TW202315866A - 喹唑啉類化合物、組合物及其應用 - Google Patents

喹唑啉類化合物、組合物及其應用 Download PDF

Info

Publication number
TW202315866A
TW202315866A TW111137071A TW111137071A TW202315866A TW 202315866 A TW202315866 A TW 202315866A TW 111137071 A TW111137071 A TW 111137071A TW 111137071 A TW111137071 A TW 111137071A TW 202315866 A TW202315866 A TW 202315866A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
cancer
alkyl
pharmaceutically acceptable
compound
compounds
Prior art date
Application number
TW111137071A
Other languages
English (en)
Inventor
強 張
楊磊夫
孫月明
Original Assignee
大陸商北京賽特明強醫藥科技有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 大陸商北京賽特明強醫藥科技有限公司 filed Critical 大陸商北京賽特明強醫藥科技有限公司
Publication of TW202315866A publication Critical patent/TW202315866A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/86—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in position 4
    • C07D239/94—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本發明提供了一種喹唑啉類化合物、組合物及其應用，具體涉及式（I）所示化合物、其立體異構體、及其藥學上可接受的鹽，其組合物及其在製備作為酪氨酸激酶抑制劑的藥物中的應用。本發明化合物對EGFR、HER2激酶具有良好的抑制活性。

Description

喹唑啉類化合物、組合物及其應用
本發明屬於醫藥技術領域，涉及一種喹唑啉類化合物、組合物及其應用。
表皮生長因數受體(ErbB)酪氨酸激酶可通過多種途徑調節細胞增殖、遷移、分化、凋亡以及細胞移動。在多種形式的惡性腫瘤中，ErbB 家族成員以及其部分配體通常過表達、擴增或突變，這使其成為重要的腫瘤治療靶標。該家族蛋白激酶包括：ErbB1/EGFR/HER1、ErbB2/HER2、ErbB3/HER3 和 ErbB4/HER4。其中，基於EGFR和HER2，已成功開發了數款治療非小細胞肺癌、乳腺癌的激酶抑制劑。(Dienstmann R., et. al., (2001) Personalizing Therapy with Targeted Agents in Non-Small Cell Lung Cancer. ONCOTARGET. 2(3), 165.; Mitri Z., et. al. (2012) The HER2 Receptor in Breast Cancer: Pathophysiology, Clinical Use, and New Advances in Therapy., Chemotherapy Research & Practice., Volum 2012 (23), 743193.)。
其中，EGFR表達十分廣泛，在生長發育和正常的生理功能活動中起著重要作用。而且，EGFR及其介導的信號傳遞通路在腫瘤的發生和發展的過程中也發揮重要作用。然而，EGFR 的表達很不穩定，經常出現基因的擴增和重排，使腫瘤細胞表面的抗原表型發生改變，其中以表皮生長因數受體III型突變體（epidermal growthfactor receper variant III，EGFRvIII）最為常見。
EGFRvIII是近年來發現的一類僅表達於腫瘤細胞而非正常組織細胞表面的表皮生長因數受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）的突變體。EGFR的異常表達與眾多惡性腫瘤的發生相關，包括膠質瘤、肺小細胞癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌等。
與EGFR 完整的結構相比，編碼EGFRvIII胞外配體結合區的第2-7位外顯子被刪除，導致801個堿基對缺失，使得外顯子1和8相連接，並在該結合點產生一個新的甘氨酸，導致其第6~273位氨基酸缺失，因而喪失了與配體EGF結合的能力。EGFRvIII 在無配體結合的情況下，以二聚體化和自體磷酸化的方式使酪氨酸激酶不受調控的結構性啟動，誘發下游信號傳導，刺激腫瘤細胞增殖。
已有研究表明：EGFRvIII可通過調控多種信號傳遞通路影響腫瘤的發生和發展，包括Ras/Raf/MEK/ERK，PI3/AKT/mTOR，JAK/STAT以及PLC/PKC等。EGFRvIII陽性的腫瘤細胞致瘤性明顯增高，主要通過抑制細胞凋亡，促進腫瘤血管發生，增加侵襲性和遷移等導致腫瘤細胞發生不可控制的自發增殖和轉移。另外，EGFRvIII在腫瘤的放射治療和化學藥物治療過程中，發揮類似逃逸的功能。
神經膠質瘤是一種常見的具有高侵襲力的惡性腫瘤，神經膠質母細胞瘤（glioblastoma，GBM）是惡性程度最高的類型。其放療和化療的效果均不甚理想，術後常有復發。國內外研究發現：40%~60%的GBM顯著表達EGFR，且其突變體形式以EGFRvIII為主。EGFRvIII通過非受體依賴性的自身磷酸化及酪氨酸激酶活性，建立信號通路調控網，在調控GBM的生長、轉移和血管生成方面發揮重要作用。
近年來的研究發現針對EGFRvIII 分子靶向治療措施無論是在體外的細胞培養還是體內的動物模型的研究中均顯示出良好的抗腫瘤效應。因此，研發新的針對EGFRvIII分子靶向治療藥物將為腫瘤患者特別是神經膠質瘤患者提供更有效和更經濟的治療方案，臨床上存在著巨大的未滿足需求。
靶向EGFRvIII治療神經膠質瘤的藥物不僅需要能夠有效穿透血腦屏障，同時也需要能夠有效抑制EGFRvIII。目前尚無這種既能穿透血腦屏障又能抑制EGFRvIII的化合物的報導，因而針對EGFRvIII為驅動的神經膠質瘤的研究具有重要的臨床價值。除此之外，絕大多數已上市的EGFR和HER2激酶抑制劑都無法穿透血腦屏障，而EGFR驅動的肺癌以及HER2驅動的乳腺癌患者普遍預後較差，並存在較高的腦轉移風險。目前尚無獲批用於腦轉移治療的有效藥物，因此亟待開發一種具有穿透血腦屏障的EGFR抑制劑和/或HER2抑制劑。
本發明一方面提供一種式(I)所示化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中，
Figure 02_image004
式 (I) 式(I)中，m為0、1或者2； R 1為氫、4-7元雜脂環基或 -NR aR b， R a、R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、被羥基取代的C 1-C 6烷基、被C 1-C 3烷氧基取代的C 1-C 6烷基、或被C 3-C 6環烷基取代的C 1-C 6烷基， 所述的4-7元雜脂環基為含有1-2個選自N、O或S的雜原子的雜脂環基，所述雜脂環基未被取代或被C 1-C 3烷基、C 1-C 4醯基、羥基、氰基、氨基醯基、單或雙C 1-C 3烷基取代的氨基醯基、C 1-C 3烷基碸基、C 1-C 3烷基亞碸基、氧代（=O）中的一種或兩種取代； R 2為被1至3個選自鹵素、氰基、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3烷硫基、羥基、C 3-C 4環烷基或C 1-C 3烷基碸基中的取代基所取代或非取代的C 1-C 6烷基； R 3、R 4、R 5各自獨立地為氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C 3-C 4環烷基，且至少有一個為鹵素。
根據一個優選的實施方案，m為0或者1， R 1為4-7元雜脂環基或 -NR aR b， R a、R b各自獨立地為氫、C 1-C 3烷基、C 3-C 6環烷基、被羥基取代的C 1-C 3烷基、被C 1-C 3烷氧基取代的C 1-C 3烷基； 所述4-7元雜脂環基為吡咯烷基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、硫代嗎啉基，且上述基團未被取代或被甲基、乙基、丙基、異丙基、醛基、乙醯基、丙醯基、羥基、氰基、氨基醯基、甲基碸基、乙基碸基、丙基碸基、異丙基碸基、甲基亞碸基、乙基亞碸基、丙基亞碸基、異丙基亞碸基、氧代（=O）中的一種或兩種取代。
R 1為1-甲基吡咯烷-2-基、1-乙基吡咯烷-2-基、1-丙基吡咯烷-2-基、1-異丙基吡咯烷-2-基、吡咯烷-1-基、呱啶-1-基、1-甲基呱嗪-4-基、1-乙基呱嗪-4-基、嗎啉基、四氫呋喃2-基、四氫呋喃3-基、四氫吡喃2-基、四氫吡喃3-基、四氫吡喃4-基、硫代嗎啉基、二甲氨基、二乙氨基、二丙氨基、二異丙氨基、甲基乙基氨基、甲基丙基氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、環丙基氨基、環丁基氨基、甲基異丙基氨基、N-甲基-N-環丙基氨基、N-甲基-N-環丁基氨基或者乙基丙基氨基。
根據一個優選的實施方案，R 2為被1至3個選自氟、氯、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、羥基、環丙基、環丁基、甲碸基、乙碸基、丙碸基或異丙碸基中的取代基所取代或非取代的C 1-C 4烷基。
更優選地，R 2為甲基、乙基、丙基、異丙基、羥乙基、羥丙基、三氟甲基、氟乙基、氟丙基、2,2,2-三氟乙基、2,2-二氟乙基、3,3,3-三氟丙基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、甲硫基乙基、甲硫基丙基、乙硫基乙基、乙硫基丙基、2-羥基-2-甲基丙基、3-羥基-3-甲基丁基、甲碸基丙基、甲碸基乙基、乙碸基乙基、乙碸基丙基、異丙碸基乙基、異丙碸基丙基。
根據一個優選的實施方案，R 3、R 4、R 5各自獨立地為氫、氟、氯、溴，且至少有一個為氟、氯、溴。
更優選地，R 3、R 5各自獨立地為氫、氟、氯，且R 4為氯。
還優選地，R 3為氫、氟、氯，R 4為氯，R 5為氟。
本申請涉及的典型化合物如下：
Figure 02_image006
Figure 02_image008
Figure 02_image010
Figure 02_image012
Figure 02_image014
Figure 02_image016
Figure 02_image018
Figure 02_image020
Figure 02_image022
Figure 02_image024
Figure 02_image026
Figure 02_image028
Figure 02_image030
Figure 02_image032
Figure 02_image034
Figure 02_image036
Figure 02_image038
Figure 02_image040
Figure 02_image042
Figure 02_image044
Figure 02_image046
Figure 02_image048
Figure 02_image050
Figure 02_image052
本發明的另一方面提供一種藥物組合物，該藥物組合物包含本申請所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化物、或前藥，以及一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
本申請的藥物組合物還可以包含一種或多種其他治療劑。
本發明還涉及一種治療EGFR、HER2等激酶介導的疾病或病症的方法，其包括對有需要的患者(人或其他哺乳動物，尤其是人) 給藥治療有效量的本申請所述的化合物或其鹽，所述EGFR、HER2等激酶介導的疾病或病症包括前述提及的那些。
在本發明的一實施例中，上述的AAA（此段敘述解決問題所採用的次要手段）
除非另有說明，在本申請(包括說明書和發明專利申請範圍)中使用的以下術語具有下面給出的定義。在本申請中，除非另外說明，使用“或”或“和”意味著“和/或”。此外，術語“包括”以及其它形式的使用，例如“包含”、“含有”和“具有”，不是限制性的。本文使用的章節標題僅僅是為了組織的目的，而不應解釋為對所述的主題的限制。
除非有特殊說明，烷基表示具有指定數目碳原子的飽和直鏈、支鏈烴基，術語C 1-C 6烷基表示含有1至6個碳原子的烷基部分，同理C 1-C 3烷基表示含有1至3個碳原子的烷基部分，比如，C 1-C 6烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、n-丁基、異丁基、仲-丁基、叔-丁基、n-戊基、3-(2-甲基)丁基、2-戊基、2-甲基丁基、新戊基、n-己基、2-己基和2-甲基戊基等。
當取代基術語例如“烷基”與其它取代基術語組合使用時，例如在術語“C 1-C 3烷氧基C 1-C 6烷硫基”或“羥基取代C 1-C 6烷基”中，該連接取代基術語(例如烷基或烷硫基)旨在包含二價的部分，其中連接點通過所述連接取代基。“C 1-C 3烷氧基C 1-C 6烷硫基”的實例包括但不限於甲氧基甲硫基、甲氧基乙硫基和乙氧基丙硫基等。“羥基取代C 1-C 6烷基”的實例包括但不限於羥基甲基、羥基乙基和羥基異丙基等。
烷氧基由先前描述的直鏈或支鏈烷基與-O-形成的烷基-O-基團，例如，甲氧基、乙氧基等等。類似的，烷硫基由先前描述的直鏈或支鏈烷基與-S-形成的烷基-S-基團，例如，甲硫基，乙硫基等等。
烯基和炔基包括直鏈、支鏈烯基或炔基，術語C 2-C 6烯基或者C 2-C 6炔基表示具有至少一個烯基或炔基的直鏈或支鏈烴基。
術語“鹵代烷基”，例如“鹵代C 1-C 6烷基”表示在包括1 到6個碳原子的烷基部分的一個或多個碳原子上具有一個或多個可以相同或不同的鹵素原子的基團。“鹵代C 1-C 6烷基”的實例可以包括但不限於-CF 3(三氟甲基)、-CCl 3(三氯甲基)、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基和六氟異丙基等。類似的，術語“鹵代C 1-C 6烷氧基”表示由所述的鹵代C 1-C 6烷基與-O-形成的鹵代烷基-O-基團，可以為例如三氟甲氧基、三氯甲氧基等等。
術語“C 1-C 4醯基”包括甲醯基（醛基）（-CHO）、乙醯基（CH 3CO-）、丙醯基（C 2H 5CO-）等。術語“氨基醯基”是指NH 2CO-。
“環烷基”表示含有指定數目碳原子的非芳香的、飽和的、環狀的烴基。例如，術語“(C 3-C 6) 環烷基”指的是具有3-6 個環碳原子的非芳香的環狀烴環。示例性的“(C 3-C 6) 環烷基”包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
術語“芳基”表示包含芳香的單環或雙環烴原子團的基團或部分，其含有6 到12個碳環原子且具有至少一個芳香環。“芳基”的實例為苯基、萘基、茚基和二氫茚基( 茚滿基)。通常，在本發明化合物中，芳基為苯基。
在這裡使用的術語“雜脂環基”，除非有特殊說明，代表未被取代的或已被取代的穩定的4至7元非芳香的單環飽和環體系，它們由碳原子以及從N，O，S中選的1至3個雜原子組成，其中N，S雜原子可以被隨意氧化，N雜原子還可以被隨意季銨化。這類雜環的例子包括但不限於氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、1,3-二氧雜環戊烷基、呱啶基、呱嗪基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、1,3-二噁烷基、1,4-二噁烷基、1,3-氧硫雜環戊烷基、1,3-氧硫雜環己烷基、1,3-二噻烷基、1,4-氧硫雜環戊烷基、1,4-氧硫雜環己烷基、1,4-二噻烷基、嗎啉基、硫嗎啉基。
術語“羰基”指的是-C(O)-基。術語“鹵素”和“鹵”表示氯、氟、溴或碘取代基。“氧代”表示雙鍵的氧部分；例如，如果直接連接到碳原子上形成一個羰基部分(C＝O)。“羥基”旨在表示-OH 原子團。本文所用術語“氰基”是指基團-CN。
術語“各自獨立地”是指當一個以上的取代基選自許多可能的取代基時，那些取代基可以相同或不同。
很清楚，式I的化合物、異構體、晶型或前藥及其可藥用鹽可以存在溶劑化形式和非溶劑化形式。例如溶劑化形式可以是水溶形式。本發明包括所有這些溶劑化的和未溶劑化的形式。
本申請中術語“異構體”為具有相同分子式的不同化合物，可以包括立體異構、互變異構等各種異構形式。“立體異構體”是僅原子在空間的排列方式不同的異構體。本文描述的某些化合物含有一個或多個不對稱中心，且因此可以產生對映體、非對映體和其他依據絕對立體化學可以被定義為(R)-或(S)-的立體異構形式。本發明的化學實體、藥物組合物和方法旨在包括所有這些可能的異構體，包括外消旋混合物、光學純形式和中間的混合物。旋光(R)-和(S)-異構體可以使用手性合成子或手性試劑來製備，或使用常規技術來拆分。化合物的光學活性可以通過任何合適的方法進行分析，包括但不限於手性色譜法和旋光測定法，且可確定一種立體異構體超越其他異構體的優勢程度。
可使用本領域技術人員已知的方法拆分本發明單獨的異構體( 或異構體富集的混合物)。例如，可如下進行所述拆分：(1)通過形成非對映異構體鹽、複合物或其他衍生物；(2)通過與立體異構體特異性試劑的選擇性反應，例如通過酶促氧化或還原；或(3)通過在手性環境中的氣-液色譜或液相色譜，所述手性環境例如在手性載體上(例如結合有手性配體的矽膠)或在手性溶劑存在下。本領域技術人員將會理解，當將所需立體異構體通過上述分離方法之一轉化成另一化學實體時，需要其他步驟來釋放所需形式。或者，特異性立體異構體可通過使用光學活性試劑、底物、催化劑或溶劑的不對稱合成法來合成，或通過不對稱轉化將一種對映異構體轉化成另一種異構體。
當本文所述的化合物含有烯烴雙鍵時，除非另有說明，其意指該化合物包括各種順反異構體。
“互變異構體”是可通過互變異構化互相轉換的結構上不同的異構體。“互變異構化”是異構化的一種形式，且包括質子移變或質子轉移互變異構化，可認為它是酸鹼化學的子集。“質子移變互變異構化”或“質子轉移互變異構化”涉及伴有鍵級變換的質子遷移，往往是單鍵與相鄰的雙鍵的互換。當可能發生互變異構化時(例如，在溶液中)，可達到互變異構體的化學平衡。互變異構化的一個實例為酮-烯醇互變異構化。
作為活性成分的本發明的化合物，以及製備該化合物的方法，都是本發明的內容。而且，一些化合物的晶型形式可以作為多晶體存在，這種形式也可以被包括在目前的發明裡。另外，一些化合物可以和水(即水合物)或普通的有機溶劑一起形成溶劑化物，這種溶劑化物也被包括在此項發明的範疇內。
本發明的化合物可以以游離的形式用於治療，或者在適當情況下以藥學上可接受的鹽或其它衍生物的形式用於治療。如本文所用，術語“藥學上可接受的鹽”是指本發明的化合物的有機鹽及無機鹽，此鹽適用於人類和低等動物，無過度毒性、刺激性、過敏反應等，具有合理的利益/風險比。胺，羧酸，膦酸鹽，和其它類型的化合物的藥學上可接受的鹽在所屬領域中是眾所周知的。該鹽可以由本發明的化合物與合適的游離堿或酸反應而成。包括但不限於，與無機酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、高氯酸或與有機酸如乙酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、丙二酸形成的鹽，或通過使用本領域熟知的方法，例如離子交換法，來得到這些鹽。其他藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2 - 羥基乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、過3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、硫酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽等。代表性的堿或鹼土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。其他藥學上可接受的鹽包括適當的無毒的銨、季銨，和使用諸如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根，低級烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽形成的胺基陽離子。
另外，本文所用術語“前藥”是指一個化合物在體內可以轉化為本發明所述的化合物。此轉化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經酶轉化為母體化合物的影響。
本發明的藥物組合物包含本文所述化合物或其藥學上可接受的鹽、激酶抑制劑(小分子，多肽，抗體等)、免疫抑制劑、抗癌藥、抗病毒劑、抗炎劑、抗真菌劑、抗生素或抗血管過度增生化合物的另外的活性劑；以及任何藥學上可接受的載體、佐劑或賦形劑。
本發明的化合物可以作為單獨使用，也可以與一種或多種其它本發明的化合物或與一種或多種其它藥劑聯合使用。當聯合給藥時，治療劑可以配製成同時給藥或順序地在不同的時間給藥，或者所述治療劑可以作為單一組合物給藥。所謂“組合療法”，指的是使用本發明的化合物與另一種藥劑一起使用，給藥方式為每種藥劑同時共同給藥或每種藥劑順序給藥，無論哪種情況，目的都是要達到藥物的最佳效果。共同給藥包括同時遞送劑型，以及每種化合物分別的單獨劑型。因此，本發明的化合物的給藥可以與已知的本領域的其他療法同時使用，例如，在癌症治療中使用放射治療或細胞生長抑制劑、細胞毒性劑、其它抗癌劑等附加療法來改善癌症狀。本發明並不限於給藥的順序;本發明的化合物可以先前施用，同時施用，或在其他抗癌劑或細胞毒性劑之後施用。
為了製備這一發明的藥學成分，作為其活性成分的分子式(I)的一種或多種化合物或鹽類可緊密的與藥學載體混合在一起，這是根據傳統的製藥配料技術而進行的，其中的載體可根據按不同的給藥方式(例如，口服或腸外給藥)設計好的製備形式而採用多種多樣的形式。適當的藥學上可接受的載體在技術上是眾所周知的。對一些這類藥學可接受的載體的描述可以在《藥學賦形劑手冊》裡找到，該書由美國藥學會和英國藥學社聯合出版。
本發明藥物組合物可以有以下形式，比如說，適合口服給藥，例如藥片，膠囊，藥丸，藥粉，持續釋放的形式，溶液或懸浮液；用於胃腸外注射如透明液，懸浮液，乳狀液；或者用於局部用藥如膏，霜；亦或作為栓劑用於直腸給藥。藥學成分也可以單位劑量的形式適合用於精確劑量的一次性給藥。該藥學成分將包括一種傳統的藥學載體或賦形劑以及根據目前的發明製成的作為活性成分的化合物，另外，也可以包括其他的醫學或藥學製劑，載體，輔助劑，等等。
治療性化合物也可給於哺乳動物而非人類。給一個哺乳動物所用的藥物劑量將取決於該動物的種類以及它的疾病狀況或其所處的失調狀態。治療性化合物可以以膠囊，大丸藥，藥片藥水的形式喂給動物。也可以通過注射或灌輸的方式讓治療性化合物進入動物體內。我們根據符合獸醫實踐標準的傳統的方式製備好這些藥物形式。作為一種可選擇的方式，藥學合成藥可以同動物飼料混合在一起喂給動物，因此，濃縮的飼料添加劑或預拌和料可以備以混合普通的動物飼料。
本發明的又一目的是在於提供一種用於治療有需要的受試者中癌症的方法，其包括給受試者施用含本發明的化合物的組合物的治療有效量的一種方法。
本發明還包括本發明的化合物或其藥學上可接受的衍生物的使用，製備治療與酪氨酸激酶EGFR、HER2相關的癌症及自身免疫疾病的藥物中的應用。所述的癌症(包括非實體瘤、實體瘤、原發性或轉移性癌症，如本文別處所指出和包括癌症具有抗性或難治的一種或多種其它治療)以及其它疾病(包括但不限於眼底疾病、銀屑病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化等)的藥劑。所述癌症包括但不限於：非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B 細胞和 T 細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌中的任一種。
具體實施方式
本發明還提供了製備相應化合物的方法，可以使用多種合成方法製備本文所述的化合物，包括下述的方法，本發明的化合物或者其藥學上可接受的鹽，異構體或水合物可以使用下述方法與有機化學合成領域已知的合成方法，或通過本領域技術人員理解對這些方法的變化方法合成，優選方法包括但不限於下述方法。
為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明，並不用於限定本發明。實施例中未注明具體技術或條件的，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件或者按照產品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。本文所使用的術語“和/或”包括一個或多個相關的所列項目的任意的和所有的組合。下面提供的實施例可以更好的說明本發明，除非特別說明，所有的溫度為℃。本申請部分化合物的命名根據chemdraw命名翻譯得到。
中間體的合成
(R,E)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯醯氯的製備
Figure 02_image054
將(R,E)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯酸（160mg, 1mmol）加入乾燥的二氯甲烷(3ml)中，分別加入草醯氯(130mg, 1mmol)，DMF(1滴，催化量)，室溫攪拌3小時，反應體系有渾濁變澄清，濃縮，得類白色固體；
實施例1. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
Figure 02_image056
步驟1)：4,5-二氯-6-硝基喹唑啉的合成
將5-氯-6-硝基喹唑啉-4(3H)-酮(4.5g, 20mmol)加入二氯亞碸(45mL)，加入DMF(2mL)，加熱到80攝氏度回流反應，待產物完全溶清再反應2小時，濃縮，加入甲苯繼續再濃縮得白色固體產物4.9g；
步驟2)：5-氯-N-(3-氯-2-氟苯基)-6-硝基喹唑啉-4-胺
將4,5-二氯-6-硝基喹唑啉(4.9g, 20mmol)加入乾燥乙腈中，0攝氏度條件下分別加入3-氯-2-氟苯胺(4.35g, 30mmol)和三乙胺(3g, 30mmol)，加熱至50攝氏度反應5小時，冷卻濃縮，甲醇洗滌得白色固體產物5.3g, 收率75%；LC-MS:353[M+H] +;
步驟3)： N-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基-6-硝基喹唑啉-4-胺
在0攝氏度條件下將5-氯-N-(3-氯-2-氟苯基)-6-硝基喹唑啉-4-胺(3.5g, 10mmol)加入到DMF(15mL)和甲醇鈉溶液(30%甲醇鈉的甲醇溶液, 15mL)的混合溶液中，攪拌反應2小時，加冰淬滅，過濾乾燥得黃色固體產物4.1g, 收率94%；MS:349[M+H] +;
步驟4)： N 4-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基喹唑啉-4,6-二胺
將N-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基-6-硝基喹唑啉-4-胺(1.75g, 5mmol)加入到乙醇中，加入鐵粉和氯化銨水溶液加熱至50攝氏度反應2小時，冷卻過濾，用大量二氯甲烷沖洗，濾液用食鹽水洗滌，乾燥，濃縮得淺紫色固體產物1.6 g, 收率98%；MS:319[M+H] +;
步驟5) ：N 4-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲氧基喹唑啉-4,6-二胺(32mg, 0.1mmol)加入NMP(1mL)溶液中，在0攝氏度條件下加入(E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯醯氯(24mg, 0.15mmol)的二氯甲烷溶液(1mL)，攪拌反應半小時，加水淬滅，用碳酸氫鈉調pH至9後，用二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗滌，乾燥濃縮得到的油狀物經柱層析純化得白色固體產物16mg； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.26 (s, 1H), 10.03 (s, 1H), 8.61 – 8.48 (m, 2H), 8.36 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.39 – 7.25 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.5, 5.9 Hz, 1H), 6.59 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.12 – 3.05 (m, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:430 [M+H] +。
實施例2. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-4-(環丙基(甲基)氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟5中用(E)-4-(環丙基(甲基)氨基)丁-2-烯醯氯替換 (E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.26 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.61 – 8.50 (m, 2H), 8.37 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 – 7.25 (m, 2H), 6.86 (dt, J= 15.4, 6.2 Hz, 1H), 6.56 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.37 – 3.29 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.76 (tt, J= 6.7, 3.5 Hz, 1H), 0.48 – 0.44 (m, 2H), 0.39 – 0.31 (m, 2H).MS:456 [M+H] +。
Figure 02_image058
Figure 02_image060
實施例2                    實施例3
實施例3. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2-甲氧基乙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.10 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.43 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 8.25 – 8.16 (m, 1H), 7.63 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35 – 7.26 (m, 1H), 6.82 (dt, J= 15.4, 5.8 Hz, 1H), 6.45 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.23 – 4.16 (m, 2H), 3.78 – 3.71 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.12 – 3.06 (m, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:474 [M+H] +。
實施例4. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-氟乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2-氟乙烷-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.97 (d, J= 20.0 Hz, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.39 – 8.26 (m, 2H), 7.65 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.39 (ddd, J= 8.4, 6.8, 1.7 Hz, 1H), 7.30 (td, J= 8.1, 1.4 Hz, 1H), 6.81 (dt, J= 15.4, 5.9 Hz, 1H), 6.48 (dt, J= 15.4, 1.6 Hz, 1H), 4.91 – 4.84 (m, 1H), 4.79 – 4.73 (m, 1H), 4.38 (dd, J= 4.7, 2.7 Hz, 1H), 4.34 – 4.27 (m, 1H), 3.09 – 3.07 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H). MS:462 [M+H] +。
Figure 02_image062
Figure 02_image064
實施例4                      實施例5
實施例5. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-羥基乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2-羥基乙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.22 (s, 1H), 10.05 (s, 1H), 8.54 - 8.51 (m, 2H), 8.17 (dd, J= 8.4, 7.1 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.41 (dd, J= 8.3, 6.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.82 (dt, J= 15.4, 6.0 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 4.15 - 4.13 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.08 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H). MS:460 [M+H] +。
實施例6. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3-甲氧基丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3-甲氧基丙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.12 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.43 (dd, J= 8.7, 7.3 Hz, 1H), 8.24 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.29 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.4, 5.9 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.11 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.50 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H), 3.09 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.20 (s, 6H), 2.09 (q, J= 6.3 Hz, 2H). MS:488 [M+H] +。
Figure 02_image066
Figure 02_image068
實施例6                    實施例7
實施例7. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3-(甲基磺醯基)丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3-甲碸基丙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.00 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.45 (dd, J= 8.6, 7.3 Hz, 1H), 8.24 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.29 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.4, 5.9 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 4.13 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 3.34 – 3.26 (m, 2H), 3.09 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.34 – 2.26 (m, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:536 [M+H] +。
實施例8. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-4-(異丙基(甲基)氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟5中用(E)-4-(異丙基(甲基)氨基)丁-2-烯醯氯替換 (E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.27 (s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.62 – 8.49 (m, 2H), 8.36 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.4, 5.7 Hz, 1H), 6.60 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.20 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 0.99 (d, J= 6.5 Hz, 6H). MS:458 [M+H] +。
Figure 02_image070
Figure 02_image072
實施例8                    實施例9
實施例9. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-4-(異丙基氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟5中用(E)-4-(異丙基氨基)丁-2-烯醯氯替換 (E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.28 (s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.57 – 8.51 (m, 1H), 8.35 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.42 – 7.26 (m, 2H), 6.91 (dt, J= 15.4, 5.4 Hz, 1H), 6.60 (dt, J= 15.3, 1.8 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.41 (d, J= 5.5 Hz, 2H), 2.84 - 2.78 (m, 1H), 1.04 (d, J= 6.2 Hz, 6H). MS:444 [M+H] +。
實施例10. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-異丙氧基喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用異丙醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.69 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.14 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.39 – 7.25 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.5, 5.9 Hz, 1H), 6.49 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.45 (p, J= 6.3 Hz, 1H), 3.08 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 1.32 (d, J= 6.2 Hz, 6H). MS:458 [M+H] +。
Figure 02_image074
Figure 02_image076
實施例10                實施例11
實施例11. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3-羥基丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3-羥基丙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.19 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.54 – 8.39 (m, 2H), 7.63 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.42 – 7.25 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.4, 6.0 Hz, 1H), 6.55 – 6.46 (m, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.15 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.65 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.10 (d, J= 6.1 Hz, 2H), 2.20 (s, 6H), 2.01 (q, J= 6.1 Hz, 2H). MS:474 [M+H] +。
實施例12. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-(甲硫基)乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2-甲硫基乙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.05 (s, 1H), 9.94 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.30 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 8.22 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.42 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.83 (dt, J= 15.5, 5.9 Hz, 1H), 6.50 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 4.19 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.09 (d, J= 5.8 Hz, 2H), 2.98 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 1.97 (s, 3H). MS:490 [M+H] +。
Figure 02_image078
Figure 02_image080
實施例12                       實施例13
實施例13. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-羥基-2-甲基丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2-羥基-2-甲基丙-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.12 (s, 2H), 8.50 (s, 1H), 8.35 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 8.01 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 8.3, 6.8 Hz, 1H), 7.29 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.81 (dt, J= 15.4, 6.1 Hz, 1H), 6.33 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 5.66 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.08 (dd, J= 6.1 Hz, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.26 (s, 6H). MS:488 [M+H] +。
實施例14. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3-羥基-3-甲基丁氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3-羥基-3-甲基丁-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.25 (s, 2H), 8.69 – 8.14 (m, 3H), 7.58 (s, 1H), 7.35 – 7.25 (m, 2H), 6.81 (dt, J= 15.4, 6.0 Hz, 1H), 6.54 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 4.18 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 3.08 (d, J= 6.1Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 2.00 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.13 (s, 6H). MS:502 [M+H] +。
Figure 02_image082
Figure 02_image084
實施例14                       實施例15
實施例15. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3-氟丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3-氟丙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.07 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.54 – 8.37 (m, 1H), 8.19 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.39 (dd, J= 8.4, 6.8 Hz, 1H), 7.31 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.81 (dt, J= 15.5, 5.9 Hz, 1H), 6.47 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.72 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 4.60 (t, J= 5.8 Hz, 1H), 4.14 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.08 (dd, J= 5.9 Hz, 2H), 2.31 – 2.15 (m, 2H), 2.19 (s, 6H). MS:476 [M+H] +。
實施例16. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2,2,2-三氟乙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.04 (s, 1H), 9.59 (s, 1H), 8.61 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.14 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.43 – 7.35 (m, 1H), 7.31 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.81 (dt, J= 15.5, 5.9 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 15.5 Hz, 1H), 4.77 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 3.09 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:498 [M+H] +。
Figure 02_image086
Figure 02_image088
實施例16                       實施例17
實施例17. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2,2-二氟乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用2,2-二氟乙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.01 (s, 1H), 9.74 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.33 – 8.24 (m, 1H), 8.19 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.42 (dd, J= 8.4, 6.7 Hz, 1H), 7.31 (t, J= 8.2 Hz, 1H), 6.82 (dt, J= 15.4, 5.9 Hz, 1H), 6.63 – 6.30 (m, 2H), 4.38 (t, J= 15.4 Hz, 2H), 3.12 – 3.06 (m, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:480 [M+H] +。
實施例18. (E)-N-(4-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-5-(3,3,3-三氟丙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟3中用3,3,3-三氟丙基-1-醇鈉替換甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.93 (s, 1H), 9.73 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.64 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.43 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 6.81 (d, J= 15.3 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 4.24 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.11 – 3.05 (m, 2H), 3.04 – 2.96 (m, 2H), 2.19 (s, 6H). MS:512 [M+H] +。
Figure 02_image090
Figure 02_image092
實施例18                       實施例19
實施例19. (E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺替換3-氯-2-氟苯胺進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.27 (s, 1H), 10.06 (s, 1H), 8.63 – 8.53 (m, 2H), 8.38 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.62 (t, J= 8.7 Hz, 2H), 6.82 (dt, J= 15.5, 5.8 Hz, 1H), 6.59 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.10 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 2.21 (s, 6H). MS:464 [M+H] +。
實施例20. (R,E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-甲氧基喹唑啉-6-基)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺代替3-氯-2-氟苯胺，在步驟5中用 (R,E)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯醯氯代替(E)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.27 (s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.63 – 8.53 (m, 2H), 8.39 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.67 – 7.58 (m, 2H), 6.71 (dd, J= 15.3, 7.5 Hz, 1H), 6.57 (d, J= 15.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.04 (dd, J= 9.8, 7.1 Hz, 1H), 2.76 (q, J= 7.9 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.23 – 2.13 (m, 1H), 2.02 (dtd, J= 12.3, 8.4, 5.9 Hz, 1H), 1.82 – 1.68 (m, 2H), 1.66 – 1.52 (m, 1H). MS:490 [M+H] +。
Figure 02_image094
Figure 02_image096
實施例20                            實施例21
實施例21. (E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-羥基乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺代替3-氯-2-氟苯胺，在步驟3中用2-羥基乙基-1-醇鈉代替甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.24 (s, 1H), 10.05 (s, 1H), 8.58 – 8.49 (m, 2H), 8.23 (t, J= 8.5 Hz, 1H), 7.67 – 7.56 (m, 2H), 6.82 (dt, J= 15.4, 6.0 Hz, 1H), 6.43 (dt, J= 15.4 Hz, 1H), 5.75 – 5.68 (m, 1H), 4.15 - 4.13 (m, 2H), 3.84 (q, J= 4.3 Hz, 2H), 3.10 (dd, J= 6.0 Hz, 2H), 2.20 (s, 6H). MS:494 [M+H] +。
實施例22. (R,E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-羥基乙氧基)喹唑啉-6-基)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基 )丙烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺代替3-氯-2-氟苯胺，在步驟3中用2-羥基乙基-1-醇鈉代替甲醇鈉，在步驟5中用 (R,E)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯醯氯代替(E)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.24 (s, 1H), 10.04 (s, 1H), 8.54 (d, J= 9.6 Hz, 2H), 8.24 (t, J= 8.5 Hz, 1H), 7.67 – 7.56 (m, 2H), 6.71 (dd, J= 15.3, 7.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J= 15.3 Hz, 1H), 5.73 (t, J= 4.3 Hz, 1H), 4.14 (dd, J= 5.2, 3.3 Hz, 2H), 3.85 (q, J= 4.3 Hz, 2H), 3.04 (dd, J= 9.8, 7.3 Hz, 1H), 2.76 (q, J= 8.0 Hz, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.18 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 2.08 – 1.94 (m, 1H), 1.82 – 1.68 (m, 2H), 1.66 – 1.52 (m, 1H). MS:520 [M+H] +。
Figure 02_image098
Figure 02_image100
實施例22                         實施例23
實施例23. (E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-6-基)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯胺
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺代替3-氯-2-氟苯胺，在步驟3中用2-甲氧基乙基-1-醇鈉代替甲醇鈉進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.85 (br, 2H), 8.43 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.51 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 6.80 (dt, J= 15.4, 5.8 Hz, 1H), 6.39 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 4.26 – 4.19 (m, 2H), 3.75 – 3.68 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.08 (dd, J= 5.8, 1.7 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H). MS:508 [M+H] +。
實施例24. (R,E)-N-(4-((3,4-二氯-2-氟苯基)氨基)-5-(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-6-基)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基 )丙烯醯胺
Figure 02_image102
以與實施例1相同的方法進行合成，不同之處在於，在步驟2中用3,4-二氯-2-氟苯胺代替3-氯-2-氟苯胺，在步驟3中用2-甲氧基乙基-1-醇鈉代替甲醇鈉，在步驟5中用 (R,E)-3-(1-甲基吡咯烷-2-基)丙烯醯氯代替(E)-4-(二甲氨基)丁-2-烯醯氯進行反應； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.11 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.45 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 8.29 (t, J= 8.5 Hz, 1H), 7.67 – 7.56 (m, 2H), 6.71 (dd, J= 15.3, 7.6 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 15.3 Hz, 1H), 4.23 – 4.16 (m, 2H), 3.74 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.04 (dd, J= 9.7, 7.0 Hz, 1H), 2.78 (q, J= 7.9 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.19 (q, J= 8.8 Hz, 1H), 2.08 – 1.95 (m, 1H), 1.81 – 1.68 (m, 2H), 1.65 – 1.51 (m, 1H). MS:534 [M+H] +。
實驗例 1.小分子化合物抑制EGFR WT及HER2激酶活性的測試
試劑和耗材：ULightTM-labeled Ploy GT Peptide（Perkin Elmer，目錄號TRF-0100-M）；ULightTM-labeled JAK-1 (Try1023) Peptide（Perkin Elmer，目錄號TRF-0121-M）；Eu-W1024-labeled Anti-Phosphotyrosine Antibody (PT66)（Perkin Elmer，目錄號AD0068）；10×Detection Buffer（Perkin Elmer，目錄號CR97-100）；HER2激酶（Carna Biosciences，目錄號08-016）；EGFR激酶（Carna Biosciences，目錄號08-115）；HEPES（GIBCO，目錄號15630-080）；EGTA（Sigma，目錄號03777-10G）；EDTA（Sigma，目錄號EDS-100G）；MgCl 2（Sigma，目錄號63069-100ML）；DTT（Sigma，目錄號43816-10ML）；Tween-20（Sigma，目錄號P7949-100ML）；DMSO（Life Science，目錄號0231-500ML）；384孔板（Perkin Elmer，目錄號607290）；多功能讀板機（Perkin Elmer，目錄號Envision）
化合物溶液配置：受試化合物溶于DMSO配成10 mM母液。使用前將化合物在DMSO中稀釋至0.25 mM（100倍終濃度的稀釋液），並做3倍濃度梯度稀釋，11個梯度。加藥時用緩衝液稀釋成4倍終濃度的稀釋液。
HER2激酶檢測：配置緩衝液，使用緩衝液配置40 nM 4X HER2激酶溶液、40 μM 4X ATP溶液、400 nM 4×ULight TM-labeled Ploy GT Peptide底物溶液。配置完成後，將酶與預先稀釋配置的不同濃度化合物混合，室溫放置5分鐘，每個濃度設置複孔。加入對應底物以及ATP，室溫反應120分鐘（其中設置陰陽對照）。反應完畢加入PT66檢測抗體，室溫孵育60分鐘後用Envision檢測。
EGFR WT激酶檢測：配置緩衝液，使用緩衝液配置3.48 nM 4X EGFR激酶溶液、600 μM 4X ATP溶液、400 nM 4×ULight TM-labeled JAK-1 (Try1023) Peptide底物溶液。配置完成後，將酶與預先稀釋配置的不同濃度化合物混合，室溫放置5分鐘，每個濃度設置複孔。加入對應底物以及ATP，室溫反應120分鐘（其中設置陰陽對照）。反應完畢加入PT66檢測抗體，室溫孵育60分鐘後用Envision檢測。
資料計算：用Excel表格計算孔讀值和抑制率，孔讀值=10000*（孔EU665值）/ （孔EU615值），抑制率=[(陽性對照孔讀值-實驗孔讀值)/(陽性對照孔讀值- 陰性對照孔讀值)]*100%。將化合物濃度和相應抑制率輸入GraphPad Prism處理計算IC 50值。
表1測試顯示，本申請的化合物可以抑制EGFR WT及HER2酪氨酸激酶的活性，尤其是其中部分化合物表現出了強力的抑制效應。測試結果總結於下表1中。
表1列出了本申請中部分化合物對EGFR WT及HER2酪氨酸激酶抑制活性的測定結果，其中A表示IC 50小於或等於1 nM，B表示IC 50大於1 nM但小於或等於10 nM，C表示IC 50大於10 nM但小於或等於100 nM，D表示IC 50大於100 nM但小於或等於1000 nM，NT表示未有相關結果。
表1 本發明化合物對EGFR及HER2激酶抑制活性測定結果
實施例 EGFR WT HER2 實施例 EGFR WT HER2
編號 IC 50nM IC 50nM 編號 IC 50nM IC 50nM
1 A D 13 A C
2 B D 14 B C
3 A C 15 A C
4 A C 16 A C
5 A C 17 A D
6 A D 18 A D
7 A D 19 A C
8 A C 20 A B
9 A C 21 A C
10 B D 22 A B
11 A D 23 A C
12 A C 24 A C
由以上表1的結果可見，本申請的化合物對於HER2和EGFR兩種激酶，均表現出良好至優異的抑制活性，其中，對於EGFR表現出非常強力的抑制活性，從而相對於HER2激酶，表現出一定的選擇性。
實驗例 2.小分子化合物抑制細胞增殖的測試
本申請採用CTG方法檢測了本發明化合物對體外培養的HCC-827、Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD細胞系的體外抗增殖活性。
試劑和耗材：RPMI1640（ThermoFisher，目錄號C11875500BT）；DMEM（ThermoFisher，C11995500BT）；胎牛血清（Hyclone，目錄號SV30087.03）；0.25%胰蛋白酶-EDTA（ThermoFisher，目錄號25200072）；青黴素-鏈黴素（Hyclone，目錄號SV30010）；DSMO（Life Science，目錄號0231-500ML）；CTG測試試劑盒（Promega，目錄號G9243）；96孔板（Corning，目錄號3599）；多功能讀板機（Perkin Elmer，目錄號Envision）
細胞系：HCC-827（來自ATCC），Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD（均來自康源博創生物科技(北京)有限公司）；以上細胞在培養過程中，均用含10%胎牛血清、100 U/mL 青黴素、100 μg/mL 鏈黴素的RPMI1640培養基培養，HCC-827用10%胎牛血清、100 U/mL 青黴素、100 μg/mL 鏈黴素的DMEM培養基培養。
具體實驗方法：
1. 用DSMO溶解受試化合物形成儲藏液並進行梯度稀釋，然後再用相應培養基稀釋得到5倍工作濃度溶液。
2. 將處於對數生長期的細胞用培養液稀釋調整至特定細胞密度，添加80 μL 細胞懸液至96孔板中，使得HCC-827、Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD的細胞鋪板密度均為3000細胞/孔。其中Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD細胞直接進入下一步加化合物處理，而HCC-827需置於37℃、5%二氧化碳氣體培養箱中培養過夜貼壁後再加化合物物處理。
3. 在已接種細胞的96孔板中每孔加入20 μL化合物溶液。被測化合物最高濃度為10 μM，共9個濃度，4倍梯度稀釋，雙複孔。同時設置不加化合物的對照組。
4. 細胞繼續培養72小時後，用CTG檢測試劑盒檢測細胞活力。用多功能讀板機(Perkin Elmer) 讀取信號值，用GraphPad Prism軟體製作量效曲線並計算IC 50。
表2列出了本發明中代表性化合物對HCC-827、Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD細胞的抗增殖活性測定結果。其中A表示IC 50小於或等於5 nM，B表示IC 50大於5 nM但小於或等於50 nM，C表示IC 50大於50 nM但小於或等於500 nM，D表示IC 50大於500 nM但小於或等於5000 nM，NT表示未有相關結果。
表2. 本發明代表性化合物對HCC-827、Ba/F3-EGFR-VIII和Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD細胞的抗增殖活性測定結果
實施例 HCC-827 Ba/F3 EGFR D770_N771insSVD Ba/F3 EGFRvIII
編號 IC 50 IC 50 IC 50
1 A C A
2 A C B
3 A C A
4 A C B
5 A B A
6 A C B
7 A NT B
8 A C B
9 A B A
10 B C C
11 A C A
12 B NT B
13 A C A
14 A C B
15 A C B
16 A C B
17 A C B
18 A C B
19 A C B
20 A C NT
21 A B NT
22 A B NT
23 A C NT
24 A C NT
表2結果顯示，本申請的化合物對於以上所測試的各種細胞系均表現出一定的抗腫瘤增殖活性。尤其是對於HCC-827和Ba/F3-EGFR-VIII細胞系，本申請化合物表現出了的優異活性。
實驗例 3.小分子化合物藥代動力學試驗
本試驗通過對SD大鼠單次口服及靜脈注射給予本申請部分化合物後，研究了本申請化合物的藥代動力學特徵，研究了本申請化合物穿透血腦屏障的能力。
（一）所用試劑、儀器以及動物
表3. 試驗試劑
試劑 供應商 貨號 批號
DMSO Innochem D3851 INAH03010
Kolliphor®HS 15 (Solutol) SIGMA 42966 BCBZ6212
乙腈 Fisher 75-05-8 186342
甲酸 DIKMA 64-18-6 2486917
乙酸銨 SIGMA 431311 MKCD5084
超純水 自製 - -
表4. 試驗儀器
儀器 品牌 型號
液相質譜聯用儀（LC-MS） AB Sciex 5500 Q-trap
高速冷凍離心機 Thermo ST 40R
十萬分之一天平 梅特勒 XPE205
單孔移液器 Eppendorf Research plus系列
電動12孔排槍 Thermo Novus系列
表5. 試驗用鼠
動物&品系： SD大鼠 （雄性）
動物等級： SPF級
動物來源： 北京華阜康生物科技股份有限公司                
體重範圍，年齡： 給藥首日180g-350g，8周（以體重為主）
（二）樣品製劑配製
1. 靜脈注射（IV）組：稱取適當數量的待測化合物，完全溶解於適當體積的溶媒（DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85 V/V, 加入2 摩爾倍 HCl）中，進行攪拌、渦流和/或超聲處理。得到溶液後，將逐漸增加溶媒至終體積以達到目標濃度，渦旋、超聲，得到均一溶液，用0.22 μm 的PVDF 濾膜過濾。
2. 口服（PO）組：稱取適當數量的待測化合物，完全溶解於適當體積的溶媒（DMSO/Solutol/H 2O=5/10/85 V/V, 加入2 摩爾倍 HCl）中，進行攪拌、渦流和/或超聲處理。得到溶液後，將逐漸增加溶媒至終體積以達到目標濃度，渦旋、超聲，得到均一溶液。
（三）大鼠給藥及取樣
根據動物體重對動物隨機分組，分組後各組動物體重相當（不超過平均體重的±20%）。同時，IV組不禁食，PO組禁食過夜（＞12小時），並於給藥後2小時給予食物。所有動物自由飲水。以下表6和表7分別給出了給藥方案和藥代動力學採樣方案。
表6. 給藥方案
分組 給藥方式 動物數量 樣品 給藥劑量 給藥體積 製劑濃度
(mg/kg) (mL/kg) (mg/mL)
1 IV 3 全血 3 3 1
2 PO 3 全血 10 10 1
3 PO 3 全血/腦 10 10 1
表7. 藥代動力學採樣方案
分組 給藥方式 樣品採集 抗凝劑 藥代動力學時間點
1 IV 頸靜脈插管（JVC） K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後5、15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
2 PO 頸靜脈插管（JVC） K 2EDTA 全血：給藥前，給藥後15、30分鐘、1、2、4、7和24小時
3 PO 心臟采血，麻醉動物，採集腦組織。 K 2EDTA 全血：2小時 腦組織：2小時
按照上述方案對大鼠進行給藥，並在預定的時間點進行血液和腦組織樣品的採集和處理（採集和處理按本領域常規方法進行）。
（四）樣品分析
腦稱重，加入4倍的勻漿液（乙腈/水=1/1）勻漿。全血樣品和腦勻漿液分別加入6倍體積的乙腈，渦旋1min後，4℃，4500rpm離心15min，上清液用超純水稀釋2倍，用LC/MS分析樣品。
（五）資料分析：
將用WinNonlin軟體進行藥代動力學參數計算。如有適用的血漿的藥物濃度-時間資料，將計算以下藥代動力學參數：CL（清除率）；V d（表觀分佈容積）；T 1/2（消除半衰期）；C max（達峰濃度）；T max（達峰時間）；AUC（血藥濃度-時間曲線下面積）；MRT（平均滯留時間）；F%（生物利用度）。
測試結果示於下表8-10中，分別給出了本申請實施例化合物1在各時間點的大鼠血藥濃度，以及各藥代動力學參數值，同時給出了本申請實施例化合物1在大鼠的腦和血液中的濃度及其比值。由上面的結果可知，本申請的化合物1表現出了優異的穿透血腦屏障的能力。這也說明本申請的化合物不但具有優異的EGFR激酶抑制活性，並能在細胞水準上抑制細胞增殖，同時更具有優異的穿透血腦屏障的能力，有望應用於EGFR激酶介導的相關疾病，尤其是腦轉移相關的疾病。
表8. 本申請實施例化合物1的大鼠血藥濃度
時間點（ hr ） 實施例1 血藥濃度（ ng/mL ）
IV 3 mg/kg PO 10 mg/kg
0 0 0
0.083 888 ± 106 /
0.25 494 ± 121 83.2 ± 29.9
0.5 365 ± 48 227 ± 58
1 175 ± 23 281 ± 73
2 78.2 ± 28.7 249 ± 74
4 18.8 ± 8.7 77.7 ± 7.3
7 7.05 ± 3.77 72.6 ± 25.5
24 NA 14.2 ± 19.7
表9. 本申請實施例1的化合物的大鼠藥代參數
參數 實施例1
IV 3 mg/kg PO 10 mg/kg
T max(hr) / 1.00 ± 0.00
C max(ng/mL) / 281 ± 73
T 1/2(hr) 1.45 ± 0.09 3.17 ± 1.22
AUC 0-t (hr*ng/mL) 709 ± 96 1732 ± 170
AUC inf(hr*ng/mL) 724 ± 105 1776 ± 178
Cl _obs(mL/min/kg) 70.0 ± 9.5 /
V d(L/kg) 8.76 ± 0.67 /
F% / 73.6 ± 7.4
表10. 本申請實施例化合物1在腦和全血中的濃度及比值 (PO 10mg/kg，採樣時間，給藥2h)
實施例 血藥濃度 (ng/mL) 腦濃度 (ng/g) 腦 / 血 比值
1 480 1468 3.06
以上所述是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明所述原則的前提下，本發明的實施方式還可以作出若干改進和修飾，這些改進和修飾也應視為本發明的保護範圍。
無
無
Figure 111137071-A0101-11-0001-2

Claims (11)

  1. 一種式(I)所示化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，
    Figure 03_image004
    式 (I) 式(I)中，m為0、1或者2； R 1為氫、4-7元雜脂環基或-NR aR b， R a、R b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、被羥基取代的C 1-C 6烷基、被C 1-C 3烷氧基取代的C 1-C 6烷基、或被C 3-C 6環烷基取代的C 1-C 6烷基， 所述的4-7元雜脂環基為含有1-2個選自N、O或S的雜原子的雜脂環基，所述雜脂環基未被取代或被C 1-C 3烷基、C 1-C 4醯基、羥基、氰基、氨基醯基、單或雙C 1-C 3烷基取代的氨基醯基、C 1-C 3烷基碸基、C 1-C 3烷基亞碸基、氧代（=O）中的一種或兩種取代； R 2為被1至3個選自鹵素、氰基、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3烷硫基、羥基、C 3-C 4環烷基或C 1-C 3烷基碸基中的取代基所取代或非取代的C 1-C 6烷基； R 3、R 4、R 5各自獨立地為氫、鹵素、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C 3-C 4環烷基，且至少有一個為鹵素。
  2. 如請求項1所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中， m為0或者1， R 1為4-7元雜脂環基或 -NR aR b， R a、R b各自獨立地為氫、C 1-C 3烷基、C 3-C 6環烷基、被羥基取代的C 1-C 3烷基、被C 1-C 3烷氧基取代的C 1-C 3烷基； 所述4-7元雜脂環基為吡咯烷基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、硫代嗎啉基，且上述基團未被取代或被甲基、乙基、丙基、異丙基、醛基、乙醯基、丙醯基、羥基、氰基、氨基醯基、甲基碸基、乙基碸基、丙基碸基、異丙基碸基、甲基亞碸基、乙基亞碸基、丙基亞碸基、異丙基亞碸基、氧代（=O）中的一種或兩種取代。
  3. 如請求項2所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中，R 1為1-甲基吡咯烷-2-基、1-乙基吡咯烷-2-基、1-丙基吡咯烷-2-基、1-異丙基吡咯烷-2-基、吡咯烷-1-基、呱啶-1-基、1-甲基呱嗪-4-基、1-乙基呱嗪-4-基、嗎啉基、四氫呋喃2-基、四氫呋喃3-基、四氫吡喃2-基、四氫吡喃3-基、四氫吡喃4-基、硫代嗎啉基、二甲氨基、二乙氨基、二丙氨基、二異丙氨基、甲基乙基氨基、甲基丙基氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、環丙基氨基、環丁基氨基、甲基異丙基氨基、N-甲基-N-環丙基氨基、N-甲基-N-環丁基氨基或者乙基丙基氨基。
  4. 如請求項1所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中， R 2為被1至3個選自氟、氯、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、羥基、環丙基、環丁基、甲碸基、乙碸基、丙碸基或異丙碸基中的取代基所取代或非取代的C 1-C 4烷基。
  5. 如請求項4所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中， R 2為甲基、乙基、丙基、異丙基、羥乙基、羥丙基、三氟甲基、氟乙基、氟丙基、2,2,2-三氟乙基、2,2-二氟乙基、3,3,3-三氟丙基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、甲硫基乙基、甲硫基丙基、乙硫基乙基、乙硫基丙基、2-羥基-2-甲基丙基、3-羥基-3-甲基丁基、甲碸基丙基、甲碸基乙基、乙碸基乙基、乙碸基丙基、異丙碸基乙基、異丙碸基丙基。
  6. 如請求項1所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中， R 3、R 4、R 5各自獨立地為氫、氟、氯、溴，且至少有一個為氟、氯、溴。
  7. 如請求項6所述的化合物、立體異構體及其藥學上可接受的鹽，其中， R 3、R 5各自獨立地為氫、氟、氯，且R 4為氯。
  8. 如請求項1所述的化合物、其立體異構體及其藥學上可接受的鹽，所述化合物選自：
    Figure 03_image006
    Figure 03_image008
    Figure 03_image010
    Figure 03_image012
    Figure 03_image014
    Figure 03_image016
    Figure 03_image018
    Figure 03_image020
    Figure 03_image022
    Figure 03_image024
    Figure 03_image026
    Figure 03_image028
    Figure 03_image030
    Figure 03_image032
    Figure 03_image034
    Figure 03_image036
    Figure 03_image038
    Figure 03_image040
    Figure 03_image042
    Figure 03_image044
    Figure 03_image046
    Figure 03_image048
    Figure 03_image050
    Figure 03_image052
    。
  9. 一種藥物組合物，包括請求項1至8中任一項所述的化合物、立體異構體、或其藥學上可接受的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
  10. 如請求項9所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物還包含一種或多種其他治療劑。
  11. 如請求項1至8中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、異構體、溶劑化物、或前藥在製備治療與酪氨酸激酶EGFR、HER2相關的癌症及自身免疫疾病的藥物中的應用，其中所述癌症及自身免疫疾病包括：眼底疾病、乾眼症、銀屑病、白癜風、皮炎、斑禿、類風濕性關節炎、結腸炎、多重硬化、系統性紅斑狼瘡、克羅恩病、動脈粥樣化、肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、神經膠質瘤、膠質母細胞瘤、卵巢癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、黑色素瘤、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胃癌、肝癌、胃腸間質瘤、甲狀腺癌、慢性粒細胞白血病、急性髓細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、食道癌、腦瘤、B 細胞和 T 細胞淋巴瘤、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、膽道癌肉瘤、膽管癌。
TW111137071A 2021-09-30 2022-09-29 喹唑啉類化合物、組合物及其應用 TW202315866A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111158182.1 2021-09-30
CN202111158182 2021-09-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202315866A true TW202315866A (zh) 2023-04-16

Family

ID=85747047

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW111137071A TW202315866A (zh) 2021-09-30 2022-09-29 喹唑啉類化合物、組合物及其應用

Country Status (3)

Country Link
CN (1) CN115894383A (zh)
TW (1) TW202315866A (zh)
WO (1) WO2023051687A1 (zh)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5760041A (en) * 1996-02-05 1998-06-02 American Cyanamid Company 4-aminoquinazoline EGFR Inhibitors
GB0126433D0 (en) * 2001-11-03 2002-01-02 Astrazeneca Ab Compounds
TWI609012B (zh) * 2013-04-28 2017-12-21 廣東東陽光藥業有限公司 氨基喹唑啉類衍生物及其鹽和使用方法
CN110498804A (zh) * 2018-05-18 2019-11-26 山东轩竹医药科技有限公司 喹唑啉衍生物类酪氨酸激酶抑制剂的新用途
US20220194940A1 (en) * 2019-04-25 2022-06-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Heterocyclic inhibitors of tyrosine kinase

Also Published As

Publication number Publication date
CN115894383A (zh) 2023-04-04
WO2023051687A1 (zh) 2023-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6431593B6 (ja) ピリジニルアミノピリミジン誘導体、その製造方法、および用途
CN104736155B (zh) 双环化合物作为激酶的抑制剂
JP2020023554A (ja) ピリミジン化合物及びその医薬用途
CN111484482B (zh) 炔基嘧啶或炔基吡啶类化合物、及其组合物与应用
JP2022502438A (ja) Ｆｇｆｒ４阻害剤及びその使用
JP6719451B2 (ja) キナゾリン誘導体
CN111196814A (zh) 芳环连二噁烷并喹唑啉或喹啉类化合物、组合物及其应用
CN113087671B (zh) 一种氰基取代吡啶及氰基取代嘧啶类化合物、制备方法及其应用
TW202315866A (zh) 喹唑啉類化合物、組合物及其應用
CN111362924B (zh) 氘代的嘧啶衍生物及其用途
EP4293016A1 (en) Quinazoline-based compound, composition, and application of quinazoline-based compound
TWI820414B (zh) 喹唑啉類化合物、製備方法及其應用
KR20230012041A (ko) 3,4-디하이드로이소퀴놀린계 화합물 및 그 사용
CN115109036B (zh) 一种喹唑啉类化合物、组合物及其应用
CN113527215B (zh) 一种喹唑啉类化合物、制备方法及其应用
CN115894486B (zh) 一种氢化吡啶并喹唑啉类化合物、组合物及其应用
CN115894455B (zh) 一种喹唑啉类化合物、组合物及其应用
CN112442045B (zh) 一种酰基取代的噁嗪并喹唑啉类化合物、制备方法及其应用
WO2023030335A1 (zh) 作为tyk2/jak1假激酶结构域抑制剂的化合物及合成和使用方法
CN112341378A (zh) 脲代炔基嘧啶或脲代炔基吡啶类化合物、及其组合物与应用
JP2014214138A (ja) ヒドロキシル基を有するピペラジン誘導体及びその塩