TW473477B

TW473477B - Tricyclic compounds useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative diseases

Info

Publication number: TW473477B
Application number: TW085103321A
Authority: TW
Inventors: Adriano Afonso; Joseph M Kelly; Ronald L Wolin
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 1995-03-24
Filing date: 1996-03-20
Publication date: 2002-01-21
Also published as: US5684013A; IL117603A0; CA2216291C; US5703090A; EP0814807B1; HUP9801396A3; IL117603A; AU708244B2; ES2198481T3; AR003936A1; NZ305133A; DE69627993T2; JPH10505102A; MX9707191A; AU5307296A; DE69627993D1; EP0814807A1; ATE239472T1; US5958939A; HUP9801396A2

Description

473477 A7 B7 五、發明説明（1) 1992年7月9日公佈的國際專利公佈編號W〇 92/11034號揭示増進對抗腫瘤劑有抗性的腫瘤對抗腫瘤劑敏感性的方法，此法係同時給予抗腫瘤劑及下式的增效劑：

Y X. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 其中γ'是氫，取代的羧酸鹽或取代的磺醯基。此類增效劑的例包括1 1 - (4 -亞六氳吡啶基）-5 Η -苯并[5，6 ]環七[1，2 - b ] 11比咬’如樂拉泰淀（Loratadine)。在獲得變形勢能時Ras腫瘤蛋白質前體必須於羧基端的四肽的半胱胺酸殘基行法尼基化。所以有人建議催化此改變的酶的抑制劑，法尼基蛋白質轉移酶可用作抗癌劑，用於與R a s有對變形有密切關係的腫瘤。由r a s的變異產生腫瘤的形式常見於多種人類的癌，尤常見於50%以上的結腸及胰臟癌（Kohl etal., Science，Vol. 260，1834至 1837，1993)。此技藝受歡迎的貢獻應是用於抑制法尼基蛋白質轉移酶的化合物。本發明即提供此一貢獻。 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210x 297公釐）訂經濟部中央標準局員工消費合作社印装 i 473477 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

-5 A7 B7 五、發明説明（2 ) . 本發明概述本發明提供一使用下述三環化合物抑制法尼基蛋白質轉移酶（FPT)的方法，此化合物：（i)有效地抑制FpT ,但活體外不抑制香葉基香葉基蛋白質轉移酶I ; (ii)藉爲法尼基受體的變形Ras的形式引起對表形改變的阻斷，但不是藉爲香葉基香葉基受體作用的變形Ras的形式；（iii)阻斷爲法尼基受體的Ras的細胞内活動（processing)，但不阻斷有爲香葉基香葉基受體作用的Ras的細胞内活動；（iv)阻斷培養基内由變形Ras引起的細胞生長。本發明也提供藉給予有效量的本發明化合物抑制細胞（包括變形細胞）不正常生長的方法。細胞不正常生長意謂細胞生長脱離正常調節機制（例如失去接觸性抑制），包括如下的生長：（1)表現活化的腫瘤基因的腫瘤細胞（腫瘤）；（2)腫瘤細胞’其Ras蛋白質因另一基因突變成腫瘤基因的結果而活化；（3)發生不正常Ras活化的其他增生性疾病的良性及惡性細胞。本發明提供式（la)，（lb)及（Ic)化合物，

(lb)

衣紙張尺度適/种_家料（cNS (請先閱讀背面之注意事項再填寫本莧)

473477 Λ7 Β7 五、發明説明（3)

其中： R及R 1係獨立選自Η，（C^-Cy烷基，鹵素，OH，（CrC6y^ 氧基；nh2; (q-c^)烷基胺基；二（(Ci-cy胺基）胺基；cf3; S〇3H ; C〇2R3 ; N02 ; S〇2NH2 ;及 CONHR4 ; (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 R2 是 R5C(0)- ; R5CH2C(0)-，R5C(R6)2C(0)·，R5S〇2-， r5ch2so2-，r5sch2c(o)-，r5oc(o)-，r5nhc(o)-，r5c(o)c(o)-或 r5oc(s)-; R3是（CfCy烷基，芳基； R是（cvcy烷基； R5是（Ci-cy烷基，芳基，芳基（Ci-Cg)烷基，芳基（(：2-(：6)烯基，雜芳基，雜芳基（CrCy烷基，雜芳基（c2-c6)烯基，或雜環烷基；每一 R6獨立代表（(^-(：6)烷基，或二R4基團與其相聯的碳原子構成（c3-c7)碳環形環； η是0或1 ;而虛線代表可視需要出現的雙键；及其醫藥上可接受的鹽。 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 473477 A7 --—_______B7 五、發明説明（4 ) 本發明也提供給予需此治療的哺激私极，取1¾孔動物（例如人）有效量的此三環化合物以抑制腫瘤生長的方法。特別是，本發明提供抑制表現活化的Ras腫瘤基因的腫瘤的生長的方法，此法是給予有效量的上述化合物。可祐加 Λ J』被·抑制的腫瘤的例包括 ’但不限於’肺癌（例如肺腺癌），胰臟癌（例如胰惡性腫瘤，如外分泌月夷惡性腫瘤），、结腸癌（例如結^腸惡性腫瘤，如結腸腺癌及結腸腺瘤），骨髓性白血病（例如急性骨髓内產生的白血病（AML))，甲狀腺濾泡癌，膀胱癌，及骨髓發育不良症狀（MDS)。相信本發明也提供抑制良性及惡性増生性疾病的方法，於此等疾病中Ras蛋白質因其他基因的致瘤突變而不正常地活化（即Ras基因本身並不被突變成致瘤形式而活化），此種抑制係以給予需此治療的哺乳動物（例如人）有效量的此一環化合物元成。例如，良性增生性神經纖維瘤或其他 Ras因路胺酸激酶腫瘤基因（例如neu，肌，伽，lck，lyn , fyn )突變或過度表現而活化的腫瘤，可以此處所述三環化合物抑制。本發明化合物抑制法尼基蛋白質轉移酶及腫瘤基因蛋白質R a s的法尼基化。本發明還提供给予有效量的上述三環化合物抑制哺乳動物，特別是人類，法尼基蛋白質轉移酶的方法。給予病人本發明化合物抑制法尼基蛋白質轉移酶可用於治療上述各種癌。用於本發明方法的三環化合物抑制不正常的細胞生長。擺脱理論的束缚，相信此等化合物可透過藉阻斷G -蛋白質本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210X297公着） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 473477 A7 -------- -----------B7_ 五、發明説明（5 ) 異戊二烯基化對G -蛋白質功能，如rasp 2丨，的抑制起作用，可用於治療增生性疾病，如腫瘤生長及癌。擺脱理論的束縛，相信此等化合物抑制ras法尼基蛋白質轉移酶而表現對抗ras變形細胞的抗增生活性。峑發明詳述除非另有説明，下述各詞有如下的定義： "烷基"包括烷氧基、烷基胺基及二烷基胺基的烷基部分，意爲含有一至二十個碳原子的，較佳是一至六個碳原子的，直或分支碳鍵； "烯基”意爲有一或二個雙鍵的烷基；庫環規基思爲含有3至7個碳原子的，較佳是4至6個碳原子的，飽和的碳環形環，此碳環形環由1至3個選自〇，S 及N的雜原子所間斷，包括雜環燒基，如2 _或3 _四氫吱喃基，2 -，3 -或4 -四氫哌喃基，2 -或3 -四氫P塞吩基，2 _，3 _ 或4 -六氫吡哫基，2 -或3 -吡咯啶基，2 -或3 -六氫吡畊基及 2-或3-二吟烷基； "芳基”代表含6至1 0個碳原子的碳環形芳相族基團，如苯基或笨基’該碳環形基團視需要由個選自鹵基，（Ci_ C：6)虎基’ /i基，（crc6)垸氧基，苯氧基，cf3，胺基，，烷基胺基，二烷基胺基，CH3C(〇)NH-，CH3C(0)0-，N02，及 -COOR8’其中R8是Η或（CrC6)烷基，的取代基所取代； '•鹵基”意爲氟，氣，漠及j典；及 "雜芳基”意爲含5至1 0個環員的，包括2至9個碳原子及1 ___ _______ * 8 - 度適用中國國家標準(0奶）八4規格（210；^公釐）~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --訂 473477 A7 B7 五、發明説明（6 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印装至3個選自〇，s，N&N—〇雜原子的環形芳相族基團，其中Ν—〇代表Ν-氧化物，包括如2_，3_或4_吡啶基，2_， 3-或4-吡啶基Ν-氧化物，咪唑基，吡唑基，三唑基，嘧吩基及吱喃基之類的雜芳基，此等雜芳基視需要由丨至3個選自（crc6)烷基，（q-Cd烷氧基，胺基，烷基胺基，二烷基胺基，C6H5C(0)NHCH2-及-C00R8的基團所取代，其中尺8是 Η或（Ci-C6)烷基。畫入環系統内的線表示所顯示的鍵可聯於任何可環碳原子上。本發明的特定化合物可以不同的異構物形式（例如對映異構物及非鏡象立體異構物）存在。本發明包掊所有純形式的或混合的此類異構物，包括外消旋混合物。也包括蹄醇形式的。本發明化合物可以非溶劑合的及溶劑合的形式存在，包括水合形式及半水合形式。-般而言，以醫藥上可接受= 溶劑如水、乙醇等溶劑合的形式，就本發明目的言，相去於非溶劑合的形式。田特定的化合物會是酸性性f，例如具有I基或紛式起基的化合物。此等化合物可形成醫藥上可接受的鹽。此類二的例包括鈉 '卸、鈣、鋁、金及銀鹽。也包括與醫藥接受的胺’如氨，烷基胺，隸燒基胺，N_甲基葡所成的鹽。 ^ 特定的鹼性三環化合物也形成醫藥上可接受的鹽，例酸加成鹽。例如，吡啶氮原子可與強酸生成鹽，二有二^ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐 -9 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝訂Γ 473477 A7 B7 五、發明説明（7 ) 取代基如胺基的化合物也可與弱酸生成鹽。合適的生成鹽的酸包括鹽酸，硫酸，磷酸，醋酸，檸檬酸，草酸，丙二 fe，水輪，蘋果故，富馬酸，丁二酸，抗壞血酸，馬來酸’甲燒磺酸，及其他此技藝週知的礦物酸及羧酸。此等鹽係以習用的方法以自由態的鹼與足量所需的酸接觸製成。自由態的鹼形式可用鹽以合適的稀鹼水溶液如稀氫氧化鈉水溶液，碳酸鉀溶液，碳酸氫銨及鈉溶液處理再生成。自由通的驗形式在某些物理性質方面，如於極性溶劑内的溶解度，不同於其鹽，但其酸及鹼鹽就本發明目的言，則分別與自由態驗形式相同。所有此等酸及鹼鹽都是本發明範圍内的醫藥上可接受的鹽’而所有此等酸及驗鹽就本發明目的言，也都是對應化合物的自由態形式。下述化合物及試劑於此處係以下述縮寫指示：三氟醋酸酐（TFAA) ; 4-二甲基胺基吡啶（DMAP);甲醇（MeOH);乙醇 (EtOH);乙醚（Et2〇);三乙基胺（Et3N);乙酸乙酯（EtOAc)醋酸（HOAc) ; m-氯過苯甲酸（MCPBA);二環己基碳化二亞胺 (DCC): 1-(3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺（DEC); 1-羥基苯并三唑（HOBT) ; N-曱基嗎福啉（NMM);二甲基甲醯胺（DMF)。式（la)及（lb)化合物'可以反應方案1所示方法製備。 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） ^ ’ I ：钟衣-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 473477 A7 B7 五、發明説明（8 反應方案1 步驟⑻

p (ΠΙ) 步驟(b) H2S〇4

+ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (IV) 經濟部中央標準局員工消費合作社印51

-11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（9 ) 步驟(C):

OR

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 步驟(d): (Via) or(VIb) 去保護經濟部中央標準局員工消費合作社印51

I I (Vllb) HN、（SH2)n -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（ 10 步驟⑹： R2-OH + 偶合劑或 R2*C1 + 鹼 (VHa) or (VHb)

或

(請先閱讀背面之注意事項再填{馬本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製於反應方案1步驟（a)中，用保護過的式（III)内醯胺，其中P 是胺保護基，如CH3，芊基或C6H5S〇2-，η之定義如上述，以LD Α處理，再與式（II)之酮反應，其中R及R1之定義如上述，虛線代表視需要的雙键，反應溫度爲-100°至0°C，較佳是-80°至-20°C，生成式（IV)之醇。於步驟（b)中，將步驟（a)製得之醇（IV)用濃H2S〇4脱水，生成化合物（Va)及（Vb)的異構物的混合物。分離化合物（Va)及 (Vb);例如作柱色層分析，將單一異構物（Va)或（Vb)用於步驟（c)。於步驟（c)中，將化合物（Va)或（Vb)於合適的溶劑，如THF 或Et2〇内於-40°至40°C，較佳是-10°至20°C，以1^八旧4處 -13 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（u) 理，分別生成式（Via)及（VIa-1)化合物的混合物或式（VIb)化合物。於步驟（d)中，將化合物（Via)或（VIb)以適於特定保護基（P) 的試劑及反應條件去保護，所用此等試劑如Greene, et al.， ”Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd Ed."頁 315-385，John Wiley & Sons，New York (1991)所述者，分別生成式（Vila)或（Vllb)之胺 ο 於步骤（e)中，使胺（Vila)或（Vllb)與式R2-OH之化合物反應，其中R2之定義如前述，反應係在合適的溶劑如DMF或 CH2C12内在有如DCC或DEC之偶合劑之存在下進行，分別生成式（la)或（lb)化合物。或者使（Vila)或（Vllb)之胺與式R2-C1之化合物，其中R2之定義如前述，在有三級胺驗如DMAP或说咬之存在下，反應分別生成式（la)或（lb)化合物。式（Ic)化合物可用反應方案2所示方法製備。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 -14 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（！2) 反應方案2步驟(a沁

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（I3 步驟(b):

R1

R2-OH + 偶合劑或

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (XI) or (ΧΠ) 或 R2-C1 + 鹼

經濟部中央標準局員工消費合作社印製於反應方案2步骤⑷中，用反應方案1步驟（c)所製得式（Via) 及（VIb)化合物之混合物，其中P是CH3，R，R1及η之定義如前述，且無雙鍵，與式C1C〇2R7化合物，其中R7是（C丨-(：6)烷基（即烷基氣甲酸酯），較佳是氣甲酸乙酯，在有三級胺鹼，較佳是Et3N，之存在下，在合適的溶劑如甲苯内，於40 ° -16 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A 7 B7五、發明説明（) 至110°C，較佳是70°至90°C，反應，生成化合物（VIII)， (IX)及（X)的混合物。化合物（VIII)及（X)是由化合物（Via)生成，而化合物（IX)是由化合物（VIa-Ι)所生成。化合物（VIII)， (IX)及（X)以，例如，色層分析分離。於步驟（b)中，用式（VIII)或（IX)化合物與濃HC1在40°至110 °C，較佳是70°至90°C，反應，生成式（XI)或（XII)之胺。或者，於步驟（b)中，用式（VIII)或（IX)化合物與氫氧化物鹼，如NaOH或KOH，較佳是KOH，在有合適的溶劑，如q- 匸6醇與水的混合物，較佳是EtOH與水的混合物或iPrOH與水的混合物，之存在下，於40°至100°C，較佳是50°至80°C ，反應，分別生成式（XI)或（XII)之化合物。於步驟（c)中，用式（XI)或（XII)之化合物與R2OH及偶合劑，或與R2C1及鹼，以反應方案1步驟（e)所述方法反應，生成式（Ic)化合物。另一製備式（Ic)化合物的方法如反應方案3所述。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（：步驟⑻ 反應方案3

(XV) 步驟(b)

LiAlH4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印狀 or(XIV)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（16 步驟㈡： C1C02R7 (XVI)

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 步驟(d): (XVII)

步驟⑹：經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (XVIH)

-19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2!0X297公釐） 473477 A 7 B7 五、發明説明（17) 於反應方案3步驟（a)中，用反應方案1步驟⑻所製得化合物，其中P是CH3，R，R1及η之定義如前述，且無雙鍵，與 ^----.-------_裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Ζη粉及冰醋酸於80°至120°C，較佳是約l〇〇°C，反應，生成化合物（XIII)，（XIV)及（XV)之混合物。化合物（ΧΙΠ)，（χΐν) 及（XV)用，例如，色層分析分離。於反應方案3步驟（b)中，將式（XIII)或（XIV)化合物用氫化物還原劑，如LiAlH，以反應方案1步驟（c)所述相同方法行還原反應，生成式（XVI)化合物，其中R，R1及η之定羲如上述，虛線代表視需要存在的雙鍵。於步驟（C)中，用式（XVI)化合物與式C1C02R7化合物，其中 R7之定義如前述，以反應方案2步驟（a)所述相同方法反應，生成式（XVII)化合物。於步驟⑷中，用式（XVII)化合物以反應方案2步骤（b)所述相同方法水解，生成式（χνπι)之胺。於步驟（e)中，用式（XVIII)之胺與R2OH及偶合劑，或與 R2C1及鹼，以反應方案1步驟（e)所述相同方法反應，生成式 (Ic)化合物。起始物質式（II)之酮與起始物質式（III)化合物是已知的或可以已知方法製得的。式R2OH，R2C1及C1C02R7化合物是已經濟部中央標準局員工消費合作杜印製知的，或可由市場購得的，或可由已確立方法製備的。在上述方法中，在反應過程中有時需要及/或必須保護R 1 ，R2，R3 及 R4 等基團。可用 Greene, et al_, "Protective Groups In Organic Synthesis, 2nd Ed.”，John Wiley & Sons，New York (1991)所述保護基。例如見WO 95/10516頁60表1所列者。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（18 ) 今以下述製備實例舉例説明用於本發明的化合物，但不應§忍爲是對本發明的限制。

製備I

步驟A : (請先閱讀背面之注意事項存填寫本賨)

1) LDA

經濟部中央標準局員工消費合作社印製於火燄乾燥的二頸燒瓶内合併THF(400毫升）及無水二異丙基胺（0_135莫耳，13.74克，19.0毫升）。將溶液冷至-78°C，用5分鐘以上時間緩慢滴加n_BuLi(2M，0.134莫耳，67毫升) 。所得混合物於-78°C攪拌45分鐘，然而5分鐘以上時間後緩慢滴加内醯胺之THF溶液（0_123莫耳，21.6克，20毫升）。於- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公釐) 473477 A 7 B7五、發明説明（I9 ) 78°C將反應混合物攪拌1小時，再升至0°C 1小時，得混濁紅色溶液。將此反應混合物冷回-78°C，用管加酮之THF溶液 (0.123莫耳，30克，於300毫升THF内之溶液）。待以TLC測定反應完全後（約2小時後），將溫度升至-50°C 30分鐘，然後加飽和NH4C1水溶液使停止反應。混合物再以水稀釋，用 EtOAc重複萃取。合併萃取物，用鹽水洗。萃取物於Na2S〇4 上乾燥，過濾，眞空濃縮，得非鏡像立體異構醇之混合物。此混合物於EtOAc内加熱，得19.9克（產出率42%)得上比移値（Rf)非鏡像立體異構物，爲固體。以母液取得之物質作色層分析（二氧化矽膠，2% THF : CH2C12，逐漸增至5% THF : (：112〇2)得21.3克（產出率45%)低比移値非鏡像立體異構物，爲固體，及2.9克未反應的酮。上比移値非鏡像立體異構物之分析數據：MS(CI，Μ+Η) =385，熔點 164-166°C。燃燒分析，計算：C，71.51 ; Η， 5.76 ; Ν，6.67 ; Cl，8.44 ;實測：C，71.55 ; Η，5.58 ; Ν， 6.67 ； C卜 8.49。下比移値非鏡像立體異構物之分析數據：MS(CI，M+H) =385，燃燒分析，計算：C，71.51 : Η，5.76 ; N , 6.67 : Cl ，8.44 ;實測：C，71.46 : Η，5.57 ; N，6.66 ; Cl，8.40。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁 L» 裝· 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 _-22- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210'乂297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（20 ) 步驟B :

/ C6H5CH2 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製於室溫合併1.0克（2.38毫莫耳）步驟A製得的上比移値非鏡像立體異構物及濃硫酸。將混合物加熱至60°C 1.5小時，然後冷至室溫，倒入碎冰内。用10%的NaOH(水溶液）將形成的溶液鹼化至pH約10，用CH2C12(或E tOAc)重複萃取。合併萃取物，用鹽水洗。萃取物於Na2S〇4上乾燥，過濾，眞空濃縮成殘餘物。作色層分析（二氧化矽膠，5%丙酮：CH2C12，逐漸增加至5% MeOH : CH2C12)，得200毫克E-N-苄基異構物，及600毫克Z-N-芊基異構物，爲固體。 E - N -芊基異構物之分析數據：MS(CI，M+H)=401，熔點 178-180.5°C。燃燒分析，計算：C，74.90 ; Η，5.28 ; N， -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 473477 A 7 B7 五、發明説明（21 ) 699 ;(：卜 8.84。 Ζ -苄基異構物之分析數據：MS(CI，Μ+Η)=401，燃燒分析，計算：C，74.90 ; Η，5.28 ; Ν，6.99; α，8.84。實測： C，74.78 ; Η，5.41 ; Ν，6_97 ; α，8.82。步骤C: ： ·

C6H5CH2 CgHgCHa (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁 -裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂於氮氣下合併步驟B所製得Z-N-苄基異構物及5毫升THF 。將溶液冷至〇°C，分批加70毫克LiAlH4 (1.867毫莫耳）。此混合物於〇°C攪拌30分鐘，然後用EtOAc及MeOH使反應停止。用矽藻土過濾除去鋁鹽，將濾過物濃縮，加5%的NaOH水溶液。水相用EtOAc : THF(9 : 1)萃取，合併有機相，用鹽水洗。於Na2S〇4上乾燥，過濾，並將濾過物眞空濃縮成殘餘物。作色層分析（二氧化矽膠，10%丙酮：己烷，逐漸增加至20%丙酮：己烷），製得175毫克（產出率51%)Z-N-2苄基胺。E-N-苄基胺之分析數據：MS(CI，M+H)=387。就 C25H24N2CH乍高解析質譜計算：387.1628，實測：387.1609。 ΐχ -24- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 __B7 五、發明説明（22 ) 步骤D :

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 在氮氣下合併500毫克步驟C所製得的Z-N-苄基胺（1.29毫莫耳），MeOH(20毫升），HOAc(5毫升），1,4-環己二烯（5毫升）及210毫.克10%的Pd/C。小心加熱至70°C，此時有氫氣開始生成。1小時後加氫並急續於約40°C加熱1小時。混合物以碎藻土過濾、，將滤過物眞空濃縮成殘餘物。加甲苯，眞空濃縮除去剩餘之HOAc。作色層分析（二氧化矽膠，5% MeOH :CH2C12，逐漸增加至 10% MeOH : CH2C12 : 1% NH4〇H)，製得221毫克（產出率58%)Z-胺產物（P-1)。Z-胺之分析數據： MS(CI，M+H)=296。使用起始酮以基本上與製備1相同方法製得下述的胺：經濟部中央標準局員工消费合作社印製

-25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（23) 製備2

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁 -裝訂:* 於氮氣下合併1_〇4克LiAlH4(27.7毫莫耳）及75毫升Et2〇。將此混合物冷至0°C，用注射筒加2.20克（5.49毫莫耳）製備1步驟B所製得之E-N-苄基異構物之THF溶液。120分鐘後，反應混合物内加EtOAc及MeOH，再加1%的NaOH水溶液。水性部分用EtOAc (4 X 75毫升）萃取，再用EtOAc : THF(4 : 1)萃取，並將萃取物合併。萃取物用鹽水洗，於以^3〇4上乾燥，過濾，眞空濃縮成殘餘物。作色層分析（二氧化矽膠，15%丙酮：EtOAc，逐漸增加至5% MeOH : EtOAc)，製得1.08克（產出率51%)E-N-芊基胺產物。 E-N-苄基胺產物之分析數據：MS(CI，M+H)=387，燃燒 -26- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） •線經濟中央標準局員工消費合作社印製 473477 A7 __B7 五、發明説明（24 ) 分析，計算：C ’ 77_61 ; Η，5.99 ; N，7.24 ; C1，9.16。實測：C，77.80 ; Η，6.07 ; Ν，7.20 : C1，8.94。步驟Β :

用與製備1步驟D所述製備Ζ-異構物的基本相同的方法以 Pd/C使步驟Α製得之Ε-Ν-爷基胺氫化，製得Ε-胺產物（Ρ-2)。使用所示起始酮以基本上與製備2相同方法製得下述的胺 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印敦

-27- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7五、發明説明（25 ) 製備3

步驟A :

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 7.0毫升（49.5毫莫耳）TFAA，然後加3.7克（43.53毫莫耳） NaN〇3至攪拌的混合物中。任混合物升至20°C，攪拌30小時。將混合物冷至0°C，緩慢加30毫升濃NH4〇H水溶液100毫升。攪拌30分鐘，再加300毫升(：112(：12及200毫升水。分離各層，有機相於MgS0'4上乾燥。過濾，眞空濃縮成固體殘餘物。將此固體於100毫升熱MeOH内攪拌30分鐘，然後任混合物冷至室溫。過濾，固體用20毫升MeOH洗，眞空（0.2毫米Hg)下於室溫乾燥，製得4.9克（產出率41.4%)硝基酮產物。 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7----£1五、發明説明（26 )步驟B :

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝·

經濟部中央標準局員工消費合作社印$L 室溫下合併5克（17.3毫莫耳）步驟A製得之硝基酮，140毫升EtOH及15毫升水，然後加3克（54.5毫莫耳）Fe粉。加1毫升濃HC1，將此混合物於回流加熱4小時。再將混合物冷卻至室溫，眞空濃縮至其容積約20毫升。加100毫升水，200毫升CH2C12，及30毫升20%的NaOH水溶液。分離各層，水相用200毫升CH2C12萃取。合併有機萃取物，過濾，用100毫升水洗。於MgS〇4上乾燥，然後眞空濃縮成殘餘物。將此殘餘物於20毫升丙酮及100毫升Et2〇之混合物内攪拌至生成固體。過濾，固體用20毫升Et2〇洗，然後於20°C眞空乾燥，製得4.0克（產出率89.5%)胺基酮產物。胺基酮之分析數據：溶點=199°-20〇C ; MS(CI)=259.261 ;燃燒分析：計算’：C ’ 64.99 ; Η ’ 4.28 ; N，10.83 ;實測 :C，64,79 ; Η，4.41 ; N，10.58。 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公瘦）訂· .»線 473477 A7 B7 五、發明説明（27 ) 步驟C :

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中夬標準局員工消費合作社印製於-5°C合併10克（0.386莫耳）步驟B製得之胺基酮及300毫升 48%的HBr，然後加9.0毫升（1.74莫耳）Br2，於-5°C攪拌20分鐘。緩慢滴加10.5克（1.52莫耳）NaN〇2K25毫升水内之溶液，維持溫度於-5°C。於-5°C攪拌1小時，任此混合物於1小時以上時間内升至20°C，並於20°C攪拌4小時。將此混合物倒入 300克冰内，加40%的NaOH水溶液至此冰冷混合物内，使pH 調整至14。用CH2C12 (2 X 300毫升）萃取，合併萃取物並於 MgS〇4上乾燥。過濾並眞空濃縮成殘餘物。將殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，25% EtOAc/己烷），製得8_7克（產出率 69.9%)溴酮產物。溴酮之分析數據：MS(CI)=322,324。 -30- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 4/M/7 A7 --________ _B7五、發明説明（28 )步驟D :

經濟部中央標準局員工消費合作社印裝將18¾升（45.0愛莫耳）之2 5M的卜丁基链於己燒内之溶液於-78Χ:緩慢滴加於7.0毫朴9 41毫莫耳）二異丙基胺於⑽毫 ^THF内之溶液中nC攪拌15分鐘，錢加7()毫升⑹ 笔莫耳）N-甲基_2_六氫吡啶酮。此混合物於—it攪拌3〇分鐘 ’再用1小時以上時間加溫至_5，c。再冷至_7yC，緩慢滴加 12克（37.2¾莫耳）步驟c製得之溴酮於2〇〇無水thf内之溶液。此混合物於-78 C授拌1小時，再用i 5小時以上時間加溫至-10°C。加25毫升水，眞空濃縮除去約2〇〇毫升溶劑。用 600愛升CH〆〗2及300毫升鹽水萃取，有機萃取物於MgS〇4上乾燥。過濾，眞空濃縮成殘餘物，此殘餘物於3〇毫升丙酮及20毫升Et^O内擾摔至生成固體。過遽，固體用1〇毫升 Et2〇洗’於20°C及0.2毫米Hg下乾燥過夜，製得η 89克產物，爲非鏡像立體異構物。母液及Et2〇洗液作色層分析（二氧化矽膠，25% EtOAc/己烷），又製得1.0克產物（總產出率 79.56%) 〇 … -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） Γ請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁j -裝，丁* . 、-a .,^ 473477 A7 B7 五、發明説明（29) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 步驟D產物分析數據：MS(CI，M+H)=437 ;燃燒分析：計算：C，55.12 ; Η，4.62 ; N，6.43 ;實測：C，54.70 ; Η， 4.57 ; Ν，6.26 〇步驟Ε :

經濟部中央標準局員工消費合作社印製合併11.4克（26.1毫莫耳）步驟D製得產物及100毫升濃H2S〇4 ，並加熱至80°C 4小時。將此混合物冷至20°C，倒入300克冰内，於此冰冷混合物内加50%的NaOH水溶液將pH調整至 14。過濾收集殘餘固體，此固體用300毫升水洗，然後於20 °C，0.2毫米Hg乾燥過夜。此固體作色層分析（二氧化矽膠， 2% MeOH/EtOAc)製得此產物4.48克Z-異構物及4.68克E-異構 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（30 ) 物（總產出率84%)。 Z-異構物分析數據：MS(CI，M+H)=417，419 :燃燒分析 :計算：C，57.50 ; Η，4.34 ; N，6.70。實測：C，57.99 ; Η，4.76 ; Ν，6_66。 Ε-異構物分析數據：MS(CI，Μ+Η)=417，419;燃燒分析 :計算：C，57.50 ; ，4.34 ; Ν，6.70。實測：C，57_23. ; Η ，4.43 ; Ν，6.65。步驟F : (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝.

訂- 於-10°C合併1.0克（2.39毫莫耳）步驟Ε製得之Ζ-異構物及10 毫升無水11^，加110毫克（2.78毫莫耳）1^八1114。此混合物於- 10°至-5°C攪拌2小時，然後加2毫升EtOAc，再加20毫升 10%的四水合酒石酸鉀鈉水溶液，5毫升10%的NaOH水溶液及150毫升CH2C12。分離各層，有機相於MgS〇4上乾燥。過濾，眞空濃縮至成殘餘物。殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，先用25% EtOAc/己烷，再用含濃1% NH4〇H的3%

MeOH/EtOAc)製得480毫克（產出率50°/〇)Z-甲基胺產物。 Z-甲基胺分析數據：熔點=160° - 161°C ; MS(CI， -33- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 473477 Α7 Β7 五、發明説明（31 ) M+H)=403，405 ;燃燒分析：計算：C，59.49 ;，Η，4.99 ; Ν，6.94。實測：c，59.75 ; Η，5.43 ; Ν，6.79。步驟G :

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝於0°C合併1_1克（2.72毫莫耳）步驟F製得之Ζ-甲基胺及20毫升甲苯，加1.0毫升（1〇.4毫莫耳）C1C〇2C2H5。加i 〇毫升（13 6 觉莫耳）EtsN ’將此混合物加熱至7〇°C 3小時。將昆合物冷卻並眞空濃縮成殘餘物。用50毫升CH2C12將殘餘物萃取，萃取物用30毫升水洗。於MgS〇4上乾燥。過濾，並眞空濃縮成殘餘物。殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，2〇% Et〇Ac/己燒）製得粗製產物。以EtO及CH2C12混合物重結晶，得510毫克（產出率40·8%)Ζ-乙基胺曱酸酯產物。 Ζ-乙基胺曱酸酯分析數據：熔點=182。-丨83。匸；MS(CI， M+H)= 461 ’ 463 ;燃燒分析：計算：c，57.29 ; ，Η，4.80 ;Ν，6.06。實測：c，57.38 ; Η，4.72 ; Ν，6.08。訂

經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 -34-

473477 A7 B7五、發明説明（32) 步骤Η :

合併400毫克（0.866毫莫耳）步驟G製得之Ζ-乙基胺甲酸酯及 5毫升濃HC1，於100°C加熱過夜。冷至0°C，緩慢加30%的 NaOH水溶液以鹼化此混合物。用CH2C12 (2 X 250毫升）萃取，萃取物於MgS〇4上乾燥。過濾並眞空濃縮，製得320毫克（產出率94.86%) Z-胺產物（P-3)。Z-胺（P-3)分析數據：MS(FAB ，M+H)=389，39卜使用所示起始酮，以製備3步驟D至Η所述基本相同方法製得以下之胺： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝- 訂·. 起始酮胺經濟部中央標隼局員工消費合作杜印製

-35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 473477 A7 B7五、發明説明（33) 製備4

於-5°C合併3.4克（8.15毫莫耳）製備3步驟E製得之E-異構物產物及40毫升無水THF，加470毫克（11.9毫莫耳）1^八1114。此混合物於〇°C攪拌5小時，然後加5毫升水，20毫升10%的四水合酒石酸奸納水溶液，5毫升10%的NaOH水溶液及150毫升CH2C12。分離各層，有機相於MgS〇4上乾燥。過濾，眞空濃縮至成殘餘物。此殘餘物爲產物化合物及下式化合物經濟部中央標準局員工消費合作社印製

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（34 ) 之混合物。殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，2 % MeOH / EtOAc)， 1.3克率40%)E-甲基胺產物。 E-甲基胺之分析數據：熔點=140° - 141°C ; MS(CI，M+H) =403，405 ;燃燒分析：計算：C，59.49 ; Η，4.99 ; N，6.94 ，實測：C，59.11 ; Η，4.75 ; N，6.98。步驟B :

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁裝- 訂經濟部中央標隼局員工消費合作社印取使用0.4克（0.99毫莫耳）步驟A製得之E-甲基胺，15毫升曱苯，0,5毫升（5.2毫莫耳）(：1(：〇2(：2115，及〇.5毫升（6.8毫莫耳） Et3N，以製備3步驟G所述基本上相同的方法製得230毫克（產出率51.1%)E-乙基胺甲酸酯。乙基胺曱酸酯之分析數據：熔點=186° - 187°C : MS(CI， M+H) =463，464 ;燃燒分析：計算：C，57.29 ; Η，4.80 ; N ，6.06，實測：C，57.43 ; Η，5.11 ; Ν，6.09。 _-57- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（35) 步驟C :

以基本上與製備3步驟Η所述相同的方法將步驟B製得之 Ε-乙基胺甲酸酯轉化成Ε-胺（Ρ-4)，產出率97.8%。乙胺（Ρ-4)之分析數據：熔點=166°-167°C ; MS(CI)=389, 391 ;燃燒分析：計算：C，57.88 ; Η，4_66 ; N，7.10，實測：C，57.63 ; Η，4.61 ; N，7.03。使用所示起始酮以製備3步驟D及Ε所述方法，步驟Α-Ε ，製備合適的Ε -異構物，以製備4步驟A - C所述相同的方法製得下述之胺： (請先闖讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-38- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210Χ2ί»7公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（36 ) 製備5 步驟A ··

(請先閑讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-39- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（37) 於0°C合併20克（61.5毫莫耳）製備4步驟A所製得之粗製（未作色層分析）E-甲基胺（使用合適的起始酮製得的）及200毫升甲苯，再加20毫升（208毫莫耳）C1C02C2H5。加20毫升（272毫莫耳）Et3N，然後加熱至80°C並攪拌4小時。冷至室溫並眞空濃縮至成殘餘物。此殘餘物用300毫升CH2C12萃取，萃取物用200毫升水洗，然後於MgS〇4上乾燥。過濾，眞空濃縮至成殘餘物，然後將殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，70% £1:0八(；/己烷），製得5_0克產物（冱），4.2克_產物（13)，及300毫克產物（c)。分析數據：MS(CI，M+H)產物（a)=383，產物 (b)=383，產物（c)=385。步驟B : (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製合併4.0克（10.4毫莫耳）步驟A所製產物〇)及20毫升濃HC1，於80°C加熱過夜。冷至20°C，用20% NaOH水溶液鹼化至 pH=14，用200毫升C.H2C12萃取。萃取物用25毫升水洗，於 MgS〇4上乾燥，過濾，眞空濃縮至成殘餘物。將殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，10% MeOH/EtOAc+2% NH4〇H水溶液），再用15毫升丙酮/Et2〇研磨，製得1.96克（產出率60.5%)胺 -40- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（38) 產物P-5)。胺（P-5)之分析數據：熔點=157°-158°C ; MS(CI ，M+H)=311，313。製備6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

於20°C合併400毫克（1.03毫莫耳）製備5步驟A製得之產物（c) 及5毫升EtOH，然後加0.23克（4.15毫莫耳）KOH於10毫升水内之溶液。此混合物於回流加熱3天，冷至室溫，眞空濃縮至成殘餘物。此殘餘物用8 0毫升CH2C12萃取，萃取物用50毫升水洗。於MgS〇4上乾燥，過濾，眞空濃縮成至成殘餘物。將殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，10% MeOH/EtOAc+2% NH4〇H水溶液），再用10毫升Et2〇研磨，製得200毫克（產出率 61.5%)胺（P-6)。胺（P-6)分析數據：MS(CI，M+H)=313， 315。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣. 訂本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 第85103321號專利申請案中文說明書修正頁(88年2月） A7 B7 五、發明説明—1 I 各冷H g 'gg. 2. 〇3 ,.· 製備7

(請先閔讀背面之注意事項再填寫本頁 I訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210'X 297公釐） 473477 Α7 Β7 五、發明説明（40) 合併1.0克（2.95毫莫耳）製備3步驟E所製得E_異構物產物（用適當的酮製得），30毫升冰HOAc及1.0克（15.29毫莫耳）鋅粉，此混合物於100°C加熱過夜。經矽藻土過濾，濾過餅用2〇毫升HOAc洗，/慮過物眞g濃縮成殘餘物。此殘餘物用1 $毫升濃ΝΗρΗ水溶液鹼化，加5〇毫升水，用CH2Cl2(2x 1〇〇毫升）萃取。合併之萃取物,MgS〇4上乾燥，眞空濃縮成殘餘物。將殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，5% Me〇H/Et〇Ac+2% NH4〇H水洛液），製得三種產物：3〇〇毫克（產出率3〇%)產物(a) ’ 250笔克（產出率25%)產物（b);及250毫克(產出率25%)產物（c)。產物（c)之分析數據：熔點=172。、mi，MS(CI , m+h) =341 ， 343 。產物（b)之分析數據：熔點=142。— 144。〇，MS(CI，m+h) =339 ， 341 。實例1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -a Γ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

在氮氣下合併115毫克製備1製得之Z-胺產物（p-l) (0.389毫莫耳），5毫升吡啶（5毫升）及催化量（15毫克）的DMAP。冷至〇 -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨Οχ297公釐） i 473477 A7 B7 五、發明説明（41 =’加175毫克2-嘍吩基磺醯氯（〇961毫莫耳）。於〇χ：攪拌分鐘，再升至室溫，攪拌17小時。加NaHC〇3水溶液使反應化合物停止反應，水層用Et〇Ac_THF(2〇 : 萃取。合併萃取物，用鹽水洗，於Mgs%上乾燥，眞空濃縮成殘:物。作色層分析（二氧化矽膠，25%Et〇Ac/己烷），製得65毫克（產出率39%)Z-N-(2-噻吩基)磺醯胺產物（E-1)。Z-N-(2-嘍吩基）磺醯胺之分析數據：|lvlS(CI > Μ+Η)=443。0 用適當的磺醯氯及所示胺，以與實例丨所述基本相同的方法製得下列^¥7匕一合物：〜一— 胺分析數據

P-2A 醯胺

MS (FAB, M+H) 443 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 __B7 五、發明説明（42) -45- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210'乂297公^~ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 473477 A7 __B7 五、發明説明（43 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 P-3A ο Λ S 乂 sofv (E-1G Or r) MS (Cl, M+H)= 457, 459 :cl '^N C'^x r S^sof- (E-1H Xr y ) mh = i54°- x) V 155°C MS 454 17" ..CpCra 0、sp (E-1J) .........-- ^點=254-、 255°^^ MS^CrT^i+H)= 457, 459 P-4A C〇Crc^ | 厂N [S rC .,(E-1K) MS (Cl, M+H)= 590, 592 ---------4^.衣— ** (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂tl —0. -46-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（44 )

衣-- ♦ « (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-47- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（45 ) 於乂下合併110毫克製備1所製Z-胺產物（P-l)(0.339毫莫耳），5毫升吡啶及催化量（10毫克）的DMAP。經溶液冷至0°C，加C6H5S02C1(1.17毫莫耳，207毫克）。此混合物於0°C攪拌10 分鐘，然後升至蚀溫再攪拌17小時。加NaHC〇3水溶液使反應混合物驟冷，水層以EtOAc-THF (20 : 1)萃取。合併萃取物，用鹽水洗，於Na2S〇4上乾燥，眞空濃縮成殘餘物。作色層分析（二氧化矽膠，25% EtOAc/己烷，逐漸增加至35% EtOAc/己烷），製得80毫克（產出率54%)Z-苯磺醯胺產物（E-2) 。Z-N-苯磺醯胺分析數據：MS(CI，M+H)=437。使用合適的磺醯氣及所示胺，以與實例2所述基本相同的方法製得下列磺醯胺化合物： ---------衣-- ♦ · (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 —0. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 48 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（46) 部中-央標準局覓—工消費合作社印製胺醯胺分析數據. Ρ-2 : 1 MS (FAB, M+H)= 八。P (E-2A) 437 Ρ-2Α cfp (Er2B) Ρ-1Α cCo MS (Cl. M+H)= (E-2C) 403 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2LOX297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣'

、1T i0. 473477 A7 B7 五、發明説明（47 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製. ϋ/ / BrxC η Γ" (E-2D) Cr ^點=184°- V 185°C 〆〆/ ____ Μ&-{€ΓΓΜ+Η)= 529, 531 Ρ-3Α cC ~~~N | n sof^" (E-2E) Or MS (Cl) = 451, 453 ΪΤ l· cl so;、 (E-2F) Xr y ..〆-·. 一·---- /落黑占=178。:、、179^0_^ msIoTm+h)= 496 Ρ-3β/ '^Xra CH3〇^. Λ ^^so；N^ (E-2G) /愈點=160。-、 ( 483 -50- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（48 )_ ύΙ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

^^衣-- •- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（49

CH3 A (Ε-2Μ) / 熔點=189°-)V 190°^^ msIctTmh)= 389, 391 P-3

(E-2N)

熔點=198°7

MS (Cl) = 465, 467 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

(E-2P) 溶,f占=235。-236JJ&〆 -iS-feT, M+H) 451, 453 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（50 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

•53· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 473477 A7 B7 五、發明説明（si)

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製，3毫升DMF及2毫升NMM。將混合物冷至〇°C，力〇 110毫克 HOBT(0.888毫莫耳），250毫克DEC(1.31毫莫耳），及0.651毫莫耳（4-吡啶基硫基）醋酸。經30分鐘後升至室溫並攪拌24小時。眞空濃縮成殘餘物，殘餘物用NaHC〇3水溶液稀釋，用 CH2C12萃取。合併萃取物，用鹽水洗，於Na2S〇4上乾燥，眞空濃縮成殘餘物。’以活性碳脱色，作色層分析（二氧化石夕膠，5% MeOH : CH2C12逐漸增加至 10% MeOH : CH2C12)，製得45毫克（產出率37%)E-(4-吡啶基硫基）醯胺產物（E-3)。E-(4-吡啶基硫基）醯胺分析數據:MS(CI，M+H)=448 ° -54- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 B7 五 '發明説明（52 ) .使用合適的碳環酸及所示胺，以與實例3所述基本相同的方法製得下列績醯胺化合物：經濟部中央標準局員工消費合作社印製

•55· 本紙張尺度—適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） ---------•裝-----Γΐτ-,------ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 473477 A7 __B7 五、發明説明（53) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝· *-訂 -56- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（54 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-57- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 473477 A7 __B7 五、發明説明（55) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -58- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）— 473477 A7 B7 五、發明説明（56 )

C1

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝. 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製於0°C合併100毫克（0.626毫莫耳）3-吡啶磺酸及3毫升無水 p比淀，加100毫克（0.406毫莫耳）4-硝基苯績酿氯。加5¾克 DMAP，此混合物於0°C攪拌7小時。加80毫克（0.258毫莫耳）製備3所製Z-胺產物（P-3 A)，此混合物於0°C攪拌1小時，再於20°C攪拌過夜。加50毫升CH2C12& 20毫升水，分離各層，有機相用水洗。於MgS〇4上乾燥，眞空濃縮成殘餘物。殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，5% MeOH/EtOAc+l°/〇濃 NH4〇H (水溶液）），用10毫升Et2〇結晶，形成的固體於60°C 眞空乾燥，製得180毫克（產出率68.9%)Z-3-吡啶基磺醯胺（E- 一'〆.一---------------------- 4)。Z-3-吡啶基磺醯胺（E-4)分析數據，· ί點=158° - 159°C^i) -59- 本紙張尺度適用中國國家標準_( CNS )_Α4規格.（210Χ297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（57) MS(CI) =452，454。用所示E-或Z-胺，以與實例4所述基本相同的方法製得下列磺醯胺化合物： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝.

、1T 實例5 經濟部中央標準局員工消費合作社印.^

-60- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（58 於Of σ併70¾克（〇·225毫莫耳）製備3所製得的ζ_胺 0.2<c，（1.53$莫及㈣升⑶外，加〇 2毫升（2毛莫耳）Et3N，於20 C搜拌過夜。加2〇毫升水及25毫升CH2C12,分離各層，有機相於MgS〇4上乾燥。過濾，眞空濃縮成殘餘物，殘餘物作色層分析（二氧化謂，20% EtOAc/己燒）’用10宅料t2〇結晶。所得固體於抓眞空乾燥氣得75毫^秦〔苯基脲產物（E_5)。苯基脲之分析數據：备點=ϋί：二^; MS(CI，_M+H)=430, 432。 ijHey

Cl

t〇°C合併25毫克（0.08毫莫耳）製備3所製得的2_胺（？_3八）， γ·2毫升（2.72¾莫耳）EtsN及2毫升無水吡啶，加〇 2克（丨13毫莫耳）虱硫甲酸苯酯。加5毫克（〇〇4毫莫耳）DMAp，將此混合物攪拌過夜。眞空濃縮成殘餘物，殘餘物於25毫升设〇/^及 20¾升水間分開。有機相於Na2S〇4上乾燥，過濾，眞空濃縮成殘餘物。殘餘物作色層分析（二氧化膠，5% Me〇H /EtOAc)，用己烷研磨，於2〇。〇眞空乾燥所得固體，製得3〇宅克（產出率83.6%)Z；^基硫基胺曱酸酯產物（E_6)。E_苯基 n «^1 一 ΙΊ I4H '« (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) ( 21〇><297公们 473477 Μ Β7 五、發明説明（59 ) 硫基胺甲酸酯之分析數據：（^點=187° - 1处°€ ; MS(CI)=447 -- 實例7

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製於0°C合併40毫克（0.129毫莫耳）製備3所製得的Z-胺（P-3A) ，0.5毫升（0.391毫莫耳）苯曱醯氣及5毫升無水吡啶，加2毫克DMAP，然後於20°C攪拌過夜。加20毫升CH2C12& 1 0毫升水，分離各層，有機相用2 0毫升·鹽水洗。有機相於MgS〇4 上乾燥，過濾，眞空濃縮成殘餘物。殘餘物作色層分析（二氧化矽膠，5% MeOH /EtOAc+1%濃NH4〇H(水溶液）），所得固體用丙酮/己烷結晶，於60°C眞空乾燥，製得Z-苯基醯胺產物（E-7)。Z-苯基醯胺產物（E-7)之分析數據d點=215。- 21.g^ °C ; MS(CI，M+H)=415，417。使用合適的醯基氣及所示Z -胺，以實例7所述基本相同方法製備下列醯胺化合物： -62- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 473477 A7 _ B7 五、發明説明（6〇 )

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁 -裝·

*tT 鑑定用WO95/10516所述鑑定法作FPT IC5〇 (法尼基蛋白質轉移經濟部中央標準局員工消費合作社印製酶之抑制，活體外酶鑑定），GGPT香葉基香葉基蛋白質轉移酶之抑制，活體外酶鑑定），COS細胞IC5〇 (以細胞爲基礎之鑑定）及 Cell Mat Assay。 -63- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29—7公ϋ^ 473477 A7 B7 五、發明説明（ei __表 2_

-FPT 抑制經濟部中央標準局員工消費合作社印製

化合物 E-1 E-1A E-1B E-2 E-2A E-2B E-2C E-3 E-3A E-3B E-3C E-3D E-3J E-3K E-3L E-3H E-2P E-4B E-2Q E-1J E-2R E-2T E-2S E-1K E-3E E-3F E-7A E-7B E-6 E-2E E-3G E-2M E-7 E-1G FPT IC5〇 (μΜ) 0.01-10 COS IC5〇 (μΜ) 0.01-10 0.01-10 0.01-10 0.01-10 10-100 10-100 0.01-10 10-100 0.01-10 10-100 10-100 0.01-10 0.01-10 10-100 0.01-10 10-100 10-100 10-100 10-100 10-100 10-100 10-100 10-100 10-100 0.01-10 10-100 10-100 >100 0.01-10 -64- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 0.01-10 0.01-10 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ▼裝· —r -- · f· ip 473477 A7 B7 五、發明説明（62 ) E-2J 10-100 Ε-2Η 10-100 E-2G 10-100 E-2F 10-100 Ε-4 0.01-10 Ε-1Η 0.01-10 Ε-2Κ 10-100 E-2L 10-100 Ε-2Ν 10-100 Ε-5 10-100 E-1D 0.01-10 E-2D 0.01-10 E-2U 0.01-10 E-2V 10-100 Ε-4Α 0.01-10 Ε-3Ν 0.01-10 Ε-3Μ 10-100 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社ίρ製表2 FPT抑制與GGPT抑制之比較化合物酶抑制 FPT IC5〇/uM 酶抑制 GGPT IC5〇/^M Ε-2Ε 0.01-10 7.4 mM E-1G 0.01-10 <13 -65- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 473477 Λ7 B7 五、發明説明（63) 腫瘤細胞生長之抑制-M A T銀定 ----- 化合物腫瘤細胞生長之抑制 (ic50"m) 正常細胞生長之抑制 (IC50^M) -E：2E <3.1 >50 E-1G 12.5 >25 12.5 >25 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Hi 1 ·酶學：數據顯示，本發明化合物’以部分純化的鼠及人腦法尼基蛋白質轉移酶（FPT)測定，爲Ras_cVLS法尼基化的抑制劑。此數據也顯示本發明化合物可認爲，以部分純化的鼠腦法尼基蛋白質轉移酶（FPT)測定，爲Ras_cVLS法尼基化有效的抑制劑（IC5〇<l 0 " M)--見表2。數據還顯示，本發明化合物，以Ras-CVLL作爲類異戊二 '蹄党體銀定，爲不佳的香葉基香葉基蛋白質轉移酶（GGpT) 抑制劑。試驗化合物於20微克/毫升濃度時，爲不活性的或弱活性的香葉基香葉基蛋白質轉移酶抑制劑。此種選擇性是本發明方法所用尚化合物的治療效果上是重要的，並能增加此等化合物對r a s -變形細胞的生長抑制的選擇性。 2._以細胞爲基礎的COS細胞及Cell Mat鑑定表現於Ras-轉變感染COS細胞的Ras蛋白質的免疫缺陷 66- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) M規格（210><297公釐） it 473477 A7 B7 五、發明説明（ 64 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 (immunoblot)分析顯示，本發明法尼基轉移酶抑制劑抑制 Ras-CVLS活動，導致未表現的Ras的累積（表2)。例如，化合物E-2及E-2E抑制Ras-CVLS活動的IC5〇値分別是>5及2.5 " Μ 。此等結果顯示’此等化合物於完整細胞内抑制法尼基蛋白S轉移酶’此表示其藥效是以活化r a s腫瘤基因阻斷細胞變形。於Mat鑑定，本發明化合物也抑制Ras_變形腫瘤細胞的生長。例如，E-2E化合物以<3.1 " Μ的IC5〇値產生抑制。此化 &物/、在較南;辰度（ΙΟ：% >5〇 " M)時對正常細胞單層展現細胞毒性。活體内抗腫瘤研究：本發明化合物的抗腫瘤活性也可以95/1〇516所述方法測定。以本發明所述化合物製備醫藥组合物時，惰性的、醫藥上可接受的載劑可以是固體或液體。固體形式的製劑包括散、錠、可分散的顆粒、膠囊、扁形膠囊劑及塞劑。散或錠可含約5至約7 0 %的活性成分。合適的固體載劑是此技藝已知的，例如碳酸鎂，硬脂酸鎂，滑石粉，糖，乳糖。錠欢扁形膠囊及膠囊可以適於經口給予的固體劑形使用〇、製備塞劑時，先將低溶蝶，如脂肪酸甘油醋或椰子油，熔化’再將活性成分於其中攪掉均勻。然後將熔化的均勻的混合物倒入大小適宜的模内待其冷卻固化。液體形的㈣包括溶液、懸浮液及乳液。供注射用的例本紙張尺度適财( CNS ) A4^m ( 210x1^^ 67- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ►裝.

Lf A7 五經濟部中央標準局員工消費合作社印製、發明説明（65 ) 是水或丙二醇溶液。液體形的製劑也包括供鼻内給予的溶液。適於供吸入的噴霧製劑▼包括溶液及散形的上可接受的載劑，如惰性氣體，混合。、=另-種固體形式’此種固體形式是在臨用硬供經口或非經口給予。此類液體形式包括溶液、磕浮液及乳液。本發明化合物也可經皮投予。經皮给予的組合物可以是霜、洗液、噴霧劑及/或乳液形式，並可含於基質或儲器型的經皮給予的綷内，這都是此技藝習用的。此化合物較佳是經口給予。較佳是醫藥製劑爲單位劑量形式。以此劑形，可將製劑分成含適當量（如達所需目的的有效量）的有效成分的單位劑形。製J早位劑量内的活性化合物的量可在爲約〇丨毫克至 1000毫克之範圍内視特定使用調整，較佳是約丨毫克至3〇〇毫克。實際使用的劑量可視病人需要及要治療的疾病的嚴重性而改變。特定情況下適宜劑量的決定是此技藝的技巧。一般而T，治療先以小於此化合物的適宜劑量開始。然後逐漸加大劑量至能達適宜效果的劑量。爲方便起見，需要時每天的總劑量可分成數份在白天給予。本發明化合物及其醫藥上可接受的鹽的給予量及頻率，可由醫生視病人的年齡、病情、體型及症狀嚴重程度決定可與醫藥 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 卜訂 -68- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 473477 A7 B7 五、發明説明（66 。阻斷腫瘤生長時，典型的建議南丨县β 量疋毫克至2000毫克 /天，較佳是10至1000毫克/天，八上 _ 刀成二或四次經口給予。在此劑量範圍内此等化合物是無毒I生白勺以下爲含本發明化合物的醫藥南丨朱Μ形的舉例。在豆醫藥組合物方面，本發明範圍並不限於提供的實例八 ’ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) c· 訂

玉米澱粉，食物級硬脂酸鎂__

總計 L#

乳糖，美國藥典玉米澱粉，食物級，純化水内的10%的糊經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 63 於 69- 製造方法在合適的混合器内將項目混合。用5頁目3將混合物製成顆粒。如有需*，將濕顆粒用粗篩（例如1 /4吋，〇公分）磨。將濕顆粒乾燥。如有需要，將乾燥的顆過再與項目4混合1〇-15分鐘。加項目5,混合Κ3分鐘合適的打片機上將混合物壓成合適的大小及重量。里本紙張尺度適用中國國家標準（CNST^·^^^ 473477 A7 B7 五、發明説明（π ) 實例B -膠囊編號成分毫克/膠囊毫克/膠囊 1 活性化合物 100 500 2 乳糖，美國藥典 106 123 3 玉米澱粉，食物級 40 70 4 硬脂酸鎂 7 7 總計 253 700 製造方法在合適的摻合器内將項目1，2及3混合1 0 -1 5分鐘。加項目4，混合1 - 3分鐘。於合適的裝膠囊機上將此混合物裝於合適的二件式的硬明膠膠囊内。雖則本發明已用前述特定具體實施例説明，此技藝的一般技術人員會了解還可作多種變化及修改。所有的此等變化及修改都在本發明精神及範圍内。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -70-

Claims

473477 A8 第85103321號專利申請案漂中文申請專利範圍修正本(90年8月）Ds

其中： R及R 1係獨立選自Η或鹵素； R2 是 R5C(0)- ; R5CH2C(0)-，R5S〇2-，R5CH2S〇2-， r5sch2c(o)-，R5NHC(0)- ’ R5SC(0)-或R5CH=CH-C(0)-; R 5是喵吩基其係未經取代或經自素、C O 2 ( Cm)烷基或C02Na+所取代，苯基其係未經取代或經硝基、CN4烷基、 CN4烷氧基、齒素或Cm烷羰胺基所取代，吡唑基其係未經取代或經Cm烷基或齒素所取代，吡啶基，芊基或Cy 烷基； η是0或1 ;而 =代表單鍵或雙鍵；本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 473477 A8 B8 C8 —圓_____ D8 夂、申請專利範圍及其醫藥上可接受的鹽。 2 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其具有結構式 (lb)。 3.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中…是R5C(0)_， R5CH2C(0)-，R5SCH2C(0)-，r5so2- , r5ch2so2-，r5nhc(〇) 或 R5sc(0)-。 4 ·根據申請專利範圍第i項之化合物，其中R5是甲基，苯基’字基，2-β塞吩基，4-»比咬基，3-7比咬基，5-氣-2-噻吩基，對-甲苯基，對-硝基苯基，對-氟苯基，5 -氯-1，3·二甲基_4_吡唑基，2,4,6 -三甲基苯基，2 -甲氧基羰基-3-嘍吩基，Ε-(3-吡啶基）乙烯基，對-甲氧基苯基，對-乙醯胺基苯基，或2 -羧基-3-嘧吩基的鈉鹽。 5 .根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R 2是R5C(0)- ’而R5是E-(3-p比咬基）乙缔基。 6 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R2是 R5CH2C(0)-，而R5是ρ比淀基或苯基。 7·根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R2是R5S〇2-，而R5是2-噻吩基，5 -氯-2-嘍吩基，5 -氣-1，3 -二甲基-4 -吡唑基，2 -甲氧基羰基-3 -喳吩基，苯基，對-硝基苯基，對-甲氧苯基，對-氟苯基，對-乙醯胺基苯基，對-甲苯基，2,4,6 -三曱基苯基，甲基，芊基，3-11比症基或2 -竣基-3 - 塞吩基的鈉鹽。 -2 - 本紙張尺度逋用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 473477 A8 B8 C8 D8 、申請專利範圍 8.根據申請專利範圍第2項之化合物，其中R2是選自 R5CH2S〇2-，其中R5是苯基；R5NHC(0)-，其中R5是苯基；R5SC(0)-，其中R5是苯基；R5S〇2-，其中R5是噻吩基、苯基或吡啶基；或R5SCH2C(0)-，其中R5是吡啶基。 9 .根據申請專利範圍第2項之化合物，其係選自

、s

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局負工消費合作社印製

Cl C1

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X；297公釐） 473477 A8 B8 C8 D8 經濟部中央揉準局員工消費合作社印製申請專利範圍

Cl

Cl

10·:種用於抑制不正常細胞生長的醫藥組合物，其含有醫藥上可接受㈣劑及有效量的根據申冑專利i圍°第i項之化合物。 11_根據申請專利範圍第10項之醫藥組合物，其中受抑制的細胞是表現活性Ras致癌基因的腫瘤細胞。 12.根據申請專利範圍第1丨項之醫藥組合物，其中受抑制的細胞是胰腫瘤細胞，肺癌腫瘤細胞，上皮癌腫瘤細胞’骨髓性白血病腫瘤細胞，甲狀腺濾泡腫瘤細胞，骨髓發育不良細胞，膀胱癌腫瘤細胞或結腸腫瘤細胞。 -4- 本紙張尺度逋用中國國家梂準（CNS ) A4说格（210X297公釐） ---------^4---^---------· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 舛 M4/7 A8 B8 C8 D8 申请專利範圍 13·根據申請專利範圍第1 〇項之醫藥組合物’其中係抑制法尼基蛋白質轉移酶來抑制細胞不正常生長。 14·根據申請專利範圍第1 〇項之醫藥組合物’其中係抑制’其中受到Ras基因以外之基因藉由致癌性突變而導致R a S蛋白質活化之腫瘤細胞。 15. 根據申請專利範圍第1項之化合物’用於製造抑制細胞不正常生長的藥物。 16. 根據申請專利範圍第i項之化合物’用於抑制細胞的不正常生長。 --------#! (請先閲讀背面之注意事項异填寫本頁) I·-?-----f 經濟部中央揉率局負工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家梂準（CNS ) Μ規格（210X297公釐）