TW202237090A

TW202237090A - 治療呼吸道疾病之化合物

Info

Publication number: TW202237090A
Application number: TW110146440A
Authority: TW
Inventors: 史蒂芬柯林伍德; 強納森大衛哈葛雷; 都肯亞力山德海; 克利夫麥克卡西; 湯瑪士畢優瑞佳德史秋費德; 愛德華沃克; 勞密溫特
Original assignee: 英商Ｔｍｅｍ16Ａ有限公司
Priority date: 2020-12-11
Filing date: 2021-12-10
Publication date: 2022-10-01
Also published as: AR124316A1; WO2022123314A1; JP2023552638A; EP4259607A1; US20240132467A1; CN116745267A

Abstract

本發明提供通式 (I) 化合物：

其中 R ¹、R ²、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 係如本文中所定義，該通式 (I) 化合物可用於治療呼吸道疾病及受 TMEM16A 調控之其他疾病及病症。

Description

治療呼吸道疾病之化合物

本發明涉及化合物，其包括某些新穎化合物，該等化合物具有作為鈣活化氯通道 (CaCC) TMEM16A 之正調控劑的活性。本發明亦涉及製備化合物及包含該等化合物的醫藥組成物的方法，以及這些化合物在治療受 TMEM16A 調控之疾病及病症、特別是呼吸道疾病及病症中的用途。

人類每天可吸入多達 12,000 L 空氣，與之伴隨的是空氣傳播的病原體 (諸如細菌、病毒及真菌孢子) 可能進入氣道。為抵禦這些空氣傳播的病原體，肺演化出先天防禦機制，以最大程度降低氣道感染及移生的可能性。一種此類機制為黏液清除系統，其中分泌的黏液藉由纖毛的協調跳動以及咳嗽清除被向上推動並排出氣道。這一持續的肺部「清潔」不斷清除吸入的顆粒及微生物，從而降低感染風險。

近年來，已有研究清楚地表明，黏液凝膠之水合對於清除黏液至關重要 (Boucher 2007；Matsui 等人，1998)。在正常、健康的氣道中，黏液凝膠通常為 97% 水及 3% w/v 固體，在該等條件下，黏液藉由黏膜纖毛作用清除。氣道黏膜之水合受許多離子通道及轉運蛋白之協同活動的調節。經由囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白 (CFTR) 及鈣活化氯離子電導 (CaCC；TMEM16A) 介導的陰離子 (Cl ^-/ HCO ₃ ^-) 分泌的平衡以及透過上皮 Na ⁺通道 (ENaC) 之 Na ⁺吸收決定了氣道黏膜的水合狀態。當離子跨上皮運輸時，水必然跟隨滲透，因此液體被分泌或吸收。

在呼吸道疾病諸如慢性支氣管炎及囊腫纖維化中，隨著水合減少及黏液清除率降低，黏液凝膠的固體百分比增加 (Boucher, 2007)。在囊腫纖維化中，CFTR 中之功能喪失突變減弱了氣道分泌液體的能力，固體百分比可增加至 15%，據信其導致小氣道堵塞及黏液清除失敗。增加氣道黏液水合的策略包括刺激陰離子並由此刺激液體分泌或抑制 Na ⁺吸收。為此，刺激 TMEM16A 通道之活性將增加陰離子分泌，從而增加氣道黏膜中的積液，使黏液水合並增強黏液清除機制。

TMEM16A 亦稱為 Anoctamin-1 (Ano1)，是鈣活化氯離子通道的分子標識 (Caputo 等人，2008；Yang 等人，2008)。TMEM16A 通道響應於細胞內鈣離子含量的升高而打開，並允許氯離子、碳酸氫根及其他陰離子跨細胞膜雙向流動。已提出功能性 TMEM16A 通道調控跨上皮離子轉運、胃腸蠕動、傷害感受及細胞遷移/增殖 (Pedemonte 及 Galietta，2014)。

TMEM16A 通道由不同器官 (包括肺、肝、腎、胰腺及唾液腺) 之上皮細胞表現。在氣道上皮中，TMEM16A 在產生黏液的杯狀細胞、纖毛細胞及黏膜下腺中以高含量表現。從生理學上講，TMEM16A 藉由動員細胞內鈣的刺激活化，特別是嘌呤能致效劑 (ATP, UTP)，該等致效劑由呼吸上皮響應於呼吸及其他機械刺激諸如咳嗽所引起之周期性剪應力而釋放。除增加陰離子分泌以引起氣道水合增強以外，TMEM16A 之活化在碳酸氫鹽分泌中發揮重要作用。據報導，碳酸氫鹽分泌為黏液特性的重要調節劑，並在控制氣道腔 pH 並由此控制天然抗菌劑諸如防禦素之活性中發揮重要作用 (Pezzulo 等人，2012)。

經由細胞內鈣之升高間接調控 TMEM16A 已在臨床上經過探索，例如地紐福索 (denufosol) (Kunzelmann 及 Mall，2003)。儘管在小規模患者群組中觀察到令人鼓舞的初步結果，但該方法在大規模患者群組中並未提供臨床獲益 (Accurso 等人2011；Kellerman 等人2008)。這種臨床效應之缺乏歸因於地紐福索在上皮表面的半衰期短及受體/途徑脫敏導致陰離子分泌僅發生短暫升高，以及升高細胞內鈣具有不需要的效果諸如增加杯狀細胞所釋放的黏液 (Moss, 2013)。預計直接作用於 TMEM16A 以在鈣升高含量較低的情況下增強通道開啟的化合物可持久增強患者的陰離子分泌及黏膜纖毛清除，並改善先天防禦。由於 TMEM16A 活性與 CFTR 功能無關，因此 TMEM16A 正調節劑有可能為所有 CF 患者以及特徵在於黏膜充血的非 CF 呼吸道疾病 (包括慢性支氣管炎及重度氣喘) 提供臨床獲益。

TMEM16A 調控已被認為是一種治療由薛格連氏症候群中的唾液腺功能障礙及放射治療所造成之口乾 (口乾症)、乾眼症、膽汁鬱積和胃腸動力障礙的療法。

WO 2019/145726 涉及化合物，該等化合物為 TMEM16A 的正調節劑並因此用於治療其中 TMEM16A 之調控發揮作用的疾病及病症，特別是呼吸道疾病及病症。本發明人開發出作為 TMEM16A 的正調節劑的另外的化合物。

在本發明的第一態樣中，提供一種通式 (I) 化合物，該化合物包含所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：

(I) 其中： R ¹為 i. [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹； n 為 1 或 2；各 R ⁷獨立地為 H、苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁸為 H、視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁹為 C _2-4烷基；或 ii. CH(R ¹¹)(R ¹²)； R ¹¹為 H、OH、CH ₃、CH ₂OH 或與在如以下所定義的 R ¹²上之取代基結合的基團； R ¹²係選自視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的環己基；以及苯基或 5 或 6 員雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經一個或多個選自以下之取代基取代：OH、甲氧基、甲基、氟、氯及與 R ¹¹和其所連接的原子一起形成與該苯基或雜芳基基團 R ¹²稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基；或 iii. 視情況經 OR ¹⁵取代的 C _2-6烷基； R ¹⁵為甲基或乙基；或 iv. 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代； Z 係選自 -NH-C(O)- 及 -C(O)-NH-； Y 係選自鍵、-CH ₂- 及 -CH(CH ₃)-；或 Y 與如以下所定義的 R ²結合；以及 R ²係選自： 3 至 10 員碳環系統或 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基環系統，其中該芳基、雜芳基或碳環系統視情況經一個或多個選自下列之取代基取代：氟；氯；CN；硝基；OH；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 C _1-6烷基；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 O(C _1-6烷基)；以及視情況經一個或多個選自鹵基及 OH 之取代基取代的 CH ₂NH-C(O)O-C _1-6烷基；或 Y 及 R ²一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團或基團 CH ₂-C(R ¹⁷)(R ¹⁸)-CH ₂-N(R ¹⁹)R ²⁰；其中 R ¹⁷、R ¹⁸及 R ¹⁹中之每一個獨立地為 H 或 C _1-4烷基；以及 R ²⁰為 C _1-4烷基或 C _1-4鹵代烷基； R ³、R ⁴及 R ⁵各自獨立地為 H 或 F；條件是： A. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹¹為 H 或甲基且 R ¹²為未經取代或經 1 或 2 個取代基取代的苯基，其中該等取代基係選自鹵基及甲氧基： i. R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1 或 2 個選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基及 5 員雜芳基環之取代基取代；以及 B. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹²為苯基且 R ¹¹與在 R ¹²上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ¹²稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： i. R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1、2 或 3 個取代基取代，其中該等取代基係選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4鹵代烷基及 C _1-4烷氧基；以及 ii. Y 及 R ²不會結合形成 C _3-10烷基； C. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹¹為 H 且 R ¹²為環己基： R ²不為視情況經 1、2 或 3 個取代基取代之苯基，其中該等取代基係選自鹵基、甲基、甲氧基；未經取代的 5 至 8 員雜芳基。

視情況，該通式 (I) 化合物係選自： N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-環己基-乙醯胺 (化合物 1.1)； 2-苄基-N-(環己基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2)； N-(1-金剛烷基甲基)-2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.1)； 2-苄基-N-[(1-甲基環戊基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.2)； 2-苄基-N-[(1R)-1-環己基乙基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.3)； N-(環庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3)； N-(環庚基甲基)-2-[(1-羥基環己基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3.1)； N-(環庚基甲基)-2-(2-羥基-1-苯基-乙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3.2)； N-(環己基甲基)-2-[(3-羥基苯基)甲基]-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.4)； 2-(1-金剛烷基)-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5)； N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]-2-(1-甲基環己基)乙醯胺 (化合物 1.5.1)； 2-環庚基-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5.2)； 2-環己基-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5.3)； 2-(1-金剛烷基)-N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)乙醯胺 (化合物 1.5.4)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羥基-2-金剛烷基)乙醯胺 (化合物 1.6)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1S)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.1)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1R)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.2)； N-[[5-[[2-(1-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 1.7.3)； 2-(1-金剛烷基)-N-[2-[(2-甲氧基-3-吡啶基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.8)； 2- 三級 -丁基-N-[(5-氯-2-羥基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.9)； N-[[5-(環庚基甲基胺甲醯基)-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 1.10)； 2-苄基-N-[(1-甲基環己基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.10.1)； 2-苄基-N-(環辛基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.10.2)； N-[[1-[2-[(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)胺基]-2-側氧-乙基]環己基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.1)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-(4,4-二氟環己基)乙醯胺 (化合物 2.1.1)； N-[1-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-2-甲氧基-乙基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2)； N-[(R)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.1)； N-[(S)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.2)； N-[[6-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-乙基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.3)； N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-(2-甲氧基乙基)胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-(2-甲氧基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.2.5)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-(3-甲氧基丙基)-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.2.6)； N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.3)； N-(環庚基甲基)-2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 2.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[羥基(苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.5)； 2-環己基-N-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)乙醯胺 (化合物 3.1)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)金剛烷-1-甲醯胺 (化合物 3.2)； N-(環庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3)； N-(環庚基甲基)-6-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3.1)； N-(環庚基甲基)-4-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3.2)； N-[2-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]乙基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 3.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 3.4.1)； 2-苄基-N-(2,2-二甲基丙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.5)； 2-苄基-N-(1,1,2,2-四甲基丙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.5.1)； N-(環庚基甲基)-2-[(5-氟-2-甲氧基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺； N-(環庚基甲基)-2-[(3-氟-2-甲氧基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺；及其鏡像異構物、鹽及溶劑合物。

通式 (I) 化合物為 TMEM16A 的調控劑，因此可用於治療或預防受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症。

在整個說明書及隨後的申請專利範圍中，除非上下文另外要求，否則詞語「包含」及變體，諸如「含有」和「包括」，將被理解為表示包括陳述的整體、步驟、整體之群組或步驟之群組，但不排除任何其他整體、步驟、整體之群組或步驟之群組。

在本說明書中，提及的「醫藥用途」是指用於向人或動物 (特別是人或哺乳動物，例如家養或家畜哺乳動物) 投予以治療或預防疾病或醫學病症的用途。術語「醫藥組成物」是指適合醫藥用途的組成物，且「醫藥上可接受之」是指適合用於醫藥組成物中的藥劑。其他類似之術語應作相應解釋。

在本說明書中，術語「C _1-6」烷基是指具有 1 至 6 個碳原子的直鏈或支鏈完全飽和的烴基。該術語涵蓋甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基及三級丁基。其他烷基基團，例如 C _1-10烷基，如上文所定義但含有不同數量的碳原子。

除非另有說明，否則術語「碳環」及「碳環基」是指含有 3 至 10 個環碳原子及視情況存在的一個或多個雙鍵的非芳族烴環系統。碳環基團可為單環，或者可含有兩個或三個稠合或橋聯的環，其中橋中的碳原子包括在環碳原子數中。實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環戊烯基及環己烯基以及橋聯繫統諸如雙環[1.1.1]戊基、雙環-[2.2.1]庚基、雙環-[2.2.2]辛基及金剛烷基。

在本說明書的上下文中，除非另有說明，否則術語「雜環」及「雜環基」是指含有 3 至 10 個環原子的非芳族環系統，其包括至少一個選自 N、O 及 S 的雜原子。雜環基團可為單環，或者可含有兩個或三個稠合或橋聯的環，其中橋原子包括在環原子數中。實例包括四氫呋喃基、四氫哌喃基、吡咯啶基、哌啶基、𠰌啉基、哌𠯤基及硫代𠰌啉基，以及稠合系統諸如環丙基稠合之吡咯啶。提及的含氧雜環包括其中唯一雜原子為氧的兩個環，例如四氫呋喃和四氫哌喃，以及其中存在選自 N 及 S 的其他雜原子的環，或例如𠰌啉。

在本說明書的上下文中，除非另有說明，否則術語「芳基」和「芳族」是指具有芳族特徵的環系統，其具有 5 至 14 個環碳原子，且含有最多三個環。在芳基基團含有一個以上的環的情況下，並非所有環皆必須為全芳環。芳族部分的實例為苯、萘、茀、四氫萘、茚烷及茚。

在本說明書的上下文中，除非另有說明，否則術語「雜芳基」和「雜芳族」是指具有芳族特徵的環系統，其具有 5 至 14 個環原子，該等環原子中的至少一個為選自 N、O 及 S 的雜原子，且含有最多三個環。在雜芳基基團含有一個以上的環的情況下，並非所有環皆必須為芳環。雜芳基基團的實例包括吡啶、嘧啶、吲哚、吲唑、噻吩、苯并噻吩、苯并㗁唑、苯并呋喃、二氫苯并呋喃、四氫苯并呋喃、苯并咪唑、苯并咪唑啉、喹啉及吲哚烯。

術語「鹵素」是指氟、氯、溴或碘，術語「鹵基」是指氟、氯、溴或碘基團。類似地，「鹵化物」是指氟化物、氯化物、溴化物或碘化物。

如本文所使用之術語「C _1-6鹵代烷基」是指其中一個或多個氫原子經鹵基取代的如上所定義之 C _1-6烷基基團。任意數量的氫原子皆可被替代，最多經全鹵取代。實例包括三氟甲基、氯乙基及 1,1-二氟乙基。氟烷基為其中鹵基為氟的鹵代烷基基團。

術語「同位素變異物」是指同位素標記的化合物，該等化合物與式 (I) 所示之化合物相同，但一個或多個原子經原子質量或質量數不同於自然界中最常見的原子質量或質量數的原子取代，或其中具有在自然界中較不常見的原子質量或質量數的原子的比例有所增加 (後一種概念稱為「同位素富集」)。可併入本發明之化合物中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、氟、碘及氯的同位素，例如 2H (氘)、3H、11C、13C、14C、18F、123I 或 125I (例如 3H、11C、14C、18F、123I 或 125I)，其可為天然存在的或非天然存在的同位素。

通式 (I) 化合物亦可呈互變異構形式：

在本發明的一些化合物中，R ¹為 [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹，其中 n、R ⁷、R ⁸及 R ⁹係如上文針對通式 (I) 所定義。

在一些此類化合物中，n 為 1；在其他此類化合物中，n 為 2。

更適當地，在此類化合物中，R ⁷係選自 H、苯基、甲基、CH ₂OH 及 CH ₂OCH ₃，再更適當地，選自 H、甲基、苯基及 CH ₂OCH ₃。

R ⁸係更適當地選自 H、視情況經甲氧基取代的甲基及視情況經甲氧基取代的乙基。

R ⁹係更適當地選自 C _3-4烷基，尤其是正丁基、異丁基及三級丁基，特別是三級丁基。

在一些化合物中，其中 R ¹為 [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹，其中 n 為 1，R ⁷及 R ⁸不會兩者為 H。例如，在一些情況下，R ⁷為 H，且 R ⁸為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基，尤其是甲基或乙基。在其他情況下，R ⁷為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基，尤其是苯基、甲基或 CH ₂OCH ₃，且 R ⁸為 H。在另一些其他情況下，R ⁷為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基，且 R ⁸為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基；例如，R ⁷為 CH ₂OCH ₃或苯基，且 R ⁸為甲基或乙基。

在一些通式 (I) 化合物中，R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)，其中 R ¹¹及 R ¹²係如上文針對通式 (I) 所定義。

在一些合適的此類化合物中，R ¹²為視情況經 OH 取代的環己基。

在其他此類化合物中，R ¹²為苯基、吡啶基或㗁唑基，其中任一者視情況經一個或多個選自 OH、甲氧基、氟及氯之取代基取代。

在一些情況下，例如，R ¹²為視情況在位置 2 處經 OH 或甲氧基取代並視情況具有一個或兩個另外的取代基 (較佳的是一個選自氟及氯的另外的取代基) 的苯基。該等 R ¹²基團的實例包括苯基 2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-2-甲氧基苯基、4-氟-2-甲氧基苯基、5-氟-2-甲氧基苯基及 5-氯-2-甲氧基苯基。

在其他情況下，R ¹²為視情況經 OH 或甲氧基取代的吡啶基基團 (例如 2-甲氧基-吡啶-3-基) 或視情況經一個或兩個甲基基團取代的㗁唑基基團 (尤其是二甲基㗁唑基基團)。

可替代地，R ¹²為具有取代基的苯基，該取代基與 R ¹¹和其所連接的原子一起形成與苯基基團 R ¹²稠合的 5 或 6 員含氧雜環。苯基基團 R ¹²亦可含有如上所述之其他取代基。適當地，與 R ¹¹結合之 R ¹²取代基係位在毗鄰該苯基基團 R ¹²連結至 CH(R ¹¹) 所處位置之苯基基團 R ¹²上的位置，且經結合的取代基為其中 CH ₂部分視情況以 -O- 替代之 2 或 3 員烴鏈。例如，R ¹¹與 R ¹²上的取代基可結合以形成基團 -O-CH ₂-、-CH ₂-O-、-O-CH ₂-CH ₂-、-CH ₂-CH ₂-O-。此類結合之 R ¹¹及 R ¹²基團的一個實例為 2,3-二氫苯并呋喃-3-基。

在一些通式 (I) 化合物中，R ¹為視情況經 OR ¹⁵取代的 C _2-6烷基，其中 R ¹⁵如通式 (I) 中所定義。在一些更合適的此類化合物中，R ¹為未經取代的 C _3-6烷基，尤其是支鏈未經取代的 C _3-6烷基，且更特別是支鏈未經取代的 C _4-6烷基基團。在其他更合適的此類化合物中，R ¹為經 OR ¹⁵(尤其是甲氧基) 取代的甲基或乙基。

在另一些其他通式 (I) 化合物中，R ¹為 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代。更適當地，R ¹為苯基或 5 或 6 員雜芳基基團，適當地為含氮或含氧雜芳基基團。苯基或雜芳基基團可視情況經取代 (如上文所定義)，但是更適當地係未經取代。未經取代的苯基為此類 R ¹基團的一個實例。

在一些通式 (I) 化合物中，R ²為視情況經取代的 3 至 10 員碳環系統，如上文所定義。

在一些此類化合物中，R ²為橋聯的碳環系統，諸如雙環[1.1.1]戊烷基, 雙環[2.1.1]己烷基、雙環-[2.2.1]庚烷基、雙環-[2.2.2]辛烷基或金剛烷基，尤其是雙環-[2.2.1]庚烷基或金剛烷基。其中 R ²為金剛烷基的化合物為特別合適的。在一些情況下，當 R ²為橋聯的碳環系統，其未經取代。可替代地，橋聯的碳環系統 R ²可經 (例如) OH 取代。該等 R ²基團的一個實例為經 OH 取代的金剛烷基。

在其他此類化合物中，R ²為碳環系統，特別是選自環戊基、環己基、環庚基及環辛基的 5 至 8 員碳環系統，其中任一者可未經取代或經取代，如上文所定義。該等 R ²基團的更合適的取代基包括 OH、氟、C _1-6烷基、O(C _1-6烷基) 及 NH-C(O)O-C _1-6烷基，尤其是 OH、C _1-4烷基、O(C _1-4烷基) 及 NH-C(O)O-C _1-4烷基，且再更適當地為 C _1-4烷基 (尤其是甲基) 氟及 NH-C(O)O-C _1-4烷基。

在其他更合適的此類化合物中，R ²為未經取代的環戊基、環己基或環庚基環，尤其是未經取代的環己基或環庚基。

在其他通式 (I) 化合物中，R ²為 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基環系統，其視情況經取代，如上文所定義。更適當地，在該情況下，R ²為苯基或經一個或多個選自以下之取代基取代的 5 或 6 員雜芳基環：氟；氯；OH；視情況經一個或多個選自 OH 及鹵基之取代基取代的 C _1-6烷基；O(C _1-6烷基)；及 O(C _1-6鹵代烷基)；再更適當地為氟、氯、OH、C _1-4烷基、經 OH 取代的 C _1-4烷基及 O(C _1-4烷基)；且尤其為氟、氯、OH、C _1-4烷基、經 OH 及甲氧基取代的 C _1-4烷基。特定而言，R ²為在位置 2 處經 OH 取代的苯基，且視情況經選自氟及氯的另外的取代基取代。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 與 R ²一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團，更適當地，形成 C _5-8烷基基團。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 與 R ²一起形成基團 CH ₂-C(R ¹⁷)(R ¹⁸)-CH ₂-N(R ¹⁹)R ²⁰；其中 R ¹⁷、R ¹⁸、R ¹⁹及 R ²⁰中之每一個如上文所定義。

更適當地，R ¹⁷、R ¹⁸及 R ¹⁹中之每一個獨立地為 H 或甲基，且 R ²⁰為 C _1-4鹵代烷基。再更適當地，R ¹⁷及 R ¹⁸中之每一個獨立地為 H 或甲基，R ¹⁹為 H，且 R ²⁰為 C _1-4鹵代烷基。

在一些特別較佳的通式 (I) 化合物中，R ²為未經取代的環己基，且 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)，其中 R ¹¹及 R ¹²如上文所定義。更特定而言，R ¹¹如上文所定義，且 R ¹²為視情況經 OH 或甲氧基取代的苯基。其中 R ²為未經取代的環己基且 R ¹為未經取代的苄基的化合物為特別合適的，特別是 N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-環己基-乙醯胺；2-苄基-N-(環己基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺以及其鹽和溶劑合物。

在一些通式 (I) 化合物中，R ³、R ⁴及 R ⁵皆為 H。

在一些通式 (I) 化合物中，R ³、R ⁴及 R ⁵中之一者為鹵基，且其他基團為 H。在某些化合物中，R ³為鹵基，且 R ⁴及 R ⁵為 H。在某些化合物中，R ⁴為鹵基且 R ³及 R ⁵為 H。在某些化合物中，R ⁵為鹵基且 R ³及 R ⁴為 H。

在其他通式 (I) 化合物中，R ³、R ⁴及 R ⁵中的一個或多個為 F。例如： R ³為 F 且 R ⁴及 R ⁵為 H；或 R ⁴為 F 且 R ³及 R ⁵為 H；或 R ⁵為 F 且 R ³及 R ⁴為 H。

在一些通式 (I) 化合物中，Z 為 -NH-C(O)-。

在一些通式 (I) 化合物中，Z 為 -C(O)NH-。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 為鍵。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 為 -CH ₂-。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 為 -CH(CH ₃)-。

在一個實施例中，式 (I) 化合物為式 (IA) 化合物，其包括所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：

(IA) 其中 R ²、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 係如針對通式 (I) 所定義，以及： R ^1a為 i. [CH(R ^7a)] _n-N(R ^8a)-C(O)OR ^9a； n 為 1 或 2；各 R ^7a獨立地為 H、苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基； R ^8a為 H、視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基；條件是當 n 為 1，R ^7a及 R ^8a不會兩者為 H； R ^9a為 C _2-4烷基；或 ii. CH(R ^11a)(R ^12a)； R ^11a為 H、OH、CH ₃、CH ₂OH 或與在如以下所定義的 R ^12a上之取代基結合的基團； R ^12a係選自苯基或 5 或 6 員雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經一個或多個選自以下之取代基取代：OH、甲氧基、甲基、氟、氯及與 R ^11a和其所連接的原子一起形成與該苯基或雜芳基基團 R ^12a稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基；條件是當 R ^12a為視情況經一個或多個選自 OH、甲氧基、甲基、氟或氯之取代基取代的苯基或 6 員雜芳基，R ^11a不為 H；或 iii. 經 OR ^15a取代之甲基、乙基或正丙基； R ^15a為甲基或乙基；或 iv. 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代；條件是： A. 當 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)；其中 R ^11a為 H 或甲基且 R ^12a為未經取代或經 1 或 2 個取代基取代的苯基，其中該等取代基係選自鹵基及甲氧基： i. R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1 或 2 個選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基及 5 員雜芳基環之取代基取代；以及 B. 當 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)；其中 R ^12a為苯基且 R ^11a與在 R ^12a上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ^12a稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： i. R ^2a不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1、2 或 3 個取代基取代，其中該等取代基係選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4鹵代烷基及 C _1-4烷氧基；以及 ii. Y 及 R ²不會結合形成 C _3-10烷基。

在一些通式 (IA) 化合物中，R ^1a為 [CH(R ^7a)] _n-N(R ^8a)-C(O)OR ^9a，其中 n、R ^7a、R ^8a及 R ^9a係如上文針對通式 (IA) 所定義。

更適當地，在該等化合物中，R ^7a係選自 H、苯基、甲基、CH ₂OH 及 CH ₂OCH ₃，再更適當地，選自 H、甲基、苯基及 CH ₂OCH ₃。

R ^8a係更適當地選自 H、視情況經甲氧基取代的甲基及視情況經甲氧基取代的乙基。

R ^9a係更適當地選自 C _3-4烷基，尤其是正丁基、異丁基及三級丁基，特別是三級丁基。

在式 (IA) 化合物中，其中 R ¹為 [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹，且 n 為 1，R ^7a及 R ^8a不會兩者為 H。在一些情況下，R ^7a為 H，且 R ^8a為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基，尤其是甲基或乙基。在其他情況下，R ^7a為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基，尤其是苯基、甲基或 CH ₂OCH ₃，且 R ^8a為 H。在另一些其他情況下，R ^7a為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基，且 R ^8a為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基；例如，R ^7a為 CH ₂OCH ₃或苯基，且 R ^8a為甲基或乙基。

在一些通式 (IA) 化合物中，R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)，其中 R ^11a及 R ^12a係如上文針對通式 (IA) 所定義。

在一些該等化合物中，R ^12a為苯基或 6 員雜芳基基團諸如吡啶基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自 OH、甲氧基、氟及氯之取代基取代；且 R ^11a為 OH、CH ₃或 CH ₃OH。

例如，R ^12a為視情況在位置 2 處經 OH 或甲氧基取代並視情況具有一個或兩個另外的取代基 (較佳的是一個選自氟及氯的另外的取代基) 的苯基。該等 R ^12a基團的實例包括苯基 2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-2-甲氧基苯基、4-氟-2-甲氧基苯基、5-氟-2-甲氧基苯基及 5-氯-2-甲氧基苯基。

在其他該等化合物中，R ^12a為視情況經 OH 或甲氧基取代的吡啶基基團，例如 2-甲氧基-吡啶-3-基。

在其他通式 (IA) 化合物中，其中 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)，R ^12a為視情況經一個或兩個甲基基團取代的 5 員雜芳基基團諸如㗁唑基，尤其是二甲基㗁唑基基團。在該情況下，R ^11a可為 H、OH、CH ₃或 CH ₃OH。

在另一些其他通式 (IA) 化合物中，其中 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)，R ^12a為具有與 R ^11a和其所連接的原子一起形成與該苯基基團 R ^12a稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基之苯基。苯基基團 R ^12a亦可含有如上所述之其他取代基。適當地，與 R ^11a結合之 R ^12a取代基係位在毗鄰該苯基基團 R ^12a連結至 CH(R ^11a) 所處位置之苯基基團 R ^12a上的位置，且經結合的取代基為其中 CH ₂部分視情況以 -O- 替代之 2 或 3 員烴鏈。例如，R ^11a與 R ^12a上的取代基可結合以形成基團 -O-CH ₂-、-CH ₂-O-、-O-CH ₂-CH ₂-、-CH ₂-CH ₂-O-。此類結合之 R ¹¹及 R ¹²基團的一個實例為 2,3-二氫苯并呋喃-3-基。

在一些通式 (IA) 化合物中，R ^1a為甲基、乙基或正丙基，尤其是經 OR ¹⁵取代 (尤其是經甲氧基取代) 的乙基或正丙基。

在另一些其他通式 (IA) 化合物中，R ^1a為 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代。更適當地，R ^1a為苯基或 5 或 6 員雜芳基基團，適當地為含氮或含氧雜芳基基團。苯基或雜芳基基團可視情況經取代 (如上文所定義)，但是更適當地係未經取代。未經取代的苯基為此類 R ^1a基團的一個實例。

在通式 (IA) 化合物中，R ²、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 的更合適的值如上文針對通式 (I) 化合物所定義。

在另一個實施例中，通式 (I) 化合物為通式 (IB) 化合物，其包括所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：

(IB) 其中 R ¹、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 係如針對通式 (I) 所定義，以及： R ^2b係選自： i. 經一個或多個選自以下之取代基取代的 3 至 10 員碳環系統：氟；氯；CN；硝基；OH；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 C _1-6烷基；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 O(C _1-6烷基)；以及視情況經一個或多個選自鹵基及 OH 之取代基取代的 CH ₂NH-C(O)O-C _1-6烷基；或 Y 及 R ^2b一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團或基團 CH ₂-C(R ^17b)(R ^18b)-CH ₂-N(R ^19b)R ^20b；其中 R ^17b、R ^18b及 R ^19b中之每一個獨立地為 H 或 C _1-4烷基；以及 R ^20b為 C _1-4烷基或 C _1-4鹵代烷基；條件是：當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹²為苯基且 R ¹¹與在 R ¹²上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ¹²稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： Y 及 R ^2b不會結合形成 C _3-8烷基。

在一些通式 (IB) 化合物中，R ^2b為經取代的 3 至 10 員碳環系統，如上文所定義。

在一些此類化合物中，R ^2b為橋聯的碳環系統，諸如雙環[1.1.1]戊烷基、雙環[2.1.1]己烷基、雙環-[2.2.1]庚烷基、雙環-[2.2.2]辛烷基或金剛烷基，尤其是經取代的雙環-[2.2.1]庚烷基或金剛烷基，如上文所定義。其中 R ²為經取代的金剛烷基的化合物為特別合適的，尤其是經 OH 取代的金剛烷基。

在其他通式 (IB) 化合物中，R ^2b為碳環系統，特別是選自環戊基、環己基、環庚基及環辛基的 5 至 8 員碳環系統，其中任一者經取代，如上文所定義。該等 R ²基團的更合適的取代基包括 OH、氟、C _1-6烷基、O(C _1-6烷基) 及 NH-C(O)O-C _1-6烷基，尤其是 OH、C _1-4烷基、O(C _1-4烷基) 及 NH-C(O)O-C _1-4烷基，且再更適當地為 C _1-4烷基 (尤其是甲基) 氟及 NH-C(O)O-C _1-4烷基。

在一些通式 (IB) 化合物中，Y 與 R ^2b一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團，更適當地，形成 C _5-8烷基基團。

在一些通式 (I) 化合物中，Y 與 R ^2b一起形成基團 CH ₂-C(R ^17b)(R ^18b)-CH ₂-N(R ^19b)R ^20b；其中 R ^17b、R ^18b、R ^19b及 R ^20b中之每一個如上文所定義。

更適當地，R ^17b、R ^18b及 R ^19b中之每一個獨立地為 H 或甲基且 R ^20b為 C _1-4鹵代烷基。再更適當地，R ^17b及 R ^18b中之每一個獨立地為 H 或甲基，R ^19b為 H，且 R ^20b為 C _1-4鹵代烷基。

在以下討論中，提及的通式 (I) 化合物包括通式 (IA) 及 (IB) 化合物。

其中 Z 為 -NH-C(O)- 的通式 (I) 化合物可藉由以下方法製備：使通式 (II) 化合物：

(II) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義；與通式 (III) 化合物反應：

(III) 其中 Y 及 R ²係如針對通式 (I) 所定義且 R ¹¹為 OH 或鹵素，特別是 Cl。

當 R ¹¹為鹵素，反應可在有機溶劑中並在鹼諸如二異丙基乙胺存在下進行。

當 R ¹¹為 OH，反應可在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。

合適的偶合劑包括已知的肽偶合劑，諸如 O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鏻 (HBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽 (TBTU)、O-(7-偶氮苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鏻 (HATU)、O-(7-偶氮苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽 (TATU)、(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲胺基)鏻六氟磷酸鹽 (BOP)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶鏻六氟磷酸鹽 (PyBOP) 碳二亞胺諸如 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺 (EDCI) 及三唑諸如 1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑 (HOAt) 或羥基苯并三唑 (HOBt)。適當地，反應在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。

通式 (III) 化合物可商購獲得或可藉由已知方法來製備。一些通式 (II) 化合物亦如此。但是，當通式 (II) 化合物非商業上可獲得時，它們可藉由還原通式 (IV) 化合物來製備：

(IV) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義。

還原可藉由在鈀催化劑上氫化來進行。適當地，此類氫化反應將在醇溶劑 (例如乙醇) 中進行。

可替代地，還原可使用金屬諸如鋅及酸諸如乙酸進行。

如果通式 (III) 的 R ¹含有 OH 基團，其可在反應過程中受到保護，例如作為苄氧基基團。保護基可在還原過程中去除，特別是當使用氫化時。

通式 (IV) 化合物可藉由以下方法製備：使通式 (V) 化合物：

(V) 其中 R ¹係如針對通式 (I) 所定義；與通式 (VI) 化合物：

(VI) 其中 R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義。

該反應包括兩個步驟。適當地，第一步在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。第二步為環化步驟，其中將第一步的產物在酸性條件下加熱，適當地在乙酸中於約 50 至 100°C 的溫度下加熱。

通式 (V) 及 (VI) 化合物可商購獲得或可使用已知方法來製備。

一種合成其中Z 為 -NH-C(O)- 的通式 (I) 化合物的替代方法是使如上所定義之通式 (V) 化合物與通式 (VII) 化合物反應

(VII) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如上文針對通式 (I) 所定義。

如通式 (V) 及 (VI) 化合物之間的反應一樣，該反應為兩步法。第一步在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。第二步為環化步驟，並藉由將第一步的產物與酸諸如乙酸在約 50 至 100°C 的溫度下加熱來進行。

通式 (VII) 化合物可藉由還原通式 (VIII) 化合物來製備：

(VIII) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如上文針對通式 (I) 所定義。

該還原可為催化氫化，例如在醇溶劑諸如乙醇中使用鈀催化劑進行。

通式 (VIII) 化合物可藉由使如上所定義之通式 (III) 化合物與通式 (IX) 化合物反應來製備：

(IX) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如上文針對通式 (I) 所定義。

適當地，該反應在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。

通式 (IX) 化合物可商購獲得或可藉由已知方法來製備。

其中 Z 為 -C(O)-NH- 的通式 (I) 化合物可藉由以下方法製備：使通式 (XII) 化合物：

(XII) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義；與通式 (XIII) 化合物：

(XIII) 其中 R ²及 Y 係如針對通式 (I) 所定義。

適當地，該反應在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如 4-二甲基胺基吡啶 (DMAP) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物之反應所述，其中 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺 (EDCI) 為特別合適的。

通式 (XIII) 化合物可商購獲得或可藉由已知方法來製備。一些通式 (XII) 化合物亦可商購獲得。

非商業上可獲得的通式 (XII) 化合物可藉由水解通式 (XIV) 化合物來製備：

(XIV) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義，且 R ¹⁵為 C _1-6烷基或苄基。

水解適當地為鹼水解，例如在水溶液中使用鹼金屬氫氧化物 (特別是氫氧化鋰) 進行。

通式 (XIV) 化合物可藉由使如上所定義之通式 (V) 化合物與通式 (XV) 化合物反應來製備：

(XV) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義，且 R ¹⁵係如針對通式 (XIV) 所定義。

適當地，兩步反應的第一步在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。然後將第一步的產物用酸諸如乙酸處理。

通式 (XV) 化合物可商購獲得或可藉由已知方法來製備。

其中 Z 為 -C(O)-NH- 的通式 (I) 化合物亦可藉由以下方法來製備：使如上所定義之通式 (XIII) 化合物與通式 (XVI) 化合物：

(XVI) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義，且 R ¹⁶為鹵素，尤其是溴；及一氧化碳反應。

一氧化碳可原位生成，如以下實例 3.3 中所述。

通式 (XVI) 化合物可藉由使如上所定義之通式 (V) 化合物與通式 (XIX) 化合物反應來製備：

(XIX) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如針對通式 (I) 所定義，且 R ¹⁶係如針對通式 (XVI) 所定義。

適當地，該反應的第一步在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。環化係藉由將第一步的產物在約 50 至 100°C 的溫度下用酸諸如乙酸處理來實現。

其中 Z 為 -C(O)-NH- 的通式 (I) 化合物亦可藉由使如上所定義之通式 (V) 化合物與通式 (XX) 化合物反應來製備：

(XX) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如上文針對通式 (I) 所定義。

通式 (XX) 化合物可藉由使如上所定義之通式 (XIII) 化合物與通式 (XVIII) 化合物反應來製備：

(XVIII) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如上文針對通式 (I) 所

定義。適當地，該反應在偶合劑存在下並在鹼性條件下進行，例如在胺諸如二異丙基乙胺 (DIPEA) 或三乙胺 (TEA) 存在下並在有機溶劑諸如 DMF 中進行。合適的偶合劑係如上文針對通式 (II) 及 (III) 化合物的反應所述。

通式 (XVIII) 化合物可藉由水解通式 (XV) 化合物來製備，特別是藉由鹼水解來製備，例如在醇溶劑諸如甲醇或甲醇、四氫呋喃與水的混合物中使用鹼金屬氫氧化物諸如氫氧化鋰進行。

在通式 (I) 化合物的合成中，必要時可使用保護基。合適的保護基為眾所周知的 (參見：Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis, Peter G.M.Wuts, Ed, John Wiley & Sons, Inc, 2014)。例如，如果 R ¹或 R ²基團包含經 OH 取代的芳環，則可能需要保護。例如，在 R ¹基團為 CH(R ¹¹)(R ¹²) 的情況下，其中 R ¹²為經 OH 取代的苯基，該 OH 基團可作為內酯得到保護，其可藉由用還原劑諸如硼氫化鈉或硼氫化鋰處理以開環，得到所需的 R ¹²基團。可替代地，OH 基團可作為 O(C _1-6) 烷基 (尤其是甲氧基) 或作為苄氧基得到保護。當保護基為甲氧基，去保護可藉由與三溴化硼反應來進行。苄氧基基團可藉由催化氫化去除，如實例 1.4、1.5 及 3.3 中所示。作為另一替代方案，OH 基團可由三(C _1-6烷基)矽基基團保護，其可在水溶液後處理 (aqueous workup) 中去除。

通式 (I) 化合物為 TMEM16A 的正調控劑，在本發明的又一態樣中，提供如上所定義之通式 (I) 化合物用於藥品中，特別是用於治療或預防受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症。

亦提供通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症的藥物。

亦提供用於治療或預防受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。

受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症包括呼吸道疾病及病症、口乾 (口乾症)、腸道過度活動、膽汁鬱積及眼部病症。

亦提供： l 用於治療或預防呼吸道疾病及病症的通式 (I) 化合物。 l 用於治療或預防口乾 (口乾症) 的通式 (I) 化合物。 l 用於治療或預防腸道過度活動的通式 (I) 化合物。 l 用於治療或預防膽汁鬱積的通式 (I) 化合物。 l 用於治療或預防眼部病症的通式 (I) 化合物。

本發明亦提供： l 通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防呼吸道疾病及病症的藥物。 l 通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防口乾 (口乾症) 的藥物。 l 通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防腸道過度活動的藥物。 l 通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防膽汁鬱積的藥物。 l 通式 (I) 化合物之用途，其用於製造用於治療或預防眼部病症的藥物。

進一步提供： l 一種治療或預防呼吸道疾病及病症之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。 l 一種治療或預防口乾 (口乾症) 之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。 l 一種治療或預防腸道過度活動之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。 l 一種治療或預防膽汁鬱積之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。 l 一種治療或預防眼部病症之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之通式 (I) 化合物。

可由通式 (I) 化合物治療或預防的呼吸道疾病及病症包括囊性纖維化、慢性阻塞性肺病 (COPD)、慢性支氣管炎、肺氣腫、包含非囊性纖維化支氣管擴張在內的支氣管擴張、氣喘及原發性纖毛運動障礙。

可由通式 (I) 化合物治療或預防的口乾 (口乾症) 可由薛格連氏症候群、放射治療或異源藥物所造成。

可由通式 (I) 化合物治療或預防的腸道過度活動可與胃消化不良、胃輕癱、慢性便秘或腸躁症候群有關。

可由通式 (I) 化合物治療或預防的眼部病症包括乾眼症。

本發明之化合物一般將作為醫藥組成物的一部分投予，因此本發明進一步提供包含通式 (I) 化合物以及醫藥上可接受之賦形劑的醫藥組成物。

醫藥組成物可調配用於經口、直腸、鼻腔、支氣管 (吸入)、局部 (包括皮膚、透皮、滴眼劑、口腔及舌下)、陰道或腸胃外 (包括皮下、肌內、靜脈及皮內) 投予，並可藉由藥學領域所熟知的任何方法來製備。

組成物可藉由將如上文所定義之活性劑與賦形劑締合來製備。一般而言，藉由使活性劑與液體載劑或細分的固體載劑或兩者均勻且緊密地締合，然後 (必要時) 使產品成型來製備調配物。本發明擴展到製備醫藥組成物的方法，該等方法包含使通式 (I) 化合物與醫藥上可接受之載劑或載體結合或締合。

本發明中用於經口投予的調配物可呈現為：離散單元，諸如膠囊、小袋或錠劑，其各自含有預定量的活性劑；粉劑或顆粒劑；活性劑在水性液體或非水性液體中的溶液或懸液劑；或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑；或丸劑等。

對於經口投予的組成物 (例如錠劑和膠囊)，術語「可接受之載劑」包括載體，諸如常用賦形劑，例如黏合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、西黃蓍膠、聚乙烯氫吡咯酮 (普維酮)、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、蔗糖及澱粉；填充劑及載劑，例如玉米澱粉、明膠、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸二鈣、氯化鈉及海藻酸；以及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉及其他硬脂酸金屬鹽、硬脂酸甘油酯、硬脂酸、矽油、滑石蠟、矽氧流體及膠體二氧化矽。亦可使用調味劑，諸如薄荷、冬青油、櫻桃調味劑等。可能期望添加著色劑以使劑型易於識別。錠劑亦可藉由本領域所熟知的方法進行包衣。

錠劑可藉由壓縮或模製製成，視情況與一種或多種輔助成分一起製成。壓製式錠劑可以藉由在適合的機器中壓製呈自由流動形式 (諸如粉劑或顆粒劑) 的活性劑來製備，視情況與黏合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、界面活性劑或分散劑混合。模製式錠劑可藉由在適合的機器中模製濕潤的粉末狀化合物與惰性液體稀釋劑的混合物來製備。錠劑可視情況被包衣或刻痕並且可被調配以便提供對活性劑的緩慢或受控釋放。

其他適用於經口投予的調配物包括在調味基劑 (通常是蔗糖及阿拉伯樹膠或黃蓍膠) 上包含活性劑的口含錠；在惰性基劑 (諸如明膠及甘油或蔗糖及阿拉伯樹膠) 上包含活性劑的軟錠劑 (pastille)；以在適合的液體載劑中包含活性劑的漱口水。

為局部施加於皮膚，通式 (I) 化合物可製成乳膏、軟膏、膠凍、溶液或懸液劑等。可用於藥物的乳膏或軟膏調配物為本領域所熟知的習用調配物，例如，如英國藥典等藥學標準教科書中所述。

局部投予肺部可藉由使用噴霧劑調配物來實現。噴霧劑調配物通常包含懸浮或溶解於合適的推噴劑中的活性成分，諸如氟氯碳化物 (CFC) 或氫氟碳化物 (HFC)。合適的 CFC 推進劑包括三氯一氟甲烷 (推進劑 11)、二氯四氟甲烷 (推進劑 114) 及二氯二氟甲烷 (推進劑 12)。合適的 HFC 推進劑包括四氟乙烷 (HFC-134a) 及七氟丙烷 (HFC-227)。推進劑通常佔總吸入組成物重量的 40%-99.5%，例如 40%-90%。該調配物可包含賦形劑，該等賦形劑包括共溶劑 (例如乙醇) 及界面活性劑 (例如卵磷脂、山梨糖醇酐三油酸酯等)。其他可能的賦形劑包括聚乙二醇、聚乙烯氫吡咯酮、甘油等。噴霧劑調配物包裝在罐中並藉由計量閥 (例如由 Bespak、Valois 或 3M 提供，或可替代地，由 Aptar、Coster 或 Vari 提供) 遞送合適的劑量。

局部投予肺部亦可藉由使用非加壓調配物諸如水溶液或懸液劑來實現。這些調配物可藉由霧化器投予，例如該霧化器可為手持及便攜式霧化器或供家庭或醫院使用的 (亦即非便攜式) 霧化器。該調配物可包含賦形劑，諸如水、緩衝劑、張力調節劑、pH 調節劑、界面活性劑及共溶劑。懸液及噴霧劑調配物 (加壓或未加壓) 通常含有呈細分形式的本發明的化合物，例如具有 0.5-10 μm (例如約 1-5 μm) 的 D ₅₀。粒徑分佈可使用 D ₁₀、D ₅₀及 D ₉₀值來表示。粒徑分佈之 D ₅₀中值定義為將分佈一分為二的以微米為單位的粒徑。由雷射繞射得到的測量值更準確地描述為體積分佈，並因此使用該程序所獲得的 D ₅₀值更有意義地稱為 Dv ₅₀值 (體積分佈之中值)。如本文所用，Dv 值是指使用雷射繞射所測得的粒徑分佈。類似地，在雷射繞射的上下文中使用的 D ₁₀及 D ₉₀值被視為指 Dv ₁₀及 Dv ₉₀值，並且分別是指其中 10% 的分佈低於 D ₁₀值且 90% 的分佈低於 D ₉₀值的粒徑。

局部投予肺部亦可藉由使用乾粉調配物來實現。乾粉調配物將含有呈細分形式的本揭露的化合物，通常具有 1-10 µm 的質量平均直徑 (MMAD) 或 0.5-10 μm (例如約 1-5 μm) 的 D ₅₀。呈細分形式的本發明的化合物的粉劑可藉由微粉化方法或類似的尺寸減小方法來製備。微粉化可使用噴射磨機 (諸如由 Hosokawa Alpine 製造的那些) 進行。所得粒徑分佈可使用雷射繞射 (例如，使用 Malvern Mastersizer 2000S 儀器) 來測量。調配物通常將含有局部可接受之稀釋劑，諸如乳糖、葡萄糖或甘露醇 (較佳的是乳糖)，通常具有較大的粒徑，例如 50 μm 或更大 (例如 100 µm 或更大) 的質量平均直徑 (MMAD) 或 40-150 µm 的 D ₅₀。如本文所用，術語「乳糖」是指含乳糖的組分，包括 α-乳糖單水合物、β-乳糖單水合物、無水 α-乳糖、無水 β-乳糖及無定形乳糖。乳糖組分可藉由微粉化、篩分、碾磨、壓縮、黏聚或噴霧乾燥進行加工。亦涵蓋各種形式的市售乳糖，例如 Lactohale ^®(吸入級乳糖；DFE Pharma)、InhaLac ^®70 (經篩分的用於乾粉吸入器的乳糖；Meggle)、Pharmatose ^®(DFE Pharma) 及 Respitose ^®(經篩分的吸入級乳糖；DFE Pharma) 產品。在一個實施例中，乳糖組分係選自 α-乳糖單水合物、無水α-乳糖及無定形乳糖。較佳的是，乳糖為 α-乳糖單水合物。

乾粉調配物亦可含有其他賦形劑。因此，在一個實施例中，如本揭露之干粉調配物包含硬脂酸鎂或硬脂酸鈣。該等調配物可具有優異的化學及/或物理穩定性，尤其是當該等調配物亦含有乳糖時。

乾粉調配物通常使用乾粉吸入器 (DPI) 裝置進行遞送。示例乾粉遞送系統包括 SPINHALER®、DISKHALER®、TURBOHALER®、DISKUS®、SKYEHALER®、ACCUHALER® 及 CLICKHALER®。乾粉遞送系統的另外的實例包括 ECLIPSE、NEXT、ROTAHALER、HANDIHALER、AEROLISER、CYCLOHALER、BREEZHALER/NEOHALER、MONODOSE、FLOWCAPS、TWINCAPS、X-CAPS、TURBOSPIN、ELPENHALER、MIATHALER、TWISTHALER、NOVOLIZER、PRESSAIR、ELLIPTA、ORIEL 乾粉吸入器、MICRODOSE、PULVINAL、EASYHALER、ULTRAHALER、TAIFUN、PULMOJET、OMNIHALER、GYROHALER、TAPER、CONIX、XCELOVAIR 及 PROHALER。

在一個實施例中，通式 (I) 化合物作為微粉化干粉調配物提供，例如包含合適等級的乳糖。

因此，作為本發明的一個態樣，提供一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含呈顆粒形式的通式 (I) 化合物與微粒狀乳糖的組合，該組成物視情況包含硬脂酸鎂。

在一個實施例中，通式 (I) 化合物作為微粉化干粉調配物提供，其包含合適等級的乳糖及硬脂酸鎂，裝入裝置諸如 DISKUS 中。適當地，該裝置為多劑量裝置，例如將調配物裝入泡型中以用於多單位劑量裝置諸如 DISKUS 中。

在另一實施例中，通式 (I) 化合物作為微粉化干粉調配物提供，例如包含合適等級的乳糖，其裝入硬殼膠囊中以用於單劑量裝置諸如 AEROLISER 中。

在另一實施例中，通式 (I) 化合物作為微粉化干粉調配物提供，其包含合適等級的乳糖及硬脂酸鎂，裝入硬殼膠囊中以用於單劑量裝置諸如 AEROLISER 中。

在另一實施例中，通式 (I) 化合物作為用於吸入劑型的細粉提供，其中該粉劑為具有 0.5-10 μm (例如約 1-5 μm) 的 D ₅₀的細顆粒，其藉由除噴射磨機微粉化以外的粉碎方法生產，例如噴霧乾燥、噴霧冷凍、微流化、高壓均質化、超臨界流體結晶、超音波結晶或這些方法的組合，或本領域已知的用於生產具有 0.5-10 μm 的空氣動力學粒徑的細顆粒其他合適的顆粒形成方法。所得粒徑分佈可使用雷射繞射 (例如，使用 Malvern Mastersizer 2000S 儀器) 來測量。顆粒可包含單獨的化合物或與可有助於加工的合適的其他賦形劑的組合。所得細顆粒可形成最終調配物以遞送給人類或可視情況與其他合適的賦形劑進一步調配以促進可接受之劑型之遞送。

本發明之化合物亦可經直腸投予，例如以栓劑或灌腸劑的形式，其包括水性或油性溶液以及懸液劑及乳劑和泡沫。該等組成物按照本領域技術人員所熟知的標準程序來製備。例如，栓劑可藉由將活性成分與習用栓劑基劑諸如可可脂或其他甘油酯混合來製備。在這種情況下，將藥物與合適的無刺激性賦形劑混合，該賦形劑在常溫下為固體，但在直腸溫度下為液體，因此將在直腸中融化以釋放藥物。該等材料為可可脂及聚乙二醇。

一般而言，對於旨在以滴眼劑或眼膏形式局部投予眼睛的組成物，通式 (I) 化合物的總量將為約 0.0001 至小於 4.0% (w/w)。

較佳的是，對於局部眼部投予，投予的如通式 (I) 的組成物將被配製為溶液劑、懸液劑、乳劑及其他劑型。基於調配的容易性以及患者藉由將一至兩滴溶液滴入受影響之眼睛而容易地投予該等組成物的能力，通常較佳的是水溶液。但是，組成物亦可為懸液劑、黏性或半黏性凝膠或其他類型的固體或半固體組成物。對於微溶於水的化合物，可能較佳的是懸液劑。

投予眼睛的一種替代方案是經玻璃體內注射通式 (I) 化合物之溶液或懸液劑。此外，亦可藉由眼部植入物或插入物來引入通式 (I) 化合物。

投予的如通式 (I) 的組成物亦可包括各種其他成分，該等成分包括但不限於張力劑、緩衝劑、界面活性劑、穩定聚合物、防腐劑、共溶劑及增黏劑。合適的通式 (I) 醫藥組成物包括與張力劑和緩衝劑調配的本發明的化合物。通式 (I) 醫藥組成物可進一步視情況包括界面活性劑及/或緩和劑及/或穩定聚合物。

可採用各種張力劑來調節組成物的張力，較佳的是調節針對眼科組成物產生的天然淚液的張力。例如，可將氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、單糖諸如右旋糖、果糖、半乳糖及/或簡單的多元醇諸如糖醇 (甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、異麥芽糖醇、麥芽糖醇) 及氫化澱粉水解產物添加至組成物中以接近生理張力。該等張力劑的量將根據要添加的特定試劑而變化。但是，一般而言，組成物將具有足以使最終組成物具有眼科可接受之重量滲透濃度 (一般而言，約 150-450 mOsm，較佳的是 250-350 mOsm，最佳的是約 290 mOsm) 的量的張力劑。一般而言，本發明之張力劑將在 2 至 4% w/w 的範圍內存在。本發明之較佳的張力劑包括單糖或糖醇諸如 D-甘露醇。

可向組成物中添加合適的緩衝系統 (例如磷酸鈉、乙酸鈉、檸檬酸鈉、硼酸鈉或硼酸) 以防止儲存條件下的 pH 發生漂移。特定濃度將根據所用的試劑而變化。但是，較佳的是，緩衝液經選擇為將標靶 pH 保持在 pH 5 至 8 的範圍內，更佳的是，保持 pH 5 至 7 的標靶 pH。

可視情況採用界面活性劑以遞送更高濃度的通式 (I) 化合物。界面活性劑用於溶解化合物並穩定膠體分散體諸如膠束溶液、微乳劑、乳劑及懸液劑。可視情況使用的界面活性劑的實例包括聚山梨醇酯、泊洛沙姆、聚乙二醇 40 硬脂酸酯、聚氧乙烯蓖麻油、泰洛沙泊 (tyloxapol)、Triton 及山梨醇酐單月桂酸酯。用於本發明的較佳的界面活性劑具有在 12.4 至 13.2 範圍內的親水/親油/平衡「HLB」，並且對於眼科使用為可接受的，諸如 TritonX114 及泰洛沙泊。

可添加至通式 (I) 化合物的眼科組成物中的其他試劑是用為穩定聚合物的緩和藥。穩定聚合物應為離子/帶電實例，其優先用於局部眼部使用，更具體而言，其為表面帶有負電荷的聚合物，可表現出 (–)10–50 mV 的 ζ 電位以實現物理穩定性並能夠在水中形成分散體 (亦即溶於水)。本發明之較佳的穩定聚合物為聚電解質或多於一種的聚電解質，其來自交聯聚丙烯酸酯家族，諸如卡波姆及 Pemulen(R)，具體為卡波姆 974p (聚丙烯酸)，其含量為 0.1–0.5% w/w。

亦可將其他化合物添加至通式 (I) 化合物的眼科組成物中以提高載劑的黏度。增黏劑的實例包括但不限於：多醣，諸如透明質酸及其鹽、硫酸軟骨素及其鹽、聚葡萄糖、纖維素家族的各種聚合物；乙烯基聚合物；及丙烯酸聚合物。

局部眼科藥品通常以多劑量形式包裝。因此，需要防腐劑以防止使用過程中的微生物污染。合適的防腐劑包括：氯化苯二甲烴銨、氯丁醇、苯度溴銨 (benzododecinium bromide)、對羥苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯乙醇、依地酸二鈉、山梨酸、聚季銨鹽-1 或本領域技術人員已知的其他試劑。通常以 0.001 至 1.0% w/v 之水平採用此等防腐劑。通式 (I) 的單位劑量組成物將為無菌的，但通常不添加防腐劑。因此，該等組成物通常不含防腐劑。

腸胃外調配物通常為無菌的。

醫療從業者或其他技術人員將能夠確定通式 (I) 化合物的合適劑量，並因此確定應包含在任何特定醫藥調配物 (無論是否為單位劑型) 中本發明化合物的量。

通式 (I) 化合物可與一種或多種其他可用於治療或預防呼吸道疾病及病症的活性劑組合使用。

此類額外活性劑可包含於上述醫藥組成物中，但可替代地，其可以與通式 (I) 化合物同時或在更早或更晚的時間單獨投予。

因此，在本發明的又一態樣中，提供一種作為組合調配物的藥品，其包含通式 (I) 化合物及可用於治療或預防呼吸道病症的額外藥劑，其同時、依序或分開使用於治療受 TMEM16A 調控影響的疾病或病症且尤其是呼吸道疾病或病症 (例如，上述疾病及病症中之一者)。

亦提供一種式 (I) 化合物，其與可用於治療或預防呼吸道病症的額外藥劑組合使用，作為組合調配物同時、依序或分開使用於治療受 TMEM16A 調控影響的疾病或病症且尤其是呼吸道疾病或病症 (例如，上述疾病及病症中之一者)。

可與通式 (I) 化合物包含在醫藥組成物或組合調配物中的合適的額外活動劑包括： β2 腎上腺素受體促效劑，諸如奧西那林、異丙基腎上腺素 (isoproterenol)、喘息定 (isoprenaline)、沙丁胺醇、沙布坦錠、福莫特羅、沙美特羅、茚達特羅、特布他林、異丙喘寧、甲磺酸比托特羅、吡布特羅、奧達特羅、維蘭特羅及阿比特羅；抗組織胺，例如組織胺 H ₁受體拮抗劑，諸如氯雷他定、西替利嗪、地氯雷他定、左西替利嗪、非索非那定、阿司咪唑、氮卓斯汀及氯菲安明或 H ₄受體拮抗劑；去氧核醣酶 α；皮質類固醇，諸如強體松、培尼皮質醇、氟尼縮松、丙酮特安皮質醇、二丙酸倍氯米松、亞丁皮質醇、丙酸氟替卡松、糠酸莫美他松及糠酸氟替卡松；白三烯拮抗劑，諸如孟魯司特及紮魯司特；抗副交感神經化合物，特別是蕈毒鹼拮抗劑，諸如異丙托銨、噻托溴銨、格隆溴銨、阿地溴銨及蕪地溴銨； CFTR 修復療法 (例如 CFTR 增效劑、修正劑或增幅劑)，諸如依伐卡托、QBW251、巴馬卡托 (VX659)、依來卡托 (VX445)、VX561/CPT-656、VX152、歐拉卡托 (VX440)、GLP2737、GLP2222、GLP2451、PTI438、PTI801、PTI808、FDL-169 及 FDL-176，及 CFTR 修正劑，諸如魯瑪卡托及堤扎卡托或其組合 (例如依伐卡托、堤扎卡托及依來卡托之組合)； ENaC 調控劑，特別是 ENaC 抑制劑；抗生素；抗病毒藥，諸如利巴韋林及神經胺酸酶抑制劑，例如紮那米韋；抗真菌藥，例如 PUR1900；氣道保濕劑 (滲透劑)，諸如高張鹽水及甘露醇 (Bronchitol®)；以及黏液溶解劑，例如N-乙醯基半胱胺酸。

當額外活性劑為 ENaC 調控劑，其可為 ENaC 抑制劑，諸如阿米洛利、VX-371、AZD5634、QBW276、SPX-101、BI443651、BI1265162 及 ETD001。其他合適的 ENaC 阻斷劑揭示於 WO 2017/221008、WO 2018/096325、WO 2019/077340 及 WO 2019/220147 中，並且那些申請的示例化合物中之任一者皆可與通式 (I) 化合物組合使用。與通式 (I) 的化合物組合使用的特別合適的化合物包括具有選自以下陽離子的化合物： 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)乙基]-6-(4-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}哌啶-1-羰基)-1,3-二乙基-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-{[2-(4-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}哌啶-1-基)乙基]胺甲醯基}-1,3-二乙基-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-5-[4-({雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}甲基)哌啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-[(3 R)-3-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}吡咯啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-[(3 S)-3-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}吡咯啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1 r,4 r)-4-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}環己基]胺甲醯基}-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5 H-吡咯并[2,3- b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1 s,4 s)-4-{雙[(2 S,3 R,4 R,5 R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}環己基]胺甲醯基}-1 H-1,3-苯并二唑-3-鎓；該適當的陰離子為例如鹵化物、硫酸根、硝酸根、磷酸根、甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、富馬酸根、檸檬酸根、酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、杏仁酸根、甲磺酸根或對甲苯磺酸根。

發明藉由以下實例進行說明。

實例

本發明藉由以下非限制性實例進行說明。

實例

一般條件：

質譜在使用電灑離子化的 LC-MS 系統上運行。這些分析使用配備 Waters PDA 和 ELS 偵測器的 Waters Acquity uPLC 系統或 Shimadzu LCMS-2010EV 系統運行。[M+H]+ 是指單同位素分子量。

在配備 5 mm 寬頻帶反向探針的 Bruker Avance III HD 500 MHz、配備 5 mm 寬頻帶 Observed SmartProbe 的 Bruker Avance III HD 250 MHz 或 400MHz Avance III HD Nanobay 上，使用溶劑作為內部氘鎖，記錄 NMR 譜。除非另有說明，否則所有波譜均於室溫下記錄，並使用溶劑峰作為參比。

參見以下實例，較佳的實施例的化合物使用本文所述之方法或本領域已知的其他方法合成。

較佳的實施例的各種起始材料、中間體及化合物可在適當情況下使用習用技術諸如沉澱、過濾、結晶、蒸發、蒸餾及層析法進行分離和純化。除非另有說明，否則所有起始材料皆獲自商業供應商，並在不經進一步純化的情況下使用。鹽可藉由已知的鹽形成程序由化合物製備。

在 Biotage® Isolera 系統上，使用適當的 SNAP 卡夾或 Sfär 卡匣及梯度，藉由正相矽膠急速管柱層析法純化化合物。可替代地，使用配備適當的 SNAP C18 或 Sfär C18 卡匣的 Biotage® Isolera 或 Biotage® Selekt 系統及逆相溶析液在逆相矽膠上純化化合物，或藉由製備型 HPLC (如果另有說明) 進行純化。

使用酸性 pH 的製備型 HPLC ，早期溶析方法

在 Gilson LC 系統上進行純化，使用 Waters Sunfire C18 管柱 (30 mm × 100 mm，10 µM；溫度：RT)，以及 B 在 14.44 分鐘內從 10% 增加至 95% 的梯度 (A = 0.1% 甲酸水溶液；B = 0.1% 甲酸的乙腈溶液)，然後以 95% B 保持 2.11 分鐘，進樣體積為 1500 µL，且流速為 40 mL/min。使用 Gilson 偵測器在 215 nm 處記錄 UV 光譜。

使用酸性 pH 的製備型 HPLC ，標準溶析方法

在 Gilson LC 系統上藉由製備型 HPLC (酸性 pH，標準溶析方法) 進行純化，使用 Waters Sunfire C18 管柱 (30 mm × 100 mm，10 µM；溫度：RT)，以及 B 在 11 分鐘內從 30% 增加至 95% 的梯度 (A = 0.1% 甲酸水溶液；B = 0.1% 甲酸的乙腈溶液)，然後以 95% B 保持 2.11 分鐘，進樣體積為 1500 µL，且流速為 40 mL/min。使用 Gilson 偵測器在 215 nm 處記錄 UV 光譜。

使用鹼性 pH 的製備型 HPLC ，早期溶析方法

在 Gilson LC 系統上藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 進行純化，使用 Waters Sunfire C18 管柱 (30 mm × 100 mm，10 µM；溫度：RT)，以及 B 在 14.44 分鐘內從 10% 增加至 95% 的梯度 (A = 0.2% 氫氧化銨水溶液；B = 0.2% 氫氧化銨的乙腈溶液)，然後以 95% B 保持 2.11 分鐘，進樣體積為 1500 µL，且流速為 40 mL/min。使用 Gilson 偵測器在 215 nm 處記錄 UV 光譜。

使用鹼性 pH 的製備型 HPLC ，標準溶析方法

在 Gilson LC 系統上藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，標準溶析方法) 進行純化，使用 Waters Sunfire C18 管柱 (30 mm × 100 mm，10 µM；溫度：RT)，以及 B 在 11 分鐘內從 30% 增加至 95% 的梯度 (A = 0.2% 氫氧化銨水溶液；B = 0.2% 氫氧化銨的乙腈溶液)，然後以 95% B 保持 2.11 分鐘，進樣體積為 1500 µL，且流速為 40 mL/min。使用 Gilson 偵測器在 215 nm 處記錄 UV 光譜。

除非另有說明，否則分析型 HPLC 條件如下：方法 A管柱： Phenomenex Kinetix-XB C18 2.1 × 100 mm, 1.7 µm 管柱溫度： 40°C 溶析液： A：H ₂O + 0.1% 甲酸，B：乙腈 + 0.1% 甲酸流速： 0.6 mL/min 梯度： 0-5.3 分鐘，5-100% B；5.3-5.8 分鐘，100% B；5.8-5.82 分鐘，100-5% B；5.82-7.00 分鐘，5% B 方法 B管柱： Waters UPLC ® CSH ^TMC18 2.1 × 100 mm, 1.7 µm 管柱溫度： 40°C 溶析液： A：2 mM 碳酸氫銨，緩衝至 pH 10，B：乙腈流速： 0.6 mL/min 梯度： 0-5.3 分鐘，5-100% B；5.3-5.8 分鐘，100% B；5.8-5.82 分鐘，100-5% B；5.82-7.00 分鐘，5% B 方法 C管柱： Waters UPLC ® BEH ^TMC18 2.1 × 100 mm, 1.7 µm 管柱溫度： 40°C 溶析液： A：2 mM 碳酸氫銨，緩衝至 pH 10，B：乙腈流速： 0.6 mL/min 梯度： 0-5.3 分鐘，5-100% B；5.3-5.8 分鐘，100% B；5.8-5.82 分鐘，100-5% B；5.82-7.00 分鐘，5% B 方法 E管柱： Kinetex Core-Shell C18 2.1 × 50 mm, 5 µm 管柱溫度： 40°C 溶析液： A：H ₂O + 0.1% 甲酸，B：乙腈 + 0.1% 甲酸流速： 1.2 mL/min 梯度： 0-1.20 分鐘，5-100% B；1.20-1.30 分鐘，100% B；1.30-1.31 分鐘，100-5% B；1.31-1.7 分鐘，5% B 方法 F管柱： Phenomenex Gemini-NX C18 2 × 50 mm, 3µm 管柱溫度： 40°C 溶析液： A：2 mM 碳酸氫銨，緩衝至 pH 10，B：乙腈流速： 1 mL/min 梯度： 0-1.80 分鐘，1-100% B；1.80-2.10 分鐘，100% B；2.10-2.30 分鐘，100-1% B；2.30-3.50 分鐘，1% B

以下實例旨在說明本發明，不應解釋為對本發明的限制。溫度以攝氏度為單位。除非另外提及，否則所有蒸發皆 在真空中(較佳的是，介於約 15 mm Hg 與 100 mm Hg (= 20-133 mbar) 之間) 進行。最終產物、中間體及起始材料的結構藉由標準分析方法確認，例如微量分析和光譜特徵，例如 MS、IR 及 NMR。所使用的縮寫為本領域習用的那些。如未定義，這些術語具有其普遍接受的含義。

縮寫AcOH 乙酸 aq. 水性 br 寬 d 二重線 dd 雙二重線 DCE 二氯乙烷 DCM 二氯甲烷 DIPEA 二異丙基乙胺 DMAP 4-二甲胺基吡啶 DMF N,N-二甲基甲醯胺 EDCI 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 HOAt 1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑 HATU 2-(7-氮雜-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鏻 HPLC 高效液相層析法 IPA 異丙醇 MeCN 乙腈 MeOH MeOH MS 質譜法 m 多重線 min 分鐘 mL 毫升 m/z 質荷比 NMR 核磁共振 q 四重線 Rt 滯留時間 s 單線 t 三重線 TBTU N,N,N′,N′-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲鎓四氟硼酸鹽 TEA 三乙胺 THF 四氫呋喃

實例之製備

實例 1.1

N-(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 )-2- 環己基 - 乙醯胺

向 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A) (75 mg, 0.34 mmol) 及 DIPEA (70 µL, 0.40 mmol) 於 DCM (2 mL) 中之冷卻 (0°C) 溶液中添加 2-環己基乙醯氯 (57 µL, 0.37 mmol)。將溶液升溫至室溫並攪拌 1 小時。將所得混合物用 DCM (5 mL) 稀釋，並用水 (5 mL)、鹽水 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將粗殘餘物溶於 MeOH (2 mL) 及 7 M NH ₃之 MeOH (0.5 mL) 溶液中，並將混合物靜置 5 分鐘。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 純化甲醇溶液，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.10 min；MS m/z 348.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.16 – 12.08 (m, 1H), 9.80 – 9.68 (m, 1H), 7.97 – 7.83 (m, 1H), 7.42 – 7.09 (m, 7H), 4.13 (s, 2H), 2.17 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.82 – 1.74 (m, 1H), 1.72 – 1.59 (m, 5H), 1.27 – 1.11 (m, 3H), 1.02 – 0.93 (m, 2H)。

實例 1.2

2- 苄基 -N-( 環己基甲基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

向市售 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸 (75 mg, 0.30 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之溶液中添加 EDCI (63 mg, 0.33 mmol)、DMAP (40 mg, 0.33 mmol) 及 HOAt (45 mg, 0.33 mmol)。於室溫下攪拌 5 分鐘後，添加環己基甲胺 (67 mg, 0.59 mmol)，並在惰性環境下繼續攪拌 16 小時。將所得混合物用 EtOAc (20 mL) 稀釋，用水 (2 × 10 mL)、鹽水 (2 × 10 mL) 洗滌，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (酸性 pH，標準溶析方法) 純化粗產物，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.21 min；MS m/z 348.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 8.43 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.70 (dd, J = 8.5, 1.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 – 7.30 (m, 4H), 7.28 – 7.23 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.26 – 3.21 (m, 2H), 1.85 – 1.73 (m, 4H), 1.71 – 1.62 (m, 2H), 1.34 – 1.17 (m, 3H), 1.07 – 0.97 (m, 2H)。

實例 1.2.1

N-(1- 金剛烷基甲基 )-2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 1.2，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及 1-金剛烷基甲胺製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.67 min；MS m/z 400.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.47 (br. s, 1H), 8.21 – 8.15 (m, 1H), 8.02 (br. s, 1H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 – 7.39 (m, 1H), 7.35 – 7.29 (m, 4H), 7.26 – 7.20 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.00 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 1.96 – 1.89 (m, 3H), 1.69 – 1.56 (m, 6H), 1.54 – 1.46 (m, 6H)。

實例 1.2.2

2- 苄基 -N-[(1- 甲基環戊基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 1.2，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及 (1-甲基環戊基)甲胺製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.22 min；MS m/z 348.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.48 (br s, 1H), 8.26 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.19 – 7.80 (m, 1H), 7.67 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.61 – 7.39 (m, 1H), 7.38 – 7.29 (m, 4H), 7.28 – 7.19 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.22 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 1.69 – 1.51 (m, 6H), 1.32 – 1.17 (m, 2H), 0.98 (s, 3H)。

實例 1.2.3

2- 苄基 -N-[(1R)-1- 環己基乙基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 1.2，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及 (1R)-1-環己基乙胺製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.38 min；MS m/z 362.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.45 (br s, 1H), 8.15 – 7.83 (m, 2H), 7.66 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (br s, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 4H), 7.27 – 7.17 (m, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.89 – 3.79 (m, 1H), 1.78 – 1.66 (m, 4H), 1.63 – 1.57 (m, 1H), 1.46 – 1.38 (m, 1H), 1.24 – 1.07 (m, 6H), 1.00 – 0.89 (m, 2H)。

實例 1.3

N-( 環庚基甲基 )-2-(1,1- 二甲基丙基 )-3H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

步驟 1 ：3,4-二胺基-N-(環庚基甲基)苯甲醯胺

向環庚基甲胺 (2.27 mL, 15.77 mmol) 及 3,4-二胺基苯甲酸 (2.0 g, 13.14 mmol) 於 THF (50 mL) 及 DMF (20 mL) 中之溶液中添加 TBTU (5.06 g, 15.77 mmol) 及 TEA (5.5 mL, 39.43 mmol)。於室溫下攪拌 19 小時後， 在真空中濃縮混合物。將粗產物溶於 EtOAc (50 mL) 中，並用水 (2 × 25 mL) 洗滌。將水性部分用 EtOAc (3 × 50 mL) 反萃取，並將合併之有機萃取物用鹽水 (2 × 25 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到深棕色糖漿。藉由 C18 逆相層析法純化粗產物，用含 10-100% MeCN 的水溶析，以得到淺棕色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.96 min；MS m/z 262.1 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz，氯仿-d) δ 7.22 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.13 – 5.92 (m, 1H), 3.81 – 2.90 (m, 6H), 1.85 – 1.33 (m, 11H), 1.32 – 1.14 (m, 2H)。

步驟 2 ：N-(環庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺

將 2,2-二甲基丁酸 (34 µL, 0.28 mmol)、HATU (105 mg, 0.28 mmol) 及 TEA (80 µL, 0.46 mmol) 於 DMF (1.9 mL) 中之混合物於室溫下攪拌 1 小時，然後用 DMF (1 mL) 中之 3,4-二胺基-N-(環庚基甲基)苯甲醯胺 (步驟 1) (60 mg, 0.23 mmol) 進行處理。於室溫下攪拌 24 小時後，將混合物用 EtOAc (10 mL) 稀釋，並用飽和碳酸氫鈉水溶液 (2 × 10 mL) 洗滌。有機部分經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，藉由矽膠層析法純化粗產物，用含 0-100% EtOAc 的庚烷溶析。將所得殘餘物溶於乙酸 (1.9 mL) 中，並於 60°C 下攪拌 3 小時。將混合物用 EtOAc (20 ml) 稀釋，並用飽和碳酸氫鈉水溶液 (3 × 20 mL) 洗滌。有機部分經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (低 pH，早期溶析方法) 純化殘餘物，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.22 min；MS m/z 342 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.27 – 12.17 (m, 1H), 8.41 – 8.25 (m, 1H), 8.11 – 7.86 (m, 1H), 7.70 – 7.58 (m, 1H), 7.58 – 7.39 (m, 1H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.79 – 1.69 (m, 5H), 1.67 – 1.59 (m, 2H), 1.58 – 1.44 (m, 4H), 1.43 – 1.33 (m, 8H), 1.22 – 1.13 (m, 2H), 0.70 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。

實例 1.3.1

N-( 環庚基甲基 )-2-[(1- 羥基環己基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

由 3,4-二胺基-N-(環庚基甲基)苯甲醯胺 (實例 1.3 步驟 1) 及 2-(1-羥基環己基)乙酸 (類似於實例 1.3 步驟 2) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.19 min；MS m/z 384.4 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.21 (br. s, 1H), 8.35 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.67 (br. s, 1H), 3.10 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.92 (s, 2H), 1.80-1.70 (m, 3H), 1.68 – 1.34 (m, 17H), 1.23-1.12 (m, 3H)。

實例 1.3.2

N-( 環庚基甲基 )-2-(2- 羥基 -1- 苯基 - 乙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

由 3,4-二胺基-N-(環庚基甲基)苯甲醯胺 (實例 1.3 步驟 1) 及 3-羥基-2-苯基-丙酸 (類似於實例 1.3 步驟 2) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.46 min；MS m/z 392.4 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 – 12.39 (m, 1H), 8.40 – 8.28 (m, 1H), 8.19 – 7.89 (m, 1H), 7.70 – 7.63 (m, 1H), 7.61 – 7.40 (m, 1H), 7.39 – 7.34 (m, 2H), 7.34 – 7.28 (m, 2H), 7.25 – 7.20 (m, 1H), 5.00 (br s, 1H), 4.35 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.24 – 4.17 (m, 1H), 3.98 – 3.91 (m, 1H), 3.10 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.82 – 1.68 (m, 3H), 1.67 – 1.59 (m, 2H), 1.57 – 1.34 (m, 6H), 1.23 – 1.12 (m, 2H)。

實例 1.4

N-( 環己基甲基 )-2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-3H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

步驟 1 ：2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯

將 2-(3-苄氧基苯基)乙酸 (2.01 g, 8.3 mmol)、HATU (3.16 g, 8.3 mmol) 及 DIPEA (3.19 mL, 18.27 mmol) 於 DMF (50 mL) 中之溶液於室溫下攪拌 45 分鐘，然後用 3,4-二胺基苯甲酸甲酯 (1.38 g, 8.3 mmol) 處理。將反應混合物於室溫下攪拌 18 小時。將所得混合物 在真空中濃縮，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(100 mL) 與 EtOAc (125 mL) 之間。將有機層分離，用水 (2 × 75 mL)、鹽水 (2 × 75 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將粗產物用 MeOH (40 mL) 研製，過濾固體，並於 40°C 下在真空下乾燥 3 小時。將所得固體懸浮於 AcOH (25 mL) 中，並於 70°C 下攪拌 6 小時。 在真空中濃縮混合物，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(100 mL) 與 EtOAc (125 mL) 之間。將有機層用水 (2 × 75 mL)、鹽水 (2 × 75 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.05 min；MS m/z 373.0 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 – 7.40 (m, 2H), 7.38 – 7.33 (m, 2H), 7.32 – 7.28 (m, 1H), 7.24 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.03 – 7.00 (m, 1H), 6.93 – 6.87 (m, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.85 (s, 3H)。

步驟 2 ：2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯

向 2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯 (步驟 1) (95%, 700 mg, 1.79 mmol) 於 EtOH (20 mL) 中之懸浮液中添加 10% Pd-C (10%, 150 mg, 0.14 mmol)。將反應混合物置於氫氣環境下，並於室溫下攪拌 6 小時。所得混合物經 Celite® (過濾材料) 塞過濾，並用 EtOH (45 mL) 洗滌。 在真空中濃縮濾液，以得到淡橙色/棕色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.83 min；MS m/z 283.1 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.09 (s, 1H), 7.78 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.72 – 6.69 (m, 1H), 6.62 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.85 (s, 3H)。

步驟 3 ：2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸

將 2M LiOH 水溶液 (2.53 mL, 5.06 mmol) 添加至 2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯 (步驟 2) (95%, 501 mg, 1.69 mmol) 於 THF (8 mL) 中之溶液中，並將反應混合物於 50°C 下攪拌 4 小時。 在真空中去除揮發性有機相，然後將所得水性混合物酸化至 pH 4。將混合物用 3:1 氯仿:IPA (3 × 30 mL) 萃取，並將合併之有機萃取物用 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到淡橙色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.73 min；MS m/z 269.1 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 13.48 – 11.55 (m, 2H), 9.37 (s, 1H), 8.10 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.73 – 6.70 (m, 1H), 6.64 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 4.16 (s, 2H)。

步驟 4 ：N-(環己基甲基)-2-[(3-羥基苯基)甲基]-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺

將 2-[(3-羥基苯基)甲基]-3H-苯并咪唑-5-甲酸 (步驟 3) (50 mg, 0.19 mmol)、EDCI (33 mg, 0.21 mmol)、DMAP (46 mg, 0.37 mmol) 及 HOAt (28 mg, 0.21 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液攪拌 5 分鐘，然後用環己基甲胺 (48.5 μL, 0.37 mmol) 進行處理。將所得混合物於室溫下攪拌 2 小時，並 在真空中濃縮。將殘餘物吸收於 EtOAc (5 mL) 中，並將有機相用水 (3 × 5 mL)、鹽水 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，標準溶析方法) 純化粗產物，然後藉由製備型 HPLC (酸性 pH，標準溶析方法) 進一步純化，以得到灰白色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.00 min；MS m/z 364.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.52 – 12.34 (m, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.39 – 8.28 (m, 1H), 8.13 – 7.84 (m, 1H), 7.76 – 7.60 (m, 1H), 7.60 – 7.33 (m, 1H), 7.11 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.71 – 6.66 (m, 1H), 6.63 (dd, J = 8.0, 2.1 Hz, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.12 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.77 – 1.65 (m, 4H), 1.65 – 1.51 (m, 2H), 1.28 – 1.08 (m, 3H), 1.00 – 0.85 (m, 2H)。

實例 1.5

2-(1- 金剛烷基 )-N-[2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

步驟 1 ：2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-5-硝基-1H-苯并咪唑

將 2-(3-苄氧基苯基)乙酸 (2.99 g, 12.34 mmol)、HATU (4.69 g, 12.34 mmol) 及 DIPEA (5.27 mL, 30.17 mmol) 於 DMF (50 mL) 中之溶液於室溫下攪拌 45 分鐘，然後用 4-硝基苯-1,2-二胺 (2.1 g, 13.71 mmol) 進行處理。將反應混合物於室溫下攪拌 60 小時，然後用飽和 NaHCO ₃(50 mL) 及 EtOAc (100 mL) 稀釋。分離各相，並將有機部分用水 (2 × 50 mL)、鹽水 (2 × 50 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將殘餘物溶於乙酸 (40 mL) 中，並於 70°C 下攪拌 2.5 小時。添加額外之 AcOH (20 mL)，並於 70°C 下繼續攪拌 1 小時。 在真空中濃縮反應混合物，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(50 mL) 與 EtOAc (100 mL) 之間。將有機部分分離，用水 (50 mL)、鹽水 (50 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗產物，用含 20-75% EtOAc 的庚烷溶析，然後藉由 C18 逆相層析法進行純化，用含 10-100% MeCN 的水 (0.1% 甲酸) 溶析，以得到亮橙色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.17 min；MS m/z 360.0 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.94 (br s, 1H), 8.41 (br s, 1H), 8.07 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.47 – 7.19 (m, 6H), 7.01 (s, 1H), 6.94 – 6.88 (m, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.23 (s, 2H)。

步驟 2 ：3-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]酚

向 2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-5-硝基-1H-苯并咪唑 (步驟 1) (89%, 250 mg, 0.62 mmol) 於 EtOH (30 mL) 中之懸浮液中添加 10 % Pd-C (10%, 66 mg, 0.06 mmol)。將反應混合物置於氫氣環境下，並於室溫下攪拌 6 小時。所得混合物穿過 Celite® (過濾材料) 塞，並用 EtOH (約 35 mL) 洗滌。 在真空中濃縮濾液，然後與 Et ₂O (3 × 15 mL) 共沸，以得到灰色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 F)：Rt 1.19 min；MS m/z 240.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.61 (br. s, 1H), 9.28 (br. s, 1H), 7.22 – 7.04 (m, 2H), 6.75 – 6.37 (m, 5H), 4.74 (br. s, 2H), 3.95 (s, 2H)。

步驟 3 ：2-(1-金剛烷基)-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺

將 HATU (119 mg, 0.31 mmol)、2-(1-金剛烷基)乙酸 (55 mg, 0.28 mmol) 及 DIPEA (109 µL, 0.63 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之溶液於室溫下攪拌 30 分鐘，然後用 3-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]酚 (步驟 2) (80%, 85 mg, 0.28 mmol) 進行處理。將反應混合物於室溫下攪拌 1 小時，並 在真空中濃縮。將殘餘物吸收於 EtOAc (5 mL) 中，並用水 (3 × 5 mL)、鹽水 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，標準溶析方法) 純化粗產物，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.28 min；MS m/z 416.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.14 – 12.03 (m, 1H), 9.73 – 9.57 (m, 1H), 9.31 (s, 1H), 7.99 – 7.81 (m, 1H), 7.46 – 7.04 (m, 3H), 6.75 – 6.56 (m, 3H), 4.03 (s, 2H), 2.05 (s, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.71 – 1.52 (m, 12H)。

實例 1.5.1

N-[2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ]-2-(1- 甲基環己基 ) 乙醯胺

由 3-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]酚 (實例 1.5 步驟 2) 及 2-(1-甲基環己基)乙酸 (類似於實例 1.5 步驟 3) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.11 min；MS m/z 378.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (br s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.39 (br s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.25 – 7.12 (m, 1H), 7.08 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.69 – 6.66 (m, 1H), 6.60 dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 4.03 (s, 2H), 2.21 (s, 2H), 1.53 – 1.38 (m, 7H), 1.35 – 1.26 (m, 3H), 1.03 (s, 3H)。

實例 1.5.2

2- 環庚基 -N-[2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

由 3-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]酚 (實例 1.5 步驟 2) 及 2-環庚基乙酸(類似於實例 1.5 步驟 3) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.11 min；MS m/z 378.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.17 – 12.04 (m, 1H), 9.80 – 9.68 (m, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.96 – 7.83 (m, 1H), 7.45 – 7.10 (m, 2H), 7.08 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.69 – 6.65 (m, 1H), 6.63 – 6.58 (m, 1H), 4.05 – 4.00 (m, 2H), 2.24 – 2.13 (m, 2H), 2.06 – 1.92 (m, 1H), 1.75 – 1.65 (m, 2H), 1.65 – 1.51 (m, 4H), 1.51 – 1.34 (m, 4H), 1.27 – 1.16 (m, 2H)。

實例 1.5.3

2- 環己基 -N-[2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

由 3-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]酚 (實例 1.5 步驟 2) 及 2-環己基乙酸(類似於實例 1.5 步驟 3) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 1.89 min；MS m/z 364.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.12 – 12.04 (m, 1H), 9.80 – 9.67 (m, 1H), 9.30 (s, 1H), 7.96 – 7.83 (m, 1H), 7.45 – 7.04 (m, 3H), 6.72 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.69 – 6.65 (m, 1H), 6.61 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 4.05 – 4.01 (m, 2H), 2.20 – 2.15 (m, 2H), 1.86 – 1.55 (m, 6H), 1.32 – 1.06 (m, 3H), 1.06 – 0.91 (m, 2H)。

實例 1.5.4

2-(1- 金剛烷基 )-N-(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 ) 乙醯胺

由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A) 及 2-(1-金剛烷基)乙酸 (類似於實例 1.5 步驟 3) 製備標題化合物。

LC-MS (方法 C)：Rt 3.51 min；MS m/z 400.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 (s, 1H), 9.84 – 9.40 (m, 1H), 8.02 – 7.78 (m, 1H), 7.48 – 7.05 (m, 7H), 4.13 (s, 2H), 2.04 (s, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.75 – 1.48 (m, 12H)。

實例 1.6

N-(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 )-2-(2- 羥基 -2- 金剛烷基 ) 乙醯胺

步驟 1 ：2-(2-羥基-2-金剛烷基)乙酸

於 -78°C 下向二異丙胺 (350 µL, 2.5 mmol) 於 THF (4 mL) 中之溶液中添加 n-BuLi (1.6 M，於己烷中) (1.56 mL, 2.5 mmol)。將混合物升溫至 0°C，攪拌 30 分鐘，然後再次冷卻至 -78°C。依次向其中添加乙酸 (95 µL, 1.66 mmol) 及 n-BuLi (1.6 M，於己烷中) (1.04 mL, 1.66 mmol)。將混合物升溫至 0°C，攪拌 30 分鐘，然後再次冷卻至 -78°C，並向其中添加於 THF (1.5 mL) 中之金剛烷-2-酮 (751 mg, 5.0 mmol)。將所得溶液升溫至室溫，並攪拌 1 小時。藉由添加飽和 NH ₄Cl 溶液 (1 mL)，將反應淬滅。將混合物用乙醚 (10 mL) 稀釋，並用 2 M NaOH 溶液 (10 mL) 洗滌。分離醚層並將其棄去。使用 2 M HCl 溶液將水層酸化至 pH 2，並用 EtOAc (10 mL) 萃取。將 EtOAc 溶液用水 (10 mL)、鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到無色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.98 min；MS m/z 209.0 = [M-H]-

1H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 11.99 (br s, 1H), 4.48 (br s, 1H), 2.55 (s, 2H), 2.20 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.92 – 1.57 (m, 10H), 1.40 (d, J = 12.2 Hz, 2H)。

步驟 2 ：N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羥基-2-金剛烷基)乙醯胺

向 2-(2-羥基-2-金剛烷基)乙酸 (步驟 1) (120 mg, 0.57 mmol)、DIPEA (209 µL, 1.2 mmol) 及 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A) (127 mg, 0.57 mmol) 於 DMF (3 mL) 中之溶液中添加 HATU (239 mg, 0.63 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 1 小時。將所得混合物用 EtOAc (10 mL) 稀釋，並用水 (10 mL)、鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將粗殘餘物用混合物 MeCN/MeOH/水 (1:1:1) 研製，並藉由過濾收集所得固體。將固體用 MeCN/水 (1:1) 及醚洗滌，然後在氮氣流下乾燥，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.20 min；MS m/z 416.3 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 12.23 – 12.11 (m, 1H), 10.01 – 9.89 (m, 1H), 7.96 – 7.80 (m, 1H), 7.46 – 7.10 (m, 7H), 5.13 – 5.03 (m, 1H), 4.14 (s, 2H), 2.69 (s, 2H), 2.28 – 2.19 (m, 2H), 1.92 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.80 (s, 1H), 1.75 – 1.61 (m, 7H), 1.42 (d, J = 11.9 Hz, 2H)。

實例 1.7

2-(2- 金剛烷基 )-N-[2-[(3- 甲氧基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

將 2-(3-甲氧基苯基)乙酸 (83 mg, 0.50 mmol)、HATU (210 mg, 0.55 mmol) 及 DIPEA (0.18 mL, 1.00 mmol) 溶於 DMF (1.5 mL) 中，並將混合物於室溫下攪拌 30 分鐘。添加 2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) (150 mg, 0.50 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液，並將反應混合物於室溫下攪拌過夜。將額外之 2-(3-甲氧基苯基)乙酸 (42 mg, 0.25 mmol)、HATU (105 mg, 0.28 mmol) 及 DIPEA (0.09 mL, 0.5 mmol) 於 DMF (0.5 mL) 中攪拌 10 分鐘，然後將其添加至主反應混合物中。於室溫下攪拌 4.5 小時後，將所得混合物用 EtOAc (10 mL) 及飽和碳酸氫鈉水溶液 (10 mL) 稀釋。分離各相，將有機部分用水 (2 × 20 mL)、鹽水 (10 mL) 洗滌，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗產物，用含 0-100% EtOAc 的庚烷梯度溶析，以得到棕色油狀物。將該油狀物在 EtOAc 研製，以得到灰白色固體。將該固體懸浮於乙酸 (1 mL) 中，並於 60°C 下攪拌 5 小時。冷卻至室溫後， 在真空中濃縮混合物，並將殘餘物分配在 EtOAc (5 mL) 與飽和碳酸氫鈉水溶液 (5 mL) 之間。分離各層，並將有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液 (3 × 5 mL) 洗滌，使其穿過疏水性玻料，並 在真空中濃縮。將所得油狀物與 MeCN 共沸三次，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.83 min；MS m/z 430 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.12 (s, 1H), 9.91 – 9.70 (m, 1H), 8.06 – 7.79 (m, 1H), 7.49 – 7.05 (m, 3H), 6.97 – 6.85 (m, 2H), 6.84 – 6.74 (m, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.45 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.28 – 2.21 (m, 1H), 1.99 – 1.65 (m, 12H), 1.56 – 1.49 (m, 2H)。

以下表格中的實例 (表 Ex1.7) 化合物之製備類似於實例 1.7，由 2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) 及適當的市售酸製得。

Ex.	結構與名稱	滯留時間， [M+H]+ ， 1H NMR
1.7.1	2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1S)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺	LC-MS (方法 A)：Rt 2.65 min；MS m/z 414.3 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.11 – 11.96 (m, 1H), 9.91 – 9.69 (m, 1H), 8.02 – 7.77 (m, 1H), 7.51 – 7.03 (m, 7H), 4.41 – 4.23 (m, 1H), 2.47 – 2.41 (被掩蔽 m, 2H), 2.27 – 2.19 (m, 1H), 1.99 – 1.63 (m, 15H), 1.57 – 1.46 (m, 2H)。
1.7.2	2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1R)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺	LC-MS (方法 A)：Rt 2.63 min；MS m/z 414.3 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 – 12.00 (m, 1H), 9.85 – 9.72 (m, 1H), 7.95 – 7.83 (m, 1H), 7.45 – 7.27 (m, 5H), 7.25 – 7.17 (m, 1H), 7.15 – 7.10 (m, 1H), 4.33 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 2.44 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.27 – 2.19 (m, 1H), 1.97 – 1.91 (m, 2H), 1.88 – 1.64 (m, 13H), 1.55 – 1.48 (m, 2H)。

實例 1.7.3

N-[[5-[[2-(1- 金剛烷基 ) 乙醯基 ] 胺基 ]-1H- 苯并咪唑 -2- 基 ] 甲基 ] 胺甲酸三級丁酯

類似於實例 1.7，由 2-(1-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 C) 及 2-( 三級 -丁氧基羰基胺基)乙酸製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.69 min；MS m/z 439.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.02 (br. s, 1H), 9.67 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.46 – 7.26 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 4.31 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.05 (s, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.71 – 1.57 (m, 12H), 1.41 (s, 9H)。

實例 1.7.4

2-(1- 金剛烷基 )-N-[2-[(2- 甲氧基 -3- 吡啶基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

類似於實例 1.7，由 2-(1-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 C) 及 2-(2-甲氧基-3-吡啶基)乙酸製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.37 min；MS m/z 431.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (br s, 1H), 9.73 – 9.59 (m, 1H), 8.09 (dd, J = 5.0, 1.8 Hz, 1H), 8.01 – 7.79 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 7.2, 1.7 Hz, 1H), 7.41 – 7.07 (m, 2H), 6.96 (dd, J = 7.2, 5.0 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.05 (s, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.69 – 1.58 (m, 12H)。

實例 1.8

2-(2- 金剛烷基 )-N-[2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

將 1 M BBr ₃於 DCM (0.20 mL, 0.20 mmol) 中之溶液逐滴添加至 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (實例 1.7) (44 mg, 0.10 mmol) 於 DCM (3 mL) 中之冰冷溶液中。將混合物在冰浴中攪拌 5 分鐘，然後於室溫下攪拌過夜。將反應混合物在冰浴中再次冷卻，並用 1 M BBr ₃於 DCM (0.10 mL, 0.10 mmol) 中之溶液處理，然後於室溫下繼續攪拌 6 小時。向不斷攪拌之反應混合物中緩慢添加水 (5 mL)。用吸管小心地移除大部分水層。將剩餘 DCM/水性懸浮液在真空下過濾，以得到白色固體。將該固體溶於 MeOH 中，並藉由 C18 逆相層析法純化，用含 10-100% MeCN 的水 (+ 0.1% 甲酸) 溶析，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.57 min；MS m/z 416 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.10 (s, 1H), 9.82 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.48 – 7.04 (m, 3H), 6.74 – 6.70 (m, 1H), 6.69 – 6.66 (m, 1H), 6.62 – 6.58 (m, 1H), 4.03 (s, 2H), 2.45 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.26 – 2.19 (m, 1H), 1.99 – 1.91 (m, 2H), 1.88 – 1.63 (m, 10H), 1.56 – 1.46 (m, 2H)。

實例 1.9

2- 三級 - 丁基 -N-[(5- 氯 -2- 羥基 - 苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

步驟 1 ：2- 三級 -丁基-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯

向 3,4-二胺基苯甲酸甲酯 (200 mg, 1.2 mmol)、2,2-二甲基丙酸 (148 mg, 1.44 mmol) 及 DIPEA (0.25 mL, 1.44 mmol) 於 DMF (7 mL) 中之溶液中添加 HATU (503 mg, 1.32 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 1 小時。添加額外之 2,2-二甲基丙酸 (148 mg, 1.44 mmol)、DIPEA (0.25 mL, 1.44 mmol) 及 HATU (503 mg, 1.32 mmol)，並繼續攪拌過夜。將所得混合物用 EtOAc (15 mL) 稀釋，並用水 (10 mL) 及鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將粗殘餘物溶於乙酸 (7 mL) 中，並於 60°C 下加熱 2 小時，然後於 70°C 下加熱2 小時。冷卻至室溫後， 在真空中濃縮混合物。將殘餘物溶於 EtOAc (10 mL) 中，然後用飽和 NaHCO ₃溶液 (10 mL)、鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗殘餘物，用含 30-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到淺棕色玻狀固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.80 min；MS m/z 233.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，氯仿-d) δ 10.01 (br s, 1H), 8.48 – 8.10 (m, 1H), 7.96 – 7.90 (m, 1H), 7.79 – 7.32 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.52 (s, 9H)。

步驟 2 ：2- 三級 -丁基-1H-苯并咪唑-5-甲酸

向 2- 三級 -丁基-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯 (步驟 1) (213 mg, 0.92 mmol) 於 MeOH (1.5 mL)、THF (1.5 mL) 及水 (1.5 mL) 中之溶液中添加 LiOH (26 mg, 1.1 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌過夜。添加額外之 LiOH (26 mg, 1.1 mmol)，並將反應混合物於室溫下攪拌 8 小時。添加另外的 LiOH (79 mg, 3.3 mmol)，並將混合物攪拌 30 小時。藉由添加 1 M HCl 溶液以使 pH 達到 4，將反應淬滅。將水性混合物用 EtOAc (10 mL)、CHCl ₃/IPA (1:1) (10 mL) 萃取，並且合併之有機萃取物經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到淺粉色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.77 min；MS m/z 219.0 = [M+H]+

步驟 3 ：(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲胺

於 0°C 下，將 5-氯-2-甲氧基-苯甲腈 (2.0 g, 11.93 mmol) 於 THF (30 mL) 中之溶液逐滴添加至鋁氫化鋰 (2.4 M，於 THF 中，7.46 mL，17.9 mmol) 於 THF (22.5 mL) 中之溶液中。添加完成後，將混合物升溫至室溫並攪拌 1 小時。藉由於 0°C 下緩慢添加 1 M NaOH 溶液 (10 mL)，將反應淬滅。將所得混合物用 EtOAc (50 mL) 及 1 M NaOH 溶液 (50 mL) 稀釋，並過濾以去除懸浮之固體。將有機層分離，用鹽水洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到黃色油狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.72 min；MS m/z 172.0，174.0 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz，氯仿-d) δ 7.23 – 7.13 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.78 (s, 2H)。

步驟 4 ：2- 三級 -丁基-N-[(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺

向 2- 三級 -丁基-1H-苯并咪唑-5-甲酸 (步驟 2)(80 mg, 0.37 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液中添加 DIPEA (57 mg, 0.44 mmol) 及 HATU (167 mg, 0.44 mmol)，然後添加 (5-氯-2-甲氧基-苯基)甲胺 (步驟 3) (90%, 84 mg, 0.44 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液，並將混合物於室溫下攪拌 1 小時。將所得混合物用 EtOAc (10 mL) 稀釋，並用水 (10 mL)、鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗殘餘物，用含 50-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到淺粉色玻狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.02 min；MS m/z 372.0/374.0 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz，甲醇-d4) δ 8.08 (br s, 1H), 7.75 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.63 – 7.52 (m, 1H), 7.27 – 7.18 (m, 2H), 6.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。

步驟 5 ：2- 三級 -丁基-N-[(5-氯-2-羥基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺

於 0°C 下向 2- 三級 -丁基-N-[(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (步驟 4) (94%, 124 mg, 0.31 mmol) 於 DCM (1 mL) 中之溶液中添加於 DCM (0.47 mL, 0.47 mmol) 中之 1 M BBr ₃，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。藉由逐滴添加飽和 NaHCO ₃溶液 (5 mL) 並將所得混合物用 EtOAc (10 mL) 及飽和 NaHCO ₃溶液 (5 mL) 稀釋，將反應淬滅。將有機部分分離，用鹽水 (10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，標準溶析方法) 純化粗殘餘物，以得到無色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 1.77 min；MS m/z 358.1/360.1 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 8.08 (s, 1H), 7.74 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 1.49 (s, 9H)。

實例 1.10

N-[[5-( 環庚基甲基胺甲醯基 )-1H- 苯并咪唑 -2- 基 ] 甲基 ] 胺甲酸三級丁酯

步驟 1 ：2-[( 三級-丁氧基羰基胺基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯

向 2-( 三級-丁氧基羰基胺基)乙酸 (3.45 g, 19.70 mmol) 於 DMF (100 mL) 中之攪拌溶液中添加 HATU (8.24 g, 21.67 mmol) 及 DIPEA (3.78 mL, 21.67 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 10 分鐘。添加 3,4-二胺基苯甲酸甲酯 (3.60 g, 21.67 mmol)，並將混合物攪拌 17 小時。將所得混合物用水 (100 mL) 稀釋，並用 EtOAc (6 × 100 mL) 萃取。將合併之有機萃取物用鹽水 (3 × 100 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將中間體溶於乙酸 (50 mL) 中，並於 60°C 下加熱 80 分鐘。將所得混合物 在真空中濃縮，並將殘餘物溶於 EtOAc (50 mL) 中。將有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液 (2 × 30 mL)、鹽水 (2 × 30 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法將其純化，用含 50-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.91 min；MS m/z 306.1 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (br s, 1H), 8.12 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.41 (s, 9H)。

步驟 2 ：2-[( 三級-丁氧基羰基胺基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸

將 2-[(三級-丁氧基羰基胺基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯 (步驟 1) (500 mg, 1.64 mmol) 添加至 LiOH (39 mg, 1.64 mmol) 於 MeOH (5 mL)、THF (5 mL) 及水 (5 mL) 之混合物中之溶液中，並於 50°C 下攪拌 1 小時 40 分鐘。添加額外之 LiOH (39 mg, 1.64 mmol)，並於 50°C 下繼續攪拌 3 小時 35 分鐘。添加另外的 LiOH (117 mg, 4.91 mmol)，使溫度升高至 60°C，並繼續反應過夜。添加額外之 LiOH (390 mg, 16.4 mmol)，並於 60°C 下繼續攪拌 6 小時。添加最後一部分 LiOH (390 mg, 16.4 mmol)，將混合物攪拌並於 60°C 下額外加熱 23 小時。將所得混合物用 1 M HCl 酸化至 pH 4，並用 EtOAc (5 × 10 mL) 萃取。將合併之有機萃取物 在真空中濃縮，以得到無色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.83 min；MS m/z 292.0 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz，甲醇-d4) δ 8.47 – 8.38 (m, 1H), 8.28 – 8.16 (m, 1H), 7.90 – 7.81 (m, 1H), 4.80 – 4.70 (m, 2H), 1.68 – 1.07 (m, 9H)。

步驟 3 ：N-[[5-(環庚基甲基胺甲醯基)-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]胺甲酸三級丁酯

向環庚基甲胺 (74 μL, 0.51 mmol) 及 2-[( 三級-丁氧基羰基胺基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲酸 (步驟 2) (85%, 160 mg, 0.47 mmol) 於 DMF (3 mL) 中之溶液中添加 HATU (195 mg, 0.51 mmol)，並將混合物攪拌 10 分鐘。添加 DIPEA (90 µL, 0.51 mmol)，並將反應混合物於室溫下攪拌 3 小時 30 分鐘。將所得混合物用水 (5 mL) 稀釋，並用 EtOAc (3 × 5 mL) 萃取。將合併之有機萃取物用鹽水 (2 × 5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將殘餘物復溶於 EtOAc (2 mL) 中，用飽和碳酸氫鈉水溶液 (2 × 2 mL) 洗滌，並 在真空中濃縮。藉由 C18 逆相層析法將其純化，用含 10-100% 水的 MeCN (0.1% 氫氧化銨) 溶析，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.52 min；MS m/z 401.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 8.03 (s, 1H), 7.71 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.24 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.91 – 1.78 (m, 3H), 1.76 – 1.68 (m, 2H), 1.67 – 1.59 (m, 2H), 1.59 – 1.42 (m, 12H), 1.33 – 1.23 (m, 3H)。

實例 1.10.1

2- 苄基 -N-[(1- 甲基環己基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 1.10 步驟 3，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及 (1-甲基環己基)甲胺製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.43 min；MS m/z 362.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.46 (br s, 1H), 8.17 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.70 – 7.61 (m, 1H), 7.57 – 7.39 (m, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 4H), 7.27 – 7.20 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.17 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.55 – 1.46 (m, 2H), 1.46 – 1.18 (m, 8H), 0.88 (s, 3H)。

實例 1.10.2

2- 苄基 -N-( 環辛基甲基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 1.10 步驟 3，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及環辛基甲胺製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.62 min；MS m/z 376.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.36 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.67 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 – 7.31 (m, 4H), 7.28 – 7.20 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.10 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 1.86 – 1.78 (m, 1H), 1.70 – 1.60 (m, 4H), 1.57 – 1.38 (m, 8H), 1.30 – 1.22 (m, 2H)。

實例 2.1

N-[[1-[2-[(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 ) 胺基 ]-2- 側氧 - 乙基 ] 環己基 ] 甲基 ] 胺甲酸三級丁酯

將 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A)(50 mg, 0.22 mmol) 添加至 2-[1-[( 三級 -丁氧基羰基胺基)甲基]環己基]乙酸 (67 mg, 0.25 mmol)、HATU (102 mg, 0.27 mmol) 及 DIPEA (0.12 mL, 0.67 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之溶液中，並將反應混合物攪拌 18 小時。將所得混合物分配在 EtOAc (10 mL) 與水 (10 mL) 之間，並分離各相。將有機相用 1 M LiOH 水溶液 (10 mL) 及鹽水 (10 mL) 洗滌。合併之有機萃取物經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到黃色油狀物。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 純化該油狀物，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.61 min；MS m/z 477.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.95 (s, 1H), 7.59 – 7.15 (m, 7H), 4.23 (s, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.33 (s, 2H), 1.67 – 1.55 (m, 4H), 1.53 – 1.44 (m, 13H), 1.44 – 1.31 (m, 2H)。

實例 2.1.1

N-(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 )-2-(4,4- 二氟環己基 ) 乙醯胺

類似於實例 2.1，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A) 及 2-(4,4-二氟環己基)乙酸製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 1.95 min；MS m/z 384.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.92 (s, 1H), 7.43 (br. s, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 4H), 7.28 – 7.11 (m, 2H), 4.20 (s, 2H), 2.32 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.10 – 1.92 (m, 3H), 1.91 – 1.70 (m, 4H), 1.44 – 1.31 (m, 2H)。

實例 2.2

N-[1-[5-[[2-(2- 金剛烷基 ) 乙醯基 ] 胺基 ]-1H- 苯并咪唑 -2- 基 ]-2- 甲氧基 - 乙基 ] 胺甲酸三級丁酯

向 2-( 三級 -丁氧基羰基胺基)-3-甲氧基-丙酸 (36 mg, 0.16 mmol)、2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B)(95%, 50 mg, 0.16 mmol) 及 DIPEA (36 µL, 0.21 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之攪拌溶液中添加 HATU (60 mg, 0.16 mmol)，並將反應混合物於室溫下攪拌 2 小時。 在真空中濃縮所得混合物，並將殘餘物用飽和 NaHCO ₃(10 mL) 及 EtOAc (10 mL) 稀釋。將有機層分離，用水 (2 × 5 mL)、鹽水 (2 × 5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將粗產物溶於乙酸 (1 mL) 中，並於 70°C 下攪拌 2 小時。 在真空中濃縮所得混合物，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(10 mL) 與 EtOAc (10 mL) 之間。將有機層分離，用水 (2 × 5 mL) 洗滌，並經 Na ₂SO ₄乾燥。藉由製備型 HPLC (酸性 pH，早期溶析方法) 純化粗產物，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.80 min；MS m/z 483.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.98 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 8.7, 1.8 Hz, 1H), 5.16 – 4.97 (m, 1H), 3.85 – 3.65 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.56 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.36 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.09 – 2.01 (m, 2H), 1.96 – 1.82 (m, 6H), 1.82 – 1.74 (m, 4H), 1.68 – 1.58 (m, 2H), 1.52 – 1.24 (m, 9H)。

以下表格中的實例 (表 Ex2.2) 化合物之製備類似於實例 2.2，由 2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) 及適當的市售酸製得。

Ex.	結構與名稱	滯留時間， [M+H]+ ， 1H NMR
2.2.1	N-[(R)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯	LC-MS (方法 A)：Rt 3.52 min；MS m/z 529.4 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.35 (s, 1H), 9.98 – 9.74 (m, 1H), 8.10 – 7.87 (m, 1H), 7.56 – 7.09 (m, 7H), 6.63 (br. s, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.46 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.28 – 2.20 (m, 1H), 2.00 – 1.91 (m, 2H), 1.89 – 1.65 (m, 10H), 1.57 – 1.49 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。
2.2.2	N-[(S)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯	LC-MS (方法 A)：Rt 3.51 min；MS m/z 529.4 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.47 – 12.25 (m, 1H), 9.98 – 9.73 (m, 1H), 8.09 – 7.89 (m, 1H), 7.59 – 7.06 (m, 7H), 6.62 (br. s, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.46 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.28 – 2.21 (m, 1H), 1.99 – 1.91 (m, 2H), 1.88 – 1.66 (m, 10H), 1.57 – 1.48 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。
2.2.3	N-[[6-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-乙基-胺甲酸三級丁酯	LC-MS (方法 A)：Rt 3.02 min；MS m/z 467.5 = [M+H]+ 1H NMR (250 MHz, DMSO-d6 VT NMR @353K) δ 11.81 (s, 1H), 9.54 (s, 1H), 8.01 – 7.74 (m, 1H), 7.50 – 7.11 (m, 2H), 4.54 (s, 2H), 3.33 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.48 – 2.44 (被掩蔽 m, 2H), 2.32 – 2.23 (m, 1H), 2.03 – 1.70 (m, 12H), 1.55 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.07 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
2.2.4	N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-(2-甲氧基乙基)胺甲酸三級丁酯	LC-MS (方法 A)：Rt 2.77 min；MS m/z 497.3 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6 + 1 滴 D ₂O) δ 7.93 (br s, 1H), 7.40 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (br s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.52 – 3.36 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 2.43 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.20 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 1.91 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.85 – 1.74 (m, 4H), 1.74 – 1.61 (m, 6H), 1.49 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.44 – 1.12 (m, 9H)。
2.2.5	2-(2-金剛烷基)-N-[2-(2-甲氧基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺	LC-MS (方法 A)：Rt 2.36 min；MS m/z 368.3 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.02 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.43 – 7.02 (m, 2H), 3.73 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.00 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.45 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.98 – 1.92 (m, 2H), 1.87 – 1.78 (m, 4H), 1.78 – 1.65 (m, 6H), 1.55 – 1.48 (m, 2H)。
2.2.6	2-(2-金剛烷基)-N-[2-(3-甲氧基丙基)-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺	LC-MS (方法 A)：Rt 2.24 min；MS m/z 382.3 = [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.01 (s, 1H), 9.80 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.44- 7.02 (m, 2H), 3.38 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.80 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.45 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.01-1.92 (m, 4H), 1.89-1.84 (m, 1H), 1.81 (d, J = 11.2 Hz, 3H), 1.78-1.66 (m, 6H), 1.52 (d, J = 12.4 Hz, 2H)。

實例 2.3

N-[[5-[[2-(2- 金剛烷基 ) 乙醯基 ] 胺基 ]-1H- 苯并咪唑 -2- 基 ] 甲基 ]-N- 甲基 - 胺甲酸三級丁酯

步驟 1 ：N-甲基-N-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]胺甲酸三級丁酯

將 2-[ 三級 -丁氧基羰基(甲基)胺基]乙酸 (1.4 g, 7.4 mmol) 及 HATU (3.38 g, 8.88 mmol) 於 DMF (15 mL) 中之溶液用 4-硝基苯-1,2-二胺 (1.36 g, 8.88 mmol) 及 DIPEA (2.58 mL, 14.8 mmol) 處理，並將混合物於室溫下攪拌 16 小時。將所得混合物用 EtOAc (25 mL) 稀釋，並用水 (3 × 25 mL) 洗滌。將合併之水性部分用 EtOAc (25 mL) 反萃取，並將合併之有機萃取物用飽和 NaHCO ₃水溶液 (25 mL)、鹽水 (25 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將殘餘物溶於乙酸 (10 mL) 中，並於 70°C 下攪拌 3 小時。 在真空中濃縮所得混合物，並將殘餘物分配在 NaHCO ₃(50 mL) 與 EtOAc (50 mL) 之間。將有機層分離，用水 (3 × 50 mL)、鹽水 (50 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥，過濾，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法將其純化，用含 0-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到橙色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.67 min；MS m/z 307 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 (br. s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 8.9, 2.3 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 2.96 (s, 3H), 1.58 – 1.19 (m, 9H)。

步驟 2 ：N-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯

將 N-甲基-N-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]胺甲酸三級丁酯 (步驟 1) (99%, 500 mg, 1.62 mmol) 於 EtOH (10 mL) 中之溶液用氮氣吹掃 (3 次) 並用 10% Pd/C (50% 濕基) (5%, 86 mg, 0.04 mmol) 處理。將混合物置於氫氣環境下，並於室溫下攪拌 16 小時。將所得混合物經 Celite® (過濾材料) 過濾，並 在真空中濃縮，以得到標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.71 min；MS m/z 277.1 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.84 – 11.53 (m, 1H), 7.27 – 7.05 (m, 1H), 6.75 – 6.40 (m, 2H), 4.91 – 4.60 (m, 2H), 4.46 (s, 2H), 2.86 (s, 3H), 1.53 – 1.25 (m, 9H)。

步驟 3 ：N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯

將 2-(2-金剛烷基)乙酸 (中間體 B 步驟 3) (103 mg, 0.53 mmol) 及 HATU (243 mg, 0.64 mmol) 於 DMF (3 mL) 中之溶液用 DIPEA (0.19 mL, 1.06 mmol) 及 N-[(5-胺基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (步驟 2) (98%, 150 mg, 0.53 mmol) 處理，並將混合物於室溫下攪拌 16 小時。將所得混合物用 EtOAc (20 mL) 稀釋，並用水 (3 × 20 mL) 洗滌。有機部分經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由 C18 逆相層析法將其純化，用含 10-100% MeCN 的水 (0.1% 甲酸) 溶析，以得到灰白色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.86 min；MS m/z 453.4 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.98 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.30 – 7.22 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.06 – 2.94 (m, 3H), 2.57 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.40 – 2.33 (m, 1H), 2.09 – 2.01 (m, 2H), 1.96 – 1.83 (m, 6H), 1.82 – 1.75 (m, 4H), 1.64 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 1.57 – 1.29 (m, 9H)。

實例 2.4

N-( 環庚基甲基 )-2-(2,3- 二氫苯并呋喃 -3- 基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

向 2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲酸 (中間體 D) (90%, 61 mg, 0.20 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液中添加 DIPEA (38 µL, 0.22 mmol) 及 HATU (82 mg, 0.22 mmol)，然後添加環庚基甲胺 (27 mg, 0.22 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之溶液，並將混合物於室溫下攪拌 1 小時。將所得混合物用水稀釋，並用 EtOAc (5 mL) 萃取。將有機萃取物用鹽水 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 純化粗殘餘物，以得到無色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.91 min；MS m/z 390.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.04 (br s, 1H), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.90 – 6.84 (m, 2H), 5.08 (dd, J = 9.6, 6.9 Hz, 1H), 5.05 – 5.00 (m, 1H), 4.98 – 4.93 (m, 1H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.80 – 1.70 (m, 3H), 1.66 – 1.61 (m, 2H), 1.58 – 1.52 (m, 2H), 1.51 – 1.43 (m, 2H), 1.42 – 1.35 (m, 2H), 1.21 – 1.14 (m, 2H)。

實例 2.5

2-(2- 金剛烷基 )-N-[2-[ 羥基 ( 苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

步驟 1 ：2-(2-金剛烷基)-N-[2-[甲氧基(苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺

類似於實例 2.2，由 2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) 及 2-甲氧基-2-苯基-乙酸製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.88 min；MS m/z 430.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 – 12.32 (m, 1H), 9.94 – 9.70 (m, 1H), 8.06 – 7.80 (m, 1H), 7.51 – 7.06 (m, 7H), 5.61 – 5.49 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.48 – 2.41 (m, 2H), 2.27 – 2.19 (m, 1H), 1.98 – 1.91 (m, 2H), 1.88 – 1.64 (m, 10H), 1.56 – 1.47 (m, 2H)。

步驟 2 ：2-(2-金剛烷基)-N-[2-[羥基(苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺

將含 1 M BBr ₃的 DCM (0.37 mL, 0.37 mmol) 逐滴添加至 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[甲氧基(苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (步驟 1) (53 mg, 0.12 mmol) 於 DCM (3 mL) 中之溶液中，並將混合物於室溫下攪拌過夜。將所得混合物於室溫下靜置 2 天，然後將溶劑蒸發，以得到白色/黃色固體。將固體懸浮於水 (5 mL) 中並用超音波處理。使用飽和碳酸氫鈉水溶液將酸性水溶液調節至 pH 8。添加 EtOAc (10 mL)，並對混合物進行超音波處理，直至所有固體皆溶解。將有機層分離，用水洗滌，並穿過相分離管柱。 在真空中濃縮混合物，將粗產物懸浮於 MeOH (1 mL) 中並過濾。 在真空中濃縮濾液，然後將殘餘物懸浮於 MeOH (1 mL) 中，短暫加熱並用超音波處理。冷卻至室溫後，過濾懸浮液，棄去固體並藉由 C18 逆相層析法純化濾液，用含 10-100% MeCN 的水 (+0.1% 甲酸) 溶析，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.53 min；MS m/z 416.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.93 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 – 7.48 (m, 2H), 7.45 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.38 – 7.31 (m, 2H), 7.31 – 7.25 (m, 1H), 7.25 – 7.20 (m, 1H), 5.97 (s, 1H), 2.59 – 2.52 (m, 2H), 2.39 – 2.32 (m, 1H), 2.09 – 2.00 (m, 2H), 1.95 – 1.73 (m, 10H), 1.68 – 1.58 (m, 2H)。

實例 3.1

2- 環己基 -N-(2- 苯基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 ) 乙醯胺

向 2-苯基-1H-苯并咪唑-5-胺 (50 mg, 0.24 mmol) 及 DIPEA (84 μL, 0.48 mmol) 於 DCM (5 mL) 中之冷卻 (0°C) 溶液中逐滴添加 2-環己基乙醯氯 (42 mg, 0.26 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 1 小時。將所得混合物用飽和碳酸氫鈉溶液 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 將其純化，以得到標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.29 min；MS m/z 334.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ = 12.96 – 12.55 (m, 1H), 9.98 – 9.71 (m, 1H), 8.27 – 7.95 (m, 3H), 7.66 – 7.06 (m, 5H), 2.29 – 2.15 (m, 2H), 1.88 – 1.54 (m, 6H), 1.38 – 1.09 (m, 3H), 1.06 – 0.90 (m, 2H)。

實例 3.2

N-(2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 基 ) 金剛烷 -1- 甲醯胺

向 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺 (中間體 A) (60 mg, 0.27 mmol) 及 DIPEA (56 µL, 0.32 mmol) 於 DMF (1 mL) 中之冷卻 (0°C) 溶液中添加金剛烷-1-氯化羰基化合物 (59 mg, 0.30 mmol)。將溶液升溫至室溫並攪拌 1 小時。將所得混合物用 EtOAc (5 mL) 稀釋，並用水 (5 mL)、鹽水 (5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥並 在真空中濃縮。將殘餘物懸浮於水 (1.5 mL) 及 MeCN (0.5 mL) 中並過濾，用醚及庚烷洗滌，然後在氮氣流下乾燥，以得到標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.50 min；MS m/z 386.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.14 (s, 1H), 9.06 – 8.97 (m, 1H), 7.92 – 7.82 (m, 1H), 7.41 – 7.21 (m, 7H), 4.13 (s, 2H), 2.04 – 1.99 (m, 3H), 1.93 – 1.90 (m, 6H), 1.72 – 1.69 (m, 6H)。

實例 3.3

N-( 環庚基甲基 )-7- 氟 -2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

步驟 1：2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-5-溴-7-氟-1H-苯并咪唑

向 2-(3-苄氧基苯基)乙酸 (650 mg, 2.68 mmol) 於 DMF (10 mL) 中之溶液中依次添加 HATU (1113 mg, 2.93 mmol) 及 DIPEA (0.85 mL, 4.88 mmol)。將混合物於室溫下在氮氣環境下攪拌 30 分鐘，然後添加 5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺 (500 mg, 2.44 mmol)。於室溫下攪拌過夜後，將所得混合物用 EtOAc (50 mL) 稀釋，並用水 (3 × 50 mL) 及鹽水 (3 × 50 mL) 洗滌。有機部分經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將所得黑色油狀物吸收於乙酸 (10 mL) 中，並於 70°C 下加熱 3 小時，然後使其冷卻至室溫。將混合物用水 (100 mL) 稀釋，然後用 EtOAc (50 mL) 萃取。將有機萃取物用水 (2 × 50 mL)、飽和 NaHCO ₃水溶液 (50 mL)、鹽水 (50 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗產物，用含 0-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到淺棕色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.31 min；MS m/z 411.0/413.0 = [M+H]+

1H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (br. s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.45 – 7.29 (m, 5H), 7.28 – 7.19 (m, 2H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.93-6.86 (m, 2H), 5.07 (s, 2H), 4.15 (s, 2H)。

步驟 2 ：2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-N-(環庚基甲基)-7-氟-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺

根據以下程序，將所有試劑皆加入 COware 設備 (一氧化碳發生系統) 中；

向室 A 中加入 2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-5-溴-7-氟-1H-苯并咪唑 (步驟 1) (83%, 200 mg, 0.40 mmol)、碳酸鈉 (128 mg, 1.21 mmol) 及 XantPhos Pd-G3 (第三代 G3 Buchwald 前觸媒) (19 mg, 0.020 mmol)。依次添加甲苯 (5 mL) 及環庚基甲胺 (77 mg, 0.61 mmol)。將混合物用氮氣脫氣 5 分鐘。然後，將甲苯 (5 mL) 中之甲酸 (46 µL, 1.21 mmol) 添加至室 B 中，然後添加甲磺醯氯 (94 µL, 1.21 mmol)。將裝置用氮氣進一步脫氣 2 分鐘，然後密封。將 TEA (338 µL, 2.42 mmol) 添加至室 B 中 (以生成 CO 氣體)。將密封系統於 100°C 下加熱過夜。將來自室 A 的所得混合物 在真空中濃縮，並將殘餘物吸收於 EtOAc (50 mL) 中。將混合物用水 (2 × 25 mL)、鹽水 (25 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗產物，用含 0-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到淺黃色體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.35 min；MS m/z 486.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 13.20-12.70 (m, 1H), 8.46 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.00 – 7.74 (m, 1H), 7.48 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.36 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.25 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.94 – 6.88 (m, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.80 – 1.67 (m, 3H), 1.67-1.59 (m, 2H), 1.58 – 1.34 (m, 6H), 1.22-1.13 (m, 2H)。

步驟 3 ：N-(環庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺

向 2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-N-(環庚基甲基)-7-氟-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (步驟 2) (75 mg, 0.15 mmol) 於 EtOH (25 mL) 中之溶液中添加 10% Pd/C (50% 濕基) (5%, 33 mg, 0.015 mmol)，並將混合物置於氫氣環境下，並於室溫下攪拌 16 小時。將所得混合物經 Celite® (過濾材料) 過濾，用 EtOH (20 mL) 洗滌。 在真空中濃縮濾液，並藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 純化粗產物，以得到白色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.96 min；MS m/z 396.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.69 (br. s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.45 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.83 (br. s, 1H), 7.47 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.71-6.69 (m, 1H), 6.63 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.10 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.80 – 1.67 (m, 3H), 1.67-1.58 (m, 2H), 1.58 – 1.33 (m, 6H), 1.21-1.12 (m, 2H)。

實例 3.3.1

N-( 環庚基甲基 )-6- 氟 -2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 3.3 (步驟 1-3)，藉由將 5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺 (步驟 1) 替換為 4-溴-5-氟-苯-1,2-二胺來製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.71 min；MS m/z 396.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.44 (br s, 1H), 8.28 – 8.23 (m, 1H), 7.75 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.73 – 6.71 (m, 1H), 6.67 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.10 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.75 – 1.70 (m, 3H), 1.67 – 1.61 (m, 2H), 1.57 – 1.52 (m, 2H), 1.50 – 1.45 (m, 2H), 1.42 – 1.36 (m, 2H), 1.22 – 1.15 (m, 2H)。

實例 3.3.2

N-( 環庚基甲基 )-4- 氟 -2-[(3- 羥基苯基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

類似於實例 3.3 (步驟 1-3)，藉由將 5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺 (步驟 1) 替換為 4-溴-3-氟-苯-1,2-二胺來製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.90 min；MS m/z 396.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.35 (br s, 1H), 8.14 (br s, 1H), 7.37 – 7.33 (m, 1H), 7.31 – 7.26 (m, 1H), 7.10 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.71 – 6.67 (m, 1H), 6.62 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.11 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.77 – 1.70 (m, 3H), 1.67 – 1.60 (m, 2H), 1.58 – 1.52 (m, 2H), 1.51 – 1.44 (m, 2H), 1.43 – 1.35 (m, 2H), 1.22 – 1.14 (m, 2H)。

實例 3.4

N-[2-[5-[[2-(2- 金剛烷基 ) 乙醯基 ] 胺基 ]-1H- 苯并咪唑 -2- 基 ] 乙基 ] 胺甲酸三級丁酯

向 3-( 三級 -丁氧基羰基胺基)丙酸 (75 mg, 0.40 mmol)、2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) (95%, 125 mg, 0.40 mmol) 及 DIPEA (90 μL, 0.52 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之攪拌溶液中添加 HATU (151 mg, 0.40 mmol)，並將反應混合物於室溫下攪拌 2 小時。 在真空中濃縮所得混合物，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(10 mL) 與 EtOAc (10 mL) 之間。將有機層分離，用水 (2 × 5 mL)、鹽水 (2 × 5 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。將所得粗產物溶於乙酸 (2 mL) 中，並於 70°C 下攪拌 2 小時。 在真空中濃縮混合物，並將殘餘物分配在飽和 NaHCO ₃(10 mL) 與 EtOAc (10 mL) 之間。將有機層用水 (2 × 5 mL) 洗滌，並經 Na ₂SO ₄乾燥。藉由製備型 HPLC (鹼性 pH，早期溶析方法) 純化粗產物，以得到灰白色粉末狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.46 min；MS m/z 453.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 7.92 (s, 1H), 7.43 (br s, 1H), 7.18 (br s, 1H), 3.50 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.02 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.56 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.36 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 2.05 (d, J = 14.6 Hz, 2H), 1.98 – 1.83 (m, 6H), 1.83 – 1.73 (m, 4H), 1.64 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.45 – 1.20 (m, 9H)。

實例 3.4.1

2-(2- 金剛烷基 )-N-[2-[(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 甲基 ]-1H- 苯并咪唑 -5- 基 ] 乙醯胺

類似於實例 3.4，由 2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺 (中間體 B) 及 2-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)乙酸製備標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.56 min；MS m/z 419.4 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.06 (br. s, 1H), 9.82 (br. s, 1H), 8.07 – 7.78 (m, 1H), 7.48 – 7.03 (m, 2H), 3.90 (s, 2H), 2.45 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.26 – 2.20 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.98 – 1.90 (m, 2H), 1.89 – 1.66 (m, 10H), 1.56 – 1.47 (m, 2H)。

實例 3.5

2- 苄基 -N-(2,2- 二甲基丙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺

將 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸 (75 mg, 0.3 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之溶液用 EDCI (63 mg, 0.33 mmol)、DMAP (40 mg, 0.33 mmol) 及 HOAt (45 mg, 0.33 mmol) 處理。於室溫下攪拌 5 分鐘後，添加 2,2-二甲基丙-1-胺 (52 mg, 0.59 mmol)，並將反應混合物於室溫下在惰性環境下攪拌 16 小時。將所得混合物用 EtOAc (20 mL) 稀釋，用水 (2 × 10 mL)、鹽水 (2 × 10 mL) 洗滌，並 在真空中濃縮。藉由 HPLC (酸性 pH，標準溶析方法) 純化粗產物，以得到無色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 1.89 min；MS m/z 322.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.69 – 12.33 (m, 1H), 8.29 – 8.20 (m, 1H), 8.16 – 7.86 (m, 1H), 7.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.59 – 7.39 (m, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 4H), 7.27 – 7.20 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.12 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 0.90 (s, 9H)。

實例 3.5.1

2- 苄基 -N-(1,1,2,2- 四甲基丙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲醯胺 ET4146

類似於實例 3.5，由 2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲酸及 2,3,3-三甲基丁-2-胺製備標標題化合物。

LC-MS (方法 A)：Rt 2.31 min；MS m/z 350.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.45 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.55 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.34 – 7.29 (m, 4H), 7.26 – 7.21 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.19 (s, 2H), 1.42 (s, 6H), 0.99 (s, 9H)。

中間體之製備

中間物 A

2- 苄基 -1H- 苯并咪唑 -5- 胺

步驟 1 ：2-苄基-6-硝基-1H-苯并咪唑

將 DIPEA (4.56 mL, 26.12 mmol)、2-苯基乙酸 (1.60 g, 11.75 mmol)、HATU (4.47 g, 11.75 mmol) 及 4-硝基苯-1,2-二胺 (2.0 g, 13.06 mmol) 於 DMF (50 mL) 中之溶液於室溫下攪拌 72 小時。將所得混合物用 EtOAc (60 mL) 稀釋，並用水 (2 × 50 mL)、鹽水 (2 × 50 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥並 在真空中濃縮。將粗產物吸收於乙酸 (50 mL) 中，並於 60°C 下攪拌 20 小時。 在真空中濃縮混合物，並將所得殘餘物分配在 EtOAc (30 mL) 與冷的飽和 NaHCO ₃溶液 (30 mL) 中。分離各相，並將有機相用水 (2 × 30 mL)、鹽水 (30 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到紅色黏稠油狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 1.00 min；MS m/z 254.0 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.98 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07 (dd, J = 8.9, 2.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.40 – 7.30 (m, 4H), 7.30 – 7.21 (m, 1H), 4.26 (s, 2H)。

步驟 2 ：2-苄基-1H-苯并咪唑-5-胺

向 2-苄基-5-硝基-1H-苯并咪唑 (步驟 1) (3.1 g, 12.24 mmol) 於 MeOH (40.5 mL) 及乙酸 (13.5 mL) 中之冷卻 (0°C) 溶液中添加鋅粉 (4.8 g, 73.44 mmol)，將反應混合物升溫至室溫，並攪拌 20 分鐘。將所得混合物經 Celite® (過濾材料) 過濾，並用 MeOH 洗滌。 在真空中濃縮濾液，並將粗殘餘物溶於 EtOAc (50 mL) 及飽和 NaHCO ₃水溶液 (50 mL) 中。過濾所得雙相混合物，然後將濾液的各相分離。將水層用 CHCl ₃/IPA (2:1, 3 × 20 mL) 萃取，並 在真空中濃縮合併之有機部分。將粗產物溶於 3 M HCl 水溶液 (需要加熱以使其溶解) 中，然後用 2 M NaOH 處理，直至固體沉澱物持續存在。過濾未能分離產物，因此 在真空中濃縮合併之固體與濾液，以得到棕色油狀物。藉由 C18 逆相管柱層析法將其純化，用含 10-100% MeCN 的水 (0.1% 甲酸) 溶析，以得到粉色玻狀固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.65 min；MS m/z 224.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.41 – 7.28 (m, 6H), 6.82 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H)。

中間物 B

2-(2- 金剛烷基 )-N-(3,4- 二胺基苯基 ) 乙醯胺

步驟 1 ：2-(2-亞金剛烷基)乙酸乙酯

將 2-二乙氧基磷醯基乙酸乙酯 (7.26 mL, 36.61 mmol) 逐滴添加至 NaH (60%，分散於礦物油中 (1.86 g, 46.6 mmol)) 於 THF (100 mL) 中之冷卻 (0°C) 懸浮液中。於 0°C 下攪拌 30 分鐘後，添加金剛烷-2-酮 (5.0 g, 33.28 mmol)，將混合物升溫至室溫，並攪拌 2 小時。將所得混合物用 DCM (100 mL) 稀釋並用水 (100 mL) 洗滌。將水性部分用 DCM (100 mL) 萃取，合併之有機萃取物經 MgSO ₄乾燥並 在真空中濃縮，以得到無色油狀物。藉由矽膠層析法純化該油狀物，用含 0-20% EtOAc 的庚烷溶析，以得到無色油狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 1.43 min；MS m/z 221.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，氯仿-d) δ 5.58 (s, 1H), 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.06 (s, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.00 – 1.90 (m, 6H), 1.88 – 1.78 (m, 6H), 1.27 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。

步驟 2 ：2-(2-金剛烷基)乙酸乙酯

將 2-(2-亞金剛烷基)乙酸乙酯 (步驟 1) (95%, 14.0 g, 60.37 mmol) 及 Pd/C (10%, 6.42 g, 6.04 mmol) 於 EtOH (125 mL) 中之懸浮液置於氫氣環境下，並攪拌 18 小時。所得混合物經玻璃濾紙過濾，並將濾餅用 EtOH (2 × 10 mL) 洗滌。 在真空中濃縮濾液，以得到無色油狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 1.47 min；MS m/z 223.0 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，氯仿-d) δ 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.44 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.23 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.91 – 1.75 (m, 8H), 1.71 (d, J = 10.9 Hz, 4H), 1.62 – 1.50 (m, 3H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。

步驟 3 ：2-(2-金剛烷基)乙酸

將 2-(2-金剛烷基)乙酸乙酯 (步驟 2) (100%, 18.3 g, 82.31 mmol) 於 MeOH (200 mL) 及 2 M 氫氧化鈉水溶液 (82.31 mL, 164.63 mmol) 中之溶液於 70°C 下攪拌 2 小時。將混合物冷卻至室溫，並 在真空中濃縮。將所得溶液用水 (200 mL) 稀釋，並添加 6 M HCl 水溶液 (約 30 mL)，以形成白色沉澱。添加 EtOAc (300 mL)，並將各相分離。將水性部分用 EtOAc (200 mL) 進一步萃取，並將合併之有機萃取物用鹽水 (200 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到白色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 1.15 min；MS m/z 193.4 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，氯仿-d) δ 2.50 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 1.93 – 1.77 (m, 8H), 1.74 (d, J = 11.2 Hz, 4H), 1.56 (d, J = 12.5 Hz, 2H)。

步驟 4 ：2-(2-金剛烷基)-N-(4-胺基-3-硝基-苯基)乙醯胺

將 HATU (13.66 g, 35.91 mmol) 添加至 2-(2-金剛烷基)乙酸 (步驟 3) (6.34 g, 32.65 mmol) 於 DMF (60 mL) 中之冷卻 (0°C) 溶液中。在 1 分鐘內逐滴添加 DIPEA (8.53 mL, 48.97 mmol)，並將所得溶液於 0°C 下攪拌 5 分鐘，並於室溫下攪拌 10 分鐘。將溶液再次冷卻至 0°C，並添加 2-硝基苯-1,4-二胺 (5.0 g, 32.65 mmol)。將所得溶液於 0°C 下攪拌 1 小時，並在升溫至室溫後，用水 (60 mL) 稀釋。添加 EtOAc (100 mL) 及更多的水 (40 mL)，並分離各層。將水層用 EtOAc (100 mL) 萃取，並將合併之有機萃取物用飽和碳酸氫鈉水溶液 (2 × 100 mL)、10% 碳酸鉀溶液 (2 × 100 mL) 洗滌，然後在真空下過濾。將雙相濾液置於分液漏斗中，並分離各層。使有機層穿過相分離 Isolute® 卡匣，並 在真空中濃縮，以得到深黑色/棕色/紅色膠狀物。添加 DCM (約 80 mL)，並攪拌懸浮液。添加更多 DCM，並在真空下過濾懸浮液，用 DCM 洗滌，並在真空下乾燥，以得到紅色/棕色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 1.22 min；MS m/z 330.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.88 (s, 1H), 8.40 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 9.1, 2.5 Hz, 1H), 7.31 (s, 2H), 7.03 – 6.90 (m, 1H), 2.41 (d,J= 7.6 Hz, 2H), 2.21 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 1.95 – 1.60 (m, 12H), 1.56 – 1.46 (m, 2H)。

步驟 5 ：2-(2-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺

將 2-(2-金剛烷基)-N-(4-胺基-3-硝基-苯基)乙醯胺 (步驟 4) (4.0 g, 12.14 mmol) 於 EtOH (60 mL) 中之溶液用氮氣吹掃，並用 Pd/C (10%, 1.03 g, 0.97 mmol) 處理。將混合物置於氫氣環境下，並於室溫下攪拌過夜。將所得混合物經 Celite® (過濾材料) 過濾，用 EtOAc 洗滌，並 在真空中濃縮，以得到棕色泡沫狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 0.97 min；MS m/z 300.2 = [M+H]+ (100%，在 215 nm 下)

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.27 (s, 1H), 6.81 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.53 (dd, J= 2.3, 6.5 Hz, 1H), 6.38 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.60 – 4.07 (m, 4H), 2.33 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 2.20 – 2.13 (m, 1H), 1.95 – 1.62 (m, 12H), 1.55 – 1.42 (m, 2H)。

中間體 C

2-(1- 金剛烷基 )-N-(3,4- 二胺基苯基 ) 乙醯胺

步驟 1 ：2-(1-金剛烷基)-N-(4-胺基-3-硝基-苯基)乙醯胺

將 2-硝基苯-1,4-二胺 (3.15 g, 20.59 mmol) 添加至 2-(1-金剛烷基)乙酸 (4.0 g, 20.59 mmol)、HATU (8.61 g, 22.65 mmol) 及 DIPEA (5.38 mL, 30.88 mmol) 於 DMF (20 mL) 中之溶液中。於室溫下攪拌 18 小時後，將反應混合物分配在 EtOAc (100 mL) 與水 (100 mL) 之間。在雙相混合物中形成黑色沉澱。濾出固體並將其棄去。分離各相，並將有機層用水 (100 mL) 及鹽水 (2 × 50 mL) 洗滌，經 MgSO ₄乾燥，並 在真空中濃縮，以得到棕色/黑色油狀物。將該油狀物在 DCM (約 40 mL) 中研製，並過濾所得懸浮液，以得到紅色/黑色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 1.24 min；MS m/z 330.2 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.73 (s, 1H), 8.39 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 9.1, 2.5 Hz, 1H), 7.29 (s, 2H), 6.96 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 2.00 (s, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.69 – 1.63 (m, 3H), 1.63 – 1.54 (m, 9H)。

步驟 2 ：2-(1-金剛烷基)-N-(3,4-二胺基苯基)乙醯胺

將 2-(1-金剛烷基)-N-(4-胺基-3-硝基-苯基)乙醯胺 (步驟 1) (4.82 g, 14.63 mmol) 及 Pd/C (10%, 1.24 g, 1.17 mmol) 於 EtOH (50 mL) 中之懸浮液置於氫氣環境下，並攪拌 18 小時。將所得混合物經 Celite® (過濾材料) 過濾，並將固體用 EtOH (3 × 10 mL) 洗滌。 在真空中濃縮濾液，以得到紫色固體狀標題化合物。

LC-MS (方法 B)：Rt 0.93 min；MS m/z 300.3 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.12 (s, 1H), 6.83 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.52 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.54 – 4.22 (m, 4H), 1.96 – 1.88 (m, 5H), 1.70 – 1.54 (m, 12H)。

中間物 D

2-(2,3- 二氫苯并呋喃 -3- 基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸

步驟 1 ：2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯

向 2,3-二氫苯并呋喃-3-甲酸 (50 mg, 0.30 mmol) 於 DMF (2 mL) 中之溶液中依次添加 DIPEA (59 µL, 0.34 mmol)、HATU (127 mg, 0.34 mmol) 及 3,4-二胺基苯甲酸甲酯 (56 mg, 0.34 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 16 小時。將所得混合物用水 (5 mL) 稀釋，並用 EtOAc (2 × 5 mL) 萃取。將合併之有機萃取物用鹽水 (5 mL) 洗滌，並 在真空中濃縮。將粗殘餘物溶於乙酸 (2 mL) 中，並於 60°C 下加熱 3 小時。將所得混合物用 EtOAc (10 mL) 稀釋，並用飽和 NaHCO ₃溶液 (2 × 10 mL) 洗滌，經 Na ₂SO ₄乾燥，並 在真空中濃縮。藉由矽膠層析法純化粗殘餘物，用含 0-100% EtOAc 的庚烷溶析，以得到淡橙色玻狀標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.97 min；MS m/z 294.9 = [M+H]+

1H NMR (500 MHz，甲醇-d4) δ 8.22 (br s, 1H), 7.91 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.55 (br s, 1H), 7.23 – 7.14 (m, 2H), 6.92 – 6.84 (m, 2H), 5.09 – 5.03 (m, 1H), 4.96 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.87-4.83 (被掩蔽 m, 1H), 3.91 (s, 3H)。

步驟 2 ：2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲酸

向 2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯 (步驟 1) (90%, 69 mg, 0.21 mmol) 於 MeOH (0.3 mL)、THF (0.3 mL) 及水 (0.3 mL) 中之溶液中添加 LiOH (5.6 mg, 0.23 mmol)，並將混合物於室溫下攪拌 2 小時。添加另外的 LiOH (5.6 mg, 0.23 mmol)，並將混合物於 50°C 下加熱過夜。將所得混合物冷卻至室溫，並使用 1 M HCl 將其酸化至 pH 4。將混合物用水稀釋，並用氯仿/IPA (2:1) 萃取。使合併之有機萃取物穿過疏水性玻料並 在真空中濃縮，以得到標題化合物。

LC-MS (方法 E)：Rt 0.84 min；MS m/z 280.9 = [M+H]+

生物實例

用於偵測重組細胞中 TMEM16A 活性的自動化全細胞箝膜測定 （ whole-cell patch clamp assay ）

細胞培養及製備

在 T-75 燒瓶中，將穩定表現人 TMEM16A (TMEM16Aabc 變異體；Luis Galietta，Insituto Giannina，Italy) 的 Fisher 大鼠甲狀腺 (FRT) 細胞置於 Coon 改良的 Hams F-12 培養基 (Sigma) 中培養，該培養基補充有 10% (v/ v) 胎牛血清、青黴素-鏈黴素 (10,000 U/mL/10000 µg/mL)、G-418 (750 µg/mL)、L-麩醯胺酸 (2 mM) 及碳酸氫鈉溶液 (7.5% v/v)。在約 90% 匯合時，藉由用 Detachin (BMS Biotechnology) 與 0.25% (w/v) 胰蛋白酶-EDTA 的 2:1 (v/v) 混合物分離，收穫細胞以用於實驗。使用由 CHO-S-SFM II (Sigma)、25 mM HEPES (Sigma) 及大豆胰蛋白酶 (Sigma) 組成的培養基將細胞稀釋至密度為 3.5 – 4.5 × 10 ⁶個細胞/mL。

全細胞箝膜記錄術

使用自動化平面箝膜系統 (Qpatch, Sophion) 對 FRT-TMEM16A 細胞進行全細胞箝膜測定。簡言之，一旦在細胞與平面記錄陣列之間形成高電阻 (GOhm) 密封，即用抽吸脈衝使箝膜斷開，以建立箝膜技術的全細胞記錄組態。該測定採用以下溶液 (所有試劑皆購自 Sigma)：

細胞內溶液 (mM)：N-甲基-D-葡萄糖胺 130、CaCl ₂18.2、MgCl ₂1、HEPES 10、EGTA 10、BAPTA 20、Mg-ATP 2，pH 7.25，325 mOsm (含蔗糖)。

細胞外溶液 (mM)：N-甲基-D-葡萄糖胺 130、CaCl ₂2、MgCl ₂1、HEPES 10，pH 7.3，320 mOsm (含蔗糖)。

細胞內溶液緩衝細胞內鈣離子所需的含量，以提供約 20% 的最大 TMEM16A 介導之電流 (鈣離子的 EC ₂₀) 活化。將細胞電壓箝制在 -70 mV 的保持電位，並在 0.05 Hz 下施加組合電壓階躍 (至 +70 mV)/斜坡 (-90 mv 至 +90 mV)。經過一段時間的電流穩定後，施加溶於 100% (v/v) DMSO 並隨後經細胞外溶液稀釋的測試化合物，以生成累積濃度響應曲線。將每種濃度的測試化合物孵育 5 分鐘，然後添加下一種濃度。在測試最終濃度後，添加最高濃度的已知活性陽性調節劑或 TMEM16A 抑制劑 CaCCinhA01 (Del La Fuente 等人，2008) 以定義測定的上限及下限。

藉由測量添加化合物後電流的增加來量化化合物活性，並將其表示為基線 TMEM16A 電流位準的增加百分比。確定每種濃度下的電流增加百分比，並使用 Qpatch 軟體或 Graphpad Prism v6.05 將資料作為濃度的函數作圖，提供產生最大效應 50% 的濃度 (EC ₅₀) 及最大功效 (基線增加百分比)。

計算結果的方法如圖 1 所示，其中示出由 Qpatch TMEM16A 測定所得到的示例跡線。在圖 1 中，I _BL等於基線電流，I _[#1]等於測試化合物濃度 1 孵育期間的峰值電流，依此類推。

將 +70 mV 下的峰值 TMEM16A 電流作為測定期間的時間函數作圖。在穩定期後測量基線電流 (I _BL)。每次添加化合物所引起的電流增加藉由來以下方法來確定：測定孵育期間的峰值電流，並扣除前一個記錄期內的電流，然後將其表示為基線電流的百分比。對於圖 1 中的測試化合物濃度 1，計算公式為： (I _[#1]- I _BL/ I _BL) × 100

對於每種額外的測試濃度，電流之增加藉由扣除前一個孵育期內的電流並標準化基線值來確定；對於圖 1 中的測試濃度 2，計算公式為： (I _[#2]– I _[#1}/ I _BL) × 100

將每種測試濃度的值作為濃度的累積函數作圖，例如對於測試濃度 2，結果將為濃度 1 加上濃度 2 期間所測量的峰值變化的總和。

示例化合物在 3.33 μM 下的 % 增強結果顯示於表 2 中，從中可以看出本發明之化合物能夠顯著提高 TMEM16A 電流位準。

表 2 – 3.33 μ M 測試化合物溶液的 % 增強及計算得出的 EC ₅₀ 值

實例	3.33 μM 下的平均 % 增強	平均 EC ₅₀(µM)
1.1	127.42	0.250
1.2	111.46	0.225
1.2.1	145.99	0.441
1.2.2	144.25	0.203
1.2.3	153.06	0.792
1.3	78.45	0.563
1.3.1	134.61	0.425
1.3.2	92.92	0.581
1.4	81.29	0.384
1.5	162.43	1.084
1.5.1	105.43	0.222
1.5.2	135.94	0.227
1.5.3	93.11	0.566
1.5.4	218.70	0.834
1.6	83.87	0.231
1.7	136.32	0.587
1.7.1	156.93	0.273
1.7.2	143.30	0.294
1.7.3	114.41	1.12
1.7.4	148.28	1.31
1.8	126.24	0.260
1.9	52.097	-
1.10	110.07	0.892
1.10.1	124.47	0.210
1.10.2	76.062	0.192
2.1	214.76	0.860
2.1.1	47.606	0.582
2.2	197.3	0.622
2.2.1	97.67	0.907
2.2.2	127.18	0.948
2.2.3	154.64	1.035
2.2.4	190.41	1.079
2.2.5	112.54	0.758
2.2.6	167.14	0.780
2.3	200.58	1.069
2.4	133.35	0.658
2.5	58.86	0.150
3.1	74.05	0.287
3.2	58.487	0.332
3.3	113.72	0.554
3.3.1	95.75	0.471
3.3.2	90.25	0.598
3.4	99.79	0.471
3.4.1	116.41	0.576
3.5	143.57	1.018
3.5.1	89.54	0.779

綿羊黏膜纖毛清除率 (MCC)

綿羊中之 MCC 按照 Coote 等人 (NVP-QBE170: an inhaled blocker of the epithelial sodium channel with a reduced potential to induce hyperkalaemia, Br J Pharmacol. 2015 Jun; 172(11): 2814–2826) 所述的方法進行測量。簡言之，將成年母羊用乾粉乳糖摻合物形式的測試化合物進行鼻插管。經由氣管導管霧化向綿羊投予高滲鹽水及水對照。使用氣霧化之锝標記硫膠體 ( ^99mTc-SC)，藉由伽馬閃爍攝影測量不同劑量之測試化合物或對照對 MCC 的影響。投予測試物質後，以選定的時間間隔向母羊投予 ^99mTc-SC。定期拍攝連續圖像，並對右肺之計數進行衰減校正，將其表示為相對於基線圖像所清除的放射性百分比 (% 清除)。在投予放射性噴霧劑後，以一定的時間間隔比較 ^99mTc-SC 清除率差異。另外參見：Hirsh 等人 ,Pharmacological properties of N-(3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carbonyl)-N'-4-[4-(2,3-dihydroxypropoxy)phenyl]butyl-guanidine methanesulfonate, a novel epithelial sodium channel blocker with potential clinical efficacy for cystic fibrosis lung disease, J Pharmacol Exp Ther. 2008 Apr; 325(1):77-88；及 Coote 等人, Camostat attenuates airway epithelial sodium channel function in vivo through the inhibition of a channel-activating protease, J Pharmacol Exp Ther. 2009 May; 329(2):764-74。

本文所引用的所有文獻及專利文件皆盡可能完整地以引用方式併入本文。參考文獻Accurso FJ, Moss RB, Wilmott RW, Anbar RD, Schaberg AE, Durham TA, Ramsay BW; TIGER-1 Investigator Study Group (2011) Denufosol tetrasodium in patients with cystic fibrosis and normal to mildly impaired lung function. Am J Respir Crit Care Med, 183(5):627 – 634. Boucher RC (2007) Evidence for airway surface dehydration as the initiating event in CF airway disease. J Intern Med., 261(1):5-16. Caputo A, Caci E, Ferrera L, Pedemonte N, Barsanti C, Sondo E, Pfeffer U, Ravazzolo R, Zegarra-Moran O & Galietta LJ (2008) TMEM16A, a membrane protein associated with calcium-dependent chloride channel activity. Science, 322(5901):590 – 594. Del La Fuente R, Namkung W, Mills A & Verkman AS (2008) Small molecule screen identifies inhibitors of a human intestinal calcium-activated chloride channel. Mol Pharmacol, 73(3):758-768. Kellerman D, Rossi Mospan A, Engels J, Schaberg A, Gorden J & Smiley L (2008) Denufosol: a review of studies with inhaled P2Y(2) agonists that led to Phase 2. Pulm Pharmacol Ther, 21(4):600 – 607. Kunzelmann K & Mall M (2003) Pharmacotherapy of the ion transport defect in cystic fibrosis: role of purinergic receptor agonists and other potential therapeutics. Am J Respir Med, 2(4):299 – 309. Matsui H, Grubb BR, Tarran R, Randell SH, Gatzy JT, Davis CW and Boucher RC (1998) Evidence for periciliary liquid layer depletion, not abnormal ion composition, in the pathogenesis of cystic fibrosis airways disease. Cell, 95(7):1005-15. Moss RB (2013) Pitfalls of drug development: lessons learned from trials of denufosol in cystic fibrosis. J Pediatr, 162(4):676 – 680. Pedemonte N & Galietta LJ (2014) Structure and function of TMEM16 proteins (anoctamins). Physiol Rev, 94(2):419 – 459. Pezzulo AA, Tang XX, Hoegger MJ, Abou Alaiwa MH, Ramachandran S, Moninger TO, Karp PH, Wohlford-Lenan CL, Haagsman HP, van Eijk M, Banfi B, Horswill AR, Stoltz DA, McCray PB Jr, Welsh MJ & Zabner J (2012) redcued airway surface pH impairs bacterial killing in the porcine cystic fibrosis lung. Nature, 487(7405):109 – 113. Yang YD, Cho H, Koo JY, Tak MH, Cho Y, Shim WS, Park SP, Lee J, Lee B, Kim BM, Raouf R, Shin YK & Oh U (2008) TMEM16 confers receptor-activated calcium-dependent chloride conductance. Nature, 455(7217):1210 – 1215.

圖 1 為生物實例中使用的全細胞箝膜 (Qpatch) TMEM16A 增效劑測定所得到的示例跡線，並示出該測定中使用的方法。

Claims

一種通式 (I) 化合物，其包含所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：
(I) 其中： R ¹為 i. [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹； n 為 1 或 2；各 R ⁷獨立地為 H、苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁸為 H、視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁹為 C _2-4烷基；或 ii. CH(R ¹¹)(R ¹²)； R ¹¹為 H、OH、CH ₃、CH ₂OH 或與在如以下所定義的 R ¹²上之取代基結合的基團； R ¹²係選自視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的環己基；以及苯基或 5 或 6 員雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經一個或多個選自以下之取代基取代：OH、甲氧基、甲基、氟、氯及與 R ¹¹和其所連接的原子一起形成與該苯基或雜芳基基團 R ¹²稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基；或 iii. 視情況經 OR ¹⁵取代的 C _2-6烷基；或 R ¹⁵為甲基或乙基；或 iv. 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代； Z 係選自 -NH-C(O)- 及 -C(O)-NH-； Y 係選自鍵、-CH ₂- 及 -CH(CH ₃)-；或 Y 與如以下所定義的 R ²結合；以及 R ²係選自： i. 3 至 10 員碳環系統或 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基環系統，其中該芳基、雜芳基或碳環系統視情況經一個或多個選自下列之取代基取代：氟；氯；CN；硝基；OH；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 C _1-6烷基；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 O(C _1-6烷基)；以及視情況經一個或多個選自鹵基及 OH 之取代基取代的 CH ₂NH-C(O)O-C _1-6烷基；或 Y 及 R ²一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團或基團 CH ₂-C(R ¹⁷)(R ¹⁸)-CH ₂-N(R ¹⁹)R ²⁰；其中 R ¹⁷、R ¹⁸及 R ¹⁹中之每一個獨立地為 H 或 C _1-4烷基；以及 R ²⁰為 C _1-4烷基或 C _1-4鹵代烷基； R ³、R ⁴及 R ⁵各自獨立地為 H 或 F；條件是： A. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹¹為 H 或甲基且 R ¹²為未經取代或經 1 或 2 個取代基取代的苯基，其中該等取代基係選自鹵基及甲氧基： R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1 或 2 個選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基及 5 員雜芳基環之取代基取代；以及 B. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹²為苯基且 R ¹¹與在 R ¹²上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ¹²稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： i. R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1、2 或 3 個取代基取代，其中該等取代基係選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4鹵代烷基及 C _1-4烷氧基；以及 ii. Y 及 R ²不會結合形成 C _3-10烷基；以及 C. 當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹¹為 H 且 R ¹²為環己基： R ²不為視情況經 1、2 或 3 個取代基取代之苯基，其中該等取代基係選自鹵基、甲基、甲氧基；未經取代的 5 至 8 員雜芳基。
如請求項 1 之化合物，其中 R ²為未經取代的環己基且 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)，其中 R ¹¹及 R ¹²係如請求項 1 中所定義。
如請求項 2 之化合物，其中 R ¹²為視情況經 OH 或甲氧基取代之苯基。
如請求項 3 之化合物，其中 R ¹為未經取代的苄基且 R ²為未經取代的環己基。
如請求項 4 之化合物，其係選自： N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-環己基-乙醯胺； 2-苄基-N-(環己基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺；以及其鹽和溶劑合物。
如請求項 1 之化合物，其中 R ³、R ⁴及 R ⁵中的一個或多個為 F。
如請求項 6 之化合物，其中： R ³為 F 且 R ⁴及 R ⁵為 H；或 R ⁴為 F 且 R ³及 R ⁵為 H；或 R ⁵為 F 且 R ³及 R ⁴為 H。
如請求項 1 之化合物，其中 Y 為鍵。
一種通式 (I) 化合物，其包含所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：
(I) 其中： R ¹為 i. [CH(R ⁷)] _n-N(R ⁸)-C(O)OR ⁹； n 為 1 或 2；各 R ⁷獨立地為 H、苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁸為 H、視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁹為 C _2-4烷基；或 ii. CH(R ¹¹)(R ¹²)； R ¹¹為 H、OH、CH ₃、CH ₃OH 或與在如以下所定義的 R ¹²上之取代基結合的基團； R ¹²係選自視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的環己基；以及苯基或 5 或 6 員雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經一個或多個選自以下之取代基取代：OH、甲氧基、甲基、氟、氯及與 R ¹¹和其所連接的原子一起形成與該苯基或雜芳基基團 R ¹²稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基；或 iii. 視情況經 OR ¹⁵取代的 C _2-6烷基； R ¹⁵為甲基或乙基；或 iv. 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代； Z 係選自 -NH-C(O)- 及 -C(O)-NH-； Y 係選自鍵、-CH ₂- 及 -CH(CH ₃)-；或 Y 與如以下所定義的 R ²結合；以及 R ²係選自： i. 3 至 10 員碳環系統或 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基環系統，其中該芳基、雜芳基或碳環系統視情況經一個或多個選自下列之取代基取代：氟；氯；CN；硝基；OH；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 C _1-6烷基；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 O(C _1-6烷基)；以及視情況經一個或多個選自鹵基及 OH 之取代基取代的 CH ₂NH-C(O)O-C _1-6烷基；或 Y 及 R ²一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團或基團 CH ₂-C(R ¹⁷)(R ¹⁸)-CH ₂-N(R ¹⁹)R ²⁰；其中 R ¹⁷、R ¹⁸及 R ¹⁹中之每一個獨立地為 H 或 C _1-4烷基；以及 R ²⁰為 C _1-4烷基或 C _1-4鹵代烷基； R ³、R ⁴及 R ⁵各自獨立地為 H 或 F；其中該通式 (I) 化合物係選自： N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-環己基-乙醯胺 (化合物 1.1)； 2-苄基-N-(環己基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2)； N-(1-金剛烷基甲基)-2-苄基-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.1)； 2-苄基-N-[(1-甲基環戊基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.2)； 2-苄基-N-[(1R)-1-環己基乙基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.2.3)； N-(環庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3)； N-(環庚基甲基)-2-[(1-羥基環己基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3.1)； N-(環庚基甲基)-2-(2-羥基-1-苯基-乙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.3.2)； N-(環己基甲基)-2-[(3-羥基苯基)甲基]-3H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.4)； 2-(1-金剛烷基)-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5)； N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]-2-(1-甲基環己基)乙醯胺 (化合物 1.5.1)； 2-環庚基-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5.2)； 2-環己基-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.5.3)； 2-(1-金剛烷基)-N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)乙醯胺 (化合物 1.5.4)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羥基-2-金剛烷基)乙醯胺 (化合物 1.6)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1S)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.1)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(1R)-1-苯基乙基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.2)； N-[[5-[[2-(1-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 1.7.3)； 2-(1-金剛烷基)-N-[2-[(2-甲氧基-3-吡啶基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.7.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 1.8)； 2-三級-丁基-N-[(5-氯-2-羥基-苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.9)； N-[[5-(環庚基甲基胺甲醯基)-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 1.10)； 2-苄基-N-[(1-甲基環己基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.10.1)； 2-苄基-N-(環辛基甲基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 1.10.2)； N-[[1-[2-[(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)胺基]-2-側氧-乙基]環己基]甲基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.1)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-(4,4-二氟環己基)乙醯胺 (化合物 2.1.1)； N-[1-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-2-甲氧基-乙基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2)； N-[(R)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.1)； N-[(S)-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.2)； N-[[6-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-乙基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.3)； N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-(2-甲氧基乙基)胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.2.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-(2-甲氧基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.2.5)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-(3-甲氧基丙基)-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.2.6)； N-[[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-N-甲基-胺甲酸三級丁酯 (化合物 2.3)； N-(環庚基甲基)-2-(2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 2.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[羥基(苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 2.5)； 2-環己基-N-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)乙醯胺 (化合物 3.1)； N-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)金剛烷-1-甲醯胺 (化合物 3.2)； N-(環庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3)； N-(環庚基甲基)-6-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3.1)； N-(環庚基甲基)-4-氟-2-[(3-羥基苯基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.3.2)； N-[2-[5-[[2-(2-金剛烷基)乙醯基]胺基]-1H-苯并咪唑-2-基]乙基]胺甲酸三級丁酯 (化合物 3.4)； 2-(2-金剛烷基)-N-[2-[(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)甲基]-1H-苯并咪唑-5-基]乙醯胺 (化合物 3.4.1)； 2-苄基-N-(2,2-二甲基丙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.5)； 2-苄基-N-(1,1,2,2-四甲基丙基)-1H-苯并咪唑-5-甲醯胺 (化合物 3.5.1)；以及其鹽和溶劑合物。
一種通式 (IA) 化合物，其包含所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：
(IA) 其中 R ²、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 係如請求項 1 中針對通式 (I) 所定義，以及： R ^1a為 i. [CH(R ^7a)] _n-N(R ^8a)-C(O)OR ^9a； n 為 1 或 2；各 R ⁷獨立地為 H、苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基； R ⁸為 H、視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基；條件是當 n 為 1，R ^7a及 R ^8a不會兩者均為 H； R ^9a為 C _2-4烷基；或 ii. CH(R ^11a)(R ^12a)； R ^11a為 H、OH、CH ₃、CH ₂OH 或與在如以下所定義的 R ^12a上之取代基結合的基團； R ^12a係選自苯基或 5 或 6 員雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經一個或多個選自以下之取代基取代：OH、甲氧基、甲基、氟、氯及與 R ^11a和其所連接的原子一起形成與該苯基或雜芳基基團 R ^12a稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基；條件是當 R ^12a為視情況經一個或多個選自 OH、甲氧基、甲基、氟或氯之取代基取代的苯基或 6 員雜芳基，R ^11a不為 H；或 iii. 經 OR ^15a取代的甲基或乙基；或 R ^15a為甲基或乙基；或 iv. 6 至 10 員芳基或 5 至 10 員雜芳基，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自氟、氯、OH 或甲氧基之取代基取代；條件是： A. 當 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)；其中 R ^11a為 H 或甲基且 R ^12a為未經取代或經 1 或 2 個取代基取代的苯基，其中該等取代基係選自鹵基及甲氧基： i. R ²不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1 或 2 個選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基及 5 員雜芳基環之取代基取代；以及 B. 當 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)；其中 R ^12a為苯基且 R ^11a與在 R ^12a上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ^12a稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： i. R ^2a不為苯基或雜芳基，其中該苯基或雜芳基視情況經 1、2 或 3 個取代基取代，其中該等取代基係選自鹵基、C _1-4烷基、C _1-4鹵代烷基及 C _1-4烷氧基；以及 ii. Y 及 R ²不會結合形成 C _3-10烷基。
如請求項 10 之化合物，其中 R ^1a為 [CH(R ^7a)] _n-N(R ^8a)-C(O)OR ^9a，其中 n、R ^7a、R ^8a及 R ^9a係如請求項 10 中所定義。
如請求項 11 之化合物，其中 R ^7a係選自 H、苯基、甲基、CH ₂OH 及 CH ₂OCH ₃。
如請求項 11 之化合物，其中 R ^8a係選自 H、視情況經甲氧基取代的甲基及視情況經甲氧基取代的乙基。
如請求項 11 之化合物，其中 R ^9a為 C _3-4烷基。
如請求項 11 之化合物，其中 n 為 1 且 R ^7a及 R ^8a不會兩者均為 H。
如請求項 15 之化合物，其中： R ^7a為 H 且 R ^8a為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基；或 R ^7a為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及 OCH ₃之取代基取代的 C _1-3烷基且 R ^8a為 H；或 R ^7a為苯基或視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基且 R ^8a為視情況經一個或多個選自 OH 及甲氧基之取代基取代的 C _1-3烷基。
如請求項 10 之化合物，其中 R ^1a為 CH(R ^11a)(R ^12a)，其中 R ^11a及 R ^12a係如請求項 10 中所定義。
如請求項 17 之化合物，其中： R ^12a為苯基或 6 員雜芳基基團，其兩者中任一者視情況經一個或多個選自 OH、甲氧基、氟及氯之取代基取代；以及 R ^11a為 OH、CH ₃或 CH ₃OH。
如請求項 17 之化合物，其中 R ^12a為視情況經 OH 或甲氧基取代之吡啶基基團。
如請求項 17 之化合物，其中 R ^12a為視情況經一個或兩個甲基基團取代的 5 員雜芳基基團且 R ^11a為 H、OH、CH ₃或 CH ₃OH。
如請求項 17 之化合物，其中 R ^12a為具有與 R ^11a和其所連接的原子一起形成與該苯基基團 R ^12a稠合的 5 或 6 員含氧雜環之取代基之苯基，且其中該苯基基團 R ^12a視情況含有如請求項 10 中所定義的其他取代基。
如請求項 21 之化合物，其中與 R ^11a結合之該 R ^12a取代基係位在毗鄰該苯基基團 R ^12a連結至 CH(R ^11a) 所處位置之該苯基基團 R ^12a上的位置，且經結合的取代基為其中 CH ₂部分視情況以 -O- 替代之 2 或 3 員烴鏈。
如請求項 10 之化合物，其中 R ^1a為經 OR ¹⁵取代之乙基或經 OR ¹⁵取代之 n-丙基。
如請求項 10 之化合物，其中 R ^1a為未經取代的苯基。
一種通式 (IB) 化合物，其包含所有互變異構形式、所有鏡像異構物和同位素變異物以及其鹽和溶劑合物：
(IB) 其中 R ¹、R ³、R ⁴、R ⁵、Y 及 Z 係如請求項 1 中針對通式 (I) 所定義，以及： R ^2b係選自：經一個或多個選自以下之取代基取代的 3 至 10 員碳環系統：氟；氯；CN；硝基；OH；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 C _1-6烷基；視情況經一個或多個選自鹵基、OH 及 CN 之取代基取代的 O(C _1-6烷基)；以及視情況經一個或多個選自鹵基及 OH 之取代基取代的 CH ₂NH-C(O)O-C _1-6烷基；或 Y 及 R ^2b一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團或基團 CH ₂-C(R ^17b)(R ^18b)-CH ₂-N(R ^19b)R ^20b；其中 R ^17b、R ^18b及 R ^19b中之每一個獨立地為 H 或 C _1-4烷基；以及 R ^20b為 C _1-4烷基或 C _1-4鹵代烷基；條件是：當 R ¹為 CH(R ¹¹)(R ¹²)；其中 R ¹²為苯基且 R ¹¹與在 R ¹²上之取代基一起和其等所連接的原子結合以形成與該苯基環 R ¹²稠合的 5 或 6 員環，其中該 5 或 6 員環視情況經 C _1-3烷基取代： Y 及 R ^2b不會結合形成 C _3-8烷基。
如請求項 25 之化合物，其中 R ^2b為如請求項 25 中所定義之經取代的 3 至 10 員碳環系統。
如請求項 26 之化合物，其中 R ^2b為經 OH 取代之金剛烷基。
如請求項 26 之化合物，其中 R ^2b為碳環系統，該碳環系統係選自環戊基、環己基、環庚基及環辛基，其中任一者係經一個或多個選自 OH、氟、C _1-6烷基、O(C _1-6烷基) 及 NH-C(O)O-C _1-6烷基，尤其是 OH、C _1-4烷基、O(C _1-4烷基)及 CH ₂NH-C(O)O-C _1-4烷基之取代基取代。
如請求項 25 之化合物，其中 Y 為鍵。
如請求項 25 之化合物，其中： Y 及 R ^2b一起形成未經取代的 C _3-8烷基基團；或 Y 及 R ^2b一起形成基團 CH ₂-C(R ^17b)(R ^18b)-CH ₂-N(R ^19b)R ^20b；其中 R ^17b、R ^18b及 R ^19b中之每一個獨立地為 H 或甲基且 R ^20b為 C _1-4鹵代烷基。
一種治療或預防受 TMEM16A 調控影響的疾病及病症之方法，該方法包含向需要此治療之患者投予有效量之如請求項 1 至 30 中任一項之化合物。
如請求項 31 之方法，其中受 TMEM16A 調控影響的該等疾病及病症係選自呼吸道疾病及病症、口乾 (口乾症)、腸道過度活動、膽汁鬱積及眼部病症。
如請求項 32 之方法，其中：該等呼吸道疾病及病症係選自囊性纖維化、慢性阻塞性肺病 (COPD)、慢性支氣管炎、肺氣腫、包含非囊性纖維化支氣管擴張在內的支氣管擴張、氣喘及原發性纖毛運動障礙；及/或該口乾 (口乾症) 係由薛格連氏症候群(Sjorgens syndrom)、放射治療或異源藥物所造成；及/或該腸道過度活動係與胃消化不良、胃輕癱、慢性便秘或腸躁症候群有關；及/或該眼部病症為乾眼症。
一種醫藥組成物，其包含如請求項 1 至 30 中任一項之化合物及醫藥上可接受之賦形劑。
如請求項 34 之醫藥組成物，其進一步包含可用於治療或預防呼吸道病症之額外活性劑，作為同時、依序或分開使用於治療受 TMEM16A 調控影響的疾病或病症之組合製劑。
如請求項 35 之醫藥組成物，其中該額外活性劑係選自： β2 腎上腺素受體促效劑，諸如奧西那林(metaproterenol)、異丙基腎上腺素 (isoproterenol)、喘息定 (isoprenaline)、沙丁胺醇(albuterol)、沙布坦錠(salbutamol)、福莫特羅(formoterol)、沙美特羅(salmeterol)、茚達特羅(indacaterol)、特布他林(terbutaline)、異丙喘寧(orciprenaline)、甲磺酸比托特羅(bitolterol mesylate)、吡布特羅(pirbuterol)、奧達特羅(olodaterol)、維蘭特羅(vilanterol)及阿比特羅(abediterol)；抗組織胺，例如組織胺 H ₁受體拮抗劑，諸如氯雷他定(loratadine)、西替利嗪(cetirizine)、地氯雷他定(desloratadine)、左西替利嗪(levocetirizine)、非索非那定(fexofenadine)、阿司咪唑(astemizole)、氮卓斯汀(azelastine)及氯菲安明(chlorpheniramine)或 H ₄受體拮抗劑；去氧核醣酶 α；皮質類固醇，諸如強體松(prednisone)、培尼皮質醇(prednisolone)、氟尼縮松(flunisolide)、丙酮特安皮質醇(triamcinolone acetonide)、二丙酸倍氯米松(beclomethasone dipropionate)、亞丁皮質醇(budesonide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、糠酸莫美他松(mometasone furoate)及糠酸氟替卡松(fluticasone furoate)；白三烯拮抗劑，諸如孟魯司特(montelukast)及紮魯司特(zafirlukast)；抗副交感神經化合物，特別是蕈毒鹼拮抗劑，諸如異丙托銨(ipratropium)、噻托溴銨(tiotropium)、格隆溴銨(glycopyrrolate)、阿地溴銨(aclidinium)及蕪地溴銨(umeclidinium)； CFTR 修復療法 (例如 CFTR 增效劑、修正劑或增幅劑)，諸如依伐卡托(Ivacaftor)、QBW251、巴馬卡托(Bamacaftor) (VX659)、依來卡托(Elexacaftor) (VX445)、VX561/CPT-656、VX152、歐拉卡托(Olacaftor) (VX440)、GLP2737、GLP2222、GLP2451、PTI438、PTI801、PTI808、FDL-169 及 FDL-176，及 CFTR 修正劑，諸如魯瑪卡托(Lumacaftor)及堤扎卡托(Tezacaftor)或其組合 (例如依伐卡托、堤扎卡托及依來卡托之組合)； ENaC 調控劑，特別是 ENaC 抑制劑，諸如阿米洛利(amiloride)、VX-371、AZD5634、QBW276、SPX-101、BI443651、BI1265162 及 ETD001，以及具有陽離子及適當的陰離子之化合物，該陽離子係選自： 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)乙基]-6-(4-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}哌啶-1-羰基)-1,3-二乙基-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-{[2-(4-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}哌啶-1-基)乙基]胺甲醯基}-1,3-二乙基-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-5-[4-({雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}甲基)哌啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-[(3R)-3-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}吡咯啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-6-[(3S)-3-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}吡咯啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1r,4r)-4-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}環己基]胺甲醯基}-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓； 2-[({3-胺基-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲醯胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1s,4s)-4-{雙[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基]胺基}環己基]胺甲醯基}-1H-1,3-苯并二唑-3-鎓；該適當的陰離子為例如鹵化物、硫酸根、硝酸根、磷酸根、甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、富馬酸根、檸檬酸根、酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、杏仁酸根、甲磺酸根或對甲苯磺酸根；抗生素；抗病毒藥，諸如利巴韋林(ribavirin)及神經胺酸酶抑制劑，例如紮那米韋(zanamivir)；抗真菌藥，例如 PUR1900；氣道保濕劑 (滲透劑)，諸如高張鹽水及甘露醇 (Bronchitol®)；以及黏液溶解劑，例如N-乙醯基半胱胺酸。
一種製備如請求項 1 之通式 (I) 化合物之方法，其包含： A. 針對通式 (I) 化合物，其中 Z 為 -NH-C(O)-：使通式 (II) 化合物：
(II) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如請求項 1 中所定義與通式 (III) 化合物反應：
(III) 其中 Y 及 R ²係如請求項 1 中所定義且 R ¹¹為 OH 或鹵素，特別是 Cl；以及其中當 R ¹¹為 OH，該反應係在偶合劑的存在下且在鹼性條件下進行；或 B. 針對通式 (I) 化合物，其中 Z 為 -NH-C(O)-：使通式 (V) 化合物：
(V) 其中 R ¹係如請求項 1 中所定義；與通式 (VII) 化合物反應
(VII) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如請求項 1 中上述所定義；其中該反應為兩步法，其包含在偶合劑的存在下且在鹼性條件下使該通式 (V) 化合物與該通式 (VII) 化合物反應，接著以酸處理產物；或 C. 針對通式 (I) 化合物，其中 Z 為 -C(O)-NH-：使通式 (XII) 化合物：
(XII) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如請求項 1 中所定義；與通式 (XIII) 化合物：
(XIII) 其中 R ²及 Y 係如請求項 1 中所定義；在偶合劑的存在下且在鹼性條件下反應；或 D. 針對通式 (I) 化合物，其中 Z 為 -C(O)-NH-：使如此請求項中上述所定義的通式 (XIII) 化合物與通式 (XVI) 化合物：
(XVI) 其中 R ¹、R ³、R ⁴及 R ⁵係如請求項 1 中所定義且 R ¹⁶為鹵素；及一氧化碳反應；或 E. 針對通式 (I) 化合物，其中 Z 為 -C(O)-NH-：使如此請求項中上述所定義的通式 (V) 化合物與通式 (XX) 化合物反應
(XX) 其中 R ²、R ³、R ⁴及 R ⁵係如請求項 1 中上述所定義；其中該反應為兩步法，其包含在偶合劑的存在下且在鹼性條件下使該通式 (V) 化合物與該通式 (XX) 化合物反應，接著以酸處理產物。
如請求項 1 之化合物，其中該化合物係選自：
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；或其鏡像異構物或醫藥上可接受之鹽。