TW202311523A - 病毒載體用表面被覆晶片及容器 - Google Patents

Abstract

本發明係以提供一種供穩定腺相關病毒載體之器具、腺相關病毒載體檢查套組、降低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法、腺相關病毒載體之穩定化方法，以及保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法為課題。 本發明係提供一種供穩定腺相關病毒載體之器具，其係於表面的至少一部分具備塗覆膜的供穩定腺相關病毒載體之器具，其中前述塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°。前述塗覆膜較佳包含以下共聚物，或者含有羥基之聚合物或化合物，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

Description

病毒載體用表面被覆晶片及容器

本發明係有關於一種供穩定病毒，尤為腺相關病毒載體之器具、腺相關病毒載體檢查套組、降低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法、腺相關病毒載體之穩定化方法，以及保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法。

病毒無法單獨繁殖，而會入侵包括人類在內的動植物細胞，因此常會引起嚴重的感染症。從而，在研究感染症的預防或治療方法等的過程中常會進行純化、保存病毒之作業。此外，為了進行病毒感染的確認或調查，一般係採取體液或汙水等檢體置入容器中並保存後，再對病毒進行測定(例如參照非專利文獻1)。然而，病毒會吸附於保存容器的表面，以致病毒消失或其回收性降低，而造成問題。與病毒相同，蛋白質亦因吸附於容器表面而導致回收性降低或不易穩定進行檢測，例如，有人報導一種具有生物體物質之附著抑制力的離子錯合物材料及使用其之抑制生物體物質附著之塗覆材料(例如參照專利文獻1)。又，蛋白質對容器表面的吸附雖可藉由界面活性劑等添加物來改善，但某些病毒會被界面活性劑破壞，縱可抑制吸附，但仍有其後之回收、檢測發生問題之課題。 [先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1] 國際公開第2016/093293號公報 [非專利文獻]

[非專利文獻1] Science of the Total Environment 739 (2020) 139076

[發明所欲解決之課題]

本發明係以提供一種供穩定病毒，尤為腺相關病毒載體之器具、腺相關病毒載體檢查套組、降低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法、腺相關病毒載體之穩定化方法，以及保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法為目的。 [解決課題之手段]

本發明係包含以下者。 [1]  一種供穩定腺相關病毒載體之器具，其係於表面的至少一部分具備塗覆膜的供穩定腺相關病毒載體之器具，其中前述塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°。 [2]  如[1]之器具，其中前述穩定化係抑制腺相關病毒載體的附著。 [3]  如[1]或[2]之器具，其中前述塗覆膜為包含以下共聚物的塗覆膜，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

[式中， U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。 [4]  如[1]或[2]之器具，其中前述塗覆膜係包含含有羥基之聚合物或化合物。 [5]  如[1]~[4]中任一項之器具，其為腺相關病毒載體用吸頭。 [6]  如[1]~[4]中任一項之器具，其為腺相關病毒載體保存容器。 [7]  一種腺相關病毒載體檢查套組，其具備如[1]~[4]中任一項之器具。 [8]  如[1]~[4]中任一項之器具，其為腺相關病毒載體之製造用資材。 [9]  一種減低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法，其係使用如[1]~[4]中任一項之器具。 [10]  一種腺相關病毒載體之穩定化方法，其包含： (1)對器具的至少一部分賦予膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°的塗覆膜之步驟、 (2)使包含腺相關病毒載體與溶劑的組成物接觸前述塗覆膜之步驟。 [11]  如[10]之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述塗覆膜係包含以下共聚物，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

[式中， U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。 [12]  如[10]之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述塗覆膜係包含含有羥基之聚合物或化合物。 [13]  如[10]~[12]中任一項之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述組成物不含界面活性劑。 [14]  一種保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法，其係使用如[1]~[4]中任一項之器具。 [發明之效果]

本發明可提供一種供穩定病毒，尤為腺相關病毒載體之器具(例如吸頭或保存容器等)、具備該器具之腺相關病毒載體檢查套組、使用該器具之降低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法、腺相關病毒載體之穩定化方法，以及保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法。又，本發明之保存容器亦可發揮在保存一定期間後仍可維持腺相關病毒載體的病毒感染度(病毒的感染能力)之效果。

[實施發明之形態] ＜用語的說明＞

本發明中使用之用語，除非另外合先敘明，否則具有以下定義。

本發明中所稱「病毒」，除非另外合先敘明，否則為隨後詳述之「腺相關病毒」，本明說書中「病毒」之記載係指「腺相關病毒」。

本發明中，「鹵素原子」係指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。

本發明中，「烷基」係指直鏈或者分支之飽和脂肪族烴之一價基團。「碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」可舉出例如甲基、乙基、n-丙基、異丙基、n-丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、n-戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基或1-乙基丙基。「碳原子數1~18之直鏈或者分支烷基」，除「碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」之實例外，尚可舉出己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基或十八烷基，或者該等之異構物。

本發明中，「可經鹵素原子取代之碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」係指上述碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基，或指經1個以上之上述鹵素原子取代之上述碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基。「碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」之實例係如上述。另外，「經1個以上之鹵素原子取代之碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」係指上述碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基的1個以上任意氫原子經鹵素原子取代者；其實例可舉出氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、溴甲基、碘甲基、2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氯乙基、全氟乙基、全氟丁基或全氟戊基等。

本發明中，「酯鍵」係指-C(=O)-O-或者-O-C(=O)-，「醯胺鍵」係指-NHC(=O)-或者-C(=O)NH-，醚鍵則指-O-。

本發明中，「可經鹵素原子取代之碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基」係指碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基，或者經1個以上之鹵素原子取代之碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基。於此，「伸烷基」係指對應上述烷基之二價有機基。「碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基」之實例可舉出伸甲基、伸乙基、伸丙基、三伸甲基、四伸甲基、1-甲基伸丙基、2-甲基伸丙基、二甲基伸乙基、乙基伸乙基、五伸甲基、1-甲基-四伸甲基、2-甲基-四伸甲基、1,1-二甲基-三伸甲基、1,2-二甲基-三伸甲基、2,2-二甲基-三伸甲基、1-乙基-三伸甲基、六伸甲基、八伸甲基及十伸甲基等，此等當中，較佳為伸乙基、伸丙基、八伸甲基及十伸甲基，更佳為例如伸乙基、伸丙基、三伸甲基、四伸甲基等碳原子數1~5之直鏈或者分支伸烷基，尤以伸乙基或伸丙基為佳。「經1個以上之鹵素原子取代之碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基」係指上述伸烷基的1個以上任意氫原子經鹵素原子取代者，尤以伸乙基或伸丙基的部分或全部氫原子經鹵素原子取代者為佳。

本發明中，「碳原子數3~10之環式烴基」係指碳原子數3~10之單環式或者多環式之飽和或者部分不飽和脂肪族烴之一價基團。其中，較佳為碳原子數3~10之單環式或者二環式飽和脂肪族烴之一價基團，可舉出例如環丙基、環丁基或環己基等碳原子數3~10之環烷基，或者雙環[3.2.1]辛基、冰片基、異冰片基等碳原子數4~10之雙環烷基。

本發明中，「碳原子數6~10之芳基」係指碳原子數6~10之單環式或者多環式之芳香族烴之一價基團，可舉出例如苯基、萘基或蒽基等。「碳原子數6~10之芳基」可經1個以上之上述「可經鹵素原子取代之碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」取代。

本發明中，「碳原子數7~14之芳烷基」係指基-R-R’(於此，R表示上述「碳原子數1~5之直鏈或者分支伸烷基」，R’表示上述「碳原子數6~10之芳基」)，可舉出例如苯甲基、苯乙基或α-甲基苯甲基等。「碳原子數7~14之芳烷基」之芳基部分可經1個以上之上述「可經鹵素原子取代之碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」取代。

本發明中，「碳原子數7~14之芳氧烷基」係指基-R-O-R’(於此，R表示上述「碳原子數1~5之直鏈或者分支伸烷基」，R’表示上述「碳原子數6~10之芳基」)，可舉出例如苯氧甲基、苯氧乙基或苯氧丙基等。「碳原子數7~14之芳氧烷基」之芳基部分可經1個以上之上述「可經鹵素原子取代之碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基」取代。

本發明中，「鹵化物離子」係指氟化物離子、氯化物離子、溴化物離子或碘化物離子。

本發明中，「無機酸離子」係指碳酸離子、硫酸離子、磷酸離子、磷酸氫離子、磷酸二氫離子、硝酸離子、過氯酸離子或硼酸離子。

較佳作為上述An ^-者為鹵化物離子、硫酸離子、磷酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子，特佳者為鹵化物離子。

本發明中，(甲基)丙烯酸酯化合物係指丙烯酸酯化合物與甲基丙烯酸酯化合物此兩者。例如(甲基)丙烯酸係指丙烯酸與甲基丙烯酸。

＜供穩定腺相關病毒載體之器具＞ 本案之供穩定腺相關病毒載體之器具，其特徵為於表面的至少一部分具備塗覆膜，且前述塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°。本發明中所稱「穩定化」，典型上意指抑制腺相關病毒載體對器具的附著，及當前述器具為容器時，抑制腺相關病毒載體在存在於容器中之溶液中的凝聚。 上述抑制附著係指針對以實施例記載之方法進行分注試驗後之ITR(反向末端重複序列；Inverted Terminal Repeat)之藉由使用引子的qPCR分析的核酸含量，與無本發明之塗覆的比較對照相比高1.5倍以上之意。 抑制在上述溶液中的凝聚係指在容器中置入腺相關病毒載體溶液(腺相關病毒載體的濃度為例如1.0mg/mL)後，於20~25℃搖晃24小時後，對該溶液藉由流速成像裝置(例如FlowCam8100，Fluid Imaging Technologies公司製)進行粒子量測，與無本發明之塗覆的比較對照相比，粒子濃度為100分之1以下之意。

＜塗覆膜＞ 所稱塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°，係指例如在使用接觸角計(例如全自動接觸角計(協和界面化學股份有限公司，DM-701))的靜態接觸角測定中，於水中(常溫，例如25±5℃)之氣泡的接觸角為120°~180°之意。塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為130°~180°，為140°~180°，較佳為150°~180°。

前述塗覆膜只要具備於後述器具的表面的至少一部分即可；較佳在可能與病毒接觸的面之整面形成塗覆膜，更佳在整個器具表面形成塗覆膜。

於本發明較佳實施樣態中，前述塗覆膜較佳包含含有羥基之聚合物或化合物。 本發明之含有羥基之聚合物或化合物可為具羥基之乙烯性不飽和單體、或多醣類或者其衍生物之聚合物。乙烯性不飽和單體之實例可舉出選自由(甲基)丙烯酸及其酯；乙烯吡咯烷酮；以及乙烯所成群組之1種或2種以上之乙烯性不飽和單體。多醣類或其衍生物之實例可舉出羥烷基纖維素(例如羥乙基纖維素或羥丙基纖維素)等纖維素系高分子、澱粉、葡聚糖、卡特蘭多醣。

羥基可為烷二醇殘基。烷二醇殘基係指烷二醇(HO-Alk-OH；於此，Alk為碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基)之單側末端羥基與其他化合物(縮合)反應後所殘留的羥烷基(-Alk-OH)，可包含伸烷氧基單元重複而成之聚(伸烷氧)基。具此種結構之聚合物或化合物之實例可舉出聚(2-羥乙基(甲基)丙烯酸酯)、聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯、聚氧乙烯鏈與聚氧丙烯鏈之嵌段共聚物之泊洛沙姆(例如以Pluronic(註冊商標)之商品名稱於市面上販售)等。

於本發明其他較佳實施樣態中，前述塗覆膜可為以下塗覆膜，該塗覆膜包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元的共聚物；

[式中， U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。

＜塗覆膜的形成＞ 本發明之塗覆膜可藉由將可形成塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°的塗覆膜之週知塗覆膜形成用組成物以週知之方法塗佈於後述器具的表面的至少一部分，較佳為器具的表面當中可能與病毒接觸的面，更佳為器具的整個表面而形成。 塗覆膜之說明係如前述。

於表面的至少一部分具有本發明之塗覆膜之器具較佳為藉由包含將塗覆膜形成用組成物塗佈於器具之表面的至少一部分之步驟的方法而得；該塗覆膜形成用組成物包含以下共聚物與溶媒，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

[式中，U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基；R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)；An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。

於本發明較佳實施樣態中，上述塗覆膜形成用組成物所含共聚物係包含：包含上述式(a)表示之基之重複單元、包含上述式(b)表示之基之重複單元與包含上述式(c)表示之基之重複單元的共聚物。此外，本發明中，包含上述式(c)表示之基之重複單元係有別於包含上述式(a)表示之基之重複單元及包含上述式(b)表示之基之重複單元。該聚合物期望為將包含上述式(a)表示之基之單體、包含上述式(b)表示之基之單體與包含上述式(c)表示之基之單體進行自由基聚合而得，惟亦可使用經聚縮合、加成聚合反應而得者。共聚物之實例可舉出烯烴反應而得之乙烯聚合聚合物、聚醯胺、聚酯、聚碳酸酯、聚胺基甲酸酯等；此等當中，尤其期望為烯烴反應而得之乙烯聚合聚合物或(甲基)丙烯酸酯化合物經聚合而成的(甲基)丙烯酸聚合物。

本發明之塗覆膜之共聚物中包含式(a)表示之基之重複單元的比例為3莫耳%~80莫耳%，較佳為3.5莫耳%~50莫耳%，更佳為4莫耳%~30莫耳%。此外，本發明之共聚物亦可包含2種以上包含式(a)表示之基之重複單元。 本發明之塗覆膜之共聚物中包含式(b)表示之基之重複單元的比例為3莫耳%~80莫耳%，較佳為5莫耳%~70莫耳%，更佳為8莫耳%~65莫耳%。此外，本發明之共聚物亦可包含2種以上包含式(b)表示之基之重複單元。 本發明之共聚物中包含式(c)表示之基之重複單元的比例可為對整個共聚物減去上述式(a)及(b)而得的全部其餘部分，亦可為減去上述式(a)及(b)與下述之第4成分之合計比例而得的其餘部分，例如為1莫耳%~90莫耳%，較佳為3莫耳%~88莫耳%。更佳為5莫耳%~87莫耳%。最佳為50莫耳%~86莫耳%。此外，本發明之共聚物亦可包含2種以上包含式(c)表示之基之重複單元。

本發明共聚物中包含上述式(a)、式(b)及式(c)表示之基之重複單元的比例的組合較佳為： 式(a)：3莫耳%~80莫耳%、式(b)：3莫耳%~80莫耳%、式(c)：1莫耳%~90莫耳%、 更佳為： 式(a)：3.5莫耳%~50莫耳%、式(b)：5莫耳%~70莫耳%、式(c)：3莫耳%~88莫耳%、 再更佳為： 式(a)：4莫耳%~30莫耳%、式(b)：8莫耳%~65莫耳%、式(c)：5莫耳%~87莫耳%、 最佳為： 式(a)：4莫耳%~30莫耳%、式(b)：8莫耳%~65莫耳%、式(c)：50莫耳%~86莫耳%。

上述塗覆膜形成用組成物所含共聚物，特佳使用包含下述式(a1)、(b1)及(c1)之重複單元的共聚物。

式中，T ^a、T ^b、T ^c、U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基，Q ^a及Q ^b分別獨立表示單鍵、酯鍵或醯胺鍵，Q ^c表示單鍵、醚鍵或酯鍵，R ^a及R ^b分別獨立表示可經鹵素原子取代之碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基，R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)，An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子，m表示0~6之整數。

式(a1)中，m表示0~6之整數，較佳表示1~6之整數，更佳表示1~5之整數，特佳為1。

包含上述式(a1)、(b1)及(c1)之重複單元之共聚物的比例分別以本發明之共聚物中包含上述式(a)、式(b)及式(c)表示之基之重複單元的比例與上述者相同。

上述共聚物可藉由使包含以下述式(A)、(B)及(C)：

[式中， T ^a、T ^b、T ^c、U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； Q ^a及Q ^b分別獨立表示單鍵、酯鍵或醯胺鍵，Q ^c表示單鍵、醚鍵或酯鍵； R ^a及R ^b分別獨立表示可經鹵素原子取代之碳原子數1~10之直鏈或者分支伸烷基，R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子； m表示0~6之整數] 表示之化合物的單體混合物於溶媒中反應(聚合)而得。

T ^a、T ^b及T ^c較佳為氫原子、甲基或乙基，更佳為氫原子或甲基。U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3較佳為氫原子、甲基、乙基或第三丁基，式(a)之U ^a1及U ^a2更佳為氫原子，式(b)之U ^b1、U ^b2及U ^b3更佳為氫原子、甲基、乙基或第三丁基。

於本發明其他實施樣態中該共聚物亦可進一步包含衍生自任意之第4成分的單元。例如作為第4成分，亦可包含衍生自具有2個以上官能基之(甲基)丙烯酸酯化合物的交聯結構。此種第4成分可舉出例如乙二醇二(甲基)丙烯酸酯、三乙二醇二(甲基)丙烯酸酯、丙二醇二(甲基)丙烯酸酯、磷酸雙(甲基丙烯醯氧基甲基)、磷酸雙[(2-甲基丙烯醯氧基)乙基]、磷酸雙[3-(甲基丙烯醯氧基)丙基]、三丙烯酸氧次膦基參(氧基-2,1-乙二基)等。

例如，上述共聚物中衍生自具有2個以上官能基之(甲基)丙烯酸酯化合物之交聯結構的比例為0莫耳%~50莫耳%，較佳為5莫耳%~45莫耳%，最佳為10莫耳%~40莫耳%。

前述塗覆膜形成用組成物所含溶媒可舉出水、磷酸緩衝生理食鹽水(PBS)、醇。醇可舉出碳數2至6之醇、例如乙醇、丙醇、異丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、第三丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、1-庚醇、2-庚醇、2,2-二甲基-1-丙醇(=新戊醇)、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-1-丁醇、2-甲基-2-丁醇(=第三戊醇)、3-甲基-1-丁醇、3-甲基-3-戊醇、環戊醇、1-己醇、2-己醇、3-己醇、2,3-二甲基-2-丁醇、3,3-二甲基-1-丁醇、3,3-二甲基-2-丁醇、2-乙基-1-丁醇、2-甲基-1-戊醇、2-甲基-2-戊醇、2-甲基-3-戊醇、3-甲基-1-戊醇、3-甲基-2-戊醇、3-甲基-3-戊醇、4-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、4-甲基-3-戊醇及環己醇，可單獨或使用該等之組合之混合溶媒；而基於溶解共聚物之觀點，較佳為選自水、PBS、乙醇、丙醇及該等之混合溶媒者，更佳為選自水、乙醇及該等之混合溶媒者。

為形成具有本發明之塗覆膜的器具，而將上述塗覆膜形成用組成物塗佈於器具表面的至少一部分。塗佈方法無特別限制，可採用一般的旋轉塗佈、浸漬塗佈、溶媒澆鑄法等塗佈法。

用於獲得具有本發明之塗覆膜的器具之方法，緊接著上述塗佈步驟後，亦可包含塗覆膜之乾燥步驟。塗覆膜之乾燥步驟係於大氣下或真空下，較佳於溫度-200℃~200℃之範圍內進行。藉由乾燥步驟，可去除上述塗覆膜形成用組成物中的溶媒，同時使本發明之共聚物之式(a)及式(b)彼此形成離子鍵而完全固接於容器。

塗覆膜以例如室溫(10℃~35℃、例如25℃)下之乾燥亦可形成，而為了更迅速地形成塗覆膜，亦能以例如40℃~50℃加以乾燥。又亦可採用藉由冷凍乾燥法之於極低溫~低溫(-200℃~-30℃前後)下的乾燥步驟。冷凍乾燥亦稱真空凍結乾燥，係一般經過乾燥後以冷媒予以冷卻，且於真空狀態下藉由昇華而去除溶媒之方法。冷凍乾燥所用之普通冷媒可舉出乾冰與甲醇之混合介質(-78℃)、液態氮(-196℃)等。

乾燥溫度若為-200℃以下，則須使用非普通冷媒而缺乏泛用性，且為使溶媒昇華，乾燥需要長時間而使得效率差。乾燥溫度若為200℃以上，則塗覆膜表面的離子鍵反應過度進行使得該表面喪失親水性，而未能發揮病毒附著抑制力。更佳之乾燥溫度為10℃~180℃，更佳之乾燥溫度為25℃~150℃。

乾燥後，為了去除殘留於該塗覆膜上的雜質、未反應單體等，且為了調節膜中的共聚物離子平衡，亦可實施以選自包含水及電解質之水溶液中的至少1種溶媒洗淨之步驟。洗淨期望為流水洗淨或超音波洗淨等。上述包含水及電解質之水溶液亦可為例如以40℃~95℃之範圍加溫者。包含電解質之水溶液較佳為PBS、生理食鹽水(僅含氯化鈉者)、杜氏磷酸緩衝生理食鹽水、TRIS緩衝生理食鹽水、HEPES緩衝生理食鹽水及巴比妥緩衝生理食鹽水，特佳為PBS。固接後以水、PBS及醇等洗淨，塗覆膜也不會溶出而保持強固地固接於基體之狀態。形成之塗覆膜縱有生物物質附著，其後仍可藉由水洗等輕易地去除。

亦可視需求，為了滅菌而進行放射線、電子束、環氧乙烷、高壓釜等之處理。

本發明之塗覆膜的膜厚較佳為10~1000Å，更佳為10~500Å，最佳為20~400Å。

本發明之器具係於器具表面的至少一部分具有由上述塗覆劑所形成的塗覆膜。具體而言，係於器具的表面當中可能與病毒接觸的面，更佳為器具的整個表面具有塗覆膜。

於前述塗佈步驟前，亦可對前述器具的表面施予週知之電漿處理。例如，為了將玻璃或ITO(Indium Tin Oxide)等氧化物表面親水化，已知有進行UV照射或氧氣電漿處理之方法。又，亦有人報導使塑膠或樹脂之矽氧橡膠(聚二甲基矽氧烷)的表面親水化而促進與清漆的密合性之技術(日本專利第5898703號、日本專利第4255911號)。電漿可為藉由各種氧系、氮系、氟系單一氣體或該等之混合氣體而產生之真空電漿，或者於大氣壓或大氣壓附近的壓力下產生之電漿等，可使用能產生使活性帶電粒子、活性自由基以高密度存在之空間的裝置來產生。

國際公開第2016/093293號公報的全部揭示內容係援用於本案。

＜病毒＞ 一般而言，病毒(亦包含疫苗或病毒載體)可粗分為包膜型與非包膜型。包膜係指由源自宿主細胞之脂質或蛋白質，甚而源自病毒之糖蛋白質所構成的膜狀構造，存在具有包膜之病毒與不具有包膜之病毒。又，基於所含基因構造的差異，可粗分為DNA病毒與RNA病毒。 本發明中所稱「病毒」，除非另外合先敘明，否則意指「腺相關病毒(AAV)」，此等之疫苗用途、載體用途亦屬本發明中所稱「病毒」之範圍內。腺相關病毒係分類為小DNA病毒科依賴性細小病毒屬，屬不具有包膜之單股DNA病毒。近年來，腺相關病毒其作為病毒載體之機能經進化及改良，使用於基因治療或再生醫療，週知有各種重組型AAV(rAAV)，且可由試劑供應公司等取得，且此等亦屬本發明中所稱「病毒」之範圍內。又，腺相關病毒，根據其血清型，顯示對特定細胞或組織種類的天然指向性，而作為醫藥品用途備受矚目。

＜器具＞ 本發明之器具，只要是使用於腺相關病毒者則不特別限定，於其使用時，期望為與病毒接觸且可抑制病毒的附著者。形狀亦不限於平板狀、曲面狀、凹凸狀等。且本發明之器具亦可為腺相關病毒載體之製造用資材。

具體例可舉出一般具有多個井孔(凹孔)之微孔孔盤、微細孔盤、微管、螺旋蓋管、吸頭、培養燒瓶、生物元件、分注器注射器、預充式注射器、過濾器、分離用過濾膜、滅菌濾器、不織布及小瓶等；尤其是腺相關病毒載體之製造用資材，除由上述具體例中選出者外，尚可舉出生物反應器、攪拌葉片及製造用配管等。

本發明器具之一樣態可為病毒保存容器。保存容器較佳為在與病毒之接觸面具有前述塗覆膜者。病毒保存容器之形狀，只要是可保存含病毒溶液(含病毒水溶液等通常於室溫下為液體者)的形狀，則不限於瓶狀、管狀等。較佳於容器上部具有可封緊之蓋部等，而能夠密封保存。

本發明之器具的另一樣態亦可為吸頭。吸頭典型上為吸量管吸頭，較佳為在與病毒之接觸面具有前述塗覆膜者。吸頭形狀不特別限定，市面上有配合目的之各種容量或形狀者販售並可取得。

本發明之器具的材質亦不特別限定。可舉出玻璃、含金屬化合物或者含類金屬化合物或樹脂，而基於泛用性觀點，宜使用玻璃或樹脂成形物。含金屬化合物或者含類金屬化合物可舉出例如如基本成分為金屬氧化物，且藉由高溫下之熱處理進行燒結而成之燒結體之陶瓷、矽等半導體、金屬氧化物或者類金屬氧化物(矽氧化物、氧化鋁等)、金屬碳化物或者類金屬碳化物、金屬氮化物或者類金屬氮化物(矽氮化物等)、金屬硼化物或者類金屬硼化物等無機化合物之成形體等無機固體材料、鋁、鎳鈦、不鏽鋼(SUS304、SUS316、SUS316L等)。樹脂可為天然樹脂或者其衍生物，或合成樹脂任一種，天然樹脂或者其衍生物宜使用纖維素、三乙酸纖維素(CTA)、硝基纖維素(NC)、硫酸葡聚醣固定化纖維素等；合成樹脂宜使用聚丙烯腈(PAN)、聚醯亞胺(PI)、聚酯系聚合物合金(PEPA)、聚苯乙烯(PS)、聚碸(PSF)、聚對苯二甲酸乙二酯(PET)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚乙烯醇(PVA)、聚胺基甲酸酯(PU)、乙烯乙烯醇(EVAL)、聚乙烯(PE)、聚酯、聚丙烯(PP)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚醚碸(PES)、聚碳酸酯(PC)、環烯烴聚合物(COP)(例如ZEONOR(註冊商標)、ZEONEX(註冊商標)(日本ZEON(股)製))、聚氯乙烯(PVC)、聚四氟乙烯(PTFE)、超高分子量聚乙烯(UHPE)、聚二甲基矽氧烷(PDMS)、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯樹脂(ABS)或TEFLON(註冊商標)。

＜病毒之穩定化方法＞ 本發明之病毒之穩定化方法係一種包含：對器具的至少一部分賦予膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°的塗覆膜之步驟，與使包含病毒及溶劑的組成物與賦予至前述器具之塗覆膜接觸之步驟，且透過減少藉由塗覆膜而附著於器具之病毒，來達到病毒的穩定化之方法。例如，其意指：前述器具若為容器，將含病毒溶液置入前述容器中並保存一定時間後，溶液中的病毒量距初始量的變化較少(例如距初始量的變化為30%以內)。一定時間係指例如1小時~1年。溫度可為冷凍(例如-100℃~-20℃以下)、冷藏(例如未達-20℃~10℃以下)、室溫(例如未達10℃~35℃)。其意指於保存後，前述溶液中的病毒保持初始病毒量之例如50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、90%以上、95%以上、98%以上、99%以上，較佳為100%。前述組成物中亦可含有界面活性劑；而根據本發明之穩定化方法，前述組成物縱使不含界面活性劑，亦可抑制腺相關病毒附著於容器表面。

此外，穩定化方法中的各用語之意義或較佳樣態係如前述。

從而，本發明又有關於一種用於減低病毒附著於器具之膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°的塗覆膜的使用。各用語之意義或較佳樣態係如前述。

＜病毒檢測方法＞ 一般而言，病毒的檢測方法可粗分為4種。第1種為檢測病毒所具核酸之方法，第2種為檢測病毒所具蛋白質之方法，第3種為利用病毒所具性質之方法，第4種則為檢測病毒粒子本身之方法。

就檢測病毒所具核酸之方法，透過檢測對病毒呈專一性之核酸序列，可進行病毒的鑑定、定量，PCR法、LAMP法、TMA法、NASBA法、液相核酸雜交法、南方墨點雜交法、北方墨點雜交法、in situ 雜交法、微陣列法等屬之。

就檢測病毒所具蛋白質之方法，透過檢測對病毒呈專一性之蛋白質，可進行病毒的鑑定、定量，酵素免疫法、螢光抗體法、免疫層析法、西方墨點法、化學發光免疫測定法、放射免疫測定法等屬之。

就利用病毒所具性質之方法，透過檢測病毒所具獨特性質的表現型(細胞變性效果或紅血球凝聚等)，可進行病毒的定量，TCID50、PFU、HA、LD50等屬之。

就檢測病毒粒子本身之方法，透過檢測數十至數百奈米級病毒的1個粒子或多個粒子，可進行病毒的鑑定、定量，電子顯微鏡觀察(TEM、AFM、低溫EM等)、奈米粒子追蹤解析(NTA(NanoSight、Zeta View等))、奈米孔電流量測(qNano等)、超離心分析法(AUC)、質量光度測定法(Refyen One)等屬之。

＜病毒檢測器具＞ 就前述病毒檢測方法，有時會使用特定的檢測器具(例如病毒檢查套組)，藉由對該等器具中假設病毒可能會附著的部分或器具實施本發明之塗覆，可進一步降低病毒檢測的檢測下限，而提升病毒檢測的性能。 就上述檢測器具，無特別限制，可使用市售品。可對使用於上述檢測器具之萃取容器的檢體附著部分實施本發明之塗覆。

＜用於病毒檢測之專一性蛋白質＞ 若為腺相關病毒時，AAV衣殼蛋白質係適用於作為使用抗體進行檢測時的抗原。

＜病毒檢體採取套組＞ 本發明之病毒檢體採取套組係由屬前述器具之一樣態中，為了進行檢體採取而安裝於吸量管等而使用之吸頭及病毒萃取容器、病毒保存容器之組合所構成。

＜減低病毒檢查的檢測下限之方法＞ 若使用本發明之器具，具體而言使用病毒檢查套組來進行病毒檢查，可抑制附著於前述器具的病毒量，故可檢測存在於檢體中的微量病毒，而能夠減低檢測下限。

從而，本發明又有關於一種用於減低病毒的檢測下限之具有親水性之塗覆膜的使用。各用語之意義係如前述。

＜保持病毒的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法＞ 透過使用本發明之器具，可抑制附著於前述器具的病毒量，同時保持經附著抑制之病毒的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力。從而，本發明之器具亦屬用於保持病毒的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力的器具。透過使用本發明之器具，可保持病毒的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力，而能夠適當保存、研究並評估病毒。此外，本發明中所稱「保持感染力」，係意指維持病毒感染度，感染度可使用本業者週知之方法，以例如顯示50%組織培養細胞感染率的TCID ₅₀(Tissue Culture Infectious Dose 50)為指標來評估。又，「感染細胞之基因表現活性能力」能以本業者週知之方法，根據例如後述試驗例4所記載之方法來評估。

從而，本發明又有關於一種用於保持病毒的感染力之具有親水性之塗覆膜的使用。各用語之意義係如前述。 [實施例]

以下基於實施例，更詳細地說明本發明，惟本發明非限定於此等。

＜合成例1＞ 將甲基丙烯酸酸性膦醯氧基乙酯(製品名稱：Phosmer M，Uni-chemical(股)製，乾固法100℃且1小時之非揮發成分：91.8%，甲基丙烯酸酸性膦醯氧基乙酯(44.2質量%)、磷酸雙[2-(甲基丙烯醯氧基)乙基](28.6質量%)、其他物質(27.2質量%)的混合物)260g投入至乙醇390g中，邊冷卻至35℃以下邊加入膽鹼(48-50%水溶液：東京化成工業(股)製)310g並攪拌至呈均勻。對此混合液添加甲基丙烯醯基膽鹼氯化物80%水溶液(東京化成工業(股)製)220g、甲基丙烯酸丁酯(東京化成工業(股)製)300g，追加添加乙醇260g並攪拌。進而，邊將純水230g中溶有2,2’-偶氮雙(N-(2-羧乙基)-2-甲基丙脒)n-水合物(製品名：VA-057、FUJIFILM Wako Chemicals(股)製)22g的水溶液保持於35℃以下邊加入至上述溶液中，將含有充分攪拌而呈均勻之上述所有物質的混合液導入至連結滴液泵的三頸燒瓶。另一方面，另外將純水650g與乙醇980g添加於附冷卻管之三頸燒瓶並流通氮氣，邊攪拌邊升溫至回流溫度。邊維持此狀態邊將上述混合液，利用連結鐵氟龍管的滴液泵，以1.5小時滴加至純水與乙醇的沸騰液內。滴加後，在維持上述環境2小時的狀態下加熱攪拌。2小時後予以冷卻，得到固體成分約24.20質量%之含共聚物清漆3610g。所得液體之GFC的重量平均分子量為約23,225。

＜調製例1＞ 對上述合成實施例1中所得之含共聚物清漆568g添加1mol/L鹽酸(1N)(關東化學(股)製)157g與純水1697g、乙醇4456g並充分攪拌，調製成塗覆膜形成用組成物。pH為2.6。

＜調製例2＞ 將聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)(Aldrich公司製，製品編號：P3932-25G)1g添加至乙醇水溶液(乙醇91.7重量%)99g，於50℃的水浴中邊攪拌邊予以溶解，調製成塗覆膜形成用組成物。

＜調製例3＞ 將Pluronic(註冊商標)F-127(Aldrich公司製，製品編號：P2443-250G)4g添加至純水96g中，於室溫下攪拌溶解，調製成塗覆膜形成用組成物。

＜實施例1＞ 將調製例1中所得之塗覆膜形成用組成物取1.0mL置入聚丙烯(PP)製CryoTube Vials 1.0mL(Thermo Fisher Scientific公司製，377224)、取1.5mL置入PP製微管中，靜置於25℃下0.5小時。自管件/小瓶內去除塗覆膜形成用組成物後，以25℃進行乾燥3小時。其後，藉由將管件/小瓶內以純水充分洗淨，而得到於其內部表面形成有塗覆膜的PP製管件及小瓶。

＜實施例2＞ 對PP製吸量吸頭epT.I.P.S Reloads 0.5-20μL、2-200μL、50-1000μL(Eppendorf公司製，製品編號：0030073401、0030073428、0030073460)的前端覆上Parafilm並加蓋，以27G之注射針穿孔，分別置入2、200、1000μL之調製例1中所得之塗覆膜形成用組成物，靜置於25℃下1秒。去除塗覆膜形成用組成物後，以25℃進行乾燥3小時。其後，藉由將吸量吸頭以純水充分洗淨，而得到於其內部表面形成有塗覆膜的PP製吸量吸頭。

＜實施例3＞ 於PP製qPCR孔盤(applied biosystems公司製，REF4346906)中以200μL/well置入調製例1中所得之塗覆膜形成用組成物，靜置於25℃下0.5小時。自井孔中去除塗覆膜形成用組成物後，以25℃進行乾燥3小時。其後，藉由將井孔以純水充分洗淨，而得到形成有塗覆膜的PP製qPCR孔盤。

＜實施例4＞ 將調製例1中所得之塗覆膜形成用組成物以2mL置入聚苯乙烯(PS)製Asnol Petri Dish φ90×20mm(AS ONE公司製，製品編號：1-8549-04)中，靜置於25℃下0.5小時。去除塗覆膜形成用組成物後，以25℃進行乾燥3小時。其後，以純水充分洗淨，而得到形成有塗覆膜的PS製基板。

＜實施例5＞ 以與實施例4同樣的條件塗覆調製例2中所得之塗覆膜形成用組成物，而得到形成有塗覆膜的PS製基板。

＜實施例6＞ 以與實施例4同樣的條件塗覆調製例3中所得之塗覆膜形成用組成物，而得到形成有塗覆膜的PS製基板。

＜試驗例1＞ 將腺相關病毒載體rAAV1試樣(不含界面活性劑)，使用實施例2之吸量吸頭與未塗佈塗覆劑之吸量吸頭進行分注等，進行使用針對ITR(反向末端重複序列；Inverted Terminal Repeat)之引子的qPCR分析。比較以塗覆之吸頭調製時的結果與使用非塗覆吸頭時的結果。同樣針對分注時的冷凍小管(實施例1)、測定時的qPCR孔盤(實施例3)，亦分別以實施例1及3之冷凍小管及孔盤與未塗覆之冷凍小管及孔盤比較qPCR結果。其結果，使用塗覆之吸量吸頭時，比起使用未塗覆者時可得到高12.9倍的核酸含量。使用塗覆者時，比起使用未塗覆者時，冷凍小管成為高6.3倍、qPCR孔盤成為高20.7倍的核酸含量。將結果示於圖1。

＜試驗例2＞ 將腺相關病毒載體rAAV1試樣(不含界面活性劑)分注至實施例1之塗覆及未塗覆之冷凍小管，使用實施例2之塗覆及未塗覆之吸量吸頭進行吸量，於實施例3之塗覆及未塗覆之qPCR孔盤內進行qPCR分析3次。引子係使用與試驗例1相同者。比較使用全部塗覆者調製時的結果與使用全未塗覆者而調製時的結果。其結果，使用塗覆之冷凍小管、吸量吸頭、qPCR孔盤時，比起使用未塗覆者時成為高1.7-3.8倍的核酸含量。將結果示於圖2。

＜試驗例3＞ 將腺相關病毒載體rAAV2試樣(含界面活性劑)分注至實施例1之塗覆及未塗覆之冷凍小管，使用實施例2之塗覆及未塗覆之吸量吸頭進行吸量，於實施例3之塗覆及未塗覆之qPCR孔盤內進行qPCR分析。引子係使用與試驗例1相同者。比較使用全部塗覆者調製時的結果與使用全未塗覆者而調製時的結果。其結果，使用塗覆之冷凍小管、吸量吸頭、qPCR孔盤時，比起使用未塗覆者時成為高1.6倍的核酸含量。將結果示於圖3。

＜試驗例4＞ 就塗覆效果，係根據使細胞感染腺相關病毒載體時細胞中之蛋白質的表現效率來測定。將搭載有編碼GFP之基因的AAV1，使用實施例1之塗覆之冷凍小管與實施例2之吸量吸頭，或使用實施例1及2中未經處理之未塗覆之管件與吸量吸頭添加於含HeLaRC32細胞之培養基中進行培養。其結果，源自細胞之GFP的平均螢光強度，使用塗覆之冷凍小管、吸量吸頭時，比起使用未塗覆者時成為高1.8倍的值。將結果示於圖4。

＜試驗例5＞ 實施例1之未處理微管及塗覆之微管，以及下述參考例1~5之各管件的內表面，與實施例4~6之未處理聚苯乙烯基板、及塗覆之各聚苯乙烯基板的親水性係以全自動接觸角計(協和界面化學(股)製，DM-701)評估。 參考例1：PROTEOSAVE SS1.5mL微管(Sumitomo Bakelite(股)製，製品編號：MS-4215M)、 參考例2：1.5mL蛋白質吸附控制取樣管(Sarstedt(股)製，製品編號：72.41152.006)、 參考例3：Protein LoBind Tube1.5mL(Eppendorf(股)製，製品編號：0030108116)、 參考例4：1.5mL Siliconize微管圓底(深江化成(股)製，製品編號：131-615CH)、 參考例5：TORAST(註冊商標)PP Vial(Shimadzu GLC (股)製，製品編號：370-04051-01) 此外，對於接觸角，除在大氣中測定水滴的接觸角外，亦於水中倒立設置各種基板，以進行氣泡之接觸角測定的水中接觸角此兩項進行評估。測定將結果示於表1。

由大氣中的測定結果，與有無塗覆處理時未看出顯著差異。另一方面，由水中的測定結果，就實施例1、實施例4~6、參考例1(以蛋白質低吸附容器系列市售之管件)中，與未處理之情形相比，確認顯著的親水化。 [產業上可利用性]

根據本發明，可提供一種可抑制病毒附著之器具、使用該器具之減低病毒附著之方法。具體而言，可提供一種損失量少之病毒保存容器、可提升病毒檢測靈敏度之病毒檢查套組。可提供一種供穩定病毒，尤為腺相關病毒載體之器具(例如吸頭或保存容器等)、具備該器具之腺相關病毒載體檢查套組、使用該器具之降低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法、腺相關病毒載體之穩定化方法，以及保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法。又，本發明之保存容器亦可發揮在保存一定期間後仍可維持腺相關病毒載體的病毒感染度(病毒的感染能力)之效果。

[圖1]為表示試驗例1中，使用具備實施例1至3中所得之既定塗覆膜的本發明之器具之任一者時，與使用未塗覆器具時，對殘留於不含界面活性劑之rAAV1試樣中的核酸含量進行qPCR分析之結果的圖表。 [圖2]為表示試驗例2中，使用具備實施例1至3中所得之既定塗覆膜的本發明之器具之任一者時，與使用未塗覆器具時，對殘留於不含界面活性劑之rAAV1試樣中的核酸含量進行qPCR分析之結果的圖表。 [圖3]為表示試驗例3中，使用具備實施例1至3中所得之既定塗覆膜的本發明之器具之任一者時，與使用未塗覆器具時，對殘留於不含界面活性劑之rAAV2試樣中的核酸含量進行qPCR分析之結果的圖表。 [圖4]為以HeLaRC32細胞之GFP的平均螢光強度表示試驗例4中，使用具備實施例1至2中所得之既定塗覆膜的本發明之器具之任一者時，與使用未塗覆器具時，使細胞感染AAV時之細胞中之蛋白質的表現效率的圖表。

Claims (14)

1. 一種供穩定腺相關病毒載體之器具，其係於表面的至少一部分具備塗覆膜的供穩定腺相關病毒載體之器具，其中前述塗覆膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°。
2. 如請求項1之器具，其中前述穩定化係抑制腺相關病毒載體的附著。
3. 如請求項1或2之器具，其中前述塗覆膜為包含以下共聚物的塗覆膜，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

   

   [式中， U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。
4. 如請求項1或2之器具，其中前述塗覆膜係包含含有羥基之聚合物或化合物。
5. 如請求項1~4中任一項之器具，其為腺相關病毒載體用吸頭。
6. 如請求項1~4中任一項之器具，其為腺相關病毒載體保存容器。
7. 一種腺相關病毒載體檢查套組，其具備如請求項1~4中任一項之器具。
8. 如請求項1~4中任一項之器具，其為腺相關病毒載體之製造用資材。
9. 一種減低腺相關病毒載體檢查的檢測下限之方法，其係使用如請求項1~4中任一項之器具。
10. 一種腺相關病毒載體之穩定化方法，其包含： (1)對器具的至少一部分賦予膜表面的水中氣泡接觸角為120°~180°的塗覆膜之步驟、 (2)使包含腺相關病毒載體與溶劑的組成物接觸前述塗覆膜之步驟。
11. 如請求項10之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述塗覆膜係包含以下共聚物，該共聚物包含：包含下述式(a)表示之基之重複單元、包含下述式(b)表示之基之重複單元與包含下述式(c)表示之基之重複單元；

    

    [式中， U ^a1、U ^a2、U ^b1、U ^b2及U ^b3分別獨立表示氫原子或碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基； R ^c表示碳原子數4~18之直鏈或者分支烷基、碳原子數3~10之環式烴基、碳原子數6~10之芳基、碳原子數7~14之芳烷基或碳原子數7~14之芳氧烷基(於此，前述芳基部分可經碳原子數1~5之直鏈或者分支烷基取代，該烷基可經鹵素原子取代)； An ^-表示選自由鹵化物離子、無機酸離子、氫氧化物離子及異硫氰酸根離子所成群組中之陰離子]。
12. 如請求項10之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述塗覆膜係包含含有羥基之聚合物或化合物。
13. 如請求項10~12中任一項之腺相關病毒載體之穩定化方法，其中前述組成物不含界面活性劑。
14. 一種保持腺相關病毒載體的感染力及/或感染細胞之基因表現活性能力之方法，其係使用如請求項1~4中任一項之器具。

Images