乙醯基七肽-1]、由Laboratoires Srobiologiques/Cognis銷售之Skinasenyl^TM [INCI：乙醯基四肽-15]、輔酶Q10或烷基甘油醚。

應用

本發明的另一觀點係關於通式(I)之肽中之至少一者、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽在製備用於治療及/或保養由乙醯膽鹼受體群聚導致的症狀、失調症及/或疾病之美容或醫藥組成物的用途。

本發明的另一觀點係關於通式(I)之肽中之至少一者、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽在製備用於抑制肌肉收縮(較佳為抑制乙醯膽鹼受體群聚)之美容或醫藥組成物的用途。

較佳地，在欲治療之由肌肉收縮所造成的失調症及/或疾病為緊張不全症，且更特別為臉部緊張不全症，例如但不限於臉痙攣、扭轉性緊張不全症、頸緊張不全症或斜頸症、喉緊張不全症或痙攣性緊張不全症、口顎緊張不全症、肢體緊張不全症(諸如作家或音樂家的痛性痙攣)或腳部緊張不全症、睡中磨牙、半邊顏面神經痙攣、抽搐症及/或斜視；節段性緊張不全症、梅格斯氏症候群、多發性緊張不全症、半身緊張不全症、多巴胺反應緊張不全症及瀨川緊張不全症。

本發明的另一觀點係關於通式(I)之肽中之至少一者、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽在製備用於治療及/或保養皮膚(較佳為臉部皮膚)之美容或醫藥組成物的用途。

根據較佳的具體例，治療及/或保養皮膚為治療及/或預防老化及/或光老化跡象。

根據另一較佳的具體例，本發明係關於通式(I)之肽中之至少一者、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽在製備用於治療及/或保養受皺紋及/或表情紋影響的皮膚之美容或醫藥組成物的用途。

用於治療及/或保養皮膚及/或身體之美容或醫藥組成物的實例尤其包括乳霜、複合乳液(例如但不限於水包油型及/或水包聚矽氧型乳液、水包油型及/或聚矽氧乳液、水/油/水型或水/聚矽氧/水型乳液及油/水/油型或聚矽氧/水/聚矽氧型乳液)、無水組成物、水性分散液、油、奶狀物、香脂、泡沫、洗劑、凝膠、乳凝膠、水醇溶液、水甘醇溶液、水凝膠、塗擦劑、漿液(sera)、皂、洗髮精、潤髮乳、漿液(serum)、多醣膜、軟膏、慕斯、香膏劑、粉末、條狀物、筆狀物及噴霧劑或氣溶膠(噴霧劑)，包括免沖洗型和沖洗型調配物、繃帶、紗布、T恤、襪子、連褲襪、內衣、束腹、手套、尿布、衛生棉、衣服、床罩、擦拭布、黏性貼片、無黏性貼片、閉合型貼片、微電貼片或面膜、化妝產品，諸如化妝粉底(例如液態粉底和粉餅)、卸妝液、卸妝乳、遮瑕膏、眼影、唇膏、護唇膏、唇彩及蜜粉。

含有本發明之肽的組成物可施予皮膚或必要時可經口服或非經腸投予，以治療及/或保養症狀、失調症及/或疾病。

在本發明有關的美容或醫藥組成物可藉由離子電滲、超聲波導入、電穿孔、微電貼片、機械性壓力、滲透壓梯度、密合治療、微注射器或利用壓力之無針注射(諸如以氧壓力注射)或其任何組合的方式施予皮膚，以達成本發明之肽的更大穿透性。

本發明的額外觀點係關於治療及/或保養由肌肉收縮導致(較佳為AChR群聚導致)的哺乳類(較佳為人類)之症狀、失調症及/或疾病的方法，其包含投予有效量之至少一種通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，較佳呈含有彼等之美容或醫藥組成物形式。

本發明的另一觀點係關於治療及/或保養哺乳類(較佳為人類)之症狀、失調症及/或疾病的方法，其係抑制肌肉收縮，較佳地抑制乙醯膽鹼受體群聚，該方法包含投予有效量之至少一種通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，較佳呈含有彼等之美容或醫藥組成物形式。

根據特別的具體例，欲治療之失調症及/或疾病係選自緊張不全症之群組，且更特別為臉部緊張不全症，例如但不限於臉痙攣、扭轉性緊張不全症、頸緊張不全症或斜頸症、喉緊張不全症或痙攣性緊張不全症、口顎緊張不全症、胺體緊張不全症(諸如作家或音樂家的痛性痙攣)或腳部緊張不全症、睡中磨牙、半邊顏面神經痙攣、抽搐症及/或斜視；節段性緊張不全症、梅格斯氏症候群、多發性緊張不全症、半身緊張不全症、多巴胺反應緊張不全症及瀨川緊張不全症。

本發明的另一觀點係提供治療及/或保養皮膚(較佳為臉部皮膚)的方法，其包含投予美容或醫藥有效量之至少一種通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，較佳呈含有彼等之美容或醫藥組成物形式。

根據特別的具體例，治療及/或保養皮膚為治療及/或預防老化及/或光老化跡象。

根據另一特別的具體例，本發明提供治療及/或保養受皺紋及/或表情紋影響之皮膚的方法，其包含投予美容或醫藥有效量之至少一種通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，較佳呈含有彼等之美容或醫藥組成物形式。

根據另一特別的具體例，本發明提供治療及/或保養由肌肉收縮導致的症狀、失調症及/或疾病的方法，其包含以含有至少一種本發明之之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽的美容或醫藥組成物經局部或穿透皮膚施予皮膚上或經口服或非經腸投予。

在另一特別的觀點中，本發明之治療及/或保養係藉由局部或穿透皮膚施予來進行，局部或穿透皮膚施予較佳地係藉由離子電滲、超聲波導入、電穿孔、機械性壓力、滲透壓梯度、密合治療、微注射器或利用壓力之無針注射、微電貼片或其任何組合來進行。

在另一特別的觀點中，治療及/或保養係藉由口服投予來進行。

在另一特別的觀點中，治療及/或保養係藉由非經腸施予來執行。

施予或投予頻率可取決於每一對象的需求及欲治療或保養之症狀、失調症或疾病的嚴重性而廣泛地改變，建議的施予或投予範圍係從每月1次至每天10次，較佳從每週1次至每天4次，更佳從每週3次至每天3次，甚至更佳從每天1或2次。

在此所提供的下列特定實例係例證本發明的性質。所包括之該等實例係以例證為目的而已，且不應將其解釋為對本文主張之本發明的限制。

通用方法

所有的試劑及溶劑均具有合成品質，且未經額外處理即使用。

縮寫

用於胺基酸之縮寫係依照在Eur. J. Biochem.(1984)138:9-37及J. Chem(1989) 264:633-673中所規定之IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature規則。

：樹脂；2,6-diClZ：2,6-二氯苯甲基；2-BrZ：2-溴苯甲氧基羰基；Ac：乙醯基；ACh：乙醯膽鹼；AChR：乙醯膽鹼受體；Adpoc：1-(1-金剛烷基)-1-甲基乙氧基羰基；All：烯丙基；Alloc：烯丙氧基羰基；AM：2-[4-胺基甲基-(2,4-二甲氧基苯基)]苯氧基乙酸；DNA：去氧核醣核酸；Arg：精胺酸；Asp：天冬胺酸；Boc：第三丁氧基羰基；Bzl：苯甲基；Cbz：苯甲氧基羰基；cHx：環己基；ClTrt-：2-氯三苯甲基樹脂；ClZ：2-氯苯甲基；cps：厘泊；C-末端：羧基末端；DCM：二氯甲烷；Dde：N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基環己-1-亞基)乙基；DIEA：N,N-二異丙基乙胺；DIPCDI：N,N’-二異丙基碳二醯亞胺；Dmab：4-(N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基亞環己基)-3-甲基丁基]胺基)苯甲基；DMF：N,N-二甲基甲醯胺；DMSO：二甲亞碸；Dnp：2,4-二硝酚；DPPC：二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼；EDTA：乙二胺四乙酸；equiv：當量；ES-MS：電噴霧離子化質譜；Fm：茀基甲基；Fmoc：9-茀基甲氧基羰基；Glu：麩胺酸；HOAt：1-羥基氮雜苯並三唑；HOBt：1-羥基苯並三唑：HPLC：高性能液相層析術；INCI：國際化妝品成份命名法(International Nomenclature of Cosmetic Ingredients)；ivDde：1-(4,4-二甲基-2,6-二酮基環亞己基)-3-甲基丁基；Leu：白胺酸；Lys：離胺酸；mAChR：蕈毒鹼乙醯膽鹼受體；MASC：MuSK-附屬特異性組份；MBHA：對-甲基二苯甲胺；MeCN：乙腈；MeOH：甲醇；Met：甲硫胺酸；MLV：多層小囊泡；Mtr：4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺醯基；Mtt：甲氧基三苯甲基或甲基三苯甲基：MuSK：肌肉特異性激酶；nAChR：菸鹼乙醯膽鹼受體；NMJ：神經肌肉界面；N-末端：胺基末端；PAL：5-(4-胺基甲基-3,5-二甲氧基苯氧基)戊酸；Palm：棕櫚醯基；Pbf：2,2,4,6,7-五甲基二氫苯並呋喃-5-磺醯基；PBS：以磷酸鹽緩衝之食鹽水；Phe：苯基丙胺酸；Pmc：2,2,5,7,8-五甲基苯並二氫吡喃-6-磺醯基；pNZ：對-硝基苯甲氧基羰基；Pro：脯胺酸；q.s.：適量；q.s.p.：適量至；RATL：rapsyn相關之跨膜連結分子；SNARE：可溶性NSF連接蛋白質受體；tBu：第三丁基；Teoc：2-(三甲矽基)乙氧基羰基；TFA：三氟乙酸；THF：四氫呋喃；TIS：三異丙基矽烷；Tos：對-甲苯磺醯基或甲苯磺醯基；Troc：2,2,2-三氯乙氧基羰基；Trt：三苯甲基；Tyr：酪胺酸；ULV：單層小囊泡；UV：紫外線；Z：苯甲氧基羰基。

化學合成

所有的合成法皆在配備有多孔聚乙烯圓盤之聚丙烯注射器或配備有多孔盤之Pyrex反應器中進行。溶劑及可溶性試劑係藉由抽氣移除。Fmoc基團係以哌啶-DMF(2：8，v/v)(1×1分鐘，1×5分鐘，5毫升/公克樹脂)移除[Lloyd-Williams P.,Albericio F. and Giralt E.(1997)“Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins” CRC,Boca Raton,FL,USA]。在去保護、偶合及再次去保護階段之間的清洗係以DMF(3×1分鐘)進行，每次使用10毫升溶劑/公克樹脂。偶合反應係以3毫升溶劑/公克樹脂執行。偶合作用的控制係藉由進行茚三酮(ninhydrin)試驗來執行[Kaiser E.,Colescott R. L.,Bossing C. D. and Cook P. l.(1970)“Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides” Anal. Biochem. 34:595-598]或四氯苯醌(chloranil)試驗來執行[Christensen T.(1979)“A qualitative test for monitoring coupling completeness in solid-phase peptide synthesis using Chloranil” Acta Chem Scand. 33B:763-766]。所有的合成反應及清洗皆在室溫下進行。

HPLC層析術分析係以Shimadzu儀器(Kyoto,Japan)使用在30℃下熱穩定之反相管柱(250x4.0毫米，Kromsail C₈ ，5微米，Akzo Nobel,Sweden)進行。溶析係使用在水(+0.1%TFA)中的乙腈(+0.07%TFA)為梯度以1毫升/分鐘之流速進行且在220奈米下進行偵測。

實例1

獲得Fmoc-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -O-2-CITrt，其中AA₁ 為-L-Asp-、-L-Glu-或-L-Pro-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-或-L-Arg-，AA₄ 為-L-Phe-或-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-或-L-Lys-，AA₆ 為-L-Leu-或-L-Met；且n、m、p及s為0。

將溶解在添加1.3毫升DIEA(7.6毫莫耳，0.86當量)的55毫升DCM中的3.11公克Fmoc-L-Leu-OH或3.27公克Fmoc-L-Met-OH(8.8毫莫耳，1當量)偶合在無水2-氯三苯甲基(5.5公克，8.8毫莫耳)上。將彼等攪拌5分鐘，然後添加2.5毫升DIEA(14.6毫莫耳，1.66當量)。允許混合物反應40分鐘。將剩餘氯離子基團以4.4毫升MeOH處理而封鎖。

將Fmoc基團之N-末端如通用方法中所述予以去保護，且將14.27公克Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH或10.31公克Fmoc-L-Lys(Boc)-OH(22毫莫耳，2.5當量)在DIPCDI(3.39毫升，22毫莫耳，2.5當量)及HOBt(3.37公克，22毫莫耳，2.5當量)的存在下使用DMF作為溶劑經1小時偶合在肽基樹脂上。接著將樹脂如通用方法中所述予以清洗，且重複Fmoc基團的去保護處理，以偶合在下一個胺基酸上。依照所述規程，將下列者相繼偶合：8.52公克Fmoc-L-Phe-OH或10.11公克Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH(22毫莫耳，2.5當量)，14.27公克Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH或10.11公克Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH(22毫莫耳，2.5當量)，9.05公克Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(22毫莫耳，2.5當量)及接著7.43公克Fmoc-L-Pro-OH、9.75公克Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH或9.05公克Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(22毫莫耳，2.5當量)，該每一偶合係在3.37公克HOBt(22毫莫耳，2.5當量)及3.39毫升DIPCDI(22毫莫耳，2.5當量)的存在下。

在合成之後，將肽基樹脂以DCM(5×3分鐘)清洗且以氮流乾燥。

實例2

獲得Fmoc-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -AM-MBHA-，其中AA₁ 為-L-Asp-、-L-Glu-或-L-Pro-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-或-L-Arg-，AA₄ 為-L-Phe-或-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-或-L-Lys-，AA₆ 為-L-Leu-或-L-Met；且n、m、p及s為0。

根據所述之通用規程，將6.85公克具有官能性之Fmoc-AM-MBHA樹脂0.73毫莫耳/公克(5毫莫耳)以哌啶-DMF處理，俾以移除Fmoc基團。將8.84公克Fmoc-L-Leu-OH或9.29公克Fmoc-L-Met-OH(25毫莫耳，5當量)在DIPCDI(3.85毫升，25毫莫耳，5當量)及HOBt(3.85公克，25毫莫耳，5當量)的存在下使用DMF作為溶劑經1小時併在去保護之樹脂上。

接著將樹脂如通用方法所述予以清洗，且重複Fmoc基團的去保護處理，以偶合下一個胺基酸。依照先前所述之規程，將11.72公克Fmoc-L-Lys(Boc)-OH或16.22公克Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH(25毫莫耳，5當量)，11.49公克Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH或9.69公克Fmoc-L-Phe-OH(25毫莫耳，5當量)，11.49公克Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH或16.22公克Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH(25毫莫耳，5當量)，10.29公克Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(25毫莫耳，5當量)及接著8.44公克Fmoc-L-Pro-OH、10.29公克Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH或11.09公克Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH(25毫莫耳，5當量)相繼偶合，該每一偶合係在3.85公克HOBt(25毫莫耳，5當量)及3.85毫升DIPCDI(25毫莫耳，5當量)的存在下。

在合成之後，將肽基樹脂以DCM(5×3分鐘)清洗且以氮流乾燥。

實例3

用於移除Fmoc之N-末端保護基之通用方法

將實例1及2中所獲得之肽基樹脂的Fmoc基團之N-末端如通用方法中所述予以去保護(在DFM中的20%哌啶，1×5分鐘+1×20分鐘)。將肽基樹脂以DMF(5×1分鐘)、DCM(4×1分鐘)、二乙醚(4×1分鐘)清洗且在真空下乾燥。

實例4

在實例3中所獲得之肽基樹脂上引入R₁ 棕櫚醯基之方法

將預溶解在DMF(1毫升)的2.56公克棕櫚酸(10毫莫耳，10當量)在1.53公克HOBt(10毫莫耳，10當量)及1.54毫升DIPCDI(10毫莫耳，10當量)的存在下添加在實例3中所獲得之1毫莫耳肽基樹脂上。允許彼等反應15小時，然後將樹脂以THF(5×1分鐘)、DCM(5×1分鐘)、DMF(5×1分鐘)、MeOH(5×1分鐘)、DMF(5×1分鐘)、THF(5×1分鐘)、DMF(5×1分鐘)、DCM(4×1分鐘)、醚(3×1分鐘)清洗且在真空下乾燥。

實例5

在實例3中所獲得之肽基樹脂上引入R₁ 乙醯基之方法

將實例3中所獲得之1毫莫耳肽基樹脂在25當量DIEA的存在下使用5毫升DMF作為溶劑以25當量乙酸酐處理。允許彼等反應30分鐘，然後將肽基樹脂以DMF(5×1分鐘)、DCM(4×1分鐘)、二乙醚(4×1分鐘)清洗且在真空下乾燥。

實例6

從實例4及5中所獲得之肽基樹脂的聚合物載體之分離方法

將實例4及5中所獲得之200毫克乾燥肽基樹脂在室溫及攪拌下以5毫升TFA：TIS：H₂ O(90：5：5)處理2小時。將濾液收集在50毫升冷二乙醚上，將彼等經由配備有多孔聚乙烯圓盤之聚丙烯注射器過濾，且以50毫升二乙醚清洗5次。將最終沉澱物在真空下乾燥。

所獲得之肽以在H₂ O(+0.1%TFA)中的MeCN(+0.07%TFA)為梯度之HPLC分析顯示出在所有情況中的純度皆超過80%。所獲得之肽的鑑證係以ES-MS確認。

實例7

聚合物載體之分離方法及具有經R₂ 取代胺之官能性：

獲得：Ac-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ，其中AA₆ 為-L-Leu-或-L-Met，AA₅ 為-L-Arg-或-L-Lys-，AA₄ 為-L-Phe-或-L-Tyr-，AA₃ 為-L-Tyr-或-L-Arg-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₁ 為-L-Asp-、-L-Glu-或-L-Pro-；且n、m、p及s為0。

具有經完全保護之側鏈的肽Ac-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -OH係藉由在真空下在KOH的存在下以3毫升在DCM中的3%TFA溶液處理事先乾燥的實例5之150毫克肽基樹脂Ac-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -O-2-CITrt-® 5分鐘而獲得。將濾液收集在50毫升冷二乙醚上，且重複處理3次。將醚溶液在減壓及室溫下蒸發至乾燥，將沉澱物再溶解在H₂ O中的50%MeCN中且凍乾。將10毫克所獲得之粗肽秤重至燒瓶中且添加3當量十六烷基胺及25毫升無水DMF。添加2當量DIPCDI且留置於47℃下以磁攪拌反應。反應係以HPLC監控，直到初產物消失為止，其係在24-48小時之後完成。將溶劑蒸發至乾燥且與DCM共蒸發兩次。將所獲得殘餘物[具有經完全保護之側鏈的Ac-W_n -X_m -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -Y_p -Z_s -NH-(CH₂ )₁₅ -CH₃ ]再溶解在25毫升TFA：DCM：大茴香醚(49：49：2)之混合物中且留置於室溫下反應30分鐘。添加250毫升冷二乙醚，將溶劑在減壓下蒸發且與醚進行兩次額外的共蒸發。將剩餘物溶解在H₂ O中的50%MeCN之混合物且凍乾。

實例8

AChR群聚抑制試驗

將肽再懸浮在0.5%DMSO存在的水中。將10⁴ 個小鼠肌原細胞接種在12-槽孔盤中且在分化培養基中培養4-6天，直到形成肌管為止。移除分化培養基且將細胞與5M NaCl培育16小時，然後移除培養基且將細胞與0.1mM肽培育24小時。在此期間之後，添加溶解在PBS(+0.1%BSA)中的5微克/毫升之C-末端agrin片段且在37℃下培育5小時。

將細胞固定且以與四甲基若丹明(tetramethylrhodamine)連結之α-銀環螺毒素執行免疫細胞化學，使AChR顯現。將肌管與10nM毒素溶液在無光線的室溫下培育30分鐘。在此時間之後，將毒素移除，將肌管清洗，乾燥且放置在具有封固劑的載片上。

使用40倍接物鏡的共軛焦顯微鏡拍攝照片且使用影像處理軟體定量AChR群聚數量。

表2提供顯示群聚抑制值大於20%之肽的細節。抑制值係關於培養基之抑制基礎值標準化。

實例9

含有Ac-L-Glu-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Arg-L-Leu-NH₂ 之美容組成物

實例10

含有Ac-L-Pro-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Lys-L-Leu-NH₂ 之脂質體的製備

將二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(DPPC)秤重且溶解在氯仿中。將溶劑在真空下蒸發，直到獲得磷脂質薄層為止，且將該層在55℃下以所欲濃度之肽水溶液(含有防腐劑Phenonip)處理而含水，並獲得MLV脂質體。將MLV脂質體浸沒於55℃之超聲波浴中，經2分鐘浸沒及5分鐘間隔的8次循環獲得ULV脂質體。ULV脂質體尺寸係藉由將彼等通過高壓擠壓系統而縮減。

實例11

含有Ac-L-Pro-L-Asp-L-Arg-L-Phe-L-Lys-L-Leu-NH₂ 之臉部乳霜組成物

實例12

呈含有Ac-L-Pro-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Lys-L-Leu-NH₂ 之脂質體凝膠形式的組成物之製備

將實例11之脂質體在光線下攪拌分散在具有防腐劑(EDTA、咪唑啶基尿素及Phenonip)的水中。添加Hispagel200[INCI：水劑(水)、甘油、聚丙烯酸甘油酯]且輕微攪拌，直到獲得均勻混合物為止。

實例13

含有Palm-L-Glu-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Arg-L-Met-NH₂ 之微乳液組成物

實例14

含有Ac-L-Glu-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Arg-L-Leu-NH₂ 之混合小囊泡組成物的製備

將A相成分秤重且在適合於完全樣品的容器中略微溫熱至約30℃，有助於溶解一些防腐劑。接著添加B相組份且在光線下攪拌均化。

接著在連續攪拌下添加C相，然後以緩慢攪拌添加D相，以避免泡沫化。

將pH調整至5.5-6.5。

實例15

含有Ac-L-Glu-L-Asp-L-Tyr-L-Tyr-L-Arg-L-Leu-NH₂ 之乳霜組成物

實例16

實例15之組成物減少皺紋的效果

為了評定來自本發明的實例15之組成物的有效性，將具有平均年齡45歲的20位自願者小組每天以實例15之組成物施予一隻眼睛的眼框周圍區域2次為期1個月，但是以具有與實例15之乳霜相同的組成物，但是沒有本發明之肽的安慰乳霜施予另一隻眼睛的眼框周圍區域。使用Primos光學3D技術評定處理前及後的皺紋深度，且以相對於以安慰乳霜所顯示之有效性計算皺紋減少有效性。在自願者獲得平均減少的皺紋深度比以安慰乳霜之該值增加44.7%。

<110> 利波塔克股份有限公司

<120> 抑制肌肉收縮的化合物

<130> PXWO623/2010

<140> PCT/EP2010/004530

<141> 2010-07-23

<150> ES P2009-30501

<151> 2009-07-24

<150> US 61/228767

<151> 2009-07-27

<160> 28

<170> PatentIn 3.5版本

<210> 1

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223>AChR 群聚之肽抑制劑

<400> 1

<210> 2

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<212> PRT

<213> 人工序列

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<223>AChR 群聚之肽抑制劑

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<223>AChR 群聚之肽抑制劑

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<223>AChR 群聚之肽抑制劑

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Claims

一種通式(I)之肽R₁ -AA₁ -AA₂ -AA₃ -AA₄ -AA₅ -AA₆ -R₂ (I)、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其特徵在於：AA₁ 係選自由-Asp-、-Glu-及-Pro-所組成之群組；AA₂ 為-Asp-；AA₃ 係選自由-Tyr-及-Agr-所組成之群組；AA₄ 係選自由-Phe-及-Tyr-所組成之群組；AA₅ 係選自由-Arg-及-Lys-所組成之群組；AA₆ 係選自由-Leu-及-Met-所組成之群組；R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、或棕櫚醯基；及R₂ 係選自由下列所組成之群組：-NR₃ R₄ 及-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係H。
根據申請專利範圍第1項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其中R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、及棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Glu-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Arg-，AA₆ 為-L-Leu-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係H。
根據申請專利範圍第1項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其中R₁ 係選自由下列所組成之群組：H、乙醯基、及棕櫚醯基，AA₁ 為-L-Pro-，AA₂ 為-L-Asp-，AA₃ 為-L-Tyr-，AA₄ 為-L-Tyr-，AA₅ 為-L-Lys-，AA₆ 為-L-Leu-，且R₂ 為-NR₃ R₄ 或-OR₃ ，其中R₃ 及R₄ 係H。
根據申請專利範圍第1至3項中任一項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養由肌肉收縮導致的症狀、失調症及/或疾病。
根據申請專利範圍第4項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其中該症狀、失調症及/或疾病為乙醯膽鹼受體群聚的結果。
根據申請專利範圍第1至3項中任一項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養皮膚。
根據申請專利範圍第6項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其中該治療及/或保養皮膚為治療及/或預防老化及/或光老化跡象。
根據申請專利範圍第4項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其係用於治療及/或保養受皺紋及/或表情紋影響的皮膚。
根據申請專利範圍第4項之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽，其中該失調症及/或疾病為緊張不全症。
一種美容或醫藥組成物，其包含美容或醫藥有效量之至少一種根據申請專利範圍第1至3項中任一項之通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽及至少一種美容或醫藥上可接受之賦形劑或佐劑。
根據申請專利範圍第10項之組成物，其中該通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物及/或其美容或醫藥上可接受之鹽係併入選自由下列所組成之群組的美容或醫藥輸送系統及/或持續釋放系統中：脂質體、混合脂質體、油質體、非離子質體(niosome)、乙醇脂體(ethosome)、毫膠囊(millicapsule)、微膠囊、奈米膠囊、海棉、環糊精、小囊泡、微胞、界面活性劑之混合微胞、界面活性劑-磷脂質之混合微胞、毫球體、微球體、奈米球體、脂球體(liposphere)、微乳液、奈米乳液、微型粒子(miniparticle)、毫粒子、微粒子、奈米粒子、固態脂質奈米粒子及奈米結構化脂質載劑，或係吸附在選自由下列所組成之群組的美容或醫藥上可接受之固態有機聚合物或固態無機載體上：滑石、膨土、矽石、澱粉及麥芽糊精。
根據申請專利範圍第10或11項之組成物，其中該組成物係呈現於選自由下列所組成之群組的調配物中：乳霜、複合乳液、無水組成物、水性分散液、油、奶狀物、香脂、泡沫、洗劑、凝膠、乳凝膠(cream gel)、水醇溶液、水甘醇(hydroglycolic)溶液、水凝膠、塗擦劑、漿液(sera)、皂、洗髮精、潤髮乳、漿液(serum)、軟膏、慕斯(mousse)、香膏劑、粉末、條狀物、筆狀物、噴霧劑、氣溶膠、膠囊、明膠膠囊、軟膠囊、硬膠囊、錠劑、糖衣錠劑、顆粒、咀嚼膠、溶液、懸浮液、乳液、糖漿、多醣膜、膠凍及明膠。
根據申請專利範圍第10或11項之組成物，其中該組成物係併入選自由下列所組成之群組的產物中：遮瑕膏、粉底、卸妝液、卸妝乳、眼影、唇膏、唇彩、護唇膏及蜜粉。
根據申請專利範圍第10或11項之組成物，其中該通式(I)之肽、其立體異構物、其混合物或其美容或醫藥上可接受之鹽係併入織物、不織布或醫療裝置中。
根據申請專利範圍第10或11項之組成物，其中該組成物進一步包含美容或醫藥有效量之至少一種選自由下列所組成之群組的佐劑：其他抑制乙醯膽鹼受體群聚之劑、其他抑制肌肉收縮之劑、抗膽鹼能劑、彈性蛋白酶抑制劑、基質金屬蛋白酶抑劑劑、黑色素合成刺激和抑制劑、增白或脫色劑、色素原劑(pro-pigmenting agent)、仿曬劑、抗老化劑、NO-合成酶抑制劑、5α-還原酶抑制劑、離胺醯基-及/或脯胺醯基-羥化酶抑制劑、抗氧化劑、自由基清除劑及/或抗空氣污染之劑、反應性羰基物種清除劑、抗糖化劑、抗組織胺劑、止吐劑、抗病毒劑、抗寄生蟲劑、乳化劑、潤膚劑、有機溶劑、液體推進劑、皮膚調理劑、保濕劑、保濕物質、α羥酸、β羥酸、濕潤膏、表皮水解酵素、維生素、顏料或著色劑、染料、膠化聚合物、增稠劑、界面活性劑、軟化劑、防皺劑、能夠減輕或治療眼袋之劑、去角質劑、抗微生物劑、抗真菌劑、抑真菌劑、殺細菌劑、抑細菌劑、刺激真皮或表皮巨分子合成及/或能夠抑制或預防彼等退化之劑、膠原合成刺激劑、彈性蛋白合成刺激劑、核心蛋白聚糖(decorin)合成刺激劑、層黏蛋白(laminin)合成刺激劑、防禦素(defensin)合成刺激劑、伴隨蛋白(chaperone)合成刺激劑、水通道蛋白(aquaporin)合成刺激劑、玻尿酸合成刺激劑、纖連蛋白(fibronectin)合成刺激劑、靜默信息調節蛋白(sirtuin)合成刺激劑、刺激角質層之脂質與組份合成之劑、刺激腦醯胺合成之劑、抑制膠原退化之劑、抑制彈性蛋白退化之劑、抑制絲胺酸蛋白酶之劑、刺激纖維母細胞增生之劑、刺激角質細胞增生之劑、刺激脂肪細胞增生之劑、刺激黑色素細胞增生之劑、刺激角質細胞分化之劑、刺激脂肪細胞分化之劑、抑制乙醯膽鹼酯酶之劑、皮膚鬆弛劑、葡萄糖胺聚糖合成刺激劑、抗角化過度劑、粉刺溶解劑(comedolytic agent)、抗牛皮癬劑、DNA修復劑、DNA防護劑、穩定劑、止癢劑、敏感性皮膚治療及/或保養劑、皮膚緊實劑、除妊娠紋劑、收斂劑、調節皮脂產生之劑、解脂劑或刺激脂肪分解之劑、抗蜂窩組織劑、止汗劑、刺激癒合之劑、協助癒合劑、刺激表皮再生之劑、協助表皮再生之劑、細胞激素生長因子、鎮靜劑、消炎劑及/或止痛劑、麻醉劑、作用於毛細血管循環及/或微循環之劑、刺激血管生成之劑、抑制血管滲透性之劑、靜脈滲透劑(venotonic agent)、作用於細胞代謝之劑、改善真皮-表皮界面之劑、誘發毛髮生長之劑、毛髮生長抑制劑或延緩劑、防腐劑、香料、螯合劑、植物萃取物、精油、海洋萃取物、自生物發酵法所獲得之劑、無機鹽、細胞萃取物與防曬劑、抗紫外線A及/或B之活性有機或無機光防護劑，或其組合。