TWI341840B - 7-iminophenyl-camptothecin derivatives having antitumor activity - Google Patents

Description

1341840 Π) 玖、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關具抗腫瘤活性的化合物，特別是有關新 穎喜樹鹼衍生物，彼等的製備法，彼等作爲抗腫瘤藥物之 用途及含有彼等作爲活性成分之藥學組成物。 【先前技術】 喜樹鹼爲一種生物鹼，係由 Wall et al(J. Am. Chem. Soc. 88， 3888-3890 (1966))首次由喜樹（

Camptoteca acuminata )，一種源自中國的5共同科 （ Nyssaceae)植物，離析出來的。 該分子包括一五環構造，在環E中具有一內酯，其爲 胞毒性所必需者。 該藥物展現出廣範圍的抗腫瘤活性，特別是抗結腸瘤 ’其他固體腫瘤和白血病，且其第一次臨床試驗係在70 年代早期實施的。由於喜樹鹼（下文簡稱CPT )具有低水 溶性且爲了準備臨床試驗，國家癌症硏究院（the National Cancer Institute ( NCI )製備 了鈉鹼（ NSC 1 008 8 0 )，其爲水溶性者。在階段I和中的臨床試 驗因爲試化合物所顯示的高毒性而沒有完成（出血性膀胱 炎’胃腸毒性，例如D惡心、喔吐、腹滇，和脊髓壓制，尤 其是白血球減少症和血小板減少症）。 於任何情況中，鈉鹽都顯示出比C P T較低的活性， 因爲，在pH 7.4時，非活性形式（開環）係比內酯活性 (2) (2)1341840 形式（閉環）佔多數之故，後者係在pH < 4.0佔多數。 後來，有許多種CP T類似物經合成出來以得到具有 較低毒性及較高水溶性之化合物。有兩種藥物上市，由 Upjohn 以註冊商標 Camptosar®上市的 Irinotecan(CPT-l] ) 和由 Smith Kline & Beecham 以註冊商標 Hymcamptamine® 或 Thycantin®上市的 Topotecan。其他衍 生物都處於階段II中的不同臨床發展步驟中，例如NSC-60307] (9-胺基 ·喜樹 驗） ，9-NC或9-硝基喜樹鹼，一種 在9 -胺基喜樹鹼中轉化的口服前藥，GG-2]1 (GI 147211 )，和DX- 8 5 9 1 f，後者爲水溶性者。到目前爲止經鑑定 過的所有衍生物都包含有5個環；胞毒性所必需的母體結 構。經證實者，在第1環上的改質，例如上述諸藥物的情 況中者，令增加水溶性且促成較高的藥物耐性。 水溶性Irinotecan業經認可用於治療許多固體腫瘤和 腹水（結腸-直腸，皮膚，胃，乳房，小和非小胞肺，子 宮頸和卵巢癌，及非-Hodgkin氏淋巴瘤）。再者， Irinotecan 導致在對 Topotecan，長春新驗（vincristine) 或梅爾法蘭（melphalan )有抗性的固體腫瘤中及在對藥 物有邊緣抗性的MDR-1細胞中具有活性。其活性代謝物 經鑑定爲由羧基酯酶的作用所產生的I 0-羥基衍生物（ SN-38 ) 。CPT-1 1於使用不同的投服途徑，例如腹膜內， 靜脈內，口服等都顯示出良好的活性（Costin， D.,

Potni hexyl: Μ .. Advances in Pharmacol.. 2 9 B . 5 1 - 72 1 994 (3) (3)1341840 CPT- 1 1 也在與順氯氨鉑（cisplatin)或 etoposide — 起投服時，由於阻礙DN A修復之能力而顯示出增效作用 。不過，也在此等情況中，出現第3和4級白血球缺乏症 和腹潟（Sinha, B.K., (1995)，Topoisom erase inhibitors.

Drugs, 49:1 1 - 1 9,1 99 5 ) 〇 喜樹鹼具有明顯的口服生物利用率。口服經證明可方 便地達到對藥物的延長展現，而不需用到暫用型插管（ Rothenberg，M.L.; Annals of Oncology. 8，83 7- 8 5 5. 1997 )。此外，此種水溶性CPT類似物顯示出對不同類型腫 瘤的活性，可用不同的投服途徑，腹膜內，靜脈內，皮下 ，口服。使用喜樹鹼鹽酸鹽，靜脈內注輸5天，可對不同 腫瘤例如小和非小胞肺，卵巢，乳房，胃，肝，前列線， 軟組織肉瘤，頭頸癌，食管癌，抗藥性結腸-直腸癌，多 形神經膠母細胞瘤，慢性和急性脊髓細胞性白血病，都得 到更樂觀的結果。不過，同樣地於此情況中，發生嚴重的 副作用^例如嗜中性白血球減少症和血小板減乏症，而胃 腸毒性，例如噁心，嘔吐和腹瀉則都較爲輕微。 經證實者，該藥物的主要轉換和消除途徑包括內酯水 解和尿排泄：事實上，在注輸3 0分鐘後，內醋形式有 5 0%水解成開環。於注輸1 0分鐘後，Topotecan即越過血 腦障壁（相對於在血漿中，有3 0 %在腦脊髓液中）。相異 者，喜樹鹼不能以顯著量越過血腦障壁，也許是因其與蛋 白質結合著之故。 9 -胺基喜樹鹼的臨床發展受阻於其不足的水溶性。最 -7 - 1341840 近，有製備一種膠體分散液，其可因而進入第π期間臨床 實驗。延長的展示（從7 2小時到2 1天）顯然是證實抗腫 瘤活性所必需者，係因爲其所具短半生期之故（Dahut, et al., 1 994 )。在罹患未治療過的結腸-直腸和乳房癌與抗 性淋巴瘤的患者中可看到回應。對Pgp-陽性腫瘤所展示 的活性推測出缺乏對於抗性M D R- 1細胞的交叉抗性。再 次地，觀察到骨髓和胃腸毒性。

Lurtotecan爲最具水溶性的類似物，其在試管內（in v i tr 〇 )的活性可與Τ ο ρ 〇 t e c a η相比。有兩種投藥法受到採 用：一天30 -分鐘注輸，每3星期5天及一每三星期一次 的72-小時注輸。罹患頸，卵巢，乳房，肝等腫瘤的患者 體內都有觀察到回應。同樣地於此情況中，有偵檢到血液 毒性。 該分子爲下面所示者：

9-硝基喜樹鹼爲一種可在投服後快速轉化成9-胺基喜 樹鹼的口服前藥。在罹患胰，卵巢，和乳房癌的患者中有 觀察到回應。 雖然大部份的腫瘤細胞對拓樸異構酶I抑制劑具高度 敏感性’但因高酵素水平之故：某些腫瘤系導致抗性。此 (5) (5)1341840 爲MDR1和MRP (多藥物抗性締合蛋白質）基因及彼等 的產物，分別爲P ( Pgp)糖蛋白與MRP蛋白，的過度表 現以外的其他機制所致，對於彼等，Topotecan或CPT_n 都不是非常好的基質（Kawato, Υ·, et a]., [ Pharm

Pharmacol., 4 5, 444 -44 8. ( 1 9 9 3 ))。 事實上，經觀察到，某些抗性腫瘤細胞含有突變％式 的topo I，因而使topo I-DNA複合物的形成受到損害或 者某些細胞缺乏將CPT-1 ]轉化成活性代謝物SN-38所需 的羧基酯酶活性，因而對此藥物有抗性（R〇thenbMg， 1 99 7，上文）。 在腫瘤治療中所用的藥物之內，因下列考量而導致對 拓樸異構酶I酯素抑制劑之興趣：a )對抗對習用藥物， 包括拓樸異構酶η抑制劑，天然具有抗性的腫瘤，之效力 ;b) topo I酵素的水平在所有循環期中都保持高昂：C) 許多腫瘤表現高水平的目標酵素；d)缺乏被涉及在多藥 物抗性現象中的蛋白質（PgP或M RP )所辨識且沒有與穀 胱苷肽-依賴性系統相關聯的去毒性酵素·媒介機制（穀胱 苷肽過氧化酶和穀胱苷肽 S-轉移酶（Gerrits，C』H.，et al.. Brit. J. Cancer. 76, 952-962 )。 在考慮拓樸異構酶I抑制劑的潛在臨床優點時’就對 廣範圍腫瘤檢定過的抗腫瘤活性，及藥物抗性的不良誘導 兩者而言，本硏究的目標爲鑑定出相對於市面上或臨床期 中的藥物所展現者而言具有較低毒性的t〇p〇 1抑制劑。決 定喜樹鹼類似物所具相對效力的因素包括：a)拓樸異構 -9 - (6) 1341840 酶1抑制的固有活性；b )藥物平均壽命 質的交互作用；d )循環活性形式（內酯 (羧酸鹽）之間的比例；e )相對於由糖1 介的細胞外流之藥物敏感性；f )與拓樸丨 穩定性（Rothenberg，】997，上文）。 於Irinotecan和其他喜樹鹼衍生物的 ，有觀察到脊髓壓制與胃腸毒性，例如腹 可能具有早或晚起始且可能爲一項劑量限 和後期腹瀉係由許多抗腫瘤藥物誘導的， 緊接其後發生的早期腹瀉幾乎是對Irinot 鹼衍生物具特異性者。 毒性效應主要發生在腸道內。 爲了減低腹瀉，於某些臨床實驗中， loperamide-—種合成類鴉片，爲mu-類鴉 劑-組合投服（Abigerges, ]994; Abigerge 與腦啡肽酶抑制劑（acetorfan)或與〇nd HT3受體的括抗劑·，或與diphenidramine 抗劑-，等組合投服。 到目前爲止，與喜樹鹼衍生物作爲抗 相關聯的問題可摘列成下列諸項： -喜樹鹸（CPT)，與許多其活性衍生 性； -後續的衍生物都天賦著對胃腸和骨 作用； ;C )與血费蛋白 )與非活性形β I白Ρ或MRP媒 異構酶I的結合 主要不良作用中 瀉與嘔吐。腹瀉 制性因素。嘔吐 而在注輸之中或 ecan和某些喜樹 係將C P T -1 1與 片腸受體的激動 s，】9 9 5 )，以及 ansetron -—種 5 -:·—種Η 1受體括 腫瘤藥物的用途 物都具有低水溶 髓層次的嚴重副 -10- (7) (7)1341840 -某些腫瘤系會發展出對拓樸異構酶I抑制劑的抗性 » -有不斷地尋求較佳的治療指數。 專利申請WO 97/31003揭示出在位置7，9和10有 取代的喜樹鹼衍生物。位置7提供下列取代基：-CN， -CH(CN)-R4 ' -CH = C(CN)-R4 ' -CH 2-CH = C(CN)-R4 ' -C( = NOH)-NH2，-CH = C(N02)-R4，-CH(CN)-R5， -CH(CH2N02)-R5 > 5,四唑基，2-(4,5-二氫哼唑基）， 1,2,4-鸣二唑啶-3-基-5·酮，其中R4爲氫，有1至6個碳 原子的線型或分枝烷基，腈，羧基烷氧基。於此等可能的 化合物中，WO 97/31003只揭示在位置 7載有-CN和-CH = C(CN)2取代基之喜樹鹼衍生物，而在位置9和]0沒 有取代基。 於此等化合物中，經證明最佳者爲 7-腈（R4 = -CN ) ，後文稱爲CPT 83者，具有對非小胞肺癌的胞毒性活性 (非-SCLC，H-460 )。此腫瘤系內稟地抗拒胞毒性治療 且即使目標酵素的過度表現，對拓樸異構酶I抑制劑也只 有中等的反應。CP 丁 83比丁 opotecan更活性，其作爲參比 化合物且整體地其提供較佳的藥物學剖面，即使就耐性而 言，也有較佳的治療指數。 CPT 83係透過包括7-羥甲基喜樹鹼氧化成爲喜樹鹼 7-醛的合成途徑製備者，後者轉變成肟且最後轉化爲腈。 起始化合物和中間體都揭示於S a w a d a e t a ] .: C h e m . P h a r m . B u 11 ·: 3 9，（ 1 0 ): 2 5 7 4，（ I 9 9 1 )之中。此文係參考優 -11 - (8) (8)1341840 先權爲1 9 8】的一專利族，例如在1 9 8 2年公開的歐洲專利 申請EP 0 05 6 692。於此等公報中，揭示出，與其他一起 者，化合物喜樹鹼7 -醛和其肟。此等衍生物的用處在於 提供具有起始自7-羥甲基喜樹鹸的低毒性之抗腫瘤活性 化合物。於在 Chem. Pharm. Bull” 39，（10) 2574，（1991) 公開的文中，作者證明，針對喜樹鹼而言，在上述專利申 請案中沒有看到的7 -烷基和7 -醯氧甲基衍生物，對於鼠 白血病L I 2 I 0系都是更活性的化合物，而同樣相對於喜樹 鹸者，在載有高極性特質的7-取代基，例如腙和肟_ CH( = NOH)-的化合物中觀察到較低的活性。 EP 1 CM4 977揭示出在位置7載有肟〇_取代基之喜 樹鹼衍生物。該通式也包括在位置7載有烯胺基的喜樹鹼 衍生物。於此參考文獻中，主要講求內容係朝向目弓衍生物 的抗腫瘤活性，而亞胺類則只給出一些合成製備例，但沒 有提供藥物學數據。上面所提專利的發明人之後續硏究都 焦注於肟衍生物，特別是第三丁氧基者，其，在 G i m a t e c a η之命下於今已在臨床實驗之下。亞胺類經認爲 只是肟類的一替代物，但其初期的藥物學檢定都阻止此類 的進一步發展。 【發明內容】 頃令人1牙異地發現在位置7載有一芳族烯胺基的喜樹 鹼天賦著抗腫瘤活性。該化合物具有較佳的治療指數。 因此’本發明的一項目的爲通式（丨）化合物： -12- (9) (9)1341840

其中·· 1^爲-(：(}15) =N-R4基，其中R4爲一苯基，視情況 含一或多個選自下列所構成的群組中之基：鹵素，羥基， 酮基，C丨-c8烷基，C丨-c8烷氧基，苯基，氰基，硝基，-NR6R7，其中Re和R7可相同或相異而爲氫，（CrCs)線 型或支鏈型烷基；-S-S-(2 -胺基苯基），-S-S- (4 -胺基 苯基）-，-S-(4-胺基苯基）-，-SCH3 和- CH2ON = C(CH3)2 » R 5爲氫，C , - C s線型或支鏈型烷基，C , - C 8線型或支 鏈型烯基，C3-C,G環烷基，（C3-C1Q)環烷基-(C,-C8) 線型或支鏈型烷基，C6-C14芳基，（C6-Cl4)芳基- (C,-C 8 )線型或支鏈型烷基； R2與R3，相同或相異地爲氫，羥基，線型或支 鏈型烷氧基； 彼等的 N ,-氧化物，彼等的單一異構物，特別是-C(R5) = N-R4基的同側（syn )和對側（ami )異構物，彼 等的可能鏡像異構物，非鏡像異構物和相關摻合物，其藥 學上可接受之鹽類及彼等的活性代謝物。 本發明包括上述式（I )化合物作爲醫藥品，特別是 治療腫瘤所用醫藥品的活性成分之用途。本發明的另--目 -13 - (10) (10)^41840 的也爲式（I)化合物作爲可用來治療病毒感染的醫藥品 所用活性成分之用途。本發明另一目的也爲式（ί)化合 物作爲具有抗瘧原活性的醫藥品所用活性成分之用途。 本發明包括藥學組成物’其包括作爲活性成分的式（ 1)化合物與藥學上可接受的媒劑和賦形劑之摻合物。 本發明也包括式（I )化合物的製備方法’及相關的 關键中間產物。 發明詳細說明 於本發明範圍內者，C 1 - C 8線型或支鏈型烷基意指甲 基，乙基，丙基，丁基，戊基，辛基，和彼等的可能異構 物’例如異丙基，異丁基，第三丁基。 有關鹵素，意指氟，氯，溴，碘。 藥學可接受之鹽類的例子，於具有鹼性特質的氮原子 之情況中，爲藥學上可接受的包括無機和有機兩種酸的鹽 類，例如鹽酸、硫酸、乙酸、或於酸基，例如羧基的情況 中’與藥學上可接受的鹼，包括無機和有機兩種鹼，之鹽 類，例如鹼金屬和鹼土金屬的氫氧化物，氫氧化銨，胺， 以及雜環類。 第一組較佳化合物爲其中R4爲苯基，其經至少一個 選自下列所構成的群組中之殘基所取代：甲基，第三丁基 ，甲氧基，羥基’氯’碘，硝基，-S - S - ( 2 -胺基苯基） ’·S-S-(4 -胺基苯基）’-S-(4 -胺基苯基），-SCH3和· CH2〇N = C(CH3)2者。特別者’該苯基最佳者係在鄰-位經 -14 - (11) (11)1341840 取代。 第二組特別較佳化合物包括： 7-(2-甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 212) 7-(2-氯苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 228) 7-(2-二甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（5丁23]7) 7-(2,6-碘苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2316) 7-(2-甲氧基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 343) 7-(2-甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（5丁2478) 7- ( 4-羥基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST23 8 9 ) 7-(4-氯苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（5丁2412) 7-(4-甲氧基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 477) 7- [ ( 4-亞異丙基-胺基-氧基甲基）苯基〕亞胺基甲 基喜樹鹼（ST2460 ) 7-(2-第三丁基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（3丁2388) 7 -苯基亞胺基甲基喜樹鹼（ST]546) 7 - ( 4 -硝基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（S 丁 I 5 6 1 ) 7-2- ( 2-胺基苯基二硫基）苯基亞胺基甲基喜樹鹸（ ST 1 73 7 ) 7-4 · (4-胺基苯基二硫基）苯基亞胺基甲基喜樹鹼（ ST2 03 4 ) 7-4- ( 4-胺基苯基硫基）苯基亞胺基甲基喜樹鹼（ ST2 06 9 ) 7-(2-甲硫基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2]38) 7 - ( 4 -第三丁基苯基亞胺基甲基）-喜樹鹸（S 丁2 6 ] 9 -15 - 1341840 7-(4 -甲硫基苯基亞胺基甲基）-喜樹鹼（ST2667) 7- ( 4-羥基苯基亞胺基甲基）—喜樹鹼（ST26〗6) 式（】）化合物可以用不同的方法根據鍵聯到7 _亞胺 基甲基所含氮的R4基而製備。 式（η中R4爲上面所定義者的化合物可以從喜樹鹼 醛（式Ia' R5爲氫）或7-酮基喜樹鹼（式】a，R$不是 氫），

其中Ri爲- C(R5) = 0基’且Rs爲對式（I)所定義者，r2 和R·3皆爲如式（I )中所定義者。式（I a )化合物與式（ Ob) RcNH2’其中R4爲上述者之化合物反應而得式（I )化合物’其中R,爲-C(R5) = N-R4基，且r4爲式I中所 定義者。該反應可用諳於此技者熟知的習用亞胺形成方法 進行。較佳者，7 ·醛或7 -酮基喜樹鹼與胺之間的莫耳比爲 介於]:3與3 :】之間。也可以使用目標胺的鹽類。該反 應係在鹼，例如無機鹼’如碳酸鉀’或有機鹸，例如三乙 胺或二氮雜雙環壬烯的存在中’使用極性溶劑，較佳者甲 醇或乙醇進行，且在室溫與治劑沸點之間的溫度下’視情 況於脫水劑，例如碳酸鈉或硫酸錢’分子餘等的存在中進 -16- (13) (13)1341840 行該反應◊於需要時，也可以在催化劑，例如Lewi s酸存 在中進行該反應（如揭示於例如 Moretti and Torre， Synthesis, ]97〇, ]4];或 Kobayashi, et al·，Synlett, 1 977, 1 15之中者）。 喜樹鹼7-醛和喜樹鹼7-肟係揭示於專利申請案EP 0 0 5 6 692 與所述 Sawada，et a 1.. Chem. Pharm. Bull., 39, (1 0) 2 5 74 ( 1 99 1 )之中。 式（I )化合物的Ν'-氧化物係根據熟知的雜芳族氮的 氧化方法，較佳者經由用乙酸或三氟乙酸與過氧化氫之氧 化，或經由用有機過氧酸反應而製備（六.六11^1^311(13· Pietra, Heterocyclic N-oxides, CRC, 1991 )。 有關存在於不同式Π反應物中的之各種意義’此 等反應物可在市場中取得，或可根據文獻中的熟知方法予 以製備，此爲此領域的專家可據以用彼等的主述技術予以 完成· 藥學上可接受的鹽類係用文獻中可找到的習用方法予 以得到，且不需在此進一步揭示。 本發明所揭示的化合物顯示出抗增生活性，所以可用 於彼等的治療活性，且擁有使彼等適合調配在藥學組成物 中的物理化學性質。 該藥學組成物包括至少一種式（1 )化合物，其量爲 可產生明顯的治療效應，特別是抗腫瘤效應者。包括在本 發明內的組成物爲傳統者且可用製藥工業中常用的方法得 到。根據台意的投服途徑，該組成物可爲固體或液體形式 -17- (14) 1341840 ’ &適用於口服，非經腸，靜脈內等途徑。本發明組 包括與該等活性成分一起的至少一種藥學上可接受的 或'賦形劑。調配其一佐劑，例如溶解化劑，分散劑， 劑’乳化劑等可爲特別有用者。 式（I )化合物也可以與其他活性成分，例如其 ®瘤藥物’組合使用，包括分開形式，及在單一劑型 者。 本發明化合物可用爲具有抗腫瘤活性的醫藥品， 用於肺腫瘤，如非小胞肺腫瘤，結腸-直腸和前列腺 瘤，及神經膠質瘤。 本發明化合物的胞毒活性係在人類腫瘤細胞的細 統內，使用抗增生活性檢驗作爲胞毒性潛在性評估方 以檢定。 所用細胞系爲屬於稱爲NCI Η4 60的非小胞組織 肺非小胞癌。 對於活體內硏究’溶解化係在1 〇% DM SO/雙重 水中進行，不能在食鹽水中溶解化，且口服途徑投服 毫升/公斤的體積進行。 抗腫瘤活性 使用】0-12個星期大的 atimic nu/nu瑞士小 Charles River； Calco, Italia)。將動物維持在層流室 根據的是 the United Kingdom Co-ordination Comm C a n c e r R e s e a r c li的指導原則°貫驗程序彳乐由1 s t 成物 媒劑 懸浮 他抗 之內 例如 的腫 胞系 法予 型的 蒸餾 係以 鼠（ 內， i 11 e e i 1 U 1 o -18- (15) (15)1341840 N a 2 i ο n a 1 e per lo Studio e la Cura dei Tumori 的動物實驗 t h e E t h i c a 1 C o m m i 11 e e 所認可。 將從經皮下（S. c · ) ] 0 6細胞N C I Η 4 6 0 /小鼠接種過 的小鼠取得之約2 X 2 X 2毫米腫瘤片段對各5隻小鼠成組的 動物經皮下兩側移植。 在腫瘤開始可觸知時，用化合物處理動物。 每星期二次，使用Vernier測徑器以毫米爲單位測量 腫瘤的寬度，最小直徑（< )，長度和最大直徑（L ) » 根據公式1 2 X L /2計算腫瘤體積（立方毫米）。根據公式 7^1%=】〇〇-(丁/(：><100)，其中丁爲處理組腫瘤體積的平 均値而 C爲對照組的値，而以處理組相對於對照組的 T V I %評估分子的效力。當τ V I % 2 5 0時，該化合物即視 爲具有活性。 此等分子的其他優點可用有效間量之間的廣間隔予以 鑑定’其指明治療指數的增加及在治療用途中的更高處理 性’特別是若可預見可以使用變異的時間表與劑量而有延 長的投服時間，更重要者於可注射調配物中者。 傳統喜樹鹼的一項重要缺陷在於彼等在三元複合物（ 藥物-D N A -酵素）中的結合之可逆性。此種可逆性會影響 藥物效力，因其會在DNA合成中促成單股DNA切斷轉換 成爲雙股DMA切變之故。 本發明化合物所提供的優點爲其可明顯克服先前技術 三元複合物所具可逆性之限制。 於臨床前硏究中：本發明化合物顯示出對多種腫瘤細 -19- (16) (16)1341840 胞系有胞毒性活性。 此種廣範圍抗癌活性在用人類腫瘤異種移植體移植的 小鼠上確認出，其中包括N S C L C ( Η 4 6 0 , A 5 4 9 )，前列 腺癌（JCA-1 )，神經膠質母細胞瘤（GBM/7 )，胃癌（ MKN28)，骨肉瘤（U20S)，卵巢癌（A2780/Dx， A2 7 8 0/DDP )和結腸癌（Η T 2 9，C ο B A )以及鼠類肺癌（ M109)與白血病模型（L1210)。 臨床前數據推測本發明化合物可爲對抗人類癌症且特 別是對抗非小胞肺癌（NSCLC )，神經膠質母細胞瘤和前 列腺癌之活性抗癌劑。 本發明範例化合物的抗腫瘤活性經列於下面的表I之 中 。

-20- (17) 1341840 表 ] 化 合物 ic5〇 (毫克/ 毫升 ST 17 37 0. 0295 ±0.07 ST 2 0 3 4 0 • 235 ±0 .02 S T 2 0 69 0.14 ±0. 04 S T 2 13 8 0. 03 3 ±0. 004 ST 2 2 2 8 0 • 03 6 ±0 • 01 ST 2 3 16 0 .062 ±0 • 03 ST 23 17 0 • 075 ±0 • 02 ST 1561 (CPT 1 60) C ).14 ±0. 03 ST 24 12 0.042 ±0.0012 ST 22 12 0 • 23 5 ±0 .06 ST 2 3 8 8 0. 03 3 ± 0 . 004 S T 2 3 8 9 0. 0 15 ±0. 00 8 S 丁 2 3 4 3 0. 02 8 ±0. 0 12 ST 24 7 7 0 .08 ±0.002 (水可溶） 化合物ST 1 7 3 7的活體內活性經列於下面的表2之中。 (18) (18)1341840 表2 經口，q4d><4，投服於經皮下載以MKN-28人類胃癌的無 胸腺裸鼠所得效果 藥 物 劑量 T V I % 1 B W L %2 丁 0 X (毫克/公斤） ST 173 7 4 69 0/4 7 56 0/4 12 68 4 0/4 於對 照小鼠 體內的平均腫瘤 二倍化時 間爲 7 . 1 ±1.3 5.4 ±1 .4天（分別爲實驗65 6和6 64所得値） 1於最後處理1 1 -1 2天處理組相對於對照組腫瘤的腫瘤體 積抑制率％ 2因藥物處理所誘導的體重減量％ 3死亡數/處理小鼠 本發明化合物的高度胞毒性效力，於此係以其較佳化 合物之一，ST] 7 3 7，爲範例呈現出，也由強力抗腫瘤活性 反映出。使用一組具有對Topotecan ( TPT )有明顯反應 性（亦即TVI > 80% )的特徵之腫瘤異種移植物，顯示本 發明化合物對抗顯著多種人類腫瘤模型的抗腫瘤活性範圍 有獲得實質地改良。特別者，在許多腫瘤模型的處理中發 明令人印象深刻的抗腫瘤效力，其中在一大數目的處理動 物中達到非常高的腫瘤減退。再者，本發明化合物都能夠 對具有 MDR-表現型的腫瘤誘導出實質的CR。此種觀察 -22- (19) (19)1341840 結果具有高度重要性，表明本發明化合物不是P -糖蛋白 的受質。 本發明化合物的其他治療優點係關聯於a )治療指數 的改善，b )於大劑量範圍中的藥物效力，c )使用頗爲不 同的時間表的效力證明，使本發明化合物比Τ ο ρ 〇 t e c a η較 不依賴治療時間表。 【實施方式】 下面諸實施例係用以進一步闡明本發明。 實施例1 通用程序：於含4 A MS的Yb(OTf) 3(16毫克，0.03 毫莫耳）/ 5毫升無水C Η 2 C 12懸浮液中，加入7 -甲醯基 喜樹鹼（100毫克，0.26毫莫耳）/ 20毫升CH2C12溶液 ’接著加入胺（0.26毫莫耳）/0.5晕升CH2C丨2溶液。在 室溫下搜拌所得混合物直到反應完全爲止。於濾掉分子篩 之後’加入2 0毫升水並分開兩相。用二氯甲烷快速萃取 水層三次。將合倂有機相脫水及蒸發，並將產物在矽膠上 以快速層析術純化。 胃到下列化合物。於某些例子中有顯示出抗腫瘤活性 (對 H-460 的 IC5G，單位 μΜ ) 7—(2-甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2212) 1 C 5 〇 ( Η - 4 6 0 = μ Μ ) ： 0.10 -23 - (20) (20)1341840 M.P. 247-248。(：分解，'HNMRCDMSO-de) 5 : 0.87 (t， •l = 7Hz，H3-】8) ，：1.7-1.9 ( m，H2-I9) ，2.5 ( s，Ar-CH3

)，5.4(s，H2-17) ，5.60(s，H2-5) ，6.55 (s，-OH )，7.25-7.50 (m，4H Ar，H-]4) ，7.75 (m，H- 1 1 )， 7.95 ( m > H- 1 0 ) ，8.25(dd，H-12) ，9.]0(dd，H-9) ，9_65 ( s，CH = N )。 7-(2-氯苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（3丁2228) IC5〇 ( H-4 60 > μΜ ) ： 0.07 M.P. >240 °C 分解，NMR(DMSO-d6) <5 ·· 〇.83(t， J = 7Hz，H3- 1 8 ) ，1.7-I.9 ( m，H2-19) ，5.4 5 ( s > H2- 1 7 )-5.60 ( s > H2-5 ) ，6.50(s，-OH) >7.35-7.50( m， H- 1 4 ； 4H Arom. ) ，7.85 (m，H-ll) ，7.95 (m，H-10 )，8.30 ( dd，H-12) ，9.10 ( dd，H-9 ) ，9.70 ( s， CH = N )。 7-(2,6-二甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2317) IC5〇 ( H-460 ' μΜ) ： 0.15 M.P. 250。(：分解，NMR(DMSO-d6) : 0.87 (t，J = 7Hz -H3- 1 8 ) ，].7-1.9( m，H2-19 ) ，2.25(s，2Ar-CH3) ，5.4(s，H2-17) ，5.60(s，H2-5) > 6.55 ( s > -OH ) ，7.0-7.30( m，3HAr) ，7.40(s，H-14) ，7.8(m，H- ]1 ) ，7.9(m，H-]0) ，8.25(dd，H-】2) - 8.85 ( dd ' H-9 ) ，9.5(s，CH=N)。 -24 - (21) (21)1341840 7- ( 2-碘苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2316 ) 1C50 ( H-4 60，μΜ ) :0.06 M.P. 240 〇C 分解，4 NMR(DMSO-d6) ό : 〇.87(t， J = 7Hz > H3-18) ，1.8-1.9 ( m - H 2 - 1 9 ) ，5.45 (s，H2-17

)，5.75(s，H2-5) ，6.55(s，-OH) ，7.】-7.6(m，4H

Ar，H-14) ，7.8(m，H-ll) ，7_9(m，H-10) ，8.30( dd，H-]2) ，9」0(dd，H9) ，9.65(s，CH=N)。 7-(2-甲氧基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（5丁2343) IC50( H-460，μΜ) ： 0.06 M.P. 244-246 t 分解，NMR(DMSO-d6) ό : 0.83 (t > J = 7Hz> Η3Ί8) > 1.7-1.9 ( m ' H2- 1 9 ) ，3.95 ( s， OCH3 ) ，5.45(s，H2-17) ，5.55(s，H2-5) ，6.45(s ，-OH) ，7.0-7.50 (m，H-]4; 4H Arom . ) > 7.7 ( m - H- 1 1 ) ，7.85(m，H-10) ，8.25(dd，H-]2) ，8.9(dd ，H-9 ) ，9.70 ( s，CH = N )。 7-(4 -甲基苯基）亞胺基甲基喜樹鹸（ST2478) IC5〇 ( Η-460 > μΜ) ： 0.18 M.P. 159-160 °C 分解，'Η N MR (DMSO-cU) δ ： 0.83 ( t ，J = 7Hz，H3-18) ，1.7-1.9( m，Η2·19) ，2.35(s，Ar- CH 3 ) ，5.37( s’ H2-17) ，5.5(s，H2-5) - 6.45 ( s > - OH) > 7.2 5 - 7.3 5 ( m ^ H - 1 4 ； 2)-1 Arom.) ，7 .4 - 7 . 5 ( m， -25 - (22) (22)1341840 2H a r o m . ) ，7.7 ( m > Η- Π ) ，7.85 (m，Η - 1 0 ) ，8.16 (dd - Η - 1 2 ) ，8.9(dd，H-9) ，9.55(s，CH)。 7-(2-烴基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 389) IC5〇 ( H-460 > μΜ ) ： 0.06 M.P. 252-254 °C 分解，1 H NMR(DMSO-d6) ό : 0.87( t ，J = 7Hz，H3-1 8 ) ，] .7-1 .9 ( m，H2-] 9 ) ，5.4 ( s，H2- 17) > 5.60 ( s ' H2-5) ，6.55 (s，-OH) ，6.90-7.5 (m ，4H Ar，H-14) ，7.85-8.0 ( m > Η- 1 1 - H- ] 0 ) ，8.35 ( dd > Η- 1 2 ) > 8.90 ( dd - H9 ) ，9.70(s，CH = N)。 7-(4-氯苯基）亞胺基甲基喜樹鹸（ST2 412) 1C 5〇 ( H-460 - μΜ) :0.08 M.P. 246-247。。分解，1 H NMR ( D M S Ο - d 6 ) ： 0.83 (t， J = 7Hz > H3 -1 S ) ，1.7-1.9 ( m > H2- 1 9 ) ，5.40 ( s，H2-]7 )，5.55(s，H2-5) ，6.45 (s，-OH) ' 7.35 ( s > H-14 )，7.50-7.60 (m，4H arom.) ，7.85( m，H-ll) ，7.95 (m > H- 1 0 ) ，8.25(dd，H-】2) ，8.95(dd，H-9)， 9.55(s，CH = N)。 7-(4-甲氧基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2477) ]C5〇 ( H-460 > μΜ) ： 0.16 M.P, 252-255 °C 分解，NMR (DMSO-d6) ό : 0.87( t ，.)=7 H z，H 3 - ] 8 ) ， 1.7-1.9 ( m > H 2 - 1 9 ) ，3.8 ( s，- -26 - (23) 1341840 OCH3 ) ，5.4 ( s，H2-17) ，5.45 ( s，H2-5) ，6.55 ( s ' -OH ) ，7.05(d，2HAr) ，7.35(s，H-14) ，7.60( d - 2 H A r ) ，7.85(ni，H-ll) ，7.9(m，H-10) - 8.25 (dd - Η- Ί 2 ) ，8.8(dd，H-9) ，9.5(s，CH)。 7-〔 （4-亞異丙基-胺基-氧基甲基）苯基〕亞胺基甲基喜

樹鹸（ST2460 ) 1C50 ( H-4 60 > μΜ ) ： 0.01 M.P. 147°C 分解，NMR(DMSO-d6) δ : 0.85(t， J = 7Hz，H3- 1 8 ) ，1 .7-1 .9 ( m，H2-] 9，C(CH3)，2 )， 5.05 ( s > CH2-〇 ) ，5.4 0- 5.5 5 ( m，H2-I 7，H2-5 ) > 6.50 (s，-OH ) ，7.35 (s，H- 1 4 ) ，7.40-7.60( m，4H arom. )，7.75-7.85 (m，Hll) ，7.86-7.95 (m，H-10) > 8.25 (dd，H-12) ，8.95(dd，H-9) ，9.60(s，CH=N)。

7-(2 -第三丁基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 3 88) IC50(H-460，μΜ) :0.07 M.P. 2]5t 分解，NMR(DMSO-d6) (5 : 0.85(t， J = 7Hz > H3-]8) ，].45(s，9H，tBut) ，1.7-1.9 ( m -

H2- 1 9 ) ，5.35-5.75 ( m，H2-17，H2-5) ，6.50 ( s，-OH )，/.05-7.5(m，H-14; 4 H arom.) ， 7.75-7.85 (m， Η- Π ) ，7.88-7.95 (m，H-]0) ，8.25(dd，H-12)， 8.95 ( dd > H-9) ，9.45(s，CH = N)。 -27 - (24) (24)1341840 7 -苯基亞胺基甲基喜樹鹼（ST1546) IC5〇 ( Η -4 60 · μΜ ) ： 0.13 'H NMR ( DMSO-d6) ¢5 ： 0.83 ( t - J = 7Hz - H3- 1 8 )， 1.7-1.9 (m，H2-l9) ，5.37(s，H2-17) ，5.5(s，H2-5 )> 6.45 ( s 1 -OH) ，7.25-7.35 (m，H-14; H a r o m.) ，7.4-7.5 (m，4Harom) ，7.7(m，H-ll) ，7.85(m， H- 10 ) ，8.16(dd，H-12) ，8.9(dd，H-9) ，9.55(s， CH=N)。 7-(4-硝基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST156I) 1C 5 ο ( H-460 > μΜ) :0.28 Μ. P. 260-265。(：分解.NMR(DMSO-d6) (5 : 0.85(t， .1 = 7 Hz，H3- 1 8 ) 1 .7-1 .9 ( m - H2-l 9 ) ，5.35 ( s，H2-17 )，5.48(s，H2-5) ，6.45 (s，-OH) ，7.3(s，H-14) ，7.6-7.7 (m， 2 Ar) > 7 . 8 ( m > H - 1 1 ) > 7.9 ( m > H - 1 0 )，8.25(dd，H-]2) > 8.35-8.40 (m> 2 Ar) ，8.9(dd ，H-9 ) ，9.67 ( s，CH = N )。 7-2- (2 -胺基苯基二硫基）苯基亞胺基甲基喜樹鹼（ ST 1 7 3 7 ) 1C50 ( H-4 60，μΜ ) ： 0.0 17 !H NMR ( DMSO-d6 ) b ： 0.83 ( t > J = 7Hz > H3-18) 1.7-1.9( m，H2-]9) 5.35-5.75 (6H，m，H2-5 + H-17 + NH2 )，6.40( ]H，m:ArH) ，6.5-6.6(2H，m，】A r H + -28 - (25) 1341840 OH) ，6.90(]H，m，ArH) ，7.25-7.45 + H- 1 4 ) > 7.15-8.0 (4H- m- 4 ArH )， ，9.75(lH，s，CH = N)。 7-4- ( 4-胺基苯基二硫基）苯基亞胺： ST2 03 4 ) IC5〇 ( H-4 6 0 > μΜ ) :0.39 Μ.Ρ. 154-155 °C 分解，NMR(DMSO. ，J = 7Hz，Η3Ί 8 ) ，1.7-1.9 ( m，Η2-19 17) ，5.55(s，H2-5+NH2) > 6.50 ( s m，2HAr) ，7.25(m，2HAr) > 7.3 7.60 ( m 5 4 H A r ) ，7.8(m，H-]l)， ，8.25 ( dd，H-12 ) ，9.0 ( dd，H-9 ) )° 7-4- ( 4 -胺基苯基硫基）苯基亞胺基甲基 IC5〇 ( H-4 60 > μΜ ) : 0.24 M.P. 187-188 °C 分解，NMR (DM SO-> J = 7Hz > Η3Ί 8 ) ，1.7-1.9 (m，H2-]9 ]7) > 5.5 5 ( s > H 2 - 5 + N H 2 ) - 6.55 ( s m > 2H At ) ，7.10-7.50 ( m > 6H Ar + H H-1 1 ) > 7.9 ( m « H - 1 0 ) > 8.30 ( dd -，H-9) ，9.5(s，CH = N)。 (4H， m， 3 ArH 8.25 ( ] H，dd ) s甲基喜樹鹼（ d6 ) 5 : 0.83 ( t )，5.40 ( s，H2-，-OH ) ，6.55 ( 丨 5 ( s，H- 1 4 )， 7.9 ( m，H- 1 0 ) ，9.70 ( s，CH 二 N 喜樹鹼（ST2069) •d6) 〇 ： 0.87 ( t )，5.4 ( s，H2-，-OH ) - 6.65 ( -]4 ) ，7 · 8 ( m， H- ] 2 ) ' 9.0 ( dd -29- (26) (26)1341840 7- ( 2-甲硫基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2] 38 ) lC5〇(H-460> μΜ) :0.06 M.P. >250 °C 分解，’H NMR(DMSO-d6) (5 : 0.83(t， J = 7Hz，H3- 1 8 ) ，1.7-1.9 (m，H2-19) ，2.50 (s，SCH3

)，5.40(s，H2-17) ，5‘70(s，H2-5) ，6.45 (s，-OH )，7.25-7.35 ( m，H-14 ; 3H arom.) ，7.6 ( m，]H a r o m ) ，7.8(m，H-]l) ，7.95(m，H-10) ，8.30(dd > H- 1 2 ) ，9.10(dd，H-9) - 9.5 5 ( s > CH = N )。 實施例2 於20S-喜樹鹼-7-醛（1) ( 100毫克，0.26毫莫耳） / 7毫升無水 C H 2 C 12的懸浮液中，加入恰當的胺（0.7 8 毫莫耳）和Yb(OTf)3 ( 16毫克，0.03毫莫耳）。在室溫 下攪拌所得混合物直到反應完全爲止，於過濾掉篩之後， 將溶劑蒸發，並在矽膠（Merck 2 3 0-4 00網目）上以快速 層析術純化產物。 得到下列化合物 7-(4-第三丁基苯基亞胺基甲基）-喜樹鹼（ST2619) 攪拌溶液].5小時。快速層析術（溶析劑：CH2C12 : MeOH 99 ：))。黃色粉末。產率 50%，M.P. 250 °C分解 ，1H NMR ( DMSO-d6 ) δ : 0.88 (t，J = 7Hz > H3-]8)， 1.30 ( s，tBut) ，1.75-1.95 ( m > H2-19) ，5.45 ( s，H2- 17) ，5.55(s，H2-5) ，6.55 (s，-OH) ，7.35(s，H- 1 4 ) ，7 . 4 5 - 7.6 0 ( i”，4 H A i· ) ，7 . 8 0 ( m，H - Π ) ，7.9 5 -30 - (27) (27)1341840 (m，H-10) > 8.25 ( dd > H- 1 2 ) > 8.95 ( dd > H-9 )， 9.7 ( s，CH = N )。 1C50 ( H-4 6 0 > μΜ ) ： 0.09 7-(4-甲硫基苯基亞胺基甲基）-喜樹鹼（ST2667) 攪拌溶液 22小時。快速層析術（溶析劑：CH2C12 : MeOH 98: 2)。黃色粉末。產率 36%，M.P. 160°C分解 ，】H NMR ( DMSO-d6 ) δ : 0.87 ( t，J = 7Hz，H3- 1 8 )， 1.7-1.9 ( m ' H2- 1 9 ) ，2.55(s，-SCH3) ，5.45( s，H2- 17) ，5.55(s，H2-5) ，6.50 (s，-OH) ，7.35(s，H- 14) - 7.40 (d> 2H Ar) > 7.55 (d-2H Ar) - 7.80 ( m > H- 1 1 ) ，7.9(m，H-10) ，8.20(dd，H-]2) ，8.95( dd > H-9 ) ，9.7(s，CH = N )。 I C50 ( H-4 6 0，μΜ ) :0.074 7-(4-羥基苯基亞胺基甲基）-喜樹鹼（ST2616) 攪拌溶液3小時。快速層析術（溶析劑·· CH2C12 : MeOH 96: 4)。黃色粉末。產率 79°/。，M.P. 250 °C 分解， 1H NMR ( DMSO-d6 ) δ : 0.90 ( t，J = 7Hz，H3- 1 8 )， i.75-2.0 ( m > H2-19) ，5.4 (s，H2-]7) > 5.55 ( s - H2-5 )，6.50 ( s 1 -OH) ，6.90 ( d > 2H Ar) ，7.35 (s，H - 1 4 )5 7.55 (d· 2H Ar) 1 7.80 (m> H-ll) ，7.90(m，H-10) - 8.25 ( dd > H-12) · 9.0 ( dd > H-9) - 9.70 ( s - C ]·] = N )。 -31 - (28)1341840 IC5〇 ( H-4 6 0 ’ μ M ) : 0.22

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Claims (1)

1341840 附件3A :第093105744號申請專利範圍修正本 民f 100年2月日修正 拾、申請專利範圍 I I月曰修(更)正替換頁 1.—種式（I)化合物 R R

其中1^爲-(：(115) = ^114基，其中尺4爲經一或多個選 自下述之基取代的苯基：-S-S-(4-胺基苯基）-、-S-(4-胺基 苯基）-或-SCH3 ; Rs爲氫、C^-Cs線型或支鏈型烷基、Cl_c8線型或支 鏈型烯基、C3-Ch>環烷基、（c3_Cl())環烷基·（(：1-(：8)線型或 支鏈型烷基、C6-C14芳基' (c6-C14)芳基- (Ci-C8)線型或支 鏈型烷基； R2與R3係相同或相異地爲氫、羥基、Cl-C8線型或 支鏈型烷氧基； 彼等之Ni-氧化物、彼等之單一異構物（其包括· C(RS) = N-R4基的同側（syn)和對側（anti)異構物）、彼等之 可能的鏡像異構物、非鏡像異構物及前揭之摻合物，及上 述之藥學上可接受的鹽類。 2 ·如申請專利範圍第〗項之化合物’其中該苯基係 在鄰位經取代。 1341840 3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其選自： 7-2-(2 -胺基苯基二硫基）苯基亞胺基甲基喜樹驗 (ST1737)' 7-4-(4-胺基苯基二硫基）苯基亞胺基甲基喜樹齡 (ST2034)' 7-4-(4-胺基苯基硫基）苯基亞胺基甲基喜樹賴 (ST2069)、 7-(2-甲硫基苯基）亞胺基甲基喜樹鹼（ST2 138) ’ 彼等之N,-氧化物、彼等之單一異構物（其包括_ C(R5) = N-R4基的同側（syn)和對側（anti)異構物）、彼等之 可能的鏡像異構物、非鏡像異構物及前揭之摻合物’及上 述之藥學上可接受的鹽類。 4. —種製備如申請專利範圍第1至3項中任一項之 化合物之方法，其包含令式（la)化合物

(其中1^爲-(：(115) = 〇基，且R5爲式⑴所定義者’ R2 與皆爲式（I)中所定義者）與式（Ila)之R4-NH2化合物反 應’及將所得式（I)化合物視需要地轉換成彼等之Νι-氧化 物、彼等之單一異構物（其包括-C(R5) = n-R4基的同側 (syn)和對側（anti)異構物）（其中r4係如申請專利範圍第1 1341840 項中所定義者）、彼等之可能的鏡像異構物、非鏡像異構 物及前揭之摻合物，及上述之藥學上可接受的鹽類。 5·如申請專利範圍第4項之方法，其中該式（la)化合 物與式（IIa)化合物之莫耳比係介於1 :3至3: 1之間。 6·如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合物， 其係作爲藥物。 7. —種藥學組成物，其包含治療上有效量的至少一 種如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合物及摻合之 藥學上可接受的載體和賦形劑。 8 . —種藥學組成物，其包含治療上有效量的至少一 種如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合物及摻合之 藥學上可接受的載體和賦形劑及視需要地結合其他活性抗 腫瘤成分。 9. 一種如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合 物於製備用於治療腫瘤的藥物上之用途，該腫瘤係選自非 小細胞肺腫瘤或胃癌。 -3-