TW570800B - Agents protective against hepatopathy - Google Patents

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 570800 A7 B7 五、發明說明（1 ) 技術分野 本發明係關於防禦肝障礙用劑。更詳細爲與含有香菇 菌絲體萃取物的藥物之防禦肝障礙用劑有關。 過去技術 香菇（Lentinus edodes)爲日本與中國的代表性食用菇 ，於日本早在3 0 0年前便實行人工栽培，日常所食用的 香菇被稱爲子實體，其爲菌類爲存留子孫爲目的產生孢子 之生殖器官，營養體的菌絲細胞則於地中或原木中經長時 間形成菌絲體。 香菇自古即被認爲對各種疾病或症狀有效果，但其；〇 藥理效果與藥效成分僅於最近才解明，例如有報告指出， 對於小白鼠與家鼠的發癌實驗，動物的大腸與肝臟等的腫 瘤形成以及移植腫瘤細胞之增値具抑制作用，提升動物的 生存率（N. Sugano，et al.，Cancer Letter，17: 109，1982; 鈴木康將等，日本大腸肛門病會誌，43 :1 7 8、1 990等）以及顯示 促進細胞分裂劑效果（T. Tabata. et al.，Immunopharmacology ，24:57，1 992; Hibino, et al., Immu nopharmacology, 2 8: 77 ，1 994)等。增加抗體的產生，經由抗體藉八0(：0^1^113〇〇1^ d e p e n d e n t c e 11 - m e d i a t e d c y t 〇 t ο X i c i t y)顯示對免疫學上對肝 細胞障礙有著抑制效果（溝口靖紘們，肝膽脾、1 5:1 27,1 9 87 ) 等種種報告。其他亦有報告出香菇菌絲體萃取物對發根促 進、農作物的成長促進等具植物賀爾蒙作用（“.1^1〖8111^3}1丨-Kato et al·，Plant Cell Physiol. 26:22 1，1 98 5)或抗植物病 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） ^ --i-----^----^ --------訂-----_-----線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 570800 A7 B7 五、發明說明（2 ) 毒作用（小室康雄：農林水產植物病毒硏究報告，1 977)。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明的目的爲對香菇菌絲體萃取物的藥理作用作更 詳細的解明，探索香菇菌絲體萃取物的新醫藥用途或保健 用途。 發明的揭示 本發明者爲解決上述的課題，詳細硏究的結果’發現 香菇菌絲體萃取物以藥物對肝障礙，顯示有著顯著的防禦 效果，於是完成本發明。 即，本發明提供一種對肝障礙的防禦劑之藥物’其含 有香菇菌絲體萃取物。 本發明的藥物之肝障礙防禦劑係，食有香菇菌絲體萃 取物以及作爲任意成分之藥學上可容許的載體’僅其藥物 對肝障礙的治療用以及/或預防用組成物的形式即可。 又，藉本發明的藥物之肝障礙防禦劑，以食品的形式 亦可。 且，藉本發明的藥物之肝障礙.防禦劑，以飮料的形式 亦可。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 更進一步，但不限定於這些型態。 本發明更係提供一種藥物的肝障礙防禦方法’其係投 與香菇菌絲體萃取物方式所成。 提供一種製造藉藥劑的肝障礙防禦劑之香菇菌絲體萃 取物的使用。 ^紙張度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公釐) ' 570800 A7 -B7 五、發明說明（3 ) · 亂画的簡單說明 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 圖1爲表示使用老鼠初代培養肝細胞，於（ i n v i t r i 〇 )試驗作香蘇菌絲體萃取物的肝障礙防雙試驗結果 之圖。 圖2爲表示使用C C 1 4所誘導的老鼠肝障礙’於體 (in v i v 〇 )試驗作香菇菌絲體萃取物的肝障礙防禦試驗結 果之圖。 圖3爲表示對於藥劑性肝障礙的人類患者之試驗’作 香菇菌絲體萃取物的肝障礙防禦試驗結果之圖。 實施發明的最佳型態 使用於本發明藥物的肝障礙防禦劑之香菇菌絲體萃取 物，係指將香菇菌於固體培養基上培養所得的菌絲體 '較 佳爲含有菌絲體的固體培養基於水以及酵素存在下’粉碎 、分解所得的萃取物而言。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 香菇菌絲體萃取物，較佳爲使用以下的方法所得者’ 但不以此限定。即，蔗渣（甘蔗的榨粕）與脫脂米糠爲基 材的固定培養基上接種香菇菌，菌絲體增殖後，含有菌絲 體增殖的固體培養基通過1 2篩孔（每平方英吋孔眼數） 使其解開成3 0重量％以下的通過量。 此解開的固體培養基中將水與選自於碳水化合物分解 酵素、蛋白質分解酵素或葡糖苷酶中的一種或種以上的酵 素保持3 0 - 5 5 °C的溫度，添加於前述的固體培養基中 ，同時前述固體培養基於前述酵素存在下絞碎、禱碎至少 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 570800 Α7 ___ Β7 五、發明說明（4 ) 以7 0重量％以上通過1 2篩孔的程度。其次加熱至9 5 °C溫度使酵素失去活性，同時進行滅菌。最後所得的懸浮 狀液體經過濾而得到香蘇菌絲體萃取物。所得的香薛菌絲 體萃取物可直接作爲本發明的防驚劑使用，又可將此濃縮 、凍結乾燥做成粉末保存，使用時可以種種方便的型態使 用。凍結乾燥所得的粉末爲褐色粉末，具吸濕性與特異味 道。 如此所得的香菇菌絲體萃取物以苯酚-硫酸法進行糖 値分析得知含有糖値爲1 5 - 5 0 % (重量/重量）、較 佳爲2 0 — 4 0% (重量/重量）、以洛瑞法（Lowry法） 進行蛋白質分析得知含有蛋白質1 〇 - 4 0 % (重量/重 量）、較佳爲13 - 30 % (重量/重量），以沒食子酸 爲基準的佛隆—丹尼斯法（Folon-Dems法）得知含有聚苯 1 一 5% (重量/重量）、較佳爲2 .5 — 3.5% ( 重量/重量）。香菇菌絲體萃取物中亦含有其他脂質約 0.1% 、纖維約0 · 4 % ，灰份約2 0 % ，但不限於此 〇 其中香菇菌絲體萃取物中所構成的糖組成物（％ )如 以下一例所示，但組成份因培養條件等有所變動：木糖： 15.2;阿拉伯糖：8·2;甘露糖：8.4;葡萄糖 :3 9 · 4 ;半乳糖·· 5 · 4 ;半乳糖胺：1 2 · 0 ;葡 糖醛酸：1 1 · 3。 * 香菇菌絲體萃取物的藥物，對肝障礙防禦效果以以下 方法作實驗的結果，使用老鼠肝細胞的體外試驗、使用 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂--------：線一 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -7- 570800 A7 ___ B7 五、發明說明（5 ) c C 1 4誘導的老鼠肝障礙之體內試驗，以及對藥劑性肝障 礙的人類患者之試驗，任一種試驗皆觀察到顯著的防禦效 果。 本發明的防禦劑係對於，Cefroxadine· Cefuroxime、 Latamoxef Na等Seftem系、硫酸丁胺卡那霉:素等胺配糖體系 ' Aclambicin等的抗腫瘤系、降脂哌啶等的抗酸菌抗生物質 系、四環素、大環內酯系、青霉素系等抗生物質、中樞神 經用藥的阿斯匹林等解熱鎭痛消炎系、Cloxazolam等精神神 經系、Valproate Na等的抗癲癇劑系、三氟溴氯乙烷（ Halothane)等全身麻醉劑系、苯巴比妥等的催眠鎭靜系、綜 合感冒藥系等的藥劑投與所引起的肝障礙、又其他，间哚心 安等心律不整用劑系、TravMH等的血管擴張劑系、 Nicardipine HC1等循環器官用劑系、Labetalol HC1等的降血 壓劑系、心血安等已知的動脈硬化用劑系之循環器用劑系 、且.Tegafur等代謝拮抗劑系或Estracyt等賀爾蒙劑或 Sulfamethoxyazole等的磺胺劑、異菸肼等抗結核劑、 Norfloxacin等的合成抗菌劑等的藥劑投與所引起的肝障礙 、且對於生活環境中所存在的雙酚、鄰苯二甲酸酯、氯化 乙烯單體、壬酸酯、醇類等的環境賀爾蒙所引起的肝障礙 有用。因此，含有作爲香菇菌絲體萃取物以及任意成分於 藥學上容許的載體，可作爲藥物肝障礙治療用以及/或預 防用組成物使用。 投與途徑以經口投與爲最佳，但可使用靜脈內投與、 皮下投與等。經口投與的適合劑型可包含錠劑、膠囊劑、 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂----------線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -8- 570800 A7 _____ · B7 五、發明說明（6 ) 散劑、顆粒劑、溶液劑、糖漿劑等，但不限定於此。 藥學上可容許的載體，可爲斯業者所公知的包含適當 之賦形劑、結合劑、分解劑、滑澤劑、香料劑、著色劑、 溶解輔助劑、懸濁劑、塗佈劑等，但不限定於此。 本發明的防禦劑的投與量考慮到患者的年齡、體重、 症狀、投與途徑等而由醫師、藥劑師、營養師等決定。含 於本發明的防禦劑之香菇菌絲體爲一直作爲食品者，由極 爲安全的事可知，無需對投與量作嚴格的限定，但若換算 成一般香菇菌絲體萃取物粉末，一天爲4 0 m g至6 g， 較佳爲4 0 0mg至1 . 8g，且可與導致肝障礙的藥劑 並用投與而不會形成阻礙。 本發明的防禦劑可以食品的形式提供。較佳的食品形 式爲顆粒、麵類、糖果、果凍、餅乾等可舉出。且，本發 明的防禦劑可以飮料的形式提供。如此的食品，飮料中除 香菇菌絲體萃取物外可再追加維他命劑、鈣等無機成分、 穀聚糖等食物纖維、大豆萃取物等蛋白質、卵磷脂等脂質 、乳糖等糖類。 本發明由以下的實施例作詳細說明，但本發明的範圍 不限定於此。本發明的方法可由斯業者作種種變化或修飾 使用，這些皆包含於本發明的範圍中。 實施例 ’ 實施例1 :調製香菇菌絲體萃取物 蔗渣9 0重量份，米糠1 〇重量份所成的固體培養基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂-----.——：線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -9- 570800 A7 — B7 五、發明說明（7 ) 使其含適當水後，接種香菇種菌，放置於調整溫度以及濕 度的培養室內，使菌絲體增殖。菌絲體於固體培養基下聚 集後，解開蔗渣基材的纖維素束，使其成爲1 2篩孔（每 平方英吋孔眼數）可通過份量爲2 4重量％以下。此解束 之後的培養基1 · 〇 k g中，純水3 · 5 L以及純化的纖 維酵素2 · 0 g，以邊保持固體培養基爲4 〇 °C邊加入， 成爲含有培養基的混合物。 其次’含有培養基的混合物以附有變速齒輪的幫浦一 邊將其循環，一邊將固體培養基於齒輪部分進行粉碎以及 揆爛作用2 0 〇分鐘的程度，使其蔗渣纖維能約以8 0重 量％作爲1 2篩孔的通過份量，含有培養基的混合物進行 粉碎與揆爛爲，邊徐徐上升該混合物的溫度邊實施。其後 ’含有培養基的混合物更加溫至9 0 °C使酵素失去活性同 時進行滅菌，於9 0 °C下放置3 0分鐘。所得的含有培養 基混合液以6 0篩孔濾布過濾作爲香菇菌絲體萃取物，濃 縮後得到凍結乾燥粉末。 實施例2 :使用初代培養的肝細胞進行體外（m vltr〇 )試 驗 1) 老鼠肝細胞的分離以及初代培養 分離老鼠（Wistar，雄、6至8週大）的肝細胞，於 3 7 °C、5 % C 0 2條件下培養一晚。 2 ) 肝細胞的C C 1 4以及被驗物質的處理 所調製出的肝細胞中加上C C 1 4 ( D M S〇溶液：肝 _本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱1 _ 10 _ " " (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------' 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 570800 A7

五、發明說明（8 ) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 障礙誘導物質）以及被驗物質（香菇菌絲體萃取物或對照 物質）以種種的濃度調製出的無血淸培養基5 〇 〇 // ：[, 經2 4小時培養。 3 ) G Ο T活性測定 · 培養液的上淸液移入微量試管中，以1 〇 〇 〇 〇 Γ P m、5分鐘，於室溫下進行離心。此上淸液中的 G〇T活性使用G〇T測定試藥（RicktechGOT IFCC: Beringer manhaym公司製）進行測定。未添加被驗物質的培 養液上淸液之G 0 T活性平均値作爲1 〇 〇時，求得各培 養液上淸液的G 0 T活性之分率，作爲肝障礙強度。結果 如圖1所示。 由圖中淸楚得知，可觀察,到香菇菌絲體萃取物具肝障 礙防禦效果。 實施例3 :使用C C 1 4所誘導的老鼠肝障礙作體內（ i n v i v 〇 )試驗 調製出以含有2 0 %香菇菌絲體萃取物粉末（其他爲 乳糖）之香菇菌絲體萃取物顆粒，對老鼠作7天的投與， ， 檢討C C 1 4誘導的肝障礙防禦效果。投與結束後， C C 1 4投與於腹腔中，引起肝障礙後取腹部大動脈的血液 ，測定血淸中的G〇T、G P T。所得結果如圖2所示。 由圖中淸楚得知，可觀察到香菇菌絲體萃取物具肝障 礙防禦效果。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -ΊΤ- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

--------訂--------—線I 1 ϋ J.. 570800 A7 ____B7_____ 五、發明說明（9 ) 實施例4 :對藥劑性肝障礙的人類患者之試驗 以因藥劑治療導致藥劑性肝障礙症的2名患者（任一 皆已引發倂發症的肺結核病），使其4週間每天攝取香菇 菌絲體萃取物顆粒（含有2 0 %香菇菌絲體萃取物粉末， 其他爲乳糖）6 g。繼續服用肝障礙原因藥劑（乙胺丁醇 、異菸肼、利福平）。4週後由患者的末梢血測定其 G〇T、G P T。所得結果如圖3所示。2例子其G〇T 、G P T皆於基準値內降低。且無顯示副作用。 產業上的利用件 藉含有本發明的香菇菌絲體萃取物的藥物對肝障礙之 防禦劑，對因藥劑投與而引起的肝障礙具有防禦效果，可 使用於預防、治療因藥劑投與引起的肝障礙。本發明的防 禦劑可與引起肝障礙原因的藥劑並用，且由無副作用的事 得知可安全使用，且可期待於大產業上可利用性。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂-----一---τ線1 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） _ 12 -

Claims (1)

1. 570800 A8 B8 C8 D8 修.叫 -» η ! WXi 六、申請專利範圍 第881 20738號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國92年10月17日修正 1 . 一種藥物引起的肝障礙之防禦劑，其特徵爲含有 香？S菌培養於含有蔗渣的固體培養基上所得之菌絲體，於 含有該固體培養基的狀態下，在水及1種以上選自纖維素酶 '蛋白酶及葡糖苷酶所成群的酵素存在下經粉碎、分解所 得之香菇菌絲體萃取物。 2 ·如申請專利範圍第1項的防禦劑，其爲含有香菇 菌絲體萃取物，以及藥劑學上可容許的任意成分之載體， 使用於治療及/或預防對因藥物引起的肝障礙之組成物。· 3 ·如申請專利範圍第1或2項的防禦劑，其以經口 方式投予。 4 ·如申請專利範圍第1項的防禦劑，其爲食品。. 5 ·如申請專利範圍第1項的防禦劑，其爲飮料。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家摞準（CNS ) A4規格（210X297公釐）