KR20010089496A - 간장해 방어제 - Google Patents

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Abstract

표고버섯 균사체 추출물을 함유하는 약물에 의한 간장해의 방어제.

Description

간장해 방어제{PREVENTIVES FOR HEPATOPATHY}
표고버섯 (Lentinus edodes) 은 일본, 중국의 대표적인 식용 버섯으로, 일본에서는 약 300 년전부터 인공재배가 이루어져 왔다. 일상 식용으로 하고 있는 버섯은 자실체라 불려 균류가 자손을 남기기 위해 포자를 발생하는 생식체이고, 영양체인 균사 세포는 지중이나 원목중에서 오랜 시간에 걸쳐 균사체를 형성한다.
표고버섯은 오래전부터 여러가지 병이나 증상에 효과가 있는 것으로 말해져 왔으나, 그 약리 작용이 해명되어 온 것은 비교적 최근이다. 표고버섯 균사체 추출물이 보고되고 있다. 이들은 하기를 포함한다: 레트, 마우스에서의 발암 실험에 있어서, 동물의 대장, 간장 등의 종양 형성 및 식물 종양 세포의 증식을 억제하여 동물의 생존률을 상승시킨 것(N. Sugano 등, Cancer Letter, 27:1, 1985; Y. Suzuki 등, 일본대장항문병회지, 43:178, 1990 등), 마이토젠 활성을 나타낸 것 (T. Tabata 등, 면역약리학, 24:57, 1992; Y. Hibino 등, 면역약리학, 28:77, 1994등), 항체생산을 증강하여 항체를 통하는 ADCC (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity) 에 의한 면역학적 간세포 장해에 억제 효과를 나타낸 것 (Y.Mizoguchi 등, 간담췌, 15:127, 1987), 표고버섯 균사체 추출물에는 발근촉진, 농작물의 성장촉진 등의 식물 호르몬 작용 (M. Mitsuhashi-Kato 등, Plant Cell Physiol. 26:221, 1985) 이나 항식물 바이러스 작용 (Y. Komuro 등: 농림수산성 식물 바이러스 연보고, 1977).
본 발명의 목적은, 표고버섯 균사체 추출물의 약리작용을 더욱 상세하게 해명하여, 표고버섯 균사체 추출물의 새로운 의약 용도 또는 보건 용도를 탐색하는 것이다.
본 발명은 간장해(肝障害) 방어제에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 표고버섯 균사체 추출물을 함유하는 간장해 방어제에 관한 것이다.
도 1 은 레트의 초대 배양 간세포를 사용하는 생체외(in vitro) 시험에서의 표고버섯 균사체 추출물의 간장해 방어 시험의 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2 는, CCl4에서 유도한 레트 간장해를 사용하는 생체내(in vivo) 시험에서의 표고버섯 균사체 추출물의 간장해 방어 시험의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3 은, 약제성 간장해의 인간 환자에 대한 시험에서의 표고버섯 균사체 추출물의 간장해 방어 시험의 결과를 나타낸 그래프이다.
본 발명자들은 상기 과제를 해결하기 위해, 예의연구한 결과, 표고버섯 균사체 추출물이 약물에 의한 간장해에 대하여 현저한 방어 효과를 나타내는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은, 표고버섯 균사체 추출물을 포함하는 약물에 의한 간장해의 방어제를 제공한다.
본 발명의 약물에 의한 간장해 방어제는, 표고버섯 균사체 추출물 및 임의성분으로서 약제적으로 허용할 수 있는 담체를 포함하는 약물에 의한 간장해의 치료용 및/또는 예방용 조성물의 형태이어도 된다.
본 발명의 약물에 의한 간장해의 방어제는 식품 또는 음료의 형태이어도 되지만, 이들 형태에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 또한, 표고버섯 균사체 추출물을 투여하는 것으로 이루어지는, 약물에 의한 간장해의 방어 방법을 제공한다.
또한, 약물에 의한 간장해 방어제의 제조를 위한 표고버섯 균사체 추출물의 용도를 제공한다.
본 발명의 약물에 의한 간장해 방어제에 사용하는 표고버섯 균사체 추출물이란, 표고버섯균을 고체 배지상에서 배양하여 얻어지는 균사체, 바람직하게는 균사체를 포함하는 고체 배지를 물 및 효소의 존재하에 분쇄, 분해하여 얻어지는 추출물을 말한다.
표고버섯 균사체 추출물은 바람직하게는 이하의 방법으로 얻어진 것을 사용하는데, 이것에 한정되지 않는다. 즉, 바가스(bagasse) (사탕수수를 짜고 남은 찌꺼기) 와 탈지 쌀겨를 기재로 하는 고체 배지상에 표고버섯균을 접종하고, 이어서 균사체를 증식하여 얻어지는 균사체를 포함하는 고체 배지를 12 메시 통과분이 30 중량% 이하로 되도록 해속(解束)하고, 이 해속된 고체 배지에 물 및 셀룰라아제, 프로테아제 또는 글루타아제로부터 선택된 효소의 1 종 또는 그 이상을, 상기 고체 배지를 30 ∼ 55 ℃ 의 온도로 유지하면서 첨가함과 동시에, 상기 고체 배지를 상기 효소의 존재하에서 분쇄하고 갈아 바가스 섬유의 적어도 70 중량% 이상이 12 메시 통과분이 되도록 하고, 이어서 95 ℃ 까지의 온도로 가열함으로써 효소를 활성화시킴과 동시에 멸균하여, 얻어진 현탁상액을 여과함으로써 표고버섯 균사체 추출물을 얻는다. 표고버섯 균사체 추출물은 그대로 본 발명의 방어제로 사용하여도 되지만, 이것을 농축, 동결건조하여 분말로 보존하여, 사용시에 여러가지의 형태로 사용하는 것이 편리하다. 동결건조하여 얻어지는 분말은 갈색 분말로, 흡습성이 있고, 특이한 맛과 냄새를 갖는다.
이와 같이 하여 얻어지는 표고버섯 균사체 추출물은 페놀-황산법에 의해 카르보히드레이트를 15 - 50 %, 바람직하게는 20 - 40 % (w/w), 로리(Lowry)법에 단백질을 10 - 40 %, 바람직하게는 13 - 30 % (w/w), 갈산을 표준으로 하는 폴린-데니스(Folin-Denis)법에 의해 폴리페놀을 1 - 5 %, 바람직하게는 2.5 - 3.5 % (w/w) 포함한다. 표고버섯 균사체 추출물에는 그 외에 지질 약 0.1 %, 섬유 약 0.4 %, 회분 약 20 % 를 포함하는데, 이것에 한정되지 않는다.
또, 표고버섯 균사체 추출물의 구성당 조성 (%) 의 일례는 이하와 같지만, 이 조성은 배양 조건 등에 띠라 변동될 수 있다 :
키시로스 15.2; 아라비노스 8.2; 만노스 8.4; 글루코스 39.4; 가락토스 5.4; 가락토사민 12.0; 글루쿠론산 11.3.
표고버섯 균사체 추출물의 약물에 의한 간장해의 방어 효과를 이하의 방법으로 시험한 바, 레트 간세포를 사용하는 생체외 시험, CCl4로 유도한 레트 간장해를 사용하는 생체내 시험 및 약제성 간장해의 인간환자에 대한 시험에 있어서, 모두 현저한 방어 효과가 관찰되었다.
본 발명의 방어제는, 세프록사딘(Cefroxadine), 세푸록심(Cefuroxim) 나트륨, 라타목세프(Latamoxef) 나트륨 등의 세펨계, 황산아미카신 등의 아미노글리코시드계, 아클라루비신(Aclarubicin) 등의 항종양계, 리팜피신(Rifampicin) 등의 항산균 항생물질계, 테트라사이클린계, 마크로라이드계, 페니실린계 등의 항생물질, 중추신경용약인, 아스피린 등의 해열진통소염계, 클록사졸람(Cloxazolam) 등의 정신신경계, 발프로산나트륨 등의 항전간제계, 할로탄 등의 전신마취제계, 페노바르비탈 등의 최면진정계, 종합감기약계 등의 약제의 투여에 의해 일어나는 간장해, 또, 이들 외에, 핀돌롤 등의 부정맥용계, 트라피딜 등의 혈관확장제계, 염산니카르디핀 등의 순환기관용계, 염산라베탈롤 등의 강압제계, 클로피브레이트 등의 동맥경화용계에서 알려진 순환기용약, 또한 테카푸르(tegafur) 등의 대사길항제계나 에스트라사이트(estracyt) 등의 호르몬제나 술파메톡사졸 등의 술파제, 이소니아지드 (isoniazid) 등의 항결핵제, 노르플록사신(norfloxacin) 등의 합성항균제 등의 약제의 투여에 의해 일어나는 간장해, 또한, 생활환경중에 존재하는 비스페놀, 프탈산에스테르, 염화비닐모노머, 노닐산에스테르, 알코올류 등의 환경호르몬에 의해 일어나는 간장해에 유용하다. 따라서, 표고버섯 균사체 추출물 및 임의성분으로서 약제적으로 허용할 수 있는 담체를 포함하는, 약물에 의한 간장해의 치료용및/또는 예방용 조성물로서 사용할 수 있다.
투여경로는 경구투여가 가장 바람직하지만, 정맥내투여, 피하투여 등이어도 된다. 경구투여에 적합한 제제에는, 정제, 캡슐제, 산제, 과립제, 용액제, 시럽제 등이 포함되지만, 이것에 한정되지 않는다.
약제적으로 허용할 수 있는 담체에는, 당업계에서 공지의 적당한 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 착향료, 착색제, 용해보조제, 현탁제, 코팅제 등을 포함하지만, 이것에 한정되지 않는다.
본 발명의 방어제의 투여량은 환자의 연령, 체중, 증상, 투여경로 등을 고려하여 의사, 약제사, 영양사 등에 의해 결정된다. 본 발명의 방어제에 함유되는 표고버섯 균사체는 식품으로서 사용되어온 것으로, 매우 안전한 점에서, 투여량을 까다롭게 한정할 필요는 없지만, 통상 표고버섯 균사체 추출물분말로 환산하여 1 일당 40 ㎎ - 6 g, 바람직하게는 400 ㎎ - 1.8 g 이다. 또한, 간장해의 원인이 되는 약제와 병용하여 투여하여도 지장은 없다.
본 발명의 방어제는, 식품의 형태로 제공할 수도 있다. 바람직한 식품으로서는 과립, 면류, 캔디, 젤리, 쿠키 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 방어제는, 음료의 형태로 제공할 수도 있다. 이와 같은 식품, 음료에는 표고버섯 균사체 추출물 외에, 비타민제, 칼슘 등의 무기성분, 키토산 등의 식물섬유, 대두추출물 등의 단백질, 레시틴 등의 지질, 젖당 등의 당류 등을 추가하여도 된다.
본 발명을 이하의 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명하는데, 본 발명의 범위는 이것에 한정되지 않는다. 본 발명의 방법을 여러가지 변경, 수식하여 사용하는 것이 당업자에세는 가능하고, 이들도 본 발명의 범위에 포함된다.
실시예
실시예 1 : 표고버섯 균사체 추출물의 제조법
바가스 90 중량부, 쌀겨 10 중량부로 이루어진 고체 배지에 순수(純水)를 적당히 포함시킨 후에, 표고버섯종균을 접종하고, 온도 및 습도를 조절한 배양실내에 방치하여, 균사체를 증식시켰다. 균사체가 고체 배지에 만연된 후, 바가스 기재의 섬유소를 해속 하여, 12 메시 통과분이 24 중량% 이하로 되도록 하였다. 이 해속된 배지 1.0 ㎏ 에, 순수 3.5 ㎏ 을 추가하여, 40 ℃ 로 유지하면서 정제 셀룰라아제 2.0 g 을 추가하여 배지함유 혼합물로 하였다.
이어서 배지함유 혼합물을 변속이 부착된 기어 펌프로 순환시키면서, 고체 배지에 기어부분에서 분쇄 및 가는 작용을 200 분 정도 추가하여 바가스 섬유의 약 80 중량% 가 12 메시 통과분이 되도록 하였다. 배지함유 혼합물의 분쇄 및 가는 것은, 이 혼합물의 온도를 서서히 상승시키면서 실행하였다. 그 후 배지함유 혼합물을 더욱 가열하여, 90 ℃ 로 하여 30 분간 방치하였다. 90 ℃ 로의 가열에 의해, 효소를 활성화시키고, 또한 살균을 실시하였다. 얻어진 배지함유 혼합액을 60 메시의 여과포를 사용하여 여과하여 표고버섯 균사체 추출액으로 하여, 농축한 후, 동결건조분말을 얻었다.
실시예 2 : 초대 배양 간세포를 사용하는 생체외 시험
1) 레트 간세포의 분리 및 초대 배양
레트 (Wistar, 수컷, 생후 6 - 8 주) 의 간세포를 분리하여, 37℃, 5% CO2조건하에서 하룻밤 배양하였다.
2) 간세포의 CCl4및 피험물질에 의한 처리
로 조제한 간세포에, CCl4(DMSO 용액 : 간장해 유도 물질) 및 피험 물질 (표고버섯 균사체 추출물 또는 대조물질) 을 여러가지의 농도로 조정한 1) 에서 제조된 무혈청 배지를 500 ㎕ 추가하여, 24 시간 인큐베이트하였다.
3) GOT 활성측정
배양 상등액을 에펜도르프(Eppendorf) 튜브로 옮겨, 10000 rpm, 5 분간, 실온에서 원심하였다. 이 상등액중의 GOT 활성을 GOT 측정시약 (Liqui Tech GOT IFCC : 베링거만하임사 제조) 을 사용하여 측정하였다. 피험 물질을 추가하고 있지 않은 배양액 상등액의 GOT 활성의 평균값을 100 으로 했을 때의 각 배양액 상등액의 GOT 활성의 비율을 구하여, 간장해 강도로 하였다. 결과를 도 1 에 나타낸다.
도 1 로부터 명확한바와 같이, 표고버섯 균사체 추출물은 간장해 방어효과를 나타내는 것이 관찰되었다.
실시예 3 : CCl 4 로 유도한 레트 간장해를 사용하는 생체내 시험
표고버섯 균사체 추출물 분말을 20% 포함하는 (잔여는 젖당) 표고버섯 균사체 추출물 과립을 조제하여 레트에 7 일간 경구투여하여, CCl4유도의 간장해 방어효과를 검토하였다. 투여 종료후, CCl4를 복강내투여하여, 간장해를 일으킨 후, 복대동맥에서 채혈하여, 혈청중의 GOT, GPT 를 측정하였다. 얻어진 결과를 도 2 에 나타낸다.
도면으로부터 명확한 바와 같이, 표고버섯 균사체 추출물은 간장해 방어 효과를 나타내는 것이 관찰되었다.
실시예 4 : 약제성 간장해의 인간환자에 대한 시험
약제 치료에 의해 약제성 간장해를 발증하고 있는 인간환자 2 명 (모두 합병증으로 간결핵을 발증하고 있음) 에게, 표고버섯 균사체 추출물 과립 (표고버섯 균사체 추출물 분말을 20 % 포함하고, 잔여는 젖당) 6 g 을 4 주간에 걸쳐 매일 섭취시켰다. 간장해의 원인 약제 (에탐부톨, 이소니아지드, 리팜피신) 는 계속하여 복용시켰다. 4 주간후에 환자의 말초혈로부터 GOT, GPT 를 측정하였다. 얻어진 결과를 도 3 에 나타낸다. 2명 모두의 GOT, GPT 가 기준치내로 저하되었다. 또, 부작용은 볼 수 없었다.
본 발명의 표고버섯 균사체 추출물을 포함하는 약물에 의한 간장해의 방어제는, 약제투여에 의해 일어나는 간장해를 방어하는 효과를 갖고 있고, 약제투여에 의해 일어나는 간장해의 예방 또는 치료에 사용할 수 있다. 본 발명의 방어제는, 간장해의 원인이 되는 약제의 투여와 병용할 수 있고, 또 부작용이 없는 점에서, 안전하게 사용할 수 있어, 산업상의 이용가능성을 크게 기대할 수 있다.

Claims (7)

  1. 표고버섯(Lentinus edodes) 균사체 추출물을 포함하는 약물에 의한 간장해의 방어제.
  2. 제 1 항에 있어서, 표고버섯 균사체 추출물 및 임의성분으로서 약제적으로 허용할 수 있는 담체를 포함하는, 약물에 의한 간장해의 치료용 및/또는 예방용 조성물인 방어제.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 경구투여하는 방어제.
  4. 제 1 항에 있어서, 식품의 형태인 방어제.
  5. 제 1 항에 있어서, 음료의 형태인 방어제.
  6. 표고버섯 균사체 추출물을 투여하는 것으로 이루어지는 약물에 의한 간장해의 방어 방법.
  7. 약물에 의한 간장해의 방어제의 제조를 위한 표고버섯 균사체 추출물의 용도.
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