TW201919619A - 增強及/或穩定Fabry氏症患者之心臟功能之方法 - Google Patents

Abstract

本發明提供了用於在患者中治療Fabry氏病之方法。某些方法涉及治療已經歷ERT或ERT初治的Fabry氏患者。某些方法包括向該患者給予約100 mg至約150 mg游離鹼當量的米加司他，用於增強及/或穩定心臟功能。

Description

增強及/或穩定Fabry氏症患者之心臟功能之方法

本申請要求於2017年8月28日提交的美國臨時申請系列號62/550,984之優先權，將該申請藉由引用以其全文結合在此。

本發明的原理和實施方式總體上涉及用於治療溶酶體貯積失調的藥理學伴護蛋白之用途，特別是用於治療Fabry氏病的米加司他（migalastat）之用途。

Fabry氏病係一種進行性的X-連鎖的先天性醣神經鞘脂質代謝缺陷，係由作為α-Gal A基因（GLA）突變的結果的在溶酶體酶α-半乳糖苷酶A（α-Gal A）方面的缺乏造成的。儘管是X-連鎖障礙，女性可能表現出不同程度的臨床表現。Fabry氏病係一罕見的疾病，發生率估計在40,000分之一的男性發病至117,000分之一的一般人群發病。此外，存在著可能在診斷標準以下的Fabry氏病的遲發表現型的變體，因為它們沒有呈現出典型的體征和症狀。這種情況以及Fabry氏病的新生兒篩查，表明Fabry氏病的實際發病率可能高於目前的估計。

如果不治療，Fabry氏患者的預期壽命減少，通常在四十歲或五十歲左右由於影響腎臟、心臟及/或中樞神經系統的血管疾病而死亡。酶缺乏導致底物，球形三醯神經醯胺（GL-3），在全身血管內皮和內臟組織中的細胞內累積。由於醣神經鞘脂質沈積，腎功能逐步衰退和氮質血症的發展通常在生命的三十歲至五十歲時發生，但是也可能早在二十歲就發生。腎損傷在半合子（男性）和雜合子（女性）患者中都有發現。

Fabry氏病引起的心臟病發生在大多數男性和許多女性中。早期的心臟所見包括左心室增大、心瓣膜受累以及傳導異常。二尖瓣關閉不全係典型存在於兒童或青少年中的最常見的瓣膜損傷。腦血管表現主要來自多病灶小血管受累並且可能包括血栓、短暫腦缺血發作、基底動脈缺血和動脈瘤、癲癇發作、偏癱、偏身麻木、失語症、迷路病症或腦出血。腦血管表現的平均發作年齡為33.8歲。可能隨著年齡增長而表現出人格改變和精神病行為。

用於治療Fabry氏病的一種批准的療法係酶替代療法（ERT），其典型地涉及靜脈內輸注純化形式的相應野生型蛋白質。兩種α-Gal A產品目前可用於治療Fabry氏病：阿加糖酶α（Replagal®，希雷人基因治療公司（Shire Human Genetic Therapies））和阿加糖酶β（Fabrazyme®；賽諾菲健贊公司（Sanofi Genzyme Corporation））。雖然ERT在許多情況下是有效的，這種治療還是有限制的。尚未證實ERT能減少中風的風險，心肌反應緩慢，並且GL-3從腎臟的一些細胞類型中的消除受到限制。一些患者還對ERT發展免疫反應。

因此，仍然需要用於治療Fabry氏病的療法，尤其是用於增強心臟功能。

本發明的不同方面涉及使用米加司他治療ERT初治（ERT-naïve）的和已經歷ERT的患者中的Fabry氏病。此類治療可以包括增強及/或穩定心臟功能，例如增加及/或穩定室壁中層縮短分數（MWFS）。

本發明的一個方面涉及增強患有Fabry氏病的患者的心臟功能的方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於增強該患者的心臟功能，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的游離鹼當量（FBE）。

在一個或多個實施方式中，增強心臟功能包括增強左心室收縮功能。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者患有左心室肥大（LVH）。

在一個或多個實施方式中，米加司他或其鹽增強α-Gal A活性。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。

在一個或多個實施方式中，該配製物包括口服劑型。在一個或多個實施方式中，該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少12個月。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少24個月。

在一個或多個實施方式中，該患者係ERT初治患者。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1 %的MWFS的平均增加。

在一個或多個實施方式中，該患者係已經歷ERT的患者。

本發明的另一方面涉及增加患有Fabry氏病的患者中的MWFS之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於增加該患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的FBE。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者患有LVH。

在一個或多個實施方式中，米加司他或其鹽增強α-Gal A活性。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。

在一個或多個實施方式中，該配製物包括口服劑型。在一個或多個實施方式中，該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少12個月。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少24個月。

在一個或多個實施方式中，該患者係ERT初治患者。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1%的MWFS的平均增加。

在一個或多個實施方式中，該患者係已經歷ERT的患者。

本發明的另一方面涉及正常化具有Fabry氏病和受損的MWFS的患者中的MWFS之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於正常化該患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的FBE。

在一個或多個實施方式中，米加司他或其鹽增強α-Gal A活性。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。

在一個或多個實施方式中，該配製物包括口服劑型。在一個或多個實施方式中，該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少12個月。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少24個月。

在一個或多個實施方式中，該患者係ERT初治患者。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1 %的MWFS的平均增加。

本發明的另一方面涉及穩定患有Fabry氏病的患者中的MWFS之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於穩定該患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的FBE。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者患有LVH。

在一個或多個實施方式中，米加司他或其鹽增強α-Gal A活性。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。

在一個或多個實施方式中，每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。

在一個或多個實施方式中，該配製物包括口服劑型。在一個或多個實施方式中，該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少12個月。

在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少30個月。

在一個或多個實施方式中，該患者係已經歷ERT的患者。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽30個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的已經歷ERT的患者組中提供了大於約-0.5%的MWFS的平均變化。

在描述本發明若干示例性實施方式之前，應當理解的是，本發明不限於以下描述中列出的構建或方法步驟的細節。本發明能夠有其他的實施方式，並且能夠以不同的方式被實施或進行。

本發明的不同方面涉及用於給予用於治療Fabry氏病的藥理學伴護蛋白，例如米加司他的給藥方案。在一個或多個實施方式中，米加司他的給藥方案增強患者的一個或多個心臟參數。 定義

在本說明書中使用的術語在本發明的上下文中以及在使用每個術語的特定上下文中通常具有其在本領域中的普通含義。某些術語在下文或說明書中的其他地方討論，以向從業者提供描述本發明的組成物和方法以及如何製作和使用它們的另外指導。

術語“Fabry氏病”係指由於缺乏溶酶體α-Gal A活性而導致的醣神經鞘脂質分解代謝的X連鎖先天錯誤。該缺陷導致底物神經醯胺三己糖苷（“GL-3”，也稱為Gb3或神經醯胺三己糖苷（ceramide trihexoside））和相關的醣神經鞘脂質在心臟、腎臟、皮膚和其他組織的血管內皮溶酶體中的積累。酶的另一種底物係血漿鞘胺醇三聚己糖苷（“血漿溶血-Gb3”）。

術語“非典型Fabry氏病”係指具有主要為α-Gal A缺陷的心臟表現的患者，即心肌細胞中的進行性GL-3積累，導致心臟特別是左心室的顯著增大。

“攜帶者”係一女性，其具有一個有缺陷型α-Gal A基因的X染色體和一個有正常基因的X染色體，並且其中一種或多種細胞類型中存在正常等位基因的X染色體失活。攜帶者通常被診斷具有Fabry氏病。

“患者”係指被診斷患有或疑似患有特定疾病的受試者。患者可以是人類或動物。

“Fabry氏患者”係指已經被診斷患有或懷疑患有Fabry氏病並且具有如以下進一步定義的突變的α-Gal A的個體。Fabry氏病的特徵標記可以發生在具有相同患病率的男性半合子和女性攜帶者中，但女性受到的影響通常不太嚴重。

人α-半乳糖苷酶A（α-Gal A）係指由人GLA基因編碼的酶。包括內含子和外顯子的α-Gal A的完整DNA序列可以在GenBank登錄號X14448.1中獲得，並示於圖1A-1E（SEQ ID NO: 1）中。人α-Gal A酶由429個胺基酸組成，並可以在GenBank登錄號X14448.1和U78027.1中獲得，並示於圖2（SEQ ID NO: 2）中。僅包括SEQ ID NO: 1的編碼區（即外顯子）的核酸序列示於圖3（SEQ ID NO: 3）中。

術語“突變體蛋白”包括在編碼該蛋白質的基因中具有突變的蛋白質，該突變導致該蛋白質在通常存在於內質網（ER）中的條件下不能達到穩定構象。不能達到穩定構象導致大量的酶被降解，而不是被轉運到溶酶體。這樣一種突變有時稱為“構象突變體”。這樣的突變包括但不限於錯義突變以及框內小缺失和插入。

如本文在一個實施方式中所使用的，術語“突變型α-Gal A”包括在編碼α-Gal A的基因中具有突變的α-Gal A，該突變導致該酶在通常存在於ER中的條件下不能達到穩定構象。不能達到穩定構象導致大量的酶被降解，而不是被轉運到溶酶體。

如在此使用，術語“藥理學伴護蛋白”（“PC”）係指特異性結合蛋白質並具有一種或多種以下效應的任何分子,包括小分子、蛋白質、肽、核酸、碳水化合物等：(i) 增強該蛋白質的穩定分子構象的形成；(ii) 誘導該蛋白質從ER運輸到另一個細胞位置（較佳的是天然細胞位置），即，防止蛋白的ER相關的降解；(iii) 防止錯誤折疊的蛋白質的聚集；及/或 (iv) 恢復或增強該蛋白質的至少部分野生型功能及/或活性。一種化合物特異性結合到例如α-Gal A，意味著它結合到該酶並對該酶而不是相關或不相關的酶的群組施加伴護蛋白效應。更具體地，此術語不是指內源伴護蛋白例如BiP，或指對不同蛋白質表現非特異性伴護蛋白活性的非特異性試劑例如甘油、DMSO或氘化水，即化學伴護蛋白。在本發明的一個或多個實施方式中，PC可以是可逆的競爭性抑制劑。在一個實施方式中，PC係米加司他或其鹽。在另一個實施方式中，PC係米加司他游離鹼（例如123 mg的米加司他游離鹼）。在又另一個實施方式中，PC係米加司他的鹽（例如150 mg的鹽酸米加司他）。

酶的“競爭性抑制劑”可以指在結構上類似於酶底物的化學結構和分子幾何形狀以在與底物大致相同的位置結合酶的化合物。因此，抑制劑與底物分子競爭相同的活性位點，從而增加Km。如果足夠的底物分子可用於取代抑制劑，競爭性抑制通常是可逆的，即競爭性抑制劑可以可逆地結合。因此，酶抑制的量取決於抑制劑濃度、底物濃度、以及抑制劑和底物對活性位點的相對親和力。

如在此使用，術語“特異性結合”係指藥理學伴護蛋白與蛋白質例如α-Gal A的相互作用，特別是與該蛋白質的胺基酸殘基的相互作用，該等胺基酸殘基直接參與接觸藥理學伴護蛋白。藥理學伴護蛋白特異性結合靶蛋白例如α-Gal A，以對該蛋白而不是相關或不相關蛋白的群組施加伴護蛋白效應。與任何給定的藥理學伴護蛋白相互作用的蛋白的胺基酸殘基可以在或可以不在蛋白質的“活性位點”內。可以藉由常規結合測定或藉由結構研究（例如共結晶、NMR等）評價特異性結合。α-Gal A的活性位點係底物結合位點。

“缺陷型α-Gal A活性”係指來自患者的細胞中的α-Gal A活性，與（使用相同的方法）不患有或沒有疑似患有Fabry氏或任何其他疾病（尤其是血液病）的正常個體中的活性相比，其低於正常範圍。

如在此使用，術語“增強α-Gal A活性”或“增加α-Gal A活性”係指相對於在不與對α-Gal A具有特異性的藥理學伴護蛋白接觸的細胞（較佳的是相同細胞類型或相同細胞，例如，在更早的時間）中採用穩定構象的α-Gal A的量，在與對α-Gal A具有特異性的藥理學伴護蛋白接觸的細胞中增加採用穩定構象的α-Gal A的量。此術語還指相對於不與對蛋白α-Gal A具有特異性的藥理學伴護蛋白接觸的α-Gal A的運輸，在與對α-Gal A具有特異性的藥理學伴護蛋白接觸的細胞中增加α-Gal A向溶酶體的運輸。該等術語係指野生型和突變型α-Gal A兩者。在一個實施方式中，細胞中α-Gal A的量的增加係藉由測量來自已經用PC處理的細胞的裂解物中人工底物的水解來測量。水解的增加表明α-Gal A活性增加。

術語“α-Gal A活性”係指細胞中野生型α-Gal A的正常生理功能。例如，α-Gal A活性包括GL-3的水解。

“響應者”係診斷患有或疑似患有溶酶體貯積失調（LSD）例如Fabry氏病的個體，響應於接觸PC，其細胞分別展現出足夠增加的α-Gal A活性、及/或症狀的減輕或替代標記物的增強。Fabry氏替代標記物的增強的非限制性實例係溶血GB3和美國專利申請公開案號U.S. 2010/0113517中揭露的那些，將該申請藉由引用以其全文特此結合。

U.S. 2010/0113517中揭露的Fabry氏病替代標記物改善的非限制性實例包括細胞（例如成纖維細胞）和組織中的α-Gal A水平或活性的增加；GL-3積累減少；升半胱胺酸和血管細胞黏附分子-1（VCAM-1）的血漿濃度降低；心肌細胞和瓣膜纖維細胞內GL-3積累減少；血漿溶血Gb3的減少；心臟肥大（尤其是左心室）減少，瓣膜生長不足和心律不整減輕；蛋白尿減輕；脂質（如CTH、乳糖神經醯胺、神經醯胺）的尿濃度降低，以及尿液中葡糖神經醯胺和鞘磷脂的尿濃度增加；在腎小球上皮細胞中不存在層疊包涵體（斑馬體）；腎功能改善；少汗症緩和；血管角化瘤不存；以及聽力異常（如高頻感覺神經性聽力損失、進行性聽力損失、突發性耳聾或耳鳴）改善。神經症狀的改善包括短暫性缺血發作（TIA）或中風的預防；以及自身表現為肢端感覺異常（四肢灼燒或刺痛）的神經性疼痛的減輕。可以針對Fabry氏病進行評估的另一個類型的臨床標記物係有害的心血管表現形式的流行。

“室壁中層縮短分數”或“MWFS”係收縮功能的量度，其識別具有靶器官損傷、收縮儲備受損和死亡率增加的證據的高血壓患者。

術語“心臟功能”係指患者心臟的表現。例如，一項心臟功能評估係左心室收縮功能，這係指左心臟的排空特徵。左心室收縮功能可以藉由幾種方式評估，包括但不限於左心室射血分數（LVEF）、心內膜縮短分數（EFS）和MWFS。

如本文中所使用，短語“穩定心臟功能”和類似術語係指減少或遏制心臟功能的下降及/或恢復心臟功能。隨著預期未經治療的Fabry氏患者心臟功能隨時間有顯著的下降，心臟功能退化速率的增強及/或心臟功能的增強證明了如本文所述的米加司他療法的益處。在各種實施方式中，穩定心臟功能包括穩定MWFS。“穩定MWFS”同樣是指減少或遏制MWFS的下降。

術語“增強心臟功能”係指用於評估心臟功能的至少一個參數的有益變化。如果患者的參數處於正常範圍的下端或低於該參數的正常範圍，則該參數的有益變化係該參數的增加。例如，具有低MWFS的患者的MWFS增加係該參數的增強。類似地，如果患者的參數處於正常範圍的上端或高於該參數的正常範圍，則該參數的有益變化係該參數的減少。在一個方面，“增強心臟功能”包括以下各項中的一種或多種：(i) 改善左心室功能，(ii) 改善縮短分數，(iii) 改善射血分數，(iv) 減少舒張末期容積，和(v) 使心臟幾何形狀正常化。

如本文中所使用，術語“受損的MWFS”係指MWFS低於正常範圍的患者。女性MWFS的正常範圍為至少15%並且男性MWFS的正常範圍為至少14%。因此，女性患者受損的MWFS為 ＜ 15%，並且男性患者受損的MWFS為 ＜ 14%。

如在此使用，術語“正常化MWFS”係指將患者的MWFS從受損的MWFS增加到正常範圍內。因此，正常化女性患者的MWFS係將MWFS從 ＜ 15%增加到至少15%，並且正常化男性患者的MWFS係將MWFS從 ＜ 14%增加到至少14%。

如在此使用，術語“左心室肥大”或“LVH”係指患者的左心室質量指數（LVMi）高於女性的正常範圍43-95 g/m² 和男性的正常範圍49-115 g/m² 。因此，LVH係指女性的LVMi ＞ 95 g/m² 或男性 ＞ 115g /m² 。

實現一個或多個上述響應的劑量係“治療有效劑量”。

短語“藥學上可接受的”係指生理學可耐受的並且當給予人時不會典型地產生不良反應的分子實體和組成物。在一些實施方式中，如本文所用，術語“藥學上可接受的”係指由聯邦或州政府的管理機構批准的或者在美國藥典或其他普遍認可的藥典中列出的，用於在動物體內並且更具體地在人體內的使用。就藥物載體而論的術語“載體”係指稀釋劑、輔助劑、賦形劑、或與化合物一起給予的運載體。該等藥學載體可以是無菌液體，如水和油類。較佳的是應用水或水溶液鹽溶液和葡萄糖和甘油水溶液溶液作為載體，特別是用於可注射溶液。合適的藥物載體描述於由E. W. Martin編輯的“Remington’s Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學]”第18版，或其他版本。

如在此使用，術語“分離的”意指將參比材料從其通常發現的環境中去除。因此，分離的生物材料可以不含細胞組分，即發現或產生該材料的細胞的組分。在核酸分子的情況下，分離的核酸包括PCR產物、凝膠上的mRNA條帶、cDNA或限制性片段。在另一個實施方式中，分離的核酸較佳的是從可以在其被發現的染色體上切除，並且更較佳的是不再與非調節性非編碼區連接，或與位於當在染色體中發現時由分離的核酸分子包含的基因上游或下游的其他基因連接。在又另一個實施方式中，分離的核酸缺少一個或多個內含子。分離的核酸包括插入質粒、黏接質體、人工染色體等中的序列。因此，在一個具體實施方式中，重組核酸係分離的核酸。分離的蛋白質可以與其在細胞中結合的其他蛋白質或核酸或兩者結合，或者如果其係膜結合蛋白質則與細胞膜結合。將分離的細胞器、細胞或組織從其在生物體中發現的解剖部位去除。分離的材料可以是但不必是純化的。

術語“酶替代療法”或“ERT”係指將非天然的、經純化的酶引入具有這種酶缺陷的個體中。給予的蛋白質可以從自然來源或藉由重組表現而獲得（如下文更詳細描述的）。該術語也指將經純化的酶引入個體，該個體在其他情況下需要或受益於給予經純化的酶，例如該個體遭受酶不足。該引入的酶可以是在體外產生的經純化的重組酶，或從離體組織或體液（例如像胎盤或動物奶）或從植物純化的蛋白質。

術語“ERT初治患者”係指從未接受ERT或在開始米加司他療法前至少6個月未接受ERT的Fabry氏患者。

術語“已經歷ERT的患者”係指就在開始米加司他療法之前接受ERT的Fabry氏患者。在一些實施方式中，已經歷ERT的患者就在開始米加司他療法之前已經接受了至少12個月的ERT。

如在此使用，術語“游離鹼當量”或“FBE”係指米加司他或其鹽中存在的米加司他的量。換句話說，術語“FBE”係指一個量的米加司他游離鹼，抑或由米加司他的鹽提供的等量的米加司他游離鹼。例如，由於鹽酸鹽的重量，150 mg的米加司他鹽酸鹽僅提供了和123 mg的游離鹼形式的米加司他所提供的同樣多的米加司他。預期其他鹽具有不同的轉換因子，這取決於該鹽的分子量。

術語“米加司他”涵蓋米加司他游離鹼或其藥學上可接受的鹽（例如鹽酸米加司他），除非有相反的確切說明。

術語“突變”和“變體”（例如，如在“順從性突變或變體”中）係指基因或染色體的核苷酸序列的變化。在此提及的兩個術語典型地一起使用 - 例如，如在“突變或變體”中 - 係指前一句中所述的核苷酸序列的變化。如果出於一些原因僅敘述了兩個術語中的一個，則那個缺失的術語旨在包括在內，並且人們應該這樣理解。此外，術語“順從性突變”和“順從性變體”係指順從PC療法的突變或變體，例如順從米加司他療法的突變。特定類型的順從性突變或變體係“HEK測定順從性突變或變體”，其係根據本文和美國專利案號8,592,362（將其藉由引用以其全文特此結合）所描述的體外HEK測定中的標準確定為順從米加司他療法的突變或變體。

術語“約”和“近似地”通常意指在給定測量的性質或精度的情況下測量的量的可接受的誤差程度。典型地，示例性的誤差程度在給定的數值或數值範圍的20%以內，較佳的是在10%以內，並且更加較佳的是在5%以內。可替代地，特別是在生物系統中，術語“約”和“近似地”可以表示在給定值的一個數量級內，較佳的是在10倍或5倍內，更較佳的是在2倍內的值。除非另有說明，本文給出的數字量係近似地，意味著當沒有明確說明時，可以推斷出術語“約”或“近似地”。 Fabry氏病

Fabry氏病係罕見的、進行性的和破壞性的X連鎖的LSD。GLA基因的突變導致溶酶體酶α-Gal A（醣神經鞘脂質代謝所必需的）的缺陷。從生命的早期開始，α-Gal A活性的降低導致醣神經鞘脂質（包括GL-3和血漿溶血Gb3）的積累，並導致Fabry氏病的症狀和生命限制性後遺症，包括疼痛、胃腸道症狀、腎衰竭、心肌病、腦血管事件和早期死亡。早期開始療法和終身治療提供了減慢疾病惡化和延長預期壽命的機會。

Fabry氏病涵蓋廣泛的疾病嚴重程度和發病年齡，儘管它傳統上被分為2種主要表型，即“經典型”和“遲發型”。經典型表現型主要已經歸於具有不可檢測的至低的α-Gal A活性和腎、心臟及/或腦血管臨床表現的更早發作的男性。遲發型表現型主要已經歸於具有更高殘留α-Gal A活性和該等疾病表現的更晚發作的男性。雜合性女性攜帶者典型表現遲發型表現型，但是取決於X染色體失活的模式，也可以顯示經典型表現型。

已經鑒定了超過1,000種導致Fabry氏病的GLA突變。大約60%係錯義突變，導致α-Gal A酶中的單個胺基酸取代。錯義GLA突變通常導致異常折疊的和不穩定形式的α-Gal A的產生，並且大多數與經典型表現型相關。ER中的正常細胞質量控制機制阻斷了該等異常蛋白轉運到溶酶體上，並且將該等異常蛋白作為過早降解和消除的目標。許多錯義突變體形式係米加司他（α-Gal A特異性藥理學伴護蛋白）的靶標。

Fabry氏病的臨床表現具有廣泛的嚴重程度，並且與患者的殘留α-Gal A水平大致相關。大多數目前治療的患者被稱為經典Fabry氏患者，其中大多數係男性。該等患者經歷各種器官的疾病，包括腎臟、心臟和腦，其中疾病症狀首先出現在青春期，並且典型地病情不斷加重，直到生命的第四或第五個十年死亡為止。許多最近的研究表明，存在大量未確診的男性和女性，他們具有一系列Fabry氏病症狀，例如心臟或腎臟功能受損和中風，通常首次出現在成年期。患有這種類型的Fabry氏病的個體，稱為遲發型Fabry氏病，與經典型Fabry氏患者相比，傾向於具有更高的殘留α-Gal A水平。患有遲發型Fabry氏病的個體通常典型地在成年期間首次經歷疾病症狀，並且疾病症狀通常集中在單一器官，例如左心室的擴大或進行性腎衰竭。此外，遲發型Fabry氏病也可能以未知原因的中風形式出現。

Fabry氏患者具有進行性腎損傷，並且未經治療的患者到生命的第五個十年之前顯示出末期腎損傷。α-Gal A活性的缺陷導致GL-3和相關的醣神經鞘脂質在許多細胞類型（包括腎細胞）中積累。GL-3積累在足細胞、上皮細胞以及遠端小管和亨利氏環的管狀細胞中。腎功能損傷可以表現為蛋白尿和腎小球濾過率降低。

由於Fabry氏病罕見，涉及多器官，發病年齡範圍廣，並且是異質性的，正確診斷係一個挑戰。衛生保健專業人員中的意識較低，並且誤診也頻繁。一旦患者有症狀，加上突變分析，Fabry氏病的診斷最常基於血漿或外周白細胞（WBC）中降低的α-Gal A活性來證實。在女性中，診斷甚至更具挑戰性，因為攜帶者女性的酶鑒定由於攜帶者的一些細胞中的隨機X染色體失活而不太可靠。例如，一些專性攜帶者（受正統影響的男性的女兒）具有從正常到非常低活性範圍的α-Gal A酶活性。由於攜帶者在白細胞中可以具有正常的α-Gal A酶活性，所以僅藉由遺傳學檢驗鑒定α-Gal A突變提供了精確的攜帶者鑒定及/或診斷。

在一個或多個實施方式中，α-Gal A的突變體形式被認為順從米加司他，當α-Gal A的突變體形式在HEK-293細胞中表現時（稱為“HEK測定”），根據良好實驗室規範（Good Laboratory Practice（GLP））驗證的體外測定（GLP HEK或米加司他順從性測定（Migalastat Amenability Assay）），被定義為顯示 ≥ 1.20倍的相對增加（± 10 µM米加司他）和 ≥ 3.0%野生型（WT）的絕對增加（± 10 µM米加司他）。該等突變在本文中也稱為“HEK測定順從性”突變。

已提供以前的篩選方法，其在開始治療之前評估酶增強。例如，使用HEK-293細胞的測定已經在臨床試驗中用於預測給定的突變是否響應於藥理學伴護蛋白（例如米加司他）治療。在此測定中，建立了cDNA構建體。相應的α-Gal A突變形式在HEK-293細胞中暫態表現。然後將細胞 ± 米加司他（17 nM至1 mM）孵育4至5天。之後，在細胞裂解物中使用合成的螢光底物（4-MU-α-Gal）或藉由蛋白質印跡測量α-Gal A水平。這已經針對已知的導致疾病的錯義或小的框內插入/缺失突變進行。以前使用該等方法鑒定為響應PC（例如，米加司他）的突變在美國專利案號8,592,362中列出。 藥理學伴護蛋白

與LSD相關的酶的小分子抑制劑的結合可以增加突變酶和相應的野生型酶的穩定性（參見美國專利案號6,274,597；6,583,158；6,589,964；6,599,919；6,916,829；和7,141,582，全部藉由引用結合在此）。特別地，葡萄糖和半乳糖的小分子衍生物（其係用於幾種靶標溶酶體酶的特異性、選擇性競爭性抑制劑）的給予有效地增加了體外細胞中酶的穩定性，並因此增加了酶到溶酶體的運輸。因此，藉由增加溶酶體中酶的量，酶底物的水解預期增加。此策略背後的原有理論如下：由於突變酶蛋白在ER中不穩定（Ishii等人,Biochem. Biophys. Res. Comm. [生物化學和生物物理研究通訊] 1996; 220: 812-815），因此酶蛋白在正常轉運途徑（ER→高基氏體→胞內體→溶酶體）中延遲並過早降解。因此，結合並增加突變酶穩定性的化合物可以充當酶的“伴護蛋白”，並增加可以離開ER並移動到溶酶體的量。另外，由於一些野生型蛋白質的折疊和運輸係不完全的，在一些情況下一些野生型蛋白質的多達70%在達到其最終細胞位置之前被降解，所以該等伴護蛋白可用於穩定野生型酶，並增加可以離開ER並被運輸到溶酶體的酶的量。

在一個或多個實施方式中，該藥理學伴護蛋白包括米加司他或其鹽。化合物米加司他，也稱為1-去氧半乳糖野尻黴素（deoxygalactonojirimycin）（1-DGJ）或(2R,3S,4R,5S)-2-(羥甲基)呱啶-3,4,5-三醇，係具有以下化學式的化合物：和米加司他游離鹼

如在此討論的，米加司他的藥學上可接受的鹽也可以用於本發明。當使用米加司他的鹽時，調整該鹽的劑量，這樣使得由患者接受的米加司他的該劑量與使用米加司他游離鹼時接受的量係相當的。米加司他的藥學上可接受的鹽的一個實例係鹽酸米加司他：鹽酸米加司他

米加司他係低分子量亞胺基糖，並且是GL-3末端半乳糖的類似物。體外和體內藥理學研究已經證明，米加司他充當藥理學伴護蛋白，以高親和力選擇性地和可逆地結合到野生型α-Gal A和α-Gal A的特定突變體形式的活性位點上，該特定突變體形式的基因型被稱為HEK測定順從性突變。米加司他結合穩定了內質網中該等突變體形式的α-Gal A，有助於其正確地轉輸到溶酶體上，在溶酶體上米加司他的解離允許α-Gal A降低GL-3和其他底物的水平。大約30%-50%的Fabry氏病患者具有HEK測定順從性突變；其中大多數與該疾病的經典型表現型相關。

HEK測定順從性突變至少包括藥理學參考表中列出的那些突變（例如，美國或國際產品標籤中針對米加司他產品例如GALAFOLD®所述的那些突變）。如在此使用，“藥理學參考表”係指任何可公開訪問的書面或電子記錄，包括在米加司他產品（例如，GALAFOLD®）包裝內的產品標籤中或在醫療保健提供者可訪問的網站中，其傳達特定突變或變體是否對米加司他（例如，GALAFOLD®）PC療法有應答，並且不一定限於以表格形式呈現的書面記錄。在本發明的一個實施方式中，“藥理學參考表”因此係指包括一種或多種順從性突變或變體的任何資訊倉庫。用於HEK測定順從性突變的示例性藥理學參考表可以在GALAFOLD®批准使用的各個國家的GALAFOLD®的產品特徵及/或處方資訊的總結中找到，或者在例如www.galafoldamenabilitytable.com或者www.fabrygenevariantsearch.com等網站上找到，其各自藉由引用以其全文特此結合。

用於HEK測定順從性突變的示例性藥理學參考表提供於下表1中。在一個或多個實施方式中，如果雙重突變存在於同一染色體（男性和女性）上，則如果該雙重突變存在於表1中的一個條目中（例如，D55V/Q57L），該患者被認為係HEK測定順從性的。在一些實施方式中，如果雙重突變存在於不同染色體（僅在女性中）上，則如果個體突變中的任一個存在於表1中，則該患者被認為係HEK測定順從性的。 給藥、配製物和給予

在一個或多個實施方式中，以每隔一天一次（也稱為“QOD”）的頻率向Fabry氏患者給予米加司他或其鹽。在不同實施方式中，本文所述的劑量涉及米加司他鹽酸鹽或等效劑量的米加司他或其不是鹽酸鹽的鹽。在一些實施方式中，該等劑量涉及米加司他的游離鹼。在替代性實施方式中，該等劑量涉及米加司他的鹽。在另外的實施方式中，米加司他的鹽係米加司他鹽酸鹽。米加司他或米加司他的鹽的給予在本文中稱為“米加司他療法”。

米加司他或其鹽的有效量可以在約100 mg FBE至約150 mg FBE的範圍內。示例性劑量包括約100 mg FBE、約105 mg FBE、約110 mg FBE、約115 mg FBE、約120 mg FBE、約123 mg FBE、約125 mg FBE、約130 mg FBE、約135 mg FBE、約140 mg FBE、約145 mg FBE或約150 mg FBE。

再次，應注意，150 mg的米加司他鹽酸鹽相當於123 mg的游離鹼形式的米加司他。因此，在一個或多個實施方式中，該劑量係以每隔一天一次的頻率給予的150 mg的米加司他鹽酸鹽或等效劑量的米加司他或其不是鹽酸鹽的鹽。如上所述，此劑量被稱為123 mg FBE的米加司他。在另外的實施方式中，該劑量為以每隔一天一次的頻率給予的150 mg的米加司他鹽酸鹽。在其他實施方式中，該劑量為以每隔一天一次的頻率給予的123 mg的米加司他游離鹼。

在不同實施方式中，有效量為約122 mg、約128 mg、約134 mg、約140 mg、約146 mg、約150 mg、約152 mg、約159 mg、約165 mg、約171 mg、約177 mg或約183 mg的米加司他鹽酸鹽。

因此，在不同實施方式中，米加司他療法包括以每隔一天一次的頻率給予123 mg的FBE，例如每隔一天150 mg的米加司他鹽酸鹽。

米加司他或其鹽的給予可以持續某一時段。在一個或多個實施方式中，將米加司他或其鹽給予至少28天的持續時間，例如至少30、60或90天，或至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、16、20、24、30或36個月，或者至少1、2、3、4或5年。在不同實施方式中，米加司他療法係長期米加司他療法，持續至少6個月，例如至少6、7、8、9、10、11、12、16、20、24、30或36個月，或者至少1、2、3、4或5年。

根據本發明的米加司他或其鹽的給予可以是以適合任何給予途徑的配製物形式，但較佳的是以口服劑型（例如片劑、膠囊或溶液）進行給予。作為一個實例，該患者口服給予膠囊，每個膠囊包含150 mg的米加司他鹽酸鹽或等效劑量的米加司他或其不是鹽酸鹽的鹽。

在一些實施方式中，口服給予PC（例如，米加司他或其鹽）。在一個或多個實施方式中，藉由注射給予PC（例如，米加司他或其鹽）。PC可以伴有藥學上可接受的載體，這可以取決於給予的方法。

在一個或多個實施方式中，PC（例如，米加司他或其鹽）作為單一療法被給予，並且可以是以適合任何給予途徑的形式，包括例如以片劑或膠囊或液體的形式口服，或以用於注射的無菌水溶液形式。在其他實施方式中，PC以乾燥的凍乾粉末的形式被提供，以在重建期間或之後立即添加到替代酶的配製物中，以防止在給予前在體外進行酶聚集。

當該PC（例如，米加司他或其鹽）被配製用於口服給予時，可以藉由常規手段與以下項一起來製備片劑或膠囊：藥學上可接受的賦形劑，諸如黏合劑（例如預糊化玉米澱粉、聚乙烯吡咯啶酮或羥丙基甲基纖維素）；填充劑（例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣）；潤滑劑（例如硬脂酸鎂、滑石或二氧化矽）；崩解劑（例如馬鈴薯澱粉或澱粉羥乙酸鈉）；或濕潤劑（例如十二烷基硫酸鈉）。可以藉由本領域所熟知的方法將片劑進行包被。用於口服給予的液體製劑可以採取例如溶液、糖漿或懸浮液的形式，或它們可以作為一種乾產品（在使用前用水或其他適合的運載體進行組合）而存在。此類液體製劑可以藉由常規方法用藥學上可接受的添加劑來製備，該等添加劑為諸如助懸劑（例如山梨糖醇糖漿、纖維素衍生物或氫化的可食用脂肪）；乳化劑（例如卵磷脂或阿拉伯膠）；非水性載體（例如杏仁油、油狀酯、乙醇或分餾的植物油）；以及防腐劑（例如，對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸）。適當時製劑還可以包含緩衝鹽、調味劑、著色劑和甜味劑。可以適當地配製口服製劑以使活性伴護蛋白化合物能夠可控制地釋放。

適合腸胃外/注射使用的PC（例如，米加司他或其鹽）的藥物配製物通常包括無菌水溶液（（在水溶性的情況下）、或者分散體以及用於臨時製備無菌注射溶液或分散體的無菌粉末。在所有情況下，該形式必須是無菌的且必須具有達到容易注射的程度的流動性。它在生產和存儲條件下必須是穩定的並且必須抗微生物（如細菌和真菌）的污染作用而保存。該載體可以是包含以下各項的溶劑或分散介質：例如，水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇和聚乙二醇等）、其適合的混合物、以及植物油。可以例如藉由使用包衣（例如卵磷脂）、藉由在分散情況下維持所需顆粒大小以及藉由使用表面活性劑來維持適當的流動性。防止微生物的作用可以藉由不同的抗細菌以及抗真菌劑，例如對羥苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、苄醇、山梨酸等來實現。在許多情況下，包括等滲劑例如糖類或氯化鈉將是合理的。可藉由使用延遲吸收的試劑（例如單硬脂酸鋁和明膠）的組成物來實現可注射組成物的延長的吸收。

按照需要，可以藉由將純化的酶（若有的話）和該PC（米加司他或其鹽）以需要的量摻入具有以上列舉的不同其他成分的適當溶劑中，隨後進行過濾或最終滅菌來製備無菌可注射溶液。總體上，藉由將不同滅菌的活性成分摻入無菌運載體中來製備分散體，該無菌運載體包含基礎分散介質以及來自以上列舉的那些的所需其他成分。在用於製備無菌可注射溶液的無菌粉末的情況下，製備的較佳的方法係真空乾燥和冷凍乾燥技術，這從其之前的無菌過濾溶液產生活性成分加上任何另外的所希望成分的粉末。

該配製物可以包含賦形劑。可以被包含在該配製物中的藥學上可接受的賦形劑係：緩衝劑，諸如檸檬酸鹽緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑、乙酸鹽緩衝劑、碳酸氫鹽緩衝劑、胺基酸、脲、醇、抗壞血酸和磷脂；蛋白質，諸如血清白蛋白、膠原、以及明膠；鹽，諸如EDTA或EGTA、以及氯化鈉；脂質體；聚乙烯吡咯啶酮；糖，諸如右旋糖酐、甘露醇、山梨糖醇、以及甘油；丙二醇以及聚乙二醇（例如，PEG-4000、PEG-6000）；甘油；甘胺酸或其他胺基酸；以及脂類。與配製物一起使用的緩衝劑系統包括檸檬酸鹽；乙酸鹽；碳酸氫鹽；以及磷酸鹽緩衝劑。磷酸鹽緩衝劑係一個較佳的實施方式。

該伴護蛋白化合物的給予途徑可以是口服的或腸胃外的，包括靜脈內、皮下、動脈內、腹膜內、眼內、肌內、口頰、直腸、陰道、眼眶內、腦內、真皮內、顱內、脊柱內、心室內、鞘內、腦池內、囊內、肺內、鼻內、經黏膜、經皮膚、或經由吸入。

該伴護蛋白化合物的上述腸胃外配製物的給予可以是藉由週期性注射製劑的推注，或可以從儲庫藉由靜脈內或腹膜內給予來給予，該儲庫可以是外部的（例如靜脈注射袋）或內部的（例如生物可蝕性植入物）。

涉及藥物配製物和給予的實施方式可以與本發明的任何其他實施方式組合，例如涉及治療Fabry氏病患者之方法、治療ERT初治的Fabry氏病患者之方法、治療已經歷ERT的Fabry氏病患者的方法、增強心臟功能（例如，左心室收縮功能）之方法、穩定心臟功能（例如，左心室收縮功能）之方法、增加MWFS之方法、穩定MWFS之方法、正常化MWFS之方法、在診斷患有或疑似患有Fabry氏病的患者中增強α-Gal A之方法、α-Gal A的藥理學伴護蛋白用於製造用於治療被診斷患有Fabry氏病的患者的藥劑之用途或涉及用於治療被診斷患有Fabry氏病的患者的α-Gal A的藥理學伴護蛋白之實施方式，連同涉及順從性突變、PC及其適合的劑量的實施方式。

在一個或多個實施方式中，PC（例如，米加司他或其鹽）與ERT組合給予。藉由輸注的方式，藉由外源性引入野生型或具有生物學功能的酶，ERT增加了蛋白質的量。已經針對許多遺傳疾病開發了這種療法，包括如上引用的LSD（例如Fabry氏病）。輸注後，預期外源酶藉由非特異性或受體特異性機制被組織吸收。一般來說，吸收效率不高，並且外源蛋白的循環時間短。此外，外源蛋白係不穩定的，並且經受快速的細胞內降解，而且在隨後治療的情況下具有不利免疫反應的潛力。在一個或多個實施方式中，將該伴護蛋白與替代酶（例如，替代α-Gal A）同時給予。在一些實施方式中，將伴護蛋白與替代酶（例如，替代α-Gal A）共配製。

在一個或多個實施方式中，將患者從ERT轉換至米加司他療法。在一些實施方式中，鑒定了接收ERT的患者，中斷了患者的ERT，並且該患者開始接受米加司他療法。可以根據本文所述的任何方法進行米加司他療法。 心臟功能

在此所述的給藥方案可以穩定及/或增強Fabry氏病患者的心臟功能（例如，左心室收縮功能）。由於未經治療的Fabry氏患者典型地隨著時間的推移表現出心臟功能的退化，所以心臟功能的增強和維持不變都指示米加司他療法的益處。如以下實例中進一步詳細描述的，第3期研究已經發現，米加司他療法在已曆ERT和ERT初治患者中都增加及/或穩定了MWFS。該等第3期研究還發現，在一些具有受損的MWFS的患者中，米加司他療法正常化MWFS。因此，米加司他療法可以用於藉由穩定MWFS、增加MWFS及/或正常化ERT初始及/或已經歷ERT的Fabry氏患者（包括具有受損的MWFS的患者）中的MWFS來治療Fabry氏患者。

與沒有用米加司他療法進行治療的同一患者相比，米加司他療法可以遏制或減少Fabry氏患者MWFS的降低及/或增加MWFS。在一個或多個實施方式中，米加司他療法為患者的MWFS提供改變，該改變大於（即，更正於）-2%，例如大於或等於約-1.5%、-1.4%、-1.3%、-1.2%、-1.1%、-1%、-0.9%、-0.8%、-0.7%、-0.6%、-0.5%、-0.4%、-0.3%、-0.2%、-0.1%、0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%或2.5%。在一個或多個實施方式中，該Fabry氏患者係已經歷ERT的患者。在一個或多個實施方式中，該Fabry氏患者係ERT初治患者。在一個或多個實施方式中，該Fabry氏患者在開始米加司他治療之前具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，米加司他療法在ERT初治的患者組中提供了至少約0%的MWFS的平均變化。在不同實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，ERT初治的患者組中的平均增加為至少約0.05%、約0.1%、約0.15%或約0.2%。在一個或多個實施方式中，在開始米加司他治療之前，ERT初治的患者患有具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他療法在ERT初治的患者組中提供了至少約0%的MWFS的平均變化。在不同實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，ERT初治的患者組中的平均增加為至少約0.05%、約0.1%、約0.15%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%或約1.5%。在一個或多個實施方式中，在開始米加司他治療之前，ERT初治的患者患有具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽36個月後，米加司他療法在ERT初治的患者組中提供了至少約0%的MWFS的平均變化。在不同實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，ERT初治的患者組中的平均增加為至少約0.05%、約0.1%、約0.15%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%或約1.5%。在一個或多個實施方式中，在開始米加司他治療之前，ERT初治的患者患有具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽48個月後，米加司他療法在ERT初治的患者組中提供了至少約0%的MWFS的平均變化。在不同實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，ERT初治的患者組中的平均增加為至少約0.05%、約0.1%、約0.15%、約0.2%、約0.3%、約0.4%、約0.5%、約0.6%、約0.7%、約0.8%、約0.9%、約1%、約1.1%、約1.2%、約1.3%、約1.4%、約1.5%、約1.6%、約1.7%、約1.8%、約1.9%、約2%、約2.1%、約2.2%、約2.3%、約2.4%或約2.5%。在一個或多個實施方式中，在開始米加司他治療之前，ERT初治的患者患有具有受損的MWFS。

在一個或多個實施方式中，在給予米加司他或其鹽30個月後，米加司他療法在ERT初治的患者組中提供了大於約-1.5%的MWFS的平均變化。在不同實施方式中，在給予米加司他或其鹽12個月後，ERT初治的患者組中的平均增加為大於-1.5%、-1.4%、-1.3%、-1.2%、-1.1%、-1%、-0.9%、-08.%、-0.7%、-0.6%、-0.5%、-0.4%、-0.3%、-0.2%、-0.1%或0%。在一個或多個實施方式中，在開始米加司他療法之前，已經歷ERT的患者具有受損的MWFS。實例 實例 1 ： 用於使用米加司他鹽酸鹽治療 ERT 初治的 Fabry 氏患者之給藥方案

本實例描述了在ERT初治的Fabry氏患者中的米加司他療法的第3期研究。

患者入選 . 符合條件的患者為16-74歲，並且具有經遺傳學證實的Fabry氏病；從未接受ERT或未接受ERT ≥ 6個月；基於在入選時使用的人胚腎-293（HEK）測定，具有產生將響應米加司他的突變體蛋白的GLA突變；具有eGFR ＞ 30 ml/min/1.73m² ，並且具有尿GL-3 ≥ 4倍正常上限的。

研究設計 . 在合格性-基線評估（2個月）後，隨機分配患者至第1階段-每隔一天雙盲給予150 mg的米加司他鹽酸鹽或安慰劑，持續6個月。完成第1階段的所有患者都有資格在第2階段（第6-12月）以及之後的另外一年（第13-24月）接受非盲（open-label）米加司他。主要目的是，比較在6個月的治療後，相對於安慰劑，米加司他對腎臟GL-3的影響，如藉由間質毛細血管中內含物數量的組織學評分所評估的。第1階段的次要目的是，比較相對於安慰劑，米加司他對尿GL-3水平、腎功能、24小時尿蛋白以及安全性和耐受性的影響。第三個目的是心臟功能、患者報告的結果、探索性腎臟分析和白細胞α-Gal A活性。研究完成者有資格參加非盲延伸研究，持續長達5年。

腎臟組織學評估 . 每個患者進行基線腎生檢，連同在6個月和12個月時重複腎生檢。每個患者在基線時以及在6個月和12個月時，每個腎間質毛細血管的GL-3內含物的數量由3個獨立病理學家（對治療和訪視雙盲）在300個毛細血管中進行定量評估。在統計分析之前，在給定時間內對每個個體生檢的所有值取平均值。

足細胞、內皮細胞和系膜細胞中的GL-3變化以及腎小球硬化由同樣的3個病理學家（對治療/訪視雙盲）進行定量評估。

神經醯胺三己糖苷和鞘胺醇三聚己糖苷 . 使用新穎穩定的同位素-標記的內標物13C6-溶血Gb3（下限定量：0.200 ng/mL，0.254 nmol/L），藉由液相層析-質譜法分析血漿溶血Gb3和24小時尿GL-3。

腎功能評估 . 年變化率（mL/min/1.73 m² /年）係使用慢性腎臟疾病流行病學合作（Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration）-eGFR_CKD-EPI 和測量的碘海醇清除率-mGFR_碘海醇 進行計算的。

超音波心動描記術 . LVMi、左後壁厚、舒張壓、室間隔厚、舒張壓等參數藉由盲式、集中評價進行評估。

患者報告的結果 . 使用胃腸道症狀評分量表（Gastrointestinal-Symptoms-Rating-Scale）（GSRS）、簡易格式（Short Form）-36v2TM和簡明疼痛量表疼痛程度組分（Brief-Pain-Inventory-Pain-Severity-Component）評估患者報告的結果。

安全分析與不良事件 . 將接受 ≥ 1劑量的隨機患者納入安全性分析，該分析包括生命體征、體檢、心電圖、臨床實驗室和不良事件。

腎間質毛細血管 GL-3 底物的 統計學分析 . 主要的第1階段（6個月）結束點（具有基線生檢的ITT人群，n = 64）係米加司他和安慰劑組中每個間質毛細血管的GL-3內含物減少 ≥ 50%的患者的比例。評估另外兩個第1階段結束點（修改後的ITT人群：具有配對基線和第6個月生檢的隨機患者；n = 60）：每個間質毛細血管的GL-3內含物的百分比變化，以及不含GL-3內含物的間質毛細血管的百分比。

針對第2階段（第6-12月）和非盲延伸（第12-24個月）中的每個間質毛細血管的GL-3內含物和其他預先指定的結束點的功效分析係基於以下修改的治療意圖（mITT）：治療由具有藉由驗證測定顯示適合於米加司他治療的突變體α-Gal A酶的隨機患者組成的人群；n = 50）。 結果

基線特徵 . 對六十七個具有潛在應答性的突變體α-Gal A的患者（16-74歲，64%為女性）（ITT人群）進行隨機分組。表2提供了具有適合的突變體α-Gal A的ITT群體中的50個患者的基線特徵。基線參數沒有統計學顯著性差異。[ 表 2] ：基線特徵

與具有適合突變的患者（n = 50）的基因型相關的一種或多種臨床表現型的已發表報告表明，30例（60%）具有與Fabry氏病經典表現型相關的突變，一例（2%）具有與非經典表現型相關的突變，三例（6%）具有與兩種表現型都相關的突變，以及16例（32%）尚未分類。16例男性中有14例（87%）中發現殘留WBC α-Gal A活性 ＜ 3%；31例男性和女性中有29例（94%）具有升高的血漿溶血Gb3，並且50例男性和女性中有47例（94%）具有多器官系統疾病。

基線 MWFS. 在基線處，9名患者報告MWFS受損（女性 ＜ 15%，男性 ＜ 14%）。

米加司他和心臟功能 . 這項對ERT初治患者的研究發現，米加司他療法增加了在基線處具有受損的MWFS的患者的MWFS。下表3顯示了米加司他療法後MWFS從基線的變化。[ 表 3] ：在米加司他療法下，在基線處具有受損的 MWFS 的患者（具有順應性突變的患者）的 MWFS 隨時間從基線的百分比變化 末次觀察推進法（LOCF）分析基於最後的研究評估，包括任何計畫外或提前終止訪視；女性的異常MWFS為 ＜ 15%，男性 ＜ 14%。

如可以從表3中看出，對基線處具有受損的MWFS的ERT初治患者進行的LOCF分析顯示，米加司他治療48個月後，MWFS的平均變化為1.9%（95% CI -0.8%，4.5%；n = 8）。米加司他療法後6/8（75%）的患者的MWFS增加，其中3/8（38%）顯示MWFS正常化。

還分析了在基線處LVH患者的MWFS。LVH患者在基線處的MWFS從基線的變化提供於下表4中：[ 表 4] ：在米加司他療法下，在基線處的 LVH 患者（具有順應性突變的患者）的 MWFS 從基線的變化 LOCF分析基於最後的研究評估，包括任何計畫外或提前終止訪視；LVH亞組：LVMi ＞ 95 g/m2（女性）或 ＞ 115 g/m2（男性）。

如可以從表4中看出，對基線處患有LVH的ERT初治患者進行的LOCF分析顯示，米加司他治療48個月後，MWFS的平均變化為1.0%（95% CI-1.5%，3.5%；n = 10）。米加司他療法後7/10（70%）的患者的MWFS增加，其中2/10（20%）顯示MWFS正常化。

安全性與不良事件 . 在第1階段，治療突發性不良事件在組間係相似的。與安慰劑相比，接受米加司他的患者中出現的高頻不良事件為頭痛（12/34個患者-35%對比7/33個患者-21%）和鼻咽炎（6/34個患者-18%對比2/34-6%）。第2階段最常報告的不良事件係頭痛（9/63個患者-14%）和操作性疼痛（7/63個患者-11%，與腎生檢相關），以及非盲延伸階段最常報告的不良事件係蛋白尿（9/57個患者-16%）、頭痛（6/57個患者-11%）和支氣管炎（6/57個患者-11%）。大多數不良事件嚴重程度為輕度或中度。沒有不良事件導致米加司他中斷。

六個患者在第1階段出現嚴重不良事件（2：米加司他；4：安慰劑），5個患者在第2階段出現嚴重不良事件，以及11個患者在非盲延伸期出現嚴重不良事件。兩個嚴重不良事件（疲勞和感覺異常）被調查者評估為可能與米加司他相關。兩者在第12-24個月之間發生在同一患者身上，並已解決。由 ＞ 1個患者報告了無個體嚴重不良事件。兩個患者由於嚴重不良事件而中斷米加司他；這兩者都被認為與米加司他無關。未報告出現死亡病例。

在第12-24個月之間有9個患者（16%）發生了治療突發性蛋白尿，並且其中一例被判斷與米加司他相關。在5個患者中，24個月的值均與基線相同。三個具有適合的突變的患者基線蛋白尿明顯（＞ 1 g/24-hr），該水平在24個月內有所上升。在28個基線蛋白尿 ＜ 300 mg/24-h的患者中，有23個的24小時尿蛋白在米加司他治療期間保持穩定。

沒有Banikazemi等人所定義的進展到終末期腎病、心臟死亡或中風。有一例短暫性腦缺血發作-判斷為與米加司他無關。

生命體征、體檢發現、實驗室和ECG參數的分析未揭示米加司他的臨床相關作用。實例 2 ： 使用米加司他鹽酸鹽治療已經歷 ERT 的 Fabry 氏患者的給藥方案

本實例描述了在已經歷ERT的Fabry氏患者中的米加司他療法的第3期研究。

患者入選 . 符合條件的患者為16-74歲，並且具有經遺傳學證實的Fabry氏病；接受ERT ≥ 12個月；基於在入選時使用的人胚腎-293（HEK）測定，具有產生將響應米加司他的突變體蛋白的GLA突變；具有eGFR ≥ 30 ml/分鐘/1.73m² ；並且具有已經至少3個月保持穩定的ERT劑量水平和方案。

研究設計 . 在資格基線評估之後，57個患者被隨機分到18個月的米加司他療法或ERT，接著是12個月的米加司他療法。米加司他給藥方案係每隔一天150 mg的米加司他鹽酸鹽。主要目的是比較，相對ERT，米加司他對腎功能的影響，經過18個月的治療後藉由mGFR碘海醇進行評估。次要目標係比較，相對ERT，米加司他對以下各項的影響：腎功能（藉由eGFR和24小時尿蛋白進行評估）；綜合臨床結果（按發生腎臟、心臟、腦血管事件或死亡的時間進行評估）；心臟功能（藉由超音波心動描記術進行評估）和患者報告的結果（疼痛和生活質量）。

基線 MWFS. 在基線處，19名患者（14名米加司他，5名ERT）報告MWFS受損（女性 ＜ 15%，男性 ＜ 14%）。 結果

米加司他和心臟功能 . 這項對已經歷ERT的患者的研究發現，米加司他療法穩定了在基線處具有受損的MWFS的患者的MWFS。對基線處具有受損的MWFS的患者進行的LOCF分析顯示，米加司他治療30個月後，基線的平均變化為-0.2%（95% CI-1.3%，1.0%；n = 14）。對基線處具有受損的MWFS的患者進行的LOCF分析顯示，ERT治療18個月後，MWFS的平均變化為-0.6%（95% CI-2.6%，1.4%；n = 5）。

本文所描述的實施方式旨在說明本發明的組成物和方法，而並不旨在限制本發明的範圍。旨在包括與作為整體的描述一致的並且對於熟習該項技術者來說容易理解的不同修改和改變。所附申請專利範圍不應受實例中所示出的具體實施方式的限制，但是應當被給予與作為整體的描述一致的最寬泛的解釋。

貫穿本申請案，引用了專利案、專利申請案、出版物、產品描述、基因庫登錄號、和實驗方案，出於所有目的，將其揭露內容以其整體藉由引用結合在此。

無

從以下書面描述和附圖中，本發明的其他特徵將變得明顯，其中：

圖1A-1E顯示了人野生型GLA基因的完整DNA序列（SEQ ID NO: 1）；

圖2顯示了野生型α-Gal A蛋白（SEQ ID NO: 2）；以及

圖3顯示了編碼野生型α-Gal A蛋白的核酸序列（SEQ ID NO: 3）。

國內寄存資訊 (請依寄存機構、日期、號碼順序註記) 無

國外寄存資訊 (請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記) 無

Claims (74)

1. 一種增強患有Fabry氏病的患者的心臟功能之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於增強患者的心臟功能，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的游離鹼當量（FBE）。
2. 如請求項1所述之方法，其中增強心臟功能包括增強左心室收縮功能。
3. 如請求項1或2所述之方法，其中在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的室壁中層縮短分數（MWFS）。
4. 如請求項1至3中任一項所述之方法，其中該米加司他或其鹽增強α-半乳糖苷酶A活性。
5. 如請求項1至4中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。
6. 如請求項1至5中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。
7. 如請求項1至5中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。
8. 如請求項1至7中任一項所述之方法，其中該配製物包括口服劑型。
9. 如請求項8所述之方法，其中該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。
10. 如請求項1至9中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少12個月。
11. 如請求項1至10中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少24個月。
12. 如請求項1至11中任一項所述之方法，其中該患者係酶替代療法（ERT）初治的患者。
13. 如請求項1至12中任一項所述之方法，其中在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1%的MWFS的平均增加。
14. 如請求項1至11中任一項所述之方法，其中該患者係已經歷ERT的患者。
15. 如請求項1至14中任一項所述之方法，其中該患者在α-半乳糖苷酶A中有HEK測定順從性突變。
16. 如請求項15所述之方法，其中該突變被揭露於藥理學參考表中。
17. 如請求項16所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在批准用於治療Fabry氏病的米加司他產品的產品標籤中。
18. 如請求項16所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在GALAFOLD®的產品標籤中。
19. 如請求項16所述之方法，其中該藥理學參考表在網站上提供。
20. 如請求項19所述之方法，其中該網站係www.galafoldamenabilitytable.com或www.fabrygenevariantsearch.com中的一個或多個。
21. 一種增加患有Fabry氏病患者的室壁中層縮短分數（MWFS）之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於增加患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的游離鹼當量（FBE）。
22. 如請求項21所述之方法，其中在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的MWFS。
23. 如請求項21或22所述之方法，其中該米加司他或其鹽增強α-半乳糖苷酶A活性。
24. 如請求項21至23中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。
25. 如請求項21至24中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。
26. 如請求項21至24中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。
27. 如請求項21至26中任一項所述之方法，其中該配製物包括口服劑型。
28. 如請求項27所述之方法，其中該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。
29. 如請求項21至28中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少12個月。
30. 如請求項21至29中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少24個月。
31. 如請求項21至30中任一項所述之方法，其中該患者係酶替代療法（ERT）初治的患者。
32. 如請求項21至31中任一項所述之方法，其中在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1%的MWFS的平均增加。
33. 如請求項21至30中任一項所述之方法，其中該患者係已經歷ERT的患者。
34. 如請求項21至33中任一項所述之方法，其中該患者在α-半乳糖苷酶A中有HEK測定順從性突變。
35. 如請求項34所述之方法，其中該突變被揭露於藥理學參考表中。
36. 如請求項35所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在批准用於治療Fabry氏病的米加司他產品的產品標籤中。
37. 如請求項35所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在GALAFOLD®的產品標籤中。
38. 如請求項35所述之方法，其中該藥理學參考表在網站上提供。
39. 如請求項38所述之方法，其中該網站係www.galafoldamenabilitytable.com或www.fabrygenevariantsearch.com中的一個或多個。
40. 一種正常化具有Fabry氏病和受損的MWFS的患者的室壁中層縮短分數（MWFS）之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於正常化患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的游離鹼當量（FBE）。
41. 如請求項40所述之方法，其中該米加司他或其鹽增強α-半乳糖苷酶A活性。
42. 如請求項40或41所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。
43. 如請求項40至42中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。
44. 如請求項40至42中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。
45. 如請求項40至44中任一項所述之方法，其中該配製物包括口服劑型。
46. 如請求項45所述之方法，其中該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。
47. 如請求項40至46中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少12個月。
48. 如請求項40至47中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少24個月。
49. 如請求項40至48中任一項所述之方法，其中該患者係酶替代療法（ERT）初治的患者。
50. 如請求項40至49中任一項所述之方法，其中在給予米加司他或其鹽24個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的ERT初治的患者組中提供了至少約1%的MWFS的平均增加。
51. 如請求項40至50中任一項所述之方法，其中該患者在α-半乳糖苷酶A中有HEK測定順從性突變。
52. 如請求項51所述之方法，其中該突變被揭露於藥理學參考表中。
53. 如請求項52所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在批准用於治療Fabry氏病的米加司他產品的產品標籤中。
54. 如請求項52所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在GALAFOLD®的產品標籤中。
55. 如請求項52所述之方法，其中該藥理學參考表在網站上提供。
56. 如請求項55所述之方法，其中該網站係www.galafoldamenabilitytable.com或www.fabrygenevariantsearch.com中的一個或多個。
57. 一種穩定已經歷酶替代療法（ERT）的患有Fabry氏病患者的室壁中層縮短分數（MWFS）之方法，該方法包括每隔一天向該患者給予包含有效量的米加司他或其鹽的配製物用於穩定患者的MWFS，其中該有效量為約100 mg至約150 mg的游離鹼當量（FBE）。
58. 如請求項57所述之方法，其中在開始給予米加司他或其鹽之前，該患者具有受損的MWFS。
59. 如請求項57或58所述之方法，其中該米加司他或其鹽增強α-半乳糖苷酶A活性。
60. 如請求項57至39中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg FBE的米加司他或其鹽。
61. 如請求項57至60中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約123 mg的米加司他游離鹼。
62. 如請求項57至60中任一項所述之方法，其中每隔一天向該患者給予約150 mg的米加司他鹽酸鹽。
63. 如請求項57至62中任一項所述之方法，其中該配製物包括口服劑型。
64. 如請求項63所述之方法，其中該口服劑型包括片劑、膠囊或溶液。
65. 如請求項57至64中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少12個月。
66. 如請求項57至65中任一項所述之方法，其中將米加司他或其鹽給予至少30個月。
67. 如請求項57至66中任一項所述之方法，其中該患者係已經歷酶替代療法（ERT）的患者。
68. 如請求項57至67中任一項所述之方法，其中在給予米加司他或其鹽30個月後，米加司他或其鹽的給予在具有受損的MWFS的已經歷ERT的患者組中提供了大於約-0.5%的MWFS的平均變化。
69. 如請求項57至68中任一項所述之方法，其中該患者在α-半乳糖苷酶A中有HEK測定順從性突變。
70. 如請求項69所述之方法，其中該突變被揭露於藥理學參考表中。
71. 如請求項70所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在批准用於治療Fabry氏病的米加司他產品的產品標籤中。
72. 如請求項70所述之方法，其中該藥理學參考表被提供在GALAFOLD®的產品標籤中。
73. 如請求項70所述之方法，其中該藥理學參考表在網站上提供。
74. 如請求項73所述之方法，其中該網站係www.galafoldamenabilitytable.com或www.fabrygenevariantsearch.com中的一個或多個。