TW202204318A - 諾羅病毒及冠狀病毒複製之抑制劑 - Google Patents

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Abstract

本發明提供抑制病毒在生物樣本或患者中之複製、降低生物樣本或患者中之病毒量及治療患者之病毒感染的方法，其包括向該生物樣本或患者投與有效量之由式I表示之化合物、表A、B或C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

Description

諾羅病毒及冠狀病毒複製之抑制劑
本揭示案大體上係關於諾羅病毒（norovirus）及冠狀病毒（coronavirus）複製之抑制劑，及藉由向需要治療之患者投與該等抑制劑來治療或預防諾羅病毒及冠狀病毒感染之方法。
諾羅病毒為涉及全世界非細菌性胃腸炎爆發之重要腸道病原體。諾羅病毒主要經由糞-口途徑在人與人之間出現，且亦經由被污染的食物或水出現。由於病毒在環境中之持久性，間接污染亦為可能的。人類諾羅病毒屬於杯狀病毒科諾羅病毒屬，且為具有正義單股RNA基因體之無包膜病毒。諾羅病毒株分類為七組。屬於GI、GII及GIV組之病毒感染人類，而GII、GIII、GIV、GV、GVI及GVII NoV組在動物中加以描述。
冠狀病毒為在人類中引起感冒至嚴重急性呼吸道症候群（severe acute respiratory syndrome；SARS）之一系列疾病的常見病毒科。冠狀病毒亦可在動物中引起多種疾病。冠狀病毒為包膜之正股RNA病毒，其名稱來源於其在電子顯微照片中之特徵性冠狀外觀。冠狀病毒在網巢病毒目內分類為一科，該等病毒使用一組嵌套的mRNA進行複製。冠狀病毒亞科進一步分類為四個屬：α、β、γ及δ冠狀病毒。人類冠狀病毒（HCoV）屬於此等屬中之兩者：α冠狀病毒（包含HCoV-229E及HCoV-NL63）及β冠狀病毒（包含HCoV-HKU1、HCoV-OC43、中東呼吸道症候群冠狀病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus；MERS-CoV）、嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus；SARS-CoV）及SARS-CoV-2）。
2012年，沙烏地阿拉伯（Saudi Arabia）出現了一種新型冠狀病毒，且被稱為中東呼吸道症候群冠狀病毒（MERS-CoV）。所報導之MERS-CoV感染病例中有約一半導致死亡，且所報導病例中之大部分出現在中老年男性中。所報導病例中僅少數涉及患有輕度呼吸道疾病之個體。已發現MERS-CoV之人類與人類傳播係可能的，但非常有限。2019年底，中國武漢（Wuhan, China）出現另一種新型冠狀病毒。此病毒被稱為SARS-CoV-2、2019-nCoV或武漢冠狀病毒（Wuhan coronavirus），且其引起2019年底及2020年之世界範圍大流行。
鑒於此等病毒之廣泛傳播及潛在的健康影響，需要用於治療諾羅病毒及冠狀病毒感染之藥物。
本揭示案大體上係關於治療諾羅病毒及冠狀病毒感染之方法、係關於抑制諾羅病毒及冠狀病毒之複製之方法、係關於降低諾羅病毒及冠狀病毒之量之方法且係關於可用於該等方法之化合物及組合物。
本揭示案提供式（I）之化合物及其醫藥學上可接受之鹽：
Figure 02_image003
， 其中 Z為O、NR1 或一鍵；各RN 獨立地為H或C1-6 烷基；R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基或5至8員N-雜環，其中環氮視情況經COO-C1-6 烷基取代；R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基或C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基視情況經1-3個R7 取代，且該碳環基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、O-C1-6 伸烷基-C6-10 芳基及CO2 C1-6 烷基；R3 為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C0-6 伸烷基-視情況經1-2個鹵基取代之C6-10 芳基或胺基酸側鏈；各R4 獨立地為鹵基、OH、CN、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、側氧基（=O）、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 、COORA 、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基，或兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合3-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基、SO2 -C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、-[C(O)]1-2 -(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、-[C(O)]1-2 -NRN RN 、C(O)-Y-H或-[C(O)]1-2 -NRN -Y-X-A，其中A為H、C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；Y為一鍵、C1-6 伸烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 伸烷基或C1-6 伸烯基，其中C1-6 伸烷基及C1-6 伸烯基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基；X為一鍵、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)；各R6 獨立地為H、C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)；各R7 獨立地為鹵基、C1-6 鹵烷基、C2-6 烯基、C3-5 碳環基或C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基視情況經1-2個鹵基取代，或兩個R7 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合C3-6 碳環基環；RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基；n為0-3；m為0-5；且o為0-5。在一些實施例中，Z為O或NR1 ；各RN 獨立地為H或C1-6 烷基；R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基或5至8員N-雜環，其中環氮視情況經COO-C1-6 烷基取代；R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基或C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基視情況經1-2個獨立地選自C1-6 鹵烷基及C2-6 烯基之取代基取代，且碳環基、芳基及雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基及CO2 C1-6 烷基；R3 為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基或胺基酸側鏈；各R4 獨立地為鹵基、OH、CN、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、側氧基（=O）、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 、COORA 、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基，或兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；R5 為C1-6 伸烷基-OH、視情況經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、視情況經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO、C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、CONRN RN 或C(O)-C(O)NRN -Y-X-A，其中A為C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；Y為視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基；X為空、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)；各R6 獨立地為H、C1-6 伸烷基-OH、視情況經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、視情況經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)；RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基；n為0-3；m為0-5；且o為0-5。
進一步提供向生物樣本或患者投與安全且有效量之如本文所揭示，例如如由式I表示之化合物或表A、B或C之化合物的方法。
本文亦提供藉由向生物樣本或患者投與有效量之如本文所揭示，例如如由式I表示之化合物或表A、B或C之化合物降低該生物樣本或患者中之病毒量的方法。
進一步提供治療或預防患者之病毒感染之方法，其包括向該患者投與有效量之如本文所揭示，例如如由式I表示之化合物或表A、B或C之化合物。
亦提供醫藥組合物，其包括如本文所揭示，例如如由式I表示之化合物或表A、B或C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑、載劑、佐劑或媒劑。
亦提供本文所述之化合物用於抑制或減少病毒在生物樣本或患者中之複製、用於降低生物樣本或患者中之病毒量或用於治療患者之病毒感染的用途。
本文進一步提供本文所述之化合物用於製造用以治療患者之病毒感染之藥物、用於降低生物樣本或患者中之病毒量或用於抑制病毒在生物樣本或患者中之複製的用途。
本文提供化合物及其在治療或預防病毒感染（例如諾羅病毒或冠狀病毒感染）中之用途。亦提供本文所述之化合物、或其醫藥學上可接受之鹽、或包括此類化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥學上可接受之組合物的用途，其用於抑制病毒在生物樣本或患者中之複製、用於降低生物樣本或患者中之病毒量（降低病毒滴度）及用於治療患者之病毒感染。
除非另有指示，否則本文中所描繪之結構亦欲包含結構之所有異構（例如對映異構、非對映異構、順反異構、構形異構及旋轉異構）形式。舉例而言，除非特定指示僅異構體中之一者，否則本揭示案中包含每一不對稱中心、(Z)及(E)雙鍵異構體及(Z)與(E)構形異構體之R與S構形。因此，本發明化合物之單一立體化學異構體以及對映異構、非對映異構、順/反異構、構形異構及旋轉異構混合物屬於本揭示案之範疇內。在一些情況下，本文所揭示之化合物為立體異構體。「立體異構體」係指一或多個立體異構中心之對掌性不同的化合物。立體異構體包含對映異構體及非對映異構體。本文所揭示之化合物可能以單一立體異構體或立體異構體之混合物形式存在。除非另外論述，否則本文中所示之化合物的立體化學指示相對立體化學，而非絕對立體化學。如本文中所指示，單一立體異構體、非對映異構體或對映異構體係指為至少超過50%所指示立體異構體、非對映異構體或對映異構體且在一些情況下至少90%或95%所指示立體異構體、非對映異構體或對映異構體的化合物。
除非另有指示，否則本揭示案之化合物之所有互變異構形式在本揭示案之範疇內。
另外，除非另有指示，否則本文所描繪之結構亦欲包含僅在存在一或多個經同位素增濃之原子的方面不同之化合物。舉例而言，除了氫經氘或氚置換或碳經13 C或14 C增濃之碳置換外之具有本發明結構之化合物均在本揭示案之範疇內。該等化合物適用作例如生物分析中之分析工具或探針。該等化合物（尤其氘類似物）亦可為治療上適用的。
本揭示案之化合物在本文中藉由其化學結構及/或化學名稱定義。在藉由化學結構與化學名稱提及化合物且化學結構與化學名稱矛盾時，化學結構決定化合物之身分。 化合物
本文提供式（I）之化合物及其醫藥學上可接受之鹽：
Figure 02_image005
其中 Z為O、NR1 或一鍵； 各RN 獨立地為H或C1-6 烷基； R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基或5至8員N-雜環，其中環氮視情況經COO-C1-6 烷基取代； R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基或C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，且C1-6 伸烷基視情況經1-3個R7 取代，且該碳環基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、O-C1-6 伸烷基-C6-10 芳基及CO2 C1-6 烷基； R3 為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C0-6 伸烷基-視情況經1-2個鹵基取代之C6-10 芳基或胺基酸側鏈； 各R4 獨立地為鹵基、OH、CN、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、側氧基（=O）、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 、COORA 、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基，或 兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合3-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基、SO2 -C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、-[C(O)]1-2 -(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、-[C(O)]1-2 -NRN RN 、C(O)-Y-H或-[C(O)]1-2 -NRN -Y-X-A，其中A為H、C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； Y為一鍵、C1-6 伸烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 伸烷基或C1-6 伸烯基，其中C1-6 伸烷基及C1-6 伸烯基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基； X為一鍵、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)； 各R6 獨立地為H、C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)； 各R7 獨立地為鹵基、C1-6 鹵烷基、C2-6 烯基、C3-5 碳環基或C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基視情況經1-2個鹵基取代，或 兩個R7 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合C3-6 碳環基環； RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基； n為0-3；m為0-5；且o為0-5。
在一些實施例中，Z為O或NR1 ； 各RN 獨立地為H或C1-6 烷基； R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基或5至8員N-雜環，其中環氮視情況經COO-C1-6 烷基取代； R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基或C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基視情況經1-2個獨立地選自C1-6 鹵烷基及C2-6 烯基之取代基取代，且該碳環基、芳基及雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基及CO2 C1-6 烷基； R3 為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基或胺基酸側鏈； 各R4 獨立地為鹵基、OH、CN、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、側氧基（=O）、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 、COORA 、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基，或 兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO、C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、CONRN RN 或C(O)-C(O)NRN -Y-X-A，其中A為C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； Y為視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基； X為空、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)； 各R6 獨立地為H、C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)； RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基； n為0-3；m為0-5；且o為0-5。
如本文所用，術語「烷基」或「伸烷基」意謂飽和直鏈或分支鏈烴。術語Cn 意謂烷基具有「n」個碳原子。舉例而言，C4 烷基係指具有4個碳原子之烷基。C1-6 烷基係指具有涵蓋整個範圍（亦即1至8個碳原子）之碳原子數的烷基，以及所有亞基（例如1-6、2-6、1-5、2-6、1-4、2-5、1、2、3、4、5及6個碳原子）。特定實例包含但不限於甲基、乙基、異丙基、正丁基、二級丁基及三級丁基。
如本文所用，術語「鹵素」及「鹵基」意謂F、Cl、Br或I。
術語「碳環」（或「碳環基」）係指非芳族單環、稠合、橋聯或螺環系統，其環原子為碳，且其可為飽和的或具有一或多個不飽和單元。碳環可具有五至八個環碳原子。在一些實施例中，碳原子數為5至6。在一些實施例中，碳原子數為6。「稠合」雙環系統包括共用兩個鄰接環原子之兩個環。橋聯雙環基團包括共用三個或四個相鄰環原子之兩個環。螺雙環系統共用一個環原子。環烷基可包含環烯基。特定實例包含但不限於環己基、環戊基、環丙基及環丁基。碳環未經取代或如本文所述經取代。
如本文所用，術語「雜環」係指非芳族單環、稠合、螺或橋聯環系統，其可為飽和的或含有一或多個不飽和單元，具有五至八個環原子，其中一或多個（例如一至三個或一個、兩個或三個）環原子為選自N、S及O之雜原子。「N-雜環」指示環雜原子中之至少一者為氮原子。在一些實施例中，雜環包括5-6個環成員。在一些實施例中，雜環包括5個環成員。在一些實施例中，雜環包括6個環成員。在一些實施例中，雜環為哌啶基。雜環之實例包含但不限於
Figure 02_image007
啶基、哌啶基、哌
Figure 02_image009
基、吡咯啶基、吡唑啶基、咪唑啶基、氮雜環庚烷基、二氮雜環庚烷基、三氮雜環庚烷基、氮雜環辛基、二氮雜環辛基、三氮雜環辛基、
Figure 02_image011
唑啶基、異
Figure 02_image011
唑啶基、噻唑啶基、異噻唑啶基、氧氮雜環辛基、氧氮雜環庚烷基、噻氮環庚烷基、噻氮環辛基、苯并咪唑酮基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、N-嗎啉基（包含例如3-N-嗎啉基、4-N-嗎啉基）、2-N-硫代嗎啉基、3-N-硫代嗎啉基、4-N-硫代嗎啉基、1-吡咯啶基、2-吡咯啶基、3-吡咯啶基、吡咯啶-2-酮、1-四氫哌
Figure 02_image009
基、2-四氫哌
Figure 02_image009
基、3-四氫哌
Figure 02_image009
基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-噻唑啶基、3-噻唑啶基、4-噻唑啶基、1-咪唑啶基、2-咪唑啶基、4-咪唑啶基、5-咪唑啶基、吲哚啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、苯并二硫雜環戊烷基、苯并二噻烷基、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮基及1,3-二氫-咪唑-2-酮基。雜環未經取代或如本文所述經取代。
術語「芳基」係指芳環基團僅具有碳環原子（通常六至十個），且包含單環芳環，諸如苯基及稠合多環芳環系統，其中兩個或更多個碳環芳環彼此稠合。在一些實施例中，芳基為苯基。芳基環未經取代或如本文所述經取代。
術語「雜芳基」係指雜環，其為芳族的，具有五至八個成員（例如5至6個成員），包含單環雜芳環及多環芳環，其中單環芳環與一或多個其他芳環稠合。雜芳基具有一或多個選自N、O及S之環（例如1至4、1至3、1、2、3或4個）雜原子。如本文所用之術語「雜芳基」之範疇內亦包含芳環與一或多個非芳環（碳環或雜環)「稠合」的基團，其中基團或連接點位於芳環上。雜芳基之實例包含吡啶基、吡
Figure 02_image009
基、嘧啶基、嗒
Figure 02_image009
基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、
Figure 02_image011
唑基、異
Figure 02_image011
唑基、
Figure 02_image011
二唑基、噻唑基、異噻唑基或噻二唑基，包含例如2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-異
Figure 02_image011
唑基、4-異
Figure 02_image011
唑基、5-異
Figure 02_image011
唑基、2-
Figure 02_image011
二唑基、5-
Figure 02_image011
二唑基、2-
Figure 02_image011
唑基、4-
Figure 02_image011
唑基、5-
Figure 02_image011
唑基、3-吡唑基、4-吡唑基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-嗒
Figure 02_image009
基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-三唑基、5-三唑基、四唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、異噻唑基、1,2,3-
Figure 02_image011
二唑基、1,2,5-
Figure 02_image011
二唑基、1,2,4-
Figure 02_image011
二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、吡
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基及1,3,5-三
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基。雜芳基環未經取代或如本文所述經取代。
如本文所用，術語「胺基酸側鏈」係指胺基酸之側鏈，例如丙胺酸之甲基、纈胺酸之異丙基、白胺酸之異丁基、異白胺酸之二級丁基。側鏈之所涵蓋胺基酸包含丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸、組胺酸、異白胺酸、白胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。
如本文所述，本揭示案之化合物可視情況經諸如一般說明或藉由本揭示案之具體類別、亞類及物種所例示的一或多個取代基取代。應瞭解，片語「視情況經取代」可與片語「經取代或未經取代」互換使用。一般而言，術語「經取代」無論是否放在術語「視情況」之後皆係指既定結構中之一或多個氫基團經指定取代基之基團置換。除非另有指示，否則視情況經取代之基團可在該基團之每一可取代位置處具有一取代基。當既定結構中超過一個位置可經超過一個選自指定群組之取代基取代時，在各位置處該取代基可為相同的或不同的。
在一些情況下，至少一個RN 為H。在一些情況下，至少一個RN 為C1-6 烷基。在一些情況下，各RN 為H。在一些情況下，至少一個RN 為C1-6 烷基，例如甲基。在一些情況下，各RN 為C1-6 烷基，例如甲基。
在一些情況下，Z為O或NR1 。在一些情況下，Z為O或一鍵。在一些情況下，Z為O。在一些情況下，Z為一鍵。在各種情況下，Z為NR1 。在一些情況下，R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基。在一些情況下，R1 為未經取代之C5-8 碳環基。在一些情況下，R1 為未經取代之C5-6 碳環基。在一些情況下，R1 為環戊基。在一些情況下，R1 為環己基。在一些情況下，R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基。在一些情況下，R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-6 碳環基。在一些情況下，R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5 碳環基。在一些情況下，R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C6 碳環基。在一些情況下，R1 為經C1 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5 碳環基。在一些情況下，R1 為經C1 伸烷基-C6-10 芳基取代之C6 碳環基。在一些情況下，R1 為經苯甲基取代之C5-6 碳環基。在一些情況下，R1 為經苯甲基取代之C5 碳環基。在一些情況下，R1 為經苯甲基取代之C6 碳環基。
在一些情況下，R1 為5至8員N-雜環，其中環氮經COO-C1-6 烷基取代。在一些情況下，R1 為5至6員N-雜環，其中環氮經COO-C1-6 烷基取代。在一些情況下，R1 為6員N-雜環，其中環氮經COO-C1-6 烷基取代。在一些情況下，R1 為6員N-雜環，其中N-雜環環氮經COO-三級丁基取代。
在一些情況下，R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基或C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基經1-3個R7 取代。在一些情況下，R2 為C1-6 烷基。在一些情況下，R2 為甲基。在一些情況下，R2 為C1-6 伸烷基-C6-10 芳基。在一些情況下，R2 為C1-6 伸烷基-C6 芳基。在一些情況下，R2 為苯甲基。在一些情況下，R2 為C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基。在一些情況下，R2 為具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基。在一些情況下，R2 為C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基。在一些情況下，R2 之C1-6 伸烷基經1-3個R7 取代。在一些情況下，R2 之C1-6 伸烷基經1個R7 取代。在一些情況下，R2 之C1-6 伸烷基經2個R7 取代。在一些情況下，R2 之C1-6 伸烷基經3個R7 取代。在一些情況下，R2 之C1-6 伸烷基未經取代。在一些情況下，R2 之碳環基、雜環基、芳基或雜芳基經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、O-C1-6 伸烷基-C6-10 芳基及CO2 C1-6 烷基。在一些情況下，R2 之碳環基、雜環基、芳基或雜芳基經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基及CO2 C1-6 烷基。在一些情況下，R2 之碳環基、雜環基、芳基或雜芳基未經取代。
在一些情況下，R3 為C1-6 烷基。在一些情況下，R3 為C4 烷基。在一些情況下，R2 為
Figure 02_image023
。在一些情況下，R3 為C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基。在一些情況下，R3 為C1-6 伸烷基-C6 碳環基。在一些情況下，R3 為
Figure 02_image025
。在一些情況下，R3 為C2-6 烯基或C2-6 炔基。在一些情況下，R3 為C0-6 伸烷基-C6-10 芳基。在一些情況下，R3 為胺基酸側鏈。在各種情況下，胺基酸側鏈為甲基、異丙基、異丁基、二級丁基、CH2 CH2 SCH3 、CH2 -吲哚基、苯甲基、CH2 OH、CH(OH)CH3 、CH2 SH、CH2 -(4-OH-苯基)、CH2 C(O)NH2 、CH2 CH2 C(O)NH2 、CH2 COOH、CH2 CH2 COOH、CH2 CH2 CH2 CH2 NH2 、CH2 CH2 CH2 NHC(NH)NH2 或咪唑基。
在本文所揭示之化合物中，m為0-5。在各種情況下，m為0。在一些情況下，m為1。在一些情況下，m為2。在一些情況下，m為3-5。
在一些情況下，n為0。在一些情況下，n為1、2或3，或為1或2。在一些情況下，各R4 獨立地為C1-6 烷基、側氧基（=O）、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，至少一個R4 為鹵基、OH、CN、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 或COORA 。在一些情況下，兩個R4 組合形成螺或稠合5-8員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基、SO2 -C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，兩個R4 組合形成螺或稠合5-8員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些實施例中，n為1，且R4 為C1-6 烷基、側氧基（=O）、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，n為2，且各R4 獨立地為C1-6 烷基、側氧基（=O）、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)；且芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，n為2，且兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，兩個R4 與其所附接之碳一起形成螺5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，兩個R4 與其所附接之碳一起形成稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
在本文所揭示之化合物中，o為0-5。在一些情況下，o為0。在一些情況下，o為1或2。在各種實施例中，各R6 為H。在一些情況下，至少一個R6 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)。
在一些情況下，R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、-[C(O)]1-2 -(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、-[C(O)]1-2 -NRN RN 、C(O)-Y-H或C(O)-C(O)NRN -Y-X-A，其中A為H、C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO、C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)或CONRN RN 。在一些情況下，R5 為C1-6 伸烷基-OH。在一些情況下，R5 為經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH。在一些情況下，R5 為經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH。在一些情況下，R5 為經SO3 H取代之C1 伸烷基-OH。在一些情況下，R5 為C(O)-Y-H。在一些情況下，R5 為CHO。在一些情況下，R5 為C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)。在一些情況下，R5 為C(O)-C(O)(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)。在一些情況下，R5 為CONRN RN 。在一些情況下，R5 為C(O)-C(O)NRN RN 。
在一些情況下，R5 為C(O)-C(O)NRN -Y-X-A，其中A為H、C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；Y為視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基；且X為空、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)。在一些情況下，A為C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基；Y為視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基；且X為空、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)。在各種情況下，RN 為H。在各種情況下，Y為C1-6 伸烷基。在一些情況下，Y為一鍵、C1-6 伸烷基或C1-6 伸烯基，其中C1-6 伸烷基及C1-6 伸烯基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基。在一些情況下，Y為經1-3個（或1個）獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基。在一些情況下，X為一鍵。在一些情況下，X為NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)。在各種情況下，A為C5-8 碳環基或C6-10 芳基，且視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，A為具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。在一些情況下，A包括吡啶基（例如2-吡啶基）。
在一些情況下，各R7 獨立地為鹵基、C1-6 鹵烷基、C2-6 烯基、C3-5 碳環基或C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基視情況經1-2個鹵基取代。在一些情況下，至少一個R7 為鹵基。在一些情況下，至少一個R7 為C1-6 鹵烷基。在一些情況下，至少一個R7 為C2-6 烯基。在一些情況下，至少一個R7 為C3-5 碳環基。在一些情況下，至少一個R7 為C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基視情況經1-2個鹵基取代。在一些情況下，至少一個R7 為C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基經1-2個鹵基取代。在一些情況下，至少一個R7 為C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基未經取代。在一些情況下，至少一個R7 為視情況經1-2個鹵基取代之苯基。在一些情況下，至少一個R7 為視情況經1個鹵基取代之苯基。在一些情況下，至少一個R7 為氯苯基。在一些情況下，至少一個R7 為苯基。在一些情況下，兩個R7 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合C3-6 碳環基環。在一些情況下，兩個R7 與其所附接之碳一起組合形成螺C3-6 碳環基環。在一些情況下，兩個R7 與其所附接之碳一起組合形成稠合C3-6 碳環基環。
在一些情況下，RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基。在一些情況下，RA 及RB 中之至少一者為H。在一些情況下，RA 及RB 中之各者為H。在一些情況下，RA 及RB 中之至少一者為C1-6 烷基。在一些情況下，RA 為C1-6 烷基。在一些情況下，RA 為甲基。在一些情況下，RB 為C1-6 烷基。在一些情況下，RB 為甲基。
涵蓋之特定化合物包含下表中之化合物。展示具體立體異構中心之化合物指示至少一種相對立體異構性。不指示具體立體異構性之具有對掌性中心之化合物指示所述對掌性中心處之立體異構中心之混合物。
化合物可為表A中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。表 A
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化合物可為表B中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。表 B
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化合物可為表C中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。表 C
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本文所揭示之化合物可用作生物樣本或患者中之諾羅病毒或冠狀病毒複製之抑制劑。此等化合物亦可適用於降低生物樣本或患者中之諾羅病毒或冠狀病毒之量（病毒滴度）。其亦可適用於生物樣本或患者之由諾羅病毒或冠狀病毒引起的感染的治療性及預防性治療。 醫藥學上可接受之鹽
本文所述之化合物可以游離形式或在適當時以鹽形式存在。醫藥學上可接受之彼等鹽備受關注，因為其適用於出於醫療目的投與下文所述之化合物。醫藥學上不可接受之鹽適用於製造製程，用於分離及純化目的，且在一些情況下用於分離本揭示案之化合物或其中間物之立體異構形式。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指合理醫療判斷範疇內適用於接觸人類及低等動物之組織而無不當副作用（諸如毒性、刺激、過敏反應及其類似副作用）且滿足合理利益/風險比的化合物之鹽。
醫藥學上可接受之鹽在此項技術中已熟知。舉例而言，S. M. Berge等人在《醫藥科學雜誌（J. Pharmaceutical Sciences）》, 1977, 66, 1-19中詳細描述醫藥學上可接受之鹽，該文獻以引用之方式併入本文中。本文所述之化合物之醫藥學上可接受之鹽包含衍生自適合的無機酸及鹼以及有機酸及鹼之彼等鹽。可在化合物之最終分離及純化期間就地製備此等鹽。
在本文所述之化合物含有鹼基或足夠鹼性之生物電子等排物體之情況下，酸加成鹽可藉由1）使呈其游離鹼形式之純化化合物與適合的有機或無機酸反應及2）分離因此形成之鹽來製備。在實踐中，酸加成鹽可為供使用之更適宜形式，且所述鹽之使用相當於游離鹼形式之使用。
醫藥學上可接受之無毒酸加成鹽之實例為胺基與無機酸（諸如氫氯酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及過氯酸）或與有機酸（諸如乙酸、草酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、丁二酸或丙二酸）形成之鹽，或藉由使用此項技術中所用之其他方法（諸如離子交換）形成之鹽。其他醫藥學上可接受之鹽包含己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽（borate）、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、葡糖酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽（picrate）、特戊酸鹽、丙酸鹽、柳酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及類似物。
在本文所述之化合物含有羧基或足夠酸性之生物電子等排物體的情況下，鹼加成鹽可藉由以下來製備：1）使呈其酸形式之經純化化合物與適合有機或無機鹼反應及2）分離因此形成之鹽。在實踐中，鹼加成鹽之使用可為更適宜形式，且該鹽形式本身之使用相當於游離酸形式之使用。衍生自適當鹼之鹽包含鹼金屬（例如鈉、鋰及鉀）鹽、鹼土金屬（例如鎂及鈣）鹽、銨鹽及N+ (C1-4 烷基)4 鹽。本揭示案亦設想本文所揭示之化合物之任何鹼性含氮基團的四級銨化。藉由該四級銨化可獲得水溶性或油溶性或可分散性產物。
鹼加成鹽包含醫藥學上可接受之金屬鹽及胺鹽。適合的金屬鹽包含鈉、鉀、鈣、鋇、鋅、鎂及鋁。鈉鹽及鉀鹽通常為較佳的。在適當時，其他醫藥學上可接受之鹽包含使用諸如鹵化物、氫氧化物、羧酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、低碳數烷基磺酸鹽及芳基磺酸鹽之相對離子形成之無毒銨、四級銨及胺陽離子。適合的無機鹼加成鹽由金屬鹼製備，該金屬鹼包含氫化鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁、氫氧化鋰、氫氧化鎂、氫氧化鋅及其類似金屬鹼。適合的胺鹼加成鹽由因其低毒性及醫學用途之可接受性而時常用於藥物化學的胺製備。氨、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、離胺酸、精胺酸、鳥胺酸、膽鹼、N,N'-二苯甲基乙二胺、氯普魯卡因（chloroprocaine）、二乙醇胺、普魯卡因（procaine）、N-苯甲基苯乙基胺、二乙胺、哌
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、三(羥基甲基)-胺基甲烷、四甲基氫氧化銨、三乙胺、二苯甲基胺、安非胺（ephenamine）、去氫樅胺（dehydroabietylamine）、N-乙基哌啶、苯甲胺、四甲銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、鹼性胺基酸、二環己胺及類似物。
其他酸及鹼在其本身並非醫藥學上可接受時可用於製備在獲得本文所述之化合物及其醫藥學上可接受之酸或鹼加成鹽時適用作中間物之鹽。
應理解，本文所揭示之化合物可能以不同醫藥學上可接受之鹽之混合物/組合的形式存在。亦涵蓋游離形式之化合物及醫藥學上可接受之鹽的混合物/組合。 醫藥組合物
本文所述之化合物可調配成進一步包括醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、佐劑或媒劑之醫藥組合物。在實施例中，本發明係關於一種醫藥組合物，包括上文所述之化合物或其鹽，及醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、佐劑或媒劑。在實施例中，醫藥組合物包括安全且有效量之如本文所揭示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、佐劑或媒劑。醫藥學上可接受之載劑包含例如關於預期投與形式適當選擇且符合習知醫藥慣例之醫藥稀釋劑、賦形劑或載劑。
「有效量」包含「治療有效量」及「預防有效量」。術語「治療有效量」係指在治療及/或改善患者之諾羅病毒或冠狀病毒感染方面有效的量。術語「預防有效量」係指在預防及/或實質上減輕諾羅病毒或冠狀病毒感染爆發之機會或規模方面有效的量。
醫藥學上可接受之載劑可含有並不過度抑制化合物之生物活性之惰性成分。醫藥學上可接受之載劑應為生物相容的，例如無毒、非炎性、非免疫原性或在向個體投與後無其他非所要反應或副作用。可採用標準醫藥調配技術。
如本文所使用之醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑包含適用於所期望具體劑型的任何溶劑、稀釋劑或其他液體媒劑、分散或懸浮助劑、界面活性劑、等張劑、增稠或乳化劑、防腐劑、固體黏合劑、潤滑劑及類似物。《雷明頓氏醫藥科學（Remington's Pharmaceutical Sciences）》,第十六版, E. W. Martin （Mack Publishing公司, Easton, Pa., 1980）揭示用於調配醫藥學上可接受之組合物之各種載劑及其已知製備技術。除非任何習知載劑介質諸如藉由產生任何不合需要之生物效應或另外以有害方式與醫藥學上可接受之組合物之任何其他組分相互作用而與本文所述之化合物不相容，否則預期其使用屬於本揭示案之範疇內。如本文所用，片語「副作用」涵蓋療法（例如，預防劑或治療劑）的不希望及不良作用。副作用始終係不希望的，但不希望的作用不一定係不利的。療法（例如，預防劑或治療劑）之不良作用可為有害或不適或有風險的。副作用包含但不限於發熱、發冷、嗜睡、胃腸道毒性（包含胃腸潰瘍及糜爛）、噁心、嘔吐、神經毒性、腎毒性、腎臟毒性（包含如乳頭狀壞死及慢性間質性腎炎之該等病況）、肝毒性（包含血清肝臟酶含量升高）、骨髓毒性（包含白血球減少症、骨髓抑制、血小板減少症及貧血）、口腔乾燥、金屬味、妊娠延長、無力、嗜眠、疼痛（包含肌肉痛、骨痛及頭痛）、脫髮、乏力、眩暈、椎體外症狀、靜坐不能、心血管紊亂及性功能障礙。
可充當醫藥學上可接受之載劑的物質之一些實例包含但不限於：離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；血清蛋白（諸如人血清白蛋白）；緩衝物質（諸如twin 80、磷酸酯、甘胺酸、山梨酸或山梨酸鉀）；飽和植物脂肪酸、水、鹽或電解質之偏甘油酯混合物（諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉或鋅鹽）；膠態二氧化矽；三矽酸鎂；聚乙烯吡咯啶酮；聚丙烯酸酯；蠟；聚乙烯-聚環氧丙烷嵌段聚合物；甲基纖維素；羥丙基甲基纖維素；羊毛脂；糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；黃蓍粉末；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；油，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；二醇，諸如丙二醇或聚乙二醇；酯，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；海藻酸；無熱原質水；等張生理鹽水；林格氏溶液（Ringer's solution）；乙醇；及磷酸酯緩衝溶液；且根據調配者之判斷，諸如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂之其他無毒相容潤滑劑以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、調味劑及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑亦可存在於組合物中。 用於經肺遞送之調配物
在一些實施例中，本文所揭示之醫藥組合物適用於藉由吸入直接經由氣道投與至下呼吸道（例如，肺）。藉由吸入投與之組合物可呈可吸入粉末組合物或液體或粉末噴霧劑形式，且可能以標準形式使用粉末吸入裝置或氣溶膠分配裝置來投與。此類裝置為眾所周知的。對於藉由吸入投與，粉末狀調配物通常包括活性化合物以及惰性固體粉末狀稀釋劑（諸如乳糖或澱粉）。可吸入乾粉組合物可存在於明膠或類似物質之膠囊及藥筒或者用於吸入器或吹入器之層壓鋁箔的泡殼中。各膠囊或藥筒可通常含有例如約10 mg至約100 g各活性化合物。可替代地，組合物可呈現為不含賦形劑。
可吸入組合物可經封裝用於單位劑量或多劑量遞送。舉例而言，組合物可按類似於以下中所述之方式封裝以用於多劑量遞送：GB 2242134、美國專利第6,632,666號、第5,860,419號、第5,873,360號及第5,590,645號（皆說明了「Diskus」裝置）；或GB2i78965、GB2129691、GB2169265、美國專利第4,778,054號、第4,811,731號及第5,035,237號（其說明了「Diskhaler」裝置）；或者EP 69715（「Turbuhaler」裝置）或GB 2064336及美國專利第4,353,656號（「Rotahaler」裝置）。
用於藉由吸入表面遞送至肺之噴霧組合物可調配為水溶液或懸浮液或自加壓包裝遞送之氣溶膠，諸如定劑量吸入器（MDI），其中使用適合的液化推進劑，包含氫氟烷烴，諸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷及尤其1,1,1,2-四氟乙烷、1,1,1,2,3,3,3-七氟-正丙烷及其混合物。適用於吸入之氣溶膠組合物可以懸浮液或溶液之形式呈現。
藉由吸入投與之藥物通常具有受控制粒度。用於吸入至支氣管系統中之最佳粒度通常為約1 μm至約10 μm，且在一些實施例中，為約2 μm至約5 μm。具有大於約20 μm之粒度的顆粒一般過大而在吸入時不能達至較小呼吸道。為達成此等粒度，活性成分之顆粒可經歷諸如微米尺寸化之粒度減小處理過程。可藉由風選或篩分分離出所期望粒度部分。較佳地，所述顆粒將為結晶。
鼻內噴霧劑可使用水性或非水性媒劑添加諸如增稠劑、調節pH之緩衝鹽或酸或鹼、等張調節劑或抗氧化劑之藥劑來調配。
用於藉由霧化吸入之溶液可使用水性媒劑添加諸如酸或鹼、緩衝鹽、等張調節劑或抗菌劑之試劑來調配。其可藉由過濾或在高壓釜中加熱來滅菌，或呈現為非滅菌產品。霧化器以自調配物水溶液產生之薄霧形式供應氣溶膠。
在一些實施例中，本文中所揭示之醫藥組合物可與補充活性成分一起調配。
在一些實施例中，本文所揭示之醫藥組合物係自乾粉吸入器投與。在其他實施例中，本文所揭示之醫藥組合物藉由氣溶膠分配裝置視情況結合諸如「Volumatic®」吸入室之吸入室來投與。
載劑可為含有例如水、乙醇、多元醇（例如丙三醇、丙二醇、液體聚乙二醇及類似物）、其合適混合物及/或植物油之溶劑或分散介質。可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣、在分散液之情況下藉由維持所要粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。藉由添加抗細菌及/或抗真菌劑（例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、乙汞硫柳酸鈉及類似物）來達成預防本文中所揭示之組合物中的微生物之作用。在許多情況下，較佳包含等張劑，例如糖或氯化鈉。可藉由在組合物中使用延緩吸收劑（例如，單硬脂酸鋁及明膠）來延長可注射組合物之吸收。
在一些實施例中，醫藥組合物可處於控制組合物之釋放的基質內。在一些實施例中，基質可包括：脂質、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚己內酯、聚(乙醇酸)、聚(乳酸)、聚己內酯、聚乳酸、聚酸酐、聚丙交酯-共-乙交酯、聚胺基酸、聚氧化乙烯、丙烯酸封端之聚氧化乙烯、聚醯胺、聚乙烯、聚丙烯腈、聚磷氮烯、聚(原酸酯)、蔗糖乙酸異丁酸酯（SAIB）及其組合，以及例如美國專利第6,667,371號、第6,613,355號、第6,596,296號、第6,413,536號、第5,968,543號、第4,079,038號、第4,093,709號、第4,131,648號、第4,138,344號、第4,180,646號、第4,304,767號、第4,946,931號中所揭示之其他聚合物，所述文獻中之各者明確地以全文引用之方式併入本文中。在此等實施例中，基質持續釋放藥物。
醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑亦可包含任何溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及/或抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑以及類似物。此類介質及藥劑用於醫藥活性物質之用途在此項技術中已熟知。除非任何習知介質或試劑與活性成分不相容，否則考慮將其用於醫藥組合物中。
醫藥組合物可根據習知技術經調配以供投與。參見例如Remington《藥學科學與實踐（The Science and Practice of Pharmacy）》（第20版，2000）。舉例而言，本揭示案之鼻內醫藥組合物可調配為氣溶膠（此術語包含液體與乾粉氣溶膠）。如熟習此項技術者所已知，液體顆粒之氣溶膠可藉由任何適合的手段產生，諸如使用壓力驅動之氣溶膠霧化器或超音波霧化器。參見例如美國專利第4,501,729號。固體顆粒之氣溶膠（例如凍乾、冷凍乾燥等）可同樣使用任何固體微粒藥劑氣溶膠產生器藉由醫藥領域中已知之技術來產生。作為另一實例，醫藥組合物可經調配為按需可溶形式，其提供醫藥組合物之凍乾部分及醫藥組合物之溶解溶液部分。
在一些實施例中，醫藥組合物呈水性懸浮液形式，其可由溶液或懸浮液製備。對於溶液或懸浮液，劑型可由親脂性物質、脂質體（磷脂小泡/膜）及/或脂肪酸（例如，棕櫚酸）之微胞組成。在特定實施例中，醫藥組合物為能夠溶解於由經投與、施用及/或遞送醫藥組合物之組織之上皮細胞黏膜所分泌的流體中之溶液或懸浮液，其可有利地增強吸收。
醫藥組合物可為水溶液、非水溶液或水溶液及非水溶液之組合。適合水溶液包含但不限於：水凝膠、水性懸浮液、水性微球體懸浮液、水性微球體分散液、水性脂質體分散液、脂質體之水性微胞、水性微乳液及前述之任何組合或可溶解於鼻腔黏膜分泌之流體中的任何其他水溶液。例示性非水溶液包含但不限於：非水凝膠、非水性懸浮液、非水性微球體懸浮液、非水性微球體分散液、非水性脂質體分散液、非水性乳液、非水性微乳液及前述之任何組合或可溶解或混合於黏膜分泌之流體中的任何其他非水溶液。
粉末調配物之實例包含但不限於：純粉末混合物、微米化粉末、冷凍乾燥粉末、凍乾粉末、粉末微球、包衣粉末微球、脂質體分散液及前述之任何組合。粉末微球可由各種多醣及纖維素形成，包含但不限於澱粉、甲基纖維素、三仙膠、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、卡波姆（carbomer）、聚乙烯醇海藻酸鹽、阿拉伯膠、聚葡萄胺糖及其任何組合。
在特定實施例中，組合物為至少部分或甚至大量（例如至少80%、90%、95%或更多）可溶於黏膜分泌之流體中以便有助於吸收之組合物。或者或另外，組合物可調配有促進藥劑溶解於分泌物內的載劑及/或其他物質，包含但不限於脂肪酸（例如，棕櫚酸）、神經節苷脂（例如，GM-1）、磷脂（例如，磷脂醯絲胺酸）及乳化劑（例如，聚山梨醇酯80）。
本領域熟習此項技術者將瞭解，對於鼻內投與或遞送，由於投與之醫藥組合物的量通常較小，故鼻分泌物可能改變所投與劑量之pH，因為鼻腔中的pH範圍可寬達5至8。此類改變可影響可供吸收之未離子化藥物之濃度。因此，在代表性實施例中，醫藥組合物更包括緩衝劑以就地維持或調節pH。典型的緩衝劑包含但不限於抗壞血酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、麩蛋白、碳酸鹽及磷酸鹽緩衝劑。
在實施例中，選擇醫藥組合物之pH以使得黏膜組織之內部環境在投與後處於酸性至中性，這（1）可提供未游離化形式之活性化合物以供吸收，（2）阻止更可能出現於鹼性環境中之病原菌之生長，及（3）降低黏膜刺激之可能性。
對於液體及粉末噴霧劑或氣溶膠，醫藥組合物可經調配以具有任何適合且所期望的粒度或液滴大小。在說明性實施例中，顆粒或液滴之大部分及/或平均粒度之範圍等於或大於約1、2.5、5、10、15或20微米及/或等於或小於約25、30、40、45、50、60、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400或425微米（包含前述之所有組合）。大部分及/或平均粒度或液滴大小之合適範圍之代表性實例包含但不限於約5至100微米、約10至60微米、約175至325微米及約220至300微米，其有助於安全且有效量之活性化合物例如在鼻腔中（例如，在鼻腔上部三分之一、上鼻道、嗅區及/或通向嗅覺神經通路之鼻竇區中）的沈積。一般而言，小於約5微米之顆粒或液滴將沈積於氣管或甚至肺中，而為約50微米或更大之顆粒或液滴一般不能達至鼻腔且沈積於鼻前部。
國際專利公開案WO 2005/023335（Kurve Technology公司）描述了具有適合於實踐本文中所揭示之醫藥組合物之代表性實施例的直徑大小的顆粒及液滴。在特定實施例中，顆粒或液滴具有約5至30微米、約10至20微米、約10至17微米、約10至15微米、約12至17微米、約10至15微米或約10至12微米之平均直徑。顆粒可「實質上」具有如本文中所述之平均直徑或大小，即至少約50%、60%、70%、80%、90%或95%或大於95%之顆粒具有所指示直徑或大小範圍。
醫藥組合物能夠以具有如上文所述之液滴大小的噴霧化或霧化液體形式遞送。
根據包括鼻內遞送方法的本揭示案之特定實施例，可能期望延長醫藥組合物在鼻腔中（例如，在鼻腔上部三分之一、上鼻道、嗅區及/或鼻竇區中）之滯留時間，例如以增強吸收。因此，醫藥組合物可視情況與以下一起調配：生物黏附聚合物、膠（例如三仙膠）、聚葡萄胺糖（例如高度純化陽離子多醣）、果膠（或當施用至鼻黏膜時如同凝膠一樣稠化或乳化之任何碳水化合物）、微球體（例如澱粉、白蛋白、聚葡萄糖、環糊精）、明膠、脂質體、卡波姆、聚乙烯醇、海藻酸鹽、阿拉伯膠、聚葡萄胺糖及/或纖維素（例如甲基或丙基纖維素；羥基或羧基纖維素；羧甲基或羥丙基纖維素），其為增加在鼻腔中之滯留時間的藥劑。作為另一方法，增大調配物之黏度亦可提供延長藥劑與鼻上皮之接觸的手段。醫藥組合物可調配為鼻乳液、軟膏或凝膠，其由於其黏度而提供局部施用之優勢。
潮濕及高度血管化之膜可有助於快速吸收；因此，醫藥組合物可視情況包括保濕劑，尤其在基於凝膠之組合物的情況下，以確保足夠的鼻內水分含量。適合的保濕劑之實例包含但不限於丙三醇（glycerin/glycerol）、礦物油、植物油、膜調節劑、舒緩劑及/或糖醇（例如木糖醇、山梨糖醇；及/或甘露糖醇）。保濕劑在醫藥組合物中之濃度將視所選藥劑及調配物而變化。
醫藥組合物亦可視情況包含吸收增進劑，諸如抑制酶活性、降低黏液之黏度或彈性、降低黏膜纖毛清除效應、打開緊密結合及/或溶解活性化合物之藥劑。化學增強劑為本領域中已知且包含螯合劑（例如，EDTA）、脂肪酸、膽酸鹽、界面活性劑及/或防腐劑。當調配展現較差膜滲透率、缺乏親脂性及/或由胺基肽酶降解之化合物時，用於滲透之增強劑可尤其適用。吸收增強劑在醫藥組合物中之濃度將視所選藥劑及調配物而變化。
為了延長儲存壽命，可視情況將防腐劑添加至醫藥組合物。適合的防腐劑包含但不限於苯甲醇、對羥基苯甲酸酯、硫柳汞、氯丁醇及羥基氯苯胺以及前述之組合。防腐劑之濃度將視使用之防腐劑、所調配之化合物、調配物及其類似物而變化。在代表性實施例中，防腐劑以約2重量%或更小之量存在。
本文所述之醫藥組合物可視情況含有氣味劑，例如如EP 0 504 263 B1中所描述，以提供對氣味之感覺，以便有助於吸入組合物，從而促進向嗅區之遞送及/或藉由嗅覺神經元觸發運輸。
作為另一選項，組合物可包括調味劑，例如以增強味道及/或個體對組合物之可接受性。 經肺投與之多孔顆粒
在一些實施例中，顆粒為多孔的，使得其具有適當密度以避免在經由吸入器投與時沈積於咽喉後部。相對較大之粒度及相對較低之密度的組合避免肺中之吞噬作用，提供適當靶向之遞送，避免組分之全身遞送且在肺內提供高濃度之組分。
用於製備該等顆粒及用於遞送該等顆粒之代表性方法描述於以下中：例如標題為「用於經肺遞送之顆粒組合物（Particulate compositions for pulmonary delivery）」之美國專利第7,384,649號；標題為「用於經肺遞送之顆粒組合物（Particulate compositions for pulmonary delivery）」之美國專利第7,182,961號；標題為「吸入裝置及方法（Inhalation device and method）」之美國專利第7,146,978號；標題為「用於吸入之具有持續釋放特性的顆粒（Particles for inhalation having sustained release properties）」之美國專利第7,048,908號；標題為「穩定噴霧乾燥蛋白調配物（Stable spray-dried protein formulations）」之美國專利第6,956,021號；標題為「吸入裝置（Inhalation device）」之美國專利第6,766,799號；及標題為「吸入裝置及方法（Inhalation device and method）」之美國專利第6,732,732號。
揭示該等顆粒之額外專利包含：標題為「噴霧乾燥多孔大顆粒之調配（Formulation for spray-drying large porous particles）」的美國專利第7,279,182號；標題為「使用簡單胺基酸形成多孔顆粒（Use of simple amino acids to form porous particles）」的美國專利第7,252,840號；標題為「吸入裝置及方法（Inhalation device and method）」的美國專利第7,032,593號；標題為「用於產生乾燥顆粒之方法及設備（Method and apparatus for producing dry particles）」的美國專利第7,008,644號；標題為「產生多孔大顆粒之過程濕度的控制（Control of process humidity to produce large, porous particles）」的美國專利第6,848,197號；及標題為「噴霧乾燥多孔大顆粒之調配（Formulation for spray-drying large porous particles）」的美國專利第6,749,835號。
標題為「用於吸入之具有持續釋放特性的顆粒」之美國專利第7,678,364號揭示用於將顆粒遞送至肺部系統之方法，其包括：向需要治療、預防或診斷之患者的呼吸道投與安全且有效量之乾燥粉末，該乾燥粉末包括：a）與治療劑、預防劑或診斷劑複合之多價金屬陽離子，b）醫藥學上可接受之載劑，及c）含多價金屬陽離子之組分，其中該乾燥粉末經噴霧乾燥且具有為藥劑總重量之約10% w/w或更多的多價金屬陽離子總量、約0.4 g/cm3 或更小之敲緊密度、約5微米至約30微米之中值幾何直徑及約1至約5微米之空氣動力直徑。
顆粒中存在之本文所述之化合物或其鹽之量可在約0.1重量%至約95重量%之範圍內，儘管在一些情況下，可甚至高達100%。例如，約1至約50%，諸如約5至約30%。化合物分佈於在整個顆粒中之顆粒可為較佳的。
在一些實施例中，顆粒包含除上文所述之磷脂外之界面活性劑。如本文所使用，術語「界面活性劑」係指較佳地吸收至兩種不可混溶相之間的界面（諸如水與有機聚合物溶液之間的界面、水/空氣界面或有機溶劑/空氣界面）的任何試劑。界面活性劑一般具有親水性部分及親脂性部分，使得其在吸收至顆粒時易於使各部分達至不吸引類似包衣之顆粒的外部環境，因此減少顆粒集結。界面活性劑亦可促進治療劑或診斷劑之吸收且提高藥劑之生物可用性。
可用於製造本文中所揭示之顆粒的適合界面活性劑包含但不限於：十六烷醇；脂肪醇，諸如聚乙二醇（PEG）；聚氧乙烯-9-月桂醚；表面活性脂肪酸，諸如棕櫚酸或油酸；甘膽酸鹽；表面活性肽（surfactin）；泊洛沙姆（poloxamer）；脫水山梨糖醇脂肪酸酯，諸如脫水山梨糖醇三油酸酯（Span 85）；Tween® 80；及泰洛沙泊（tyloxapol）。
界面活性劑可以約0至約5重量%範圍內之量存在於顆粒中。較佳地，其可以約0.1至約1.0重量%範圍內之量存在於顆粒中。
具有小於約0.4 g/cm3 之敲緊密度、至少約5 μm之中值直徑及約1 μm至約5 μm或約1 μm至約3 μm之空氣動力直徑的顆粒更能夠避免口咽區中之慣性及重力沈積，且靶向呼吸道或肺深部。使用較大之更多孔顆粒係有利的，因為其能夠比較小的更緻密氣溶膠顆粒（諸如當前用於吸入療法的彼等顆粒）更有效地氣溶膠化。 脂質體遞送
本文所述之組合物有利地經遞送至肺，以在實際或潛在諾羅病毒或冠狀病毒感染之位點處提供化合物。此可藉由經肺遞送經由定劑量吸入器或其他經肺遞送裝置實現，且亦藉由使顆粒進入肺中之肺泡周圍的微血管床實現。
包含較小單層囊泡之奈米載劑（諸如脂質體）展示優於用於將藥物遞送至肺之其他習知方法的若干優勢，包含延長之藥物釋放及細胞特異性靶向藥物遞送。奈米級藥物載劑亦可有利於遞送水溶性較差之藥物，且本文所述之化合物中之某些水溶性較差。額外優勢包含其提供受控釋放、保護以免代謝及降解、降低之藥物毒性及靶向能力的能力。
脂質體（較佳地單層囊泡）如藉由動態光散射量測具有小於200 nm之大小，且較佳地特徵在於由化學上純的合成磷脂組成，最佳地具有長度為至少16個碳的脂族側鏈，且含有本文所述之化合物中之一或多者或其醫藥學上可接受之鹽，其足以將一定量之其化合物優先遞送（亦即靶向）至肺泡周圍的微血管床。可例如藉由動態光散射使用氦-氖100 mW NEC氣體雷射及Malvern K7027相關器量測囊泡直徑，理想地每次產生至少兩個或三個量測值以用於各大小判定。
表述「化學上純的磷脂」旨在定義基本上不含有害洗滌劑部分及引起其形成之較小單層囊泡（SUV）之聚集的雜質且純度超過97%的磷脂。較佳地，脂質體之直徑絕大多數為約50至約160 nm，電荷基本上為中性，且併入側鏈長度為16至18個碳原子的磷脂。更佳地，脂質體由二硬脂醯基磷脂醯膽鹼（DSPC）製備且包含作為囊泡穩定劑之膽固醇（最佳以全部脂質之10%至50%之量）。
脂質體具有高於體溫（亦即大於37℃）之熔點亦可為有利的。出於此原因，使用純磷脂，較佳為飽和且具有至少16個碳、較佳16個碳與18個碳之間的碳鏈長度之磷脂可為有利的。二硬脂醯基磷脂醯膽鹼（DSPC）為較佳磷脂。
膽固醇有助於穩定脂質體且較佳以足以提供脂質體穩定性之量添加。最佳地，脂質體更包括聚乙二醇化磷脂，諸如DSPEPEG。該方法涉及向患者之血流中引入一定量脂質體，該等脂質體大小小於200 nm（較佳為單層囊泡）且特徵較佳在於包括化學上純的合成磷脂，最佳具有長度為至少16個碳之脂族側鏈，且含有本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或前藥，其足以將一定量之化合物優先遞送（亦即靶向）至肺中肺泡周圍的微血管床。
本文所述之化合物可與其他抗諾羅病毒劑或抗冠狀病毒劑組合。該等額外藥劑亦可存在於脂質體中，可存在於不同脂質體中，或可經由不同途徑共同投與。
脂質體包含本文所述之化合物中之一或多者或其醫藥學上可接受之鹽，且可視情況包含其他抗諾羅病毒劑或抗冠狀病毒劑。脂質體可藉由將磷脂及膽固醇溶解於諸如氯仿之適當有機溶劑中及蒸發溶劑以形成脂質膜來製備。若採用離子載體來將本文所述之化合物載入脂質體中，則可在蒸發前將離子載體添加至脂質溶液。接著將乾燥脂質膜於適當水相中再水合，該水相為諸如磷酸鹽緩衝鹽水或其他生理學上適當之溶液。水溶性藥物或治療劑可含於水合溶液中，但若期望遠距離裝載，則可將諸如上文所述之螯合劑之裝載劑添加至水合溶液以包封於脂質體之內部水空間內。
在添加水合溶液時，不同大小之脂質體自發地形成且包封一部分水相。其後，使脂質體及懸浮水溶液經受諸如擠壓之剪切力、音波處理或根據美國專利第4,753,788號中所述之方法經由均質器進行之處理；以產生特定大小內之囊泡。
隨後可處理脂質體以自懸浮溶液移除非所期望化合物，例如未包封藥物，其可經由諸如凝膠層析或超過濾之過程實現。
脂質體於乾粉氣溶膠中用於靶向肺遞送之用途描述於例如Willis等人, 《肺（Lung ）》, 2012年6月, 190(3):251-262中。一個優勢為用於製備脂質體之磷脂與內源性肺界面活性劑類似。 投與途徑及劑量
視所治療感染之嚴重程度而定，上文所述描述之化合物及醫藥學上可接受之組合物可經口、經直腸、非經腸、腦池內、陰道內、腹膜內、局部（作為散劑、軟膏或滴劑）、經頰、作為經口或經鼻噴霧、至經肺系統（諸如藉由使用吸入器，諸如定劑量吸入器（MDI））或其類似途徑向人類及其他動物投與。在一些實施例中，本文所揭示之化合物或組合物經口服，經由吸入或靜脈內投與。
用於經口投與之液體劑型包含但不限於醫藥學上可接受之乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性化合物以外，液體劑型可含有常用於本領域中之惰性稀釋劑(諸如水或其他溶劑)、增溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺、油(尤其為棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、丙三醇、四氫呋喃醇、聚乙二醇以及脫水山梨糖醇之脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀釋劑之外，經口組合物亦可包含佐劑，諸如濕潤劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑及芳香劑。
可注射製劑（例如，無菌可注射水性或油性懸浮液）可根據已知技術使用適合的分散劑、濕潤劑及/或懸浮劑調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒性非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液、懸浮液或乳液，例如呈於1,3-丁二醇中之溶液。在可接受之媒劑及溶劑中，可使用的有水、林格氏溶液、U.S.P.及等張氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發性油習知地用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用包含合成單甘油酯或二甘油酯之任何溫和的不揮發性油。另外，脂肪酸（諸如油酸）用於製備可注射劑。
可例如藉由經由細菌截留過濾器過濾或藉由併入在使用之前可溶解或分散於無菌水或其他無菌可注射介質中之呈無菌固體組合物形式之滅菌劑來將可注射調配物滅菌。
為延長本文所述之化合物之效應，通常期望減緩來自皮下或肌肉內注射之化合物之吸收。此可藉由使用具有不佳水溶性之結晶或非晶形材料之液體懸浮液來實現。化合物之吸收率則視其溶解率而定，溶解率又可能視晶體大小及結晶形式而定。或者，藉由將化合物溶解或懸浮於油媒劑中來達成非經腸投與之化合物之延遲吸收。藉由在諸如聚丙交酯-聚乙交酯之生物可降解聚合物中形成化合物之微膠囊基質來製備可注射積存形式。視化合物與聚合物之比率及所使用之特定聚合物的性質而定，可控制化合物釋放速率。其他生物可降解聚合物之實例包含聚(原酸酯)及聚(酸酐)。可注射積存調配物亦可藉由將化合物包覆於與身體組織相容之脂質體或微乳液中來製備。
用於經直腸或經陰道投與之組合物特定地為栓劑，其可藉由將本文所述之化合物與適合非刺激性賦形劑或載劑，諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟混合來製備，所述賦形劑或載劑在環境溫度下為固體，但在體溫下為液體且因此在直腸或陰道腔中熔融並釋放活性化合物。
用於經口投與之固體劑型包含膠囊、錠劑、丸劑、散劑及粒劑。在此類固體劑型中，將活性化合物與至少一種惰性醫藥學上可接受之賦形劑或載劑(諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣)及/或以下混合：a）填充劑或增量劑，諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及矽酸；b）黏合劑，諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯膠；c）保濕劑，諸如甘油；d）崩解劑，諸如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；e）溶液阻滯劑，諸如石蠟；f）吸收加速劑，諸如四級銨化合物；g）潤濕劑，諸如鯨蠟醇及丙三醇單硬脂酸酯；h）吸附劑，諸如高嶺土及膨潤土；及i）潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，劑型亦可包括緩衝劑。
亦可使用相似類型之固體組合物作為軟填充及硬填充的明膠膠囊中之填充劑，該等膠囊使用賦形劑，諸如乳糖（lactose/milk sugar）以及高分子量聚乙二醇及其類似物。錠劑、糖衣藥丸、膠囊、丸劑及粒劑之固體劑型可製備有包衣及外殼，諸如腸溶包衣及醫藥調配技術中熟知之其他包衣。其可視情況含有乳濁劑，且亦可具有僅在或優先在腸道之某一部分中釋放或視情況以延遲方式釋放活性成分之組合物。可使用之包埋組合物之實例包含聚合物質及蠟。亦可使用相似類型之固體組合物作為軟填充及硬填充的明膠膠囊中之填充劑，該等膠囊使用賦形劑，諸如乳糖（lactose/milk sugar）以及高分子量聚乙二醇及其類似物。
活性化合物亦可呈具有一或多種如上文所提及之賦形劑之微膠囊化形式。錠劑、糖衣藥丸、膠囊、丸劑及粒劑之固體劑型可製備有包衣及外殼，諸如腸溶衣、釋放控制包衣及醫藥調配技術中熟知之其他包衣。在此等固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性稀釋劑（諸如蔗糖、乳糖或澱粉）混合。如在一般實踐中，此類劑型亦可包括除惰性稀釋劑以外之其他物質，例如製錠潤滑劑及其他製錠助劑，諸如硬脂酸鎂及微晶纖維素。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，劑型亦可包括緩衝劑。其可視情況含有乳濁劑，且亦可具有僅在或優先在腸道之某一部分中釋放或視情況以延遲方式釋放活性成分之組合物。可使用之包埋組合物之實例包含聚合物質及蠟。
用於表面或經皮投與本文所述之化合物之劑型包含軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、散劑、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼片。活性組分在無菌條件下與醫藥學上可接受之載劑及如可為所要求之任何所需防腐劑或緩衝劑摻合。亦涵蓋經眼調配物、滴耳劑及滴眼劑屬於本揭示案之範疇內。另外，本揭示案涵蓋使用經皮貼片，其具有向身體提供控制遞送化合物之附加優點。此類劑型可藉由將化合物溶解或分配於適當介質中來製備。亦可使用吸收增強劑來增加化合物通過皮膚之通量。速率可藉由提供速率控制膜或藉由將化合物分散於聚合物基質或凝膠中來控制。
本文所述之組合物之無菌可注射形式可為水性或油性懸浮液。此等懸浮液可根據此項技術中已知之技術使用適合之分散劑或潤濕劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如呈1,3-丁二醇中之溶液的形式。在可接受之媒劑及溶劑中，可採用的有水、林格氏溶液及等張氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發性油習知地用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和不揮發性油，包含合成單甘油酯或二甘油酯。脂肪酸（諸如油酸及其甘油酯衍生物）適用於製備可注射劑，天然醫藥學上可接受之油（諸如橄欖油或蓖麻油，尤其其聚氧乙烯化形式）亦然。此等油溶液或懸浮液亦可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，諸如羧甲基纖維素或通常用於調配醫藥學上可接受之劑型（包含乳液及懸浮液）之類似分散劑。其他常用界面活性劑（諸如Tween、Span及其他乳化劑）或常用於製造醫藥學上可接受之固體、液體或其他劑型之生物可用性增強劑亦可用於調配之目的。
本文所述之醫藥組合物可用任何經口可接受之劑型經口投與，所述劑型包含但不限於膠囊、錠劑、水性懸浮液或溶液。在用於經口用途之錠劑之情況下，常用載劑包含但不限於乳糖及玉米澱粉。通常亦添加潤滑劑，諸如硬脂酸鎂。對於以膠囊形式經口投與，適用之稀釋劑包含乳糖及乾燥玉米澱粉。當需要水性懸浮液用於經口使用時，使活性成分與乳化劑及懸浮劑組合。若需要，亦可添加某些甜味劑、調味劑或著色劑。
替代地，本文所述之醫藥組合物可以用於經直腸投與之栓劑形式投與。此等栓劑可藉由將試劑與適合非刺激性賦形劑混合來製備，所述賦形劑在室溫下為固體但在直腸溫度下為液體且因此將在直腸中熔融以釋放藥物。此類材料包含但不限於可可脂、蜂臘及聚乙二醇。
本文所述之醫藥組合物亦可局部投與，當治療目標包含局部施用可容易地接近之區域或器官時尤其如此，該治療目標包含眼、皮膚或低位腸道之疾病。用於此等區域或器官中之每一者的適合的局部調配物易於製備。
用於低位腸道之局部施用可以經直腸栓劑調配物（參見上文）形式或以適合灌腸調配物形式實現。局部施用亦包含使用經皮貼片。
對於局部施用，醫藥組合物可以含有懸浮或溶解於一或多種載劑中之活性組分之適合的軟膏形式調配。用於本揭示案之化合物之局部投與的載劑包含但不限於礦物油、液體石蠟脂、白石蠟脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟及水。或者，醫藥組合物可以含有懸浮或溶解於一或多種醫藥學上可接受之載劑中之活性組分之適合洗劑或乳膏形式調配。適合載劑包含但不限於礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二醇、苯甲醇及水。
對於經眼使用，醫藥組合物可調配為具有或不具有防腐劑（諸如羥基氯苯胺）之於等張、pH經調整的無菌生理鹽水中之微米化懸浮液，或特定而言調配為於等張、pH經調整的無菌生理鹽水中之溶液。替代地，對於經眼使用，醫藥組合物可調配於諸如凡士林之軟膏中。
醫藥組合物亦可藉由經鼻氣溶膠或吸入投與。該等組合物係根據醫藥調配領域中熟知之技術製備，且可採用苯甲醇或其他適合的防腐劑、增強生物可用性之吸收促進劑、氟碳化物及/或其他習知溶解劑或分散劑製備為於生理鹽水中之溶液。
用於本揭示案之方法中之化合物可按單位劑型調配。術語「單位劑型」係指適合以單位劑量形式用於經受治療之個體的物理離散單元，其中各單元含有經計算以產生所期望治療效應的預定量之活性材料，其視情況與適合之醫藥載劑結合。單位劑型可用於單一日劑量或多個日劑量（例如每天約1至4次或更多次）中之一者。當使用多種日劑量時，用於各劑量之單位劑型可相同或不同。 治療方法
本文提供本文所述之化合物作為治療劑之用途。本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用以降低生物樣本（例如經感染之細胞培養物）之病毒滴度或人類之病毒滴度（例如患者之肺病毒滴度）。本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可在治療病毒感染之方法中使用。可用本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療的病毒感染之非限制性實例包含冠狀病毒感染、杯狀病毒（calicivirus）感染及小核糖核酸病毒（picornavirus）感染。
杯狀病毒感染之非限制性實例包含諾羅病毒介導之病況及諾羅病毒感染。如本文所用，術語「諾羅病毒介導之病況」、「諾羅病毒感染」或「諾羅病毒」可互換使用以意謂由諾羅病毒感染引起之疾病。
諾羅病毒為引起哺乳動物之胃腸炎的感染性病毒。諾羅病毒為杯狀病毒科之RNA病毒，該杯狀病毒科包括七個基因組：GI、GII、GIII、GIV、GV、GVI及GVII。基因組II為最普遍的人類基因組，當前含有19個基因型。基因組I、II及IV感染人類，而基因組III感染牛物種，且最近已在小鼠中分離出基因組V。與人類之胃腸炎最相關聯之兩個組為：基因組I（GI），其包含諾沃克病毒（Norwalk virus）、沙漠風暴病毒（Desert Shield virus）及南安普頓病毒（Southampton virus）；及基因組II（GII），其包含布里斯托爾病毒（Bristol virus）、洛茲達雷病毒（Lordsdale virus）、多倫多病毒（Toronto virus）、墨西哥病毒（Mexico virus）、夏威夷病毒（Hawaii virus）及雪山病毒（Snow Mountain virus）。
在一些實施例中，本文所用之化合物用於治療與胃腸炎相關聯之諾羅病毒。在一些實施例中，諾羅病毒與諾沃克病毒相關聯。在一些實施例中，諾羅病毒與HuNV GGII.4相關聯。
在一些實施例中，本文所揭示之化合物可用於治療諾羅病毒，其中化合物結合至游離病毒，或抑制諾羅病毒蛋白酶。在一些情況下，化合物可靶向兩者（游離病毒及蛋白酶）。
在人類中，諾羅病毒之常見症狀為噁心、嘔吐、水樣便、腹痛，且在一些情況下為味覺喪失。諾羅病毒可在免疫功能不全的人群中建立長期感染。在嚴重情況下，持久性感染會引起諾羅病毒相關聯腸病、腸道絨毛萎縮及吸收不良。諾羅病毒相關聯胃腸炎亦稱為「冬季嘔吐症（winter vomiting bug）」。
人通常在暴露於諾羅病毒後12至48小時出現胃腸炎症狀。可能出現一般嗜睡、無力、肌肉痛、頭痛及低燒。
如本文所用，術語「冠狀病毒介導之病況」及「冠狀病毒感染」可互換使用以意謂由冠狀病毒感染引起之疾病。冠狀病毒之非限制性實例包含嚴重急性呼吸道症候群相關冠狀病毒（SARS）、中東呼吸道症候群相關冠狀病毒（MERS）及SARS-CoV-2病毒（亦稱為2019-nCoV或武漢冠狀病毒（Wuhan coronavirus））。冠狀病毒介導之病況或冠狀病毒感染之非限制性實例包含SARS、MERS及COVID-19。
冠狀病毒為在哺乳動物及鳥類中引起疾病的病毒科。冠狀病毒係屬於冠狀病毒科中之正冠狀病毒亞科，屬於網巢病毒目。存在四種主要的冠狀病毒屬，稱為α、β、γ及δ。影響人類之冠狀病毒包含人類冠狀病毒229E（HCoV-229E）、人類冠狀病毒OC43（HCoV-OC43）、嚴重急性呼吸道症候群相關冠狀病毒（SARS-CoV）、人類冠狀病毒NL63（HCoV-NL63，紐黑文冠狀病毒（New Haven coronavirus））、人類冠狀病毒HKU1、中東呼吸道症候群相關冠狀病毒（MERS-CoV，先前稱為新型冠狀病毒2012及HCoV-EMC）及SARS-CoV-2（亦稱為2019-nCoV及武漢冠狀病毒）。
在人類中，冠狀病毒引起呼吸道感染，包含感冒，其通常為輕度呼吸道感染，但較罕見形式，諸如SARS、MERS及SARS-CoV-2（2019-20 COVID-19爆發之病因）可能為致命的。症狀在其他物種中有所不同：在雞中，其引起上呼吸道疾病，而在奶牛及豬中，冠狀病毒引起腹瀉。無疫苗或抗病毒藥物預防或治療人類冠狀病毒感染。冠狀病毒HCoV-229E、-NL63、-OC43及-HKU1在人類群體中不斷循環，且在全世界在成人及兒童中引起呼吸道感染。
在一些實施例中，本文所用之化合物用於治療α冠狀病毒或β冠狀病毒。在一些情況下，本文所用之化合物用於治療α冠狀病毒。α冠狀病毒之非限制性實例包含HCoV-229E及HCoV-NL63。在一些實施例中，本文所用之化合物用於治療β冠狀病毒。β冠狀病毒之非限制性實例為HCoV-HKU1、HCoV-OC43、中東呼吸道症候群冠狀病毒（MERS-CoV）、嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒（SARS-CoV）及SARS-CoV-2。在一些實施例中，本文所用之化合物用於治療與SARS、MERS及COVID-19相關聯之冠狀病毒。在一些實施例中，冠狀病毒與SARS相關聯。在一些實施例中，冠狀病毒與MERS相關聯。在一些實施例中，冠狀病毒與COVID-19相關聯。
在一些實施例中，本文所揭示之化合物可用於治療冠狀病毒，其中化合物結合至游離病毒，或抑制冠狀病毒蛋白酶。在一些情況下，化合物可靶向兩者（游離病毒及蛋白酶）。
在人類中，冠狀病毒之常見症狀為發燒、咳嗽、呼吸短促及肌痛。
小核糖核酸病毒感染之非限制性實例包含鼻病毒介導之病況及鼻病毒感染。如本文所用，術語「鼻病毒介導之病況」及「鼻病毒感染」可互換使用以意謂由鼻病毒感染引起之疾病。
小核糖核酸病毒感染人類及動物兩者，會引起嚴重麻痹（麻痹性脊髓灰白質炎）、無菌性腦膜炎、肝炎、肋肌痛、心肌炎、皮膚出疹及感冒；但無症狀感染很常見。若干種醫學上重要的屬為此科之成員，諸如腸病毒（包含脊髓灰白質炎病毒（poliovirus；PV）、鼻病毒及人類腸病毒（例如柯薩奇病毒（coxsackie virus））；肝病毒，其包含A型肝炎病毒（HAV）；及口蹄疫病毒（aphthovirus），其包含口蹄疫病毒（foot- and mouth disease virus；FMDV））。公認為鼻病毒係人類感冒之主要病因，且包括三種不同物種：A、B及C。主要藉由氣溶膠途徑及病毒在鼻中複製進行傳播。
在一些實施例中，本文所揭示之化合物可用於治療小核糖核酸病毒感染。在一些實施例中，本文所揭示之化合物可用於治療鼻病毒感染。在一些實施例中，本文所揭示之化合物可用於治療鼻病毒感染，其中化合物結合至游離病毒，或抑制鼻病毒蛋白酶。在一些情況下，化合物可靶向兩者（游離病毒及蛋白酶）。
術語「疾病」、「病症」及「病況」在本文可互換使用以指代諾羅病毒或冠狀病毒介導之醫學或病理學病況。
如本文所用，術語「個體」及「患者」可互換使用。術語「個體」及「患者」係指動物（例如，諸如雞、鵪鶉或火雞之鳥類，或哺乳動物），特定言之包含非靈長類動物（例如，牛、豬、馬、羊、家兔、天竺鼠、大鼠、貓、狗及小鼠）及靈長類動物（例如，猴、黑猩猩及人類）的「哺乳動物」，且更特定言之人類。在一個實施例中，個體為非人類動物，諸如農畜（例如，馬、牛、豬或羊），或寵物（例如，狗、貓、天竺鼠或家兔）。在一較佳實施例中，個體為「人類」。
如本文所用，術語「生物樣本」包含但不限於細胞培養物或其提取物；獲自哺乳動物之活檢材料或其提取物；血液、唾液、尿液、糞便、精液、淚液或其他體液或其提取物。
如本文所用，「感染倍率」或「MOI」為感染劑（例如，噬菌體或病毒）與感染目標（例如，細胞）之比率。舉例而言，當提及用感染性病毒顆粒接種之細胞之群時，感染倍率或MOI為由沈積於孔中之感染性病毒顆粒的數目除以存在於孔中之目標細胞的數目來定義的比率。
如本文所用，術語「抑制諾羅病毒之複製」及「抑制冠狀病毒之複製」包含降低病毒複製之量（例如，降低至少10%）及完全遏制病毒複製（亦即100%降低病毒複製之量）兩者。在一些實施例中，將諾羅病毒或冠狀病毒之複製抑制至少50%、至少65%、至少75%、至少85%、至少90%或至少95%。
諾羅病毒或冠狀病毒複製可藉由本領域中已知之任何適合的方法量測。舉例而言，可量測生物樣本（例如經感染之細胞培養物）之諾羅病毒或冠狀病毒的病毒滴度或人類之諾羅病毒或冠狀病毒的病毒滴度（例如患者之肺病毒滴度）。更特定言之，對於基於細胞之分析，在細胞經活體外培養之各情況下，在存在或不存在測試劑之情況下將病毒添加至培養物，且在適合的時間長度後評估病毒依賴性端點。該等分析為本領域中已知的。可用於本揭示案的第一類細胞分析視經感染目標細胞之死亡，亦即稱為細胞病變效應（CPE）之過程而定，其中病毒感染引起細胞來源之耗竭及細胞之最終裂解。在第一類細胞分析中，微量滴定盤之孔中的較小部分細胞經感染（通常1/10至1/1000），使病毒在48至72小時內經歷若干輪複製，隨後使用細胞ATP含量相較於未感染對照物之減小來量測細胞死亡之量。可用於本揭示案的第二類細胞分析視經感染細胞中的病毒特異性RNA分子之倍增而定，其中使用分支鏈DNA雜交方法（bDNA）直接量測RNA含量。在第二類細胞分析中，較低數目之細胞最初於微量滴定盤之孔中進行感染，使病毒在感染之細胞中複製且擴散至額外輪次之細胞，接著該等細胞裂解且對病毒RNA含量進行量測。通常在18至36小時後提早停止此分析，此時所有目標細胞仍有活力。病毒RNA藉由雜交至固定於分析盤之孔的特異性寡核苷酸探針、接著藉由與連接至報導酶之額外探針雜交而擴增信號來定量。
如本文所用，「病毒滴度（或滴度）」為病毒濃度之量度。滴度測試可採用連續稀釋以自本質上僅評估為陽性或陰性之分析型程序獲得大致定量資訊。滴度對應於仍產生正讀數之最高稀釋因子；舉例而言，前8次連續兩倍稀釋中之正讀數轉換為1:256之滴度。為確定滴度，將製備若干稀釋液，諸如10-1 、10-2 、10-3 、10-8 。
如本文所使用，術語「治療（treat/treatment/treating）」係指治療性與預防性治療。舉例而言，治療性治療包含因投與一或多種療法（例如一或多種治療劑，諸如本揭示案之化合物或組合物）而降低或減輕諾羅病毒或冠狀病毒介導之病況的進展、嚴重程度及/或持續時間，或改善諾羅病毒或冠狀病毒介導之病況的一或多種症狀（特定言之，一或多種可辨別的症狀）。在具體實施例中，治療性治療包含改善諾羅病毒或冠狀病毒介導之病況的至少一個可量測物理參數。在其他實施例中，治療性治療包含在物理上藉由例如使可辨別的症狀穩定、在生理上藉由例如使物理參數穩定或兩者來抑制諾羅病毒或冠狀病毒介導之病況的進展。在其他實施例中，治療性治療包含使諾羅病毒或冠狀病毒介導之感染減少或穩定。抗病毒藥物可用於社區環境以治療已患有諾羅病毒或冠狀病毒之人群以減輕症狀之嚴重程度且減少其患病天數。
術語「化學療法」係指使用例如小分子藥物（而非「疫苗」）之藥品用於治療病症或疾病。
如本文所用，術語「預防」或「預防性用途」及「預防性治療」係指目的在於預防而非治療或治癒疾病的任何醫學或公共衛生程序。如本文所用，術語「預防（prevent/prevention/preventing）」係指降低患上或出現給定病況的風險，或降低或抑制並未不適但已成為或可能接近成為帶病人員的個體之復發或該病況。術語「化學預防」係指使用例如小分子藥物（而非「疫苗」）之藥品用於預防病症或疾病。
如本文所用，預防性用途包含在已偵測到爆發之情形下的使用，以預防感染在處於嚴重諾羅病毒或冠狀病毒併發症之高風險下的大量人群彼此緊密接觸的場所（例如，醫院病房、日托中心、監獄、護理之家等）的接觸傳染或擴散。其亦包含在需要保護以免患諾羅病毒或冠狀病毒但在疫苗接種後並未獲得保護（例如，歸因於免疫系統弱）之群體之中的使用，或在疫苗對其不可用時或在其由於副作用無法獲得疫苗時的使用。其亦包含在疫苗接種後兩週期間的使用，因為在該時間期間疫苗仍為無效的。預防性用途亦可包含治療並未患有諾羅病毒或冠狀病毒或不認為處於併發症高風險下之人以降低感染諾羅病毒或冠狀病毒且將其傳染給與其緊密接觸之高風險的人（例如醫療保健工作者、護理之家工作者等）之機會。
在一些實施例中，本揭示案之方法為針對易患由諾羅病毒或冠狀病毒之感染引起的併發症之患者，特定言之人類的「預防性（preventative/prophylactic）」措施。預防性用途包含在已確認「指示病例」或「爆發」之情況中之用途，以防止感染在社區或群體之其餘部分中擴散。
在實施例中，本揭示案之方法用作對社區或群體之成員（特定言之人類）的「預防性」措施，以防止感染擴散。
如本文所用，「有效量」係指足以引起所期望生物反應之量。在本揭示案中，所期望生物反應為抑制諾羅病毒或冠狀病毒之複製，降低諾羅病毒或冠狀病毒之量或降低或改善諾羅病毒或冠狀病毒感染之嚴重程度、持續時間、進展或發作，預防諾羅病毒或冠狀病毒感染之加快，預防與諾羅病毒或冠狀病毒感染相關聯之症狀的復發、發展、發作或進展，或增強或改進針對諾羅病毒或冠狀病毒感染使用之另一種療法的預防性或治療效應。向個體投與之化合物之精確量將視投與模式、感染之類型及嚴重程度以及個體之特徵（諸如一般健康狀況、年齡、性別、體重及對藥物之耐受性）而定。熟習此項技術者將能夠依據此等及其他因素判定適當的劑量。當與其他抗病毒劑共同投與時，例如當與抗諾羅病毒或冠狀病毒藥品共同投與時，「有效量」之第二藥劑將視所使用之藥物類型而定。批准藥劑之適合的劑量為已知的，且可由熟習此項技術者根據個體之病況、所治療病況之類型及所使用的本文所述之化合物之量進行調整。在未明確地標註量之情況下，應假設安全且有效的量。舉例而言，本文所述之化合物可能以大約0.01至100毫克/公斤體重/天之間的劑量範圍向個體投與以用於治療性或預防性治療。
一般而言，給藥方案可根據各種因素進行選擇，該等因素包含：所治療之病症及病症之嚴重程度；採用之特定化合物之活性；採用之特定組合物；患者之年齡、體重、一般健康狀況、性別及膳食；採用之特定化合物之投與時間、投與途徑及排泄率；個體之腎及肝功能；及採用之特定化合物或其鹽、治療之持續時間；與採用之特定化合物組合或同時使用之藥物；以及醫學領域中熟知之類似因素。熟習此項技術者可容易地判定及開立用於治療、預防、抑制（完全或部分）或遏制疾病進展所需之本文所述之化合物的有效量。
用於本文所述之用途的化合物之劑量的範圍可介於約0.01至約100毫克/公斤體重/天、約0.01至約50毫克/公斤體重/天、約0.1至約50毫克/公斤體重/天或約1至約25毫克/公斤體重/天之間。應理解，每天之總量可以單次劑量投與，或可以多次給藥投與，諸如一天兩次（例如每12小時）、一天三次（例如每8小時）或一天四次（例如每6小時）。
對於治療性治療，可在症狀（例如鼻塞、咽喉痛、咳嗽、疼痛、乏力、頭痛及發冷/盜汗）之發作之例如48小時內（或40小時內、或小於2天、或小於1.5天或24小時內）向患者投與本文所述之化合物。治療性治療可持續任何適合的持續時間，例如，5天、7天、10天、14天等。對於社區爆發期間之預防性治療，可例如在指示病例之症狀之發作的例如2天內向患者投與本文所述之化合物，且可持續任何合適的持續時間，例如7天、10天、14天、20天、28天、35天、42天等。 組合療法
本文所述之化合物可以組合療法，亦即與其他抗諾羅病毒或抗冠狀病毒化合物結合或與疫苗結合使用。在患者可能暴露於超過一種形式之諾羅病毒或冠狀病毒的情況下，組合療法可能尤其有利。
在本揭示案之方法或醫藥組合物中單獨或與額外的適合治療劑（例如抗病毒劑或疫苗）組合採用式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，可達成安全且有效量。當採用「組合療法」時，可使用第一量之式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及第二量之額外的適合治療劑（例如抗病毒劑或疫苗）達成安全且有效量。
在實施例中，式I、表A、表B或表C之化合物或醫藥學上可接受之鹽及額外治療劑各自以安全且有效量（亦即，若單獨投與，則各自以治療上有效之量）投與。在其他實施例中，式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及額外治療劑各自以不單獨提供治療效應之量（次治療劑量）投與。在又其他實施例中，式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以安全且有效量投與，而額外治療劑以次治療劑量投與。在再其他實施例中，式I、表A、表B或表C之化合物、其醫藥學上可接受之鹽可以次治療劑量投與，而額外治療劑，例如適合抗病毒治療劑以安全且有效量投與。
如本文所用，術語「組合」或「共同投與」可互換使用以指使超過一種療法（例如一或多種預防劑及/或治療劑）。該等術語之使用不限制向個體投與之療法（例如預防劑及/或治療劑）的次序。
共同投與涵蓋以基本上同時之方式，諸如以單一醫藥組合物形式，例如具有固定比率之第一量與第二量之膠囊或錠劑，或以多個各自分開之膠囊或錠劑形式投與第一量及第二量的共同投與之化合物。另外，該共同投與亦涵蓋以任一次序以依序方式使用各化合物。
在實施例中，本揭示案係針對組合療法用於抑制病毒在生物樣本或患者中之複製或用於使用本文所述之化合物或醫藥組合物，例如式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療或預防患者之諾羅病毒或冠狀病毒感染的方法。因此，醫藥組合物亦包含包括與呈現抗諾羅病毒或冠狀病毒活性之抗病毒化合物組合的如本文中所揭示之化合物（例如，病毒複製之抑制劑）的彼等醫藥組合物。
本文所揭示之化合物及組合物的使用方法亦包含化學療法與式I、表A、表B或表C之化合物或組合物或其醫藥學上可接受之鹽之組合或與本揭示案之化合物或組合物與另一種抗病毒劑之組合一起。
當共同投與涉及單獨投與第一量之式I、表A、表B或表C或其醫藥學上可接受之鹽及第二量之另一種治療劑時，化合物在足夠接近的時間內投與以具有所期望治療效應。舉例而言，可產生所期望治療效應之各投與之間的時間段的範圍可在數分鐘至數小時之範圍內，且可考慮到各化合物之特性（諸如效能、溶解度、生物可用性、血漿半衰期及動力學概況）來判定。舉例而言，式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及第二治療劑可按任何次序彼此間隔約24小時、彼此間隔約16小時、彼此間隔約8小時、彼此間隔約4小時、彼此間隔約1小時或彼此間隔約30分鐘地投與。
更特定言之，第一療法（例如，諸如本揭示案之化合物之預防劑或治療劑）可在向個體投與第二療法（例如，諸如抗病毒劑之預防劑或治療劑）之前（例如，之前5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時、96小時、1週、2週、3週、4週、5週、6週、8週或12週）、同時或之後（例如，之後5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時、96小時、1週、2週、3週、4週、5週、6週、8週或12週）進行投與。
應理解，共同投與第一量之式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及第二量之另一種治療劑的方法可產生增強或協同治療效應，其中組合之效應大於將由單獨投與第一量之式I、表A、表B或表C之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及第二量額外治療劑產生的累加效應。
如本文所用，術語「協同」係指與療法之假定累加效應相比更有效的本文所揭示之化合物與另一種療法（例如，預防劑或治療劑）之組合。療法組合（例如預防劑或治療劑之組合）之協同效應可允許使用較低劑量之療法中之一或多者及/或較不頻繁地向個體投與該等療法。能夠利用較低劑量之療法（例如預防劑或治療劑）及/或較不頻繁地投與該療法可降低與向個體投與該療法相關聯之毒性而不降低該療法在預防、處理或治療病症方面之功效。另外，協同作用可使得藥劑在預防、處理或治療病症方面之功效改良。最後，療法之組合（例如預防劑或治療劑之組合）的協同作用可避免或降低與任一單獨療法之使用相關聯之不利或不合需要之副作用。
當使用如本文所揭示之化合物的組合療法與病毒疫苗組合時，兩種治療劑均可投與以使得每次投與之間之時間段可以更長（例如數天、數週或數天）。
協同作用之存在可使用用於評估藥物相互作用之適合的方法來判定。適合的方法包含例如Sigmoid-Emax方程式（Holford, N.H.G.及Scheiner, L.B.，《臨床藥代動力學（Clin. Pharmacokinet.）》6: 429-453 (1981)）、Loewe可加性方程（Loewe, S及Muischnek, H.,《實驗病理學與藥理學檔案（Arch. Exp. Pathol Pharmacol.）》114: 313-326 (1926)）及中值效應方程（Chou，TC及Talalay，P.，《酶調控研究進展（Adv. Enzyme Regul.）》22: 27-55 (1984)）。上文提及之各方程式可結合實驗資料應用以產生有助於評估藥物組合之作用的對應圖表。與上文提及之方程式相關之對應圖表分別為濃度-效應曲線、等效線圖曲線及組合指數曲線。 對掌性分離
本文所述之化合物可具有不對稱中心且以外消旋體、外消旋混合物、個別非對映異構體或對映異構體形式存在，其中所有異構體形式均包含在本揭示案中。具有對掌性中心之本揭示案之化合物可呈光學活性及外消旋形式存在且經分離。一些化合物可呈現多形現象。本揭示案涵蓋具有本文所述之適用特性的本揭示案之化合物之外消旋、光學活性、多形或立體異構形式或其混合物。光學活性形式可藉由例如用再結晶技術解析外消旋形式、藉由自光學活性起始材料合成、藉由對掌性合成、或藉由使用對掌性固定相之層析分離或藉由酶促解析來製備。吾人可純化各別化合物，隨後衍生化該化合物以形成本文所述之化合物或純化該化合物本身。
光學活性形式之化合物可藉由使用本領域中已知的任何方法製備，該方法包含但不限於藉由再結晶技術解析外消旋形式、藉由自光學活性起始材料合成、藉由對掌性合成、或藉由使用對掌性固定相之層析分離。
獲得光活性材料之方法的實例包含以下至少一種。 i）    晶體之物理分離：手動分離個別對映異構體之肉眼可見晶體的技術。若分離對映異構體之晶體存在，亦即材料聚結，且晶體在視覺上不同，則可使用此技術； ii）   同時結晶：可能僅當外消旋體以固體狀態聚結時，個別對映異構體才自外消旋體之溶液中分別結晶的技術； iii）  酶促解析：藉助於對映異構體與酶之不同反應速率部分或完全分離外消旋體的技術； iv）  酶促不對稱合成：合成之至少一個步驟使用酶促反應以獲得所期望對映異構體之對映異構性純或增濃的合成前驅體的合成技術； v）   化學不對稱合成：可使用對掌性催化劑或對掌性助劑達成的在產物中產生不對稱性（亦即對掌性）之條件下，所期望對映異構體由非對掌性前驅體合成的合成技術； vi）  非對映異構體分離：使外消旋化合物與將個別對映異構體轉化為非對映異構體的對映異構性純的試劑（對掌性助劑）反應的技術。所得非對映異構體隨後藉助於其現在更明顯的結構差異及之後移除以獲得所期望對映異構體的對掌性助劑藉由層析或結晶分離； vii） 第一階及第二階不對稱轉換：來自外消旋體之非對映異構體平衡以在來自所期望的對映異構體之非對映異構體之溶液中產生優勢，或其中自所期望對映異構體優先結晶非對映異構體干擾平衡以使得最終原則上所有材料自所期望對映異構體轉化為結晶非對映異構體的技術。所期望對映異構體隨後自非對映異構體釋放； viii）   動力學解析：此技術係指藉助於對映異構體與對掌性、非外消旋試劑或催化劑在動力學條件下之不相等反應速率達成外消旋體之部分或完全解析（或部分溶解之化合物之進一步解析）； x）   自非外消旋前驅體對映異構特異性合成：所期望對映異構體獲自非對掌性起始材料，且其中立體化學完整性在合成過程中不受損或僅最低限度地受損的合成技術； x）   對掌性液相層析：外消旋體之對映異構體藉助於其與固定相之不同相互作用（包含但不限於經由對掌性HPLC）在液體移動相中分離的技術。固定相可由對掌性材料構成，或移動相可含有額外的對掌性材料以引起不同相互作用； xi)     對掌性氣相層析：外消旋體揮發，且對映異構體藉助於其以氣態移動相與含有固定的非外消旋對掌性吸附相之管柱的不同相互作用分離的技術； xii） 用對掌性溶劑提取：對映異構體藉助於將一種對映異構體優先溶解至特定對掌性溶劑中而分離的技術； xiii）   跨對掌性膜運輸：使外消旋體與薄膜障壁接觸的技術。障壁通常分離兩種可混溶流體，一種含有外消旋體，且驅動力（諸如濃度或壓力差）引起跨膜障壁之優先運輸。分離藉由膜之非外消旋對掌性性質而進行，該性質使得外消旋體中僅一種對映異構體可通過。
一個實施例中使用對掌性層析，包含但不限於模擬移動床層析。多種對掌性固定相為市售的。
將參考以下非限制性實例更好地理解本揭示案。
化合物合成 實例1：化合物C12、C20及C1之合成
Figure 02_image140
4-((S)-4-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（3） 將(S)-4-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（1 ） （1 g，3.389 mmol）、2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（2 ） （888 mg，3.389 mmol）及吡啶（2 mL，1體積）於EtOAc（40 mL）中之混合物在0℃下用T3 P（4.31 mL，50重量%於EtOAc中，16.129 mmol）處理。將所得混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用1N HCl（20 mL）淬滅且添加水（50 mL），用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到4-((S)-4-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（3 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚，Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 540.40 (M+H)+ 4-((S)-4-胺基-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（4）
在室溫下向4-((S)-4-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（3 ）（1 g，1.855 mmol）於MeOH（40 mL）中之攪拌溶液中添加10% Pd/C（500 mg，濕重50%），且在H2 氛圍（氣球壓力）下將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物經由矽藻土過濾，用MeOH（2 × 10 mL）洗滌，且在減壓下蒸發，得到4-((S)-4-胺基-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 406.35 (M+H)+ 4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（5）
在0℃下，向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （1 g，2.949 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（845 mg，4.424 mmol）、HOBT（597 mg，4.424 mmol）、DIPEA（1.5 mL，8.849 mmol）及4-((S)-4-胺基-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（4 ）（1.38 g，3.539 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 727.67 (M+H)+ 4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（6）
在0℃下向4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） （900 mg，1.241 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.24 mL，2.48 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。用鹽水溶液（30 mL）洗滌有機層，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 699.2 (M+H)+ 4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C20）
在0℃下向4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（6 ）（150 mg，0.2148 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（Dess-Martin periodinane）（273 mg，0.6446 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（Hypo溶液）（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C20 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 697.27 (M+H)+ 4-((4S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(二乙氧基磷醯基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C1）
向4-((S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C20 ）（200 mg粗產物，0.2873 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.16 mL，0.8620 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.12 mL，0.8620 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到4-((4S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(二乙氧基磷醯基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C1 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 835.58 (M+H)+ ((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基-5-(3-苯基哌
Figure 02_image009
-1-基)戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C12）
在0℃下向4-((4S)-4-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(二乙氧基磷醯基)-5-羥基戊醯基)-2-苯基哌
Figure 02_image009
-1-甲酸三級丁酯（C1 ）（220 mg，0.2637 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（2 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（2 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基-5-(3-苯基哌
Figure 02_image009
-1-基)戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C12 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 735.53 (M+H)+ 實例2：化合物C22及C2之合成
Figure 02_image152
N2-(三級丁氧基羰基)-N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯（C）
在0℃下向(S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ A ） （3 g，11.4942 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中添加TEA（3.2 mL，22.988 mmol），且添加BOP試劑（7.62 g，17.241 mmol）及含2M二甲胺之THF（7.4 mL，14.942 mmol）（ B ） ，且隨後將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在40%甲醇/DCM下溶離，得到N2-(三級丁氧基羰基)-N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯（ C ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCM Rf ：0.3LCMS (ESI)：m/z 289.30 [M+H]+ N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（胺片段）
在0℃下向N2-(三級丁氧基羰基)-N5-(3-氯苯基乙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ C ） （1.5 g，5.208 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（15 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，用二乙醚研磨所得粗產物，得到N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCM Rf ：0.1LCMS (ESI)：m/z 189.17 [M+H]+ 2-胺基-4,4-二甲基戊酸甲酯鹽酸鹽（2）
在室溫下在0℃下向2-胺基-4,4-二甲基戊酸（ 1 ） （4 g，27.586 mmol）於MeOH（40 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加SOCl2 （12 mL，3體積），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得呈固體狀之粗殘餘物。將其用石油醚研磨，且將固體過濾，隨後在真空下乾燥，得到2-胺基-4,4-二甲基戊酸甲酯鹽酸鹽（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCM Rf ：0.3 2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸甲酯（4）
在室溫下向(3-氯苯基)甲醇（ 3 ） （2 g，14.084 mmol）於CAN（20 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（5.4 g，21.126 mmol），隨後添加三乙胺（6 mL，42.25 mmol），且攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將2-胺基-4,4-二甲基戊酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （3.27 g，16.901 mmol）放入ACN（20 mL）中，且用三乙胺（6 mL，42.252 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。16小時後，將反應混合物用冰水（15 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。藉由正相層析純化粗殘餘物，得到2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z: 328.41[M+H]- 2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸（5）
在室溫下向2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸甲酯（ 4 ） （1.5 g，4.587 mmol）於THF（20 mL）及水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（330 mg，13.761 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用2N HCL溶液酸化直至pH為約4，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗化合物2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸（ 5 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 620.1 (M+H)+ N2-(2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊醯基)-N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯（6）
在0℃下向2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊酸（ 5 ） （1.6 g，5.1118 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.46 g，7.667 mmol）、HOBT（1.03 g，7.667 mmol）、DIPEA（1.96 mL，10.6508 mmol）及N5-(3-氯苯基乙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯氯化氫（胺片段） （2.7 mL，15.335 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在80%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N2-(2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊醯基)-N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 484.90 [M+H]+ (1-(((S)-5-(二甲胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7）
在0℃下向N2-(2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4,4-二甲基戊醯基)-N5,N5-二甲基-L-麩胺酸甲酯（ 6 ） （600 mg，1.2422 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.3 mL，2.484 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用水（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗殘餘物。將其藉由矽膠管柱層析純化，得到(1-(((S)-5-(二甲胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 456.47 (M+H)+ (1-(((S)-5-(二甲胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C22）
在0℃下向(1-(((S)-5-(二甲胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7 ）（150 mg，0.329 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加PIDA（127 mg，0.395 mmol），且隨後在0℃下添加TEMPO（10 mg，0.065 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到(1-(((S)-5-(二甲胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C22 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 454.25 (M+H)+ (1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(二甲胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C2）
向(1-(((S)-5-(二甲胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C22 ） （200 mg，0.4415 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.324 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.2 mL，1.324 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到(1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(二甲胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-4,4-二甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C2 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 592.51 (M+H)+ 實例3：化合物C16及C6之合成
Figure 02_image154
(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S )-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（ 2 ） （3 g，13.531 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（7 mL，40.59 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸戊酯（ 1 ） （2.34 mL，16.2 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 330.2 (M+NH)+ (S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（2.5 g，8.3 mmol）於THF（20 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（600 mg，25 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2 (S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）（1 g，3.5 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1 g，5.2 mmol）、HOBT（700 mg，5.23 mmol）、DIPEA（1.7 mL，10.46 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（1.38 g，4.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 560.63 (M+H)+ ((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）（900 mg，1.6 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.2 mL，1.53 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 532.5 (M+H)+ ((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（C16）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6 ）（200 mg，0.376 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（479 mg，1.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（ C16 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 530.56 (M+H)+ ((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（C6）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（ C16 ） （248 mg，0.47 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.24 mL，1.41 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.19 mL，1.41 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化為((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（ C6 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 668.68 (M+H)+ 實例4：化合物C26及C7之合成
Figure 02_image160
(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S)-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（2 ）（4.8 g，2.1 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（9.7 mL，5.4 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸己酯（1 ）（3 g，1.8 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 314.42 (M+H)+
(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（2 g，6.36 mmol）於THF（20 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（450 mg，19 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 300.2 (M+H)+
1-((S )-4-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-1,2,3,5-四氫-4H -苯并[e ][1,4]二氮呯-4-甲酸三級丁酯（5）
在0℃下，向(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（1.2 g，4 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.14 g，6 mmol）、HOBT（834 mg，6 mmol）、DIPEA（2 mL，12 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（1.57 g，4.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（500 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到1-((S )-4-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-1,2,3,5-四氫-4H -苯并[e ][1,4]二氮呯-4-甲酸三級丁酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 574.53 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） （960 mg，1.67 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.25 mL，1.5 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 546.51 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（C26）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（ 6 ） （250 mg，0.45 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（583 mg，1.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（ C26 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 544.55 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（C7）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（248 mg，0.45 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.23 mL，1.37 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.18 mL，1.37 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（C7 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 682.6 (M+H)+
實例5：化合物C15及C9之合成
Figure 02_image164
(5-氯-2-羥基苯甲基) (2-羥乙基)胺基甲酸三級丁酯（3）
在室溫下向5-氯-2-羥基苯甲醛（ 1 ） （5 g，32.05 mmol）於甲醇（50 mL）中之攪拌溶液中添加2-胺基乙-1-醇（ 2 ） （1.95 mL，32.05 mmol），且攪拌6小時，隨後在0℃下添加NaBH4 （605 mg，16.02 mmol），且攪拌6小時。將反應混合物冷卻至0℃，且添加三乙胺（2.8 mL，19.93 mmol）、(Boc)2 O（3.98 g，18.27 mmol），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發，且用2N HCl酸化直至pH為約4，將固體過濾，且用水（100 mL）洗滌，在真空下乾燥，得到(5-氯-2-羥基苯甲基)(2-羥乙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 300.35 [M-H]
7-氯-2, 3, 4, 5-四氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯（4）
在-10℃下向DIAD（3.25 g，16.12 mmol）、三苯基膦（4.22 g，13.12 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加含(5-氯-2-羥基苯甲基) (2-羥乙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （5 g，16.61 mmol）之THF（20 mL），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發且溶解於二氯甲烷（50 mL）中，且在0℃下添加TFA（17 mL），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用10% NaOH鹼化為pH為約12，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到7-氯-2,3,4,5-四氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯（ 4 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.25LCMS (ESI)：m/z = 184.33 [M+H]+
(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(7-氯-2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向甲基(S )-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ 5 ） （1.5 g，57.47 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.64 g，86.20 mmol）、HOBT（1.16 g，86.20 mmol）、DIPEA（3.17 mL，172.3 mmol）及7-氯-2,3,4,5-四氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯（ 4 ） （2.1 g，68.96 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在50%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 427.36 [M+H]+
(S )-2-胺基-5-(7-氯-2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（7）
在0℃下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 6 ） （2 g，4.69 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(S )-2-胺基-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（7 ）。TLC 系統： 5 %甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 327.25 [M+H]+
(S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊酸甲酯（7）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （0.7 g，2.064 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.59 g，3.097 mmol）、HOBT（0.418 g，3.097 mmol）、DIPEA（0.5 mL，6.19 mmol）及(S )-2-胺基-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（ 7 ） （0.896 g，2.477 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（25 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在45%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 647.22 [M+H]+
((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8）
在0℃下向(S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 8 ） （0.3 g，0.463 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.7 mL，0.46 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 5 %甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 620.26 (M+H)+
((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C15）
將((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） (200 mg，0.33 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（426 mg，1.005 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由combi-flash層析純化，藉由3%甲醇/二氯甲烷溶離，得到((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C15 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 618.33 (M+H)+
((2S )-1-(((2S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C9）
向((S )-1-(((S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4 (5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C15 ） （250 mg粗產物，0.405 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.215 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.12 mL，1.215 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用飽和氯化銨（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化進行純化，得到((2S )-1-(((2S )-5-(7-氯-2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4 (5H )-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C9 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 756.10 [M+H]+
實例6：化合物C29及C11之合成
Figure 02_image170
(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（2）
在-78℃下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（1 ）（2.0 g，5.08 mmol）於THF（30 mL）中之攪拌溶液中添加1M LHMDS（10.7 mL，10.01 mmol），且攪拌1小時，隨後添加含碘甲烷（1.2 mL，20.32 mmol）之THF，且在-78℃下攪拌2小時。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由NP純化，化合物在30%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（2 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 407.41 [M+H]+
(2S )-2-胺基-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（3）
在0℃下向(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（4 ）（2.2 g，7.18 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(2S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（3 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 307.36 [M+H]+
(2S )-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（4）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （1.0 g，2.98 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.84 g，4.47 mmol）、HOBt（0.59 g，4.47 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.94 mmol）及(2S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（1 g，3.27 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（40 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由格雷斯NP（grace NP）純化，化合物在2%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 628.59 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5）
在0℃下向(2S )-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-5-側氧基戊酸甲酯（ 4 ） （1.2 g，1.91 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.4 mL，2.86 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 600.56 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C29）
將((2S )-3-環己基-1-(((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） （150 mg，0.25 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（318 mg，0.751 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（10 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1- (((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C29 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 598.28 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2, 3-二氫苯并[f] [1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4 (5H )-基)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C11）
向((2S )-3-環己基-1-(((2S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-4-甲基-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C29 ） （250 mg粗產物，0.41 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.22 mL，1.23 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.17 mL，1.23 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C11 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 736.54 (M+H)+
實例7：化合物C23及C13之合成
Figure 02_image172
(S )-4-(((3-環己基-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（3）
在室溫下向4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 1 ） （300 mg，1.49 mmol）於ACN（5 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（572 mg，2.23 mmol），隨後添加三乙胺（0.62 mL，4.47 mmol），且攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 2 ） （250 mg，1.12 mmol）放入ACN（5 mL）中，且用三乙胺（0.3 mL，2.25 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。16小時後，將反應混合物用冰水（15 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S )-4-(((3-環己基-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 435.2[M+Na]-
(S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（4）
在室溫下向(S )-4-(((3-環己基-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） （0.35 g，0.84 mmol）於THF（10 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（106 mg，2.54 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z = 421.39 [M+Na]+
4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-甲氧基-1, 5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（5）
在0℃下向(S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） （1.5 g，3.64 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.04 g，5.46 mmol）、HOBT（0.73 g，5.46 mmol）、DIPEA（1.9 mL，10.92 mmol）及(S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段） （1.27 g，4.36 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將所獲得之固體過濾，且用過量水洗滌，隨後在真空下乾燥，得到4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-甲氧基-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 673.46 [M+H]+
4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2, 3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（6）
在0℃下向4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-甲氧基-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） （1.5 g，2.23 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.2 mL，4.46 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（30 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其用二乙醚研磨，得到4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 645.67 [M+H]+
4-((((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1, 5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（C23）
將4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 6 ） （200 mg，0.31 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（395 mg，0.93 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，將此殘餘物藉由正相層析純化，藉由3%甲醇/二氯甲烷溶離，得到4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ C23 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 643.68 (M+H)+
4-((((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（C13）
向4-((((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ C23 ） （200 mg粗產物，0.31 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.16 mL，0.93 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.13 mL，0.93 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用飽和氯化銨（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到4-((((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ C13 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 781.71 [M+H]+
實例8：化合物C24及C14之合成
Figure 02_image177
(S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S)-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（2 ） （2.97 g，13.48 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（5.8 mL，33.70 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸庚酯（1 ）（2 g，11.235 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 20% EtOAc/石油醚Rf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 328.49 (M+H)+
(S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（1.2 g，3.66 mmol）於THF（12 mL）及水（6 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（264 mg，11.009 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 314.2 (M+H)+
(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下，向(S )-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙酸（1 g，3.18 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（0.91 g，4.7 mmol）、HOBT（660 mg，4.7 mmol）、DIPEA（1.2 mL，9.5 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（1.26 g，3.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（500 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 588.68 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((庚氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） （600 mg，1.01 mmol）於DCM（12 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.76 mL，1.5 2 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯庚酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 560.3 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（化合物C24）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（ 6 ） （180 mg，0.32 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（410 mg，0.96 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（化合物 C24 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 558.52 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（化合物C14）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯庚酯（249 mg，0.446 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.177 mL，1.33 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.18 mL，1.33 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸庚酯（化合物 C14 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 696.70 (M+H)+
實例9：化合物C17及C5之合成
Figure 02_image181
Figure 02_image183
1-苯甲基環丙-1-胺（2）
向2-苯乙腈（ 1 ） （2 g，17.094 mmol）於Et2 O:THF（1:1）（20 mL）中之攪拌溶液中添加異丙醇鈦（5.14 g，18.119 mmol），且隨後在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加含2M氯化乙基鎂之THF（17 mL，34.188 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌1小時，且隨後在0℃下在15分鐘內緩慢添加BF3 -Et2 O（4.8 mL，34.188 mmol）（發生放熱），且在室溫下攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。1小時後，將反應混合物傾入10% NaOH溶液（100 mL）中，形成白色沈澱物。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（50 mL）洗滌，且將過濾物用鹽水溶液（100 ml）洗滌，且將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在70%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到1-苯甲基環丙-1-胺（2）。TLC 系統 ：80%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.3LCMS (ESI) ： m/z 148.11[M+H]+
(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（3）
向1-苯甲基環丙-1-胺（ 2 ） （4.2 g，28.5714 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加TEA（4.1 mL，57.142 mmol），且隨後在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加Boc酸酐（6.8 mL，31.428 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.8LCMS (ESI) ： m/z 148.11 [M-Boc]+
(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4）
在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加碘甲烷（2.6 mL，40.485 mmol）之後，在0℃下在密封容器中向(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （2 × 2.5 g，10.121 mmol）於DMF（25 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（607 mg，15.182 mmol），且攪拌15分鐘。隨後將反應混合物加熱至40℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4）。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI) ： m/z 162.11 [M-Boc]+
1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（5）
在0℃下向(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） （1.3 g，4.9808 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI) ： m/z 162.32 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（7）
在0℃下向(S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ 6 ） （1 g，3.831 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.1 g，5.747 mmol）、HOBT（775 mg，5.747 mmol）、DIPEA（2.11 mL，11.494 mmol）及1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（ 5 ） （678 mg，4.214 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在40%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI) ： m/z 305.19 [M-Boc]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（8）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 7 ） （1.0 g，2.475 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI) ： m/z 305.26 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（9）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （1.0 g，2.949 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（845 mg，4.424 mmol）、HOBT（597 mg，5.899 mmol）、DIPEA（1.63 mL，8.849 mmol）及N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 8 ） （986 mg，3.244 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.5LCMS (ESI) ： m/z 626.58 [M+H]+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 9 ） （1 g，1.6 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.6 mL，3.2 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用水（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（10 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其藉由combi-flash純化，化合物在80%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ：0.2LCMS (ESI) ： m/z 598.98 (M+H)+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C17）
將((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） （150 mg，0.2508 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（320 mg，0.752 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 10 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將其藉由combi-flash純化，化合物在20% MeOH/DCM下溶離，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C17 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI) ： m/z 596.44 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C5）
向((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C17 ） （200 mg，0.033 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.032 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.14 mL，1.032 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-(((2S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C5 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ：0.3LCMS (ESI) ： m/z 734.51 (M+H)+
實例10：化合物C18及C19之合成
Figure 02_image185
(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S )-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（ 2 ） （4 g，22.13 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（8.7 mL，49.18 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸丙酯（ 1 ） （3 g，24.59 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 272.2 (M+H)+
(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（3 g，11.07 mmol）於THF（20 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.06 g，44.28 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 256.26 (M-H)+
(S)-2-((S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙酸（4 ）（0.6 g，2.33 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.66 g，3.501 mmol）、HOBT（0.47 g，3.5 mmol）、DIPEA（1.2 mL，6.99 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（0.8 g，2.33 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸乙酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 532.61 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-((丙氧基羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸乙酯（5 ）（400 mg，0.753 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.7 mL，1.506 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 504.64.5 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（化合物C18）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（6 ）（230 mg，0.45 mmol）於EA（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（581 mg，1.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（化合物 C18 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 502.46 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（化合物C19）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（化合物 C18 ） （粗產物）（200 mg，0.199 mmol）於DCM（2 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，0.59 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.2 mL，0.59 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸丙酯（化合物 C19 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 640.59 (M+H)+
實例11：化合物C21之合成
Figure 02_image187
Figure 02_image189
(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸甲酯（3）
在室溫下向吲哚啉（ 1 ） （3 g，25.21 mmol）於ACN（30 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（12.9 g，50.42 mmol），隨後添加三乙胺（4.7 mL，0.327 mmol），且攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 2 ） （4 g，21.73 mmol）放入ACN（20 mL）中，且用三乙胺（9.1 mL，65.21 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。16小時後，將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 331.34 [M+H]+
(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸甲酯（ 3 ） （2 g，6.06 mmol）於THF（20 mL）及水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（436 mg，18.18 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸（ 4 ） 。TLC系統：5% MeOH/DCM Rf ：0.1LCMS (ESI)：m/z 317.49 [M+H]+
(S)-2-((S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下，向(S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙酸（ 4 ） （600 mg，1.89 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（543 mg，2.84 mmol）、HOBT（384 mg，2.84 mmol）、DIPEA（1.1 mL，5.67 mmol），且將反應物質攪拌15分鐘。15分鐘後，添加N 5 -甲基-N 5 -苯基乙基-L -麩胺酸甲酯鹽酸鹽（胺片段） （622 mg，1.89 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液（80 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗產物。將粗殘餘物藉由正相層析純化，且用60% EtOAc/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）。TLC系統：5% MeOH/DCM Rf ：0.6LCMS (ESI)：m/z 591.17 [M+H]+
N-((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（6）
在0℃下，向N-((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（ 5 ） （100 mg，0.16 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.14 mL，0.34 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且將有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物藉由正相層析純化，得到N-((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（ 6 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 563.48 (M+H)+
N -((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（7）
在0℃下向N-((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（ 6 ） （150 mg，0.266 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（334 mg，0.8 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到N -((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（7 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 561.45 (M+H)+
((2S)-2-((S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊基)膦酸二乙酯（化合物C21）
將所得到之N -((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)吲哚啉-1-甲醯胺（7 ）（150 mg，0.26 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.14 mL，0.8 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.11 mL，0.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，濃縮，得到粗化合物。粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到純((2S)-2-((S)-3-環己基-2-(吲哚啉-1-甲醯胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊基)膦酸二乙酯（化合物 C21 ）。TLC 系統： 80% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 699.58 (M+H)+
實例13：化合物C27及C8之合成
Figure 02_image193
1-苯基乙基吡咯啶-2-酮(3)
向吡咯啶-2-酮（ 1 ） （10 g，117.64 mmol）於甲苯（150 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（7.0 g，176.47 mmol）、TBAI（8.68 g，23.52 mmol），隨後添加(2-溴乙基)苯（ 2 ） （21.64 mL，152.94 mmol），且回流6小時。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用70%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯基乙基吡咯啶-2-酮（ 3 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 190.29 [M+H]+
2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（4）
在-78℃下向1-苯基乙基吡咯啶-2-酮（ 3 ） （4.0 g，21.141 mmol）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含2M LDA之THF（16 mL，31.71 mmol）。將反應混合物在-78℃下攪拌1小時，隨後添加含DMF（2.3mL, 31.712 mmol）之THF（10 mL），且在相同溫度下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（ 4 ） ，其不經任何純化即用於下一步驟。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 218.20 [M+H]+
(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（6）
在0℃下向2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（4 ）（4.5 g，粗產物）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中添加2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2-(二甲氧基磷醯基)乙酸甲酯（8.2 g，24.86 mmol）。隨後添加DBU（4.72 g，31.07 mmol），且攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用25%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 218.20 [M+H]+
2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
向(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（ 6 ） （2.2 g，5.213 mmol）於甲醇（15 mL）、乙酸乙酯（15 mL）中之攪拌溶液中添加10% Pd/C（500 mg），且在H2 氣球壓力（15 Psi）下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。6小時後，將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（30 mL）洗滌，在減壓下濃縮過濾物，得到2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 291.28 [M+H]+
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 ）（1.0 g，2.948 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.84 g，4.42 mmol）、HOBT（0.59 g，4.42 mmol）、DIPEA（1.14 mL，8.84 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7 ）（0.5 g，1.74 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 612.47 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（9）
在0℃下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （400 mg，0.65 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.65 mL，1.30 mmol），且將反應混合物在相同溫度下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 584.45 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C27）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） （130 mg，0.22 mmol）於二氯甲烷（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（188 mg，0.44 mmol），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C27 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 582.29 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-(二乙氧基膦醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C8）
在0℃下向粗((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C27 ） （220 mg，0.378 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.13 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.2 mL，1.13 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（15 mL）淬滅，用DCM（3 × 15 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 720.58 (M+H)+
實例14：化合物C30及C28之合成
Figure 02_image195
(2- 羥基苯甲基 ) (2- 羥乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯（ C ）
在室溫下向2-羥基苯甲醛（ A ） （25 g，204.91 mmol）於甲醇（50 mL）中之攪拌溶液中添加2-胺基乙-1-醇（12.49 mL，204.91 mmol），且攪拌6小時，隨後在0℃下添加NaBH4 （3.89 g，102.45 mmol），且攪拌6小時。將反應混合物冷卻至0℃，且添加三乙胺（33.2 mL，245.89 mmol）、(Boc)2 O（49.13 g，225.40 mmol），且使其至室溫維持24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發，且用2N HCl酸化直至pH為約4，將固體過濾，且用水（200 mL）洗滌，在真空下乾燥，得到(2-羥基苯甲基)(2-羥乙基)胺基甲酸三級丁酯（ C ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 290.27 [M+Na]+
2, 3, 4, 5-四氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯（C）
在-10℃下向DIAD（36.72 mL，187.26 mmol）、三苯基膦（49.1 g，187.26 mmol）於THF（250 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加含(2-羥基苯甲基) (2-羥乙基)胺基甲酸三級丁酯（ C ） （25 g，93.63 mmol）之THF（100 mL），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發且溶解於二氯甲烷（200 mL）中，且在0℃下添加TFA（175 mL），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗產物，將此粗產物用水稀釋，且用二乙醚（2 × 100 mL）洗滌，隨後將水層用10% NaOH鹼化為pH為約12，且用DCM（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2,3,4,5-四氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯（ D ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z = 150.12 [M+H]+
(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（F）
在0℃下向(S )-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ E ） （10.0 g，38.31 mmol）於DMF（100 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（10.9 g，57.47 mmol）、HOBT（7.7 g，57.47 mmol）、DIPEA（20.0 mL，114.93 mmol）及2,3,4,5-四氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯（ D ） （6.2 g，42.14 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（200 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物，此粗產物藉由正相層析純化，且用40%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ F ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 393.38 [M+H]+
(S )-2-胺基-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段）
在0℃下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（F ）（5.0 g，12.75 mmol）於1, 4-二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到純(S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z = 293.1 [M+H]+
(S )-3-環己基-2-(((哌啶-4-基氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯氯化氫（2）
在0℃下向(S )-4-(((3-環己基-1-甲氧基-1-側氧基丙-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（1 ）（4 g，9.70 mmol）於1, 4-二
Figure 02_image011
烷（40 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（40 mL）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(S )-3-環己基-2-(((哌啶-4-基氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 313.33[M+H]+
(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-(((哌啶-4-基氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（ 2 ） （3.3 g，10.57 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加三乙胺（4.5 mL），隨後添加甲烷磺醯氯（1 mL，12.69 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用水（2 × 30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 391.2 [M+H]+
(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（ 3 ） （2.0 g，5.12 mmol）於THF（15 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（644 mg，15.38 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 377.52 [M+H]+
(S )-2-((S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f] [1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ） （1.0 g，2.65 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（764 mg，3.98 mmol）、HOBT（538 mg，3.98 mmol）、DIPEA（1.4 mL，7.97 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段） （0.93 g，3.19 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將所獲得之固體過濾，且用過量水洗滌，隨後在真空下乾燥，得到(S )-2-((S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 651.25 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（6）
在0℃下向(S )-2-((S )-3-環己基-2-((((1-(甲磺醯基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） （0.5 g，0.76 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.76 mL，1.53 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（30 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其用二乙醚研磨，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 623.40 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（化合物C30）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（ 6 ） （220 mg，0.35 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（449 mg，1.06 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，將此殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（化合物 C30 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 621.44 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（化合物C28）
向((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（化合物 C30 ） （220 mg粗產物，0.35 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.19 mL，1.06 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.15 mL，1.06 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用飽和氯化銨（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f] [1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(甲磺醯基)哌啶-4-基酯（化合物 C28 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 759.50 [M+H]+
實例23：化合物C10之合成
Figure 02_image198
1-(3-氯苯基)環丙-1-醇（2）
向2-苯乙腈（ 1 ） （5 g，29.41 mmol）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中添加異丙醇鈦（11.69 g，41.17 mmol），且隨後在0℃下在30分鐘內緩慢逐滴添加含2M氯化乙基鎂之THF（37 mL，73.52 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌36小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（3 × 40 mL）萃取，用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在15%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到1-(3-氯苯基)環丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 151.18 [M-OH]+
(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
在室溫下向1-(3-氯苯基)環丙-1-醇（ 2 ） （1.4 g，8.33 mmol）於ACN（20 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（3.19 g，12.49 mmol），隨後添加三乙胺（2.8 mL，24.99 mmol），且攪拌6小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （2.70 g，12.82 mmol）放入ACN（20 mL）中，且用三乙胺（3.5 mL，24.27 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。16小時後，將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC系統：20%乙酸乙酯/石油醚Rf：0.6LCMS (ESI)：m/z = 380.44 [M+H]+
(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在室溫下向丙酸甲酯(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己酯（ 4 ） （1.3 g，3.43 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（246 mg，10.29 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 366.43 [M+H]+
N 2-((S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N 5-甲基-N 5-苯基乙基-L -麩胺酸甲酯（7）
在0℃下向(S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （1.0 g，2.73 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.78 g，4.10 mmol）、HOBT（0.55 g，4.10 mmol）、DIPEA（1.5 mL，8.21 mmol）及N 5-甲基-N 5-苯基乙基-L -麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 6 ） （1.03 g , 3.28 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N 2-((S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N 5-甲基-N 5-苯基乙基-L -麩胺酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 627.47 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-5-(甲基(苯基乙基)胺基)-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯基)環丙酯（8）
在0℃下向N 2-((S )-2-(((1-(3-氯苯基)環丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N 5-甲基-N 5-苯基乙基-L -麩胺酸甲酯（ 7 ） （1 g，1.60 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.4 mL，4.80 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用水（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其用二乙醚研磨，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-5-(甲基(苯基乙基)胺基)-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯基)環丙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 598.60 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-5-(甲基(苯基乙基)胺基)-1, 5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯基)環丙酯（化合物C10）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-5-(甲基(苯基乙基)胺基)-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯基)環丙酯（ 8 ） （150 mg，0.25 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（319 mg，0.75 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 10 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，將此殘餘物藉由正相層析純化，藉由3%甲醇/二氯甲烷溶離，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-5-甲基(苯基乙基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯基)環丙酯（化合物 C10 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 596.43 (M+H)+
實例27：化合物C4之合成
Figure 02_image200
(S )-5-側氧基吡咯啶-1, 2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（1）
在0℃下向(S)-5-側氧基吡咯啶-2-甲酸乙酯（ 1 ） （20.0 g，127.38 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液中添加三乙胺（22.02 mL，152.86 mmol）、Boc酸酐（30.54 mL，140.12 mmol）及DMAP (1.5 g，12.73 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用冰水（500 mL）淬滅，且用二氯甲烷（3 × 400 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由格雷斯NP純化，化合物用30%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到呈灰白色固體狀之(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（ 2 ） （29.0 g，112.71 mmol，產率88%）。TLC 系統 ：30%乙酸乙酯/石油醚Rf：0.3LCMS (ESI)：m/z 258.23 (M+H)+
(2S)-4-甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（2）
在-78℃下向(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（ 2 ） （6.0 g，23.34 mmol）於乾燥THF（600 mL）中之攪拌溶液中添加1M LiHMDS（28 mL，28.01 mmol），且攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測將反應混合物用飽和氯化銨溶液（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 200 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由格雷斯NP純化，化合物用20%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到呈透明膠質液體狀之(2S)-4-甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-( 三級丁基) 2-乙酯（ 3 ） （1.4 g，5.16 mmol，產率22%）。TLC 系統 ：20%乙酸乙酯/石油醚Rf：0.4LCMS (ESI)：m/z 272.28 (M+H)+
(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（5）
向(2S)-4-甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（ 3 ） （1.4 g，5.16 mmol）於甲苯（50 mL）中之攪拌溶液中添加2-苯基乙基胺（ 4 ） （625 mg，5.16 mmol），且在密封試管中在90℃下加熱6小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物濃縮。將粗殘餘物藉由格雷斯NP純化，化合物用50%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到呈透明膠質液體狀之(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 5 ） （1.0 g，2.549 mmol，產率49%）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 393.4(M+H)+
(2S)-2-胺基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 5 ） （1.0 g，2.98 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4M HCl之二
Figure 02_image011
烷（10 mL）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-胺基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 6 ） （0.720 g，2.462 mmol，產率96%）。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.9LCMS (ESI)：m/z 293.28 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（7）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （0.830 g，2.448 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（0.71 g，3.672 mmol）、HOBt（0.49 g，3.67 mmol）、DIPEA（1.35 mL，7.345 mmol）及(2S)-2-胺基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 6 ） （0.714 g，2.448 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由格雷斯NP純化，化合物在50%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 7 ） （1.3 g，2.116 mmol，產率86%）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 614.47 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8）
在0℃下向(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊酸乙酯（ 7 ） （0.250 g，0.407 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.407 mL，0.814 mmol），將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，得到呈灰白色固體狀之((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 8 ） （0.200 g，0.349 mmol，產率86%）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 572.49 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((3S)-2-羥基-5-甲基-6-側氧基-1-(苯基乙基哌啶-3-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C4）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-4-甲基-5-側氧基-5-(苯基乙基胺基)戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8 ） （200 mg，0.349 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（296.6 mg，0.699 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之((2S)-3-環己基-1-(((3S)-2-羥基-5-甲基-6-側氧基-1-(苯基乙基哌啶-3-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C4 ） （40 mg，0.0877 mmol，產率25%）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 552.89 (M-OH)+
實例28：化合物C17及C5之合成
Figure 02_image202
1-苯甲基環丙-1-胺（2）
向2-苯乙腈（ 1 ） （2 g，17.094 mmol）於Et2 O:THF（1:1）（20 mL）中之攪拌溶液中添加異丙醇鈦（5.14 g，18.119 mmol），且隨後在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加含2M氯化乙基鎂之THF（17 mL，34.188 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌1小時，且隨後在0℃下在15分鐘內緩慢添加BF3 -Et2 O（4.8 mL，34.188 mmol）（發生放熱），且在室溫下攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。1小時後，將反應混合物傾入10% NaOH溶液（100 mL）中，形成白色沈澱物。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（50 mL）洗滌，且將過濾物用鹽水溶液（100 ml）洗滌，且將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在70%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到1-苯甲基環丙-1-胺（2）。TLC 系統 ：80%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.3LCMS (ESI) ： m/z 148.11[M+H]+
(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（3）
向1-苯甲基環丙-1-胺（ 2 ） （4.2 g，28.5714 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加TEA（4.1 mL，57.142 mmol），且隨後在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加Boc酸酐（6.8 mL，31.428 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.8LCMS (ESI) ： m/z 148.11 [M-Boc]+
(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4）
在0℃下在10分鐘內緩慢逐滴添加碘甲烷（2.6 mL，40.485 mmol）之後，在0℃下在密封容器中向(1-苯甲基環丙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （2 × 2.5 g，10.121 mmol）於DMF（25 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（607 mg，15.182 mmol），且攪拌15分鐘。隨後將反應混合物加熱至40℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4）。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI) ： m/z 162.11 [M-Boc]+
1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（5）
在0℃下向(1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） （1.3 g，4.9808 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI) ： m/z 162.32 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（7）
在0℃下向(S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ 6 ） （1 g，3.831 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.1 g，5.747 mmol）、HOBT（775 mg，5.747 mmol）、DIPEA（2.11 mL，11.494 mmol）及1-苯甲基-N-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽（ 5 ） （678 mg，4.214 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在40%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI) ： m/z 305.19 [M-Boc]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（8）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 7 ） （1.0 g，2.475 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI) ： m/z 305.26 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（9）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （1.0 g，2.949 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（845 mg，4.424 mmol）、HOBT（597 mg，5.899 mmol）、DIPEA（1.63 mL，8.849 mmol）及N5-(1-苯甲基環丙基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 8 ） （986 mg，3.244 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ：0.5LCMS (ESI) ： m/z 626.58 [M+H]+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-N5-甲基-L-麩胺酸甲酯（ 9 ） （1 g，1.6 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.6 mL，3.2 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用水（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（10 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其藉由combi-flash純化，化合物在80%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ：0.2LCMS (ESI) ： m/z 598.98 (M+H)+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C17）
將((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） （150 mg，0.2508 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（320 mg，0.752 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 10 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將其藉由combi-flash純化，化合物在20% MeOH/DCM下溶離，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C17 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI) ： m/z 598.98 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C5）
向((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C17 ） （200 mg，0.033 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.032 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.14 mL，1.032 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-(((2S)-5-((1-苯甲基環丙基)(甲基)胺基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C5 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ：0.3LCMS (ESI) ： m/z 734.51 (M+H)+
實例29：化合物C16及C6之合成
Figure 02_image204
(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S )-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（ 2 ） （3 g，13.531 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（7 mL，40.59 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸戊酯（ 1 ） （2.34 mL，16.2 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 330.2 (M+NH)+
(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（2.5 g，8.3 mmol）於THF（20 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（600 mg，25 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2
(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）（1 g，3.5 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl （1 g，5.2 mmol）、HOBT（700 mg，5.23 mmol）、DIPEA（1.7 mL，10.46 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（1.38 g，4.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 560.63 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5 ）（900 mg，1.6 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.2 mL，1.53 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 532.5 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物C16）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（6 ）（250 mg，0.45 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（583 mg，1.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物 C16 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 530.56 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物C6）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物 C16 ） （248 mg，0.47 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.24 mL，1.41 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.19 mL，1.41 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化為((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物 C6 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 668.68 (M+H)+
實例30：化合物C26及C7之合成
Figure 02_image206
(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(S)-2-胺基-3-環己基丙酸酯鹽酸鹽（2 ） （4.8 g，2.1 mmol）於THF（20 mL）及DIPEA（9.7 mL，5.4 mmol）中之攪拌溶液中添加氯甲酸己酯（1 ）（3 g，1.8 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 80 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 314.42 (M+H)+
(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（3 ）（2 g，6.36 mmol）於THF（20 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（450 mg，19 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 300.2 (M+H)+
1-((S )-4-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-1,2,3,5-四氫-4H -苯并[e ][1,4]二氮呯-4-甲酸三級丁酯（5）
在0℃下，向(S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙酸（1.2 g，4 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.14 g，6 mmol）、HOBT（834 mg，6 mmol）、DIPEA（2 mL，12 mmol）及(S)-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（1.57 g，4.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（500 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到1-((S )-4-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊醯基)-1,2,3,5-四氫-4H -苯并[e ][1,4]二氮呯-4-甲酸三級丁酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 574.53 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-3-環己基-2-(((己氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） （960 mg，1.67 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.25 mL，1.5 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 546.51 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（化合物C26）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（ 6 ） （250 mg，0.45 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（583 mg，1.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（化合物 C26 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 544.55 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（化合物C7）
向((S)-3-環己基-1-(((S)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（248 mg，0.45 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.23 mL，1.37 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.18 mL，1.37 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸己酯（化合物 C7 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 682.6 (M+H)+
實例31：化合物C27及C8之合成
Figure 02_image208
1-苯基乙基吡咯啶-2-酮（3）
向吡咯啶-2-酮（ 1 ） （10 g，117.64 mmol）於甲苯（150 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（7.0 g，176.47 mmol）、TBAI（8.68 g，23.52 mmol），隨後添加(2-溴乙基)苯（ 2 ） （21.64 mL，152.94 mmol），且回流6小時。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用70%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯基乙基吡咯啶-2-酮（ 3 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 190.29 [M+H]+
2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（4）
在-78℃下向1-苯基乙基吡咯啶-2-酮（ 3 ） （4.0 g，21.141 mmol）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含2M LDA之THF（16 mL，31.71 mmol）。將反應混合物在-78℃下攪拌1小時，隨後添加含DMF（2.3 mL，31.712 mmol）之THF（10 mL），且在相同溫度下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（ 4 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 218.20 [M+H]+
(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（6）
在0℃下向2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-甲醛（4 ）（4.5 g，粗產物）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中添加2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-2-(二甲氧基磷醯基)乙酸甲酯（8.2 g，24.86 mmol），隨後添加DBU（4.72 g，31.07 mmol），且攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用25%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 218.20 [M+H]+
2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
向(E )-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙烯酸甲酯（ 6 ） （2.2 g，5.213 mmol）於甲醇（15 mL）、乙酸乙酯（15 mL）中之攪拌溶液中添加10% Pd/C（500 mg），且在H2 氣球壓力（15 Psi）下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。6小時後，將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（30 mL）洗滌，在減壓下濃縮過濾物，得到2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 291.28 [M+H]+
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基) -3-環己基丙酸（酸片段 ）（1.0 g，2.948 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.84 g，4.42 mmol）、HOBT（0.59 g，4.42 mmol）、DIPEA（1.14 mL，8.84 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7 ）（0.5 g，1.74 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 612.47 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（9）
在0℃下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （400 mg，0.65 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.65 mL，1.30 mmol），且將反應混合物在相同溫度下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 584.45 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C27）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 9 ） （200 mg，0.34 mmol）於二氯甲烷（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（436 mg，1.02 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 10 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C27 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 582.52 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-(二乙氧基膦醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C8）
在0℃下向粗((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C27 ） （220 mg，0.378 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.13 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.2 mL，1.13 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（15 mL）淬滅，用DCM（3 × 15 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-苯基乙基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 720.58 (M+H)+
實例32：化合物C35及C31之合成
Figure 02_image210
(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸甲酯（3）
在室溫下向(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （500 mg，2.26 mmol）於1, 4二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加雙光氣（0.4 mL，3.39 mmol），且加熱至回流維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物，此殘餘物直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將1-(3-氯苯基)-N -甲基甲胺（ 1 ） （350 mg，2.26 mmol）放入ACN（10 mL）中，且用三乙胺（0.95 mL，6.78 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌，且加熱至80℃維持3小時，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 367.32 [M+H]+
(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸（4）
在室溫下向(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸酯（ 3 ） （600 mg，1.63 mmol）於THF（4 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（117 mg，4.89 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 353.47 [M+H]+
(S )-2-((S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H)-基)-5-側氧基戊酸甲酯（5）
在0℃下向(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙酸（500 mg，1.42 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（406 mg，2.13 mmol）、HOBt（287 mg，2.13 mmol）、DIPEA（0.7 mL，4.26 mmol）及(S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 ）（559 mg，1.70 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在2%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S )-2-((S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 627.89 [M+H]+
(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N -((S )-5-(2, 3-二氫苯并[f][1, 4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)丙醯胺（6）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯（ 5 ） （480 mg，0.95 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.95 mL，1.91 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N -((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)丙醯胺（6 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 599.53 [M+H]+
(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N -((S )-5-(2, 3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)丙醯胺（化合物C35）
將(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N -((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)丙醯胺（6 ）（200 mg，0.33 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（425 mg，1.00 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N-((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)丙醯胺（化合物 C35 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 597.44 (M+H)+
((2S )-2-((S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2, 3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1-羥基-5-側氧基戊基)膦酸二乙酯（化合物C31）
向(S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基-N-((S )-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-1,5-二側氧基戊-2-基)丙醯胺（化合物 C35 ） （110 mg粗產物，0.18 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.1 mL，0.55 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（76 mg，0.55 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用氯化銨（10 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其用製備型HPLC純化，得到((2S )-2-((S )-2-(3-(3-氯苯甲基)-3-甲基脲基)-3-環己基丙醯胺基)-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基) -1-羥基-5-側氧基戊基)膦酸二乙酯（化合物 C31 ）。TLC 系統： 10 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 735.44 (M+H)+
實例33：化合物C32之合成
Figure 02_image212
Figure 02_image214
4-硝基哌啶-1-甲酸三級丁酯（B）
在室溫下向4-碘哌啶-1-甲酸三級丁酯（ A ） （20 g，64.308 mmol）於DMSO（100 mL）中之攪拌溶液中添加間苯三酚（12.9 g，102.89 mmol），隨後添加亞硝酸鈉（8.8 g，128.6 mmol），且在45℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用水（250 mL）淬滅，且用二乙醚（3 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 50 mL）、鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到4-硝基哌啶-1-甲酸三級丁酯（B ）。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.45
4-硝基哌啶鹽酸鹽（C）
在0℃下向4-硝基哌啶-1-甲酸三級丁酯（B ）（3 g，13.043 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（5 mL）中之攪拌溶液中添加4N HCl（5 mL），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用二乙醚（2 × 10 mL）研磨，得到4-硝基哌啶鹽酸鹽（C ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 131.10 [M+H]+
1-(4-硝基哌啶-1-基)乙-1-酮（Int-4）
將4-硝基哌啶鹽酸鹽（C ）（2.2 g，13.25 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，同時在0℃下添加乙酸酐（1.25 mL，13.25 mmol）及三乙胺（2.7 mL，19.87 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用DCM（2 × 20 mL）萃取，將有機層用水（2 × 10 mL）、鹽水溶液（10 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到標題化合物。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 173.33 [M+H]+
(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（2）
在0℃下向(S)-5-側氧基吡咯啶-2-甲酸乙酯（ 1 ） （20.0 g，127.38 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液中添加三乙胺（22.02 mL，152.86 mmol）、Boc酸酐（30.54 mL，140.12 mmol）及DMAP（1.5 g，12.73 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用冰水（500 mL）淬滅，且用二氯甲烷（3 × 400 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由格雷斯NP純化，化合物用30%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-乙酯（ 2 ） 。TLC 系統 ：30%乙酸乙酯/石油醚Rf：0.3LCMS (ESI)：m/z 258.23 (M+H)+
(S,Z)-4-((二甲胺基)亞甲基)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（3）
在0℃下向(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（2 ）（10 g，41.15 mmol）於二甲氧甲烷（100 mL）中之攪拌溶液中添加Bredereck試劑（13 mL，61.72 mmol），且在80℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用二乙醚（2 × 20 mL）研磨，得到(S,Z)-4-((二甲胺基)亞甲基)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（3 ）。TLC 系統： 60% EtOAc/石油醚Rf ： 0.2
(S)-4-亞甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（4）
在室溫下向(S,Z)-4-((二甲胺基)亞甲基)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（3 ）（500 mg，1.666 mmol）於THF（4 mL）中之攪拌溶液中添加1N HCl（1.75 mL），且攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。分離各層，且有機層直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，在0℃下向上述有機層中添加33%甲醛（3 V）及碳酸鉀（344 mg，2.49 mmol），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。分離各層，將水層用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用飽和碳酸氫鈉（100 mL）、鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S)-4-亞甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.2
(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（5）
在-40℃下向(S)-4-亞甲基-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-(三級丁基) 2-甲酯（4 ）（400 mg，1.56 mmol）於乾燥THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加甲醇鋰（1M於甲醇中）（1.88 mL，1.88 mmol），且在相同溫度下攪拌20分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨（5 mL）淬滅，用乙酸乙酯（3 × 20 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（10 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（5 ）。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 310.3 (M+Na+H)+
2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（6）
在0℃下向(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（5 ）（500 mg，1.74 mmol）於ACN（5 mL）中之攪拌溶液中添加1-(4-硝基哌啶-1-基)乙-1-酮（Int-4 ） （300 mg，1.74 mmol）及DBU（0.55 mL，3.48 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.35LCMS (ESI)：m/z 482.4 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（7）
在-10℃下向2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（6 ）（100 mg，0.217 mmol）於甲醇（4 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（31 mg，0.23 mmol），隨後添加硼氫化鈉（42 mg，1.08 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（5 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（3 × 10 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 10 ml）、鹽水溶液（10 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（7 ）。TLC 系統 ： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 420.35 (M+Na+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（8）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（7 ）（80 mg，0.2 mmol）於二
Figure 02_image011
烷（2 mL）中之攪拌溶液中添加含4M HCl之二
Figure 02_image011
烷（2 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（8 ）。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.1
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（9）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 ）（54 mg，0.16 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（42 mg，0.22 mmol）、HOBT（30 mg，0.22 mmol）、DIPEA（0.1 mL，0.44 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（8 ）（50 mg，0.14 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（9 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 619.57 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（9 ）（90 mg，0.14 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.2 mL，0.24 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 591.43 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C32）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10 ）（80 mg，0.13 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（230 mg，0.54 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C32 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 589.46 (M+H)+
實例34：化合物C51及C34之合成
Figure 02_image216
(S )-4-(((1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（3）
在0℃下向4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 1 ） （10 g，49.67 mmol）於ACN（80 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（19.7 g，74.51 mmol），隨後添加三乙胺（20.9 mL，149.1 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （13.5 g，74.58 mmol）放入ACN（50 mL）中，且用三乙胺（20.9 mL，149.1 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。16小時後，將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 150 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S )-4-(((1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 395.29 [M+Na]-
(((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（4）
在室溫下向(S )-4-(((1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） （3.5 g，9.40 mmol）於THF（20 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.18 g，28.2 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)-L -白胺酸（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z = 381.53 [M+Na]+
4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（5）
在0℃下向(((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） （2.0 g，5.58 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.6 g，8.37 mmol）、HOBT（1.13 g，8.37 mmol）、DIPEA（2.8 mL，16.75 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ） （1.2 g，6.70 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，藉由5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 527.74 [M+H]+
4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（6）
在0℃下向4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） （620 mg，1.17 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.2 mL，2.35 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（30 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其藉由SFC製備型純化來純化，得到純4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 499.70 [M+H]+
4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物C34）
將4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 6 ） （100 mg，0.20 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（3 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（255 mg，0.60 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，將此殘餘物藉由製備型HPLC層析純化，得到4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C34 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 497.44 (M+H)+
(2S )-2-((S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C51）
在室溫下向4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C34 ） （90 mg，0.18 mmol）於乙醇（2 mL）、EtOAc（1 mL）、水（1 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （38 mg，0.36 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，隨後用乙醇（5 mL）洗滌。將過濾物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（2 × 5 mL）、EtOAc（2 × 5 mL）研磨，傾析溶劑，充分乾燥固體，得到(2S )-2-((S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C51 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 577.2 [M-H]- M=游離鹼
實例35：化合物C37及C40之合成
Figure 02_image218
4-(苯甲基胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（3）
在0℃下向4-側氧基哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 1 ） （3 g，15.0753 mmol）及苯基甲胺（ 2 ） （2.2 mL，18.0904 mmol）於甲醇（30 mL）中之攪拌溶液中添加8M硼烷吡啶複合物（2.8 mL，3.39 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物，用冰水（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到4-(苯甲基胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 291.52 [M+H]+
(S)-4-(1-苯甲基-3-(1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（2）
在室溫下向L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 4 ） （3 g，13.574 mmol）於1, 4-二
Figure 02_image011
烷（30 mL）中之攪拌溶液中添加雙光氣（2.4 mL，20.361 mmol），且加熱至回流維持5小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物，此殘餘物直接用於後續反應中。
在另一RB燒瓶中，將4-(苯甲基胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 3 ） （3 g，10.344 mmol）放入ACN（30 mL）中，且用三乙胺（4.47 mL，31.034 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌，且加熱至80℃維持16小時，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(S)-4-(1-苯甲基-3-(1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 484.50 [M+Na]+
(苯甲基(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)胺甲醯基)-L-白胺酸（6）
在室溫下向(S)-4-(1-苯甲基-3-(1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 5 ） （3.4 g，7.375 mmol）於THF（30 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（531 mg，22.125 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(苯甲基(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)胺甲醯基)-L-白胺酸（ 6 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 448.39 [M+H]+
4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（7）
在0℃下向(苯甲基(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)胺甲醯基)-L-白胺酸（ 6 ） （2.3 g，5.145 mmol）、DMF（30 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.47 g，7.718 mmol）、HOBt（1.04 g，7.718 mmol）、DIPEA（2.8 mL，15.436 mmol）及(S )-2-胺基-5-(2,3-二氫苯并[f][1,4]
Figure 02_image011
氮呯-4(5H )-基)-5-側氧基戊酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.14 g，6.171 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在2%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 616.88 [M+H]+
4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（8）
在0℃下向4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 7 ） （1.3 g，2.524 mmol）於THF（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.5 mL，5.048 mmol），且在0℃下將反應混合物攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其藉由SFC製備型純化來純化，得到純4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（8 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 588.65 [M+H]+
4-(1-苯甲基-3-((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物C37）
將4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（8 ）（100 mg，0.17 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（216 mg，0.511 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到4-(1-苯甲基-3-((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C37 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 597.44 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-(3-苯甲基-3-(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)脲基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C41）
在室溫下向4-(1-苯甲基-3-((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C37 ） （50 mg，1.103 mmol）於THF/H2 O（2/1）（3 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （16 mg，0.154 mmol），且將RM在40℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用EtOH（20 mL）洗滌矽藻土墊，得到粗化合物。將粗產物用乙醚及正戊烷研磨，得到(2S)-2-((S)-2-(3-苯甲基-3-(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)脲基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C41 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.1 LCMS (ESI)：m/z = 586.60 [M-磺酸鈉] +
實例36：化合物C36之合成
Figure 02_image220
(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸甲酯（3）
在0℃下向(3-氯苯基)甲醇（ 1 ） （4.0 g，2.8 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（13.2 mL，16.8 mmol）、三光氣（4.14 g，2.3 mmol），隨後添加L-苯丙胺酸甲酯（ 2 ） （6.02 g，3.36 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸1-甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 348.29 [M+H]+
(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸（4）
向(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸1-甲酯（ 3 ） （5.6 g，16.13 mmol）於THF（60 mL）、甲醇（20 mL）及DM水（40 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1.35 g，32.26 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸（ 4 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 334.28 [M+H]+
(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-苯丙胺酸（4）（1.0 g，3.003 mmol）（4 ） 於DMF（100 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.670 g，3.603 mmol）、HOBT（0.859 g，4.50 mmol）、DIPEA（1.65 mL，9.00 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.670 g，3.60 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 502.43 [M+H]+
((2S)-1-(((2S)-1-羥基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （0.75 g，1.494 mmol）於二氯甲烷（50 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.49 mL，2.98 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((2S)-1-(((2S)-1-羥基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 474.4 [M+H]+
((2S)-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7）
將((2S)-1-(((2S)-1-羥基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯甲酯（ 6 ） （0.350 g，0.738 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（25 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.626 g，1.476 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，得到((2S)-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 472.54 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C36）
在0℃下向粗((2S)-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） （330 mg，0.7003 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，2.101 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.3 mL，2.101 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（15 mL）淬滅，用DCM（3 × 15 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且充分乾燥，得到粗化合物。粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-(((2S)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C36 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 610.36 (M+H)+
實例37：化合物C38及C53之合成
Figure 02_image222
Figure 02_image224
1,2-二苯基乙-1-醇（2）
將苯甲基氯化鎂（5.0 g，46.7289 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液冷卻至-30℃，隨後在-30℃至室溫下緩慢添加溶解於THF（50 mL）中之苯甲醛（ 1 ） （70 mL，140.1869 mmol），且攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（150 mL）淬滅，且隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1,2-二苯基乙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 183.46 [M-OH]+
(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（4）
且隨後向1,2-二苯基乙-1-醇（ 2 ） （5.0 g，25.25 mmol）於乙腈（250 mL）中之攪拌溶液中添加DSC（12.92 g，50.4 mmol）、三乙胺（10.9 mL，75.6 mmol），隨後將反應混合物在室溫下攪拌16小時。隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 3 ） （4.306 g，29.6 mmol）、三乙胺（10.6 mL，72.0 mmol），將反應混合物在室溫下攪拌16小時，反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用乙酸乙酯（3 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 369.19 [M+Na]+
((1,2-二苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
向(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） （5.8 g，15.69 mmol）於THF（60 mL）及水（40 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1.976 g，47.0 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（3 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1,2-二苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 355.17 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
向((1,2-二苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） （3.0 g，8.440 mmol）於DMF（30 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（2.292 g，12.00 mmol）、HOBT（1.62 g，12.00 mmol）、DIPEA（4.64 mL，25.2 mmol），在0℃下攪拌10分鐘，且隨後在0℃下同時添加(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（2.248 g，10.12 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用100%乙酸乙酯溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 524.55 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（7）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （0.530 g，1.013 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.013 mL，2.026 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（10 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 496.59 (M+H)+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（
Figure 02_image226
化合物C38）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 7 ） （0.300 mg，0.605 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（20 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.513 g，1.216 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且將有機層用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，且藉由PHPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物 C38 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 494.44 (M+H)+
(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C53）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物 C38 ） （0.100 mg，0.2027 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（0.4 mL）中，且隨後在40℃下添加NaHSO3 （0.0632 mg，0.6081 mmol），且攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用二乙醚洗滌，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C53 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 574.2 (M+H)+
實例38：化合物C39及C50之合成
Figure 02_image228
(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（3）
在0℃下向1-苯基丙-2-醇（ 1 ） （7.0 g，51.39 mmol）於DCM（35 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（6.0 mL，77.09 mmol）、三光氣（7.62 g，25.6 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （8.942 g，61.6 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 308.52 [M+H]+
(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（4）
向(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 3 ） （6.7 g，21.81 mmol）於THF（60 mL）及DM水（40 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（2.74 g，65.43 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCL酸化，用乙酸乙酯（3 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 294.55 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
向(((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） （2.5 g，8.532 mmol）於DMF（25 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.518 g，10.20 mmol）、HOBT（1.073 g，7.95 mmol）、DIPEA（4.715 mL，25.5 mmol），在0℃下攪拌10分鐘，且隨後在0℃下同時添加(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（2.273 g，10.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用100%乙酸乙酯溶離，得到(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 462.65 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （2.4 g，5.199 mmol）於二氯甲烷（50 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（5.2 mL，10.39 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（20 mL）溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（ 6 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 434.5 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物C39）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（ 6 ） （0.300 g，0.461 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（20 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.390 g mg，0.923 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物 C39 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 432.58 (M+H)+
(2S)-1-羥基-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C50）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物 C39 ） （0.100 g，0.231 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（0.4 mL）中，且隨後在40℃下添加NaHSO3 （0.0361 mg，0.347 mmol），且攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用二乙醚洗滌，得到(2S)-1-羥基-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C50 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 512.12 (M+H)+
實例39：化合物C52及C41之合成
Figure 02_image230
Figure 02_image232
(三級丁氧基羰基)苯丙胺酸（2）
向苯丙胺酸（ 1 ） （10 g，60.606 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（100 mL）中之攪拌溶液中添加2N NaOH溶液（36 mL，72.72 mmol），且隨後在0℃下添加Boc酸酐（14.5 mL，66.66 mmol），隨後使反應混合物至室溫維持24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗產物，將此粗產物用水稀釋，且用2N HCl酸化至pH為約2，且用DCM（2 × 100 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(三級丁氧基羰基)苯丙胺酸（ 2 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z = 288.20[M+Na]+
(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（3）
向(三級丁氧基羰基)苯丙胺酸（ 2 ） （15 g，56.60 mmol）於DCM（150 mL）中之攪拌溶液中添加DMAP（10.35 g，84.905 mmol），且隨後在0℃下逐份添加米氏酸（Meldrum's acid）（12.2 g，84.905 mmol），在攪拌15分鐘之後在0℃下緩慢添加含DCC之DCM（11.6 g，56.6037 mmol），且隨後使反應混合物至室溫維持24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測，將反應混合物用冰水（200 mL）淬滅，且用DCM（2 × 100 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物，將此殘餘物藉由正相層析純化，且用80%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 390.64[M-H]+
(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（4）
向(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （10.0 g，25.575 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中添加AcOH（9.2 mL，153.452 mmol），且隨後在0℃下在30分鐘內緩慢逐份添加NaBH4 （3.9 g，102.3017 mmol），隨後將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（200 mL）淬滅，且用DCM（2 × 100 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物，將此粗產物藉由正相層析純化，且用40%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 376.39 [M-H]+
2-苯甲基-5-側氧基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（5）
向(1-(2,2-二甲基-4,6-二側氧基-1,3-二
Figure 02_image011
烷-5-基)-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） （12 g，31.8302 mmol）於甲苯（240 mL）中之攪拌溶液中，隨後將反應混合物加熱至回流維持6小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將此粗產物藉由正相層析純化，且用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-苯甲基-5-側氧基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（5 ）。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z = 298.26 [M+Na]+
4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)(羥基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（6）
在-78℃下向2-苯甲基-5-側氧基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（5 ）（4 g，14.545 mmol）於THF（40 mL）中之攪拌溶液中添加含1M LiHMDS之THF（29 mL，29.0909 mmol），且在相同溫度下攪拌30分鐘，隨後添加Int-C （5 g，21.818 mmol），且在相同溫度下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用NH4 Cl溶液（100 mL）淬滅，且用EtOAc（3 × 300 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)(羥基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 6 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 427.41 (M+Na)+
(E)-4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-亞基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（7）
在0℃下向(4R )-4-((1S )-(1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基) (羥基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 6 ） （6 g粗產物，11.9047 mmol）於DCM（60 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加NEt3 （5.1 mL）及MsCl（4.1 g，35.714 mmol），在相同溫度下將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用NH4 Cl溶液（100 mL）淬滅，且用DCM（3 × 300 mL）萃取，經Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)((甲磺醯基)氧基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（6.5 g，粗產物）。將此粗化合物溶解於DCM（60 mL）中，隨後在0℃下添加DBU（5 mL，33.505 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，用DCM（2 × 100 mL）萃取，經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，且用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(E)-4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-亞基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z = 509.64 [M+Na]+
4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（8）
在室溫下向(E)-4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-亞基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 7 ） （1.5 g，3.0864 mmol）於MeOH（20 mL）中之攪拌溶液中添加10% Pd/C（800 mg，濕重10%），且在H2氣體氣球壓力下將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物經由矽藻土過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，且用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10% EtOAc/石油醚Rf ： 0.4
3-(2-胺基-3-羥基丙基)-5-苯甲基吡咯啶-2-酮（9）
在0℃下向4-((5-苯甲基-1-(三級丁氧基羰基)-2-側氧基吡咯啶-3-基)甲基)-2,2-二甲基
Figure 02_image011
唑啶-3-甲酸三級丁酯（ 8 ） （1.1 g，2.254 mmol）於二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含4M HCl之二
Figure 02_image011
烷（10 mL）。使混合物至室溫，且攪拌16小時。起始材料耗盡後，蒸發溶劑，得到粗殘餘物。將其用二乙醚研磨，得到3-(2-胺基-3-羥基丙基)-5-苯甲基吡咯啶-2-酮（ 9 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 249.43 (M+H)+
((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）
向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（胺片段） （200 mg，0.589 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中添加EDC.HCl（170 mg，0.884 mmol）、HOBT（120 mg，0.884 mmol）、DIPEA（0.3 mL，1.769 mmol），且在0℃下同時添加3-(2-胺基-3-羥基丙基)-5-苯甲基吡咯啶-2-酮（ 9 ） （175 mg，0.707 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用DCM（2 × 50 mL）萃取，經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，且用20%甲醇/DCM溶離，得到((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 570.70 [M+H]+
((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C52）
將((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） （150 mg，0.263 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（335 mg，0.7908 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C52 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 568.53 [M+H]+
((2S)-1-((3-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C41）
向((2S)-1-((1-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C52 ） （150 mg粗產物，0.264 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.15 mL，0.793 mmol），隨後添加亞磷酸二乙酯（0.12 mL，0.793 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用飽和氯化銨（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且蒸發，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((3-(5-苯甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C41 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 706.74 [M+H]+
實例40：化合物C42及C49之合成
Figure 02_image235
Figure 02_image237
1-(3-甲氧基苯甲基)環丙-1-醇（2）
將2-(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯（10.0 g，55.49 mmol）於THF（100 mL）中之溶液冷卻至0℃，隨後緩慢添加Ti(Oi Pr)4 （22.06 mL，77.69 mmol）及氯化乙基鎂（138.0 mL，138.73 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（150 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-(3-甲氧基苯甲基)環丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS ESI)：m/z 179.35[M+H]
((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
在0℃下向1-(3-甲氧基苯甲基)環丙-1-醇（ 2 ） （5.6 g，37.00 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（6.0 mL，77.09 mmol）、三光氣（5.47 g，18.5 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 3 ） （6.49 g，44.00 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，隨後添加DCM（300 mL），且用1N HCl溶液洗滌。將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 350.47 [M+H]+
((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
向((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） （3.0 g，8.5 mmol）於THF（60 mL）及水（30 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1.08 g，25.78 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將過量THF在減壓下蒸發。隨後將混合物用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（3 × 100 mL）萃取，且將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI): m/z 336.40 [M+Na]+
(S)-2-((S)-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
向((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） （2.2 g，6.5 mmol）於DMF（40 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.86 g，9.7 mmol）、HOBT（1.34 g，9.7 mmol）、DIPEA（3.39 mL，19.5 mmol），在0℃下攪拌10分鐘，且隨後在0℃下同時添加(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.46 g，7.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用70%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 504.60 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（7）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （0.530 g，1.013 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.013 mL，2.026 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（10 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 476.67 (M+H)+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯
Figure 02_image226
（化合物C42）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 7 ） （0.300 mg，0.605 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（20 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.513 g，1.216 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且將有機層用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（化合物 C42 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 474.62 (M+H)+
(2S )-1-羥基-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C49）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（化合物 C42 ） （0.100 mg，0.2027 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（0.4 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （0.0632 mg，0.6081 mmol），且在40℃下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用二乙醚洗滌，得到((2S )-1-羥基-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C49 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 554.1 (M+H)+
實例41：化合物C43之合成
Figure 02_image240
1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（2）
在室溫下向K2 CO3 （17.6 g，128.205 mmol）於丙酮（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 1 ） （10 g，64.102 mmol），隨後在室溫下添加苯甲基溴（7.6 mL，64.102 mmol），且使反應混合物在70℃下回流16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 （150 mL）淬滅，隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，隨後用乙酸乙酯洗滌，層用飽和NaHCO3 （3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 247.26 [M+H]+
2-苯甲基環戊-1-酮（3）
在室溫下向1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（2 ）（15 g，60.975 mmol）於冰醋酸（150 mL）中之攪拌溶液中添加6N HCl水溶液（75 mL），且使反應混合物在70℃下回流6小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且傾入冰冷的水（100 mL）中，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-苯甲基環戊-1-酮（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 175.21[M+H]+
2-苯甲基環戊-1-醇（4）
在0℃下向2-苯甲基環戊-1-酮（3 ）（5 g，28.735 mmol）於MeOH（50 mL）中之攪拌溶液中添加NaBH4 （1.06 g，57.471 mmol）。使反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物蒸餾，且用1N HCl淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物2-苯甲基環戊-1-醇（4 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z = 171.43 [M+H] +
(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6）
在0℃下向2-苯甲基環戊-1-醇（4 ）（5 vg，28.409 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（2.5 mL，28.409 mmol）、三光氣（2.1 g，14.204 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（5 ）（4.9 g，34.091 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl水溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用4%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6 ）。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 348.33 [M+H] +
(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（7）
向(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6 ）（4.5 g，12.968 mmol）於THF（40 mL）、DM水（20 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（933 mg，38.904 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（7 ）。此粗產物不經任何純化即用於下一步驟.TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 334.45 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 7 ） （2 g，6.006 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.72 g，9.009 mmol）、HOBT（1.21 g，9.009 mmol）、DIPEA（3.13 mL，18.018 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.34 g，7.207 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 502.68 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（9）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （1 g，1.990 mmol）於二氯甲烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2 mL，3.981 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，將過濾物在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（9 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 474.84 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C43）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（ 9 ） （0.2 g，0.422 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.537 g，1.268 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C43 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 472.62 (M+H)+
實例42：化合物C44及C48之合成
Figure 02_image242
1-苯甲基環丙-1-醇（2）
在0℃下向2-苯基乙酸甲酯（ 1 ） （5 g，33.29 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加三異丙醇鈦（13.2 mL，46.61 mmol），隨後在0℃下添加乙基溴化鎂（66 mL，66.58 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（150 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用7%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯甲基環丙-1-醇（2 ）。TLC 系統： 2 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 149.28 [M+H]+   s
((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
在0℃下向1-苯甲基環丙-1-醇（2 ）（3.0 g，20.25 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（3 mL，39.97 mmol）、三光氣（3 g，10.12 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（3.5 g，24.30 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（50 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） 。TLC系統：20%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 320.52 [M+H] +
((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
在0℃下向((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 4 ） （3.0，9.40 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（677 mg，28.21 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 306.50 [M+H]+
(S )-2-((S )-2-(((1-苯甲基環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L -白胺酸（5 ）（2.5 g，8.19 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2.3 g，12.29 mmol）、HOBT（1.65 g，12.29 mmol）、DIPEA（4.2 mL，24.58 mmol）及(2S )-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.83 g，9.83 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S )-2-((S )-2-(((1-苯甲基環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 508.63 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（7）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-(((1-苯甲基環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （2.8 g，5.91 mmol）於二氯甲烷（30 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（5.9 mL，11.83 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 446.61 [M+H]+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（化合物C44）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（ 7 ） （0.15 g，0.33 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（4 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（226 mg，1.01 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（化合物 C44 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 444.42 (M+H)+
(2S )-2-((S )-2-(((1-苯甲基環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C48）
在室溫下向((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（50 mg，0.11 mmol）於EtOAc（2 mL）中之攪拌溶液中添加EtOH/H2 O（2/1）（3 mL）及NaHSO3 （35 mg，0.33 mmol），且將RM在50℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用EtOH（10 mL）洗滌，得到粗化合物。將粗產物用乙酸乙酯及二乙醚研磨，得到(2S )-2-((S )-2-(((1-苯甲基環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C48 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z = 526.2 (M+H)+ M=游離鹼
實例43：化合物C55及C45之合成
Figure 02_image244
Figure 02_image246
1-(3-氯苯甲基)環丙-1-醇（2）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙酸甲酯（ 1 ） （7 g，38.043 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加三異丙醇鈦（15 mL，53.260 mmol），隨後在0℃下添加乙基溴化鎂（95 mL，95.108 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（150 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%乙酸乙酯/己烷溶離，得到呈灰白色固體狀之1-(3-氯苯甲基)環丙-1-醇（2 ）（4.2 g，23.076 mmol，產率60%）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 183.33 [M+H]+
((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
在0℃下向1-(3-氯苯甲基)環丙-1-醇（2 ）（3.7 g，20.329 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（1.5 mL，16.8 mmol）、三光氣（3 g，10.164 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（3.4 g，24.395 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl水溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到呈黃色油性液體狀之((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） （3.2 g，9.065 mmol，產率44%）。TLC系統：20%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 354.26 [M+H] +
((1-3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
向((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） （3.2 g，9.065 mmol）於THF（40 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（652 mg，27.195 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到呈黃色膠質液體狀之((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） （2.8 g粗產物，8.259 mmol，產率91%）。此粗產物不經任何純化即用於下一步驟。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 340.23 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5 ）（2.8 g，8.2595 mmol）（5 ） 於DMF（50 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2.36 g，12.389 mmol）、HOBT（1.67 g，12.389 mmol）、DIPEA（4.45 mL，24.778 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.68 g，9.085 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到呈黃色膠質液體狀之(S)-2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基) -4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （2.3 g，4.536 mmol，產率54%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 508.63 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（7）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基) -4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （2.2 g，4.339 mmol）於二氯甲烷（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（4.3 mL，8.678 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到呈灰白色固體狀之((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 7 ） （1.3 g，2.713 mmol，產率62%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 480.00 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（化合物C45）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 7 ） （0.18 g，0.375 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.477 g，1.127 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（化合物 C45 ） （33 mg，0.069 mmol，產率18%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 478.41 (M+H)+
((2S)-2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C55）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（化合物 C45 ） （0.100 mg，0.2027 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（0.4 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （0.0632 mg，0.6081 mmol），且在40℃下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用二乙醚洗滌，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C55 ） （25 mg，0.047 mmol，產率26%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 558.1 (M+H)+
實例44：化合物C46及C57之合成
Figure 02_image248
(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（3）
在室溫下向2-甲基-1-苯基丙-2-醇（1 ）（2 g，13.31 mmol）於甲苯（20 mL）中之攪拌溶液中添加(S )-2-異氰酸基-4-甲基戊酸甲酯（2.7 g，15.98 mmol），且在密封試管下加熱至100℃維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 344.41 [M+Na]+
(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（4）
在室溫下向(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 3 ） （3.2 g，9.96 mmol）於THF（30 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（717 mg，29.90 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 330.50 [M+Na]+
(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（2 g，6.51 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.86 g，9.77 mmol）、HOBt（1.31 g，9.77 mmol）、DIPEA（3.6 mL，19.54 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.4 g，7.81 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 476.37 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（6）
在0℃下向(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （2 g，4.21 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（4.2 mL，8.42 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（6 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 448.49 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（化合物C46）
在0℃下將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（6 ）（200 mg，0.89 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，添加戴斯-馬丁高碘烷（599 mg，2.67 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（化合物 C46 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 446.45 (M+H)+
(2S)-1-羥基-2-((S)-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C57）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（化合物 C46 ） （0.100 g，0.231 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（0.4 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （0.0361 mg，0.347 mmol），且在40℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用二乙醚洗滌，得到(2S)-1-羥基-2-((S)-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C57 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 526.12 (M+H)+
實例45：化合物C47之合成
Figure 02_image250
(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-D-白胺酸甲酯（3）
在0℃下向(4,4-二氟環己基)甲醇（ 1 ） （9.5 g，63.33 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（10 mL，63.33 mmol）、三光氣（9.32 g，31.66 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （11.46 g，63.33 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCL溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 150 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-D-白胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 322.1[M+H]+
(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（4）
向(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-D-白胺酸甲酯（ 3 ） （13 g，40.49 mmol）於THF（130 mL）及水（75 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（5 g，121.49 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（4 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 308.1 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-((((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
向(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） （5 g，16.28 mmol）於DMF（100 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（4.58 g，24.42 mmol）、HOBT（3.33 g，24.42 mmol）、DIPEA（8.36 mL，48.85 mmol），在0℃下攪拌10分鐘，且隨後在0℃下同時添加(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（3.65 g，19.54 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（200 mL）稀釋，用乙酸乙酯（3 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用70%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-2-((((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 476.54 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-((((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （2.8 g，5.894 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（5.89 mL，11.789 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（3 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯(4,4-二氟環己基)甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 448.63 (M+H)+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯
Figure 02_image226
（化合物C47）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（ 7 ） （250 mg，0.526 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（20 mL）中，在10分鐘內在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（669 mg，1.57 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且將有機層用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物 C47 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 446.55 (M+H)+
實例46：化合物C33之合成
Figure 02_image253
1-苯甲基環丙-1-胺（2）
向2-苯乙腈（ 1 ） （2 g，17.094 mmol）於Et2 O:THF（1:1）（20 mL）中之攪拌溶液中添加異丙醇鈦（5.14 g，18.119 mmol），且隨後在10分鐘內在0℃下緩慢逐滴添加含2M氯化乙基鎂之THF（17 mL，34.188 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌1小時，且隨後在15分鐘內在0℃下緩慢添加BF3 -Et2 O（4.8 mL，34.188 mmol）（發生放熱），且在室溫下攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。1小時後，將反應混合物傾入10% NaOH溶液（100 mL）中，形成白色沈澱物。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）洗滌，且將過濾物用鹽水溶液（100 ml）洗滌，且將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在70%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到1-苯甲基環丙-1-胺（ 2 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 148.11 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-L-麩胺酸甲酯（4）
在0℃下向(S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-甲氧基-5-側氧基戊酸（ 3 ） （1 g，1.915 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（731 mg，3.831 mmol）、HOBT（517 mg，3.831 mmol）、DIPEA（1 mL，5.747 mmol）及1-苯甲基環丙-1-胺（ 2 ） （337 mg，2.298 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在40%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-L-麩胺酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5 0%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 413 [M+Na]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（5）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-(三級丁氧基羰基)-L-麩胺酸甲酯（ 4 ） （1.0 g，2.564 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（20 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 5 ） 。TLC 系統： 1 0%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 291.28 [M+H]+
N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-L-麩胺酸甲酯（6）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段） （1.0 g，2.949 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.12 g，5.899 mmol）、HOBT（796 mg，5.899 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.849 mmol）及N5-(1-苯甲基環丙基)-L-麩胺酸甲酯鹽酸鹽（ 5 ） （855 mg，3.539 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-L-麩胺酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 612.88 [M+H]+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7）
在0℃下向N5-(1-苯甲基環丙基)-N2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯基)-L-麩胺酸甲酯（ 6 ） （700 mg，1.143 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.14 mL，2.287 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用水（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（10 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將其藉由combi-flash純化，化合物在80%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 584.53 (M+H)+
((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C33）
將((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)胺基)-1-羥基-5-側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） （200 mg，0.343 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（290 mg，0.686 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 10 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-5-((1-苯甲基環丙基)胺基)-1,5-二側氧基戊-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C33 ） 。TLC系統：80%乙酸乙酯/石油醚Rf：0.4
實例47：化合物C43及C61之合成
Figure 02_image256
1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（2）
在室溫下向K2 CO3 （17.6 g，128.205 mmol）於丙酮（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 1 ） （10 g，64.102 mmol），隨後在室溫下添加苯甲基溴（7.6 mL，64.102 mmol），且使反應混合物在70℃下回流16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 （150 mL）淬滅，隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，隨後用乙酸乙酯洗滌，層用飽和NaHCO3 （3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 247.26 [M+H]+
2-苯甲基環戊-1-酮（3）
在室溫下向1-苯甲基-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（2 ）（15 g，60.975 mmol）於冰醋酸（150 mL）中之攪拌溶液中添加6N HCl水溶液（75 mL），且使反應混合物在70℃下回流6小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且傾入冰冷的水（100 mL）中，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-苯甲基環戊-1-酮（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 175.21[M+H]+
2-苯甲基環戊-1-醇（4）
在0℃下向2-苯甲基環戊-1-酮（3 ）（5 g，28.735 mmol）於MeOH（50 mL）中之攪拌溶液中添加含NaBH4 （1.06 g，57.471 mmol）。使反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物蒸餾，且用1N HCl淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物2-苯甲基環戊-1-醇（4 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z = 171.43 [M+H] +
(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6）
在0℃下向2-苯甲基環戊-1-醇（4 ）（5 vg，28.409 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（2.5 mL，28.409 mmol）、三光氣（2.1 g，14.204 mmol），隨後添加L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（5 ）（4.9 g，34.091 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl水溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用4%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6 ）。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 348.33 [M+H] +
(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（7）
向(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6 ）（4.5 g，12.968 mmol）於THF（40 mL）、DM水（20 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（933 mg，38.904 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（7 ），將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 334.45 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 7 ） （2 g，6.006 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.72 g，9.009 mmol）、HOBT（1.21 g，9.009 mmol）、DIPEA（3.13 mL，18.018 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.34 g，7.207 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 502.68 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（9）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （1 g，1.990 mmol）於二氯甲烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2 mL，3.981 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，將過濾物在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（9 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 474.84 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C43）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（ 9 ） （0.2 g，0.422 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.537 g，1.268 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C43 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 472.62 (M+H)+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C61）
在室溫下向((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C43 ） （80 mg，0.169 mmol）於乙醇（2 mL）、EtOAc（5 mL）、水（1 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （22 mg，0.219 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，隨後用乙醇（5 mL）洗滌。將過濾物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（2 × 5 mL）、EtOAc（2 × 5 mL）研磨，傾析溶劑，充分乾燥固體，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C61 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 552.2 [M-H]-
實例48：化合物C54及C69之合成
Figure 02_image258
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 ）（270 mg，0.903 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（259 mg，1.35 mmol）、HOBT（183 mg，1.35 mmol）、DIPEA（0.5 mL，2.7 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸乙酯鹽酸鹽（Int-7 ）（345 mg，0.99 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 593.59 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） （280 mg，0.47 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.4 mL，0.94 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 551.38 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C54）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 2 ） （120 mg，0.26 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（ 479 mg，1.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C54）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.35LCMS (ESI)：m/z 549.50 (M+H)+
((2R)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C69）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C54 ） （200 mg，0.36 mmol）於DCM（2 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.09 mmol）、亞磷酸二乙酯（0.1 mL，0.72 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥。粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((2R)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C69 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 587.2 (M+H)+
實例49：化合物C56及C63之合成
Figure 02_image260
1-苯甲基環丁-1-醇（2）
在0℃下向環丁酮（1 ）（5 g，71.428 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中添加苯基溴化鎂（71 mL，142.85 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（150 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯甲基環丁-1-醇（2 ）。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 163.10 [M+H]+
((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
向1-苯甲基環丁-1-醇（2）（3 g，18.518 mmol）於甲苯（30 mL）中之攪拌溶液中添加(S)-2-異氰酸基-4-甲基戊酸甲酯（3 ）（3.79 g，22.222 mmol），且在90℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.6 LCMS (ESI)：m/z = 334.38 [M+H]
((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
向((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） （3.5 g，10.510 mmol）於THF（40 mL）、DM水（20 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（756 mg，31.531 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 320.36 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((1-苯甲基環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（5 ）（3 g，9.803 mmol）於DMF（30 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2.8 g，14.705 mmol）、HOBT（1.9 g，14.705 mmol）、DIPEA（5.4 mL，29.411 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（2.1 g，11.764 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((1-苯甲基環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 448.18 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（7）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((1-苯甲基環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （400 mg，0.871 mmol）於二氯甲烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.1 mL，2.614 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，將過濾物在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 458.52 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物C56）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（ 7 ） （0.2 g，0.435 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.554 g，1.307 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C56 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 458.2 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-(((1-苯甲基環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C63）
在室溫下向粗((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C56 ） （180 mg，0.393 mmol）於EtOAc（5 mL）中之攪拌溶液中添加EtOH/H2 O（2 mL，1 mL）及NaHSO3 （61 mg，0.590 mmol），且將RM在40℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用EtOH（20 mL）洗滌，得到(2S)-2-((S)-2-(((1-苯甲基環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C63 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 538.2 (M+H)+
實例50：化合物C58及C59之合成
Figure 02_image262
Figure 02_image264
2, 3-二氫喹啉-4(1H )-酮（2）
將3-(苯基胺基)丙酸（1 ）（20 g，121.21 mmol）於PPA（200 g）中之攪拌溶液加熱至100℃維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰冷的水稀釋，且用EtOAc（3 × 100 mL）萃取。使有機層合併，且用鹽水（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗2,3-二氫喹啉-4(1H )-酮（ 2 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 148.07 [M+H]+
4-側氧基-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（3）
在室溫下向2, 3-二氫喹啉-4(1H )-酮（2 ）（5.4 g，36.73 mmol）於二氯甲烷（80 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（7.5 mL，43.78 mmol）、(Boc)2 O（9.5 mL，43.78 mmol）、DMAP（445 mg，3.64 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到4-側氧基-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 40%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 248.12 [M+H]+
4-羥基-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（4）
在0℃下向4-側氧基-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（3 ）（4 g，16.12 mmol）於甲醇（40 mL）中之攪拌溶液中添加NaBH4 （900 mg，24.19 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且在減壓下蒸發，得到粗產物，將此粗產物用水稀釋，且用EtOAc（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到4-羥基-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 40%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 272.30 [M+Na]+
4-((((S )-1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（6）
在室溫下向4-羥基-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 4 ） （2 g，8.03 mmol）於甲苯（20 mL）中之攪拌溶液中添加(S )-2-異氰酸基-4-甲基戊酸甲酯（ 5 ） （2.06 g，12.04 mmol），且在密封試管下加熱至100℃維持16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到4-((((S )-1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 6 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 443.44 [M+Na]+
(((1-(三級丁氧基羰基)-1, 2, 3, 4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)-L -白胺酸（7）
在室溫下向4-((((S )-1-甲氧基-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 6 ） （2.4 g，5.71 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（411 mg，17.14 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)-L -白胺酸（ 7 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 429.21 [M+Na]+
4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（8）
在0℃下向(((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)-L -白胺酸（ 7 ） （2 g，4.92 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.4 g，7.38 mmol）、HOBt（0.9 g，7.38 mmol）、DIPEA（2.5 mL，14.76 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.1 g，5.91 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 575.54 [M+H]+
4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3, 4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（9）
在0℃下向4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 8 ） （500 mg，0.87 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.8 mL，1.74 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（9 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 569.60 [M+Na]+
4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（化合物C59）
在0℃下將4-((((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（9 ）（150 mg，0.27 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，添加戴斯-馬丁高碘烷（349 mg，0.82 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（化合物 C59 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 545.45 (M+H)+
(2S )-2-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1, 2, 3, 4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C58）
將4-((((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（化合物 C59 ） （0.15 g，0.27 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（3.0 mL）、乙醇（2.0 mL）、水（0.5 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （46 mg，0.55 mmol），且在40℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用EtOAc和二乙醚洗滌，得到(2S )-2-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C58 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 625.2 [M]-
實例51：化合物C71及C62之合成
Figure 02_image266
1-(吡啶-3-基甲基)環丙-1-醇（2)
向2-(吡啶-3-基)乙酸甲酯（ 1 ） （10 g，66.225 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加異丙醇鈦（27.4 g，96.549 mmol），且隨後在-78℃下在30分鐘內緩慢逐滴添加含2M氯化乙基鎂之THF（115 mL，231.78 mmol）。隨後將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（3 × 40 mL）萃取，用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在94%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到1-(吡啶-3-基甲基)環丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 150.06 [M+H]+
((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
向1-(吡啶-3-基甲基)環丙-1-醇（2）（3.7 g，24.832 mmol）於甲苯（20 mL）中之攪拌溶液中添加Et3 N（10 mL，74.496 mmol），隨後添加(S)-2-異氰酸基-4-甲基戊酸甲酯（3 ）（6.3 g，37.248 mmol），且在110℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用40%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4 ）。TLC系統：70%乙酸乙酯/己烷Rf：0.6 LCMS (ESI)：m/z = 321.34 [M+H]
((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
向((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 4 ） （4.8 g，15.00 mmol）於THF（40 mL）、DM水（20 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1.8 g，45.00 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中.TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 307.22 [M+H]+
(S)-2-((S)-4-甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5 ）（1.5 g，4.901 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.4 g，7.352 mmol）、HOBT（0.99 g，7.352 mmol）、DIPEA（2.7 mL，14.705 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1 g，5.882 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S)-2-((S)-4-甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 475.14 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(吡啶-3-基甲基)環丙酯（化合物C71）
在-78℃下向(S)-2-((S)-4-甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)胺基)戊醯胺基) -3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （300 mg，0.632 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2.4M LAH之THF（0.3 mL，0.632 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，在減壓下濃縮過濾物，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(吡啶-3-基甲基)環丙酯（化合物 C71 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 445.12 [M+H]+
(2S)-1-羥基-2-((S)-4-甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物C62）
在室溫下向粗((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(吡啶-3-基甲基)環丙酯（化合物 C71 ） （200 mg，0.450 mmol）於EtOAc（5 mL）中之攪拌溶液中添加EtOH/H2 O（2 mL，1 mL）及NaHSO3 （70 mg，0.675 mmol），且將RM在40℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用EtOH（20 mL）洗滌矽藻土墊，得到(2S)-1-羥基-2-((S)-4-甲基-2-(((1-(吡啶-3-基甲基)環丙氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸酯（化合物 C62 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 525.2 (M+H)+
實例52：化合物C64之合成
Figure 02_image268
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -2 ）（1.2 g，3.9 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.1 g，5.86 mmol）、HOBT（0.79 g，5.86 mmol）、DIPEA（2.1 mL，11.72 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.49 g，4.29 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 601.71 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1 ）（500 mg，0.85 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.85 mL，1.7 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 559.68 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物C64）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2 ）（400 mg，0.71 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.2 g，2.87 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物 C64 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 557.3 (M+H)+
實例53：化合物C96及C72之合成
Figure 02_image270
2-(3- 氯苯基 )-2- 甲基丙酸甲酯（ 2 ）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙酸甲酯（ 1 ） （10 g，54.17 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（6.5 g，162.51 mmol），且攪拌15分鐘，隨後在相同溫度下添加MeI（13.5 mL，216.68 mmol），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 100 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 213.31 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（3）
在-50℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（6 g，28.30 mmol）於THF（80 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加含2.4 M LAH之THF（11.7 mL，28.30 mmol），且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 50 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（60 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） 。TLC系統：30%乙酸乙酯Rf：0.3LCMS (ESI)：m/z = 167.4 [M-OH]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（5）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） （2.8 g，15.16 mmol）、L -白胺酸甲酯（2.64 g，18.19 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（3 mL，1體積），隨後添加三光氣（2.24 g，7.58 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 356.31 [M+H]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6）
在室溫下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） （2.3 g，6.47 mmol）於THF（10 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（800 mg，19.43 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，且用二乙醚（20 mL）稀釋及洗滌，將水層用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 342.34 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（6）（10 g，29.32 mmol）、DMF（100 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（8.401 g，43.98 mmol）、HOBt（5.76 g，43.98 mmol）、DIPEA（15.2 mL，87.9 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（6.545 g，35.19 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 510.55 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（8）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （3 g，5.893 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（8.8 mL，17.681 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到cpd-8 （2.8 g，5.81 mmol，產率98%）之混合物。將混合物藉由SFC純化，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 482.50 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C96）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（8 ）（1 g，2.079 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（2.644 g，6.237 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由正相矽膠純化來純化，10% MeOH/DCM產物經溶離為((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C96 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 480.2 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物C72）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C96 ） （750 mg，1.565 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（2.0 mL）、乙醇（2.0 mL）、水（2.0 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （325 mg，3.131 mmol），且在50-60℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，用甲醇（10 mL）洗滌，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用DCM/二乙醚/戊烷之組合洗滌，得到(2S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C72 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷，隨後100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 560.1 (M-Na)-
實例54：化合物C54及C69之合成
Figure 02_image272
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 ）（270 mg，0.903 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（259 mg，1.35 mmol）、HOBT（183 mg，1.35 mmol）、DIPEA（0.5 mL，2.7 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸乙酯鹽酸鹽（Int-7 ）（345 mg，0.99 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 593.59 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） （280 mg，0.47 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.4 mL，0.94 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 551.38 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C54）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2 ）（120 mg，0.26 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（479 mg，1.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C54 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf : 0.35LCMS (ESI)：m/z 549.50 (M+H)+
((2R)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C69）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C54 ） （200 mg，0.36 mmol）於DCM（2 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.09 mmol）、亞磷酸二乙酯（0.1 mL，0.72 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((2R)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C69 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 587.2 (M+H)+
實例55：化合物C60及C76之合成
Figure 02_image274
2-(3-(苯甲氧基)苯基)乙酸甲酯（2）
在室溫下向2-(3-羥基苯基)乙酸甲酯（ 1 ） （5 g，3.012 mmol）於DMF（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加K2 CO3 （12.46 mL，9.03 mmol），隨後添加苯甲基溴（7.7 mL，4.51 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰冷的水（150 mL）淬滅，且攪拌1小時，用二乙醚（3 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用7%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-(苯甲氧基)苯基)乙酸甲酯（2 ）。TLC 系統： 2 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 257.36 [M+H]+
1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙-1-醇（3）
在0℃下向2-(3-(苯甲氧基)苯基)乙酸甲酯（ 2 ） （6 g，23.43 mmol）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加三異丙醇鈦（9.3 mL，46.61 mmol），隨後在0℃下添加乙基溴化鎂（58.5 mL，58.5 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（50 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-苯甲基環丙-1-醇（3 ）。TLC 系統： 10 %乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 255.1 [M+H]+
((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
向1-苯甲基環丙-1-醇（3 ）（2.5 g，9.82 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（3 mL）、L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（1.7 g，11.79 mmol），隨後在0℃下緩慢添加三光氣（1.45 g，4.91 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（50 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用2 × 50 mL NaHCO3 溶液洗滌，有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 5 ） 。TLC系統：20%乙酸乙酯/己烷Rf：0.4 LCMS (ESI)：m/z = 426.47 [M+H] +
((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（6）
在0℃下向((1-苯甲基環丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） （1.2 g，2.8 mmol）於THF（10 mL）、水（2.5 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（350 mg，8.4 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 70%乙酸乙酯及石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 412.44 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） （23.2 g，7.78 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2.2 g，11.67 mmol）、HOBT（1.576 g，11.67 mmol）、DIPEA（4.3 mL，23.34 mmol）及(R)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.73 g，9.34 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 580.78 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙酯（6）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （1.3 g，2.24 mmol）於二氯甲烷（13 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（3.36 mL，6.6 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 70%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 552.46 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙酯（化合物C60）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丙酯（ 7 ） （200 mg，0.362 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（4 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（446 mg，1.088 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，用矽藻土墊過濾，將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙酯（化合物 C60 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 444.42 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-(((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物C76）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙酯（化合物 C60 ） （150 mg，0.273 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（1.0 mL）、乙醇（1.0 mL）、水（1.0 mL）中，且隨後添加NaHSO3 （31 mg，0.3 mmol），且在50-60℃下攪拌24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，用甲醇（10 mL）洗滌，且將過濾物經硫酸鈉乾燥，濃縮，且將粗化合物用DCM/二乙醚/戊烷之組合洗滌，得到(2S)-2-((S)-2-(((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C76 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷，隨後100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 630.2 (M-Na)
實例56：化合物C64及C95之合成
Figure 02_image276
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -2 ）（1.2 g，3.9 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.1 g，5.86 mmol）、HOBT（0.79 g，5.86 mmol）、DIPEA（2.1 mL，11.72 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.49 g，4.29 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 601.71 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((4,4二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（1 ）（500 mg，0.85 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.85 mL，1.7 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 559.68 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物C64）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（2 ）（400 mg，0.71 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.2 g，2.87 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物 C64 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 557.3 (M+H)+
((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物C95）
將((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物 C64 ）（100 mg，0.179 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.1 mL，0.53 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.08 mL，0.53 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（化合物 C9 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 695.3.3 (M+H)+
實例57：化合物C66及C85之合成
Figure 02_image278
Figure 02_image280
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環己基)甲基)戊二酸1-乙酯5-甲酯
在0℃下向(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸1-乙酯5-甲酯（2 ）（1.86 g，6.17 mmol）於ACN（8 mL）中之攪拌溶液中添加硝基環己烷（1 ） （800 mg，6.17 mmol）及DBU（1.8 mL，12.4 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環己基)甲基)戊二酸1-乙酯5-甲酯（3 ）。TLC 系統 ： 60%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 453.48 (M+ Na+ H)+
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（4）
在-10℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環己基)甲基)戊二酸1-乙酯5-甲酯（3 ）（500 mg，1.16 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（151 mg，1.16 mmol），隨後添加硼氫化鈉（221 mg，5.81 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（5 mL）淬滅，且用10% MeOH/DCM（3 × 25 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（10 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 369.55 (M+H)+
2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯鹽酸鹽（5）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（4 ）（2 g，5.43 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加1,4-二
Figure 02_image011
烷.HCl（20 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯鹽酸鹽（5 ）。TLC系統：15% MeOH/DCM       Rf ：0.1LCMS (ESI)：m/z 269.03 (M+H)+
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（6）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 ）（1.2 g，4.01 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.1 g，6.01 mmol）、HOBT（800 mg，6.01 mmol）、DIPEA（2 mL，12 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯鹽酸鹽（1.4 g，4.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（6 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 550.61 (M+H)+
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（7）
在0℃下向2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（6 ）（800 mg，1.45 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.45 mL，2.91 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸乙酯（7 ）。TLC 系統： 5 % MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 508.20 (M+H)+
((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C66）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7 ）（100 mg，0.19 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（334 mg，0.78 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C66 ）。TLC系統：5%甲醇/DCM     Rf ：0.4LCMS (ESI)：m/z 506.2 (M+H)+
((2R)-1-((1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C85）
在0℃下向((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C66 ）（200 mg，0.39 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（0.2 mL，1.1 mmol）、亞磷酸二乙酯（0.14 mL，1.1 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到((2R)-1-((1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C85 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 644.2 (M+H)+
實例58：化合物C67及C82之合成
Figure 02_image283
(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸（1 ）（500 mg，2.73 mmol）於甲醇（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加乙醯氯（1 mL，10體積）及催化劑DMF，且將反應混合物在80℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應物質蒸發至乾，且用正戊烷研磨，得到(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 198.24 (M+H)+
(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（4）
在0℃下向(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（ 3 ） （108 mg，0.76 mmol）、(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（2）（100 mg，0.507 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（0.1 mL，1體積），隨後添加三光氣（225 mg，0.76 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（4）。TLC 系統： 40%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 366.30 [M+H]+
(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸（5）
在室溫下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯（ 4 ） 甲基（1.2 g，3.28 mmol）於THF（8 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（404 mg，9.86 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 351.92 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙醯胺基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(R)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸（5 ）（970 mg，2.76 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（790 mg，790 mmol）、HOBT（595 mg，4.41 mmol）、DIPEA（1.4 mL，8.28 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.15 g，3.31 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用60%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙醯胺基)丙酸甲酯（6 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 631.31 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-(3-氟苯基)丙醯胺基)丙酸甲酯（6 ）（600 mg，0.95 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.95 mL，1.9 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 603.7 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C67）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） （500 mg，0.79 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1 g，2.38 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2 yl)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C67 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 601.2 (M+H)+
((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C67）
將((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C82 ）（100 mg，0.18 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.1 mL，0.54 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.07 mL，0.54 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到純((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-3-(3-氟苯基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C67 ） 。TLC 系統： 100% EtOAc/石油醚Rf ： 0.25LCMS (ESI)：m/z 739.2 (M+H)+
實例59：化合物C68之合成
Figure 02_image285
(3S )-3-((2S )-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（2）
在0℃下向((S )-1-(((S )-1-氰基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-1-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 1 ） （750 mg，1.2 mmol）於THF/H2 O（5 mL/2.5 mL）中之攪拌溶液中添加過硫酸氫鉀（745 mg，2.4 mmol），且將混合物在室溫下攪拌2小時。隨後添加2-吡啶甲基胺（0.06 mL，0.4189 mmol）於THF/DMF（0.5 mL/0.25 mL）中之溶液。隨後向混合物中添加1N HCl，且將pH調整至酸性，且用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(3S )-3-((2S )-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（2 ）。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 538.44 [M+H]+
((S )-1-(((S )-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-((吡啶-2-基甲基)胺基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物C68）
在-40℃下向(3S )-3-((2S )-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（ 2 ） （150 mg，0.2793 mmol）於THF（3 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加氯甲酸異丁酯（0.045 mL，0.33516 mmol）及NMM（0.045 mL，0.4189 mmol）。將混合物在-40℃下攪拌30分鐘。隨後添加2-吡啶甲基胺（0.06 mL，0.4189 mmol）於THF/DMF（0.5 mL/0.25 mL）中之溶液。將混合物在-40℃下攪拌2小時。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-((吡啶-2-基甲基)胺基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物 C68 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 628.3 [M+H]+
實例60：化合物C70及C84之合成
Figure 02_image287
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -1 ）（1 g，2.9 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（ 1 g，5.2 mmol）、HOBT（0.7 g，5.2 mmol）、DIPEA（1.5 mL，8.7 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.2 g，3.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 521.27 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（1 ）（350 mg，0.56 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.56 mL，1.1 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.25LCMS (ESI)：m/z 593.26 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C70）
在0℃下向((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（2 ）（240 mg，0.4 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（515 mg，1.21 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C70 ）。TLC系統：5%甲醇/DCM      Rf ：0.3LCMS (ESI)：m/z 591.3 (M+H)+
((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C84）
將((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C70 ）（270 mg，0.28 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.24 mL，0.86 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.25 mL，0.21 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C84 ）。TLC 系統： 80% EtOAc/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 729.2 (M+H)+
實例61：化合物C73之合成
Figure 02_image289
((2S)-1-(((2S)-1-氰基-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（3）
向((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C56 ） （700 mg，1.552 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加Et3 N（0.27 mL，1.862 mmol），隨後在0℃下添加丙酮氰醇（ 2 ） （263 mg，3.104 mmol），且使反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（50 mL）稀釋，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2S)-1-(((2S)-1-氰基-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 485.75 [M+H]+
((2S)-1-(((2S)-4-胺基-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（4）
在0℃下向((2S)-1-(((2S)-1-氰基-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（ 3 ） （500 mg，1.033 mmol）、DMSO（10 mL）之攪拌溶液中添加K2 CO3 （213 mg，1.549 mmol）及H2 O2 （30%）（0.6 mL，5.681 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((2S)-1-(((2S)-4-胺基-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基) -4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 503.23 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物C73）
在0℃下向((2S)-1-(((2S)-4-胺基-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（4 ）（450 mg，0.896 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.3 g，3.286 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C73 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 501.2 [M+H]+
實例62：化合物C74及C94之合成
Figure 02_image291
(1H-吲哚-2-羰基)-L-白胺酸甲酯（3）
在0℃下向1H-吲哚-2-甲酸（2 ） （1 g，6.21 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.7 g，9.31 mmol）、HOBT（1.2 g，5.47 mmol）、三乙胺（2.6 mL，4.5 mmol）及L-白胺酸甲酯（2）（1.2 g，1.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(1H-吲哚-2-羰基)-L-白胺酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 289.28 (M+H)+
(1H-吲哚-2-羰基)-L-白胺酸（4）
在室溫下向(1H-吲哚-2-羰基)-L-白胺酸甲酯甲基（3）（0.8 g，2.77 mmol）於THF（4 mL）、水（1 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（349 mg，8.33 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(1H-吲哚-2-羰基)-L-白胺酸（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf: 0.2LCMS (ESI)：m/z 275.1 (M+H)+
2-((S)-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(1H-吲哚-2-羰基)-D-白胺酸（ 4 ）（1 g，3.649 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.03 g，5.47 mmol）、HOBT（0.32 g，5.47 mmol）、DIPEA（1.9 mL，10 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.39 g，4 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到2-((S)-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 554.76 (M+H)+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）
在0℃下向2-((S)-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（5 ）（900 mg，1.62 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.6 mL，3.25 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 526.75 (M+H)+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C74）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）（200 mg，0.38 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（0.48 g，0.38 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C74）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 524.2 (M+H)+
(2-((S)-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-羥基丙基)膦酸二乙酯（化合物C94）
將N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C74 ）（30 mg，0.05 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.03 mL，0.15 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.03 mL，0.15 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到純(3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-1-羥基丙基)膦酸二乙酯（化合物 C94 ）。TLC 系統： 100% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 662.2 (M+H)+
實例63：化合物C75及C81之合成
Figure 02_image293
Figure 02_image295
(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向1H-吲哚-2-甲酸（1 ） （2 g，12.42 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（3.5 g，18.6 mmol）、HOBT（1.5 g，12.4 mmol）、三乙胺（5.2 mL，37.2 mmol）及(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（2 ）（3.4 g，18.6 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 329.33 (M+H)+
(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（3 ）（7 g，24.3 mmol）於THF（12 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（3 g，72.9 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 315.1 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(R)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段 -5 ）（1 g，3.18 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.88 g，4.6 mmol）、HOBT（0.62 g，4.6 mmol）、DIPEA（1.6 mL，9.3 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.3 g，3.8 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 594.28 (M+H)+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（5 ）（600 mg，1.08 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，2.1 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 566.3 (M+H)+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C75）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）（500 mg，0.88 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.12 g，2.87 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C75 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 564.2 (M+H)+
(3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-1-羥基丙基)膦酸二乙酯（化合物C81）
將N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C75 ）（30 mg，0.05 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.03 mL，0.15 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.03 mL，0.15 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到(3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-1-羥基丙基)膦酸二乙酯（化合物 C81 ）。TLC 系統： 80% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 702.3 (M+H)+
實例64：化合物C78及C99之合成
Figure 02_image297
(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.5 g，3.253 mmol）於THF（10 mL）、水（8 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（234 mg，9.7613 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 448.66 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（4）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （1.1 g，2.46 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.4 g，3.691 mmol）、DIPEA（1.36 mL，7.382 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（608 mg，2.953 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 557.89 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物C99）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（ 4 ） （150 mg，0.269 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（31 mg，0.179 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物 C99 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 475.2 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物C78）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（ 4 ） （200 mg，0.359 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（154 mg，0.899 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯基丙-2-基酯（化合物 C78 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 515.2 [M+H]+
實例65：化合物C79之合成
Figure 02_image299
1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3）
向四氫噻吩（1A ）（10 g，113.63 mmol）之攪拌溶液中添加溴乙腈（2A ）（13.5 g，113.63 mmol），且在室溫下攪拌24小時。將所得固體用二乙醚洗滌且乾燥，得到1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）。LCMS (ESI)：m/z 205.0 [M-H]+
(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （800 mg，1.68 mmol）於THF（6 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（80 mg，3.36 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 484.15 [M+Na]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（4）
在0℃下向(S )-2-((S )-4-甲基-2-((((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（3）（700 mg，1.51 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.14 g，3.02 mmol）、DIPEA（0.8 mL，4.53 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（376 mg，1.82 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S ) -2-側氧基吡咯啶-3-基) -4- (四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 571.78 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（化合物C79）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（ 4 ） （150 mg，0.26 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（90 mg，0.52 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（化合物 C79 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 448.49 [M+H]+
實例66：化合物C80及C98之合成
Figure 02_image301
(S)-2-((S)-2-(3-苯甲基-3-(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)脲基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 1 ） （2 g，3.252 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（234 mg，3.36 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-((S)-2-(3-苯甲基-3-(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)脲基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 601.4 [M+H]+
4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（4）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(3-苯甲基-3-(1-(三級丁氧基羰基)哌啶-4-基)脲基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （1.5 g，2.495 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（1.42 g，3.743 mmol）、DIPEA（1.37 mL，7.487 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（616 mg，2.995 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 711.53 [M+H]+
4-(3-((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1-苯甲基脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物C80）
在0℃下向4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 4 ） （150 mg，0.211 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（72 mg，0.422 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到4-(3-((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-1-苯甲基脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C80 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 629.3 [M+H]+
4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物C98）
在0℃下向4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（ 4 ） （200 mg，0.281 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（121 mg，0.704 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到4-(1-苯甲基-3-((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)脲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（化合物 C98 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 669.3 [M+H]+
實例67：化合物C86之合成
Figure 02_image303
(2S )-2-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1, 2, 3, 4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向4-((((S )-1-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 1 ） （400 mg，0.69 mmol）於THF（4 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（50 mg，2.08 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 559.65 [M-H]+
4-((((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （350 mg，0.62 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（474 mg，1.24 mmol）、DIPEA（0.3 mL，1.87 mmol）及甲基1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（155 mg，0.74 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到4-((((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 670.48 [M+H]+
(3S )-3-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基) -1, 2, 3, 4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（5）
在室溫下向4-((((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（ 4 ） （300 mg，0.44 mmol）於THF（5 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加過硫酸氫鉀（826 mg，1.34 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(3S )-3-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 587.37 [M-H]+
4-((((S )-1-(((S)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-((吡啶-2-基甲基)胺基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（化合物C86）
將(3S )-3-((2S )-2-((((1-(三級丁氧基羰基)-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（ 5 ） （130 mg，0.22 mmol）之攪拌溶液溶解於THF（6 mL）中，在-40℃下添加NMM（29 mg，0.28 mmol）、氯甲酸異丁酯（36 mg，0.26 mmol），且隨後添加吡啶-2-基甲胺（6 ）（30 mg，0.26 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用鹽水溶液（ 2 × 15 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到4-((((S )-1-(((S )-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-((吡啶-2-基甲基)胺基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺甲醯基)氧基)-3,4-二氫喹啉-1(2H )-甲酸三級丁酯（化合物 C86 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 679.3 (M+H)+
實例68：化合物C90及C87之合成
Figure 02_image305
(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （2 g，3.9292 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（282 mg，11.7878 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 496.69 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（4）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （1.1 g，2.2222 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（380 mg，3.3333 mmol）、DIPEA（1.22 mL，6.666 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（915 mg，4.444 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 605.71 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C90）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） （350 mg，0.579 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（200 mg，1.158 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1.5 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C90 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 523.2 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C87）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） （150 mg，0.248 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（85 mg，0.496 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C87 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 563.2 [M+H]+
實例69：化合物C88之合成
Figure 02_image307
(S )-2-((S )-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S )-2-((S )-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （2.6 g，5.12 mmol）於THF（30 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（629 mg，15.36 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((S )-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 494.68 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯
在0℃下向(S )-2-((S )-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（1.5 g，3.04 mmol）、DCM（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.7 g，4.56 mmol）、DIPEA（1.3 mL，9.12 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（940 mg，4.56 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 603.74 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（化合物C88）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 4 ） （200 mg，0.33 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（114 mg，0.66 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（化合物 C88 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 521.2 [M+H]+
實例70：化合物C89之合成
Figure 02_image309
((2S)-1-(((2R)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（2）
將((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C43 ） （300 mg，0.636 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.2 mL，2.547 mmol）、異氰基環丙烷（1 ）（51 mg，0.764 mmol），攪拌10分鐘，在0℃下添加TFA（0.09 mL，1.273 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，用EtOAc（2 × 55 mL）萃取，將經合併之有機層用1N HCl（3 × 20 mL）、鹽水溶液（3 × 20 mL）洗滌，將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發。粗殘餘物((2S)-1-(((2R)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 557.3 [M+H]
((S)-1-(((R)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C89）
在0℃下向((2S)-1-(((2R)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（ 2 ） （250 mg，0.449 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（571 mg，1.34 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((R)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C89 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 555.3 (M+H)+
實例71：化合物C93之合成
Figure 02_image311
(S )-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S )-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.8 g，3.57 mmol）於THF（30 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（440 mg，10.73 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 490.69[M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（4）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-(((1-(3-甲氧基苯甲基)環丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（1.5 g，3.06 mmol）、DCM（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.7 g，4.60 mmol）、DIPEA（1.3 mL，9.20 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（947 mg，4.60 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 599.26 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（化合物C93）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（ 4 ） （300 mg，0.50 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（172 mg，1.00 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-甲氧基苯甲基)環丙酯（化合物 C93 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 517.2 [M+H]+
實例72：化合物C96之合成
Figure 02_image313
2-(3- 氯苯基 )-2- 甲基丙酸甲酯（ 2 ）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙酸甲酯（ 1 ） （10 g，54.17 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（6.5 g，162.51 mmol），且攪拌15分鐘，隨後在相同溫度下添加MeI（13.5 mL，216.68 mmol），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 100 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 213.31 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（3）
在-50℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（6 g，28.30 mmol）於THF（80 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加含2.4 M LAH之THF（11.7 mL，28.30 mmol），且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 50 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（60 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） 。TLC系統：30%乙酸乙酯Rf：0.3LCMS (ESI)：m/z = 167.4 [M-OH]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（5）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） （2.8 g，15.16 mmol）、L -白胺酸甲酯（ 4 ） （2.64 g，18.19 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（3 mL，1體積），隨後添加三光氣（2.24 g，7.58 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 356.31 [M+H]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6）
在室溫下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） （2.3 g，6.47 mmol）於THF（10 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（800 mg，19.43 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，且用二乙醚（20 mL）稀釋及洗滌，將水層用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 342.34 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（6）（10 g，29.32 mmol）於DMF（100 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（8.401 g，43.98 mmol）、HOBt（5.76 g，43.98 mmol）、DIPEA（15.2 mL，87.9 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（6.545 g，35.19 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 510.55 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（8）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （3 g，5.893 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（8.8 mL，17.681 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到cpd-8 （2.8 g，5.81 mmol，產率98%）之混合物。將混合物藉由SFC純化，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 482.50 [M+H]+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C96）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（8 ）（1 g，2.079 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（2.644 g，6.237 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由正相矽膠純化來純化，10% MeOH/DCM產物經溶離為((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C96 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM    Rf：0.4LCMS (ESI)：m/z 480.2 (M+H)+
實例73：化合物C97之合成
Figure 02_image315
(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （2 g，3.824 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（275 mg，11.472 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 510.67 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（4）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基) -4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （1.5 g，2.946 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.6 g，4.420 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.840 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（728 mg，3.536 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 619.51 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物C97）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 4 ） （400 mg，0.647 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（278 mg，0.618 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物 C97 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 577.2 [M+H]+
實例74：化合物C100之合成
Figure 02_image317
(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （2 g，3.824 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（275 mg，11.472 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 510.67 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（4）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-二苯基乙氧基)羰基)胺基) -4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （1.5 g，2.946 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.6 g，4.420 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.840 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（728 mg，3.536 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 619.51 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物C100）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（ 4 ） （400 mg，0.647 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（278 mg，1.618 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1.5 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-二苯基乙酯（化合物 C100 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 537.2 [M+H]+
實例75：化合物C65之合成
Figure 02_image319
(( 戊氧基 ) 羰基 )-L - 白胺酸甲酯（ 3 ）
在0℃下向氯甲酸戊酯（ 1 ） （3.7 g，24.56 mmol）、L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（3 g，20.68 mmol）於THF（30 mL）中之攪拌溶液中添加DIPEA（10.4 mL，62.06 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（30 mL）稀釋，且用水（2 × 30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((戊氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 201.39 [M+H]+
((戊氧基)羰基)-L -白胺酸（4）
在室溫下向((戊氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 3 ） （2.5 g，mmol）於THF（30 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（717 mg，29.90 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((2-甲基-1-苯基丙-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 330.50 [M+Na]+
2-甲基-2-((S )-4-甲基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向((戊氧基)羰基)-L-白胺酸（4 ）（400 mg，1.632 mmol）、DMF（5 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（467 mg，2.44 mmol）、HOBt（330 mg，2.44 mmol）、DIPEA（0.87 mL，4.89 mmol）及2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2A ）（391 mg，1.95 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-甲基-2-((S)-4-甲基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 524.7 [M+H]+
((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸戊酯（6）
在0℃下向2-甲基-2-((S)-4-甲基-2-(((戊氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （400 mg，0.93 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.9 mL，1.86 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸戊酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 400.20 [M+H]+
((2S )-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物C65）
將((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸戊酯（6 ）（200 mg，0.50 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（630 mg，1.48 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸戊酯（化合物 C65 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM Rf：0.4LCMS (ESI)：m/z 398.2 (M+H)+
實例76：化合物C77及C91之合成
Figure 02_image321
Figure 02_image323
4-丙基環己-1-醇（2）
在0℃下向4-丙基環己-1-酮（1 ）（500 mg，3.57 mmol）於甲醇（10 mL）中之攪拌溶液中添加硼氫化鈉（337 mg，8.92 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到4-丙基環己-1-醇（2 ）。TLC 系統： 30 %乙酸乙酯/石油醚Rf 0.2LCMS (ESI)：m/z 124.87 [M-OH]+
(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）
在0℃下向4-丙基環己-1-醇（ 2 ） （200 mg，1.418 mmol）、L-白胺酸甲酯（3）（308 mg，2.1 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（0.2 mL，1體積），隨後添加三光氣（209 mg，0.7 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用DCM（2 × 20 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4 ）。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 314.51 [M+H]+
(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
在室溫下向(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（4）（500 mg，1.597 mmol）於THF（3 mL）、水（1 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（115 mg，4.8 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸（5 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 300.4 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(((4-丙基環己基)氧基)羰基)-L-白胺酸（5 ）（700 mg，2.34 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（670 mg，3.51 mmol）、HOBT（473 mg，3.51 mmol）、DIPEA（1.2 mL，7.02 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（974 mg，1.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用60%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 575.91 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（6 ）（350 mg，0.63 mmol）於DCM（3 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.63 mL，1.27 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（7 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 551.4 (M+H)+
((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸4-丙基環己酯（化合物C77）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-4-甲基-2-((((4-丙基環己基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)丙酸甲酯（7 ）（290 mg，0.52 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（670 mg，1.58 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸4-丙基環己酯（化合物 C77 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 549.3 (M+H)+
((2R)-1-((3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-1-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸4-丙基環己酯（化合物C91）
將((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸4-丙基環己酯（化合物 C77 ） （450 mg，0.821 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（2 mL）中，在0℃下添加DIPEA（0.34 mL，2.46 mmol）及亞磷酸二乙酯（0.42 mL，2.46 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，用DCM（3 × 20 mL）萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且藉由製備型HPLC純化，得到純(3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-1-羥基丙基)膦酸二乙酯（化合物 C91 ） 。TLC 系統： 100% EtOAc/石油醚Rf ： 0.25LCMS (ESI)：m/z 687.3 (M+H)+
實例77：化合物C83之合成
Figure 02_image325
(E )-2-( 亞苯甲基胺基 ) 丙酸甲酯（ 3 ）
在0℃下向丙胺酸甲酯鹽酸鹽（ 1 ） （15 g，108.30 mmol）、苯甲醛（11.4 g，108.30 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中添加三乙胺（18.2 mL，129.96 mmol），隨後添加硫酸鎂（9.1 g，75.81 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用DCM（50 mL）洗滌。將過濾物用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗(E )-2-(亞苯甲基胺基)丙酸甲酯（ 3 ） ，將其用於下一步驟中。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 192.38 [M+H]+
2-胺基-2-甲基戊二酸二甲酯（5）
在0℃下向粗(E )-2-(亞苯甲基胺基)丙酸甲酯（ 3 ） （15 g，78.53 mmol）於乙腈（100 mL）中之攪拌溶液中同時添加碳酸鉀（32.5 g，235.60 mmol）、苯甲基三乙基氯化銨（3.5 g，15.70 mmol），隨後添加丙烯酸甲酯（10 g，117.80 mmol），且攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 50 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 60 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在80%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-胺基-2-甲基戊二酸二甲酯（ 5 ） 。TLC系統：80%乙酸乙酯Rf：0.2
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基戊二酸二甲酯（5）
在0℃下向2-胺基-2-甲基戊二酸二甲酯（ 5 ） （7.5 g，39.68 mmol）於甲醇（75 mL）、THF（75 mL）中之攪拌溶液中添加NaHCO3 （6.6 g，78.57 mmol），隨後添加boc酸酐（12.9 mL，59.52 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基戊二酸二甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 312.27 [M+Na]+
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(氰基甲基)-2-甲基戊二酸二甲酯（6）
在-78℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基戊二酸二甲酯（ 5 ） （7.5 g，25.95 mmol）於THF（70 mL）中之攪拌溶液中添加含1M LiHMDS之THF（57 mL，29.95 mmol），且攪拌1小時，隨後逐滴添加溴乙腈（2.16 g，31.14 mmol），且在相同溫度下再繼續攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用甲醇（10 mL）及乙酸（5 mL）淬滅，且在室溫下攪拌1小時，隨後用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(氰基甲基)-2-甲基戊二酸二甲酯（8 ），將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.5
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
將COC12 ·6H2 O（10.3 g，45.73 mmol）及2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(氰基甲基)-2-甲基戊二酸二甲酯（8 ）（7.3 g，22.25 mmol）於MeOH（70 mL）中之溶液劇烈攪拌，且冷卻至0℃，隨後在30分鐘內逐份添加NaBH4 （3.3 g，86.84 mmol）。將反應物在室溫下攪拌24小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物濃縮以移除甲醇，且用1N HCl（50 mL）淬滅，隨後將所形成之固體經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌。將兩個層分離，且經硫酸鈉乾燥，過濾，且濃縮，得到粗產物，將此殘餘物藉由管柱層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9 ）。TLC 系統 ： 10% MeOH/DCMRf : 0.5LCMS (ESI): m/z 301.10 [M+H]+
2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段-2A）
在0℃下將4M HCl於二
Figure 02_image011
烷（5 mL）中之溶液添加至2-((三級丁氧基羰基)胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9 ）（0.5 g，1.66 mmol）於1, 4二
Figure 02_image011
烷（5 mL）中之溶液中。將混合物攪拌2小時，且隨後濃縮，得到粗2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯.HCl鹽（胺片段 -2A ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 201.39 [M+H]+
2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（11）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（10 ）（600 mg，1.910 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（547 mg，2.82 mmol）、HOBt（386 mg，2.85 mmol）、DIPEA（1 mL，5.73 mmol）及2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2A ）（458 mg，2.29 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 11 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 524.7 [M+H]+
((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（12）
在0℃下向2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 11 ） （550 mg，1.049 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，2.09 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 12 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 496.7 [M+H]+
((2S )-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C83（
將((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（12 ）（160 mg，0.32 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（411 mg，0.96 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C83 ） 。TLC系統：5% MeOH/DCM Rf：0.4LCMS (ESI)：m/z 494.2 (M+H)+
實例78：化合物C101及C92之合成
Figure 02_image328
2-(3- 氯苯基 )-2- 甲基丙酸甲酯（ 2 ）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙酸甲酯（ 1 ） （10 g，54.17 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加60% NaH（6.5 g，162.51 mmol），且攪拌15分鐘，隨後在相同溫度下添加MeI（13.5 mL，216.68 mmol），且使其至室溫維持16小時。反應之進展藉由TLC監測，將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 100 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 213.31 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（3）
在-50℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酸甲酯（6 g，28.30 mmol）於THF（80 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加含2.4 M LAH之THF（11.7 mL，28.30 mmol），且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用EtOAc（2 × 50 mL）萃取，將有機層合併，且用鹽水溶液（60 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯LCMS (ESI)：m/z = 167.4 [M-OH]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（5）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） （2.8 g，15.16 mmol）、L -白胺酸甲酯（ 4 ） （2.64 g，18.19 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（3 mL，1體積），隨後添加三光氣（2.24 g，7.58 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 356.31 [M+H]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6）
在室溫下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） （2.3 g，6.47 mmol）於THF（10 mL）及水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（800 mg，19.43 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，且用二乙醚（20 mL）稀釋及洗滌，將水層用1N HCl水溶液酸化直至pH為約4，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（6 ）。TLC系統：10% MeOH/DCM    Rf ：0.1LCMS (ESI)：m/z 342.34 [M+H]+
(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（6）（10 g，29.32 mmol）於DMF（100 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（8.401 g，43.98 mmol）、HOBt（5.76 g，43.98 mmol）、DIPEA（15.2 mL，87.9 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（6.545 g，35.19 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 510.55 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C101）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （2 × 7 g，13.75 mmol）於DCM（70 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（20 mL，41.25 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到cpd-8 （10 g，20.75 mmol，產率75.58%）之混合物。將混合物藉由SFC純化，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C101 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C96）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙-2-基酯（8 ）（1 g，2.079 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（2.644 g，6.237 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由正相矽膠純化來純化，10% MeOH/DCM產物經溶離為((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C96 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM Rf：0.4LCMS (ESI)：m/z 480.2 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-1-(二乙氧基膦醯基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C92）
在0℃下向((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C96 ） 於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加磷酸二乙酯（138 mg，1.002 mmol）、DIPEA（0.18 mL，1.002 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用10%甲醇/DCM（3 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-(((2S)-1-(二乙氧基膦醯基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C92 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 618.2 [M+H]+
實例79：化合物C102之合成
Figure 02_image330
3-硝基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（2）
在室溫下向3-碘氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（ 1 ） （20 g，70.671 mmol）於DMSO (100 mL）中之攪拌溶液中添加間苯三酚（10.225 g，148.409 mmol），隨後添加亞硝酸鈉（9.79 g，77.738 mmol），且在45℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用水（250 mL）淬滅，且用二乙醚（3 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 50 ml）、鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到3-硝基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（2 ）。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.45
3-硝基氮雜環丁烷鹽酸鹽（3）
在0℃下向3-硝基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（2 ）（3.5 g，17.326 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（5 mL）中之攪拌溶液中添加含4M HCl之1,4-二
Figure 02_image011
烷（5 mL），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。4小時後，將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用二乙醚（2 × 10 mL）研磨，得到3-硝基氮雜環丁烷鹽酸鹽（3 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 102.80 [M+H]+
1-(3-硝基氮雜環丁烷-1-基)乙-1-酮（4）
將3-硝基氮雜環丁烷鹽酸鹽（3 ）（3.3 g，23.913 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，在0℃下同時添加乙酸酐（2.2 mL，23.913 mmol）及三乙胺（2.7 mL，35.869 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用DCM（2 × 20 mL）萃取，將有機層用水（2 × 10 ml）、鹽水溶液（10 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到1-(3-硝基氮雜環丁烷-1-基)乙-1-酮。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 144.78 [M+H]+
2-((1-乙醯基-3-硝基氮雜環丁烷-3-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（5）
在0℃下向1-(3-硝基氮雜環丁烷-1-基)乙-1-酮（4 ）（1.5 g，10.416 mmol）於ACN（15 mL）中之攪拌溶液中添加(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯Int-5、2-((1-乙醯基-3-硝基氮雜環丁烷-3-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（5 ）（3.3 g，11.458 mmol）及DBU（1.9 mL，12.499 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（5 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.35LCMS (ESI)：m/z 454.36 (M+Na+H)+
3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（6）
在-10℃下向2-((1-乙醯基-3-硝基氮雜環丁烷-3-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（5 ）（5.2 g，12.06 mmol）於甲醇（100 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（1.7 g，13.27 mmol），隨後添加硼氫化鈉（2.29 g，60.3 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用DCM（3 × 150 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 50 ml）、鹽水溶液（30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（6 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 370.2 (M+H)+
3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-胺基丙酸甲酯（7）
在0℃下向3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（6 ）（2 g，5.42 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液中添加1,4-二
Figure 02_image011
烷.HCl（12 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-胺基丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 270.21 (M+H)+
3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(((3-氯苯甲基)氧基)羰基)-L-白胺酸（1 g，3.34 mmol）於DMF（12 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.7 g，3.67 mmol）、HOBT（0.49 g，3.67 mmol）、DIPEA（1.8 mL，10.02 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（8 ）（1 g，3.64 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（60 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（8 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 551.41 (M+H)+
((2S)-1-((1-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（9）
在0℃下向3-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)丙酸甲酯（9）（600 mg，0.94 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.9 mL，1.89 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（9 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 523.57 (M+H)+
((2S)-1-((1-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C102）
在0℃下向((2S)-1-((1-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（9 ）（100 mg，0.19 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（478 mg，0.76 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((1-(2-乙醯基-6-側氧基-2,5-二氮雜螺[3.4]辛-7-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C102 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 521.2 (M+H)+
實例80：化合物C103及C111之合成
Figure 02_image332
(S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁酸甲酯（2）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ Int-3 ） （3.0 g，16 mmol）、(S )-2-胺基-3,3-二甲基丁酸甲酯（2.8 g，19.0 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（9 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.36 g，8.0 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用2N HCl（30 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 356.43 [M+H]+
(S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁酸（3）
在室溫下向(S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁酸甲酯（ 2 ） （4.1 g，11.54 mmol）於THF（20 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（2.7 g，115.54 mmol），且在室溫下攪拌24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁酸（ 3 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 342.41 [M+H]+
(S )-2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（4）
在0℃下向(S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3,3-二甲基丁酸（3 ）（2 g，5.86 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.6 g，8.79 mmol）、HOBt（1.1 g，8.79 mmol）、DIPEA（2.5 mL，17.52 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.3 g，7.03 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S )-2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3, 3-二甲基丁醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 510.57 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3, 3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（5）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3,3-二甲基丁醯胺基) -3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 4 ） （500 mg，0.98 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，1.96 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（5 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 482.58 [M+H]+
((S )-3,3-二甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C103）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3,3-二甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（5 ）（200 mg，0.41 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（528 mg，1.24 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（15 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3,3-二甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C103 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 480.20 (M+H)+
(2S)-2-((S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3,3-二甲基丁醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物C111）
在室溫下向((S )-3,3-二甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C103 ） （100 mg，0.20 mmol）於乙醇（2 mL）、EtOAc（1 mL）、水（1 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （43 mg，0.41 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，隨後用乙醇（5 mL）洗滌。將過濾物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚、EtOAc研磨3次，得到(2S )-2-((S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3,3-二甲基丁醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C111 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 560.1 [M-Na]-
實例81：化合物C104及C114之合成
Figure 02_image334
2-(3- 氯苯基 ) 乙醛（ 2 ）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙-1-醇（1 ）（20 g，128.20 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（16.3 g，384.61 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用DCM（80 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 150 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 150 mL）、隨後用鹽水（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮，得到粗產物；將粗產物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)乙醛（ 2 ） 。TLC 系統： 1 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 156.18 [M+1]+
2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（4）
在-30℃下向苯基溴化鎂（3 ）（155 mL，155.84 mmol）於四氫呋喃（120 mL）中之攪拌溶液中添加2-(3-氯苯基)乙醛（12 g，77.92 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（ 4 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 215.18 [M-OH]+
((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（4 ）（4 g，17.23 mmol）、L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（5 ）（3.7 g，25.85 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（12 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.5 g，8.61 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 426.43 [M+Na]+
((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（7）
在室溫下向((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 6 ） （2.2 g，5.45 mmol）於THF（30 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（671 mg，16.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 7 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 412.41 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 7 ） （1.7 g，4.36 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.55 mmol）、HOBt（0.88 g，6.55 mmol）、DIPEA（1.8 mL，13.10 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（0.97 g，5.24 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 558.57 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （800 mg，1.43 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.4 mL，2.87 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 530.60 [M+H]+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C104）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9 ）（250 mg，0.47 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（600 mg，1.41 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C104 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 528.2 (M+H)+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物C114）
在室溫下向((S )-3,3-二甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C104 ） （100 mg，0.18 mmol）於乙醇（0.5 mL）、EtOAc（1 mL）、水（0.5 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （39 mg，0.37 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，隨後用乙醇（5 mL）洗滌。將過濾物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚、EtOAc研磨3次，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C114 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 608.2 [M-Na]-
實例82：化合物C107之合成
Figure 02_image336
2-((S )-2-((((4, 4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(((4,4-二氟環己基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（1 ）（600 mg，1.95 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（559 mg，2.92 mmol）、HOBt（395 mg，2.92 mmol）、DIPEA（1 mL，5.86 mmol）及2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2A ）（469 mg，2.29 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S )-2-((((4, 4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 490.40 [M+H]+
((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（3）
在0℃下向2-((S )-2-((((4, 4-二氟環己基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （750 mg，1.53 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.5 mL，3.06 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4, 4-二氟環己基)甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 462.49 [M+H]+
((2S )-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4, 4-二氟環己基)甲酯（化合物C107）
將((2S )-1-((1-羥基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4,4-二氟環己基)甲酯（3 ）（500 mg，1.08 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（15 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.3 g，3.25 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-4-甲基-1-((2-甲基-1-側氧基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4, 4-二氟環己基)甲酯（化合物 C107 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM Rf：0.6LCMS (ESI)：m/z 460.2 (M+H)+
實例83：化合物C108之合成
Figure 02_image338
2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（2）
在-78℃下向DMSO（7.6 mL，108.69 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中添加乙二醯氯（7 mL，81.52 mmol），且攪拌30分鐘，隨後在-78℃下添加含2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（10 g，54.34 mmol）之DCM，且繼續2小時，在此之後在相同溫度下添加TEA（45.6 mL，326.08 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM（100 mL）稀釋，且用冰冷的水（3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ 2 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 2 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 148.07 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙-1-醇（4）
在-30℃下向苯基溴化鎂（3 ）（85 mL，82.87 mmol）於四氫呋喃（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（10 g，55.24 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙-1-醇（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 243.01 [M- OH]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（4）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙-1-醇（ 4 ） （3.6 g，13.84 mmol）、(S )-2-胺基-3,3-二甲基丁酸甲酯HCl（2.4 g，16.61 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（10.8 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.0 g，6.75 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用2N HCl（50 mL）淬滅，用DCM（2 × 40 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 454.48 [M+Na]+
((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（7）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 6 ） （3.0 g，6.60 mmol）於THF（20 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.81 g，19.82 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 7 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 440.47 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 7 ） （2.2 g，5.27 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.5 g，7.85 mmol）、HOBt（1.0 g，7.40 mmol）、DIPEA（2.8 mL，16.18 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.2 g，6.33 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 586.62 [M+H]+
((S )-1-(((S)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（9）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （1.5 g，2.56 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.5 mL，5.12 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（9 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 580.96 [M+Na]+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C108）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（9 ）（250 mg，0.44 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（570 mg，1.34 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C108 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 545.45 (M+H)+
實例84：化合物C109及C115之合成
Figure 02_image340
Figure 02_image342
2-(3-氯苯基)乙醛（2）
在0℃下向2-(3-氯苯基)乙-1-醇（1 ）（20 g，128.20 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（16.3 g，38.46 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用DCM（80 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 160 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 120 mL）洗滌，且將有機層用鹽水（100 mL）洗滌，有機層經硫酸鈉乾燥，濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)乙醛（ 2 ） 。TLC 系統： 1 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 155.15 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（4）
Figure 02_image344
在-30℃下向苯基溴化鎂（3 ）（155 mL，155.84 mmol）於四氫呋喃（120 mL）中之攪拌溶液中添加2-(3-氯苯基)乙醛（12 g，77.92 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（ 4 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 215.18 [M-OH]-
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（6）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（4 ）（3.5 g，15.08 mmol）、(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（5 ）（3.6 g，19.60 mmol）於DCM（35 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（10.5 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.2 g，7.54 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl（50 mL）淬滅，用DCM（2 × 60 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 466.49 [M+Na]+
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（7）
在室溫下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 6 ） （3.3 g，7.44 mmol）於THF（40 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（915 mg，22.33 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 7 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 452.44 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（8）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 7 ） （3 g，6.99 mmol）、DMF（30 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2 g，10.48 mmol）、HOBt（1.4 g，10.48 mmol）、DIPEA（3 mL，20.97 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.5 g，8.38 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離為(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 598.30 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 8 ） （1 g，1.67 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.6 mL，3.34 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 570.66 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C109）
將((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（9 ）（700 mg，1.22 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（12 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.5 mg，3.68 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（600 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）稀釋。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C109 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 568.2 (M+H)+
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物C115）
在室溫下向((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C109 ） （100 mg，0.17 mmol）於乙醇（0.5 mL）、EtOAc（1 mL）、水（0.5 mL）中之攪拌溶液中添加NaHSO3 （36 mg，0.35 mmol），且加熱至50℃維持16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物冷卻至室溫，且經由矽藻土墊過濾，隨後用乙醇（5 mL）洗滌。將過濾物在減壓下蒸發，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚、EtOAc研磨3次，得到(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-1-磺酸鈉（化合物 C115 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 648.2 [M-Na]-
實例85：化合物C110及C113之合成
Figure 02_image346
Figure 02_image348
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（3）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙-1-醇（ 1 ） （3.0 g，11.53 mmol）、(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（2.5 g，13.84 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（9 mL，3體積），隨後添加三光氣（1.7 g，5.76 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用2N HCl（50 mL）淬滅，用DCM（2 × 40 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 1 0%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 494.15 [M+Na]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（4）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （3.0 g，6.36 mmol）於THF（20 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.78 g，19.10 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 456.17 [M-H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） （2.8 g，6.12 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.75 g，9.19 mmol）、HOBt（1.24 g，9.19 mmol）、DIPEA（3.2 mL，18.38 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.36 g，7.35 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 626.64 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （2.0 g，3.20 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（6.4 mL，6.4 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基) -1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 598.67 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C110）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基) -1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（6）（1 g，1.67 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（20 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（2.12 g，5.01 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（30 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C110 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 596.3 (M+H)+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（7）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （500 mg，0.80 mmol）於THF（6 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（100 mg，2.4 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 7 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 610.37 [M-H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（9）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（7 ）（600 mg，0.98 mmol）、DCM（15 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（746 mg，1.96 mmol）、DIPEA（5.4 mL，2.94 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（8 ）（242 mg，1.17 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 9 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 721.69 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C113）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基) -3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 9 ） （350 mg，0.47 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（162 mg，0.94 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C113 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 521.2 [M+H]+
實例86：化合物C105之合成
Figure 02_image350
Figure 02_image352
2-(3- 氯苯基 )-1-(3- 氟苯基 )-2- 甲基丙 -1- 醇（ 2 ）
在-30℃下向(3-氟苯基)溴化鎂（1 ）（32 mL，65.934 mmol）之攪拌溶液中添加含2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ Int-4 ） （4 g，21.978 mmol）之二乙醚（50 mL），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 261.27 [M-OH]-
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
向2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） （4.0 g，14.388 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（4.0 mL，1體積）及(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （3.2 g，17.266），隨後在0℃下在15分鐘內逐份添加三光氣（2.12 g，7.194 mmol），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 512.19 [M+Na]+
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在室溫下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （3.5 g，7.157 mmol）於THF（25 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（515 mg，21.472 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 498.3 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （2 g，4.2105 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.315 mmol）、HOBt（852 mg，6.315 mmol）、DIPEA（2.3 mL，12.631 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ） （940 mg，5.052 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在30%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 8 0%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 645.11 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（7）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （1.8 g，2.7993 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（3.5 mL，6.998 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 616,73 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C105）
將((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） （200 mg，0.324 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（275 mg，0.649 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C105 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 614.3 (M+H)+
實例87：化合物C106之合成
Figure 02_image354
1,2- 雙 (3- 氯苯基 )-2- 甲基丙 -1- 醇（ 2 ）
在-30℃下向(3-氯苯基)溴化鎂於四氫呋喃（1 ）（41 mL，27.472 mmol）中之攪拌溶液中添加含2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（5 g，27.472 mmol）之二乙醚（50 mL），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 277.16 [M-OH]-
(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
向1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） （4.2 g，14.285 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（4.2 mL，1體積）及(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （3.17 g，17.1428），隨後在0℃下在15分鐘內逐份添加三光氣（2.11 g，7.1428 mmol），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 528.24 [M+Na]+
(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在室溫下向(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （3.2 g，6.336 mmol）於THF（20 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（456 mg，19.009 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 514.22 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （1.5 g，3.054 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（875 mg，4.582 mmol）、HOBt（618 mg，4.582 mmol）、DIPEA（1.7 mL，9.164 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（681 mg，3.665 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在30%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 8 0%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 683.78 [M+Na]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（7）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （1 g，1.517 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.5 mL，3.034 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 632.64 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C106）
將((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） （200 mg，0.316 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（268 mg，0.633 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C106 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 630.2 (M+H)+
實例88：化合物C112之合成
Figure 02_image356
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（2）
在室溫下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） （900 mg，1.51 mmol）於THF（7 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（109 mg，4.55 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 580.19 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（5）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 2 ） （570 mg，0.984 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（514 mg，1.476 mmol）、DIPEA（0.51 mL，2.215 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-鎓（3 ）（304 mg，1.476 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用EtOAc（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 689.61 [M+H]+
N-((2R)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C112）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） （200 mg，0.290 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（124 mg，0.726 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2R)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C112 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 607.3 [M+H]+
實例89：化合物C116之合成
Figure 02_image358
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1 g，1.67 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（206 mg，5.02 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 584.37 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（500 mg，0.85 mmol）、DCM（5 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（488 mg，1.28 mmol）、DIPEA（0.4 mL，9.12 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（3 ）（265 mg，1.28 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 693.3 (M+H)+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C116）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （180 mg，0.26 mmol）於甲醇（2 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（89 mg，0.52 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C116 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 611.3 [M+H]+
實例90：化合物C118之合成
Figure 02_image360
2-(2,3-二甲基丁-2-基)丙二酸二乙酯（3）
將2-(丙-2-亞基)丙二酸二乙酯（ 1 ） （5 g，25.00 mmol）於THF（100 mL）中之溶液冷卻至0℃，隨後為碘化銅(I)（7.1 g，37.00 mmol）。將混合物在0℃下攪拌0.5小時。隨後在0℃下將含異丙基溴化鎂1.5M之THF（50 mL，75.00 mmol）逐滴添加至以上混合物中。將混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將混合物用1N HCl淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，且用水（2 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-(2,3-二甲基丁-2-基)丙二酸二乙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 245.39 [M+H]+
2-(乙氧基羰基)-3,3,4-三甲基戊酸（4）
（3 ）（6 g，24.59 mmol）於乙醇（150 mL）及THF（75 mL）之混合物中之攪拌溶液用NaOH（25 mL，24.59 mmol）之1N溶液處理，且將反應混合物在室溫下攪拌24小時，在此之後，將混合物蒸發成糊漿，且溶解於水（200 mL）中，且用乙醚（2 × 100 mL）萃取。將水層用1N HCl酸化至pH 2.0，且用EtOAc（2 × 100 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液（200 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-(乙氧基羰基)-3,3,4-三甲基戊酸（ 4 ） 。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 217.08 [M+H]+
2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊酸乙酯（5）
向（4 ） （2 g，9.259 mmol）於乾燥苯中之攪拌溶液中添加三乙胺（2.62 mL，18.518 mmol）及二苯基磷醯基疊氮化物（2.98 mL，13.888 mmol）。將反應混合物在回流下加熱2小時。在冷卻至室溫之後，添加苯甲醇（1.5 mL，13.88 mmol），且將反應物在回流下再次加熱16小時。蒸發溶劑之後，將粗材料用5%檸檬酸溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL萃取）。將經合併之有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，將粗產物藉由急驟層析純化，得到2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊酸乙酯（5 ）。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 322.44 [M+H]+
2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4-三甲基戊酸（6）
在室溫下向2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊酸甲酯乙酯（5 ）（2 g，6.230 mmol）於MeOH/THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（785 mg，18.691 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4-三甲基戊酸（ 6 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 294.37 [M+H]+
(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4-三甲基戊酸（6 ）（1.5 g，5.119 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.46 g，7.679 mmol）、HOBt（1.03 g，7.67 mmol）及DIPEA（2.67 mL，15.358 mmol），隨後在0℃下添加2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2A ）（1.25 g，5.6313 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗產物藉由純化急驟層析，得到(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 462.53 [M+H]+
(1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3,3,4-三甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸苯甲酯（8）
在0℃下向(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3,3,4三甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （500 mg，1.084 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.08 mL，2.16 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3,3,4-三甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸苯甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 434.20 [M+H]+
(3,3,4-三甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸苯甲酯（化合物C118）
在0℃下向(1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3,3,4-三甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸酯（ 8 ） （200 mg，0.461 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（293 mg，0.692 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。藉由完成消耗起始材料後，反應物質經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用乙酸乙酯（30 mL）洗滌。隨後將有機層用10%硫代硫酸鈉溶液（2 × 50 mL）洗滌，隨後用飽和碳酸氫鈉溶液（2 × 50 mL）、水（1 × 50 mL）、鹽水（1 × 50 mL）洗滌。隨後將有機層經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發。隨後將粗化合物藉由製備型HPLC純化來純化，得到(3,3,4-三甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸苯甲酯（化合物 C118 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM    Rf：0.45LCMS (ESI)：m/z 432.2 (M+H)+
實例91：化合物C119之合成
Figure 02_image362
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段 -5 ）（1 g，2.564 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（842 mg，4.424 mmol）、HOBT（590 g，4.424 mmol）、DIPEA（1.9 mL，10 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7A ）（940 mg，3.244 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5% MeOH/DCM溶離，得到2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 551.61 (M+H)+
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（2）
在室溫下向2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.3 g，2.36 mmol）於THF（7 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（170 mg，7.09 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 537.64 [M+H]+
((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（4）
在0℃下向2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） （870 mg，1.623 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（923 mg，2.434 mmol）、DIPEA（0.84 mL，4.869 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-鎓（3 ）（525 mg，2.434 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用EtOAc（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 646.35 [M+H]+
N-((2S)-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C119）
在0℃下向N-((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） （150 mg，0.232 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（100 mg，0.580 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用MeOH/DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C119 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 564.2 [M+H]+
實例92：化合物C120之合成
Figure 02_image364
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.1 g，1.71 mmol）於THF（10 mL）、水（4 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（214 mg，5.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基) -3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 630.59 [M+H]+
((S )-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （900 mg，1.43 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1 g，2.86 mmol）、DIPEA（8 mL，4.29 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（219 mg，1.71 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 739.67 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C120）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） （180 mg，0.243 mmol）於甲醇（2 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（83 mg，0.487 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C120 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 657.1 [M+H]+
實例93：化合物C128及C122之合成
Figure 02_image366
Figure 02_image368
2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙-1-醇（2）
在室溫下向鎂旋屑（2.3 g，96.61 mmol）及碘（2個球）於四氫呋喃（40 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加2-溴萘（3 ）（8 g，38.647 mmol）及1,2二溴乙烷，且在40℃下攪拌5分鐘，反應物變成無色，並且將反應物質攪拌3小時。將另一RBF (2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛)（Int-4 ）（4 g，21.97 mmol）/THF（40 mL）冷卻至-78℃，在-78℃下緩慢添加上述製備之格林納溶液（Grignard solution），攪拌1小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 1 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
在0℃下向層析2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙-1-醇（ 2 ） （3.5 g，11.290 mmol）、(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲基、酯鹽酸鹽（ 3 ） （2.5 g，13.548 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（3.5 mL，1體積），隨後添加三光氣（1.67 g，5.64 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，且用（2 × 50 mL）飽和NaHCO3 溶液洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在15%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 544.52 [M+Na]+
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （2.8 g，5.374 mmol）於THF（38 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（661 mg，16.37 mmol），且在室溫下攪拌5小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 530.33 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （1.9 g，3.74 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.07 g，5.621 mmol）、HOBt（758 mg，5.621 mmol）、DIPEA（2 mL，11.242 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（0.836 g，4.497 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 676.33 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（7）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （400 mg，0.592 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.6 mL，1.18 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙基((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基) -1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸酯（ 7 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 648.73 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物C128）
將2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙基((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸酯（ 7 ） （300 mg，0.46 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（589 mg，1.39 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，用乙酸乙酯（20 mL）洗滌，將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物 C128 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 646.2(M+H)+
(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （2 g，2.962 mmol）於THF（15 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.364 g，8.88 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 8 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 684.49 [M+Na]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（10）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 8 ） （2 × 300 mg，0.453 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（258 mg，0.680 mmol）、DIPEA（0.4 mL，2.178 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（9 ）（140 mg，0.680 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（25 mL）稀釋，用5%甲醇/二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 771.71 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物C122）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（ 10 ） （500 mg，0.649 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（279 mg，1.623 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2.5 mL），且在室溫下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物 C122 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCM及100%乙酸乙酯Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 689.2 [M+H]+
實例94：化合物C123之合成
Figure 02_image370
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(2-甲基-2-硝基丙基)戊二酸二甲酯（2）
向2-硝基丙烷（1）（2 g，22.47 mmol）於ACN（60 mL）、(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（Int-5 ）（7.4 g，24.71 mmol）中之攪拌溶液中添加DBU（6 mL，44.94 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，得到粗產物：將此粗產物用水稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在30%乙酸乙酯/己烷下溶離，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(2-甲基-2-硝基丙基)戊二酸二甲酯（2 ）。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 377.14 [M+H]+
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（3）
向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-(2-甲基-2-硝基丙基) 戊二酸二甲酯（2 ）（3 g，7.97 mmol）於MeOH（30mL）中之攪拌溶液中添加NiCl2 （1 g，7.97 mmol），且在-10℃下攪拌10分鐘，隨後在2小時內在相同溫度下添加NaBH4 （1.5 g，39.89 mmol）。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（100 mL）淬滅，經由矽藻土墊過濾，且將過濾物用DCM（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（3 ）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 337.12 [M+Na]+
2-胺基-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（4）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 3 ） （2.3 g，7.32 mmol）於1,4二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中添加逐滴含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（10 ml），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（4 ）。TLC 系統： 20%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 228.18 [M+H]+
2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段 -5 ） （1.5 g，4.77 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.3 g，7.150 mmol）、HOBt（965 mg，7.150 mmol）、DIPEA（2 mL，14.31 mmol）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（ 4 ） （1.4 g，5.721 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 511.64 [M+H]+
2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6）
在室溫下向2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （1 g，1.96 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（241 mg，5.88 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 6 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 497.75 [M+H]+
N -((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（8）
在0℃下向2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6 ）（500 mg，1.00 mmol）、DCM（5 mL之攪拌溶液中）同時添加HATU（574 mg，1.511 mmol）、DIPEA（0.6 mL，4.53 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 7 ） （311 mg，1.511 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N -((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 606.69 [M+H]+
N -((2S )-1-((4-胺基-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物C123）
在0℃下向N -((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） （200 mg，0.33 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（113 mg，0.66 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N -((2S )-1-((4-胺基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物 C123 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 524.2 (M+H)+
實例95：化合物C124及C136之合成
Figure 02_image374
Figure 02_image376
2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙-1-醇（2）
在-30℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ Int-4 ） （7 g，38.461 mmol）於THF（60 mL）中之攪拌溶液中添加3-甲基溴化鎂（115 mL，115.384 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（50 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙-1-醇（2 ）。TLC 系統： 10 %乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 258.81 [M-OH]
(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙-1-醇（2 ）（6 g，mmol）於DCM（60 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（6 mL）、L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（3.8 g，26.277 mmol），隨後添加三光氣（3.24 g，10.948 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（100 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用（2 × 50 mL）NaHCO3 溶液洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z = 508.53 [M+Na] +
((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（5）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （4.8 g，9.896 mmol）於THF（20 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（712 mg，29.690 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 470.18 [M-H]
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 5 ） （2 g，4.246 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.309 mmol）、HOBt（0.859 g，6.369 mmol）、DIPEA（2.3 mL，12.738 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.947 g，5.095 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 640.35 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（7）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （550 mg，0.86 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（61 mg，2.582 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基) -3- ((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 7 ） 。TLC系統：15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 626.31 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（9）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（7）（300 mg，0.480 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（273 mg，0.720 mmol）、DIPEA（0.26 mL，1.44 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（8 ）（92 mg，0.720 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（9 ）。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.4 LCMS (ESI)：m/z 735.41 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（化合物C124）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（ 9 ） （200 mg，0.272 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（93 mg，0.544 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（化合物 C124 ）。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 653.2 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（10）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （1 g，1.564 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.9 mL，3.912 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基) -1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 612.7 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（化合物C136）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（ 5A ） （300 mg，0.490 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（416 mg，0.981 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由用3%甲醇/二氯甲烷溶離之combi-flash層析純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（化合物 C136 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 610.2 (M+H)+
實例96：化合物C141及C126之合成
Figure 02_image378
Figure 02_image380
(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸甲酯（3）
在0℃下向5-氯-1H-吲哚-2-甲酸（ 1 ） （3 g，15.3 mmol）、DMF（30 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（4.3 g，22.95 mmol）、HOBt（3.0 g，22.95 mmol）、DIPEA（8.0 mL，45.9 mmol）及(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 2 ） （2.8 g，15.3 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在20%乙酸乙酯/己烷下溶離為(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 363.08 [M+H]+
(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸（4）
在室溫下向(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （3.5 g，9.6 mmol）於THF（40 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.2 g，28.9 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 349.22 [M+H]+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） （1.2 g，3.4 mmol）、DMF（120 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.98 g，5.16 mmol）、HOBt（0.69 g，5.16 mmol）、DIPEA（1.9 mL，10.32 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.02 g，3.4 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離為3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 628.6 [M+H]+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸（6）
在室溫下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） （1.2 g，1.9 mmol）於THF（40 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.24 g，5.7 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 614.34 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（8）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸（ 6 ） （0.5 g，0.81 mmol）、DCM（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（0.464 g，1.22 mmol）、DIPEA（0.45 mL，2.44 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（ 7 ） （0.26 g，1.22 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 723.5 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C126）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） （200 mg，0.27 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（71.3 mg，0.41 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2.0 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C126 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 641.1 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（6-A）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-2-(5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-3-環己基丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） （0.500 g，0.79 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.15 mL，1.59 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N -((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 6-A ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 600.51 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C141）
將N -((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 6-A ） （170 mg，0.28 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（240 mg，0.566 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-5-氯-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C141 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 598.1 (M+H)+
實例97：化合物C130之合成
Figure 02_image382
Figure 02_image384
(喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸甲酯（3）
在0℃下向喹
Figure 02_image011
啉-2-甲酸（ 1 ） （5.0 g，28.72 mmol）、DMF（30 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（8.22 g，43.0 mmol）、HOBt（5.81 g，43.00 mmol）、DIPEA（15.8 mL，86.16 mmol）及L-苯丙胺酸甲酯（ 2 ） （5.1 g，28.72 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離為(喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 336.58 [M+H]+
(喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸（4）
在室溫下向(喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸甲酯（ 3 ） （5.0 g，14.9 mmol）於THF（40 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.8 g，44.7 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸（ 4 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 322.2 [M+H]+
3-(8- 乙醯基 -2- 側氧基 -1,8- 二氮雜螺 \[4.5] 癸 -3- 基 )-2-((S)-3- 苯基 -2-( 喹
Figure 02_image387
啉 -2- 甲醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 丙酸甲酯（ 5 ） 在0℃下向((喹
Figure 02_image011
啉-2-羰基)-L-苯丙胺酸（4）（1.0 g，3.1 mmol）、DMF（100 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.92 g，4.66 mmol）、HOBt（0.63 g，4.66 mmol）、DIPEA（1.7 mL，9.33 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（ int-7 ） （0.92 g，3.1 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離為3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-苯基-2-(喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 601.39 [M+H]+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-苯基-2-(喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（6）
在室溫下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-苯基-2-(喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） （0.350 g，0.58 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.073 g，1.74 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-苯基-2-(喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 587.62[M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺（8）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-苯基-2-(喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 6 ） （0.2 g，0.34 mmol）、DCM（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（0.194 g，0.51 mmol）、DIPEA（0.2 mL，1.02 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（7 ）（0.110 g，1.22 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 696.6 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺（化合物C130）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺（ 8 ） （0.170 g，0.24 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（0.084 mg，0.48 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2.0 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)喹
Figure 02_image011
啉-2-甲醯胺（化合物 C130 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 641.1 [M+H]+
實例98：化合物C135及C137之合成
Figure 02_image390
2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2）
在-30℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ Int-4 ） （5 g，27.472 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中添加3-甲基溴化鎂（82 mL，82.417 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（50 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）。TLC 系統： 10 %乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 261.21 [M-OH]
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）（6.5 g，23.381 mmol）於DCM（65 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（6.5 mL）、L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（5.1 g，28.057 mmol），隨後添加三光氣（3.46 g，11.690 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（100 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用2 × 50 mL NaHCO3 溶液洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z = 512.18 [M+Na]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （5.5 g，11.247 mmol）於THF（40 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（809 mg，33.742 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 498.45 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((1-(3-(苯甲氧基)苯甲基)環丙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 5 ） （1 g，2.105 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（426 mg，3.157 mmol）、HOBT（603 mg，3.157 mmol）、DIPEA（1.16 mL，6.315 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.587 g，3.157 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基) -3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 644.51 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（7）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （800 mg，1.244 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（89 mg，3.732 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 7 ） 。TLC系統：15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 630.28 [M+H]+
((S )-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（9）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 7 ） （750 mg，1.192 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（679 mg，1.78 mmol）、DIPEA（0.6 mL，3.577 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（8 ）（228 mg，1.788 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 9 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.4 LCMS (ESI)：m/z 739.31 [M+Na]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C135）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（9 ）（200 mg，0.271 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（93 mg，0.542 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C135 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z 657.2 [M+H] +
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（10）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （1.5 g，2.439 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.4 mL，4.878 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 616.69 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C137）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(間甲苯基)丙酯（ 10 ） （300 mg，0.487 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（620 mg，1.463 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由用3%甲醇/二氯甲烷溶離之combi-flash層析純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C137 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 614.2 (M+H)+
實例99：化合物C117及C133之合成
Figure 02_image392
(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲酸（ 1 ） （3g 157 mmol）於DMF（30 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（4.4 g，23 mmol）、HOBT（3.10 g，23 mmol）、DIPEA（8.3 g，47 mmol）及(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （4.16g,18 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 40%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 359.5 [M+H]+
(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸甲酯（ 3 ） （5 g，13.9 mmol）於THF（30 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.75 g，41.8 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 345.3 [M+H]+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（ 4 ） （1 g，2.9 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（832 mg，4.3 mmol）、HOBT（588 mg，4.3 mmol）、DIPEA（1.54 mL，8.7 mmol）及3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.06 g，3.1 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 624.71 (M+H)+
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（6）
在室溫下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 5 ） （600 mg,0.93 mmol）於THF（4 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（121 mg，0.96 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 610.6 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（8)
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 6 ） （400 mg，6.5 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（374 mg，9.8 mmol）、DIPEA（0.35 mL，1.97 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（ 7 ） （202 mg，9.8 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（15 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離為N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.4 LCMS (ESI)：m/z 719.7 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1, 8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C117）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 8 ） （190 mg，0.26 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（113 mg，0.66 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1, 8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C117 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 637.3 [M+H]+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（5 ）（250 mg，0.4 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.6 mL，1.2 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 596.73 (M+H)+
N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C133）
在0℃下向N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）（6 ）（200 mg，0.35 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（445 mg，1.05 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((1-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C133 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 594.2 (M+H)+
實例100：化合物C121之合成
Figure 02_image394
(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7-峰-1）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（峰 -1 ）（1.1 g，2.77 mmol）於DCM（4 mL）中之攪拌溶液添加二
Figure 02_image011
烷HCl（4 mL），且在室溫下攪拌2小時。在2小時後藉由TLC及LCMS監測反應之進展，在減壓下蒸發反應混合物。將粗殘餘物藉由純化，用正戊烷研磨，得到(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（ Int-7 峰 -1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 298.08 [M+H]+
(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(R)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（胺片段 -6 ）（700 mg，3.92 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（630 mg，3.3 mmol）、HOBT（440 mg，3.3 mmol）、DIPEA（1.1 ml，4.5 mmol）及(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 峰 -1 ）（840 mg，1.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 594.6 [M+H]+
(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（3）
在室溫下向(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 2 ） （550 mg，0.927 mmol）於THF（5 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（66 mg，2.782 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用10% MeOH/DCM（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 580.45 [M+H]+
N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（5）
在0℃下向(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 3 ） （300 mg，0.518 mmol）於THF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（269 mg，0.777 mmol）、DIPEA（0.26 mL，1.165 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-鎓（4 ）（160 mg，0.777 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（25 mL）稀釋，用EtoAc（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 689.61 [M+H]+
N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C121）
在0℃下向N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） （200 mg，0.290 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（124 mg，0.726 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((S)-1-(((S)-1-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C121 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 607.2 [M+H]+
實例101：化合物C125之合成
Figure 02_image397
(R)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（2）（峰-1）及(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（2）（峰-2）
3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（1 ）（4 g，10.55 mmol）藉由SFC分離進行分離，得到(R)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（ 2 ）（峰 -1 ） 及(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（2）（峰-2）。
(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7峰-2）
在0℃下向3-(8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯（2 個峰 -2 ）（2 g，5.037 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加二
Figure 02_image011
烷HCl（5 mL），且在室溫下攪拌2小時。2小時後藉由TLC及LCMS監測反應之進展，在減壓下蒸發反應混合物。將粗殘餘物藉由純化，用正戊烷研磨，得到(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（ Int-7 峰 -2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 298.4 [M+H]+
(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（3）
在0℃下向(R)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（胺片段 -6 ） （480 mg，1.52 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（430 mg，2.2 mmol）、HOBT（309 mg，2.2 mmol）、DIPEA（0.814 ml，4.5 mmol）及(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 峰 -2 ）（509 mg，1.52 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 594.3 [M+H]+
(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1, 8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（4）
在室溫下向(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 3 ） （700 mg，1.1 mmol）於THF（4.5 mL）、水（2.5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（148 mg，3.5 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 580.3 [M+H]+
N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6）
在0℃下向(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（ 4 ） （560 mg，0.96 mmol）、THF（5 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（550 mg，1.44 mmol）、DIPEA（0.54 mL，2.8 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（ 5 ） （298 mg，1.44 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（15 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離為N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z 689.6 [M+H]+
N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C125）
在0℃下向N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-氰基-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 6 ） （200 mg，0.29 mmol）於甲醇（2 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（124 mg，0.72 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（15 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((S)-1-(((S)-1-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-胺基-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（9）（化合物 C125 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 607.3 [M+H]+
實例102：化合物C142之合成
Figure 02_image400
(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
將(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1 g，3.496 mmol）於甲醇（10 mL）中之溶液冷卻至0℃，隨後添加NaOH（500 mg於5 mL水中）溶液。將所得溶液在0℃下攪拌1小時，隨後在真空中移除過量甲醇。將殘餘物酸化至pH 3，且用二氯甲烷（2 × 50 ml）萃取，且將經合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2
((S )-4-重氮基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基甲酸三級丁酯（3）
將(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （3 g，11.0 29 mmol）於THF（30 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至-23℃。將所得無色澄清溶液依次用三乙胺（3 mL，22.059 mmol）、隨後用氯甲酸異丁酯（1.8 mL，13.235 mmol）處理。將反應混合物用重氮甲烷（約50 mL，約25 mmol）於二乙醚中之溶液緩慢處理。將所得黃色澄清溶液逐漸溫熱至室溫，且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。此後將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（100 mL）萃取，用水（50 mL）洗滌一次，用鹽水（50 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到a。藉由正相管柱層析純化此材料，得到((S )-4-重氮基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 319.19 [M+Na]+
(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（4）
將((1S)-3-重氮基-2-側氧基-1-{[(3S)-2-側氧基吡咯啶-3-基]甲基}丙基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （1.5 g，5.06 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（15 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。將此澄清淺黃色溶液用4M鹽酸於1,4-二
Figure 02_image011
烷（15 mL）中之溶液逐滴處理。完成添加後，在1小時內將反應物溫熱至室溫，形成白色沈澱物。在真空下蒸發過量1,4-二
Figure 02_image011
烷，且用二乙醚研磨固體，得到(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（ 4 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 205.13 [M+H]+
N -((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（5）
將(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（ 4 ） （500 mg，2.083 mmol）及4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲酸（660 mg，2.083 mmol）於DMF（10 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。將此淺黃色溶液依次用HATU（1.18 g，3.124 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.45 mL，4.166 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到黃色糊漿。藉由正相層析純化此材料，得到N -((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM      Rf：0.6LCMS (ESI)：m/z 491.52 [M+H]+
N -((S )-1-(((S )-4-羥基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物C142）
將N -((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） （200 mg，0.428 mmol）及苯甲醯基甲酸（80 mg，0.53 mmol）於DMF（4 mL）中之溶液置於N2 氛圍下。將此澄清淺黃色溶液用氟化銫（155 mg，1.02 mmol）處理，隨後加熱至65℃。4小時後，將現在為黃色的懸浮液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（60 mL）稀釋，用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈粗黃色泡沫狀之粗側氧基(苯基)乙酸(3S )-3-({N -[(4-甲氧基-1H -吲哚-2-基)羰基]-L-白胺醯基}胺基)-2-側氧基-4-[(3S )-2-側氧基吡咯啶-3-基]丁酯。C32H36N4O8之MS (ESI+)m/z 605.2 (M+H)+ 。將此粗產物放入甲醇（20 mL）中，置於N2 氛圍下，且在攪拌下用碳酸鉀（7 mg，0.04 mmol）處理。1小時後，在真空中移除揮發物（浴＜ 30℃），得到粗產物。藉由正相層析純化此材料，得到N -((S )-1-(((S )-4-羥基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物 C142 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 473.2 [M+H]+
實例103：化合物C128之合成
Figure 02_image404
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 ）（1 g，2.949 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（842 mg，4.41 mmol）、HOBT（595 mg，4.41 mmol）、DIPEA（1.52 mL，8.823 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7A ）（890 mg，3.529 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%乙基甲醇/DCM溶離，得到2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 577.63 (M+H)+
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（2）
在室溫下向2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲基甲酯（ 1 ） （600 mg，1.043 mmol）於THF（7 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（100 mg，4.173 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S)-2-((((3- 氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 562.63 [M+H]+
((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（4）
在0℃下向2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） （450 mg，0.802 mmol）於DCM（8 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（259 mg，1.203 mmol）、DIPEA（0.41 mL，2.406 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-鎓（3 ）（259 mg，1.203 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用EtoAc（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 671.32 [M+H]+
((2S)-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C128）
在0℃下向((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） （200 mg，0.298 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（128 mg，0.745 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C128 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 589.2 [M+H]+
實例104：化合物C129之合成
Figure 02_image406
(E )-2-(2- 甲基伸丙基 ) 肼 -1- 甲酸苯甲酯（ 3 ）
向苯甲肼甲酸酯（1 ）（5 g，30.12 mmol）於甲苯（50 mL）中之攪拌溶液中添加異丁醛（2.7 mL，30.12 mmol），在60℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。在減壓下直接濃縮反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(E )-2-(2-甲基伸丙基)肼-1-甲酸苯甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 221.29 [M+H]+
2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（4）
在0℃下向(E )-2-(2-甲基伸丙基)肼-1-甲酸苯甲酯（ 3 ） （3 g，13.574 mmol）於甲醇（20 mL）中之攪拌溶液中添加乙酸（0.5 mL），隨後添加氰基硼氫化鈉（1.7 g，27.149 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰冷的水淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash層析純化，且化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 223.26 [M+H]+
2-異丁基-2-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)肼-1-甲酸苯甲酯（5）
在0℃下向2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（ 4 ） （1 g，4.504 mmol）、氯仿（15 mL）之攪拌溶液中添加吡啶（1 mL，1體積），且向(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1 g，5.405 mmol）中同時添加三光氣（666 mg，2.252 mmol），且在60℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash層析純化，且化合物在8%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-異丁基-2-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)肼-1-甲酸苯甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 435.39 [M+H]+
2-(((S )-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)-2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（6）
在0℃下向2-異丁基-2-(((S )-1-甲氧基-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)肼-1-甲酸苯甲酯（ 5 ） （1 g，2.304 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.3 mL，4.608 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)-2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 407.69 [M+H]+
(5S )-6-羥基-2-異丁基-3-側氧基-5-(((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)甲基)-1, 2, 4-三
Figure 02_image009
烷-1-甲酸苯甲酯（化合物C129）
將2-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺甲醯基)-2-異丁肼-1-甲酸苯甲酯（ 6 ） （150 mg，0.369 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（469 mg，1.107 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到(5S )-6-羥基-2-異丁基-3-側氧基-5-(((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)甲基)-1, 2, 4-三
Figure 02_image009
烷-1-甲酸苯甲酯（化合物 C129 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 405.1 (M+H)+
實例105：化合物C132及C131之合成
Figure 02_image410
Figure 02_image412
2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙-1-醇（2）
在0℃下向5-溴-2,3-二氫-1H -茚-1-酮（10 g，47.846 mmol）於三氟乙酸（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加三乙基矽烷（76 mL，478.6 mmol），隨後將所得反應混合物在50℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物傾入冰水中，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。經合併之有機層用碳酸氫鈉水溶液（2 × 200 mL）中和，且用水（200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，藉由正相層析純化粗殘餘物，得到5-溴-2,3-二氫-1H-茚（ 2 ） 。TLC系統：石油醚Rf ：0.8GCMS (ESI)：m/z 196.7 [M+H]+
2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙-1-醇（3）
將5-溴-2,3-二氫-1H -茚（ 2 ） （2.5 g，12.820 mmol）於THF（25 mL）中之溶液冷卻至-78℃，隨後將含正丁基鋰2.0 M之THF（7.69 mL，15.384 mmol）逐滴添加至以上混合物中。將混合物在-78℃下攪拌1小時。此後，添加2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（Int-4 ）（3.5 g，19.23 mmol）於THF（5 mL）中之溶液，且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將混合物用NH4 Cl水溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，且用水（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，且藉由正相層析純化，得到2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙-1-醇（3 ）。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 284.76 [M-OH]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（5）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-2-甲基丙-1-醇（ 3 ） （4 g，13.33 mmol）、(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（ 4 ） （3.53 g，15.99 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（4 mL，1體積），隨後添加三光氣（1.97 g，6.66 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用NaHCO3 水溶液（100 mL）淬滅，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 534.37 [M+Na]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（6）
在室溫下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4 ）（3.5 g，6.849 mmol）於MeOH/THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.86 g，20.549 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM        Rf ：0.1LCMS (ESI)：m/z 520.29 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 6 ） （2.5 g，5.03 mmol）於DMF（50 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.44 g，7.545 mmol）、HOBt（1.01 g，7.545 mmol）及DIPEA（2.72 mL，15.09 mmol），隨後在0℃下添加2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.34 g，6.036 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗產物藉由急驟層析純化，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 666.47 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H- 茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （850 mg，1.278 mmol）於THF（4 mL）、水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（165 mg，3.83 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用二氯甲烷（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H- 茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 8 ） 。10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 652.53 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（10）
在0℃下同時向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 8 ） （350 mg，0.453 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中添加HATU（306 mg，0.806 mmol）、DIPEA（0.29 mL，1.6128 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（9 ）（167 mg，0.806 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（25 mL）稀釋，用5%甲醇/二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 761.63 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（化合物C131）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（ 10 ） （150 mg，0.197 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m -CPBA（65%）（105 mg，0.3947 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且隨後添加氨水（1.5 mL），且在室溫下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（化合物 C131 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 679.1 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（11）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （500 mg，0.7518 mmol）於DCM（6 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.75 mL，1.503 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（ 11 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 638.74 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（化合物C132）
在0℃下向((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（ 11 ） （200 mg，0.3139 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（399 mg，0.9419 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。藉由TLC及LCMS完成消耗起始材料後，反應物質經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用乙酸乙酯（30 mL）充分洗滌。隨後將有機層用10%硫代硫酸鈉溶液（2 × 50 mL）、隨後用飽和碳酸氫鈉溶液（2 × 50 mL）、水（1 × 50 mL）、鹽水（1 × 50 mL）洗滌。隨後將有機層經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發。隨後將粗化合物藉由製備型HPLC純化來純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(2,3-二氫-1H -茚-5-基)-2-甲基丙酯（化合物 C132 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM   Rf ：0.45LCMS (ESI)：m/z 636.00 (M+H)+
實例106：化合物C145及C134之合成
Figure 02_image414
Figure 02_image416
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （2.5 g，3.793 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（466 mg，11.380 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC系統：15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 646.49 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （500 mg，0.775 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（441 mg，1.16 mmol）、DIPEA（0.4 mL，2.32 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（239 mg，1.162 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.4 LCMS (ESI)：m/z 755.47 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C134）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（4 ）（200 mg，0.265 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（91 mg，0.530 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C134 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z 673.1 [M+H] +
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C145）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙基((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） （0.2 g，0.265 mmol）於甲醇（4 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（91 mg，0.530 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙基胺（2.0 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基) -3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C145 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 713.2 [M+H]+
實例107：化合物C138之合成
Figure 02_image418
(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(R)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段-5）（1 g，3.1 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（912 mg，4.7 mmol）、HOBT（644 mg，4.7 mmol）、DIPEA（1.69 mL，9.5 mmol）及(S)-3-((R)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-胺基丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7 ）（1.16 g，3.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 25 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到呈淺綠色固體狀之(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（1 ）（1.6 g，2.6 mmol，產率89%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 594.3 [M+H]+
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S)-3-((S)-8-乙醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸甲酯（ 1 ） （500 mg，0.84 mmol）於甲醇（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鉀（280 mg，5.05 mmol），且在室溫下攪拌24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，得到呈黃色固體狀之2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（2 ）（450 mg，0.83 mmol，產率99.7%）。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 538.6 [M+H]+
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（4)
在室溫下向0℃的2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） （450 mg，0.83c mmol）於二
Figure 02_image011
烷（4.5 mL）及水（2.2 mL）中之攪拌溶液中添加異丁酸酐（ 3 ） （0.65 mL，4.18 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，且藉由1N HCl酸化，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash RP純化，化合物在20%乙腈/水下溶離，得到呈白色固體狀之2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（4 ）（150 mg，0.24 mmol，產率29.4%）。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 608.7 [M+H]+
N-((2S)-1-((4-氰基-1-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6)
在0℃下向2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（4 ）（150 mg，0.26 mmol）、THF（3 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（140 mg，0.37 mmol）、DIPEA（0.13 mL，0.74 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（5 ）（101 mg，0.49 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（15 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到呈黃色固體狀之N-((2S)-1-((4-氰基-1-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（6 ）（150 mg，0.21 mmol，產率88%）。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z 717.8 [M+H]+
N-((2S)-1-((4-胺基-1-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C138）
在0℃下向N-((2S)-1-((4-氰基-1-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 6 ） （150 mg，0.32 mmol）於甲醇（2 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（90 mg，0.52 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1.1 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（15 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（15 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之N-((2S)-1-((4-胺基-1-(8-異丁醯基-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C138 ）（7 mg，0019 mmol，產率5%）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 635.2 [M+H]+
實例108：化合物C139之合成
Figure 02_image421
4- 硝基四氫 -2H- 哌喃（ 2 ）
向4-碘四氫-2H-哌喃（ 1 ） （10.0 g，47.1 mmol）、DMF（250 mL）之攪拌溶液中添加NaNO2 （6.4 g，94.3 mmol）、間苯三酚（9.5 g，75.4 mmol），添加DMSO（100 mL），且在45℃下加熱16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）稀釋，用二乙醚（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，藉由在20%於乙酸乙酯及己烷中溶離，得到4-硝基四氫-2H-哌喃（2 ）。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 131.92 [M+H]+
2-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 )-4-((4- 硝基四氫 -2H- 哌喃 -4- 基 ) 甲基 ) 戊二酸二甲酯（ 3 ） 向4-硝基四氫-2H-哌喃（ 2 ） （2.1 g，16.0 mmol）於ACN（20 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（5.06 g，17.6 mmol）及DBU（7.3 mL，48.0 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，粗化合物用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，藉由在30%乙酸乙酯及己烷下溶離，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((4-硝基四氫-2H-哌喃-4-基)甲基)戊二酸二甲酯（3 ）。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 441.25 [M+Na]+
2-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 )-3-(2- 側氧基 -8- 氧雜 -1- 氮雜螺 \[4.5] 癸 -3- 基 ) 丙酸甲酯（ 4 ） 向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((4-硝基四氫-2H-哌喃-4-基)甲基)戊二酸酯（3 ）（5.5 g，13.15 mmol）於MeOH（250 mL）中之攪拌溶液中添加NiCl2 （1.69 g，13.15 mmol），且在-10℃下攪拌10分鐘。向此中添加NaBH4 （2.5 g，65.7 mmol）且攪拌2小時。藉由TLC完成反應之後，濃縮反應混合物，用飽和NH4 Cl淬滅，經由方解石墊過濾，且將過濾物用10%甲醇/DCM（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4 ）。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 379.1[M+Na]+
2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（5）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 4 ） （3.8 g，10.67 mmol）於1,4二
Figure 02_image011
烷（30 mL）中之攪拌溶液中添加4N HCl/二
Figure 02_image011
烷（30 mL），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用二乙醚洗滌，得到2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（ 5 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 257.24 [M+H]+
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（7） 隨後在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（6）（1.5 g，4.7 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.35 g，7.1 mmol）、HOBt（0.95 g，7.1 mmol）、DIPEA（2.6 mL，14.1 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（5）（1.44 g，4.7 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，藉由在5%甲醇/二氯甲烷下溶離為2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（7）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 578.59 [M+H]+
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（8）
在室溫下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （0.700 g，1.2 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.152 g，3.6 mmol），且繼續攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 8 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 564.6[M+H]+
((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（10）
隨後在0℃下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 8 ） （0.550 g，0.97 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加HATU（0.555 g，1.4 mmol）、DIPEA（0.5 mL，2.92 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（9 ）（0.315 g，1.46 mmol，且在室溫下繼續攪拌2小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 673.4 [M+H]+
((2S )-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C139）
在0℃下向((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 10 ） （0.270 g，0.40 mmol）於甲醇（10 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（206.93 mg，1.2 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2.0 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-1-((4-胺基-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C139 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 591.1 [M+H]+
實例109：化合物C140之合成
Figure 02_image424
2-(2- 環己基丙 -2- 基 ) 丙二酸二乙酯（ 3 ）
將2-(丙-2-亞基)丙二酸二乙酯（ 1 ） （5 g，25.00 mmol）於THF（100 mL）中之溶液冷卻至0℃，隨後碘化銅(I)（7.1 g，37.00 mmol）。將混合物在0℃下攪拌0.5小時。隨後在0℃下將環己基溴化鎂1.0 M/THF（75 mL，75.00 mmol）逐滴添加至以上混合物中。將混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將混合物用1N HCl淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，且用水（2 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-(2-環己基丙-2-基)丙二酸二乙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 471.27 [M+Na]+
3-環己基-2-(乙氧基羰基)-3-甲基丁酸（4）
將2-(2-環己基丙-2-基)丙二酸二乙酯（3 ）（4.5 g，15.84 mmol）於乙醇（100 mL）及THF（50 mL）之混合物中之攪拌溶液用NaOH（25 mL，15.84 mmol）之1N溶液處理，且將反應混合物在室溫下攪拌24小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。24小時之後，將混合物蒸發成糊漿，且溶解於水（200 mL）中，且用乙醚（2 × 100 mL）萃取。將水層用1N HCl酸化至pH 2.0，且用EtOAc（2 × 100 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液（200 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到3-環己基-2-(乙氧基羰基)-3-甲基丁酸（ 4 ） 。TLC 系統： 50% EtOAc/石油醚Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 279.29 [M+Na]+
2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸乙酯（5）
向3-環己基-2-(乙氧基羰基)-3-甲基丁酸（ 4 ） （3 g，11.718 mmol）於乾燥苯（30 mL）中之攪拌溶液中添加三乙胺（3.31 mL，23.436 mmol）及二苯基磷醯基疊氮化物（3.77 mL，17.578 mmol）。將反應混合物在回流下加熱2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物冷卻至室溫，添加苯甲醇（1.8 mL，17.57 mmol），且將反應物在回流下再次加熱16小時。蒸發溶劑之後，將粗材料用5%檸檬酸溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，且將粗產物藉由純化急驟層析，得到2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸乙酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5% EtOAc/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 362.36 [M+H]+
2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸（6）
在室溫下向2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸乙酯（ 5 ） （3.2 g，8.31 mmol）於MeOH/THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.1 g，26.59 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸（ 6 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM          Rf：0.1LCMS (ESI)：m/z 334.37 [M+H]+
(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁酸（6 ）（2.4 g，7.207 mmol）於DMF（25 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（2.06 g，10.81 mmol）、HOBt（1.46 g，10.81 mmol）及DIPEA（3.87 mL，21.6216 mmol），隨後在0℃下添加2-胺基-2-甲基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2A ）（1.9 g，8.64 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗產物藉由純化急驟層析，得到(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 502.60 [M+H]+
(3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯（8）
在0℃下向(2S )-2-(2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基-3-甲基丁醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （500 mg，0.998 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.99 mL，1.996 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到(3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 474.46 [M+H]+
(3-環己基-3-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯（化合物C140）
在0℃下向(3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯（ 8 ） （200 mg，0.422 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（268 mg，0.634 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。藉由TLC及LCMS完成消耗起始材料後，反應物質經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用乙酸乙酯（30 mL）充分洗滌。隨後將有機層用10%硫代硫酸鈉溶液（2 × 50 mL）、隨後用飽和碳酸氫鈉溶液（2 × 50 mL）、水（1 × 50 mL）、鹽水（ 1 × 50 mL）洗滌。隨後將有機層經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發。隨後將粗化合物藉由製備型HPLC純化來純化，得到(3-環己基-3-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯（化合物 C140 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM   Rf：0.45LCMS (ESI)：m/z 472.2 (M+H)+
實例110：化合物C143之合成
Figure 02_image426
Figure 02_image428
2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（2）
在-30℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ Int-4 ） （5 g，27.472 mmol）於THF（50 mL）中之攪拌溶液中添加(4-氯苯基)溴化鎂（54 mL，54.945 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）。TLC 系統： 10 %乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 277.19 [M-OH]
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（4）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）（3 g，10.20 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中逐份添加吡啶（3 mL）、(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（3 ）（2.4 g，13.265 mmol），隨後添加三光氣（1.5 g，5.102 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（50 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用飽和NaHCO3 溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z = 528.52 [M+Na]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （4.2 g，8.313 mmol）於THF（15 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1 g，24.940 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 514.45 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （4 g，8.143 mmol）於DMF（35 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（2.3 g，12.219 mmol）、HOBt（1.6 g，12.219 mmol）、DIPEA（3.5 mL，24.429 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.8 g，9.775 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 660.47 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （700 mg，1.062 mmol）於DCM（7 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，4.878 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 632.65 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C143）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） （200 mg，0.316 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（6 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（403 mg，0.95 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由製備型HPLC純化，得到2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙基((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸酯（化合物 C143 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 630.1 (M+H)+
實例111：化合物C144之合成
Figure 02_image430
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C144）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（1 ）（150 mg，0.203 mmol）於甲醇（2 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（69 mg，0.406 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基) -3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C144 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z 697.2 [M+H] +
實例112：化合物C146之合成
Figure 02_image432
Figure 02_image434
1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（3）
在室溫下向K2 CO3 （17.6 g，128.205 mmol）於丙酮（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 1 ） （10 g，64.102 mmol），隨後添加1-(溴甲基)-3-氯苯（9.6 mL，76.923 mmol），且使反應混合物在70℃下回流36小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 溶液（150 mL）淬滅，隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層用飽和NaHCO3 （3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 281.23 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4）
在室溫下向1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） （15 g，35.714 mmol）於冰醋酸（150 mL）中之攪拌溶液中添加6N HCl水溶液（75 mL），且將反應混合物在120℃下回流6小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且傾入冰冷的水（100 mL）中，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 209.09 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4 ）（5 g，24.038 mmol）於MeOH（50 mL）中之攪拌溶液中添加NaBH4 （1.82 g，48.076 mmol）。使反應混合物達到室溫，且攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl淬滅，且蒸發以移除溶劑，隨後用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗化合物2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z = 193.14 [M-OH]
(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸甲酯（7）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ） （3 g，14.28 mmol）、L -苯丙胺酸甲酯HCl（ 6 ） （3 g，16.75 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（9 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.1 g，7.09 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用2N HCl（30 mL）淬滅，用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸甲酯（ 7 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z = 416.4 [M+H]+
(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸（3）
向(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸甲酯（ 7 ） （2.1 g，5.06 mmol）於THF（20 mL）、DM水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（622 mg，15.12 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸（8 ），將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 424.3 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9）
在0℃下向(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -苯丙胺酸（ 8 ） （1.8 g，4.48 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.73 mmol）、HOBT（0.9 g，6.73 mmol）、DIPEA（2.4 mL，13.46 mmol）及(2S )-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.34 g，5.422 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 570.4 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（10）
向(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲基甲酯（ 9 ） （1.1 g，1.495 mmol）於THF（20 mL）、DM水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（622 mg，15.12 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 556.4 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（12）
在0℃下向2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-苯基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 10 ） （500 mg，8.99 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（680 mg，1.33 mmol）、DIPEA（0.4 mL，4.41 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 11 ） （455 mg，2.20 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸酯（ 12 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 665.4 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C146）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸酯（ 12 ） （120 mg，0.18 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（62 mg，0.36 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙基胺（0.01 mL，0.21 mmol），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C146 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 623.1 (M+H)+
實例113：化合物C147之合成
Figure 02_image436
((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（3）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-苯基乙-1-醇（1）（4 g，17.23 mmol）及L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（2）（3.7 g，25.85 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（12 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.5 g，8.61 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 426.43 [M+Na]+
((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（4）
在室溫下向((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 4 ） （2.2 g，5.45 mmol）於THF（30 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（671 mg，16.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 4 ） 。TLC系統：100% EtOAc      Rf：0.1LCMS (ESI)：m/z 412.41 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 4 ） （1.7 g，4.36 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.55 mmol）、HOBt（0.88 g，6.55 mmol）、DIPEA（1.8 mL，13.10 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（0.97 g，5.24 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 558.57 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （1 g，1.79 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（220 mg，5.37 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 9 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 544.52 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（8）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6 ）（800 mg，1.473 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（839 mg，2.209 mmol）、DIPEA（0.6 mL，4.41 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 7 ） （455 mg，2.209 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 653.52 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C147）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 8 ） （200 mg，0.30 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（105 mg，0.61 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙基胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C147 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 611.2 (M+H)+
實例114：化合物C148之合成
Figure 02_image438
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2）
在0℃下將((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C104 ） （250 mg，0.409 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中依序添加吡啶（0.75 mL，3體積）、異氰基環丙烷（1 ）（41 mg，0.614 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.06 mL，819 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥且在減壓下乾燥，得到粗((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 2 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 681.6 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C148）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 2 ） （200 mg，0.293 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（373 mg，0.881 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C148 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 679.2 (M+H)+
實例115：化合物C149之合成
Figure 02_image440
(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 ）（1 g，2.57 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（ 736 mg，3.85 mmol）、HOBT（519 mg，3.85 mmol）、DIPEA（1.34 mL，7.71 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7A ）（820 mg，2.82 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/DCM溶離，得到(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（2 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.65LCMS (ESI)：m/z 576.66 (M+H)+
(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（3）
在室溫下向(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （1 g，1.73 mmol）於THF（7 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（249 mg，5.20 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（3 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 562.47 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 3 ） （800 mg，1.42 mmol）於THF（8 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（798 mg，2.135 mmol）、DIPEA（0.74 mL，4.270 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-鎓（4 ）（461 mg，2.135 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用EtoAc（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 671.53 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C149）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） （300 mg，0.447 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（192 mg，1.117 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（6 ）（1.5 mL，5體積），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C149 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 629.2 [M+H]+
實例116：化合物C150之合成
Figure 02_image442
((S)-3-環己基-1-(((S)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物C150）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（1 ）（400 mg，0.519 mmol）於甲醇（2.5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（223 mg，1.29 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加吡咯啶（0.738 mL，5.1 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用10%甲醇/DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物 C150 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z 743.2 [M+H] +
實例117：化合物C151之合成
Figure 02_image444
1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（3）
在室溫下向K2 CO3 （17.6 g，128.205 mmol）於丙酮（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 1 ） （10 g，64.102 mmol），隨後在室溫下添加1-(溴甲基)-3-氯苯（9.6 mL，76.923 mmol），且使反應混合物在70℃下回流16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 （150 mL）淬滅，隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，隨後用乙酸乙酯洗滌，層用飽和NaHCO3 （3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 281.23 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4）
在室溫下向1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） （15 g，35.714 mmol）於冰醋酸（150 mL）中之攪拌溶液中添加6N HCl水溶液（75 mL），且將反應混合物在120℃下回流6小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且傾入冰冷的水（100 mL）中，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 209.09 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4 ）（5 g，24.038 mmol）於MeOH（50 mL）中之攪拌溶液中添加NaBH4 （1.82 g，48.076 mmol）。使反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物蒸餾，且用1N HCl淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z = 193.14 [M-OH]
(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（7）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ）（(5 g，23.809 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（15 mL）、三光氣（3.5 g，11.904 mmol），隨後添加(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（6 ）（5.3 g，28.571 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，將有機層濃縮，用1N HCl水溶液再次洗滌，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用4%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC系統：20%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 422.26 [M+H] +
(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（8）
向(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 7 ） （3 g，7.125 mmol）於THF（30 mL）、DM水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（513 mg，21.377 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 25 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（8 ），將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 430.38 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9）
在0℃下向(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（8 ）（2.2 g，5.405 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.5 g，8.108 mmol）、HOBT（1.09 g，8.108 mmol）、DIPEA（2.9 mL，16.216 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.2 g，6.486 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 576.61 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（10）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） （1 g，1.739 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（125 mg，5.217 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 562.47 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（12）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 10 ） （0.7 g，1.247 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（0.71 g，1.871 mmol）、DIPEA（0.66 mL，3.743 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H-噻吩-1-溴化鎓（11 ）（239 mg，1.871 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 12 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 671.31 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C151）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 12 ） （250 mg，0.373 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加mCPBA（160 mg，0.932 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（ 13 ） （25 mg，0.447 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C151 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 629.2 [M+H]+
實例118：化合物C152之合成
Figure 02_image446
1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（3）
在室溫下向K2 CO3 （17.6 g，128.205 mmol）於丙酮（100 mL）中之攪拌溶液中添加2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 1 ） （10 g，64.102 mmol），隨後添加1-(溴甲基)-3-氯苯（9.6 mL，76.923 mmol），且使反應混合物在70℃下回流36小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 溶液（150 mL）淬滅，隨後用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層用飽和NaHCO3 （3 × 100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用3%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 281.23 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4）
在室溫下向1-(3-氯苯甲基)-2-側氧基環戊烷-1-甲酸乙酯（ 3 ） （15 g，35.714 mmol）於冰醋酸（150 mL）中之攪拌溶液中添加6N HCl水溶液（75 mL），且將反應混合物在120℃下回流6小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物冷卻至室溫，且傾入冰冷的水（100 mL）中，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 209.09 [M+H]+
2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-酮（4 ）（5 g，24.038 mmol）於MeOH（50 mL）中之攪拌溶液中添加NaBH4 （1.82 g，48.076 mmol）。使反應混合物達到室溫，且攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl淬滅，且蒸發以移除溶劑，隨後用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗化合物2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ）。TLC系統：5%乙酸乙酯/己烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z = 193.14 [M-OH]
(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（6）
在0℃下向2-(3-氯苯甲基)環戊-1-醇（5 ）（1.7 g，8.095 mmol）、L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（5 ）（1.4 g，9.714 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中逐份添加吡啶（5.1 mL，24.285 mmol），隨後添加三光氣（1.19 g，4.047 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用4%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（7 ）。TLC系統：20%乙酸乙酯/己烷Rf：0.5 LCMS (ESI)：m/z = 382.38 [M+H] +
(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -白胺酸（8）
向(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（7 ）（1.6 g，4.199 mmol）於THF（20 mL）、DM水（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（302 mg，12.598 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（8 ），將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 368.22 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9）
在0℃下向(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 8 ） （1.4 g，3.814 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.09 g，5.722 mmol）、HOBT（0.772 g，5.722 mmol）、DIPEA（2.1 mL，18.018 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（1.34 g，15.422 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 536.59 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（10）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） （0.8 g，1.495 mmol）於二氯甲烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.4 mL，2.990 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，將過濾物在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（10 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 508.38 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C152）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（10 ）（0.1 g，0.197 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.167 g，0.394 mmol，且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C152 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 506.1 [M+H]+
實例119：化合物C153之合成
Figure 02_image448
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 1 ） （酸片段 -37 ）（1.0 g，2.33 mmol）於DMF（15 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（0.667 g，3.49 mmol）、HOBt（0.47 g，3.49 mmol）、DIPEA（1.3 mL，6.99 mmol）及甲基-2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸酯鹽酸鹽（胺片段 -18 ）（0.68 g，2.33 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（250 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 666.50 [M+H]+
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（2）
在室溫下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （0.9 g，1.35 mmol）於THF（6 mL）、水（6 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（170 mg，4.06 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。在減壓下蒸餾過量THF，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 652.49 [M+H]+
((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） （800 mg，1.27 mmol）於DCM（12 mL）中之攪拌溶液中添加HATU（700 mg，1.83 mmol）、DIPEA（0.7 mL，3.66 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-鎓（3 ）（305 mg，2147 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層用水（1 × 50 mL）、鹽水溶液（1 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 761.43 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（C153）
在0℃下向((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （200 mg，0.263 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m -CPBA（68 mg，0.394 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且隨後添加環丙基胺（0.03 mL，0.526 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用水（1 × 20 mL）及鹽水溶液（1 × 30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ C153 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 719.2 [M+H]+
實例120：化合物C154之合成
Figure 02_image450
(S )-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 1 ） （5.0 g，14.7 mmol）於DMF（50 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（4.2 g，22.11 mmol）、HOBt（2.98 g，22.11 mmol）、DIPEA（8.15 mL，44.22 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（3.92 g，17.69 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（250 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(S )-2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 508.47 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（3）
在0℃下向(S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （4.0 g，7.88 mmol）於DCM（200 mL）中之攪拌溶液添加含2M LiBH4 之THF（7.8 mL，1.57 mmol），隨後將反應混合物在室溫下攪拌1小時。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（200 mL）淬滅，且用DCM（2 × 200 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，得到純((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 480.37[M+H]+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（4）
在0℃下向((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 3 ） （2.0 g，4.16 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（5.29 g，12.49 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用DCM（50 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 478.1 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5）
將((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（4 ）（600 mg，1.25 mmol）及異氰基環丙烷（126.41 mg，1.88 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（60 mL）中，隨後在0℃下添加吡啶（3mL），且攪拌10分鐘。在0℃下向此溶液中添加TFA（0.3 mL，2.51 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 563.2 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C154）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5 ） （450 mg，0.799 mmol）之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（677.79 mg，1.59 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用DCM（50 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C154 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 561.1 [M+H]+
實例121：化合物C155及化合物C180之合成
Figure 02_image452
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -37 ） （1 g，2.33 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（667 mg，3.49 mmol）、HOBt（471 mg，3.49 mmol）、DIPEA（1 mL，6.99 mmol）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -21 ）（699 mg，2.79 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 626.48 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（2）
在0℃下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （920 mg，1.47 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.4 mL，2.94 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（2 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 598.40 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（C180）
將((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（2 ）（150 mg，0.25 mmol）之攪拌溶液中溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（213 mg，0.50 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ C180 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 596.52 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ C180 ） （300 mg，0.50 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加乙酸（1 mL），添加異氰基環丙烷（ 3 ） （50 mg，0.75 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，直接濃縮反應混合物，得到粗產物：將此殘餘物溶解於甲醇（5 mL）、水（2 mL）中，且在室溫下添加碳酸鉀（104 mg，0.75 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 681.56 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（C155）
將((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （280 mg，0.41 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（349 mg，0.82 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi-flash NP純化，化合物在6%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ C155 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 679.2 (M+H)+
實例122：化合物C156及化合物C167之合成
Figure 02_image454
2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1)
在0℃下向(2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（Int-5 ）（1.5 g，3.68 mmol）於DMF中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（718 mg，3.68 mmol）、HOBT（490 mg，3.62 mmol）、DIPEA（4.5 mL，3體積）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片 段 5 ）（737 mg，11.05 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 604.5 (M+H)+
2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在0℃下向2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1 ）（1 g，1.65 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.48 mL，4.96 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）。TLC 系統： 5%MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 576.5 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C156）
在0℃下向2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（200 mg，0.33 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（422 mg，0.99 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ C156 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 574.2 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4）
將((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ C156 ） （350 mg，0.60 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1 mL，3體積）、異氰基環丙烷（3 ）（61 mg，0.91 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.13 mL，1.21 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 659.5 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C167）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） （200 mg，0.30 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（386 mg，0.91 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 10 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C167 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 657.2 (M+H)+
實例123：化合物C174及C157之合成
Figure 02_image456
((S )-1-(((S)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1 ）（600 mg，1.02 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，1.53 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S ) -2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2 ）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 558.52 [M+H]+
((S )-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（C157）
將((S )-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2 ）（100 mg，0.15 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（519 mg，1.02 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（30 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C157 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 558.52 [M+H]+
((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（4）
在0℃下向((S )-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C157 ） （250 mg，0.45 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（ 3 ） （45 mg，0.67 mmol）、吡啶（71 mg，0.90 mmol），隨後添加TFA（102 mg，0.90 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl溶液（15 mL），隨後鹽水（15 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨，得到((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 641.55 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（C174）
將((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（4）（210 mg，0.32 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（417 mg，0.98 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在8%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C174 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 639.2 [M+H]+
實例124：化合物C158之合成
Figure 02_image458
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （0.7 g，1.17 mmol）於THF（5 mL）、甲醇（5 mL）及水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（144 mg，3.51 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 584.60 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（420 mg，0.72 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（410 mg，1.08 mmol）、DIPEA（0.3 mL，2.16 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（222 mg，1.08 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)環丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 693.53 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)碳酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（C158）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （200 mg，0.28 mmol）於甲醇（4 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（99 mg，0.57 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加環丙胺（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（2 × 40 mL）洗滌，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ C158 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 651.2 [M+H]+
實例125：化合物C165及C159之合成
Figure 02_image460
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環戊基)甲基)戊二酸二甲酯（2）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（6.8 g，14.34 mmol）於ACN中之攪拌溶液中添加硝基環戊烷（1 ）（1.5 g，13.04 mmol）及DBU（3.6 mL，13.44 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環戊基)甲基)戊二酸二甲酯（2 ）。TLC 系統： 10%石油醚/EtOAcRf ： 0.25LCMS (ESI)：m/z 403.2 (M+H)+
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（3）
在-10℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基環戊基)甲基)戊二酸二甲基二甲酯（2 ）（4.3 g，10.64 mmol）於甲醇（50 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（1.3 g，10.64 mmol），隨後添加硼氫化鈉（2 g，53.21 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（3 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 50 ml）、鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（3 ）。TLC系統：5% MeOH/DCM Rf ：0.2LCMS (ESI)：m/z 341.3 (M+H)+
2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（4）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（3 ）（2.5 g，3.75 mmol）於二
Figure 02_image011
烷（25 mL）中之攪拌溶液中添加含4M HCl之二
Figure 02_image011
烷（25 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2
2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5 ）（2 g，4.91 mmol於DMF中）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.4 g，7.17 mmol）、HOBT（900 mg，6.66 mmol）、DIPEA（2.7 mL，3體積）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（1.6 g，5.89 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（6 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 630.8 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（7）
在0℃下向2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙酸甲酯（6 ）（700 mg，1.11 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.2 mL，0.24 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5%MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 602.4 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C165）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯2-(3-氯苯甲基)環戊酯（7 ）（200 mg，0.33 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（422 mg，0.99 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C165 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 600.2 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（9）
將((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ C165 ） （400 mg，0.06 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1.2 mL，3體積）、異氰基環丙烷（8 ）（66 mg，1.29 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.05 mL，0.66 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 9 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 685.2 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C159）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 9 ） （200 mg，0.29 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（371 mg，0.87 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 10 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.4]壬-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C159 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 683.2 (M+H)+
實例126：化合物C186及C160之合成
Figure 02_image464
1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（2）
在-30℃下向(2-氯苯基)溴化鎂於THF（1 ）（65 mL，65.934 mmol）中之攪拌溶液中添加含2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（4 g，21.978 mmol）之THF（50 mL），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物，將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7
(2S )-2-(((1-(2- 氯苯基 )-2-(3- 氯苯基 )-2- 甲基丙氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 環己基丙酸甲酯（ 4 ） 在0℃下在15分鐘內向1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 2 ） （3.5 g，11.904 mmol）及(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （2.64 g，14.285 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中逐份添加吡啶（3.8 mL，1體積），隨後添加三光氣（1.76 g，5.9523 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發，得到粗產物；將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 528.36 [M+Na]+
(2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（5）
在室溫下向(2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 4 ） （3.8 g,7.524 mmol）於THF（30 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（541 mg，22.57 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 514.36 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向(2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 5 ） （2 g，4.073 mmol）、DMF（15 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.16 g，6.10 mmol）、HOBt（824 mg，6.10 mmol）、DIPEA（2.2 mL，12.21 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（910 mg，4.88 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2- (3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 80%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 660.43 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（7)
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （1.5 g，2.276 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.2 mL，4.552 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（7 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 632.38 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸11-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（C160)
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（7 ）（100 mg，0.15 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（201 mg，0.47 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi flash NP純化；化合物在5%甲醇二氯甲烷下溶離，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ C160 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 630.2 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（9）
在0℃下向((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ C160 ） （250 mg，0.39 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（ 8 ） （39 mg，0.59 mmol）、吡啶（0.5 mL，2體積），隨後添加TFA（0.1 mL，0.79 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl溶液（30 mL）、隨後用鹽水（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 9 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 715.57 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（C186）
將((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（9 ）（170 mg，0.23 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（201 mg，0.47 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在6%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1-(2-氯苯基)-2-(3-氯苯基)-2-甲基丙酯（ C186 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 713.2 [M+H]+
實例127：化合物C161之合成
Figure 02_image466
((S )-3-((S )-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁基)磷酸二-三級丁酯（1）
在室溫下向N -((S )-1-(((S )-4-羥基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（C142 ） （200 mg，0.423 mmol）於THF（4 mL）中之溶液中添加1H-四唑（300 mg，4.23 mmol）及二乙基胺基亞磷酸二-三級丁酯（2 mL，6.35 mmol）。將反應物在室溫下攪拌4小時，隨後在0℃下添加30%過氧化氫水溶液（0.5 mL）。將混合物在25℃下攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。After that，將反應混合物用10%偏亞硫酸氫鈉溶液（Na2 S2 O5 ）（10 mL）淬滅。隨後將各層分離，且用飽和NaHCO3 溶液（2 × 20 mL）洗滌。將有機層經Na2 SO4 乾燥，且在真空下蒸發。藉由正相管柱層析純化粗材料，得到((S )-3-((S )-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁基)磷酸二-三級丁酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 665.87 [M+H]+
二氫磷酸(S )-3-((S )-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酯（C161）
將((S )-3-((S )-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁基)磷酸二-三級丁酯（1 ）（100 mg，0.15 mmol）於DCM（2 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。隨後添加三氟乙酸（0.2 ml），且將反應物在室溫下在氮氣下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將混合物在真空中濃縮，且隨後自二氯甲烷（2 × 5 mL）及二乙醚（2 × 5 mL）濃縮以移除殘餘酸。將粗化合物藉由逆相製備型HPLC純化，藉由呈梯度使用0.1% TFA於水及乙腈中，得到二氫磷酸(S )-3-((S )-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酯（ C161 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 553.1 [M+H]+
實例128：化合物C162及C172之合成
Figure 02_image468
2-(3-氯苯基)乙醛（2）
在-78℃下向DMSO（2.7 mL，38.46 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中添加乙二醯氯（2.5 mL，28.84 mmol），且隨後攪拌30分鐘，在-78℃下添加含2-(3-氯苯基)乙-1-醇（1 ）（3 g，19.23 mmol）之DCM，且繼續2小時，此後在相同溫度下添加TEA（8.3 mL，57.69 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用DCM（100 mL）稀釋，且用冰冷的水（3 × 60 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗2-(3-氯苯基)乙醛（ 2 ） 。將此產物用於下一步驟中。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4
1,2-雙(3-氯苯基)乙-1-醇
在-30℃下向(3-氯苯基)溴化鎂（ 3 ） （58 mL，58.44 mmol）、THF（50 mL）之攪拌溶液中添加2-(3-氯苯基)乙醛（ 2 ） （3 g，19.48 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%乙酸乙酯/己烷下溶離，得到1,2-雙(3-氯苯基)乙-1-醇（ 4 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 249.11 [M-OH]+
(2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（6）
在0℃下向1,2-雙(3-氯苯基)乙-1-醇（4 ）（2.3 g，8.64 mmol）及(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（5 ）（1.9 g，10.37 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（2.3 mL，1體積），隨後添加三光氣（1.27 g，4.32 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在7%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-(((1, 2-bis (3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 500.28 [M+Na]+
(2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段-53）
在室溫下向(2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 6 ） （2.1 g，4.40 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（316 mg，13.20 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -53 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 486.25 [M+Na]+
2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -53 ） （1 g，2.07 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（595 mg，3.11 mmol）、HOBt（420 mg，3.11 mmol）、DIPEA（0.8 mL，6.23 mmol）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -21 ）（623 mg，2.49 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 660.2 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（8）
在0℃下向2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （950 mg，1.44 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.4 mL，2.88 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（8 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 632.50 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（C162）
將((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（8 ）（400 mg，0.63 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（537 mg，1.26 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ C162 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 630.1 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（10）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ C162 ） （350 mg，0.55 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（1 mL），添加異氰基環丙烷（ 9 ） （55 mg，0.83 mmol），添加TFA（0.3 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層合併，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨3次，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 669.59 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（C172）
將((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（10 ）（280 mg，0.39 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（332 mg，0.78 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（30 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ C172 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 713.2 (M+H)+
實例129：化合物C163之合成
Figure 02_image470
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（酸片段 -38 ） （1.6 g，3.83 mmol）、DMF（16 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1 g，5.75 mmol）、HOBt（0.77 g，5.75 mmol）、DIPEA（1.6 mL，11.50 mmol）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -20 ）（1.15 g，4.60 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 614.48 [M+H]+
((2S )-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2）
在0℃下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （350 mg，0.57 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.6 mL，1.14 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 586.56 [M+H]+
((2S )-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（3）
將((2S )-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2 ）（300 mg，0.51 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（519 mg，1.02 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 584.55 (M+H)+
((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（5）
在0℃下向((2S )-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 3 ） （250 mg，0.42 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加乙酸（0.5 mL），添加異氰基環丙烷（ 4 ） （56 mg，0.83 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物濃縮，得到粗產物；將粗殘餘物溶解於甲醇（10 ml）、水（5 mL）中，在室溫下添加碳酸鉀（80 mg，0.58 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，粗化合物用1N HCl水溶液洗滌，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨3次，得到((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 669.59 [M+H]+
((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（C163）
將((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（5 ）（200 mg，0.29 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（310 mg，0.59 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C163 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 667.2 (M+H)+
實例130：化合物C164之合成
Figure 02_image472
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己酸甲酯（3）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙-1-醇（1 ）（2.5 g，9.61 mmol）及(S )-2-胺基己酸甲酯鹽酸鹽（2 ）（2.0 g，11.53 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（7.5 mL，3體積），隨後添加三光氣（1.4 g，4.82 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在8%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己酸甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 432.32 [M+H]+
(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)氫氧化鋰（4）
在室溫下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己酸甲酯（ 3 ） （3.0 g，6.96 mmol）於THF（30 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（500 mg，20.88 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)氫氧化鋰（ 4 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 416.31 [M-H]-
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)氫氧化鋰（ 4 ） （2.5 g，5.99 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.7 g，8.98 mmol）、HOBt（1.2 g，8.98 mmol）、DIPEA（3.0 mL，17.97 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.3 g，7.19 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 586.52 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （500 mg，0.85 mmol）於THF（10 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（61 mg，2.56 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 6 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 572.50 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（8）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（6 ）（350 mg，0.612 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（465 mg，1.22 mmol）、DIPEA（0.3 mL，1.91 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 7 ） （350 mg，1.68 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基) -4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 681.56 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（C164）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 8 ） （200 mg，0.29 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（151 mg，0.88 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C164 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 599.2 (M+H)+
實例131：化合物C166之合成
Figure 02_image474
((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（2）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ C108 ） （250 mg，0.449 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.75 mL，3體積）、異氰基環丙烷（1 ）（45 mg，0.671 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.06 mL，899 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 2 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 641.5 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（C166）
在0℃下向((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 2 ） （200 mg，0.312 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（396 mg，0.936 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C166 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 639.2 (M+H)+
實例132：化合物C168之合成
Figure 02_image476
(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
將N -(三級丁氧基羰基)-3-[(3S)-2-側氧基吡咯啶-3-基]-L-丙胺酸甲酯（1 ）（1 g，3.496 mmol）於甲醇（10 mL）中之溶液冷卻至0℃，隨後添加NaOH（500 mg於5 mL水中）溶液。將所得溶液在0℃下攪拌1小時，隨後在真空中移除過量甲醇。將殘餘物酸化至pH 3，且用二氯甲烷（2 × 50 ml）萃取，且將經合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/石油醚R f ： 0.2
((S )-4-重氮基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基甲酸三級丁酯（3)
將N -(三級丁氧基羰基)-3-[(3S )-2-側氧基吡咯啶-3-基]-L-丙胺酸（3 ）（3 g，11.0 29 mmol）於THF（30 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至-23℃。將所澄清無色溶液依次用三乙胺（3 mL，22.059 mmol）、隨後用氯甲酸異丁酯（1.8 mL，13.235 mmol）處理。反應混合物用重氮甲烷（約50 mL，約25 mmol）於二乙醚中之溶液緩慢處理。將所得黃色澄清溶液逐漸溫熱至室溫，且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。此後將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（100 mL）萃取，用水（50 mL）洗滌一次，用鹽水（50 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到a。藉由正相管柱層析純化此材料，得到((S )-4-重氮基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 319.19 [M+Na]+
(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（4）
將((1S )-3-重氮基-2-側氧基-1-{[(3S )-2-側氧基吡咯啶-3-基]甲基}丙基)胺基甲酸三級丁酯（1.5 g，5.06 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（15 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此澄清淺黃色溶液用4M氫氯酸於1,4-二
Figure 02_image011
烷（15 mL）中之溶液逐滴處理。完成添加後，在1小時內將反應物溫熱至室溫，形成白色沈澱物。在真空下蒸發過量1,4-二
Figure 02_image011
烷，且用二乙醚研磨固體，得到呈淡黃色固體狀之(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（ 4 ） （1 g，4.16 mmol，產率83%）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 205.13 [M+H]+
((2S)-1-(((2S)-4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（5）
將(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（ 4 ）胺片段 -19 （547 mg，1.769 mmol）及(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸酸 片段 -2 （500 mg，1.474 mmol）於DMF（50 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此淡黃色溶液依次用HATU（841 mg，2.212 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.32 mL，2.949 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （50 mL）淬滅且用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到黃色糊漿。藉由正相層析純化此材料，得到((2S)-1-(((2S)-4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 594.47 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-羥基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C168）
將((2S )-1-(((2S )-4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 5 ） （300 mg，0.42 mmol）及苯甲醯基甲酸（95 mg，0.63 mmol）於DMF（20 mL）中之溶液置於N2 氛圍下。此澄清淺黃色溶液用氟化銫（151 mg，0.84 mmol）處理，隨後加熱至65℃。4小時後，將現在為黃色的懸浮液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（60 mL）稀釋，用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈粗黃色泡沫狀之粗2-側氧基-2-苯基乙酸((3S )-3-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-側氧基-4-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁酯。C38H4ClN3O8之MS (ESI+)m/z 707.3 (M+H)+。將此粗產物放入甲醇（40 mL）中，置於N2 氛圍下，且在劇烈攪拌下用碳酸鉀（30 mg，0.04 mmol）處理。1小時後，在真空中移除揮發物（浴＜ 30℃），得到粗產物。藉由正相層析純化此材料，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-羥基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C168 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 576.2 [M+H]+
實例133：化合物C169之合成
Figure 02_image480
1-(3-氯苯甲基)環丁-1-醇（3）
在室溫下向1-(溴甲基)-3-氯苯（ 1 ） （3 g，14.705 mmol）於二乙醚（60 mL）中之攪拌溶液中添加催化劑1,2-二i溴乙烷（0.2 mL，1.47 mmol）、催化劑碘（94 mg，0.73 mmol）及鎂旋屑（1 g，44.11 mmol）。觀測自劇烈回流。在室溫下維持1小時。隨後在-78℃下將所產生之格林納試劑緩慢逐滴添加至含有另一RBF之環丁酮（2 ）（1 g，14.28 mmol）/二乙醚（20 mL）中。維持室溫16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-(3-氯苯甲基)環丁-1-醇（ 3 ） 。TLC 系統： 10 %乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 197.28 [M+H]
((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5）
在0℃下向1-(3-氯苯甲基)環丁-1-醇（3 ）（1.1 g，5.61 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（1.3 mL，16.83 mmol）及L-白胺酸甲酯（4 ）（1.2 g，8.41 mmol），隨後逐份添加三光氣（0.83 g，2.806 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（20 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用飽和NaHCO3 溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 5 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf ：0.4 LCMS (ESI)：m/z = 368.35 [M+H]+
((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（6）
在0℃下向((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 5 ） （1.6 g，4.35 mmol）於THF（6.5 mL）、水（1.6 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（0.42 g，17.43 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。起始材料耗盡後，將反應混合物濃縮，且用1N HCl酸化，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 354.34 [M+H]+
2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)-L-白胺酸（6）（1 g，2.83 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.65 g，4.24 mmol）、HOBt（0.57 g，4.22 mmol）、DIPEA（1.2 mL，8.49 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -22 ）（1 g，3.39 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 592.53 [M+H]+
((2S)-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（8）
在0℃下向2-((S)-2-(((1-(3-氯苯甲基)環丁氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （800 mg，1.35 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.3 mL，2.7 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((2S)-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 564.52 (M+H)+
((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（9）
將((2S)-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（ 8 ） （700 mg，1.24 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（6 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.05 mg，2.48 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（9 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 562.32 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（11）
在0℃下向所得((2S)-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（9 ）（110 mg，0.19 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（10 ）（25 mg，0.29 mmol）、吡啶（0.7 mL，0.78 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，添加TFA（45 mg，0.39 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（ 11 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 647.36 [M+H]+
((2S)-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（C169）
將((2S)-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（ 11 ） （100 mg，0.155 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（6 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（262 mg，0.62 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-(3-氯苯甲基)-環丁酯（ C169 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 645.2 (M+H)+
實例134：化合物C170及C178之合成
Figure 02_image482
1-(甲磺醯基)-4-硝基哌啶（2）
將4-硝基哌啶鹽酸鹽（1 ）（3 g，18 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（30 mL）中，在0℃下同時添加甲磺醯氯（158 mL，19.87 mmol）及三乙胺（3.79 mL，27 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（40 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取，將有機層用水（2 × 20 ml）、鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到1-(甲磺醯基)-4-硝基哌啶（ 2 ） 。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 209.14 [M+H]+
2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（3）
在0℃下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（Int-5 ）（E0574-200）（3.03 g，10.09 mmol）於ACN（20 mL）中之攪拌溶液中添加1-(甲磺醯基)-4-硝基哌啶（ 2 ） （1.5 g，7.211 mmol）及DBU（2.19 mL，14.42 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((1-乙醯基-4-硝基哌啶-4-基)甲基)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)戊二酸二甲酯（3 ）。TLC 系統： 70% EtOAc/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 496.8 (M+H)+
(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4）
在-10℃下向(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-(甲磺醯基)-4-硝基哌啶-4-基)甲基)戊二酸二甲基二甲酯（3 ）（2.8 g，5.65 mmol）於甲醇（30 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（801 mg，6.21 mmol），隨後添加硼氫化鈉（1.07 g，28.28 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨（50 mL）淬滅，且用10% MeOH IN DCM（3 × 25 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 20 ml）、鹽水溶液（25 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 378.36 (M+Na)+
(2S )-2-胺基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段-25）
在0℃下向(2S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4 ）（2 g，4.61 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（20 mL）中之攪拌溶液中添加含4M HCl之1,4-二
Figure 02_image011
烷（10 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到(2S )-2-胺基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -25 ）。TLC 系統： 15% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 334.29 (M+H)+
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（5）
隨後在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ）（1.3 g，3.83 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.09 g，5.75 mmol）、HOBt（0.776 g，5.751 mmol）、DIPEA（2.0 mL，11.502 mmol）及(2S )-2-胺基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -25 ）（1.55 g，4.218 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，藉由5%甲醇/二氯甲烷下溶離為2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 655.41 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（6）
在0℃下向2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （1.6 g，2.4 mmol）於THF（20 mL）中之攪拌溶液中添加2M LiBH4 (2.4 mL，4.8 mmol），且繼續攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（10 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 627.40[M+H]+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C178）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（6 ） （270 mg，0.431 mmol）於乙酸乙酯（4 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（457 g，1.07 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C178 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 625.1[M+H]+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C178 ） （300 mg，0.48 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（6）（64.32 mg，0.96 mmol）、吡啶（0.15ml 1.92 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（109.4 mg），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 710.33 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C170）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸33-氯苯甲酯（8 ） （330 mg，0.466 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（494 mg，1.16 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C170 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 708.2 [M+H]+
實例135：化合物C171之合成
Figure 02_image485
2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（ 1 ） （酸片段 -34 ）（1.5 g，4.77 mmol）於DMF（30 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.36 g，7.165 mmol）、HOBt（0.96 g，7.165 mmol）、DIPEA（2.54 mL，14.31 mmol）及甲基-2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸酯鹽酸鹽（胺片段 -19 ）（1.68 g，5.724 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（250 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 551.50 [M+H]+
2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（3）
在室溫下向2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （1.5 g，2.722 mmol）於THF（15 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（343 mg，8.166 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。在減壓下蒸餾過量THF，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用DCM（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 3 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 537.44 [M+H]+
N -((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（5）
在0℃下向2-((S )-3-環己基-2-(1H -吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 3 ） （1.3 g，2.42 mmol）於DCM（25 mL）中之攪拌溶液中添加HATU（1.3 g，3.358 mmol）、DIPEA（1.2 mL，6.716 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-鎓（4 ）（556 mg，2.686 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層用水（1 × 50 mL）、鹽水溶液（1 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N -((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 646.51 [M+H]+
N -((2S )-3-環己基-1-((3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（C171）
在0℃下向N -((2S )-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1λ4 -噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（ 5 ） （200 mg，0.310 mmol）於甲醇（3 mL）中之攪拌溶液中添加m -CPBA（159 mg，0.930 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且隨後添加吡咯啶（0.06 mL，0.93 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 15 mL）萃取。將有機層用水（1 × 20 mL）及鹽水溶液（1 × 30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N -((2S )-3-環己基-1-((3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（ C171 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 616.4 [M+H]+
實例136：化合物C175之合成
Figure 02_image487
2-((2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯
在0℃下向(2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -53 ） （1 g，2.07 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（596 mg，3.11 mmol）、HOBt（421 mg，3.11 mmol）、DIPEA（0.8 mL，6.23 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（Int-7A ）（603 mg，2.07 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 700.31 [M+H]
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯
在0℃下向2-((2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （900 mg，1.28 mmol）於DCM（9 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.28 mL，2.57 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（2 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 672.50 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1, 2-雙(3-氯苯基)乙酯（C175）
將((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（2 ）（800 mg，1.190 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1 g，2.38 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（C175 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 670.2 (M+H)+
實例137：化合物C176及C200之合成
Figure 02_image489
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ）（1.0 g，2.94 mmol）於DMF（200 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（842 mg，4.41 mmol）、HOBt（595 mg，4.41 mmol）、DIPEA（1.5 mL，8.82 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -22 ）（992 mg，3.24 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 25 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 578.28 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2）
在0℃下向(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （1.6 g，2.76 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.7 mL,5.53 mmol），隨後將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（20 mL）淬滅，且用EtoAc（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，得到純((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 550.31[M+H]+
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C200）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯3-氯苯甲酯（ 2 ） （300 mg，0.545 mmol）於EtOAc（6mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（578 mg，1.36 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用EtoAc（20 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 10 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C200 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 548.1 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（4）
將((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((2S)-1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C200 ） （300 mg，0.547 mmol）及異氰基環丙烷（ 3 ） （73.3 mg，1.09 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，隨後，在0℃下添加吡啶（0.17mL），且攪拌10分鐘。在0℃下向此溶液中添加TFA（124 mg，1.09 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 5 mL）、鹽水溶液（3 × 5 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 633.34 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（C176）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 4 ） （340 mg，0.537 mmol）之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（569 mg，1.34 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用EtoAc（10 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在10%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ C176 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 631.2 [M+H]+
實例138：化合物C177及C189之合成
Figure 02_image491
2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1)
在0℃下向(2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -55 ）（1 g，2.44 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.69 g，3.66 mmol）、HOBt（0.49 g，3.66 mmol）、DIPEA（1.2 mL，7.32 mmol）及2-胺基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -25 ）（1 g，3.39 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 723.69 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
在0℃下向2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.6 g，2.21 mmol）於DCM（15 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.2 mL，4.43 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 695.40 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C189）
將((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） （150 mg，0.22 mmol）之攪拌溶液中溶解於DCM（4 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（235 mg，0.55 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C189 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 693.2 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4）
在0℃下向所得((2S )-3-環己基-1-((1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C189 ）（380 mg，0.54 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（3 ）（74 mg，1.09 mmol）、吡啶（0.7 mL，2.1 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.12 ml，1.09 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 778.81 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C177）
將((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4 ）（330 mg，1.06 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（6 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（449 mg，0.62 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷稀釋（10 mL），且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（C177 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 776.2 (M+H)+
實例139：化合物C179之合成
Figure 02_image493
2-((S )-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S )-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（1）（1.0 g，2.9 mmol）於DMF中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.83 g，4.35 mmol）、HOBT（0.587 g，4.35 mmol）、DIPEA（1.6 mL，3體積）及2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -22 ） （1.0 g，3.4 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到2-((S )-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 583.64 (M+H)+
N-((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（3）
在0℃下向2-((S )-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （1.5 g，2.57 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.5 mL，5.14 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N-((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 3 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf 0.5LCMS (ESI)：m/z 555.46 (M+H)+
N-((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（C179）
在0℃下向N-((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 3 ） （150 mg，0.27 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（229.60 mg，0.54 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ C179 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 553.2 (M+H)+
實例140：化合物C201及C181之合成
Figure 02_image495
(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（3）
在-30℃下向(4-氯苯基)溴化鎂（ 2 ） （35 mL，35.55 mmol）、THF（70 mL）之攪拌溶液中添加1-(3-氯苯基)環丙烷-1-甲醛（ 1 ） （3.2 g，17.77 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在7%乙酸乙酯/己烷下溶離，得到(4-氯苯基) (1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 275.18 [M-OH]+
(((4-氯苯基) (1-(3-氯苯基)環丙基)甲基)羰基)-L -白胺酸甲酯（5）
在0℃下向(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（ 3 ） （4 g，13.69 mmol）於ACN（40 mL）中之攪拌溶液中添加碳酸N,N'二丁二醯胺酯（8.7 g，33.98 mmol），隨後添加三乙胺（6.6 mL，47.94 mmol），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC監測。反應物質直接用於後續反應中。
在另一燒瓶中，將L -白胺酸甲酯鹽酸鹽（ 2 ） （6.1 g，34.24 mmol）放入ACN（50 mL）中，且用三乙胺（6.6 mL，47.94 mmol）處理。將所得反應混合物攪拌5分鐘，隨後逐滴添加以上製備之反應物質，且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（150 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層用鹽水溶液（100 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗(((4-氯苯基) (1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） ，將其直接用於下一步驟中。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 486.13 [M+Na]+
(((4-氯苯基) (1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L -白胺酸（6）
在0℃下向(((4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 5 ） （5.6 g，12.09 mmol）於THF（40 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（870 mg，36.28 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L -白胺酸（ 6 ） 。TLC系統：100% EtOAc   Rf：0.1LCMS (ESI)：m/z 472.19 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-2-((((4-氯苯基) (1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(((4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L -白胺酸（ 6 ） （4.5 g，10.02 mmol）、DMF（30 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（9.5 g，25.05 mmol）、DIPEA（4.7 mL，30.05 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（2.23 g，12.02 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在溶離7%甲醇/二氯甲烷下，得到(2S )-2-((2S )-2-((((4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 618.25 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（8）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-((((4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （1.0 g，1.62 mmol）於二氯甲烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.2 mL，2.43 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（8 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 590.34 [M+H]+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物C181）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（8 ）（100 mg，0.197 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（167 mg，0.394 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）及鹽水（1 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi flash NP純化，3%甲醇/二氯甲烷溶離，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C181 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 588.1 [M+H]+
((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（10）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物 C181 ） （450 mg，0.731 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下添加吡啶（0.25 mL，3體積）、異氰基環丙烷（9 ）（97 mg，1.462 mmol）、隨後TFA（0.11 mL，1.462 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL），隨後鹽水（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 673.58 (M+H)+
((S )-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物C201）
在0℃下向((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 10 ） （200 mg，0.297 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（378 mg，0.892 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(4-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物 C201 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 671.1 [M+H]+
實例141：化合物C195之合成
Figure 02_image497
((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
將((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C175 ） （190 mg，0.283 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.1 mL,0.851 mmol）、異氰基環丙烷（1 ）（0.03 mL，0.425 mmol），隨後在0℃下添加TFA（0.06 mL，0.867 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL）、鹽水溶液（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 754.33[M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C195）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 2 ） （175 mg，0.231 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（196 mg，0.4635 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C195 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 752.3 (M+H)+
實例142：化合物C185及C184之合成
Figure 02_image499
Figure 02_image501
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（7）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-((((R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1 ）（0.77 g，1.19 mmol）於THF（7 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.19 mL，2.30 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 2 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.2  LCMS (ESI)：m/z 616 [M+H] +
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（3）
將((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 2 ） （630 mg，1.01 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（6.5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.31 g，3.0 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(R)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 3 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM   Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 614.30 [M+H] +
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（5）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(R)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 3 ） （510 mg，0.831 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（ 4 ） （111 mg，1.66 mmol）、吡啶（0.262 mL，3.3 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.12 mL，1.66 mmol）且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 5 ） 。TLC系統：5%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 699.3 [M+H] +
((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C185）
將((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 5 ） （500 mg，0.71 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（750 mg，1.70 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(R )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C185 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM  Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 697.2 [M+H] +
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（2）
在0℃下向(S )-2-((S )-2-((((S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （0.700 g，1.08 mmol）於DCM（7 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1 mL，2.177 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 2 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.2  LCMS (ESI)：m/z 616.61 [M+H] +
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（3）
將((S )-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯(S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 2 ） （620 mg，1.01 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（6.5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.282 g，3.0 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 3 ） 。TLC系統：10%甲醇/DCM    Rf：0.4 LCMS (ESI)：m/z 614.30 [M+H] +
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（10）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 3 ） （600 mg，0.978 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（ 4 ） （131.1 mg，1.957 mmol）、吡啶（0.3 mL，3.915 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.15 mL，1.95 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 5 ） 。TLC系統：10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 699.2 [M+H] +
((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C184）
將((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S)-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 5 ） （400 mg，0.71 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（727 mg，1.716 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(S )-2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C184 ）。TLC系統：10%甲醇/DCM   Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 697.2 [M+H] +
實例143：化合物C187及C203之合成
Figure 02_image503
(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（2）
在0℃下向1-(3-氯苯基)環丙烷-1-甲酸（1 ）（10 g，51.02 mmol）於THF（200 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加LiAlH4 ，且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在15%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到化合物(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（2 ）。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.6
1-(3-氯苯基)環丙烷-1-甲醛（3）
將(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（2 ）（8 g，4.39 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（80 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（2.79 g，6.59 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（100 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 50 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 50 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到1-(3-氯苯基)環丙烷-1-甲醛（ 3 ） 。vTLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 181.1 [M+H]-
(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（5）
在-30℃下向1-(3-氯苯基)環丙烷-1-甲醛（ 3 ） （6.5 g，36.11 mmol）於THF（200 mL）中之攪拌溶液中逐滴添加(3-氯苯基)溴化鎂（ 4 ） ，且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用水（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在08%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（ 5 ） 。TLC 系統 ： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 315.13 [M+Na+H]+
(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（7）
在0℃下向(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲醇（ 5 ） （5.0 g，17.06 mmol）於乙腈（50 mL）中之攪拌溶液中添加TEA（8.30 mL，59.7 mmol）、DSC（10.9 g，42.01 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。隨後，添加(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 6 ） ，且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（50 mL）稀釋，且用水（50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 464.16 [M+H]+
(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（8）
在0℃下向(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸甲基甲酯（ 7 ） （4.9 g，10.50 mmol）於THF（30 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.33 g，31.66 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（ 8 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 450.1 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（9）
在0℃下向(((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-L-白胺酸（ 8 ） （1.2 g，2.60 mmol）、DMF（12 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（765 mg，4.01 mmol）、HOBt（541 mg，4.01 mmol）、DIPEA（1.42 mL，8.01 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ） （1.08 g，5.847 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在50%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)-胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） （1.2 g，1.96 mmol，產率75%）。TLC 系統： 乙酸乙酯Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 618.5 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（10）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 9 ） （0.750 g，1.20 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4之THF（1.55 mL，2.45 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮為((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 10 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.2  LCMS (ESI)：m/z 590.5 (M+H)+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物C203）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸酯（ 10 ） （320 mg，0.54 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（689 mg，1.62 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在5%二氯甲烷/甲醇下溶離，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物 C203 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 588.0 (M+H) +
((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（12）
在0℃下向((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸酯（化合物 C203 ） （290 mg，0.49 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（11 ）（66 mg，0.98 mmol）、吡啶（0.15 mL，1.97 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.075 mL，0.91 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 12 ） 。TLC系統：5%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 673.2 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物C187）
將((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸酯（ 12 ） （290 mg，0.43 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（457 mg，1.02 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物 C187 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM     Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 671.1 (M+H)+
實例144：化合物C188及C212之合成
Figure 02_image505
Figure 02_image507
2,2-二甲基-1-(4-硝基哌啶-1-基)丙-1-酮（2）
將4-硝基哌啶鹽酸鹽（1 ）（2.9 g，22.307 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（30 mL）中，在-20℃下同時添加三甲基乙酸酐（6.5 mL，33.461 mmol）及Et3 N（9.4 mL，66.921 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（40 mL）淬滅，用DCM（2 × 30 mL）萃取，將有機層用水（2 × 20 ml）、鹽水溶液（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到呈無色液體狀之2,2-二甲基-1-(4-硝基哌啶-1-基)丙-1-酮（2 ）（2.5 g，11.68 mmol，產率52%）。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 215.18 [M+H]+
(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((4-硝基-1-三甲基乙醯基哌啶-4-基)甲基)戊二酸二甲酯（3）
在0℃下向(S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（中間物-5 ）（3.84 g，13.395 mmol）於ACN（30 mL）中之攪拌溶液中添加2,2-二甲基-1-(4-硝基哌啶-1-基)丙-1-酮（ 2 ） （2.4 g，11.162 mmol）及DBU（2.19 mL，14.42 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((4-硝基-1-三甲基乙醯基哌啶-4-基)甲基)戊二酸二甲酯（3 ）。TLC 系統： 30% EtOAc/石油醚Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 502.47 (M+H)+
(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4）
在-10℃下向(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((4-硝基-1-三甲基乙醯基哌啶-4-基)甲基)戊二酸二甲酯（3 ）（4.9 g，9.760 mmol）於甲醇（10 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（1.38 g，10.737 mmol），隨後添加硼氫化鈉（1.85 g，48.80 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨（50 mL）淬滅，且用10% MeOH/DCM（3 × 25 mL）萃取，將經合併之有機層用水（2 × 20 ml）、鹽水溶液（25 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 440.45 (M+H)+
(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段-30）
在0℃下向(2S)-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（4 ）（3.2 g，7.954 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加1,4-二
Figure 02_image011
烷.HCl（20 mL），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片 段 30 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 340.35 (M+H)+
2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（5）
隨後在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ） （1.0 g，2.941 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.0 g，4.411 mmol）、HOBt（0.842 g，4.411 mmol）、DIPEA（1.52 mL，8.823 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -30 ）（1.55 g，4.218 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 60 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，藉由在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 661.61 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （1.0 g，1.371 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.3 mL，2.743 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 633.4 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C212）
將((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） （200 mg，0.31 mmol）之攪拌溶液溶解於EtOAc（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（534 mg，1.26 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C212 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 631.3 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8)
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C212 ）（300 mg，0.47 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（7 ）（48 mg，0.71 mol）、吡啶（0.15 mL，1.716 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.1 mL，0.858 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 716.6 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C188）
將((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（8 ）（260 mg，0.36 mmol）之攪拌溶液溶解於EtoAc（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（462 mg，1.019 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷稀釋（10 mL），且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C188 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 714.2 (M+H)+
實例145：化合物C193及C190之合成
Figure 02_image509
2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段 -49 ） （1 g，2.90 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（833 mg，4.36 mmol）、HOBt（590 mg，4.36 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.7 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -19 ）（843 mg，2.90 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 580.3 [M+H]
N-((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（2）
在0℃下向2-((S)-3-環己基-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （900 mg，1.55 mmol）於DCM（9 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.5 mL，3.10 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（30 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N-((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（2 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 553.58 [M+H]+
N-((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C193）
將N-((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（2 ）（150 mg，2.715 mmol）之攪拌溶液中溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（230 mg，5.43 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用DCM（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 30 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 30 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C193 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 551.2 (M+H)+
N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（4）
將N-((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C193 ） （370 mg，0.672 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.1 mL，2.01 mmol）、異氰基環丙烷（3 ）（0.07 mL，1.008 mmol），隨後在0℃下添加TFA（0.15 mL，1.34 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL）、鹽水溶液（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 635.3[M+H]+
N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C190）
在0℃下向N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） （200 mg，0.314 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（267 mg，0.629 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C190 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 634.2 (M+H)+
實例146：化合物C191之合成
Figure 02_image511
N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（2）
將N-((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（500 mg，0.904 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（60 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1.5 mL，3體積）、異氰基環丙烷（ 1 ） （121 mg，1.80 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.2 mL，2.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 30 mL）、鹽水溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.7LCMS (ESI)：m/z 638.36 [M+H]+
N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C191）
在0℃下向N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 2 ） （400 mg，0.62 mmol）於DCM（50 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（798 mg，1.59 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C191 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.8LCMS (ESI)：m/z 636.3 (M+H)+
實例147：化合物C192及C223之合成
Figure 02_image513
2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -52 ）（1.3 g，3.2 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（915 mg，4.7 mmol）、HOBT（646 mg，4.7 mmol）、DIPEA（1.7 mL，3體積）及2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -19 ） （926 mg，3.2 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/DCM溶離，得到2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 644.8 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
在0℃下向2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1 g，1.55 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.55 mL，3.10 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2 ）。TLC 系統： 5% MeOH/DCMRf 0.3LCMS (ESI)：m/z 616.5 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C223）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2 ）（850 mg，1.37 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.17 g，4.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C223 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 614.2 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4）
將((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C223 ） （600 mg，1.25 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（60 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1.8 mL，3體積）、異氰基環丙烷（3 ）（126.41 mg，1.88 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.2 mL，2.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 30 mL）、鹽水溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 700.50 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C192）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） （450 mg，0.79 mmol）於EtOAc（50 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（677 mg，1.59 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C192 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 697.2 (M+H)+
實例148：化合物C194及C215之合成
Figure 02_image515
((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物C194）
在0℃下向((1-苯甲基環丁氧基)羰基)-L -白胺酸（酸 - 片段 -25 ） （300 mg，0.940 mmol）於DMF（4 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（394 mg，1.410 mmol）、NMM（0.2 mL，1.880 mmol）及(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -23 ）（270 mg，128 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，隨後製備型HPLC，得到((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C194 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 506.1 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-羥基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物C215）
向((S )-1-(((S )-4-氯-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C194 ） （280 mg，0.554 mmol）於DMF（4 mL）中之攪拌溶液中添加苯基乙醛酸（124 mg，0.831 mmol）及CsF（167 mg，1.108 mmol），且加熱至65℃維持2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（40 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將有機層合併，且用冷水（2 × 30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗產物，將此粗產物溶解於甲醇（5 ml）中，在0℃下添加K2 CO3 （7 mg），且攪拌1小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。濃縮反應混合物，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-羥基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-苯甲基環丁酯（化合物 C215 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 488.3 (M+H)+
實例149：化合物C195之合成
Figure 02_image517
((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
將((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C175 ） （190 mg，0.283 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.1 mL,0.851 mmol）、異氰基環丙烷（1 ）（0.03 mL，0.425 mmol），隨後在0℃下添加TFA（0.06 mL，0.867 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL）、鹽水溶液（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 754.33[M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C195）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 2 ） （175 mg，0.231 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（196 mg，0.4635 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C195 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 752.3 (M+H)+
實例150：化合物C196之合成
Figure 02_image519
((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C152 ） （350 mg，0.693 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.75 mL，3體積）、異氰基環丙烷（1 ）（55 mg，0.831 mmol），隨後在0℃下添加TFA（0.07 mL，1.386 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL）、鹽水溶液（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 591.2 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C196）
在0℃下向((2S )-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） （200 mg，0.338 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（431 mg，1.016 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C196 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 589.1 (M+H)+
實例151：化合物C197之合成
Figure 02_image521
((2S)-1-(((2S)-4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C197）
將(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -28 ） （150 mg，0.442 mmol）及(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ） （164 mg，0.53 mmol）於DMF（20 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此淺黃色溶液依次用HATU（252 mg，0.66 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.12 mL，0.88 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-(((2S)-4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C197 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 594.47 [M+H]+
實例152：化合物C198之合成
Figure 02_image524
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ） （1 g，2.94 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（844 mg，4.42 mmol）、HOBt（596 mg，4.42 mmol）、DIPEA（1.2 mL，8.84 mmol），隨後添加2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（885 mg，3.53 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸乙酯（ 2 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 536.51 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（3）
在0℃下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （900 mg，1.63 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.6 mL，3.27 mmol），隨後將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用飽和氯化銨溶液淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 508.55[M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C198）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 3 ） （200 mg，0.39 mmol）於乙酸乙酯（6 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（334 mg，0.78 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C198 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 506.1 [M+H]+
實例153：化合物C199及C208之合成
Figure 02_image526
((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C199）
將(S )-3-((S )-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -23 ） （540 mg，2.252 mmol）及(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -23 ） （500 mg，1.501 mmol）於DMF（10 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此淡黃色溶液依次用HATU（856 mg，2.252 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.3 mL，3.003 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到黃色糊漿。藉由正相層析純化此材料，得到((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C199 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM     Rf：0.6LCMS (ESI)：m/z 520.1 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-羥基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C208)
將((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（200 mg，0.385 mmol）及苯甲醯基甲酸（87 mg，0.577 mmol）於DMF（4 mL）中之溶液置於N2 氛圍下。此澄清淺黃色溶液CsF（116 mg，0.770 mmol）用處理，隨後加熱至65℃。4小時後，將黃色懸浮液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（60 mL）稀釋，用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌一次，經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈粗黃色泡沫狀之粗2-側氧基-2-苯基乙酸(3S)-3-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酯。C35 H43 N3 O8 之MS (ESI+)m/z 633.3 (M+H)+ 。將此粗產物放入甲醇（20 mL）中，置於N2 氛圍下，且在劇烈攪拌下用碳酸鉀（10 mg，0.04 mmol）處理。1小時後，在真空中移除揮發物（浴＜ 30℃），得到粗產物。藉由正相層析純化此材料，得到((S)-1-(((S)-4-羥基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C208 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.55LCMS (ESI)：m/z 501.28 [M+H]+
實例154：化合物C202及C210之合成
Figure 02_image528
Figure 02_image530
2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -55 ）（1 g，2.45 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.701 g，3.671 mmol）、HOBt（0.49 g，3.671 mmol）、DIPEA（1.2 mL，7.35 mmol）及2-胺基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -25 ）（1 g，2.94 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 729.71 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
在0℃下向2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.0 g，1.371 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.3 mL，2.743 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 701.24 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C202）
將((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） （700 mg，1.0 mmol）之攪拌溶液溶解於EtOAc（20 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（1.27 g，3.0 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C202 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 699.3 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4）
在0℃下向所得((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C202 ）（300 mg，0.42 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（3 ）（57 mg，0.858 mmol）、吡啶（0.13 mL，1.716 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.1 mL，0.858 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4 ）。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 784.3 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3, 4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1, 8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C210）
將((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4 ）（200 mg，0.255 mmol）之攪拌溶液溶解於EtoAc（10 mL中），在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（324 mg，0.765 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（10 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-三甲基乙醯基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C210 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 782.4 (M+H)+
實例155：化合物C222及C205之合成
Figure 02_image532
2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（2）
在0℃下向(2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 1 ） （1.7 g，3.57 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl （1 g，5.36 mmol）、HOBt（0.7 g，5.36 mmol）、DIPEA（1.8 mL，10.73 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -21 ） （0.98 g，3.93 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在30%乙酸乙酯/石油醚下溶離，且在SFC純化之後，得到2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 7 0%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 672.60 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（3）
在0℃下向2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （1.1 g，1.63 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加LiBH2 （1.6 ml，3.27 mmol），且繼續攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（10 ml）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 10 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 3 ） 。TLC 系統： 7 0%乙酸乙酯/石油醚Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 644.49 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C222）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-羥基-3-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（3 ） （230 mg，0.357 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（379 mg，0.89 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C222 ） 。TLC 系統： 05%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 642.35 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（6）
將((2S)-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C222 ） （250 mg，0.436 mmol）及異氰基環丙烷（4 ）（58 mg，0.87 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（6 mL）中，隨後在0℃下添加吡啶（0.2mL），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中溶液添加TFA（99 mg，0.87 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 5 mL）、鹽水溶液（3 × 5 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 727.47 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C205）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（5 ） （250 mg，0.343 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（364 mg，0.858 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。3小時後，將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（20 mL）洗滌，且經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-1-(8-(甲磺醯基)-2-側氧基-1,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C205 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 725.01 [M+H]+
實例156：化合物C225及C206之合成
Figure 02_image534
2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -55 ）（1.2 g，2.91 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（844 mg，4.4 mmol）、HOBT（597 mg，4.4 mmol）、DIPEA（1.56 mL，8.8 mmol）及(2S)-2-胺基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -22 ）（1.03 g，3.5 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（30 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用70%乙酸乙酯/石油醚溶離為2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM       Rf ：0.5LCMS (ESI)：m/z 646.4 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
在0℃下向2-((2S)-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （800 mg，1.20 mmol）於THF（8 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.23 mL，2.40 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 2 ） 。TLC系統：5%MeOH/DCM   Rf 0.3LCMS (ESI)：m/z 618.6 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C225）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）（400 mg，0.64 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（823 mg，1.90 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C225 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 616.3 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（4）
將((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C225 ）（380 mg，0.64 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（0.24 mL，2.5 mmol）、異氰基環丙烷（3 ）（86 mg，1.29 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.10 mL，1.29 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 701.3 [M+H]+
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C206）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 4 ） （420 mg，0.61 mmol）於EtOAc（15 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（763 mg，1.81 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（35 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 15 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 15 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C206 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 699.3 (M+H)+
實例157：化合物C207之合成
Figure 02_image536
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.3 g，2.22 mmol）於THF（10 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（273 mg，6.65 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 572.5 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（900 mg，1.57 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.19 g，2.89 mmol）、DIPEA（0.3 mL，3體積）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 3 ） （486 mg，2.36 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 681.7 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C207）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸酯（ 4 ） （200 mg，0.44 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（189 mg，1.09 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C207 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 599.1 (M+H)+
實例158：化合物C250及C208之合成
Figure 02_image538
Figure 02_image540
(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（3）
在0℃下向(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲橋（ 1 ） （2.5 g，8.51 mmol）於乙腈（25 mL）中之攪拌溶液中添加Et3 N（4.16 mL，29.10 mmol）、DSC（5.47 g，21.01 mmol），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC監測。隨後添加(S)-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯（ 2 ） ，且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發，且用水（25 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（25 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z =.504.5 [M+H]+
(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（4）
在0℃下向(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸甲酯（ 3 ） （2.5 g，4.90 mmol）於THF（15 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（416 mg，9.92 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮為(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） 。TLC 系統： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 490.2 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（ 4 ） （1 g，2.0 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（585 mg，3.01 mmol）、HOBt（414 mg，3.01 mmol）、DIPEA（1.09 mL，6.1 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ） （542 mg，2.10 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 乙酸乙酯Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 618.5 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （900 mg，1.30 mmol）於THF（9 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.3 mL，2.70 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 6 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.2  LCMS (ESI)：m/z 630.3 (M+H)+
((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯)（化合物C250）
將((S)-3-環己基-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 6 ） （200 mg，0.31 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（403 mg，0.95 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯)（化合物 C250 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 628.2 (M+H)+
((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（8）
在0℃下向((S)-3-環己基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯)（化合物 C250 ） （180 mg，0.28 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（7 ）（38 mg，0.57 mmol）、吡啶（0.09. mL，1.14 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.046 mL，0.57 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 8 ） 。TLC系統：5%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 713.6 [M+H]+
((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物C208）
將((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（ 8 ） （200 mg，0.28 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（297 mg，0.70 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((S)-3-環己基-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯(3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲酯（化合物 C208 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM  Rf：0.3LCMS (ESI)：m/z 711.3 (M+H)+
實例159：化合物C209之合成
Figure 02_image542
((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C209）
將3-((S)-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -23 ）（69.3 mg，0.28 mmol）及((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -38 ）（100 mg，0.23 mmol）於DMF（20 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此淺黃色溶液依次用HATU（136.62 mg，0.35 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.1 mL，0.47 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C209 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 604.2 [M+H]+
實例160：化合物C214之合成
Figure 02_image544
2-((S )-2-(4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(4-甲氧基-1H -吲哚-2-羰基)-D-白胺酸（酸片段 -60 ）（1.5 g，5 mmol）於DMF(15 mL）中之攪拌溶液中添加EDC.HCl（1.42 g，7.4 mmol）、HOBT（1 g，7.4 mmol）及DIPEA（2.1 mL，12.3 mmol），隨後添加2-胺基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -19 ） （1.7 g，5.9 mmol），且將所得反應混合物在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用5%甲醇/二氯甲烷溶離，得到2-((S )-2-(4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMR f ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 541.47 [M+H]+
N -((2S )-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（2）
在0℃下向2-((S )-2-(4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 2 ） （0.8 g，1.48 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（1.5 mL，2.96 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用飽和氯化銨溶液（50 mL）淬滅，且用DCM（2 × 50 mL）萃取。將經合併之有機層用水（50 mL）、鹽水溶液（50 mL）洗滌，且經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到N -((2S )-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（2 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f 0.3LCMS (ESI)：m/z 513.30 [M+H]+
4-甲氧基-N -((2S )-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物C214）
在0℃下向N -((2S )-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H -吲哚-2-甲醯胺（2 ）（100 mg,0.195 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（124 mg，0.292 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。反應物質經由矽藻土墊過濾，且將矽藻土墊用乙酸乙酯（30 mL）充分洗滌。隨後將有機層用10%硫代硫酸鈉溶液（2 × 20 mL）、隨後用飽和碳酸氫鈉溶液（2 × 20 mL）、水（1 × 20 mL）、鹽水（ 1 × 20 mL）洗滌。隨後將有機層經硫酸鈉乾燥，且在真空下蒸發，得到4-甲氧基-N -((2S )-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)-1H -吲哚-2-甲醯胺（化合物 C214 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMR f ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 511.3 [M+H]+
實例161：化合物C209及C236之合成
Figure 02_image546
((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C209）
將3-((S)-2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)吡咯啶-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -23 ）（69.3 mg，0.28 mmol）及((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -38 ）（100 mg，0.23 mmol）於DMF（20 mL）中之溶液置於N2 氛圍下，且冷卻至0℃。此淺黃色溶液依次用HATU（136.62 mg，0.35 mmol）及N -甲基
Figure 02_image402
啉（0.1 mL，0.47 mmol）處理。1小時後，將反應物用1:1冰/飽和NaHCO3 （20 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將經合併之有機物用鹽水（100 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C209 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 604.2 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-羥基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C236）
將((S)-1-(((S)-4-氯-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C209 ） （550 mg，0.9097 mmol）、苯基乙醛酸（204.86 mg，1.364 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液置於N2 氛圍下。此澄清淺黃色溶液用氟化銫（343.41 mg，2.27 mmol）處理，隨後加熱至65℃。4小時後，將現在為黃色的懸浮液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（60 mL）稀釋，用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈粗黃色泡沫狀之粗2-側氧基-2-苯基乙酸(3S)-3-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酯。MS (ESI+) for   C39H44ClN3O8m/z 718.75 (M+H)+.將此粗產物放入甲醇（40 mL）中，置於N2 氛圍下，且在劇烈攪拌下用碳酸銫（144.64 mg，0.446 mmol）處理。1小時後，在真空中移除揮發物（浴＜ 30℃），得到粗產物。將粗化合物提交至製備型HPLC，得到((S)-1-(((S)-4-羥基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C236 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 586.2 [M+H]+
實例162：化合物C211之合成
Figure 02_image548
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(乙胺基)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C211）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 1 ） （200 mg，0.27 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（142 mg，0.831 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加乙胺.HCl（600 mg，7.358 mmol）、DIPEA（0.8 mL，4.49 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(乙胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基) -1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C211 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 667.3 [M+H]+
實例163：化合物C216之合成
Figure 02_image550
2-甲基-1-苯基丙-1-醇（3）
在-30℃下向苯基溴化鎂（ 2 ） （139 mL，138.8 mmol）、THF（100 mL）之攪拌溶液中添加1-(3-氯苯基)異丁醛（ 1 ） （5 g，69.44 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在7%乙酸乙酯/己烷下溶離，得到2-甲基-1-苯基丙-1-醇（ 3 ） 。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 133.26 [M-OH]+
(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向2-甲基-1-苯基丙-1-醇（3 ）（2.0 g，13.3 mmol）及(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（2.95 g，15.96 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（6 mL，3體積），隨後添加三光氣（1.97 g，6.65 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）、隨後鹽水（50 mL）洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（5）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 384.21 [M+Na]+
(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（6）
在室溫下向(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（5 ）（3.0 g，8.31 mmol）於THF（20 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（598 mg，24.93 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（6 ）。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 370.19 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（ 6 ） （2.5 g，7.21 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（6.84 g，18.01 mmol）、DIPEA（3.4 mL，21.6 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ） （1.6 g，8.64 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 516.47 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7 ）（500 mg，0.97 mmol）於THF（4 mL）及水（2 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（70 mg，2.91 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8 ）。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 502.31 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙酯（10）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8 ）（400 mg，0.798 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（606 mg，1.59 mmol）、DIPEA（0.37 mL，2.39 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 9 ） （400 mg，1.99 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙酯（ 10 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 611.41 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C216）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙酯（ 10 ） （350 mg，0.57 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（296 mg，1.72 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C216 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 529.3 (M+H)+
實例164：化合物C217之合成
Figure 02_image552
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （910 mg，1.45 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（178 mg，4.35 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 1 00%乙酸乙酯Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 612.67 [M+H]+
((2S )-1-((4-氰基-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （820 mg，1.339 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（562 mg，2.00 mmol）、DIPEA（0.74 mL，4.017 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（414 mg，2.009 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（40 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 721.49 [M+H]+
((2S )-1-((4-胺基-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C217）
在0℃下向((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （300 mg，0.446 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（215 mg，1.249 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-1-((4-胺基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C217 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 639.3 [M+H]+
實例165：化合物C218之合成
Figure 02_image554
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（酸片段 -38 ） （1.6 g，3.83 mmol）、DMF（16 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl （1 g，5.75 mmol）、HOBt（0.77 g，5.75 mmol）、DIPEA（1.6 mL，11.50 mmol）及2-胺基-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -21 ）（1.15 g，4.60 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（80 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 614.48 [M+H]+
2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （490 mg，0.797 mmol）於THF（5 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（98 mg，2.393 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 586.56 [M+H]+
((2S )-1-((4-氰基-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（3）
在0℃下向2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （310 mg，0.516 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（217 mg，0.774 mmol）、DIPEA（0.28 mL，1.54 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（159 mg，0.774 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（4 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 709.52 (M+H)+
((2S )-1-((4-胺基-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物C218）
在0℃下向((2S )-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 3 ） （240 mg，0.33 mmol）於甲醇（4 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（116 mg，0.676 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（2 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-1-((4-胺基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（化合物 C218 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 627.3 [M+H]+
實例166：化合物C235及C219之合成
Figure 02_image556
(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（化合物C235）
在室溫下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（ Int-9 ） （600 mg，0.779 mmol）於THF（2.5 mL）、水（2.5 mL）中之攪拌溶液中添加過硫酸氫鉀（717 mg，2.33 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用10%甲醇/DCM（3 × 15 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗化合，藉由製備型HPLC純化，得到(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（化合物 C235 ）。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 688.59 [M+H]+
(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-羥基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（2）
在0℃下向(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-側氧基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（化合物 C235 ） （1.0 g，1.45 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加NaCNBH3 （89 mg，1.45 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰冷的水（10 mL）淬滅，且用10%甲醇/二氯甲烷（3 × 20 mL）萃取，且用1N HCl溶液（2 × 15 mL）洗滌，隨後鹽水（20 mL）。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗產物，將其藉由正相combi-flash純化，藉由10%甲醇/DCM溶離，得到(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-羥基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（2 ）。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1(相同RF)LCMS (ESI)：m/z 692.36 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(二乙胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（4）
在0℃下向(3S )-3-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-2-羥基-4-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁酸（2 ）（600 mg，.868 mmol）於DMF（5 mL）中之攪拌溶液中添加HATU（494 mg，1.302 mmol）、DIPEA（0.5 mL，2.604 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘。向此中添加二乙胺（ 3 ） （6 mL），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(二乙胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 747.5 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(二乙胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物C219）
將((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(二乙胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（4）（350 mg，0.469 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（995 mg，2.348 mmol），且在室溫下攪拌5小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）及鹽水（1 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化來純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(二乙胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基pyrr olidin-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-(萘-2-基)丙酯（化合物 C219 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 745.3 (M+H)+
實例167：化合物C220之合成
Figure 02_image558
2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向2-((2S)-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （500 mg，0.74 mmol）於THF（5 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（60.9 mg，1.48 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 658.45 [M+H]+
((2S)-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)己醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（350 mg，0.531 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（302 mg，0.796 mmol）、DIPEA（0.27 mL，1.59 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（ 3 ） （172 mg，0.796 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在4%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((2S)-1-((4-氰基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 767.55 [M+H]+
((2S)-1-((4-胺基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C220）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基己-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-2-甲基-1-苯基丙酯（ 4 ） （200 mg，0.26 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（112 mg，0.65 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時，且添加氨水（1 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（40 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-1-((4-胺基-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3,4-二側氧基丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C220 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 685.2 (M+H)+
實例168：化合物C221之合成
Figure 02_image560
(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （3 g，10.48 mmol）於THF（15 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（800 mg，20.97 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 273.20 [M+H]+
((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（3）
在室溫下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2 ）（1 g，3.67 mmol）於DCM中之攪拌溶液中添加CDI(1.1 g，7.35 mmol），且在40℃下攪拌2小時。此後添加環丙烷磺醯胺（889 mg，7.35 mmol）、DBU（1.1 mL，7.35 mmol），且攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。在減壓下直接反應混合物。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在15%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 376.46 (M+H)+
(S )-2-胺基-N -(環丙磺醯基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙醯胺鹽酸鹽（胺片段-29）
在0℃下向((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 4 ） （1.2 g，3.2 mmol）於1,4二
Figure 02_image011
烷（10 mL）中之攪拌溶液中添加逐滴含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（15 mL），且將混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(S )-2-胺基-N -(環丙磺醯基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙醯胺鹽酸鹽（胺片段 -29 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 276.21 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C221）
在0℃下向(S)-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ） （150 mg，0.442 mmol）、DMF（6 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（126 mg，0.663 mmol）、HOBt（89 mg，0.663 mmol）、DIPEA（0.2 mL，1.327 mmol）及(S )-2-胺基-N - (環丙基磺醯基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙醯胺鹽酸鹽（胺片段 -29 ） （165 mg，0.530 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C221 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 597.2 [M+H]+
實例169：化合物C290及C229之合成
Figure 02_image563
硝基環丁烷（2）
在室溫下向溴環丁烷（1 ）（10 g，74.07 mmol）於DMSO（100 mL）中之攪拌溶液中添加間苯三酚（9.3 g，74.07 mmol），隨後添加脲（8.88 g，148.14 mmol）、亞硝酸鈉（25.5 g，370.37 mmol），且將所得反應混合物在50℃下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用冰冷的水（150 mL）淬滅，且用二乙醚（3 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用水（150 ml）、鹽水溶液（150 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在最小減壓下蒸發，得到2 ，將其直接用於下一步驟中。
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基-環丁基)甲基)戊二酸二甲酯（3）
在室溫下向以上粗液體於ACN（60 mL）中之攪拌溶液中添加2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-亞甲基戊二酸二甲酯（Int-5 ） （5.5 g，19.8 mmol）及DBU（9 mL，59.4 mmol），且繼續攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。在減壓下蒸發過量ACN。粗殘餘物將放入乙酸乙酯（200 mL）中，且用水（150 mL）及鹽水溶液（150 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，蒸發，且將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基-環丁基)甲基)戊二酸二甲酯（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/石油醚R f ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 411.31 [M+Na]+
2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（4）
在-10℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-4-((1-硝基-環丁基)甲基)戊二酸二甲酯（3 ）（5 g，12.8 mmol）於甲醇（50 mL）中之攪拌溶液中添加氯化鎳（1.67 g，12.8 mmol），隨後添加硼氫化鈉（2.4 g，64.4 mmol），且使其緩慢達到室溫，且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（100 mL）淬滅，且用DCM（3 × 100 mL）萃取，將經合併之有機層用水（250 mL）、隨後鹽水溶液（200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物，且將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（4 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 349.25 [M+Na]+
2-胺基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段-26）
在0℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（4 ）（3 g，9.2 mmol）於1,4-二
Figure 02_image011
烷（30 mL）中之攪拌溶液中添加4N二
Figure 02_image011
烷.HCl（30 mL），且將所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物在減壓下蒸發。將粗殘餘物用正戊烷研磨，得到2-胺基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -26 ）。TLC 系統： 10% MeOH/DCMR f ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 227.26 [M+H]+
2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向(S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -2 ） （1.2 g，3.53 mmol）於DMF（12 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1 g，5.309 mmol）、HOBt（0.716 g，5.309 mmol）、DIPEA（1.88 mL，10.617 mmol）及2-胺基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -26 ）（0.927 g，3.539 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 100 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由正相層析純化，得到2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 548.40 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（6）
在0℃下向2-((S )-2-((((3-氯苯甲基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙酸甲酯（ 5 ） （1.2 g，2.193 mmol）於二氯甲烷（25 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.2 mL，4.387 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 520.63 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C229）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((1-羥基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 6 ） （150 mg，0.289 mmol）於乙酸乙酯（3 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（183 mg，0.433 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由正相層析純化，得到((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C229 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z 518.2 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（7）
將((2S )-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C229 ） （200 mg，0.386 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（5 mL）中，隨後在0℃下添加吡啶（0.124 mL，1.512 mmol）、異氰基環丙烷（51 mg，0.7736 mmol），隨後添加TFA（0.06 mL，0.7736 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 30 mL）、隨後用水（20 mL）及鹽水（20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 603.39 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C290）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 7 ） （170 mg，0.282 mmol）於乙酸乙酯（5 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（239 mg，0.564 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(6-側氧基-5-氮雜螺[3.4]辛-7-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C290 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.45LCMS (ESI)：m/z 601.53 [M+H]+
實例170：化合物C224之合成
Figure 02_image566
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-((((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （12 g，20.869 mmol）於二氯甲烷（120 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（20.8 mL，41.739 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 100 mL）萃取，經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 548.57 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2-PK-1、2-PK-2、2-PK-3、2-PK-4）之對掌性HPLC純化
藉由製備型 SFC 條件管柱 / 尺寸 的((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 10 g ） 之SFC 純化： CHIRALPAK-IA-3（4.6 × 250 mm），3µ% CO2 ：60% %共溶劑：40%（乙腈:IPA 1:1），總流速：3.0 g/min背壓：1500 Psi，溫度：3℃ UV：MAX PLOT溶解度：甲醇2-PK-1 、 2-PK-2 2-PK-3 2-PK-4 .TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z = 548.57 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(1S , 2S )-2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C224）
將((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸(1S ,2S )-2-(3-氯苯甲基)環戊酯（2-PK-1 ）（0.1 g，0.182 mmol）之攪拌溶液溶解於二氯甲烷（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（0.155 g，0.365 mol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸(1S ,2S )-2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C224 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z = 546.2 [M+H]+
實例171：化合物C225之合成
Figure 02_image568
((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C225）
在0℃下向((2S)-3-環己基-1-((1-羥基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲2-(3-氯苯甲基)環戊酯（ 1 ） （400 mg，0.64 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（823 mg，1.90 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（10 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((2S)-3-環己基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-8-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C225 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 616.3 (M+H)+
實例172：化合物C226及C246之合成
Figure 02_image570
Figure 02_image572
((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（1）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙-1-醇（ 1 ） （2.5 g，8.51 mmol）於乙腈（25 mL）中之攪拌溶液中添加Et3 N（4.16 mL，29.10 mmol）、DSC（5.47 g，21.01 mmol），且在室溫下攪拌4小時。反應之進展藉由TLC監測。隨後添加L-白胺酸甲酯（ 2 ） （3.08 g，21.01 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下蒸發，且用水（25 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（25 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統 ： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z =488.23 [M+Na+H]+
((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段-57）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 1 ） （1.8 g，3.80 mmol）於THF（11 mL）、水（7 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（325 mg，7.74 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮為((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） 。TLC 系統 ： 50%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 474.2 [M+Na+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 4 ） （1 g，2.0 mmol）、DMF（10 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（633 mg，3.31 mmol）、HOBt（448 mg，3.31 mmol）、DIPEA（1.1 mL，6.63 mmol）及(S)-2-胺基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 胺片段 -2 ） （586 mg，2.6 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在60%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） 。TLC 系統： 乙酸乙酯Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 620.6 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸(2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（6）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((3-氯苯基)(1-(3-氯苯基)環丙基)甲氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 5 ） （300 mg，4.8 mmol）於THF（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4之THF（0.48 mL，0.96 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 15 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 6 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.2  LCMS (ESI)：m/z 592.5 (M+H)+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(5-氯環己-1,5-二烯-1-基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C246）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 6 ） （100 mg，0.130 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（172 mg，0.401 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 15 mL）、飽和NaHCO3溶液（3 × 15 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(5-氯環己-1,5-二烯-1-基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C246 ） 。TLC系統：乙酸乙酯Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 590.2 (M+H)+
((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（8）
在0℃下向((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(5-氯環己-1,5-二烯-1-基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C246 ） （200 mg，0.33 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（7 ）（45 mg，0.67 mmol）、吡啶（0.10 mL，1.35 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，且添加TFA（0.055 mL，0.67 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用1N HCl溶液（5 mL）酸化，且用DCM（2 × 10 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（5 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。粗化合物得到((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 8 ） 。TLC系統：5%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2 LCMS (ESI)：m/z 675.2 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物C226）
將((2S)-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（ 8 ） （200 mg，0.29 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（314 mg，0.74 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗產物藉由正相純化來純化，得到((S)-1-(((S)-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氯苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C226 ） 。TLC系統：5%甲醇/DCM Rf：0.3 LCMS (ESI)：m/z 673.3 (M+H)+
實例173：化合物C227及C233之合成
Figure 02_image574
N-((2S)-1-((4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C227）
在0℃下向(4-甲氧基-1H-吲哚-2-羰基)-D-白胺酸（酸片段 -5 ） （600 mg，1.973 mmol）及3-(2-胺基-4-氯-3-側氧基丁基)-1-氮雜螺[4.5]癸-2-酮鹽酸鹽（胺片段 -19 ）（ 731.8 mg，2.368 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（1.12 g，2.959 mmol）及DIPEA（1.1 mL，5.921 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇及二氯甲烷溶離，得到N-((2S)-1-((4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C227 ） 。TLC系統：10% MeOH/DCM      Rf：0.6LCMS (ESI)：m/z 559.2 [M+H]+
N-((2S)-1-((4-羥基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C233）
將N-((2S)-1-((4-氯-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C227 ） （540 mg，0.9667 mmol）、苯基乙醛酸（217.93 mg，1.45 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液置於N2 氛圍下。此澄清淺黃色溶液用氟化銫(292.24 mg，1.93 mmol）處理，隨後加熱至65℃。4小時後，將現在為黃色的懸浮液冷卻至室溫，用乙酸乙酯（60 mL）稀釋，用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌一次，經MgSO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈粗黃色泡沫狀之粗2-側氧基-2-苯基乙酸3-((S)-2-(4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺基)-4-甲基戊醯胺基)-2-側氧基-4-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁酯。C37H44N4O8之MS (ESI+)m/z 673.7 (M+H)+.將此粗產物放入甲醇（40 mL）中，置於N2 氛圍下，且在劇烈攪拌下用碳酸銫（144.64 mg，0.446 mmol）處理。1小時後，在真空中移除揮發物（浴＜ 30℃），得到粗產物。將粗化合物提交至製備型HPLC，得到N-((2S)-1-((4-羥基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C233 ） 。TLC 系統： 10% MeOH/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 541.3 [M+H]+
實例174：化合物C228之合成
Figure 02_image576
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸酯（1）
在0℃下向(S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙酸（酸片段 -34 ） （1 g，3.183 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.91 g，4.774 mmol）、HOBt（0.645 g，4.774 mmol）、DIPEA（2 mL，9.549 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -19 ）（1.2 g，3.819 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 537.48 [M+H]+
2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸
在室溫下向2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.5 mg，2.723 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（350 mg，8.171 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2LCMS （ ESI ）： m/z 315.23 [M+H]+
N-((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（4）
在0℃下向2-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙酸（ 2 ） （1.3 g，2.425 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（1.4 g，3.638 mmol）、DIPEA（1.3 mL，7.276 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（602 mg，2.910 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到N-((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（4 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.4LCMS （ ESI ）： m/z 646.47 (M+H)+
3-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-2-側氧基-4-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁酸（化合物C228）
在0℃下向N-((2S)-1-((4-氰基-3-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 4 ） （500 mg，0.77 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加過硫酸氫鉀（476 mg，1.54 mmol），且在室溫下攪拌6小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到3-((S)-3-環己基-2-(1H-吲哚-2-甲醯胺基)丙醯胺基)-2-側氧基-4-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁酸（化合物 C228 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2LCMS （ ESI ）： m/z 565.2 [M+H]+
實例175：化合物C230之合成
Figure 02_image578
3-甲基-1-苯基丁-2-醇（3）
在-30℃下向2-苯基乙醛（166.6mL, 333.3 mmol）於THF（400 mL）中之攪拌溶液中添加異丙基溴化鎂（ 1 ） （8 g，111.1 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（500 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（2 × 200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到3-甲基-1-苯基丁-2-醇（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 147.1 [M-OH]
(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5）
在0℃下向3-甲基-1-苯基丁-2-醇（ 3 ） （6.5 g，39.5 mmol）於DCM（300 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（19.5 mL）、L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（6.8 g，47.4 mmol），隨後添加三光氣（5.84 g，19.75 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（100 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用（2 × 50 mL）NaHCO3 溶液洗滌，有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.4 LCMS (ESI)：m/z = 358.29 [M+Na] +
(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（6）
在室溫下向(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5 ） （5.0 g，14.9 mmol）於THF（10 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.83, 44.7 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） 。TLC系統：100% EtOAc   Rf：0.1LCMS (ESI)：m/z 344.39 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） （1 g，3.11 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.89 g，4.66 mmol）、HOBt（0.629 g，4.66 mmol）、DIPEA（1.71 mL，9.33 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.901 g，3.7 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇及二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z = 490.85 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-甲基-1-苯基丁-2-基酯（8）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-4-甲基-2-((((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)胺基)戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） （0.8 g，1.63 mmol）於二氯甲烷（30 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（3.2 mL，3.27 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-甲基-1-苯基丁-2-基酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 462.46 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸3-甲基-1-苯基丁-2-基酯（化合物C230）
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸3-甲基-1-苯基丁-2-基酯（ 8 ） （300 mg，0.644 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（551.1 mg，1.229 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）及鹽水（1 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物提交至製備型HPLC，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸3-甲基-1-苯基丁-2-基酯（化合物 C230 ） 。Rf：0.2LCMS （ ESI ）： m/z 460.2 [M+H]+
實例176：化合物C231之合成
Figure 02_image580
2, 2-二甲基-1-苯基丙-1-醇（3）
在-30℃下向苯基溴化鎂（ 2 ） （116 mL，116.27 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加三甲基乙醛（ 1 ） （5 g，58.13 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combiflash NP純化，化合物在8%乙酸乙酯/己烷下溶離，得到2, 2-二甲基-1-苯基丙-1-醇（3 ）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 147.06 [M-OH]+
(2S )-3-環己基-2-(((2, 2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（5）
在0℃下向2,2-二甲基-1-苯基丙-1-醇（3 ）（3 g，18.29 mmol）、(S )-2-胺基-3-環己基丙酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（4.0 g，21.94 mmol）於二氯甲烷（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（9 mL，3體積），隨後添加三光氣（2.7 g，9.14 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用DCM稀釋，且用1N HCl（50 mL）洗滌，將有機層用鹽水溶液（50 mL）洗滌，且經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到(2S )-3-環己基-2-(((2, 2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（5 ）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 432.32 [M+H]+
(2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（6）
在室溫下向(2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯（ 5 ） （6.0 g，16.00 mmol）於THF（15 mL）、水（15 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（1.15 g，48.00 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（6 ）。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 362.40 [M+H]+
(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2, 2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向(2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙酸（6 ）（2 g，5.54 mmol）、DMF（20 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（5.2 g，13.85 mmol）、DIPEA（2.6 mL，16.62 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 -2 ）（1.23 g，6.6 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取。將有機層合併，且用鹽水溶液（50 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2, 2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲基(甲酯（7 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 530.70 [M+H]+
((2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2, 2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸(甲酯（7 ）（700 mg，1.32 mmol）於THF（10 mL）、水（3 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（95 mg，3.96 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2S )-2-((2S )-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（8 ）。TLC系統：100% EtOAc   Rf：0.1LCMS (ESI)：m/z 516.60 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2,2-二甲基-1-苯基丙酯（10）
在0℃下向(2S )-2-((2S)-3-環己基-2-(((2,2-二甲基-1-苯基丙氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 8 ） （500 mg，0.97 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（737 mg，1.94 mmol）、DIPEA（0.45 mL，2.91 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（9 ）（500 mg，2.42 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在3%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2,2-二甲基-1-苯基丙酯（10 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 625.91 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-胺基-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2, 2-二甲基-1-苯基丙酯（化合物C231）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2,2-二甲基-1-苯基丙酯（ 10 ） （200 mg，0.32 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（165 mg，0.96 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加氨水（2 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-3-環己基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸2,2-二甲基-1-苯基丙酯（化合物 C231 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4
實例177：化合物C232之合成
Figure 02_image582
((S )-1-(甲氧基(甲基)胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（2）
在0℃下向(S )-2-((三級丁氧基羰基)胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 1 ） （5 g，18.38 mmol）於DMF（40 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（5.2 g，27.53 mmol）、HOBt（3.72 g，27.53 mmol）、NMM（5.56 mL，55.14 mmol）及N,O-二甲基羥基胺（2.13 g，22.058 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((S )-1-(甲氧基(甲基)胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 316.30 [M+H]+
((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（3）
在-78℃下向((S )-1-(甲氧基(甲基)胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 2 ） （1 g，3.17 mmol）於THF中之攪拌溶液中添加1M LAH（1.32 mL，3.17 mmol），且攪拌30分鐘。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.3
(S, E )-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯（5）
在室溫下向((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基甲酸三級丁酯（ 3 ） （250 mg，0.97 mmol）、2-(三苯基-l5-膦醯亞胺)乙酸乙酯（348 mg，0.976 mmol）於THF（10 mL）中之攪拌溶液中添加DBU（148 mg，0.976 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和氯化銨淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用2%甲醇/二氯甲烷溶離，得到(S,E )-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 327.21 (M+H)+
(S, E )-4-胺基-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯鹽酸鹽（胺片段-31）
在0℃下向(S,E )-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯（ 5 ） （350 mg，1.073 mmol）於1,4二
Figure 02_image011
烷（5 mL）中之攪拌溶液中添加逐滴含4N HCl之二
Figure 02_image011
烷（5 mL），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC監測。在減壓下蒸發反應混合物，獲得粗化合物，將所得粗產物用二乙醚研磨，得到(S,E )-4-胺基-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯鹽酸鹽（胺片段 -31 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 227.30 (M+H)+
(4S, E )-4-((2S)-2-(((1, 2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-5-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯（化合物C232）
在0℃下向((1,2-二苯基乙氧基)羰基)-L -白胺酸（酸片段 -22 ） （200 mg，0.563 mmol）於DMF（6 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（161 mg，0.84 mmol）、HOBt（114 mg，0.84 mmol）、DIPEA（0.2 mL，1.68 mmol）及(S,E )-4-胺基-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯鹽酸鹽（胺片段 -31 ）） （152 mg，0.675 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（20 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到(4S, E )-4-((2S )-2-(((1, 2-二苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-5-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)戊-2-烯酸乙酯（化合物 C232 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 564.3 [M+H]+
實例178：化合物C234之合成
Figure 02_image584
N -((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（1）
向甲基4-甲氧基-N -((2S )-4-甲基-1-側氧基-1-((1-側氧基-3-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C214 ）（350 mg，0.686 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加異氰基環丙烷（69 mg，1.02 mmol）、吡啶（216 mg，2.74 mmol），隨後攪拌15分鐘，隨後在0℃下添加TFA（80 mg，0.75 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl溶液（15 mL）、隨後鹽水（15 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到粗殘餘物。將此殘餘物用二乙醚（30 mL）研磨，得到N -((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 596.63 [M+H]+
N -((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物C234）
將N -((2S )-1-((4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（ 1 ） （140 mg，0.23 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（149 mg，0.35 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物經由矽藻土床過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到N-((2S)-1-((4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-(2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)-4-甲氧基-1H-吲哚-2-甲醯胺（化合物 C234 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 594.3 [M+H]+
實例179：化合物C237之合成
Figure 02_image586
在-70℃下向環己烷甲醛（ 1 ）（ 10 g，0.0998 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加苯甲基溴化鎂（ 2 ） （250 mL，0.2496 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（500 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（2 × 200 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用20%乙酸乙酯/己烷溶離，得到1-環己基-2-苯基乙-1-醇（ 3 ） 。TLC 系統： 20%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 187.2 [M-OH]
((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5）
在0℃下向1-環己基-2-苯基乙-1-醇（ 3 ） （6 g，29.3 mmol）於DCM（100 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（18 mL）、L-白胺酸甲酯鹽酸鹽（4 ）（5.1 g，35.1 mmol），隨後添加三光氣（4.4 g，14.6 mmol）添加，且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（100 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用（2 × 50 mL）NaHCO3 溶液洗滌，有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf：0.4 LCMS (ESI)：m/z = 398.35 [M+Na] +
((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸（6）
在室溫下向((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（5 ） （2.5 g，6.663 mmol）於THF（10 mL）、水（10 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（600 mg，13.32 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(((3-甲基-1-苯基丁-2-基)氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 384.47 [M+Na]+
(2S)-2-((2S)-2-(((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（7）
在0℃下向((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 6 ） （1 g，2.7683 mmol）於DMF（20 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（0.79 g，4.1524 mmol）、HOBt（0.561 g，4.1524 mmol）、DIPEA（1.6 mL，8.3049 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.620 g，3.3219 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%甲醇及二氯甲烷溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-(((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.6LCMS (ESI)：m/z =530.7 [M+H]+
((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-環己基-2-苯基乙酯（8）
向(2S)-2-((2S)-2-(((1-環己基-2-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲基甲酯（ 7 ） （0.5 g，0.944 mmol）於二氯甲烷（30 mL）中之攪拌溶液中在0℃下添加含2M LiBH4 之THF（2 mL，1.889 mmol），且攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl溶液淬滅，且用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-環己基-2-苯基乙酯（ 8 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 502.48 [M+H]+
((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-環己基-2-苯基乙酯（化合物C237)
將((S)-1-(((S)-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1-環己基-2-苯基乙酯（ 8 ） （270 mg，0.5385 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（10 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（685.1 mg，1.6157 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用二氯甲烷（20 mL）稀釋，且用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）及鹽水（1 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物提交至製備型HPLC，得到((S)-4-甲基-1-側氧基-1-(((S)-1-側氧基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1-環己基-2-苯基乙酯（化合物 C237 ） 。LCMS (ESI)：m/z 500.3 [M+H]+
實例180：化合物C238之合成
Figure 02_image588
2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2）
在-30℃下向2-(3-氯苯基)-2-甲基丙醛（ Int-3 ） （10 g，54.945 mmol）於THF（100 mL）中之攪拌溶液中添加(4-氟苯基)溴化鎂（54 mL，109.89 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用飽和NH4 Cl（100 mL）淬滅，且經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（100 mL）洗滌。將各層分離，且經硫酸鈉乾燥，隨後在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用10%乙酸乙酯/己烷溶離，得到2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）。TLC 系統： 10%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 261.28 [M-OH]
((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（4）
在0℃下向2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇（2 ）（5 g，17.985 mmol）於DCM（30 mL）中之攪拌溶液中緩慢添加吡啶（6 mL）、L -白胺酸甲酯（3 ）（4.3 g，23.381 mmol），隨後添加三光氣（2.6 g，8.992 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC監測。將反應混合物用1N HCl水溶液（100 mL）淬滅，隨後用DCM（2 × 50 mL）萃取，用飽和NaHCO3 溶液（2 × 50 mL）洗滌，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用15%乙酸乙酯/己烷溶離，得到((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲基甲酯（ 4 ） 。TLC系統：10%乙酸乙酯/己烷Rf ：0.3 LCMS (ESI)：m/z = 472.27 [M+Na]+
((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（5）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸甲酯（ 4 ） （3.6 g，8.017 mmol）於THF（20 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加LiOH.H2 O（1 g，24.051 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 5 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z = 458.23 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（6）
在0℃下向((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)-L -白胺酸（ 5 ） （1.4 g，3.21 mmol）於DMF（14 mL）中之攪拌同時溶液中添加EDC.HCl（922 mg，4.827 mmol）、HOBt（651 mg，4.827 mmol）、DIPEA（1.4 mL，9.654 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（718 mg，3.862 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用80%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 604.65 [M+H]+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（7）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 6 ） （300 mg，0.497 mmol）於DCM（5 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（0.5 mL，0.995 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。隨後將反應混合物用NH4 Cl水溶液（50 mL）淬滅，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（2 × 20 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到化合物，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.2LCMS (ESI)：m/z 576.64 (M+H)+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物C238）
將((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（ 7 ） （270 mg，0.469 mmol）之攪拌溶液溶解於乙酸乙酯（5 mL）中，在0℃下添加戴斯-馬丁高碘烷（398 mg，0.939 mmol），且在室溫下攪拌3小時。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（20 mL）洗滌。將過濾物用飽和海波溶液（3 × 20 mL）、飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，此粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-2-甲基丙酯（化合物 C238 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/DCMRf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 574.2 (M+H)+
實例181：化合物C239之合成
Figure 02_image590
((S )-1-(((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物C239）
在0℃下向(((2-(3-氯苯甲基)環戊基)氧基)羰基)-L -白胺酸（酸片段 -52 ） （250 mg，0.681 mmol）、DMF（6 mL）之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（195 mg，1.021 mmol）、HOBt（137 mg，1.021 mmol）、DIPEA（0.3 mL，2.043 mmol）及(S )-2-胺基-N -(環丙磺醯基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙醯胺鹽酸鹽（胺片段 -29 ） （254 mg，0.817 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-1-(環丙烷磺醯胺基)-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯甲基)環戊酯（化合物 C239 ） 。TLC 系統： 15 %甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 625.3 [M+H]+
實例182：化合物C240之合成
Figure 02_image592
(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1）
在0℃下向(((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)-L-白胺酸（酸片段 -23 ）（1 g，3.003 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（1.7 g，4.504 mmol）、DIPEA（2 mL，9.009 mmol）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（胺片段 -2 ）（0.656 g，3.603 mmol），且在室溫下攪拌16小時。將反應混合物用冰水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（2 × 50 mL）萃取，將有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗化合物。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯及石油醚溶離，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z = 502.94 [M+H]+
(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （700 mg，1.39 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（190 mg，4.1866 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 15%甲醇/二氯甲烷Rf：0.2LCMS (ESI) ： m/z 488.38.31 [M+H]+
((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（4）
在0℃下向(2S)-2-((2S)-2-((((2-苯甲基環戊基)氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （500 mg，1.025 mmol）、DCM（10 mL）之攪拌溶液中同時添加HATU（584 mg，1.538 mmol）、DIPEA（1 mL，3.076 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（255 mg，1.23 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（50 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 20 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（4 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf：0.4LCMS (ESI) ： m/z 597.73 (M+H)+
((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物C240）
在0℃下向((S)-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（ 4 ） （430 mg，0.72 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（190 mg，1.08 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加氨水（5 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用飽和NaHCO3 溶液（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S)-1-(((S)-4-胺基-3,4-二側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-苯甲基環戊酯（化合物 C240 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 515.2 (M+H)+
實例183：化合物C272及C241之合成
Figure 02_image594
(2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段-53）
在0℃下向(2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙酸（酸片段 -53 ）（2 g，4.31 mmol）於DMF（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.2 g，6.28 mmol）、HOBT（872 mg，6.45 mmol）、DIPEA（6 mL，3體積）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 2 ）（962 mg，5.17 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 631.2 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（2）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-3-環己基丙醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（1 ）（1.5 g，2.37 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.37 mL，4.75 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（2 ）。TLC 系統： 5%MeOH/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 604.2 (M+H)+
((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C272）
在0℃下向((S )-3-環己基-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸酯（2 ）（500 mg，0.82 mmol）於乙酸乙酯（20 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1 g，2.48 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物。將其藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C272 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 602.2 (M+H)+
((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（4）
將((S )-3-環己基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C272 ） （350 mg，0.69 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（20 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1 mL，3體積）、異氰基環丙烷（3 ）（46 mg，0.91 mmol），且攪拌10分鐘。向此中在0℃下添加TFA（0.15 mL，1.31 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S)-3-環己基-1-(((2S)-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S)-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 687.4 [M+H]+
((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C241）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 4 ） （250 mg，0.36 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（308 mg，0.72 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 10 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-3-環己基-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C241 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 685.2 (M+H)+
實例184：化合物C282及C242之合成
Figure 02_image596
((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（2）
在0℃下向1,2-雙(3-氯苯基)乙-1-醇（ Int-3 ） （2.7 g，10.11 mmol）、L-白胺酸甲酯(S )-甲酯HCl（2.2 g，12.13 mmol）於DCM（40 mL）中之攪拌溶液中添加吡啶（8.5 mL，3體積），隨後添加三光氣（1.4 g，4.72 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用2N HCl（50 mL）淬滅，用DCM（2 × 40 mL）萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash純化，化合物在10%乙酸乙酯/石油醚下溶離，得到((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 30%乙酸乙酯/己烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 477.1 [M+Na]+
((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸（3）
在0℃下向((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸甲酯（ 2 ） （2.5 g，5.24 mmol）於THF（20 mL）、水（20 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（0.64 g，15.72 mmol），且在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約3，且用乙酸乙酯（2 × 40 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸（ 3 ） 。TLC 系統： 100% EtOAcRf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 423.1 [M+Na]+
(2S )-2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（4）
在0℃下向((1,2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)-L-白胺酸（3 ）（2 g，4.728 mmol）於DMF中之攪拌溶液中同時添加EDC.HCl（1.35 g，7.092 mmol）、HOBT（957 mg，7.092 mmol）、DIPEA（4 mL，3體積）及(S )-2-胺基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯鹽酸鹽（胺片段 2 ）（1.055 g，5.673 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。16小時後，將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由矽膠管柱純化，藉由用50%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到(2S )-2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 4 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 591.9 (M+Na)+
((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（5）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((1, 2-雙(3-氯苯基)乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（4 ）（1.5 g，2.538 mmol）於DCM（20 mL）中之攪拌溶液中添加含2M LiBH4 之THF（2.53 mL，5.076 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。2小時後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，且用DCM（2 × 30 mL）萃取。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，且將經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮將粗殘餘物藉由矽膠關注純化，藉由用90%乙酸乙酯/石油醚溶離，得到((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（5 ）。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf 0.2LCMS (ESI)：m/z 564.2 (M+H)+
((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C282）
在0℃下向((S )-1-(((S )-1-羥基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（5 )（500 mg，0.888 mmol）於乙酸乙酯（20 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（1.1 g，2.66 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和海波溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，藉由製備型HPLC純化粗產物，得到((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C282 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/DCMRf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 562.1 (M+H)+
((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（7）
將((S )-4-甲基-1-側氧基-1-(((S )-1-側氧基-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙-2-基)胺基)戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C282 ） （350 mg，0.623 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下依序添加吡啶（1 mL，3體積）、異氰基環丙烷（6 ）（61 mg，0.91 mmol），且攪拌10分鐘。在0℃下向此中添加TFA（0.14 mL，2.49 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用冰水（20 mL）淬滅，且用二氯甲烷（2 × 15 mL）萃取。將有機層用1N HCl（3 × 15 mL）、鹽水溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 7 ） 。TLC 系統： 5%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 647.5 [M+H]+
((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物C242）
在0℃下向((2S )-1-(((2S )-4-(環丙基胺基)-3-羥基-4-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（ 7 ） （200 mg，0.309 mmol）於EtOAc（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（393 mg，0.928 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 10 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 10 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-4-(環丙基胺基)-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸1,2-雙(3-氯苯基)乙酯（化合物 C242 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 645.2 (M+H)+
實例185：化合物C243之合成
Figure 02_image598
(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（2）
在室溫下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸甲酯（ 1 ） （1.2 g，2.154 mmol）於THF（10 mL）、水（5 mL）中之攪拌溶液中添加氫氧化鋰（271 mg，6.460 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物在減壓下完全蒸餾，將粗化合物用1N HCl水溶液酸化直至pH為約2，且用乙酸乙酯（2 × 30 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，在減壓下濃縮，得到(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） 。TLC 系統： 100%乙酸乙酯Rf ： 0.1LCMS (ESI)：m/z 544.46 [M+H]+
((S )-1-(((S)-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4）
在0℃下向(2S )-2-((2S )-2-(((2-(3-氯苯基)-1-苯基乙氧基)羰基)胺基)-4-甲基戊醯胺基)-3-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)丙酸（ 2 ） （800 mg，1.472 mmol）於DCM（10 mL）中之攪拌溶液中同時添加HATU（618 mg，2.209 mmol）、DIPEA（0.81 mL，4.418 mmol）及1-(氰基甲基)四氫-1H -噻吩-1-溴化鎓（3 ）（455 mg，2.209 mmol），且在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用冰水（30 mL）稀釋，用二氯甲烷（2 × 25 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且在減壓下蒸發。將粗殘餘物藉由combi-flash NP純化，化合物在5%甲醇/二氯甲烷下溶離，得到((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（4 ）。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 653.67 [M+H]+
((S )-1-(((S)-3, 4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物C243）
在0℃下向((S )-1-(((S )-4-氰基-3-側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(四氫-1l4-噻吩-1-亞基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（ 4 ） （350 mg，0.535 mmol）於甲醇（5 mL）中之攪拌溶液中添加m-CPBA（185 mg，1.071 mmol），且將反應混合物在0℃下攪拌2小時。向此中添加哌啶（4 mL），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層用鹽水溶液（30 mL）洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到粗化合物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((S )-1-(((S )-3,4-二側氧基-1-((S )-2-側氧基吡咯啶-3-基)-4-(哌啶-1-基)丁-2-基)胺基)-4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸2-(3-氯苯基)-1-苯基乙酯（化合物 C243 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.3LCMS (ESI)：m/z 639.2 [M+H]+
實例186：化合物C244之合成
Figure 02_image600
((2S)-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（2）
將((2S )-3-環己基-1-((1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C198 ） （230 mg，0.455 mmol）之攪拌溶液溶解於DCM（10 mL）中，在0℃下添加吡啶（1 mL，4體積）、異氰基環丙烷（2 ）（45 mg，0.682 mmol），隨後添加TFA（0.13 mL，1.09 mmol），且在室溫下攪拌16小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，且用1N HCl（2 × 15 mL）、隨後鹽水（20 mL）洗滌。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且在減壓下蒸發，得到粗((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 2 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.5LCMS (ESI)：m/z 591.35 [M+H]+
((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物C244）
在0℃下向((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5,5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3-羥基-4-側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（ 2 ） （100 mg，0.169 mmol）於乙酸乙酯（10 mL）中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（143 mg，0.338 mmol），且在室溫下攪拌3小時。反應之進展藉由TLC及LCMS監測。將反應混合物經由矽藻土墊過濾，且用乙酸乙酯（25 mL）洗滌，且將過濾物用海波溶液（3 × 20 mL）、隨後用飽和NaHCO3 溶液（3 × 20 mL）洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗殘餘物。將粗化合物藉由製備型HPLC純化，得到((2S )-3-環己基-1-((4-(環丙基胺基)-1-(5, 5-二甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)-3, 4-二側氧基丁-2-基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸3-氯苯甲酯（化合物 C244 ） 。TLC 系統： 10%甲醇/二氯甲烷Rf ： 0.4LCMS (ESI)：m/z 589.3 [M+H]+ 測試化合物活性 活體外抗病毒分析
諾羅病毒抗病毒分析：
基於細胞之抗病毒劑分析：抑制劑之抗病毒劑效應在攜帶諾沃克病毒複製子之細胞（HG23細胞）中檢查。簡言之，將融合細胞和半融合細胞與含有DMSO（＜0.1%）或每種化合物（至多100 μM）之介質一起培育48小時。培育後，提取總RNA，且用實時定量RT-PCR（qRT-PCR）定量病毒基因體。EC50 值由GraphPadPrism軟體測定。除諾沃克病毒複製子外，亦使用貓冠狀病毒（feline coronavirus；FCoV）、MERS-CoV（中東呼吸道症候群相關冠狀病毒）、SARS-CoV（嚴重急性呼吸道症候群相關冠狀病毒）、人類冠狀病毒229E、鼠類諾羅病毒及人類鼻病毒來測定抑制劑之細胞病變效應（cytopathic effect；CPE）抗病毒活性。
病毒蛋白酶分析：抑制劑之抗病毒劑活性藉由螢光共振能量轉移（Fluorescence Resonance Energy Transfer；FRET）分析測定。經純化之病毒蛋白酶與蛋白酶基質肽（Edans-DFHLQ/GP-Dabcyl）及抑制劑一起培育，且IC50 值隨後藉由螢光信號測定。
諾羅-諾沃克FRET蛋白酶分析在50 mM HEPES-Na pH 8、50 mM NaCl、0.4 mM EDTA、4%丙三醇及6 mM DTT中進行。自淬滅肽基質[5-FAM]-EPDFHLQG PEDLAKK-[TAMRA]藉由Anaspec自定義合成。將化合物以3倍連續稀釋稀釋至200 µM至10.2 nM之最終濃度。視酶活性程度而定，添加諾羅蛋白酶直至最終濃度為1-7 µM，且添加肽基質直至最終濃度為10 µM。將該分析在37℃下培育90分鐘，且在Perkin Elmer Envision中讀取，在473 nm下進行激發，且在519 nm下進行發射量測。
SARS2 FRET蛋白酶分析在20 mM HEPES-Na pH 7、120 mM NaCl、0.4 mM EDTA、0.01% Triton、5%丙三醇及4 mM DTT中進行。自淬滅肽基質5-FAM-TSA VLQ SGF RKK (5TAMRA)-NH2藉由Anaspec自定義合成。將化合物以3倍連續稀釋稀釋至20 µM至1.0 nM之最終濃度。視酶活性程度而定，添加SARS2蛋白酶直至最終濃度為25 nM，且添加肽基質直至最終濃度為1.3 µM。將該分析在30℃下培育30分鐘，且在Perkin Elmer Envision中讀取，在473 nm下進行激發，且在519 nm下進行發射量測。
諾羅病毒蛋白酶抑制分析之結果呈現在下表D中。表 D
化合物 編號 IC50 （µM）
C32 4.2 µM
C37 26.0 µM
C38 3.7 µM
C43 5.9 µM
C52 9.2 µM
C54 7.0 µM
C66 10.9 µM
C67 9.1 µM
C68 ＞200
C69 ＞200
C70 5.2 µM
C71 87.0 µM
C72 2.3 µM
C73 39.1 µM
C74 16.4 µM
C75 8.1 µM
C76 10.5 µM
C77 32.6 µM
C78 ＞200
C79 ＞200
C80 ＞200
C81 23.9 µM
C82 126.6 µM
C83 ＞200
C84 190.5 µM
C85 143.4 µM
C86 ＞200
C87 208.7 µM
C88 ＞200
C89 99.2 µM
C90 136.2 µM
C91 ＞200
C92 36.3 µM
C93 209.3 µM
C94 156.3 µM
C95 115.9 µM
C96 4.1 µM
C97 66.9 µM
C98 ＞200
C99 ＞200
C100 ＞200
C101 ＞200
C102 6.9 µM
C103 21.3 µM
C104 2.8 µM
C105 2.7 µM
C106 1.8 µM
C107 85.5 µM
C108 0.979 µM
C109 1.4 µM
C110 1.3 µM
C111 40.7 µM
C112 109.2 µM
C113 104.5 µM
C114 1.7 µM
C115 2.2 µM
C116 98.1 µM
C117 77.7 µM
C118 118.8 µM
C119 67.6 µM
C120 62.6 µM
C121 106.8 µM
C122 35.2 µM
C123 121.5 µM
C124 36.5 µM
C125 47.2 µM
C126 ＞200
C127 5.7 µM
C128 155.6 µM
C129 ＞200
C130 ＞200
C131 193.1 µM
C132 6.0 µM
C133 0.743 µM
C134 171.3 µM
C135 191.5 µM
C136 3.2 µM
C137 9.9 µM
C138 92.9 µM
C139 162.8 µM
C140 76.0 µM
C141 9.6 µM
C142 ＞200
C143 3.7 µM
C144 140.2 µM
C145 ＞200
C146 ＞200
C147 ＞200
C148 58.7 µM
C149 ＞200
C150 ＞200
C151 130.7 µM
C152 2.9 µM
C153 ＞200
C154 76.1 µM
C155 86.4 µM
C156 6.1 µM
C157 3.1 µM
C158 100.4 µM
C159 75.3 µM
C160 4.3 µM
C161 ＞200
C162 8.3 µM
C163 62.8 µM
C164 142.6 µM
C165 5.5 µM
C166 13.9 µM
C167 38.6 µM
C168 ＞200
C169 ＞200
C170 52.5 µM
C171 ＞200
C172 ＞200
C173 44.0 µM
C174 57.9 µM
C175 38.3 µM
C176 69.7 µM
C177 100.0 µM
C178 3.5 µM
C179 3.1 µM
C180 6.1 µM
C181 3.3 µM
C182 106.1 µM
C183 16.2 µM
C184 81.7 µM
C185 28.2 µM
C186 30.8 µM
C187 81.9 µM
C188 46.6 µM
C189 3.3 µM
C190 37.1 µM
C191 91.9 µM
C192 27.7 µM
C193 3.8 µM
C194 ＞200
C195 ＞200
C196 26.3 µM
C197 155.0 µM
C198 3.3 µM
C199 92.8 µM
C200 1.2 µM
C201 2.7 µM
C202 7.3 µM
C203 1.5 µM
C204 1.8 µM
C205 183.8 µM
C206 76.3 µM
C207 106.0 µM
C208 ＞200
C209 88.0 µM
C210 ＞200
C211 57.8 µM
C212 5.3 µM
C213 18.9 µM
C214 4.6 µM
C215 ＞200
C216 ＞200
C217 ＞200
C218 ＞200
C219 ＞200
C220 ＞200
C221 ＞200
C222 13.8 µM
C223 22.6 µM
C224 7.8 µM
C225 7.0 µM
C226 169.2 µM
C227 ＞200
C228 25.8 µM
C229 4.6 µM
C230 13.4 µM
C231 204.1 µM
C232 ＞200
C233 ＞200
C234 124.4 µM
C235 8.9 µM
C236 185.1 µM
C237 8.6 µM
C238 1.6 µM
C239 Act
C240 ＞200
C241 85.7 µM
C242 33.9 µM
C243 ＞200
C244 97.6 µM
C245 ＞200
C246 52.1 µM
C247 182.7 µM
C248 ＞200
C249 ＞200
C250 11.7 µM
C251 58.2 µM
C252 0.973 µM
C253 1.8 µM
C254 ＞200
C255 ＞200
C256 ＞200
C257 ＞200
C258 42.9 µM
C259 4.4 µM
C260 ＞200
C261 192.6 µM
C262 3.2 µM
C263 1.0 µM
C264 12.7 µM
C265 10.4 µM
C266 0.796 µM
C267 7.5 µM
C268 0.549 µM
C269 2.2 µM
C270 105.8 µM
C271 ＞200
C272 16.4 µM
C273 ＞200
C274 ＞200
C275 1.5 µM
C276 3.5 µM
C277 33.4 µM
C278 3.5 µM
C279 ＞200
C280 ＞200
C281 ＞200
C282 1.0 µM
C283 ＞200
C284 201.6 µM
C285 27.1 µM
C286 15.2 µM
C287 ＞200
C288 119.1 µM
C289 86.0 µM
C290 93.2 µM
C291 2.5 µM
C292 90.5 µM
C293 8.7 µM
C294 177.3 µM
C295 5.1 µM
C296 115.5 µM
C297 217.1 µM
C298 217.9 µM
SARS-CoV-2蛋白酶抑制分析之結果呈現在下表E中。表 E
化合物 編號 IC50 （µM）
C1 ＞200
C2 71.0 µM
C3 ＞200
C4 ＞200
C5 ＞200
C6 ＞200
C7 ＞200
C8 ＞200
C9 ＞200
C10 ＞200
C11 ＞200
C12 ＞200
C13 ＞200
C14 ＞200
C15 ＞200
C16 37.8 µM
C17 2.7 µM
C18 49.25 µM
C19 94.3 µM
C20 ＞200
C21 ＞200
C22 3.8 µM
C23 ＞200
C24 ＞200
C25 11.1 µM
C26 ＞200
C27 ＞200
C28 ＞200
C29 ＞200
C30 42.3 µM
C31 ＞200
C32 0.023
C33 ＞200
C34 0.1 µM
C35 18.9 µM
C36 2.5 µM
C37 0.1373 0.2621
C38 0.016 µM
C39 0.153 µM
C40 0.1735 0.2214
C41 0.308 µM
C42 0.356 µM
C43 0.056 µM
C44 0.331 µM
C45 0.304 µM
C46 1.382 µM
C47 0.073 µM
C48 0.241 µM
C49 0.266 µM
C50 0.119 µM
C51 0.115 µM
C52 0.5 µM
C53 0.04 µM
C54 0.1 µM
C55 0.3 µM
C56 0.6 µM
C57 0.8 µM
C58 0.1 µM
C59 0.1 µM
C60 0.6 µM
C61 0.0 µM
C62 4.6 µM
C63 1.6 µM
C64 0.1 µM
C65 26.9 µM
C66 0.1 µM
C67 0.3 µM
C68 2.1 µM
C69 26.8 µM
C70 0.1 µM
C71 1.6 µM
C72 0.01 µM
C73 0.60 µM
C74 0.14 µM
C75 0.0012
C76 0.38 µM
C77 0.6 µM
C78 0.5 µM
C79 3.8 µM
C80 0.9 µM
C81 0.2 µM
C82 4.4 µM
C83 1.3 µM
C84 9.2 µM
C85 17.8 µM
C86 0.9 µM
C87 0.7 µM
C88 1.3 µM
C89 0.3 µM
C90 0.1 µM
C91 ＞20
C92 0.2 µM
C93 ＞20
C94 2.6 µM
C95 7.0 µM
C96 0.0 µM
C97 0.1 µM
C98 2.2 µM
C99 2.8 µM
C100 1.0 µM
C101 ＞20
C102 0.118 µM
C103 0.736 µM
C104 0.006 µM
C105 0.0006
C106 0.0001
C107 6.792 µM
C108 0.0012
C109 0.002
C110 0.0014
C111 0.4911
C112 0.1850
C113 0.1333
C114 0.0111
C115 0.0157
C116 4.8437
C117 0.0553
C118 0.8685
C119 0.7962
C120 1.0555
C121 0.1775
C122 0.4559
C123 0.2945
C124 0.3245
C125 0.0201
C126 1.1927
C127 0.0036
C128 0.8984
C129 ＞20
C130 ＞20
C131 15.81
C132 0.060
C133 0.0000855
C134 0.767
C135 1.8901
C136 0.00045
C137 0.0436
C138 0.2454
C139 3.1425
C140 0.4049
C141 0.0308
C142 0.0351
C143 0.0036
C144 2.0192
C145 4.3001
C146 ＞20
C147 2.998
C148 0.9733
C149 3.965
C150 ＞20
C151 3.669
C152 0.0118
C153 ＞20
C154 1.480
C155 1.5618
C156 0.0528
C157 0.0001
C158 2.6117
C159 3.4899
C160 0.0247
C161 2.9937
C162 0.0922
C163 1.8127
C164 0.1440
C165 0.1057
C166 0.014
C167 2.0544
C168 5.441
C169 5.9886
C170 1.8397
C171 10.9692
C172 1.6704
C173 1.4331
C174 0.0082
C175 0.3862
C176 1.5674
C177 4.3893
C178 0.0710
C179 0.000015
C180 0.0566
C181 0.000076
C182 2.4676
C183 0.2490
C184 2.3188
C185 0.1426
C186 1.2417
C187 0.1086
C188 1.8928
C189 0.3398
C190 0.0445
C191 0.3052
C192 0.6169
C193 0.0007
C194 0.4850
C195 2.0137
C196 0.1082
C197 0.6200
C198 0.0047
C199 0.1961
C200 0.00065
C201 0.0044
C202 0.6444
C203 0.0105
C204 0.224 µM
C205 2.559 µM
C206 5.109 µM
C207 0.315 µM
C208 1.046 µM
C209 1.875 µM
C210 2.647 µM
C211 0.339 µM
C212 0.194 µM
C213 0.257 µM
C214 0.011 µM
C215 20.000 µM
C216 3.102 µM
C217 3.991 µM
C218 1.847 µM
C219 20.000 µM
C220 1.832 µM
C221 20.000 µM
C222 0.235 µM
C223 0.781 µM
C224 0.183 µM
C225 1.01 µM
C226 0.057 µM
C227 0.059 µM
C228 0.12 µM
C229 0.0008 µM
C230 0.07 µM
C231 1.8 µM
C232 15.1 µM
C233 0.020 µM
C234 0.0008 µM
C235 0.071 µM
C236 0.271 µM
C237 0.003 µM
C238 0.0001 µM
C239 ＞20
C240 0.23 µM
C241 2.35 µM
C242 0.074 µM
C243 ＞20
C244 1.73 µM
C245 1.98 µM
C246 0.52 µM
C247 0.08 µM
C248 6.93 µM
C249 ＞20
C250 0.01 µM
C251 0.000008 µM
C252 0.00010 µM
C253 0.000030 µM
C254 4.27 µM
C255 0.07 µM
C256 0.32 µM
C257 ＞20
C258 0.09 µM
C259 0.05 µM
C260 1.14 µM
C261 16.97 µM
C262 0.02 µM
C263 0.02 µM
C264 0.68 µM
C265 0.84 µM
C266 0.02 µM
C267 0.10 µM
C268 0.02 µM
C269 0.07 µM
C270 4.41 µM
C271 2.00 µM
C272 0.32 µM
C273 5.35 µM
C274 12.02 µM
C275 0.02 µM
C276 0.06 µM
C277 0.71 µM
C278 0.02 µM
C279 6.59 µM
C280 ＞20
C281 2.48 µM
C282 0.04 µM
C283 ＞20
C284 1.57 µM
C285 0.08 µM
C286 0.07 µM
C287 ＞20
C288 2.23 µM
C289 0.37 µM
C290 0.508 µM
本文提供之所有參考文獻以全文引用之方式併入本文中。如本文所用，所有縮寫、符號及定則與當代科學文獻中所用之縮寫、符號及定則一致。參見例如Janet S. Dodd編, 《ACS風格指南：作者及編輯手冊（The ACS Style Guide: A Manual for Authors and Editors）》,第2版,華盛頓特區：美國化學學會（Washington, D.C.: American Chemical Society）, 1997。
應理解，雖然本揭示案已結合其實施方式進行描述，但前述描述意欲說明且不限制本揭示案之範疇，本揭示案之範疇係由所附申請專利範圍之範疇限定。其他態樣、優勢及修改在以下申請專利範圍之範疇內。
無
無
Figure 110109546-A0101-11-0001-2

Claims (78)

  1. 一種具有式（I）之結構之化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
    Figure 03_image001
    其中 Z為O、NR1 或一鍵； 各RN 獨立地為H或C1-6 烷基； R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基或5至8員N-雜環，其中環氮視情況經COO-C1-6 烷基取代； R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基或C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基視情況經1-3個R7 取代，且該碳環基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵基烷基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、O-C1-6 伸烷基-C6-10 芳基及CO2 C1-6 烷基； R3 為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、C0-6 伸烷基-視情況經1-2個鹵基取代之C6-10 芳基或胺基酸側鏈； 各R4 獨立地為鹵基、OH、CN、C1-6 烷基、C1-6 鹵基烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、側氧基（=O）、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 、COORA 、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基,及COO-C1-6 烷基，或 兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合3-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基、SO2 -C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、-[C(O)]1-2 -(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、-[C(O)]1-2 -NRN RN 、C(O)-Y-H或-[C(O)]1-2 -NRN -Y-X-A，其中A為H、C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基； Y為一鍵、C1-6 伸烷基、C1-6 伸烷基-O-C1-6 伸烷基或C1-6 伸烯基，其中C1-6 伸烷基及C1-6 伸烯基視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基； X為一鍵、NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)； 各R6 獨立地為H、C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)； 各R7 獨立地為鹵基、C1-6 鹵基烷基、C2-6 烯基、C3-5 碳環基或C0-6 伸烷基-C6-10 芳基，且C6-10 芳基視情況經1-2個鹵基取代，或 兩個R7 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合C3-6 碳環基環； RA 及RB 各自獨立地為H、C1-6 烷基、C1-6 鹵基烷基、C1-6 烷氧基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-6 環烷基、C0-6 伸烷基-C6-10 芳基、C0-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基； n為0-3； m為0-5；且 o為0-5。
  2. 如請求項1之化合物或鹽，其中各RN 為H。
  3. 如請求項1或2之化合物或鹽，其中Z為NR1 。
  4. 如請求項3之化合物或鹽，其中R1 為視情況經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基。
  5. 如請求項4之化合物或鹽，其中R1 為未經取代之C5-8 碳環基。
  6. 如請求項5之化合物或鹽，其中R1 為未經取代之C5-6 碳環基。
  7. 如請求項3之化合物或鹽，其中R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-8 碳環基。
  8. 如請求項7之化合物或鹽，其中R1 為經C1-6 伸烷基-C6-10 芳基取代之C5-6 碳環基。
  9. 如請求項7或8之化合物或鹽，其中R1 為經苯甲基取代之C5-6 碳環基。
  10. 如請求項3之化合物或鹽，其中R1 為5至8員N-雜環，其中環氮經COO-C1-6 烷基取代。
  11. 如請求項10之化合物或鹽，其中R1 為6員N-雜環，其中該環氮經COO-C1-6 烷基取代。
  12. 如請求項10或11之化合物或鹽，其中雜環氮經COO-三級丁基取代。
  13. 如請求項1或2之化合物或鹽，其中Z為O。
  14. 如請求項1至13中任一項之化合物或鹽，其中R2 為C1-6 烷基。
  15. 如請求項12之化合物或鹽，其中R2 為甲基。
  16. 如請求項1至13中任一項之化合物或鹽，其中R2 為C1-6 伸烷基-C6-10 芳基。
  17. 如請求項16之化合物或鹽，其中R2 為苯甲基。
  18. 如請求項1至13中任一項之化合物或鹽，其中R2 為C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基。
  19. 如請求項1至13中任一項之化合物或鹽，其中R2 為C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基。
  20. 如請求項16至19中任一項之化合物或鹽，其中R2 經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷氧基、C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基及CO2 C1-6 烷基。
  21. 如請求項1至20中任一項之化合物或鹽，其中R3 為C1-6 烷基。
  22. 如請求項21之化合物或鹽，其中R3 為
    Figure 03_image603
    。
  23. 如請求項1至20中任一項之化合物或鹽，其中R3 為C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基。
  24. 如請求項23之化合物或鹽，其中R3 為
    Figure 03_image605
    。
  25. 如請求項1至20中任一項之化合物或鹽，其中R3 為C2-6 烯基或C2-6 炔基。
  26. 如請求項1至20中任一項之化合物或鹽，其中R3 為C0-6 伸烷基-C6-10 芳基。
  27. 如請求項1至20中任一項之化合物或鹽，其中R3 為胺基酸側鏈。
  28. 如請求項27之化合物或鹽，其中R3 為甲基、異丙基、異丁基、二級丁基、CH2 CH2 SCH3 、CH2 -吲哚基、苯甲基、CH2 OH、CH(OH)CH3 、CH2 SH、CH2 -(4-OH-苯基)、CH2 C(O)NH2 、CH2 CH2 C(O)NH2 、CH2 COOH、CH2 CH2 COOH、CH2 CH2 CH2 CH2 NH2 、CH2 CH2 CH2 NHC(NH)NH2 或咪唑基。
  29. 如請求項1至28中任一項之化合物或鹽，其中n為0。
  30. 如請求項1至28中任一項之化合物或鹽，其中n為1、2或3。
  31. 如請求項30之化合物或鹽，其中n為1或2。
  32. 如請求項30或31之化合物或鹽，其中各R4 獨立地為C1-6 烷基、側氧基（=O）、C0-4 伸烷基-C6-10 芳基、C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-12員雜芳基)或C0-4 伸烷基-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環)；且該芳基、雜芳基及雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  33. 如請求項30或31之化合物或鹽，其中至少一個R4 為鹵基、OH、CN、C1-6 鹵烷基、C1-6 烷基-OH、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C1-6 烷氧基、C3-6 烷基氧基烷基、NRA SO2 RB 、SO2 NRA RB 或COORA 。
  34. 如請求項31之化合物或鹽，其中n為2，且兩個R4 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  35. 如請求項34之化合物或鹽，其中該兩個R4 與其所附接之該碳一起組合形成螺5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  36. 如請求項34之化合物或鹽，其中該兩個R4 與其所附接之該等碳一起組合形成稠合5-12員碳環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的雜環，該碳環或雜環視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基、C(O)-C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  37. 如請求項1至36中任一項之化合物或鹽，其中R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)、CONRN RN 、C(O)-C(O)N(RN )2 、CHO或C(O)-C(O)NRN -Y-X-A，其中A為C3-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環、C6-10 芳基或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，且該碳環基、雜環基、芳基或雜芳基視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  38. 如請求項1至37中任一項之化合物或鹽，其中Y為視情況經1-3個獨立地選自以下之取代基取代的C1-6 伸烷基：鹵基、OH、NRN RN 及C1-6 烷氧基。
  39. 如請求項1至38中任一項之化合物或鹽，其中R2 為C1-6 烷基、C1-6 伸烷基-C5-8 碳環基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-10員雜環基、C1-6 伸烷基-C6-10 芳基、具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基或C1-6 伸烷基-具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-10員雜芳基，其中C1-6 伸烷基經1-3個R7 取代。
  40. 如請求項39之化合物或鹽，其中C1-6 伸烷基經1個R7 取代。
  41. 如請求項39之化合物或鹽，其中C1-6 伸烷基經2個R7 取代。
  42. 如請求項39之化合物或鹽，其中C1-6 伸烷基經3個R7 取代。
  43. 如請求項39至42中任一項之化合物或鹽，其中至少一個R7 為C0-6 伸烷基-視情況經1-2個鹵基取代之C6-10 芳基。
  44. 如請求項43之化合物或鹽，其中至少一個R7 為視情況經1-2個鹵基取代之苯基。
  45. 如請求項43或44之化合物或鹽，其中至少一個R7 為視情況經1個鹵基取代之苯基。
  46. 如請求項1至39、41及42中任一項之化合物或鹽，其中兩個R7 與其所附接之一或多個碳一起組合形成螺或稠合C3-6 碳環基環。
  47. 如請求項46之化合物或鹽，其中兩個R7 與其所附接之該碳一起組合形成螺C3-6 碳環基環。
  48. 如請求項46之化合物或鹽，其中兩個R7 與其所附接之碳一起組合形成稠合C3-6 碳環基環。
  49. 如請求項1至48中任一項之化合物或鹽，其中o為0。
  50. 如請求項1至48中任一項之化合物或鹽，其中o為1-5。
  51. 如請求項50之化合物或鹽，其中o為1或2。
  52. 如請求項50或51之化合物或鹽，其中各R6 為H。
  53. 如請求項50或51之化合物或鹽，其中至少一個R6 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO或C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)。
  54. 如請求項1至53中任一項之化合物或鹽，其中m為0。
  55. 如請求項1至53中任一項之化合物或鹽，其中m為1。
  56. 如請求項1至53中任一項之化合物或鹽，其中m為2。
  57. 如請求項1至56中任一項之化合物或鹽，其中R5 為C1-6 伸烷基-OH、經PO(OCH2 CH2 )2 取代之C1-6 伸烷基-OH、經SO3 H取代之C1-6 伸烷基-OH、CHO、C(O)-(具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-8員雜環)或CONRN RN 。
  58. 如請求項1至56中任一項之化合物或鹽，其中R5 為C(O)-C(O)NRN -Y-X-A。
  59. 如請求項58之化合物或鹽，其中Y為C1-6 伸烷基。
  60. 如請求項58或59之化合物或鹽，其中X為一鍵。
  61. 如請求項58或59之化合物或鹽，其中X為NRN RN 、C(O)、SO2 或OC(O)。
  62. 如請求項58至61中任一項之化合物或鹽，其中A為C5-8 碳環基或C6-10 芳基，且視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  63. 如請求項58至61中任一項之化合物或鹽，其中A為具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的4-12員雜環或具有1-3個選自N、O及S之環雜原子的5-8員雜芳基，視情況經1-2個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、C1-6 烷基及COO-C1-6 烷基。
  64. 如請求項63之化合物或鹽，其中A包括吡啶基。
  65. 一種如表A中所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  66. 一種如表B中所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  67. 一種醫藥調配物，其包括如請求項1至66中任一項之化合物或鹽以及醫藥學上可接受之賦形劑。
  68. 一種用於治療或預防宿主之病毒感染之方法，其包括向該宿主投與治療量之如請求項1至66中任一項之化合物或鹽。
  69. 如請求項68之方法，其中該病毒感染為冠狀病毒感染、杯狀病毒（calicivirus）感染或小核糖核酸病毒（picornavirus）感染。
  70. 如請求項69之方法，其中該病毒感染為杯狀病毒感染。
  71. 如請求項70之方法，其中該杯狀病毒感染為諾羅病毒（norovirus）感染。
  72. 如請求項69之方法，其中該病毒感染為冠狀病毒感染。
  73. 如請求項72之方法，其中該冠狀病毒感染為嚴重急性呼吸道症候群（severe acute respiratory syndrome；SARS）、中東呼吸道症候群（Middle East respiratory syndrome；MERS）或冠狀病毒疾病2019（Coronavirus disease 2019；COVID-19）。
  74. 如請求項69之方法，其中該病毒感染為小核糖核酸病毒感染。
  75. 如請求項74之方法，其中該小核糖核酸病毒感染為鼻病毒感染。
  76. 如請求項75之方法，其中該鼻病毒感染為鼻病毒A、鼻病毒B或鼻病毒C感染。
  77. 如請求項72之方法，其中該冠狀病毒為α冠狀病毒。
  78. 如請求項72之方法，其中該冠狀病毒為β冠狀病毒。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI790704B (zh) * 2020-09-03 2023-01-21 美商輝瑞股份有限公司 含腈之抗病毒化合物類

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11124497B1 (en) 2020-04-17 2021-09-21 Pardes Biosciences, Inc. Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof
US11174231B1 (en) 2020-06-09 2021-11-16 Pardes Biosciences, Inc. Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof
CN116348477A (zh) 2020-07-20 2023-06-27 英安塔制药有限公司 作为抗病毒剂的功能化肽
US11352363B1 (en) 2020-11-23 2022-06-07 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Spiropyrrolidine derived antiviral agents
US11384090B2 (en) 2020-11-23 2022-07-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Spiropyrrolidine derived antiviral agents
JP2024500286A (ja) 2020-11-23 2024-01-09 エナンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 新規スピロピロリジン誘導抗ウイルス剤
WO2022156693A1 (zh) * 2021-01-19 2022-07-28 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 含有n-(取代磺酰基)乙酰胺结构的病毒蛋白酶抑制剂，及其在抗病毒药物中的应用
WO2022165220A1 (en) * 2021-01-29 2022-08-04 Kansas State University Research Foundation Conformationally-constrained inhibitors of 3c or 3c-like proteases
WO2022235605A1 (en) 2021-05-04 2022-11-10 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Novel macrocyclic antiviral agents
US11319325B1 (en) 2021-05-11 2022-05-03 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic spiropyrrolidine derived antiviral agents
WO2022266363A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 The Scripps Research Institute Protease inhibitors for the treatment of coronavirus infections
US11339170B1 (en) 2021-07-23 2022-05-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Spiropyrrolidine derived antiviral agents
US11325916B1 (en) 2021-07-29 2022-05-10 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Spiropyrrolidine derived antiviral agents
KR20240055745A (ko) * 2021-08-03 2024-04-29 코크리스탈 파마, 아이엔씨. 코로나바이러스 억제제
US11912714B2 (en) 2021-11-12 2024-02-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Spiropyrrolidine derived antiviral agents
WO2023086400A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Novel spiropyrrolidine derived antiviral agents
WO2023086350A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Alkyne-containing antiviral agents
WO2023107419A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Saturated spirocyclics as antiviral agents
WO2023165334A1 (zh) * 2022-03-01 2023-09-07 成都威斯克生物医药有限公司 酮酰胺类衍生物及其制药用途

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4131648A (en) 1975-01-28 1978-12-26 Alza Corporation Structured orthoester and orthocarbonate drug delivery devices
US4180646A (en) 1975-01-28 1979-12-25 Alza Corporation Novel orthoester polymers and orthocarbonate polymers
US4093709A (en) 1975-01-28 1978-06-06 Alza Corporation Drug delivery devices manufactured from poly(orthoesters) and poly(orthocarbonates)
US4079038A (en) 1976-03-05 1978-03-14 Alza Corporation Poly(carbonates)
CY1308A (en) 1979-12-06 1985-12-06 Glaxo Group Ltd Device for dispensing medicaments
US4304767A (en) 1980-05-15 1981-12-08 Sri International Polymers of di- (and higher functionality) ketene acetals and polyols
US4353656A (en) 1980-10-14 1982-10-12 Xerox Corporation Moving coil, multiple energy print hammer system including a closed loop servo
CY1492A (en) 1981-07-08 1990-02-16 Draco Ab Powder inhalator
GR79615B (zh) 1982-10-08 1984-10-31 Glaxo Group Ltd
GB2169265B (en) 1982-10-08 1987-08-12 Glaxo Group Ltd Pack for medicament
US4778054A (en) 1982-10-08 1988-10-18 Glaxo Group Limited Pack for administering medicaments to patients
US4501729A (en) 1982-12-13 1985-02-26 Research Corporation Aerosolized amiloride treatment of retained pulmonary secretions
US4753788A (en) 1985-01-31 1988-06-28 Vestar Research Inc. Method for preparing small vesicles using microemulsification
PH26882A (en) 1985-07-30 1992-11-16 Glaxo Group Ltd Devices for administering medicaments to patients
US4946931A (en) 1989-06-14 1990-08-07 Pharmaceutical Delivery Systems, Inc. Polymers containing carboxy-ortho ester and ortho ester linkages
AU6909091A (en) 1989-12-05 1991-06-26 Ramsey Foundation Neurologic agents for nasal administration to the brain
GB9004781D0 (en) 1990-03-02 1990-04-25 Glaxo Group Ltd Device
US6413536B1 (en) 1995-06-07 2002-07-02 Southern Biosystems, Inc. High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device
US5968543A (en) 1996-01-05 1999-10-19 Advanced Polymer Systems, Inc. Polymers with controlled physical state and bioerodibility
US6956021B1 (en) 1998-08-25 2005-10-18 Advanced Inhalation Research, Inc. Stable spray-dried protein formulations
CN1378445B (zh) 1999-08-06 2013-02-06 得克萨斯系统大学评议会 药物释放生物可降解纤维植入物
US7252840B1 (en) 1999-08-25 2007-08-07 Advanced Inhalation Research, Inc. Use of simple amino acids to form porous particles
US6749835B1 (en) 1999-08-25 2004-06-15 Advanced Inhalation Research, Inc. Formulation for spray-drying large porous particles
US7678364B2 (en) 1999-08-25 2010-03-16 Alkermes, Inc. Particles for inhalation having sustained release properties
US6632666B2 (en) 2000-01-14 2003-10-14 Biolife Solutions, Inc. Normothermic, hypothermic and cryopreservation maintenance and storage of cells, tissues and organs in gel-based media
US6613355B2 (en) 2000-05-11 2003-09-02 A.P. Pharma, Inc. Semi-solid delivery vehicle and pharmaceutical compositions
AU2001283546A1 (en) 2000-08-14 2002-02-25 Advanced Inhalation Research, Inc. Inhalation device and method
WO2002053190A2 (en) 2000-12-29 2002-07-11 Advanced Inhalation Research, Inc. Particles for inhalation having sustained release properties
US6766799B2 (en) 2001-04-16 2004-07-27 Advanced Inhalation Research, Inc. Inhalation device
US6848197B2 (en) 2001-04-18 2005-02-01 Advanced Inhalation Research, Inc. Control of process humidity to produce large, porous particles
US6524606B1 (en) 2001-11-16 2003-02-25 Ap Pharma, Inc. Bioerodible polyorthoesters containing amine groups
ES2415654T3 (es) 2001-11-20 2013-07-26 Civitas Therapeutics, Inc. Composiciones particuladas mejoradas para suministro pulmonar
US7008644B2 (en) 2002-03-20 2006-03-07 Advanced Inhalation Research, Inc. Method and apparatus for producing dry particles
US8001963B2 (en) 2003-09-05 2011-08-23 Kurve Technology, Inc. Integrated nebulizer and particle dispersion chamber for nasal delivery of medicament to deep nasal cavity and paranasal sinuses
US7462594B2 (en) * 2003-12-31 2008-12-09 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Peptide-like compounds that inhibit coronaviral 3CL and flaviviridae viral proteases
WO2005113580A1 (en) * 2004-05-21 2005-12-01 Pfizer Inc. Anticoronviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses and materials for their synthesis
WO2006061714A2 (en) * 2004-12-09 2006-06-15 Pfizer Inc. Anticoronaviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses and materials for their synthesis
WO2013049382A2 (en) * 2011-09-27 2013-04-04 Kansas State University Research Foundation Broad-spectrum antivirals against 3c or 3c-like proteases of picornavirus-like supercluster: picornaviruses, caliciviruses and coronaviruses

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI790704B (zh) * 2020-09-03 2023-01-21 美商輝瑞股份有限公司 含腈之抗病毒化合物類

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