449619 經濟部中央棣準局負工消費合作社印製 A7 ______ B7五、發明説明（i ) 本發明的背骨奋料 發明的頜域 本發明關於一種新型非還原醣，即《 -異麥芽糖基α 一異麥芽糖苷（O—or — D—吡喃葡糖基一（1 — 6 )— a— D —吡喃葡糖基 0_a— D —吡喃葡糖基—（i — 6)—α—D—吡喃葡萄糖苷），其製法與用途。而且， 本發明關於一種含一或更多種新型醣類和一般已知的α _ 異麥芽糖基α -葡萄糖替和λ —異麥芽三糖基a 一葡萄糖 替做爲有效組成份的組成份之製法與用途。 先前技藝的播沭 海藻糖或αα ~海藻糖是一種由葡萄糖組成的非還 原雙醣，廣泛存在於自然界，如；海藻糖存在於眞菌、酵 母菌、細菌、蕈類、高等植物、昆蟲等，然其含量相當少 。由於它的非還原性，海藻糖不會與具胺基酸殘基的物質 ，如：胺基酸和蛋白質發生梅納反應或胺羰基反應。因此 ，海藻糖不會使含胺基酸的物質變質。此外，它是一種具 安定性物質，可自由應用和加工，而不必擔心發生變褐和 變質現象。因此，海藻糖已被期望用於許多領域內。例如 日本專利公開公報編號2 4 0，7 5 3/8 8刊載：海藻 糖是一種促進雙叉桿菌生長1的醣類並具有低致齲齒性。 接績硏究發現海藻糖在這活性上優於蔗糖*但其產量相當 低。因此，極切發展具有更高優越性的醣類。 __^Chemical & pharmaceutical Bulletin* , Vο 1 . 本紙張尺度適中國國家檫率（CNS > Α4規格（210Χ297公釐） (請先閲讀背面之注意事項一〔寫本頁) 遞 Α7 l.iB7 _ _ _1 _ 五、發明説明（） 2 26, ρρ. 3,306-3,311(1978)描述：異麥芽寡醣，如：異 麥芽三糖，別名右旋糖酐三醣，和異麥芽四糖，別名右旋 糖酐四醣等，已知可做爲雙叉桿菌的生長促進醣類*和如 曰本專利公開公報編號39，584/9 3和 5 3 ，4 6 5/9 3刊載：海藻糖已知是一種非或抗齲齒 醣。 然而，異麥芽寡醣有還原活性，會與胺基酸反應造成 變褐反應，而在食品製備時發生變質。因此，極需發展較 佳的醣類。 本發明者專注於海藻糖和異麥芽寡醣的這些特性，篩 檢具有不含還原力，對雙叉桿菌有選擇性生長活性和抗齲 齒的醣類，並預期在含有海藻糖和異麥芽糖構造的醣類中 存在此種醣類· Katsumi AJISAKA 和 Hiroshi FUJIMOTO 於 'Carbohydrate Research#，Vo 1. 19 9, ρρ. 227-234 經濟部中央標隼局負工消費合作社印裝 (请先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (1990)曾報導：利用源自酵母菌（Saccharomyce)的α -葡萄糖替酶成源自雪白根黴菌（Rhizopus niveus)的葡 萄糖澱粉酶，使海藻糖和葡萄糖之間進行縮合反應，而形 成α-異麥芽糖基α -葡萄糖替（即0 — α — D—吡喃葡 糖基—（1 — 6) — a — D —吡喃葡糖基a — D —吡喃葡 萄糖替）。而Kin等人於 ''Journal of the Japanese Society of Starch Science^ , Vol. 40* No.3, Page 349(1993)曾報導：利用源自於球形分節芽胞桿菌T 6株 (Artheobacter globiformis)的異麥芽右旋酶使聚葡 糖和海藻糖之間進行醣類轉移反應，而形成α -異麥芽三糖 本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ29?公釐） -5 ，
民國9〇年5月修正 4496 1 9 ΓΤΤΤΤΤ~j第85101^29號專利申請案 2 I中文說明書修正頁 五、發明說明（3) 基at -荀萄糖替（即0 — a — D —吡喃葡糖基-(1 — 6 )—0 - a - D -妣喃葡糖基一（1 — 6 ) — a — D -舭 喃葡糖基a_D-吡喃葡萄糖苷）。然而，本發明者發現 這些報導並未對這些醣類的特徴提出報告，並且含有海藻 糖和異麥芽糖構造的醣類仍未被報導。 本發明的概要 爲了克服上述的問題，本發明者積極研究此種醣類， 組成和製法》 結果，本發明者發現非還原醣，如：a-異麥芽糖基 a —荀萄糖笞，at —異麥芽糖基a —異麥芽糖替，和a -異麥芽三糖基a -葡萄糖Μ (此後皆稱爲★醣類〃）具有 極佳安定性，對雙叉桿菌有高度促進生長活性，和抗齲齒 活性。因此發展出含有一或更多種醣類做爲有效成份的雙 叉桿菌生長促進劑和抗齲齒劑，其製法和應用。 附圖的簡沭 第1圖是at -異麥芽糖基a -異麥芽糖苷的構造圖。 第2圖是a -異麥芽糖基a —葡萄糖苷的構造圖。 第3圖是a -異麥芽三糖基《 —葡萄糖苷的構造圖。 本發明的詳細描述 本發明是關於一種分子內具有海藻糖和異麥芽糖構造 的新型非還原醣，即a —異麥芽糖苷基“ _異麥芽糖苷， 本紙張尺度適t國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公发） -------------裝--------訂---------京 (請先閱讀背面之注意審 丹填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 # 49 6 1 g Α7 Β7 經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 五、發明説明（4 ) 其製法相應用。而且，本發明發展含有此新型非還原醣做 爲有效成份的組成份，特別是雙叉桿菌的生長促進劑和抗 鎘齒劑，其製法和用途。本發明者同時發現：傳統已知的 π -異麥芽糖基α —葡萄糖苷和β —異麥芽三糖基ίΤ 一葡 萄糖苷和α _異麥芽糖基α —異麥芽糖苷有相似特性，因 此有相似的用途。 雖然本發明所使用的α —異麥芽糖基π -葡萄糖苷， α _異麥芽糖基α —異麥芽糖苷和α -異麥芽三糖基α — 葡萄糖替可以化學法合成，然宜利用生物化學反應進行大 規模的製造，特別是可利用—葡萄糖Μ酶（EC 3 . 2 . 1 . 2 0 )催化含海藻糖和澱粉性物質的水溶液而製 造。 含海藻糖和澱粉性物質的任何水溶液都可被本發明所 使用，只要α _葡萄糖苷酶催化此溶液時會產生醣類。例 如，含游離海藻糖和澱粉性物質的水溶液，和化合物分子 中具有海藻糖構造和α~1 ，4 一葡萄糖苷鍵結構造的其 他水溶液都可自由地使用。 以使用含游離海藻糖和澱粉性物質的水溶液爲例，可 由商業上獲得海藻糖，如有需要則其他的海藻糖製備法都 可使用。如利用傳統方法自酵母中萃取，從具產生海藻糖 的微生物培養物中分離，或由酵素催化後面所描述的澱粉 性物質。澱粉和它們的部部份水解物，如：糊化，液化和 溶解澱粉和麥芽寡醣都可做爲游離澱粉性物質。此種部份 澱粉水解物相當容易製備，即利用澱粉液化酵素如：β — (請先閲讀背面之注意事項/ .寫本頁) 本紙張尺度適用t國國家揉举（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐） 在 496 19 at B7 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 五、發明説明（5 ) 澱粉海耜澱粉分支酵素如：澱粉分支酶和異澱粉酶進行催 化反應。 同時產生海藻糖和澱粉性物質的方法包括，例如：由 本發明者申請刊載於日本專利申請編號1 5 6，3 3 8/ 9 3和7 9 ，2 9 1/9 4的：利用非還原醣生成酵素和 海藻糖釋放酵素催化含澱粉性物質的水溶液，和本發明者 申請刊載於日本專利申請編號1 9 9，9 7 1/9 3和 1 4 4，0 9 2/9 4的：利用麥芽糖/海藻糖轉化酵素 催化含麥芽糖的水溶液。 以使用具有海藻糖構造和β-l ，4 -葡萄糖替鍵結 的澱粉性構造的化合物爲例，這些化合物可利用下列方法 製備，如：由本發明者發表刊載於歐洲專利編號 0606753 Α2的：利用非還原醣生成酵素催化含 澱粉性物質的水溶液而形成具α — 1 ，4 —葡萄糖苷鍵結 的澱粉性構造和海藻糖構造做爲一尾端單位的化合物，和 由本發明者申請刊載於日本專利申請編號1 7 8，6 2 3 /9 3和1 6 7，4 8 6/9 4的：利用非還原醣生成酵 素和環麥芽糊精聚葡糖轉移酶催化含瀕粉性物質的水溶液 而產生分子中具海藻糖構造和，4 -葡萄糖苷澱粉 性構造的化合物。 任何的π —葡萄糖苷酶都可被本發明所使用，只要它 可將澱粉性物質內的α-l，4 -葡萄糖替鍵結轉化成《 —1 ，6 —葡萄糖Μ鍵結：如源自於黑徽菌（AspergiH-us niger)，專藤曲黴菌（Aspergillus saitoi)，泡盛 本紙張尺度適中國國家椟準（CNS ) A4規格（210X297公釐）~" -ft - I. , ! J— I n 裝 n n .1 I— n n ϋ II (請先閱讀背面之注意事項··,.寫本頁) 449619 五、發明説明（6 ) 曲黴菌（Aspergillus awamori)，爪哇毛黴菌（Mucor j a v a n i c u s )，產黃青黴菌（P e η 丨 c i 1 1 i u m c h r y s 〇 g e n u m ) ，熱帶念珠菌（Candida tropicalis)等的酵素都可使用 Ο 經濟部中央標準局負工消資合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項7、寫本頁) 本發明使用的酵素反應條件和方法是那些可形成醣類 的方法。一般含海藻糖和澱粉性物質的水溶液是以至少 0 · 1 單位 / 克乾燥固體（dry solid basis，d.s.b.) 澱粉的e —葡萄糖苷酶處理，宜爲1 一 1 〇 0單位/克乾 燥澱粉固體，反應溫度爲2 0 — 8 0 °C，pH=3〜9， 進行約0 . 1 — 1 0 0小時催化反應，宜爲1 — 7 0小時 。在本發明中，α —葡萄糖μ酶的1單位活性定義爲：在 4 0°C，ρΗ5 . 5條件下催化〇 . 2w/v%麥芽糖每 分鐘可產生2 j«mo V e的葡萄糖。本酵素反應形成的醣 類和寡醣具有一或許多的α —葡萄糖基殘基以1，6 一葡萄糖苷鍵結至醣類，如：这一異麥芽三糖基α -異麥 芽糖苷，or —異麥芽四糖基α —異麥芽糖苷，和α —異麥 芽三糖基α -異麥芽三糖苷。獲得的反應混合物通常含還 原醣如：葡萄糖、麥芽糖和麥芽三糖，以及完整的澱粉性 物質和海藻糖。當葡萄糖澱粉酶催化此反應混合物時，主 要形成α —異麥芽糖基dr —葡萄糖替和異麥牙糖基江 _異麥芽糖苔等非還原醣，然後將其收集並應用於本發明 Ο 通常由上述酵素反應所製造的醣類溶液其乾燥固體含 有5 — 4 0 w/v %具海藻糖和異麥芽糖構造的非還原醣 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS > A4規格（2丨0X297公釐） 449 6 1 9 A7 B7 經涛部中央標隼局貝工消費合作社印裝 五、發明説明（7 ) (符號在本發明中如果沒有其他特殊情形都 將縮寫爲^%|)，其中Λ—異麥芽糖基α-異麥芽糖誉 和《 —異麥芽糖基α -葡萄糖苷的含量分別爲1 — 5%d • s . b .和5 — 3%d . s . b .。此溶液可過濾並純 化成液狀產品，如有需要可進一步濃縮成糖漿或乾燥成固 體。 爲了改善醣類的特性，在使用前可將它們分離並純化 成更高純度的醣類，例如：利用酵母菌發酵法，膜過濾法 ，部份沈澱法，鹼處理法，和管柱層析法都適合使用以分 離並去除伴隨的醣類。特別是如日本專利申請編號 5 0 ，4 77/87和50，319/92所刊載的利用 强酸陽離子樹脂的管柱層析法都可使用，以去除伴隨的醣 類並收集富含醣類的部份。而固定式床、移動式床，和僞 移動式床的方法都可隨意使用。 如果有需要，可將獲得的醣類以氫化方法將具還原性 的醣類，如：葡萄糖和麥芽糖轉化成糖醇，使其還原力喪 失。 醣類本身不具有還原力，但有極佳安定性，相當低甜 度，相當髙品質，和輕微甜味。當口服投予包括人類的動 物時，它們消化道中相當難被消化，大部份都轉移至大腸 ，並且可有效做爲雙叉桿菌的生長促進劑。對雙叉桿菌的 選擇性生長會造成有機酸的形成，如：醋酸和乳酸，以及 降低腸道P Η値，並且抑制有害微生物如：腐敗菌和其他 造成自然感染疾病的微生物。而且，醣類可抑制有害物質 ^紙张尺度逋用中國國家橾率（CNS ) Α4規格(210Χ297公釐> ~" -in - (請先閱讀背面之注意事項声♦寫本頁) ^4961 9 A7 B7 經濟部中央標隼局貝工消費合作社印製 五、發明説明（8 ) 形成，如：氨，喟跺和糞醇，適宜地刺激腸道，和適當地 促進嬬動以控制腸道狀況。具有促進雙叉桿菌生長的醣類 會在大腸中被利用而形成有機酸，然後降低腸道P Η値， 增加溶解度，和如鈣、鐵和鋅等易於缺乏的礦物質吸收。 因此，醣類可做爲促進礦物質吸收劑。此外，它們不易被 龋齒誘發微生物所發酵，並且抑制這些微生物作用於蔴糖 而形成的不溶性聚葡糖，因此降低牙垢形成。由於這些特 性，使得醣類可做爲甜味劑而不會產生踽齒，並且做爲抗 齲齒劑。而且，醣類具有極佳化學安定性，可安定易於與 其他醣類產生變褐反應的胺基酸和寡胜肽，和易於喪失有 效成份和活性的生物活性物質，和滲透壓控制活性，部份 分配活性，光澤分配活性，保濕力，黏稠分配活性，‘預防 結晶化活性，難發酵性，和預防澱粉老化作用活性等特性 Ο 醣類的這些極佳特性使其可廣泛應用於許多組成份， 使其具促進雙叉桿菌生長活性和抗齲齒活性，如食品，飼 料，寵物食物，和藥品等形式。特別是，本發明有效成份 可隨意併入糖醇，礦物質和蔗糖等一或更多種化合物，而 得到具有促進雙叉桿菌生長活性和抗齲齒活性的組成物。 粗製或純化的醣類可完整使用做增加甜味的調味料， 如果有需要，這些醣類可伴隨一或更多種甜味劑使用，如 :糖漿粉、葡萄糖、麥芽糖、海藻糖、蔗糖、乳蔗糖、異 化糖、蜂蜜、楓葉糖、山梨糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇、二 氫化査爾酮、甜菊精、葡萄糖基甜菊精、瑞包地苷（ 本紙張尺度通用中國國家標準（CNsTa4規格（210Χ297公釐） ~ -11 - —¾ΐτΜ (請先Μ讀背面之注意事項庐寫本頁) 449619 A7 B7 五、發明説明（9 ) rebaudioside)、甘草替、L 一天門冬胺酸基L —苯丙胺 基甲基酯、糖精、甘胺酸和丙胺酸；和/或與如糊精、澱 粉或乳糖等塡充劑。 此醣類可完整地使用，如有需要，在使用前可隨意與 塡充劑、佐劑、賦形劑或結合劑相混合，並且進一步定型 成顆粒狀、球形、短棒狀、片狀、立方狀或錠劑狀等產品 〇 此醅類有極佳甜度，可與餐桌上具酸性、鹽類、辛辣 味或苦味物質相調和，並且對相當强酸和熱物質具容忍性 。因此，此醣類可做爲食品的一般甜味劑並改善其味道和 品質。 經濟部中央橾準局*:工消费合作社印製 此醣類可做爲許多種的調味料，如：醬油、，醬油粉 、味噌、味噌粉、酒糟（未精錬醬油>、鹹魚（味噌醬混 合鹽淹蔬菜）、魚香鬆（魚或紫菜粉）、美乃滋、調味汁 、醋、三杯醋（調味品並混合醬油、酒和醋）、粉末狀壽 司用醋（壽司的粉末狀醋）、中菜佐料（中國口味調味料 )、炸物佔醤（甜不辣醬）、涼麵沾料（日式麵醤）、調 味料、蕃茄醬、醃蘿蔔佐料（日式蘿蔔用的調味料）、酸 白菜佐料（中式捲心菜用的調味料）、烤肉醬（烤肉用發 )、咖哩醬、預先混合的燉菜、預先混合湯、調味料（乾 的鏗魚味調味料）、混合調味料、甜酒（相當甜的酒）、 新甜酒（合成的甜酒）、糖和咖啡糖。 此外，醣類逋宜做爲增甜劑，例如：日式點心如：煎 餅（米餅干）、年糕（糯米餅干）、小米杲（麵粉和米朗: 本紙張尺度適用t·國國家標準（CNS ) Μ現格（2I0X297公釐） }7 4496 1 9 A7 B7 經淹部中夫標率局貝工消費合作社印製 五、發明説明（10) 千）、米餅、豆沙包子（麺包塡充豆醬）、米粉糕（甜米 凍膠質）、豆沙（豆醬）、羊羹（豆的甜凍膠質）、水羊 葜（軟的紅豆凍膠質）、米稞（凍膠質狀的日本蛋糕）、 凍膠質、長崎蛋糕，和糖菓（日式太妃糖〉：西式點心如 :麵包、餅干、英式餅干、派、小甜餅、布丁、奶油、卡 士達泡芙、海線蛋糕、甜甜圈、巧克力、口香糖、牛奶糖 和糖果：冷凍點心如：冰淇淋和冰凍果子露；糖漿如：水 果保存用糖漿和刨冰用糖漿（刨冰）：糊類如：麵粉糊、 花生糊、水果糊和塗於麵包用之糊；加工蔬菜和水果如： 果醬、橘子果醤、糖漿保存水果和結晶化水果：醃製品如 :什錦醬菜（薄片蔬菜醃漬於醬油內）、醃蘿荀（新鲜蘿 荀浸漬物）、淹漬片狀濂荀和薤醬（浸漬慈葱類植物）； 肉製品如：火腿和熱狗；魚肉製品如：魚肉火腿、魚肉熱 狗、板魚（熟的魚類糊狀物）、竹輪（竹輪形的板魚）和 甜不辣（油炸食物）：調味品如：海膽醬（鹽醃的海膽內 臟）、烏賊醤（鹽醃的烏賊內臟）、酸昆布、魷魚絲和醃 甜酒河豚干：煮熟魚貝（食物放在醬油中熟煮）如：海苔 (乾的海草）、小菜（山裏蔬菜）、魷魚（乾的烏賊）、 小魚和甲殼類動物；每日餐點如：煮豆（煮的豆類）、馬 鈴薯沙拉和昆布捲（海藻捲）：乳製品；瓶子和罐頭食品 如：魚肉、肉、水果和蔬菜等瓶子和罐裝製品；酒精類飮 料如：合成的甜酒、利口酒、葡萄酒和威士忌酒；飮料如 :咖啡、茶、可可、果汁、碳酸飲料、乳酸飲料和乳酸菌 飲料：預先混合和速食食物如：預先混合的布丁、預先混 未^*尺度適闲中國國家橾举（匚呢>从規格（210'/297公釐） ： " -- ^1T# (請先閲讀背面之注意事項> 寫本頁) 44961 9 A7 B7 經濟部中夬標隼局員工消費合作社印裝 五、發明説明（u ) 合的熱餅，速食紅豆湯（預先混合的紅豆汁和米餅），和 速食湯：和飲料如：嬰兒食品、治療性食品，如營養飲料 ;和改善它們的味道和品質。 而且，這些醣類可應用於家畜動物家禽及蜜蜂、葚和 魚類等的飼料和寵物飼料，以改善它們味道的嗜好性。它 們也可做爲包括固體、糊狀或液體狀化粧品和藥品的甜味 劑，如：牙粉、唇資、唇乳、內服藥、錠劑、藥片、鳕魚 肝油滴，口腔清新劑、口香片和嗽口藥，也可做爲昧道品 質改良劑、味道掩飾劑或品質改良劑。 當使用做爲品質改良劑或安定劑，此醣類適宜應用於 易於喪失其有效成份和活性的生物活性物質內，和含有此 種生物活性物質的健康食品和藥品。此種醣類藉由併入含 有維生素如：硫胺素、核黃素，L 一抗壊血酸，鳕魚肝油 、胡蘿荀素、麥角固醇和生育醇，或含有酵素如：脂解酶 、彈性蛋白酶、尿激_、蛋白酶、澱粉酶、異澱粉酶 、聚葡糖酶和乳酸酶：萃取物如：人參萃取物、烏龜萃取 物、葉綠素萃取物、蘆薈萃取物和蜂膠萃取物；活的微生 物如：病毒、乳酸菌、和酵母；或生物活性物質如：蜂王 漿等溶液中，促進高品質健康食品和藥品的製造，使其具 有極佳安定性而不會喪失它們有效的成份和活性。 爲了將此種醣類併入上述的各種組成物中，在組成物 製備完成之前，我們可選擇適當方法將其併入產品內，例 如：混合、塗抹、包衣、槎揉、溶解、熔化、浸潰、滲入 、敷、噴霧、注射和固化。醣類併入所欲製的組成物含量 <請先《讀背面之注意事項真‘舄本頁) 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) Μ規格（210X297公釐） 14 4496 1 9 Α7 Β7
經濟部中央標準局員工消費合作社印I 五、發明説明（12) 至少爲0 . 1%，宜至少爲0 . 5%d . s . b .。此醣 類由於具有抗齲齒活性可做爲甜味劑，並隨意與蔴糖混合 併入組成物，此組成物中蔗糖的齲齒誘發作用則被抑制。 當與蔗糖一起使用時，併入組成物的醣類含量至少爲5 % ，而宜爲蔗糖乾燥固體重的1 0%。上述組成物（即雙叉 桿菌生長促進劑和抗齲齒劑）的使用方法將決於使用的組 成物種類，做爲有效成份的α -異麥芽糖基β -葡萄糖苷 、π -異麥芽糖基α —異麥芽糖苷，和α —異麥芽三糖基 α —葡萄糖苷的含置，和投予的頻率。通常投予成人的有 效成份劑量爲每天0 . 1 — 1 00克，宜爲0 · 5-30 克。 將具有促進雙叉桿菌生長和預防齲齒活性的本組成份 投予包括人類的動物後會誘發雙叉桿菌在腸內生長，特別 是在大腸中產生有機酸如：醋酸和乳酸，而降低腸道ρ Η 値。此組成物會抑制感染性和腐敗性細菌生長，並且抑制 胺基酸和蛋白質代謝時有害物質的產生。而且，本組成物 會適切地刺激腸道而促進蠕動，增加糞便含量，有效控制 腸道狀況，和預防便秘。本組成物具有促進礦物質吸收的 活性，如：鈣、鎂、鐵、銅、鋅和磷的吸收。 因此，本組成物具有促進雙叉桿菌生長和抑制齲齒的 活性，可爲所有年齡的男女使用而維持並促進他們的美麗 和健康，預防老年疾病、恢復並促進癒後健康，和治療和 /或預防西氨過多症，肝腦病，和骨質疏鬆症。 此外，本組成份對家畜如：豬、拘和貓，家禽如：金 (請先《讀背面之注意事項再_"本頁) 本紙乐尺度適用中國囷家標準（CNS)A4规格（210X297公釐） 4496 1 9 A7 B7 經濟部中央橾準局員工消費合作杜印装 五、發明説明（I3) 絲雀、鸚鵡和雞，和其他動物如：蜜蜂、蠶和魚都會發揮 極佳的影#力，例如：預防動物發生感染性疾病，抑制牠 們糞便的氣味，促進動物生長和產卵，和促進礦物質吸收 〇 此醣類相當容易與蔗糖加工製成組成物，而可預防蔗 糖的致齲齒性：當與蔗糖一起使用，加至蔗糖的醣類含量 至少爲5%，宜爲蔗糖乾燥固體重的1 〇% ◊以下實驗將 更詳細說明本發明： 實驗1 α -異麥芽糖基π —葡萄糖苷，α —異麥芽糖基α -異麥 芽糖替，和α —異麥芽三糖基-葡萄糖替的製備 將6 0份（重量）的海藻糖和4 0份麥芽四糖（購自 Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc. Okayam， a, Japan)加至1 5 0份水內，然後加熱使其溶解。將溶 液調整至6 0°0和〇11=5.5，加入5 units/g麥芽 四糖的轉葡萄糖苷酶〔此係源自黑麴菌（Aspergillus niger>的一種α —葡萄糖苷酶，購自Amano , Pharmaceu tical Co. Ltd·, Acihi, Japan〕，進行 2 4 小時酵素反 應，然後於1 0 0°C加熱2 0分鐘使酵素失去活性。此溶 液形成的乾燥固體中含有約2 2 % α -麥芽糖基α -葡萄 糖苷，—異麥芽糖基異麥芽糖苷和—異 麥芽四糖基α —葡荀糖苷，還原醣如：葡荀糖、麥芽糖和 麥芽三糖，和完整的海藻糖和麥芽三糖。將此溶液以活性 ^1. II ^^1 I I— n n » a^i _ - -1 in ..... -s (請先閎讀背面之注意事項孑4.寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > Α4規格（210X297公釐） -lfi - 4 496 1 9 經涛部中央橾準局貝工消費合作杜印製 A7 B7五、發明説明（14 ) 炭脫色；以Η—和0H-型式的離子交換樹脂脫鹽和純化 ;並注入塡充强酸陽離子交換樹脂的管柱層析儀，收集富 含α —異麥芽糖基《-異麥芽糖苷的部份而濃縮成約5 0 w/v %的溶液。 將强酸鹼金牖陽離子交換樹脂'^XT— 101 6， { N a·型式，4 %聚合度，購自 Tokyo Organic Chemic-a 1 I n d u s t r i e s , L t d ·，T o k y ο , J a p a η )懸浮於水中，並 塡充至內直徑5 . 4 cm的夾套式不銹鋼管柱。在本例子 中，使用4枝每枝具有5m凝膠層深度的管柱，以階段式 連接使其總凝膠層深度約2 Om。保持管柱溫度在6 0°C ，將5 v/v%醣類溶液注入管柱，利用6 0°C熱水，以 1 . 5空間速度（space velocity, SV)進行沖提，然後 分別收集富含α -異麥芽糖基α -葡萄糖替，異麥芽 糖基α -異麥芽糖苷和“ 一異麥芽三糖基葡萄糖苷的 部分。 將富含α —異麥芽糖基α _異麥芽糖苜和α —異麥芽 三糖基α -異葡萄糖替的部份合併並製成約2 w/v %溶 液。然後將此溶液調整至pH=5 . 0並混入Sunits/ g乾燥固體的葡糖澱粉酶，於4 0eC反應2 0小時，使在 非還原端具有or - 1，4糖苷鍵結的醣類分解。接著將此 混合物於1 0 0°C加熱2 0分鐘使酵素失去活性，冷卻， 並以一般方式脫鹽，純化並濃縮成4 Ow/v%溶液。再 將此溶液利用塡充+八碳矽凝膠、YMC - PACK R —3 5 5— 1 5* (購自 YMC Co., Ltd., Kyoto, Japan 本紙浪尺度通用中國固家梂準（CNS ) A4規格（210X297公釐) (請先閲讀背面之注$項再€本頁) -17 - '443 6 1 g at ______ B7_五、發明説明（) 1〇 的管柱層析儀分離富含α —異麥芽糖基《 -異麥芽糖Μ和 α -異麥芽糖基-異葡萄糖苷的部份。重覆上述步驟收 集富含α —異麥芽糖基Λ -異麥芽糖Μ，並眞空乾燥，而 可得到約2份（重量〉的粉末狀α -異麥芽糖基α -異麥 芽糖苷。此粉末產物含有約9 7%的β -異麥芽糖基α — 異麥芽糖苷。 同樣地，可獲得12份的粉末狀α—異麥芽糖基《— 葡萄糖苷，其中含9 8%的α -異麥芽糖基α -葡萄糖苷 ;和3份的粉末狀or —異麥芽三糖基λ —異葡萄糖苷，其 中含9 7%的β —異麥芽三糖基α -異葡萄糖苷。 實驗2 α _異麥芽糖基α —異麥芽糖苷的物化性質 利用富含α —異麥芽糖基α _異麥芽糖苷的粉末狀產 物進行α -異麥芽糖基α -異麥芽糖苷的物化特性硏究： (1 )元素分析 實驗値：C=42 . 1%，Η=6 . 3%， I.--------1^-------1T------^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 ο C 値 論 mil 理 子 分 VI/ 2 6 收 吸 線 外 紫 一準 標 一家 國 i國 中 i用 一-3 尺 |張 紙 一本 1 5 1± 4 8 %% % 8 5 式 II 學 Η 化 % 7 -—I 6
ο 2 4 Η 4 2 C 頓 耳 道 " 公 7 29 “9619 A7 __ B7 五、發明説明（i6) 溶解於水中後測量無吸收特徴 (4 )味道 (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) 具有約5分之1蔗糖的甜度，並且吃起來有令人偷 悅的味道但不會有令人不悅的氣味。 (5)於溶劑中的溶解度 易於於水，0 . IN NaOH和0 . 1N HC J2。難溶於甲醇和乙醇。不溶於氯仿和醋酸乙 酯0 (6 )呈色反應 在Μ酮一磺酸反應呈綠色。在菲林反應和碘反應呈 陰性反應。 < 7 )結構 - (a )以1 Ν硫酸水解只形成D —葡萄糖殘基； (b )經過一連串甲基化、酸水解、還原和乙醯化形成 醋酸糖醇酯或醋酸甲基乙烷醇酯以氣相層析儀分析醋酸甲 基乙烷醇酯發現形成1 : 1莫耳數比的1 ，5_雙_0_ 乙醯基一2，3 ，4 ，6 —四一 0_甲基糖醇和1 ，5， 經濟部中央橾隼局員工消費合作社印製 6 —三一 0 -乙醯基一2，3，4 —三—〇 —甲基糖醇： (c )可被葡萄澱粉酶部份水解成葡萄糖、海藻糖和 α -異麥芽糖基α -葡萄糖苷，但不被異麥芽糖聚葡萄糖 酶水解：和 (d )以 13C 一 NMR (nuclear magnetic resona-nce，核磁共振儀）分析，並以《-D -吡喃葡萄的化學 移動做爲標樂物質〔如J. H· Bradbury於''Carbohydrat- 本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4规格（210 X297公釐） -1Q - k i ϊ] ΤΗ:! Α7 Β7 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 五、發明説明（） 17 e Research，，Vol. 126，pp. 125-156 ( 1 9 8 4 )，報導〕 ’可得到12個13C訊號，顯示此粉末狀產物是一種由 〇~a — D — flit喃葡糖基一（1 — 6) - α — D-0比喃葡 萄糖苷所組成的醣類。由分子量和醣類組成份分析結果顯 示此粉末狀產品是由葡萄糖組成的四醣類。樣品的13C 訊號數目是2 4個碳原子的一半顯示其具有對稱結構，即 〇~a — D —吡喃葡糖基-(1 — 6) -α-D—吡喃葡 糖基0— α — D—卩比喃葡糖基—（1 — 6) —卩比 喃葡萄萄糖替。 根據這些結果，粉末狀產品的構造顯示於第圖。 此構造命名爲α —異麥芽糖基cr 一異麥芽糖苷。 α -異麥芽糖基α -葡萄糖苷和α -異麥芽三糖基α 一異麥芽糖替的物化特性和分析結果都類似於α —異麥芽 糖基α —異麥芽糖替，顯示這些物質分別是0 - ci — D — 吡喃葡糖基一（1 — 6) - α-D—吡喃葡糖基a_D-吡喃葡萄糖苷和〇 - α — D—吡喃葡糖基一（1 — 6)— a — D —吡喃葡糖基α—D -吡喃葡萄糖苷，並圖示於第 2及3圖。 實驗3 梅納反應 將含有利用實驗1方法製備的1〇w/v%a-異麥 芽糖基α—葡萄糖苜*lw/v%甘胺酸和50mM磷酸 鹽緩衝液（PH7 _ 〇)的溶液，於100°C反應90分 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規柢（210x 297公釐） -20 - ^^^1 - - * ^^^1 1^1 J^i ^^^1 ϋ^ι ^^^1 ^^1 11^ nn 、vs (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 4 9 6 t 9 A7 __B7_ 五、發明説明（18 ) 鐘，然後冷卻，並測量在4 8 Onm波長的吸光値。同樣 地也測量α -異麥芽糖基α -異麥芽糖苷和α —異麥芽三 糖基α —葡萄糖Μ的吸光値並以海藻糖•異麥芽三糖、異 麥芽糖和異麥芽四糖爲控制組。其結果列於表1 : g_ 酷類 呈色程度（ 480ηιη波長） 海藻糖 0 . 0 0 7 異麥芽糖 0 . 9 3 S 異麥芽三糖 0 . 6 4 2 異麥芽四糖 0.495 濟 α _異麥芽糖基π -葡萄糖苷 0.021 α —異麥芽糖基α -異麥芽糖苷 0.016 α-異麥芽三糖基 α -葡萄糖苷 0.019 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 部 中 央 準 k 員 工 消 合 作 社 印 % 44961 9 經濟部中央梯準局員工消費合作社印製 A7 _____B7_五、發明説明（19 ) 由表1結果顯示：α -異麥芽糖基α —葡萄糖替具有 相當低的呈色程度，僅相當於與其具有相同葡萄糖聚合度 (glucose polymerization, GP)的還原醣一異麥芽三糖 的3 %，並且類似於不產生梅納反應的海藻糖。同時也證 實，α -異麥芽糖基α -異麥芽糖苷和π -異麥芽三糖基 α —葡萄糖苷與α —異麥芽糖基α -葡萄糖砮相類似，皆 不易發生梅納反應。 實驗4 消化測試 根據 Okada 等人於 ''Journal of Society of Nutrition and Food Science^ , Vol.43, No.l, pp 2 3 , 2 9 ( 1 990 )發表的方法，將依實驗1方法製備的異 麥芽糖基β —葡萄糖苷測試其在試管中的消化率，並且依 照水解比率（葡萄糖/總糖類的比値）以評恬其消化程g 。依實驗1方法製得的α —異麥芽糖基α —異麥芽糖替和 α ~異麥芽三糖基α —葡萄糖苷，也以上述方法進行測試 。並利用麥芽糖、海藻糖和異麥芽糖爲控制組。結果列於 表2 ： II-------^------II------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) Α4規格（2丨0 X 297公釐） 349619 A7 B7 五、發明説明（2〇 )毯_2 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 醣類 分解比率（％ : X 1 0 0 =(葡萄糖/總糖類） 唾腺澱 胃 酸 粉 酶 胰液澱 來自小腸黏 粉酶膜的酵素 麥芽糖 0.0 0.0 0.2 8 0.1 海藻糖 0.0 0 . 0 0.0 1 . 3 異麥芽糖 0.0 0.0 0 . 2 13.2 α —異麥芽糖基 α —葡萄糖苷 0.0 0.0 0.5 5 . 3 α —異麥芽糖基 π —異麥芽糖Μ 0 . 0 0 . 0 0 . 3 6.0 α -異麥芽三糖基 α -葡萄糖苷 0.0 0.0 0 . 5 8.8 ----------^------ΪΤ------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本炅) 本紙張尺度逋用中國國家樣準（CNS ) A4说格（210X297公釐） 4496 1 9 A7 B7 經濟部十央標隼局員工消費合作社印製 五、發明説明（21) 由表2結果可證實，當口服投予or —異麥芽糖基α — 葡萄糖替時，僅少部份被小腸黏膜酵素所水解*而大部份 可到達大腸：然麥芽糖和異麥芽糖主要被此酵素所分解。 雖然此酵素對於α -異麥芽糖基《 -異麥芽糖苷和α -異 麥芽三糖基α -葡萄糖替的分解速率是稍微不同於β -異 麥芽糖基α —葡萄糖苷，但可確信的是其低消化率和低卡 路里是類似於α -異麥芽糖基α —葡萄糖奋。 實驗5 腸道微生物的同化作用 將腸道微生物培養於添加或不添加依實驗1方法製備 含0 . 5w/v%or —異麥芽糖基α -葡萄糖苷的PYF 培養物（腩酵母萃取物fildes溶液培養物〉，於3 7°C培 養 9 6 小時（依照 Tomotari MITSU0KA 於 'A Color Atlas of Anaerobic B a c t e r i a ^ ,Kabus h i k i Ka i s h a Sobunsha, Tokyo, Japan,第 325 頁（ 1 98 4 )發表的方法 )。爲了評估微生物的生長速率和同化能力，將反應後的 培養物稀釋5倍，並測量在7 5 0 nm波長的混濁度。依 實驗1方法製備的α _異麥芽糖基α —異麥芽糖苷和α — 異麥芽三糖基or —葡萄糖苷也以上述方法進行測試。並且 以葡萄糖、海藻糖和異麥芽糖爲控制組。結果評定的條件 列於表3 ，並且將結果列於表4和5 : I.--------装------*r------ t (請先聞讀背面之注項再填寫本頁) 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐} -9.4 - 4496 彳 9 A7 __B7 五、發明説明（22 ) 表 3 於750nm波長時 評 定 的混濁度（X 5 ) 小於0 . 1 — 小於0 . 1 5大於等於0 . 1 土 小於0 . 2大於等於0 . 1 5 + 小於0 . 3大於等於0 . 2 + + 大於等於 0 . 3 + + + (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝_ 訂 經濟部中央揉準局員工消費合作杜印製 本紙張尺度適用中國國家橾隼（CNS ) A4規格（210X297公嫠） 449619 A7 B7 五、發明説明（23 )m_4 經濟部中央標準局負工消費合作社印裝 微生物菌株 醣類 不含 A 糖 B C D E F 青春雙叉桿菌 JCM 1275 - + + + + 十 + + + + + + + + + + + 動物雙叉桿菌 JCM 1190 - + +十 + + + + + + 十 +++ + + + 兩岐雙叉桿菌 JCM 1255 — + + -f + + + + + + 短雙叉桿菌 JCM 1192 - + + - + + + +++ + + + ++ + 嬰兒雙叉桿菌 JCM 1222 - + + - 十 + + + + + + + + + + 長雙叉桿菌 JCM 1217 - + + + + + + + + + + + + + + + + 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐} ---------^------ΪΤ------.戒 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -
A B 4496 1 9 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 五、發明説明（ 24 ) 表 4 ( 續） 微生物菌株 醣類不含 A B 糖 C D E F 發酵乳桿菌 IF0 3959 - + + + - - - .- - 植物乳桿菌 IF0 3070 - + + + + - - - - 產氣眞桿菌 ATCC 25986 - 屮+ + + - - - 吉氏擬桿菌 JCM 5825 - + + + + + - - - 註：表中之A至F符號分別表示： A，葡萄糖；B，海藻糖；C，異麥芽糖： D，α —異麥芽糖基α —葡萄糖苷， Ε，α —異麥芽糖基α —異麥芽糖苷；和 F，α -異麥芽三糖基α -葡荀糖苷 I-------i-------tl------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS)A4規格（210X297公釐） ^496 1 9 A7 B7五、發明説明（25 )Μ_5 微生物菌株醣類 不含 A B C D E F 糖 普通擬桿菌 JCM 5826 I..— I-----'—裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 單形擬桿菌 JCM 5828 酪酸梭菌 JCM 1391 產氣莢膜梭菌 - + + ++ + + 士 .+ - 土 JCM 3816 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 多枝梭菌 JCM 1298 產芽胞梭菌 土 + ++ 士 土士土 JCM 1416 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） -?« - 449619 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（ 26 ) 表 5 (續） 微生物菌株 醣類 不含 A 糖 B C D E F 糞鏈球菌 I AM 1 0065 - + + 臍鏈球菌 ATCC 9321 - + + - 土土士 大腸桿菌 IF0 3301 - + - — - - 註： :表 中 之 A 至 F 符 號 分 別表 示： A : -葡 萄 糖 B 海 藻 糖 ；C ，異麥 芽糖 D : » a — 異 麥 芽 糖 基 a — 葡萄糖替； E， p a — 異 麥 芽 糖 基 a — 異麥 芽糖替 :和 F ’ 1 a 一 異 麥 牙 三 糖 基 a 一葡 萄糖苻 〇 由表4和5結果顯示，不像控制組的葡萄糖和海藻糖 ，本發明的α —異麥芽糖基α -葡萄糖苷，α -異麥芽糖 -W - 本紙張尺度適用中國國家棣準（CNS ) Α4規格（2ΙΟΧ297公釐） ----------^------1Τ------^ (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) 449619 經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝 A7 _B7_五、發明説明（27 ) 基α -異麥芽糖苷和α -異麥芽三糖基α —葡萄糖苷可被 雙叉桿菌靥高度選擇性同化。將這些結果和實驗4結果相 結合可得知：當口服投予異麥芽糖基α —葡萄糖苷、 π _異麥芽糖基π _異麥芽糖替和α —異麥芽三糖基α — 菊萄糖苷於哺乳動物時，大部份的醣類會到達大腸並且做 爲雙叉桿菌屬的生長促進劑。 實驗6 對體內雙叉桿菌屬生長促進活性的影響 將1 0 g β -異麥芽糖基—葡萄糖苷或1 〇 g異麥 芽糖基α —異麥芽糖苷溶於熱湯中，於每天午餐時間以口 服投予5位平均年齡4 0 . 6歲，平均體重6 2 . 2kg 的健康自願者，共給予14天。實驗程序如下：在給予α 一異麥芽糖基or —葡萄糖笞的第一次實驗期和給予—異 麥芽糖基—異麥芽糖苷的第二次實驗期之間有14天的 控制期。在14天投予實驗期之前和之後的每天糞便重量 、糞便重量相對變化，糞便的ρ Η値，每克糞便的總微生 物數，糞便中雙叉桿菌扃佔總微生物數的百分比，和雙叉 桿菌屬總數的相對變化都要測量，然後計算五位自願者的 平均値。在這些測量中，微生物的總數是依照下列報導的 方法所測定.A Color Atlas of Anaerobic Bacteria '，pp · 53-65 (1 984 )，編辑者：Tomotar i MITSUOKA， 出版者：Kabushiki Kaisha Sobunsha, Tokyo, Japan ( 1984)。方法如下：將生長於i 3種不同種類的培養基（ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----------Μ------it------^ (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 449619 A7 B7 五、發明説明（28) 不含Ml 0培養基）的菌落評其所靥於的^靥〃並計算細 胞數目。將所有微生物屬得到的細胞數目加起即代表總微 生物數。雙叉桿菌佔總微生物的百分比係將計算得到的雙 叉桿菌靥數目除以總微生物數目並乘以1 〇 〇。雙叉桿菌 總數的相對變化係將每克糞便所含的雙叉桿菌數乘以總糞 便重，然後以1 4天投予實驗期之前的數目做爲1 0 0， 以求其相對値。重量p Η値的變化，和自願者糞便內的雙 叉桿菌總數都列於表6。 ----------i------IT------Μ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟·邱中央標準局貝工消費合作社印製 準 標 -家 國 國 中 一用 一遑 I度 尺 一張 -紙 本 Μ S Ν 一釐 公 7 29 感 ^4961 9 A7 B7 經濟部中央標率局員工消費合作杜印製 五、發明説明（ 29 ) 表 6 a — 異麥芽糖基 α _異麥芽糖基 a — 異麥芽糖替 α —葡萄糖苷 之前 之後 之前 之後 糞便重量 (g/day )* 128 土 32 142 土 40 125 土 33 140 土 37 糞便重量的 相對變化〃 100 111 100 112 糞便的pH値* 6 · 7 ± 0 . 5 5 · 9 ± 0 · 3 6.6土 0.5 6 . 0 土 0 . 4 每克糞便所 含總微生物* 10 . 8± 0 . 2 10 . 9± 0 2 10.9± 0.2 10‘9± 0.2 每克糞便所 含雙叉桿菌 的百分比（％ ) 9 . 9土 0 . 2 * * 10 . 3土 0 I 9 9± 0 · 2 1 0 3 ± 0 . -----------^------ir--------^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 4496 1 9
7 7 A B 五、發明说明（30 ) m_6 (績） a a -異麥芽糖基 一異麥芽糖苷 α -異麥芽糖基 α —葡萄糖苷 之前 之後 之前 之後 雙叉桿菌佔 總微生物的 百分比（％ ” 12.3 25 . 0 12.3 24 . 5 雙叉桿菌的 相對變化* 100 256 100 231 I!---------^------tr------^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準局負工消費合作社印裂 註：表中之和''pi符號分別表示平均値或平均値 土標準偏差和每克糞便的相對平均値土標準偏差。 比較表6中α —異麥芽糖基α —葡萄糖替或異麥 芽糖基α _異麥芽糖苷投予之前的資料顯示，給予此二種 醣類會降低糞便的pH値約0 . 6 — 0 · 8，並且增加每 日糞便量，每克糞便中雙叉桿菌的細胞數，雙叉桿菌佔總 微生物數百分比增加2倍，其中雙叉桿菌的總數增加約 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格（210X297公釐） 4 96 19 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印装 五、發明説明（31) 2 . 3至2 . 5倍。同樣地，α —異麥芽三糖基α —葡萄 糖替和《 -異麥芽糖基β -葡萄糖苷及α —異麥芽糖基泛 一異麥芽糖Μ有相似的結果，即在胃中難以被消化，大部 份都到達大腸並促進雙叉桿菌的生長。 實驗7 經由齲齒誘發微生物的酸生成作用 利用實驗1製備的π -異麥'芽糖基π -葡萄糖苷和 K a η 〇 U T A K E U C Η I 於'』3卩311656』〇111'1131〇€0『&181〇1〇§-y' , VgI· 26, ρρ. 698-713 (1984)報導的方法，以硏究 是否此種醣類可被齲齒誘發微生物一梭地納斯鏈球菌 ATCC 27351 ( Streptococcus sobrinus ATCC 2 7 3 5 1 )所發酵。 實驗方法如下：將含有5 0 w/v%活的細胞懸浮液 和0 . 0 2M測試醣類的Stephen緩衝液（pH7 . 0 ) 於3 7°C攪拌，並在每一時間點測量混合物的p Η値。同 時也测試α -異麥芽糖基α _異麥芽糖替和α -異麥芽三 糖基λ _葡萄糖苷二種醣類，並且以蔗糖、海藻糖和異麥 芽糖爲控制組。結果顯示於表7: ---------^------ΐτ------^ (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨〇 X 297公釐） 449613 A7 B7 五、發明説明（32 ) ^_7 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 碰粗 在每一發酵時間（分）的ρ Η値 0®观 0 5 15 30 60 90 蔗糖 7.0 4.3 4.1 4.0 4.0 4.0 海藻糖 7.0 6.7 5.3 4‘7 4 . 3 4.2 異麥芽糖 7.0 7.0 6.9 6.9 6 . 8 6.7 π —異麥芽糖 基β -葡萄糖苷 7.0 7.0 6.9 6.9 6 . 9 6.9 α -異麥芽糖基 π -異麥芽糖替 7.0 7-0 6.9 6.9 6.9 6.9 α —異麥芽三糖 基《 —葡萄糖苜 7.0 7.0 6.9 6.9 6 . 9 由表7結果可知，蔗糖、海藻糖和異麥芽糖分別具有 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) A4规格（210 X 297公釐） ----------'^------ir—^-----t (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 449619 經濟部中央樣準局員工消費合作社印裝 五、發明説明（33) 快速，適中和輕微降低P Η的效果。而使用α —異麥芽糖 基α -葡萄糖苷並無降低Ρ Η的作用，顯示此種醣類不產 生酸生成作用。同樣地，α -異麥芽糖基α —異麥芽糖苷 和α -異麥芽三糖基α -葡萄糖苷也有相同的效果。 實驗8 對齲齒誘發微生物葡萄糖基轉移酶造成的不溶性聚葡糖的 抑制作用 利用依實驗1製得的α -異麥芽糖基β —葡萄糖苷和 根據 K a η 〇 u T A K E U C Η I 於、J a p a n e s e J 〇 u r n a 1。f 0 r a 1 Biology# Vol, 26, pp. 698-713 ( 1984 )發表的方法以硏 究源自梭比納斯鏈球菌株（ATCC 2 7 3 5 1 )的轉 移葡萄糖苷酶對蔗糖產生酵素作用合成不溶性琴葡糖的影 響〇 將由lmj? lw/v%蔗糖溶液，1 mJ? 1 w /v%測試醣類溶液，和0.1M磷酸鹽緩 衝液（PH6 . 8 )組成的混合物加入0 . 5mj?含1 0 m g蛋白質含量的粗葡萄糖基轉移酶的溶液再將此溶液置 於傾斜3 0度的小試管內，於3 7 °C進行1 6小時反應。 然後將此反應混合物小心轉移至另一試管內，以4 m β水 清附著於小試管內壁的殘餘物質，並將此溶液加至反應混 合物內，然後離心而得到非吸附的聚葡糖沈澱物。吸附和 非吸附的聚葡糖含量分別以葸酮一硫酸方法測定，此二者 總量則視爲不熔性聚葡糖的含量。控制組則以水取代測試 I.. I I I ^ΐτ------5-1--i (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用t國S家橾準（CNS ) A4说格（210X297公釐） 4496 1 9 五、發明説明（34) 醣類溶液進行反應，即反應系統中使用蔗糖做爲醣類。不 溶性聚葡糖生成的抑制百分率爲：一百減去測試醣類溶液 內形成的不溶性聚葡糖作控制組中形成的不溶性聚葡糖比 例。α -異麥芽糖基異麥芽糖苷和α -異麥芽三糖基 ^ 一葡萄糖苷依實驗1方法製備，並以類似上述方法進行 測試。以海藻糖和異麥芽糖進行上述類似測試做爲控制組 。其結果顯示於表8。 ----------^------1Τ-------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公嫠） A7 B7 44961 9 五、發明説明（35) g_8 經濟部中央橾隼局負工消費合作社印裝 醣類 非吸附的 聚葡糖產 率（Ai g/m 1 ) 吸附的聚葡糖 產率（/< g/m 1 ) 對不溶性聚葡 糖生成的抑制 百分比（％) 蔗糖（控制組> 923 1,160 - 蔗糖+海藻糖 1,130 772 8.7 蔗糖+異麥芽糖 305 67 82.2 蔗糖+ Of —異麥 芽糖基α -葡 萄糖苷 118 30 92.9 蔗糖+ α -異麥 芽糖基α -異 麥芽糖苷 298 72 82.2 蔴糖+ β —異麥 芽三糖基α -葡萄糖苷 269 66 83:9 本紙張尺度適用中國國家標牟（CNS ) A4C格（21GIX297公釐） I.--------1------IT------φ. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 449619 Α7 Β7 經濟部中央揉準局員工消費合作社印製 五、發明説明（36) 從表8結果發現.：與蔴糖控制組相比，由異麥芽 糖基α —葡萄糖替形成的非吸附和吸附聚葡糖量是非常少 ，並且比海藻糖和異麥芽糖控制組更加抑制不溶性聚葡糖 的生成。同時也發現：α -異麥芽糖基or —異麥芽糖苷和 α ~異麥芽三糖基α _葡萄糖苷與異麥芽糖基β -葡 萄糖苷相似，都具有抑制不溶性聚葡糖生成的效果。 綜合實驗7結果可知；α—異麥芽糖基α—葡萄糖登 、α —異麥芽糖基α —異麥芽糖Μ和α —異麥芽三糖基α 一葡萄糖苜都不易被牙齒的齲齒誘發微生物發酵，可抑制 因這些微生物形成的不溶性聚葡糖，並且有效抑制不溶性 聚葡糖在牙齒表面的吸附作用。因此，這些醣類與蔗糖一 起使用時，它們可有效抑制蔗糖的齲齒性，所以它們適合 做爲齲齒抑制劑。 實驗9 急性毒性試驗 將依實驗1方法製得的α —異麥芽糖基α -葡萄糖苷 投予小鼠以進行急性毒性試驗。當給予最高可能劑量時， 並沒有老鼠死亡。此意謂對小鼠而言其LD50是5 Og/ kg或更高，因此此種醣類的毒性非常低。同樣地，α — 異麥芽糖α —異麥芽糖苜和α _異麥芽三糖基α -葡萄糖 替與α -異麥芽糖基α -葡荀糖替有相類似的結果，即這 些醣類的毒性非常低。 實施例Α和Β將說明製備含有-異麥芽糖基α -葡 本紙張尺度適用中國國家揉率（CNS > Α4規格（2丨0Χ297公釐) ~ -邛一 I--------^.-------玎------^ (請先Μ讀背面之注$項再填寫本頁) Α7 Β7 五、發明説明（37) (請先閲讀背面之注意事項再¥寫本頁) 萄糖苷或α —異麥芽糖基α —異麥芽糖苷和/或α —異麥 芽糖基（Τ -葡萄糖苷此種有效成份的雙叉桿菌生長促進劑 的程序，和·具有促進雙叉桿菌生長活性的本組成份，其中 含有α —異麥芽糖基α -葡萄糖苷或α -異麥芽糖基α _ 異麥芽糖苷和/或α -異麥芽糖基α -葡萄糖替此種有效 成份： 實施例A — 1 取1份（^份〃皆指重置而言）海藻糖和1份天碳醣 當量（dextrose equivalent，DE )爲 1 8 的糊精一' PINE—DEX # 4 '〈購自 Matsutani Chemical Ind., Co·, Ltd., Hyogo, Japan)加熱溶解於 2 . 5 份 經濟部中央樣準局員工消費合作社印製 水中。然後將溶液調至6 0°C，pH=5 . 5，並混入5 單位/克乾燥固體的α —葡萄糖苷酶（源自於黑徽菌一） ，進行2 0小時酵素反應，然後於9 5 °C加熱3 0分鐘使 酵素失去活性。以一般方式將此溶液脫色，過濾，脫鹽並 以Η —和0H —型式的離子交換樹脂純化，再濃縮成7 5 -異麥芽糖基α —異麥芽糖苷的糖漿，產率約9 2% d . s . b . ° 此產品含2 l%d . s . b .的or —異麥芽糖基α — 葡萄糖替，5%d . s . b .的or —異麥芽糖基α —異麥 芽糖苷和7%d _ s . b •的α-異麥芽三糖基α -葡萄 糖苷，其可做爲雙叉桿菌的生長促進劑，礦物質吸收促進 劑，和抗齲齒試劑。此產品有適宜甜度，黏稠度和保濕力 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > Α4規格（210Χ297公釐） A7 B7
449,6,1 Q 五、發明説明（38) (锖先鬩讀背面之注f項本頁) ，因此岢做爲食品，化粧品和藥品組成物中的甜味劑，味 道改良劑，安定劑，塡充劑，佐劑和賦形劑，並且具有促 進雙叉桿菌生長，礦物質吸收和預防齲齒的活性。 實施例A — 2 將依實施例A-1方法得到反應混合物純化並濃縮成 5 Ow/v%的醣類溶液。爲了增加α-葡萄糖轻含量， 將此溶液依照實驗1方法通入塡充N a —型式强酸陽離子 交換樹脂—*XT— 1016# ，內徑5. 4cm，總凝 膠層深度2 Om的4個夾套不銹鋼管柱的管柱層析儀 將5 v/v%醣類溶液加至樹脂管柱內，保持內部管 柱於6 0°C，以6 0°C熱水在0 . 1 5SV下進行沖提， 然後收集富含異麥芽糖基α -葡萄糖苷的部份以去除 伴隨的醣類如：麥芽糖和葡萄糖。將收集的部份聚集、純 化、濃縮、眞空乾燥並粉末化，而可得到富含《 -異麥芽 糖基α —異麥芽糖苷的粉末，產率爲2 5%d . s . b · Ο 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印製 此產品含2 0%d . s . b ·的α —異麥芽糖基α- 異麥芽糖苷，3 2%d · s . b .的α —異麥芽糖基α — 葡萄糖苷和2 異麥芽三糖基葡萄糖苷，其可 做爲雙叉桿菌的生長促進劑、礦物質吸收促進劑和抗齲齒 試劑。因爲此產品含有相當低還原性和適中髙質甜度， 因此可做爲食品、化粧品和藥品等組成份中的甜味劑、味 道改良劑、安定劑、塡充劑、佐劑和賦形劑，並且具有促 本紙張尺度適用t國國家標隼（CNS ) Α4規扁·（ 2ΙΟΧ 297公釐） -41 - 4 4961 9 五、發明説明（39) 進雙叉棒菌生長，礦物質吸收和預防齲齒的活性。 實施例A _ 3 將1 0 w/v %馬鈴薯澱粉懸浮液加至碳酸鈣中使其 最於濃度爲l w/v%，然後將此懸浮液調至pH = 6.0,每克澱粉再加入0.1%的or —澱粉酶、 SPITASE HS’ （購自 Nagase Biochemicals， Ltd·, Kyoto i Japan)，於加熱攪拌下進行糊化和液化。然後於 1 2 0°C消毒2 0分鐘，並調至4 0°C和pH=6 . 5。 再加入5 0 0單位/克乾燥固體澱粉的異澱粉酶（購自 Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc., Okay a -raa ，Japan ) ，3單位/克乾燥固體澱粉的非還原醣類 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項寻i寫本頁) 生成酵素〔源自於分節芽胞桿菌3 0.<3 3 6"1'1:111'〇卜 acter sp. Q36)(FERM BP-4316)，此酵素發表於日本專 利申請案編號7 9，2 9 1/9 4，是由本申請者所提出 申請。〕和1 5單位/克乾燥固體澱粉的海藻糖釋放酵素 (也是源自於上述相同菌株），進行12小時酵素反應而 可得到含5 5%d · s . b ·海藻糖的醣類溶液◊然後將 此溶液於9 5 °C加熱3 0分鐘使酵素失去活性，再濃縮成 4 5%d . s . b .溶液，並調至 6 0°C 和 pH=5 . 0 ，然後加入3單位/克乾燥固體的α -葡萄糖苷酶（其係 源自熱帶念珠菌株-Candida tropicalis ( IF0 0589) ，購於 Hayashibara Biochemical Laboratories, [nc.，
Okayama, Japan)，進行2 4小時酵素反應。然後將此溶 本紙張尺度逍用t國國家揉準（CNS > A4規格（210X297公釐} 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印装 4496 1 9 五、發明説明（40) 液於9 加熱3 0分鐘使酵素失活，再以活性炭脫色、 過濾、Η -和0Η -型式的離子交換樹脂脫鹽和純化，並 濃縮成含7 5%α -異麥芽糖基葡萄糖Μ的糖漿，其 產率爲95%d.s.b。 此產品含2 0%d，s . b ·的or —異麥芽糖基 葡萄糖苷，3%d . s _ b .的β —異麥芽糖基α —異麥 芽糖苷和5%d · s . b .的α -異麥芽三糖基α -葡萄 糖替，其可做爲雙叉桿菌的生長促進劑，確物質吸收促進 劑，和抗齲齒試劑。因爲此產品具有相當低還原性和適中 高品質甜度，因此可做爲食品、化粧品和藥品等組成份中 的甜味劑、味道改良劑、安定劑、塡充劑、佐劑和賦形劑 ，並且具有促進雙叉桿菌生長、礦物質吸收和預防齲齒的 活性。 實施例A — 4 將3 Ow/v%玉米澱粉懸浮液加至碳酸鈣中使其最 終濃縮爲0 .lw/v%，然後將此懸浮液高至PH= 6 5，每克澱粉再加入0 . 2w/v%的澱粉酶^ T E R M A Μ Y L 6 0 L '(購自 Ν ο ν ο I n d u s t r i A / S , C 〇 p e n h a g e η， Denmark )於加熱攪拌下進行糊化和液化。然後於1 2 0 。(：消毒2 0分鐘，並冷卻至5 5°C。再加入5 0 0單位/ 克乾燥固體澱粉的異澱粉酶（購自Hayashibara Biochemical Laboratories, [nc，， Okayama, Japan) 和 3 0 單 位/克乾燥固體澱粉的卢-澱粉酶（購自Nagase Biochemi- 本纸張ΛΑ適用中國國家橾準（CNS ) A4现格（2! 0 X B7公釐） ----------^-------ΐτ------.if (請先Μ讀背面之注意事項？寫本頁) 4496 1 2 at Β7 五、發明説明（41) (請先聞讀背面之注$項再¥寫本頁) cals，Ltd.，Kyoto, Japan)，進行4 8小時酵素反應而 可得到含8 4%d . s . b ·麥芽糖的醣類溶液。然後將 此溶液於9 5eC加熱3 0分鐘並調至6 0°C和pH = 7 . 0，再加入1單位/克乾燥固體澱粉的麥芽糖/海藻 糖轉化酵素（係源自於水生棲熱菌一Thermus aquaticusC ATCC 33 92 3)，此發表於日本專利申請案編號 144，092/94，是由本申請者所提出申請〕，進 行2 4小時酵素反應，而得到含5 0%d . s . b .海藻 糖的醣類溶液。將此溶液調至pH=5 . 5，加入3單位 /克乾燥固體的α -葡萄糖苷酶（係源自於黑麴菌），於 6 0°C反應2 4小時。然後將此反應混合物於9 5 °C加熱 3 0分鐘使酵素失活，以活性炭脫色，過濾，Η -和OH 一型式的離子交換儀脫鹽和純化，濃縮，眞空乾燥並粉末 化，而可得到含《 —異麥芽糖基or —葡萄糖苷的粉末，產 率爲 9 0%d.· s . b .。 此產品含2 0%d . s . b .的or —異麥芽糖基or — 葡萄糖苷，4%d . s . b . 異麥芽糖基異麥芽 經濟部中央樣準局員工消費合作杜印褽 糖苷和6 % π _異麥芽三糖基α -葡萄糖旮，其可做爲雙 叉桿菌的生長促進劑、礦物質吸收促進劑，和抗龋齒試劑 。此產品有適宜甜度、黏稠度和保濕力。因此可做爲食品 、化粧品和藥品等組成份中的甜味劑、味道改良劑、安定 劑、塡充劑、佐劑和賦形劑，並且具有促進雙叉桿菌生長 礦物質吸收和預防龋齒的活性。 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS)A4規格（2t〇X297公釐）-44 - 449619 A7 B7 五、發明説明（42 ) 實施例A - 5 將3 Ow/v%的馬鈴薯澱粉懸浮液加至碳酸鈣中使 其最終濃度爲0 .lw/v%，然後將此懸浮液調至PH =6 . 5 ，每克乾燥固體澱粉再加入0 . 0 1%的澱 粉酶，S Ρ I T A S E H S，（購自 Nagase Biochemicals, Ltd., Kyoto, japan)，於加熱攪拌下進行糊化和液化。然後於 1 2 〇 °C消毒5分鐘並冷卻至5 5 °C，而可得到D E小於 1的液化澱粉溶液。將此溶液調至pH=7 . 0，加入 1 5 〇單位/克乾燥固體澱粉的支鏈澱粉酶和8單位/克 乾燥固體澱粉的麥芽四糖生成澱粉酹（二種酵素皆購自 Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc., 0 k a y a -ma ，Japan )，於5 0 °C反應3 6小時。然後於9 5 eC加 熱3 0分鐘，冷卻至4 5 °C，加入2單位/克乾燥固體澱 粉的非還原醣生成酵素〔源自於根瘤菌5?.1|1-11(1?11丨2-obiura sp. M-11)(FERM BP-4130)，此發表於Europe an Patent Pub 丨 ication Ν〇·0606753 A2，此由本申請者所申 請。〕，進行6 4小時酵素反應。然後調至6 0 °C和pH =5 . 0，再加入3單位/克乾燥固體澱粉的α_葡萄糖 苷酶〔源自熱帶念珠菌（IFO 0589)]，進行 2 4小時酵素反應。將此反應混合物於9 5 °C加熱3 〇分 鐘使酵素失去活性，以活性炭脫色、過濾、H —和OH — 型式的離子交換儀脫鹽和純化、濃縮、眞空乾燥並粉末化 ，而可得到含π -異麥芽糖基《 _葡萄糖苷的粉末，產率 爲 . s . h ___—_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）-45 - ----------參------1T------I^f (請先閱讀背面之注意事項f寫本頁) 經濟部中央榉準局貝工消費合作杜印裝 4496 1 9 at B7 五、發明説明（43) 此產品含1 8%d . s . b .的or —異麥芽糖基α — 葡萄糖替，4 -異麥芽糖基異麥芽糖替和5 (請先W讀背面之注意事項再<寫本頁) 一異麥芽三糖基1 -葡萄糖替，其可做爲雙叉桿菌的生長 促進劑、破物質吸收促進劑，和抗齲齒試劑。因爲本產品 具有適宜甜味、黏稠度和保濕力，因此可做爲食品、化粧 品和藥品中的甜味劑、味道改良劑、安定劑、塡充劑、佐 劑和賦形劑，並且具有促進雙叉桿菌生長、礦物質吸收和 預防齲齒的活性。 實施例A — 6 將3 Ow/v %的玉米澱粉懸浮液加至碳酸鈣中其最 終濃度爲0 .lw/v%，然後將此懸浮液調至PH= 經濟部中央標牟局員4消費合作社印裝 6 . 5 *並加入0 . 3w/v%的—殺粉酶'TERM AMYL 6 0 L# (購自 Novo Industri A/S Copenhagen, Denmark) ， 加熱攪拌使澱粉糊化和液化。然後於 1 2 0°C消毒3 0分鐘，冷卻至5 5°C，而可得到DE = 4的液化澱粉溶液。每克乾燥澱粉固體加入4單位的非還 原醣生成酵素（源自分節芽胞桿菌sp . Q 3 6 ( FERM BP — 4 3 1 6 )，5單位的環麥芽糊精葡萄 糊轉移酶和3 0 0單位的異激粉酶（以上二種酵素皆購自 Hayashibara Biochemical Laboratories, [ n c . , 0 k a y a -1^，』3卩311)，於〇11=6.3及4 5°(：反應4 8小時。 然後於9 5 °C加熱3 0分鐘使酵素失去活性並將混合物調 ：gr>i4=R . Fi孖5 5°Γ，加入10厘元/宽齩幡薅粉因 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4洗格（210X297公釐）-46- 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 4496 1 9 at B7 五、發明説明（44) 體的α -澱粉酶，進行1 6小時反應。然後於9 5 °C加熱 3 0分鐘使酵素失去活性，冷卻至6 0°C，再加入3單位 /克乾燥澱粉固體的葡萄糖苷酶（源自黑徽菌），進 行2 4小時反應。將反應混合物於9 5 °C加熱3 0分鐘使 酵素失去活性，以活性炭脫色，過，Η —和0H —型式的 離子交換儀脫鹽和純化，再濃縮成含α —異麥芽糖基α -葡萄糖苷的糖漿，產率爲9 5%。 此產品含有18%%d·s·b.的α—異麥芽糖基 α —葡萄糖苷，2%d . s · b _的異麥芽糖基α -異麥芽糖苷和3%d . s . b .的α —異麥芽三糖基α — 葡萄糖葑，其可做爲雙叉桿菌的生長促進劑、礦物質吸收 促進劑，和抗齲齒試劑。因爲本產品具有適宜甜味、黏稠 度和保濕力，因此可做爲食品、化粧品和藥品組成物中的 甜味劑、味道改良劑、安定劑、塡充劑、佐劑和賦形劑， 並且具有促進雙叉桿菌生長、礦物質吸收和預防齲齒的活 性。 實施例Α — 7 將依實施例A_1方法得到的反應混合物以一般方式 純化並濃縮至5 Ow/v%糖漿，然後置於消毒箱，加入 1 Ow/v% Raney鎳，携拌加熱至9 0-1 2 OT，增 加氫氣壓力至2 0 — 1 2 0 kg/cm2使其完全氫化。 然後將Raney鎳從反應混合物中移除，並脫色、脫馥、純 _ 化、遍掂味7 0 w._/ v%耱漿，產率爲8 . s . h 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4规格（ 210X297公釐）-47- -----------^------•訂------^ (請先閲讀背面之注意事項丹沒寫本頁) 4 4961 9 經濟部中央標隼局貝工消費合作杜印製 五、發明説明（45) •此產品含有2 l%d _ s . b * 異麥芽糖基α —葡 萄糖苷，5%d · s . b ·的α —異麥芽糖基異麥芽 糖替，7%d . S b .的α —異麥芽三糖基α -葡萄糖 苷，和糖醇，其可做爲雙叉桿菌的生長促進劑、礦物質吸 收劑，和抗齲齒試劑。此產品不具有還原力，但有適宜甜 度，黏稠度和保濕力，因此可做爲食品、化粧品和藥品組 成物中的甜味劑、味道改良劑、安定劑、塡充劑、佐劑和 賦形劑，並且具有促進雙叉桿菌生長、礦物質吸收和預防 齲齒的活性。 實施例A — 8 將依實施例A - 2方法得到富含α —異麥芽糖基α — 異麥芽糖苷的部份，以一般方式純化並濃縮至5 Ow/v %糖漿，再依照實施例A_7方法氫化、純化、眞空乾燥 並粉末化，而可得到富含α -異麥芽糖基α _異麥芽糖苷 的粉末，其產率爲7 0%(1.3.13.»此產品含有3 2 % d • S • b • 的 a 一 異 麥 芽 糖 基 a — 葡 萄 糖苷 9 2 0 % d • S • b • 的 a 一 異 麥芽糖 基 a — 異 麥芽 糖苷 9 2 8 % d > S • b • 的 a — 異 麥 芽 三 糖 基 a — 葡 萄 糖苷 和 糖 醇 0 其 可 做 爲 雙 叉 桿 菌 生 長 促 進 劑 > 礦 物 質 吸 收促進 劑 和 抗 齲 齒 試 劑 0 此 產 品 不 具 有 還 原 性 ί 但 有 適 中 髙 品質 甜 度 9 因 此 可 做 爲 食 品 化 粧 品 和 藥 品 組 成 物 中 的 甜 味劑 味 道 改 良 劑 品 質 改 良 劑 、 安 定 劑 、 塡 充 劑 > 佐 劑 和賦 形 劑 9 並 日具有伲推雔Υ榑葙Φ苒、確物晳盼妝和葙防豳齒的活忡 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）-48. {請先聞讀背面之注意事項再4寫本頁) 449619 A7 B7 五、發明説明（46) 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 實施例A _ 9 將依實施A — 5得到含有or _異麥芽糖基α —異麥芽 糖奋的反應混合物以一般方式純化並濃縮成5 0 w/v % 糖漿，然後依照實施例A — 7方法進行氫化、純化並濃縮 成7 Ow/v%糖漿，產率8 0%d . s . b .此產物含 有1 · s . b .的α —異麥芽糖基葡萄糖替， 4%d . s . b .的α —異麥芽糖基異麥芽糖苷，5 %d _ s · b .的α —異麥芽三糖基α—葡萄糖苷和糖醇 。其可做爲雙叉桿菌生長促進劑、礦物質吸收促進劑和抗 齲齒試劑。此產品不具有還原力，但有適中高品質甜度， 因此可做爲食品、化粧品、薬品等組合物中的甜味劑、味 道改良劑、品質改良劑、安定劑、塡充劑和佐劑、賦形劑 ，並且具有促進雙叉桿菌生長、礦物質吸收和預防齲齒的 活性。 實施例Β - 1 甜味劑 取1份由實施例Α — 2方法製得的醣類粉末， 0 . 0 1份葡萄糖基甜菊萃產物'irG — SWEET 身（購自於Toyo Sugar Refining C., Ltd·, Tokyo, Japan)，和0 . 0 1份安斯巴甜或L —天門冬胺酸基一 L 一苯丙胺酵申某酯均晳化，#製成顆粒狀甜味劑。此產 本紙張尺度適用中國國家標準（〇^)厶4規#格（210\297公釐）-49- ----------裝------訂------M (请先閲讀背面之注意事項异4寫本頁) A7 B7 449619 五、發明説明（47) 品是一種具有促進雙叉桿菌生長和礦物質吸收的組成份， 可做爲一種養顏或健康食品，並且不易經齲齒誘發微生物 作用生成酸和不溶性聚葡糖，因此也可做爲抗齲齒食品的 甜味劑。此產品有高品質甜度，爲蔗糖的2.5倍甜度， 但熱童僅爲蔗糖的2.5分之1。此產品有極佳的稞定性 ，組成物中的— SWEET**和^安斯巴甜〃並不 會被分解，因此可做爲限制熱量攝取的肥胖者及糖尿病人 低熱量食物的甜味劑。此外，此產品不易產生不溶性聚葡 糖，因此可做爲抗齲齒食品的甜味劑。 實施例B — 2 硬糖 將1 0 0份的5 5w/v%蔗糖溶液加熱混入3 0份 依實施例A - 1方法獲得的醣類糖漿，然後加熱眞空濃縮 使其水份含量低於2%，再加入1份檸檬酸，適當量檸檬 味和色素，並製成所欲的形狀。此產品是一種具促進雙叉 桿菌生長活性的組成份或是一種具有此活性並且不易產生 齲齒的硬糖。此產品是一種高品質和低齲齒性的硬糖，具 有令人偷悅的咀嚼特性和味道並且不易產生蔗糖結晶情形 〇 實施例B — 3 口香糖 _將？ί份皤某加埶锪仆革軟，加入3份麥芽糖酵結晶， 本紙張尺度遥用中國圉家梂準（CNS)A4現格（210X297公釐）-50- ----------^------1T--^----^ (請先Μ讀背面之注意事項再V寫本頁) 經濟部中央標準局爲工i#i费合作社印裝 A7 B7 4496 1 9 五、發明説明（Μ ) 4份依實施例A - 8方法得到的醣類粉末和適當量色素及 味道。然後以滾筒搓揉，成型並包裝成所欲的產品。此產 品是一種具促進雙叉桿菌生長的組成物，即具有此活性， 不產生齲齒和怡人質感、氣味的口香糖。 實施例B — 4 蔬菜汁 取1 0 0 0份主要由蕃茄汁組成的蔬菜汁，溶於1 0 份依實施例A — 9方法製得的醣類糖漿，和5份平份子置 約1 0，0 0 0的支鏈澱粉，然後以加熱方式消毒並裝罐 。此產品是一種具促進雙叉桿菌生長和預防龋齒的組成物 ，由於具有此活性和促進礦物質吸收，並且蔬菜中含有維 生素和礦物質，因此可做爲養顏或健康食品。 實施例B - 5 卡士達 取1 0 0份玉米澱粉，1 0 0份依實施例A — 3方法 製得的醣類糖漿，8 0份麥芽糖，2 0份蔗糖和1份鹽均 勻混合。然後加入2 8 0份雞蛋，1 0 0 0份熱牛奶，並 加熱攪拌直到玉米澱粉完全糊化呈現半透明狀。然後逐漸 冷卻，再加入適量香草香料，稱重，注射並包裝成所欲的 產品形式。此產品是一種具促進雙叉桿菌生長和預防齲齒 活性的組成份，並且由於具有此活性和促進礦物質吸收的 —_活性》闵吐可做爲蓥顔和健廒兪品。吐杳品有革滑表而， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）-51 - ----------^-------1T------if (請先Μ讀背面之注意事項异¾寫本頁) 經濟部中央揉準局員工消費合作社印裝 44961 9 五、發明説明（49) 適宜甜度和怡人味道。 (請先閲讀背面之注意事項再I本頁) 實施例B — 6 米稞佐料 取9 0份稻米粉與2 0份玉米澱粉、4 0份蔗糖、 8 0份依實施例A — 4方法得到的醣類粉末和4份支鏈澱 粉，然後均質化而得到所欲的產品。此產品以水和適當量 抹茶（一種綠茶）進行搓揉，然後置於一容器中並蒸煮 6 0分鐘而得到一抹茶米稞。此產品是一種具促進雙叉桿 菌生長活性和預防齲齒的組成物，並且由於具此活性因此 可做爲養顏或健康食品。此產品有怡人光澤，咀嚼特性和 味道。因爲澱粉的老化作用被抑制，因此此產品具有一相 當長的保存期。 實施例B - 7 甜味濃縮乳 經濟部中央標率局員工消費合作社印製 將3份依實施例A — 7方法製得的醣類糖漿和1份蔴 糖溶解於1 0 0份生乳中，然後加熱滅菌，濃縮成7 Ow /v %，並無菌裝罐成所欲的產品。此產品具有適中甜度 和恰人的味道，因此可做爲嬰兒食品和水果、咖啡、可可 和茶的甜味劑。此產品是一種具促進雙叉桿菌生長活性、 礦物質吸收和預防齲齒的組成物*並且由於具此活性及促 進確物質吸收，因此可做養顏或健康食品。 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（2丨Ο X 297公釐）-52 A7 B7 4 49 6 1 9 五、發明説明（50) 實施例B — 8 化粧乳 取2份聚單硬脂酸氧乙二醇酯，5份單硬脂酸甘油酯 ’ 2份依實驗1方法得到的粉未醣類，1份^ -葡糖基芸 香替，1份液體石蠛，10份三辛酸甘油酯，和適當量防 腐劑以一般方式混合。然後再加入5份1，3 _ 丁二醇和 6 6精煉水，以均質機進行乳化，然後加入逋當量香料而 可得到想要的產品。此產品具有極佳穩定性，可做爲高品 質防曬劑、皮虜美白劑和保養品。 實施例B — 9 固體製品 將天然人類干擾素(購自Hayashibara Βίοοί^ιη-ί c a 1 L a b 〇 r a t 。 r i e s ， I n c · ， 0 k a y a m a , J a p a η ) 注 入管壁 內有抗人類干擾素_ «抗體固定的管柱以吸附此人類千擾 素一α，然後注入牛血清白蛋白做爲安定劑，並去除過量 的血清。接著以含依實驗1方法製備的5 %醣類生理鹽水 將人類干擾素-α從管柱沖提下來。將沖提物以膜過濾， 再加入2 0倍體積的無水麥芽糖結晶粉未'FINETOSE®^· (購自 Hayashibara Co·, Ltd., Okayama, Japan)進行 脫水，而形成粉末狀產物，然後利用製錠機器製成每 2 0 Omg的錠劑含1 5 0單位的人類干擾素一 α。此錠 劑可做爲治療病毒疾病、過敏、風濕病、糖尿病和惡性腫 π服苦下漤割》S割量爲Ί 一 1 0龉銪割/天/成人 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS)A4C格UlOX 297公釐）-53 - ,----------麥-- (請先閲讀背面之注意事項寻ΐ寫本頁) ,^τ. 經濟部中央揉準局員工消費合作社印製 A7 B7 4496 1 9 五、發明説明（51 ) (請先《讀背面之注意事項再¥寫本頁) 。特別是本錠劑可做爲A I D S和肝炎的治療藥劑。由於 本錠劑中含有α -異麥芽糖基葡萄糖苷，λ —異麥芽 糖基α -異麥芽糖苷和/或α —異麥芽三糖基α -葡萄糖 苷係做爲人類干擾素- c的安定劑，因此即使在室溫下， 本錠劑仍具有相當長保存期限。 實施例Β _ 1 0 錠劑 將2 0份依實施例Α_2方法得到的醣類，3 0份含 水海藻糖結晶，1份乳酸鈣，1份糖酯，和適當量香料均 勻混合，然後製成每顆約3 5 Omg的錠劑。此產品是一 種具促進雙叉桿菌生長和預防鼷齒活性的組成物，由於具 此活性和可促進鈣吸收，因此可做爲養顏成健康食品°此 產品不易碎裂，極穩定且易呑嚥，因此其投予的劑量爲1 _4 0顆錠劑/天/成人，宜爲2 — 2 0顆錠劑/天/成 人。 經濟部中央標準局貝工消費合作社印袈 實施例B _ 1 1 錠劑 取2 0份依實施例A — 4方法得到的醣類，1 〇份乳 蔗糖粉末 ' N Y U ΚΑ 0 R I G Ο ® '(購自 H a y a s h i b a r a S h 〇 j i， Inc,, Okayama, Japan) ，1份三憐酸耗，1份乳酸耗’ 1份糖酯，和適量當可食色素粉末及香料粉末，均勻混合 然徕郸成铒萌約fi H Om π的雔商丨。吐齑品捂一種具促 本紙張尺度適用十國國家標準（〔泌）八4規格（210><297公釐）-54- 經濟部中央搮準局負工消費合作社印装 一 A7 」j ^____B7 五、發明説明（52 ) 進雙叉桿菌生長和預防齲齒活性的組成物，由於具此活性 和可促進鈣吸收，因此可做爲養顏或健康食品。使用的劑 量爲1 — 4 0顆錠劑/天/成人，宜爲2 - 2 0顆錠劑/ 天/成人。 實施例B — 1 2 營養品 製備一種由4 8 0份無水麥芽糖結晶，1 9 0份乾燥 蛋，2 0 9份脫脂乳粉，1 1 5份依實施例A— 2方法製 得的醣類粉末，4 . 4份氯化鈉，1 . 8 5份氯化鉀，4 份硫酸鎂，0 . 01份硫胺素，0 .1份抗壞血酸鈉， 0 . 6份維生素E醋酸鹽，和0 . 0 4份菸鹸酸醯胺組成 的組成物。將分裝的2 5個組成物注入鋁箔小袋並加熱封 口，而得到一營養品。使用前再溶解於溶劑內。此產品具 有極佳溶解性及分散性，並不需要冷藏，即使在室溫下仍 有相當長的保存期限。此產品是一種具促進雙叉桿菌生長 和預防齲齒活性的組成物。使用時，將1袋產品溶於 1 5 0 — 3 0 Omi?熱水中*經由管灌方式送入鼻腔、喉 部和胃。可做營養補充品，藉由促進雙叉桿菌生長和礦物 質吸收使病人恢復健康。特別是本產品可促進大腸內雙叉 桿菌生長，降低P Η値，和抑制由腐敗細菌產生的有害物 質。而且，此產品可促進糞便量，並且預防常發生於病人 的糞便現象。由於本產品具有促進雙叉桿菌生長的活性， .因此也可以门服或管漕立式役予家畜。. 本紙伕尺度適用中國圉家標準（CNS>A4規格（210Χ297公釐）-55 - -----------參------ΐτ------^‘ (請先聞讀背面之注意事項？寫本頁) A7 B7 53 營養品 製備一 蔴糖，3 . 法製得的醣 抗壞血酸， 4 0 0 g 的 到所欲製品 1 0的產品 具促進雙叉 溶於1 0 0 投予病人， 恢復健康。 造成的齲齒 發明説明（ 實施例B — 1 種由1 4 · 5份無水海藻糖結晶，4 . 0 5份 2份橙色橘子汁，3 . 0份依實施例A - 5方 類粉末，0 . 11份檸檬酸，Q . 02份L 一 和0.1份橘子汁粉末所組成的組成物。將每 分裝組成物注入有螺旋蓋的罐子並封口，而得 。使用前將此產品溶於溶劑中。如實施例B -—樣，此產品有極佳的安定性和溶解性，並且 桿菌生長的活性。使用時，先將2 5 g的產品 一 1 5 0m2熱水中，然後以口服或管灌方式 而捕充其營養並促進雙叉桿菌的生長，使病人 同時本產品可做爲一種營養品，其所含的蔗糖 問題會被抑制。 I----------參------訂------键 (請先閲讀背面之注意事項ί寫本頁) 經濟部中央梂隼局OOC工消費合作社印裝 ¾. 紙 本 實施例B _ 1 4 什錦飼料 將4 0份米糠粉，3 8份脫脂乳粉，1 2份實施例A - 5方法製得的醣類粉末，1 0份維生素試劑，5份魚粉 ，5份第二磷酸鈣，3份液態油和脂肪，3份碳酸鈣，2 份鹽，和2份礦物質試劑混合。此產品對於家畜和家畜而 言是一種具味道偏愛的飼料，特別是對於幼小豬隻。此產 石里右谁鰺f揑荫Φ#和碴物晳吸收的活侔。而日吐齑 適 準 橾 家 國 釐 公 7 29. 4496 1 9 A7 _ B7 五、發明説明（54) (請先聞讀背面之注f項弄i本頁) 品可預防動物發生破染疾病和下痢，促進其食慾，並抑制 糞便的不好氣味。如果有必要，此產品可製成不同種類的 飼料，如混入毅類、麵粉、澱粉、油類，和稻米糠醣類製 成濃縮物，以及混入稻草、乾草、甘蔗渣和玉米穗軸製成. 粗飼料。 實施例B — 1 5 牙膏 取4 5份第二級磷酸鈣，2 · 9 5份支鏈澱粉， 1 . 5份硫酸月桂酯鈉，2 0份甘油，0 . 5份聚氧乙烯 山梨醇酐月桂酸鹽，0 . 0 5份防腐劑，1 5份醣類糖漿 ，5份蔗糖和1 0份水均勻混合，而得到所要的產品。因 爲此產品有適當甜味，因此特別適合嬰兒使用。 如上述，做爲有效成份的醣類，即α -異麥芽糖基α -荀萄糖苷，β —異麥芽糖基異麥芽糖苷和《 -異麥 芽三糖基α -葡萄糖苷，具有極佳的品質和適宜甜度，並 且可安定存在產品中。雖然這些醣類口服時，部份被微生 經濟部t央樣準局員工消費合作社印製 物同化並做爲能量來源，但大部份仍到達大場，因此可做 爲雙叉桿菌的選擇性生長促進劑。當被雙叉桿菌進行同化 ,作用時，這些醣類會形成有機酸，而降低大腸的Ρ Η値， 增加礦物質如鈣和鐵的溶解性和吸收。而且，這些醣類不 易被齲齒誘發微生物所發酵，因此將抑制這些微生物由蔗 糖所形成的不溶性聚葡糖，牙垢生成和皤齒的誘發。 _此非還Μ酪是化肇安定性，並日.具有穩定易於喪失有 本紙張尺度逋用中圉國家標準（CNS)A4洗格（2丨0X297公釐）-57- A7 B7五、發明説明（55 ) 效成份和活性的生物活性物質的能力。此外，此醣類有渗 透壓調節活性，塡充劑分配活性，光澤活性，保濕力，極 佳黏稠度和預防其他醣類結晶化的活性，不易發酵能力， 和預防澱粉老化作用的活性。這些特性使其可應用於許多 種組成物，如食物、飼料、寵物飼料和藥品，並且具有促 進雙叉桿菌生長和預防龋齒的活性。這些組成物具有促進 雙叉桿菌生長、礦物質吸收和抑制龋齒的活性，因此也可 做爲美容或健康食品。 因此本發明對於食品、化粧品和藥品界都提供了極大 的實業上意義。 除了本發明所描述的較佳具體實施例，也可進行其他 各種不同修飾。這些修飾都將包含在附靥的申請專利範圍 中，並且都將落入本發明的實質精神和目標之內。 44961 9 {請先閱讀背面之注意事項再δ本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 Ί — .--1! ^--l·----------私-----—訂------線----------------- 本紙張尺度適用中國國家棣準（CNS)A4規格（2丨0Χ297公釐）-58 -