TW202003582A

TW202003582A - 頭頸癌之治療

Info

Publication number: TW202003582A
Application number: TW108108192A
Authority: TW
Inventors: 皮爾迪登; 查瑪阿妮絲波爾; 羅傑柯翰
Original assignee: 法商天賜製藥公司
Priority date: 2018-03-13
Filing date: 2019-03-12
Publication date: 2020-01-16
Also published as: US11795222B2; CN112004828A; KR20200133233A; WO2019175182A1; EP3765508A1; MA51995A; AU2019233507A1; IL277187A; US20240117045A1; CA3092522A1; JP2021530428A; EA202092147A1; SG11202008669YA; JP7455749B2; US20210061909A1

Abstract

本發明涉及用於治療已接受既往西妥昔單抗治療的患者中的癌症特別是頭頸癌的NKG2A-靶向劑之用途。本發明還提供了使用NKG2A-靶向劑用於癌症治療之有利組合方案。

Description

頭頸癌之治療

本發明涉及用於治療癌症，特別是頭頸癌的NKG2A-靶向劑之用途。本發明還提供了使用NKG2A-靶向劑用於癌症治療之有利組合方案。

自然殺傷(NK)細胞活性係由涉及激活和抑制訊號的複雜機制調控的。已經鑒定出多種不同的NK-特異性受體，它們在NK細胞介導的識別和殺傷HLA I類缺陷靶細胞中發揮重要作用。天然細胞毒性受體(NCR)係指一類在NK細胞中特異性表現的活化受體蛋白及表現它們的基因。NCR的實例包括NKp30、NKp44和NKp46(參見例如Lanier(2001)Nat Immunol[自然免疫學]2：23-27)。參與NK細胞裂解靶細胞的另一個重要活化受體係NKG2D。NKG2D識別MICA/B和ULBP蛋白家族的I-類主要組織相容性複合物(MHC)相關抗原；後者係與應激相關的蛋白，其能夠作為腫瘤特異性抗原，使得NK細胞識別和清除腫瘤細胞。

CD94/NKG2A係發現於自然殺傷細胞(NK細胞)亞群，自然殺傷T細胞(NKT細胞)和T細胞(α/β和γ/δ)上的抑制性受體。CD94/NKG2A限制細胞介質的釋放以及上述淋巴細胞對表現CD94/NKG2A-配位基HLA-E的細胞的細胞毒性應答(參見，例如WO 99/28748)。HLA-E也被發現以可溶性形式被某些腫瘤細胞(Derre等人， J Immunol[免疫學雜誌]2006；177：3100-7)和活化的內皮細胞(Coupel等人，Blood[血液]2007；109：2806-14)分泌。抑制CD94/NKG2A訊號傳導的抗體可增加細胞介質的釋放以及淋巴細胞對HLA-E陽性靶細胞的溶細胞活性，例如CD94/NKG2A陽性NK細胞對病毒感染細胞的應答。因此，抑制CD94/NKG2A但不引起殺傷表現CD94/NKG2A的細胞的治療性抗體(即非消耗性抗體)可能誘導癌症患者腫瘤生長的控制。

各種針對NKG2A的抗體已經在本領域中描述。WO 2008/009545描述了人源化抗NKG2A抗體Z270，而WO 2009/092805描述了人源化抗NKG2A抗體Z199。Vance等人(J Exp Med[實驗醫學雜誌]1999；190：1801-12)係指大鼠抗小鼠NKG2-抗體20D5(現可經由BD生物科學製藥公司(BD Biosciences Pharmingen)商購，目錄號550518,USA)；以及美國專利申請公開20030095965描述了鼠抗體3S9，據稱其結合至NKG2A、NKG2C和NKG2E。

頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC)的發病率約為每年60萬例，死亡率約為50%。HNSCC的主要危險因素係吸煙、飲酒和感染人乳頭瘤病毒(HPV)。儘管在流行病學和發病機制方面的知識取得了進展，但在過去四十年中，許多類型的HNSCC的生存率幾乎沒有提高。HNSCC患者的5年總的生存率僅為50%左右。吸煙、飲酒和病毒劑係HNSCC發展的主要危險因素。這些危險因素，加上遺傳易感性，導致在癌症發展的多步驟過程中積累了多種遺傳和表觀遺傳學改變，對此類HNSCC的分子致癌作用的瞭解正被用於開發治療HNSCC的靶向藥劑。

免疫療法作為治療HNSCC的想法已經存在了幾十年，治療HNSCC的嘗試涉及腫瘤特異性抗原的靶向。雖然在對用於各種實體癌症使用的此類免疫刺激治療策略方面取得了進展，但對頭頸部鱗狀細胞癌 (HNSCC)患者使用這些策略則相對滯後。HNSCC的免疫療法方法尤其複雜，因為HNSCC誘導的嚴重免疫抑制，這可能會降低免疫刺激的效果。HNSCC逃避抗腫瘤免疫應答(例如HLA I類的下調)的機制綜述提供於：Duray等人(2010)Clin.Dev.Immunol.[臨床與發育免疫學]文章編號701657；2010：1-15。

HNSCC的護理標準包括以基於順鉑的化學療法，包括與用於治療轉移性HNSCC的西妥昔單抗組合。對於不可切除的非轉移性HNSCC的治療，治療包括給予順鉑的化學療法以及西妥昔單抗與放射療法的組合。c225抗體(西妥昔單抗，ERBITUX®)係一種已表明抑制EGF-介導的體外腫瘤細胞生長的抗-EGFR抗體，該抗體已在2011年被FDA批准用於治療頭頸癌。西妥昔單抗(cetuximab)被認為藉由阻斷EGF受體途徑的致癌訊號傳導並藉由誘導Fcγ受體介導的抗體依賴的細胞的細胞毒性(ADCC)起作用。然而，在HNSCC中，ADCC可能受到誘導的嚴重免疫抑制的影響。同時，Vantourout等人，Sci.Transl.Med.[科學轉化醫學]6：231ra49(2014)報告了阻斷EGF受體途徑的致癌訊號傳導導致腫瘤細胞中MICA/B和ULBP蛋白家族的主要組織相容性複合體(MHC)I類相關抗原(其被在NK細胞和T細胞亞群上的激活受體NKG2D識別)的轉錄後調節。特別地，腫瘤細胞對這些作為NKG2D天然配位基的應激相關抗原的表現被臨床EGFR抑制劑降低，因此潛在地降低腫瘤細胞對NK和T細胞的可見性。

然而，由於許多HNSCC患者接受不同的儘管目前已批准的療法的治療過程，但本領域仍有需要確定最能從免疫療法藥劑治療中獲益的患者群體。

本發明尤其由以下觀察產生：使用抗NKG2A抗體與西妥昔單抗組合對抑制性受體NKG2A的阻斷提供患有癌症，具體是患有頭頸癌(特別是HNSCC)的患者(包括在既往接受基於鉑的療法的患者和癌症已經發生進展的患者(例如，不發生應答、復發或進展)中)中的臨床應答。此外，抗NKG2A抗體與西妥昔單抗組合應用，即使是在使用西妥昔單抗治療期間或使用西妥昔單抗治療後癌症已經進展的患者，也會導致臨床應答。在某些實施方式中，患者可能之前已使用西妥昔單抗和/或化學療法藥劑(例如，基於鉑的療法)或西妥昔單抗和放射療法進行治療。

在一個實施方式中，本文揭露的聯合治療特別適用於治療不能治癒的不可切除的和/或轉移性的HNSCC的患者群體，視情況進一步治療之前接受過基於鉑的療法、放射療法和/或西妥昔單抗的患者群體。

因此，在一個方面，與西妥昔單抗組合的中和性抗NKG2A抗體可以顯著改善患有不可切除的(例如，不能治癒的不可切除的)和/或轉移性頭頸癌的個體的群體的癌症，特別是已被認為對西妥昔單抗具有抗性的癌症HNSCC。這種聯合治療可為大群體的患有頭頸癌的個體提供機會，特別是儘管使用西妥昔單抗治療但癌症仍在進展的HNSCC的患者。特別地，聯合治療在預防進一步進展方面可能很有價值，特別是在延遲或預防轉移性癌症方面(例如，在患有非轉移性癌症的個體中)。

本文提供的是治療患有頭頸癌的個體中頭頸癌之方法。在一個實施方式中，該癌症係不可切除的(頭頸癌，不能藉由手術完全切除)。在一個實施方式中，提供了一種用於減少患有不可切除的和/或轉移性頭頸癌的個體中的腫瘤負荷(例如，與基線直徑總和相比，靶細胞病灶直徑總和的減少)之方法。

在一個實施方式中，該方法包括治療個體的頭頸癌，該方法包括給予該個體治療活性量的藥劑，該藥劑與西妥昔單抗組合使用中和人NKG2A多肽的抑制活性。在一個實施方式中，患有在使用西妥昔單抗治療期間或使用西妥昔單抗治療過程後癌症已經進展的癌症的個體(既往使用西妥昔單抗療程不包括中和NKG2A活性的化合物，但其可以與其他治療組合給予，特別是放射療法和/或化學療法)。在一個實施方式中，除了既往使用西妥昔單抗的治療過程(視情況與化學療法藥劑或放射療法組合)外，該個體還接受了使用化學療法藥劑的進一步的既往治療過程；例如，該個體接受了使用基於鉑的藥劑的療法的第一既往過程，然後是使用西妥昔單抗的療法的第二既往過程。在一個實施方式中，該癌症係不可切除的(例如，不可治癒的不可切除的)和/或轉移性頭頸癌。

在一個實施方式中，提供了一種用於治療患有不可切除的、視情況的非轉移性頭頸癌(特別是HNSCC)的個體中頭頸癌之方法，該方法包括給予該個體：(a)治療活性量的中和人NKG2A多肽活性的藥劑，(b)治療活性量的西妥昔單抗。在一個實施方式中，該個體已接受既往化學療法藥劑(例如，基於鉑的療法)、放射療法和/或西妥昔單抗的治療(例如，包括給予此類化學療法藥劑、放射療法和/或西妥昔單抗的既往療程)且其頭頸癌在此類既往治療期間或之後已經發生進展。在一個實施方式中，該個體患有對此類化學療法藥劑、放射療法和/或西妥昔單抗的治療沒有應答或沒有充分應答的頭頸癌。在一個實施方式中，該個體患有使用化學療法藥劑、放射療法和/或西妥昔單抗的治療後復發的頭頸癌。在一個實例中，個體已接受了包括給予化學療法藥劑(例如，基於鉑的療法)、放射療法和/或西妥昔單抗的既往療程，並且已經歷了在治療過程完成後(例如，治療過程完成的3年內或更短時間內)的癌症進展或復發。在一個實施方式中，該個體已接受與放射療法組合的西妥昔單抗。在一個實施方式中，該個體已接受基於鉑的療法，之後使用西妥昔單抗療法或與西妥昔單抗療法組合。在另一個實施方式中，該個體已接受既往西妥昔單抗治療。

在一個實施方式中，提供的是用於治療患有頭頸癌的個體中頭頸癌之方法，該個體已接受使用西妥昔單抗的既往治療(例如，包括給予西妥昔單抗的既往療程)，且其癌症已進展，該方法包括給予該個體：(a)治療活性量的中和人NKG2A多肽活性的藥劑，(b)治療活性量的西妥昔單抗。在一個實例中，該患有頭頸癌的個體已接受包括給予西妥昔單抗的既往療程，並且未對此類治療應答或對此類治療未充分應答。在一個實例中，個體已接受了包括給予西妥昔單抗的既往療程，並且已經歷了在包括給予西妥昔單抗的所述治療過程期間或之後的癌症進展或復發。在一個實例中，個體已接受了包括給予西妥昔單抗的既往療程，並且已經歷了在包括西妥昔單抗的所述既往治療過程完成之後(例如，所述既往治療過程完成後3年內)的癌症進展或復發。包括西妥昔單抗的既往療程可以例如包括西妥昔單抗與放射療法組合。在一個實施方式中，包括西妥昔單抗的既往療程包括西妥昔單抗與放射療法藥劑和/或化學療法藥劑(例如，基於鉑的藥劑)組合。

在一個實施方式中，提供的是一種用於治療個體中HNSCC或預防個體中HNSCC進展之方法，該方法包括：(i)確定患有HNSCC的個體，其對西妥昔單抗治療有抗性(例如，儘管使用西妥昔單抗治療，視情況使用西妥昔單抗與放射療法和/或化學療法組合，但仍有進展)，以及(ii)給予該個體有效劑量的藥劑與西妥昔單抗組合，該藥劑中和抑制性受體NKG2A。在一個實施方式中，步驟(i)的個體患有不可切除的、非轉移性的頭頸癌。在一個實施方式中，步驟(i)的個體患有不可切除的和轉移性的頭頸癌。

在另一個實施方式中，提供的是用於確定患有HNSCC，視情況不可切除的頭頸癌，視情況非轉移性頭頸癌，視情況的轉移性頭頸癌的個體(或例如，個體的群體)能否從使用中和抑制性受體NKG2A的藥劑與西妥昔單抗組合的治療中特別地獲得益處，對該治療有應答和/或適合於該治療之方法，該方法包括確定一個或多個個體是否患有對西妥昔單抗有抗性的頭頸癌(例如，作為單藥療法的西妥昔單抗，西妥昔單抗與放射療法組合，和/或西妥昔單抗與化學療法組合)，其中確定個體患有對西妥昔單抗有抗性的頭頸癌指示該一個或多個個體可能從使用中和抑制性受體NKG2A的藥劑與西妥昔單抗組合的治療中特別地獲得益處，對該治療有應答和/或適合於該治療。視情況，該方法還包括向確定從此類治療中特別地獲得益處，對此類治療有應答和/或適合於此類治療的個體給予中和抑制性受體NKG2A的藥劑與西妥昔單抗組合的步驟。

本文還提供了用於治療疾病(例如西妥昔單抗抗性的癌症)的組成物。在一些實施方式中，提供的是用於治療患有對使用西妥昔單抗(例如單獨使用西妥昔單抗或與另一種藥劑如化學療法或放射療法組合)治療(例如既往治療)有抗性的HNSCC癌症的個體的HNSCC的藥劑和/或西妥昔單抗，該藥劑中和人NKG2A的抑制活性。在一個實施方式中，提供的是中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，該藥劑用於治療接受既往使用西妥昔單抗治療的個體中的癌症。在一個實施方式中，中和人NKG2A抑制活性的藥劑與西妥昔單抗組合給予。在一個實施方式中，提供的是中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，該藥劑用於治療既往使用西妥昔單抗治療的人個體中的HNSCC，該治療包括向該個體給予有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗。在一個實施方式中，該癌或癌症係HNSCC。在一個實施方式中，提供的是中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，該藥劑用於治療患有不可切除的、視情況是非轉移性癌症的人個體中的癌症，該治療包括給予該個體有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗。在一個實施方式中，該癌或癌症係HNSCC。在一個實施方式中，提供的是西妥昔單抗，用於治療已接受既往治療(例如使用西妥昔單抗進行第一個療程的治療)的個體中的HNSCC，其中所述治療包括給予該個體有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗(例如使用西妥昔單抗進行第二療程的治療)。

在本文的任何實施方式中，該個體的特徵為換患有儘管使用西妥昔單抗治療但仍有進展的HNSCC癌。視情況，該個體患有HNSCC癌，儘管既往使用西妥昔單抗聯合放射療法治療，但所述癌仍在進展。

在本文的任何實施方式中，對使用西妥昔單抗治療具有抗性的頭頸癌係指在包含西妥昔單抗的既往療程期間或之後發生進展或復發的癌症。在一個實例中，對西妥昔單抗的治療有抗性的癌症係在包含西妥昔單抗的既往療程結束後(例如在3年內或更短時間內)發生進展或復發的癌症。例如，癌症可能在包含妥昔單抗的既往療程結束後2年內或12個月、6個月、4個月或3個月內發生進展。視情況，復發的癌症不是一種新的原發性癌症，而是代表原HNSCC的復發。視情況，復發的癌症係具有相同區域和/或側性(例如，右側或左側)的癌症。包括西妥昔單抗的既往療程可以例如包括西妥昔單抗與放射療法組合。包括西妥昔單抗的既往療程可以例如包括西妥昔單抗與化學療法(例如，基於鉑的療法)組合。

在本文的任何實施方式的一個方面，本發明的治療導致腫瘤負荷的降低，視情況，與基線直徑總和相比，靶細胞病灶直徑總和的減少。在一個實施方式中，該治療延遲癌症的進展。在一個實施方式中，該治療延遲或防止癌症的轉移。在一個實施方式中，藉由縮小或延遲癌症的生長的治療可改善患者的症狀或康樂。

在本文的任何實施方式中，該個體可以表徵為已接受了既往基於鉑的療法(並且可能患有儘管使用此類療法仍然有進展的癌症)。基於鉑的療法可以包括，例如，給予包括順鉑或卡鉑的治療方案，例如，包括鉑劑和進一步紫杉醇、多西他賽(docetaxel)、吉西他濱(gemcitabine)或5FU(5-氟尿嘧啶)的方案。

在一個實施方式中，提供的是一種用於治療個體中HNSCC之方法，該方法包括：(a)給予個體西妥昔單抗(例如，給予包含西妥昔單抗的週期或療程，視情況包含西妥昔單抗和放射療法或包含西妥昔單抗和化學療法的療程)；以及(b)如果步驟(a)中個體的癌症係對西妥昔單抗(例如，對步驟(a)的療程)有抗性的，視情況其中患者患有的癌症正在進展，擴散到其他器官或無應答，給予該個體治療活性量的與治療活性量的西妥昔單抗組合的中和人NKG2A多肽的活性的藥劑。

在一個實施方式中，該個體患有非轉移性HNSCC。

在一個實施方式中，該個體已接受了既往基於鉑之療法(例如，以及儘管進行了此類治療但仍有進展)。

在一個實施方式中，步驟(a)的西妥昔單抗治療包括放射療法和/或化學療法的組合治療。

在本文實施方式的任何方面中，中和人NKG2A多肽的抑制活性的藥劑係能夠結合NKG2A的抗體。在一個方面，中和人NKG2A多肽的抑制活性的藥劑係非消耗性抗體(例如缺乏Fc結構域或具有對一種或多種Fcγ受體具有最小結合或無結合的Fc結構域的抗體)。

在一個實施方式中，該癌症係口咽部腫瘤、喉部腫瘤、口腔腫瘤、鼻咽部腫瘤或下嚥部腫瘤。在一個實施方式中，HNSCC係口腔SCC(OCSCC)。OCSCC包括唇部、舌前2/3、口腔底、頰黏膜、牙齦、硬齶和磨牙後三角區鱗狀細胞癌。

在一個實施方式中，HNSCC係非轉移性癌症。

在一個實施方式中，個體係人乳頭狀瘤病毒(HPV)陽性的(例如，其特徵在於存在人乳頭瘤病毒，對於與高癌風險相關的HPV基因型係陽性的，對於HPV16基因型係陽性的和/或對於P16^INKa表現係陽性的)。

在一個實施方式中，個體係人乳頭狀瘤病毒(HPV)陰性的(例如，其特徵在於不存在人乳頭瘤病毒，不存在對於與高癌風險相關的HPV基因型，對於HPV16基因型係陰性的和/或對於P16^INKa表現係陰性的)。

在一個實施方式中，個體患有特徵在於在腫瘤環境中(例如在腫瘤組織內和/或在腫瘤鄰近組織內)存在淋巴細胞的頭頸癌。

在一個實施方式中，抗NKG2A抗體以導致人患者(體內)中人CD94/NKG2A的抑制活性得以中和的量給予，視情況其中抗NKG2A抗體以下述劑量給予：導致周圍血液NK和T淋巴細胞上的NKG2A多肽飽和持續至少兩周，視情況至少四周。在一個實施方式中，抗NKG2A抗體以1mg/kg至10mg/kg之間(視情況以約4mg/kg、視情況以約10mg/kg)的劑量給予。在一個實施方式中，給予的抗NKG2A抗體的固定劑量在100mg-1000mg範圍內，視情況在200mg-1200mg範圍內，例如750mg。

視情況，可以在用抗NKGA藥劑治療之前評估癌症的HLA-E狀態。在一個實施方式中，提供了組合HLA-E檢測步驟以鑒定患有HLA-E+HNSCC的患者的方法；這些患者隨後可以使用中和NKG2A多肽抑制活性的藥劑進行治療。

在一個實施方式中，中和人NKG2A多肽的活性的藥劑係抗NKG2A抗體，其以導致人患者(體內)中人CD94/NKG2A的抑制活性得以中和的有效量給予，視情況其中抗NKG2A抗體以下述劑量給予：導致外周血NK和T淋巴細胞中的NKG2A中和持續至少兩週，視情況至少四週。在一個方面，根據特定的臨床劑量方案，特別是以特定的劑量量並根據特定的給藥方案(例如劑量量和/或根據在此提供的具體給藥方案)給予該組合(或用於給予)。

在一個實施方式中，中和人NKG2A多肽的活性的藥劑係藉由阻斷其配位基HLA-E的結合(即抗NKG2A藥劑干擾NKG2A與HLA-E的結合)來降低NKG2A的抑制活性的抗體。具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體係此類抗體的實例。在一個實施方式中，抗NKG2A抗體降低NKG2A的抑制性活性而不阻斷其配位基HLA-E的結合，即抗NKG2A藥劑係非競爭性拮抗劑，並且不干擾NKG2A與HLA-E的結合。具有SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17的重鏈和輕鏈可變區的抗體分別是這種抗體的實例。

在一個實施方式中，抗NKG2A藥劑係以比對一種或多種活化NKG2受體顯著更高的親和力結合NKG2A的抗體。例如，在一個實施方式中，該藥劑係以比對NKG2C顯著更高的親和力結合NKG2A的抗體。在另外的或可替代的實施方式中，該藥劑係以比NKG2E顯著更高的親和力結合NKG2A的抗體。在另外的或可替代的實施方式中，該藥劑係以比NKG2H顯著更高的親和力結合NKG2A的抗體。分別具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體結合NKG2A而基本上不結合NKG2C、NKG2E或NKG2H。

在另外的或可替代的實施方式中，該抗NKG2A藥劑與具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體，和/或具有SEQ ID NO：16和17的重鏈和輕鏈可變區的抗體分別競爭與CD94/NKG2A的結合。該藥劑可以是例如人或人源化抗NKG2A抗體。

在一個實施方式中，該抗NKG2A抗體係具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的人源化抗體。提供了這樣的人源化抗體的框架區(FR)中的胺基酸取代的示例性互補決定區(CDR)殘基或序列和/或位點，該人源化抗體具有改進的性質例如像更低的免疫原性、改善的抗原結合或其他功能特性、和/或改善的物理化學性質例如更好的穩定性。

在其他的實施方式中，提供了藥物組成物和套組(kit)，以及使用它們的方法。

將這些方面更詳細地揭露於在此提供的本發明的說明書中，並且另外的方面、特徵和優點將從該說明書中顯而易見。

定義

當使用“包括”時，這可以視情況被“基本上由......組成”或藉由“由......組成”代替。

NKG2A(OMIM 161555，將其全部公開內容藉由引用結合在此)係NKG2轉錄物組的成員(Houchins等人(1991)J.Exp.Med.[實驗醫學雜誌]173：1017-1020)。NKG2A由跨越25kb的7個外顯子編碼，顯示出一些差別剪接。NKG2A與CD94一起形成在NK細胞、α/β T細胞、γ/δ T細胞、和NKT細胞的亞群的表面上發現的異源二聚體抑制性受體CD94/NKG2A。與抑制性KIR受體類似，它在其胞質結構域中具有ITIM。如本文所使用的，“NKG2A”係指NKG2A基因或編碼蛋白的任何變體、衍生物或同種型。還涵蓋的是與野生型、全長NKG2A共用一種或多種生物學性質或功能並且共用至少70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的核苷酸或胺基酸同一性的任何核酸或蛋白質序列。人NKG2A在3個結構域中包含233個胺基酸，其中包含殘基1-70的胞質結構域、包含殘基71-93的跨膜區和包含殘基94-233的胞外區，具有以下序列：MDNQGVIYSDLNLPPNPKRQQRKPKGNKSSILATEQEITYAELNLQKASQDFQGNDKTYHCKDLPSAPEKLIVGILGIICLILMASVVTIVVIPSTLIQRHNNSSLNTRTQKARHCGHCPEEWITYSNSCYYIGKERRTWEESLLACTSKNSSLLSIDNEEEMKFLSIISPSSWIGVFRNSSHHPWVTMNGLAFKHEIKDSDNAELNCAVLQVNRLKSAQCGSSIIYHCKHKL(SEQ ID NO：1)。

NKG2C(OMIM 602891，其全部揭露內容藉由引用併入本文)和NKG2E(OMIM 602892，其全部揭露內容藉由引用併入本文)係NKG2轉錄物組的另外兩個成員(Gilenke等人(1998)Immunogenetics[免疫遺傳學]48：163-173)。CD94/NKG2C和CD94/NKG2E受體係在淋巴細胞亞群表面上發現的活化受體，例如NK細胞和T細胞。

HLA-E(OMIM 143010，將其全部公開內容藉由引用併入本文)係在細胞表面上表現並受肽的結合調節的非經典MHC分子，例如衍生自其他MHC I類分子的訊號序列的片段。也已經鑒定了HLA-E的可溶性版本。除了其T細胞受體結合性質，HLA-E藉由特異性結合CD94/NKG2A、CD94/NKG2B、和CD94/NKG2C而結合自然殺傷(NK)細胞、自然殺傷T細胞(NKT)和T細胞(α/β和γ/δ)的亞組(參見例如Braud等人(1998)Nature[自然]391：795-799，其全部揭露內容藉由引用在此結合)。HLA-E的表面表現藉由CD94/NKG2A+NK細胞、T細胞、或NKT細胞選殖保護靶細胞免於裂解。如在此所使用的，“HLA-E”係指HLA-E基因或編碼的蛋白質的任何變體、衍生物或同種型。還涵蓋的是與野生型、全長HLA-E共用一種或多種生物學性質或功能並且共用至少70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的核苷酸或胺基酸同一性的任何核酸或蛋白質序列。

在本揭露的上下文中，“CD94/NKG2A陽性淋巴細胞”係指在細胞表面上表現CD94/NKG2A的淋巴譜系(例如NK細胞、NKT細胞和T細胞)的細胞，這些細胞可以藉由例如使用特異性識別CD94和NKG2A上的組合表位或單獨NKG2A上的表位的抗體的流式細胞術來檢測。“CD94/NKG2A陽性淋巴細胞”還包括淋巴來源的無限增殖細胞系(例如NKL、NK-92)。

在本揭露的上下文中，“降低NKG2A的抑制活性”、“中和NKG2A”或“中和NKG2A的抑制活性”係指這樣的過程，其中CD94/NKG2A在其對造成淋巴細胞反應(如細胞介質釋放和細胞毒反應)的細胞內過程產生負面影響的能力方面受到抑制。這可以例如在基於NK細胞或T細胞的細胞毒性測定中測量，其中測量治療化合物刺激藉由 CD94/NKG2A陽性淋巴細胞殺死HLA-E陽性細胞的能力。在一個實施方式中，抗體製品導致CD94/NKG2A限制性淋巴細胞的細胞毒性增加至少10%，較佳的是淋巴細胞細胞毒性增加至少40%或50%，或更較佳的是NK細胞毒性增加至少70%，並涉及所述的細胞毒性測定。如果抗NKG2A抗體減少或阻斷CD94/NKG2A與HLA-E的相互作用，則其可增加CD94/NKG2A限制性淋巴細胞的細胞毒性。這可以例如在標準的4小時體外細胞毒性測定中評價，使用例如表現CD94/NKG2A的NK細胞和表現HLA-E的靶細胞。此類NK細胞不能有效殺死表現HLA-E的靶標，因為CD94/NKG2A識別HLA-E，導致防止淋巴細胞介導的細胞溶解的抑制性訊號傳導的起始和傳播。這種體外細胞毒性測定可以藉由本領域熟知的標準方法進行，例如在Coligan等人編輯，Current Protocols in Immunology[當前免疫學方案]，格林尼出版協會(Greene Publishing Assoc.)和威力出版公司(Wiley Interscience)，紐約，(1992,1993)的實例中所描述的。評估抗體刺激淋巴細胞殺死靶細胞(例如P815、K562細胞或合適的腫瘤細胞)的能力的鉻釋放和/或其他參數也被揭露於Sivori等人，J.Exp.Med.[實驗醫學雜誌]1997；186：1129-1136；Vitale等人，J Exp Med.[實驗醫學雜誌]1998；187：2065-2072；Pessino等人J.Exp.Med.[實驗醫學雜誌]1998；188：953-960；Neri等人Clin.Diag.Lab.Immun.[臨床及診斷實驗室免疫學]2001；8：1131-1135；Pende等人，J Exp Med.[實驗醫學雜誌]1999；190：1505-1516中，每個全部揭露內容藉由引用併入本文。在添加NK細胞之前，用⁵¹Cr標記靶細胞，然後殺傷被估計為與從細胞到培養基的⁵¹Cr釋放成比例，作為殺傷的結果。添加防止CD94/NKG2A與HLA-E結合的抗體導致經由CD94/NKG2A的抑制性訊號傳導的啟動和傳播的預防。因此，添加這類藥劑導致淋巴細胞介導的靶細胞殺傷的增加。該步驟由此鑒定藉由例如阻斷配位基結合來阻止CD94/NKG2A誘導的負的訊號傳導的藥劑。在特別的⁵¹Cr釋放細胞毒性測試中，表現CD94/NKG2A的NK效應細胞可殺死HLA-E陰性LCL 721.221靶細胞，但較少能殺死表現HLA-E的LCL 721.221-Cw3對照細胞。相反地，缺少CD94/NKG2A的YTS效應細胞有效殺死兩種細胞系。因此，由於HLA-E誘導的經由CD94/NKG2A的抑制性訊號，NK效應細胞更低效地殺死HLA-E+LCL 721.221-Cw3細胞。當在這此類⁵¹Cr釋放細胞毒性測定中，NK細胞與根據本發明的封閉抗CD94/NKG2A抗體預孵育時，以抗體濃度依賴性方式更有效地殺死表現HLA-E的LCL 721.221-Cw3細胞。抗NKG2A抗體的抑制性活性(即細胞毒性增強潛力)也可以藉由許多其他方式中的任何一種來評估，例如，藉由其對胞內游離鈣的效應，例如Sivori等人，J Exp Med.[實驗醫學雜誌]1997；186：1129-1136中所述的，其揭露內容藉由引用併入本文。可以例如藉由測量細胞介質產生(例如IFN-γ產生)或細胞毒性標誌物(例如CD107或CD137動員)的增加來評估NK細胞細胞毒性的活化。在一個示例性方案中，藉由細胞表面和細胞質內染色以及藉由流式細胞術在培養4天後的分析來評估來自PBMC的IFN-γ產生。簡而言之，在培養物的最後4小時以5μg/ml的最終濃度添加佈雷非德菌素A(西格瑪奧德里奇公司(Sigma Aldrich))。然後在透化(IntraPrep^TM；貝克曼庫爾特公司(Beckman Coulter))和用PE-抗IFN-γ或PE-IgG1(Pharmingen)染色之前用抗CD3和抗CD56 mAb孵育細胞。使用ELISA(GM-CSF：DuoSet Elisa，R&D系統公司，明尼阿波里斯，明尼蘇達州，IFN-γ：OptElA set，Pharmingen)在上清液中測量來自多株激活的NK細胞的GM-CSF和IFN-γ產生。

無論何時當提及NKG2A中和劑(例如抗體)的整個說明書中提及“治療HNSCC”等時，是指：(a)治療HNSCC的方法，所述方法包括向對此類治療有需要的個體、哺乳動物、尤其是人，以允許治療HNSCC的劑量(治療有效量)、較佳的是以如本文所規定的劑量(量)給予(對於至少一種治療)NKG2A中和劑(較佳的是在藥學上可接受的載體材料中)的步驟；(b)使用NKG2A中和劑用於治療HNSCC，或使用NKG2A中和劑用於所述治療(尤其是在人中)；(c)使用NKG2A中和劑用於製造用於治療HNSCC的藥劑製劑，(d)使用NKG2A中和劑用於製造用於治療HNSCC的藥劑製劑(包括混合NKG2A中和劑與藥學上可接受的載體)或包含有效劑量的適用於治療HNSCC的NKG2A中和劑的藥劑製劑的方法；或者(e)(a)、(b)、(c)和(d)的任何組合，這係根據允許在提交本申請的國家取得專利權的本發明主題。

如在此所使用的術語“生檢樣品”被定義為去除組織用於檢查例如以建立診斷的目的。生檢的類型的實例包括藉由應用吸取，例如藉由連接到注射器的針；藉由儀器去除組織的片段；藉由用適當的儀器藉由內窺鏡去除；藉由手術切除例如整個病灶；等等。

如在此所使用，術語“抗體”係指多株和單株抗體。根據重鏈中恒定區的類型，抗體被分配到五個主要類別之一：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。其中一些進一步分為亞類或同種型，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4等。示例性免疫球蛋白(抗體)結構單元包括四聚體。每個四聚體由兩對相同的多肽鏈構成，每對具有一條“輕”鏈(約25kDa)和一條“重”鏈(約50kDa-70kDa)。每條鏈的N末端限定具有約100個至110個或更多個胺基酸的可變區，主要負責抗原識別。術語可變輕鏈(V_L)和可變重鏈(V_H)分別指這些輕鏈和重鏈。對應於不同類別的免疫球蛋白的重鏈恒定區被對應地稱為“α”、“δ”、“ε”、“γ”以及“μ”。不同類別的免疫球蛋白的亞單元結構和三維組態係熟知的。IgG係在此使用的示例性抗體類別，因為它們係生理狀況下最常見的抗體且在實驗室條件下最容易製備。視情況，該抗體係單株抗體。抗體的具體實例係人源化的、嵌合的、人的或其他適合人的抗體。“抗體”還包括任何一種抗體的任何一種片段或衍生物。

術語“特異地結合到”意指較佳的是在競爭性結合測定中抗體可以結合到結合配偶體(例如NKG2A)上，正如使用重組體形式的蛋白、其中的表位、或存在於分離的靶細胞的表面上的天然蛋白所評估。用於確定特異性結合的競爭性結合測定以及其他方法在本領域內是熟知的。例如，可以經由放射性標記、物理方法如質譜法、或使用例如細胞螢光分析(例如FACScan)檢測的直接或間接螢光標記來檢測結合。結合高於用對照所看到的量，非特異性藥劑指示出藥劑結合至靶標。特異性結合NKG2A的藥劑可以單獨地結合NKG2A或作為與CD94的二聚體結合NKG2A。

當一種抗體被稱為與一種具體的單株抗體競爭時，它意指在使用重組分子(例如NKG2A)或表面表現的分子(例如NKG2A)結合測定中，該抗體與該單株抗體競爭。例如，如果測試抗體在結合測定中降低具有SEQ ID NO：2中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體與NKG2A多肽或表現NKG2A的細胞的結合，則稱該抗體分別與這樣的抗體“競爭”。

如本文所用的，術語“親和力”意指抗體與表位結合的強度。抗體的親和性藉由解離常數Kd(定義為[Ab] x [Ag]/[Ab-Ag])給出，其中[Ab-Ag]係抗體-抗原複合體的莫耳濃度，[Ab]係未結合的抗體的莫耳濃度，並且[Ag]係未結合的抗原的莫耳濃度。親和力常數K_a係由1/Kd定義的。用於確定mAb的親和力的方法可以在Harlow等人，Antibodies：A Laboratory Manual[抗體：實驗室手冊],Cold Spring Harbor Laboratory Press[冷泉港實驗室出版社],Cold Spring Harbor[冷泉港]，紐約州，1988；Coligan等人編輯，Current Protocols in Immunology[免疫學實驗指南],Greene Publishing Assoc.and Wiley Interscience[格林出版協會和威利國際科學出版公司]，紐約州，(1992,1993)以及Muller,Meth.Enzymol.[酶學方法]92：589-601(1983)中找到，將這些參考文獻藉由引用全然地併入本文。本領域中熟知的用於確定mAb親和力的一種標準的方法係使用表面電漿共振(SPR)篩選(例如藉由用BIAcore^TMSPR分析裝置分析)。

在本文的上下文中，“決定簇”指明多肽上相互作用或結合的位點。

術語“表位”係指一種抗原決定簇，並且是在抗原上與抗體結合的面積或區域。蛋白質表位可以包括直接參與結合的胺基酸殘基連同藉由特異性抗原結合的抗體或肽被有效地阻斷的胺基酸殘基，即，抗體“足跡”內的胺基酸殘基。它係可以與例如抗體或受體組合的複雜抗原分子上的最簡單形式或最小結構區域。表位可以是直鏈的或構象性的/結構性的。術語“直鏈的表位”被定義為由多個胺基酸殘基組成的表位，這些胺基酸殘基在胺基酸的線性序列上(一級結構)係連續的。術語“構象性表位或結構性表位”被定義為由多個胺基酸殘基構成的表位，這些胺基酸殘基不全是連續性的，並且因此表示了藉由分子折疊(二級、三級和/或四級結構)而彼此鄰近的胺基酸線性序列的分離的部分。構象性表位取決於三維結構。因此，術語“構象性”經常與“結構性”互換使用。

術語“藥劑”在本文中用於表示化合物、化學化合物的混合物、生物大分子、或由生物學材料製成的提取物。術語“治療劑”係指具有生物活性的藥劑。

出於本文的目的，“人源化”或“人”抗體係指一種抗體，其中一種或多種人免疫球蛋白的恒定和可變框架區與動物免疫球蛋白的結合區(例如CDR)相融合。這類抗體被設計成保持衍生出這些結合區的非人抗體的結合特異性，但是卻要避免對抗非人抗體的免疫應答。此類抗體可獲自轉基因小鼠或其他動物，所述動物已經被“工程化”以產生響應於抗原激發的特異性人抗體(參見，例如，格林(Green)等人(1994)自然遺傳學(Nature Genet)(7：13；Lonberg等人(1994)Nature[自然]368：856；Taylor等人(1994)Int Immun[國際免疫學]6：579，將其全部傳授內容藉由引用併入本文)。完全的人抗體還可藉由基因或染色體轉染法連同噬菌體展示技術來構建，這些技術在本領域中已知(參見，例如McCafferty等人(1990)Nature[自然]348：552-553)。人抗體也可以藉由體外激活的B細胞產生(參見，例如，美國專利案號5,567,610和5,229,275，藉由引用以其全文結合在此)。

“嵌合抗體”係一種抗體分子，其中(a)恒定區或其一部份被改變、替換或交換，這樣使得抗原結合位點(可變區)被連接至不同的或改變的類別、效應子功能和/或種類的恒定區，或連接至賦予該嵌合抗體新特性的完全不同的分子，例如酶、毒素、激素、生長因子、藥物等；或者(b)可變區或其一部份被具有不同的或改變的抗原特異性的可變區改變、替換或交換。

術語“Fc結構域”、“Fc部分”以及“Fc區域”係指抗體重鏈的C端片段，例如人γ(伽馬)重鏈的從胺基酸約(aa)230至約aa 450或它在其他類型的抗體重鏈(例如針對人抗體的α、δ、ε和μ)中的對應序列，或其天然發生的同種異型。除非另外說明，否則貫穿本揭露使用了針對免疫球蛋白通常所接受的Kabat胺基酸編號((參見Kabat等人，1991， Sequences of Proteins of Immunological Interest[免疫學目的蛋白質序列]，第5版，美國國立衛生研究院，公共衛生署(United States Public Health Service,National Institute of Health)，馬里蘭州貝塞斯達(Bethesda,MD))。

術語“分離的”、“純化的”或“生物學純的”係指實質上或基本上不含在天然狀態下發現的通常伴隨其的組分的物質。純度和均質性典型地是使用分析化學技術(例如聚丙烯醯胺凝膠電泳或高效液相層析法)來確定的。製劑中存在的主要種類的蛋白基本上是純化的。

術語“多肽”、““肽”以及“蛋白”在此可互換地使用，係指胺基酸殘基的聚合物。這些術語適用於胺基酸聚合物，其中一個或多個胺基酸殘基係相應天然存在的胺基酸的人造化學類比劑，並且適用於天然存在的胺基酸聚合物和非天然存在的胺基酸聚合物。

術語“重組”當用於指例如一種細胞、核酸、蛋白或載體時表明該細胞、核酸、蛋白或載體已經藉由導入異源核酸或蛋白或者改變天然的核酸或蛋白進行修飾，或者表明該細胞衍生自這樣修飾的細胞。因此，例如，這些重組細胞表現在細胞的天然形式(非重組體)中未發現的基因或表現以其他方式異常表現的、低表現的或根本不表現的天然基因。

在此上下文中，“結合”多肽的或表位的術語抗體指定一種結合所述具有特異性和/或親和性決定簇的抗體。

術語“同一性”或“相同的”當用於兩種或更多種多肽的序列之間的關係時，係指多肽之間的序列關聯程度，如藉由兩個或更多個胺基酸殘基鏈之間匹配的數目來確定的。“同一性”使用由具體數學模型或電腦程式(即，“演算法”)解決的空位比對(如果有的話)測量兩個或更多個序列中較短序列之間的相同匹配的百分比。相關多肽的同一性可以藉由已知方法容易地計算出。此類方法包括但不限於在以下文獻中描述的那些：Computational Molecular Biology[計算分子生物學],Lesk,A.M.，編輯，Oxford University Press[牛津大學出版社]，紐約，1988；Biocomputing：Informatics and Genome Projects[生物計算：資訊學和基因組項目]Smith,D.W.，編輯，Academic Press[學術出版社]，紐約，1993；Computer Analysis of Sequence Data[序列數據的電腦分析]，第1部分，Griffin,A.M.，和Griffin,H.G.，編輯，Humana Press[胡瑪納出版社]，新澤西州，1994；Sequence Analysis in Molecular Biology[分子生物學的序列分析]，von Heinje,G.，Academic Press[學術出版社]，1987；Sequence Analysis Primer[序列分析引物],Gribskov,M.和Devereux,J.，編輯，M.Stockton Press[斯托克頓出版社]，紐約，1991；以及Carillo等人，SIAM J.Applied Math.[工業和應用數學學會應用數學雜誌]48,1073(1988)。

用於確定同一性的方法被設計為在測試的序列之間給出最大的匹配。確定同一性的方法描述於公開地可獲得的電腦程式中。用於確定在兩個序列之間的同一性的電腦程式方法包括GCG套裝程式，包括GAP(Devereux等人，Nucl.Acid.Res.[核酸研究]12,387(1984)；遺傳學電腦集團(Genetics Computer Group)，威斯康辛大學(University of Wisconsin)，威斯康辛州麥迪森市(Madison,Wis.))、BLASTP、BLASTN、以及FASTA(Altschul等人，J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]215,403-410(1990))。BLASTX程式可以公開地獲自美國國家生物技術資訊中心(NCBI)以及其他來源(BLAST Manual[BLAST手冊],Altschul等人.NCB/NLM/NIH貝塞斯達，馬里蘭州20894；Altschul等人，同上)。公知的Smith Waterman演算法也可以用來確定同一性。

NKG2A中和劑的產生

例如，中和抑制性受體NKG2A的藥劑可以包括藥劑(如蛋白)，其結合人CD94/NKG2A受體細胞外部分或其天然配位基HLA-E，並降低CD94/NKG2A陽性淋巴細胞表面表現的人CD94/NKG2A受體的抑制活性。在一個實施方式中，藥劑與HLA-E競爭結合CD94/NKG2A，即該藥劑阻斷CD94/NKG2A與其配位基HLA-E之間的相互作用。在一個實施方式中，藥劑(例如抗體)結合至CD94/NKG2A，並阻斷CD94/NKG2A與其配位基HLA-E之間的相互作用。在另一個實施方式中，中和抑制性受體NKG2A的藥劑係一種結合人HLA-E多肽並抑制人HLA-E蛋白與人CD94/NKG2A蛋白之間相互作用的蛋白(例如抗體)。在另一個實施方式中，藥劑在與CD94/NKG2A結合方面不與HLA-E競爭；即該藥劑結合NKG2A且能夠與HLA-E同時結合CD94/NKG2A。抗體可以結合CD94和NKG2A上的聯合表位或單獨NKG2A上的表位。在一個實施方式中，該抗體結合在NKG2A上的表位，該表位至少部分地與HLA-E結合位點重疊。

在一個方面，抗NKG2A藥劑係選自全人抗體、人源化抗體和嵌合抗體的抗體。在一個方面，該藥劑包含衍生自人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體的恒定區。在一個方面，該藥劑係選自以下抗體的片段：IgA、IgD、IgG、IgE和IgM抗體。在一個方面，該藥劑係選自以下的抗體片段：Fab片段、Fab'片段、Fab'-SH片段、F(ab)2片段、F(ab')2片段、Fv片段、重鏈Ig(美洲駝或駱駝Ig)、V_HH片段、單結構域FV和單鏈抗體片段。在一方面中，該藥劑係選自以下各項的合成的或半合成的抗體衍生的分子：scFV、dsFV、微小抗體、雙抗體、三抗體、κ體、IgNAR、以及多特異性抗體。

在一個實施方式中，抗NKG2A抗體不顯示與人Fcγ受體(例如人CD16、CD32a、CD32b和CD64中的一種或多種(或全部))的實質的特異性結合。這類抗體可以包含已知不結合Fc受體的各種重鏈的恒定區。一個此類實例係IgG4恒定區。可替代地，不包含恒定區的IgG4抗體片段(例如Fab或F(ab')2片段)可用於避免Fc受體結合。可以根據本領域已知的方法評估Fc受體結合，包括例如在BIACORE測定中測試抗體與Fc受體蛋白的結合。此外，可以使用任何人抗體類型(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)，其中Fc部分被修飾以最小化或消除與Fc受體的結合(參見例如WO 03101485，將其揭露內容藉由引用結合在此)。用於評估Fc受體結合的測定(例如基於細胞的測定)係本領域熟知的，並且描述於例如WO 03101485中。

本揭露因此涉及結合NKG2A的抗體或其他藥劑。在一方面中，該抗體以低於與人NKG2C和/或NKG2E至少100倍的KD結合NKG2A。

在本揭露的一個方面，藥劑藉由干擾CD94/NKG2A訊號傳導來減少CD94/NKG2A介導的對表現CD94/NKG2A的淋巴細胞的抑制，例如藉由干擾NKG2A與HLA-E的結合、阻止或誘導CD94/NKG2A受體的構象變化、和/或影響CD94/NKG2A受體的二聚化和/或聚集。

在本揭露的一個方面，藥劑以比NKG2C低至少100倍的KD結合NKG2A的細胞外部分。在另一個較佳的方面中，該藥劑以比與NKG2C低至少150、200、300、400、或10,000倍的KD結合NKG2A的細胞外部分。在揭露的另一方面，藥劑以比NKG2C、NKG2E和/或NKG2H分子低至少100倍的KD結合NKG2A的細胞外部分。在另一個較佳的方面中，該藥劑以比與NKG2C、NKG2C和/或NKG2H分子低至少150、200、300、400、或10,000倍的KD結合NKG2A的細胞外部分。這可以例如在BiaCore實驗中測量，其中測量藥劑結合固定化的CD94/NKG2A的細胞外部分(例如從表現CD94/NKG2的細胞中純化的或在生物系統中產生的)的能力，並與同一測定中藥劑與類似產生的CD94/NKG2C和/或其他CD94/NKG2變體的結合進行比較。可替代地，可測量藥劑與天然表現或過表現(例如在暫態或穩定轉染後)CD94/NKG2A的細胞的結合，並與表現CD94/NKG2C和/或其他CD94/NKG2變體的細胞的結合進行比較。抗NKG2A抗體可以視情況結合NKG2B，該NKG2B係與CD94一起形成抑制性受體的NKG2A剪接變體。在一個實施方式中，可以使用在美國專利案號8,206,709中揭露的方法測量親和力，例如藉由如在美國專利案號8,206,709的實例8中所示的Biacore評估與共價固定的NKG2A-CD94-Fc融合蛋白的結合，將其揭露內容藉由引用結合在此。

抗體可以例如具有在0.5-10ng/ml之間、視情況1-5ng/ml、視情況1-10ng/ml、視情況1-20ng/ml、例如約4ng/ml的對表現NKG2A的細胞的結合(高親和力)的EC₅₀。表現NKG2A的細胞可以是例如在人PBMC中表現NKG2A的細胞。在一個實施方式中，表現NKG2A的細胞係表現CD94/NKG2A的細胞，例如如美國專利案號8,206,709的實例13所示的穩定過表現CD94/NKG2A的Ba/F3細胞，將其揭露內容藉由引用結合在此。在一個實施方式中，抗體對人NKG2A多肽的結合親和力(K_D)，視情況其中結合親和力係二價的，小於10^-9M，視情況小於10^-10M，或視情況小於10^-11M，視情況介於10^-10M和10^-12M之間，視情況介於10^-10M和10^-11M之間。可以評估親和力，例如如美國專利案號7,932,055中所述，結合單鏈NKG2A-CD94-mFc構建體，將其揭露內容藉由引用結合在此。

抗NKG2A抗體以是人或人源化抗體，例如包含下表中所示的抗體的相應VH和VL區。

抗NKG2A抗體可以是人或人源化抗體，例如包括來自選自例如VH1_18、VH5_a、VH5_51、VH1_f和VH1_46的人受體序列的VH人受體框架和JH6 J-區段，或本領域已知的其他人種系VH框架序列。VL區人受體序列可以是例如VKI_O2/JK4。

在一個實施方式中，抗體係基於抗體Z270的人源化抗體或抗體片段。不同的人源化Z270VH鏈示於SEQ ID NO：2-6(可變區結構域胺基酸已加底線)中。人源化Z270VH輕鏈示於SEQ ID NO：7中。HumZ270抗體也揭露在美國專利案號8,206,709(將其揭露內容藉由引用結合在此)中。HumZ270VH6(SEQ ID NO：3)係基於VH5_51；HumZ270VH1(SEQ ID NO：2)係基於VH1_18；humZ270VH5(SEQ ID NO：4)係基於VH5_a；humZ270VH7(SEQ ID NO：5)係基於VH1_f；以及humZ270VH8(SEQ ID NO：6)係基於VH1_46；全部具有JH6 J區段。這些抗體中的每一個保持與NKG2A的高親和力結合，具有低的對該抗體的宿主免疫應答的可能性，因為每一個人源化構建體的Kabat CDR-H2的6個C-末端胺基酸殘基與人受體構架相同。使用比對程式VectorNTI，獲得humZ270VH1和humZ270VH5、-6、-7和-8之間的以下序列同一性：78.2%(VH1對VH5)、79.0%(VH1對VH6)、88,7%(VH1對VH7)和96,0%(VH1對VH8)。

在一個方面，該藥劑包含(i)SEQ ID NO：2-6中任一個、或與其具有至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%一致的胺基酸序列的重鏈可變區，和(ii)SEQ ID NO：7、或與其具有至少50%、60%、 70%、80%、90%、95%、98%或99%一致的胺基酸序列的輕鏈可變區。在一個方面，該藥劑包含(i)含有SEQ ID NO：2-6中任一個的胺基酸序列、或與其具有至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%一致的胺基酸序列的重鏈，和(ii)含有SEQ ID NO：7的胺基酸序列、或與其具有至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%一致的胺基酸序列的輕鏈。具有包含SEQ ID NO：2-6中任一個序列的重鏈和包含SEQ ID NO：7的序列的輕鏈的抗體中和NKG2A的抑制活性，但基本上不結合活化受體NKG2C、NKGE或NKG2H。此抗體還與HLA-E競爭結合細胞表面上的NKG2A。在一方面中，該藥劑包含HCDR1、HCDR2和/或HCDR3序列，這些序列來源於具有SEQ ID NO：2-6中任一個的胺基酸序列的重鏈。在本發明的一方面中，該藥劑包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列，這些序列來源於具有SEQ ID NO：7的胺基酸序列的輕鏈。

重鏈(可變區已加底線)

VH1：

(SEQ ID NO：2)

VH6：

(SEQ ID NO：3)

VH5：

(SEQ ID NO：4)

VH7：

(SEQ ID NO：5)

VH8：

(SEQ ID NO：6)

輕鏈

(SEQ ID NO：7)

在一個方面，抗NKG2A抗體係包含對應於SEQ ID NO：2-6中任一個的殘基31-35(胺基酸序列SYWMN(SEQ ID NO：8))的CDR-H1、對應於SEQ ID NO：2-6中任一個殘基50-60(胺基酸序列RIDPYDSETHY(SEQ ID NO：9))(視情況50-66，當包括人起源的6個末端胺基酸時，即VH6重鏈的序列RIDPYDSETHYSPSFQG(SEQ ID NO：10)、VH1重鏈的序列RIDPYDSETHYAQKLQG(SEQ ID NO：11)等)的CDR-H2、以及對應於SEQ ID NO：2-6中任一個的殘基99-114(95-102，根據卡巴特)的CDR-H3(胺基酸序列GGYDFDVGTLYWFFDV(SEQ ID NO：12))的抗體或抗體片段。在一個實施方式中，CDR-H2對應於SEQ ID NO：2-6中任一個的殘基50-66。視情況，CDR可以包含一個、兩個、三個、四個或更多個胺基酸取代。

在一個方面，抗NKG2A抗體係包含對應於SEQ ID NO：7的殘基24-34(胺基酸序列RASENIYSYLA(SEQ ID NO：13))的CDR-L1、對應於SEQ ID NO：7的殘基50-56(胺基酸序列NAKTLAE(SEQ ID NO：14))的CDR-L2、以及對應於SEQ ID NO：7的殘基89-97(胺基酸序列QHHYGTPRT(SEQ ID NO：15))的CDR-L3的抗體或抗體片段。視情況，CDR可以包含一個、兩個、三個、四個或更多個胺基酸取代。

在一個方面，抗NKG2A抗體係包含對應於SEQ ID NO：2-6中任一個的殘基31-35的CDR-H1、對應於SEQ ID NO：2-6的殘基50-60(視情況50-66)的CDR-H2、對應於SEQ ID NO：2-6中任一個的殘基99-114(95-102，根據卡巴特)的殘基CDR-H3、對應於SEQ ID NO：7的殘基24-34的 CDR-L1、對應於SEQ ID NO：7的殘基50-56的CDR-L2、以及對應於SEQ ID NO：7殘基89-97的CDR-L3的抗體或抗體片段。

在一個方面，該藥劑係針對任何前述抗體結合的CD94/NKG2A表位產生的全人抗體。

應當理解地是，雖然可以使用上述抗體，但是可以製備其他抗體。例如，NKG2A的任何片段(較佳的是但不排他地是人NKG2A)或NKG2A片段的任何組合，可以用作免疫原以產生抗體，並且這些抗體可以識別在NKG2A多肽之內的任何位置的表位，只要它們能在如此處描述的表現NKG2A的NK細胞上這樣做。最較佳的是，該表位係由具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體特異性識別的表位。

在一個方面，抗NKG2A抗體實質上與具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體(例如，莫納利珠單抗(monalizumab))結合相同的表位。具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體失去與具有以下胺基酸取代的NKG2A突變體的結合：K199A/D202A/V213S/R215A/K217A(參考GenBank登錄號AAL65234.1)。在一個實施方式中，根據本揭露使用的抗NKG2A抗體結合NKG2A的表位，該表位與具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體(例如，莫納利珠單抗(monalizumab))結合的表位至少部分地與重疊，或包括其中至少一個殘基。由抗體結合的殘基可以被指定為存在於NKG2A多肽(例如，在細胞表面上表現的NKG2A多肽)的表面上。例如，由抗體結合的NKG2A上的胺基酸殘基可以例如選自以下殘基的組，該組由K199、D202、V213、R215和K217組成(參考GenBank登錄號AAL65234.1或SEQ ID NO：1的NKG2A胺基酸序列)。

可以測量抗NKG2A抗體與用NKG2A突變體轉染的細胞的結合，並將其與抗NKG2A抗體結合野生型NKG2A多肽(SEQ ID NO：1)的能力進行比較。抗NKG2A抗體和突變體NKG2A多肽(例如，具有取代K199A/D202A/V213S/R215A/K217A的突變體NKG2A)之間的結合的降低意味著結合親和力有所降低(例如，如藉由已知的方法測量的，如對表現特定突變體的細胞進行FACS測試，或藉由Biacore測試與突變體多肽的結合)，和/或抗NKG2A抗體的總結合能力的降低(例如，如藉由在抗NKG2A抗體濃度對多肽濃度的曲線圖中Bmax的降低證實的)。在結合的顯著降低指示在抗NKG2A抗體結合至NKG2A時突變的殘基直接參與與抗NKG2A抗體的結合，或緊密靠近該結合蛋白。

在一些實施方式中，結合的顯著降低意味著在抗NKG2A抗體與突變體NKG2A多肽之間的結合親和力和/或能力相對於該抗體與野生型NKG2A多肽之間的結合降低大於40%、大於50%、大於55%、大於60%、大於65%、大於70%、大於75%、大於80%、大於85%、大於90%或大於95%。在某些實施方式中，結合降至檢測限以下。在一些實施方式中，當抗NKG2A抗體與突變體NKG2A多肽的結合小於觀察到的抗NKG2A抗體和野生型NKG2A多肽之間的結合的50%(例如，小於45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%或10%)時，結合的顯著降低得到證實。

在一些實施方式中，提供了抗NKG2A抗體，其相比於與野生型NKG2A多肽(例如，SEQ ID NO：1的多肽)的結合展示出與突變體NKG2A多肽(其中包含由具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體(例如，莫納利珠單抗(monalizumab))結合的胺基酸殘基的區段中的殘基被不同的胺基酸取代)的顯著更低的結合。在一個實施方式中，藉由參考SEQ ID NO：1的野生型NKG2A，該突變體具有取代K199A、D202A、V213S、R215A和K217A。

在一方面中，該藥劑包含HCDR1、HCDR2和/或HCDR3序列，這些序列來源於具有SEQ ID NO：16的胺基酸序列的VH。在本揭露的一方面中，該藥劑包含LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列，這些序列來源於具有SEQ ID NO：17的胺基酸序列的VL。在一個方面，藥劑包含衍生自具有SEQ ID NO：16的胺基酸序列的VH的HCDR1、HCDR2和/或HCDR3序列，以及衍生自具有SEQ ID NO：17的胺基酸序列的VL的LCDR1、LCDR2和/或LCDR3序列。具有SEQ ID NO：16的重鏈和包含SEQ ID NO：17的輕鏈的抗體中和NKG2A的抑制活性，並且還結合活化受體NKG2C，NKGE或NKG2H。抗體不與HLA-E競爭結合細胞表面上的NKG2A(即它係NKG2A的非競爭性拮抗劑)。

EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSSYAMSWVRQSPEKRLFWVAFISSGGSYTYYPDTVTGRFTISRDNAKNTLYLEISSLRSEDTAMYYCTRHGDYPRFFDVWGAGTTVTVSS(SEQ ID NO：16)

QIVLTQSPALMSASPGEKVTMTCSASSSVSYIYWYQQKPRSSPKPWIYLTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCQQWSGNPYTFGGGTKLEIKR(SEQ ID NO：17)

在一個方面，藥劑包括可變重鏈(V_H)結構域(SEQ ID NO：16)的胺基酸殘基31-35、50-60、62、64、66和99-108，以及可變輕鏈(V_L)結構域(SEQ ID NO：17)的胺基酸殘基24-33、49-55和88-96，視情況具有一個、兩個、三個、四個或更多個胺基酸取代。

應當理解的是，儘管可以使用上述抗體，但是其他抗體可以識別並且針對NKG2A多肽的任何部分產生，只要該抗體導致NKG2A的抑制性活性的中和。例如，NKG2A的任何片段(較佳的是但不排他地是人NKG2A)或NKG2A片段的任何組合，可以用作免疫原以產生抗體，並且這些抗體可以識別在NKG2A多肽之內的任何位置的表位，只要它們能在如此處描述的表現NKG2A的NK細胞上這樣做。在一個實施方式中，該表位係由具有SEQ ID NO：2-6中任一個的重鏈和SEQ ID NO：7的輕鏈的抗體特異性識別的表位。

在一個方面，藥劑與美國專利案號8,206,709(將其揭露內容藉由引用結合在此)中揭露的humZ270抗體競爭結合人CD94/NKG2A受體的細胞外部分。在一個方面，藥劑與美國專利案號8,796,427(將其揭露內容藉由引用結合在此)中揭露的人源化Z199抗體競爭結合人CD94/NKG2A受體的細胞外部分。競爭性結合可以例如在BiaCore實驗中測量，其中測量藥劑的能力，用於結合固定化的CD94/NKG2A受體的細胞外部分(例如從表現CD94/NKG2的細胞純化，或在生物系統中產生)用humZ270飽和。可替代地，測量藥劑與天然表現或過表現(例如在暫態轉染或穩定轉染後)CD94/NKG2A受體並且已經用飽和劑量的Z270預孵育的細胞的結合。在一個實施方式中，可以使用美國專利案號8,206,709中揭露的方法測量競爭性結合，例如藉由如美國專利案號8,206,709的實例15中所示的流式細胞術評估與Ba/F3-CD94-NKG2A細胞的結合，將其揭露內容藉由引用結合在此。

可以將抗NKG2A藥劑例如抗體摻入包含濃度從1mg/ml至500mg/ml的藥劑配製物中，其中所述配製物具有從2.0至10.0的pH。該配製物可以進一步包含緩衝系統、一種或多種防腐劑、一種或多種張度基、一種或多種螯合劑、穩定劑和表面活性劑。在一個實施方式中，該藥物配製物係水性溶液，即包含水的配製物。此類配製物典型地是溶液或懸浮液。在另外的實施方式中，藥物配製物係水性溶液。術語“水性配製物”被定義為包含至少50%w/w水的配製物。同樣，術語“水性溶液”被定義為包含至少50%w/w水的溶液，並且術語“水性懸浮液”被定義為包含至少50%w/w水的懸浮液。

在另一個實施方式中，該藥物配製物係冷凍乾燥的配製物，醫生或患者在使用前添加溶劑和/或稀釋劑。

在另一個實施方式中，該藥物配製物係立即可用而不需任何預先溶解的乾燥配製物(例如冷凍乾燥的或噴霧乾燥的)。

在另外的方面，該藥物配製物包含此類抗體的水性溶液和緩衝液，其中抗體以1mg/ml或以上的濃度存在，並且其中所述配製物的pH從約2.0至約10.0。

在另一個實施方式中，該配製物的pH係在選自以下列表的範圍內，該列表由以下組成：從約2.0至約10.0、約3.0至約9.0、約4.0至約8.5、約5.0至約8.0、以及約5.5至約7.5。

在另一個實施方式中，所述緩衝劑選自由以下組成之群組：乙酸鈉、碳酸鈉、檸檬酸鹽、甘胺醯甘胺酸、組胺酸、甘胺酸、賴胺酸、精胺酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉、以及三(羥甲基)-胺基甲烷、二甘胺酸、曲辛、蘋果酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸(tricine)、天冬胺酸或其混合物。這些特定緩衝液中的每一種構成可替代的實施方式。

在進一步實施方式中，該配製物進一步包括藥學上可接受的防腐劑。在另外的實施方式中，該配製物進一步包含等滲劑。在另外的實施方式中，該配製物進一步包含螯合劑。在一個另外的實施方式中，該配製物進一步包含穩定劑。在一個另外的實施方式中，該配製物進一步包含表面活性劑。為了方便起見，參考Remington：The Science and Practice of Pharmacy[藥學科學與實踐]，第19版，1995。

在肽藥物配製物中存在其他成分係可能的。這些另外的成分可以包括潤濕劑、乳化劑、抗氧化劑、膨脹劑、張度調節劑、螯合劑、金屬離子、油性運載體、蛋白質(例如人血清蛋白、明膠或蛋白質)和兩性離子(例如胺基酸如甜菜鹼、牛磺酸、精胺酸、甘胺酸、賴胺酸和組胺酸)。當然，這些另外的成分不應不利地影響藥物配製物的總體穩定性。

可以在以下若干個位點向需要此類治療的患者給予包含抗體的藥物組成物：例如在局部位點(例如皮膚)和黏膜位點、在避開吸收作用的位點(例如在動脈、血管、心臟給予)以及在涉及吸收的位點(例如在皮膚、皮下、肌肉或腹部給予)。可以藉由以下給予途徑向需要此類治療的患者給予藥物組成物：例如皮下、肌肉內、腹膜內、靜脈內、舌、舌下、頰、口腔內、口服、胃和腸內、鼻、肺(例如藉由細支氣管和絨毛膜或其組合)、表皮、真皮、透皮、陰道、直腸、眼睛(例如藉由結膜)、輸尿管和胃腸外。

合適的抗體配製物也可以藉由檢查其他已經開發的治療性單株抗體的經驗來確定。在臨床方面，若干種單株抗體已經顯示是有效的，例如Rituxan®(利妥昔單抗(Rituximab))、Herceptin®(曲妥珠單抗(Trastuzumab))、Xolair®(奧巴佐單抗(Omalizumab))、Bexxar®(托西莫單抗(Tositumomab))和Campath®(阿倫單抗(Alemtuzumab))，並且類似的配製物可以與該揭露的化合物一起使用。例如，可以在100mg(10mL)或500mg(50mL)單次使用的小瓶中以10mg/mL的濃度提供單株抗體，以9.0mg/mL氯化鈉、7.35mg/mL檸檬酸鈉二水合物、0.7mg/mL聚山梨醇酯80、以及注射用無菌水配製該單株抗體用於IV給藥。將pH調節至6.5。在另一個實施方式中，在約6.0的pH下，將抗體以包含約20mM檸檬酸鈉、約150mM NaCl的配製物提供。

HNSCC的治療

描述了用於治療癌症，特別是HNSCC癌，特別是對西妥昔單抗有抗性的不可切除的癌症或HNSCC。西妥昔單抗(ERBITUX®)係一抗EGFR抗體，2011年獲得監管(FDA)批准用於HNSCC。

儘管既往使用西妥昔單抗治療(以及視情況放射療法或其他治療)，但西妥昔單抗抗性癌症可能已經進展(如無應答、復發、擴散到其他器官)。在一些實施方式中，癌症已經進展的個體可能已經接受了以西妥昔單抗為單一藥劑的既往治療。在一些實施方式中，癌症已經進展的個體可能已經接受了西妥昔單抗與化學療法藥劑(如，基於鉑的療法)組合或西妥昔單抗與放射療法組合的既往治療。在一些實施方式中，除了既往使用西妥昔單抗的治療過程(視情況另外與放射療法、化學療法和/或其他藥劑組合)，個體已經進一步接受基於鉑的化學療法藥劑的既往療程，其中在使用西妥昔單抗的療程之前給予使用基於鉑的藥劑的既往療程。

在一個實施方式中，該癌症係HNSCC。HNSCC係在頭部或頸部區域出現的鱗狀上皮細胞或基底細胞樣腫瘤，並且包括鼻腔、鼻咽、鼻竇、嘴唇、口和口腔、唾液腺、咽、下嚥或喉的腫瘤。本文揭露的治療可特別地有用於例如口咽腫瘤、喉腫瘤、口腔腫瘤和下嚥腫瘤的治療。這些腫瘤由腫瘤學領域的從業者(例如醫生、醫學腫瘤學家、組織病理學家和耳鼻喉科學家、以及頭頸外科醫生)常規鑒定。視情況HNSCC係非轉移性HNSCC。

在本文的任何實施方式中，除非上下文另外指示，頭頸癌(例如，HNSCC)可以視情況被指定為局部復發、遠端轉移、和/或被認為係不可治癒的(及其任何組合，例如局部復發、局部復發和遠端轉移、局部復發而不遠端轉移、視情況另外的在上述任意情況下，被認為係不可治癒的)。

在一個示例性方面中，提供的是在哺乳動物宿主(例如，人患者)中停止、逆轉或降低HNSCC進展的方法，該宿主患有不可切除的HNSCC癌症，並且儘管既往單獨使用西妥昔單抗治療或使用西妥昔單抗與化學療法或與放射組合治療，其疾病或癌症仍發生進展，該方法包括給予該患者足夠量的抗NKG2A藥劑(例如，抗NKG2A抗體)、抗NKG2A抗體組成物、或相關的組成物(例如，編碼抗NKG2A抗體的核酸)，該量足以可檢測地降低宿主中HNSCC的進展。

在另一方面，提供的是在哺乳動物宿主(例如人患者)中預防HNSCC進展為轉移性癌症的方法，該宿主患有不可切除的、非轉移性的癌症，視情況進一步儘管既往使用西妥昔單抗治療，該癌症仍發生進展，該方法包括給予該患者抗NKG2A藥劑。

在本文的任何實施方式中，儘管既往使用西妥昔單抗治療但仍有進展的疾病、癌症或HNSCC可稱為西妥昔單抗抗性的疾病、癌症或HNSCC。儘管既往使用西妥昔單抗治療但癌症或HNSCC仍有進展的個體可稱其為(或其疾病、癌症或HNSCC係)西妥昔單抗抗性的個體。

在一個實施方式中，抗NKG2A藥劑與西妥昔單抗組合給予。例如，具有抗性或已發生進展的癌症可視情況表徵為對西妥昔單抗治療具有抗性並且不是例如新的原發性腫瘤的腫瘤。例如，西妥昔單抗抗性腫瘤可以出現在同一區域以及出現在西妥昔單抗治療過程中或出現在西妥昔單抗治療結束後的有限時間內(例如1、2、3年或更短，例如3、4、6、9個月)。

在一個實施方式中，提供的是用於治療疾病(例如西妥昔單抗抗性的癌症)的組成物。在一些實施方式中，提供的是用於治療患有對使用西妥昔單抗(例如單獨使用西妥昔單抗或與另一種藥劑如化學療法或放射療法組合)治療(例如既往治療)有抗性的HNSCC癌症的個體的HNSCC的藥劑和/或西妥昔單抗，該藥劑中和人NKG2A的抑制活性。在一個實施方式中，提供的是中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，該藥劑用於治療既往使用西妥昔單抗治療的人個體中的HNSCC，該治療包括向該個體給予有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗。在一個實施方式中，該癌或癌症係HNSCC。

在一個實施方式中，提供的是西妥昔單抗，用於治療已接受既往治療(例如使用西妥昔單抗進行第一個療程的治療)的個體中的HNSCC，其中所述治療包括給予該個體有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗(例如使用西妥昔單抗進行第二療程的治療)。因此，已經使用西妥昔單抗進行第一既往療程且在使用西妥昔單抗治療的第一療程期間或之後其疾病進展的個體可以使用西妥昔單抗治療的第二療程治療，其中西妥昔單抗與中和人NKG2A的抑制活性的藥劑(視情況抗體)組合使用。因此，已經使用西妥昔單抗進行第一既往療程的個體可以使用有效量的下列每種治療：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗(例如使用西妥昔單抗進行第二療程的治療)。

在一個方面，使用西妥昔單抗和/或中和NKG2A抑制活性的藥劑係為了降低腫瘤負荷，視情況與基線直徑總和相比減少靶細胞病灶直徑總和。在一個實施方式中，使用西妥昔單抗和/或中和NKG2A抑制活性的藥劑係為了延緩癌症的進展。在一個實施方式中，使用西妥昔單抗和/或中和NKG2A抑制活性的藥劑係為了延緩或預防癌症轉移。

用於治療個體的合適的治療方案包括例如向該個體給予有效量的中和人NKG2A的抑制活性的抗體，其中該方法包括至少一個給藥週期，其中至少一個劑量的抗NKG2A抗體以1-10mg/kg體重的劑量給予。在一個實施方式中，該給予週期在2週和8週之間。

在一個實施方式中，該方法包含至少一個給予週期，其中該週期係八週或更短的時間，其中對於該至少一個週期中的每一個，以1mg/kg-10mg/kg體重的劑量給予兩個、三個或四個劑量的抗NKG2A抗體。

在一個實施方式中，抗NKG2A以有效使淋巴細胞上的NKG2A受體飽和的量給予至少一週、兩週、三週或四週。在某些實施方式中，抗NKG2A抗體以約1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg/kg的劑量(例如每個劑量)給予。

在此的任何實施方式的一個方面中，約每2或4週給予一次抗NKG2A抗體。

將抗NKG2A抗體遞送至個體(藉由直接給予，或從其中的核酸表現，例如從包括一個或多個抗NKG2A抗體-編碼核酸序列的痘病毒基因轉移載體)並且實踐此處的其他方法可以用於降低、治療、預防、或以其他方式改善癌症進展(特別HNSCC進展)的任何適合的方面。本文揭露之方法可以特別有用於降低和/或緩解腫瘤生長、腫瘤細胞數目、以及任何與其相關聯的參數或症狀(例如生物標記物)。本文揭露之方法在預防腫瘤復發、延長無進展生存期、預防轉移方面特別有用。獨立地並且全面地降低、預防、或以其他方式改善癌症進展的這些方面的方法係有利的特徵。

在另一個方面中，提供了這樣一種方法，該方法在人患者中降低癌症進展的風險，降低已經經歷引發的細胞群體進一步癌症進展的風險，和/或提供用於降低癌症進展的治療方案。在一個另外的方面中，提供了一種在診斷患有HNSCC的人患者中增加存活超過一個相關時期的可能性的方法。在另一個方面中，提供了一種用於改進HNSCC患者的生活品質之方法，該方法包括向該患者給予一個有效於改進其生活品質的量的組成物。在另外的方面，本文所述方法還可用於顯著降低腫瘤大小或腫瘤負荷。在一個另外的方面中，可以施用在此描述的方法以顯著減少一種脊椎動物宿主中HNSCC細胞的數目，使得例如HNSCC細胞的總數降低。在一種相關的意義上，提供了一種用於殺滅(例如，直接或間接引起死亡)脊椎動物(如人癌症患者)中的HNSCC細胞的方法。

通常，癌症進展和應答可以藉由調查員根據標準腫瘤應答標準慣例確定，例如根據“實體腫瘤反應評估標準”(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors，RECIST)v1.1由Eisenhauer,EA，等人，New response evaluation criteria in solid tumours：Revised RECIST guideline(version 1.1)[固體腫瘤反應評價新標準：修訂的RECIST指南(版本1.1)],Eur J Cancer[歐洲癌症雜誌]2009：45：228-247詳述，將其揭露內容藉由引用結合在此。

如本文所公開，NKG2A中和劑(如抗NKG2A抗體)能與西妥昔單抗組合用於治療個體。因此，在既往西妥昔單抗(既往西妥昔單抗不包括與NKG2A中和劑的組合治療)期間或之後的HNSCC進展後，個體(例如患有不可切除的、視情況的非轉移性癌症)可以組合使用NKG2A 中和劑和西妥昔單抗進行治療。西妥昔單抗的既往療程可包括一種或多種另外的藥劑或療法，特別是發射療法和/或化學療法。

在某些情況下，在使用西妥昔單抗的既往療程之前(作為單一藥劑或視情況與放射療法和/或化學療法組合使用)，患者將更早地使用基於鉑的化學療法藥劑的既往療程進行治療；例如，個體接受了使用基於鉑的藥劑的既往療程，然後接受了西妥昔單抗的既往療程的治療。在這種情況下，儘管使用鉑基藥劑治療，然後接受西妥昔單抗的後續治療(西妥昔單抗的既往療程)，視情況其中西妥昔單抗與放射療法和/或化學療法藥劑組合使用，患者可能已經經歷了癌症進展。如果個體在使用西妥昔單抗既往療程的情況下仍出現癌症進展，則可以組合使用NKG2A中和劑和西妥昔單抗治療該個體。

NKG2A中和劑和西妥昔單抗的組合給予包括處於相同或不同劑量形式的化合物的同時給予，或這些化合物的分開給予(例如，順序給予)。因此，NKG2A中和劑和西妥昔單抗可以指定為配製用於分開給予，並且同時或順序給予。該治療可視情況與一種或多種另外的治療性藥劑組合使用。在一個實施方式中，使用NKG2A中和劑的療程包括NKG2A中和劑和西妥昔單抗，並且不包括其他治療性(如抗癌)藥劑。在另一個實施方式中，使用NKG2A中和劑的療程包括包括NKG2A中和劑、西妥昔單抗和一種或多種另外的治療性(如抗癌)藥劑。

如在此所使用，抗NKG2A藥劑和西妥昔單抗輔助或組合給予包括呈相同或不同劑量形式的化合物的同時給予，或這些化合物的分開給予(例如，順序給予)。因此，抗NKG2A和西妥昔單抗可以在單個配製物中同時給予。可替代地，抗NKG2A和西妥昔單抗可以配製用於分開給予以及同時或順序給予。

在治療方法中，抗NKG2A抗體和西妥昔單抗可以分開、一起或順序地給予，或在混合劑中給予。在一些實施方式中，在給予抗NKG2A抗體之前給予西妥昔單抗。例如，該抗NKG2A抗體可以是在給予西妥昔單抗之前大約0至30天給予。在一些實施方式中，抗NKG2A抗體係在給予西妥昔單抗之前從大約30分鐘至大約2週、從大約30分鐘至大約1週、從大約1小時至大約2小時、從大約2小時至大約4小時、從大約4小時至大約6小時、從大約6小時至大約8小時、從大約8小時至1天、或從大約1至5天來給予。在一些實施方式中，抗NKG2A抗體係在給予西妥昔單抗的同時被給予的。在一些實施方式中，抗NKG2A抗體係在給予西妥昔單抗之後給予的。例如，抗NKG2A抗體可以在給予西妥昔單抗之後大約0至30天來給予。在一些實施方式中，抗NKG2A抗體係在給予西妥昔單抗之後從大約30分鐘至大約2週、從大約30分鐘至大約1週、從大約1小時至大約2小時、從大約2小時至大約4小時、從大約4小時至大約6小時、從大約6小時至大約8小時、從大約8小時至1天、或從大約1至5天來給予。

用於治療患有HNSCC的人的合適的治療方案包括，例如，給予患者有效量的中和NKG2A活性的每種抗體和西妥昔單抗，其中該方法包括至少一個給藥週期，其中以1-10mg/kg體重的劑量給予(例如每兩週一次)至少一個劑量的抗NKG2A抗體，以及給予至少一個劑量視情況至少兩個劑量的西妥昔單抗，視情況其中西妥昔單抗以每週一次250mg/m²的劑量給予，視情況其中西妥昔單抗以400mg/m²的劑量作為初始劑量給予，隨後至少每週至少一個250mg/m²的劑量。在本文的任何實施方式中，每個劑量的抗NKG2A抗體均可按固定劑量給予，如100mg-1000mg之間的固定劑量，視情況200mg-1200mg之間，例如750mg。

在一個實施方式中，該方法包含至少一個給藥時間段(例如，給藥週期)，其中該週期或時間段係八週(或更短)的時間，其中對於該至少一個時間段中的每一個，以1mg/kg-10mg/kg體重的劑量(例如，100-1000mg之間，視情況200-1200mg之間的固定計量，例如750mg)給予兩個、三個或四個劑量的抗NKG2A抗體。在一個實施方式中，每個週期進一步包括給予二、三、四、五、六、七或八個劑量的西妥昔單抗，每個劑量250mg/m²。視情況，週期包括西妥昔單抗的負荷劑量；即週期中的第一劑量包括給予初劑量為400mg/m²的西妥昔單抗的初始劑量，以及劑量為250mg/m²的西妥昔單抗的隨後劑量。

該抗NKG2A抗體可有利地以實現循環中濃度高於基本上完全(例如90%、95%)受體飽和所需濃度(如藉由在表現NKG2A的細胞(例如在PBMC中)上滴定抗NKG2A抗體所評估的)至少10倍、20倍或30倍的量給予，或視情況以實現在血管外組織(例如腫瘤組織或環境)中的濃度高於基本上完全受體飽和所需濃度(如藉由在表現NKG2A的細胞(例如在PBMC中)上滴定抗NKG2A抗體所評估的)至少10倍、20倍或30倍的量給予。

可以使用表現NKG2A的NK細胞對表現HLA-E的靶細胞的細胞毒性活性的合適測定來評估NKG2A+NK細胞應答。實例包括基於NK細胞活化的標記物的測定，例如CD107或CD137表現。有利地，可給予一定量的抗NKG2A抗體以達到和/或保持至少10μg/ml的連續(最小)組織濃度。例如，為了在組織中達到/保持10μg/ml，所要達到和/或保持的血液濃度可以在100μg/ml-110μg/ml、100μg/ml-120μg/ml、100μg/ml-130μg/ml、100μg/ml-140μg/ml、100μg/ml-150μg/ml、100μg/ml-200μg/ml、100μg/ml-250μg/ml或100μg/ml-300μg/ml之間。

針對本文實例中使用的具有約1-10μg/ml(例如，約10μg/ml)的NKG2A+NK細胞應答的EC₁₀₀的抗NKG2A抗體(例如humZ270，如莫納利珠單抗(monalizumab))的示例性的治療方案包括至少一個給予週期，其中至少一個劑量的抗NKG2A抗體按以下劑量給予：約10mg/kg體重、視情況2-10mg/kg體重、視情況4-10mg/kg體重、視情況6-10mg/kg體重、視情況2-6mg/kg體重、視情況2-8mg/kg體重、或視情況2-4mg/kg體重、視情況100-1000mg之間，視情況200-1200mg之間的固定劑量，例如750mg。視情況，給予至少2、3、4、5、6、7或8個劑量的抗NKG2A抗體。在一個實施方式中，該給予週期在2週和8週之間。在一個實施方式中，該給予週期係8週。在一個實施方式中，該給予週期係8週，並且包括每兩週給予一個劑量的抗NKG2A抗體(即，總共四個劑量)。

在本文任何實施方式的一個方面，抗NKG2A抗體約每兩週給予一次。

與抗NKG2A抗體一起使用的示例性治療方案包括例如每月兩次向患者給予抗NKG2A抗體，並且保持至少連續兩次抗NKG2A抗體給藥之間的抗NKG2A抗體的連續血液濃度為至少40μg/ml的有效量為2-10mg/kg體重、視情況2-6mg/kg體重、視情況2-4mg/kg體重、視情況約4mg/kg體重，或視情況100-1000mg的範圍內、視情況200-1200mg的範圍內的固定劑量，例如750mg。可以視情況給予這些劑量，以便在整個治療週期中提供至少40μg/ml的抗NKG2A抗體的連續血液濃度。達到40μg/ml的抗NKG2A抗體的血液濃度被預期提供約4μg/ml的組織(例如，血管外組織、腫瘤環境)濃度，提供對於抗體(如，人源化Z270，如莫納利珠單抗(monalizumab))的至少的EC₅₀。

與抗NKG2A抗體一起使用的示例性的治療方案包括例如向患者給予有效量的抗NKG2A抗體，其中每月給予抗體2次，並且維持至少兩次連續抗NKG2A抗體給藥之間的的抗NKG2A抗體連續血液濃度為至少100μg/ml的有效量係在4-10mg/kg體重之間、視情況4-6mg/kg體重、視情況4-8mg/kg體重、視情況4mg/kg體重、視情況約6mg/kg體重、視情況約8mg/kg體重、或視情況10mg/kg體重，或視情況100-1000mg的範圍內、視情況200-1200mg的範圍內的固定劑量，例如750mg。可以視情況給予這些劑量，以便在整個治療週期中提供至少100μg/ml的抗NKG2A抗體的連續血液濃度。預期實現100μg/ml的抗NKG2A抗體的血液濃度提供約10μg/ml的組織(例如，血管外、腫瘤環境)濃度，進而對應於對抗體如人源化Z270的至少EC₁₀₀。

在有或沒有預先檢測步驟評估HLA-E在腫瘤細胞表面上的表現的情況下，患有頭頸癌的患者可以用NKG2A中和劑治療，其中所述頭頸癌為使用西妥昔單抗的既往治療中或之後已經發生進展或未能有效應答。因此，視情況，治療方法可以包含在來自個體的腫瘤的生物樣品中(例如在腫瘤細胞上)檢測HLA-E核酸或多肽的步驟。生物樣品表現HLA-E的測定(例如，表現可檢測水平上的HLA-E、表現至少預定水平的HLA-E、顯著表現HLA-E、在高水平上表現HLA-E、或在用抗HLA-E抗體進行高強度染色情況下表現HLA-E，在每種情況下，可視情況與參考文獻進行比較)可用於指定患者是否為患有特別強烈的受益於使用中和NKG2A的活性的藥劑治療的頭頸癌患者。在一個實施方式中，該方法包括在生物樣品中確定HLA-E核酸或多肽的表現水平並且將該水平與對應於從使用抑制中和NKG2A活性的藥劑治療獲得益處的個體的參考水平(例如值、強的細胞表面染色等)進行比較。生物樣品以與參考水平對應的和/或相比增加的水平表現HLA-E核酸或多肽的測定表明個體患有特別強烈地受益於使用抑制中和NKG2A的活性的藥劑治療的頭頸癌。視情況，在一種生物樣品中檢測HLA-E多肽包括檢測在惡性HNSCC細胞的表面上表現的HLA-E多肽。在一個實施方式中，生物樣品顯著地表現HLA-E核酸或多肽的測定表明個體患有特別強烈地受益於使用中和NKG2A的活性的藥劑治療的頭頸癌。當提及HLA-E多肽時，“顯著地表現”意指該HLA-E多肽被表現於一種相當多的取自給定患者的腫瘤細胞中。然而術語“顯著地表現”的定義不限於精確的百分率值，在一些實例中，稱為“顯著地表現”的受體將存在於至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或更多的取自患者的HNSCC細胞上。

確定個體是否具有表現HLA-E多肽的頭頸癌細胞可以例如包括從包含頭頸癌細胞的個體獲得生物樣品(例如藉由進行生檢)，使所述細胞與結合HLA-E多肽的抗體接觸，並檢測該細胞是否在其表面上表現HLA-E。視情況，確定個體是否具有表現HLA-E的頭頸癌細胞，包括進行免疫組織化學測定。視情況，確定個體是否具有表現HLA-E的頭頸癌細胞，包括進行流式細胞術測定。

可以在有或沒有預先檢測步驟評估患者(或患者的腫瘤)是否是HPV陽性的情況下，患有頭頸癌，特別是患有HNSCC的患者能進一步用抗NKG2A藥劑來治療。在一些實施方式中，使用本發明的方法治療的個體為HPV-陽性。在一些實施方式中，使用本發明的方法治療的個體為HPV-陰性。

實例 實例1-西妥昔單抗抗性患者反復注射莫納利珠單抗(monalizumab)與西妥昔單抗的組合治療HNSCC的應答病例

IPH2201和西妥昔單抗的1b/2期試驗在患有頭頸部人乳頭狀瘤病毒(HPV)(+)和HPV(-)鱗狀細胞癌的患者中進行。儘管在基於鉑的療法之後的西妥昔單抗被批准用於HNSCC，但其在該情況中的活性有限(12%的應答率)。臨床試驗評價莫納利珠單抗(monalizumab)與西妥昔單抗組合治療HNSCC的療效。莫納利珠單抗(monalizumab)(參見WHO Drug Information[WHO藥物資訊]第30卷，No.1,2016)，又稱IPH2201，係一中和性抗NKG2A抗體，該抗體具有SEQ ID NO：2中所示的重鏈胺基酸序列和SEQ ID NO：7中所示的輕鏈胺基酸序列。

入選標準如下：年齡

18歲

1.經組織學或細胞學確診的鼻咽部(WHO 1型)、口咽部、下嚥部、喉部(上喉部、聲門、聲門下)或口腔的HPV(+)或HPV(-)鱗狀細胞癌。

2.復發性或轉移性疾病，經影像學(CT掃描、MRI、X射線)和/或體格檢查證實。在II期，根據實體瘤應答評價標準[RECIST]1.1的可測量的疾病係強制的。在Ib期，有或沒有可測量疾病的患者都是合格的。

3.基於鉑的化學療法後進展。

4.只適用於Ib期：治療前的患者，不順從有治癒目的的進一步治療。這部分對於治療前的患者是開放的，不管既往的治療系的數量。

只適用於II期：因復發和/或轉移性疾病而接受最多兩種既往系統治療方案，且不順從於有治癒目的的進一步治療的患者。

5.既往未接受西妥昔單抗治療，但在西妥昔單抗治療結束後至少4個月內進行原發性治療(局部晚期疾病)且無進行性疾病者除外。

6.因既往接受放射療法及全身治療而導致從既往手術的恢復以及從不良事件恢復至1級或以下(脫髮除外)。

7.0或1的東部腫瘤協作組(Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG)表現得分。

8.預期壽命

3個月。

9.接受腦轉移治療的患者，如果在治療(包括放射療法和/或手術)結束後>4週，且在研究開始時臨床穩定且在研究開始時未接受皮質類固醇治療，則符合條件。

10.足夠的血液、免疫、肝腎功能，被定義為：o血紅蛋白

9.0g/dL,o絕對嗜中性粒細胞計數

1,500/mm3，o血小板

100,000/mm3，o總膽紅素

1.5X規定的正常上限(UNL)，o天冬胺酸胺基轉移酶(AST)和丙胺酸胺基轉移酶(ALT)

2.5X規定的UNL，o血清肌酸酐

1.5X規定的UNL或估計的(Cockcroft-Gault公式)或測量的肌酐清除率

50mL/min。

11.開始研究治療前72小時對有生育能力的女性進行血清妊娠試驗陰性。有生育能力的女性和所有男性必須同意在研究開始前、莫納利珠單抗(monalizumab)給藥期間以及最後一次莫納利珠單抗(monalizumab)給藥後5個月採取適當的避孕措施(激素或屏障避孕法；節欲)。

12.能夠理解書面的知情同意書。

13.在任何協定特定程式之前簽署知情同意書。

排除標準如下：

1.只適用於II期：接受過2個以上針對復發和/或轉移性疾病的系統方案的患者(在試驗的Ib期部分中無限制)。

2.只適用於II期：接受西妥昔單抗或另一種表皮生長因子受體抑制劑的患者被排除在試驗的II期之外，除非西妥昔單抗係作為原發性治療方法的一部分，在既往的西妥昔單抗治療結束後至少4個月沒有進展性疾病。

3.由類似西妥昔單抗的化學或生物成分的化合物引起的過敏反應的歷史。

4.已知未治療和未控制的腦轉移的患者被排除在外。然而，如果患者沒有神經系統體征或症狀，就不需要針對合格性進行腦成像研究。

5.嚴重的併發的不受控制的醫學疾病。

6.自身免疫性疾病，其：1.目前或既往需要全身性免疫抑制或免疫調節治療(包括藉由全身性途徑給予皮質類固醇)和/或2.對任何組織造成不可逆損傷的可能性很大和/或3.在研究開始前少於3個月已被診斷和/或4.係臨床不穩定的和/或5.有很大的進展風險，並引起嚴重併發症。

7.有下列任何一項的異常心臟狀況：

1.不穩定型心絞痛

2.需要治療的心律失常，且藉由治療並不穩定

3.QTc>450ms(M)或470ms(F)(Bazett公式-QT間期/

(RR間期)其中RR間期=60/HR)。

8.包括以下任何一項的心臟功能障礙病史：

1.最近6個月內發生心肌梗塞

2.有記錄的充血性心力衰竭病史(紐約心臟協會功能分類III-IV(New York Heart Association functional classification III-IV))。

9.已知的間質性肺病。

10.孕婦被排除在本研究之外；必須停止母乳餵養。

11.其他活性侵襲性惡性腫瘤(治療的基底或鱗狀細胞皮膚癌、或原位宮頸癌除外)。

12.在研究開始前少於14天內使用其他研究藥劑進行治療。

13.在研究開始前30天內用類固醇或其他免疫抑制劑進行全身治療。可接受氫化可體松或同等物的生理替代。

14.當前活動性傳染病。

15.HIV血清學陽性。

16.HBs Ag陽性或HBV病毒血症陽性，HCV病毒血症陽性。

17.不允許醫學隨訪和遵守研究方案的心理、家庭、社會或地理條件。

該試驗包括劑量遞增部分，其中患者每兩週接受0.4、1、2、4或10mg/kg的增加劑量水平的莫納利珠單抗(monalizumab)，與固定劑量的西妥昔單抗(400mg/m2負荷劑量然後每週250mg/m2)組合，使用3+3設計。群組擴增部分使用最高測試劑量的莫納利珠單抗(monalizumab)10mg/kg，並在前11名患者後進行無效分析。根據RECIST評估應答率，每8週評估一次。患者接受治療，直到癌症進展或不可接受的毒性。該試驗仍在進行中，以招募更多的患者，並評估應答持續時間、無進展和總體生存率。

在觀察到的最初部分應答中，有一名患者有右下牙槽脊鱗狀細胞癌的病史，T4aN2bM0/IVA期，經右後側下頜骨切除術手術切除治療，游離腓骨瓣重建，然後輔以放射療法。患者患有復發性口腔鱗狀細胞癌 (非新的原發性癌)，p16陰性，係不可切除的。患者曾接受3週期順鉑-紫杉醇-5FU(TPF)誘導(用卡鉑代替順鉑)治療，隨後同步放化療，每週使用西妥昔單抗。在西妥昔單抗完成約4個月時，患者的PET/CT顯示腫瘤復發。患者被認為係對西妥昔單抗有抗性，西妥昔單抗加明確的放射療法完成後超過4個月觀察到輕微復發，復發性口腔癌出現在三年內(因此沒有被認為係新的原發性癌)並在同一區域，在該情況下所有均在右側。推薦患者進行IPH2201和西妥昔單抗的1b/2期試驗。根據方案使用莫納利珠單抗(monalizumab)和西妥昔單抗治療產生客觀應答(PR)，與基線(治療前)相比，治療中靶病灶的最佳應答係減少50%。病灶的測量係最長直徑或最短軸(如果是淋巴結的話)的總和。

在觀察到的最初部分應答中，還有一名口咽部鱗狀細胞癌患者，右側偏重，TxN2bM0/IVA期。該患者之前的治療方案包括初始疾病階段的化學療法(順鉑/多西他賽/5FU)，然後是放射療法。在病情進展時，對患者進行復發性/轉移性疾病的治療，首先在初始部位和淋巴結進行手術，然後進行化學療法(順鉑/卡鉑/5FU)，然後使用西妥昔單抗。患者在西妥昔單抗治療後疾病進展(作為最佳應答)，隨後患者用紫杉醇和卡鉑治療。病情進展後，患者被納入IPH2201和西妥昔單抗的1b/2期試驗。根據該方案使用莫納利珠單抗(monalizumab)和西妥昔單抗治療產生應答(PR)。

發現中和性抗NKG2A抗體與西妥昔單抗組合可以顯著改善被認為係對西妥昔單抗有抗性的HNSCC患者，上述發現為患有HNSCC的大量患者群提供了一個機會，所述患有HNSCC的患者患有不可切除的癌症且儘管使用西妥昔單抗特別是與放射療法結合的治療其癌症仍有進展。這種治療可能在預防進一步進展方面有價值，特別是在延遲或預防轉移性癌症方面。

本文所引用的所有參考文獻(包括出版物、專利申請、和專利)均藉由引用以其全文特此結合，並且引用的程度如同每個參考文獻被個別地並且明確地指示藉由引用結合並且以其全文在本文中闡述(至法律允許的最大程度)，而不考慮本文其他地方做出的具體文件的任何單獨提供的結合。

除非在此另外指示或與上下文明顯矛盾，否則在描述本發明的上下文中，術語“一個/種(a/an)”和“該”以及類似指稱物件的使用應解釋為包括單數和複數二者。

除非另有說明，所有在此提供的精確值均代表相應的近似值(例如，所有精確的示例值係相對於具體因字提供的，或者測量可以視為還包括提供相應的近似測量，在適當時由“約”修飾)。其中“約”與數字結合使用，這可以被指定為包括對應於指定數字的+/-10%的值。

除非另外陳述或與上下文明顯矛盾，否則在此對於使用了涉及一種或多種要素的術語如“包含”、“具有”、“包括”或“含有”的本發明的任何方面或實施方式的描述，旨在提供對“由那一種或多種特定要素組成”、“基本上由那一種或多種特定要素組成”或“基本上包含那一種或多種特定要素”的本發明的類似方面或實施方式的支持(例如，除非另外陳述或與上下文明顯矛盾，否則在此所述的包含特定要素的組成物應理解為也描述由那個要素組成的組成物)。

本文提供的任何和所有實例或示例性語言(如“例如”)的應用僅旨在更好地說明本發明，而不對另外要求保護的本發明範圍做出限制。說明書中的語言不應當被解釋為指示任何未要求保護的要素為實踐本發明所必需的。

Claims

一種中和人NKG2A的抑制活性之藥劑，該藥劑用於已經接受既往西妥昔單抗治療的個體中的HNSCC的治療。
如申請專利範圍第1項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有儘管既往使用西妥昔單抗治療但仍有進展的HNSCC癌症。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有儘管既往使用西妥昔單抗與放射療法或化學療法組合治療但仍有進展的HNSCC癌症。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有儘管既往使用西妥昔單抗作為單一藥劑治療但仍有進展的HNSCC癌症。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有不可切除的HNSCC。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中中和人NKG2A抑制活性的藥劑與西妥昔單抗組合給予。
一種西妥昔單抗，其用於已接受西妥昔單抗既往治療的個體中的HNSCC的治療，其中所述治療包括給予該個體有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗。
如申請專利範圍第7項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有不可切除的HNSCC。
一種中和人NKG2A的抑制活性之藥劑，該藥劑用於治療患有不可切除的、視情況非轉移性HNSCC的人個體中的癌症，視情況其中該HNSCC 係西妥昔單抗抗性的，該治療包括給予該個體有效量的下列每種：(a)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(b)西妥昔單抗。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有儘管既往使用西妥昔單抗治療但仍有進展的HNSCC癌症。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該個體患有儘管既往使用西妥昔單抗與放射療法組合治療但仍有進展的HNSCC癌症。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中個體中HNSCC的治療包括：a)確定個體是否患有對西妥昔單抗(例如單一藥劑或與放射療法和/或化學療法藥劑組合)抗性的HNSCC，以及b)在確定該個體患有對西妥昔單抗抗性的HNSCC後，給予該個體：(i)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(ii)西妥昔單抗。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中個體中HNSCC的治療包括：a)確定HLA-E多肽是否由來自患有HNSCC的個體的惡性細胞表現，並且b)在確定惡性細胞表現HLA-E多肽後，給予該個體(i)中和人NKG2A的抑制活性的藥劑，視情況為抗體，和(ii)西妥昔單抗。
如申請專利範圍第13項所述之用於使用的藥劑，其中確定HLA-E多肽是否由惡性細胞表現包括從該個體獲得包含HNSCC細胞的生物樣品，使所述細胞與結合HLA-E多肽的抗體接觸，並且檢測表現HLA-E的細胞。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中中和人NKG2A抑制活性的藥劑係抗NKG2A抗體。
如申請專利範圍第15項所述之用於使用的藥劑，其中與野生型NKG2A多肽(SEQ ID NO：1)相比，該抗NKG2A抗體特徵在於與具有取代K199A/D202A/V213S/R215A/K217A(參考SEQ ID NO：1)的突變體NKG2A多肽的結合降低。
如申請專利範圍第15或16項所述之用於使用的藥劑，其中該抗NKG2A抗體包含人IgG4恒定區。
如申請專利範圍第15-17項中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該抗NKG2A抗體包含Fc工程化的恒定區，該Fc工程化的恒定區包含降低與人Fcγ受體結合的胺基酸修飾。
如申請專利範圍第15-18項中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該抗NKG2A抗體與具有分別包含SEQ ID NO：2和7的重鏈和輕鏈的抗體競爭結合人NKG2A。
如申請專利範圍第15-19項中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該抗NKG2A抗體包含具有SEQ ID NO：2所示序列的重鏈的CDR1、CDR2和CDR3結構域，以及具有SEQ ID NO：7所示序列的輕鏈的CDR1、CDR2和CDR3結構域。
如申請專利範圍第15-20項中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該抗NKG2A抗體作為藥學上可接受的組成物給予，該藥學上可接受的組成物包括治療有效量的抗NKG2A抗體。
如申請專利範圍第21項所述之用於使用的藥劑，其中該組成物不含任何其他藥學活性藥劑。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中將該抗NKG2A抗體以從大約每週一次到大約每月一次的給藥頻率給予若干次。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中每週給予西妥昔單抗。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該治療包括至少一個給藥週期，其中中和人NKG2A抑制活性的藥劑每兩週給予一次，並且西妥昔單抗每週給予一次。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該治療包括至少一個兩週時間段，其中對於該至少一個時間段的每一個，該中和人NKG2A抑制活性的抗體以1mg/kg-10mg/kg體重的劑量給予，並且西妥昔單抗以400mg/m ²的初始劑量給予，隨後每週以250mg/m ²給予。
如以上申請專利範圍中任一項所述之用於使用的藥劑，其中該治療包括至少一個兩週時間段，其中對於該至少一個時間段的每一個，該中和人NKG2A抑制活性的抗體以100mg-1000mg之間的固定劑量、視情況750mg給予，並且西妥昔單抗以400mg/m ²的初始劑量給予，隨後每週以250mg/m ²給予。