TWI260316B

TWI260316B - Production of chirally pure alpha-amino acids N-sulfonyl alpha-amino acids

Info

Publication number: TWI260316B
Application number: TW091135621A
Authority: TW
Inventors: Lynn Resnick
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2001-12-11
Filing date: 2002-12-10
Publication date: 2006-08-21
Also published as: JP2005511727A; AU2009251195A1; WO2003050062A2; CA2470111A1; WO2003050062A3; MXPA04005366A; AU2002351170B2; AU2002351170B8; EP1461332A4; TW200306292A; AU2002351170A1; EP1461332A2; JP4615861B2

Description

1260316

本發明 ⑽關於製備手性純α_胺基酸及N•如|細-胺 ^=新#、衣k方法。本發明之化合物有用於多種目的，包括用於製藥組成物。業已闡明夕種由胺基酸製備較佳之鏡像異構物的方的_手_標的化合物之方法。鏡像31本發明包括—種製備α•胺基酸之手性純s- 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 20 及面’本發明係提供—種用來製備2_胺基醇，酸及肟之手性純S-鏡像異構物之方法。胺美面’本發明係提供~種用來製備磺醯基α_ 胺基酸之手性純S-鏡像異構物之方法。 M__ _料性純Ν-續酿本發= = :Γ—時當可知曉本發明之詳細說明二方面’本發明係關於製備手性α·胺基酸之方法。基酸解離之方法。種將手性Ν·輕細-胺本發明之兩個方法可生成手性純化合物，其可轉化為適當的標的化合物’包括相關之2,基醇或Ν_績醯基2_ 胺基醇，醛及肟等想要的標的化合物。 1260316 五、發明說明於本文中所用之“手性純的，，一詞係指化合物，其用手性咼效能液體色層分離法(HpLC)來測量時含有大於約％ % S-鏡像異構型式，宜為大於約97%。其他測量手性純度之方法包括習用之分析方法，包括特定之旋光度，以及習用之化學方法。然而，用來測量手性純度之技藝並非本發明之一種限制。於本文中所用之“製藥上有用的，，一詞係指具有一想要的生物效果之化合物，無論是作為治療劑，免疫刺激劑或壓制劑，輔助劑，或疫苗試劑。同樣的，有多種化合物， 10其適甩於非製藥應用，例如，診斷劑，標示劑等可藉由本發明之方法製備。然而，其他製藥上有用之化合物可藉由此方法生成。 9 15 經濟部智慧財產局員工消費合社印製 20 由本發明所生成之化合物及任何其所轉化成為之標的化合物可以由製藥上或生理上可接受的酸或鹼所衍生之赜類型式來使用。這些鹽類包括但非侷限於下列與有機酸及無機酸，例如，錯酸，乳酸，檸檬酸，酒石酸，琥珀酸，反式丁烯二酸，順式丁烯二酸，丙二酸，扁桃酸，羥^丁二2，氫氯酸，氫溴酸，鱗酸，硝酸，硫酸，甲垸，甲苯石黃酸及類似之已知可接受的酸，及其混合物所形^之鹽類。其他鹽類包括與鹼金屬或鹼土金屬，例如，鈉氫氧化鈉），鉀(如氫氧化鉀)鈣或鎂，形成之鹽類。 k些鹽類，以及其他藉由本發明生成之化合物可以酯類型式，胺基甲酸酯以及其他習用之“前藥，，型式，去了此等型式給_，其可於生體_化為活性基團。於二、您 -4- 國家標#^)_A4規格_(ΊΤ5Τ5_97公釐f 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1260316 ____B7_ 五、發明說明（3) ^- 要的具體例中，該前藥為酯類。參見，例如，Β·惕拔及】寇威，“再訪前藥·· “Ad Hoc” Approach as a Complement t〇 Ligand Design”，藥物研究評論，16(3) : 233_24i，&

John Wiley & Sons (1996) 〇 5 天然及非天然《 -胺基酸，天然及非天然胺基醇類，以及其中間體可根據本發明來製備。典型的。胺基酸係用式(NH2)(CHR.)(COOH)來描述，其中，R為一脂族基團。該根據本發明所製備之胺基酸可轉化為1磺醯基α-胺基酸及其他想要的化合物。此等其他想要的化 10合物包括，而非侷限於，相關之2-胺基醇，醛，肟，及其 I藥上可接受的鹽類，水合物，及前藥。同樣的，天然及非天然Ν-續醯基α-胺基酸，天然及非天然Ν_確醯基 >胺基醇類，及其中間體可根據本發明來製備。因此，可利用那些精於此方面技藝之人士所已知之技藝，容易的將本文 15中所說明之Ν-續醯基α-胺基酸還原為2-胺基醇，或轉化為相關之醛，肟，及其製藥上可接受的鹽類，水合物，及前藥。例如，根據本發明之方法所製得之具有式 (R)2CH(CH2)nCH(C〇2H)NH-R’之手性純_胺基酸可容易的 20轉化為手性純胺基醇。於另一例中，根據本發明所製得之具有式（R)2CH(CH2)nCH(C〇2H)NH-S(0)2R，之手性純 N- 磺醯基α -胺基酸可容易的轉化為具有式 (R)2CH(CH2)nCH(CH2〇H)NHS(0)2R，之 Ν·磺醯基胺基醇。適當的，於上式中，η為〇至約10 ; R為低級烷基，本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格H X 297公爱)

1260316 _ B7 ---------------------- 五、發明説明（4 ) ' ~- 經取代之低級烧基，低級烯基，經取代之低級稀基，低級炔基，經取代之低級炔基，環烷基，經取代之環烷基，苯基，經取代之苯基，+基，經取代之午基，CH2環烧基， CH2·3斗朵’ CH(低級烧基)_2_呋喃，CH(低級烷基)冰甲 5氧基苯基，CH(低級烷基）苯基，或CH(〇H)-4-SCH3-苯基；且R’係於其他適當的基團中選自H，低級烷基，經取代之低級烷基，低級烯基，經取代之低級烯基，低級炔基，經取代之低級炔基，雜環基，經取代之雜環基，苯基，經取代之本基午基，經取代之午基，環烧基，及經取代之環烧 10 基。於另一例中，具有式(R)2CH(CH2)nCH(CH2〇H)NH-S(0)2_ 2-C4H2S-5-Cl之N-磺醯基2-胺基醇係根據本發明之方法製備。然而，該根據本發明之方法所製備之手性純化合物並非侷限於上式。經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣本文中所用之“烷基，，一詞係指直鏈及分支具有一個至 15十個碳原子之飽和脂族烴基。宜為具有一個至八個碳原子，且最好為具有一個至六個碳原子；“烯基，，意欲包括直鏈及分支具有至少一個碳·碳雙鍵及二個至八個碳原子，宜為二個至六個碳原子之烷基；“炔基，，意欲涵蓋直鏈及分支具有至少一個碳-碳參鍵及二個至八個碳原子，宜為二 20個至六個碳原子之烧基。本文中所用之“低級，，一詞係指·任何具有一個至六個碳原子之上述定義之基團。 “經取代之烷基”，“經取代之烯基”，“經取代之炔基”，“經取代之低級烷基，，，“經取代之低級烯基，，，“經取代之低級炔基”一詞係指如前剛說明之烷基，烯基，炔本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） A7 B7

1260316 基，低級院基，低級烯基，及低級炔基，其具有一個至二個選自包括下列基團之取代基：鹵素，Cn，〇H，， fe基方基，雜基，經取代之方基，經取代之雜環基，烷氧基，經取代之烷氧基，芳氧基，經取代之芳氧基，烷基羰基，烷基羧基，烷基胺基，及芳硫基。如果連接造成一穩定的化學基團，這些取代基可連接至烷基，稀基，或炔基之任何碳原子。 10 本文中所用之“方基”一 #司係指一碳環芳族系，其可為一單環，或芳族多環，其係融合或連接一起使得至少該融合或連接之環的一部分形成了共軛芳族系。該芳基基團包括，但非侷限於，苯基，萘基，聯苯基，蒽基，四氫萘基，本奈基’及氮節基。 “經取代之芳基”係指如上所剛定義之芳基，其具有一個至四個選自包含下列基團之取代基：鹵素，CN，〇H， 15 N〇2，胺基，烷基，環烷基，烯基，炔基，烷氧基，芳氧基，經取代之烷氧基，烷基羰基，烷基羧基，烷基胺基，及方硫基。經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 “經取代之苄基”係指於苯環上具有一個至五個選自包含下列基團之取代基的苄基（Bn):鹵素，CN，0H， 2〇 N〇2，胺基，烷基，環烷基，烯基，炔基，烷氧基，芳氧基，經取代之烷氧基，烷基羰基，烷基羧基，烷基胺基，及芳硫基。本文中所用之“雜環基”一詞係指一穩定的4_至7_員單 %或一穩疋多壤雜壞基’其為飽和，部分不飽和，或不飽本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 126〇3i6 、發明說明（6) ^其含有碳原子及由—個至四個選自包括心〇，及s 括任=美該：：8原子可被氧化。該雜環環基亦包基，其中任何上述域之雜環環基係融合至。如果所產生的結構為化學上穩㈣，則該雜 ^基可賴至任何雜原子或碳原子。此等轉基包括， 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 歹1如，四虱呋喃，六氫吡啶基’六氫吡畊基，2_酮基六氫吼咬基，吖庚因基’ t各咬基，咪唑基，吼啶基，吡畊基，錢基，塔啡基’十坐基，異.坐基，嗎福d林基，吲 °朵基’ 吩基，吱絲，苯並吱喃基，苯並喧吩基’喧嗎福咐基’嗔嗎福#基㈣，異4t^基，及四氯硫哌喃。本文中所用之“經取代之雜環基，，一詞係用來說明剛定義如雨之雜環基，其具有一個至四個選自包括下列取代基：鹵素，CN，OH，N02，胺基，烷基，經取代之烷基，環烧基，經取代之環烧基，浠基，經取代之稀基，炔基，經取代之炔基，烷氧基，經取代之烷氧基，芳氧基，經取代之芳氧基，烧氧基，經取代之烧氧基，烧基幾基，經取代之烷基羰基，烷基羧基，經取代之烷基羧基，烷基胺基，經取代之烷基胺基，芳硫基，或經取代之芳硫基。本文中所用之“經取代之環烷基”一詞係指一形成一穩定環之具有多於三個碳原子之碳基環且具有由一個至五個選自包括下列基團之取代基：鹵素’ CN，OH ’ N〇2，胺基，烷基，經取代之烷基，烯基，經取代之烯基，炔基，炫氧基’芳氧基，經取代之烧氧基，烧基獄基’烧基魏 >紙張尺度^^0家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 A7 _____ B7 五、發明說明（7 ) 基，烧基胺基，經取代之烷基胺基，芳硫基，雜環基，經取代之雜環基，胺基烷基，及經取代之胺基烷基。當“經取代之烷基環烷基，，，“經取代之烷基〇Bn”，“緩取代之烧基毗啶基”，“經取代之烧基呋喃基”，“經取代之 5烧基NHR7”，及“苯基（經取代之）烧基，，，“經取代之燒基 0H” ’及“經取代之烷基SR，於下列式I及式la中提及時’取代作用將發生在烷基或相關之基礎化合物上。於下式I及la中R4基團之定義所使用之N-經取代之六氫吼咬基係定義為一經取代之雜環基。特別想要的取代 10 基為N-烷基-，N_芳基_，N-醯基_，及队磺醯基六氫吡啶基。特別適當的N-醯基-六氫吡啶基為N-第三丁氧幾基 (BOC)-六氫吡啶。然而，凡精於此方面技藝之人士可容易的認明其他適當的取代基。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本文中所用之“烷氧基，，一詞係指〇(烷基）基團，其 15中’連接點係經由氧原子且該烧基可任意的被取代。本文中所用之“芳氧基”一詞係指〇(芳基)基團，其中，連接點係經由氧原子且該芳基可任意的被取代。本文中所用之 “烧基m基”一詞係指c〇(烧基)基團，其中，該烷基可任意的被取代且連接點係經由羰基之碳原子。本文中所用之 2〇 “院基魏基”一詞係指coo(烧基)基團，其中，該烷基可任意的被取代且連接點係經由羧基之碳原子。本文中所用之 “胺基烷基”一詞係指第二及第三胺，其中，該含有一個至八個碳原子之烧基或經取代之烧基，其可相同或不同，且連接點係在氮原子上。 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公爱)_

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1260316 “鹵素”一詞係指Cl，Br，F，或I。除非另有說明環結構之型式，“環，，結構一詞係指，例如，當&及K於式I中形成一環結構時，包括一單環結構’一橋環結構，及融合環結構。強非親核性鹼”一詞係指一非親核性鹼性試劑，其並非b屬為親核試劑或黏附在根據本發明所使用之試劑上。技藝中已知有多種非親核性鹼且包括氫化鈉，氫化鉀，二 "、内基酿胺裡及六曱基二石夕疊氮化物。 1〇 “含水鹼”一詞係指一至少含有一鹼及水之溶液。技藝中已知有多種鹼可容易的溶解於水中且包括鹼金屬氫氧化物，例如，氫氧化經，氫氧化鈉或氫氧化鉀等。該驗性水溶液中又可含有其他不會干擾本發明之反應的試劑，且包括有機溶劑，例如，四氳呋喃，甲醇，乙醇，或烴溶劑，鹽類，例如，氯化鈉，及緩衝液等。 15 “含水酸”一詞係指一至少含有一酸及水之溶液。該酸性水溶液中又可含有其他不會干擾本發明之反應的試劑。 “強酸”或“強鹼”一詞係指一可於溶液中完全電離之酸或鹼。一般強酸包括 HC1，HBr，HI，PINOS，H2S04，及 hcio4 〇一般強鹼包括鹼金屬(Li，Na，κ，Rb，Cs)之氫氧 20 化物及重鹼土金屬（Ca，Si*，Ba)之氫氧化物。 “無機”酸或“無機”鹼包括不含碳之化合物。有機溶劑”一詞包括任何已知技藝中之含碳溶劑，其不會與反應中所用的試劑進行反應且包括飽和烴溶劑，不飽和烴溶劑，包括芳族烴溶劑，醇類，鹵化碳，醚，及醋 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（2lGx297公爱） ----—

1260316 Λ7 ___________ Β7 五、發明說明（9) 酸鹽等。手性純化合物之^^ 該手性純化合物可用說明於下之方法製備。精於此方面技藝者將可谷易的選擇適當的合成方法及試齊彳，其係為 5精於此方面技藝者所已知於合成之有機技藝或這些方法之變化。通常，參見，包羅萬象之有機合成法法，“於現代有機化學之選擇性，策略及功效”，ed·，；[•弗萊明，

Pergamon Press，Y〇rk (1991);包羅萬象之有機化學， “有機化合物之合成法及反應”，ed· j.F· S史脫得， 10 Pergamon Press, New York (1979) ° 手性純α-胺基酸之，備經濟部智慧財產局員工消費合作社印製一方面’本發明係提供一種由手性不純a_胺基酸製備手性純a-胺基酸之方法。於製備手性純a_胺基酸 XXXXVI日守，係使用一種新顆的strecker a-胺基酸之不對 15稱變體合成法（Scheme 14 ;有機化學期刊54 : 1055-1062(1989))。於此途徑（圖示j)中，係將醛χχχχνπ與氰化物鹽與α-甲基苄胺或其鹽以丨：丨：丨莫耳比例於一適當溶劑中進行反應而得到化合物χχχχνιπ。所包括之想要的氰化物鹽為氰化鈉及氰化鉀。然而，其他適當的氰化物 20鹽可容易的選擇以用於本發明之方法中。溶劑宜為1 : 1 之曱醇至水。該反應宜進行約12至約24小時，且最好為約18小時。然而，亦可使用較長或較短之反應時間。隨意的，根據這個反應，可形成一含有沉澱之懸浮液，將其予以過濾並清洗（例如，用水）而得到一粉末。將化合物 -11- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1260316 Λ7 _ B7 五、發明說明（10) XXXXVIII用一強無機酸，其於與化合物合併時要為冷卻的’以溶解（例如，約〇°C至約1(rc)而提供化合物 XXXXIX 〇可以時’該強無機酸為硫酸。然而，亦可容易的選擇其他強無機酸。將反應混合物用一無機鹼予以中和 5並用一有機溶劑萃取成為化合物XXXXIX。適當的，可用醋酸乙酷或其他適當的化合物進行萃取反應，且亦包括乾燥並濃縮得到化合物XXXXIX。該氫解反應係於一適當的催化劑存在之下於例如，3大氣壓之Pd或RaNi壓力下進行’過濾以移除催化劑，接著濃縮以移除溶劑而得到化合 10物XXXXX。然後將化合物χχχχχ用一含水酸溶解以得到式XXXXVI衍生物。其間，χχχχχ被乾燥形成粉末型式，將其於南溫時溶解於一強無機酸而得到一手性純心胺基酸之鹽。例如，可使用於100°c之氫氯酸。或者，精於此方面技藝之人士可輕易的選擇其他酸及其他適當溫度。 15更可以時，該水解步驟係於約12至18小時，或更長期間進行。於一適當具體例中，該步驟係進行16小時。任意的，將該產生的反應混合物濃縮得到一產物，其包含胺基酸鹽及低當量之銨鹽。於此實例中，該產物為胺基酸氫氯酸鹽及1當量之氯化銨。將此產物溶解於水中，於其中加 20入鹼，例如，氫氧化鈉或氫氧化銨以形成一溶液。 -12-

1260316 Α7 Β7 五、發明說明 ----- 11 圖示

Λ XXXXVII CN salt

CN A 2. strong acid R HN^、 χχχχνιπ h2n

HN

XXXXIX 3. OH、 4. strong inorganic acid 10 R H2N XXXXV1 H2/catalyst H：r K h2n xxxxx 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 根據本發明之方法所生成之這些手性純胺基酸可‘ 易的以所生成之型式來使用’或轉化為想要的二化: 物。例如，-手性純α-胺基酸可㈣的藉由將α_胺基酸: 原為2-胺基醇並將該2-胺基醇再处θ而ρ ^ < 丹、、、〇日日而侍到手性純2-胺· 醇而轉化為手性純2·胺基醇。本發明之手性純&胺級這些及其側途可輕㈣為精於此方面㈣者由本二中| 提供之資料及《於此方面技藝相已知之資料所顯而决口。 # 手性純Ν-績醯基α-胺某醅之^ 於另-方面，本發明係提供—種解離手性不純之且; β-分支烧基取代基之N-伽基α，絲酸以提供—手化 Ν-磺醯基α-胺基酸之圖示。可以時，ν_磺醯基&胺基㈣為N-續醯基β-乙基原绳胺酸。於另一具體例中， -13- A7 B7 1260316 五、發明說明（12) ' 胺酸化合物可被選自N-磺醯基卜乙基原纈胺酸，磺醯基纈胺酸，及N-磺醯基β_正-丙基原白胺酸之化合物所取代。或者，精於此方面技蟄之人士可用另一個選擇的具有 β-分支之烷基取代基之Ν-磺醯基α-胺基酸進行根據本發明 5 之方法以製備相關之手性純化合物。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製適當的，可將Ν-石黃醯基β-乙基原纈胺酸(或另一個經選擇的化合物）與手性純麻黃素半水合物於乙醇中以丨：工之莫耳比例混合。然後將混合物加熱以溶解該固體。於一具體例中’將混合物加熱至約8(TC。然而，亦可容易的選 10擇其他適當的溫度。之後，將混合物冷卻以便形成沉澱。此冷卻步驟可於室溫或降低溫度(於约5。〇時進行過夜（約 16-20小時）。冷卻步驟之溫度及期間可依照需要或意願各自往上或往下調整。任意的，可於冷卻後將懸浮液過濾或清洗。然後將該鹽再結晶且然後溶解於一溶劑及強含水酸 15中。適當的，該再結晶步驟係於沸騰的醋酸乙酯中進行且將該再結晶之鹽分離。此可用過渡法或其他習用方法進行。適當的，該鹽係溶解於一有機溶劑及一強含水酸中。將有機萃出物清洗，乾燥並濃縮而得到手性純N_磺醯基 α -胺基酸。於一具體例中，該清洗步驟係用一強含水 20酸，例如，氫氣酸進行，且乾燥係用硫酸鈉等進行。適當的，這些手性純α-胺基酸及Ν_磺醯基胺基酸可用於多種目的中。例如，這些手性純胺基酸及队磺醯基α -胺基酸可藉由本文中說明之方法轉化為相關之Ν_ 磺醯基2-胺基醇。本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21〇χ -14- A7 B7 1260316 五、發明說明（13 ) ~ 因此，於一具體例中，該根據本發明生成之手性純α-胺基fee可用於合成手性請基α _胺基酸。這些手性ν_ 磺醯基胺基酸之適當製法係提供於本文中。一轉化為2-胺基醉 5 本發明之製法提供合成胺基酸及Ν-石黃酿基α-胺基酸^手性純S鏡像異構物之有效途徑，其可用來製備2·胺基醇或Ν-石黃醯基2-胺基醇，及其中間體，其可用於多種目的。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製例如，本文中所提供之實例化合物，Ν•磺醯基孓胺基 10醇及其相關之盤，肟及鹽，可用來調節殿粉狀脫之生成，其係涉及於澱粉狀朊血管病，大腦澱粉狀朊血管病，全身性澱粉狀變性病，早老性癡呆徵侯群(AD)，具德式澱粉狀朊變性病之遺傳性大腦出血，包括體肌炎，唐氏症候群專因此，式⑴化合物可調節罹患AD或其他因大腦中 15澱粉狀朊蛋白質之濃度上升所造成之疾病或有此等風險之個體的/5-澱粉狀朊之生成。這些化合物及其用途於 2〇〇1年12月11曰同時申請之美國專利申請案第 1〇/〇14,304號中有更詳細的說明，其係合併於本文中作為參考。式(I)化合物包括製藥上可接受的鹽類及/或其水合 20物或前藥，其中，式(I)為：

(I) -15- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4^格（210x297公餐 1260316 A7 B7 五、發明說明（14) R3係選自包括氫’烧基’及經取代之烧基之基團； R4係選自包括氫，烷基，經取代之烷基，烧基環烧基，經取代之烧基環烧基’苯基（經取代之）烧基’炫基 0H，經取代之烷基0H，烷基OBn，經取代之烷基〇Bn， 5 烷基吡啶基，經取代之烷基吡啶基，烷基呋喃基，經取代之烷基呋喃基，CH(OH)苯基，CH(OH)經取代之苯基，稀基，經取代之烯基，環烷基，經取代之環烷基，N-取代之-六氫吡啶基，六氫吡啶基，經取代之六氫吡啶基’四氫噻哌喃基，經取代之四氫噻哌喃基，2-氫茚，經取代之 10 2-氫茚，苯基，經取代之苯基，烷基NHR7，及經取代之烷基NHR7 ; 但R3及R4不同時為氫； r7為烷基，經取代之烷基，環烷基，經取代之環烧基，苄基，經取代之苄基，烷基OH，經取代之烷基OH， 15 烷基SR8，或經取代之烷基SR8 ; R8為烷基，經取代之烷基，苄基，或經取代之苄基；或R3及R4可一起形成一環；經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 R5係選自包括氫，低級烷基，經取代之低級烷基’烯基，經取代之烯基，炔基，經取代之炔基，CH2環烷基’ 20 經取代之CH2環烷基，苄基，經取代之苄基，及 ch2ch2qr9 ; Q 為 Ο，NH 或 s ; 反9為低級烷基，經取代之低級烷基，苯基，或經取代之苯基； -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 五、發明說明（15) R6係選自包括氫，鹵素及CFs之基團； T係選自包括下列之基團 0H 0

經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 R!及R2係各自獨立選自包括下列之基團：氫，烧基，經取代之烷基，CF3，烯基，經取代之烯基，炔基，經取代之炔基，環烷基，經取代之環烷基，苯基，經取代之苯基，及(CH2)n(l，3)二4烷，其中，n為2至5 ; 10 W，Υ及Ζ係各自獨立選自包括下列之基團：C，〇1110及Ν，但至少一個W，Υ及Ζ必須為C ;

Rio係選自包括氫及li素之基團； X係選自包括Ο，S，S〇2，及NRui基團；

Rh係選自包括下列之基團··氫，低級烷基，經取代 15 之低級烷基，苄基，經取代之苄基，苯基，及經取代之苯基。 W-X-Y-Z-C雜環基對於s〇2基團之連接點不為本發明之一項限制。然而，於一較佳具體例中，該環係經由一碳原子而連接至S〇2基圑。然而，該環可經由〇，s，或n 2〇雜原子連接。式(I)化合物中含有一個或多個不對稱碳原子且一些化合物中含有一個或多個不對稱（手性）中心且因此生成光學異構物及非對映立體異構物。雖然顯示於式⑴無關於立體化學，當式⑴化合物含有一個或多個手性中心時，至+ -17- Λ7 Β7 1260316 明說明（16) 心胺基酸衍生之手性中心必須為S-立體化學。更佳者， Ν，Τ ’ R3及114所連接之碳科為s_立體化學。於一具體例中，本發明係關於一種製備具通式la之 N-罐醯基2·胺基醇之手性s鏡像異構物之方法：

VR 10

NH (CH2)n

OH 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 其中’ R為低級烧基，經取代之低級炫基，低級烯基，經取代之低級烯基，低級炔基，經取代之低級炔基，環烷基，經取代之環烷基，苯基，經取代之苯基，苄基，經取代之苄基，CHb環烷基，CH2-3-弓丨哚，CH(低級烷基)-2-吱喃，CH(低級烧基)-4-曱氧基苯基，CH(低級烧基）苯基，或CH(OH)-4-SCH3-苯基且η為0至約1〇。如想要，根據本發明之方法所製得之化合物含有至少一個手性碳中心，其中，R於上述結構中乃相同。於某些想要的具體例中，R基團為曱基’乙基，及正丙基，且更佳者乃R為乙基。然而，本發明亦包括生產通式之胺基酸及2-胺基醇，惟此處中R基團乃相異。於這些化合物中，玎出現一個或多個其他的手性中心；然而，該其他的手性中心必須為光學上純的且必須不干擾本發明之手性純 -18 -玉紙張尺度®國家標準(CNS)A4規^297公爱） 1260316 a? _____B7 五、發明說明（17 ) α-胺基酸，2-胺基醇，及队磺醯基2-胺基醇之純s鏡像異構物的生成。於另一較佳具體例中，該手性碳中心為生成鏡像異構純產物之S-立體化學。 5 於一具體例中，本發明之方法係用來生產手性純α-胺經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣基酸，其可容易的轉化為Ν_磺醯基胺基酸。例如，根據本發明之方法所製得之手性純胺基酸可用來製備式(1) 化合物。特別想要的式⑴化合物包括噻吩胺磺醯，且更想要的為$ _素°塞吩胺％酿，且最想要的為5-鹵素嘍吩胺 10磺醯，其於第一醇側鏈上為召-分支。因此，關於式(I)，根據本發明所生成之化合物可具有一結構，其中，X為 s ’ W為C ’ Υ為（：(或CR1G)且ζ為c(或CR1G)，且胺磺醯係連接到喧吩環之C2。較佳者，X為s，W為C，Y為 C(或CR10)，Z為C(或〇110)且r6鹵素。最佳的，X為 15 s，w為C，Y為C，Z為C，R6為鹵素，T為 CCOH)!^2，其中，R〗及r2為氳，R3為η，r4為S-立體化學之低級院基’且R5為Η。其他可能的式(I)化合物為呋喃胺磺醯，其中，X為0，w為C，Y為C，且Ζ為 C。於一個特別的具體例中，式⑴之呋喃胺磺醯亦可用第 20 一醇之側鏈的/3-分支來描述。因此，關於式(I)化合物，於這些化合物中，T為CCOH)!^!^，其中，R!及R2為氫，R3為Η，114為S-立體化學之低級烷基，R5為Η且R6 為鹵素。於試管内及生體内之初步篩選分析中，這些結構之經選擇的化合物具有不可預期的良好/5 -殿粉狀朊抑制 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 μ B7 五、發明說明（18) 活性，且於許多情況下，較具有其他雜環之式⑴化合物具有較佳之活性(例如，呋喃，其中，X為0)。然而，其他此等式(I)化合物亦有用於本文中說明之目的。此外，其他藉由本發明所製備之手性純α-胺基酸及 5 Ν-磺醯基2-胺基酸可轉化為所要的Ν-磺醯基2-胺基醇，其包括式⑴化合物。式(I)化合物係由（I)之胺磺醯來描述，其於第一醇基團之側鏈具有/3-分支。因此，關於(I)化合物，於這些化合物中，Τ為QOHOU，R!及R2為氫， R3為Η，R4為S-立體化學之低級烷基，且R5為Η。這些 10 以及手性純Ν-磺醯基α-胺基酸可根據於本文中說明之下列方法製備。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製製法中之第一個方法包括將2-胺基醇II與適當的磺醯鹵於一驗例如三乙胺(TEA)及一適當的溶劑存在之下進行反應而得到式III化合物。於化合物中之R2及R!為氫 15 時，將N-磺醯基第一醇用氣鉻酸紕錠(PCC)或在斯峨條件下進行氧化，然後得到相關之醛IV，其可與格利雅試劑 (RMgX，其中，R為一有機基團且X為一鹵素)進行反應而得到呈一非對映立體異構物之混合物的第二醇V，其可藉由高效能液體色層分離法(HPLC)來分離（圖示2)。 20 -20 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 五、發明說明（I9 A7 B7 圖示2

RMgX 10

15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 製法中之第二個方法包括將^•絲酸細旨ιχ與適當的磺醯i於-_如三乙胺及—適當溶劑存在之下進行反應而㈣< X化合物（圖示3)。該中間體N_績酿酸 X(Rx=H)可利用標準方法，例如⑽氏，《氰尿醯氯 /NaBH4而轉化為相關之第_醇νιΙΙ(Κι=]κ^Η)。或者，中間體N-續酿酯X(Rx=烧基，㈣可用DiBAL而轉化為趁 IV。 -21- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公髮） 1260316 Α7 Β7 五、發明說明（20 ) 圖示3

DiBAL Rx= alkyl, Bn

15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製最後，中間體N-磺醯酯X(Rx=烷基，Bn)可與2當量之格利雅試劑進行反應而得到第三醇III，其Ri=R2=烧基。或者，於Ri不等於R2之第三醇III時，可製備相關之N-續醯酸之Weinreb酸胺（參見圖示11)且隨即與 20 RiMgX及R2MgX進行反應。於在α-胺基酸碳上具有一個不對稱中心之式X化合物(Rx=H)時，該純鏡像異構物可藉由與多種手性鹼形成之鹽類的再結晶法之標準解析過程而得到。於製備第一醇之第二個方法之變化例中，係首先將α- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316

五、發明說明私基酸或S旨（或其Ν-飯租嗜—/ — l ^r~r ++ 、、二保4之衍生物)VI轉化為相 2-胺基醇VII(利用概述於前 ^ 刚早即之方法），其隨即於去保護而之卜與適當的石黃驗鹵進行反應（圖* 4)而得到式VIII化合物。 V T j 圖示4 ο 1-

Η II Ρ 〇>Λ ORx VI or protecting group 1-LiA1H4 for Rx=H or allcyl, Bn ------- or for Rx=H cyanuric Cl/NaBH4 〇rB2H6

2· Deprotect jj_q 3. TEA h八丨丨 V x ο

VIII 經濟部智慧財產局員Η消費合作社印製為了 ‘備衍生自於胺基酸側鏈含有召-分支之非天然 α-胺基酸時，根據Hruby方法(Tet. ％: 5ΐ35_5ΐ38 20 (1997))之製備方法係、概述於圖示5中。此途徑係由^万_ 不飽和酸XI生成Evans手性輔助劑之α，沒_不飽和醯胺 ΧΗ，接著藉由共軛添加一有機銅酸鹽，用Ν_溴琥珀醯亞胺(NBS)收捕所產生的烯醇酸鹽陰離子xm，用疊氮化物陰離子（由四甲基鈪疊氮化物(11^(}八)提供）置換溴化物χιν -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公愛y 1260316 A7 B7 五、發明說明（22 圖示5

Ra

tBuCOClTEA

〇 OH 人

XI

Ph

Ph XII

• NBS ΧΙΠ 10

Hctaryl 〇=S=〇 Ra R5/Nv|^V/Rb HO〆 XVI 6. LAH • He^rylS〇2d

• TMGA

Br//,. ,*\\Rb

Ph XIV 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 於製備N-烧基化胺項酸vm(R5=烧基等）時，將胺項酿酉曰XVII藉由用適當的驗例如，碳酸娜著舰基化試劑R5X或使用Mitsunobu條件(R5〇H/DEAD，TPP德理而 N-烷基化。將該N-烷基化之胺磺醯酯予以UBH4還原而得到第-醇系列vm之N_烧基化胺石黃醯（圖示6)。這些第 -醇viii可藉由概述於上之化學法而轉化為第二醇v或醛IV系列。或者，該N_烷基化之胺磺醯酯，或其相關之 Weinreb醯胺可藉由用格利雅試劑處理而得到N-院基化第三醇III。 -24-

本紙張尺度適时S國家標‘NS)A4規格（21Gx297_"?IT !26〇316 五、 Α7 Β7 發明說明 23

當該連接至上述醇之胺磺醯的雜環為噻吩時，該相關之域衍生物XIX可藉由將噻吩化合物XVIII用MCPBA氧化而製得（圖示7)。圖示7

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製由非天然2-胺基醇所衍生之胺磺醯的變化製法係利用 Strecker α-胺基酸合成之Bucherer修正法（圖示8)。於此途徑中，一醛XX係與氰化物陰離子及碳酸銨進行反應而得到乙内酿脲XXI，將其水解為胺基酸χΧΙΙ。然後將此 20化合物還原為XXIII並磺醯化而得到所要的式χχΙν化八物0 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 a7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（24 圖示

Rb

Rb 1 .NaCN/(NH4)2C03 ? Rb 2_ Na〇H Ra 〇 Rb

-x 〇

XX

XXI Rb HO

HO- 丫 Ra h2n XXII 3. L1AIH4

Rb

4. HetarylS〇2Cl Ra - HO’ '/'Ra HN——S——Hetarvl II > 〇

h2n XXIII

XXIV 10 於由含有N或O雜原子於側鏈之2-胺基醇所衍生之胺磺醯時，反應途徑係設計成由D-絲胺酸開始（圖示9)。於此途徑中，係首先將D-絲胺酸XXV磺醯化為XXVI且隨即轉化為酮XXVII，將其還原性胺化為式XXVIII之標的化合物。15 圖示9 co2h h9n

OH XXV

TEA

〇 X

B11L1 RcMgX 20

RdNH2 xx vm -26- 人

Rc、〇丫一z 丨| 1!_s——HN

CO

OH X 〇 xxvn 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 μ B7 五、發明說明（25 ) 於第二醇系列（其中R尸Η且R2=CF3(化合物XXIX))之 2-胺基醇所衍生之胺磺醯時，製備方法係如圖示10所概述，設計成由醛IV開始（如圖示2中製備）。 5 圖示10

10 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製如於關於圖示2之章節中所提及者，由於第二醇系列 V之2-胺基醇所衍生之胺磺醯之製法中造成了非對映立體異構混合物之生成。製造這些可造成純非對映立體異構物生成之化合物的另一個方法則係概述於由L-異白胺酸所衍 15 生之化合物的圖示11中。該方法，其係採用先前由Roux 所使用之化學法（四面體50:5345-5360(1994))，包括將格利雅試劑添加到Weinreb醯胺XXX(由必須胺基酸所衍生）中接著將酮XXXI予以立體有擇性還原而得到一單一非對映立體異構之N-經保護之2-胺基醇XXXII。將此化合 20 物去保護接著與磺醯氣進行反應而得到如式XXXIII之純非對映立體異構之胺磺醯第二醇。 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 ΑΊ Β7 五、發明說明（26 ) 圖示11

XXXI

10

-Cl XXXIII

NaBH4 巳〇C

XXXII 15 當連接到上述醇之胺磺醯上的雜環為噻吩時，該相關經濟部智慧財產局員工消費合作社印製之5-碘及5-氟-噻吩衍生物可藉由將5-溴-噻吩衍生物 XXXIV(如圖示2中得到）轉化為5-三烷基錫-噻吩中間體 XXXV，其可藉由用碘化鈉及氣胺T處理而轉化為5-碘-噻吩(XXXVII)或藉由用SELECTFLUOR™(埃銳奇化學公 20 司）處理而轉化為5-氟-噻吩類似物(XXXVI)(圖示12)。 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 Λ7 --- B7 五、發明說明（27 圖示12 10 15

XXXVII XXXVI 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 由在環己烷環上之4位置被烷氧基及胺基所取代之環己基甘胺醇(glycinol)所衍生之胺磺醯可根據本文中說明之方法製備（圖示13)。此途徑係設計成首先將4丄_羥基苯基甘胺酸XXXVIII氫化，接著磺醯化，將魏酸用乙棚烧予以還原並生成Ν,Ο-acetonide XXXIX。然後將該4-羥基 acetomde XXXIX用氫化鈉及一烧基化試劑例如烧基或苄基溴予以Ο-烷基化。接著用含水酸處理以移除保護基而付到式XXXX之4-¾衍生物。或者’該4-經基acetonide XXXIX可氧化為4-酮，其可被還原性胺化及去保護而得到相關之式XXXXI之4-胺基類似物。 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公爱） 1260316 A? B7 五、發明說明（28 圖示13

OH xxx vm 10 15

OH 1. H2/Ra-Ni

3.32^ 4. DMP/TsOH 〇 II H —S—N > || X 〇

入

OH XXXDC 5. NaH/RBr 6. aq HOAc

如果想要，肟XXXXXIV可由相關之醛IV藉由如圖示14中描述之標準方法衍生。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 圖示14 〇 ‘z II -i)—^ U ^

r3 nh2oh

OH X 〇 rv π

I 〇p，

r3

XXXXXIV -30- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 Λ7 --------B7 五、發明說明（29) 下列實例係用來闡明根據本發明之方法之代表性化合物的製法。凡精於此方面技藝者會了解到雖然於下列實例中概述了特定之試劑及條件，這些試劑及條件並非本發明 5 之限制。

tMA 5-氯-N_[(lS)-2-乙基甲醯基丁基]噻吩胺磺醯

CI 15 A. 5-(1-乙基-丙基)-咪唾咬-2,‘二酮將氰化鈉（12·〇克，244.8毫莫耳）及2-乙基丁基醛 (10.0毫升，81.3毫莫耳）添加到碳酸銨(Μ·4克，325·3毫經濟部智慧財產局員工消費合作社印製莫耳)於Η2〇(300毫升）中。將乙醇(3〇〇毫升)加入並沉澱出鹽。將反應混合物加熱至9〇°c。1小時後，混合物成為均 20勻相並於90°C攪拌18小時。冷卻至25°C之後，於真空中移除約500毫升之溶劑。將濃HC1加入以將混合物酸化至 pHl-2並形成一沉澱。將其過濾並將沉澱由Et〇Ac中再結晶出來而得到5-(1-乙基-丙基)_咪唑啶_2,4_二酮之白色固體 (12·9 克，93% )。質譜gESI) : 169(M-H)-。 -31- 本纸張尺度適用中國國人4規格（210 X 297公爱） 1260316 A7 B7 五、發明說明（30) Β· N-[(5-氣-2-σ塞吩基)石頁&&基]-3 -乙基原綠胺酸將5-(1-乙基-丙基)-咪嗤唆-2,4-二酮（12.3克，72.3毫莫耳)溶解於150毫升NaOH水溶液(11.6克，289.2毫莫耳) 中。將溶液藉由微波於一密封槽中加熱達1小時。（微波 5 條件：15分鐘@100%強度，15〇。〇，50psi，然後5分鐘〇%強度，然後15分鐘@100%強度，150°C，50psi，然後重複順序）。於真空中將水及氫氧化銨由反應混合物中移除並將產生的粗胺基酸及NaOH混合物不經進一步純化即使用於下個反應中。 10 將粗胺基酸及NaOH混合物溶解於300毫升水中。將混合物於一冰浴中冷卻至0°C。將5-氯噻吩-2-磺醯氯（17.3 克，79.5毫莫耳)溶解於1〇〇毫升THF中並於0.5小時期間逐滴加到反應混合物中。於1小時後，將反應混合物逐漸回暖至25°C並攪拌16小時。將THF於真空中移除且然經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 15 後將混合物用IN HC1予以酸化至pH 1。約15分鐘後，沉澱開始由乳白色溶液中迸出。1小時後，將混合物於冰箱中冷卻1小時且然後過濾。將沉澱用IN HC1清洗得到呈白色固體之N-[(5-氯-2-噻吩基)磺醯基]-3-乙基原纈胺酸 (18.5 克，78% )。質譜(-ESI) : 325(M-H)-。 20 C. N-[(5-氯-2-噻吩基)磺醯基]-3-乙基原纈胺酸將(+)-(lS，2R)-麻黃素半水合物（16.7克，95.6毫莫耳）添加到一含有N-[(5-氯-2-噻吩基)磺醯基]-3-乙基原纈胺酸 (31·2克，95·6毫莫耳)於185毫升EtOH之懸浮液中。將混合物緩緩加熱以溶解固體並形成一沉澱。於5°C冷卻18 -32- 本紙張尺度㈣T國國家標準办私4規格（51() χ 297公爱） 1260316 Λ7 Β7 五、發明說明（3!) 小時後’將產生的懸浮液過濾出來並將沉澱用冷卻的 EtOH及EtOAc清洗得到27%產量之非對映立體異構鹽。將該鹽由沸騰的Et〇Ac(420毫升）中再結晶，然後過濾出來。然後將產生的白色固體溶解於3〇〇毫升Et〇Ac及3〇〇 5毫升IN HC1中。將各層分離並將有機萃出物用1N HC1(2 χ 200毫升）清洗’乾燥(Na2S04)，並濃縮得到N-[(5-氯-2- 噻吩基)磺醯基]-3_乙基原纈胺酸之白色固體(5·6克，18 % )。手性 HPLC[chiralpak AD (25χ〇·46 公分），8 : 2 己烷 (0.1% TFA):異丙醇，L-異構物於9.6分鐘洗提且D-異構 10 物於13.1分鐘洗提]指出96%手性純度。 [a]D25= +44.5°(c= 1% SOLUTION，MeOH)。質譜(-ESI) : 325(Μ-Η)_。

CiiH16C1N〇4S2 之分析：計算值：C，40.55 ; H，4·95 ; N，4.30。 15 實測值：C，40.30 ; H，4·78 ; N，4·16。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 D· 5H[(lS)-2-乙基-1·(經基曱基）丁基]_2_σ塞吩胺磺醯於〇°C時於一含有Ν-[(5-氣-2-噻吩基)續醯基]冬乙基-L-原纈胺酸(5.6克，17.2毫莫耳)之THF(150毫升）中經由添加漏斗逐滴加入一含有1M曱硼烷四氫呋喃絡合物於 20 THF(69宅升，69毫莫耳)之溶液。15分鐘後，將反應混合物回暖至25。(：並攪拌18小時。然後用90毫升1〇% Ac〇H 於MeOH緩緩的驟冷。於真空中將揮發物移除。然後將殘貝/合解於Et〇Ac(300毫升）中，用飽和含水NaHC〇3(3x 200耄升）清洗，乾燥(Ν^3〇4)，並濃縮成一白色沉殿(51 -33- 本紙張尺度適用中國標準(CNS)A4規格C2l〇x297公釐y 1260316 五、發明說明（32) 克，96%產率，96%手性純度）。將沉澱用庚烷/Et〇Ac 4 : 1再結晶，得到光學上純的5-氯-N-[(lS)-2-乙基-1-(羥基甲基）丁基]-2-噻吩胺磺醯之白色針狀體(4.4克，81%產率）。溶點為 113-114°C。 5 [cx]d25= +4.5〇(c= 1% SOLUTION，DMSO)。質譜(-ESI) : 310(M-H)·。 C11H18CINO3S2 之分析：計算值：C，42.37 ; H，5.82 ; N，4.49。實測值：C，42.37 ; H，5.79 ; N，4.38。 10 E. 5-氯-N-[(lS)-2-乙基-1-甲醯基丁基]噻吩_2_胺石黃醯將重鉻酸紕錠(2.4克，6.4毫莫耳)添加到一含有5-氯-N-[(lS)-2-乙基小(羥基甲基）丁基]_2_噻吩胺磺醯(〇·5克， 1.6毫莫耳)於CH2Cl2(20毫升)之溶液中。18小時後，將反應混合物經由一寅氏鹽塞過濾。將濾液濃縮並將產生的殘 15質藉由矽膠管柱色層分離法(洗提液：1 : 4 EtOAC-己烷)予以純化得到5-氯[(1 S)-2·乙基小曱醯基丁基]喧吩-2-胺磺酿之白色固體(303毫克，61% )。 [a]D25= + 136.76°(c= 1% SOLUTION，CHC13)。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製質譜(-ESI) : 308(M-H)-。 20 CnHwClNO^ 之分析：計算值：C，42.64 ; H，5.21 ; N，4.52。實測值：C，42.57 ; H，5·24 ; N，4.52。實例』 -34- 本紙張尺度適用中幽囤冢標準(CNS)A4規格（21〇χ297公釐） A7 1260316 B7 五、發明說明（33) 方法2 5-氣-N-[(lS)-2-乙基-1-曱醢基丁基]喧吩-2-胺石黃醢 A· (2S)-3-乙基-2_{[(1S)-1-苯基乙基]胺基}戊腈於含(S)-(-)-a-甲基苄基胺氫氯酸鹽（ι·2克，7.6毫莫耳) 5 之80毫升1 ·· 1 MeOH/E^O中將氰化鉀(〇·5克，7.6毫莫耳)及2-甲基丁醛(0.94毫升，7.6毫莫耳)加入。於30分鐘後形成一沉澱。於20小時後，將懸浮液過濾並用h2〇清洗得到（2S)-3 -乙基-2-{[(lS)小苯基乙基]胺基}戊腈之白色粉末(1·29 克，74% )。 10 質譜(+ESI) : 310(Μ+Η)+。 C15H22N2之分析：計算值：C，78.21 ; Η，9.63 ; Ν，12.16。實測值：C，77.90 ; Η，9.75 ; Ν，12.32。 Β. 3-乙基-N2-[(1S)-1-苯基乙基]原纈胺酸醯胺 15 於〇°C時，將(2S)各乙基-2-{[(lS)-l-笨基乙基]胺基} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製戊腈(2.7克，11.6毫莫耳)逐份的加到25毫升之硫酸中。將混合物回暖至25°C。2天後，將反應混合物倒至約100 克碎冰中。將濃NH4OH加入以中和酸。將此混合物用 Et〇Ac(3x 100毫升）萃取，於Na2S〇4上乾燥，過濾出來並 20 濃縮得到3-乙基-N2-[(1S)-1 -苯基乙基]丄-原_胺酸醯胺 (2.6克，90% )，其未經進一步純化即進用於下個步驟。質譜(+ESI) : 249(M+H)+。 c15h24n2o 之分析：計算值：C，72.54 ; H，9.74 ; Ν，11·28。 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 Α7 Β7 五、發明説明（34) 實測值：c，72.24 ; H，10.04 ; N，11.01。 C. 3-乙基-L-原纈胺酸醯胺將一含有3-乙基-N2-[(1S)-1-苯基乙基]原纈胺酸酿胺(2.6克，1〇·5毫莫耳)及5% Pd/C(800毫克)之混合物於3 5 大氣壓之帕爾裝置中振盪24小時。將混合物經由一寅氏鹽塞過濾出來並將溶劑於真空中移除，得到3-乙基小原纈胺酸醢胺之白色固體（1·4克，93% )，其未經進一步純化即用於下一個反應中。質譜(+ESI) : 145(Μ+Η)+。 10 D. Ν-[(5-氯-2-喧吩基)續醯基]-3-乙基原綠胺酸將3-乙基-L-原纈胺酸醯胺（1.2克，4.8毫莫耳)溶解於濃HC1(10毫升）中並加熱至i〇〇°c達16小時。將反應混合物濃縮成一包括胺基酸氫氯酸鹽及1當量NH4C1之白色固體，其未經純化即使用於下一個步驟中。 15 將胺基酸氫氣酸鹽與1當量之NH4C1(0.28克，1.19毫經濟部智慧財產局員工消費合作社印製莫耳)溶解於6毫升Ηβ中且然後加入NaOH(0.24克， 6.00毫莫耳）。將溶液冷卻至〇〇c且然後將含於6毫升THF 之氯噻吩-2-續醯氣(〇·29克，1.32毫莫耳)逐滴加入。將此a物回暖至25 C。19小時後，於真空中將THF移除。 2〇將剩餘的溶液用10毫升Ηβ稀釋並用EtOAc(2x 10毫升) /月洗。將溶液用IN liCl予以酸化並形成一沉澱。將其過濾出來得到N_[(5_氯-2-噻吩基)磺醯基]-3-乙基-L-原纈胺酸之白色固體(〇·17克，44% )。手性HPLC指出僅出現S鏡像異構物。 -36·* t^®Si^(CNS)A4 ^ (210x297 ^^'7 A7 B7 1260316 五、發明說明（35) 然後根據實例1之方法1由N-[(5-氣-2-噻吩基)續醯基]-3_乙基-L-原纈胺酸製備5-氯乙基-l-(經基甲基）丁基]_2_噻吩胺磺酷及5·氯-N-[(is)-2-乙基小曱醯基了基]噻吩-2-胺磺醯。 5 實例3 5-氯-N-[(lS)-2-乙基-1-(羥基甲基）丁基噻唑胺磺醯經濟部智慧財產局員工消費合作社印製於一裝設有氮氣通入管，機械攪拌器，及一具有塞手之添加漏斗的3升3頸燒瓶中加入氫硼化鋰（145毫升之於 10 THF的2M >谷液，0.29莫耳）。將溶液置放於氮氣中姐冷卻至0 C。將氯三曱基石夕烧(73·8毫升，〇·58莫耳)於30分鐘之期間逐滴加入。將冰浴移除且將產生的生料於25。〇攪拌30分鐘。將反應混合物冷卻至〇它且將根據美國臨時專利申請案第60/339,264號所製備之3-乙基-L-原纈胺酸以 15固體型式於15分鐘期間逐份的加入。將反應混合物於冰浴溶化時緩緩的回暖至25°C。於25°C達3天之後，將反應混合物冷卻至〇。〇，並於80分鐘期間將甲醇(217毫升) 小心的加入。將溶液於25°C再攪拌40分鐘，然後於6(TC 減壓之水浴中濃縮。將產生的生料用20%氫氧化鈉（37.5 20 毫升）予以鹼化。將水(37.5毫升)加入，並將整個含水層用二氣曱烧(300毫升)清洗，並乾燥(Na2S〇4)。於減壓下濃縮得到呈一油之3-乙基-L-原纈胺醇（17.3克，91% )，其係立即使用或儲存於冰箱中過夜：Opt. R〇t· [a]D =-3.7°(i% solution ^ DMSO)； -37- 本紙張尺度適用中關豕標準(CNS)A4規格（210x297公爱） 1260316 a7 B7 五、發明說明（36) !Η NMR (DMSO-d6，500MHz) : δ = 4·38 (廣域 s，1H)， 3.35((1(1與一廣域8於8 3.32重疊，1 = 4.5，10.3 1^，311)， 3.14 (dd，J 二 7.9，10.2Hz，1H)，2.63 (m，1H)，1·45 - 1·05 (m， 5Η)，0·82 及 0.81(兩個重疊之三峰，J = 7·4Ηζ，6Η); 5 質譜(+ESI) : [Μ+Η]4*，132(60% )。將一含有3-乙基原纈胺醇(34.1克，0.26莫耳)及二氯曱烷(700毫升)之混合物置於氬氣中，並冷卻至0°C。將三乙胺(36.2毫升，0.26莫耳)加入，接著將含於二氣曱烷 (400毫升）之5-氯噻吩-2-磺醯氯(56.4克，0.26莫耳)逐滴 10 加入。將反應混合物於冰浴溶化時缓緩的回暖至25°C。於 25°C達3天後，將反應混合物分成兩個0.6升之部分。將每一部分用醋酸乙酯（1升）稀釋，並用飽和磷酸鉀一水合物(200毫升）清洗三次，用鹽水(200毫升）清洗一次，並乾燥(Na2S04)。於減壓下濃縮得到一白色固體（74.5克，92 15 % )。將來自數個路線之產物（87.98克）合併且由熱庚烷：醋酸乙酯（4 : 1，775毫升）中再結晶出來得到標的化合物結晶（74.9 克，85% )。熔點為 115-117.6°C ; Opt· Rot. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 [a]D25 = + l〇.81°(l% solution ’ MeOH); 20 ]H NMR (DMSO-d6 ^ 500MHz) ： δ = 7.71 (d，J = 8·1 Hz， 1H)，7.44 (d，J = 4·1 Hz，1H)，7.22 (d，J = 4.1 Hz，1H)，4.56 (t， J = 5·2 Hz，OH)，3.31 — 3.15 (m，3H)，1.40 — 1.15 (m，4H)， 1.07 (m，lH)，0.79 及 0.76(兩個重疊之三峰，J = 7.3 Hz， 6H)； -38- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） A7 1260316 B7 五、發明說明（37) 13C NMR DMSO-d6, 100 MHz) ： δ 141.75, 133,73, 130.95， 127.60, 60.41，56.89, 41.57, 21.31，20.80, 11.79, 11·51; MS (-ESI) : [Μ-Η]_，1 氣同位素型式，310 (100% )，312 (30 〇/〇 )， 5 CnH18ClN03S2 之分析：計算值：C，42.37 ; Η，5·82 ; N，4.49。實測值：C，42·34 ; Η，5·65 ; N，4.43。手性 HPLC(Chiralpak AD，25x0.46 公分，洗提液 8 ·· 2 含有0.1% THF之己烷/異丙醇，流速0.5毫升/分鐘，於254 10 毫微米做UV偵測，S及R異構物之維持時間分別為 10.95分鐘及11.95分鐘）揭示S/R比例為100.0 : 0·0。實例4 5-氣-N-[(l S)-2-乙基-1-(1-經基乙基）丁基]0塞吩-2-胺石黃酿

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 將一含有甲基溴化鎂（1.4M，7.0毫升，9.7毫莫耳)於甲苯/THF(75 : 25)之溶液加到一含有5-氯-N-[(lS)-2-乙基-1-甲醯基丁基]噻吩-2-胺磺醯(實例1或2，1.0克，3.2毫莫耳)於THF(30毫升）之溶液中。將混合物回暖至25°C且於2小時後小心的用飽和含水氯化銨(25毫升)驟冷。將混 -39- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） " ' 1260316 B7 五、發明說明（Μ 10 合物用EtOAc(3x 25毫升）萃取。將有機萃出物於Na2S〇4 上乾燥’過濾並濃縮得到一無色油。將產物藉由管柱色層分離法(Biotage)予以純化，洗提液：1 : 4 EtOAc-己烷，而得到5-氣-N-[(lS)-2-乙基-1-(1-羥基乙基)丁基]噻吩_2_胺續酿之白色固體(876毫克，83% )。產物為3 : 7比例之非對映立體異構混合物。熔點為95-98T：。 c12h2gcino3s2 之分析：計算值：C，44.23 ; H，6.19 ; N，4.30。實測值：C，44.25 ; H，6.35 ; N，4.29。質譜(-ESI) : 324 (M-Η)·。 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 分析條件 Α·半-製備性RP-HPLC條件：含 Unipoint Software 之 Gilson Semi-Preparative HPLC 系統管柱：Phenomenex C18 Luna 21.6 毫米X 60 毫米，5μ 溶劑A :水(〇·〇2% TFA緩衝液）溶劑B ··乙腈(0.02% TFA緩衝液）溶劑梯度：時間0 : 10% B ; 2.5分鐘：10% B ; 14分鐘： 90% B。流速· 22.5毫升/分鐘根據UV吸收收集產物高峰並濃縮。 B· 分析性LCMS條件：含 ChemStation Software 之 Hewlett Packard 1100 MSD 管柱：YMC ODS-AM 2.0毫米χ 50毫米，5μ管柱於23 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 A7 Β7 五、發明說明（39) °C ; 3μ微升注射；溶劑A :水(0.02% TFA緩衝液）溶劑B :乙腈(0.02% TFA緩衝液）梯度：時間0 : 95% A ; 0·3分鐘：95% A ; 4.7分鐘：10% 5 A ; 4.9 分鐘：95% A。流速：1.5毫升/分鐘；偵測：254毫微米DAD ; API-ES Scanning Mode Positive 150-700 ； Fragmentor 70 mV o 10 C.分析性LCMS條件： ZMD (Waters)或 Platform (Micromass)或 LCZ (Micromass) 管柱：Zorbax SB-C8 溶劑：乙腈+ H20(含有0.1% TFA或0.1% FA) 梯度：2.5分鐘15%乙腈-95%乙腈 15 流速· 3愛升/分鐘偵測：ELSD 偵測(SEDEX55) UV 253 貞測（Schimadzu) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製實蓋.6 -壓制劑釋放分析（RRA) 20 將如實例1至4中之說明所生成的化合物根據已公開之技藝進行RRA測試[蘇伊，D.J·，徐飛，P·，瓊斯·， D·，柯齊，M.I·，及昆内，Ε·Μ·(1999)，，，壓制劑釋放：一種監控哺乳類細胞中澱粉狀朊先質蛋白質（ΑΡΡ)解朊作用之有用的工具”，神經科學摘要學會，第25冊，神經科學 -41- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（21〇χ297公釐） 1260316 a? B7 五、發明說明（4〇 ) 學會第29次年會，邁阿密海灘，佛羅里達州，1999年10 月23-28日]。簡言之，此分析係如下進行。 A. 細胞培養將CHO-K1細胞於37°C含5% C02之完全DMEM介 5 質（DMEM -含10%牛胎兒血清，1%非必須胺基酸，及1 °/〇青黴素-鏈黴素)之高葡萄糠中培育。於轉染之前24小時將二百萬個細胞劃至10-公分培養盤中。短暫的轉染係如Gibco BRL所推薦，用其Lipo-fectamine Plus系統來完成。首先，將6微克pRSVO-luc 10 及6微克APP-lacI構築DNA添加到460微升Opti-Mem 轉染介質中並用30微升Plus試劑培育15分鐘。然後，將一含有40微升Lipofectamine試劑及460微升〇pi-Mem轉染介質之脂肪混合物與DNA-Plus試劑混合物培育15分鐘。於DNA-脂肪培育之期間，將CHO-K1細胞清洗一次 15且覆盍於5·〇 t升不含青徽素-鏈徽素之DMEM介質中。然後將DNA-脂肪製劑層覆於這些細胞上並於37它培育過夜。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製將每一孔中1至1.5百萬轉染細胞（1〇〇微升總體積）劃線到於澄清DMEM完全介質（DMEM_不含苯酚紅）之無 20菌，不透明Packard 96_孔培養盤上並於37。(：含5% 〇〇2時培育3-5小時。。 2、 B. 化合物稀釋將化合物用兩種不同的程序稀釋；一種程序係用於供應不含溶劑之化合物（用管瓶稱粉末重）而另-程序則係用 -42-

1260316 A7

盤^物（2〇福於廳0於96孔培養 H :私序中’製備新鮮的25mM Hepes及25mM 所古认—MS〇以用作為稀釋劑，該Hepes/ DMSO係於所有的貫驗培養财料為稀釋控制劑。化人札表係、。己达化合物稀釋之步驟(請注意最後—步驟為將化“勿添加到於組織培養盤上之細胞/介質中)：

稀釋 X毫克化合物(管瓶）用100% DMSO稀釋 20微升儲備溶液~~ 180 微升 25mM Hepes 稀釋3(於細胞培養盤） 2〇〇微克/亳升 20微克/毫升 60微升稀釋1 240 微升 5mMHepes 毯— 10亳克/毫升' 1毫克/毫升 11.3微升稀釋2 (於100微升細胞/孔）由於些化合物於20mM時在96-孔格式得到結果， ο 1—-*- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製】係代表其稀釋之程序（請注意這些化合物之平均分子 ®係用來計算這些稀釋且，如上所述，最後一步驟為將化合物添加到於組織培養盤上之細胞/介質中）：濃度稀釋儲備溶液 20mM溶液〜200微克/毫升 6微升儲備溶液 194 微升 25mMHepes 〜20微克/毫升 11·3微升稀釋2 —^—~__ (於100微升細胞/孔） -43- 丨國家^)A4規格（210 X297公叠了 1260316 Α7 _______ Β7 五、發明說明（42) 一旦化合物被稀釋，將其施用在組織培養盤(如上製備) 之細胞上重複兩次。於37t：含5% c〇2時，將細胞用化合物再培育36-48小時。 C · 分析測量 5 進行發光酶分析（LucLite試劑，Packard)且於一

Packard TopCount儀器讀取。由每一 96-孔培養盤中移除介質並於每一孔中用100微升pBS代替（含Mg+2及 Ca+2)。將等體積（1〇〇微升)之LucLite溶解/酶解物緩衝液添加到每一個孔中，並於室溫時將培養盤密封並於黑暗中 10於凝轉振後态上混合15-30分鐘。然後於TopCount儀益上進行發光酶讀取。測量值係以相對光單位(RLU)表示及計算且如下於MS Excel分析。 D•分析數據經濟部智慧財產局員工消費合作社印製關於本文中舉例說明之化合物的分析結果係提供於下 15表中。如果一化合物於20微W/毫升造成發光酶活性至少提咼1·5倍且不具有毒性，如藉由訊號消失來測定(提高^ 〇·75倍），該化合物則被認定為在RRA具有活性。αΑΑ。 SEM代表倍數提南平均之標準偏差（未顯示）。得知所有的測試化合物均為無毒性。 20 表

Ex# 濃度（微克/ 亳升） APPI提高倍數 ' 一 1-3 20 4.9 5-氣-N-[(lS)-2-乙基-1-甲醯基丁羞1!|_吩-2-胺磺醯 4 20 7.2 5-氣-N-[(lS)-2-乙基-1-(1-經基乙 9.7 •^1^]噻吩-2-胺磺醯 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） A7 B7 1260316 五、發明說明（43 於本文中所引用之所有公開案係合併於本文中作為參考。雖然本發明已用特別佳的具體例來說明，應瞭解的是可不脫離本發明之精神而做成變化例。此等變化例係涵蓋在所附申請專利範圍之範疇中。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -4 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims

1260316 —------ 六、申請專利範圍 A8 ^ ^ B8 專利申請案第91135621號 r〇 ROC Patent Appln. No.91135621 修正後無劃線之申請專利範圍中文本—附件(三） fj-Q _Amended Claims in Chinese - F.nr.1 (ττη 7 (民國95年2月10曰送呈) (Submitted on February 10,2006) • 一種製備手性純(chirally pure) α-胺基酸或其鹽之方法，其包括下列步驟： (a)將醛及氰化物鹽與手性α -曱基苄胺或其鹽進行反應並過濾得到產物(i); 5 (b)使強無機酸與產物(i)進行反應； (c) 將反應步驟(b)之酸中和； (d) 將產物(ii)由該經中和之酸中萃取出來； (e) 於催化劑存在之下將產物氫化而得到產物㈣；且 (〇將產物(iii)於強含水酸中水解得到手性純α -胺基酸之鹽。 2·如申請專利範圍第1項之方法，其另包括將手性純 α -胺基酸之鹽中和以得到手性純_胺基酸。 3·如申請專利範圍第1項之方法，其中，反應步驟(a)係 15 繼續進行12至24小時。 4. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，反應步驟0)生成一個含有沉澱之懸浮液且另外包括將懸浮液過濾並用水清洗濾出物而得到一粉末之步驟。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 5. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該氰化物鹽係 2〇選自亂化鈉及氰化卸。 6·如申請專利範圍第1項之方法，其中，該強無機酸為硫酸。 7·如申睛專利範圍第6項之方法，其中，當加入產物⑴ 時，硫酸之溫度為〇。〇。 -46 - 91529B-接本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公羞） 1260316 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 8. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，強無機鹼係使用於中和步驟(c)中且為氫氧化銨。 9. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該萃取步驟係使用醋酸乙酯作為萃取劑，且其中，該步驟另外包括 5 乾燥，過濾，及濃縮之步驟以得到產物(ii)。 10. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，於氫化步驟(e) 中之催化劑為把。 11. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，於氫化步驟(e) 中該混合物係加壓至3大氣壓。 10 12.如申請專利範圍第1項之方法，其中，該水解步驟(f) 係於100°C之溫度進行。 13. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該氫化步驟(e) 中另外包括將混合物過濾及移除溶劑之步驟。 14. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該水解步驟(f) 15 係進行16小時期間。 15. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該水解步驟(f) 另外包括將所產生的反應混合物濃縮而得到包含胺基酸氫氣酸鹽及1當量氯化銨之產物的步驟。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 16. 如申請專利範圍第15項之方法，其另外包括將該包 20 含胺基酸氫氯酸鹽及1當量氣化銨之產物溶解於水中並加入氫氧化鈉以形成一溶液之步驟。 17. 如申請專利範圍第1項之方法，其中，該手性α-胺基酸具有式（R)2CH(CH2)nCH(C02H)NHR’，其中，η 為0至10 ; R係選自包含下列之基團：Ci至C6烷 -47 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 Α8 Β8 C8 D8 六、申請專利範圍基，經取代之Cl至Q烷基，C2至G烯基，經取代之C2至C6稀基，C2至C6炔基，經取代之c2至〇6級炔基’ C3至C8環烷基，經取代之Q至c8環烷基，本基，經取代之苯基，辛基，經取代之节基，ch2 c3 5 至C8環烷基，CH2_3-吲嘴，CHCCi至C6烷基)-2-吱喃，CH(Cj C6烷基)_4_甲氧基苯基，cH(Cd (：6烷基)苯基，或CH(OH)-4-SCH3_苯基；且R，係選自包含下列之基團：Η，（:丨至C6烷基，經取代之（^至（：6烷基’ C2至C6烯基，經取代之c2至C6稀基，（：2至c6 10 快基，經取代之C2至C6炔基，c3至c8環烷基，經取代之C3至C8環烷基，雜環基，經取代之雜環基，本基’經取代之苯基，辛基及經取代之辛基。 18· —種製備手性2-胺基醇之方法，該方法包括下列步驟： 15 根據申請專利範圍第1項製備手性α-胺基酸；將α -胺基酸還原為2-胺基醇；及將2-胺基醇再結晶得到手性純2_胺基醇。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 19· 一種將具有万-分支烷基取代基之Ν-磺醯基α-胺基酸解析以用於製備一手性純Ν-磺醯基α-胺基酸之方 20 法，其包括下列步驟： (a)於乙醇中以1 : 1之莫耳比例形成一手性純麻黃素半水合物及N-磺醯基胺基酸之混合物，其中，該Ν-磺醯基α-胺基酸係選自包含Ν-磺醯基 /5-乙基原纈胺酸，Ν-磺醯基纈胺酸，及Ν-磺醯 -48 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍基/3-正丙基原白胺酸； (b) 將步驟(a)之混合物加熱至80°C以溶解固體； (c) 將混合物冷卻以形成一沉澱； (d) 將沉澱過濾出來而得到一非對映立體異構鹽； 5 (e)將該非對映立體異構鹽再結晶出來； (f) 將該再結晶鹽於一有機溶劑及強含水酸中溶解並將各層分離而得到一有機萃出物； (g) 將該有機萃出物清洗；及 (h) 將該有機萃出物乾燥並濃縮得到手性純N-磺醯 10 基α -胺基酸。 20.如申請專利範圍第19項之方法，其中，該Ν-磺醯基乙基原顯胺酸為Ν-[(5-氣-2-ϋ塞吩基)石黃酿基]-3 -乙基原纈胺酸；且其中於步驟（d)中，該沉澱係用乙醇及醋酸乙S旨清洗而得到一非對映立體異構鹽。 15 21.如申請專利範圍第19項之方法，其中，該冷卻步驟係於5°C中進行18小時。 22. 如申請專利範圍第19項之方法，其中，該冷卻步驟係於室溫進行。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 23. 如申請專利範圍第19項之方法，其於冷卻步驟之後 20 另外包括將所形成之懸浮液過濾的步驟。 24. 如申請專利範圍第19項之方法，其中，該再結晶步驟係於沸騰之醋酸乙酯中進行。 25. 如申請專利範圍第19項之方法，其另外包括將再結晶鹽過濾出來之步驟。 -49 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1260316 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 26. 如申請專利範圍第19項之方法，其中，該有機萃出物係用HC1清洗。 27. 如申請專利範圍第19項之方法，其中，該有機萃出物係用Na2S04乾燥。 5 28. —種製備手性N-磺醯基2-胺基醇之方法，其包括下列步驟：根據申請專利範圍第19項製備手性N-磺醯基胺基酸；將該Ν-磺醯基α-胺基酸還原為Ν-磺醯基2-胺基醇； 10 及將該Ν-磺醯基2-胺基醇再結晶得到手性純Ν-磺醯基 2-胺基醇。 29.如申請專利範圍第28項之方法，其中該Ν-磺醯基α-胺基醇為式(I)，或其製藥上可接受的鹽，其中，式(I) 15 具有下列結構式：

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製其中： R!及R2係各自獨立選自包括下列之基團：氫，烷基，經取代之烷基，CF3，烯基，經取代之烯基， -50 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1260316 六、申請專利範圍 A8 B8 C8 D8 炔基’經取代之炔基，c3至c8環烷基，經取代之 C3至C8環烷基，苯基，經取代之苯基，及 (CH2)n(l，3)二口咢烧，其中，η 為 2 至 5 ; R3係選自包括氫，烷基，及經取代之烷基之基團； R4係選自包括氫，烷基，經取代之烷基，烷基環烷基，經取代之烷基環烷基，苯基(經取代之)烷基，烷基ΟΗ，經取代之烷基〇Η，烷基〇_苄基，經取代之烷基0-苄基，烷基吡啶基，經取代之烷基吡咬基’烧基呋喃基，經取代之烷基呋喃基， CH(OH)苯基，CH(〇H)經取代之苯基，烯基，經取代之稀基，C3至C8環烧基，經取代之c3至c8環烷基，N-經取代之-六氫吡啶基，六氫吡啶基，經取代之六氳吡啶基，四氫噻哌喃基，經取代之四氫噻哌喃基，2-氫茚，經取代之2_氫茚，苯基，經取代之笨基，烷基NHR7，及經取代之烷基 NHR7 ; 土但R3及R4不同時為氫； R7為烷基，經取代之烷基，A至Q環烷基，經取代經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 101520 之C3至C8環烷基，苄基，經取代之苄基，烷基〇H，經取代之烷基〇H，烷基SRs，或經取代之^ 基 SR8 ; R8為烷基，經取代之烷基，苄基，或經取代之辛基；或R3及R4可一起形成一環； -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） ' '' --- 1260316 六、申請專利範圍 A8 B8 C8 D8 R5係選自包括氫，c〗至c6烷基，矣烷基，烯基，經取代之烯基，炔基，經取代之炔基，ch2 <:3至c8環烷基，經取代之CH2 Cs至Cs 環烷基，苄基，經取代之苄基，及CHfHtQR9 ; Q 為 Ο，NH 或 S ; 厌9為（^至c6院基，經取代之（^襄烧基’苯基，或經取代之苯基； R6係選自包括氫，鹵素及Cf3之基團； τ係選自包括下列之基團 10

及 :N OH 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 ^ y及z係各自獨立選自包括下列之基團：c， CR10 及 N ; 係選自包括氫及鹵素之基團，但至少一個w，、及z必須為C ; X係選自包括〇, S ’ so2，及NR"之基團； Rllf選自包括下列之基團：氫，CdC6院基，經单代之q至c6烧基，+基，經取代之辛基，苯基，及經取代之苯基，但是當化合物含有-個或多個手性中心時，至少該 30如基酸·衍生之手性中心必須為S'立體化學。〜 •:::專利範圍第29項之方法，其中〜為齒素。 .如惝專利範圍第29項之方法，其中R6為氣 -52 - 六、申請專利範圍 32.如申請專利範圍第29 邮邮丨尺2且R丨及&各二之方法，其中T為 33·如申請專利範圍第2 ‘、、、氧。 C。方法，其中W及z均為 34.如申請專利範圍第29項之學之 <：丨至（：6烷基。 '，其中心為S-立體化 35·如申請專利範圍第29項之 10 c，z為c，R0為函素，心為’其中X為S，W為烷基，R3為氫，'、’、 ·立體化學之（^至匸6 36·如申請專利範圍第29且^及化各為氫。基。、万法，其中R3CR4為環己訂 37. 如申請專利範圍第29項之方法，吡。定或N-經取代之六氫吼咬。、中仏取為-虱 15 38. 如申請專利範圍第29項之方法，其中， W，Y&Z獨立為C或CR丨。。〃 ‘ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製